CS235785B1 - Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček - Google Patents
Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček Download PDFInfo
- Publication number
- CS235785B1 CS235785B1 CS691982A CS691982A CS235785B1 CS 235785 B1 CS235785 B1 CS 235785B1 CS 691982 A CS691982 A CS 691982A CS 691982 A CS691982 A CS 691982A CS 235785 B1 CS235785 B1 CS 235785B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- assimilable
- fermentation
- specific
- larvae
- against mosquito
- Prior art date
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims abstract description 7
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims abstract description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 3
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 claims abstract 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 241000255925 Diptera Species 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 241000256113 Culicidae Species 0.000 abstract description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 abstract description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241000237852 Mollusca Species 0.000 abstract 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 5
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 230000000749 insecticidal effect Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 1-[(e)-2-propylsulfonylethenyl]sulfonylpropane Chemical compound CCCS(=O)(=O)\C=C\S(=O)(=O)CCC YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000256059 Culex pipiens Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000256118 Aedes aegypti Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000517097 Ochlerotatus cantans Species 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000008280 chlorinated hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-M dodecyl sulfate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O MOTZDAYCYVMXPC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000003673 groundwater Substances 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Způsob výroby specifického mikrobního
preparátu proti larvám komárů a mu- I ■ chniček z krystaloforního bacila Baoillus
thuringiensis serovar H-14 (israelensis)
submersní metodou za stálého míchání a
vzdušnění při teplotě 29 - 32 °C zaočkováním
do sterilní tekuté půdy Obsahující
asimilovatelná sacharidy a asimilovatelný
organický zdroj dusíku, vyznačený tím.
že asimllovatelných sacharidů a asimilovatelného
zdroje dusíku s obsahem růstových
faktorů a vitaminů se použije v poměru
1 : 1 až 3 s 1 za přidání oligobiogenních
prvků při výchozím pH do 7,5,
přičemž ukončení fermentace je při uvolnění
spor a krystalů a tyto ae z fermentační
půdy isolují při teplotách do 80 °C
za přídavku smáčedla a ochranné látky
Description
Předmětný vynález se vztahuje na výrobu nového bakteříjního preparátu jako vysoce selektivního biologického přípravku na hubení larev komárů a muchniček sajících krev·
Boj e komáry a muchničkami jako trapiči a přenašeči nákaz je veden ničením jejich larev v přírodních vodách· Dosud k tomu byly používány výhradně chemické insekticidy (chlorované uhlovodíky, karbaaáty, organofosfáty)· Postupně se vytvářela resistence komárů k těmto látkám a byly nahrazovány novými látkami často a vysokou toxicitou pro člověka a živočichy· Vyvolávaly u nich dlouhodobé onemocnění a ireparabilní poškození· Při širokých terárních aplikacích působily tyto přípravky na lovnou zvěř a živočichy ve volné přírodě a způsobily kritické snížení jejich počtu· Rezidua těchto látek se s rostlinami dostávala do potravy zvířat a vyvolávala nekontrolovatelné přemístění toxických látek i mimo místo aplikace· Přechodem do tekoucích a spodních vod se dostávaly zbytky chemických insekticidů do zásob pitné a užitkové vody a narušovaly zdraví i životní prostředí obyvatelstva.
