PL235016B1 - Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu - Google Patents

Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu Download PDF

Info

Publication number
PL235016B1
PL235016B1 PL416996A PL41699616A PL235016B1 PL 235016 B1 PL235016 B1 PL 235016B1 PL 416996 A PL416996 A PL 416996A PL 41699616 A PL41699616 A PL 41699616A PL 235016 B1 PL235016 B1 PL 235016B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
ppm
hydroxyisoflavone
hours
methoxyglucopyranosyl
transformation
Prior art date
Application number
PL416996A
Other languages
English (en)
Other versions
PL416996A1 (pl
Inventor
Monika Dymarska
Edyta Kostrzewa-Susłow
Elżbieta Pląskowska
Monika Urbaniak
Iak Monika Urban
Łukasz Stępień
Tomasz Janeczko
Czko Tomasz Jane
Olga Władyka
Dyka Olga Wła
Original Assignee
Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wrocław University Of Environmental And Life Sciences filed Critical Wrocław University Of Environmental And Life Sciences
Priority to PL416996A priority Critical patent/PL235016B1/pl
Publication of PL416996A1 publication Critical patent/PL416996A1/pl
Publication of PL235016B1 publication Critical patent/PL235016B1/pl

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 7-0-^-D-4”-metoksyglukopiranozylo-4’-hydroksyizoflawonu o wzorze 2, przedstawionym na rysunku.
Związek ten może znaleźć zastosowanie jako antyoksydant w przemyśle spożywczym oraz jako składnik środków farmaceutycznych i kosmetycznych, a także jako dodatek do pasz.
Daidzeina (7,4'-dihydroksyizoflawon) należy do grupy izoflawonów, które są związkami powszechnie wykorzystywanymi w substancjach leczniczych, przede wszystkim ze względu na ich powinowactwo do receptorów estrogenowych i wynikające z tego działanie prozdrowotne. Ilość izoflawonów w soi sięga 1-3 mg/g. Związki te występują w naturze przede wszystkim w postaci ^-glikozydów (A. Steensma, H.P.J.M. Noteborn, H.A. Kuiper, Environmental Toxicology and Pharmacology, 2004, 16, 131-139).
Daidzeina wykazuje szerokie spektrum aktywności biologicznych: działa przeciwnowotworowo, wpływa na homeostazę glukozy, ma działanie antyestrogenowe i neuroprotekcyjne. Związek ten jest wykorzystywany w produkcji drobiu: poprawia rozwój pęcherzyków w jajnikach, wpływa na grubość i wytrzymałość skorupki jaja, a także obniża śmiertelność drobiu (J. Guo-Zhen, W. Li, Journal of Northeast Agricultural University (English Edition), 2014, 21 (4), 31-36).
Aktywność biologiczna związków flawonoidowych jest silnie związana z ich potencjałem antyoksydacyjnym. Daidzeina wykazuje działanie przeciwutleniające zarówno in vitro, jak i in vivo. Udowodniono, że przyjmowanie daidzeiny zapewnia ochronę przed utlenianiem frakcji LDL u ludzi. Izoflawony sojowe chronią również DNA ludzkich limfocytów.
Badania przeprowadzone przez Lee i wsp. wykazały, że glikozydy izoflawonów wykazywały podobną aktywność przeciwutleniającą, jak odpowiednie aglikony. W doświadczeniu posłużono się metodą oznaczania zdolności redukowania jonów żelaza (FRAP) oraz metodą redukcji rodnika DPPH (C.H. Lee, L. Yang, J.Z. Xu, S.Y.V. Yeung, Y. Huang, Z.-Y. Chen, Food Chemistry, 2005, 90, 735-741).
Uważa się, że glikozydy izoflawonów przed absorpcją w układzie pokarmowym muszą zostać poddane hydrolizie przez mikroflorę jelitową do odpowiednich aglikonów. Dowiedziono jednak, że częściowa absorpcja połączeń cukrowych flawonoidów również jest możliwa.
Flawonoidy w roślinach występują wyłącznie w połączeniu z jednostkami cukrowymi. Glikozylacja skutkuje wzrostem rozpuszczalności i stabilności cząsteczki. Większość wykorzystywanych obecnie farmaceutyków zawierających związki flawonoidowe wykorzystuje glikozydy, np. rutyna (3-0-rutynozyd kwercetyny) sprzedawana w formie tabletek czy pueraryna (8-C-glukozyd daidzeiny) podawana przez iniekcję (J. Xiao, T.S. Muzashvili, M.l. Georgiev, Biotechnology Advances, 2014, 32, 1145-1156).
