RU2278159C1 - Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes - Google Patents

Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes Download PDF

Info

Publication number
RU2278159C1
RU2278159C1 RU2004135697/13A RU2004135697A RU2278159C1 RU 2278159 C1 RU2278159 C1 RU 2278159C1 RU 2004135697/13 A RU2004135697/13 A RU 2004135697/13A RU 2004135697 A RU2004135697 A RU 2004135697A RU 2278159 C1 RU2278159 C1 RU 2278159C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
vkpm
bacillus thuringiensis
homoptera
thysanoptera
Prior art date
Application number
RU2004135697/13A
Other languages
English (en)
Inventor
Сергей Ананьевич Тюрин (RU)
Сергей Ананьевич Тюрин
Игорь Арсеньевич Залунин (RU)
Игорь Арсеньевич Залунин
Юрий Иванович Мешков (RU)
Юрий Иванович Мешков
Инна Николаевна Яковлева (RU)
Инна Николаевна Яковлева
Дмитрий Павлович Жужиков (RU)
Дмитрий Павлович Жужиков
Фарход Хакимович Хашимов (UZ)
Фарход Хакимович Хашимов
Владимир Георгиевич Дебабов (RU)
Владимир Георгиевич Дебабов
Original Assignee
Сергей Ананьевич Тюрин
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сергей Ананьевич Тюрин filed Critical Сергей Ананьевич Тюрин
Priority to RU2004135697/13A priority Critical patent/RU2278159C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2278159C1 publication Critical patent/RU2278159C1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к производству бактериальных препаратов. Штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki ВКПМ В-8715 характеризуется значительной инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes, приносящих вред сельскохозяйственным культурам. Заявляемый штамм по токсичности против членистоногих, представителей отрядов Homoptera и Thysanoptera может успешно конкурировать с химическим препаратом карбофос на таких экономически значимых культурах, как хлопок, табак и розы. 6 табл.