Týto závažné důsledky použití chemických látek proti komárům a hlavně jejich selhání při epidemásh malárie, vedly k hledání přírodních účinných náhrad, které by při vysoké selektivitě nebyly prostředí cizí, nevytvářely rezidua a nepoškozovaly jiné organismy·
V průběhu hledání byly izolovány nové kmeny bakterie Bacillus thuringiensis serovar.H·-7 (aizawai), serovar H»13 (pakistani) a serovar EWL4 (isřaelensis),
235 785 které jsou vysoce selektivně účinné ňa larvy komárů a muchniček, přenašečů nákaz a neškodné pro ostatní organismy v témže prostředí: rostliny, zvířata a člověka· Netvoři v prostředí rezidua, protože jsou součástí potravy dalších organismů a jimi jsou odstraňovány v krátké době z vodního prostředí i z půdy* Ani souvislá velkoplošné ošetření nepoškozuje ostatní organismy·
Způsob podle vynálezu umožňuje provozní výrobu specifického bakterijního preparátu proti larvám komárů a muchniček z krystaloforního bacila Bacillus thuringiensis serovar.H-14 (israelensis), H-13 (pakistani), H-7 (aizawai) ekonomickým způsobem ve velkém měřítku za použití moderního zařízení a v krátkém čase 32 - 70 hod·
Vynález se týká způsobů výroby insektioidního bakterijního preparátu proti komárům z krystalotvorného bacila druhu Bacillus thuringiensis serovar· israelensis, pakistani a aizawai submersní metodou za stálého míchání a vzdušnění při teplotě 29 až 32*C zaočkováním do sterilní tekuté půdy obsahující ašimilovátelné sacharidy a asimilovatelný organický zdroj dusíku, vyznačený tím, že asimilovatelných sacharidů a asimilovatelného zdroje dusíku se použije v poměru 1:1 až 3:1, s obsahem růstových faktorů a vitaminů při výchozím pH do 7»5 > přičemž ukončení fermentaoe je podmíněno uvolněním insekticidní složky, která se dále z fermentační tekutiny izoluje a suší za přídavku smáčedla a ochranné látky·
Bacillus thuringiensis serovar H-14 (israelensis), serovar.H-7 (aizawai) nebo H-13 (pakistani), se kultivuje aerobně v submersních podmínkách ve sterilním tekutém mediu za stálého vzdušnění a míchání. Kultivační doba je 32 ež 7® hod·, optimální teplota 30 - 2*C, výchozí pH se může pohybovat mezi 6,5 a 7>5 a optimem při 7>0 až 7,2·
Během fermentace se pH udržuje v tomto rozmezí pomocí přísady pufru, např. KgHPO^ nebo CaCO^ nebo NaHCO^·
Může být použito různých tekutých medií obsahujících aaimilovatelný uhlík a dusík. Zdrojem uhlíku mohou být ašimilovátelné mono-j di- nebo polysacharidy nap? o glukosa
235 785 maltosa, g^yseíol, škrob. Asimilevatelným zdrojem dusíku je bílkovinný materiál, nejlépe obsahující současně vitamíny a růstové faktory, např. kvasničný autolyzót, kvasničný » extrakt, sušené kvasnice, pepton, sojová mouka, pšeničné mouka, kukuřičné mouka, mouka z odtučněných bavlníkových * klíčků, kaseinový hydrolyzát, kukuřičný extrakt, výpalky po výrobě alkoholických nápojů apod. Je výhodné přidat do kultivačního media ČLigobiogenní prvky jako hořčík, mangan, železo, zinek, vápník a sodík ve formě solí.
Po ukončení vývoje a 90-95 % vysporúlování kultury bacilu, kdy se současně uvolni insekticidní krystaly, se účinná biomasa spor a inkluzí z fermentační tekutiny izoluje a suší. Před izolací se vmíchá do fermentační tekutiny s biomasou laktosa nebo chlorid sodný (5 až 30$) a smáčedlo, např· Triton X 100, Tween 20,
Chevron, Slova sol ap. (5 až 10 $) · Izolace sporového materiálu se provede odstředěním nebo filtrací nebo kombinací obou· Fermentační tekutinu s biomasou je možno zahustit na filmové odparce nebo odstředivkou typu Laval· Sušení je možno provést několika způsoby: proudem teplého vzduchu, lyofilizací, ve vakuové sušárně, ve sprayové sušičce, precipitací acetonem a následujícím vysušením· Materiál spor a krystalů ve formě suchého prášku si zachovává své insekticidní vlastnosti po řadu let, js-li uskladněn v suchu a chladu·
Aktivita přípravku se určuje biologickým testem na larvách komárů Culax pipiens tutogenicus nebo Aedes aegypti a srovnáním s mezinárodním standardem IPS (hodnota 1000 Mezinárodních jednotek)· Aktivita se vyjadřuje v Mezinárodních biologických jednotkách. Biologický test ’ se hodnotí po 48 hod·
Příklad 1.
