NO971217L - Dihydroksy-trisdehydro-kolekalsiferolderivater - Google Patents

Dihydroksy-trisdehydro-kolekalsiferolderivater

Info

Publication number
NO971217L
NO971217L NO971217A NO971217A NO971217L NO 971217 L NO971217 L NO 971217L NO 971217 A NO971217 A NO 971217A NO 971217 A NO971217 A NO 971217A NO 971217 L NO971217 L NO 971217L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
formula
lower alkyl
compound
diseases
aryl
Prior art date
Application number
NO971217A
Other languages
English (en)
Other versions
NO971217D0 (no
Inventor
Bernard Michael Hennessy
Jerome Anthony Iacobelli
Milan Radoje Uskokovic
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of NO971217D0 publication Critical patent/NO971217D0/no
Publication of NO971217L publication Critical patent/NO971217L/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C401/00Irradiation products of cholesterol or its derivatives; Vitamin D derivatives, 9,10-seco cyclopenta[a]phenanthrene or analogues obtained by chemical preparation without irradiation
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/59Compounds containing 9, 10- seco- cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06Antipsoriatics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • A61P35/02Antineoplastic agents specific for leukemia
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02Silicon compounds
    • C07F7/08Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07FACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02Silicon compounds
    • C07F7/08Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804Compounds having Si-O-C linkages
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
  • Liquid Crystal Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelser med formel
hvor R betyr hydroksy og R<1>betyr H2eller CH2, eller R betyr hydrogen eller fluor og R<1>betyr CH2.
Begrepet "lavere alkyl" betyr heri en rettkjedet eller forgrenet alkylgruppe som inneholder 1-4 karbonatomer,
f.eks. metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, t-butyl og lignende. Begrepet "ar-lavere alkyl" betyr p-tolyl, benzyl, fenyletyl, fenylpropyl og lignende. Begrepet "aryl" betyr en gruppe som er avledet fra et aromatisk hydrokarbon og som kan være usubstituert eller substituert med én eller flere lavere alkylgrupper. Eksempler på "aryl" er fenyl og p-metylfenyl.
Forbindelser med formel I som beskrevet ovenfor, er nyttige som midler ved behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis. Forbindelsene med formel I er også nyttige midler ved behandling av neoplastiske sykdommer, såsom leukemi. Forbindelsene med formel I er også nyttige midler ved behandling av talgkjertelsykdommer, såsom akne eller seboréisk dermatitt. Forbindelsene med formel I er også nyttige midler ved behandling av sykdommer som krever en modulasjon av immunsystemet, såsom transplantatutstøt-ning, "graft-vs.-host-disease" og lignende.
Oppfinnelsen vedrører en farmasøytisk sammensetning, spesielt for hemming av hyperproliferasjon av hud og svulstcel ler, spesielt for behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis, neoplastiske sykdommer, såsom leukemi, og talgkjertelsykdommer, såsom akne eller seboréisk dermatitt, hvilken farmasøytiske sammensetning inneholder en forbindelse med formel I eller en blanding av to eller flere forbindelser med formel I.
Oppfinnelsen vedrører også anvendelsen av forbindelsene med formel I ved fremstilling av farmasøytiske sammensetninger med anti-hyperproliferativ aktivitet og svulstcellehemmende aktivitet, spesielt for behandling av de ovennevnte syk-domstilstander .
Oppfinnelsen vedrører også en fremgangsmåte ved fremstilling av forbindelser med formel I, samt mellomprodukter med formel IX, X, Via, VIb, II, III, XI og XII som skal beskrives senere.
I en foretrukken utførelse av forbindelsene med formel I betyr R hydroksy, og/eller R<1>betyr CH2. I en annen utfø-relse betyr R<1>H2. Mest foretrukket er forbindelsene 1,25-dihydroksy-16,22S,23-trienkolekalsiferol og 1,25-dihydrok-sy-16,22R,23-trienkolekalsiferol.
I sitt siste trinn omfatter fremgangsmåten ved fremstilling av forbindelsene med formel I fjerning av silylbeskyttelsesgruppene fra en tilsvarende silylert diol eller triol med formel I, hvor silylbeskyttelsesgruppene fortrinnsvis er Si (R4,R5,R6) , hvor R<4>og R<6>betyr lavere alkyl og R<5>betyr lavere alkyl, aryl eller aryl-lavere alkyl, og denne fjerning av silylbeskyttelsesgruppen utføres med fordel ved omsetning med et fluorsalt i et polart organisk oppløs-ningsmiddel.
22S-Epimeren av forbindelsene med formel I fremstilles som skal beskrives nedenfor under spesiell henvisning til Formelskjemaene I-III og Eksemplene nedenfor.
Ifølge Forraelskjema I ovenfor, oksyderes en forbindelse med formel II til en forbindelse med formel III ved behandling med et oksydasjonsmiddel, såsom 2,2'-bipyridiniumklorkromat eller pyridiniumdiklorkromat, ved romtemperatur i et aprotisk oppløsningsmiddel, såsom tørt tetrahydrofuran eller fortrinnsvis tørt metylenklorid.
Den erholdte forbindelse med formel III omdannes til en forbindelse med formel IVa, IVb eller IVc ved omsetning med den tilsvarende forbindelse med formel
hvor Ph betyr fenyl;R<1>,R<4>,R<5>ogR<6>har de ovennevnte betydninger, og R<7>betyr hydrogen, fluor eller OSi(R<4>,R<5>,R<6>) .
Omsetningen utføres ved mellom -60°C og -90°C, fortrinnsvis ved -78°C, i et polart aprotisk organisk oppløsningsmiddel, såsom tørr eter eller fortrinnsvis tørt tetrahydrofuran, i nærvær av en sterk base, såsom alkyllitium, såsom butyllitium. Forbindelsene med formel V er kjente eller kan fremstilles ved kjente fremgangsmåter.
Beskyttelsesgruppene av en forbindelse med formel IVa, IVb eller IVc fjernes ved omsetning med et fluorsalt, såsom tetrabutylammoniumfluorid, i et organisk oppløsningsmiddel, såsom eter eller fortrinnsvis tetrahydrofuran, for å gi en tilsvarende forbindelse med formel Ia, Ib eller Ic.
Mellomproduktene med formel II som beskrevet ovenfor, fremstilles som skal beskrives under spesiell henvisning til Formelskjema II og Eksemplene nedenfor: Ifølge Formelskjema II omdannes en forbindelse med formel Via til en forbindelse med formel VII ved omsetning med fenylsulfonylklorid og trietylamin. En forbindelse med formel VII omdannes til en forbindelse med formel II ved omsetning med metanol og tert.butyllitium. Mellomproduktene med formel Via som beskrevet ovenfor, fremstilles som skal beskrives nedenfor under spesiell henvisning til Formelskjema III og Eksemplene nedenfor: Ifølge Formelskjema III ovenfor omdannes en forbindelse med formel VIII, som er kjent, til en forbindelse med formel IX ved omsetning med et trialkylsilylklorid, såsom t.butyl-dimetylsilylklorid, i nærvær av en base, såsom imidazol, og i nærvær av et aprotisk organisk oppløsningsmiddel, såsom tørt N,N-dimetylformamid.
