PL45510B1 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- PL45510B1 PL45510B1 PL45510A PL4551060A PL45510B1 PL 45510 B1 PL45510 B1 PL 45510B1 PL 45510 A PL45510 A PL 45510A PL 4551060 A PL4551060 A PL 4551060A PL 45510 B1 PL45510 B1 PL 45510B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- hydroxy
- aqua
- cobalamin
- cobalamine
- contact
- Prior art date
Links
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 29
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 14
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 14
- -1 polysaccharide ion Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 8
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 7
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 7
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 6
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 claims description 6
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 claims description 6
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims description 6
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 claims description 6
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 claims description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 2
- RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M cyanocobalamin Chemical compound N#C[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 12
- 229960002104 cyanocobalamin Drugs 0.000 description 7
- 235000000639 cyanocobalamin Nutrition 0.000 description 7
- 239000011666 cyanocobalamin Substances 0.000 description 7
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 7
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 7
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 7
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 7
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940010007 cobalamins Drugs 0.000 description 4
- 150000001867 cobalamins Chemical class 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N hydrogen cyanide Chemical compound N#C LELOWRISYMNNSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- WXNZTHHGJRFXKQ-UHFFFAOYSA-N 4-chlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1 WXNZTHHGJRFXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000226657 Clarkia concinna Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000003346 cobalamin group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229940075554 sorbate Drugs 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- XJDNKRIXUMDJCW-UHFFFAOYSA-J titanium tetrachloride Chemical compound Cl[Ti](Cl)(Cl)Cl XJDNKRIXUMDJCW-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Description
Wynalazek dotyczy sposobu otrzymywania zwiazków adsorbcyjnych hydroksy (aqua) ko¬ balaminy, polegajacego na wprowadzeniu w zetkniecie hydroksy (auqa) kobalaminy, ewen¬ tualnie zawierajacej ja mieszaniny z polisacha- rydowym wymieniaczem jonowym w niebufo- rujacym wodnym, wodnoalkoholowym lub al¬ koholowym srodowisku.Mieszaniny zawierajace hydroksy (agua) ko- balamine otrzymuje sie z brzeczki fermentacyj¬ nej przez ekstrakcje mikroorganizmów woda i adsorpcje cial aktywnych witaminy Bi2 na odpowiednim srodku adsorpcyjnym, na przy¬ klad weglu aktywnym. Przez eluowanie za- adsorbowanych substancji, zageszczenie eluatu w prózni i wytracenie p-chlorofenolem na zie¬ mi okrzemkowej zgodnie z niemieckim opisem '*) Wlasciciel patentu Oswiadczyl, ze twórca wynalazku jest Paul Zeller. patentowym nr 1016 898 otrzymuje sie produkt, który zawiera witaminy grupy Bil, bardzo za¬ nieczyszczone cialami bialkowymi. Witaminy mozna stad