Živné půda na třepačce, v předočkovacím tanku a farmě nt a čním tanku má složení: 1,3 % sojové mouky, 1,4 $ kukuřičného škrobu, 0,03 % 0,002$ FeSO^THgO,
0,002 $ ZnS04»7H20,0,002 $ C^Cl^ a 0,1 $ NaHCOy Banky
233 785 na třepačku na 500 ml se plní 50 ml půdy a zaočkují se 20 hod· kulturou produkčního kmene vyrostlého na šikmém agaru o složení: agar 2,0 $, škrob 2 %, pepton 0,75 $, kvasničný autolyzát 2 $, K2HP04 0,68 $, oligobiogenní prvky 0,1$ základního roztoku (H^SO^ 17,4 g, MgS04«7H20 12,3 g, MnSO^I^O 0,22 g, FeS°4.7H20 2,0 g, ZnS04.7H20 1,44 g, CaCl2*6H20 18^3 g, H20 1000 ml)· Kulturou z 1 šikmého agaru zaočkovóiiy vždy 3 baňky· Předočkovací tank se očkuje 1 až 3 $ objemu 12 hodinovou kulturou z třepačky, fermentor se oškuje 2-10 % objemu 20 hodin starou kulturrou z předočkovacího tanku. Kultivace ve fermentačním tanku probíhá při 28 až 32*C za vzdušnění 1/2 objemem vzduchu a míchání 300 ot/min· 32-64 hodin, až dojde k uvolnění spor a krystalů z 95 $ buněk kultury· Po skončení fermentace se do tekutiny v tanku s biomasou B. thuringiensis přimíchává laktosa (5 až 10 % počítáno na sušinu) a Slovesol (10-15$), míchá se 30 min· za současného chlazení a pak se celý objem suší na sprayové sušičce (vstup 150 - 200*C, výstup max·
80*C)· Aktivita sušiny se stanoví testěm na larvách Culex pipiens autogenicus a určí se počet jednotek aktivity preparátu·
Přiklad 2.
Živná půda pro předočkovací tank a fermentor se skládá z 1,5 $ pšeničné mouky, 1,0 $ glukosy, 0,5 $ kvasní čného extraktu, 0,1 % HHgPO^I^O, 0,05 $ MgS04.7H20,
0,3 $ NaCl, 0,01 $ Pe2(S04)^· pH upraveno na 7,0 - 7,2· Předočkovací tank se záočkuje 1-3 $ vegetativního inokula produkčního kmene starého 12 hod·, vyrostlého na rotačním třepacím stroji na půdě obsahující 1 $ škrobu,
0,79 $ peptonu, 1,5 $ kvasničného autolyzátu, 0,68 K2HPO4 a 0,1 $ oligobiogenních prvků (viz příklad 1) a kultivuje ee při 29 - 30*C za vzdušnění 1/2 objemem vzduchu a mícháni 200 ot/min 20 hod· Tímto inokuleiů se záočkuje fermentor še stejnou půdou· Kultivace ve fermentoru probíhá při 30*C za vzdušnění 1/2 objemem a mícháním 300 ot/min· až 64 hod·, až dojde k uvolnění spor a krystalů v 95 $ kultury·
235 785
K bio^ase spor a krystalů ve fermentační tekutině se přidá 5-106 NaCl a smáčedlo Syntapon IQ %, sahustí se na filmové odparce a usuší na sprayové sušičce jako v příkladu 1·
V získaném prepařótě se stanoví biotestem na larvách komárů Aedes cantans počet jednotek aktivity·
Příklad 3·
Živná půda v předočkovacím a fermentačním tanku má složení 0,75 % peptonu, 0,5 % kvasničného extraktu, 1,2 % glukosy,
0,5 % KH2P0., 0,05 36 MgS04.7H20, 0,3 % NaCl, 0,01 %
Fe2(S04)j· Živná půda v baňkách na třepačce má složení 1*0 56 glukosy, 1,0 % kvasničného autolyzátu, 0,75 % peptonu,
0,5 % KgHPO^ a 0,1 % oligobiogenních prvků (viz příklad 1)·
Postup při inokulaci a fermentaci jsou stejné jako v příkladě 1·
Biomasa spor a krystalů ve fermentační tekutině se ochladí asi na 20*C a zahustí asi 6-krát na separátoru typu Alfa Laval. Ke koncentrátu se přidá laktosa (5 až 15 % na sušinu) a smáčedlo Triton X 100 (5 až 10 56), míchá se asi 30 min. a precipituje se 2 objemy acetonu. Precipitát se oddělí filtrací a suší se v proudu vzduchu. Aktivita se určuje biotestem na larvách komárů a srovná se s aktivitou mezinárodního standardu·Příklad účinnosti bakterijního preparátu na larvy L3 komára Culex pipiens autogenicus mortalita
| konc. prep. | 24 hod | 48 | hod |
| 0,3 mg/litr | 100 56 | ||
| 0,2 mg/litr | 90 56 | 100 % | |
| 0,1 mg/litr | 10 56 | 60 | 56 |
| 0,05 mg/litr | 10 56 | 50 | % |
| 0,025 mg/litr | 0 56 | 10 | 56 |
| kontrola | mm | mm |
Claims (2)
1· Způsob výroby specifického miknobního preparátu proti larvám komárů a muchniček z kryataloforního bacila Baeilue thuringiensis eerovar H-14 (israelensis),
