NO744526L

NO744526L -

Info

Publication number: NO744526L
Application number: NO744526A
Authority: NO
Inventors: S Terao; M Shiraishi; T Miyawaki; I Minamida; M Maoka; M Numata
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date: 1973-12-20
Filing date: 1974-12-16
Publication date: 1975-07-14
Also published as: FR2255075A1; US4011214A; DE2458695A1; CH617437A5; JPS5093990A; JPS5715597B2; DK666574A; FR2255075B1; SE7415839L; GB1463999A; CA1031324A; NL7416608A; AU7642174A

Description

3-(morfolinoalkoksyiminometyl)cefemforbindelser

i samt'fremgangsmåter til deres fremstilling.

Foreliggende'oppfinnelse angår nye og verdifulle cefalosporinforbindelser samt en fremgangsmåte for fremstilling av disse. Mer spesielt angår oppfinnelsen forbindelser med formelen:

1 • 2-

hvor R er en acylgruppe og R er en alkylengruppe som kan være substituert med en lavere alkoksyigruppe.

Tidligere har foreliggende søkere oppdaget en for-kortet fremgangsmåte ved hjelp av hvilken man kan lett fremstille et. cefalosporin-laktolderivat- med formelen: (hvor R<1>er som definert ovenfor) fra 3-hydroksymetyl-cefalosporinderivater med formelen:

