PL165207B1 - Sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny bialkowej PL PL PL PL PL - Google Patents
Sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny bialkowej PL PL PL PL PLInfo
- Publication number
- PL165207B1 PL165207B1 PL90286279A PL28627990A PL165207B1 PL 165207 B1 PL165207 B1 PL 165207B1 PL 90286279 A PL90286279 A PL 90286279A PL 28627990 A PL28627990 A PL 28627990A PL 165207 B1 PL165207 B1 PL 165207B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- toxin
- imb
- parasporal
- btd
- bacillus thuringiensis
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 title description 34
- 239000003053 toxin Substances 0.000 title description 34
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 claims abstract description 11
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 101000664393 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus S-layer protein Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 claims abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 claims 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 abstract description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 33
- 230000000749 insecticidal effect Effects 0.000 description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 10
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 7
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 7
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 6
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 4
- 241000258916 Leptinotarsa decemlineata Species 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000256118 Aedes aegypti Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 description 3
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 241000256250 Spodoptera littoralis Species 0.000 description 3
- 241000254109 Tenebrio molitor Species 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 2
- 241000122098 Ephestia kuehniella Species 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 241000254112 Tribolium confusum Species 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 2
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N (2s)-2-azanyl-5-[bis(azanyl)methylideneamino]pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N 0.000 description 1
- HTCSFFGLRQDZDE-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-2-phenylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)(C)C1=CC=CC=C1 HTCSFFGLRQDZDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- 108010082340 Arginine deiminase Proteins 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241000657422 Cortinarius coleoptera Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241001631715 Dendrolimus Species 0.000 description 1
- 241000630736 Ephestia Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108010048581 Lysine decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- RKIFNGBLHWXIQX-BVBQBVPCSA-N OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O RKIFNGBLHWXIQX-BVBQBVPCSA-N 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000254105 Tenebrio Species 0.000 description 1
- 239000012963 UV stabilizer Substances 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N nalidixic acid Chemical compound C1=C(C)N=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=C1 MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000210 nalidixic acid Drugs 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 235000015175 salami Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000004381 surface treatment Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000010408 sweeping Methods 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 235000011845 white flour Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/32—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
- C07K14/325—Bacillus thuringiensis crystal peptides, i.e. delta-endotoxins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
- A01N63/22—Bacillus
- A01N63/23—B. thuringiensis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/50—Isolated enzymes; Isolated proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/075—Bacillus thuringiensis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
1. Sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny bialkowej, znamienny tym, ze Bacillus thuringiensis var. donegani NC IMB 40152 poddaje sie hodowli a nastepnie sporogene zie i kolejnej lizie zarodni. PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny białkowej, przez hodowlę Bacillus thuringiensis var. donegani (Btd) NC IMB 40152.
Ogólnie wiadomo, że rozmnażająca się przez zarodniki bakteria Bacillus thuringiensis (Bt) wytwarza, w etapie sporogenezy, kryształy parasporalne o charakterze białkowym i wykazuje działanie owadobójcze przeciw wielkiej liczbie owadów należących do rzędu Lepidoptera, Diptera i Coleoptera. Kryształy takie, gdy zostaną spożyte przez owada wrażliwego na ich działanie, powodują nieodwracalne zmiany w błonie śluzowej jego przewodu pokarmowego, co w konsekwencji powoduje zaprzestanie pobierania pożywienia i następną śmierć.
Znanych jest wiele odmian Bt, które różnią się od siebie parametrami biochemicznymi i/lub fizjologicznymi i ich specyficznym/selektywnym działaniem owadobójczym. Niektóre z tych odmian sprzedawane są w preparatach stosowanych do zwalczania owadów.
Odmiany Bt znane dotychczas podzielone są na podstawie ich specyficznej/selektywnej aktywności na trzy typy chorobotwórcze przedstawione w tabeli 1.
Tabela 1
| Typ chorobotwórczy | Specyficzne działanie owadobójcze | Główne odmiany |
| A | Lepidoptera | kurstaki |
| B | Diptera | israelensis |
| C | Coleoptera | teberionis san diego |
Jako typ chorobotwórczy C, o specyficznym działaniu przeciw tęgopokrywym, znane są w stanie techniki tylko dwie odmiany tj. odmiana tenerionis, opisana w europejskim zgłoszeniu patentowym EPO 149 162 i odmiana san diego opisana w EPO 202739.
