PL205708B1 - Związki agonistyczne receptora muskarynowego, kompozycja zawierająca te związki i zastosowanie tych związków - Google Patents

Związki agonistyczne receptora muskarynowego, kompozycja zawierająca te związki i zastosowanie tych związków

Info

Publication number
PL205708B1
PL205708B1 PL368272A PL36827202A PL205708B1 PL 205708 B1 PL205708 B1 PL 205708B1 PL 368272 A PL368272 A PL 368272A PL 36827202 A PL36827202 A PL 36827202A PL 205708 B1 PL205708 B1 PL 205708B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
carboxylic acid
fluorobenzyl
mmol
hydroxyindan
Prior art date
Application number
PL368272A
Other languages
English (en)
Other versions
PL368272A1 (pl
Inventor
Jennifer Rebecca Allen
Stephen Andrew Hitchcock
Bin Liu
William Wilson Junior Turner
James Andrew Jamison
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of PL368272A1 publication Critical patent/PL368272A1/pl
Publication of PL205708B1 publication Critical patent/PL205708B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/325—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals directly attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/14—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C07D213/82—Amides; Imides in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/84—Nitriles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/52—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/14—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D317/28—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/24—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są związki aktywne na receptorach muskarynowych, kompozycje zawierające te związki i zastosowanie tych związków.
Związki będące agonistami muskarynowymi, a dokładniej selektywnymi agonistami receptora muskarynowego M-1, jako takie, są przydatne do leczenia różnych zaburzeń centralnego układu nerwowego i innych układów ciała. Te zaburzenia obejmują zaburzenia pojmowania, ADHD, otyłość, chorobę Alzheimera, psychozy, w tym schizofrenię, i osłabianie ciśnienia w oczach, takie jak występujące przy jaskrze.
Pewne indanopodobne związki opisano w publikacji PCT nr WO 97/25983, opublikowanej 24 czerwca 1997, i WO 99/04778, opublikowanej 4 lutego 1999, jako przydatne do leczenia stanów związanych z wadliwym działaniem muskarynowego układu cholinergicznego.
Przedmiotem wynalazku jest związek agonistyczny receptora muskarynowego o wzorze 1:
wzór 1 w którym:
R2 oznacza fenyl ewentualnie podstawiony jednym do trzech podstawników niezależnie wybranych z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl i cyjano;
R3 wybiera się z grupy obejmującej fenyl ewentualnie podstawiony jednym do trzech podstawników niezależnie wybranych z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl, cyjano i nitro; naftyl ewentualnie podstawiony jednym do trzech podstawników niezależnie wybranych z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl, cyjano i nitro; furanyl; lub 1,3-benzodioksolil ewentualnie podstawiony jednym podstawnikiem wybranym z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl i C1-C4-alkil;
lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne.
Korzystnie R2 oznacza fenyl.
Korzystnie R3 oznacza fenyl podstawiony jednym atomem halogenu, zwłaszcza atomem fluoru, najkorzystniej w pozycji para.
Korzystnie R2 oznacza fenyl, a R3 oznacza fenyl podstawiony jednym atomem halogenu, zwłaszcza atomem fluoru, najkorzystniej w pozycji para.
Szczególnie korzystnym związkiem o wzorze 1 jest (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól.
Przedmiotem wynalazku jest również kompozycja farmaceutyczna, zawierająca związek określony powyżej i jeden lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnych nośników, zaróbek lub jego rozcieńczalników.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie związku określonego powyżej jako leku.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie związku określonego powyżej do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń poznawczych, choroby Alzheimera, schizofrenii, łagodnego upośledzenia poznawczego, upośledzenia poznawczego związanego ze schizofrenią.
Związki o wzorze 1 są agonistami receptora muskarynowego M-1 i dlatego są przydatne w leczeniu wielu zaburzeń związanych z muskarynowymi receptorami, obejmującymi zaburzenia pojmowania (w tym związane z wiekiem zaburzenie pojmowania, łagodne upośledzenie pojmowania, upośledzenie pojmowania związane ze schizofrenią i upośledzenie pojmowania powodowane chemioterapią), ADHD, zaburzenia nastroju (w tym depresję, manię, zaburzenia maniakalno-depresyjne), psychozy (w szczególności schizofrenię), demencję (w tym chorobę Alzheimera, demencję powodowaną AIDS, demencję naczyniową i demencję bez charakterystycznej histologii), chorobę Parkinsona i pląPL 205 708 B1 sawicę Huntingtona. Związki według wynalazku są również przydatne do leczenia przewlekłego zapalenia okrężnicy, w tym choroby Crohna. Dodatkowo, niniejsze związki są przydatne do leczenia bólu (w tym ostrego bólu i przewlekłego bólu), suchości w ustach, choroba ciał Lewy'ego (w tym choroba rozsianych ciał Lewy'ego), afazji (w tym pierwotnej afazji i zespołu pierwotnej afazji) i zespołów niedociśnieniowych.
Terminy stosowane w opisie wynalazku mają następujące znaczenia:
Termin halogen oznacza atom chloru, fluoru, bromu lub jodu.
Termin C1-C4-alkil odnosi się do prostego lub rozgałęzionego łańcucha alkilowego mającego od jednego do czterech atomów węgla i obejmuje metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, s-butyl, izobutyl i t-butyl.
Termin C1-C4-alkoksyl odnosi się do prostego lub rozgałęzionego łańcucha alkilowego mającego od jednego do czterech atomów węgla związanych z atomem tlenu i obejmuje metoksyl, etoksyl, n-propoksyl, izo-propoksyl, n-butoksyl, izo-butoksyl, s-butoksyl i t-butoksyl.
Związki według wynalazku tworzą farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne kwasów z wieloma kwasami organicznymi i nieorganicznymi i obejmują fizjologicznie dopuszczalne sole, które są często stosowane w chemii farmaceutycznej. Takie sole są również częścią wynalazku. Farmaceutycznie dopuszczalna sól addycyjna jest tworzona z farmaceutycznie dopuszczalnego kwasu, co jest dobrze znane w tej dziedzinie. Takie sole obejmują farmaceutycznie dopuszczalne sole wymienione w Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2-19 (1977), które są znane specjaliś cie. Typowe kwasy nieorganiczne stosowane do wytworzenia takiej soli obejmują kwas chlorowodorowy, bromowodorowy, jodowodorowy, azotowy, siarkowy, fosforowy, podfosforowy, metafosforowy, pirofosforowy i tym podobne. Można również stosować sole pochodzące od organicznych kwasów, takich jak kwasy alifatyczne mono- i dikarboksylowe, podstawione fenylem kwasy alkanowe, hydroksyalkanowe i hydroksyalkanodiowe, kwasy aromatyczne, alifatyczne i aromatyczne kwasy sulfonowe. Takie farmaceutycznie dopuszczalne sole obejmują więc chlorek, bromek, jodek, azotan, octan, fenylooctan, trifluorooctan, akrylan, askorbinian, benzoesan, chlorobenzoesan, dinitrobenzoesan, hydroksybenzoesan, metoksybenzoesan, metylobenzoesan, o-acetoksybenzoesan, izomaślan, fenylomaślan, α-hydroksymaślan, butyno-1,4-dikarboksylan, heksyno-1,4-dikarboksylan, kaprynian, kaprylan, cynamonian, cytrynian, mrówczan, fumaran, glikolan, heptanian, hipuran, mleczan, jabłczan, maleinian, hydroksymaleinian, malonian, migdalan, mesylan, nikotynian, izonikotynian, szczawian, ftalan, teraftalan, propiolan, propionian, fenylopropionian, salicylan, sebacynian, sukcynian, suberynian, benzenosulfonian, p-bromobenzenosulfonian, chlorobenzenosulfonian, etylosulfonian, 2-hydroksyetylosulfonian, metylosulfonian, naftaleno-1-sulfonian, naftaleno-2-sulfonian, naftaleno-1,5-sulfonian, p-toluenosulfonian, ksylenosulfonian, winian i tym podobne.
Wynalazek obejmuje stereoizomery i tautomery związków o wzorze 1. W wynalazku, oznaczenia Cahna-Preloga-Ingolda (R)- i (S)- i cis i trans względnej stereochemii stosuje się do określania konkretnych izomerów i względnej stereochemii. Korzystne są związki, które mają stereochemię trans w pozycjach 1 i 2.
Związki o wzorze 1 wytwarza się w procedurach opisanych na schemacie A. Na schemacie A wszystkie podstawniki, jeśli nie wskazano inaczej, są takie, jak zdefiniowano poprzednio i wszystkie reagenty są dobrze znane i doceniane w dziedzinie.
PL 205 708 B1
Schemat A
Na schemacie A, etap a, związek o wzorze (1) rozdziela się otrzymując zasadniczo czysty związek o wzorze (2). Związek o wzorze (1) łatwo wytwarza się sposobami dobrze znanymi i docenianymi w dziedzinie, takimi jak znajdowane w publikacjach PCT nr WO 97/25983, opublikowanej 24 lipca 1997; i WO 99/04778, opublikowanej 4 lutego 1999. W opisie termin zasadniczo czysty odnosi się do enancjomerycznej czystości. Żądaną stereochemię w końcowych związkach o wzorze 1 można dogodnie wprowadzać na schemacie A, etap a, przez rozdzielanie związków o wzorze (1). Dalsze przetwarzanie rozdzielonych związków o wzorze (1), przez etapy b, c, d i ewentualny etap e, opisane niżej, dają zasadniczo czyste związki o wzorze 1. Można wytwarzać zasadniczo czyste związki o wzorze 1, które mają czystość enancjomeryczną większą niż 80%, korzystnie większą niż 90%, korzystniej większą niż 95%, najkorzystniej większą niż 97%. Związek o wzorze (1) można rozdzielać metodą chiralnej chromatografii lub frakcyjnej krystalizacji diastereomerycznych soli addycyjnych kwasów. Oczekuje się, że wiele takich soli nadaje się do tego celu. W praktyce, szczególnie przydatne okazały się izomery kwasu migdałowego.
Na przykład związek o wzorze (1) łączy się z wybranym kwasem. Ogólnie, można stosować od około 0,4 równoważników molowych do większego nadmiaru wybranego kwasu, przy czym korzystne jest około 0,4 do 1,5 równoważników molowych, a bardziej korzystne jest około 0,5 do 1,1 równoważników molowych. Rozdzielanie typowo prowadzi się przez krystalizację soli addycyjnej kwasu z roztworu. W szczególności, przydatne są rozpuszczalniki takie jak niższe alkohole, w tym metanol. Korzystne może być zastosowanie małych ilości wody z wybranym rozpuszczalnikiem (rozpuszczalnikami) dla przeprowadzenia rozdzielania w rozsądnej objętości. Również korzystne może być zastosowanie przeciwrozpuszczalnika. W wynalazku, termin przeciwrozpuszczalnik odnosi się do rozpuszczalnika, w którym sól jest znacznie słabiej rozpuszczalna w porównaniu z innym wybranym rozpuszczalnikiem (rozpuszczalnikami). Korzystnie, gdy stosuje się przeciwrozpuszczalnik, jest on mieszalny z innym wybranym rozpuszczalnikiem (rozpuszczalnikami). Odpowiednie przeciwrozpuszczalniki obejmują etery, takie jak eter dietylowy, eter metylowo-t-butylowy i tym podobne i niższe alkilooctany, takie jak octan metylu, octan etylu, octan izopropylu, octan propylu, octan izo-butylu, octan s-butylu, octan butylu, octan amylu, octan izo-amylu i tym podobne oraz alkany, takie jak pentan, heksan, heptan, cykloheksan i tym podobne. Gdy stosuje się racemiczną mieszaninę, należy ostrożnie stosować wszelkie przeciwrozpuszczalniki, aby uniknąć krystalizacji niepożądanej soli diastereomerycznej.
PL 205 708 B1
Typowo krystalizację prowadzi się w początkowych temperaturach około 40°C do temperatury refluksu wybranego rozpuszczalnika (rozpuszczalników). Mieszaninę ochładza się następnie otrzymując sól. Korzystne może być zaszczepianie. Korzystnie roztwór krystalizacyjny ochładza się powoli. Najdogodniej roztwór krystalizacyjny ochładza się do temperatur od temperatury otoczenia do około -20°C. Sól można zebrać stosując techniki dobrze znane w dziedzinie, w tym filtrację, dekantowanie, odwirowanie, odparowanie, suszenie i tym podobne. Związek o wzorze (2) można stosować bezpośrednio jako sól addycyjną wybranego kwasu. Alternatywnie, przed użyciem związek o wzorze (2) można wydzielić jako inną sól addycyjną kwasu po wymianie kwasu lub można wydzielać jako zasadę przez ekstrakcję w warunkach zasadowych, co jest dobrze znane i doceniane w dziedzinie.
Jest oczywiste dla specjalisty w dziedzinie, że przedstawiony związek o wzorze (2) ma konfigurację trans w pozycjach 1 i 2 jądra indanowego. Związki cis są łatwo wytwarzane z takich związków trans przez chronienie aminy, inwersję centrum hydroksylowego, następnie odbezpieczenie stosownie do potrzeb. Istnieje wiele sposobów, które pozwalają na inwersje centrów hydroksylowych, takie jak reakcja Mitsunobu z odpowiednimi kwasami karboksylowymi, w tym kwasem octowym i kwasem benzoesowym, a następnie hydrolizę.
Schemat reakcji A, etap b, przedstawia tworzenie związku o wzorze (3). Wiadomo, że związek o wzorze (3) może być związkiem, w którym R oznacza grupę pożądaną w końcowym produkcie o wzorze 1, jak zdefiniowano powyż ej. R mo ż na również łączyć z karbonylem z wytworzeniem grupy zabezpieczającej, takiej jak t-BOC, którą można później usunąć przed włączeniem grupy R pożądanej w końcowym produkcie o wzorze 1. Dobór i zastosowanie odpowiednich grup zabezpieczających jest dobrze znany i doceniany w dziedzinie (Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora Greene (Wiley-Interscience)).
Na przykład, gdy R oznacza grupę pożądaną w końcowym produkcie, reakcję sprzęgania przedstawioną w etapie b prowadzi się stosując odpowiedni kwas lub pochodzący od niego halogenek kwasu. Odpowiednie kwasy obejmują różne podstawione kwasy biarylokarboksylowe, zwłaszcza kwas bifenylokarboksylowy, i halogenki kwasu.
Na przykład, związek o wzorze (2) kontaktuje się z odpowiednim kwasem otrzymując związek o wzorze (3). Takie reakcje sprzęgania są pospolite w syntezie peptydów i można wykorzystywać stosowane tam sposoby syntezy. Na przykład, dobrze znane reagenty sprzęgania, takie jak związane z żywicą reagenty i karbodiimidy z użyciem lub bez użycia dobrze znanych dodatków, takich jak N-hydroksysukcynimid, 1-hydroksybenzotriazol, itp. można stosować dla ułatwienia tego acylowania. Reakcję zwyczajowo prowadzi się w obojętnym aprotonowym polarnym rozcieńczalniku, takim jak dimetyloformamid (DMF), chlorek metylenu (dichlorometan), chloroform, acetonitryl, tetrahydrofuran (THF) i tym podobne.
Typowo reakcję prowadzi się w temperaturach od około 0°C do około 60°C i typowo wymaga ona od około 1 do około 24 godzin. Po zakończeniu reakcji, produkt o wzorze (3) odzyskuje się konwencjonalnymi sposobami, w tym ekstrakcji, strącania, chromatografii, filtracji, ucierania, krystalizacji i tym podobnymi.