En forbindelse med formel IX omdannes til en forbindelse med formel X ved omsetning med en base, såsom n-butyllitium eller N,N-dimetylformamid, i vannfritt tetrahydrofuran som oppløsningsmiddel, fortrinnsvis ved -78°C.
En forbindelse med formel X omsettes med [3aR-Z,3aa,4b,7ab]-l-etylidenoktahydro-7a-metyl-lH-4-indenolacetat og dimetylaluminiumklorid som Lewis-syre til et klorert hydrokarbonoppløsningsmiddel, såsom metylenklorid, fortrinnsvis ved en temperatur på -78°C. Den erholdte forbindelse behandles for å separere dens epimerer, og dette gir en forbindelse med formel Via og en forbindelse med formel VIb.
22R-Epimerforbindelsene med formel I fremstilles som skal beskrives nedenfor under spesiell henvisning til Formelskjemaene IV-V og Eksemplene nedenfor.
I Formelskjema IV ovenfor oksyderes en forbindelse med formel XI til en forbindelse med formel XII som beskrevet ovenfor for oksydasjonen av en forbindelse II til en forbindelse III.
Den erholdte forbindelse med formel XII omdannes til en forbindelse med formel Xllla, XHIb eller XIIIc ved omsetning med den tilsvarende forbindelse med formel som beskrevet ovenfor for omdannelsen av en forbindelse III til en forbindelse IVa, IVb eller IVc.
Beskyttelsesgruppene av en forbindelse med formel XIIIa, XHIb eller XIIIc fjernes for å gi en forbindelse med formel Id, le eller If, som beskrevet ovenfor for forbindelsene med formel Ia, Ib eller Ic.
Mellomproduktene med formel XI som beskrevet ovenfor, fremstilles som skal beskrives under spesiell henvisning til Formelskjema V og Eksemplene nedenfor: I ovennevnte Formelskjema V omdannes en forbindelse med formel VIb til en forbindelse med formel XIV ved omsetning med fenylsulfenylklorid og trietylamin. En forbindelse med formel XIV omdannes til en forbindelse med formel XI ved omsetning med metanol og tert.butyllitium.
Mellomproduktene med formel VIb som beskrevet ovenfor, fremstilles som skal beskrives under spesiell henvisning til Formelskjema III ovenfor og Eksemplene nedenfor.
Forbindelsene med formel I som beskrevet ovenfor, kan administreres oralt
a) for behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis, basalcellekarsinom, forstyrrelser i
keritiniseringen og keratose,
b) for behandling av neoplastiske sykdommer, såsom leukemi, c) for behandling av talgkjertelsykdommer, såsom akne eller seboréisk dermatitt, eller d) for behandling av sykdommer som krever en modulasjon av immunsystemet, såsom transplantatutstetning,
"graft-vs.-host-disease" og lignende,
til varmblodige dyr som er i behov for en slik behandling. Nærmere bestemt kan forbindelsene med formel I som beskrevet ovenfor, administreres oralt til et voksent menneske i doser som ligger i området ca. fra 0,5 til 50 mg pr. dag for behandling av de ovennevnte sykdommer.
Forbindelsene med formel I som beskrevet ovenfor, kan administreres topisk a) for behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis, eller b) for behandling av talgkjertelsykdommer, såsom akne eller seboréisk dermatitt,
til varmblodige dyr som er i behov for en slik behandling. Nærmere bestemt kan forbindelsene med formel I som beskrevet ovenfor, administreres topisk til et voksent menneske i doser som ligger i området ca. fra 0,5 til 50 mg pr. gram topisk formulering pr. dag for behandling av de ovennevnte sykdommer.
Doseringen av forbindelsene med formel I kan variere innen vide grenser, avhengig av hvilken sykdom som skal behandles, pasientens alder og personlige tilstand og administra-sjonsruten, og vil såklart tilpasses de individuelle krav i hvert enkelt tilfelle.
Den nyttige aktivitet av forbindelsene med formel I som midler for behandling av hyperproliferativ hudsykdom, kan demonstreres som følger:
Hemming av keratinocyttproliferasion
HaCaT- Cellelinjen: Den udødeliggjorte humane cellelinje HaCaT ble anvendt (opprinnelig erholdt fra N.E. Fusenig, German Cancer Research Center, Heidelberg, Tyskland).<3>H-Tymidininnlemmelsen ble målt i eksponensielt voksende kulturer etter 6 dagers kultur i nærvær av testforbindelsen.
Cellekultur: HaCaT-celler ble kultivert i en blanding av Dulbeccos modifiserte Eagle-medium som inneholdt 4,5 g glukose og Ham's næringsmiddelblanding F12, 3:1 (vol/vol). Denne blanding ble supplementert med 10% føtalt kalveserum (FCS), 2 mM L-glutamin, 50 Ul/ml penicillin, 50 mg/ml streptomycin, 10 ng/ml EGF, 400 ng/ml hydrokortison, 8,5 ng/ml koleratoksin og 5 ng/ml insulin. Cellene ble holdt i en befuktet atmosfære som inneholdt 5% C02og 95% luft, og ble passert hver 3.-4. dag.
Hemming av 3H- tymidinopptaket: HaCaT-celler (250 celler i 180 ml av den supplementerte blanding) ble plassert i 96 brønners kulturskåler og inkubert ved 37°C med 5% C02og 95% luft. Umiddelbart deretter ble 20 ml testforbindelser som er opplistet nedenfor i Tabell I og som var fortynnet i den supplementerte blanding som inneholdt 1% etanol, tilsatt til brønnene for å gi slutlige konsentrasjoner mellom10~<9>og10"<6>M (utgående fra 1 mM stamoppløsninger i etanol, lagret ved -20°C og beskyttet for lys). Etter 6 dager ble det tilsatt<3>H-tymidin (5 Ci/mmol) til brønnene i en konsentrasjon på 1 mCi/brønn. Cellene ble impulsmerket under de siste 6 timer av vekstperioden. Cellene ble deretter trypsinisert i 10 minutter ved 37°C under kraftig bevegelse og samlet på en 96 brønners filterplate ved anvendelse av en cellesamlingsanordning. Etter tørking ved 40°C under vakuum i 20-30 minutter ble det tilsatt 20 ml scintilla-sjonsmiddel, og radioaktiviteten som var bundet til filtrene, ble målt.
Verdiene angis som prosentandel av kontrollgruppen (prøver uten testforbindelse). Konsentrasjonen som fører til 50% av kontrollverdiene, bestemmes grafisk og angis som IC50-verdi (hemmende konsentrasjon) i Tabell I.
Fra de ovenfor angitte resultater er det tydlig at forbindelsene med formel I hemmer proliferasjonen av keratinocyt-ter. Følgelig er forbindelsene med formel I nyttige ved behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis .
Den nyttige aktivitet av forbindelser med formel i som midler for behandling av neoplastiske sykdommer, kan demonstreres ved den følgende testprosedyre:
Induksjon av HL- 60- celledifferensiering
Induksjon av differensieringen av HL-60-celler ble testet ved å måle deres oksydative utbruddspotensiale ifølge reduksjonen av nitroblått tetrazolium (NBT).