H-13 (pakistani) a H-7 (aizewai) áubmersní metodou za Stálého míchání a vzdušnění při teplotě 29 · 32*C zaočkováním do sterilní tekutá půdy obsahující asimilovatelná sacharidy a asimilovatelný organický zdroj dusíku, vyznačený tím, že asimilovatelných sacharidů a aeimilovatelného zdroje dusíku s obsahem růstových faktorů a vitaminů se použije v poměru 1:1 až 3:1 za přidání oligobiogenních prvků při výchozím pH do 7»5, přičemž ukončení fermentace je při uvolnění spor a krystalů a tyto se z fermentační půdy izolují a po přídavku smáčedla a ochranné látky se suší při teplotách do 80*C·
2· Způsob podle bodu 1 vyznačený tím, že ae jako ochranná látka použije laktosa nebo chlorid sodný·
Vytiskly Moravské tiskařské závody,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS691982A CS235785B1 (cs) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS691982A CS235785B1 (cs) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS235785B1 true CS235785B1 (cs) | 1985-05-15 |
Family
ID=5417335
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS691982A CS235785B1 (cs) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS235785B1 (cs) |
-
1982
- 1982-09-28 CS CS691982A patent/CS235785B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100903253B1 (ko) | 바실러스 ｓｐ. Ｄ747 균주, 이를 이용한 식물병해방제제및 해충방제제 및 이들을 이용한 방제방법 | |
| Boyetchko et al. | Formulations of biopesticides | |
| EP2083070B1 (en) | Microorganism capable of controlling plant diseases and plant disease-controlling agent using the microorganism | |
| CA2216794C (en) | Use of streptomyces bacteria to control plant pathogens and degrade turf thatch | |
| EP0059460B1 (en) | An insecticide and a process for its preparation | |
| KR102112380B1 (ko) | 식물 해충, 특히 나비목 및 파리목에 대한 생물학적 방제제로서의, 신규한 브레비바실러스 라테로스포루스 균주 | |
| US20080267937A1 (en) | Compositions for Preventing Plant Disease Comprising Bacillus Subtilis Kccm 10639 or Kccm 10640 and Methods of Preventing Plant Disease by Using Them | |
| Taylor et al. | Nannocystis exedens: A potential biocompetitive agent against Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus | |
| AU599374B2 (en) | In vitro method for producing infective bacterial spores and spore-containing insecticidal compositions | |
| KR20220097325A (ko) | 포자 형성속도가 빠르며 나방목 해충에 살충 효과를 가지는 바실러스 투린지엔시스 아종 쿠르스타키(Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki) KNU-25 균주 및 이의 용도 | |
| US5266483A (en) | Bacillus strain and insect pest controlling agent | |
| Casida Jr | Competitive ability and survival in soil of Pseudomonas strain 679-2, a dominant, nonobligate bacterial predator of bacteria | |
| Ampofo | Use of local raw materials for the production of Bacillus sphaericus insecticide in Ghana | |
| CS235785B1 (cs) | Způsob výroby specifického mikrobního preparátu proti larvám komárů a muchniček | |
| CA2118267C (en) | Bioencapsulated biopesticides and process for the manufacture thereof | |
| KR101936471B1 (ko) | 바실러스 아밀로리퀴파시엔스 kbc1109 및 이의 배양액을 유효성분으로 함유하는 식물 병해충 방제용 조성물 | |
| KR900001513B1 (ko) | 미생물 살충제의 제조방법 | |
| WO1995035365A1 (en) | Process for cultivating bacillus thuringiensis biopesticides in wastewater treatment sludges | |
| RU2813789C1 (ru) | Биопрепарат для защиты сельскохозяйственных и декоративных растений от листогрызущих насекомых и способ получения этого биопрепарата | |
| KR102757825B1 (ko) | 포자 형성속도가 빠르며 파리목 해충에 살충 효과를 가지는 바실러스 투린지엔시스 아종 이스라엘렌시스(Bacillus thuringiensis subsp. israelensis) KNU-26 균주 및 이의 용도 | |
| JP3073263B2 (ja) | ドレックスレラ属の新菌株及びそれらを含有する雑草防除剤 | |
| JP2001149066A (ja) | バチルス・ポピリエの胞子嚢の製造方法 | |
| RU2064264C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis, предназначенный для получения препарата против личинок кровососущих двукрылых | |
| JPH0339041B2 (cs) | ||
| CS235786B1 (cs) | Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia |