NO335674B1 - HSA-frie, stabiliserte flytende utforminger av interferon-beta - Google Patents
HSA-frie, stabiliserte flytende utforminger av interferon-beta Download PDFInfo
- Publication number
- NO335674B1 NO335674B1 NO20055666A NO20055666A NO335674B1 NO 335674 B1 NO335674 B1 NO 335674B1 NO 20055666 A NO20055666 A NO 20055666A NO 20055666 A NO20055666 A NO 20055666A NO 335674 B1 NO335674 B1 NO 335674B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- composition according
- concentration
- ifn
- interferon
- beta
- Prior art date
Links
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 title claims description 22
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 title claims description 16
- 238000013461 design Methods 0.000 title description 70
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 116
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims abstract description 76
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 6
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical group OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 150
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 84
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 claims description 50
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims description 48
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims description 36
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 33
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 31
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 claims description 25
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 19
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 19
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical group OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 18
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 12
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 8
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 claims description 7
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 claims description 4
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 claims description 2
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical compound CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 claims 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 abstract description 115
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 abstract description 115
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 abstract description 56
- 102100026720 Interferon beta Human genes 0.000 abstract description 21
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 58
- 229960004217 benzyl alcohol Drugs 0.000 description 49
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 description 40
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 39
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 31
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 29
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 29
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 29
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 28
- 239000000047 product Substances 0.000 description 28
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 26
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 25
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 24
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 24
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 23
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 19
- 238000011161 development Methods 0.000 description 18
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 18
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 18
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 17
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 17
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 16
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 16
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 16
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 15
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 14
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 14
- 108010005716 Interferon beta-1a Proteins 0.000 description 13
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 13
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 13
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 description 13
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 13
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 12
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 11
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 11
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 11
- -1 polyethylene group Polymers 0.000 description 11
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 10
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 9
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960004461 interferon beta-1a Drugs 0.000 description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 8
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 8
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 7
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 7
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 6
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 6
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 6
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 6
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 6
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 6
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 5
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 5
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 5
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 5
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 5
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 5
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 4
- 241000004297 Draba Species 0.000 description 4
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Chemical class 0.000 description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 4
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 4
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 4
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 4
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 101000606506 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase eta Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100039808 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase eta Human genes 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 3
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 3
- YPJUNDFVDDCYIH-UHFFFAOYSA-N perfluorobutyric acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F YPJUNDFVDDCYIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 229940038850 rebif Drugs 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004322 Butylated hydroxytoluene Substances 0.000 description 2
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101001054334 Homo sapiens Interferon beta Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002021 Pluronic® F 77 Polymers 0.000 description 2
- 229920002023 Pluronic® F 87 Polymers 0.000 description 2
- 229920002025 Pluronic® F 88 Polymers 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 description 2
- 239000004288 Sodium dehydroacetate Substances 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 238000002832 anti-viral assay Methods 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 2
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 2
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 2
- 229940095259 butylated hydroxytoluene Drugs 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 238000012395 formulation development Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000002050 international nonproprietary name Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N o-cresol Chemical compound CC1=CC=CC=C1O QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 description 2
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 235000019259 sodium dehydroacetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940079839 sodium dehydroacetate Drugs 0.000 description 2
- DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M sodium;(1e)-1-(6-methyl-2,4-dioxopyran-3-ylidene)ethanolate Chemical compound [Na+].C\C([O-])=C1/C(=O)OC(C)=CC1=O DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N (R)-(-)-Propylene glycol Chemical compound C[C@@H](O)CO DNIAPMSPPWPWGF-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- WADQOGCINABPRT-UHFFFAOYSA-N 3-chloro-2-methylphenol Chemical compound CC1=C(O)C=CC=C1Cl WADQOGCINABPRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 210000001239 CD8-positive, alpha-beta cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000907 Condylomata Acuminata Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N D-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHDWDBPJOZVZSE-KKUMJFAQSA-N Glu-Phe-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O CHDWDBPJOZVZSE-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 1
- 102100040019 Interferon alpha-1/13 Human genes 0.000 description 1
- 108010005714 Interferon beta-1b Proteins 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical class OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013103 analytical ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 208000025009 anogenital human papillomavirus infection Diseases 0.000 description 1
- 201000004201 anogenital venereal wart Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 125000003435 aroyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940003504 avonex Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 description 1
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 235000019282 butylated hydroxyanisole Nutrition 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229940126534 drug product Drugs 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical compound [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003949 imides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000013383 initial experiment Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000013495 osmolality determination method Methods 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004313 potentiometry Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 238000012868 site-directed mutagenesis technique Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010268 sodium methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- PESXGULMKCKJCC-UHFFFAOYSA-M sodium;4-methoxycarbonylphenolate Chemical compound [Na+].COC(=O)C1=CC=C([O-])C=C1 PESXGULMKCKJCC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IXMINYBUNCWGER-UHFFFAOYSA-M sodium;4-propoxycarbonylphenolate Chemical compound [Na+].CCCOC(=O)C1=CC=C([O-])C=C1 IXMINYBUNCWGER-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical class [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000563 toxic property Toxicity 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/215—IFN-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/12—Keratolytics, e.g. wart or anti-corn preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
En stabilisert HSA-fii flytende farmasøytisk sammensetning som omfatter et interferon (IFN) beskrives, hvori utformingen er en løsning som omfatter en buffer, et overflateaktivt middel, et isotonisitetsmiddel og en antioksidant. Interferonet er fortrirmsvis himiant rekombinant IFN-beta.
Description
OPPFINNELSENS OMRÅDE
Den foreliggende oppfinnelsen gjelder generelt farmasøytiske sammensetninger som inneholder et interferon, nærmere bestemt stabiliserte utforminger av interferon-beta som er frie for humant serum albumin som tilsatt farmasøytisk eksipient.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Interferon er cytokiner, det vil si løselige proteiner som overfører informasjon mellom celler og spiller en essensiell rolle i immunsystemet ved å bidra til å ødelegge mikroorganismer som forårsaker infeksjon og reparere eventuell resulterende skade. Interferoner utskilles naturlig av infiserte celler og ble først påvist i 1957. Navnet er avledet fra det faktum at de "interfererer" med virusreplikasjon og virusdannelse.
Interferoner viser både antiviral og antiproliferativ aktivitet. Basert på biokjemiske og immunologiske egenskaper, grupperes de naturlig forekommende humane interferonene i tre hovedklasser: Interferon-alfa (leukocyttinterferon), interferon-beta (fibroblastinterferon) og interferon-gamma (immuninterferon). Alfa-interferon er i dag godkjent i USA og andre land for behandling av hårcelleleukemi, kjønnsvorter, Kaposis sarkom (en kreftform som hyppig rammer pasienter som lider av ervervet immunsviktsyndrom (AIDS)) og kronisk ikke-A-, ikke-B-hepatitt.
Videre er interferoner (IFN) glykoproteiner som dannes av kroppen som respons på en virusinfeksjon. De inhiberer oppformeringen av virus i beskyttede celler. Interferoner er lavmolekylære proteiner og bemerkelsesverdig uspesifikke i virkningen, det vil si at IFN indusert av ett virus er effektivt mot et bredt utvalg av andre virus. De er imidlertid artsspesifikke, det vil si at IFN som er dannet av en art kun vil stimulere antiviral aktivitet i celler fra samme art eller nært beslektede arter. IFN var den første gruppen av cytokiner som ble utnyttet for mulig antitumoraktivitet og antiviral aktivitet.
De tre hovedtypene av IFN betegnes IFN-a, IFN-P og IFN-y. Disse hovedtypene av IFN ble opprinnelig klassifisert ut fra sitt cellulære opphav (leukocytt, fibroblast eller T-celler). Det ble imidlertid klart at flere typer kan dannes av en celle. Følgelig kalles leukocytt IFN i dag IFN-a, fibroblast IFN er IFN-P og T-celle IFN er IFN-y. Det finnes også en fjerde IFN-type, lymfoblastoid IFN, som dannes i cellelinjen "Namalwa" (avledet fra Burkitts lymfom), som ser ut til å danne en blanding av både leukocytt- og fibroblast IFN.
Interferonenheten eller internasjonal enhet for interferon (U eller IU for internasjonal enhet) har blitt rapportert som et mål IFN-aktivitet, definert som den mengden som er nødvendig for å beskytte 50% av cellene mot virale skader. Analysen som kan anvendes for måling av bioaktivitet, er analysen for inhibering av cytopatisk virkning (Rubinstein, et al. 1981; Familletti, P.C., et al., 1981). I denne antivirale analysen for interferon er tilnærmet 1 enhet/ml interferon den mengden som er nødvendig for å gi en cytopatisk virkning på 50%. Enhetene er bestemt relativt til den internasjonale referansestandard for Hu-IFN-beta som leveres av National Institutes of Health (Pestka, S. 1986).
Hver av IFN-klassene inneholder flere forskjellige typer. IFN-P og IFN-y er begge produkter av ett enkelt gen.
Proteinene som klassifiseres som IFN-a er den mest variable gruppen og omfatter tilnærmet 15 typer. Det foreligger en ansamling av IFN-a-gener på kromosom 9 som omfatter minst 23 medlemmer, av hvilke 15 er aktive og transkriberes. Modne IFN-a er ikke glykosylerte.
IFN-a og IFN-P har alle den samme lengden (165 eller 166 aminosyrer) og tilsvarende biologiske aktiviteter. IFN-y er 146 aminosyrer lange og ligner mindre på a- og P-klassen. Kun IFN-y kan aktivere makrofager eller indusere modning av dreper-T-celler. Disse nye typene av terapeutiske midler kalles noen ganger biologisk responsmodifiserende midler (BRM), siden de har en virkning på organismens respons på tumoren og påvirker gjenkjenning ved immunmodulering.
Humant fibroblastinterferon (IFN-P) har antiviral aktivitet og kan også stimulere naturlige dreperceller mot neoplastiske celler. IFN er et polypeptid på tilnærmet 20000 Da som induseres av virus og dobbelttrådet RNA. Ut fra nukleotidsekvensen til genet for fibroblastinterferon, klonet ved rekombinant DNA-teknologi, har den fullstendige aminosyresekvensen til proteinet blitt utledet (Derynk et al. 1980). Proteinet er 166 aminosyrer langt.
Shepard et al. (1981) beskrev en mutasjon i base 842 (Cys —» Tyr i posisjon 141) som fjernet den antivirale aktiviteten og en variantklon med en delesjon av nukleotidene 1119-1121.
Mark et al. (1984) innførte en kunstig mutasjon ved å erstatte base 469 (T) med (A), noe som gir en aminosyreendring fra Cys -» Ser i posisjon 17. Det resulterende IFN-P ble rapportert å være like aktivt som det "naturlige" IFN-P og stabilt under lagring over lengre tid (-70°C).
Rebif<®>(S erono - rekombinant humant interferon-P), den nyeste utviklingen i interferonbehandling for multippel sklerose (MS), er interferon(IFN)-beta-la, dannet fra pattedyrcellelinjer. Det anbefalte internasjonale ikke-merkebeskyttede navnet (INN) er "interferon beta-la".Som for alle proteinbaserte farmasøytiske midler, er en hovedhindring som må overvinnes for anvendelse av IFN-beta som terapeutisk middel, tapet av farmasøytisk aktivitet som kan skje grunnet proteinets ustabilitet i farmasøytiske utforminger.
Fysisk ustabilitet som truer polypeptidaktivitet og -virkning i farmasøytiske utforminger omfatter denaturering og dannelse av løselige og uløselige aggregater, mens kjemisk ustabilitet omfatter hydrolyse, imiddannelse, oksidasjon, rasemisering og deamidering. Noen av disse endringene vites å føre til tap eller reduksjon av den farmasøytiske aktiviteten til proteinet av interesse. I andre tilfeller er de nøyaktige virkningene av disse endringene ukjente, men de resulterende degraderingsproduktene anses likevel å være farmasøytisk uakseptable, grunnet muligheten for uønskede bivirkninger.
Stabilisering av polypeptider i farmasøytiske sammensetninger er fortsatt et område hvor prøving og feiling spiller en hovedrolle (se oversikt av Wang (1999) Int. J. Pharm. 185: 129-188; Wang og Hanson (1988) J. Parenteral Sei. Tech. 42: S3-S26). Eksipienter som tilsettes til farmasøytiske polypeptidutforminger for å øke stabiliteten omfatter buffere, sukkere, overflateaktive midler, aminosyrer, polyetylenglykoler og polymerer, men de stabiliserende virkningene av disse kjemiske tilsetningsstoffene varierer avhengig av proteinet.