HL-60-celler ble holdt i RPMI1640-medium supplementert med 10% FCS, 2 mM L-glutamin, 1 mM natriumpyruvat, 1% ikke-essensielle aminosyrer, 50 U/ml penicillin og 50 mg/ml streptomycin. HL-60-celler (30.000 celler i 90 ml supplementert RPMI-medium) ble plassert i flatbunnede mikrotiter-brønner. Umiddelbart deretter ble 10 ml testforbindelser som er oppført nedenfor i Tabell II og som var fortynnet i supplementert RPMI-medium, tilsatt til brønnene for å gi slutlige konsentrasjoner mellom 10"<11>og 10"<6>M (utgående fra stamoppløsninger på 10"<2>M i etanol, lagret ved -20°C og beskyttet for lys). Etter 3 dager ble mediet fjernet fra brønnene med en flerkanals pipett og skiftet ut mot 100 ml NBT-oppløsning (1 mg/ml i fosfatbufret saltvann med 200 nM forbolmyristatacetat). Etter en ytterligere times inkuba-sjon ved 37°C ble NBT-oppløsningen fjernet, og man tilsatte 100 ml 10% natriumdodekylsulfat i 0,01N HC1. Mengden redu-sert NBT ble bestemt fotometrisk ved 540 nm under anvendelse av en automatisert platemåler. Middeltallet for 3 brøn-ner ble beregnet. Standardavviket var mellom 5 og 10%. Verdiene ble uttrykt som prosentandel av den maksimale differensiering som ble oppnådd med 100-1000 nM kalsitriol i et likt eksperiment. Konsentrasjonen (nM) som fører til en 50% reduksjon av denne maksimale verdi, ble bestemt grafisk og angis i Tabell II som ED50-verdi.
Fra de ovenfor angitte resultater er det tydlig at forbindelsene med formel I induserer differensiering av HL-60-celler og dermed hindrer disse svulstceller i å vokse. Følgelig er forbindelsene med formel I nyttige ved behandling av neoplastiske sykdommer, såsom leukemi.
Den nyttige aktivitet av forbindelsene med formel I som midler for behandling av talgkjertelsykdommer, såsom akne og seboréisk dermatitt, kan demonstreres ved den følgende testprosedyre:
Hemming av talgcelleproliferasion
Talgceller ble isolert fra talgkjertler fra voksne mennes-ker, erholdt fra ansiktshud som var fjernet under kosmetisk kirurgi. Denne fremgangsmåte beskrives i en artikkel av Doran et al. i J". Invest. Dermatol. 96:341-348 (1991) .
Cellene ble kultivert i Iscove's medium som inneholdt 10% føtalt kalveserum og 4 mg/ml deksametason på et skikt veksthemmede 3T3-musefibroblaster.
Cellene ble plassert på plater i medium uten testforbindelse, og testforbindelsene ble administrert i ferskt medium 24-48 timer senere. Kulturene fikk ferskt medium som inneholdt testforbindelsen hver 48. time. På dagen for samlin-gen av cellene, ble kulturene skylt med 0,03% etylendiamin-tetraeddiksyre (EDTA) i fosfatbufret saltvann (PBS) for å fjerne kun 3T3-fibroblastene. De gjenværende sebocyttkolo-nier ble inkubert i 0,05% trypsin/0,03% EDTA for å gi en enkeltcellesuspensjon av sebocytter. Cellene ble suspen-dert, omrørt kraftig for å gi en enkeltcellesuspensjon og telt i et hemocyttorneter.
Alle forbindelsene ble behandlet på den følgende måte: stamoppløsninger ble fremstilt som 10"<2>M oppløsninger i avgasset 100% etanol og lagret i mørke ved -20°C. Oppløs-ningene ble aldrig anvendt etter lengre enn 1 måneds lag-ring. Under eksperimentell bruk ble oppløsningene, som var delt opp i alikvoter, tint én gang og anvendt ved å fortyn-ne dem direkte i fullstendig medium til den egnede konsentrasjon.
Forbindelsene ble testet for hemming av proliferasjonen av talgceller in vitro ved de følgende konsentrasjoner: IO"<8>, IO"<7>og 10"<6>M.
Resultatene er oppført i Tabell III nedenfor som den mengde av forbindelsen som er nødvendig for å hemme proliferasjonen av talgcellene med 50% (ED50) i mM, sammenlignet med en kontrollkultur som kun var behandlet med bærerstoff.
Fra de ovenfor angitte resultater er det tydlig at forbindelsene med formel I hemmer talgcelleproliferasjon. Følge-lig er forbindelsene med formel I nyttige ved behandling av talgkjertelsykdommer, såsom akne og seboréisk dermatitt.
Den nyttige aktivitet av forbindelsene med formel I som midler ved behandling av sykdommer som krever modulasjon av immunsystemet, kan demonstreres som følger: Hemming av y- interferonfrigivning i humane T- celler
Mononukleære celler ble isolert fra venøst blod av friske donorer ved sentrifugering av lettcellelags leukocytter på "Ficoll-Pague". Lymfocyttene (70-80% T-celler) ble suspen-dert i RPMI 1640-medium supplementert med 10% FCS og inn-stilt til IO<6>celler/ml. 100/il av denne cellesuspensjon ble plassert i flatbunnede mikrotiterbrønner og stimulert med 1 mg/ml T-cellespesifikt mitogen fytohemagglutinin (PHA). Umiddelbart deretter ble testforbindelsene som er oppført nedenfor i Tabell IV, tilført for å gi slutlige konsentrasjoner mellom 1 x 10<_11>M og 1 x 10~<6>M. Alle testerble utført i fire eksemplarer.
På dagene 3 og 4, ble medium fjernet fra brønnene, og IFN-g-innholdet ble analysert ved ELISA. Verdiene angis som prosentandelen av kontrollprøvene (prøver uten testforbindelse). Den konsentrasjon som førte til 50% av kontroll-verdien, ble bestemt grafisk og angis som IC50-verdi (hemmende konsentrasjon) i Tabell IV.
Hemming av humane T- cellers proliferasion
Mononukleære celler ble isolert fra venøst blod av friske donorer ved sentrifugering av lettcellelags leukocytter på "Ficoll-Paque". Lymfocyttene (70-80% T-celler) ble suspen-dert i RPMI 1640-medium supplementert med 10% FCS og inn-stilt tilIO<6>celler/ml. 100 ml av denne cellesuspensjon ble plassert i flatbunnede mikrotiterbrønner og stimulert med 1 mg/ml PHA. Umiddelbart deretter ble testforbindelsene som er oppført nedenfor i Tabell V, tilført for å gi slutlige konsentrasjoner mellom 1 x 10"<1:>LM og 1 x10"<6>M. Alle tester ble utført i fire eksemplarer.
På dagene 3 og 4, ble det tilsatt<3>H-tymidin (5 Ci/mmol) til brønnene i en konsentrasjon på 1 mCi/brønn. Cellene ble impulsmerket under de 6 siste timene av vekstperioden. Cellene ble deretter samlet på en 96 brønners filterplate under anvendelse av en cellesamleanordning. Etter tørking ved 40°C under vakuum i 20-30 minutter ble 20^1 scintilla- sjonsmiddel tilsatt, og radioaktiviteten som var bundet til filtrene, ble telt. Verdiene uttrykkes som prosentandel av kontroilprøvene (prøver uten testforbindelse). Den konsentrasjon som fører til 50% av kontro11verdiene, ble bestemt grafisk og angis som IC50-verdi (hemmende konsentrasjon) i Tabell V.
Fra de ovenfor angitte resultater er det tydlig at forbindelsene med formel I hemmer g-interferonfrigivning i humane T-celler og hemmer humane T-cellers proliferasjon. Følgelig er forbindelsene med formel I nyttige ved behandling av sykdommer som krever modulasjon av immunsystemet, såsom transplantatutstøtning, "graft-vs.-host-disease" og lignende.
Kalsiumtoleransetest på mus