Celem wynalazku było opracowanie sposobu wytwarzania toksyny, posiadającej przewyższające specyficzne działanie owadobójcze przeciw tęgopokrywym, z której otrzymywano by preparat prościej, taniej i skuteczniejszy.
Obecnie znaleziono odmianę Bacillus thuringiensis, typ chorobotwórczy C, oznaczony ver. donegani (Btd) NC IMB 40152 i opracowano związaną z nim toksynę, która poza tym, że okazała się korzystniejsza w porównaniu ze znanym dotychczas chorobotwórczym typem C bakterii Bt, z uwagi na jej owadobójcze działanie powierzchniowe, w preparatach i w zastosowaniach rolniczych, nieoczekiwanie okazało się być środkiem owadobójczym o działaniu systemicznym.
Sposobem według wynalazku wytwarza się krystaliczną, parasporalną toksynę białkową na drodze hodowli Bacillus thuringiensis var. donegani NC IMB 40 152 po sporogenezie i kolejnej lizie zarodni.
Otrzymaną sposobem według wynalazku toksynę stosuje się do zwalczania owadów, zwłaszcza tęgopokrywych, przez rozpylenie na rośliny lub ich części takie jak łodygi, liście lub do gleby, w której one rosną, odpowiedniej ilości Btd NC IMB 40152, pochodzącego z niego preparatu lub toksyny jako takiej lub w odpowiednim środku zawierającym obojętny stały lub ciekły nośnik i inne dodatki.
165 207
Bacillus thuringiensis var. donegani (Btd) NC IMB 40152 ma specyficzne działanie owadobójcze przeciw Coleoptera i w szczególności przeciw rolniczo ważnym celom takim jak chrząszcz żerujący na liściach Leptinotarsa decemlineata (Doriphora ziemniaczana), a zatem należy do typu C według A. Kriega i wsp. Z. Ang. Ent. 96 (1983) 500-508.
Btd NC IMB 40152 różni się od znanych odmian tym, że wykazuje inne własności biochemiczne i fizjologiczne, a zwłaszcza różni się od odmian tenebrionis i san diego również tym, że wytwarza kryształy parasporalne o innej charakterystyce morfologicznej, jak również o różnym zachowaniu z fizyko-chemicznego i fizjologicznego punktu widzenia.
Morfologia i charakterystyka biochemiczna Btd NC IMBP 40152.
Bacillus thuringiensis var. donegani (Btd) NC IMB 40152 wyodrębniono z larw Tenebrio molitor zmarłych w sposób naturalny i skatalogowano na wewnętrzny użytek laboratorium pod tradycyjnym kodem Bt/43.
Wyodrębnienie nastąpiło na pożywce agarowej, którą uczyniono selektywną poprzez dodanie 10 jeden/ml penicyliny G. Zawartość owadów wstępnie traktowano w temperaturze 80°C przez okres 15-20 minut, w celu selektywnego wyodrębnienia bakterii rozmnażającej się przez zarodniki. Hodowla tych mikroorganizmów została zdeponowana dnia 31 maja 1989 zgodnie z Porozumieniem Budapesztańskim w Narodowej Kolekcji bakterii Przemysłowych (w The National Collection of Industrial and Marine Bacteria Ltd., Torry Research Station, P. O. Box 31, 135 Abbey Road, Aberdeen AB 98 DG, Szkocja. W. Brytania), gdzie uzyskała numer NC IMB 40152.
Btd NC IMB 40152 można utrzymywać na zwykłych pożywkach, np. na pożywce agarowej w temperaturze 25-30°C i może być rozmnażana znanymi sposobami.
Oznaczanie rodzaju i gatunku prowadzono na podstawie własności morfologicznych i biochemicznych mikroorganizmu.
Morfologia.
Wyizolowane kolonie Btd NC IMB 40152 na pożywce Nutrient Agar są płaskie o kształcie kołowym albo nieregularnym, mają one zabarwienie białawe. Komórka wegetatywna ma kształt małego pręta, jest Gram-dodatnia, ma średnicę 1-2pm i długość 6-8/ym. Temperatura wzrostu zawarta jest w zakresie 25-35°C.