Dagens IFN-betautforminger benytter HSA som et løselighetsfremmende middel for IFN-beta. Anvendelsen av HSA har imidlertid noen ulemper. HSA er et produkt fra humant blod og må derfor høstes fra mennesker. Selv om det tas forholdsregler for å redusere risikoen, medfører anvendelse av humane blodprodukter som HSA faren for innføring av humane virus så som HIV og HCV.
US 2002/172661 Al laget stabiliserte HSA-frie farmasøytiske sammensetninger omfattende IFN-P.
EP 1250932 Al laget stabiliserte HSA-frie farmasøytiske sammensetninger omfattende IFN-a.
EP 0736303 A2 laget HSA-frie flytende farmasøytiske sammensetninger omfattende IFN-a som også omfatter et bakteriostatisk middel (benzylalkohol).
Det foreligger følgelig et behov for ytterligere farmasøytiske sammensetninger av IFN-beta som omfatter fysiologisk forenlige stabilisatorer som forbedrer løseligheten av dette proteinet og stabiliserer proteinet mot aggregatdannelse, slik at deres farmasøytiske nytteverdi økes.
BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelsen er rettet mot stabiliserte farmasøytiske sammensetninger som omfatter et interferon-beta (IFN-P) og fremgangsmåter for fremstilling av disse. Disse sammensetningene fremstilles i fravær av humant serum albumin (HSA) og er således frie for denne farmasøytiske eksipienten. Slike sammensetninger betegnes heri "HSA-frie" farmasøytiske IFN-sammensetninger og de omfatter et interferon-beta (IFN-P) eller en isoform, et mutein, et fusjonsprotein, et funksjonelt derivat, en aktiv fraksjon eller et salt derav, hvori sammensetningen er en løsning som omfatter en buffer, et Poloxamer 188-overflateaktivt middel, et isotonisitetsmiddel og en antioksidant som er metionin.
Ifølge en utførelse av den foreliggende oppfinnelsen, omfatter sammensetningene også et bakteriostatisk middel.
Oppfinnelsen er angitt med forskjellige utførelsesformer i de tilhørende krav.
IFN-P er det foretrukne IFN ifølge den foreliggende oppfinnelsen. IFN-P som er egnet i samsvar med den foreliggende oppfinnelsen er kommersielt tilgjengelig, for eksempel som Rebif® (Serono), Avonex® (Biogen) eller Betaferon® (Schering). Anvendelse av interferoner av humant opphav, foretrekkes også i samsvar med den foreliggende oppfinnelsen. Begrepet interferon som anvendt heri, er ment å omfatte en isoform, et mutein, et fusjonsprotein, et funksjonelt derivat, en aktiv fraksjon eller et salt derav.
Begrepet "interferon-beta (IFN-beta eller IFN-P)" som anvendt heri, er ment å omfatte fibroblastinterferon, fortrinnsvis av humant opphav, erholdt ved isolering fra biologiske verter eller ved rekombinante DNA-teknikker fra prokaryote eller eukaryote vertsceller, så vel som salter, funksjonelle derivater, varianter, analoger og aktive fragmenter derav. IFN-P er fortrinnsvis ment å bety interferon beta-la.
Som anvendt heri, viser begrepet "muteiner" til analoger av IFN hvori en eller flere av aminosyrerestene i et naturlig IFN er erstattet med andre aminosyrerester eller er deletert, eller hvori en eller flere aminosyrerester er addert til den naturlige IFN-sekvensen uten i omfattende grad å endre aktiviteten til de resulterende produktene sammenlignet med villtype IFN. Disse muteinene fremstilles ved kjente synteseteknikker og/eller ved setestyrte mutageneseteknikker, eller ved enhver annen kjent teknikk som er egnet for dette. Foretrukne muteiner omfatter for eksempel de som beskrives av Shepard et al. (1981) eller Mark et al. (1984).
Ethvert slikt mutein har fortrinnsvis en aminosyresekvens som i tilstrekkelig grad tilsvarer sekvensen til IFN til at muteinet har i alt vesentlig tilsvarende, eller til og med bedre, aktivitet enn et IFN. Den biologiske funksjonen av interferon er velkjent blant fagfolk, og biologiske standarder er etablerte og tilgjengelige, for eksempel fra National Institute for Biological Standards and Control
(http: //immunology. org/links/NIB S C).
Bioanalyser for bestemmelse av IFN-aktivitet er beskrevet. En IFN-analyse kan for eksempel utføres som beskrevet av Rubinstein et al., 1981. Det kan således bestemmes hvorvidt et gitt mutein har i alt vesentlig samme eller til og med bedre, aktivitet enn IFN, basert på rutinemessig eksperimentering.
Muteiner av IFN som kan anvendes i samsvar med den foreliggende oppfinnelsen eller nukleinsyrer som koder for disse, omfatter et begrenset sett av i alt vesentlig tilsvarende sekvenser som substitusjonspeptider eller polynukleotider som rutinemessig kan erholdes av en gjennomsnittsfagperson uten omfattende eksperimentering, basert på den lære og de retningslinjer som gis heri.
Foretrukne endringer for muteiner i samsvar med den foreliggende oppfinnelsen, er hva som betegnes som "konservative" substitusjoner. Konservative aminosyresubstitusjoner i polypeptider eller proteiner ifølge oppfinnelsen kan omfatte synonyme aminosyrer innen en gruppe med tilstrekkelig like fysikalskkjemiske egenskaper til at substitusjon mellom medlemmer av gruppen vil bevare molekylets biologiske funksjon. Det er åpenbart at innsettinger og delesjoner av aminosyrer også kan innføres i de ovenfor definerte sekvensene uten å endre deres funksjon, særlig dersom innsettingene eller delesjonene kun omfatter noen få aminosyrer, for eksempel under tretti, fortrinnsvis under ti og ikke fjerner eller forskyver aminosyrer som er avgjørende for en funksjonell konformasjon, for eksempel cysteinrester. Proteiner og muteiner som er fremstilt ved slike delesjoner og/eller innsettinger, ligger innenfor den foreliggende oppfinnelses område.
De synonyme aminosyregruppene er fortrinnsvis gruppene som er definert i tabell I. Mer foretrukket er de synonyme aminosyregruppene gruppene som er definert i tabell II og mest foretrukket er de synonyme aminosyregruppene gruppene som er definert i tabell III.
Eksempler på innføring av aminosyresubstitusjoner i proteiner som kan anvendes for erholdelse av muteiner av IFN for anvendelse i den foreliggende oppfinnelsen, omfatter alle kjente fremgangsmåtetrinn, for eksempel som beskrevet i US patentskriftene nr. 4,959,314, 4,588,585 og 4,737,462 tilhørende Mark et al; 5,116,943 tilhørende Koths et al; 4,965,195 tilhørende Nåmen et al; 4,879,111 tilhørende Chong et al; og 5,017,691 tilhørende Lee et al; og de lysinsubstituerte proteinene som beskrives i US patentskrift nr. 4,904,584 (Shaw et al). Spesifikke muteiner av IFN-beta er beskrevet, for eksempel av Mark et al., 1984.
Begrepet "fusjonsprotein" viser til et polypeptid som omfatter et IFN eller et mutein derav fusjonert til et annet protein som for eksempel har forlenget halveringstid i kroppsvæsker. Et IFN kan således være fusjonert til et annet protein, polypeptid eller lignende, for eksempel et immunoglobulin eller et fragment derav.
"Funksjonelle derivater" som anvendt heri, dekker derivater av IFN og deres muteiner og fusjonsproteiner som kan fremstilles fra de funksjonelle gruppene som opptrer som sidekjeder på aminosyrerestene eller de N- eller C-terminale gruppene ved midler som er kjente innen faget, og omfattes av oppfinnelsen så lenge som de forblir farmasøytisk akseptable, det vil si at de ikke ødelegger aktiviteten til proteinet som i alt vesentlig tilsvarer aktiviteten til IFN og ikke innfører toksiske egenskaper i sammensetninger som inneholder dem. Disse derivatene kan for eksempel omfatte polyetylenglykolsidekjeder som kan maskere antigene seter og forlenge halveringstiden for IFN i kroppsvæsker. Andre derivater omfatter alifatiske estere av karboksylgruppene, amider av karboksylgruppene ved reaksjon med ammoniakk eller med primære eller sekundære aminer, N-acylderivater av frie aminogrupper i aminosyrerestene dannet med acylgrupper (for eksempel alkanoylgruppe eller karbosykliske aroylgrupper) eller O-acylderivater av de frie
hydroksylgruppene (for eksempel i seryl- eller treonylrester) dannet med acylgrupper.
Som "aktive fraksjoner" av IFN eller muteiner og fusjonsproteiner, omfatter den foreliggende oppfinnelsen ethvert fragment eller enhver forløper av polypeptidkjeden i proteinmolekylet, alene eller sammen med assosierte molekyler eller rester som er koblet til den, for eksempel sukkerrester eller fosfatrester, eller aggregater av proteinmolekylet eller sukkerrestene alene, forutsatt at fraksjonen ikke har signifikant redusert aktivitet sammenlignet med det tilsvarende IFN.
Begrepet "salter" viser heri til både salter av karboksylsgrupper og syreaddisjonssalter av aminogrupper i proteinene som er beskrevet ovenfor eller analoger av disse. Salter av en karboksylgruppe kan dannes ved midler som er kjente innen faget og omfatter uorganiske salter, for eksempel natrium-, kalsium-, ammonium-, jern(III)- eller sinksalter og lignende, og salter av organiske baser så som de dannet med aminer så som trietanolamin, arginin eller lysin, piperidin, prokain og lignende. Syreaddisjonssalter omfatter for eksempel salter med mineralsyrer så som for eksempel saltsyre eller svovelsyre og salter med organiske syrer så som for eksempel eddiksyre eller oksalsyre. Slike salter må naturligvis bibeholde den biologiske aktiviteten til proteinene (IFN) som relevant for den foreliggende oppfinnelsen, det vil si evnen til å bindes til den tilsvarende reseptoren og utløse reseptorsignalisering.
I samsvar med den foreliggende oppfinnelsen, foretrekkes videre spesielt anvendelse av rekombinant humant IFN-beta og forbindelsene ifølge oppfinnelsen.
En spesiell type interferonvariant har nylig blitt beskrevet. De såkalte "konsensusinterferonene" er ikke naturlig forekommende varianter av IFN (US 6,013,253). Ifølge en foretrukket utførelse av oppfinnelsen, anvendes forbindelsene ifølge oppfinnelsen i kombinasjon med et konsensusinterferon.
Som anvendt heri, skal human interferonkonsensus (IFN-con) bety et ikke naturlig forekommende polypeptid som hovedsakelig omfatter de aminosyrerestene som er felles for en undergruppe av IFN-alfa som er representative for de fleste naturlig forekommende humane sekvenser fra undertypen leukocyttinterferon og som i en eller flere av de posisjoner hvor det ikke foreligger en aminosyre som er felles for alle undertypene, omfatter en aminosyre som hovedsakelig opptrer i denne posisjonen og som ikke i noe tilfelle omfatter en aminosyrerest som ikke foreligger i denne posisjonen i minst én naturlig forekommende undertype. IFN-con omfatter, men er ikke begrenset til, aminosyresekvensene som betegnes IFN-conl, IFN-con2 og IFN-con3, som beskrives U.S. patentskrift nr. 4,695,623, 4,897,471 og 5,541,293. DNA-sekvenser som koder for IFN-con kan fremstilles som beskrevet i de ovenfor nevnte patentskriftene eller ved andre standard fremgangsmåter.
I nok en foretrukket utførelse omfatter fusjonsproteinet en Ig-fusjon. Fusjonen kan være direkte eller via et kort linkerpeptid som kan være ned til 1 til 3 aminosyrerester langt eller lengre, for eksempel 13 aminosyrerester langt. Linkeren kan for eksempel være et tripeptid med sekvensen E-F-M (Glu-Phe-Met) eller en 13 aminosyrer lang linkersekvens som omfatter Glu-Phe-Gly-Ala-Gly-Leu-Val-Leu-Gly-Gly-Gln-Phe-Met, innført mellom sekvensen til IFN og immunoglobulinsekvensen. Det resulterende fusjonsproteinet kan ha forbedrede egenskaper så som for eksempel en forlenget oppholdstid i kroppsvæsker (halveringstid), forhøyet spesifikk aktivitet, forhøyet ekspresjonsnivå eller enklere rensing av fusjonsproteinet.