(hvor R"*" er som definert ovenfor). Denne fremgangsmåte er allerede publisert i belgisk patent nr. 808.3^1 og Offenlegungsschrift 2.360.620 i Vest- Tyskland. ;Basert på dette arbeid har man nå forsøkt å få et cefalosporin-laktolderivat (II) til å reagere med et 0-(morfolino-alkyl)hydroksylamin.med formelen: (hvor R 2 er som definert ovenfor) samt å acylere et aminocefalosporin-syrederivat med formelen: ; (hvor R 2 er som definert ovenfor) for derved å få fremstilt en 3_ ;(morfolinoalkoksyiminometyl)cefemforbindelse (I). Man har under dette arbeid oppdaget at forbindelsen med formel (I) er en stabil forbindelse som har sterkahemmende virkning på en rekke'gram-positive og gram-negative bakterier, da spesielt Escherichia coli og Klebsielle pneumoniae, og at disse aktiviteter er sterkere enn ;for hittil kjente cefalosporiner.;Foreliggende oppfinnelse er utviklet på basis av ovennevnte oppdagelse. ;Det er følgelig en prinsipiell hensikt ved.foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe nye og verdifulle forbindelser med formel (I). ;Videre er det en hensikt ved forbindelsen å tilveiebringe en fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser med formel (I). ;■Videre er det ytterligere en hensikt ved oppfinnelsen;å tilveiebringe nye farmasøytiske preparater som inneholder forbindelser med formel (I). ;Andre hensikter ved foreliggende oppfinnelse vil fremgå ;■av den etterfølgende beskrivelse.;Utgangsforbindelsen med formel (II) som brukes i først-nevnte fremgangsmåte ifølge foreliggende oppfinnelse, inneholder en. acylgruppe med symbolet r\ og denne er fortrinnsvis en acylgruppe som finnes i de tilsvarende grupper i penicilliner og cefalosporinderivater, da spesielt en substituert oksyacetylgruppe såsom fenoksyacetyl, fenoksypropionyl eller lignende, men kan også være .en av de følgende grupper: alifatiske karboksylsyreacylgrupper såsom formyl, acetyl, propionoyl, heksanoyl, outanoyl, heptanpyl, oktanoyl, cyklopentanoyl etc.; mono-substituerte alifatiske karboksylsyreacylgrupper såsom fenylacetyl, .cykloheksylacetyl, l-cykloiheksenylacetyl, 1,4-dykloheksadienylacetyl, 2-tienylac etyl, tetrazolyltioacetyl, tetrazolylacetyl, cyanoacetyl, fenoksyacetyl, acetoacetyl, ^metyltio-3-oksobutyryl, 4-karbamoylmetyltio-3_ oksobutyryl, a-fenoksypropionyl, a-fenoksybutyroyl, a-(p-nitro-fenoksy)-acetyl, a-(p-aminofenoksy)propionyl, p-nitrofenylacetyl, fenylpropionyl, butyltioacetyl, a-(p-klorfenoksy)acetyl, a-(2-pyridyloksy.) acetyl, a-(3-pyridyloksy)acetyl, a-( 4-pyridyloksy )-acetyl, fenyltioacety1, klorfenyltioacetyl, benzyltioacetyl, fenetyltioacetyl, allyltioacetyl, 4-pyridyltioacetyl, benzyltio-propionyl, (l-imino-2-fenyletyl)aminoacetyl, 2-(3-sydnon)acetyl, 1-pyrazolylacetyl, 4-nitro-1-pyrazolylacetyl, 4-klor-l-pyrazolylacetyl, 3,5-dimetyl-l-pyrazolylacety1, 2-furylacetyl, 6-(2'-okso-3'-metylpyradizinyl.) tioacetyl, etc.; di-substituerte alifatiske karboksylsyreacylgrupper såsom a-karboksylfenylacetyl, a^brom-propionyl, a-aminofenylacetyl, mandelyl, a-sulfofenylacetyl, a-sulfo-(p-aminofenyl)acetyl, 1-cyklohekseny.lglycyl, tienylglycyl, furylglycyl, cykloheksadienylglycyl, fenylmetylglycyl, karbamoyl-fenylacetyl, 5-amino-5~karboksyv.aleryl, 5-karboksy-5~ ( 2 ' ,6'-dialkyl-3',5'-dikarboalkoksy-1', k' -dihydropyrido-1'-yl)valeryl, 5-fenyl-acetylamino-5-karboksyvaleryl, 5-benzoylamino-5-karboksyvaleryl, 5- (p-toluensuilf onyl) amino-5-karboksyvaleryl, ■ 5- (benzyloksykarbonyl) - amino-5-karboksyvaleryl, a-(8-metylsulfonyletoksykarbonyl)-aminofenylacetyl, etc. ; akryloyl, aromatiske acylgrupper såsom benzoyl, 2,6-dimetoksybenzoyl, 2-etoksynaf toyl ,•• 2-feriylbenzoyl, p-nitro-benzoyl, etc, heterocykliske acylgrupper såsom 5-metyl-3-fenyl-4-isooksazolylkarbonyl, 3-o-klorfenyl-5-metyl-4-isooksazolylkarbonyl, 3_ (2 , 6-dikl.orf enyl)-5-metyl-4-isooksazolylkarbonyl, etc. f.eks. ;Når slike .acylgrupper inneholder aminogrupper kan disse være beskyttet ved grupper såsom alkyloksykarbonyl (f.eks. isobornyl-oksykarbony1, etc), g-alkylsulf.onyletoksykarbony 1 (f.eks. 8-metyl-sulf ony letoksykarbonyl , etc ) , arylkarbonyl som kan være substituert med tertiære lavere alkylgrupper (f.eks. benzoyl, ftalyl, p-t-butyl-, benzoyl, etc), aralkylkarbony 1 (f. eks. fenylacetyl, etc), aryltio-karbbnyl (f.eks. fenyltiokarbony1, etc), aralkyloksykarbonyl (f.eks. benzyloksykarbonyl, etc), ary lsulfony 1 som kan være substituert med lavere alkylgrupper (f.eks. p-toluen-sulfonyl, p-t-butylbenzen-sulfony1, etc.). ;Mer fordelaktig er acylgruppene formyl, benzoyl eller gruppeni med følgende formel: ; hvor R"^ er hydrogen, fenyl, fenoksy, tienyl, tetrazolyl, furyl, pyrazolyl, pyridyloksy, cyklohekseny1, acetyl, cyano, 3_amino-3_ karboksypropyl, 3~beskyttet anno-3_karboksypropy 1, og ■ R Her hydrogen, hydroksyl, sulfo, amino, karboksyl eller en lavere alkylgrupper ;Hver av disse cefalosporinlaktolderivater (II) eksisterer i en likevekt med en aldehydforbindelse (VI), som er en tautomer av det førstnevnte derivat, noe som fremgår av de nedenstående formler; ; Denne likevekt påvirkes i betydelig grad av oppløsningens pH, oppløsningsmidlets polaritet samt andre faktorer. ;Hydroksylgruppen i cefalosporinlaktolderivatet (II);kan være erstattet med en alkoksylgruppe, f.eks. metoksy, etoksy eller propoksy., eller en acy loksygruppe ,. f. eks . acetoksy.- ;Også verdifulle er forskjellige estere av 4-karboksyl-funksjonen av aldehydforbindelsen (VI) (japansk patentsøknad somler lagt åpen 6859^/1973)• Som nevnte estere kan man mest vanlig anvende lett spaltbare estere eller farmasøytisk akseptable estere slik . disse er beskrevet i det etterfølgende. ;Begge disse forbindelser som er nevnt i avsnittet;ovenfor inngår i definisjonen av cefalosporinlaktolderivater (II);som kan brukes i foreliggende reaksjon.;Den andre utgangsforbindelsen-med formel (IV) inneholder en alkylengruppe angitt med symbolet R 2 og denne kan være enhver alkylengruppe såsom metylen, etylen, trimetylen, tetrametylen, 1-metyletylen, 2-metyletylen, 1-metylpropylen, 2-metylpropylen, 3-metylpropylen, 1,1-dimetyletylen etc. Disse alkylengrupper kan ha slike substituenter som alkoksylgrupper, f.eks. metoksy, etoksy, etc. Hver av disse o-(morfolinoalkyl)hydroksylaminer underkastes den foran nevnte, reaksjon, enten i fri form eller i andre former såsom salter med syrer, f.eks. saltsyre, svovelsyre, eddiksyre etc. ;Reaksjonen mellom cefalosporinlaktolderivatet (II) og o-(morfolinoalkyl)hydroksylaminet. (IV) utføres vanligvis ved å ;blande dem i ekvimolare mengder i et oppløsningsmiddel, skjønt deres forhold kan varieres innenfor rimelige grenser. Skjønt opp-løsningsmidlet kan være ethvert oppløsningsmiddel som ikke skadelig påvirker reaksjonen, -så er det fordelaktig å anvende dimetylsulfoksyd, dimetylformamid, tetrahydrofuran, dioksan, etylacetat, acetonitril og sulfolan, såvel som egnede blandinger av slike oppløsningsmidler. I de fleste tilfeller vil reaksjonen være full- ;stendig i løpet av tidsrom fra 1-8 timer. Nevnte o-(morfolino-alkyl )hydroksylamin kan brukes som det tilsvarende salt med en sterk syre, f.eks. i form av et hydroklorid eller sulfat. I.ethvert slikt tilfelle vil reaksjonen gå glattere hvis'reaksjonssystemet ;er tilsatt et alkalimetallsalt av én svak syre, f.eks. natriumåcetat, kaliumacetat leller natriumhydrogenkarbonat. ;De fremgangsmåter man bruker for å isolere og rense de fremstilte 3- (morfolino-alkoksyiminomety 1)cefemforbindelser (I) .. 