Grunnleggende endringer i kalsiumhomeostasen, har en kraftig innvirkning på vektutviklingen av mus.
Mus (25-30 g kroppsvekt) fikk daglige subkutane administra-sjoner av forbindelsen i 4 dager på rad. Kroppsvekten ble registrert rett før og etter en 5 dagers behandlings-periode. Den "høyeste tolererte dose" (HTD) er den dose som ikke fører til en øket kroppsvekt under denne behandlings-periode. Resultatene er oppført i Tabell VI.
Fra de ovenfor angitte resultater er det tydlig at forbindelsene med formel I tåles bedre enn 1,25-dihydroksykole-kalsif erol .
Orale doseringsformer som inneholder forbindelsene med formel I ifølge oppfinnelsen, kan innlemmes i kapsler,
tabletter og lignende med farmasøytisk akseptable bærerstoffer.
Eksempler på de farmasøytisk akseptable bærerstoffer som kan innlemmes i kapsler og lignende, er de følgende: bindemidler, såsom tragantgummi, akasie, kornstivelse eller gelatin; eksipienser, såsom dikalsiumfosfat; oppløsnings-midler, såsom kornstivelse, potetstivelse, alginsyre og lignende; smøremidler, såsom magnesiumstearat; søtstoffer, såsom sakkarose, laktose eller sakkarin; smakstoffer, såsom peppermynte, vintergrønnolje eller kirsebær. Forskjellige andre stoffer kan anvendes som belegg eller for å på en annen måte modifisere den fysiske form av doseringsenheten. F.eks. kan tabletter belegges med skjellakk, sukker eller både og. En syrup eller eliksir kan inneholde den aktive forbindelse, sakkarose som søtstoff, metyl- og propyl-paraben som konserveringsmidler, et fargestoff og et smak-stoff, såsom kirsebær- eller appelsinsmak.
Topiske doseformer som inneholder forbindelser med formel I ifølge oppfinnelsen, omfatter: salver og krever omfattende formuleringer på oljeholdige, absorberbare, vannoppløselige og emulsjonsaktige grunnlag, såsom vaselin, lanolin, poly-etylenglykoler og lignende.
Hudvann er flytende preparater, og de varierer fra enkle oppløsninger til vandige eller hydroalkoholiske preparater som inneholder findelte substanser. Hudvann kan inneholde suspensjons- eller oppløsningsmidler, f.eks. cellulose-derivater, såsom etylcellulose, metylcellulose og lignende; gelatin eller gummi, som innlemmer den aktive ingrediens i et bærerstoff som utgjøres av vann, alkohol, glycerin og lignende.
Geler er halvfaste preparater som fremstilles ved å gelere en oppløsning eller suspensjon av den aktive ingrediens i et bærerstoff. Bærerstoffene, som kan være vannholdige eller vannfrie, geleres ved anvendelse av et gelerings-middel, såsom karboksypolymetylen, og nøytraliseres til en egnet gelkonsistens ved anvendelse av alkalier, såsom natriumhydroksyd, og aminer, såsom polyetylenkokoamin.
Anvendt heri betyr "topisk" anvendelsen av den aktive ingrediens som er innlemmet i et egnet farmasøytisk bærerstoff og som påføres på stedet av lidelsen for å utøve en lokal virkning. Følgelig omfatter topiske sammensetninger de farmasøytiske former hvor forbindelsen påføres eksternt i direkte berøring med huden. De topiske doseformer omfatter geler, kremer, hudvann, salver, pulvere, aerosoler og andre konvensjonelle former for påføring av legemidler på huden, som erholdes ved å blande forbindelsene med formel I med kjente farmasøytiske topiske bærerstoffer.
De følgende Eksempler bringes for å ytterligere beskrive oppfinnelsen, og skal ikke begrense den på noen måte.
EKSEMPEL 1
3- Metyl- 3- t. butyldimetvlsilvloksvbutvn (formel IX)
Til en oppløsning av 25 g (0,29 mol) 3-metyl-3-hydroksy-butyn i 50 ml vannfritt N,N-dimetylformamid tilsatte man 44,5 g (0,65 mol) imidazol. Etter avkjøling av reaksjonsblandingen i et isbad, tilsatte man 50 g (0,33 mol) t.-butyldimetylsilylklorid. Reaksjonsblandingen ble omrørt i et isbad i 15 minutter ved romtemperatur over natten. 250 mg dimetylaminopyridin ble deretter tilsatt, og det hele ble oppvarmet i 2 timer til 70°C. Reaksjonsblandingen ble helt i 1 liter kaldt vann og ekstrahert med 5 x 150 ml eter. Eterekstraktet ble vasket med vann og saltvann, tørket over magnesiumsulfat og inndampet til tørrhet. Rensing ble utført ved flash-kromatografi på en kiselgelkolonne med pentan og destillering under et kammervakuum (kp. 120°C) for å gi 31,81 g (54%) tittelforbindelse.<X>K NMR (CDC13) : 6 = 0,87 (s, 9H) , 1,47 (s, 6H) , 2,39 (s, 1H) . Analyse: beregnet for<C>11<H>22OSi: C 66,60, H 11,18; funnet: C 66,13, H 11,46.
EKSEMPEL 2
4- Metyl- 4- 1. butyldimetylsilyloksypentvnal (formel X)
Til en oppløsning av 10 g (50 mmol) 3-metyl-3-t.butyl-dimetylsilyloksybutyn i 25 ml vannfritt tetrahydrofuran avkjølt til -78°C, ble det dråpevis i løpet av 40 minutter tilsatt 40 ml (63 mmol) 1,6M n-butyllitium i heksan. Etter omrøring i 1 time ved -78°C tilsatte man dråpevis 31 ml (400 mmol) N,N-dimetylformamid, og omrøringen forsattes i time. Reaksjonsblandingen ble deretter helt i 300 ml vann og saltvann og ekstrahert med 4 x 75 ml pentan. Ekstraktene ble vasket med ammoniumkloridoppløsning, vann og saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Rensing ble utført ved destillasjon for å gi 8,88 g (78%) tittel- - forbindelse, kp. 92-94°C ved 8 mm Hg.<X>H NMR (CDC13) : 6 = 0,87 (s, 9H), 1,54 (s, 6H), 9,24 (s, 1H).
EKSEMPEL 3
Epimer blanding 3aR- [ 1 ( R*) . 3acn. 4/ 3. 7ofb]- 3 , 3a. 5 . 6 . 7 , 7a- heksahydro- 7a- metyl- l[ 2( R. S)- hvdroksv- 5-( tert. butyldimetvlsilvl-oksy)- 1. 5- dimetvl- 3- heksynyl] - 4H- indenolacetat (formel VI)
Til en oppløsning av 2 g (9 mmol) [3aR-Z, 3aa, 4/3, 7a/3]-1-etylidenoktahydro-7a-metyl-lH-4-indenolacetat og 2,25 g (9 mmol) 4-metyl-4-tert.butyldimetylsilyloksypentynal i 5 ml vannfritt metylenklorid avkjølt til -78°C, ble det i løpet av 10 minutter tilsatt 20 ml (20 mmol) IM oppløsning av dimetylaluminiumklorid. Ettersom reaksjonen ifølge TLC kun var halvt fullstendig etter 2 timer, tilsatte man ytterligere 2,25 g aldehyd og 20 ml dimetylaluminiumklorid. Reaksjonen var fullstendig etter 1 times ytterligere omrøring. Det hele ble helt i 600 ml 2N kaliumbikarbonat og ekstrahert med 4 x 100 ml etylacetat, og ekstraktene ble vasket med vann og saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Flash-kromatografi på en kiselgelkolonne med først metylenklorid og deretter heksan/etylacetat (3:1) gav 4,16 g (100%) av tittel-epimerblandingen.
Separasjon av epimerene ble utført ved HPLC med heksan/- etylacetat 10:1 for å gi 3,25 g (78%) 2R-epimer, smp. 47-48°C; [ot]<2>)<5>= +7,20° (c 0,555 EtOH) ;<X>HNMR (CDC13) : 6 = 0,15 (s, 3H, SiCH3) , 0,16 (s, 3H, SiCH3) , 0,86 (s, 9H, SitBu) , 1,04 (s, 3H, CH3) , 1,14 (d, 3H, J=6,9 Hz, CH3) , 1,44 (s, 6H, 2CH3) , 2,05 (s, 3H, CH3CO), 2,40 (p, 1H, J=6,4 Hz, CH), 4,43 (t, 1H, J=6,3Hz, CH), 5,21 (brs, 1H, CHOAc), 5,68 (brs, 1H, =CH-); Analyse: beregnet for C26H4404Si: C 69,59, H 9,88; funnet: C 69,85, H 9,74.