ekstrahowac na przyklad wodnym roztworem metanolu. Po jego odparowaniu otrzymuje sie koncentrat, który ogólnie biorac zawiera wiecej niz 10°/o witamin grupy Bit.Koncentraty hydroksy (aqua) kobalaminy da¬ dza sie równiez otrzymywac z koncentratów cyjanokobalaminy przez redukcje za pomoca chlorku tytanowego, usuniecie wydzielajacego sie cyjanowodoru i utlenienie zredukowanej kobalaminy.Jako polisacharydowe wymieniacze jonowe nadaja sie polisacharydy o kwasowych grupach funkcyjnych. Takie wymieniacze jonowe otrzy¬ muje sie na przyklad z celulozy, szczególnie z celulozy z drewna i bawelny, przez1 wpro¬ wadzenie grup kwasowych droga estryfikowa¬ nia lub eteryfikowania grup hydroksylowych,na przyklad kwasem'octowym lub fosforowym.Równiez moga byc stosowane polisacharydy, które juz zawieraja w swej czasteczce funkcyj¬ ne grupy kwasowe, jak na przyklad kwas algi- Polisacharydowe wymieniacze jonowe moga byc na przyklad stosowane w postaci proszków lub klaczków. Wykazuja one wlasciwosci wy¬ mienne najkorzystniej w osrodku wodnym jak równiez alkoholowym i wodno-alkoholowym.W tych srodowiskach posiadaja one szczególnie wysoka pojemnosc w stosunku do wysokocza- steczkowych kwasów ewentualnie substancji zasadowych. Te wlasciwosci zawdzieczaja one swej wydluzonej, wolnej od usieciowania struk¬ turze, która równiez duzym czasteczkom umo¬ zliwia dostep do grup czynnych.Zasadowe kobalaminy. jak hydroksy (aqua) kobalamina sa adsorbowane przez kwasne po- lisacharydowe wymieniacze jonowe, podczas gdy kwasno reagujace kobalaminy, jak kwasy kobalaminokarboksylowe oraz obojetnie reagu¬ jace kobalaminy jak cyjanokobalamina, faktor III nie sa adsorbowane.Przed uzyciem kwasne polisacharydowe wy¬ mieniacze kationowe poddaje sie silnemu za¬ kwaszeniu korzystnie w wodnej lub wodno-al- koholowej zawiesinie, na przyklad rozcienczo¬ nym kwasem solnym, a w celu usuniecia nad¬ miaru kwasu starannie przemywa sie. Wy¬ mieniacz z kwasu alginowego korzystnie jest przemywac woda, az wartosc pH nie bedzie sie zmieniac, aby usunac pochodzacy z produk¬ cjirkwas solny.Wedlug wynalazku do wodnego, alkoholowego lub wodno-alkoholowego roztworu hydroksy (aqua) kobalaminy, który zawiera jeszcze rów¬ niez inne witaminy grupy Bu i (albo) substncje bialkowe, dodaje sie kwasnego polisacharydo- wego wymieniacza jonowego i po 20—60 mi¬ nutach mieszanine wymieniacza w roztworze zawierajacym hydroksy (aqua) kobalamine i polisacharydowy wymieniacz jonowy nalado- nowy (poli-d-manuronowy). Niektóre znane i znajdujace sie w handlu polisacharydowe wy¬ mieniacze jonowe sa przytoczone w nastepu¬ jacej tabeli. wany hydroksy(aqua)kobalamina oddziela sie przez odwirowanie, korzystnie przyrzadza sie za¬ wiesine w malej ilosci alkoholu, odsacza i suszy pod próznia w temperaturze pokojowej. Odpo¬ wiedni stosunek ilosciowy wymienicza do znaj¬ dujacych sie w roztworze witamin Bu zalezy od pojemnosci stosowanego wymieniacza. Wy¬ mieniacz jonowy z kwasu alginowego stosuje sie korzystnie w co najmniej 10-krotnej, na przy¬ klad 10—20-krotnej ilosci w stosunku do odsor- bowanej ilosci witaminy, wymieniacz karbo- ksymetylocelulozowy praktycznie w 50—100- krotnej ilosci.Jako skladnik alkoholowy srodowiska stosu¬ je sie korzystnie nizszy alkohol alifatyczny, który zawiera 1—4 atomów wegla, zwlaszcza alkohol metylowy.Hyroksy(aqua)kobalamina, która przedstawia naturalna czynna postac witaminy Bit, ulega w tej postaci latwo rozkladowi Stwierdzono, ze kobalamina otrzymywana sposobem wedlug wynalazku w postaci zwiazków adsorpcyjnych wykazuje wyzsza stabilnosc. Szczególnie sta¬ bilny