1 2 varierer i detalj med den spesielle kombinasjon av R og R som forefinnesj'men. vanligvis kan forbindelsene skilles og renses på kjent måte, f.eks. ved oppløsningsmiddelekstraksjon, kromatografi hvor man bruker ioneutbytningsharpikser, polystyrenharpikser, silisiumdioksydgel, cef adexharpiks , etc, som absorbsj onsmidler eller ved hjelp av molekylære siler, eller/og ved omkrystallisasj.on; - De fremstilte 3-(morfolinoalkoksyiminometyl)cefemforbindelser (I) kan brukes med 4-karboksylgruppen fri eller alternativt i form av et salt med ikke-toksisk kation, f.eks. natrium, kalium eller lignende, en basisk aminosyre, f.eks. ;arginin, ornitin, lysin, histidin,eller lignende, eller et poly-hydroksyalkylamin, f.eks. N-metyl-glukamin, dietanolamin, tri-etanolamin, tris-hydroksymetylaminométan eller lignende. ;Det cefalosporinlaktolderivat (II) som brukes i ovennevnte reaksjon kan lett fremstilles ved.å oksydere et 3-hydroksy-metylceifalosporinderivat med følgende formel: ; (hvor R<1>er som definert .ovenfor) eller et alkalimetallsalt eller ester av dette med en heksavalent kromforbindelsé. ;Nevnte 3~(morfolinoalkoksyiminometyl)cefemforbindelser (I) ifølge foreliggende oppfinnelse kan også fremstilles ved å acylere et aminocefalosporaninsyrederivat med formel. (V). Dette derivat kan fremstilles ved en avspaltning på kjent måte av f-acylgruppen fra det tilsvarende acylderivat, såsom 7B-/D-5-(p-t-butylbenzoy1)amino-5-karboksyvaleramido7-3-morfolinoalkyloksyimino-metyl-3-cef em-4-kar.boksylsyre eller 76-/D-5- (p-t-butylbenzensulfonyl) amino-5-karboksyvaleramido7-3-morfolinoalkyloksyiminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre og forbindelsene underkastes denne reaksjon i fri form eller som et salt eller som en lett spaltbar ester.. Som det foran nevnte salt kan man bruke de tilsvarende salter av alkali eller alkalijordmetaller eller av organiske aminer, såsom salter av natrium, kalium, magnesium, aluminium, trimetylamin, trietylamin, tributylamin, etc. Som den lett spaltbare ester kan man'bruke produkter som oppstår ved en.reaksjon mellom aminocefalosporanin, syrederivatet (V) og silyleringsmidler såsom trialkylhalogensilaner, triaralkylhalogensilåner, trialkoksyhalogensilaner, heksaalky1-disilazan, N,O-bis(trimetylsilyl)acetamido, etc. ; sileneringsmidler såsom dialkyldihalogensilaner, diaralkyIdihalogensilaner, etc., tinnf orestrende midler såsom tinno.ksyd (trialky ltinn ) , N-trialkyl-stannyldialkylaminer, trialkylstannylalkoksyder, etc., og reaksjons-produktene av aminocefalosporaninsyrederivatet (V) og alkylsulfonyl-alkylhalogenider, alkyltioalkylhalogenider, etc' ;Acyleringsreaksjonen utføres ved å la en karboksylsyre som må innføres i aminocefalosporaninsyrederivatet (V) eller et reaktivt derivat av dette virke på aminocefalosporaninsyrederivatet (V)..Som nevnte reaktive derivat kan man blant andre bruke de tilsvarende syrehalogenider, f.eks. syreklorider, syrebromider, etc., syreanhydrider med alkylkarbonater, alkylfosfater, andre karboksyl-syrer etc., aktiverte estere av karboksylsyren med pentaklorfenol, p-nitrofenol, N-hydroksysuccinimid, etc.; samt reaktive derivater av karboksylsyren med kondenseringsmidler såsom karbodiimider, N,N'-karbonyldiimidazol, acetylen, etere, etc. Blant de mer vanlige typer av foran nevnte karboksylsyre er de som har acylgrupper som nevnt tidligere under. R"'". ;Acyleringsreaksjonen utføres vanligvis i et oppløsnings-middel. Blant de oppløsningsmidler som egner seg for dette formål er slike vanlige organiske oppløsningsmidler som aceton, dioksan, kloroform, metylenklorid,.tetrahydrofuran, eter, etylacetat, etc., alt avhengig av den utgangsforbindelse man bruker, og reaksjonen kan utføres i vann eller i et vandig oppløsningsmiddel. Skjønt det er ingen spesiell begrensning med hensyn til reaksjonstemperatur, så utføres reaksjonen ofte under avkjøling eller ved romtemperatur. ;I forbindelse med denne reaksjon kan den forønskede forbindelse;(I) fremstilles som et indre salt eller som et salt ved å la en;base være tilstede i reaksjonssystemet. Denne base kan f.eks.;være et alkalihydrogenkarbonat, alkalikarbonat, alkalihydroksyd eller et organisk amin, f.eks. trietylamin, pyridin eller N,N-dimetylanilin. Når utgangsforbindelsen er eri ester av amino-cef alosporaninsyrederivatet (V), vil en hydrolyse, hvis dette er nødvendig,) kunne utføres på kjent måte,- og reaksjonsproduktet kan innvinnes på vanlig kjent måte f.eks. ved hjelp av oppløsnings-middelekstraks j on, kromat.ograf i eller lignende; eller forbindelsen kan renses ved omkrystallisering eller på annen måte. ;De således fremstilte 3-(morfolinoalkoksyiminometyl) cefemforbindelser (I) kan brukes med karboksylgruppen i 4-stillingen i fri form, men kan også brukes med nevnte karboksylfunksjon omdannet til et salt, f.eks. ved å bruke et ikke-toksisk kation, f.eks. natrium, kalium eller lignende, en basisk aminosyre, f.eks. arginin, ornitin, lysin, histidin eller lignende; eller et polyhydroksyalkyl-amin, f.eks. N-metylglukamin, dietanolamin, trietanolamin,.tris-hydroksymetylaminometan eller lignende. Det er.også mulig å for-estre 4-karboksylfuksjonen i forbindelsen for derved å fremstille biologisk aktive esterderivaterrsom gir forhøyede blodnivå.er og langvarig virkning. ;De estergrupper som kan brukes for det foreliggende formål er a-alkoksy-a-substituerte metylgrupper såsom'alkoksymetyl, a-alkoksyety1 eller lignende, f.eks. metoksymetyl, etoksymetyl, isoproppksymety1, a-metoksyetyl, a-etbksyetyl, etc., alkyltiometyl-grupper såsom' mety ltiomety.l, etyltiometyl, isopropyltiometyl etc, samt acyloksymetylgrupper . såsom a-acyloksy-ct-substituerte metylgrupper såsom pivoloyloksymety 1, a-acetoksybutyl, etc, for å angi et par eksempler. ;De fremstilte 3-(morfolinoalkoksyiminometyl)cefemforbindelser (I) er cefalosporinderivater som ikke bare er nye, ;men som har meget sterk antimikrobiell aktivitet overfor gram-negative og gram-positive bakterier, og de er således meget verdifulle som medisiner som kan brukes i forbindelse med infeksjonssykdommer i dyr og i mennesker. På samme måte som for kjente cefalosporinprodukter kan de foreliggende forbindelser (I) tilføres i form av pulvere eller som oppløsninger eller suspensjoner som kan-oppnås eller fremstilles på vanlig måte i et fysiologisk akseptabelt fortynningsmiddel eller oppløsningsmiddel. ;For behandling, av infeksjonssykdommer hos mennesker kan forbindelser (I).ifølge foreliggende oppfinnelse, f.eks.'78"(2-tienylacetamido)-3~(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3_cefem-4-karboksylsyre, 76-(D-mandelylamido)-3-(2-morfolinoetoksy)-iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre dg 7B-(a-sulfofenylacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)-iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre natriumsalt, er lett tilføret parenteralt (ikke-oralt) i daglige dosenivåer på fra 5 til 20 mg pr. kg- kroppsvekt i fra 3 til 4 doser,pr. døgn. ;De NMR-spektra som er angitt i de etterfølgende eksempler ble oppnådd ved å bruke et spektrometer Varian T-60 eller HR-100. ;De kjemiske forskyvninger er uttrykt i deler pr. million (ppm);i forhold til en indre standard av tetrametylsilan (6).. Hvis intet annet er angitt ble deuterio-kloroform brukt som oppløsningsmiddel. Symbolet s angir en singlet, d en dublett, t en triplett, q en kvartett,ABq en AB type kvartett, m en multiplett og J en koblet konstant i herz. ;De etterfølgende eksempler er kun angitt for å. illustrere oppfinnelsen og er således ikke begrensende for denne, og man kan utføre mange variasjoner uten å derved forlate oppfinnelsens intensjon. I de etterfølgende eksempler betyr "g", "1" og "ml" henholdsvis "gram", "liter" og "milliliter". Videre betegner "DMSO" dimetylsulfoksyd, "hm" nanometer, "IR" absorbsjonsbånd i infrarødt spektrum ;■og "UV" absorbsjon i det ultraviolette absorbsjonsspektrum, henholdsvis. Harpikser med varemerket "Amberlite" fremstilles av Rohm & Haas