PL80058B1

PL80058B1 -

Info

Publication number: PL80058B1
Application number: PL1969133893A
Authority: PL
Original assignee: Sandoz Ltdch
Priority date: 1968-05-31
Filing date: 1969-05-29
Publication date: 1975-08-30
Also published as: DE1926045C3; US3752814A; CY780A; FI49035C; SE341854B; CA953720A; YU33970B; NL151374B; US3752888A; FR2009737A1; GB1257841A; FI49035B; BR6909341D0; NL6907038A; DE1926045A1; BE733799A; CH507249A; DK124884B; DE1926045B2; YU133669A

Description

Sposób wytwarzania 2-bromo-a-ergokryptyny Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia 2-bromo-a-ergokryptyny o wzorze przedsta¬ wionym na rysunku i jej soli! z organicznymi lub nieorganicznymi kwasami.Siposóbem wedlug wynalazku wytwarza sie 2-bromo-a-ergókryptyne o wzorze przedstawionym na rysunku ii jej sole addycyjne z kwasami, pod¬ dajac ergokryptyne w rozpuszczalniku, obo¬ jetnym w warunkach reakcji, bromowaniu za pomoca lagodnie dzialajacego srodka bromujace¬ go jak N-bromoimid kwasu ftalowego, N-bro- moiimid kwasu 'bursztynowego lub N-bromokap- rolaktam, tak wytworzona 2-ibromo-a-ergokrypty- ne oczyszcza w znany sposób i nastepnie prze¬ prowadza w sól addycyjna z kwasami.Korzystny sposób przeprowadzania sposobu we¬ dlug wynalazku polega na traktowaniu, ergokryp- tyny rozpuszczonej w rozpuszczalniku, obojetnym w warunkach ireakcji lagodnie dzialajacym srod¬ kiem bromujacym w rozpuszczalniku obojetnym w warunkach reakcji. Jako srodki bromujace na¬ daja sie zwlaszcza podstawione chlorowcem przy azocie amidy lub imidy alifatycznych lub aro¬ matycznych kwasów karbonylowych lub sulfono¬ wych jak na przyklad N-bromoimid kwasu ftalo¬ wego, N-bromoimid kwasu bursztynowego lub N-lbromokaprolaktam '(1 do 3 imoli) lub kompleks bromu z dibksanem (0,5 mola Br2).Bromowanie przeprowadza sie w obojetnym, po¬ larnym rozpuszczalniku jak dioksan, acetonitryl 10 15 20 30 lub chlorek metylenu, w temperaturach mieclzy 10° i 80°C.Wytworzona surowa 2-bromo-a-ergokryptyne oczyszcza sie znanymi imetodaimi, na przyklad za pomoca chromatografii i/lub krystalizacji. 2-bromo-a-ergokryptyna jest w temperaturze otoczenia substancja krystaliczna, tworzaca z or¬ ganicznymi lub nieorganicznymi kwasami trwale, w temperaturze otoczenia krystaliczne sole. Sto¬ sowac imozna jako kwasy nieorganiczne na przy¬ klad chlorowodór, bromowodór lub kwas siarko¬ wy lub kwasy organiczne jak kwas szczawiowy, kwas winowy, kwas metanosulfonowy i podobne. 2-bromo-a-ergokryptyna hamuje wydzielanie hormonu luteotropowego (prolaktyny) i zwiazane z tym stany fizjologiczne lub patologiczne. Nalezy tu na przyklad hamowanie laktacji oraz hamowa¬ nie raka sutka. 2-bromo-a-ergokryptyna odróznia sie od podob¬ nych przedstawicieli grupy ergotoksyny, na przy¬ klad a-ergokryptyny lub ergokorniny, po pierw¬ sze lepszym dzialaniem, po drugie wieksza spe¬ cyficznosci^ dzialania i po trzecie lepsza toleran¬ cja. 2-bromo-a-ergokryptyne mozna wiec stosowac w medycynie jako specyficzny czynnik hamujacy prolaktyne, miedzy innymi w ginekologii jako czynnik hamujacy laktacje, przy leczeniu raków sutka, mlekotoku, zapalenia gruczolu sutkowego i mastoclyniii. 80 05880 058 Dzienna dawka wynosi okolo 2—20 mg.Prolaktyna jest honmonem peptydowym wy¬ dzielanym z gruczolów przysadkowych. Wyodreb¬ nianie ii oczyszczanie prolaktyny jest bardzo skomplikowane.Powodowane przez ergotalkaloidy u szczura ha¬ mowanie zagniezdzenia jaja zaplodnionego jest reprezentatywne dla dzialania hamujacego prolak¬ tyne tych zwiazków ergotowych {miedzy innymi Acta Endocrinologica 27 (1958) 99—109 oraz 41 (1962) 321^335).Wartosci ED50 dla hamowania zagniezdzenia jaja u szczura wykazuja poziom dzialania czynnika hamujacego prolaktyne.Specyficznosc dzialania hamujacego prolaktyne mozna wyrazic stosunkiem: ED50 dla hamowania owulacji (mg/kg, szczur) ED50 dla hamowania inplantacji (img/kg, szczur) Ponizej porównuje sie aktywnosc, specyficznosc, toksycznosc i tolerancje 2-broimo-a-ergokryptyny ze znanymi czynnikami hamujacymi prolaktyne.Dzialanie hamujace inplantacje u szczura. W ciagu 19 dni przetrzymuje sie w klatce 2 plodne samiczki szczura (zwierze kontrolne i doswiad¬ czalne), przy czym kazda umieszcza sie razem z doswiadczonym samcem szczura. Piatego, dziesia¬ tego i pietnastego dnia doswiadczenia wstrzykuje sie samiczkom podskórnie badany preparat lub jego rozpuszczalnik. Podczas autopsji dziewietna¬ stego dnia kontroluje sie rogi macicy pod lupa na inplantacje i resorpcje. Dla kazdej dawki stosuje sie 11 zwierzat doswiadczalnych i tylez zwierzat kontrolnych. W celu okreslenia wyników do¬ swiadczenia inplantacje zwierzat kontrolnych przy¬ jeto za }0Q°/o, a dzialanie hamujace inplantacje u zwierzat doswiadczalnych okreslono w procen¬ tach. Doswiadczenia te powtarza sile z róznymi dawkami, aby ustalic pewny stosunek dawka— dzialanie i okreslic ED50.Wartosci ED50 obliczono metoda probitowa Lit- chfielda i Wilcoxona, J. Pharmacol. 96. (1949) 99.Specyficznosc dzialania hamujacego prolaktyne.Wiadomo, ze ergokornina hamuje spontaniczne ja¬ jeczkowanie u szczurów w cyklu i powodujacy je proestrus „LH-Surge" (LH = hormon luteinizujacy). 10 25 30 35 niny 1,7 mg/kg, dla a-ergokryptyny ,1,7 mg/kg, a dla 2- bromo-a-ergokryptyny 29 mg/kg.Tablica 1 Substancja ergokornina a-ergokryptyna 1 2-bromo-a-ergokryptyna Dzialanie hamujace inplantacje u szczura ED50 mg/kg 2,7 1 1,15 0,75 Z danych tych widac, ze 2-bramo-a-ergokryp- tyna u doroslych szczurów wykazuje bardzo slabo zaznaczone dzialanie hamujace owulacje.Wielkosc specyficznosci dzialania hamujacego prolaktyne powyzszych zwiazków pokazana jest w ponizszej tablicy 2.Tab] Substancja engokornina a-engokiryptyna 2-bromo-a-ergokrypty- na Lica 2 Specyficznosc = ED50 hamowanie owulacji ED50 hamowanie inplan- tacji 1,7 ^=1,5 1,15 20 0,75 45 Z tablicy tej wynika, ze dla 2-toromo-a-ergo¬ kryptyny ED50 dla hamowania owulacji wynosi wiecej niz 25-krotna wartosc ED50 dla hamowania inplantacji.Z powyzszych tablic 1 i 2 wynika, ze 2-bro- mo-a-ergokryptyna wykazuje bardziej zaznaczone i bardziej specyficzne dzialanie hamujace pro¬ laktyne niz substancje porównawcze a-ergokryp¬ tyna i ergokornina.Zmiany powodowane u doroslych szczurów przez 2^broimo-a-ergokryptyne w wartosciach se- rum-prolaktyna i seruim-LH oznaczono równiez bezposrednio za pomoca RIA Tablica 3 LH hg/ml prolaktyna hg/ml Próba kontrolna (NaCl fizj.) 1098 (±267) 114 (±35) 2-bromo-a-ergokryptyna mg/kg podskórnie 1,5 1020 (±884) n.s. 9,8 (±7,6) +++ 10 267 (±276) III n1 r 2,9 (±1,3) + + + 20 225 (±392) 2,8 (+0,9) _l i |_ i 1 r 100 371 (+571) + 3,0 (+0,7) ±++ Wartosci ED50 tego dzialania hamujacego owula¬ cje u szczura okreslono dla ergokominy, a-ergo¬ kryptyny i 2-bromo-a-ergokryptyny, przy czym mozna je przedstawic nastepujaco: dla ergokor- 65 Statystyka: test t-Studenta: n.s. = p 0,5 ± = p 0,05 ±++ = p 0,001 Specyficzne dzialanie hamujace prolaktyne 2-bro-80 058 5 mo-ce-ergokryptyny wynika równiez z tej ta¬ blicy 3.Tolerancja a) toksycznosc ostra Okreslenie LD50 (dawka dla 50^/© smiertelnosci) prowadzono przy podawaniu doustnym i dozyl¬ nym u królików. Okres obserwacji po jednora¬ zowym podaniu substancji wynosil 7 dni. Wyniki podane sa w tablicy 4, gdzie podano równiez dane porównawcze dla a-ergokryptyny i ergokor- nihy.Tablica 4 Preparat 2-bromo-a-ergokryp- tyna a-ergokryptyna | ergokornina L.D50 mg/kg u królików doustnie 1000 dozylnie 12,0 0,95 0,9 | b) dzialanie wymiotne Nie uspione psy reaguja wymiotami na podawa¬ ne pozajelitowo alkaloidy sporyszu w okreslonym zakresie dawkowania. Mozna to interpretowac jako wynik dzialania tych alkaloidów peptydowych na osrodkowy uklad nerwowy. Wymioty te mozna wywolac przez powolne dozylne podawanie ergo¬ taminy o ED50 fig/kg. a-ergokryptyna i ergo¬ kornina wykazuja podobna aktywnosc. ED50 dla a-ergokryptyny wynosi 2,6 Mg/kg, a dla ergokor- niny 3,0 ^g/kg. 2-bromo- prawda równiez dzialanie wymiotne, ED50 wy¬ nosi jednak 7,5 p-g/kg. 2-bromo-a-ergokryptyna ma wiec 2,5-krotnie mniejsze dzialanie wymiot¬ ne niz ergokornina, 2,8-krotnie mniejsze dziala¬ nie wymiotne niz a-ergokryptyna i 3-krotnie mniejsze dzialanie • wymiotne niz ergotamina.Równiez dzialanie tonizujace naczynia 2-bro- mo-a-ergokryptyny jest slabe w porównaniu z takim dzialaniem znanych naturalnych lub czes¬ ciowo syntetycznych alkaloidów sporyszu. 2-bromo-a-ergokryptyne mozna stosowac jako srodek leczniczy sama lub w odpowiednich po¬ staciach leku dla podawania doustnego lub poza¬ jelitowego. Celem wytworzenia odpowiednich po¬ staci leku przerabia sie ten zwiazek z nieorga¬ nicznymi lub organicznymi, farmakologicznie obo¬ jetnymi! srodkami pomocniczymi. Jako srodki po¬ mocnicze stosuje sie na przyklad dla tabletek i drazetek: cukier mleczny, skrobie, talk, kwas stearynowy i podobne dla syropów: cukier trzci¬ nowy, cukier inwertowany, roztwory glukozy i inne dla preparatów do zastrzyków: wode, alko¬ hole, gliceryne, oleje roslinne i podobne dla czopków: naturalne lub utwardzane oleje, woski ii inne.Ponadto preparaty te moga zawierac odpowied¬ nie srodki konserwujace, stabilizujace, powie- rzchniowo-czynne, ulatwiajace rozpuszczanie, slo¬ dzace, barwiace, aromatyzujace i inne.W ponizszych przykladach objasniajacych bli¬ zej sposób wedlug wynalazku, nie ograniczajac jednak jego zakresu, wszelkie dane temperatu- 6 rpwe sa korygowane i podane w stopniach Cel¬ sjusza.Przyklad I. 2^bromo-a-ergokryptyna. Do ogrzanego dp temperatury 60°C i mieszanego roz¬ tworu 9,2 g ergokryptyny w 180 ml absolutnego dioksanu wkrapla sie w ciemnosci w ciagu 5 mi¬ nut roztwór 3,4 g N^fcromoimidu kwasu burszty¬ nowego w 00 ml absolutnego dioksanu. Miesza¬ nine reakcyjna miesza sie w ciagu 70 minut w tej temperaturze i zageszcza w wyparce obro¬ towej do konsystencji syropu przy temperaturze lazni 50°C. Nastepnie rozciencza sie 300 ml chlor¬ ku metylenu, zadaje w rozdzielaczu okolo 200 ml 2 n roztworu weglanu sodowego i dobrze wytrza¬ sa. Wodna warstwe ekstrahuje sie trzykrotnie po 10Q ml chlorku metylenu. Polaczone warstwy orga¬ niczne przemywa sie 50 unl wody, suszy nad siar¬ czanem sodowym i oddestylowuje rozpuszczalnik pod zmniejszonym cisnieniem.Pozostalosc w postaci brunatnej piany chroma- to;grafuje sie na 50-cio krotnej ilosci tlenku gli¬ nowego o aktywnosci II—III, stosujac