PL97318B1 - Sposob wytwarzania modyfikowanych polipeptydow - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania modyfikowanych polipeptydów, w których skladni¬ kiem polipeptydowym jest hormon stymulujacy folikuline FSH, hormon luteinizujacy (LH), ludzka kosmówkowa gonadotropina lub jej p-podjednostka, ludzi lozyskowy laktogen (HPL), ludzka prolak- tyka lub zwiazek o wzorze ogólnym X-Ser-Ser-Ser- -Lys-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-Leu-Pro-Ser-Y, w któ¬ rym X oznacza grupe o wzorze Ser-Lys-Glu-Pro- * -Leu-Arg-Pro-Arg-Cys-Arg-Pro-Ile-Asn-Ala-Thr- -Leu-Ala-Val-Glu-Lys-Glu-Gly-Cys-Pro-Val-Cys- * -Ile-Thr-Val-Asn-Thr-Thr-Ile-Cys-Ala-Gly-Try- 40 -Cys-Pro-Thr-Met-Thr-Arg-Val-Leu-Gln-Gly-Val- 50 -LoUHPLro-AlA-Lev-Pro-Gln-Val-Val-Cys-Asn-Try- 60 70 -Arg-Asp-Val-Arg-Phe-Glu-Ser-Ile-Arg-Leu-Pro- 80 -Gly-Cys-Pro-Arg-Gly-Val-Asn-Pro-Val-Val-Ser- 90 -Tyr-Ala-Val-Ala-Leu-Ser-Cys-Gln-Cys-Ala-Leu- 100 -Cys-Arg-ArgnSer-Thr-Thr-Asp-Cys-Gly-Gly-Pro- 100 -Phe-Gln-Asp-Ser lub o wzorze Ser-Lys-Gln-Pro- ? -Leu-Arg-Pro-Arg-Cys-Arg-Pro-Ile-Asn-Ala-Thr- -Leu-Ala-Val-Glu-Lys-Glu-Gly-Cys-Pro-Val-Cys- 29 * -Ile-Thr-Val-Asn-Thr-Thr-Ile-Cys-Ala-Gly-Tyr- 40 -Cys-Pro-Thr-Met-Thr-Arg-Val-Leu-Gln-Gly-Val- 50 -Leu-Pro-Ala-Leu-Pro-Glx-Leu-Val-Cys-Asn-Tyr- 60 70 -Arg-Asp-Val-Arg-Phe-Glu-Ser-Ile-Arg-Leu-Pro- 80 -Gly-Cys-Pro-Arg-Gly-Val-Asn-Pro-Val-Val-Ser- 90 -Tyr-Ala-Val-Ala-Leu-Ser-Cys-Gln-Cys-Ala-Leu- 100 -Cys-Arg-(Arg)-Ser-Thr-Thr-Asp-Cys-Gly-Gly- 110 -Pro-Lys-Asp-His-Pro-Leu-Thr-Cys-Asp-Asp-Pro- -Arg-Phe-Gln-Asp lub o wzorze Asp~Asp-Pro-Arg- * -Phe-Gln-Asp-Ser-Ser-Ser-Se--Lys-Ala-Pro-Pro- * * Pro-Ser-Leu-Pro-Ser-Pro-Ser lub o wzorze Gln- -Asp-Ser lub o wzorze Thr-Cys-Asp-Asp-Pro-Arg- -Phe-Gln-Asp lub o wzorze Phe-Gln-Asp lub o wzorze Phe-Gln-Asp-Ser lub o wzorze Asp-Asp- -Pro-Arg-Phe-Gln-Asp lub o wzorze Asp-Asp-Pro- -Arg-Phe-Gln-Asp-Ser lub o wzorze Asp-His-Pro- -Lys-Asp-His-Pro-Leu-Thr-Cys-Asp-Asp-Pro-Arg- st -Leu-Thr-Cys-Asp-Asp-Pro-Arg-Phe-Gln-Asp-Ser, •711867 316 130 * a Y oznacza grupe o wzorze Pro-Ser-Arg-Leu-Pro- * 140 -Gly-Pro-Ser-Asp-Thr-Pro-Ile-Leu-Pro-Gln-Pro- 140 -Ser-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro-Pro-Asx-Thr-Pro-Ile- 147 -Leu-Pro-Gln-Ser-Leu-Pro-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro- -Ser-Asp-Thr-Pro-Ile-Leu-Pro-Gln lub o wzorze * * Pro-Ser-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro-Ser-Asp-Thr-Pro- * -Ile-Deu-Pro-Gln lub o wzorze Pro-Ser-Arg-Deu- -Pro-Gly-Pro-Pro-Asx-Thr-Pro-Ile-Leu-Pro-Gln- * -Ser-Leu-Pro, lub o wzorze Pro-Ser-Arg-Leu-Pro- -Gly-Pro-Pro-Asx-Thr-Pro-Ile-Leu-Pro-Gln-Ser- * -Leu-Pro, lub o wzorze Pro-Ser-Arg-Leu-Pro-Gly- -Pro-Ser-Asp-Thr-Pro-Ile-Leu-Pro-Gln lub Gly o wzorze Pro-Ser-Arg-Leu-Pro-Gln-Ser-Leu-Pro, albo Pro-Ser-Arg-Leu-Pro-Gly-Pro-Pro-Asp-Thr-Pro- -Ile-Leu-Pro-Gin-Ser-Leu-Pro.Wedlug wynalazku modyfikowane polipeptydy mozna wytwarzac sprzegajac polipeptydy, takie jak hormon stymulujacy folikuline FSH, hormon lutei- nizujacy (LH), ludzka kosmówkowa gonadotropina lub jej (3-podjednostka, ludzki lozyskowy laktogen (HPL), ludzka prolaktyna lub zwiazek o powyz¬ szym wzorze z jedna lub kilkoma grupami mody¬ fikujacymi.Jako grupy modyfikujace stosuje sie grupy po¬ chodne kwasu dwuazasulfonilowego, dwunitrofeno- lu, trójnitrofenolu, bezwodnika kwasu S-acetomer- kaptobursztynowego, polityrozyny o lancuchu pro¬ stym lub rozgalezionym, polialaniny o lancuchu prostym lub rozgalezionym, spolimeryzowanych cukrów, takich jak kopolimer sacharozy z epichlo- rohydryna albo poliglukozy, protein surowicy, ta¬ kich jak homologi surowicznej albuminy, hemocy- janiny z Keyhole limpet (morski mieczak) lub bia¬ lek naturalnych, takich jak tyroglobulina.Wiadomo, ze przeciwciala powstaja w organizmie czlowieka i zwierzat