PL20869B1 - Sposób otrzymywania zenskich hormonów plciowych w postaci krystalicznej. - Google Patents

Description

^ Dotychczas j edynie wielostopnio wemi, nadzwyczaj uciazllwemi sposobami oczy¬ szczania udawalo sie wyciagi surowe, otrzy¬ mywane z ludzkiego lub zwierzecego moczu i zawierajace hormony, doprowadzac do stopnia czystosci, zapewniajacego krysta¬ liczne wydzielenie materjalów czynnych.Obecnie okazalo sie, ze z latwoscia udaje sie otrzymywac zenskie hormony plciowe w stanie krystalicznym z zawierajacych hor¬ mony wyciagów z moczu ciezarnych kobiet lub samic w ten sposób, ze wyciagi te zada¬ je sie w obecnosci wody wodorotlenkami lub tlenkami metali drugiej grupy ukladu okre¬ sowego pierwiastków az do wytworzenia la¬ two rozpadajacego sie proszku, nastepnie wytworzony osad odsacza sie, dokladnie przemywa, zebrane wyciagi wodne zakwa¬ sza sie, wyfcugowuije rozpuszczalnikiem, nie- mieszajacym sie z woda, i oczyszcza w zna¬ ny sposób.Traktowanie gruczolów plciowych wzglednie lozysk, albo- wyciagów z tych or¬ ganów roztworami wodorotlenków wapniow- ców w celu otrzymywania zenskich horaio* nów plciowych jest juz znane. Jednakze nieudalo si£ dotychczas 6lrzyiiiac w postaci krystalicznej hormonów^, z tych organów.Nie mozna bylo przewidziec, ze proces ni¬ niejszy w tak bardzo prosty sposób dopro¬ wadzi do celu, podcizas gdy inne metody, stosowane do oczyszczania gruczolów plcio¬ wych zawodzily w zastosowaniu ich do wy¬ ciagów z moczu. Zwlaszcza zas wedlug Doisy, Veler'a & Thayer a (Journal of Bió- logical Chemistry, tom 86, 1930, str, 499) zanieczyszczenia, wystepujace w wyciagach z moczu i rózniace sie od zanieczyszczen, znajdujacych sie w wyciagach, otrzymywa¬ nych z gruczolów plciowych, nie daja sie u- sunac w taki sam sposób. Podczas traktowa¬ nia wyciagów z gruczolów plciowych wzglednie z lozysk wodnemi roztworami wodorotlenków wapniowców powstaja trud¬ ne do obróbki mazie, co utrudnia w wyso¬ kim stopniu rozdzielanie skladników takiej mazi, natomiast takaz obróbka wyciagów z moczu prowadzi do otrzymywania drobno sproszkowanych osadów, z których przyle¬ gajace do nich hormony latwo daja sie wy¬ myc.Przyklad I. Wyciag, otrzymany .z&po- moca butanolu z 500 litrów moczu kobiet ciezarnych, po oddestylowaniu rozpuszczal¬ nika, poddaje sie kilkugodzinnej destylacji z para wodna, w celu usuniecia substancyj lotnych. Otrzymany wyciag surowy zagnia¬ ta sie w temperaturze lazni wodnej z mle¬ kiem wapiennem az do trwalej reakcji fe- noloftaleinówej i dekantuje zólto zabarwio¬ ny przezroczysty wodny wyciag. Przy po- nownem powtórzeniu tej obróbki zywicowa¬ la masa rozpada sie na drobny brunatny proszek, dajacy sie latwo odsaczyc na ssaw- cei Proszek ten miele sie w bebnie w cia¬ gu kilkii godzin z woda, zawierajaca wodo¬ rotlenek wapnia, odsacza zapomoca pompy ssacej i, mieszajac, wyciaga kilkakrotnie wo¬ da o temperaturze 90 — 100°C. Polaczone 1vyciagi wodne zakwasza sie kwasem sol¬ nym i wyciaga dwukrotnie czteroma oraz szesciokrotnie dwoma litrami eteru (kazdo¬ razowo), wolnego od nadtlenków (zamiast eteru mozna równiez stosowac np. benzen, octan etyki, butanol lub chloroform). Wy¬ ciagi eterowe przemywa sie dwukrotnie 3- litrowemi porcjami 1 % -wego wodnego roz¬ tworu dwuweglanu sodowego oraz dwu¬ krotnie taka sama iloscia 0,33%-wej sody, a nastepnie steza do malej objetosci. Pod¬ czas odparowywania wydziela sie krysta¬ liczny osad zenskich hormonów plciowych.Substancje wykrystalizowana, przesiaknie¬ ta jeszcze masa oleista, zadaje sie niewiel¬ ka iloscia octanu etylowego i pozostawia przez pewien czas w temperaturze —10°C.Nastepnie papke krystaliczna odsacza sie zapomoca pompy ssacej, rozpuszcza we wrzacym alkoholu, otrzymany roztwór od¬ barwia weglem kostnym i przesacza, po- czem przesacz zageszcza na lazni wodnej az do rozpoczecia krystalizacji, wreszcie ozie¬ bia do —10°C i powstaly osad odsacza. 0- trzymuje sie hormony w postaci czysto bia¬ lego osadu o temperaturze topnienia 272 — 276°C (bez poprawki). Chodzi tu o trójhy- droestryne o wzorze C18i/2403. Z alkoholo¬ wych lugów pokfystóliczhy^h faiozna otrzy¬ mac dalsze ilosci tego hormonu. Jest to ke- tohydroksyestryna o wzorze C18/?2202, w drodze krystalizacji mozna ja oczyscic je¬ szcze dokladniej. Jesli odparowac lug po- krystaliczny z octanu etylowego, to z pozo¬ stalosci mozna otrzymac dalsze ilosci hor¬ monów w postaci bezbarwnych krysztalów o temperaturze topnienia okolo 250°C.Przyklad IL Surowy wyciag, otrzyma¬ ny wedlug przykladu I, z 10 litrów moczu kobiet ciezarnych po destylacji z para wod¬ na rozciera sie z 5 g tlenku magnezowego (magnesia usta) i 75 cm3 wody na wrzacej lazni wodnej oraz przesacza sie zapomoca pompy ssacej. Skladnik nierozpuszczoriy proszkuje sie i kilkakrotnie wyciaga po¬ nownie na wrzacej lazni wodnej woda, za¬ wierajaca wodorotlenek magnezu, przyczem pozostalosc kazdorazowo odsacza sie zapo¬ moca pompy ssacej. Otrzymane wyciagiwodne zakwasza sie Wasem solnym, wycia¬ ga eterem i przerabia, jak w przykladzie I, otrzymujac opisane tam hormony.Przyklad IJL Surowy wyciag z 20 li¬ trów moczu kobiet ciezarnych otrzymany wedlug przykladu I i przedestylowany z para wodna, rozciera sie z 20 g tlenku cyn¬ kowego i wioda w temperaturze 90—100°C, poczem wodny wyciag odsacza. Ekstrakcje powtarza sie kilkakrotnie i wodne wyciagi pnzeraJbia wedlug przykladu I i II na wy¬ krystalizowane hormony.Przyklad IV. Surowy olej, otrzymany wedlug przykladu I przez ekstrakcje eterem zakwaszonego moczu ciezarnych kobiet, traktuje sie mlekiem wapiennem i otrzyma¬ ne wyciagi alkaliczne przerabia dalej we¬ dlug tegoz przykladu. Otrzymuje sie wy¬ krystalizowane hormony o wyzej podanych wlasciwosciach.Przyklad V. Wyciag butanolowy, o- trzymany z 500 litrów moczu kobiet ciezar¬ nych, odparowuje sie w prózni, a pozosta¬ losc destyluje z para wodna, dopóki prze¬ chodza substancje lotne. Nastepnie dodaje sie 750 cm3 3-normalnego mleka wapienne¬ go i w dalszym ciagu destyluje z para wod¬ na az do calkowitego odpedzenia amon jaku i innych, zwlaszcza zasadowych suhstancyj.Pozostalosc odsacza sie i miele w obecnosci 1,5 litra wody i 50 cm3 mleka wapiennego1.Po odsaczeniu zapomoca pompy ssacej powstaly mialki proszek rozrabia sie kilkakrotnie z 1,5 1 goracej wody i odsysa.Polaczone wyciagi nastepnie zakwasza sie kwasem solnym do slabej reakcji wo¬ bec wskaznika konjgo i wyciaga kil¬ kakrotnie eterem, wolnym od nadtlen¬ ków. Wyciagi eterowe przemywa sie najpierw rozcienczonym roztworem dwu¬ weglanu sodowego, a nastepnie takim sa¬ mym roztworem, zawierajacym ponadto nie¬ co weglanu sodowego. Po oddestylowaniu roztworu eterowego, przemytego woda, po¬ zostaja hormony w stanie wykrystalizowa¬ nym. W celu ich wyosobnienia mozna je top. wyciagac na cieplo 1 % -ym lugiem bodo¬ wym, przyczem pozostaja nieznaczne ilosci nierozpuiszGZonych zanieczyszczen, które sia odsacza. Przezroczysty przesacz wyciaga sie kilkakrotnie eterem i polaczone wyciagi przemywa woda. Po odparowaniu eteru po- zostaje zóltawa masa zywicowala, krystali¬ zujaca szybko po dodaniu niewielkiej ilo¬ sci octanu etylowego i ewentualnie nieco e- teru naftowego. Po zakonczeniu krystaliza¬ cji w lodówce, substancje odsacza sie zapo¬ moca .pompy ssacej, przemywa niewielka iloscia octanu etylowego i suszy. Przedsta¬ wia ona czysty hormon o skladzie C18H2202 (ketohydroksyestryna) o temperaturze top¬ nienia 256 — 258°C.Alkaliczny roztwór, wyciagniety eterem, nasyca sie dwutlenkiem wegla i kilkakrotnie wyciaga eterem. Polaczone wyciagi eterowe przemywa sie rozcienczonym wodnym roz¬ tworem dwuweglanu sodowego oraz woda.Po odparowaniu eteru pozostaje hormon o skladzie C18H2403 (trójhydroksyestryna) w postaci krystalicznej. Daje sie on otrzymy¬ wac w stanie zupelnie czystym przez dzia¬ lanie octanem etylowym i przekrystalizo- wanie z alkoholu w obecnosci niewielkiej ilo¬ sci wegla zwierzecego. Wykazuje on tempe¬ rature topnienia 276 — 277°C.Przyklad VI. Wyciag z moczu ciezar¬ nych klaczy, otrzymany wedlug przykladu I, przerabia sie wedlug przykladu V. Otrzy¬ muje sie przytem wykrystalizowane hormo¬ ny o skladzie C18H2202 (ketohydroksye¬ stryna) , Przyklad VII. Zastepujac w przykla¬ dzie V mleko wapienne wodnym roztworem wodorotlenku barowego, otrzymuje sie rów¬ niez krystaliczne hormony o skladzie CisH2202 i C18//2403. PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe. Sposób otrzymywania zenskich hormo¬ nów plciowych w postaci krystalicznej iz za¬ wierajacych hormony wyciagów z moczu — 3ciezarnych kobiet lub samic, znamienny tern, ze wyciagi te poddaje sie w obecnosci wody dzialaniu wodorotlenków lub tlenków metali drugiej grupy ukladu okresowego az do wy¬ tworzenia latwo rozpadajacego sie proszku, poczem osad odsacza sie i dokladnie prze¬ mywa, a zebrane wodne wyciagi zakwasza, nastepnie wyciaga rozpuszczalnikiem, nie- mieszajacym sie z woda, i wreszcie tak o- trzymane wyciagi oczyszcza w znany spo¬ sób, Gesellschaft f ii r Chemische Industrie in Basel. Zastepca: M. Skr.zypkow.ski, rzecznik patentowy. Druk L, Boguslawskiego i Ski, Warszawa. PL