Alternatywnie, na przykład, związek o wzorze (2) styka się z halogenkiem odpowiedniego kwasu z wytworzeniem związku o wzorze (3). Takie halogenki kwasu są dostępne w handlu lub łatwo wytwarzane z odpowiednich kwasów sposobami dobrze znanymi w dziedzinie, takimi jak działanie trichlorku fosforu, tribromku fosforu, tlenochlorku fosforu, pentachlorku fosforu, chlorku tionylu, bromku tionylu, lub chlorku oksalilu, w obecności lub bez małej ilości dimetyloformamidu, w obojętnym rozpuszczalniku, takim jak toluen, chlorek metylenu, lub chloroform; w temperaturach od około 0-80°C. Reakcję typowo prowadzi się przez czas w zakresie od 1 godziny do 24 godzin. Halogenek kwasu można wydzielić i oczyszczać lub można często stosować bezpośrednio, to jest z oddzielaniem i/lub oczyszczaniem lub bez nich. Reakcje sprzęgania ogólnie wykorzystują odpowiednią zasadę dla związania kwasu wytwarzanego podczas reakcji. Odpowiednie zasady obejmują, przykładowo, wodorotlenek sodu, wodorotlenek potasu, pirydynę, trietyloaminę, N,N-diizopropyloetyloaminę, N-metylomorfolinę i tym podobne. Reakcję zwyczajowo prowadzi się w rozpuszczalniku, takim jak chlorek metylenu, chloroform, tetrahydrofuran i tym podobne, lub w warunkach Schotten-Baumanna w mieszaninie rozpuszczalników, takiej jak chlorek metylenu, octan etylu, toluen i woda. Typowo reakcję sprzęgania prowadzi się w temperaturach od około -20°C do około 80°C i typowo wymaga ona od około 1 do około 24 godzin. Po zakończeniu reakcji, produkt o wzorze (3) odzyskuje się konwencjonalnymi sposobami, w tym ekstrakcji, strącania, chromatografii, filtracji, ucierania, krystalizacji i tym podobnych.
PL 205 708 B1
Schemat reakcji A, etap c, przedstawia redukcję grupy nitrowej z wytworzeniem związku o wzorze (4). Takie reakcje redukcji można prowadzić na wiele sposobów dobrze znanymi w dziedzinie.
Na przykład, związek o wzorze (3) można uwodorniać nad katalizatorem, takim jak pallad na węglu, otrzymując związek o wzorze (4). Takie reakcje uwodornienia ogólnie prowadzi się w rozpuszczalniku i jest wiele odpowiednich rozpuszczalników, np. metanol, etanol, izopropanol, tetrahydrofuran lub octan etylu lub ich mieszaniny. Uwodornienie można prowadzić przy początkowym ciśnieniu wodoru 20-180 psi (137-1241 kPa). Reakcję typowo prowadzi się w temperaturze od około 0°C do około 60°C. Reakcja typowo wymaga 1 godziny do 3 dni. Produkt można wydzielać i oczyszczać technikami dobrze znanymi w dziedzinie, takimi jak filtracja, ekstrakcja, odparowanie, ucieranie, strącanie, chromatografia i rekrystalizacja.
Na schemacie A, etap d, związek o wzorze (4) styka się z odpowiednim środkiem tworzącym amidynę otrzymując związek o wzorze 1. Odpowiednie środki tworzące amidyny obejmują trifluorometanosulfonian 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowy i jodek 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowy. Fachowiec w dziedzinie zauważy, że odpowiednie środki tworzące amidyny można wytwarzać wcześniej lub in situ, jeśli to pożądane.
Na przykład, związek o wzorze (4) styka się z około 1-3 równoważnikami odpowiedniego środka tworzącego amidynę. Reakcję ogólnie prowadzi się w suchym rozpuszczalniku, takim jak chlorek metylenu, toluen lub tetrahydrofuran, w temperaturach od około -20°C do 50°C. Reakcję prowadzi się stosując odpowiednią zasadę, taką jak pirydyna, kolidyna lub trietyloamina. Reakcja typowo wymaga 1 do 18 godzin. Produkt można wydzielać i oczyszczać technikami dobrze znanymi w dziedzinie, takimi jak zalewanie, filtracja, ekstrakcja, odparowanie, ucieranie, strącanie, chromatografia i rekrystalizacja.
Jak można łatwo zauważyć, gdy R oznacza grupę zabezpieczającą wprowadzaną w etapie b, to grupę tę można usuwać po etapie d i powstałą aminę sprzęgać z odpowiednim kwasem lub halogenkiem kwasu, co również opisano powyżej w etapie b, z wytworzeniem związku o wzorze 1.
Pewne związki o wzorze 1 są związkami pośrednimi dla innych końcowych związków o wzorze 1.
W pozycji podstawnika R2 może być atom halogenu lub inna grupa opuszczają ca, którą moż na zastąpić grupą R2 pożądaną w końcowym produkcie.
Na schemacie A, w ewentualnym etapie e, nie pokazanym, powstaje sól addycyjna kwasu związku o wzorze 1 z użyciem farmaceutycznie dopuszczalnego kwasu. Tworzenie soli addycyjnych kwasów jest dobrze znane i doceniane w dziedzinie.
Wynalazek zilustrowano poniżej następującymi przykładami i przykładami wytwarzania. Te przykłady i przykłady wytwarzania tylko ilustrują wynalazek i nie mają na celu ograniczania go w ż aden sposób.
Terminy użyte w przykładach i przykładach wytwarzania mają ich normalne znaczenia, jeśli nie wskazano inaczej. Np., °C odnosi się do stopni Celsjusza; M odnosi się do moli lub molowości; mmol odnosi się do milimola lub milimoli; g odnosi się do grama lub gramów; ml odnosi się do mililitra lub mililitrów; mp odnosi się do temperatury topnienia; solanka odnosi się do nasyconego wodnego roztworu chlorku sodu; itp. W widmach 1H NMR, wszystkie przesunięcia chemiczne podano w δ , jeś li nie wskazano inaczej.
Procedury sprzęgania
Sposób A
Kwas 2'-chlorobifenylo-4-karboksylowy
Połączyć 4-bromobenzoesan metylu (1,0 g, 4,65 mmol), kwas 2-chlorofenyloborowy (799 mg, 5,1 mmol), Pd(OAc)2 (51 mg, 0,46 mmol) i węglan sodu (1,5 g, 13,9 mmol) w DMF (20 ml) i wodę (2,0 ml) z mieszaniem. Przedmuchać mieszaninę reakcyjną argonem, dodać trifenylofosfinę (61 mg, 0,23 mmol) i przedmuchać ponownie argonem. Umieścić szczelnie zamkniętą mieszaninę reakcyjną na łaźni olejowej trzymanej w temperaturze 80°C i pozostawić z mieszaniem przez 1 godzinę. Ochłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej, rozcieńczyć octanem etylu i przesączyć przez krótką warstwę celitu z dodatkowym octanem etylu. Przemyć składniki organiczne wodą, osuszyć nad MgSO4, przesączyć i odparować. Oczyszczanie metodą kolumnowej chromatografii rzutowej daje ester metylowy kwasu 2'-chlorobifenylo-4-karboksylowego jako żółtą substancję stałą. Rozpuścić oczyszczony ester w THF (0,25 M) i dodać równą obję tość 1 M NaOH. Mieszać energicznie w temperaturze pokojowej przez 15 godzin. Po zakończeniu, zakwasić mieszaninę stężonym HCl i ekstrahować octanem etylu. Odparowanie rozpuszczalnika daje 762 mg (67%) tytułowego związku. MS (m/e): 231,1 (M-).
Poniższe związki wytwarza się zasadniczo jak opisano wyżej.
Kwas 6-(2-chlorofenylo)pirydyno-3-karboksylowy MS 233,9 (MH+)
PL 205 708 B1
MS 265,2 (M-) MS 264,9 (M-) MS 233,1 (M-) MS 227,0 (M-) MS 233,1 (M-) MS 203,1 (M-) MS 214,9 (M-) MS 215,0 (M-) MS 222,0 (M-)
Kwas 2'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 2',6'-dichlorobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 2',6'-difluorobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 2'-metoksybifenylo-4-karboksylowy
Kwas 3,4'-difluorobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 4-(tien-2-ylo)fenylo-1-karboksylowy
Kwas 4'-fluorobifenylo-4-karboksylowy (hydroliza w dioksanie w temperaturze 60°C)
Kwas 3'-fluorobifenylo-4-karboksylowy (hydroliza w dioksanie)
Kwas 3'-cyjanobifenylo-4-karboksylowy (hydroliza LiOH w dioksanie)
Sposób B
Kwas 5-fenylopirazyno-2-karboksylowy
Połączyć ester metylowy kwasu 5-chloropirazyno-2-karboksylowego (626 mg, 3,64 mmol), kwas fenyloborowy (666 mg, 5,45 mmol), fluorek cezu (55 mg, 0,36 mmol) i Na2CO3 (964 mg, 9,09 mmol) w DMF (5 ml) i wodzie (5 ml) z mieszaniem. Umieścić niejednorodną mieszaninę reakcyjną, w odkrytym naczyniu, na łaźni olejowej utrzymywanej w temperaturze 80°C. Po 5 minutach ogrzewania, dodać Pd(OAc)2 (81 mg, 0,36 mmol) w jednej porcji i mieszać do zmiany barwy na czarną. Ochłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej, rozcieńczyć octanem etylu i przesączyć przez krótką warstwę celitu z dodatkowym octanem etylu. Przemyć części organiczne wodą, osuszyć nad MgSO4, przesączyć i odparować. Oczyszczanie metodą kolumnowej chromatografii rzutowej daje ester metylowy kwasu 2-fenylopirymidyno-5-karboksylowego jako żółtą substancję stałą. Rozpuścić oczyszczony ester w THF (0,25 M) i dodać równą objętość 1 M NaOH.
Mieszać energicznie w temperaturze pokojowej przez 15 godzin. Po zakończeniu, zakwasić mieszaninę stężonym HCl i ekstrahować octanem etylu. Odparowanie rozpuszczalnika daje 63 mg (8%) tytułowego związku. 1H NMR (DMSO): 9,37 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,23-8,21 (m, 2H), 7,57-7,77 (m, 3H).
Poniższe związki wytwarza się zasadniczo jak opisano wyżej.
Kwas 2'-fluoro-6'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 4'-fluoro-2'-metoksybifenylo-4-karboksylowy
Kwas 4'-fluoro-2'-metylobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 4'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowy
Sposób C
Kwas 3',4'-difluorobifenylo-4-karboksylowy
Połączyć kwas 3,4-difluorobenzenoborowy (1,0 g, 5,2 mmol), 4-bromobenzoesan metylu (0,241 g, 1,73 mmol), Pd(OAc)2 (0,019 g, 0,086 mmol), bromek tetrabutyloamoniowy (0,111 g, 0,345 mmol) i fosforan potasu (0,733 g, 3,454 mmol). Przedmuchać reaktor argonem i dodać bezwodny DMF (20 ml) do mieszaniny reakcyjnej. Ogrzać zamknięty szczelnie reaktor do 120°C z mieszaniem do zakończenia reakcji. Ochłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej, rozcieńczyć octanem etylu i przesączyć przez krótką warstwę celitu z dodatkowym octanem etylu. Przemyć części organiczne wodą, osuszyć nad MgSO4, przesączyć i odparować. Oczyszczanie metodą kolumnowej chromatografii rzutowej daje ester metylowy kwasu 3',4'-difluorobifenylo-4-karboksylowego jako żółtą substancję stałą. Rozpuścić oczyszczony ester w dioksanie (45 ml) i dodać równą objętość 1 M wodnego roztworu NaOH. Ogrzać reaktor do 60°C z mieszaniem do zakończenia reakcji. Usunąć rozpuszczalnik przez odparowanie. Rozpuścić pozostałość w dichlorometanie i przemyć 1 N wodnym roztworem kwasu chlorowodorowego. Osuszyć części organiczne nad MgSO4, przesączyć i odparować otrzymując 0,048 g (12%) tytułowego związku. MS (m/e): 235 (M+).
Poniższe związki wytwarza się zasadniczo jak opisano wyżej.
MS 283,1 (M-) MS 245,1 (MH-) MS 229,0 (M-) MS 265,1 (M-)
Kwas 3',5'-dimetylobifenylo-4-karboksylowy Kwas 3',5'-difluorobifenylo-4-karboksylowy Kwas 3',5'-dichlorobifenylo-4-karboksylowy Kwas 3'-chlorobifenylo-4-karboksylowy
Kwas 2',3'-difluorobifenylo-4-karboksylowy Kwas 4'-chlorobifenylo-4-karboksylowy
MS 225,0 (M-) MS 233,0 (M-) MS 267,1 (M+) MS 230,9 (M-) MS 264,9 (M-) MS 230,9 (M-)
PL 205 708 B1
Sposób D
Kwas 2',4',6'-trimetylobifenylo-4-karboksylowy
Połączyć 1-jodo-2,4,6-trimetylobenzen (2,966 g, 12,05 mmol), kwas 4-karboksyfenyloborowy (1,0 g, 6,026 mmol), Pd(OAc)2 (0,0067 g, 0,005 mmol), bromek tetrabutyloamoniowy (0,388 g, 1,2055 mmol) i fosforan potasu (2,557 g, 12,05 mmol). Przedmuchać reaktor argonem i dodać bezwodnym DMF (20 mol) do mieszaniny reakcyjnej. Ogrzać zamknięty szczelnie reaktor do 120°C z mieszaniem do zakończenia reakcji, jak określono metodą TLC. Ochłodzić mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej. Dodać jodek metylu (1,0 ml, 36,63 mmol) do mieszaniny reakcyjnej z ciągłym mieszaniem do zakończenia reakcji. Rozcieńczyć mieszaninę octanem etylu i przesączyć przez krótką warstwę celitu z dodatkowym octanem etylu. Przemyć części organiczne wodą, osuszyć nad MgSO4, przesączyć i odparować. Oczyszczanie metodą kolumnowej chromatografii rzutowej daje ester metylowy kwasu 2',4',6'-trimetylobifenylo-4-karboksylowego jako żółtą substancję stałą. Rozpuścić oczyszczony ester w dioksanie (45 ml) i wodzie (5 ml) zawierającej 5 równoważników LiOH z mieszaniem w temperaturze 60°C. Po zakończeniu, odparować rozpuszczalnik, zakwasić mieszaninę reakcyjną kwasem chlorowodorowym i ekstrahować octanem etylu. Osuszyć części organiczne nad MgSO4, przesączyć i odparować otrzymując 0,023 g (16%) tytułowego związku. MS (m/e): 239,1 (M-).
Poniższe związki wytwarza się zasadniczo jak opisano wyżej.
Kwas 2',4',6'-trifluorobifenylo-4-karboksylowy MS 251,0 (M-)
Kwas 2'-fluoro-4'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowy MS 283,0 (M-)
Sposób E
Kwas 2',4'-difluorobifenylo-4-karboksylowy
Połączyć kwas 4-karbometoksyfenyloborowy (1,021 g, 5,67 mmol), 1-bromo-2,4-difluorobenzen (1,000 g, 5,181 mmol), Pd(OAc)2 (0,113 g, 0,50 mmol), trifenylofosfinę (0,149 g, 0,505 mmol) i węglan sodu (1,664 g, 0,568 mmol). Przedmuchać reaktor argonem. Dodać DMF (20 ml) i wodę (2,0 ml) z mieszaniem. Umieścić zamknięty szczelnie reaktor na łaźni olejowej w temperaturze 80°C i pozostawić z mieszaniem przez 24 godziny. Ochłodzić mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej, rozcieńczyć octanem etylu i przesączyć przez krótką warstwę celitu z dodatkowym octanem etylu. Przemyć części organiczne wodą, osuszyć nad MgSO4, przesączyć i odparować. Oczyszczanie metodą kolumnowej chromatografii rzutowej daje ester metylowy kwasu 2',4'-difluorobifenylo-4-karboksylowego jako żółtą substancję stałą. Rozpuścić oczyszczony ester w dioksanie (5 ml) i dodać 5M NaOH (1 ml). Mieszać energicznie w temperaturze 50°C przez 15 godzin. Po zakończeniu, zakwasić mieszaninę stężonym HCl i ekstrahować octanem etylu. Odparowanie rozpuszczalnika daje 300 mg (24,7%) tytułowego związku. MS (m/e): 233,0 (M-).
Sposób F
Kwas 6-(4-fluoro-2-metylofenylo)pirydyno-3-karboksylowy
Połączyć ester metylowy kwasu 6-bromopirydyno-3-karboksylowego (387 mg, 1,79 mmol), kwas 4-fluoro-2-metylofenyloborowy (338 mg, 2,19 mmol), Pd(OAc)2 (40 mg, 0,18 mmol), fluorek cezu (27 mg, 0,18 mmol) i węglan sodu (570 mg, 5,38 mmol) w DMF (6 ml) i wodzie (6 ml) z mieszaniem. Przedmuchać mieszaninę reakcyjną N2, dodać trifenylofosfinę (47 mg, 0,18 mmol) i przedmuchać ponownie N2. Umieścić zamknięty szczelnie reaktor na łaźni olejowej utrzymywanej w temperaturze 80°C i pozostawić z mieszaniem na 7 godzin. Ochłodzić reakcję do temperatury pokojowej i przepuścić przez krótką warstwę żelu krzemionkowego. Przemyć kolumnę dichlorometanem (100 ml), a następnie wodnym roztworem metanolu (100 ml, 3 metanol/l woda). Odparować połączone frakcje pod zmniejszonym ciśnieniem i zawiesić pozostałą substancję stałą w wodzie (10 ml). Przesączyć dla usunięcia czarnej substancji stałej i zakwasić 1 roztworem kwasu chlorowodorowego do pH 4. Tworzy się biały osad, który zbiera się przez filtrację i osusza otrzymując 306 mg (74%) tytułowego związku. MS (m/e): 231,9 (MH+).