og 0,754 g (18%) 2S-epimer, smp. 77-79°C, [a]<2>,<5>= +18,12°
(c 0,524, EtOH); % NMR (CDCl3) : 6 = 0,17 (2s, 6H, 2SiCH3) ,
0,87 (s, 9H, Sit.Bu), 1,03 (s, 3H, CH3) , 1,14 (d, 3H, J=6,9 Hz, CH3) , 1,47 (s, 6H, 2CH3) , 2,05 (s, 3H, CH3CO) , 2,37 (p, 1H, CH), 4,40 (dd, 1H, J=3,7og 7,8 Hz, CH), 5,21 (brs, 1H, CHOAc), 5,54 (brs, 1H, =CH-); Analyse: beregnet for<C>26<H>4404Si: C 69,59, H 9,88; funnet: C 69,42, H 10,15.
EKSEMPEL 4
f3aS- T3( 1S*. 2S*). 3aa. 7a, 7afl11- 3- \ 5 - f T( 1, 1- Dimetvletvl)-dimetvlsilvl] oksv- 1. 5- dimetyl- 4-( fenvlsulfinyl)- 2, 3- heksa-dienvl]- 3a. 4, 5. 6, 7, 7a- heksahvdro- 3a- metyl- lH- inden- 7- ol-acetat (formel VII)
Til en oppløsning av 802 mg (1,8 mmol) [3aS-[3 (1R*,2S*) ,3aa,7a,7a/3] ] -7- (acetyloksy) -a- [3 [ [ (1,1-dimetyl-etyl)dimetylsilyl]oksy-3-metyl-l-butynyl]-3a,4,5,6,7, 7a-heksahydro-j8, 3a-dimetyl-lH-inden-3-etanol i 20 ml vannfri eter ble det tilsatt 0,5 ml (3,6 mmol) trietylamin. Etter avkjøling til -78°C i et tørrisbad tilsatte man 8 ml (4 mmol) ferskt fremstilt fenylsulfenylklorid i løpet av to timer. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med vann og ekstrahert med eter. Eterekstraktet ble vasket med 2N kaliumbikarbonat, etterfulgt av vann inntil det var nøy-tralt, og saltvann. Etter tørking over natriumsulfat ble eteroppløsningen inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset ved flash-kromatografi med heksan/etylacetat 4:1 og deretter ved preparativ HPLC med heksan/etylacetat 3:1 for å gi 878 mg (88,2%) tittelforbindelse i form av en blanding av to epimere sulfoksyder.
EKSEMPEL 5
T3aS- T3 ( 1S*, 2R*) . 3aa. 7a. 7a/ 3] ] - 3- f5- f [ ( 1, 1- Dimetvletvl) - dimetylsilyl] oksy]- 1, 5- dimetyl- 2, 3- heksadienyl]-3a. 4. 5, 6, 7, 7a- heksahydro- 3a- metyl- lH- inden- 7- ol (formel II)
Til en oppløsning av 1,68 g (3,02 mmol) [3aS-[3(1S*,2S*),3aa,7a, 7aB]]-3-[5-[[(1,1-dimetyletyl)dimetyl-silyl]oksy]-1,5-dimetyl-4-(fenylsulfinyl)-2,3-heksadienyl]-3a, 4, 5, 6, 7, 7a-heksahydro-3o!-metyl-lH-inden-7-olacetat i 550 ml vannfri eter tilsatte man 0,432 ml (11,174 mmol) vannfri metanol. Den således erholdte blanding ble avkjølt til -100°C i et pentan/flytende nitrogen-bad, og man tilsatte 10,6 ml (18,12 mmol) 1,7M tert.butyllitium dråpevis i løpet av 10 minutter. TLC viste at reaksjonen var fullstendig. Reaksjonen ble stoppet med 8,0 ml metanol, og eterskiktet ble vasket med vann og deretter med saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet. Residuet ble oppløst i 12 ml etanol, og etter tilsetning av 7 ml 2N natriumhydroksyd oppvarmet man det til 70°C i tre timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann/saltvann 1:1 og ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann og saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC med heksan/etylacetat 7:1. Dette gav 593 mg (50,25%) tittelforbindelse, som krystalliserte i fryseren, smp. 64-65°C; [a]q<5>= + 99,62° (c 0,5, EtOH);<X>H NMR (CDC13) : 6 = 0,07 (s, 6H, SiMe2) , 0,85 (s, 9H, Si-t.butyl), 1,09 (s, 3H, CH3) , 1,11 (d, 3H, J=7Hz, CH3) , 1,29 (s, 3H, CH3) , 1,30 (s, 3H, CH3) , 1,98, 2,27 (m, 2H, CH2) , 2,83 (brm, 1H, CH) , 4,18 (brs, 1H, CH), 5,28 (t, 1H, J=6,3Hz, =CH-), 5,32 (dd, 1H, J=2,8 og 6,3 Hz, =CH-), 5,43 (brs, 1H, =CH-). Analyse: beregnet for C24H4202Si2: C 73,78, H 10,84; funnet: C 73,89, H 11,08.
EKSEMPEL 6
f3aS- \ 3 ( 1S*. 2R*). 3aa. 7gfl11- 3- \ S -[[( 1. 1- Dimetvletvl) dimetvl-silvll oksy]- 1, 5- dimetvl- 2. 3- heksadienyl]- 3a. 4, 5. 6, 7,7a-heksahvdro- 3a- metvl- 1H- inden- 7- on (formel III)
En oppløsning av 390 mg (1 mmol) [3aS-[3 (1S*,2R*) ,3aa,7a/3]] -3- [5- [[ (1,1-dimetyletyl) dimetyl-silyl] oksy]-1,5-dimetyl-2,3-heksadienyl]-3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-3a-metyl-lH-inden-7-ol i 8 ml vannfritt metylenklorid ble behandlet porsjonsvis med 1,694 g (4,5 mmol) pyridiniumdikromat og 85 mg pyridinium-p-toluensulfonat. Denne reaksjonsblanding ble omrørt i 4,5 h ved romtemperatur. Etter tilsetning av 20 ml eter ble blandingen omrørt i 20 minutter og deretter filtrert over "Celite", og residuet ble vasket med 3 x 50 ml eter. Filtratene ble vasket med 20 ml iskaldt IN HC1, vann, 40 ml 2N kaliumbikarbonat og en vann/saltvann-blanding. De vandige skikt ble ekstrahert med 2 x 100 ml etylacetat. De sammenslåtte organiske skikt ble tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset ved flash-kromatografi med heksan/- etylacetat 15:1 for å gi 350 mg (90%) tittelforbindelse.
EKSEMPEL 7
1. 25- Dihvdroksv- 16. 22S. 23- trienkolekalsiferol
Til en oppløsning av 820 mg (0,141 mmol) [3S-(1Z,3a,5b)]-2-[3,5-bis[[(1,1-dimetyl)dimetylsilyl]oksy]-2-metylencyklo-heksyliden]etyldifenylfosfinoksyd i 8 ml vannfritt tetrahydrofuran ved -78°C ble det dråpevis tilsatt 0,856 ml (1,37 mmol) 1,6M n-butyllitium i heksan. Etter omrøring i 5 minutter ble det til den således dannede røde oppløsning dråpevis i løpet av 10 minutter tilsatt en oppløsning av 350 mg (0,9 mmol) [3aS-[3(IS<*>,2R<*>),3aa,7ab]]-3-[5-[[(1,1-dimetyletyl)dimetylsilyl]oksy]-1,5-dimetyl-2,3-heksa-dienyl] -3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-3a-metyl-lH-inden-7-on i 5 ml vannfritt tetrahydrofuran. Reaksjonsblandingen ble omrørt under argon ved -78°C i 90 minutter, og deretter ble reaksjonen stoppet ved tilsetning av 10 ml l:l-blanding av 2N vandig kaliumnatriumtartrat og 2N vandig KHC03, og det hele ble ekstrahert med 3 x 125 ml etylacetat. De organiske skikt ble vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Residuet ble renset ved flash-kromatografi med heksan/etylacetat 40:1 for å gi 475 mg trisily-lert tittelforbindelse, som ble oppløst i 6 ml vannfritt tetrahydrofuran og behandlet med 6,4 ml IM tetrabutylammoniumfluorid i tetrahydrofuran under argon. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 45,5 h ved romtemperatur. Reaksjonen ble stoppet med 5 ml vann, og etter fjerning av tetrahydrofuranet under vakuum ble det hele ekstrahert med 3 x 120 ml etylacetat. Det organiske skikt ble vasket med en blanding av vann og saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset ved flash-kromatografi med heksan/etylacetat 1:3 for å gi 172 mg (46,5%) tittelf orbindelse. [a]<2>,<5>= +67,5° (c 0,2, EtOH). UV^g (EtOH): 258-259 nm (e 11520).<X>HNMR (20:1 CDCl3/DMSO-d6) : 6 = 0,73 (s, 3H, CH3) , 1,16 (d, 3H, J=6,7 Hz, CH3), 1,34 (s, 6H, 2CH3) , 4,22 (brm, 1H, CH) , 4,43 (brm, 1H, CH), 4,98 (s, 1H, CH fra =CH2) , 5,34-5,42 (m, 4H, CH fra =CH2, allen, =CH-), 6,14 (d, 1H, J=llHz, =CH-), 6,35 (d, 1H, J=ll Hz, =CH-).
EKSEMPEL 8