Gdy hodowlę mikroorganizmu poddaje się obróbce w autoklawie w temperaturze 121°C przez 15 minut, zarówno zarodniki jak i toksyny ulegają dezaktywacji.
Usytuowanie zarodnika jest centralne lub subterminalne. Obserwowany pod mikroskopem przemiatającym kryształ parasporalny ma kształt równoległościanu o kwadratowej podstawie z dwoma piramidami o równych podstawach na górnej i dolnej podstawie, o wymiarach zawartych w zakresie 1-2//m a zatem są inne niż parasporalny kryształ produkowany przez Bt odmian tenebrionis i san diego, które w obu przypadkach są płaskie o podstawie romboidalnej.
Własności biochemiczne. Btd NC IMB 40152 na jego etapie wegetatywnym, ma własności biochemiczne podane w tabeli 2.
Tabela 2
| Próba | Reakcja |
| 1 2 | |
| zakwaszenie glukozy | + |
| zakwaszenie mannitu | - |
| zakwaszenie mannozy | - |
| zakwaszenie sacharozy | + |
| zakwaszenie laktozy | - |
| zakwaszenie arabinozy | - |
| zakwaszenie ksylozy | - |
| zakwaszenie salicyny | + |
| hydroliza eskuliny | + |
| hydroliza skrobi | + |
| hydroliza żelatyny | + |
| produkcja gazu z glukozy | - |
| di-hydrolaza argininy | - |
| dekarboksylaza lizyny | - |
165 207
| 1 2 | |
| dearninaza fenyloalaniny | - |
| ureaza | - |
| katalaza | + |
| lecytynaza (soja) | + |
| reduktaza azotanowa | + |
| reakcja Voges-Proskauera | + |
| wzrost na chitynie | - |
| wzrost w 7% NaCl | - |
| wzrost w temperaturze 50°C | - |
| wzrost w 10 dedn/ml penicyliny G | + |
| wzrost w 10 pg, ml chloramfenikolu | - |
| wzrost w 25 pg/ml sterptomycyny | - |
| wzrost w 30 pg/ml kwasu nalidynowego | - |
| wzrost w 50 pg/ml lizozymu | + |
/Odnośnie do stosowanych metod oznaczeń patrz: „The Prokaryotes, Springer-Verlag, 1981; Manual of Methods for General Bacteriology, The American Society for Microbioloy, 1981.
Różnice pomiędzy Btd 40152 i odmianami znanymi ze stanu techniki można wprowadzić również z porównania własności biochemicznych Btd 40152 i znanych odmian Bt, jak przedstawiono w następującej tabeli 3.
Tabela 3 (Według A. Kriega „The Prokaryotes, Springer-Verlag, 1981, str. 17507; A. Kriega, J. Appl. Ent. 104 (1987), 417-424)
| Odmiana | MAN | SAC | SAL | AMI | CHT | URE | ARG | LOT |
| thuringiensis | + | + | + | + | V | - | + | |
| finitimus | - | + | + | - | + | - | - | |
| alesti | - | - | - | + | V | - | + | |
| kurstaki | - | - | + | + | V | + | + | |
| sotto | - | + | - | + | V | - | - | |
| dendrolimus | - | - | - | + | + | - | V | |
| keniae | - | - | + | + | V | + | + | |
| galleriae | - | - | + | + | V | + | + | |
| canadensis | - | + | + | + | + | - | + | |
| enlomocidus | + | + | - | + | - | - | - | |
| aizawai | - | - | + | + | + | + | + | |
| morrisoni | - | + | - | + | V | - | - | |
| tolworti | - | + | + | + | V | - | + | |
| darmstadiensis | - | - | - | + | - | - | + | |
| toumanoffi | - | - | - | + | - | + | + | |
| thompsoni | - | + | + | + | V | + | + | |
| pakistani | - | + | (+) | + | (+) | - | + | |
| israelensis | + | - | - | - | - | - | ||
| wuhanensis | - | - | - | + | + | - | ||
| tenebrionis | + | + | - | + | - | - | + | - |
| san diego | + | + | - | + | - | - | + | - |
| NCIMB 40152 | - | + | + | + | - | - | - | + |
Uwagi do tabeli 3.