Poniższe związki wytwarza się zasadniczo jak opisano wyżej.
Kwas 2'-fluorobifenylo-4-karboksylowy MS 215,1 (M-)
Kwas 2'-metylobifenylo-4-karboksylowy MS 211,2 (M-)
P r z y k ł a d 1-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego
PL 205 708 B1
Powoli dodać roztwór 375 g (5,13 mol, 1,12 równoważnika) N-metyloacetamidu w THF (1,76 l) do 224 g (5,55 mol, 1,2 równoważnika) wodorku sodu (60% dyspersja w oleju mineralnym) jako zawiesinę w THF (8,75 L). Po 30 minutach, gdy doda się 25% roztworu, dodać 875 g (4,63 mol, 1 równoważnik) bromku 4-fluorobenzylu i pozostałe roztwory N-metyloacetamidu i bromku 4-fluorobenzylu równocześnie w czasie dalszych 3 godzin. Użyć łaźni wodnej dla utrzymania temperatury poniżej 40°C. Mieszać powstałą mieszaninę przez noc i wylać do mieszaniny 20% NH4CI (2,5 l), wody (6,5 l) i octanu etylu (9 l). Oddzielić warstwy i ekstrahować warstwę wodną octanem etylu (4,5 l, następnie 2 l). Połączyć warstwy organiczne i przemyć wodą (4 l) i następnie solanką (7 l). Osuszyć warstwę organiczną (Na2SO4) i usunąć rozpuszczalnik otrzymując pozostałość. Rozpuścić pozostałość w acetonitrylu (7 l) i heptanie (1,75 l). Oddzielić warstwy i przemyć warstwę acetonitrylową ponownie heptanem (1,75 l). Połączyć warstwy heptanowe i ekstrahować acetonitryl (0,5 l). Połączyć warstwy acetonitrylowe i odparować otrzymując 0,814 kg N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)acetamidu.
Rozpuścić N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)acetamid (0,500 kg, 2,76 mol) w THF (11,5 l). Dodać pięciosiarczek fosforu (0, 737 kg, 1,65 mol, 0,6 równoważnika) i ogrzać mieszaninę do refluksu w czasie 1-2 godzin. Po 5 godzinach w 5 temperaturze wrzenia, pozostawić mieszaninę do ochłodzenia do temperatury pokojowej, odsączyć substancje stałe i przemyć 12,5 l THF. Połączyć przesącz z identycznym przesączem z oddzielnej reakcji i zatężyć do 0,978 kg pozostałości. Rozpuścić pozostałość i chromatografować na 2,7 kg żelu krzemionkowego stosując CH2CI2 otrzymując 1,01 kg substancji stałej. Zawiesić substancję stałą w chlorku metylenu (1 l) przez 15-30 minut, dodać heptan (5 l), ochłodzić mieszaninę do 0-5°C i mieszać przez 2 godziny. Zebrać substancję stałą przez filtrację i osuszyć otrzymują c 0,814 kg N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)tioacetamidu.
Dodać 11,5 l acetonitrylu i 2,52 kg (17,7 mol, 1,5 równoważnika) jodku metylu do 2,30 kg (11,6 mol) N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)acetamidu. Ogrzać mieszaninę do 35°C przez 21 godzin. Zmniejszyć objętość o połowę na wyparce obrotowej i dodać 14 l mtbe. Zmniejszyć objętość ponownie o połowę i dodać kolejne 14 l mtbe. Ochłodzić powstałą zawiesinę do 0°C, zebrać substancję stałą przez filtrację i osuszyć otrzymując 3,92 kg jodku 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowego jako białej substancji stałej.
Dodać 85 l stężonego NH4OH i 28 l wody do 6,20 kg (35,0 mol) 1,2-epoksy-6-nitroindanu. Ogrzewać mieszaninę w temperaturze 36°C przez 21 godzin i pozostawić do ochłodzenia do temperatury pokojowej. Przesączyć mieszaninę reakcyjną przez złoże mokrego celitu (10 kg) i przemyć placek wodą. Dodać do mokrego placka 55 l metanolu, 1,3 l wody i 5,80 kg (38,1 mol, 1,09 równoważnika) kwasu (S)-(+)-migdałowego. Ogrzewać mieszaninę przez 2 godziny w temperaturze 55°C i przesączyć przez impregnowany węglem wkład do sączenia. Zmniejszyć objętość przesączy metodą destylacji próżniowej do 5 około 35 l i dodać 130 l EtOAc. Zmniejszyć objętość metodą destylacji próżniowej do około 65 l. Ochłodzić mieszaninę do -8°C i mieszać przez 8 godzin. Przesączyć zawiesinę i osuszyć substancję stałą otrzymując 7,6 kg substancji stałej. Zawiesić tę substancję stałą w 30 l metanolu i 0,3 l wody i ogrzać mieszaninę w temperaturze wrzenia przez 0,5 godziny. Ochł odzić mieszaninę do 45°C w czasie 0,5 godziny i mieszać przez 12 godzin, a następnie ochłodzić do 22°C i mieszać przez 10 godzin. Zebrać substancję stałą przez filtrację i osuszyć otrzymując 2,7 kg (S)-migdalanu 1(R)amino-2(R)-hydroksy-6-nitroindanu.
Dodać (S)-migdalan 1(R)-amino-2(R)-hydroksy-6-nitroindan (0,64 kg, 1,85 mol) do mieszaniny toluenu (9,6 l) i wodnego 1N roztworu NaOH (4,8 l, 4,8 mol, 2,6 równoważnika). Po 1 godzinie dodać chlorek 4-bifenylokarbonylu (0,44 kg, 2,0 mol, 1,1 równoważnika) w porcjach w czasie 20-30 minut. Po 22 godzinach, przesączyć substancje stałe pod zmniejszonym ciśnieniem i przemyć po kolei 0,5 l toluenu, 2 l wody i 2 l toluenu. Osuszyć placek otrzymując 0,74 kg (R)-(6-nitro-2-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego. Dodać 38,2 l octanu etylu do 1,914 kg (R)-(6-nitro-2-ydroksyindan-1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego wytworzonego w podobny sposób. Mieszać zawiesinę przez 8 godzin, zebrać substancję stałą przez filtrację, osuszyć otrzymując 1,76 kg
PL 205 708 B1 (R)-(6-nitro-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego jako białą substancję stałą.
Połączyć zawiesinę 0,176 kg 10% Pd-C (50% wody) i 1,7 kg (R)-(6-nitro-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego w 17,5 1 DMF z wodoru (50 psi, 345 kPa). Po 19 godzinach, mieszaninę reakcyjną przesączyć, dodać część roztworu DMF (5 l) do wody (10 l) i mieszać zawiesinę przez 2 godziny - powtórzyć dwukrotnie dla przetworzenia całości objętości reakcji. Przesączyć zawiesiny razem i przemyć powstały placek filtracyjny wodą (3 x 7 l). Osuszyć placek filtracyjny otrzymując 1,42 kg (R)-(6-amino-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego.
Zawiesić (R)-(6-amino-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego (0,969 kg, 2,81 mol) w THF (9,7 l) i dodać jodek 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowy (0,954 kg, 2,81 mol) i 4-dimetyloaminopirydynę (34,5 g, 0,281). Mieszać mieszaninę przez 24 godziny i usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Rozpuścić powstałą pianę w CH2CI2 (12,5 l) i przemyć fazę organiczną 1,0 N HCl (1x 4 l i 1x 3 l), 1,0 M NaOH (1x 2,4 l) i nasyconym NaCl (1x 4 l). Oddzielić fazę organiczną, osuszyć (Na2SO4), przesączyć i usunąć rozpuszczalnik otrzymując substancję stałą. Rozpuścić substancję stałą w acetonitrylu (9 l) podgrzewając do 35-40°C. Po w przybliżeniu 30 minutach dodać szczepiące kryształy, co daje grubą, białą zawiesinę. Ochłodzić mieszaninę do -15°C i mieszać w tej temperaturze przez 1-2 godziny. Przesączyć zawiesinę i osuszyć otrzymując 1,10 kg tytułowego związku jako częściowego solwatu acetonitrylowego.
1H NMR (CDCI3): δ 7,90 (d, 2, J = 8,6), 7,69 (d, 2, J = 8,6), 7,63 (d, 2, J = 8,2), 7,48 (t, 2, J = 8,2, 7,6), 7,41 30 (d, 1, J = 7,3), 7,24 (dd, 2, J = 8,5, 5,2), 7,14 (d, 1, J =7,9), 7,04 (t, 2, J = 8,7), 6,726,63 (m, 3), 5,31 (t, 1, J = 5,6), 4,84 (br s, 1), 4,64 (dd, 2, J = 21,4, 15,6), 4,54 (dd, 1, J = 14,0, 7,9), 3,32 (dd, 1, J = 15,6, 7,9), 3,01 (s, 3), 2,95 (dd, 1, J = 15,7, 8,0), 1,97 (s, 3). MS (m/z): 508,2 5 (M+1).
P r z y k ł a d 2-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego
Połączyć trans-1-amino-2-hydroksy-6-nitroindan (20,2 g, 0,10 mol) i kwas S-migdałowy (16,7 g, 0,11 mol, 1,1 równoważnika) w 173 ml metanolu i 3,6 ml wody. Ogrzać w temperaturze wrzenia i następnie dodać 200 ml octanu etylu. Zaszczepić i pozostawić do ochłodzenia do 23°C. Po wymieszaniu przez 4 godziny w temperaturze 23°C, ochłodzić przez 3 godziny w temperaturze -3°C, następnie przesączyć i przemyć zimnym 40% metanolem i 60% octanem etylu otrzymując substancję stałą. Osuszyć substancję stałą w piecu próżniowym w temperaturze 45°C przez 16 godzin otrzymując mieszaninę 59:41 diastereomerycznych soli z przewagą 1(R)-amino-2(R)-hydroksy-6-nitroindanu.
Połączyć mieszaninę 59:41 diastereomerycznych soli z 35 ml metanolu i 0,32 g wody. Ogrzać do około 64°C, pozostawić do ochłodzenia do około 45°C i mieszać przez 14 godzin i następnie w temperaturze 23°C przez 14 godzin otrzymują c substancję stałą. Zebrać substancję stałą przez filtrację, przepłukać metanolem i osuszyć w piecu próżniowym w temperaturze 45°C przez 26 godzin otrzymując 2,64 g S-migdalanu 1(R)-amino-2(R)-hydroksy-6-nitroindanu o wysokiej enancjomerycznej czystości. HRMS (m/z): 194,0691. IR (CHCI3) 1347, 1074 cm-1.
Połączyć S-migdalan 1(R)-amino-2(R)-hydroksy-6-nitroindanu, 40,2 g (116,1 mmol), 320 ml wody, 650 ml octanu etylu, 26,6 g diwęglanu di-t-butylu (121,9 mmol, 1,05 równoważnika) i dodatkowe 200 ml octanu etylu. Dodać kroplami 120 ml 1N wodnego roztworu wodorotlenku sodu (120 mmol, 1,03 równoważnika). Po 15 godzinach powstaje substancja stała. Zebrać substancję stałą i przepłukać wodą (3 razy) i octanem etylu (3 razy). Osuszyć otrzymując 1(R)-(t-butoksykarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-nitroindan jako białą substancję stałą, 19,4 g (57%): MS (m/z): 295 (M+1). [a]D = -111 (c = 1, MeOH).
Połączyć (R)-(t-butoksykarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-nitroindan, 30,5 g (0,11 mol), 800 ml
THF, 800 ml octanu etylu i 6,3 g 5% palladu na węglu. Uwodorniać przy 50 psi (345 kPa) wodoru
PL 205 708 B1 przez 2 godziny. Usunąć katalizator metodą filtracji i odparować rozpuszczalnik otrzymując 29,5 g
1(R)-(t-butoksykarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-aminoindan: MS (m/z): 265 (M+1). IR (KBr) 1699,
1625, 1535 cm-1, [a]D = -122 (c = 1, MeOH).
Do roztworu NaH (6,86 g, 0,172 mol, 60% w oleju mineralnym, 1,3 równoważnika) w THF (250 ml), dodać kroplami roztwór N-metyloacetamidu (11,6 g, 0,159 mol, 1,2 równoważnika) w THF (90 ml). Po około 20 minutach, dodać bromek 4-fluorobenzylu (25 g, 0,132 mol). Mieszać przez około 62 godziny, następnie wylać na wodę z lodem (300 ml) i ekstrahować octanem etylu (400 ml i 200 ml). Połączyć warstwy organiczne i przemyć wodą (300 ml), osuszyć nad Na2SO4, przesączyć i zatężyć do oleju. Rozpuścić olej w acetonitrylu i ekstrahować heksanem dla usunięcia oleju mineralnego otrzymując 22,79 g N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)acetamidu: temperatura topnienia = 48-54°C; Rf = 0,45 (4% MeOH/chlorek metylenu); 1H NMR (CDCI3) 7,27-6,93 (m, 4), 4,5 (d, 2), 2,91 (s, 3), 2,14 (s, 3).
Połączyć N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)acetamid (364,8 g, 2,01 mol) i THF (9 1). Mieszać z wytworzeniem roztworu, następnie dodać pięciosiarczek fosforu (537,7 g, 1,21 mol). Po 45 minutach, ogrzać do refluksu. Po 3 godzinach, pozostawić do ochłodzenia i mieszać przez noc otrzymując substancję stałą. Usunąć substancję stałą przez filtrację i przemyć placek filtracyjny THF (4 l). Odparować przesącz otrzymując pozostałość, rozpuścić w chlorku metylenu (500 ml) i przepuścić przez krótką kolumnę z żelem krzemionkowym 60 (1,2 kg) przygotowanym wstępnie heptanem. Eluować 4 l heptanu/chlorku metylenu (1:1), a następnie 100% chlorku metylenu otrzymując, po zebraniu i suszeniu, 217,98 g N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)tioacetamidu: temperatura topnienia = 99-104 C; Rf= 0,42 (chlorek metylenu); 1H NMR (CDCI3) 7,35-7,26 (m, 1), 7,14-6,96 (m, 3), 5,28 (s, 1,2) i 4,79 (s, 0,8), 3,42 (s, 1,2) i 3,15 (s, 1,8), 2,72 (s, 1,2) i 2,69 (s, 1,8).
Uwaga: Częściowe protony uważa się za spowodowane rotamerami.
Połączyć N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)tioacetamid (14,03 g, 0,0711 mol) i chlorek metylenu (140 ml) pod azotem i ochłodzić na łaźni z wodą z lodem. Dodać kroplami trifluorometanosulfonian metylu (9,66 ml, 0,085 mol, 1,2 równoważnika). Po 15 minutach, usunąć łaźnię lodową i mieszać przez 2 godziny. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 25,89 g (100%) trifluorometanosulfonian 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowy.
Połączyć trifluorometanosulfonian 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimmoniowy (5 g, 13,8 mmol), chlorek metylenu (50 ml) i (R)-(t-butoksykarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-aminoindan (3,65 g, 13,8 mmol) pod azotem. Dodać pirydynę (0,15 ml). Po 2,5 godziny powstaje substancja stała. Zebrać substancję stałą przez filtrację, przemyć minimalną ilością chlorku metylenu i osuszyć w piecu próżniowym otrzymując 6,29 g (79%) trifluorometanosulfonian 1(R)-(t-butoksykarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-(1-metylo-N'-(4-fluorobenzylo)-N'-metyloamidyno)indanu jako białą substancję stałą, temperatura topnienia = 123-132°C.