[ 3aS- [ 3 ( 1S*. 2R*) . 3aa, 7o?. 7aiS] 1 - 3- \ 5 - \ \ ( 1. 1- Dimetvletvl) - dimetvlsilvl] oksy]- 1. 5- dimetyl- 4-( fenylsulfinvl)- 2, 3- heksa-dienyl] - 3a. 4, 5, 6, 7, 7a- heksahvdro- 3a- metvl- lH- inden- 7- ol-acetat (formel XIV)
Til en oppløsning av 681 mg (1,52 mmol) [3aS-[3 (1R*,2R*) ,3aaa7of,7a/3] ] -7-acetyloksy) -or- [3- [ [ (1,1-dimetyl-etyl)dimetylsilyl]oksy]-3-metyl-l-butynyl]-3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-/9,3a-dimetyl-lH-inden-3-etanol i 40 ml vannfri eter tilsatte man 0,423 ml (3,04 mmol) trietylamin. Til denne omrørte blanding ved -78°C ble det dråpevis tilsatt ferskt fremstilt fenylsulfenylklorid inntil en gul farge vedvarte. Etter omrøring i ytterligere 1 time ble reaksjonsblandingen oppvarmet til romtemperatur, fortynnet med vann og ekstrahert med eter. Eterekstraktene ble vasket med 2N kaliumbikarbonat, vann og saltvann, tørket over natrium-sulf at og inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset først ved flash-kromatografi med etylacetat og deretter ved HPLC med heksan/etylacetat 3:1 for å gi 655 mg (51%) av tittel-epimersulfoksydene.
EKSEMPEL 9
[ 3aS- T3( 1S*, 2S*), 3aa. 7a, 7afl] 1- 3- T5- T r( 1. 1- Dimetvletvl)-dimetylsilyl] oksy]- 1. 5- dimetvl- 2. 3- heksadienyll-3a. 4. 5. 6. 7, 7a- heksahydro- 3a- metvl- lH- inden- 7- ol (formel XI)
Til en oppløsning av 655 mg (1,18 mmol) [3aS-[3 (IS*, 2R*) , 3aof, 7a, 7a/3] ] -3- [5 - [ [ (1,1-dime ty le tyl) dimetyl-silyl] oksy] -1,5-dimetyl-4-(fenylsulfinyl)-2,3-heksadienyl] - 3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-3a-metyl-lH-inden-7-olacetat i 200 ml vannfri eter ble det tilsatt 0,176 ml (4,35 mmol) vannfri metanol. Den således erholdte blanding ble avkjølt til
-100°C i et pentan/flytende nitrogen-bad, og 8 ml (14,1 mmol) 1,7M tert.butyllitium ble tilsatt dråpevis, hvoretter fargen ble brunaktig gul. TLC tydet på at reaksjonen var fullstendig. Reaksjonen ble stoppet med 4 ml metanol, og blandingen ble vasket med vann inntil den var nøytral og deretter med saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet. Residuet (730 mg) ble oppløst i 8 ml etanol, og etter tilsetning av 4 ml 2N natriumhydroksyd ble det oppvarmet til 70°C i VA h. Etter fortynning med saltvann/vann, ble det ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann inntil det var nøytralt og deretter med saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Råproduktet (610 mg) ble renset ved HPLC med heksan/etylacetat
7:1 for å gi 208 mg (45,2%) tittelf orbindelse; [a]2,<5>=10,82° (c 0,5%, EtOH);<1>H NMR (CDC13): 6 = 0,08 (s, CH, SiMe2) , 0,86 (s, 9H, Si-tButyl), 1,09 (s, 3H, CH3) , 1,13
(d, 3H, J=6,9 Hz, CH3) , 1,99, 2,27 (m, 2H, CH2) , 2,83 (m, 1H, CH), 4,18 (brs, 1H, CH), 5,21 (t, 1H, J=6,4 Hz, =CH-), 5,34 (dd, 1H, J=2,7og 6,4 Hz, =CH-), 5,44 (brs, 1H, =C-).
EKSEMPEL 10
T3aS- T3( 1S*. 2S*). 3aa. 7abl1- 3- 15 -\\( 1. 1- Dimetvletvl) dimetyl-silyl] oksy] - 1. 5- dimetvl- 2. 3- heksadienvl]- 3a, 4. 5. 6. 7,7a-heksahydro- 3a- metvl- 1H- inden- 7- on (formel XII)
En oppløsning av 415 mg (1,06 mmol) [3aS-[3(1S<*>,2S<*>),3aa,7a,7ab]]-3-[5-[[(1,1-dimetyletyl)dimetyl-silyl] oksy]-1,5-dimety1-2,3-heksadienyl]-3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-3a-metyl-lH-inden-7-ol i 9 ml vannfritt metylenklorid ble behandlet med 1,2 g (3,19 mmol) pyridiniumdikromat og 60 mg pyridinium-p-toluensulfonat. Etter omrø-ring i 2 h ved romtemperatur ble det tilsatt ytterligere 564 mg (1,5 mmol) pyridiniumdikromat og 28 mg pyridinium-p-toluensulf onat , og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 2,5 h. 25 ml eter ble deretter tilsatt, og etter omrøring i 20 minutter ble blandingen filtrert over "Celite" og vasket med eter (3 x 50 ml). Filtratet ble vasket med 20 ml iskaldt IN HC1, vann, 2N KHC03(40 ml) og en blanding av vann og saltvann. De vandige skikt ble ekstrahert med etylacetat. De sammenslåtte organiske skikt ble tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset ved flash-kromatografi med heksan/etylacetat 15:1 for å gi 310 mg (75%) tittelforbindelse.
EKSEMPEL 11
1. 25- Dihvdroksy- 16. 22R. 23- trienkolekalsiferol
Til en oppløsning av 755 mg (1,3 mmol) [3S- (1Z, 3a, 5/3] -2-[3,5-bis[[(1,1-dimetyl)dimetylsilyl]oksy]-2-metylencyklo-heksyliden]etyl]difenylfosfinoksyd i 8 ml vannfritt tetrahydrofuran ved -78°C ble det dråpevis tilsatt 0,79 ml (1,26 mmol) 1,6M n-butyllitium i heksan under argon. Etter omrø-ring i 5 minutter ble det til den således dannede røde oppløsning dråpevis i løpet av 10 minutter tilsatt en oppløsning av 310 mg (0,8 mmol) [3aS-[3 (IS*, 2S*) , 3aa, 7a/3] ] - 3- [5- [ [ (1,1-dimetyletyl) dimetylsilyl] oksy] -1, 5-dimetyl-2 , 3-heksadienyl]-3a,4,5,6,7,7a-heksahydro-3a-metyl-lH-inden-7-on i 4 ml vannfritt tetrahydrofuran. Blandingen ble omrørt under argon ved -78°C i ytterligere 90 minutter, og reaksjonen ble stoppet ved tilsetning av 10 ml l:l-blanding av 2N vandig kaliumnatriumtartrat og 2N vandig KHC03, og det hele ble ekstrahert med 2 x 120 ml etylacetat. Den organiske fase ble vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Det ubehandlede trisylerte slutt-produkt ble renset ved flash-kromatografi med heksan/etylacetat 40:1. 434 mg således renset mellomprodukt ble opp-løst i 5,5 ml vannfritt tetrahydrofuran og behandlet med 9,96 ml IM tetrabutylammoniumfluorid i tetrahydrofuran under argon ved omrøring i 71 h ved romtemperatur. Etter stopping av reaksjonen med 5 ml vann ble tetrahydrofuranet fjernet under vakuum, og residuet ble fortynnet med vann og ekstrahert med 3 x 120 ml etylacetat. Det organiske skikt ble vasket med en blanding av vann og saltvann, tørket over natriumsulfat og inndampet til tørrhet. Råproduktet ble renset ved flash-kromatografi med heksan/etylacetat 1:3 for å gi 215 mg (65,5%) tittelforbindelse, som krystalliserte fra en blanding av tetrahydrofuran og metylformiat (1:7); smp. 174-176°C, [a] = +0° (c 0,2, EtOH). UVmaks(EtOH):264 nm (e 17080).<X>H NMR (CD30D) : = 0,74 (s, 3H, CH3) , 1,18 (d, 3H, J=6,9 Hz, CH3) , 1,30 (s, 3H, CH3) , 1,31 (s, 3H, CH3) , 1,31 (s, 3H, CH3) , 1,52 (m, 1H, CH fra CH2) , 1,89 (t, 2H, J=5,6 Hz, CH2) , 4,13 (q, 1H, J=5,3 Hz, CH) , 4,36 (t, 1H, J=5,8 Hz, CH), 5,21 (t, 1H, J=6,7 Hz, =CH-), 5,30 (s, 1H, CH fra =CH2) , 5,33 (dd, 1H, J=2,3 og 6,2 Hz, =CH-), 5,45 (s, 1H, =CH-), 6,17 (d, 1H, J=ll,2 Hz, =CH-), 6,3 (d, 1H, J=ll,2 Hz, =CH-).
De følgende farmasøytiske doseringsformer fremstilles på i og for seg kjent måte:
EKSEMPEL 12
Oral doseringsform: bløtgelatinkapsel
EKSEMPEL 13
Oral doseringsform: bløtgelatinkapsel
EKSEMPEL 14 Topisk doseringsform: krem
EKSEMPEL 15
Topisk doseringsform: gel
EKSEMPEL 16
Topisk doseringsform: gel