Description

Изобретение относится к микробиологической промышленности, микробиологии и биотехнологиии, а именно к производству бактериальных биопрепаратов, предназначенных для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур, являющихся представителями отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.
Эффективная борьба с вредителями играет важную роль в сохранении и увеличении урожая, поскольку потери сельскохозяйственной продукции, связанные с жизнедеятельностью насекомых-вредителей, составляют до 30% от ожидаемого урожая.
В настоящее время для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур широко применяют химические препараты. Длительное использование последних привело к формированию устойчивых к этим препаратам популяций вредителей [1]. Кроме того, химические препараты токсичны для теплокровных животных и полезных насекомых, а также способны проникать в растения, что ухудшает санитарно-гигиенические показатели сельскохозяйственной продукции. Наиболее широко применяемым из химических препаратов является карбофос.
Все возрастающую роль в защите растений от сельскохозяйственных вредителей играют биологические методы борьбы с использованием препаратов, полученных на основе вирусных, бактериальных и грибных патогенов или синтезируемых ими продуктов. Преимущество большинства известных микробиологических средств защиты растений по сравнению с химическими - их экологическая безопасность.
Наиболее широко в качестве микробиологических средств защиты растений используют продукты на основе различных штаммов энтомопатогенной бактерии Bacillus thuringiensis. Эти бактерии при споруляции синтезируют кристаллические белки, или, как их еще называют, дельта-эндотоксины, отличающиеся между собой по спектру энтомопатогенного действия [2]. Дельта-эндотоксины обладают избирательным токсичным действием только по отношению к насекомым.
Некоторые штаммы Bacillus thuringiensis продуцируют еще и термостабильный экзотоксин, который, в отличие от эндотоксина, не обладает избирательностью и проявляет токсичность в отношении очень широкого круга беспозвоночных и позвоночных животных, вызывая также аллергические реакции у лиц, работающих с этими препаратами [3].
Альтернативным направлением является использование продуцентов Bacillus thuringiensis, не синтезирующих термостабильный экзотоксин. На их основе созданы такие биопрепараты как DIPEL (США), лепидоцид (РФ), Novodor (США), Колорадо (РФ). Препараты DIPEL (США) и лепидоцид (РФ) эффективны против большого числа представителей отряда чешуекрылых (Lepidoptera), однако не обладают инсектицидной активностью против представителей отряда жесткокрылых (Coleoptera). В отличие от них препараты Novodor (США), Колорадо (РФ) эффективны только против представителей отряда жесткокрылых (Coleoptera).
Известны штаммы Bacillus thuringiensis, которые обладают инсектицидной активностью против представителей как отряда Coleoptera, так и отряда Lepidoptera [4, 5]. Однако они не токсичны для представителей отрядов Homoptera, Thysanoptera(инсектицидная активность) и Acariformes (акарицидная активность).
Представители этих отрядов (тли, трипсы, растительноядные клещи) имеют трансконтинентальное распространение и являются опасными вредителями многих экономически значимых культур: зерновых, зернобобовых, овощных, плодово-ягодных, а также наносят вред хлопчатнику, лесным, декоративным и лекарственным насаждениям.
Задача заявляемого изобретения - получить штамм бактерий Bacillus thuringiensis, обладающий как инсектицидной, так и акарицидной активностью.
Задача решена путем получения штамма бактерий Bacillus thuringiensis, обладающего инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.
Заявляемый штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) как Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715.
Он получен в результате скрещивания методом Гонзалеса [6] двух родительских штаммов Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226 и Bac.thuringiensis ssp.tenebrionis ВКПМВ-5081.
Штамм ВКПМ В-8715 имеет следующие характеристики.
Культурально-морфологические признаки.
Грамположительные подвижные палочки размером 4,1-1,6 мкм. В стационарной фазе роста образуют кристаллы эндотоксинов и овальные споры.