jest a^sorbat na kwasie alginowym. Spo¬ sób wedlug wynalazku umozliwia wiec otrzy¬ mywanie stabilnej, -fizjologicznie przyswajalnej postaci uzytkowej hydroksy(aqua)kobalaminy.Mozna równiez w sposobie wedlug wynalaz¬ ku srodowisko zawierajace hydroksy(aqua)ko- balamine przepuszczac przez kolumne z poli- sacharydowym wymieniaczem jonowym adsor- bujacym hydroksy(aqua)kobalamine, przy czym hydroksy(aqua)kobalamina zostaje na kolumnie zatrzymana, podczas gdy substancje towarzy¬ szace, na przyklad obojetnie reagujace kobala¬ miny przeplywaja bez przeszkód. Przez rozwi¬ niecie, mozna zatrzymane na kolumnie wy¬ miennej kwasne kobalaminy rozlozyc na po- Tablica wymieniaczy jonowych polisacharydowyeh Okreslenie , ^jggL- Otomany z CM-ceululoza Grupy karboksymetylowe: Sproszkowanej bawelny slabokwasny i kwasu octowego P-celuloza Grupy kwasu fosforowego: Sproszkowanej bawelny silniekwasny i POCL^ Kwas alginowy Grupy karboksylowe: alg droga procesów slabo kwasny oczyszczania — 2 —szczególne skladniki i nastepnie kolumne wy¬ mienna rozdzielic przez pokrajanie na poszcze¬ gólne czesci. Czesci kolumny zawierajace hy- droksy(aqua)kobalamine mozna nastepnie wy¬ suszyc i adsorbat jako taki stosowac.•Przyklad I. W 100 ml wodnego roztworu 50 mg hydroksy(aqua)kobalaminy, która zawie¬ ra 7—10V» cyjanokobalaminy, przyrzadza sie zawiesine 1,5 g fosforylowanej celulozy (P-ce- luloza f-my Serva, Heidelberg). Po 1 godzinie mieszania naladowany wymieniacz odsacza sie na filtrze szklanym i po krótkim przemyciu alkoholem metylowym suszy pod próznia w tem¬ peraturze pokojowej. Rózowo zabarwiony prze¬ sacz zawiera 4,3 g cyjanokobalaminy. Otrzy¬ muje sie 1,5 g adsorbatu z 45 mg hydroksy- (aqua)kobalaminy.Przyklad II. 40 mg hydroksy(aqua)kobala- miny, która zawiera 7—10*/# cyjanokobalaminy, rozpuszcza sie w 2 ml (HP/t-owego wodnego roz¬ tworu alkoholu metylowego i wprowadza na kolumne (srednica 12 mm) przygotowana przez zastosowanie 80°/»-owego wodnego roztworu me¬ tylowego z 5 g karboksymetylocelulozy (CM-ce- luloza, f-my Serva, Heidelberg). Przy rozwi¬ janiu kolumny 80*/»-owym roztworem alkoholu metylowego hydroksy(aqua)kobalamina jest zwiazana przez wymieniacz w postaci szerokiej czerwonej wstegi, podczas gdy cyjanokóbalami- ne (3,9 mg) wymywa sie az do osiagniecia bez¬ barwnego eluatu. Po krótkim przemyciu alko¬ holem metylowym obciazony wymieniacz od¬ dziela sie i suszy pod próznia w temperaturze pokojowej. Otrzymuje sie 4 g adsorbatu z 35,6 mg hydroksy(aqua)kobalaminy.Przyklad III. Postepuje sie jak w przykla¬ dzie II, jednakze stosuje sie 2 g fosforylowanej celulozy (P-celuloza). Otrzymuje sie tak 1,2 g adsorbatu z 38,2 mg hydroksy(aqua)kobalaminy.Przyklad IV. W podobny sposób jak w przykladzie II stosuje sie 1 g kwasu alginowego (Protacid pure f-my AS Protan, Drammen, Norwegia). Otrzymuje sie 0,62 adsorbatu z 32,4 mg hydroksy(aqua)kobalaminy.Przyklad V. Roztwór 0,8 mg cyjanokobala¬ miny i hydroksy(aqua)kobalaminy w 0,2 ml wody poddaje sie na kolumnie (srednica 10 mm) zetknieciu z 1,5 g karboksymetylocelulozy (CM-celuloza). Podczas przemywania woda cy- janokobalamina bardzo szybko opuszcza kolum¬ ne. Hydrokys(aqua)kobalamina pozostaje jed¬ nakze w jej górnym koncu i moze byc oddzie¬ lona jako adsorbat PL
Claims (8)
- Zastrzezenia patentowe 1. Sposób otrzymywania zwiazków adsorpcyj- nych hydroksy(aqua)kobalanliny, znamienny tym, ze hydroksy(aqua)kobalamine lub za¬ wierajaca ja mieszanine wprowadza sie w zetkniecie z polisacharydowym ' wymienia¬ czem jonowym w niebuforujacym wodnym, wodno-alkoholowym lub alkoholowym sro¬ dowisku.