Claims (10)

1. Forbindelse karakterisert ved formel
hvor R betyr hydroksy og R <1> betyr H2 eller CH2 , eller R betyr hydrogen eller fluor og R <1> betyr CH2 .
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R betyr hydroksy og/el ler at R <1> betyr CH2 .
3. Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at den er 1,25-dihydroksy-16,22S,23-trienkolekalsiferol eller 1,25-dihydroksy-16,22R,23-trienkolekalsiferol.
4. Forbindelse karakterisert ved formel eller
hvor R <4> og R <6> betyr lavere alkyl, og R <5> betyr lavere alkyl, aryl eller ar-lavere alkyl.
5. Forbindelse karakterisert ved formel
hvorR<4> ogR<6> betyr lavere alkyl, og R <5> betyr lavere alkyl, aryl eller ar-lavere alkyl. 6. Forbindelse karakterisert ved formel hvorR<4> og R <6> hver uavhengig betyr lavere alkyl, og R <5> uavhengig betyr lavere alkyl, aryl eller ar-lavere alkyl.
7. Farmasøytisk sammensetning, spesielt for hemming av hudhyperproliferasjon og svulstceller, spesielt for behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis, neoplastiske sykdommer, såsom leukemi, og talgkjertelsykdommer, såsom akne og seboréisk dermatitt, karakterisert ved at den inneholder en virksom mengde av en forbindelse med formel I ifølge krav 1, 2 eller 3, og et inert bærerstoff.
8. Fremgangsmåte ved fremstilling av en forbindelse med formel I ifølge krav 1, karakterisert ved fjerning av silylbeskyttelsesgruppene fra en tilsvarende silylert diol eller triol med formel I, hvor silylbeskyttelsesgruppene fortrinnsvis er Si (R4,R5,R6) , hvor R4 ogR<6> betyr lavere alkyl og R <5> betyr lavere alkyl, aryl eller aryl-lavere alkyl, hvor fjerningen av silylbeskyttelsesgruppen med fordel utføres ved omsetning med et fluorsalt i et polart organisk oppløsningsmiddel.
9. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 ved fremstilling av farmasøytiske sammensetninger med anti-hyper-prolif erativ aktivitet og svulstcellehemmende aktivitet, spesielt ved behandling av hyperproliferative hudsykdommer, såsom psoriasis, neoplastiske sykdommer, såsom leukemi, og talgkjertelsykdommer, såsom akne og seboréisk dermatitt.
10. Nye forbindelser, mellomprodukter, formuleringer, fremgangsmåter og anvendelser, hovedsaklig som beskrevet heri.
NO971217A 1996-03-21 1997-03-17 Dihydroksy-trisdehydro-kolekalsiferolderivater NO971217L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1380996P 1996-03-21 1996-03-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO971217D0 NO971217D0 (no) 1997-03-17
NO971217L true NO971217L (no) 1997-09-22