Хорошо растет на гидролизатах казеина (панкреатический гидролизат казеина - 1, дрожжевой экстракт - 0,2, MnSO4,- 0,5, MgSO4 - 3, KH2PO 4-0,1, глюкоза - 0,6, вода - остальное, рН среды - 7,4-7,5, состав среды в мас.%) при 27-29°С и рН 6,8-7,5. На агаризованной среде казеина (панкреатический гидролизат казеина - 1, дрожжевой экстракт - 0,5, хлористый натрий - 0,05, агар - 1,5, вода - остальное, рН среды - 7,4-7,5, состав среды в мас.%) на 10 сутки при 27-29°С образует однородные колонии 3-5 мм в диаметре, светло-серого цвета со слабо изрезанным краем. Структура мелкозернистая.
По Н-антигену относится к сероварианту III (3а3в).
При культивировании штамма как в жидких, так и на твердых питательных средах выхода фага не наблюдается.
Физиолого-биохимические признаки.
Отношение к источникам углерода: усваивает с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, кукурузный и картофельный крахмал, соевую и кукурузную муку. Не усваивает лактозу, ксилозу, арабинозу, лецитин. Пептонизирует молоко, гидролизует крахмал, желатину не разжижает.
Отношение к источникам азота: восстанавливает нитраты, усваивает аммонийные формы азота.
Отношение к температуре: хорошо растет при 27-29°С, оптимальная температура 28°С.
Отношение к рН среды: хорошо растет при 6,8-7,5, оптимум рН-7,2.
Отношение к кислороду: аэроб.
Отношение к фагам: устойчив к основным производственным фагам П, 22, С/П, И-77, 25-16.
Бета-экзотоксин не синтезирует.
Не патогенен для человека, домашних и диких животных, полезных насекомых, птиц и рыб.
Не является генетически модифицированным штаммом.
Заявляемые свойства: синтезирует компоненты, обладающие инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.
Маркерные признаки: активность против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes, отсутствие способности синтезировать бета-экзотоксин.
Хранение штамма: штамм хранят в ампулах после лиофилизации спорокристаллической смеси обычным способом.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
ПРИМЕР 1. Технологические характеристики заявляемого штамма.
Оценку заявляемого штамма на лабораторных питательных средах проводили по двум основным параметрам, а именно титру спор и концентрации основного инсектицидного белка (дельта-эндотоксина) в сравнении с родительскими штаммами.
Для этого штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715, а также родительские штаммы (ВКПМ В-1226 и ВКПМ В-5081) выращивали в колбах емкостью 750 мл в объеме среды выращивания 200 мл до стадии полной споруляции на круговой качалке при 28°С и встряхивании 250 об/мин. Для выращивания использовали среды следующего состава (мас.%):
1. Среда №1:
панкреатический гидролизат казеина -1,
дрожжевой экстракт - 0,2,
MnSO4, - 0,5
MgSO4 - 3,
KH2PO4 - 0,1
глюкоза - 0,6,
вода - остальное
рН среды - 7,4-7,5
2. Среда №2:
триптический гидролизат казеина -1,
дрожжевой экстракт - 0,2,
MnSO4, - 0,5
MgSO4 - 3,
KH2PO4 - 0,1
глюкоза - 0,6,
вода - остальное
3. Среда №3: рН среды - 7,4-7,5
пептон - 1,
дрожжевой экстракт - 0,2,
MnSO4, - 0,5
MgSO4 - 3,
КН2РО4 - 0,1
глюкоза - 0,6,
вода - остальное
рН среды - 7,4-7,5
Выращенную культуру отделяли центрифугированием и отмывали 1М NaCl в присутствии 0.001М ЭДТА. Кристаллические белки из спорокристаллической смеси растворяли в карбонатном буфере рН 11,0 в течение часа, не растворившийся осадок отделялся центрифугированием, рН надосадочной жидкости доводили до 10,0. Концентрацию белка определяли по методу Бредфорда [7], используя бычий сывороточный альбумин в качестве стандарта. Полноту растворения контролировали повторной экстракцией в том же буфере. При повторной экстракции растворялось не более 7% белка. Определение титра жизнеспособных спор проводили на чашках Петри с агаризованной средой следующего состава (мас.%)
панкреатический гидролизат казеина -1,
дрожжевой экстракт - 0,5,
хлористый натрий - 0,05
агар- 1,5
вода - остальное
рН среды - 7,4 - 7,5
Результаты исследований приведены в таблице 1:
Таблица 1.
Питательные среды Среда №1: Среда №2: Среда №3:
Штаммы ВКПМ ВКПМ ВКПМ ВКПМ ВКПМ ВКПМ ВКПМ ВКПМ ВКПМ
Bacillus В-8715 В-1226 В-5081 В-8715 В-1226 В-5081 В-8715 В-1226 В-5081
thuringiensis
Титр спор, ×108 на мл 5 6 4 2 1 1,6 3 1 1
Концентрация белка (мг/мл) 0,3 0,1 0,03 0,4 0,1 0,03 0,3 0,1 0,05
Как следует из таблицы 1, заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 на трех исследованных лабораторных питательных средах превосходит исходные родительские штаммы как по титру спор, так и по концентрации основного инсектицидного белка, дельта-эндотоксина.