MAN, SAC, SAL - zakwaszenie mannozy, sacharozy i salicyny;
AMI-hydroliza skrobii, CHT-wzrost na chitynie, URE-ureaza,
ARG-di-hydrolaza argininy; LCT-lecytynaza; + = reakcja pozytywna,
- =- reakcja negatywna; (+) = reakcja częściowo pozytywna;;
V = reakcja zmienna.
Charakterystyka dotycząca hodowli i metod wydzielania substancji aktywnej.
Bacillus thuringiensis var. donegani NC IMB 40152 można hodować na zwykłych ciekłych pożywkach takich jak np. pożywka bulionowa, w temperaturze 25-30°C znanymi sposobami. Pod koniec procesu fermentacji i sporogenezy biomasę można oddzielić przez odwirowanie brzeczki fermentacyjnej. Tak oddzieloną biomasę można następnie poddać odparowaniu i liofilizacji, aby otrzymać stały produkt w postaci sproszkowanej, posiadający działanie owadobójcze.
Działanie owadobójcze Btd NC IMB 40152 zasadniczo związane jest z parasporalną, krystaliczną toksyną o charakterze proteinowym, która jest rozpuszczalna w wodzie o obojętnej wartości
165 207 pH, co różni ją od toksyn produkowanych przez Bt var. san diego. Zatem toksyna taka może być oddzielona przez zawieszenie ponownie w wodzie, przy obojętnych wartościach pH, biomasy oddzielonej przez odwirowanie z brzeczki fermentacyjnej po sporogenezie i utrzymywanie tak otrzymanej zawiesiny, przez mieszanie w temperaturze pokojowej przez okres czasu od 1 godziny do 12 godzin.
Po kolejnym odwirowaniu lub filtracji zawiesiny wodnej, roztwór wodny wolny od zarodników i pozostałości pofermentacyjnych można odebrać. Zawiera on w zasadzie białkową toksynę, którą można odzyskać z roztworu za pomocą znanych technik takich jak np. liofilizacja.
Oznaczenie ciężaru cząsteczkowego toksyny za pomocą SDS-elektroforezy na żelu poliakryloamidowym metodą Iaemmli'ego (Nature, 227, 680, 1970) wykazało dwie główne grupy pasm: Pierwszą grupę trzech pasm o ciężarze cząsteczkowym zawartym w zakresie od 64.000 do 72.000. Drugą grupę dwóch pasm, o ciężarze cząsteczkowym zawartym w zakresie od 34.000 do 36.000.
Działanie biologiczne, Btd NC IMB 40152, preparat lub toksyna otrzymana z niego wykazuje działanie owadobójcze typu powierzchniowego jak również typu systemicznego przeciw Coleoptera takim jak np. Leptinotarsa decemlineata.
Natomiast nie zaobserwowano żadnego działania toksycznego w odniesieniu do niektórych Lepidoptera, takich jak Spodoptera littoralis i Ephestia kuehniella, jak również na dwuskrzydłe Aedes aegypti.
Działanie substancji aktywnej na larwy Coleoptera jest takie samo jak obserwowane w przeszłości w przypadku preparatów na bazie Bt „chorobotwórczego typu A“; kilka godzin po traktowaniu larwy przestawały jeść i ginęły po okresie 24 do 48 godzin. Śmierć następowała w wyniku działania toksyny na nabłonek jelitowy owada, który ulegał nieodwracalnym uszkodzeniom.
Btd NC IMB 40152, liofilizowane stałe produkty otrzymane po fermentacji i sporogenezie, jak również parasporalna toksyna białkowa jako taka lub w odpowiedniej kompozycji jest zatem przydatna do zwalczania Coleoptera, które niszczą uprawy rolnicze. Do tego celu, korzystne jest zastosowanie wyodrębnionej toksyny.
W porównaniu z toksynami otrzymanymi ze znanych odmian Bt, a w szczególności z odmianami „chorobotwórczymi typu C“ tenebrio i san diego, toksyna pochodząca z Btd NC IMB 40152 według wynalazku wykazuje większe korzyści finansowo-przemysłowe w odniesieniu do jej wydzielania, do jej zastosowania i do jej działania owadobójczego.