I nok en foretrukket utførelse er IFN fusjonert til det konstante området av et Ig-molekyl. Det er fortrinnsvis fusjonert til tungkjedeområder, for eksempel CH2- og CH3-domenene i humant IgGl. Andre isoformer av Ig-molekyler er også egnede for fremstilling av fusjonsproteiner ifølge den foreliggende oppfinnelsen, for eksempel isoformene IgG2, IgG3eller IgG4, eller andre Ig-klasser, for eksempel IgM eller lg A. Fusjonsproteiner kan være monomere eller multimere og hetero- eller homomultimere.
I nok en foretrukket utførelse omfatter det funksjonelle derivatet minst en gruppe som er bundet til en eller flere funksjonelle grupper som foreligger som en eller flere sidekjeder på aminosyrerestene. Gruppen er fortrinnsvis en polyetylengruppe (PEG). PEGylering kan utføres ifølge kjente fremgangsmåter, for eksempel de som er beskrevet i W099/55377.
Den administrerte mengden, administrert som enkelt eller flere doser, til et individ vil variere avhengig av en rekke faktorer, innbefattet farmakokinetiske egenskaper, administrasjonsveien, pasientens tilstand og egenskaper (kjønn, alder, kroppsvekt, helsetilstand, størrelse), omfanget av symptomer, samtidige behandlingstyper, behandlingens hyppighet og den ønskede virkningen.
Standarddoser av humant IFN-beta varierer fra 80000 IU/kg til 200000 IU/kg pr dag, fra 6 MIU (millioner internasjonale enheter) til 12 MIU pr person pr dag eller fra 22 til 44 ug (mikrogram) pr person. Ifølge den foreliggende oppfinnelsen kan IFN fortrinnsvis administreres i en dose på fra tilnærmet 1 til 50 ug, mer foretrukket fra omtrent 10 til 30 ug eller fra omtrent 10 til 20 ug pr person pr dag.
Administrering av aktive bestanddeler i samsvar med den foreliggende oppfinnelsen kanskje intravenøst, intramuskulært eller subkutant. Den foretrukne administrasjonsveien for IFN er subkutant.
IFN kan også administreres daglig, annenhver dag eller mindre hyppig. Fortrinnsvis administreres IFN en, to eller tre ganger i uken.
Den foretrukne administrasjonsveien er subkutan administrering, administrert for eksempel tre ganger ukentlig. Nok en foretrukket administrasjonsvei er intramuskulær administrering, for eksempel tilført en gang i uken.
Fortrinnsvis administreres fra 22 til 44 ug eller fra 6 MIU til 12 MIU IFN-beta tre ganger i uken ved subkutan injeksjon.
IFN-beta kan administreres subkutant i en dose på fra 25 til 30 ug eller fra 8 MIU til 9,6 MIU annenhver dag. 30 ug eller 6 MIU IFN-beta kan videre administreres intramuskulært en gang i uken.
Begrepet "stabilitet" viser til den fysiske, kjemiske og konformasjonelle stabiliteten av utforminger av interferon ifølge den foreliggende oppfinnelsen (innbefattet opprettholdelse av biologisk aktivitet). Ustabilitet av en proteinutforming kan skyldes kjemisk degradering eller aggregering av proteinmolekylene slik at det dannes høyere ordens polymerer, deglykosylering, modifisering av glykosylering, oksidasjon eller enhver annen strukturell modifikasjon som reduserer minst en biologisk aktivitet forbundet med et interferonpolypeptid som omfattes av den foreliggende oppfinnelsen.
En "stabil" løsning eller utforming er en løsning eller utforming hvori graden av degradering, modifikasjon, aggregering, tap av biologisk aktivitet og lignende av proteinene deri er kontrollert i akseptabel grad og ikke på en uakseptabel måte øker med tiden. Utformingen bibeholder fortrinnsvis minst tilnærmet 60%, mer foretrukket minst tilnærmet 70% og mest foretrukket minst tilnærmet 80% av den merkede interferonaktiviteten over et tidsrom på 12 til 24 måneder. De stabiliserte HSA-frie IFN-sammensetningene ifølge oppfinnelsen har fortrinnsvis en lagringstid på minst tilnærmet 6 måneder, 12 måneder, 18 måneder, mer foretrukket minst 20 måneder, enda mer foretrukket minst tilnærmet 22 måneder og mest foretrukket minst tilnærmet 24 måneder ved lagring ved 2-8°C.
Fremgangsmåter for å måle stabiliteten av de HSA-frie farmasøytiske IFN-sammensetningene ifølge oppfinnelsen er tilgjengelige innen faget, innbefattet fremgangsmåtene som beskrives i eksemplene gis heri. Således kan dannelse av IFN-aggregater under lagring av en flytende farmasøytisk sammensetning ifølge oppfinnelsen lett bestemmes ved å måle endringen av løselig IFN i løsning over tid. Mengden av løselig polypeptid i løsningen kan kvantifiseres ved en rekke analytiske analyser som er tilpasset påvisning av IFN. Slike analyser omfatter for eksempel revers fase (RP) HPLC og UV-absorpsjonsspektroskop, som beskrevet i eksemplene nedenfor.
Bestemmelse av både løselige og uløselige aggregater under lagring i flytende preparater kan for eksempel oppnås ved anvendelse av analytisk ultrasentrifugering, som bemerket i eksemplene nedenfor, for å skille mellom den andelen av det løselige polypeptidet som foreligger som løselige aggregater og den andelen som foreligger i ikke-aggregert, biologisk aktiv molekylær form.
Uttrykket "flerdosebruk" er ment å omfatte anvendelsen av en enkelt medisinflaske, ampulle eller patron med en interferonutforming for mer enn én injeksjon, for eksempel 2, 3, 4, 5, 6 eller flere injeksjoner. Injeksjonene utføres fortrinnsvis over et tidsrom på minst tilnærmet 12 timer, 24 timer, 48 timer, osv., fortrinnsvis opptil et tidsrom på minst tilnærmet 12 dager. Avstanden i tid mellom injeksjonene kan for eksempel være 6, 12, 24, 48 eller 72 timer.
Begrepet "buffer" eller "fysiologisk akseptabel buffer" viser til løsninger av forbindelser som vites å være sikre for farmasøytisk eller veterinærmedisinsk anvendelse i utforminger og som virker ved å opprettholde eller kontrollere pH i utformingen innenfor det pH-området som er ønsket for utformingen. Akseptable buffere for kontroll av pH mellom en moderat sur pH og en moderat basisk pH omfatter, men er ikke begrenset til, forbindelser så som fosfat, acetat, citrat, arginin, TRIS og histidin. "TRIS" viser til 2-amino-2-hydroksymetyl-l,3-propandiol og ethvert farmakologisk akseptabelt salt derav. Foretrukne buffere er acetatbuffere med saltløsning eller et akseptabelt salt.
Et "isotonisitetsmiddel" er en forbindelse som tolereres fysiologisk og som gir en utforming en egnet tonisitet for å forhindre netto gjennomstrømning av vann over cellemembraner som er i kontakt med utformingen. Forbindelser så som glyserin anendes hyppig for slike formål i kjente konsentrasjoner. Andre egnede isotonisitetsmidler omfatter, men er ikke begrenset til, aminosyrer eller proteiner (for eksempel glysin eller albumin), salter (for eksempel natriumklorid) og sukkere (for eksempel dekstrose, mannitol, sukrose og laktose). Isotonisitetsmiddelet er fortrinnsvis mannitol.
Begrepet "antioksidant" viser til en forbindelse som forhindrer at oksygen eller oksygenavledede frie radikaler interagerer med andre forbindelser. Antioksidanter er blant en rekke eksipienter som hyppig tilsettes til farmasøytiske systemer for å forbedre fysisk og kjemisk stabilitet. Antioksidanter tilsettes for å minimalisere eller forsinke oksidative prosesser som opptrer for noen medikamenter eller eksipienter når de eksponeres overfor oksygen eller i nærvær av frie radikaler. Disse prosessene kan ofte katalyseres av lys, temperatur, hydrogenionkonsentrasjon, nærvær av spormetaller eller peroksider. Sulfitter, bisulfitter, tiourea, metionin, salter av etylendiamintetraeddiksyre (EDTA), butylert hydroksytoluen (BHT) og butylert hydroksyanisol (BHA) anvendes hyppig som antioksidanter i medikamenter. Natrium EDTA har blitt vist å forsterke aktiviteten av antioksidanter ved å gelatere metallioner som ellers ville katalysere oksidasjonsreaksjonen. I henhold til oppfinnelsen er antioksidanten metionin.
Begrepet "bakteriostatisk" viser til en forbindelse eller sammensetninger som tilsettes til en utforming for å virke som et antibakterielt middel. En konservert interferonholdig utforming ifølge den foreliggende oppfinnelsen oppfyller fortrinnsvis lovmessige eller regulatoriske retningslinjer for effektiv konservering i en grad som gjør det til et kommersielt levedyktig flerbruksprodukt. Eksempler på bakteriostatiske midler omfatter fenol,/w-kresol,/?-kresol, okresol, klorkresol, benzylalkohol, alkylparaben (metyl, etyl, propyl, butyl og lignende), benzalkoniumklorid, benzetoniumklorid, natriumdehydroacetat og timerosal. Det bakteriostatiske middelet er fortrinnsvis benzylalkohol.
Begrepet "overflateaktivt middel" viser til en løselig forbindelse som reduserer væskers overflatespenning eller reduserer interfasespenningen mellom to væsker eller en væske og et fast stoff, hvor overflatespenningen er den kraften som virker på overflaten av en væske og bidrar til å minimalisere overflatearealet. Overflateaktive midler har noen ganger blitt anvendt i farmasøytiske preparater, innbefattet preparater for tilførsel av lavmolekylære medikamenter og polypeptider, for å modifisere absorpsjonen av medikamentet eller tilførselen til målvevene. Velkjente overflateaktive midler omfatter polysorbater (polyoksyetylenderivater; Tween) så vel som Pluronic.
Ifølge en foretrukket utførelse av oppfinnelsen, har det blitt funnet at ved å utforme interferon-beta med det overflateaktive middelet Pluronic F68 (BASF, Pluronic F68 betegnes også Poloxamer 188), oppnås stabile utforminger som minimaliserer tapet av aktivt prinsipp grunnet adsorpsjon til overflaten av ampullen og/eller tilførselsinnretningen (for eksempel sprøyten, pumpen, kateteret, osv). Det har også blitt funnet at ved å utforme interferon-beta med det overflateaktive middelet Pluronic F68 (BASF, Pluronic F68 betegnes også Poloxamer 188), erholdes en stabil utforming som er mer resistent overfor oksidasjon og for dannelse av proteinaggregater.
De overflateaktive midlene Pluronic er blokksampolymerer av etylenoksid (EO) og propylenoksid (PO). Propylenoksidblokken (PO) er plassert mellom to etylenoksidblokker (EO).
De overflateaktive midlene Pluronic syntetiseres i en totrinns prosess:
1. En hydrofob gruppe med den ønskede molekylvekten dannes ved kontrollert tilsetning av propylenoksid til de to hydroksylgruppene i propylenglykol; og 2. Etylenoksid tilsettes slik at den hydrofobe gruppen plasseres mellom hydrofile grupper.
I Pluronic® F77, er prosentandelen av polyoksyetylen (hydrofil) 70%, og molekylvekten av den hydrofobe gruppen (polyoksypropylen) er tilnærmet 2306 Da.
I Pluronic F87, er prosentandelen av polyoksyetylen (hydrofil) 70%, og molekylvekten av den hydrofobe gruppen (polyoksypropylen) er tilnærmet 2644 Da.
I Pluronic F88, er prosentandelen av polyoksyetylen (hydrofil) 80%, og molekylvekten av den hydrofobe gruppen (polyoksypropylen) er tilnærmet 2644 Da.