Оценку заявляемого штамма на промышленной питательной среде проводили по параметру - микробиологическая продуктивность (титр спор).
Для подготовки посевного материала заявляемый и родительские штаммы выращивали в 2 мл среды №1 в течение 12 часов при 28°С, как было описано выше. Затем 1 мл микробной культуры засевают в колбы емкостью 750 мл с объемом среды выращивания 50 мл дрожже-полисахаридной среды (ДПС) следующего состава (мас.%): дрожжи кормовые - 36, кукурузная мука - 26,8, соевая мука - 5,0, мел - 3,0, вода - остальное, рН среды - 7,2-7,5 и культивировали на круговой качалке до стадии полной споруляции. Определение титра жизнеспособных спор проводили на чашках Петри с агаризованной средой как описано выше.
Таблица 2.
Штаммы Вас. thuringiensis ВКПМ ВКПМ ВКПМ
В-1226 В-5081 В-8715
Микробиологическая 4,3 4,0 4,6
продуктивность
(млрд. сп./мл)
Из результатов, приведенных в таблице 2, следует, что продуктивность заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 на промышленной среде выше продуктивности исходных родительских штаммов и превосходит продуктивность штаммов-продуцентов промышленного препарата «Лепидоцид», составляющую 3,5-4 млрд спор /мл [8] и промышленного препарата «Колорадо», составляющую 2-3 млрд спор /мл [9].
ПРИМЕР 2. Оценка инсектоакарицидной активности заявляемого штамма.
Определение токсичности заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 для представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes проводили в лабораторных условиях.
Заявляемый штамм ВКПМ В-8715 и контроль (родительские штаммы) выращивали до стадии полной споруляции как в примере 1 на среде 1.
Оценку инсектицидной активности для представителей отряда Lepidoptera проводили на двух объектах: гусеницах непарного шелкопряда Lymantria dispar 2 возраста и гусеницах мельничной огневки Galleria mellonella 7 возраста.
Гусениц непарного шелкопряда выращивали из хранящихся в холодильной камере при температуре +4°С яйцекладок на среде следующего состава (мас.%):
Семена фасоли набухшие 72
Дрожжи пивные сухие 5,4
Агар 5,4
Бумага фильтровальная мелко нарезанная 2
Сахароза 4
Калий фосфорно-кислый двузамещенный 1,4
Аскорбиновая кислота 1,4
Масло льняное 0,7
Бензойная кислота + спирт 3,5
Формалин (40%) 1,8
КОН 1,4
Лист дуба сухой (измельченный) 1
При биотестировании 3 г среды смешивали с 1 мл испытуемой суспензии споро-кристаллической смеси (дважды отмыты физраствором), и хорошо растирали смесь в фарфоровой ступке с помощью пестика. Полученную смесь шпателем переносили на крышку чашки Петри и размещали в виде кольца диаметром около 3 см. Внутрь этого кольца сажали по десять гусениц. На дно чашки Петри помещали диск фильтровальной бумаги. Каждый образец суспензии испытывали в 3-х параллельных повторностях. Эксперимент проводили при комнатной температуре и естественном освещении. Число погибших насекомых подсчитывали на 6-й день.
Смертность в опыте с Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis ВКПМ В-5081 составила 10%, для заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 - 58%, а для Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226 - 100%. Из этого следует, что для непарного шелкопряда инсектицидная активность заявляемого штамма значительно превосходит активность одного из родительских штаммов Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis ВКПМ В-5081, но уступает активности другого родительского штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226.
Оценку инсектицидной активности против мельничной огневки (Galleria mellonella) проводили методом подсадки личинок мельничной огневки в чашки Петри с кормом (мерва + пшеничные отруби).
Корм расфасовывали в чашки Петри (по 9 г в каждую), в которые вносили по 3 мл препарата.
В каждую чашку Петри (после подсыхания корма) подсаживали по 10 гусениц огневки 7 возраста (массой 75±5 мг) в трех повторностях. Чашки Петри с гусеницами содержали на лабораторных столах при температуре воздуха 25±20°С и относительной влажности воздуха 60-80%. Гибель гусениц подсчитывали на 6 сутки.
Смертность в опыте с родительским штаммом Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis ВКПМ В-5081 составила 3,3%, для заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 - 26,7%, а для другого родительского штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226 - 63,3%. Инсектицидная активность для гусениц мельничной огневки у заявляемого штамма значительно превосходит активность штамма ВКПМ В-5081 и уступает ВКПМ В-1226.
Заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 обладает инсектицидной активностью для представителей отряда Lepidoptera, сопоставимой с таковой у известных штаммов Bacillus thuringiensis [8].
Оценку инсектицидной активности заявляемого штамма ВКПМ В-8 715 для представителей отряда Coleoptera проводили на личинках колорадского жука Leptinotarsa decemlineata и мучного хрущака Tenebrio molitor L.
Личинок колорадского жука младшего возраста (2 и начало 3 возраста) подсаживали в чашки Петри с листьями картофеля, обработанными путем погружения в растворы препаратов. В таблице 3 приведены результаты учета гибели личинок колорадского жука на 5-е сутки.
Таблица 3.
Штаммы Смертность
Bacillus thuringiensis (%)
2-3 возраст
ВКПМВ-5081 25,1
ВКПМ В-8715 92,5
ВКПМ В-1226 10
Заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 значительно превосходит по своей инсектицидной активности против личинок колорадского жука исходные родительские штаммы. Статистическая обработка результатов, проведенная с помощью компьютерной программы пробит-анализа, позволила нам вычислить ЛК50 заявляемого штамма ВКПМ В-8715 на 4 сутки эксперимента. Величина ЛК50 составила 0,04% КЖ, что значительно превосходит этот показатель у других штаммов Bacillus thuringiensis [5,9].
С целью оценки инсектицидной активности заявляемого штамма ВКПМ В-8715 для личинок мучного хрущака проверяли инсектицидную активность спорокристаллических комплексов заявляемого штамма и родительских штаммов путем применения их в качестве добавок к питательной среде для личинок 1-11 возраста. Личинки предварительно голодали 24 ч. Каждую водную суспензию смешивали с молотым геркулесом из расчета 3 мл исходной суспензии на 3 г геркулесовой муки. Полученную однородную смесь разделяли на 3 приблизительно равные части, каждую из которых разминали до состояния тонкой лепешки в пластмассовой чашке Петри. В каждую чашку Петри на влажную лепешку сразу же помещали по 16 экспериментальных личинок (в целом 48 личинок). Чашки накрывали крышками с вентиляционными отверстиями и инкубировали в термостате при температуре 27°С. Через сутки и далее на протяжении 15 суток с разными интервалами проверяли состояние личинок и пищевого субстрата. Последний по мере его высыхания измельчали. Регистрировали суммарную смертность личинок на протяжении опыта. В таблице 4 приведены результаты учета гибели личинок мучного хрущака на 19-е сутки.
Таблица 4.
Штаммы Смертность
Bacillus thuringiensis (%)
1-2 возраст
ВКПМВ-5081 10
ВКПМ В-8715 100
ВКПМВ-1226 16,7
Заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 по своей активности против личинок мучного хрущака значительно превосходит родительские штаммы. Другие штаммы Bacillus thuringiensis [4, 5, 8, 9] не активны для личинок мучного хрущака.
Сравнительную оценку инсектоакарицидной активности заявляемого штамма против представителей отрядов Homoptera, Thysanoptera и Acariformes проводили на трех объектах: бахчевая тля, западный цветочный трипе и паутинный клещ.
Для тест-объектов в лабораторных условиях использовали метод погружения растений-хозяев в растворы культуральной жидкости со спорами и кристаллами исследуемых штаммов, полученные после окончания споруляции как в примере 1 на среде выращивания 1.
Для бахчевой тли (Aphis gossypii Glov., Homoptera) срезанные листья огурца погружали в растворы испытуемых образцов на 6 секунд, после чего их помещали на влажную фильтровальную бумагу в чашку Петри и заселяли самками тли.
Для западного цветочного трипса (Frankliniella occidentalis Pergande, Thysanoptera) использовали двухлистковые растения фасоли. За 7 дней до опыта на растения самки трипса откладывали яйца. После отрождения личинок растения срезали и листьями погружали в растворы испытуемых образцов на 6 секунд, после чего устанавливали в стаканы с водой, подставляя под черешки пластмассовые кружки, обмазанные по краям вазелином.
В случае обыкновенного паутинного клеща (Tetranychus urticae Koch, Acariformes) срезанные двухлистковые растения фасоли за сутки до опыта заселяли самками клеща. Растения погружали в растворы препаратов на 6 секунд и устанавливали в сосуды с водой.
Результаты гибели тест-объектов на 5-е сутки приведены в таблице 5.
Таблица 5.
Штаммы