- 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako srodowisko stosuje sie jednofunkcyj- ny alifatyczny alkohol o 1—4 atomach wegla lub wodny roztwór takiego alkoholu.
- 3. Sposób wedlug zastrz^ 2, znamienny tym, ze stosuje sie metanol.
- 4. Sposób wedlug zastrz. 1—3, znamienny tym, ze stosuje sie polisacharydowy wymieniacz kationowy.
- 5. Sposób wedlug zastrz. 1—4, znamienny tym* ze hydroksy(aqua)kobalamine wprowadza sie w zetkniecie z kwasem alginowym.
- 6. Sposób wedlug zastrz. 1—4, znamienny tym, ze hydroksy(aqua)kobalamine wprowadza sie w zetkniecie z karboksymetyloceluloza.
- 7. Sposób wedlug zastrz. 1—4, znamienny tym, ze hydroksy(aqua)kobalamine wprowadza sie w zetkniecie z fosforylowana celuloza.
- 8. Sposób wedlug zastrz. 1—7, znamienny tym, ze roztwór hydroksy(aqua)kobalaminy prze¬ puszcza sie przez polisacharydowa kolumne jonowymienna. F. Hoffmann-La Roche & Co Aktiengesellschaf t Zastepca: dr Andrzej Au rzecznik patentowy PL
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL45510B1 true PL45510B1 (pl) | 1962-02-15 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4458030A (en) | Adsorbent composition | |
| DE3545107C2 (pl) | ||
| Warner et al. | Yolk platelets in brine shrimp embryos: Site of biosynthesis and storage of the diguanosine nucleotides | |
| DE1814028A1 (de) | Verfahren zur Bestimmung des Hydroxyprolingehaltes von biologischen Fluessigkeiten und diagnostische Packung fuer diese Bestimmung | |
| Hawthorne Costa et al. | Removal of cupric ions from aqueous solutions by contact with corncobs | |
| DE3435491A1 (de) | 9-aminoalkyl-8-hydroxyadenine und verfahren zu ihrer herstellung | |
| Conway et al. | The effects of cortisone, deoxycorticosterone and other steroids on the active transport of sodium and potassium ions in yeast | |
| Goodman et al. | Polyphosphate and other phosphorus compounds during growth and differentiation of Physarum polycephalum | |
| PL45510B1 (pl) | ||
| Buyske et al. | The stability of Coenzyme A1 | |
| CN109939131B (zh) | 一种高纯度银杏总黄酮醇苷制备方法及其应用 | |
| Fager | Phosphoglyceric acid formation of carbon dioxide fixation in plant extracts | |
| DE2448371A1 (de) | Verfahren zur isolierung der transferrine aus biologischen stoffen | |
| DE2206636C3 (de) | Reaktive Matrix zur Trennung von in einem Medium vorliegenden Enzymen und Verwendung derselben zur affinitätschromatographischen Trennung von Enzymen | |
| US3644618A (en) | Stable composition of synthetic sodium estrone sulfate | |
| DE2424118B2 (de) | Verfahren zur herstellung von hochreinem kallikrein | |
| DE2632115A1 (de) | Neue serotoninderivate, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende arzneimittel | |
| DE2165406C3 (de) | Verfahren zur Isolierung vom anorganischen Phosphat abhängigen Enzymen | |
| DE2812609A1 (de) | Verfahren zur reinigung roher urokinase | |
| CH386050A (de) | Verfahren zur Herstellung von salzartigen Verbindungen aus Hydroxo(aquo)cobalamin und Polysaccharidionenaustauschern | |
| AT264004B (de) | Verfahren zur Reinigung von Moenomycin | |
| US2931799A (en) | Process for treating cobalamin adsorbates | |
| DE1966573C3 (de) | Verfahren zur Reinigung von Insulin | |
| US2186314A (en) | Concentration and isolation of water-soluble vitamins | |
| DE2502095C3 (de) | Verfahren zur Reinigung von Urokinase |