Co. i U.S.A. Alle temperaturer er ukorrigerte og ;alle prosentsatser er på vektbasis.;Eksempel 1;(1) N-/p-(t-butyl)-benzoyl7-cefalosporin C;Cefalosporin C mononatrium (47,4 g) ble tilsatt 500 ml ;vann og 150-ml aceton, og blandingen ble holdt på fra 3-4°C.;Under røring ble blandingen justert til pH 9 med natriumkarbonatpulver, hvoretter man dråpevis i løpet av 1=5 time tilsatte 21,5 g p-(t-butyl)-benzoylklorid. Under den dråpevise tilsetningen ble pH holdt på 9,0 ved hjelp av natriumkarbonatpulver. Blandingen ble rørt' i 15°C og ved pH 9,0 i 1?time og deretter justert til pH 7,0 med fosforsyre mens mesteparten av acetonen ble avdestillert under redusert trykk. Konsentratet ble vasket to ganger med etylacetat (400 ml) og tilført en skillegrakt. Det vandige lag ble avkjølt til 5°C og under røring ble pH justert til 2,5 med fasforsyre. Oppløsningen ble ekstrahert tre ganger med 600 ml etylacetat. Ekstraktene'ble slått sammen, tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert til tørrhet under redusert' ;trykk. Denne fremgangsmåte gir N-/p-(t-butyl)-benzoyl7-cefalosporin ;C. ;IR: 1778, 1730, 1708, I68O, 1660, 15^0 cm"<1>. ;NMR(d6-DMSO)6: 1.28(9H), ca. ■1, 5-1,9(4H), 2,01(3H), 2,10-2,35(2H), ;3,36 & 3,61 (2H,ABq), 4,37.(1H), 4,68&4,99(2H, ABq) , 5,06 (1H), 5,67(1H), 7,46 & 7,82(4H, ABq), 8,4l(lH), 8,79(1H). ;(2) Dinatrium 7 8-/D-5-(p-t-butylbenzamido)-5-karboksyvaleramido7-3-hydroksymetyl-3_cefem-4-karboksylat ;I en fosfatbuffer med pH 7,2 og et volum på 1 liter ble det oppløst 47 g N-/p-(t-butyl)-benzoyl/-cefalosporin C dinatrium fulgt av en tilsetning av lipase "Saiken 100" (fremstilt av Osaka Saikin Kenkusho) (50 g). ;Systemet ble reagert på et vannbad ved 30°C under;røring i 18 timer. I løpet av denne periode ble en vandig opp-løsning av nat.riumhy.drogenkarbonat tilsatt fra tid til annen slik at systemets pH ikke falt under 7,2. Etter reaksjonen ble oppløsningen avkjølt til 5°C og pH justert til 2,90 med fosforsyre. Oppløsningen . ble tilsatt 1 liter etylacetat og deretter rørt. Ettersom blandingen inneholder uoppløselig enzym, ble den filtrert over celitt. ;Celitten såvel som uoppløselige stoffer ble vasket med 500 ml etylacetat. Filtratet og etylacetatvaskeoppløsningene ble slått sammen og tilført en skilletrakt. Det organiske lag ble vasket med 3 x 100 ml vann og rystet med en 3% vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat. Denne oppløsningen ble gradvis, tilsatt inntil pH i det vandige lag var 5,50. Det vandige lag ble utskilt og justert til pH 7,0 med 2N vandig natriumhydroksyd og så frysetørket. Denne fremgangsmåten gir dinatrium 78-/D_5_p-(t-butyl)-benzamido-5-karboksy1valeramido? - 3-hydroksyrnetyl-3_cefem-4-karboksylat. ;IR: 1760 cm"1. ' ;NMR(D20)6: 1,25(9H), 3,27 & 3,57(2H, ABq), 4,30(2H), 5,07(1H), ;5,68(1H) ,i7,50 & 7,84(4H, ABq) (3) . 7 6-/D-5-(p-t-butylbenzoyl)amino-5-karboksyvaleramido7-9-okso-ll-hydroksy-UH-f urano( 4 , 3-c ) -3-'cef em. ;Det 3-hydroksymety1-cefalosporinderivat som ble fremstilt som angitt under avsnitt (2) ovenfor (2,5 g) ble tilsatt 80 ml aceton, og den resulterende suspensjon ble rørt under avkjøling ved 5°C. Blandingen ble så tilsatt 1,88 ml av en kromsyre-svovelsyreblanding /fremstilt ved å tilsette konsentrert svovelsyre (4,52 ml, H^SO^-innhold.1,77 g/ml) til kromsyreanhydrid (2,67 g, analysekvalitet) og fortynne blandingen forsynt med vann slik at man totalt fikk 15,0 ml7, og tilsetningen ble utført dråpevis i løpet av 3 minutter fulgt av røring ved 5°C i ytterligere 20 minutter. Etter at reaksjonen var fullstendig ble mesteparten av acetonen avdestillert, og residumet ble fortynnet med 30 ml vann og ekstrahert med tre ganger 50 ml etylacetat. Etylacetatoppløsningen ble tørket over vannfritt natriumsulfat ;og konsentrert til tørrhet under redusert trykk.;Denne fremgangsmåte gir 73-/D-5"(p-t-butylbenzoyl) amino-5_karboksyvaleramidg7-9-okso-ll-hydroksy-llH-furano(4,3_c)-3-cefem. , (4) Mononatrium 78-/D-5_,(p-t-butylbenzoyl)amino-5-karboksyvaler-amido7-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylat. ;I 20 ml dimetylsulfoksyd ble det oppløst 76-/D-5-(p-t-butylbenzoyl) amino-5-karboksyvaleramido7-9-okso-l1-hydroksy-llH-furan(4,3-c)-3-cefem(2,8 g). Deretter ble 1,0 g 0-(2-morfolino-etyl)hydroksylamindihydroklorid tilsatt i en enkelt dose, og blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1 time. Denne oppløsning ble tilsatt 0,431 g vannfritt natriumacetat i løpet av 1 time, hvoretter blandingen ble ytterligere rørt i 2 timer.. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 10 ml kaldt vann og justert til pH 7 med en 10% vandig natriumhydrogenkarbonatoppløsning. Den ble så underkastet en kolonnekromatografi over polystyrenharpiks ("Amberlite XAD-2") og eluert med vann og så med 20% vandig etanol. ;De fraksjoner som ble oppnådd ved eluering med 20% vandig etanol;ble slått sammen og frysetørket, hvorved man fikk den forønskede forbindelse. Utbytte l.,2 g (33,8%) ;IR(KBr): 1775, l605 pm"<1.>;NMR(D'20)6: 1, 31 ( s , t-Bu ) , l,5-2,2(m, -(CH^-), 2,3-2,6(m, -CH2C0) , 2,6-2,9(m,morfolin B"CH2og -CH2-N=), 3,44 & 3,72 (ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 3,82(m,morfolin a-CH2), 4,30(m, QCH2-), 4,54(m, valery1-CH=), 5,17(d, J=5Hz, 6-H), 5,74(d, J=5Hz, 7-H), 7,56 & 7,88(hver e, J=8Hz, benzen), 8 ,26 ( s -CH = NO-) ;Eksempel 2;(1) N-/p-(t-butyl)-benzensulfonyl/-cefalosporin C;I en fremgangsmåte som tilsvarer avsnitt (1) i eksempel 1, brukte man p-(t-butyl)-benzensulfonylklorid i steden for p-(t-butyl)-benzoylklorid, hvorved man oppnådde den angitte forbindelse Utbytte 51,9 g. ;IR(KBr): 1770, 1728, 1710, 1660 cm"<1.>;NMR(d6-DMSO)6: 1,29(9H), 2,01(3H), 3,40 & 3,64(2H, ABq), 4,70 & ;5,02(2H, ABq), 5,06(1H, d), 5,64(lH,q), 7,50 & 7,68(4H, ABq), 7,94(lH,d) ,, 8,72(lH,d) (2) Dinatrium 78-/D-5-(p-t-butylbenzensulfonyl)amino-5-karboksy-v'aleramido7-3-hydroksymety 1-3-cef em-4-karboksylat. ;I 1 liter fosfatbuffer ved pH 7,2 ble det oppløst 50 g N-/p-(t-butyl)-benzensulfonyl7-cefalosporin C dinatrium hvoretter man tilsatte 50 g lipase."Saiken 100" (fremstilles av Osaka Saikin Kenkusho). Systemet ble reagert på et vannbad ved 30°C under røring i 18 timer. Under denne periode tilsatte man en vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat fra tid til annen for å holde systemets pH på en verdi høyere enn 7,2. Etter at reaksjonen var ferdig ble blandingen avkjølt til^5°C og pH justert til 2,90 med fosforsyre. ;Den resulterende blanding ble tilsatt 1 liter etylacetat og rørt fulgt av en filtrering av uoppløselige enzymer idet man brukte ■ celitt som filterhjelp. Filterkaken ble vasket med etylacetat (500 ml). Filtratet og etylacetatet ble slått sammen og blandingen rystet. De orga.niske lag ble-vasket med 3 x 100 ml vann og rystet med en 3% vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat. Det vandige lag ble gradvis tilsatt en vandig oppløsning av natriumhydrogenkarbonat til pH ble 5,90, og pH ble således justert til 7,0 med en 2N vandig oppløsning -av natriumhydroksyd, og så ble oppløsningen frysetørket. Denne fremgangsmåte gir den ovenfor nevnte forbindelse.. IR: 1754, 1660, 1595'" cm"1; ;NMR(D20)6: 1,30(9H), 4,36(2H), 5,l5(lH,d), 5,68(lH,d), '7y60&7,86 ;(4H, ABq);(3) 78-/D-5-(p-t-butylbenzensulfonyl)amino-5-karboksyvaleramidoV-9-okso-ll-hydroksy-llH-furano(4,3-c)-3-cefem. ;En ' suspensjon av dinatrium 78-/D-5-(p-t-butylbenzensulfonyl)amino-5-karboksyvaleramido7-3-hydroksymetyl-3-cefem-4-karboksylat i 300 ml aceton ble rørt under avkjøling ved 5°C. Suspensjonen ble tilsatt en kromsyre-svovelsyreblanding (6,10 ml) ;(fremstilt som angitt i eksempel I)')dråpevis i løpet av 5 minutter fulgt av røring ved 5°C i ytterligere 15 minutter. Etter at reaksjonen var ferdig ble mesteparten av acetonen avdestillert under redusert trykk, og residumet ble fortynnet med 250 ml vann hvorpå blandingen ble ekstrahert to ganger med 300 ml etylacetat. De samlede etylacetatekstrakter ble vasket to ganger med 300 ml ;av en mettet vandig oppløsning av natriumklorid, så tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert til tørrhet. Denne fremgangsmåte gir den ovenfor angitte forbindelse. Utbytte 7,3 g (78,9%). ;■ (4) Mononatrium 78-/D-5~(p-t-butylbenzensulfonyl)amino-5-karboksyvaleramido7-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylat. ;I 70 ml tørr dimetylsulfoksyd ble det oppløst 5,67 g 78-/D-5- (p-t-butylbenzensulf onyl) amino- 5-kårboksyv.aleramido7-9-okso-li-hydroksy-llH-furano(4,3-c)-3-cefem, fulgt av en tilsetning av 2,19 g 0-(2-morfolinoetyl)hydroksylamindihydroklorid i en enkelt dose. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 3 timer hvoretter man tilsatte. 3,36 g natriumhydrogenkarbonat i 40 ml vann. Opp-løsningen ble utviklet på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) med.vann og så med en 15% vandig etanoloppløsning. De fraksjoner som inneholdt.den forønskede forbindelse ble slått sammen og etter avdestillering av metanolen ble oppløsningen fryse-tørket. Fremgangsmåten gir den. ovenfor angitte forbindelse. Utbytte 2,29 g ( 3250.. ;IR(KBr): 1764, 1655, 1599 cm"<1.>;NMR(D20)6: 1, 37 ( s , t-B.u) , l,63'(m, -CH2CH2"), 2,19(m, -CH2C0NH-) ;2,7-3,0(m, morfolin 6-CH2& -CH N=), 3,5-4,0(.m, 2-CH2, ;morfolin a-CH2& valeryl -CH=), 4,32(m, =N0'-CH2-), 5,21(d, J = 5Hz, 6-H), 5,77(d, J = 5Hz, 7-H)", 7,62 & 7,90 ;(hver d, J = 9Hz, benzen), 8,32(s, -CH=N-);Eksempel 3 ;7B_(fenylacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)-iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. ;I 10 ml tørr dimetylsulfoksyd ble det oppløst 0,346 g 73_(fenylacetamido)-9-okso-ll-hydroksy-llH-furano-(4,3-c)-3-cefem, hvoretter man i en enkelt dose tilsatte 0,219 g 0-^ (2-morf olino-etyl,)hydroksylamindihydroklorid. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter. Blandingen ble tilsatt 0,082 g vannfritt natriumacetat i løpet av 2 timer hvoretter blandingen ble rørt i romtemperatur i 1 time. ;Oppløsningen ble så tilsatt en oppløsning av 0,164 g natriumacetat i 10 ml vann under avkjøling, og den resulterende blanding ble utviklet på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2), først med vann og så med 5% vandig etanol og tilslutt med 15% vandig etanol. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen, og etanolen ble avdestillert. Residumet ble frysetørket, og man fikk den ovenfor nevnte forbindelse. ;Utbytte 0,412 g ( 87%) .;IR(KBr): 1.765, 1665, l605 cm"<1..>. NMR(D20')5: 2 , 6-3 , 0 (m ,morf olln 3-CH~2), 3,5-3,.8(m, 2-CH2 & morfolin i a-CH2& -CH2C0), 4,20(m, -CH2NH=), 4,70-(m, -N0CH2-), ;5,07(d, J=5Hz, 6-H), 5,60(d, J=5Hz, 7-H), 7,25(s,benzen), 8,38(s, -CH=N-). ;Eksempel 4 ;78-(2-tienylacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4 - karboksylsyre. ;I 10 ml tørr dimetylsulfoksyd oppløste man 0,352 g 78-(2-tienylacetamido)-9-okso-ll-hydroksy-llH-furano(4,3-c)-3-cefem, hvoretter man i en enkelt dose tilsatte 0,219 g 0-(2-morfolinoetyl)hydroksylamindihydroklorid. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 1 time. Blandingen ble så tilsatt vannfritt natriumacetat (0,082 g) i løpet av 1 time, hvoretter blandingen ble rørt ved romtemperatur i.ytterligére 1 time. Man tilsatte så en oppløsning av 0,33 g natriumacetat i 10 ml vann, og den resulterende blanding ble utviklet på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) med vann og så med 20% vandig etanol.' De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen, og etter avdestillering av etanolen ble produktet fremstilt ved frysetørking. Fremgangsmåten gir 0,205. g av den forønskede forbindelse (43%). ;IR(KBr): 1771, 1667, l605 cm"1. ;UVXmaks (e,i!vann): 233 nm(10,800), 296 nm(17,600) NMR (dg-DMSO) 6 : 2,83(m, morfolin 8"CH2 ) ,. 2 , 98 (m, -CH2-morf olino ) , ;3,4-4,0(m, 2-CH2& morfolin a-CH'2&-CH2C0), 4,25 (m, =N0CH2-), 5,09(d, J=5Hz, 6-H), 5,64(q, J = 5 & 8 Hz, 7-H), 6,9Ktienyl 3~& 5-H), 7,30( tienyl 4-H) , 8,30(s, -CH=N-), 9,13(d, J= 8Hz, -CONH-). ;Eksempel 5;(1) 73_amino-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. ;I en blanding av 5,32 ml N,N-dimetylanilin og 40 ml diklormetan ble det suspendert 4,62 g 73-/D-5-(p-t-butylbenzoyl) amino-5_karboksyvaleramido7-3_(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-,cefem-4-karboksylat. Suspensjonen ble avkjølt til -10°C og rørt. Ved denne temperatur som ikke oversteg -10°C tilsatte man dråpevis 1,575 ml fosfortriklorid og blandingen ble rørt i 1 time og man oppnådde en homogen oppløsning. Oppløsningen ble avkjølt til -20°C og 2,9l6 g fosforpentaklorid ble tilsatt. Røring ble fortsatt i 2 timer. Blandingen ble avkjølt til -50°C og 26 ml kald metanol ble tilsatt dråpevis idet man tok hensyn til at temperaturen.holdt seg under -35°C Temperaturen ble gradvis hevet til -5°C og blandingen ble rørt ved denne temperatur i 30 minutter. Etter en tilsetning, av 20 ml vann ble det vandige lag justert til pH 3,5 med vandig ammoniakk. Etter kraftig røring ble det vandige lag skilt. Dét organiske lag ble ytterligere ekstrahert med 3 ;x 20 ml vann. De vandige lag ble slått sammen og konsentrert under redusert trykk til 20 ml. Dette konsentrat ble kjørt.på en kromatografisk kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og utviklet med vann. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått ;sammen og frysetørket. Fremgangsmåten gir den ovenfor angitte forbindelse. Utbytte 2,2 g. ;IR(KBr) :• 1788 cm"<1.->;NMR(D20)6: 3,2-4,9 (m, 14H9, 5,20(d, J=5Hz, 6-H), 5,56(d, J=5Hz),';8,57(s, -CH=NO-).;(2) Natrium 7B-(D-a-sulfofenylacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)-iminometyl-3-cefem-4-karboksylat. ;I 15 ml vann ble det oppløst 0,712 g 7B-amino-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre, og oppløsningen ble justert til pH 6 med 1 N vandig, natriumhydroksydoppløsning. Oppløsningen ble tilsatt, en oppløsning av 0,47 g D-(- )-a-sulfo-fenylacetylklorid i 2 ml etylacetat dråpe for dråpe mens reaksjonsblandingen ble holdt ved pH 6 til 7 ved å tilsette 1 N vandig natriumhydroksydoppløsning. Etter at den dråpevise tilsetningen var ferdig ble blandingen rørt i 30 minutter hvoretter etylacetaten ble avdestillert under redusert, trykk. Residumet ble kromatografert på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlige XAD-2) og utviklet med vann. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen og frysetørket. Fremgangsmåten gir den ovenfor angitte forbindelse. ;Utbytte.0,4 g (35%)• .;IR(.KBr): 1768, 1670, l6o6 cm<-1>. ;NMR(D20)6: 3,35"4,20(12H , m), 4,52(m, -CH20N=), 5,15(s, CgH^-CHO, ;5,24(d, J =5Hz, 6-H), 5,79(d, j=5Hz, 7~H) , .7,-3-7,8 (m,fenyl),' 8,25(s, -CH=N0-). ;Eksempel 6 ;76-(d-mandelylamido)-3-(2-morfolinoetoksy)iminomety1-3-cefem-4-karboksylsyre. ;I 10 ml tørr dimetylformamid • oppløste man O.,70l2 g 76_amino-3-(2-morfolinoetoksy)iminomety1-3-cefem-4-karboksylsyre, samt 0,356 g av D-mandelinsyrekarboksyanhydridet.. Blandingen ble rørt ved romtemperatur, hvoretter karbokdioksydgass ble utviklet og man fikk en homogen reaksjonsblanding. Etter 1 time ble 10 ml kaldt vann. tilsatt reaksjonsblandingen. Blandingen ble så underkastet kolonnekromatografi på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) ;og utviklet med vann og så med 10% vandig etanol. De fraksjoner ;■ som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen og etter avdestillering av etanolen ved redusert trykk ble produktet fremstilt ved frysetørking. Man fikk den ovenfor angitte forbindelse i et utbytte på 0,259 g 027*)•.