Bacillus thuringiensis ВКПМВ-5081 ВКПМ В-8715 ВКПМ В-1226
Бахчевая тля
Смертность (%)
12,8 59,2 17,4
Паутинный клещ
Смертность (%)
21,7 91,45 23,6
Западный цветочный трипе 12,4 53,3 9,4
Смертность (%)
Как следует из результатов, представленных в таблице 5, заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 по инсектоакарицидной активности против представителей отрядов Homoptera, Thysanoptera и Acariformes более чем в четыре раза превосходит исходные родительские штаммы. Другие штаммы Bacillus thuringiensis [4, 5, 8, 9] не активны против этого вида вредителей.
ПРИМЕР 3. Оценка токсичности заявляемого штамма в полевых условиях.
Оценку токсичности заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 в полевых условиях проводили для представителей отрядов Homoptera и Thysanoptera.
Заявляемый штамм ВКПМ В-8715 выращивали до стадии полной споруляции как в примере 1 на среде 1.
В каждом варианте опыта было по 100 растений. Доза биопрепарата во всех опытах составляла 4,1×108 спор/мл. Обработку проводили ранцевым опрыскивателем. Перед обработкой определяли численность тлей и трипсов на каждом растении. Чтобы избежать естественных миграции тлей и трипсов учетные растения в естественных условиях покрывали плотномарлевыми мешочками. Через 3, 5, 7 и 10 дней учитывали количество погибших и живых особей. Повторность каждого варианта 4-кратная. Количество тлей и трипсов подсчитывали лупой при 10-кратном увеличении. В таблице 6 приведены результаты испытаний заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 в сравнении с наиболее широко применяемым химическим препаратом карбофосом (50% концентрат эмульсии).
Таблица 6.
Название вариантов Численность вредителя на 10 растений (в абсолютных числах) до обработки Средняя численность живых насекомых в (%) к предварительному учету, по дням учета
3 5 7 10
Опыт с хопчатником. Хлопковая тля (Aphis gossypii, Homoptera)
1. Контроль вода 173 146 262 360 510
2. Карбофос - 50% к. эм. 0,7 л/га 165 0,4 0,9 6,5 9,2
3. ВКПМ В-8715 194 24,0 17,1 11,2 10,3
Опыт с хопчатником. Табачный трипс (Thrips tabaci Lind, Thysanoptera)
1. Контроль вода 82 116 124 161 186
2. Карбофос - 50% к.эм. 0,7 л/га 91 1,1 2,6 8,4 14,6
5. ВКПМ В-8715 68 48,7 43,1 32,1 26,0
Опыт с лимоном. Бахчевая тля (Aphis gossypii Glov, Homoptera).
1 Контроль - вода 248 161 174 216 345
2. Карбофос, 50% к.эм. 0,7 л/га 265 1,9 2,6 8,9 13,4
3. ВКПМ В-8715 202 33,4 26,8 20,3 14,6
Опыт с розой. Персиковая тля (Myzodes persicae, Homoptera).
1. Контроль-вода 86 147 192 240 316
2. Карбофос - 50% к.эм. 0,7 л/га 106 2,6 3,1 7,9 11,6
3. ВКПМ В-8715 116 29,8 17,6 11,4 6,8
Как следует из таблицы 6 токсичность заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 для трипсов (отряд Thysanoptera ) незначительно уступает, а для тлей (отряд Homoptera) на 10 сутки практически соответствует токсичности химического препарата карбофоса.
Таким образом впервые получен штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.
Результаты опытов с использованием штамма в полевых условиях показывают, что заявляемый штамм по токсичности против вредителей сельскохозяйственных культур из отрядов Homoptera и Thysanoptera может успешно конкурировать с химическим препаратом карбофос на таких экономически значимых культурах, как хлопок, табак и розы.
Источники информации:
1. National Research Council. 1986. Pesticide reistance: strategies and tactics for management. National Academy of Sciences, Washington, D.C.
2. Crickmore, N., Zeigler, D.R., Feitelson J., Schenepf, E., van Rie, J., Lereclus, D., Baum, J. and Dean, D.H. 1998. Revision of the nomenclature for Bacillus thuringienis pesticidal crystal proteins. Microbiol. Molec. Biol. Rev. 62:807-813.
3. McConnell, E. and Richards, A.G. 1959. The production by Bacilllus thuringiensis Berliner of a heat-stable exotoxin toxic to insects. Can. J. Microbiol. 5: 161-168.
4. USA patent 6156308.
5. Патент РФ №2125091.
6. Gonzalez, J.M., Brown, B.J. and Carlton, B.C. 1982. Transfer of Bacillus thuringiensis plasmids coding for delta endotoxin among strains of B. thuringiensis and B. cereus. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 79:6951-6955.
7. Bradford, M.M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation ofmicrogram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analyt. Biochem. 72:248-254.
8. Патент РФ №2080065
9. Патент РФ №2204598