Family

ID=21761865

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO971217A NO971217L (no) 1996-03-21 1997-03-17 Dihydroksy-trisdehydro-kolekalsiferolderivater

Country Status (30)

Country Link
EP (1) EP0796843B1 (no)
JP (1) JP2801587B2 (no)
KR (1) KR100240541B1 (no)
CN (1) CN1110477C (no)
AR (1) AR006315A1 (no)
AT (1) ATE240941T1 (no)
AU (1) AU708679B2 (no)
BR (1) BR9701404A (no)
CA (1) CA2199893C (no)
CO (1) CO4820396A1 (no)
CZ (1) CZ85897A3 (no)
DE (1) DE69722064T2 (no)
DK (1) DK0796843T3 (no)
ES (1) ES2198512T3 (no)
HR (1) HRP970162A2 (no)
HU (1) HUP9700609A3 (no)
ID (1) ID16285A (no)
IL (1) IL120469A0 (no)
MA (1) MA26423A1 (no)
MX (1) MX9702139A (no)
NO (1) NO971217L (no)
NZ (1) NZ314424A (no)
PE (1) PE42998A1 (no)
PL (1) PL319070A1 (no)
PT (1) PT796843E (no)
SG (1) SG70589A1 (no)
TR (1) TR199700219A3 (no)
TW (1) TW444001B (no)
YU (1) YU10397A (no)
ZA (1) ZA972302B (no)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9625271D0 (en) * 1996-12-04 1997-01-22 Leo Pharm Prod Ltd Chemical compounds
US6331642B1 (en) * 1999-07-12 2001-12-18 Hoffmann-La Roche Inc. Vitamin D3 analogs
KR101285720B1 (ko) * 2012-03-02 2013-07-19 주식회사 유니크메디케어 여드름 개선용 조성물
KR102493627B1 (ko) 2015-11-26 2023-01-31 코웨이 주식회사 호르데닌을 유효성분으로 함유하는 피부암 예방 또는 치료용 약학 조성물

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA8923B (en) * 1988-01-20 1989-09-27 Hoffmann La Roche 16-dehydro-vitamin d3-derivatives
DK0398217T3 (da) * 1989-05-18 1994-02-14 Hoffmann La Roche Dehydrocholecalciferolderivater

Also Published As

Publication number Publication date
TR199700219A2 (xx) 1997-10-21
PT796843E (pt) 2003-09-30
EP0796843B1 (en) 2003-05-21
ATE240941T1 (de) 2003-06-15
AR006315A1 (es) 1999-08-25
EP0796843A3 (en) 1999-04-14
IL120469A0 (en) 1997-07-13
HUP9700609A3 (en) 1999-03-01
MX9702139A (es) 1998-04-30
MA26423A1 (fr) 2004-12-20
PE42998A1 (es) 1998-08-11
TW444001B (en) 2001-07-01
CA2199893C (en) 2008-02-05
JPH107651A (ja) 1998-01-13
ID16285A (id) 1997-09-18
HRP970162A2 (en) 1998-04-30
KR970065495A (ko) 1997-10-13
KR100240541B1 (ko) 2000-01-15
AU1513597A (en) 1997-09-25
CZ85897A3 (cs) 1998-04-15
YU10397A (sh) 1999-07-28
CA2199893A1 (en) 1997-09-21
PL319070A1 (en) 1997-09-29
TR199700219A3 (tr) 1997-10-21
DE69722064D1 (de) 2003-06-26
CN1172793A (zh) 1998-02-11
JP2801587B2 (ja) 1998-09-21
NZ314424A (en) 1998-07-28
HUP9700609A2 (hu) 1998-07-28
AU708679B2 (en) 1999-08-12
DK0796843T3 (da) 2003-09-15
NO971217D0 (no) 1997-03-17
CN1110477C (zh) 2003-06-04
ZA972302B (en) 1997-09-22
EP0796843A2 (en) 1997-09-24
HU9700609D0 (en) 1997-05-28
ES2198512T3 (es) 2004-02-01
DE69722064T2 (de) 2004-04-08
SG70589A1 (en) 2000-02-22
CO4820396A1 (es) 1999-07-28
BR9701404A (pt) 1998-11-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5512554A (en) Method of treating hyperproliferative skin diseases with fluorinated vitamin D3 analogs
US5939408A (en) Vitamin D3 analogs
KR100783856B1 (ko) 비타민d3동족체
NZ260647A (en) Vitamin d derivatives and medicaments thereof
FR2630740A1 (fr) Composes derives de vitamine d3, procede pour les preparer et leur utilisation
RU2235721C2 (ru) Аналоги витамина d3
EP0580968A2 (en) Vitamin D3 fluorinated analogs
US5750517A (en) Method of treating sebaceous gland diseases with vitamin D3 fluorinated analogs
RU2165923C2 (ru) Аналоги витамина d, способ их получения, фармацевтическая композиция
NO971217L (no) Dihydroksy-trisdehydro-kolekalsiferolderivater
EP0983221B1 (en) Cyclohexanediol derivatives
US5840718A (en) 22-epimeric-1,25-dihydroxy-16,22,23-triene-cholecalciferol
MXPA97002139A (en) Derivatives of 1,25-dihydroxy-16,22,23-trisdeshidro-colecalcife
WO1995019963A1 (en) New pharmacotherapeutically active compounds
AU5117198A (en) Vitamin d3 derivatives
Batcho et al. Vitamin D 3 analogs
JP3633639B2 (ja) ビタミンd化合物およびそれらの製造方法
Enrico et al. Method of treating hyperproliferative skin diseases with fluorinated vitamin D 3 analogs
WO1997016423A1 (en) 24-homo-26,27-hexafluoro-cholecalciferols
MXPA97003774A (en) Vitamin analogues
MXPA98003345A (es) 24-homo-26,27-hexafluoro-colecalcifero

Legal Events

Date Code Title Description
FC2A Withdrawal, rejection or dismissal of laid open patent application