IR(KBr): 1780, 1675, 1605, 1510 cm"<1.>

UVA maks (e i vann). 296 nm(19-000)

NMR(dg-DMSO): 2,6-3,15(m, morfolin' B~CH2 og -CH2N=), 3,47 & 3,82

(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 3,70(m, morfolin a-CH2), 4,26(m, -CH20N=), 5,07(s, C6H5CH(OH)-), 5 ,08(d, J = 5Hz,

6-H), 5,68(q, J = 5 & 8Hz, 7-H), 7,15-7,55(m, Cg^-),

8,29(s, -CH=NO-), 8,66(d, J=8Hz, -NH-).

•Elementæranalyse, beregnet for C2<2H>2<gN>^0^S.2H20

C 50,18, H 5,74; N 10,64

Funnet: C 50,69, H 5,71; ' N 10,64

Eksempel 7

(1) Natrium 76-(D-mandelylamido)-3-hydroksymetyl-3_cefem-4-karboksylat

4,06 g 76-(D-mandelylamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre ble tilsatt 20 ml vann<p>g 0,84 g natriumbikarbonat, og syren ble omdannet til et salt. Denne vandige oppløsning ble tilsatt. 100 ml fosfatbuffer (pH 7,2.) -og så 4,77 g lipase "Saiken 100" (fremstilles av Osaka Saikin Kenkyusho), og systemet ble rørt ved en konstant temperatur på 30°C og en pH på 7,2 i 16 timer. Blandingen ble filtrert under sug (med Hyflo-Supercel som filterhjelp), og filtratet ble konsentrert under redusert trykk. Konsentratet ble plassert på en kolonne av "Amberlite XAD-2" og utviklet med vann. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen og konsentrert under redusert trykk. Konsentratet ble frysetørket og man fikk det forønskede produkt.

(2 ) 7 6- (D-mandelylamido )-9~okso-11-hydroksy-11H-f urano-( 4 ,3-c ).-3-cefem.

I' 100 ml aceton ble det suspendert 1,93 g natrium 76~(D-mandelylamido)-3-hydroksymetyl-3-cefem-4-karboksylat.og under røring og avkjøling ved -3°C ble den nedenfor nevnte reagens

(se nedenstående bemerkning) (1,25 ml) tilsatt i løpet av 5 minutter. Blandingen ble .rørt ved 0°C i 1 time, hvoretter acetonen ble avdestillert under redusert trykk. Residumet ble fortynnet med 100 ml vann og så ekstrahert med 150 ml etylacetat tre ganger. Ekstraktet ble vasket tre ganger med en mettet vandig oppløsning på 300 ml av natriumklorid, tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert

til tørrhet. Fremgangsmåten gir den ovenfor nevnte forbindelse.