Korzyściami tymi są np.:
Oddzielanie toksyny od środowiska hodowlanego jest prostsze i łatwiejsze dzięki rozpuszczalności tej toksyny w wodzie a w konsekwencji wymieniona toksyna może być otrzymywana w postaci stężonej, wolna od zarodników, komórek i pozostałości pofermentacyjnych.
Stężone wodne roztwory toksyny - które w odróżnieniu od zawiesin lub dyspersji znanych toksyn nie osadzają się - mogą być łatwiej magazynowane i transportowane.
Toksyny mogą być stosowane z ich roztworów łatwiej i skuteczniej niż analogiczne toksyny, które stosuje się zdyspergowane w postaci stałej z uwagi na ich niezgodność z tradycyjnymi rozpuszczalnikami organicznymi stosowanymi w preparatach.
Ponadto nieoczekiwanie stwierdzono korzystną cechę toksyn pochodzących z Btd NC IMB 40152, które poza tym, że mają działanie owadobójcze typu powierzchniowego, wykazują również systemiczne działanie owadobójcze, co odróżnia je od toksyn produkowanych z innych odmian Bt.
Takie działanie systemiczne, które w zasadzie polega na tym, że składnik aktywny migruje do części roślin nieraz bardzo odległych od punktu zastosowania, zapewnia szerszą ochronę roślinie i stwarza możliwość stosowania mniejszej ilości składnika aktywnego; w szczególności toksyna według wynalazku przenosi się poprzez aparat korzeniowy rośliny.
Ponadto toksyna może stać się skuteczna przez dłuższe okresy czasu dzięki temu, że penetruje układ naczyniowy rośliny dając większą ochronę niż środki zewnętrzne, które mają tendencję odszczepiania się i wymywania.
Działanie systemiczne toksyny jest jeszcze nawet korzystniejsze, gdy traktowanie dotyczy roślin na ich etapie rozwoju, które odtąd oferują owadom młode pędy wyrosłe po dacie traktowania.
165 207
Ponadto działanie systemiczne nadaje toksynom wyższą skuteczność przy traktowaniu zapobiegawczym i zmniejsza potrzebę powtarzania traktowań podczas cyklu wzrostu rośliny.
Bacillus thuringiensis var. donegani NC IMB 40152, produkt otrzymany z jego fermentacji i sporogenezy, jak również jego parasporalna toksyna, mogą być sporządzone w postaci cieczy, proszków zawiesinowych, przy użyciu ciekłych lub stałych obojętnych nośników oraz substancji pomocniczych i/lub dodatków, takich jak środki zwilżające, promotory adhezji, środki powierzchniowo czynne, stabilizatory U. V. i jeszcze inne dodatki takie jak normalnie stosuje się przy sporządzaniu preparatów owadobójczych.
W praktycznym zastosowaniu w rolnictwie, dawki odpowiednie, w odniesieniu do toksyny pochodzącej z Btd NC IMB 40152 mieszczą się w zakresie 0,05-4 kg/ha, są korzystnymi dawkami zawartymi w zakresie 0,2-2 kg/ha.
Poniższe przykłady ilustrują przedmiot wynalazku nie ograniczając jego zakresu.
Przykład I. Kolby erlenmeyerki o pojemności 500 ml zawierające 100 ml pożywki składającej się z bulionu tryptonowo-sojowego (OXOIDI zaszczepiono 1 ml 16 godzinnej hodowli Bacillus thuringiensis NC IMB 40152 w pożywce Nutrient Broth. Następnie kolby te utrzymywano przy mieszaniu orbitalnym w temperaturze w zakresie 25-35°C. Sporogenezę sprawdzano na mikroskopie. Pod koniec fermentacji biomasę odwirowano zawieszono ponownie w wodzie o wartość pH 7 i trzymano mieszając przez 3 godziny w temperaturze pokojowej. Roztwór otrzymany po oddzieleniu przez odwirowanie zarodników i pozostałości pofermentacyjnej, liofilizowano i stosowano do oznaczeń aktywności biologicznej lub do sporządzenia preparatów.
Przykład II. Oznaczenia działania owadobójczego preparatu liofilizowanego otrzymanego według przykładu I zasadniczo składającego się z parasporalnej toksyny białkowej prowadzono przez zastosowanie tego preparatu w postaci roztworu wodnego o różnych stężeniach.
Sposób podawania preparatu przy wykonywaniu prób aktywności według stosowanych owadów wyszczególniono poniżej.
Leptinotarsa decemlineata.
Działanie powierzchniowe. Larwy w drugim stadium odżywiono młodymi roślinami ziemniaka traktowanymi przez zanurzenie w wodnym roztworze liofilizowanej toksyny opisanej w przykładzie I.
Warunki otoczenia w czasie prowadzenia obserwacji były następujące:
temperatura 25°C±1°C wilgotność względna 60%±2°C
Końcowe oznaczenie stopnia śmiertelności prowadzono po 48 godzinach od zakażenia. Wyniki podano w tabeli 4.
Działanie systemiczne. Larwy owada w drugim stadium odżywiono młodymi roślinami ziemniaka utrzymywanego odpowiednio przez 12 i 24 godziny w hodowli hydroponicznej zawierającej liofilizowaną toksynę sporządzoną w przykładzie I, rozpuszczoną do stężenia 200 ppm.
Po 48 godzinach trzymania larw w kondycjonowanym otoczeniu, w temperaturze 25°C i przy wilgotności względnej 60% w obu testach stwierdzono 100% stopień śmiertelności.
Tribolium confusum, Tenebrio molitor, Ephestia kuheniella.
Larwy w trzecim stadium rozwoju hodowano w kontrolowanych warunkach w temperaturze 25°C±1°C przy wilgotności 65%±2% w białej mące, do której uprzednio dodano liofilizowany produkt z przykładu I. Stopień śmiertelności oznaczono po 14 dniach po zakażeniu. Wyniki przedstawiono w tabeli 4.
Aedes Aegypti. Działanie. Larwy w trzecim stadium przeniesiono w wodzie destylowanej zawierającej liofilizowany preparat z przykładu I. Larwy utrzymywano w kontrolowanych warunkach w temperaturze 25°C±1°C przy wilgotności względnej 60% i codziennie karmiono. Stopień śmiertelności, podany w tabeli 4, mierzono 5 dni po traktowaniu.
Spodoptera littoralis. Działanie powierzchniowe: larwy drugiego stadium rozwoju żywiono liśćmi tytoniu traktowanego przez zanurzenie w roztworze wodnym liofilizowanej toksyny opisanej w przykładzie I.
165 207
Warunki otoczenia w okresie obserwacji były następujące:
temperatura 22°C±1°C wilgotność względna 60%±2%
Oznaczenie śmiertelności prowadzono po 5 dniach od zakażenia, wyniki przedstawiono w tabeli 4.
Tabela 4
| Rząd | Gatunek | Dawka ppm | % śmiertelności |
| Coleoptera | Leptinotarsa decemlineata | 100 | 100% |
| Tenebrio molitor | 1.000 | 100% | |
| Tribolium confusum | 1.000 | 100% | |
| Lepidoptera Ephestia kuehniella | 1.000 | 0% | |
| Spodoptera littoralis | 500 | 0% | |
| Diptera | Aedes aegypti | 500 | 0% |
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz
Cena 10 000 zl
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny białkowej, znamienny tym, że Bacillus thuringiensis var. donegani NC IMB 40152 poddaje się hodowli a następnie sporogenezie i kolejnej lizie zarodni.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że produkt wyodrębnia się i liofilizuje.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT8921412A IT1231766B (it) | 1989-08-01 | 1989-08-01 | Bacillus thuringiensis var. donegani, preparato o tossina da esso ottenuta aventi attivita' insetticida contro i coleotteri. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL286279A1 PL286279A1 (en) | 1991-12-02 |
| PL165207B1 true PL165207B1 (pl) | 1994-11-30 |
Family
ID=11181378
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL90286279A PL165207B1 (pl) | 1989-08-01 | 1990-07-31 | Sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny bialkowej PL PL PL PL PL |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5120536A (pl) |