I Pluronic F68, er prosentandelen av polyoksyetylen (hydrofil) 80%, og molekylvekten av den hydrofobe gruppen (polyoksypropylen) er tilnærmet 1967 Da.
Typiske egenskaper ved Pluronic F77 er opplistet nedenfor:
Gjennomsnittlig molekylvekt: 6600;
Smelte/hellepunkt: 48°C;
Fysisk form ved 20°C: Fast;
Viskositet (Brookfield) eps: 480 [væsker ved 25°C, pastaer ved 60°C og faste stoffer ved 77°C];
Overflatespenning, dyn/cm ved 25°C;
0,1% konsentrasjon: 47,0
0,01% konsentrasjon: 49,3
0,001% konsentrasjon: 52,8
Interfasespenning, dyn/cm ved 25°C versus Nujol;
0,1% konsentrasjon: 17,7
0,01% konsentrasjon: 20,8
0,01% konsentrasjon: 25,5
Draves fukting, sekunder ved 25°C
1,0% konsentrasjon: >360
0,1% konsentrasjon: >360
Skumhøyde
Ross Miles, 0,1%, mm ved 50°C: 100
Ross Miles, 0,1%, mm ved 26°C: 47
Dynamisk, 0,1%, mm ved 400 ml/minutt: >600
Blakkingspunkt i vandig løsning, °C
1% konsentrasjon: >100
10% konsentrasjon: >100
HLB (hydrofil-lipofil balanse): 25
Typiske egenskaper ved Pluronic F87 er opplistet nedenfor:
Gjennomsnittlig molekylvekt: 7700;
Smelte/hellepunkt: 49°C;
Fysisk form ved 20°C: Fast;
Viskositet (Brookfield) eps: 700 [væsker ved 25°C, pastaer ved 60°C og faste stoffer ved 77°C];
Overflatespenning, dyn/cm ved 25°C;
0,1% konsentrasjon: 44,0
0,01% konsentrasjon: 47,0
0,001% konsentrasjon: 50,2
Interfasespenning, dyn/cm ved 25°C versus Nujol;
0,1% konsentrasjon: 17,4
0,01% konsentrasjon: 20,3
0,01% konsentrasjon: 23,3
Draves fukting, sekunder ved 25°C
1,0% konsentrasjon: >360
0,1% konsentrasjon: >360
Skumhøyde
Ross Miles, 0,1%, mm ved 50°C: 80
Ross Miles, 0,1%, mm ved 26°C: 37
Dynamisk, 0,1%, mm ved 400 ml/minutt: >600
Blakkingspunkt i vandig løsning, °C
1% konsentrasjon: >100
10% konsentrasjon: >100
HLB (hydrofil-lipofil balanse): 24
Typiske egenskaper ved Pluronic F88 er opplistet nedenfor:
Gjennomsnittlig molekylvekt: 11400;
Smelte/hellepunkt: 54°C;
Fysisk form ved 20°C: Fast;
Viskositet (Brookfield) eps: 2300 [væsker ved 25°C, pastaer ved 60°C og faste stoffer ved 77°C];
Overflatespenning, dyn/cm ved 25°C;
0,1% konsentrasjon: 48,5
0,01% konsentrasjon: 52,6
0,001% konsentrasjon: 55,7
Interfasespenning, dyn/cm ved 25°C versus Nujol;
0,1% konsentrasjon: 20,5
0,01% konsentrasjon: 23,3
0,01% konsentrasjon: 27,0
Draves fukting, sekunder ved 25°C
1,0% konsentrasjon: >360
0,1% konsentrasjon: >360
Skumhøyde
Ross Miles, 0,1%, mm ved 50°C: 80
Ross Miles, 0,1%, mm ved 26°C: 37
Dynamisk, 0,1%, mm ved 400 ml/minutt: >600
Blakkingspunkt i vandig løsning, °C
1% konsentrasjon: >100
10% konsentrasjon: >100
HLB (hydrofil-lipofil balanse): 28
Typiske egenskaper ved Pluronic F68 er opplistet nedenfor:
Gjennomsnittlig molekylvekt: 8400;
Smelte/hellepunkt: 52°C;
Fysisk form ved 20°C: Fast;
Viskositet (Brookfield) eps: 1000 [væsker ved 25°C, pastaer ved 60°C og faste stoffer ved 77°C];
Overflatespenning, dyn/cm ved 25°C;
0,1% konsentrasjon: 50,3
0,01% konsentrasjon: 51,2
0,001% konsentrasjon: 53,6
Interfasespenning, dyn/cm ved 25°C versus Nujol;
0,1% konsentrasjon: 19,8
0,01% konsentrasjon: 24,0
0,01% konsentrasjon: 26,0
Draves fukting, sekunder ved 25°C
1,0% konsentrasjon: >360
0,1% konsentrasjon: >360
Skumhøyde
Ross Miles, 0,1%, mm ved 50°C: 35
Ross Miles, 0,1%, mm ved 26°C: 40
Dynamisk, 0,1%, mm ved 400 ml/minutt: >600
Blakkingspunkt i vandig løsning, °C
1% konsentrasjon: >100
10% konsentrasjon: >100
HLB (hydrofil-lipofil balanse): 29
Andre polymerer med tilsvarende egenskaper som dem opplistet ovenfor kan også anvendes.. Det foretrukne overflateaktive middelet er Pluronic F68.
Pluronic, fortrinnsvis Pluronic F68, foreligger fortrinnsvis i en konsentrasjon som er tilstrekkelig til å opprettholde interferonstabiliteten over den ønskede lagringsperioden (for eksempel 12 til 24 måneder) og også i en konsentrasjon som er tilstrekkelig til å forhindre tap av protein grunnet adsorpsjon til overflater, for eksempel i flasken, ampullen, patronen eller sprøyten.
Konsentrasjonen av Pluronic F68 i flytende utforminger er fortrinnsvis fra tilnærmet 0,01 mg/ml til tilnærmet 10 mg/ml, mer foretrukket fra tilnærmet 0,05 mg/ml til tilnærmet 5 mg/ml, ytterligere mer foretrukket fra tilnærmet 0,1 mg/ml til tilnærmet 2 mg/ml og mest foretrukket tilnærmet 1 mg/ml.
Konsentrasjonen av IFN-beta i utformingen er fortrinnsvis fra tilnærmet 10 u,g/ml til tilnærmet 800 ug/ml, mer foretrukket fra tilnærmet 20 ug/ml til tilnærmet 500Hg/ml, enda mer foretrukket fra tilnærmet 30 til tilnærmet 300 og mest foretrukket tilnærmet 22, 44, 88 eller 264 ug/ml.
Utformingene ifølge den foreliggende oppfinnelsen har fortrinnsvis en pH på mellom tilnærmet 3,0 og tilnærmet 5,0, mer foretrukket tilnærmet 3,7 eller 4,7. En foretrukket buffer er acetat, hvor de foretrukne motionene er natrium- eller kaliumioner. Acetat-saltvannsbuffere er velkjente innen faget. Bufferkonsentrasjonen i den totale løsningen kan variere mellom tilnærmet 5 mM, 9,5 mM, 10 mM, 50 mM, 100 mM, 150 mM, 200 mM, 250 mM og 500 mM. Bufferkonsentrasjonen er fortrinnsvis tilnærmet 10 mM. Spesielt foretrukket er en buffer som er 10 mM med hensyn på acetationer og med en pH på 3,5 + 0,2 eller 4,5 ± 0,2.
I sammensetningen ifølge oppfinnelsen, foreligger fortrinnsvis antioksidanten, for eksempel metionin, i en konsentrasjon på fra tilnærmet 0,01 til tilnærmet 5,0 mg/ml, mer foretrukket fra tilnærmet 0,05 til tilnærmet 0,3 mg/ml, og konsentrasjonen er mest foretrukket tilnærmet 0,1 mg/ml.
Konsentrasjonen av isotonisitetsmiddelet (for eksempel mannitol) i flytende utforminger er fortrinnsvis fra tilnærmet 0,5 mg/ml til tilnærmet 500 mg/ml, mer foretrukket fra tilnærmet 1 mg/ml til tilnærmet 250 mg/ml, enda mer foretrukket fra tilnærmet 10 mg/ml til tilnærmet 100 mg/ml og er mest foretrukket tilnærmet 55 mg/ml.
Oppfinnelsen omfatter flytende utforminger. Det foretrukne løsemiddelet er injeksjons vann.
Flytende utforminger kan være enkeltdoseutforminger eller flerdoseutforminger. De flytende interferonutformingene ifølge oppfinnelsen som er beregnet for flerdosebruk, omfatter fortrinnsvis et bakteriostatisk middel så som fenol,/M-kresol,/7-kresol, o-kresol, klorkresol, benzylalkohol, alkylparaben (metyl, etyl, propyl, butyl og lignende), benzalkoniumklorid, benzetoniumklorid, natriumdehydroacetat og timerosal. Spesielt foretrekkes fenol, benzylalkohol og/M-kresol, fortrinnsvis benzylalkohol. Det bakteriostatiske middelet anvendes i en mengde som vil gi en konsentrasjon som effektivt holder utformingen i alt vesentlig bakteriefri (egnet for injeksjon) over flerdoseinjeksjonstidsrommet som kan være fra tilnærmet 12 eller 24 timer til tilnærmet 12 dager, fortrinnsvis fra tilnærmet 6 til tilnærmet 12 dager. Det bakteriostatiske middelet foreligger fortrinnsvis i en konsentrasjon på fra tilnærmet 0,1% (masse bakteriostatisk middel/masse løsemiddel) til tilnærmet 2,0%, mer foretrukket fra tilnærmet 0,2% til tilnærmet 1,0%. Når det gjelder benzylalkohol, foretrekkes spesielt konsentrasjoner på 0,2 eller 0,3%. Anvendelse av et konserveringsmiddel, for eksempel benzylalkohol, er imidlertid ikke begrenset til flerdoseutforminger, konserveringsmiddelet kan også tilsettes til enkeltdoseutforminger.
Konsentrasjonsområdet av interferon i utformingene ifølge oppfinnelsen omfatter mengder som etter rekonstituering gir konsentrasjoner på fra tilnærmet 1,0 u,g/ml til tilnærmet 50 mg/ml, selv om lavere og høyere konsentrasjoner fungerer og vil avhenge av den påtenkte tilførselsbærer, for eksempel vil utforminger som er løsninger være forskjellige fra fremgangsmåter som benytter transdermale plastere, pulmonale fremgangsmåter, transmukosale fremgangsmåter eller fremgangsmåter som benytter osmotiske pumper eller mikropumper. Interferonkonsentrasjonen er fortrinnsvis fra tilnærmet 5,0 ug/ml til tilnærmet 2 mg/ml, mer foretrukket fra tilnærmet 10 u,g/ml til tilnærmet 1 mg/ml og mest foretrukket fra tilnærmet 30Hg/ml til tilnærmet 100 ug/ml.
Utformingene bibeholder fortrinnsvis minst tilnærmet 60%, mer foretrukket minst tilnærmet 70% og mest foretrukket minst tilnærmet 80% av interferonaktiviteten på pakketidspunktet over et tidsrom på 24 måneder.
I en ytterligere foretrukket utførelse, tilveiebringes det en fremgangsmåte for fremstilling av en flytende farmasøytisk sammensetning som beskrevet tidligere.
I ytterligere en foretrukket utførelse, tilveiebringes en fremgangsmåte for fremstilling av en pakket farmasøytisk sammensetning som omfatter plassering av en løsning som omfatter den aktive bestanddelen og eksipientene som er beskrevet ovenfor.
I ytterligere en foretrukket utførelse, tilveiebringes en fremstilt gjenstand for human farmasøytisk anvendelse som omfatter en flaske som omfatter de farmasøytiske sammensetningene som beskrevet ovenfor og nedskrevet materiale som angir at løsningen kan oppbevares over et tidsrom på tilnærmet tjuefire timer eller mer etter første gangs bruk. Dette nedskrevne materialet angir fortrinnsvis at løsningen kan oppbevares opptil tilnærmet 12 dager.