Ochłodzić kwas trifluorooctowy (TFA, 66 ml) na łaźni lodowej i dodać trifluorometanosulfonian 1(R)-(t-butoksykarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-(1-metylo-N'-(4-fluorobenzylo)-N'-metyloamidyno)indanu (29,65 g, 0,051 mol) w porcjach wraz z 3 ml chlorku metylenu. Mieszać na łaźni lodowej przez 10 minut i następnie pozostawić do ogrzania do temperatury pokojowej i mieszać przez 1,5 godziny. Podzielić mieszaninę reakcyjną pomiędzy chlorek metylenu (500 ml) i wodę z lodem (500 ml). Dodać 2M wodny roztwór wodorotlenku sodu (450 ml) i oddzielić warstwy. Ekstrahować warstwę wodną chlorkiem metylenu (250 ml) i połączone warstwy organiczne przemyć wodą (300 ml). Ochłodzić warstwę organiczną, dodać 1N wodny roztwór wodorotlenku sodu (76 ml) i wodę (76 ml) i mieszać otrzymując.
Do N'-(3-amino-2-hydroksyindan-5-ylo)-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloacetamidyny wytworzonej w powyższych procedurach, dodać chlorek 4-bifenylokarbonylu (11,05 g, 0,051 mol, 1 równoważnik) w porcjach. Dodać jeszcze 50 ml wody. Po 2 godzinach oddzielić warstwy, ekstrahować warstwę organiczną wodą (300 ml), osuszyć nad Na2SO4, przesączyć i odparować otrzymując 27,06 g tytułowego związku jako białej piany.
Krystalizować porcję 10 g tytułowego związku z 10 ml/g acetonitrylu otrzymując 5,96 g tytułowego związku: temperatura topnienia 103-111°C. MS (m/z): 508 (M+1).
Zawiesić tytułowy związek otrzymany przez rekrystalizację jak powyżej w mieszaninie 45 ml octanu etylu i 45 ml heksanu przez 16 godzin otrzymując tytułowy związek, temperatura topnienia
139-142°C.
Połączyć tytułowy związek mający temperaturę topnienia 139-142°C (1 g) i absolutny etanol (12 ml). Ogrzać do około 50°C do rozpuszczenia składników stałych. Dodać kroplami zdejonizowaną wodę (4,5 ml), a następnie dodać szczepiące kryształy polimorfu o temperaturze topnienia około 150-152°C. Ochłodzić do około 23°C w czasie 1,5 godziny, otrzymując gęstą zawiesinę. Ochłodzić zawiesinę na
PL 205 708 B1 łaźni lodowej, przesączyć i osuszyć w piecu próżniowym w temperaturze 50-60°C otrzymując 0,76 g tytułowego związku: temperatura topnienia 150-152°C.
Jak zauważy fachowiec w dziedzinie, inną nazwą tytułowego związku jest 6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2-hydroksy-1-bifenyloamidoindan.
P r z y k ł a d 2-2 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego
Połączyć S-migdalan 1(R)-amino-2(R)-hydroksy-6-nitroindanu, 50,0 g (0,144 mol) i 750 ml toluenu. Dodać 375 ml (0,375 mol, 2,6 równoważnika) 1N wodnego roztworu wodorotlenku sodu, a następnie 470 ml wody. Mieszać przez około 22 minuty, następnie dodać 35,5 g (0,159 mol, 1,1 równoważnika) chlorku 4-bifenylokarbonylu porcjami w czasie około 6 minut. Po 3,5 godziny, przesączyć powstałą zawiesinę, przemyć placek filtracyjny toluenem, osuszyć pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50°C przez 18 godzin otrzymują c 56,1 g (R)-(4-bifenylokarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-nitroindanu: IR (KBr, cm-1): 3293, 1640, 1549, 1528, 1345, 1329, 1086, 739; HRMS obliczone dla C22H18N2O4: 374,1267, Znalezione: 374,1266.
Połączyć 1(R)-(4-bifenylokarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-nitroindan, 55,7 g, 550 ml DMF i 2,8 g katalizatora 10% Pd/C. Uwodorniać pod ciśnieniem 50 psi (345 kPa) wodoru w temperaturze otoczenia przez 4,75 godziny. Przesączyć mieszaninę reakcyjną i rozcieńczyć przesącz 1200 ml wody otrzymując zawiesinę. Mieszać zawiesinę przez 30 minut, przesączyć, przemyć wodą i osuszyć pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50°C. Połączyć osuszony produkt i około 1 l wody i mieszać w zawiesinie przez 30 minut, przesączyć , przemyć wodą i osuszyć pod zmniejszonym ciś nieniem w temperaturze 50°C otrzymując 45,4 g (90%) 1(R)-(4-bifenylokarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-aminoindanu: IR (KBr, cm-1) 3584, 3364, 3277, 1632, 1543, 1326, 1073, 743; HRMS obliczone dla C22H20N2O2: 344,4120; Znalezione: 344,1525.
Połączyć N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)acetamid (364,8 g, 2,01 mol) i THF (9 l). Mieszać do rozpuszczenia i następnie dodać pentasiarczek fosforu (537,7 g, 1,21 mol). Po 45 minutach ogrzać do refluksu przez 3 godziny, następnie ochłodzić i mieszać przez noc otrzymując substancję stałą. Zebrać substancję stałą przez filtrację i przepłukać placek THF (4 l), odparować przesącz pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując pozostałość, rozpuścić pozostałość w chlorku metylenu (około 500 ml) i przepuś cić przez zł o ż e ż elu krzemionkowego 60 (1,2 kg) przygotowane heptanem. Eluować 4 l mieszaniny heptan/chlorek metylenu (1:1) a następnie 100% chlorkiem metylenu otrzymując 217,98 g N-metylo-N-(4 -fluorobenzylo)tioacetamidu (55%): temperatura topnienia = 99-104°C; Rf = 0,42 (chlorek metylenu); 1H NMR (CDCI3) 7,35-7,26 (m, 1), 7,14-6,96 (m, 3), 5,28 (s, 1,2) i 4,79 (s, 0,8), 3,42 (s, 1,2) i 3,15 (s, 1,8), 2,72 (s, 1,2) i 2,69 (s, 1,8).
Uwaga: Częściowe protony uważa się za spowodowane rotamerami.
Dodać jodek metylu (10,76 g, 75,8 mmol) w jednej porcji do zawiesiny N-metylo-N-(4-fluorobenzylo)tioacetamidu (10 g, 50,6 mmol) w acetonitrylu (50 ml). Ogrzać w temperaturze 35°C przez 46 godzin, następnie ochłodzić do około 23°C. Zmniejszyć objętość mieszaniny reakcyjnej do około 25 ml przez odparowanie i następnie dodać eter metylowo-t-butylowy (50 ml). Ponownie zmniejszyć objętość przez odparowanie do 25 ml i następnie rozcieńczyć kolejną porcją 50 ml eteru metylowo-t-butylowego otrzymując substancję stałą. Ochłodzić do 0°C, przesączyć, przepłukać 15 ml zimnego eteru metylowo-t-butylowego i osuszyć otrzymując 16,89 g jodku 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowego jako żółtą substancję stałą, temperatura topnienia 142-150°C. MS (elektrorozpylanie): teoretyczne dla części iminiowej C11H15FNS: 212; Znalezione: 212.
Połączyć 1(R)-(4-bifenylokarbonyloamino)-2(R)-hydroksy-6-aminoindan, 10,0 g (0,029 mol), 4-dimetyloaminopirydynę (DMAP), 0,4 g (0, 0032 mol, 0,011 równoważnika), 200 ml acetonu i jodek 1-metylotio-1-metylo-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloimoniowy, 10,8 g (czystość 96%, 0,0305 mol, 1,05
PL 205 708 B1 równoważnika). Po 6 godzinach, zatężyć mieszaninę reakcyjną do piany. Połączyć pianę i 120 ml toluenu, mieszać w temperaturze otoczenia przez 19,5 godziny, przesączyć, osuszyć pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50°C otrzymując pozostałość, sól jodowodorową tytułowego związku, charakteryzującą się następującym NMR: 1H NMR (CDCI3, 300 MHz): δ 8,02 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,827,93 (m, 1H); 6,90-7,69 (m, 14H); 4,85-5,25 (m, 2H); 4,60-4,80 (m, 2H); 3,45 (s, 2H); 3,00-3,20 (m, 2H); 2,60-2,75 (m, 1H); 2,10-2,35 (m, 4H).
Rozpuścić pozostałość w 200 ml chlorku metylenu i ekstrahować 200 ml 1,0 M wodnego roztworu wodorotlenku sodu, a następnie 200 ml solanki. Osuszyć warstwę organiczną nad MgSO4, przesączyć i odparować pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 15 g tytułowego związku.
Połączyć 5,0 g związku otrzymanego powyżej i 200 ml chlorku metylenu. Dodać 1,00 g węgla DARCO, mieszać przez 1 godzinę i następnie przesączyć przez złoże Hyflo. Odparować pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 4,0 g pozostałości. Rozpuścić pozostałość w absolutnym etanolu (około 40 ml) i dodać zdejonizowaną wodę (12 ml) otrzymując substancję stałą. Ogrzać zawiesinę substancji stałej do 55°C przez 30 minut, pozostawić do ochłodzenia do temperatury pokojowej i mieszać. Po 24 godzinach przesączyć, przemyć 10 ml mieszaniny 10:3 EtOH:woda, osuszyć pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 1,5 g tytułowego związku: temperatura topnienia 108-112°C.
Fachowiec w dziedzinie zauważy, że inną nazwą tytułowego związku jest 6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2-hydroksy-1-bifenyloamidoindan.
P r z y k ł a d 3-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',6'-dichlorobifenylo-4-karboksylowego
Dodać DMF (1,6 ml) do mieszaniny żywicy N-cykloheksylokarbodiimido-N-metylopolistyrenowej (Novobiochem, 2,0 mmol/g) (150 mg, 0,30 mmol) i kwasu 2',6'dichlorobifenylo-4-karboksylowego (14 mg, 0,05 mmol), a następnie roztwór N-hydroksysukcynimidu (2,3 mg, 0,02 mmol) w DMF (0,2 ml) i następnie roztwór N'-(3-amino-2-hydroksyindan-5-ylo)-N-(4-fluorobenzylo)-N-metylo-acetamidyny (6,6 mg, 0,02 mmol) w DMF (0,2 ml). Mieszać mieszaninę przez 16 godzin, następnie dodać żywicę polistyrenotrisaminową (Argonaut Technologies, 3,7 mmol/g) (100 mg, 0,37 mmol) i mieszać przez dalsze 24 godziny. Przesączyć mieszaninę dla uzyskania 0,01 M roztworu tytułowego związku. MS (m/e): 577 (M+).
Związki z przykładów 3-2 do 3-26 wytwarza się zasadniczo jak w przykładzie 3-1.
Prz. nr Nazwa związku MS (m/e)
1 2 3
3-2 (R)-(6-(1-(4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',6'-dichlorobifenylo-4-karboksylowego 542 (M+)
3-3 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2'-chlorobifenylo-4-karboksylowego 542 (M+)
3-4 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowego 576 (M+)
3-5 (R) (6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowego 576 (M+)
3-6 (R)-6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4'-metylobifenylo-4-karboksylowego 522 (M+)
3-7 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 3',4'-difluorobifenylo-4-karboksylowego 544 (M+)
3-8 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 3',5'-dimetylobifenylo-4-karboksylowego 536 (M+)
PL 205 708 B1 cd. tabeli
1 2 3
3-9 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloaminoetylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-cykloheksylofenylo-1-karboksylowego 514 (M+)
3-10 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 3'-cyjanobifenylo-4-karboksylowego 533 (M+)
3-11 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amib 3',5'-difluorobifenylo-4-karboksylowego kwasu 544 (M+)
3-12 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 3'-fluorobifenylo-4-karboksylowego 526 (M+)
3-13 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',4'-difluorobifenylo-4-karboksylowego 544 (M+)
3-14 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',3'-dichlorobifenylo-4-karboksylowego 576 (M+)
3-15 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4'-chlorobifenylo-4-karboksylowego 542 (M+)
3-16 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 3'-chlorobifenylo-4-karboksylowego 542 (M+)
3-17 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-trifluorometylofenylo-1-karboksylowego 500 (M+)
3-18 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-metylofenylo-1-karboksylowego 446 (M+)
3-19 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylO)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan010ylo)amid kwasu 3',5'-dichlorobifenylo-4-karboksylowego 576 (M+)
3-20 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',4',6'-trimetylobifenylo-4-karboksylowego 550 (M+)
3-21 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2'-fluoro-4'trifluorometylobifenylo-4-karboksylowego 594 (M+)
3-22 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid 4-(pirol-1-ilo)fenylo-1-karboksylowego kwasu 597 (M+)
3-23 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-cyjanofenylo-1-karboksylowego 457 (M+)
3-24 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid 2'-metylobifenylo-4-karboksylowego kwasu 522 (M+)
3-25 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)atylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amidkwasu 2'-metoksybifenylo-4-karboksylowego 538 (MH+)
3-26 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 6'-fluoro-2'-trifluorometylobifenylo-4-karboksylowego 594 (MH+)
P r z y k ł a d 4-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 6-cyjanopirydyno-3-karboksylowego
PL 205 708 B1
Rozpuścić równomolowe ilości N'-(3-amino-2-hydroksyindan-5-ylo)-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloacetamidyny (229 mg, 0,70 mmol) i 6-cyjano-3-karboksypirydyny (0,70 mmol, 103 mg) w bezwodnym DMF (4,0 ml). Dodać trietyloaminę (0,487 ml, 3,50 mmol), a następnie heksafluorofosforan benzotriazol-1-iloksytris-dimetyloaminofosfoniowy (296 mg, 0,70 mmol). Pozostawić reakcję z mieszaniem w temperaturze pokojowej na 0,5 godziny. Rozcieńczyć mieszaninę wodą (100 ml) i ekstrahować EtOAc (3x 50 ml). Osuszyć połączone warstwy organiczne nad MgSO4, przesączyć i zatężyć. Rozpuścić surowy produkt reakcji w THF (5,0 ml). Dodać wodorotlenek żywicy (żywica BIO-RAD AG 1-X8, 20-50 mesh - przemyta wodą), 1 M NaOH, MeOH, eter i osuszyć pod zmniejszonym ciśnieniem) do zasadowego odczynu roztworu i mieszać w temperaturze otoczenia przez 24 godziny. Przesączyć mieszaninę, przemyć dodatkowym THF, odparować na żelu krzemionkowym i oczyścić metodą kolumnowej chromatografii rzutowej z mieszaniną EtOAc/heksany otrzymując 253 mg (79%) tytułowego związku jako białej substancji stałej. MS (m/e): 458 (M+).
P r z y k ł a d 4-2
Związek z przykładu 4-2 wytwarza się zasadniczo jak w przykładzie 4-1.
Prz. nr Nazwa związku MS (m/s)
4-2 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-(tien-3-ylo)fenylo-1-karboksylowego 514,1 (M+)
P r z y k ł a d 5-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 6-(2-chlorofenylo)pirydyno-3-karboksylowego
Rozpuścić N'-(3(R)-amino-2(R)-hydroksyindan-5-ylo)-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloacetamidynę (42 mg, 0,13 mmol) i kwas 6-(2-chlorofenylo)pirydyn-3-karboksylowy (103 mg, 0,70 mmol) w bezwodnym DMF (2,5 ml). Dodać trietyloaminę (0,17 8 ml), a następnie heksafluorofosforan benzotriazol-1-iloksytris-dimetyloaminofosfoniowy (54 mg, 0,3 mmol). Pozostawić mieszaninę z mieszaniem w temperaturze pokojowej do zakończenia reakcji. Rozcieńczyć mieszaninę wodą (100 ml) i ekstrahować EtOAc. Osuszyć połączone warstwy organiczne nad MgSO4, przesączyć i zatężyć. Oczyścić metodą kolumnowej chromatografii rzutowej mieszaniną CHCl3/MeOH otrzymując 276 mg (35,7%) stałego tytułowego związku. MS (m/e): 543,0 (M+).
Związek z przykładu 5-2 wytwarza się zasadniczo jak w przykładzie 5-1.