| EP (1) | EP0411582B1 (pl) |
| JP (1) | JPH0380074A (pl) |
| AT (1) | ATE128186T1 (pl) |
| AU (1) | AU636633B2 (pl) |
| BR (1) | BR9003738A (pl) |
| DE (1) | DE69022509T2 (pl) |
| DK (1) | DK0411582T3 (pl) |
| ES (1) | ES2077614T3 (pl) |
| HU (1) | HU210680B (pl) |
| IL (1) | IL95224A (pl) |
| IT (1) | IT1231766B (pl) |
| NO (1) | NO300508B1 (pl) |
| PL (1) | PL165207B1 (pl) |
| RU (1) | RU2048099C1 (pl) |
| ZA (1) | ZA905973B (pl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK141790D0 (da) * | 1990-06-08 | 1990-06-08 | Novo Nordisk As | Middel |
| GB9023735D0 (en) * | 1990-11-01 | 1990-12-12 | Ici Plc | Bacterial strain |
| EP0602064B1 (en) * | 1991-08-02 | 1998-12-16 | Mycogen Corporation | Novel microorganism and insecticide |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3346138A1 (de) * | 1983-12-21 | 1985-07-11 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Bacillus thuringiensis var. tenebrionis sowie ein insektizid wirkendes, hieraus erhaeltliches praeparat bzw. toxin sowie deren verwendung zur bekaempfung von coleoptera |
| US4764372A (en) * | 1985-03-22 | 1988-08-16 | Mycogen Corporation | Compositions containing bacillus thuringiensis toxin toxic to beetles of the order coleoptera, and uses thereof |
| US4771131A (en) * | 1985-08-16 | 1988-09-13 | Mycogen Corporation | Cloning and expression of Bacillus thuringiensis toxin gene encoding a protein toxic to beetles of the order Coleoptera |
| US4865981A (en) * | 1985-08-16 | 1989-09-12 | Mycogen Corporation | Cloning and expression of Bacillus Thuringiensis toxin gene toxic to bettles of the order coleoptera |
| US4950471A (en) * | 1987-05-18 | 1990-08-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Acetate selected bacillus thuringiensis and the method of use |
| US4910016A (en) * | 1987-08-03 | 1990-03-20 | Mycogen Corporation | Novel Bacillus thuringiensis isolate |
| US4948734A (en) * | 1987-08-12 | 1990-08-14 | Mycogen Corporation | Novel isolates of bacillus thuringiensis having activity against nematodes |
| US4849217A (en) * | 1987-11-19 | 1989-07-18 | Mycogen Corporation | Novel isolates of bacilus thuringiensis having activity against the alfalfa weevil, hypera brunneipennis |
| US4966765A (en) * | 1988-02-23 | 1990-10-30 | Mycogen Corporation | Novel coleopteran-active Bacillus thuringiensis isolate |
| IT1240335B (it) * | 1990-03-21 | 1993-12-07 | Ministero Dell'universita' E Della Ricerca Scientifica E Tecnologi | Composizioni insetticide a base di bacillus thuringiensis |
-
1989
- 1989-08-01 IT IT8921412A patent/IT1231766B/it active
-
1990
- 1990-07-30 IL IL9522490A patent/IL95224A/en not_active IP Right Cessation
- 1990-07-30 ZA ZA905973A patent/ZA905973B/xx unknown
- 1990-07-30 AU AU59984/90A patent/AU636633B2/en not_active Ceased
- 1990-07-31 DE DE69022509T patent/DE69022509T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-07-31 RU SU904830849A patent/RU2048099C1/ru active
- 1990-07-31 DK DK90114708.2T patent/DK0411582T3/da active
- 1990-07-31 HU HU904691A patent/HU210680B/hu not_active IP Right Cessation
- 1990-07-31 EP EP90114708A patent/EP0411582B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-07-31 AT AT90114708T patent/ATE128186T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-07-31 BR BR909003738A patent/BR9003738A/pt not_active Application Discontinuation
- 1990-07-31 US US07/560,848 patent/US5120536A/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-07-31 PL PL90286279A patent/PL165207B1/pl unknown
