PL153070B2 - SPOSÓB WYTWARZANIA 17^-H YD R O K S¥-aZ-M ETYLO -4,6-A N D R O STA D IEN -3-O N U - Google Patents

Description

SPOSÓB WYTWARZANIA 17^3-HYDROKS¥-a>ć-METYLO-4,6-ANDROSTADIEN-3-ONU , Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 17/^a-hydroksy-2 0(-metylo-4,6-androstad.ien-3-onu, który może znaleźć zastosowanie w farmacji, zwłaszcza jako środek o działaniu anabolicznym i anty nowotworowym. Znane są dwa sposoby wytwarzania 2 -metylopochodne j szeregu androstenonu /H. Ringold, E. Batrese, Ó.Halpem, E.Necoechea - 2-Methyl and 2-hydro xym et byle ne-androstanę derivativesⁿ, Journal of the American Society vol. 81, str. 428, 1959/· Według pierwszego sposobu 2-etoksalilowa pochodna testosteronu w reakcji z metalicznym sodem w etanolu daje 2ot-metylopochodną testosteronu· 0 małej użyteczności tego sposobu decyduje niska wydajność procesu otrzymywania substratu do tej reakcji. Według drugiego sposobu inny związek wspomnianego szeregu 2-hydroksymetyleno-17^ -hydroksy-4-androsten-3-on poddaje się redukcji wodorem pod ciśnieniem 3·1,013ΊΟ^ Pa, w obecności palladu jako katalizatora i otrzymuje się 17/3-hydroksy-2 ot-metylo-4-androstan-3-on, z wydajnością co najmniej 5096. Metoda ta jest stosunkowo droga z uwagi na stosowanie palladu jako katalizatora.

Wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania 2oć-metylopochodnej szeregu androstenonu to jest 11β-hydroksy-2e£-metylo-4,6-androstadien-3-onu o wzorze 2, w którym jako substrat stosuje się albo 2-metyleno-4,6-androstadien-3»17-dion o wzorze 1 albo 17yS -hydroksy-2-metyleno-4,6-androstadien-3-on o wzorze 3.

Istota wynalazku polega na tym, że substrat poddaje się mikrobiologicznej redukcji kulturą szczepu z gatunku Aphanocladium album. Korzystne jest prowadzenie procesu redukcji w temperaturze od 22°C do 28°C, co zapewnia szybki wzrost mikroorganizmów. Ponadto korzystne jest stosowanie kultury wodnej szczepu i równoczesne wstrząsanie reagentów, co daje lepszy kontakt substratu z komórkami mikroorganizmów.

153 070

153 070

W sposobie według wynalazku, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury szczepu następuje,w obu użytych substratach, redukcja egzocyklicznej grupy metylenowej na węglu drugim do grupy metylowej eąuatorialnej, to jest 2o6 . W przypadku stosowania 2-metyleno-4,6-androstadien-3-onu /wzór l/ następuje równolegle redukcja na węglu siedemnastym do alkoholu 17/3 . Dzięki temu, niezależnie od stosowanego substratu, otrzymuje się 17/3 -hydroksy-20C-metylo-4,6-androstadien-3-on /wzór 2/. Produktowi 2oC-metylo może towarzyszyć jego izomer 2β -metylo, w ilości kilku procent ale przez przepuszczenie mieszaniny poreakcyjnej przez warstwę alkalicznego tlenku glinu uzyskuje się konwersję izomeru 2 β w izomer 2o6 .

Zasadniczą zaletą sposobu według wynalazku w porównaniu ze sposobami znanymi jest całkowite przereagowanie substratu do 17/3 -hydroksy-2oc-metylo-4,6-androstadien-3-onu /wzór 2/ oraz obniżenie kosztów wytwarzania produktu. Obniżenie kosztów osiągnięto w wyniku wyeliminowania operacji redukcji metalicznym sodem lub redukcji wodorem na katalizatorze palladowym.

Przedmiot wynalazku jest objaśniony w przykładach wytwarzania 17/3 -hydroksy-2 oć -metylo-4,6-androstadien-3-onu /wzór 2/ z 2-metyleno-4,6-androstadien-3,17-dionu /wzór l/ i z 17/5-hydroksy-2-metyleno-4,6-androstadien-3-onu /wzór 5/.

Przykład I. 20 g wyciągu słodowego, zawierającego około 72% wagowych maltozy, rozpuszcza się w 1 dm^ wody i tak przygotowaną pożywkę poddaje się sterylizacji.

dm^ sterylnej pożywki maltozowej umieszcza się w kolbie o pojemności 2 dm\ zamontowanej na wstrząsarce. Następnie pożywkę zaszczepia się kulturą szczepu z gatunku Aphanocladium album. Po uruchomieniu wstrząsarki całość pozostawia się na okres 4 dni, utrzymując temperaturę 28°C. Po 4 dniach dodaje się 200 mg 2-metyleno-4,6-androstadien-3,17-dionu /wzór l/, rozpuszczonego w 3 cm^ acetonu. Reakcję prowadzi się przez 14 dni, przy ciągłym wstrząsaniu, w temperaturze 22°C do 28°C. Następnie roztwór ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem. Po osuszeniu ekstraktu siarczanem sodu i odparowaniu rozpuszczalnika otrzymuje się 200 mg suchej pozostałości zawierającej głównie 17/3 -hydroksy-2oC-metylo-4,6-androstadien-3-on /wzór 2/ i niewielkie ilości izomeru 17/3 -hydroksy-2 y3 -metylo-4,6-androstadien-3-onu. Mieszaninę tę eluuje się benzenem przez warstwę alkalicznego tlenku glinu, co powoduje konwersję izomeru 2β-metylo w izomer 2OĆ-metylo. W wyniku tego uzyskuje się 190 mg 17/3 -hydroksy-2oC-metylo-4,b-androstadien-3-onu /wzór 2/. Octan tego związku charakteryzują następujące dane fizykochemiczne i spektralne: temperatura topnienia 13O-132°C, 04 3° = +46°/chf, c «= 3/, IRlI^⁰¹ 1745, 1678, 1629, 1598 cm^-1; υνΛ 283 nm /lg£4.38/; PRM <fl,15 /d,3H,CH₅~2ot /, 2.02 /s,3H,CH₃COO/, 5.64 /s.1H,C-4/, 6.08 /s,2H,C-6 i C-7/ϊ MS m/e 342 /46,M⁺/.

Przykład II. Sposób postępowania jest analogiczny jak opisano w przykładzie pierwszym, z tą różnicą, że jako substrat stosuje się 17 β -hydroksy-2-metyleno4,6-androstadien-3-on /wzór 3/. Otrzymuje się 185 mg 17/3-hydroksy-2 o£-metylo-4,6-androstadien-3-onu /wzór 2/. Produkt ten prżeprowadzony w octan ma dane fizykochemiczne i spektralne identyczne jak podane w przykładzie pierwszym.

Claims (3)

1. Sposób wytwarzania 17 /3 -hydroksy-2 oć-metylo-4,6-androstadien-3-onu o wzorze 2, znamienny tym, że 2-metyleno-4,6-androstadien-3,17-dion o wzorze 1 albo 17/3-hydroksy-2-metyleno-4,6-androstadien-5-on o wzorze 3 poddaje się mikrobiologicznej redukcji kulturą szczepu z gatunku Aphanocladium album.

2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces_aredukcji mikrobiologicznej prowadzi się w temperaturze od 22°C do 28°C.

3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się wodną kulturę szczepu, a proces redukcji prowadzi się przy wstrząsaniu reagentów.