Utbytte 1,41'g (78%).

IR(KBr): 1787, 1673 cm"<1.>

NMR(Dg-DMSO + D20)6: 3,4-3,8(m, 2-CH"2), 5,09(s, CgH -CH(OH)-),

^.lnfd.- J = c;Hz. 6-H)..80(d ..,T = 5Hz. 7-H).

, J ^ j - - N — j - ^ J I 7,2-7,5(m, C6H5-). (Bemerkning)reagens: En blanding av 2,67 g kromsyreanhydrid og 2,26" ml konsentrert svovelsyre fortynnet til 10 ml med vann. (3) 78_(D-mandelylamido)-3~(2-morfolinoetoksy)iminomety1-3-cefem-4-karboksylsyre.

I 3 ml tørr dimetylsulfoksyd ble det oppløst 0,08 g 76-(D-mandelylamido)-9-okso-l1-hydroksy-HH-furano-(4,3-c)~3-cefem, fulgt av en tilsetning av 0,06 g.0-(2-morfolinoetyl)-hydroksylamindihydroklorid. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter hvoretter man tilsatte 0,022 g vannfritt natriumacetat. Blandingen ble ytterligere rørt'ved romtemperatur i 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble tilsatt 5 ml kaldt vann,

og blandingen ble ført over på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) som ble eluert med vann og så med 10% vandig

■ etanol. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen,' og etanolen avdestil.lert under redusert trykk,

i

Residumet ble tilslutt frysetørket, hvorved man fikk den ovenfor angitte forbindelse.

Utbytte 0,077 g (71%).

I IR, NMR og tynnsjiktskromatografi viste dette produktet , god overensstemmelse med det"produkt som man oppnådde ifølge fremgangsmåten i eksempel 6.

Eksempel 8 76-(cyanoacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre.

I 3 ml tørr dimetylsulfoksyd ble det oppløst 0,08 g'76-(cyanoacetamido)-9-okso-l1-hydroksy-11H-furano-(4,3-c)-3-cefem hvoretter man tilsatte 0,06 g 0-(2-morfolinoetyl)hydroksylamin-.dihydroklorid. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30, minutter hvoretter man tilsatte 0,022 g vannfritt natriumacetat i løpet av

1 time. Blandingen ble rørt i ytterligere 30 minutter. Etter

tilsetning av 5 ml kaldt vann ble blandingen underkastet kolonne-'kromatografi på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2).

Kromatogrammet ble utviklét med vann og så med 5% vandig etanol. De fraksjoner s°m inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen', og etanolen avdestillert under redusert trykk. Tilslutt ble residumet frysetørket og man fikk den. ovenfor angitte forbindelse.

Utbytte 0,077 g (67%) •

IR(Kbr): 2250(CN), 1778,. 1688, l607, 1570 cm"<1.>

UVAmaks (e i vann): 296 nm (19-900). NMR(D20)6: l-4,3(l4H, m), 3,92(s, NC-CHg-CO), 5,33(d, J=5Hz, 6-H),

5,8l(d, J = 5Hz, 7-H)', 8,32(s, -CH-N0-).

Eksempel 9 73-(D-mandelylamido)-3-(2-morfolino-l-metyletoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre.

I 8 ml tørr dimetylsulfoksyd ble det oppløst 0,362 g 76_(D-mandelylamido)-9-okso-l1-hydroksy-HH-furano-(4,3-c)-3-cefem hvoretter man i en enkelt dose tilsatte 0,233 g 0-(2-morfolino-1-metylety1)hydroksylamindihydroklorid. Blandingen ble rørt véd romtemperatur i 30 minutter, hvoretter man tilsatte 0,082 g vannfritt natriumacetat i løpet av,4o minutter. Blandingen ble så rørt i ved- romtemperatur i ytterligere 1§ time. Under avkjøling med is tilsatte man en'oppløsning av 0,164 g natriumacetat i 8 ml vann. Blandingen ble så kromatografert på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og utviklet med vann, 10% vandig etanol og ^så med 15% vandig etanol.' De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen, og etanolen avdestillert under redusert

trykk. Tilslutt ble residumet frysetørket hvorved man fikk den ovenfor angitte forbindelse.

Utbytte 0,221 g (44%).

IR(KBr): 1777, 1670, l607 cm<-1.>

UVXmaks (e i vann): .295 nm (18,900)

NMR'(Dg-DMSO + D20)6: 1,24 & 1,26 (hver d, J = 6Hz, O-CHtCH^)-) ,

3,10(m,morfolin 6-CH2 & -CH2-N=), 3,47 & 3,78

i (ABq, J = l8Hz,. 2-CH2), 3,84(m, morfolin a-CH2), 4,25(m, N0-CH(CH3)-), 5,06(d, J=5Hz, 6-H),

= . 5,09(s, C6H5-CH(OH)-) , 5,63(d, J = 5Hz, 7-H), 7,2-7,5

(m,C6H5-)s 8,30 & 8,33(hver s, -CH=NO)

.Elementæranalyse, beregnet for C^H^<N>^OyS.2.:

c 50,26; H 6,05; N 10,19.;

Funnet: -c 50 ,58; H 6,00; N'9,99--

i

Eksempel 10

■78- (D-mandelylamido )-3_ ( 3-morfolinopropoksy) iminometyl-3-cef em-'4-karb'oksylsyre.

I 8'ml tørr dimetylsulfoksyd ble det oppløst 0,362 g 78~ (D-mandelylamido )- 9~ oks.o-11-hy dro ksy -UH-f urano- (4,3-c)-3-cefem og deretter tilsatte man en enkelt dose 0,233 g 0-(3-morfolino-propyl)hydroksylamindihydroklorid. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i. 30 minutter hvoretter man tilsatte 0,082 g vannfritt natriumacetat i løpet av 1^ time. Blandingen ble ytterligere rørt ved romtemperatur i 30 minutter. ■ Under avkjøling med is tilsatte man en oppløsning av 0,l64 g natriumacetat i 8 ml vann. Blandingen ble så kromatografert på en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD -2) og utviklet med vann og så med .12,5% vandig etanol. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen, og etanolen avdestillert under redusert trykk.

Tilslutt ble residumet frysetørket og man fikk den' ovenfor angitte forbindelse. Utbytte 0,21-g (42%).

IR(KBr): 1778,'1674, 1607 cm<-1.>

UVXmaks (e i vann): 296 nm(15,700)

NMR(dg-DMSO + DO):' 2,05(m, CH^CHgCHjN), 3,17(m,morfolin 8-CH2&

-CH2N=j, 3,3-3,9(m, morfolin a-CH2& 2-CH2), 4,0-4,4 (m,N0CH2-), 4,99(d, J=5Hz, 6-H), 5,07(s, CgH5-CH(0H)-)., 5,59(d, J = 5Hz, 7-H) , 7,2-7,5(m, C6H5-), 8,26(s, -CH=N-). Elementæranalyse, beregnet for C^H^N^O^S . 2 . 5H20 : C 50,26; H 6,05; N 10,19;

Funnet: C.50,46; H 5,70; N 9,92

Eksempel 11

76"(D-mandelylamido)-3-/2-morfolino-(l-metoksyrnetyl)-etoksy7imino-mety 1-3-defem-4-karboksylsyre.