Etter første gangs bruk av en flerdoseutforming, kan denne oppbevares og anvendes i minst tilnærmet 24 timer, fortrinnsvis minst tilnærmet 4, 5 eller 6 dager, mer foretrukket i opptil 12 dager. Etter første gangs bruk av utformingen, lagres den fortrinnsvis ved en temperatur under romtemperatur (det vil si lavere enn tilnærmet 25°C), mer foretrukket lavere enn tilnærmet 10°C, mer foretrukket ved tilnærmet 2-8°C og mest foretrukket ved tilnærmet 4-6°C.
Utformingene kan fremstilles ved en prosess som omfatter tilsetning av de beregnede mengdene av eksipientene til den bufrede løsningen, fulgt av tilsetning av interferonet.
Den resulterende løsningen plasseres så i flasker, ampuller eller patroner. Varianter av denne prosessen vil være kjent blant gjennomsnittsfagfolk. For eksempel er rekkefølgende som bestanddelene tilsettes i, hvorvidt ytterligere tilsetningsstoffer anvendes og temperatur og pH ved hvilken utformingen fremstilles ved, alle faktorer som kan optimaliseres for den benyttede konsentrasjon og administrasj onsmåte.
Når det gjelder en utforming for flerdoseanvendelse, kan det bakteriostatiske middelet være tilsatt til løsningen som inneholder den aktive bestanddelen (interferon), eller det kan alternativt foreligge i en separat flaske eller patron og så blandes med løsningen som inneholder den aktive bestanddelen på det tidspunkt utformingen skal anvendes.
Utformingene ifølge oppfinnelsen kan administreres ved anvendelse av anerkjente innretninger. Eksempler som benytter disse enkeltflaskesystemene omfatter autoinjeksjons- eller penninjeksjonsinnretninger for tilførsel av en løsning så som Rebiject®.
Produktene ifølge de vedlagte krav omfatter pakkemateriale. Pakkematerialet angir i tillegg til den informasjon som kreves av de regulerende myndighetene, betingelsene som produktet skal anvendes under. Pakkematerialet ifølge den foreliggende oppfinnelsen gir om nødvendig instruksjoner til pasienten vedrørende fremstilling av den endelige løsningen og anvendelse av denne endelige løsningen over et tidsrom på tjuefire timer eller mer for toflaskeproduktet, en flaske med en løsning og en flaske med tørt materiale. For løsningsproduktet i en enkelt flaske, angir merkelappen at løsningen kan anvendes over et tidsrom på tjuefire timer eller mer. Produktene ifølge de vedlagte krav er anvendbare for anvendelse som humane farmasøytiske produkter.
De stabile konserverte utformingene kan gis til pasienter som klare løsninger. Løsningen kan være en engangsbruk eller gjenbrukes flere ganger, og kan være tilstrekkelig for en enkelt syklus eller flere sykluser av pasientbehandling, og tilveiebringer følgelig et enklere behandlingsskjema enn hva som i dag er tilgjengelig.
Interferonet i enten de stabile eller konserverte utformingene eller løsningene som beskrives heri, kan administreres til en pasient i samsvar med den foreliggende oppfinnelsen via en rekke tilførselsfremgangsmåter innbefatter SC- eller IM-injeksjon, transdermalt, pulmonalt, transmukosalt, ved implantering, via en osmotisk pumpe, patron eller mikropumpe, oralt eller på andre måter som er kjente blant fagfolk.
Begrepet "flaske" viser bredt til et reservoar som er egnet for å holde interferonet i fast eller flytende form i en omsluttet steril tilstand. Eksempler på en flaske som anvendt heri omfatter ampuller, patroner, boblepakker eller et annet slikt reservoar som er egnet for tilførsel av interferonet til pasienten ved hjelp av en sprøyte, pumpe (innbefattet osmotisk pumpe), et kateter, et transdermalt plaster eller ved pulmonal eller transmukosal spray. Flasker som er egnede for innpakking av produkter for parenteral, pulmonal, transmukosal eller transdermal tilførsel er velkjente og anerkjente innen faget.
Begrepet "behandling" viser i forbindelse med den foreliggende oppfinnelsen til enhver gunstig virkning på sykdomsutviklingen, innbefattet svekkelse, reduksjon, nedgang eller minskning av den patologiske utviklingen etter at sykdommen har begynt.
Farmasøytiske sammensetninger ifølge oppfinnelsen som inneholder IFN eller en isoform, et mutein, et fusjonsprotein, et funksjonelt derivat, en aktiv fraksjon eller et salt derav, er anvendbare for diagnose, forebygging og behandling (lokalt eller systemisk) av kliniske indikasjoner som responderer på behandling med dette polypeptidet. Slike kliniske indikasjoner omfatter for eksempel lidelser eller sykdommer i sentralnervesystemet (CNS), hjernen og/eller ryggmargen, innbefattet multippel sklerose; autoimmune sykdommer innbefattet revmatoid artritt, psoriasis, Crohns sykdom; og kreft innbefattet brystkreft, prostatakreft, urinblærekreft, nyrekreft og kolonkreft.
Henvisninger til kjente fremgangsmåtetrinn, konvensjonelle fremgangsmåtetrinn, kjente fremgangsmåter eller konvensjonelle fremgangsmåter er på ingen måte en innrømmelse av at noe aspekt, noen beskrivelse eller noen utførelse av den foreliggende oppfinnelsen er beskrevet, lært eller antydet innen teknikkens stand.
Det skal forstås at begreper og terminologi som benyttes heri, benyttes for å beskrive og ikke for å begrense, slik at terminologien eller begrepene i den foreliggende beskrivelsen skal tolkes av den erfarne fagperson i lys av den lære og de retningslinjer som gis heri, kombinert med kunnskapen til en gjennomsnitts fagperson.
BESKRIVELSE AV FIGURENE
Figur 1: Her rapporteres prosentandelen av oksiderte former som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la med forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol etter lagring ved 40°C. Figur 2: Her rapporteres prosentandelen av oksiderte former som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la med forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol etter lagring ved 25°C. Figur 3: Figuren viser prosentandelen av oksiderte former som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la med forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol etter lagring ved 2-8°C. Figur 4: Her rapporteres prosentandelen av totale aggregater som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la med forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol etter lagring ved 40°C. Figur 5: Her rapporteres prosentandelen av totale aggregater som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la med forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol etter lagring ved 25°C. Figur 6: Her rapporteres prosentandelen av totale aggregater som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la med forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol etter lagring ved 2-8°C. Figur 7: Her vises prosentandelen av oksiderte former som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la som inneholder alternative bakteriostatiske midler etter lagring ved 25°C. Figur 8: Her rapporteres prosentandelen av oksiderte former som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la som inneholder alternative bakteriostatiske midler etter lagring ved 2-8°C. Figur 9: Her rapporteres prosentandelen av totale aggregater som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la som inneholder bakteriostatiske midler. Figur 10: Her vises prosentandelen av oksiderte former som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la som inneholder EDTA etter lagring ved 25°C. Figur 11: Her vises prosentandelen av totale aggregater som foreligger i flerdoseutforminger av interferon beta-la som inneholder EDTA etter lagring ved 25°C. Figur 12: Her vises effektiviteten av 0,012% L-metionin som antioksidant (ved 2-8°C). Figur 13: Her vises effektiviteten av 0,012% L-metionin som antioksidant (ved 25 ± 2°C).
EKSEMPLER
Eksempel 1 - Flytende HSA- fri enkeltdoseutforming av interferon beta- la i ferdigfylte sprøyter
1. 1 Innledende kompatibilitetsundersøkelser
Innledende eksperimenter ble utført for å bekrefte den beskyttende virkningen vist av enkelte eksipienter, for eksempel antioksidanter og overflateaktive midler, siden det var forventet at fjerning av humant serum albumin (HSA) fra produktet ifølge teknikkens stand kunne påvirke produktet når det gjaldt oksidasjon, dannelse av aggregater og adsorpsjon til overflater.
Interferon beta-la ble utformet i konsentrasjoner på 44 ug/ml og 88 ug/ml i natriumacetatbuffer tilsatt 54,6 mg/ml mannitol kombinert med flere eksipienter så som 0,4% HSA, 0,012% L-metionin, Tween 20 (0,005%, 0,007%, 0,01%), Poloxamer 188 (ved konsentrasjoner på 0,05%, 0,1% og 0,5%). De forskjellige kombinasjonene ble eksponert overfor stressbetingelser (enten lagring ved 40°C eller vorteksbehandling) og analysert for oksidasjon (ved RP-HPLC) og aggregering (ved SE-HPLC).
Tabellene DEP-1 og -2 oppsummerer nivåene av oksidasjon og aggregering etter 2 ukers lagring ved 40°C. Kombinasjonen av interferon beta-1 med begge de to overflateaktive midlene som ble analysert (Tween 20 og Poloxamer 188) førte til et økt oksidasjonsnivå som for begge typer av overflateaktivt middel er konsentrasjonsavhengig (tabell DEP-1, kombinasjonene nr. 4-6 og nr. 7-9); ved en konsentrasjon på 0,5% Poloxamer 188 (også betegnet Pluronic F-68 eller F-68) er medikamentsubstansen fullstendig degradert (tabell DEP-1, nr. 9). En høyere degraderingshastighet observeres som forventet for Tween 20, grunnet oksiderende molekyler (for eksempel peroksider) som kan foreligge som restmaterialer etter syntese.
Ingen av de to overflateaktive midlene påvirket aggregeringsnivået etter lagring ved 40°C i de forskjellige analyserte konsentrasjonene (tabell DEP-2). Tabell DEP-3 viser at begge de to overflateaktive midlene Tween 20 og Poloxamer 188 (F-68) benyttet ved den kritiske micellekonsentrasjonen (CMC) bidrar til å forhindre aggregering indusert ved 5 minutters vorteksbehandling.
1. 1. 1 Fvsikalskkjemiske egenskaper
De fysikalskkjemiske egenskapene som vites å være avgjørende for kvaliteten av medikamentproduktet, er graden av oksidasjon og av dimerer/aggregater. Disse egenskapene har blitt vurdert i kompatibilitetsundersøkelser som er oppsummert ovenfor.
1. 2 Eksipienter
1. 2. 1 10 mM natriumacetatbuffer.pH 3. 5
En 10 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5 tilsatt 54,6 mg/ml mannitol som isotonisitetsmiddel stabiliserer produktet, som vist under den tidligere utvikling av det i dag markedsførte produktet (Rebif®) og som beskrevet i EP 759,775.
1. 2. 2 Poloxamer 188
Poloxamer 188 (eller Pluronic F-68) inngår i utformingen i en konsentrasjon på 0,1% (kritisk micellekonsentrasjon) for å forhindre adsorpsjon av medikamentforbindelsen til overflaten av beholdere under fremstillingsprosesser; høyere konsentrasjoner kan på negativ måte påvirke stabiliteten av produktet (høyere oksidasjon); mens lavere konsentrasjoner kan være mindre effektive når det gjelder å begrense adsorpsjon.
Virkningen av Poloxamer 188 når det gjelder å forhindre adsorpsjon av medikamentforbindelsen under fremstillingsprosessen er vist ved følgende undersøkelse: Løsninger som inneholdt 44 ug/ml interferon beta-la ble kombinert med 3 forskjellige konsentrasjoner av et overflateaktivt middel (Tween 20 eller Poloxamer 188) eller HSA for å etterligne fremstillingsprosessen; prøver ble uttatt på forskjellige trinn (utforming, aseptisk filtrering, fylling) og analysert ved en kvantitativ RP-HPLC-fremgangsmåte.
Følgende prøver ble uttatt:
- før filtrering (BF)
etter første filtrering (AF1)
- etter andre filtrering (AF2)
- etter fylling (ferdig produkt ved T = 0).
Resultatene gis i tabell DEP-4 og er uttrykt som gjenvinning (%) sammenlignet med utgangsverdien (det vil si utformet løsning før filtrering): Poloxamer 188 er mer effektiv enn Tween 20, men like effektiv som HSA når det gjelder å forhindre adsorpsjon av medikamentforbindelsen under fremstillingen.