- 1990-07-31 NO NO903378A patent/NO300508B1/no not_active IP Right Cessation
- 1990-07-31 ES ES90114708T patent/ES2077614T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-08-01 JP JP2204942A patent/JPH0380074A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL286279A1 (en) | 1991-12-02 |
| BR9003738A (pt) | 1991-09-03 |
| EP0411582B1 (en) | 1995-09-20 |
| IT8921412A0 (it) | 1989-08-01 |
| NO903378D0 (no) | 1990-07-31 |
| EP0411582A1 (en) | 1991-02-06 |
| RU2048099C1 (ru) | 1995-11-20 |
| DE69022509T2 (de) | 1996-03-14 |
| AU5998490A (en) | 1991-02-07 |
| IL95224A0 (en) | 1991-06-10 |
| AU636633B2 (en) | 1993-05-06 |
| HU210680B (en) | 1995-06-28 |
| ES2077614T3 (es) | 1995-12-01 |
| DE69022509D1 (de) | 1995-10-26 |
| DK0411582T3 (da) | 1995-11-06 |
| IT1231766B (it) | 1991-12-21 |
| ZA905973B (en) | 1991-05-29 |
| US5120536A (en) | 1992-06-09 |
| HUT58789A (en) | 1992-03-30 |
| IL95224A (en) | 1995-01-24 |
| NO300508B1 (no) | 1997-06-09 |
| JPH0380074A (ja) | 1991-04-04 |
| ATE128186T1 (de) | 1995-10-15 |
| NO903378L (no) | 1991-02-04 |
| HU904691D0 (en) | 1991-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5837526A (en) | Bacillus strain and harmful organism controlling agents | |
| CA2367775C (en) | A strain of bacillus pumilus for controlling plant diseases | |
| Broadwell et al. | Proteolysis in the gut of mosquito larvae results in further activation of the Bacillus sphaericus toxin | |
| US4935353A (en) | Preparation of strains of Bacillus thuringiensis having an improved activity against certain lepidopterous pests and novel strain produced thereby | |
| Karamanlidou et al. | Toxicity of Bacillus thuringiensis to laboratory populations of the olive fruit fly (Dacus oleae) | |
| JP2571842B2 (ja) | 新規なバチルス・スリンギエンシス菌株、それらの分離方法および関連する組成物 | |
| US5501852A (en) | Biological control of lepidopterons pests using Bacillus thuringiensis | |
| Junge et al. | Strain selection, production, and formulation of the biological plant vitality enhancing agent FZB24® Bacillus subtilis | |
| US6962977B2 (en) | Protein having pesticidal activity, DNA encoding the protein, and noxious organism-controlling agent and method | |
| Stahly et al. | The genus Bacillus-insect pathogens | |
| US5266483A (en) | Bacillus strain and insect pest controlling agent | |
| PL165207B1 (pl) | Sposób wytwarzania krystalicznej, parasporalnej toksyny bialkowej PL PL PL PL PL | |
| Gustafson et al. | Large-scale production and characterization of Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis insecticidal protein from Escherichia coli | |
| US5422106A (en) | Method of controlling coleotera using Bacillus thuringiensis strains MG P-14025 and LMG P-14026 | |
| KR100280380B1 (ko) | 바실러스투린지엔시스 엔티0423 균주의 내독소단백질 및 이를 이용한 미생물 살충제 | |
| JP2002355030A (ja) | バチルス・ポピリエの胞子嚢の製造方法、防除剤及び防除方法 | |
| RU2278159C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes | |
| JP4337193B2 (ja) | ドウガネブイブイの防除方法及び防除剤 | |
| WO1992001383A1 (en) | Process for the production of compositions containing biosynthetic pesticidal products and use of the compositions obtained | |
| Khanna et al. | Control of maize stem borer, Chilo partellus (Swinhoe) by Bacillus thuringiensis based bioinsecticides | |
| CA2118207C (en) | Bacillus thuringiensis m200 for the biological control of agricultural and horticultural entomological pests | |
| CA2022362A1 (en) | Bacillus thuringiensis var. donegani, preparate or toxin obtained from it, endowed with insecticide activity against coleoptera | |
| CS235785B1 (cs) | Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček |