PL46532B1 - - Google Patents

Description

Wynalazek dotyczy sposobu rozdzielania na skladniki antybiotyku, zawierajacego glównie 1,4-dwu-(p-hydroksyfenylo-) 2,3-dwu-izonitrylo- butadien- (1,3) na drodze chromatografii.Wiadomo, ze antybiotyk, który ponizej ozna¬ czono jako „Brevicid" (znak towarowy) sklada sie ze skladnika x — 60 — 80*/o y — 20 — 40«/o i „ z — w ilosci ponizej l°/o Skladniki te otrzymano juz w stanie czys¬ tym na drodze chromatografii w kolumnie na tlenku glinowym. Na podstawie dotychczaso¬ wych badan mozna przypuszczac, ze skladnik Z jest biologicznie nieaktywny. Wedlug znanych *)- Wlasciciel patentu oswiadczyl, ze wspól¬ twórcami wynalazku sa dr Heinz Tonjes i Hein¬ rich Patter. sposobów jest wprawdzie mozliwe otrzymac czysty skladnik X z dobra wydajnoscia, jed¬ nak oddzielenie skladnika Y przebiega w trud¬ nych warunkach i z bardzo duzymi stratami z powodu silnej adsorpcji na tlenku glinowym oraz z powodu niestabilnosci skladnika Y w kwasnym srodku eluujacym. Poza tym spo¬ sób ten byl jeszcze z tego powodu niekorzyst¬ ny, ze przy stosowaniu zakwaszonego alkoholu jako srodka do eluowania zawsze przechodzily do eluatu jony glinu. Oczyszczanie kompleksu „Brevicid" na drodze chromatografii na tlenku glinowym bylo dotychczas zawsze zwiazane z duza strata aktywnosci biologicznej. Inne znane sposoby, w których „Brevicid" oczyszcza sie przez rozpuszczenie w rozpuszczalniku or¬ ganicznym i nastepne wytracenie woda posia¬ daja te wade, ze produkt koncowy zawiera jeszcze pewne zanieczyszczenia.Zadaniem wynalazku jest oddzielenie czyn¬ nego skladnika Y obok skladnika X z dobra wydajnoscia lub oczyszczenie kompleksu anty¬ biotyku bez strat substancji czynnej antybio- tycznie.Stwierdzono, ze roztwór „Brevicidu" w roz¬ puszczalniku organicznym otrzymany w znany sposób mozna rozdzielic i oczysci^ na drodze chromatografii na proszku z poliamidu. ^Na¬ stepnie przy tym nadspodziewanie rozdzieleni na cztery skladniki, to znaczy skladnik Y dotychczas znany jako jednolity daje sie roz¬ dzielic na skladniki Yi i Y2. Poza tym stwier¬ dzono, ze skladniki X jak tez Yi i Y2 mozna eluowac za pomoca alkoholi jednowartoscio¬ wych, korzystnie propanolu. Etaieki temu spo- * sobowi mozliwe jest z jednej strony uwolnie¬ nie kompleksu od skladników nieczynnych i od skladnika Z lub otrzymania poszczególnych skladników oddzielnie w postaci czystej, co moze miec znaczenie dla pewnych celów far¬ maceutycznych Szczególna zaleta sposobu po¬ lega na tym, ze wedlug niego mozna otrzy¬ mac czysty kompleks substancji czynnej, wol¬ ny od wszystkich nieczynnych zanieczyszczen, w prostym zabiegu roboczym. Oprócz tego moz¬ liwe ' jest otrzymanie w sposób ekonomiczny skladnika Y, skladajacego sie z substancji Yt i Y2, którego wedlug starych metod nie mozna bylo wydzielic.Za pomoca czterech przykladów zostaje blizej objasniony przedmiot wynalazku.Przyklad I. 5g kompleksu „Breyicid" rozpuszcza sie w 500 ml izopropanoiu lub n-propanolu i wprowadza do kolumny wypel¬ nionej proszkiem poliamidowym o uziarnieniu najkorzystniej ponizej 0,2 mm, której dlugosc wynosi 50 cm a srednica 5 cm. Po zaabsorbo¬ waniu roztworu kolumne eluuje sie 2000 ml izo- propanalu lub n-propanolu. Z obu pierwszych frakcji wyodrebnia sie skladniki X i Yj. Po calkowitej eluacji skladnika Yi eluuje sie skladnik Y2 za pomoca 1000 ml mieszaniny rozpuszczalników skladajacej sie z metanolu, estru kwasu octowego, metyloetyloketonu (1:1:1). Skladnik Z mozna po tym jeszcze elu¬ owac za pomoca okolo 250 ml n/20 lugu so¬ dowego. Frakcje zawierajace X i Y zageszcza sie oddzielnie kazdorazowo w warunkach za¬ chowawczych w prózni i wytraca poszczególne skladniki przez dodatek kazdorazowo 2 ^ 3« krotnej ilosci goracej wody o temperaturze 50 — 60°C i nastepnie saczy. Frakcje zawie¬ rajaca Yt zageszcza sie w warunkach zacho¬ wawczych do suchej pozostalosci. Frakcje ze skladnikiem Z zadaje sie n/20 kwasem solnym az do zobojetnienia roztworu alkalicznego, przy czym wytraca sie skladnik Z. Otrzymuje sie przy tym nastepujace wydajnosci: 3,5 g skladnika X 0,7 g „ Yi 0,2 g „ Y2 0,05 g ,, Z Przyklad II. 50 g kompleksu „Brevicid" rozpuszcza sie w 5000 ml metanolu i prze¬ puszcza przez kolumne z proszkiem poliamido¬ wym, której dlugosc wynosi 10 cm a srednica 5 cm. Nastepnie przemywa sie tak dlugo me¬ tanolem, az frakcje X, Yt i Y2 calkowicie przejda do eluatu. W kolumnie pozostaja przy tymL zanieczyszczenia, jak tez biologicznie nie¬ czynny skladnik Z. Eluat zageszcza sie nastep¬ nie w prózni, zadaje woda jak w przykladzie I, wytraca i przerabia dalej. Wydajnosc wedlug tego przykladu wynosi 45 g czystego jasnozól- tego kompleksu „Brevicid".Przyklad III. 5 1 ekstraktu estru kwasu octowego o zawartosci okolo l°/o „Brevicidu", który otrzymuje sie podczas ekstrakcji micelli w procesie produkcyjnym, przepuszcza sie przez kolumne z proszkiem poliamidowym, której ^dlugosc wynosi 10 cm, a srednica 5 cm. Po przejsciu ekstraktu przez kolumne przemywa sie estrem kwasu octowego tak dlugo, az cal¬ kowicie wyeluuje sie z kolumny skladniki X, Yj i Y2. W kolumnie pozostaja przy tym za¬ nieczyszczenia, jak tez biologicznie nieczynny skladnik Z. Oczyszczony ekstrakt estru kwasu octowego wolny od wszystkich zanieczyszczen przerabia sie przez zageszczenie. Otrzymuje sie okolo 45 g jasnozóltego „Brevicidu".Przyklad IV. 51 okolo lVo-wego roztwo¬ ru surowego ekstraktu „Brevicidu" w estrze kwasu octowego miesza sie ze 100 g proszku poliamidowego, po czym mase odsacza sie i przemywa tak dlugo estrem kwasu octowego az skladniki X, Yt i Y2 oddziela sie od proszku poliamidowego. Otrzymuje sie przy tym czysty koncentrat „Brevicidu" wolny od zanieczysz¬ czen i skladnika Z, który odparowuje sie do sucha w prózni. PL

Claims (3)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób rozdzielania antybiotyku.^zawieraja¬ cego glównie l,4-dwu- 2,3-dwu-izonitrylo-butadien- (1,3) na sklad¬ niki podstawowe na drodze chromatografii, — 2 —znamienny tym, ze oczyszczony lub tez su¬ rowy kompleks substancji czynnej rozpusz¬ cza sie w rozpuszczalnikach organicznych i przepuszcza przez kolumne wypelniona proszkiem poliamidowym lub miesza z nim, po czym eluuje z niego skladniki X, YltY2 pojedynczo lub wspólnie.
2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze do rozpuszczania antybiotyku stosuje sie korzystnie izopropanol, propanol, etanol, metanol, ester kwasu octowego, octan me* tylowy, aceton i metyloetyloketon.
3. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze do eluowania stosuje sie organiczne roz¬ puszczalniki, korzystnie jednak izopropanol, propanol, metanol, etanol, octan metylowy, ester kwasu octowego, aceton, metyloketon, oraz kombinacje kilku wymienionych srod¬ ków do eluowania. V E B Arzneimittelwerk Dresden Zastepca: mgr * Józef Kaminski rzecznik patentowy PL