Prz. nr Nazwa związku MS (m/e)
5-2 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-jodofenylo-1-karboksylowego 558,0 (M+)
P r z y k ł a d 6-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-(pirydyn-3-ylo)fenylo-1-karboksylowego
PL 205 708 B1
Połączyć (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-jodofenylo-1-karboksylowego (0,131 g, 0,235 mmol), 2-(tributylostannylo)pirydynę (0,129 g, 0,352 mmol) i tetrakis(trifenylofosfino)pallad(0) (0,406 g, 0,352 mmol) w dioksanie w temperaturze 80°C. Ogrzać z mieszaniem do zakończenia reakcji. Usunąć rozpuszczalnik przez odparowanie. Rozcieńczyć pozostałość octanem etylu i mieszać z równą objętością nasyconego fluorku potasu przez 3 godziny. Przesączyć roztwór przez warstwę celitu. Oddzielić warstwę organiczną od warstwy wodnej i osuszyć nad siarczanem magnezu. Usunąć organiczny rozpuszczalnik przez odparowanie i oczyścić metodą chromatografii rzutowej z dichlorometanem i metanolem otrzymując 0,035 g (30%) tytułowego związku jako substancji stałej. MS (m/e): 509,2 (M+).
P r z y k ł a d 7-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',4',6'-trifluorobifenylo-4-karboksylowego
Połączyć kwas 2',4',6'-trifluorobifenylo-4-karboksylowy (66 mg, 0,26 mmol), EDC (53 mg, 0,28 mmol) i N-hydroksysukcynimid (0,33 mg, 0,28 mmol) w dichlorometanie i mieszać do zakończenia reakcji. Przemyć roztwór 1N kwasem chlorowodorowym. Warstwę organiczną osuszyć nad siarczanem magnezu i zatężyć. Pozostałość połączyć z N'-(3(R)-amino-2-(R)-hydroksyindan-5-ylo)-N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloacetamidyną (42 mg, 0,13 mmol) w dichlorometanie i mieszać do zakończenia reakcji. Rozpuszczalnik usunąć przez odparowanie i pozostałość oczyszczać metodą chromatografii rzutowej z dichlorometanem i metanolem otrzymując 37 mg tytułowego związku. MS (m/e): 562,0 (M+).
P r z y k ł a d 8-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 3,4'-difluorobifenylo-4-karboksylowego
Mieszać mieszaninę kwasu 3,4'-difluorobifenylo-4-karboksylowego (160 mg, 0,684 mmol), N-hydroksysukcynimidu (79 mg, 0, 684 mmol) i DCC (141 mg, 0, 684 mmol) w 15 ml chlorku metylenu w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Połączyć ester t-butylowy kwasu (6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino) etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)karbaminowego (256 mg, 0,62 mmol) z TFA (2 ml) w temperaturze 0°C i mieszać przez 2 godziny. Odparować TFA pod zmniejszonym ciśnieniem. Rozpuścić pozostałość w chlorku metylenu i odparować do suchej masy - powtórzyć proces trzy razy. Dodać 5 ml chlorku metylenu i 1 ml trietyloaminy. Dodać powstały roztwór do powyższej mieszaniny i mieszać w temperaturze pokojowej przez 12 godzin. Wylać mieszaninę do chlorku metylenu, przemyć wodą, osuszyć Na2SO4 i zatężyć. Oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy, 3% MeOH w CH2CI2) otrzymując 199 mg tytułowego związku jako białej substancji stałej (wydajność 55%).
1H NMR (CDCI3) δ 8,21 (1 H, t, J = 8,4 Hz), 7,58 (2 H, dd, J = 8,8 i 4,8 Hz), 7,32 (1 H, d, J =
13,2 Hz), 7,26-7,23 (2 H, m), 7,19-7,12 (3 H, m), 7,04 (2 H, t, J = 8,8 Hz), 6,68 (1 H, s), 6,66 (1 H, s),
5,32 (1 H, t, J = 5,2 Hz), 4,82-4,72 (1 H, m), 4,64 (2 H, s), 4,56 (1 H, q, J = 6,4 Hz), 3,32 (1 H, dd, J =
15,6 i 8,0 Hz), 3,00 (3 H, s), 2,96 (1 H, dd, J = 15,2 i 8,4 Hz), 1,96 (3 H, s). MS 544 (MH+).
Związki z przykładów 8-2 przez 8-5 wytwarza się zasadniczo jak w przykładzie 8-1.
PL 205 708 B1
Prz. nr Nazwa związku MS (m/e)
8-2 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-yloamid kwasu 4'-fluorobifenylo-4-karbokdylowego 526 (MH+)
8-3 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4'-fluoro-2'-metoksybifenylo-4-karboksylowego 556 (MH+)
8-4 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2',6'-difluorobifenylo-4-karboksylowego 544 (MH+)
8-5 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 2'-fluorobifenylo-4-karboksylowego 526,1 (MH+)
P r z y k ł a d 9-1 (R)-(6-(1-((furan-2-ylometylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-bromofenylo-1-karboksylowego
Do mieszaniny tioacetamid (10,04 g, 133,64 mmol) i K2CO3 (45,80 g, 331,38 mmol) w 100 ml THF w temperaturze 0°C dodać chlorek ftaloilu (28,49 g, 140,32 mmol) kroplami. Podnieść temperaturę reakcji do 25°C po 2 godzinach i pozostawić z mieszaniem na jeszcze 2 godziny, po czym ochłodzić mieszaninę reakcyjną do 0°C ponownie. Zalać reakcję dodając kroplami 125 ml wody z lodem. Ekstrahować mieszaninę reakcyjną EtOAc (2x). Osuszyć warstwę organiczną MgSO4 i usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 3,7 g N-tioacetyloizoindolo-1,3-dionu jako surowej czerwonawej substancji stałej.
Rozpuścić N-metylofurfuryloaminę (117,2 mg, 1,05 mmol) w 20 ml Et2O w temperaturze 25°C. Dodać N-tioacetyloizoindolo-1,3-dion (294,4 mg, 1,43 mmol) i pozostawić z mieszaniem na 24 godziny. Dodać MeOTf (181,7 mg, 1,11 mmol) do mieszaniny reakcyjnej i pozostawić z mieszaniem jeszcze na 23 godziny. Zdekantować Et2O znad oleju i utrzeć olej z Et2O, i powtórzyć operacje trzykrotnie. Usunąć nadmiar Et2O znad oleistej pozostałości pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 320,4 mg surowego tioimidanu jako oleju. Rozpuścić ten surowy produkt (161,1 mg, 0,483 mmol) w 10 ml pirydyny i dodać N-(6-amino-2-hydroksyindan-1-ylo)-4-bromobenzamid (107,5 mg, 0,310 mmol). Pozostawić reakcję z mieszaniem w temperaturze 25°C na 22 godziny. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem i podzielić pozostałość pomiędzy CH2CI2 i nasycony wodny roztwór NaHCO3. Osuszyć warstwę organiczną MgSO4. Przesączyć i usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 146,2 mg surowego produktu. Oczyścić metodą chromatografii Biotage (1% MeOH/EtOAc) otrzymując 63,6 mg tytułowego związku jako białawej substancji stałej (43%). MS (m/e): 483 (M+1).
P r z y k ł a d 10-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)amino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-bromofenylo-1-karboksylowego
Etap a) Połączyć ester t-butylowy kwasu (6-amino-2-hydroksyindan-1-ylo)karbaminowego (3,7 g, 14,0 mmol) z 10 ml TFA w temperaturze 0°C. Mieszać mieszaninę przez 1 godzinę i odparować do suchej masy. Dodać do pozostałości 6,5 ml trietyloaminy i 30 ml chlorku metylenu. Połączyć tę mie18
PL 205 708 B1 szaninę powoli roztworem estru benzotriazol-1-ilowego kwasu 4-bromobenzoesowego w 15 ml chlorku metylenu w temperaturze 0°C. Mieszać powstałą mieszaninę przez 12 godzin w temperaturze pokojowej. Przesączyć otrzymując 3,4 g (wydajność 70%) N-(6-amino-2-hydroksyindan-1-ylo)-4-bromobenzamidu jako białej substancji stałej. MS 348 (MH+).
Etap b) Dodać chlorek acetylu (9,28 g, 118 mmol) do mieszaniny trietyloaminy (16,0 g, 158 mmol) i 4-fluorobenzyloaminy (9,90 g, 78,8 mmol) w 200 ml octanu etylu w temperaturze 0°C i mieszać przez 12 godzin. Dodać 100 ml wody do mieszaniny. Ekstrahować warstwę wodną octanem etylu (3x 100 ml). Połączyć warstwy organiczne i przemyć solanką, następnie osuszyć nad bezwodnym Na2SO4. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując N-(4-fluorobenzylo)acetamid (13,5 g) z wydajnością 100% jako żółty olej. Dodać NaH (6,5 g, 162 mmol) do N-(4-fluorobenzylo)acetamidu (13,5 g, 80,8 mmol) w 200 ml tetrahydrofuranu w temperaturze 0°C i mieszać przez 4 godziny. Następnie dodać jodek metylu (22,9 g, 161,6 mmol) do powyższej mieszaniny i mieszać przez 12 godzin. Wylać mieszaninę do 200 ml wody. Ekstrahować warstwę wodną chlorkiem metylenu (3x 200 ml). Połączyć warstwy organiczne i przemyć solanką, następnie osuszyć nad bezwodnym Na2SO4. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy, 5% acetonu w heksanach, 50% acetonu w heksanach) otrzymując N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloacetamid (9,1 g) z wydajnością 64% jako żółty olej. Dodać reagent Lawessona (20,3 g, 50,3 mmol) do N-(4-fluorobenzylo)-N-metyloacetamidu (9,1 g, 50,3 mmol) w 200 ml toluenu i ogrzać do 100°C przez trzy godziny. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy, 2% chlorku metylenu w heksanach, 100% chlorku metylenu) otrzymując N-(4-fluorobenzylo)-N-metylotioacetamid (5,6 g), 56,5%, jako żółtą substancję stałą: MS 198 (MH+).
Etap c) Dodać reagent Lawessona (1,8 g, 3,6 mmol) do N-(4-fluorobenzylo)acetamidu (0,9 g, 5,4 mmol) w 50 ml toluenu i ogrzać do 80°C przez 12 godzin. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy, aceton:heksan = 20:80) otrzymując mieszaninę. Przemyć eterem i odrzucić nierozpuszczalne stałe zanieczyszczenia filtracji. Usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując N-(4-fluorobenzylo)tioacetamid (0,7 g), 71%, jako żółtą substancję stałą: MS 184 (MH+).
Etap d) Dodać trifluorometanosulfonian metylu (0,190 g, 1,16 mmol) do roztworu N-(3-fluorobenzylo)tioacetamidu (0,106 g, 0,580 mmol) w 10 ml CH2CI2 w temperaturze pokojowej. Mieszać mieszaninę przez 30 minut i usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Rozpuścić pozostałość w 5 ml pirydyny. Następnie dodać sól kwasu trifluorooctowego N-(6-amino-2-hydroksyindan-1-ylo)-4-bromobenzamidu do roztworu. Mieszać przez trzy godziny. Usunąć pirydynę pod zmniejszonym ciśnieniem. Oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy/heksany:aceton = 7:3, 1:1) otrzymując 40 mg tytułowego związku z wydajnością 14% jako białą substancję stałą: MS 496 (MH+).
Związek 10-2 wytwarza się zasadniczo jak w przykładzie 10-1.
Prz. nr Nazwa związku MS (m/e)
10-2 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu 4-bromofenylo-1-karboksylowego 510 (MH+)
P r z y k ł a d 11-1 (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-2-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego
Połączyć ester t-butylowy kwasu (6-amino-2-hydroksyindan-2-ylo)karbaminowego (1,5 g, 5,68 mmol) z 5 ml TFA w temperaturze 0°C. Mieszać mieszaninę przez 1 godzinę i następnie odparować do suchej masy. Dodać do pozostałości 3,0 ml trietyloaminy i 30 ml chlorku metylenu. Do tej mieszaniny dodać roztwór estru 2,5-diokso-pirolidyn-1-ylowego kwasu bifenylo-4-karboksylowego (1,76 g, 5,96 mmol) w 15 ml chlorku metylenu. Mieszać powstały mieszanina przez 12 godzin. Odparować rozpuszczalnik i oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy/ MeOH: CH2CI2 = 9:1) otrzymując 1,88 g (wydajność 96%) (6-amino-2-hydroksyindan-1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego; MS 345 (MH+).
Dodać trifluorometanosulfonian metylu (0,290 g, 1,76 mmol) do roztworu N-(4-fluorobenzylo)tioacetamidu (0,2 g, 1,0 mmol) w 5 ml CH2CI2 w temperaturze pokojowej. Mieszać mieszaninę przez 30 minut i usunąć rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Rozpuścić pozostałość w 5 ml pirydyny. Następnie dodać (6-amino-2-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego do
PL 205 708 B1 roztworu. Mieszać przez 12 godzin. Usunąć pirydynę pod zmniejszonym ciśnieniem. Oczyścić pozostałość metodą kolumnowej chromatografii (żel krzemionkowy/heksany:aceton = 7:3, 1:1) otrzymując 78 mg tytułowego związku z wydajnością 35% jako białą substancję stałą: 1H NMR (DMSO-d6) δ 8,78 (1H, d, J = 8,8 Hz), 8,04 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,79 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,74 (2H, dd, J = 7,4, 1,6 Hz), 7,50 (2H, t, J = 8,0 Hz), 7,41 (1H, t, J = 7,2 Hz), 7,28 (2H, dd, J = 8,8, 6,6 Hz), 7,14 (2H, t, J = 8,8 Hz), 7,04 (1H, t, J = 7,6 Hz), 6,78 (1H, d, J= 7,2 Hz), 6,37 (1H, s), 5,33 (1H, d, J = 5,6 Hz), 5,27 (1H, t, J = 7,6 Hz), 4,59 (2H, s), 4,45 (1H, q, J= 6,0 Hz), 3,10 (1H, dd, J = 14,8, 7,2 Hz), 2,90 (3H, s), 2,68 (1H, dd, J = 14,8, 7,2 Hz), 1,88 (3H, s); MS 508 (MH+).
Związki z przykładów 11-2 do 11-3 wytwarza się zasadniczo jak w przykładzie 11-1.
Prz. nr Nazwa związku MS (m/e)
11-2 (R)-(6-(1-((3-metoksybenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego 520 (MH+)
11-3 (R)-(6-(1-((3,4-difluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego 526 (MH+)
P r z y k ł a d P-1
Hemihydrat (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego
Dodać 21,8 l metanolu do 2,86 kg solwatu (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego. Przepuścić roztwór przez filtr impregnowany węglem i przepłukać filtr 24 l metanolu. Dodać 5,7 kg wody do roztworu w czasie 35 minut, a następnie 15 g szczepiących kryształów hemihydratu (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego. Po 20 minutach dodać 1,15 kg wody, a następnie 15 g szczepiących kryształów. Po 1 godzinie, dodać kolejne 1,15 kg wody w czasie 30 minut, a następnie 15 g szczepiących kryształów. Po 10 minutach dodać 3,4 kg wody w czasie 1 godziny i mieszać zawiesinę w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę, i w temperaturze 0°C przez 45 minut. Zebrać substancję stałą przez filtrację, przepłukać zimnym roztworem 11,4 l metanolu i 2,9 l wody i osuszyć otrzymując 2,19 kg tytułowego związku jako białej substancji stałej.
P r z y k ł a d P-2
Hemihydrat (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metylo)amino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego
Rozpuścić solwat (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan1-ylo)amidu kwasu bifenylo-4-karboksylowego (2,0 g) w metanol (24 ml) w temperaturze 20-23°C. Dodać wodę (5 ml) do roztworu, następnie szczepiące kryształy hemihydratu (20 mg). Mieszać mieszaninę przez 2 godziny w temperaturze 20-23°C, następnie ochłodzić do 0-5°C. Przesączyć mieszaninę, przemyć roztworem metanolu (8 ml) i wody (2 ml) i osuszyć w temperaturze 50-60°C pod zmniejszonym ciśnieniem przez 16 godzin otrzymując 1,66 g tytułowego związku.
P r z y k ł a d P-3
Hemihydrat (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego
Połączyć roztwór solwatu acetonitrylowego 6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2-hydroksy-1-bifenyloaminoindanu (101 g) i metanolu (1,2 l) z Darco G-60 (5 g). Po wymieszaniu przez 15-30 minut w temperaturze 15-25°C, przesączyć mieszaninę i przepłukać przesączone substancje stałe metanolem (0,4 l). Dodać wodę (0,4 l) do połączonego przesączu, przepłukać i dodać szczepiące kryształy hemihydratu (1,5 g). Mieszać mieszaninę przez 2-3 godziny w temperaturze 15-25°C, następnie ochłodzić do 0-5°C i mieszać przez 90 minut. Przesączyć mieszaninę, przemyć roztworem metanolu w temperaturze 0-5°C (0,8 l) i wodą (0,2 l) i osuszyć w temperaturze 47-53°C pod zmniejszonym ciśnieniem przez 20 godzin otrzymując 88,7 g tytułowego związku.