16 ml tørr dimetylsulfoksyd ble' det oppløst 0,362 g 78- (D-mandelylamido )-9-okso-ll-hydrok'sy-llH-furano- ( 4 , 3-c )~3-

cefem, hvoretter man i en enkelt dose tilsatte 0,263 g 0-(2-morfolino-1-metoksymetylety1)hydroksylamindihydroklorid. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter hvoretter man tilsatte 0,082 g vannfritt natriumacetat i løpet av 1 time. Blandingen ble rørt ved romtemperatur i 30 minutter, hvoretter man tilsatte en oppløsning av 0,164 g natriumacetat i 6 ml vann. Blandingen ble kromatografert på en kolonne.av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2) og utviklet

med vann, 12,5% vandig etanol og 15% vandig etanol i den angitte rekkefølge. De fraksjoner som inneholdt det forønskede produkt ble slått sammen, og etanolen ble avdestillert under redusert trykk. Tilslutt ble' residumet frysetørket og man fikk den.ovenfor angitte forbindelse. Utbytte 0,228 g (43%).

IR(KBr): 1779, I676, l608 cm"<1.>.. NMR(d6-DMSO)6: 2,70(m, morfolino B-CH~2), 2,98(m, -CH2N=), 3,21(s,

CH30), 3,3-3,9(m, 2-CH2, morfolino a-CH2& -CH~20-), 4,17(m, =CH-CH2N), 5,10(s, CgH^-CH(OH)-), 5,12(d, J = 5Hz, 6-H), 5,7Kq, J = 5 & 8 Hz, 7-H), 7,l-7,5(m, CgH5-), 8,28(s, -CH = N-), 8,7Kd, J = 8Hz, -COHN-)..

1. Kjemisk forbindelse,karakterisert vedformelen: 1 2 ' • hvor R er en acylgruppe og R er en alkylengruppe som kan være substituert med en lavere alkoksylgruppe, eller et farmasøytisk1akseptabelt salt av en slik forbindelse. 2. Forbindelse ifølge krav 1, karakt e' riser t-ved at acylgruppeh er formyl, benzoyl eller en gruppe med formelen:

hvor R er hydrogen, fenyl, fenoksy, tienyl, tetrazolyl, furyl, pyrazolyl, pyridyloksy, cykloheksenyl, acetyl, cyano, 3_amino-3-

i ■

karboksypropyl eller 3_beskyttet amino-3-karboksypropylgruppe,

og R er hydrogen, hydroksyl, sulfo, amino,\karboksy1 eller en lavere alkylgruppe.

3. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisertved at acylgruppen er en gruppe med formelen:

hvor R 5 er fenyl, fenoksy, tienyl, tetrazolyl," furyl, pyrazolyl,' pyridyloksy, cykloheksenyl, acetyl eller en cyanogruppe. 4. Forbindelse ifølge krav 3,karakterisertved at.R er en fenyl, tienyl eller en cyanogruppe. 5. En forbindelse ifølge krav 2,karakterisert

ved at R^ er en fenyl, fenoksy, tienyl, tetrazolyl, furyl, pyrazolyl, pyridyloksy, cykloheksenyl eller en acetylgruppe, og

4

R er en hydroksyl, sulfo, ammo, karboksyl eller lavere alkylgruppe.

6. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert

ved at acylgruppen er en 5-beskyttet eller ubeskyttet amino-5-karboksyvalerylgruppe.

7. Forbindelse ifølge krav 6, "karakterisert

ved at den beskyttende gruppe for den 5-beskyttede amino-5-karboksyvalerylgruppen er en alkyloksykarbonyl, (3-alkylsulfonyl-etoksyk.arbonyl, arylkarbonyl som kan være substituert med tertiære-lavere alky lgruppe aralkylkarbonyl, aryltiokarbonyl, aralkyloksykarbonyl eller arylsulfonylgruppe som kan være substituert med lavere alkylgruppe.

8. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert

ved at alkylengruppen har fra 2-4 karbonatomer.

9'. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert' ! ved at den lavere alkoksylgruppen er metoksy eller etoksy.

10. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedå være 78-/D-5-(p-t-butylbenzoyl)amino-5_karboksyvalerylamido7-3.- ( 2-morf olinoetoksy ) iminometyl-3-cefem-4-karboksy lsyre . 11. Forbindelse-ifølge krav 1,karakterisertved å være 7 3-/D-5- (p-t-butylbenzensulf onyl) amino-5^karboksy-valerylamido7-3-(2-morfolinoetoksy)iminomety1-3"cefem-4-karboksylsyre. ' r 12. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedå være 73-(fenylacetamido)- y- (2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. 13. Forbindelse- ifølge krav 1,karakterisertved å være 73-(2-tienylacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)imino-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre.' 14. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisertved å være 73-(D-a-sulfofenylacetamido)-3-(2-morfolinoetoksy)

iminomety1-3-cefem-4-karboksylsyre.

15. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert

v e d å være 73-(D-mandelylamido)-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. 16. Forbindelse ifølge.krav 1,karakterisert

ved å være 7B-cyanoacetamido-3-(2-morfolinoetoksy)iminometyl-3-cefem-4-karboksylsyre.

17. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert

ved å være 78-(D-mandelylamido)-3~(2-morfolino-l-metyletoksy) iminomety1-3-cefem-4-karboksylsyre.

18. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert

v e d >'å være 73~'(D-mandelylamido)-3- ( 3-morf olinopropoksy) imino-metyl- 3-cefem-4-karboksylsyre.

19. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert

ved å være 73-(D-mandelylamido)-3-/2-morfolino-(l^metoksymetyl) etoksy7-iminometyl-ceifem-4-karboksylsyre.

20. Fremgangsmåte for fremstilling av en 3-(morfolinoalkoksy-iminometyl ) cef emf orbinde-lse med formelen:

hvor R<1>er en acylgruppe .og R<2>er en al■kylengruppe som kan være substituert med en lavere alkoksylgruppe, eller et farmasøytisk akseptabelt salt av nevnte forbindelse,karakterisert

ved at man fremstiller forbindelsen med formel (I) ved.en fremgangsmåte som er kjent for fremstilling av analoge forbindelser.

21. Fremgangsmåte ifølge krav 20, -k a r åk t e r i s e'r t

ved at man (l) reagerer et cefalosporin-laktolderivat med formelen:

eller.et alkyl eller acylderivat av dette med et 0-(morfolinoalkyl) hydroksylamin med formelen: eller et salt av dette, eller (2) acylerer et aminocefalosporånin-syrederivat med formelen:

i

eller ét salt av dette derivat eller en lett spaltbar ester av dette derivat..

22. Farmasøytisk preparat,karakterisert

ved å inneholde en medisinsk effektiv mengde av én forbindelse med formelen:

hvor R 1 er en acylgruppe .og R 2er en alkylehgruppe som kan være substituert- med en lavere alkoksylgruppe, eller et farmasøytisk akseptabelt salt, sammen med ett eller flere farmasøytisk akseptable bærestoffer eller fortynningsmidler, og hvor nevnte sammensetning tilføres i en enhetsdoseform.