Claims (1)

  1. Штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki ВКПМ B-8715, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.
RU2004135697/13A 2004-12-07 2004-12-07 Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes RU2278159C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004135697/13A RU2278159C1 (ru) 2004-12-07 2004-12-07 Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2004135697/13A RU2278159C1 (ru) 2004-12-07 2004-12-07 Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2278159C1 true RU2278159C1 (ru) 2006-06-20

Family

ID=36714152

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2004135697/13A RU2278159C1 (ru) 2004-12-07 2004-12-07 Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2278159C1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2458502C1 (ru) * 2011-03-18 2012-08-20 Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства Россельхозакадемии Способ защиты многолетних культур от вредителей
MD4196C1 (ru) * 2012-04-27 2013-09-30 Институт Зоологии Академии Наук Молдовы Штамм бактерий Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki, - биоинсектицид для борьбы с жуками-долгоносиками

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
МАСЛОВ А.Д. и др. Защита леса от вредителей и болезней: Справочник. М.: Агропромиздат, 1988, с.48-54. КОРЧАГИН В.Н. Защита растений от вредителей и болезней на садово-огородном участке: Справочник. М.: Агропромиздат, 1987, 39-40. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2458502C1 (ru) * 2011-03-18 2012-08-20 Государственное научное учреждение Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский институт садоводства и виноградарства Россельхозакадемии Способ защиты многолетних культур от вредителей
MD4196C1 (ru) * 2012-04-27 2013-09-30 Институт Зоологии Академии Наук Молдовы Штамм бактерий Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki, - биоинсектицид для борьбы с жуками-долгоносиками

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0593428B1 (en) Myconematicide
WO2013030792A1 (en) Insecticidal lipid agents isolated from entomopathogenic fungi and uses thereof
US20140100175A1 (en) Insecticidal Agents and Uses Thereof
JPH01273581A (ja) 新規なバチルス菌株a20及びa29及びそれを含有する殺虫剤組成物並びに植物保護法
Tozlu et al. The investigation of the biological control of Icerya purchasi Maskell, 1878 (Hemiptera: Margarodidae) with entomopathogenic fungi and bacteria
KR20200057643A (ko) 우수한 살충 효과 및 포자생성능을 갖는 신규 보베리아 바시아나 knu-101 균주 및 이의 용도
JPH10504451A (ja) 新規の双翅類活性化合物及びバチルス チューリングエンシス株
US6962977B2 (en) Protein having pesticidal activity, DNA encoding the protein, and noxious organism-controlling agent and method
RU2278159C1 (ru) Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes
US5266483A (en) Bacillus strain and insect pest controlling agent
KR101524557B1 (ko) 바실러스 아밀로리쿼페이션스 eml―cap3를 포함하는 살충 조성물
RU2434939C1 (ru) Штамм бактерий bacillus thuringiensis биос-1, обладающий инсектоакарицидной активностью
KR100280380B1 (ko) 바실러스투린지엔시스 엔티0423 균주의 내독소단백질 및 이를 이용한 미생물 살충제
RU2278161C1 (ru) РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ДЕЛЬТА-ЭНДОТОКСИНА Cry IIIA, И ШТАММ BACILLUS THURINGIENSIS SSP. KURSTAKI, ПОЛУЧЕННЫЙ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОЙ ПЛАЗМИДНОЙ ДНК
KR100458765B1 (ko) 파리목 해충에 대해 방제효과를 가지는 바실러스슈린지에스 균주 및 이를 이용한 미생물 살충제의 제조방법
CN117024536B (zh) 控制亚洲玉米螟害虫的方法
RU2825468C1 (ru) ШТАММ BZR GV L-3 ВИРУСА ГРАНУЛЁЗА ЯБЛОННОЙ ПЛОДОЖОРКИ Cydia pomonella L., ОБЛАДАЮЩИЙ ИНСЕКТИЦИДНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
CN111116723B (zh) 野生稻抗菌肽OrR214及其应用
JP4337193B2 (ja) ドウガネブイブイの防除方法及び防除剤
WO1995035365A1 (en) Process for cultivating bacillus thuringiensis biopesticides in wastewater treatment sludges
KR100505789B1 (ko) 버섯 재배지 토양으로부터 분리된 바실러스 투린지엔시스656 -3 균주 및 이를 함유하는 해충 방제용 조성물
SU1688819A1 (ru) Штамм бактерий BacILLUS тнURINGIеNSIS SUвSр.кURSтакI дл получени энтомопатогенного препарата против LерIDортеRа и СоLеортеRа
Ghising CHARACTERIZATION OF METARHIZIUM ANISOPLIAE ISOLATED FROM ORGANIC FARMS AND ITS EFFICACY AGAINST THE INSECT PESTS UNDER LABORATORY CONTROLLED CONDITION
AU633950B2 (en) Myconematicide
CN118421479A (zh) 一种布氏白僵菌及其在防治金龟子中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
QB4A Licence on use of patent

Effective date: 20060918

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20061208

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20080210

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20121208