Związki według wynalazku można podawać same lub w postaci kompozycji farmaceutycznej, to jest, połączone z farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami lub zaróbkami, których ilości i natura jest określana rozpuszczalnością i chemicznymi właściwościami wybranego związku, wybraną drogą podawania i standardową farmaceutyczną praktyką. Związki według wynalazku, chociaż skuteczne jako takie, można komponować i podawać w postaci ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli, ze względu na trwałość, wygodę, rozpuszczalność i tym podobne. W praktyce, związki o wzorze I są
PL 205 708 B1 zwykle podawane w postaci kompozycji farmaceutycznej, to jest, w mieszance z farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami lub rozcieńczalnikami.
Tak więc, przedmiotem wynalazku są farmaceutyczne kompozycje zawierające związek o wzorze 1 i farmaceutycznie dopuszczalny rozcieńczalnik. Wynalazek obejmuje również odpowiednie opakowanie, w tym etykieta, zawierające kompozycje farmaceutyczne obejmujące związek o wzorze 1.
Związki o wzorze 1 można podawać wieloma drogami. Prowadząc leczenie pacjenta dotkniętego zaburzeniami opisanymi w wynalazku, związek o wzorze 1 można podawać w dowolnej postaci lub trybie, który powoduje biodostępność związku w skutecznej ilości, w tym drogą doustną i pozajelitową. Np., związki o wzorze 1 można podawać doustnie, przez inhalację, podskórnie, śródmięśniowo, dożylnie, przezskórnie, donosowo, doodbytniczo, do oczu, miejscowo, podjęzykowo, policzkowo i tym podobnymi drogami. Doustne podawanie jest ogólnie korzystne przy leczeniu zaburzeń opisanych w wynalazku.
Specjalista w dziedzinie wytwarzania preparatów może łatwo wybrać właściwą postać i sposób podawania w zależności od konkretnej charakterystyki wybranego związku, leczonego zaburzenia lub stanu, etapu zaburzenia lub stanu i innych powiązanych okoliczności (Remington's Pharmaceutical Sciences, wyd. 18, Mack Publishing Co. (1990)).
Kompozycje farmaceutyczne wytwarza się w sposób dobrze znany w dziedzinie farmacji. Nośnik lub zaróbka może być stałą, półstałą lub ciekłą substancją, która może służyć jako podłoże lub medium dla substancji czynnej. Odpowiednie nośniki lub zaróbki są dobrze znane w dziedzinie. Kompozycja farmaceutyczna może być przystosowana do stosowania doustnego, inhalacyjnego, pozajelitowego lub miejscowego i można ją podawać pacjentowi w postaci tabletek, kapsułek, aerozoli, środków do inhalacji, czopków, roztworów, zawiesin lub tym podobnych.
Związki według wynalazku można podawać doustnie, np., z obojętnym rozcieńczalnikiem lub w kapsułkach lub sprasowane w tabletki. Dla celów doustnego leczniczego podawania, związki można włączać z zaróbkami i stosować w postaci tabletek, kołaczyków, kapsułek, eliksirów, zawiesin, syropów, wafli, gum do żucia i tym podobnych. Te preparaty powinny zawierać co najmniej 4% związku według wynalazku, substancję czynną, lecz ilość może się wahać w zależności od konkretnej postaci i może dogodnie wynosić od 4% do około 70% wagowych jednostki. Ilość związku obecnego w kompozycjach jest taka, że uzyskuje się odpowiednie dawkowanie. Korzystne kompozycje i preparaty według wynalazku może określić specjalista w dziedzinie.
Tabletki, pigułki, kapsułki, kołaczyki i tym podobne mogą również zawierać jeden lub większą liczbę następujących adiuwantów: środki wiążące, takie jak mikrokrystaliczna celuloza, guma tragakantowa lub żelatyna; zaróbki, takie jak skrobia lub laktoza, środki rozdrabniające, takie jak kwas alginowy, Primogel, skrobia kukurydziana i tym podobne; środki smarujące, takie jak stearynian magnezu lub Sterotex; środki poślizgowe, takie jak koloidalny dwutlenek krzemu; i można dodać środki słodzące, takie jak sacharoza lub sacharyna lub środek smakowo-zapachowy, taki jak mięta pieprzowa, salicylan metylu lub pomarańczowy środek smakowo-zapachowy. Gdy postać dawki jednostkowej jest kapsułką, może ona zawierać, poza materiałami powyższego typu, ciekły nośnik, taki jak poli(glikol etylenowy) lub olej tłuszczowy. Inne postaci dawki jednostkowej mogą zawierać inne różne substancje, który modyfikują fizyczną postać dawki jednostkowej, np., jako powłoki. Tak więc, tabletki lub pigułki mogą być powlekane cukrem, szelak, lub inne środki powlekające. Syrop może zawierać, poza niniejszymi związkami, sacharozę jako środek słodzący i pewne konserwanty, pigmenty i barwniki oraz środki smakowo-zapachowe. Substancje użyte przy wytwarzaniu tych różnych kompozycji powinny być farmaceutycznie czyste i nietoksyczne w użytych ilościach.
Dla celów doustnego i pozajelitowego leczniczego zastosowania, związki według wynalazku mogą być włączane w roztwór lub zawiesinę. Takie preparaty typowo zawierają co najmniej 0,1% związku według wynalazku, lecz mogą się wahać pomiędzy 0,1 i około 90% wagowych. Ilość związku o wzorze I obecnego w takich kompozycjach jest taka, że uzyskuje się odpowiednie dawkowanie. Roztwory lub zawiesiny mogą również obejmować jeden lub większą liczbę następujących adiuwantów: sterylne rozcieńczalniki, takie jak woda do iniekcji, roztwór solanki, oleje zestalone, poli(glikole etylenowe), glicerynę, glikol propylenowy lub inne syntetyczne rozpuszczalniki; środki przeciwbakteryjne, takie jak alkohol benzylowy lub metyloparaben; przeciwutleniacze, takie jak kwas askorbinowy lub wodorosiarczyn sodu; środki chelatujące, takie jak kwas etylenodiaminetetraoctowy; bufory, takie jak octanowe, cytrynianowe lub fosforanowe oraz środki do ustawiania toniczności, takie jak chlorek sodu lub dekstroza. Pozajelitowy preparat można zamknąć w ampułki, jednorazowe strzykawki lub
PL 205 708 B1 wielodawkowe fiolki ze szkła lub plastyku. Korzystne kompozycje i preparaty może określić specjalista w dziedzinie.
Związki według wynalazku można również podawać miejscowo i w tym wypadku nośnik może dogodnie obejmować roztwór, maść, lub podstawę żelu. Podstawa, np., może obejmować jeden lub większą liczbę następujących: wazelinę, lanolinę, poli(glikole etylenowe), wosk pszczeli, olej mineralny, rozcieńczalniki, takie jak woda i alkohol oraz emulgatory i stabilizatory. Miejscowe preparaty mogą zawierać stężenie związku o wzorze I lub jego farmaceutycznej soli od około 0,1 do około 10% (masy na jednostkę objętości).
Związki o wzorze 1 są agonistami receptorów muskarynowych M-1. Ponadto związki o wzorze I są selektywnymi agonistami tego konkretnego receptora muskarynowego. Związki według wynalazku wykazują szczególnie przydatne właściwości związane z ich biodostępnością, farmakokinetyką, bezpieczeństwem i skutecznością. Agonistów muskarynowych, w tym ich profile wiązania podtypów, można zidentyfikować sposobami dobrze znanymi w dziedzinie.
W jednej z odmian, przedmiotem wynalazku jest zastosowanie związków o wzorze I do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń związanych z receptorami muskarynowymi, które obejmuje podawanie pacjentowi potrzebującemu skutecznej ilości związku o wzorze 1. Tak więc, wynalazek bierze pod uwagę różne zaburzenia, zarówno te opisane jako leczone w wynalazku jak i inne, które mogą być leczone agonistami, dobrze znanymi specjalistom w dziedzinie.
Jest znanych wiele zaburzeń, które można leczyć agonistami muskarynowymi, zgodnie z ustaloną i przyjętą klasyfikacją, podczas gdy innych nie można. Np., pojmowanie jest złożonym i czasami słabo zdefiniowanym zjawiskiem. Jednakże szeroko przyjmuje się, że pojmowanie obejmuje różne domeny. Te domeny obejmują pamięć krótkotrwałą, pamięć długotrwałą, pamięć roboczą, funkcje wykonawcze i uwagę.
Wiadomo, że związki według wynalazku są przydatne do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń charakteryzujących się niedoborem w dowolnej z domen pojmowania wymienionych powyżej lub w innych aspektach pojmowania. Tak więc termin zaburzenia pojmowania ma obejmować dowolne zaburzenie charakteryzujące się niedoborem w jednej lub większej liczbie domen pojmowania, w tym między innymi pamięci krótkotrwałej, pamięci długotrwałej, pamięci roboczej, funkcjach wykonawczych i uwadze.
Jednym z zaburzeń pojmowania, objętych wynalazkiem jest związany z wiekiem spadek pojmowania. To zaburzenie nie jest dobrze zdefiniowane w dziedzinie, lecz obejmuje spadek w domenie pojmowania, szczególnie domenie pamięci i uwagi, które towarzyszy starzeniu. Innym zaburzeniem pojmowania jest łagodne upośledzenie pojmowania. Ponownie, to zaburzenie nie jest dobrze zdefiniowane w dziedzinie, lecz obejmuje spadek w domenie pojmowania i sądzi się, że obejmuje grupę pacjentów, których większość ma początki choroby Alzheimera.
Innym zaburzeniem pojmowania jest upośledzenie pojmowania związane ze schizofrenią. Związek pomiędzy zakłóceniami pojmowania i innymi objawami schizofrenii nie jest wyraźnie obecnie zrozumiały. Zaobserwowano, że niektórzy ludzie doznają problemów z pojmowaniem znacznie wcześniej, zanim uzyskają dodatnie objawy, podczas gdy inny nabywają pogorszenia pojmowania po pierwszym epizodzie i przy kolejnych nawrotach. Jeszcze innym zaburzeniem pojmowania jest powodowane chemioterapią upośledzenie pojmowania. Osoby przechodzące chemioterapię raka mogą doznawać spadku funkcji pojmowania i ten spadek może być długotrwały. Również, znaczna liczba urazów, w tym udar, niedokrwienie, niedotlenienie, zapalenie, procesy infekcyjne i niedobory pojmowania po operacjach przepływów omijających serca i przeszczepach, niedokrwienie mózgu, uraz rdzenia kręgowego, uraz głowy, okołoporodowe niedotlenienie, zespół płodowy poalkoholowy, zatrzymanie akcji serca i hipoglikemiczne uszkodzenie neuronów, demencja naczyniowa, wielozawałowa demencja, stwardnienie zanikowe boczne, chemioterapia i stwardnienie rozsiane, mogą spowodować niedobory pojmowania jako następstwa, do leczenia za pomocą związków według wynalazku.
Gdy zaburzenia, które można leczyć agonistami muskarynowymi, są znane według ustalonych i przyjętych klasyfikacji, takie klasyfikacje można znaleźć w różnych źródłach. Np., obecnie, czwarte wydanie Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-IV™) (1994, American Psychiatrie Association, Washington, D.C.), stanowi narzędzie diagnostyczne do identyfikacji wielu z zaburzeń opisanych w wynalazku. Również International Classification of Diseases, dziesiąta nowelizacja (CD-10), zapewnia klasyfikację dla wielu z zaburzeń opisanych w wynalazku. Specjalista zauważy, że istnieją alternatywne nomenklatury, nozologie i systemy klasyfikacji dla zaburzeń opisanych w wynalazku,
PL 205 708 B1 w tym opisanych w DSM-IV i ICD-10, i ż e systemy terminologii i klasyfikacji ewoluują z postę pami wiedzy medycznej.
W szczególnie korzystnych odmianach, przedmiotem wynalazku jest zastosowanie zwią zków o wzorze I1 do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń wybranych z grupy obejmują cej: zaburzenia pojmowania (w tym związane z wiekiem zaburzenia pojmowania, łagodne upośledzenie pojmowania, upośledzenie pojmowania związane ze schizofrenią i powodowanego chemioterapią upośledzenia pojmowania), ADHD, zaburzenia nastroju (w tym depresję, manię, zaburzenia maniakalnodepresyjne), psychozę (w szczególności schizofrenię i zaburzenie schizofreniczne), demencję (w tym chorobę Alzheimera, powodowaną AIDS demencję, demencję naczyniową i demencję bez charakterystycznej histologii), chorobę Parkinsona, pląsawicą Huntingtona, ból (w tym ostry ból i przewlekły ból), suchość w ustach, chorobę ciał Lewy'ego (w tym chorobę rozsianych ciał Lewy'ego), afazję (w tym pierwotną afazję i zespoły pierwotnej afazji), zespoły niedociśnieniowe i przewlekłe zapalenie okrężnicy (w tym chorobę Crohna). Leczenie to obejmuje podawanie potrzebującemu pacjentowi skutecznej ilości związku o wzorze 1. To jest, przedmiotem wynalazku jest zastosowanie związku o wzorze 1 lub jego kompozycji farmaceutycznej do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń związanych z receptorami muskarynowymi.
Przyjmuje się, że terminy terapia i leczenie mają obejmować polepszenie objawów związanych z każdym z zaburzeń związanych z receptorami muskarynowymi opisanych w wynalazku. Również przyjmuje się, że specjalista w dziedzinie może wpływać na zaburzenia lecząc pacjenta właśnie dotkniętego zaburzeniami lub profilaktycznie lecząc pacjenta o możliwej podatności na takie zaburzenia skuteczną ilością związku o wzorze 1. Tak więc, terminy terapia i leczenie mają odnosić się do wszystkich procesów, w których może wystąpić spowolnienie, przerwanie, zahamowanie, kontrolowanie lub zatrzymanie postępów zaburzeń opisanych w wynalazku, lecz niekoniecznie wskazywać na całkowitą eliminację wszystkich objawów i mają obejmować profilaktykę takich zaburzeń.
Wiadomo, że wynalazek obejmuje pomocniczą terapię zaburzeń opisanych w wynalazku. Dokładniej, związki o wzorze 1 są przydatne do leczenia zaburzeń, w których niedobór pojmowania jest jednym z objawów w kombinacji z wieloma innymi środkami leczniczymi, w szczególności, w kombinacji ze środkami wzmagającymi działanie AMPA; z typowymi i atypowymi antypsychotykami, w tym olanzapiną; z wieloma środkami, takimi jak związki agonistyczne mGluR, z antagonistami NMDA, z inhibitorami IL 1-6, z innymi ś rodkami cholinergicznymi, w tym inhibitorami cholinesterazy, takimi jak takryna i donepezil oraz związkami hamującymi przetwarzanie białka amyloidowego, w tym inhibitorami przetwarzanie prekursora białka amyloidowego i przeciwciałami skierowanymi na białka amyloidowe; ze środkami przeciwdepresyjnymi, w tym SSRI i SNRI, takimi jak fluoksetyna, paroksetyna i wenlafaksyna; i ze ś rodkami anksjolitycznymi; itp. Przypuszcza się, że kombinacje powyżej są synergicznie korzystne, zapewniając skuteczność przy dawkach będących niewielkim ułamkiem wymaganych dla uzyskania tego samego efektu z indywidualnymi składnikami.