W ostatnich latach w leczeniu i prewencji chorób coraz większe znaczenie zyskują związki pochodzenia naturalnego i ich odpowiedniki uzyskane na drodze biotransformacji. Dlatego istotne jest poszukiwanie nowych sposobów wytwarzania związków aktywnych biologicznie, które mogą być wykorzystane w przemyśle farmaceutycznym, ale też kosmetycznym i spożywczym.
W dostępnej literaturze brak jest doniesień o otrzymywaniu 7-0-^-D-4”-metoksyglukopiranozylo-4'-hydroksyizoflawonu na drodze biotransformacji.
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2. Po upływie co najmniej 72 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 7,4'-dihydroksyizoflawon (daidzeina) o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu co najmniej 120 godzin. Kolejno produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 mg : 1 mL.
Korzystnie także jest, gdy proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
Dodatkowo, korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 168 godzin.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach szczepu Isaria fumosorosea KCH J2, następuje przyłączenie 4-metoksy-^-D-glukozy przy C-7. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem, przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą (octan etylu).
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 7-0-^-D-4”-metoksy-glukopiranozylo-4’-hydroksyizoflawonu jako jedynego produktu, w temperaturze pokojowej i przy pH naturalnym dla szczepu.
PL 235 016 B1
Wykorzystanie biotransformacji, zamiast syntezy chemicznej, umożliwia, w sposób przyjazny dla środowiska, uzyskanie związków o wyższej biodostępności i aktywności biologicznej, niż użyte substraty (E. Kostrzewa-Susłow, J. Dmochowska-Gładysz, J. Oszmiański, Journalof Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2007, 49 (1-4), 113-117, W.A. Loughlin, Bioresource Technology, 2000, 74, 49-62).
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
Przykład
Do kolby Erlenmajera o pojemności 2000 cm3, w której znajduje się 500 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 10 g aminobaku i 30 g glukozy, wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2 o sekwencji 1. Po 96 godzinach jego wzrostu dodaje się 50 mg 7,4'-dihydroksyizoflawonu (daidzeiny) o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 dimetylosulfotlenku. Transformację prowadzi się w 25 stopniach Celsjusza przy ciągłym wstrząsaniu przez 7 dni. Następnie mieszaninę poreakcyjną ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymany ekstrakt oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny chloroformu i metanolu w stosunku 9 : 1.
Na tej drodze otrzymuje się 13 mg 7-O-^-D-4”-metoksyglukopiranozylo-4’-hydroksyizoflawonu (wydajność 14,8%). Stopień konwersji substratu według HPLC >99%
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi.
Opis sygnałów pochodzących z widma 1H NMR (800 MHz, Aceton-d6): δ = 8,24 ppm (1H, s, H-2), δ = 8,15 ppm (1H, d, Js,6 = 8,8 Hz. H-5), δ = 7,52 ppm (2H, d, J2',3· (6·,5·) = 8,0 Hz, H-2', H-6'), δ = 7,22 ppm (1H, s, H-8), δ = 7,18 ppm (1H, d, J6,5 = 8,8 Hz, H-6), δ = 6,93 ppm (2H, d, J3',2 (5·,6·) = 8,0 Hz, H-3',5'), δ = 5,21 ppm (1H, d, J = 7,7 Hz, H-1”), δ = 3,92 ppm (1H, m, H-6”a), δ = 3,75 ppm (1H, m, H-6”b), δ = 3,71 ppm (1H, m, H-3”), δ = 3,67 ppm (1H, m, H-5”), δ = 3,62 ppm (3H, s, C-4”- OCH3), δ = 3,57 ppm (1H, t, J = 8,2 Hz, H-2”), δ = 3,28 ppm (1H, t, J = 9,3 Hz, H-4”).

Claims (4)

1. Sposób wytwarzania 7-O-^-D-4”-metoksyglukopiranozylo-4’-hydroksyizoflawonu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Isaria fumosorosea KCH J2 o sekwencji 1, następnie po upływie co najmniej 72 godzin do hodowli wprowadza się substrat, którym jest 7,4'-dihydroksyizoflawon o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, przy czym transformację prowadzi się w temperaturze od 20 do 30 stopni Celsjusza, przy ciągłym wstrząsaniu, przez co najmniej 120 godzin, po czym produkt ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,1 mg : 1 ml.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 25 stopni Celsjusza.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 168 godzin.
PL416996A 2016-04-26 2016-04-26 Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu PL235016B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL416996A PL235016B1 (pl) 2016-04-26 2016-04-26 Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL416996A PL235016B1 (pl) 2016-04-26 2016-04-26 Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL416996A1 PL416996A1 (pl) 2017-11-06
PL235016B1 true PL235016B1 (pl) 2020-05-18

Family

ID=60190417

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL416996A PL235016B1 (pl) 2016-04-26 2016-04-26 Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL235016B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL416996A1 (pl) 2017-11-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL234609B1 (pl) 4'-O-β-D-4"-metoksyglukopiranozylo-6-metyloflawon i sposób wytwarzania 4'-O-β-D-4"-metoksyglukopiranozylo-6-metyloflawonu
PL235016B1 (pl) Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4’’-metoksyglukopiranozylo-4’- hydroksyizoflawonu
PL234610B1 (pl) Sposób wytwarzania 7-O-β-D-4"-metoksyglukopiranozyloflawanonu
PL248132B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-metylo-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL248131B1 (pl) Sposób wytwarzania 2’-metylo-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL241533B1 (pl) 2-Fenylo-6-metylo-4-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- chroman i sposób wytwarzania 2-fenylo-6-metylo-4-O-β-D-(4’’-Ometyloglukopiranozylo)- chromanu
PL237327B1 (pl) 3’-hydroksy-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL238969B1 (pl) 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-ol i sposób wytwarzania 3’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-olu
PL238968B1 (pl) 2’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-ol i sposób wytwarzania 2’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawan-4-olu
PL237329B1 (pl) 3-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-3’,4’,5,7-tetrahydroksyflawon i sposób wytwarzania 3-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- 3’,4’,5,7-tetrahydroksyflawonu
PL237701B1 (pl) 2’-Metoksy-5’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 2’-metoksy-5’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu
PL237333B1 (pl) 8-hydroksy-7-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 8-hydroksy-7-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL235025B1 (pl) 4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-3-metoksyflawon i sposób wytwarzania 4’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-3- metoksyflawonu
PL247265B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’,5-dihydroksy-7-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- izoflawonu
PL237704B1 (pl) 6-Metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL237705B1 (pl) 3’-Hydroksy-6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-6-metoksy- 4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu
PL237330B1 (pl) Sposób wytwarzania 3-O-β-D-glukopiranozylo-3’,4’,5,7- tetrahydroksyflawonu
PL237328B1 (pl) 6-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawonu
PL237707B1 (pl) 6-Metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanon i sposób wytwarzania 6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu
PL238964B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’-hydroksy-5,7-dimetoksyflawonu
PL237706B1 (pl) 3’-Hydroksy-6-metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)- flawanon i sposób wytwarzania 3’-hydroksy-6- metoksy-4’-O-β-D-(4”-O-metyloglukopiranozylo)-flawanonu
PL247590B1 (pl) Sposób wytwarzania 4’,5,7-trihydroksy-3-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL239720B1 (pl) Sposób wytwarzania 6-chloro-3’-hydroksyflawonu
PL237703B1 (pl) 6-Metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)-flawon i sposób wytwarzania 6-metoksy-3’-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawonu
PL247870B1 (pl) Sposób wytwarzania 5-O-β-D-(4’’-O-metyloglukopiranozylo)- flawanonu