jako eluent 0,2°/o roztwór etanolu w chlorku metylenu, (przy czym zwiazek podany w tytule eluuje sie bezpo¬ srednio za nieco szybciej wedrujaca plama ubocz¬ na). Ostatnie frakcje zawieraja poza zwiazkiem tytulowym jeszcze zmienne ilosci produktu wyjs¬ ciowego, które mozna jako frakcje mieszana pod¬ dac bezposrednio dodatkowemu bromowaniu we¬ dlug sposobu opisanego .powyzej,. Laczy sile czy¬ ste frakcje i krystalizuje je z metyloetyloketo- nu/eteru izopropylowego, otrzymujac produkt o temperaturze topnienia 215°—218°C z rozkladem, (a) d = —195° /c = 1, chlorek metylenu. Identy¬ fikacja chromatograficzna: faza stacjonarna: 25°/o formamid, faza ruchoma: eter/czterochlorek wegla <1 : 1) wartosc Rf: 2-bromo-a-ergokiryptyna 0,88, a-ergokryptyna 0,70.Metanosulfonian: krystalizowany z metyloetyloketonu posiada tem¬ perature topnienia 192°-^196°C z rozkladem, (a) d = + 95°C, (c = 1, metanol chlorek metyle¬ nu = 1: 1).Przyklad II. 2-bromo-a-ergokryptyna. Roz¬ twór 9,2 g ergokryptyny w 200 ml absolutnego dioksanu i roztwór 5,1 g N- bromokaprolaktamu w 300 ml dioksanu miesza sie w ciagu 6 godzin w temperaturze otoczenia. Po odparowaniu roz¬ puszczalników przerabia sie dalej jak w przy¬ kladzie I. Otrzymana piane chromatografuje sie na 50-krotnej ilosci zelu krzemionkowego, stosujac jako eluent 3°/a roztwór etanolu w chlor¬ ku metylenu. Zwiazek tytulowy otrzymuje sie przy tym od razu w stanie czystym. Jego stale fizyczne sa zgodne z podanymi w przykladzie I.Przyklad III. 2-bromo-a-ergokryptyna. Roz¬ twór 92,5 mg ergokryptyny w 2 ml absolutnego dioksanu laczy sile z roztworem 43,4 mg N-bro- moimidu kwasu ftalowego w 2 ml dioksanu i miesza otrzymana ciemna mieszanine reakcyjna przez 6 godzin w temperaturze otoczenia. Po od¬ parowaniu rozpuszczalników przerabia sie dalej jak w przykladzie I. Otrzymana piane chroma¬ lo 15 20 25 30 35 40 45 50 55 6080 058 tografuje sie na 50-krotnej ilosci zelu krze¬ mionkowego, stosujac jako eluent 3°/o roztwór etanolu w chlorku metylenu. Zwiazek tytulowy otrzymuje sie przy tym od razu w stanie czy¬ stym. Stale fizyczne sa zgodne z [podanymi w przykladzie I.Przyklad IV: 2^bromo-a-ergokryptyna. Roz¬ twór 922 mg ergokryptyny w 18 ml absolutnego dioksanu i roztwór 0,04 ml Br2 w 6 ml dioksanu miesza sie w ciagu 2 godzin w temperaturze oto¬ czenia. Po odparowaniu rozpuszczalników prze¬ rabia sie dalej jak w przykladzie I. Otrzymana piane chromatografuje sie na 50-krotnej ilosci zelu krzemionkowego, stosujac jako eluent 3°/o roztwór etanolu w chlorku metylenu. Zwiazek tytulowy otrzymuje sie przy tym od razu w stanie 10 8 czystym. Stale fizyczne sa zgodne z podanymi w przykladzie I. PL PL PL PL

Claims

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania 2-bromo-a-ergokryptyny o wzorze ogólnym przedstawionym na rysunku i jej soli addycyjnych z kwasami, znamienny tym, ze ergokryptyne w rozpuszczalniku, obojetnym w warunkach reakcji poddaje sie bromowaniu za pomoca lagodnego srodka bromujacego, jak N-bro- moimid kwasu bursztynowego, N-bromokapro- laktam lub N-bromoimid kwasu ftalowego i1 tak wytworzona 2-bromo-a-ergokryptyne nastepnie przeprowadza w jej sole addycyjne z kwasami.

2. Sposób wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze stosuje sie jako rozpuszczalnik dioksan lub ace- tonitryl. BjC ,CH3 CH .^°44i^ oJ_IHJ-o N-CH3 H ^ CH9 I. CH A H3C CH3 PZG, zam. 1579-75, naklad 110 + 20 egz. Cena 10 zl PL PL PL PL