Zgodnie z pomocniczymi terapiami opisanymi powyżej, przykładem wykonania wynalazku jest również produkt zawierający związek o wzorze 1 i jeden lub więcej środków leczniczych wybranych z grupy obejmują cej ś rodki wzmagają ce dział anie AMPA; typowe i atypowe antypsychotyki, w tym olanzapinę; związki agonistyczne mGluR; związki antagonistyczne NMDA; inhibitory IL 1-6; inhibitory cholinesterazy, takie jak takryna i donepezil; związki, które hamują przetwarzanie białka amyloidowego, w tym inhibitory przetwarzania prekursora białka amyloidowego i przeciwciała skierowane przeciwko białkom amyloidowym; antydepresanty, w tym SSRI i SNRI, takie jak fluoksetyna, paroksetyna i wenlafaksyna; i ś rodki anksjolityczne jako połączone preparaty do jednoczesnego, oddzielnego lub kolejnego podawania w leczeniu zaburzeń, w których niedobór pojmowania stanowi jeden z objawów. Innym aspektem wynalazku jest zastosowanie związku o wzorze 1 wraz z jednym lub większą liczbą środków leczniczych wybranych spośród środków wzmagających działanie AMPA; typowych i atypowych antypsychotyków, w tym olanzapiny; związków agonistycznych mGluR; związków antagonistycznych NMDA; inhibitorów IL 1-6; inhibitorów cholinesterazy, takich jak takryna i donepezil; związków hamujących przetwarzanie białka amyloidowego, w tym inhibitorów przetwarzania prekursora białka amyloidowego i przeciwciał skierowanych przeciwko białkom amyloidowym; antydepresantów, w tym SSRI i SNRI takich jak fluoksetyna, paroksetyna i wenlafaksyna; i środków anksjolitycznych do wytwarzania leku jako połączonego preparatu do jednoczesnego, oddzielnego lub kolejnego podawania w leczeniu zaburzeń, w których niedobór pojmowania stanowi jeden z objawów.
W wynalazku, termin jednoczesne, oddzielne lub kolejne podawanie oznacza, że dwa lub większą liczbę środków leczniczych podaje się w przedziale czasowym, który zapewnia, że wszystkie
PL 205 708 B1 środki lecznicze zapewnią pewną aktywność leczniczą w danej chwili. Oznacza to, że lecznicze aktywności powinny zachodzić na siebie co najmniej w pewnym stopniu, chociaż nie muszą być jednoczesne.
W wynalazku, termin pacjent obejmuje ssaka, który cierpi na jedno lub większą liczbę zaburzeń związanych z receptorami muskarynowymi. Wiadomo, że przykładami zwierząt objętych tym terminem są świnki morskie, psy, koty, szczury, myszy, konie, bydło, owce, świnie i ludzie.
W wynalazku, termin skuteczna ilość zwią zku o wzorze 1 odnosi się do iloś ci, to jest dawki, która jest skuteczna w leczeniu zaburzeń opisanych w wynalazku.
Skuteczną ilość może łatwo określić opiekujący się diagnosta, jako specjalista w dziedzinie, stosując konwencjonalne techniki i obserwując wyniki otrzymane w analogicznych okolicznościach. Określając skuteczną ilość, dawkę związku o wzorze 1, opiekujący się diagnosta rozważa kilka czynników, w tym, między innymi: podawany związek o wzorze 1; ewentualne współpodawanie innych terapii; gatunek ssaka; jego rozmiary, wiek i ogólny stan zdrowia; konkretne zaburzenie; stopień wciągnięcia lub ostrość zaburzenia; reakcję indywidualnego pacjenta; tryb podawania; charakterystykę biodostępności podawanego preparatu; wybrany reżim dawkowania; stosowanie innych towarzyszących leków; i inne powiązane okoliczności.
Skuteczna ilość związku o wzorze 1 powinna się wahać od około 0,01 mg na kilogram masy ciała dziennie (mg/kg/dzień) do około 50 mg/kg/dzień i korzystnie od 0,1 mg na kilogram masy ciała dziennie (mg/kg/dzień) do około 20 mg/kg/dzień. Korzystniejsze ilości może określić specjalista w dziedzinie.
Korzystnie związki według wynalazku są stosowane do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń obejmujących zaburzenia pojmowania (szczególnie łagodne upośledzenie pojmowania i upośledzenie pojmowania związane z schizofrenią), chorobę Alzheimera i psychozę, w tym schizofrenię.
Kilka przedklinicznych laboratoryjnych modeli zwierzęcych opisano dla zaburzeń opisanych w wynalazku.
P r z y k ł a d A
Labirynt z promieniowymi ramionami
Opóźnione niedopasowanie do próbnego zadania zastosowano do badania wpływu leków na zapamiętywanie (Pussinen, R. i Sirvio, J. J of Psychopharm 13 : 171-179 (1999); Staubli, U. i in. Proc Natl Acad Sci 91: 777-781 (1994)) w ośmioramiennym promieniowym labiryncie.
Dobrze wytresowane szczury mogły pobierać nagrody pokarmowe z czterech przypadkowo wybranych ramion labiryntu (faza próbkowania). Jakiś czas później, szczurom dano do wyboru osiem otwartych ramion i testowano ich zdolność do zapamiętania i unikania ramion odwiedzonych poprzednio dla otrzymania pokarmu. Ponowne wejście do ramienia, które zawierało przynętę podczas sesji próbkowania, liczono jako błąd odniesienia, podczas gdy wejście do tego samego ramienia więcej niż raz podczas sesji zapamiętania liczono jako błąd roboczy. Łączna (odniesienia + roboczych) liczba błędów podczas sesji zapamiętania rosła z wielkością okresów opóźnienia. Np., młode samce szczurów czyniły 0,66 (+ 0,4) błędów przy 1 minucie opóźnienia, 2 (+ 0,5) błędów przy jednej godzinie opóźnienia i 3,95 (+ 0,2) błędów przy 7 godzinach opóźnienia (obserwacje w tym laboratorium).
Samce szczurów Sprague-Dawley trzymano osobno i utrzymywano cykl 12 godzin światłaciemności (włączanie o godzinie 6 rano). Szczury miały swobodny dostęp do wody i utrzymywano je na poziomie 85% ich masy przy swobodnym karmieniu uzupełniając dietę pokarmem Purina Lab Chow.
Szczury początkowo uczono szukać pokarmu na końcu każdego z ośmiu ramion. Gdy szczury osiągały kryterium nie więcej niż dwu błędów (to jest wejścia do tego samego ramienia więcej niż raz podczas sesji) w ciągu trzech kolejnych dni, wstawiono opóźnienie jednej minuty pomiędzy wybór czwartego i piątego ramienia. Taki trening zapewnił, że szczury zapoznały się dokładnie z proceduralnymi aspektami zadania przed podawaniem leków. Po uzyskaniu trwałych zachowań w zadaniu opóźnienia (to jest nie więcej niż jednego błędu w czasie trzech kolejnych dni), rozpoczęły się testy leku i nośnika z użyciem okresu siedmiu godzin opóźnienia. Nowy zestaw ramion napełniano pokarmem codziennie dla każdego szczura i labirynt dokładnie oczyszczano podczas okresu opóźnienia.
Podczas sesji próbkowania, każdego szczura umieszczano na centralnej platformie z zablokowanym dostępem do wszystkich ośmiu ramion labiryntu. Cztery z ośmiu ramion wybrano przypadkowo i napeł niono pokarmem. Wejś cia do ramion z pokarmem podniesiono i szczury miał y pięć minut na otrzymanie pokarmu na końcu każdego z czterech ramion. Gdy tylko szczur otrzymał pokarm, zabierano go, podawano nośnik lub różne dawki związków i znów umieszczano w jego klatce. Po siedmiu godzinach (sesja zapamiętania), szczura umieszczano znów w centrum platformy z zablokowanym
PL 205 708 B1 dostępem do wszystkich ośmiu ramion. Cztery ramiona poprzednio napełnione pokarmem podczas sesji próbkowania, napełniono i wejścia do wszystkich ośmiu ramion podniesiono. Szczury miały pięć minut na odzyskanie pozostałych czterech kawałków pokarmu. Wejście do nie napełnionego ramienia lub ponowne wejście do poprzednio odwiedzanego ramienia liczono jako błąd. Istotność (p < 0,05) określono stosując analizę wariancji bez powtórzeń z powtarzanymi pomiarami, a następnie test Dunnetta dla porównania z kontrolą.
Dla porównania testowanych związków ze wzorcami, skopolaminę i takrynę podawano podskórnie natychmiast po fazie próbkowania. Działanie skopolaminy, znanego środka amnezyjnego, testowano po trzech godzinach opóźnienia, podczas gdy wpływ takryny, inhibitora cholinesterazy stosowanego w leczeniu choroby Alzheimera, testowano po sześciu godzinach opóźnienia. Skopolamina zakłóciła zapamiętywanie po trzech godzinach opóźnienia w sposób zależny od dawki. Takryna znacząco polepszała retencję po sześciu godzinach opóźnienia w dawce 10, lecz nie 3 mg/kg.
P r z y k ł a d B
Zdobywanie pokarmu w promieniowym labiryncie 8-ramiennym
Wybitną wczesną cechą objawów choroby Alzheimera (AD) jest wyraźny deficyt deklaratywnej pamięci (R. W. Parks, R. F. Zec & R. S. Wilson (red.), Neuropsychology of Alzheimer's disease and other dementias. NY: Oxford University Press str. 3-80 (1993).
Z postępami choroby, dotykane są silnie także inne domeny pojmowania. Pośród regionów mózgu dotykanych wcześnie w postępach choroby Alzheimera jest hipokamp, który jest najważniejszym neuronowym podłożem deklaratywnej pamięci. Differences in the pattern of hippocampal neuronal loss in normal aging and Alzheimer's disease; Lancet, 344: 769-772 (1994). Jednym z behawioralnych testów często stosowanym do oceny funkcji hipokampa w modelach zwierzęcych jest 8-ramienny promieniowy labirynt (Olton D. S. The radial arm maze as a tool in behavioral pharmacology. Physiology & Behavior, 40: 793-797 (1986)).
Uszkodzenia lub farmakologiczna blokada hipokampa przerywa działanie tego zadania. Ponadto, starsze zwierzęta ogólnie wykazują deficyt w tym zadaniu (Porsolt R. D., Roux S. & Wettstein J. G. Animal models of dementia. Drug Development Research, 35: 214-229 (1995)).
W tym teś cie przestrzennego uczenia się i pamię ci, gł odnego szczura umieszcza się w centrum labiryntu i pozwala mu przemierzać labirynt w poszukiwaniu pokarmu umieszczonego na końcu każdego ciągu ramienia. W tej wersji labiryntu, szczur uczy się wygrywającej strategii przesunięć, w której odwiedzone ramię nie jest napełniane. Tak więc, większość skutecznej strategii karmienia jest odwiedzenie każdego ramienia raz. Wersja labiryntu również korzysta z ogólnych procesów uczenia, ponieważ szczur nie zna labiryntu w dniu pierwszym czterodniowego eksperymentu.
Po przybyciu, samce szczurów Sprague Dawley® trzymano osobno w regularnym pomieszczeniu z cyklem oświetlenia i pozostawiono do aklimatyzacji przez co najmniej 4 dni przed testem. Każdego szczura odchudzono i utrzymywano na poziomie 85% końcowej masy ciała przez czas eksperymentu. Właściwą masę ciała utrzymywano regulując przydział pokarmy laboratoryjnego w oparciu o kombinację wieku i codziennych pomiarów masy ciał a szczura.
Sesję rozpoczynano umieszczając pojedynczego szczura w węźle labiryntu i następnie podnoszono wszystkie gilotynowe drzwi, dając swobodny dostęp do wszystkich obszarów labiryntu. Podajnik pokarmu umieszczono na końcu każdego z 8 torów ramion i pojedynczą granulkę pokarmu umieszczano w każdym podajniku pokarmu. Każdą dzienną sesję kończono, gdy szczur odwiedził wszystkie 8 podajników pokarmu lub gdy szczur przekroczył zadany czas (15 minut w dniu 1; 5 minut w dniach 2-4). Zapisywano liczbę wejść w ramiona. Błędy liczono jako powtórne wejścia w ramiona lub błędy pominięcia ramienia w sesji. Zwierzę wykluczano z badania, jeśli nie odwiedziło co najmniej jednego ramienia w dniu 1, 2 ramion w dniu 2 i co najmniej 4 ramion w dniach 3 i 4.
Każdego szczura stochastycznie przydzielono do grupy nośnika lub leku i otrzymywał on taką samą terapię przez czas eksperymentu. Nośnik składał się z 5% gumy arabskiej w sterylnej wodzie. Zastrzyki podawano podskórnie 20-30 minut przed każdą dzienną sesją.
W tym zadaniu zdobywania pokarmu, potraktowane nośnikiem zwierzęta nie wykazywały spójnie znaczącego polepszania wiedzy o labiryncie w porównaniu z liczbą błędów popełnianych w dniu 1.
Stwierdziliśmy, że w związkach ułatwiających polepszanie wiedzy o labiryncie, efektów często nie obserwowano do czwartego dnia treningu. Tak więc wyniki składały się z łącznych błędów z dnia 4 w grupach terapii.
P r z y k ł a d C
Funkcjonalna mobilizacja wewnątrzkomórkowego wapnia
PL 205 708 B1
Komórki CHO z ekspresją muskarynowych podtypów (M1-M5) hodowano jako monowarstwy w DMEM:F-12 (3:1), 10% FBSnz, 20 mM HEPES, 1% pen/strep, 250 pg/ml G418 (GibcoBRL nr 10131-027). Komórki trzyma się w warunkach 95%/5% O2/CO2 i pasażuje co 3-4 dni. Komórki umieszcza się na płytkach 24 godziny przed testem przy gęstości 50000/dołek i 48 godzin wcześniej przy gęstości 25000/dołek (100 pl/dołek) na 96-dołkowych płytkach Costar z czarnymi ściankami, przejrzystym dnem (Costar nr 3603). Komórki inkubuje się następnie z minimalną niezbędną pożywką zawierającą cytoplazmatyczny wskaźnik Ca2+, Fluo-3 (1 mM Fluo zmieszanego 1:1 z 20% kwasem pluronowym, następnie rozcieńczonego do 5 pM końcowego stężenia do hodowli i uzupełnionego 2,5 mM, 50 pl/dołek) w temperaturze 37°C w środowisku zawierającym 5% CO2 przez 60 minut. Komórki przemywa się dwukrotnie 100 pl/dołek buforu przemywania zawierającego zrównoważony roztwór soli Hanksa (HBSS) bez czerwieni fenolowej (IX) (GibcoBRL nr 14065-056), 20 mM HEPES (Sigma nr P8761) i Probenecid (2,5 mM) (100X: 1:100) . Do testu, 100 pl dodaje się do każdego dołka (100 pl leku 2X doda się przez FLIPR). Płytki przemywa się trzy razy stosując wielowkraplacz LabSystems i resztę buforu usuwa się. Płytki również osusza się papierowymi ręcznikami dla usunięcia reszty związku.
Wytwarza się związki 2X (100 pl leku dodane do 100 pl buforu testu obecnego w dołku) w buforze testu zawierającym 2% DMSO, HBSS bez czerwieni fenolowej (IX) (GibcoBRL nr 14065-056), 20 mM HEPES (Sigma nr P8761) i Probenecid (2,5 mM) (100X:1:100).
Płytki umieszczono następnie w instrumencie FLIPR (fluorometric imaging plate reader system, Molecular Devices, Sunnyvale, CA) dla obserwowania fluorescencji komórki (λ^ = 488 nm, = 540 nm) przed i po dodaniu związków.
Selektywność agonisty M1 ocenia się poddając selekcji wobec innych podtypów receptora muskarynowego (M3 i M5) w podobny sposób w trybie agonistycznym i antagonistycznym. Związki poddano również selekcji wobec wielu docelowych białek, jak też strukturalnie pokrewnego sprzężonego z białkiem G receptora (GPCR) dla upewnienia się o selektywności dla receptora M1.
P r z y k ł a d D
Wiązanie funkcyjnego GTP
Kultura komórek: komórki CHO transfekowane ludzkimi receptorami M1-M5 hodowano w zawiesinie lub w monowarstwie. Dla kultur w zawiesinie komórki hodowano w butelkach typu roller ze stałym mieszaniem w temperaturze 37°C i 5% CO2 stosując pożywkę Eagles w modyfikacji Dulbecco/F-12 (3:1) do kultur uzupełnioną 5% płodowej surowicy wołowej, 50 pg/ml tobramycyny i 20 mM HEPES. Monowarstwowe kultury hodowano w kolbach T-225 w temperaturze 37°C i 5% CO2 w pożywkę Eagles w modyfikacji Dulbecco z 10% płodowej surowicy wołowej i 100000 U/l penicyliny/streptomycyny. Komórki zebrano stosując beztrypsynową pożywkę dysocjacyjną przy 95% zlaniu i połączono przez odwirowanie i przechowywano w temperaturze 80°C. Komórki trwale wydzielające ludzkie muskarynowe receptory otrzymano z National Institutes of Health.