jako reakcja na obecnosc obcych antygenów. Wiadomo równiez, ze mozna przekazac odpornosc zwierzeciu przez podawanie przeciwciala wytworzonego poza nim. Na przyklad nastepujace opisy patentowe St. Zjedn. Am.: Mi- chaelson nr 3 553 317, Friedheim nr 2 388 260, Reus- ser nr 3 317 400 i Peterson nr 3 376 198 dotycza wy¬ twarzania przeciwcial, które wstrzykniete zwierze¬ ciu innego gatunku lub czlowiekowi wywoluja bierna immunizacje. W opisach patentowych St.Zjedn. Am. nr 2 301 532 i nr 2 372 066 Feli opisuje aktywna immunizacje przy zastosowaniu zmody¬ fikowanej histaminy u takich zwierzat, jak konie, krowy itp. R.G. Edwards w British Medical Jour¬ nal, tom 26, strony 72 — 78, 1970 r. „Immunologia zaplodnienia i ciazy" podaje przeglad literatury dotyczacej mozliwosci wykorzystania metod immu¬ nologicznych do wplywania na ciaze lub jej regu¬ lacje, dajac wpierw przeglad wytwarzania przeciw¬ cial w stosunku do jader lub spermatozoów. Znacz¬ na czesc omówionej literatury dotyczy wytwarza¬ nia obcych przeciwcial, które wstrzykuje sie osob¬ nikowi (bierna immunizacja). Przeciwciala hormo¬ nowe badano od dluzszego czasu, a efektj specy¬ ficznych przeciwsurowic notuje sie od szentgu lat.Wiadomo, ze podanie okreslonych przeciwcial pod¬ czas ciazy moze zahamowac implantacje lub spo- wodowac resorpcje plodu. Próbowano szeregu me¬ tod, poczynajac od spowodowania prawie stalej bez¬ plodnosci w przypadku aglutynacji spermatozoów u samców do wywolania zaburzen w pojedynczej ciazy za pomoca biernej immunizacji przeciwcia¬ lo lami.Istnieja powazne ograniczenia w stosunku do sto¬ sowania biernej immunizacji w leczeniu ludzi.Poniewaz przeciwciala sa praktycznie wytwarzane jedynie u zwierzat, a nie u ludzi, powtórne wstrzyk- niecie bialka zwierzecego czlowiekowi wywoluje, jak wiadomo, powazne reakcje u wiekszosci osob¬ ników.Ostatnio stwierdzono, ze dawki pewnych stero¬ idów, skladajace sie z syntetycznych hormonów niebialkowych („pigulka") podawane w okreslo¬ nych odstepach czasu, zwykle powoduja ochrone przedciaza przez krótki okres czasu (moze na mie¬ siac). Ten sposób leczenia, jak stwierdzono, wy¬ woluje czasem niepozadane objawy uboczne, po- wodujac niepozadane zmiany w metabolizmie i czasem zmiany w mechanizmie krzepniecia krwi.Ponadto skutek kazdej dawki trwa tak krótko, ze czesto stosowanie jej jest ograniczone, zwlaszcza w odleglych polaciach kraju dla osób nie odpowied- nio pouczonych o odpowiednim i stalym jej sto¬ sowaniu.Istnieje dlatego koniecznosc skutecznej i pewnej metody wywolywania czasowo, lecz przez stosun¬ kowo dlugi okres czasu immunizacji przeciw ciazy, nie wywolujac powaznych objawów ubocznych.Istnieje równiez potrzeba skutecznej bezpiecznej metody przerywania ciazy zaraz po zaplodnieniu bez powaznych szkodliwych objawów ubocznych.Metoda taka moze byc zabójetnienie hormonu re- 40 produkcji, który jest konieczny dla normalnego przebiegu zaplodnienia i/lub ciazy.Istnieje równiez zapotrzebowanie na srodek, po¬ zwalajacy na opanowywanie róznych stanów cho¬ robowych lub schorzen wywolywanych lub podle- 45 gajacych wplywowi nadmiaru pewnych polipepty- dów, takich jak gastryna, angiotensyna II lub so- matomedian. Wynalazek niniejszy zaspakaja to zapotrzebowanie w sposób bezpieczny i skuteczny.Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 50 antygenów do aktywnej immunizacji, a zwlaszcza antygenów skladajacych sie z naturalnych pro¬ teinowych hormonów reprodukcji, niehormonal- nych protein i specyficznych fragmentów takich hormonów i protein i syntetycznie wytworzonych 55 czesci wymienionych hormonów i protein, przy czym wszystkie one moga byc modyfikowane, jak to zo¬ stanie szczególowo omówione dalej. Dla uproszcze¬ nia zarówno w opisie, jak i w PL PL PL PL PL PL PL

Claims (1)

1.