Przygotowanie błon: Grudki komórek rozmrożono i zawieszono w 20 objętościach 20 mM buforu z fosforanu sodu, pH 7,4 i homogenizowano dwukrotnie przez 30 s przy wysokich obrotach stosując Tissuemizer. Homogenaty odwirowano przy 200 x g przez 15 minut w temperaturze 4°C. Supernatant usunięto i trzymano na lodzie. Tę procedurę powtórzono dwukrotnie i zebrane supernatanty odwirowano następnie przy 40000 x g przez 45 minut w temperaturze 4°C.
Błony zawieszono przy 5 mg białka/ml i przechowywano w temperaturze 80°C. Jeśli nie wskazano inaczej w opisach przy figurach, błony z komórek M1, M2 i M4 wytworzone z komórek hodowanych w zawiesinie, podczas gdy te z komórek M3 i M5 pochodziły z komórek hodowanych w monowarstwie. Gęstości receptorów (pmol/mg/1 białka błony) wynosiły 9,3, 0,7, 0,6, 0,9 i 4,8 odpowiednio dla receptorów M1-M5.
Prążkowiową tkankę samców szczurów Sprague-Dawley homogenizowano ręcznie w 10 objętościach 10 mM HEPES i 1 mM EGTA, pH 7,4, zawierających kompletny cocktail inhibitora proteazy, 1 mM ditiotreitolu i 10% sacharozy. Homogenat rozcieńczono 6-krotnie i odwirowano przy 1000 x g przez 10 minut w temperaturze 4°C. Supernatant zachowano i grudkę homogenizowano i odwirowano jak powyżej. Połączone supernatanty odwirowano przy 11000 x g przez 20 minut. Powstałą grudkę homogenizowano w 40 objętościach 10 mM HEPES i 1 mM EGTA, pH 7,4, zawierających 1 mM ditiotreitolu i 1 mM MgCl2 i odwirowano przy 27000 x g przez 20 minut. Powstałą grudkę zawieszono w tym samym buforze w stężeniu białka 1,5 mg/ml i próbki zamrożono i przechowywano w temperaturze 80°C.
Wiązanie GTPy35S: Testy prowadzono w 20 mM HEPES, 100 mM NaCl i 5 mM MgCl2 przy pH 7,4 w końcowej objętości 200 pl w 96-dołkowych płytkach Costar w temperaturze 25°C. Dodano 100 pl prepa26
PL 205 708 B1 ratu błon (25 μg białka na dołek dla błon komórkowych i 9-15 μg na dołek dla membran mózgu) zawierającego odpowiednie stężenie GDP, a następnie dodano 50 μl buforu ± testowane związki agonistyczne i antagonistyczne, a następnie 50 μl GTPy35S z wytworzeniem końcowego stężenia w teście 200 pM dla błon CHO i 500 pM dla błon mózgowych. Dla błon CHO, 0,1 μM GDP użyto dla testów receptorów M1, M3 i M5, podczas gdy 1 μM GDP użyto dla testów M2 i M4. Dla błon mózgowych 0,1 μM GDP użyto w testach prowadzonych z anty-Gaq/11, podczas gdy 50 μM GDP użyto dla testów z użyciem anty-Gai (1-3) i anty-Gao. Błony komórek CHO inkubowano przez 30 minut w temperaturze 25°C z agonistami i antagonistami, a następnie dodawano GTPy35S i inkubowano jeszcze przez 30 minut. Błony mózgowe inkubowano przez 20 minut w temperaturze 25°C z agonistami i antagonistami, a następnie dodawano GTPy35S i inkubowano jeszcze przez 60 minut. Stosowano wcześniejszą inkubację dla zapewnienia, że związki agonistyczne i antagonistyczne znajdowały się w równowadze podczas okresu znakowania.
Dla określenia łącznego wiązania przez błony, dodano 50 μl zawiesiny kulek SPA powlekanych aglutyniną zarodków pszenicy (WGA). Po 15 minutach płytki odwirowano przy 1000 x g przez 15 minut i radioaktywność określono stosując licznik płytek Wallac. Dla określenia wiązania ze specyficznymi białkami G, znakowane 35S błony solubilizowano przez 30 minut w 0,27% Nonidet P-40 (20 μl/dołek roztworu zawierającego 1,5 ml 10% Nonidet P-40 dla każdych 3,5 ml buforu testu), a następnie dodano żądane przeciwciało (10 μl/dołek) otrzymując końcowe rozcieńczenie 1/400 do 1/100 i inkubowano jeszcze przez 60 minut. Dodano 50 μl zawiesiny kulek SPA powlekanych anty-IgG na dołek, płytki inkubowano przez 3 godziny i następnie odwirowano i radioaktywność określono jak powyżej. Każdą butlę powlekanych WGA kulek SPA zawieszono w 10 ml buforu testu i każdą butlę powlekanych anty-IgG kulek SPA zawieszono w 20 ml buforu testu. Białko określono stosując test kwasu bicynchoninowego.
Materiały: 35S-GTPy35S (1000-1200 Ci/mmol), kulki SPA powlekane anty-króliczą-IgG i antymysią-IgG kulek SPA i kulki SPA powlekane WGA otrzymano z Amersham (Arlington Heights, IL). Królicza anty-Gaq/11 i królicza anty-Gai(1-3) pochodziły z Santa Cruz Biotechnologies (Santa Cruz, CA). Mysie monoklonalne anty-Gao pochodziły z Chemicon (Temecula, CA) . Oksotremoryna M i pirenzepina pochodziły z Research Biochemicals Inc. (Natick, MA). 11-{[2-((dietyloamino)metylo)-1-piperydynylo]acetylo}-5,11-dihydro-6H-pirydo[2,3b]-[1,4]benzodiazepin-6-on (AFDX 116) zsyntetyzowano w Eli Lilly. Pełny cocktail inhibitora proteazy i 10% Nonidet P-40 pochodziły z Boehringer Mannheim (Indianapolis, IN).
Selektywność agonistów M1 ocenia się przez selekcję na innych podtypach receptora muskarynowego (M2 i M4) w podobny sposób w trybie agonistycznym i antagonistycznym. Związki poddano również selekcji wobec wielu docelowych białek, jak też strukturalnie pokrewnego sprzężonego z białkiem G receptora (GPCR) dla upewnienia się o selektywności dla receptora M1.

Claims (13)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Związek agonistyczny receptora muskarynowego o wzorze 1:
    w którym 2
    R2 oznacza fenyl ewentualnie podstawiony jednym do trzech podstawników niezależnie wybranych z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl i cyjano;
    R3 wybiera się z grupy obejmującej fenyl ewentualnie podstawiony jednym do trzech podstawników niezależnie wybranych z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl, cyjano i nitro; naftyl ewentualnie podstawiony jednym do trzech podstawników niezależnie wybranych
    PL 205 708 B1 z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl, cyjano i nitro; furanyl; lub 1,3-benzodioksolil ewentualnie podstawiony jednym podstawnikiem wybranym z grupy obejmującej halogen, C1-C4-alkoksyl i C1-C4-alkil;
    lub jego farmaceutycznie dopuszczalne sole addycyjne.
  2. 2. Związek według zastrz. 1, w którym R2 oznacza fenyl.
  3. 3. Związek według zastrz. 1, albo 2, w którym R3 oznacza fenyl podstawiony jedym atomem halogenu.
  4. 4. Związek według zastrz. 1, albo 2, albo 3, w którym R3 oznacza fenyl podstawiony jednym atomem fluoru.
  5. 5. Związek według zastrz. 1, albo 2, albo 3, w którym R3 oznacza fenyl podstawiony jednym atomem fluoru w pozycji para.
  6. 6. Związek według zastrz. 1, którym jest (R)-(6-(1-((4-fluorobenzylo)metyloamino)etylidenoamino)-2(R)-hydroksyindan-1-ylo)amid kwasu bifenylo-4-karboksylowego lub jego farmaceutycznie dopuszczalna sól.
  7. 7. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera związek określony w zastrz. 1-6 i jeden lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnych nośników, zaróbek lub jego rozcieńczalników.
  8. 8. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1-6 jako leku.
  9. 9. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1-6 do wytwarzania leku do leczenia zaburzeń poznawczych.
  10. 10. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1-6 do wytwarzania leku do leczenia choroby Alzheimera.
  11. 11. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1-6 do wytwarzania leku do leczenia schizofrenii.
  12. 12. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1-6 do wytwarzania leku do leczenia łagodnego upośledzenia poznawczego.
  13. 13. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1-6 do wytwarzania leku do leczenia upośledzenia poznawczego związanego ze schizofrenią.
PL368272A 2001-09-21 2002-09-09 Związki agonistyczne receptora muskarynowego, kompozycja zawierająca te związki i zastosowanie tych związków PL205708B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US32414101P 2001-09-21 2001-09-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL368272A1 PL368272A1 (pl) 2005-03-21
PL205708B1 true PL205708B1 (pl) 2010-05-31

Family

ID=23262266

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL368272A PL205708B1 (pl) 2001-09-21 2002-09-09 Związki agonistyczne receptora muskarynowego, kompozycja zawierająca te związki i zastosowanie tych związków

Country Status (28)

Country Link
US (1) US7326731B2 (pl)
EP (1) EP1436249B1 (pl)
JP (1) JP4409290B2 (pl)
KR (1) KR20040053130A (pl)
CN (1) CN1556788A (pl)
AR (1) AR036602A1 (pl)
AU (1) AU2002332541B2 (pl)
BR (1) BR0212353A (pl)
CA (1) CA2461218C (pl)
CZ (1) CZ2004397A3 (pl)
EA (1) EA006853B1 (pl)
EC (1) ECSP045027A (pl)
EG (1) EG25796A (pl)
ES (1) ES2439093T3 (pl)
HR (1) HRP20040230B1 (pl)
HU (1) HUP0401883A2 (pl)
IL (2) IL160751A0 (pl)
MX (1) MXPA04002633A (pl)
MY (1) MY142358A (pl)
NO (1) NO20041107L (pl)
NZ (1) NZ531135A (pl)
PE (1) PE20030707A1 (pl)
PL (1) PL205708B1 (pl)
SV (1) SV2004001250A (pl)
TW (1) TWI327997B (pl)
UA (1) UA76492C2 (pl)
WO (1) WO2003027061A2 (pl)
ZA (1) ZA200402191B (pl)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60335380D1 (de) * 2002-08-22 2011-01-27 Lilly Co Eli Muskarine agonisten
EP1644320B1 (en) 2003-07-03 2008-01-16 Eli Lilly And Company Indane derivates as muscarinic receptor agonists
JP5036310B2 (ja) 2003-08-06 2012-09-26 セノミックス インコーポレイテッド 新規な風味、風味改質剤、味覚剤、味覚向上剤、旨味および甘味味覚剤、および／またはそれらの向上剤および使用
US7638515B2 (en) 2003-10-08 2009-12-29 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Tetrahydronaphthalene derivatives, process for their production and their use as anti-inflammatory agents
JP4638438B2 (ja) 2003-10-08 2011-02-23 バイエル・シエーリング・ファーマ アクチエンゲゼルシャフト テトラヒドロナフタレン誘導体類、それらの生成方法及び抗−炎症剤としてのそれらの使用
US7662821B2 (en) 2003-10-08 2010-02-16 Bayer Schering Pharma Ag Tetrahydronaphthalene derivatives, process for their production and their use as anti-inflammatory agents
US20080153859A1 (en) 2004-04-05 2008-06-26 Hartmut Rehwinkel Multiply-substituted tetrahydronaphthalene derivatives, process for their production and their use as anti-inflammatory agents
DE102004029325A1 (de) * 2004-06-10 2006-01-05 Universität Leipzig Arzneitmittel zur Behandlung des fetalen Alkoholsyndroms
DE102005017316A1 (de) * 2005-04-14 2006-10-19 Schering Ag Tetrahydronaphthalinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Entzündungshemmer
JP2009521531A (ja) * 2005-12-27 2009-06-04 ザ・ユニバーシティ・オブ・トレド ムスカリンアゴニスト及びその使用方法
EP1834948A1 (de) 2006-03-15 2007-09-19 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Tetrahydronaphthalinderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Entzündungshemmer
EP3398452B1 (en) 2006-04-21 2024-10-02 Firmenich Incorporated Comestible compositions comprising high potency savory flavorants
EP2296471A4 (en) 2008-05-15 2012-03-14 Univ Toledo MUSCARIC ACID AGONISTS AS COGNITIVE ENHANCERS
ES2551899T3 (es) * 2008-06-19 2015-11-24 Xcovery Holding Company Llc Compuestos de piridazina carboxamida sustituidos como compuestos inhibidores de cinasas
WO2011120912A1 (en) 2010-03-29 2011-10-06 Basf Se Fungicidal iminoderivatives
TWI402072B (zh) 2010-10-19 2013-07-21 Lilly Co Eli 組織蛋白酶ｓ抑制劑化合物
WO2012149524A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 The University Of Toledo Muscarinic agonists as enhancers of working memory and cognitive flexibility

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0874625T3 (da) 1996-01-22 2005-06-20 Lilly Co Eli Indanderivater til antipsykotiske præparater
US6211364B1 (en) * 1997-01-22 2001-04-03 Eli Lilly And Company Process for preparing indane-like compounds
CA2297906A1 (en) * 1997-07-22 1999-02-04 Bret Eugene Huff Pharmaceutical compounds

Also Published As

Publication number Publication date
NO20041107L (no) 2004-03-15
SV2004001250A (es) 2004-01-07
MXPA04002633A (es) 2004-07-08
HRP20040230B1 (hr) 2012-01-31
ECSP045027A (es) 2004-04-28
EA200400454A1 (ru) 2004-08-26
EG25796A (en) 2012-08-06
CA2461218C (en) 2011-02-01
JP4409290B2 (ja) 2010-02-03
ZA200402191B (en) 2005-05-11
PL368272A1 (pl) 2005-03-21
HRP20040230A2 (en) 2004-08-31
TWI327997B (en) 2010-08-01
CN1556788A (zh) 2004-12-22
AR036602A1 (es) 2004-09-22
HUP0401883A2 (hu) 2004-12-28
MY142358A (en) 2010-11-30
IL160751A0 (en) 2004-08-31
IL160751A (en) 2010-11-30
WO2003027061A2 (en) 2003-04-03
EP1436249A2 (en) 2004-07-14
CZ2004397A3 (cs) 2005-03-16
EP1436249B1 (en) 2013-11-06
WO2003027061A3 (en) 2003-07-31
NZ531135A (en) 2006-09-29
UA76492C2 (en) 2006-08-15
JP2005503433A (ja) 2005-02-03
ES2439093T3 (es) 2014-01-21
US20040242584A1 (en) 2004-12-02
US7326731B2 (en) 2008-02-05
PE20030707A1 (es) 2003-08-21
CA2461218A1 (en) 2003-04-03
EA006853B1 (ru) 2006-04-28
BR0212353A (pt) 2004-07-27
KR20040053130A (ko) 2004-06-23
AU2002332541B2 (en) 2008-05-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL205708B1 (pl) Związki agonistyczne receptora muskarynowego, kompozycja zawierająca te związki i zastosowanie tych związków
CN104203914B (zh) 作为lsd1抑制剂的(杂)芳基环丙胺化合物
EP1644320B1 (en) Indane derivates as muscarinic receptor agonists
RU2543485C2 (ru) Гетероциклические агонисты рецепторов желчных кислот tgr5, фармацевтическая композиция, способы их получения и применения
CA3133753A1 (en) Novel small molecule inhibitors of tead transcription factors
TW202227433A (zh) 中環或大環之經苄基取代的雜環衍生物及相關用途
KR20060095865A (ko) 글리신 수송 억제제로서의 비시클릭 [3.1.0] 유도체
AU2002332541A1 (en) Muscarinic agonists
US20060154922A1 (en) Muscarinic agonists
EP1608617B1 (en) Muscarinic agonists
WO2022053013A1 (zh) 苯并含氧杂环类化合物及其医药应用
HK1070062A (en) Quinoline-and naphthalenecarboxamides, pharmaceutical compositions thereof and their use as calpain inhibitors
MXPA00007383A (en) Potassium channel inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20140909