Forskjellige renhetsgrader av Poloxamer 188 erholdt fra forskjellige leverandører ble undersøkt når det gjaldt oksidasjonsprodukter etter akselererende betingelser (2 uker ved 40°C) for å finne den kvalitet som skulle benyttes: Poloxamer 188 fra BASF ble valgt, ettersom denne ga lavere oksidasjonsnivå og leveres i farmasøytisk renhet. Resultatene er oppsummert i tabell DEP-5:
1. 2. 3 L- metionin
L-metionin (L-Met) inngår i utformingen i en konsentrasjon på 0,012% for å begrense oksidasjonen. Virkningen av denne konsentrasjonen er vist ved sammenligning med en utforming som ikke inneholder L-metionin; høyere konsentrasjoner (0,05%, 0,1%) av L-metionin viser tilsvarende virkning på stabiliteten. Oksidasjonsproduktene som ble påvist etter lagring ved 40°C er vist i tabell DEP-6.
Under utviklingen av utformingen, ble effektiviteten av L-metionin som antioksidant bekreftet ved resultater vedrørende stabiliteten etter 3 måneder ved 2-8°C og 25 ± 2°C, erholdt for utforminger med L-metionin i kombinasjon med overflateaktive midler: L-metionin er effektiv som antioksidant i en konsentrasjon på 0,012% og kan garantere en stabilitet som tilsvarer stabiliteten observert for dagens produkt (se figurene 12 og 13).
1. 3 Medikamentprodukt
1. 3. 1 Utvikling av utforming
Den nye HSA-frie utformingen av interferon beta-la fokuserte på bekreftelse av resultatene fra de innledende undersøkelsene (effektiviteten av L-metionin som antioksidant, innføring av Poloxamer 188 for å forhindre tap under fremstillingen) i den endelige beholderen.
Løsninger av interferon beta-la i konsentrasjoner på 44 u,g/ml og 88 ug/ml tilsatt 54,6 mg/ml mannitol i 10 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5 ble fremstilt, og følgende eksipienter ble tilsatt: Tween 20 (0,003%, 0,007%, 0,02%)
Poloxamer 188 (0,05%, 0,1%, 0,2%)
• L-metionin (0%, 0,012%)
• HSA (0,4%, dagens utforming, betegnet "ref)
Sammensetningen av utformingene som ble undersøkt er vist i tabell DEP-7.
Utformingene ble fremstilt ifølge fremgangsmåten som er beskrevet nedenfor:
90 ml av hver utforming ble fremstilt under aseptiske betingelser ved sammenblanding av den ønskede mengde av eksipienter løst i WFI og medikamentforbindelsen (interferon beta-la); utformingene ble så filtrert gjennom en 0,22 nm membran (filtrert to ganger gjennom to membranfiltere) og 0,5 ml av hver løsning ble fylt i 1 ml Hypak glassprøyter. Porsjonsstørrelsen var på tilnærmet 180 sprøyter.
Utformingene ble så lagret ved 2-8°C, 25 ± 2°C og 40 ± 2°C og analysert for stabilitet i opptil 12 uker (opptil 6 uker for prøver lagret ved 40 ± 2°C).
Følgende analytiske tester og fremgangsmåter ble anvendt under utviklingen (for flere detaljer vedrørende disse analysene, se eksempel 2):
- bioaktivitet (CPE bioanalyse)
- analyse (RP-HPLC-fremgangsmåte)
- oksidasjonsprodukter (RP-HPLC-fremgangsmåte)
- dimerer/aggregater (SE-HPLC-fremgangsmåte og SDS-PAGE)
- pH (potensiometrisk fremgangsmåte)
- osmolalitet (kryoskopisk måling).
Resultatene og vurderingen av dem er oppsummert i tabellene DEP-8 til DEP-17.
Vinkelkoeffisientene beregnet ved lineær regresjonsanalyse og oppsummert i tabell DEP-9 viser redusert biologisk aktivitet for alle utformingene som inneholdt Tween 20 (nr. 1, 2, 3, 9) og lagret ved 40°C; en redusert bioaktivitet ble også observert for utformingene nr. 3 og 6 (høyeste konsentrasjon av overflateaktive midler) etter lagring ved 25°C og 2-8°C. Vinkelkoeffisientene beregnet ved lineær regresjonsanalyse og oppsummert i tabell DEP-11 viser høyere tap av proteininnhold for utformingene som inneholdt Tween 20 (nr. 1, 2, 3, 9) lagret ved 40°C, den samme tendens som observeres ved 25°C samt for utformingene nr. 5 og 6. En signifikant reduksjon av proteininnholdet opptrer ved 2-8°C for utformingene nr. 1, 2, 3 (med Tween 20), nr. 4, 5 (med Poloxamer 188) og nr. 9 (med Tween 20 og L-metionin). Vinkelkoeffisientene beregnet ved lineær regresjonsanalyse og oppsummert i tabell DEP-13 viste at utforminger som inneholdt Tween 20 oksideres raskere enn utforminger inneholdende Poloxamer 188 og at oksidasjonsnivået avhenger av konsentrasjonen av Tween 20.
Virkningen av L-metionin når det gjelder å begrense oksidasjonen ved de forskjellige analyserte temperaturene, vises også ved en sammenligning av utforming nr. 9 (Tween 20 + L-metionin) og nr. 3 (Tween 20) og utforming nr. 10 (Poloxamer 188 + L-metionin) og nr. 6 (Poloxamer 188).
Vinkelkoeffisienten beregnet ved lineær regresjonsanalyse og oppsummert i tabell DEP-15 viser at ingen signifikant økning i innholdt av totale aggregater skjer ved lagring ved de forskjellige temperaturene.
Ingen endring av pH observeres ved lagring.
Osmolaliteten av de analyserte utformingene er tilfredsstillende.
Basert på resultatene fra utformingsutviklingen, ble følgende HSA-frie utforming valgt: 44 eller 88 ug/ml interferon beta-la i natriumacetatbuffer pH 3,5 tilsatt 54,6 mg/ml mannitol,
1 mg/ml Poloxamer 188
0,12 mg/ml L-metionin.
1. 3. 2 Overskuddsmengder
Ingen overskuddsmengder ble benyttet.
1. 3. 3 Fvsikalskkjemiske og biologiske egenskaper
Disse egenskapene er blitt tatt i betraktning i undersøkelsene for utvikling av utformingen, som beskrevet ovenfor.
1. 4 Utvikling av fremstillingsprosess
1. 4. 1 Utvikling av fremstillingsprosessen
Dagens fremstillingsprosess ble tilpasset til fremstilling av porsjoner i laboratorieskala av den nye utformingen: Medikamentforbindelsen ble direkte sammenblandet med bestanddelene; hvoretter en dobbelt filtrering ble utført for å etterligne prosessen i industriell skals som omfatter en aseptisk filtrering fulgt av en ny filtrering før fylling av sprøytene. Sprøytene ble så manuelt fylt med den endelige sterile løsningen.
Begge filtreringstrinnene og fyllingen av sprøytene ble utført under laminær luftstrøm.
En beskrivelse av hvert av trinnene i prosessen gis i det etterfølgende.
1. 4. 2 Innledende beregninger
Mengden av medikamentforbindelse interferon beta-la D(mg) nødvendig for erholdelse av en 44 ug/ml løsning:
D(mg) = 44 ng/ml x 90 ml = 3960 ng = 3,96 mg
Volum av medikamentforbindelse interferon beta-la B(ml) som tilsvarer mengden D(mg):
B(mg) = 3,96 mg; massetiter (mg/ml)
Volum av eksipientløsning V(ml) nødvendig for erholdelse av 90 ml av løsning med 44ug/ml:
V(ml) = 90 ml - B(ml)<*>;<*>(d = 1 g/ml)
1. 4. 3 Fremstilling av 1 M natriumhydroksidløsning
En løsning av 1 M natriumhydroksid ble fremstilt i WFI.
1. 4. 4 Fremstilling av 0. 01 M natriumacetatbuffer pH 3. 5
Den korrekte mengde iseddik ble tilsatt til WFI og pH ble justert til 3,5 ± 0,2 ved anvendelse av 1 M NaOH eller 50% fortynnet eddiksyre. Løsningen ble fortynnet til det endelige volumet med WFI.
1. 4. 5 Fremstilling av eksipientløsningen
De beregnede mengder av eksipientene (mannitol, Tween 20 eller Poloxamer 188, L-metionin) ble innveid og løst i den nødvendige mengde av 0,01 M natriumacetatbuffer pH 3,5; pH kontrolleres så og justeres, om nødvendig, til 3,5 ± 0,2 med 1 M NaOH eller 50% fortynnet eddiksyre; løsningen fortynnes så til den endelige vekt med 0,01 M natriumacetatbuffer.
1. 4. 6 Innblanding av medikamentforbindelsesløsningen
Den nødvendige mengde B(g) av medikamentforbindelse interferon beta-la tilsettes til den nødvendige mengden eksipientløsning V(g) og omrøres forsiktig til homogenitet.
1. 4. 7 Første filtrering av medikamentforbindelsesløsningen
Den ferdigblandede løsningen filtreres her gjennom en 0,2 nm nylonmembran (Ultipor N660,2 nm, diameter 2,5 cm, Pall) montert i en holder av rustfritt stål under nitrogentrykk (maksimalt 1 bar) og oppsamles i et glassbeger.
1. 4. 8 Andre filtrering av medikamentforbindelsesløsningen
Løsningen fra den foregående filtreringen filtreres igjen gjennom en ny 0,2 u,m nylonmembran under de samme betingelsene.
1. 4. 9 Fylling av sprøyter
1 ml glassprøyter ble aseptisk fylt med 0,5 ml av den endelige løsningen.
1. 4. 10 Temperatur under prosessen
Under hele prosessen holdes temperaturen så nær som mulig til kjøleromsbetingelser ved anvendelse av avkjølt W.F.I. og ved å lagre eksipientløsningen og løsningene med aktiv forbindelse ved 2-8°C.
Eksempel 2 - Flytende HSA- fri flerdoseutforming av interferon beta- la i patroner som er egnet for en autoinjektor
Behovet for å utvikle et flerdoseprodukt i patroner oppsto under utviklingen av en ny HSA-fri utforming som var rettet mot fjerning av HSA fra dagens markedsførte produkt i sprøyter. Flerdoseutformingen ville gjøre det enklere for pasienten ved at den ville tillate pasienten å administrere medikamentet selv ved hjelp av en autoinjektor.
De vanligst anvendte bakteriostatiske midlene (0,3% m-kresol, 0,5% fenol og 0,9% benzylalkohol) ble i utgangspunktet undersøkt i kombinasjon med den aktive forbindelsen og sammenlignet med enkeltdoseutformingen i sprøyter som ble valgt når det gjaldt utviklingen av enkeltdoseutformingen (44 eller 88 ug/ml interferon beta-la, 54,6 mg/ml manniti91, 1 mg/ml Poloxamer 188, 0,12 mg/ml L-metionin i 10 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5); og følgende ble observert: • innføringen av hvert av de bakteriostatiske midlene i de konsentrasjoner som vanligvis anvendes for å forhindre mikrobiell kontaminering, ga en økt andel av oksiderte former og fremmet en dramatisk økning av aggregeringen; • 0,3% m-kresol og kombinasjonen av 0,5% fenol og 0,1% Poloxamer 188 ga en dramatisk økning av aggregeringen.
Basert på informasjonen som ble erholdt under forutformingen, fokuserte utviklingen av utformingen i utgangspunktet på benzylalkohol og fenol (uten Poloxamer 188), så vel som på ytterligere bakteriostatiske midler (klorbutanol, fenyletanol); EDTA ble også undersøkt i kombinasjon med benzylalkohol: Oksidasjon og aggregering av det aktive medikamentet var de viktigste observerte degraderingsveien; og en reduksjon av mengden benzylalkohol i utformingen ble vist å øke produktets lagringstid.
Ingen av de andre konserveringsmidlene som ble undersøkt i løpet av denne fasen førte til en signifikant forbedring av produktets stabilitet.
Mot slutten av utviklingen av utformingen, ble følgende kandidater for flerdoseutforminger påvist: • Utforming B - 264 u,g interferon beta-la, 163,8 mg mannitol, 3 mg Poloxamer 188, 0,36 mg L-metionin, 6 mg benzylalkohol i 3 ml 10 mM natriumacetatbuffer pH 3,5. • Utforming A - 264 u,g interferon beta-la, 163,8 mg mannitol, 3 mg Poloxamer 188, 0,36 mg L-metionin i 2,7 ml 11 mM natriumacetatbuffer pH 3,5, som skulle blandes med 0,3 ml 3% benzylalkohol i WFI for erholdelse av den endelige flerdoseutformingen.
Tre porsjoner i laboratorieskala ble fremstilt for hver av utformingskandidatene og analysert ved stabilitetsindikerende fremgangsmåter opptil 6 måneder: Ingen signifikant degradering forekom for noen av kandidatutformingene ved lagring ved 2-8°C; den dominerende degraderingen akselererende betingelser (25°C) er oksidasjon.
Ved undersøkelsens avslutning ble to kandidater til flerdoseutforminger med tilsvarende stabilitetsprofil identifisert: • Utforming B er en flerdoseutforming som er klar til bruk og som inneholder 0,2% benzylalkohol; • Utforming A er en flerdoseutforming som inneholder 0,3% benzylalkohol, erholdt etter sammenblanding av innholdet i 2 patroner (en som inneholder det aktive prinsipp og eksipientene og en som inneholder den nødvendige mengde benzylalkohol for å nå den endelige konsentrasjonen).
2. 1 Undersøkelsens formål
Formålet med denne undersøkelse var å utvikle en HSA-fri flerdoseutforming av interferon beta-la inneholdende 264 u,g i 3 ml patroner for administrering med en autoinjektor.
2. 2 Eksperimentell del
2. 2. 1 Materialer
Interferon-beta-la (Serono S.A.)
Mannitol DAB, Ph Eur, BP, USP, FCC, E421 (Merck)
Iseddik 100% GR (Merck)
Natriumhydroksidkuler GR (Merck)
Poloxamer 188 (Lutrol F 68 DAC, USP/NF, BASF)
L-metionin for biokjemi (Merck)
m-kresol for syntese (Merck)
Fenol for syntese (Merck)
Benzylalkohol Ph Eur, BP, NF (Merck)
Klorbutanol (Aldrich)
Fenyletanol (Sigma)
Natriummetylparaben BP, USP/NF (Formenti)
Natriumpropylparaben BP, USP/NF (Formenti)
EDTA dinatriumsalt (Fluka)
1,2-propandiol ekstra ren DAB, Ph Eur, BP, USP (Merck)
Acetonitril (Merck)
Trifluoreddiksyre (Baker)
Heptafluorsmørsyre (Pierce)
2. 2. 2 Utstyr
HPLC-systemer (Waters)
Millenium 32 programvare (Waters)
Osmometer (Osmomat 030-D, Gonotec)
pH-meter (model 654, Metrohm)
Kalibrerte pipetter (Gilson)
Ultipor N66 0,2 nm nylonmembraner, FTKNF, diameter 4,7 cm (Pall) Ultipor N66 0,2 nm nylonmembraner, NR14225, diameter 4,7 cm (Pall) Holdere av rustfritt stål, diameter 4,7 cm og diameter 10 cm (Sartorius)
Beholder av rustfritt stål (Sartorius)
C4-kolonne 5 nm (0,46 x 25 cm) (Baker)
C4-kolonne, Supelcosil LC-304 5um (0,46 x 25 mm) (Supelco)
TSK-kolonne, G2000SWXL (0,46 x 25 cm) (TosoHaas)
2. 2 Forutformingsundersøkelse
De vanligst benyttede bakteriostatiske midlene (0,3% m-kresol, 0,5% fenol og 0,9% benzylalkohol) ble i utgangspunktet undersøkt i kombinasjon med den aktive forbindelsen og forskjellige eksipientblandinger i den endelige beholderen (3 ml patroner): Acetatbuffer, acetatbuffer/mannitol, acetatbuffer/mannitol/L-Met/Poloxamer 188. Den aktive forbindelsens kompatibilitet i de forskjellige miljøene ble undersøkt når det gjaldt oksidasjon (ved RP-HPLC) og aggregering (ved SE-HPLC) etter lagring ved 40°C. En oppsummering av utformingene som ble undersøkt i de forskjellige trinnene av denne innledende fasen gis i tabell 1.
Virkningen av innbefattelse av hvert av de bakteriostatiske midlene ble sammenlignet med enkeltdoseutformingen (referanse) som ble utvalgt i forbindelse med utvikling av en enkeltdose i sprøyte (44 eller 88 u,g/ml interferon beta-1, 54,6 mg/ml mannitol, 1 mg/ml Poloxamer 188, 0,12 mg/ml L-metionin i 10 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5).
2. 4 Utformingsutvikling
Basert på informasjonen erholdt under forutformingen, fokuserte utviklingen av utformingen i utgangspunktet på benzylalkohol og fenol; ytterligere konserveringsmidler (klorbutanol, fenyletanol) og EDTA kombinert med benzylalkohol ble også undersøkt. En sammenlignende utforming (MS-3) som tilsvarte den nye HSA-frie enkeltdoseutformingen av interferon beta-la ble også fremstilt i patroner og anvendt som referanse.
Sammensetningen (i mg/ml) av utformingene fremstilt i denne fasen er gitt i
tabellene 2 til 5:
Ved avsluttet utvikling av utformingen, ble følgende kandidater til flerdoseutforminger identifisert: • Utforming B - 264 u,g interferon beta-la i 3 ml acetatbuffer ved pH 3,5 tilsatt 54,6 mg/ml mannitol, 1 mg/ml Poloxamer 188, 0,12 mg/ml L-metionin og 2 mg/ml benzylalkohol (0,2% benzylalkohol)
Utforming A - 264 u,g interferon beta-la i 2,7 ml acetatbuffer ved pH 3,5 tilsatt 54,6 mg/ml mannitol, 1 mg/ml Poloxamer 188 og 0,12 mg/ml L-metionin for sammenblanding med 0,3 ml 3% benzylalkohol i WFI for erholdelse av den endelige flerdoseutformingen (0,3% benzylalkohol).
2. 5 Analyse av konserveringsmiddelets effektivitet
Flerdoseutforminger som inneholdt forskjellige konsentrasjoner av benzylalkohol (0,2% til 0,9%) ble analysert for konserverende virkning ifølge EP og USP farmakopoeia.
Innledende analyser ble utført ved å velge som indikatorer Staphylococcus aureus, Aspergillus niger og Candida albicans: Materialet som viste at utformingens sure
pH i seg selv hadde en bakteriostatisk virkning på bakterier (Staphylococcus aureus) og det faktum at noen stammer av Candida albicans rapporteres å overleve selv ved lave pH-verdier (pH rundt 2), førte til valg av Candida albicans som den avgjørende indikator for analysen. Godkjenningskriteriene for analyse av konserverende virkning beskrevet i både EP og USP farmakopoeia ble anvendt.
2. 6 Kandidatutforminger
2. 6. 1 Utforming A
Tre porsjoner i laboratorieskala på tilnærmet 140 patroner/porsjon ble fremstilt, sammensetningen er gitt i tabell 6.
Den aktive bestanddelen ble blandet med eksipientløsningen og så filtrert gjennom en 0,22 nm nylonmembran, patroner ble fylt med 2,7 ml sluttløsning. Prøver ble uttatt før og etter filtrering og etter oppfylling for å måle tap av det aktive prinsipp under prosessen.
Prøvene ble lagret og analysert for stabilitet ved 2-8°C (6 måneder), 25 ± 2°C (3 måneder) og 40 ± 2°C (1 måned).
Seks porsjoner i laboratorieskala av 3% benzylalkohol i WFI ble fremstilt for sammenblanding med patronene som inneholdt den aktive bestanddelen, sammensetningen av porsjonene er gitt i tabell 7:
Den nødvendige mengde benzylalkohol ble tilsatt til WFI, hvoretter løsningen ble filtrert gjennom en 0,22 nm Durapore-membran, patroner ble så fylt med 0,5 ml og endelig sterilisert ved autoklavering.
Prøvene ble lagret ved 25 ± 2°C og analysert for benzylalkoholinnhold og pH i opptil 1 måned.
2. 6. 2 Utforming B
Tre porsjoner i laboratorieskala omfattende tilnærmet 500 patroner/porsjon ble fremstilt, sammensetningen er gitt i tabell 8:
Den aktive bestanddelen ble blandet med eksipientløsningen og så filtrert gjennom en 0,22 nm nylonmembran, patroner ble fylt med 3 ml ferdig løsning. Prøver ble uttatt før og etter filtrering og etter oppfyllingen for å måle tap av aktivt prinsipp under prosessen.
Prøvene ble lagret og analysert for stabilitet ved 2-8°C (6 måneder), 25 ± 2°C (6 måneder) og 40 ± 2°C (3 uker).
2. 6. 3 Analyse av den konserverende virkning
De to kandidatutformingene ble analysert for konserverende virkning ifølge EP og USP farmakopeia.
2. 7 Analyser og fremgangsmåter
Analysene og fremgangsmåtene som beskrives nedenfor ble benyttet for å måle stabiliteten av utformingene i laboratorieskala:
pH (potensiometrisk måling)
Proteinkvantifiseringsanalyse (RP-HPLC)
Proteinkvantifiseringen utføres på en C4, Wide-Pore butyl 5 u,m kolonne (Baker); bølgelengden justert til 214 nm og elueringen utføres ved 1 ml/minutt ved anvendelse av følgende mobile fase og gradient:
A = vann/ 0, 1% trifluoreddiksyre - B = acetonitril/ 0, 1% trifluoreddiksyre - C = acetonitril
Prøvene analyseres ved å injisere 100 ni av en prøve som den er (44 ng/ml prøver) eller etter fortynning (1:1) i en tilsvarende løsning uten aktiv bestanddel for prøver med 88 u,g/ml.
Kvantifiseringen av prøvene utføres ved anvendelse av en standardkurve i området 0,0125 mg/ml-0,2 mg/ml, fremstilt med et standard referansemateriale.
Oksiderte former (RP-HPLC)
Kvantifiseringen av de oksiderte formene utføres på en C4, Supelcosil LC-304-kolonne (Supelco) termostatert ved 40°C; bølgelengden justeres til 208 nm og elueringen utføres ved 1 ml/minutt ved anvendelse av følgende mobile fase og gradient:
A = 60% vann/40% acetonitril/0,14% heptafluorsmørsyre - B = 20% vann/80% acetonitril/0,14% heptafluorsmørsyre - C = 20% vann/80% acetonitril/0,1% trifluoreddiksyre
Prøvene analyseres som de er ved å injisere 200 ni (88 u,g/ml prøver) eller 400 ni (44 \ ig/ ml prøver).
Totale aggregater (SE-HPLC)
Bestemmelse av innholdet av totale aggregater utføres på en TSK G2000SWXL-kolonne (TosoHaas); elueringen utføres på isokratisk måte ved 0,5 ml/minutt ved anvendelse av acetonitril:vann (30:70) + 0,2% trifluoreddiksyre; bølgelengden justeres til 214 nm. Analysetiden er 20 minutter.
Prøvene analyseres som de er ved å injisere 100 ni (88 \ ig/ ml prøver) eller 200 ni (44 \ ig/ ml prøver).
Biologisk aktivitet (in vitro bioanalyse)
Den biologiske aktiviteten måles i en antiviral analyse basert på IFN-P-indusert beskyttelse av celler (WISH-celler humant aminovev) mot den cytopatiske virkningen av et virus (vesikulært stomatittvirus).
Osmolalitet (kryoskopisk måling)
Osmolalitetsbestemmelsen utføres ved en kryoskopisk måling basert på frysepunktsdepresjonen som observeres for den analyserte løsningen.
Benzylalkoholanalyse (GC)
GC-fremgangsmåten for påvisning av benzylalkohol benytter enpunktskalibreringstilnærmingen hvor benzylalkohol levert av Merck anvendes som referanse. I tillegg anvendes en intern standard (fenyletylalkohol) for normalisering av topparealene i de to analyseprøvene, kontrollprøveløsningen og standardløsningen. Fremgangsmåten utføres på en 1,8 m x 2 mm indre diameter stålkolonne med 10% Carbowax 20M på supelcoport 80/100 mesh. Detektoren er en FID (flammeioniseringsdetektor).
Resultatene er uttrykt som mg benzylalkohol pr ml.
2. 7. 1 Resultater
2. 7. 1. 1 Forutforming
Nivået av oksiderte former og totale aggregater påvist etter stressbetingelser (40°C) er vist i tabellene 9 og 19:
For begge de to bakteriostatiske midlene førte innbefattelse av dem i de konsentrasjoner som vanligvis anvendes for å forhindre mikrobiell kontaminering til en økt andel av oksiderte former og en dramatisk økning av aggregeringen, sammenlignet med enkeltdoseutformingen (referanse).
Kombinasjonen av 0,5% fenol og 0,1% Poloxamer 188 hadde negativ virkning på produktets stabilitet, siden tilnærmet 40% aggregering skjedde (utformingene P-Q-R). 0,3% m-kresol ble ikke undersøkt videre, grunnet negativ innflytelse på produktets stabilitet grunnet økt aggregering (utforming I).
2. 7. 1. 2 Utvikling av utforming
Alle stabilitetsresultater (rådata) er oppsamlet i seksjonen tabeller, lineær regresjonsanalyse ble anvendt for evaluering av resultatene.
2. 7. 1. 2. 1 Utforminger som inneholder benzylalkohol
En høy konsentrasjon av benzylalkohol (0,9%) hadde negativ innflytelse på produktets stabilitet, både når det gjaldt innhold av oksiderte former og aggregater, som vist i figurene 1 til 6: • under stressbetingelser (40°C) er økningen i oksidasjon høyere for utformingene som inneholder 0,9% benzylalkohol (MS-1 og MS-2), som vist i figur 1; • etter akselererende betingelser (25°C) er økningen i oksidasjon høyere for alle utforminger som inneholder benzylalkohol sammenlignet med utformingen uten benzylalkohol (MS-3, referanse), som vist i figur 2; • etter langtids lagring (2-8°C) ble høyere oksidasjonsgrad observert for utformingene som inneholdt 0,9% benzylalkohol (MS-1 og MS-2), mens sammenlignbare degraderingsgrader ble påvist for utforminger som inneholdt benzylalkohol under 0,45% (figur 3).
Når det gjelder nivået av aggregater, ble følgende observert:
• etter stressbetingelser (40°C) ble økt aggregering observert for utformingene som inneholdt 0,9% benzylalkohol (MS-1 og MS-2), som vist i figur 4; etter akselererende betingelser og langtidsbetingelser (25°C og 2-8°C) ble ingen økning i aggregeringen observert for noen av utformingene, som vist i figurene 5 og 6; • redusert bioaktivitet ble observert for utforminger med 0,9% benzylalkohol (MS-1 og MS-2) ved 40°C; dette observeres ikke for de samme prøvene lagret ved 25°C og 2-8°C; • ingen reduksjon av titeret ble observert etter lagring ved noen av temperaturene;
• ingen pH-endring opptrådte etter lagring ved noen av temperaturene.
2. 7. 1. 2. 2 Utforminger som inneholder alternative bakteriostatiske midler ( fenol, klorbutanol, fenvletanoQ
Fenol (MS-4 og MS-5) hadde negativ virkning på produktets stabilitet når det gjaldt oksiderte former, mens klorbutanol (MS-35) og fenyletanol (MS-34 og MS-34b) viste en stabilitet som tilsvarte stabiliteten av referanseløsningen (MS-3, uten bakteriostatisk middel), som vist i figur nr. 7 og 8.
Når det gjaldt nivået av totale aggregater, ble en dramatisk økning av aggregeringen observert etter stressbetingelser (40°C) for utformingene som inneholdt fenol (MS-4 og MS-5) som vist i figur 9; ingen økning av aggregeringen opptrådte ved lavere temperaturer (25°C og 2-8°C).
2. 7. 1. 2. 3 Utforminger som inneholder EDTA
Tilsetning av EDTA til utforminger som inneholdt 0,l%-0,2% benzylalkohol (MS-32, MS-33, MS-36) reduserte ikke oksidasjonsnivået (figur 10); økt nivå av aggregater ble observert etter akselererende betingelser for utforminger inneholdende 0,1% EDTA og 0,2% benzylalkohol (MS-32, MS-33) (figur 11); tilsvarende degradering ble observert ved 2-8°C.
2. 7. 1. 2. 4 Resultater vedrørende konserverende virkning
Resultatene fra analysene viste at kriteriene ifølge USP og EP farmakopoeia er tilfredsstilt, i det minste for konsentrasjoner av benzylalkohol som er lik eller høyere enn 0,3% (for Candida albicans).
2. 8 Kandidatutforminger
Evalueringen av alle resultater ble utført på følgende måte: En lineær regresjonsanalyse ble utført for hver porsjon, fulgt av en samvariansanalyse (P-verdi > 0,25) for vurdering av variabiliteten fra porsjon til porsjon; ingen formell statistisk analyse ble utført dersom ingen variabilitet ble observert etter lagring.
2. 8. 1 Kandidat A
2. 8. 1. 1 Gjenvinning under fremstilling
Gjenvinningen av interferon beta-la i prøver uttatt under prosessen (før og etter filtrering, sluttproduktet), oppsamlet under fremstilling av kandidat A, er oppsummert i tabell 11: Intet signifikant tap av aktiv bestanddel ble observert.
2. 8. 1. 2 Stabilitet av aktiv forbindelse
En felles vinkelkoeffisient og krysningspunkt med aksen ble beregnet for nivået av oksiderte former i de tre porsjonene lagret ved forskjellige temperaturer, resultatene fra den statistiske analysen er vist i tabell 12:
Ingen signifikant variabilitet ble observert for nivået av totale aggregater i analysen, følgelig ble ingen formell statistisk analyse utført. Det forskjellige nivået av aggregater i de tre porsjonene skyldes forskjellig nivå i porsjonene som ble anvendt for fremstillingen.
2. 8. 2 Kandidat B
2. 8. 2. 1 Gjenvinning under fremstilling
Gjenvinning av interferon beta-la i prøver uttatt under prosessen (før og etter filtrering, sluttprodukt), oppsamlet under fremstilling av kandidat B, er oppsummert i tabell 15: Intet signifikant tap av aktiv bestanddel ble observert.
2. 8. 2. 2 Stabilitet av aktiv forbindelse
Den statistiske analysen som ble utført på nivået av oksiderte former viste følgende: • en felles vinkelkoeffisient og et felles krysningspunkt med aksen ble beregnet for de tre porsjonene ved 40°C; den samlede vinkelkoeffisient er lik 1,42%/uke og det samlede krysningspunkt er lik 2,72%; • ingen felles vinkelkoeffisient kunne beregnes for de 3 porsjonene ved 25°C (P-verdi = 0,095); følgelig ble verste falls tilnærming (porsjon MS-03) benyttet: En økning på 1,17% av de oksiderte formene ble observert etter 1 måneds lagring (0,27%/uke); • ingen felles vinkelkoeffisient kunne beregnes for de 3 porsjonene ved 2-8°C (P-verdi = 0,016); følgelig ble verste falls tilnærming (porsjon MS-03) benyttet: En økning på 0,2% av de oksiderte formene ble observert etter 1 måneds lagring (0,047%/uke).
Ingen signifikant variabilitet ble observert for stabilitetsverdiene vedrørende nivå av totale aggregater i analysen, følgelig ble ingen formell statistisk analyse utført. Ingen reduksjon av bioaktiviteten ble observert etter lagring, selv etter stressbetingelser (40°C).
2. 9 Konklusjoner
Ved undersøkelsens avslutning ble det påvist to kandidater til flerdoseutforminger med tilsvarende stabilitetsprofiler: • kandidatutforming B er en flerdoseutforming som er klar til bruk og som inneholder 0,2% benzylalkohol; • kandidatutforming A er en flerdoseutforming som inneholder 0,3% benzylalkohol, erholdt etter sammenblanding av innholdet i 2 patroner (en som inneholder det aktive prinsipp og eksipientene og en som inneholder den nødvendige mengde benzylalkohol for å nå den endelige konsentrasjonen). • Disse kandidatløsningene ble også analysert ved høyere pH (4,5 ± 0,2) og ingen signifikant endring av stabilitetsprofilen ble observert. Søkeren har nå funnet at denne noe høyere pH i IFN-utformingene øker den lokale tolererbarhet av subkutane injeksjoner. Følgelig kan de 2 kandidatløsningene ovenfor ved en pH på 4,5 eller 4,7 by på ytterligere fordeler når det gjelder pasientens evne til å tolerere behandlingen.
Eksempel 3: Fremstillingsfremgangsmåte for flerdoseutformingskandidat A
Først ble en 1 N natriumhydroksidløsning fremstilt ved å løse 20 g natriumhydroksidkuler i 500 g W.F.I.
Deretter ble 0,011 M natriumacetatbuffer med pH 3,5 ± 0,2 fremstilt ved å tilsette 1,32 g iseddik til tilnærmet 1800 g W.F.I. pH i løsningen ble justert til 3,5 ± 0,2 med 1 N NaOH. Løsningen bringe så til en sluttvekt på 2000 g. pH justeres igjen til 3,5 ± 0,2 med 1 N NaOH eller 50% fortynnet eddiksyre. Løsningen justeres så til en sluttvekt på 2000 g.
Den endelige løsningen ble fremstilt som følger.
Den beregnede mengde eksipienter ble veid og løst i den nødvendige mengde 11 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5 ± 0,2, og løsingens pH ble kontrollert og justert (om nødvendig); deretter tilsettes den nødvendige mengde r-h interferon-beta-la (rekombinant fremstilt fra CHO-celler); sluttvekten nås ved tilsetning av 11 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5 ± 0,2. 1 ml av denne sluttløsningen tas ut for analyse ved kvantitativ RP-HPLC (prøve BF = før første filtrering).
Den endelige løsningen ble så filtrert gjennom en 0,2 nm membran montert i en holder av rustfritt stål og løsningen ble oppsamlet i et glassbeger. 1 ml av denne sluttløsningen ble uttatt for analyse ved kvantitativ RP-HPLC. Løsningen etter filtrering som beskrevet tidligere, ble filtrert gjennom en andre 0,2 Hm membran montert i en holder av rustfritt stål.
1 ml av denne sluttløsningen ble uttatt for analyse ved kvantitativ RP-HPLC.
3 ml glasspatrober ble fylt med 2,7 ml av den endelige løsningen og korket.
Denne løsningen er klart til å sammenblandes med en patron som inneholder 3% benzylalkoholløsning i WFI.
Eksempel 4 Fremstillingsfremgangsmåte for flerdoseutformingskandidat B
Først ble en 1 N natriumhydroksidløsning fremstilt ved å løse 20 g natriumhydroksidkuler i 500 g W.F.I.
Deretter ble 0,011 M natriumacetatbuffer ved pH 3,5 ± 0,2 fremstilt ved å tilsette 1,32 g iseddik til tilnærmet 1800 g W.F.I. Løsningens pH ble justert til pH 3,5 ± 0,2 med 1 N NaOH. Løsningen ble så justert til en sluttvekt på 2000 g. pH ble igjen justert til 3,5 + 0,2 med 1 N NaOH eller 50% fortynnet eddiksyre. Løsningen ble så justert til en sluttvekt på 2000 g.
Den endelige løsningen ble fremstilt som følger.
Den beregnede mengde eksipienter ble innveid og løst i den nødvendige mengde 10 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5 ± 0,2, og løsningens pH ble kontrollert og justert (om nødvendig); så ble den nødvendige mengde r-h interferon-beta-la (rekombinant fremstilt fra CHO-celler) tilsatt; sluttvekten ble nådd ved tilsetning av 10 mM natriumacetatbuffer ved pH 3,5 ± 0,2. 1 ml av denne sluttløsningen tas så ut for analyse ved kvantitativ RP-HPLC.
Sluttløsningen filtreres så gjennom en 0,2 nm membran montert i en holder av rustfritt stål og løsningen oppsamles i et glassbeger. 1 ml av denne løsningen tas ut for analyse ved kvantitativ RP-HPLC. Sluttløsningen, filtrert som beskrevet i punktet ovenfor, filtreres gjennom en andre 0,2 nm membran montert i en holder av rustfritt stål.
1 ml av denne løsningen tas ut for analyse ved kvantitativ RP-HPLC.
3 ml glasspatroner fylles med 3 ml av den endelige løsningen og korkes.
REFERANSER
1. Study Group. The Lancet 1998; 352, 1498-1504.
2. Clegg og Bryant, Exp. Opin. Pharmacother 2001; 2(4): 623-639.
3. Derynk R. et al., Nature 1980; 285, 542-547.
4. Familletti, P.C., Rubinstein, S. og Pestka, S. 1981 "A Convenient and Rapid Cytopathic Effect Inhibition Assay for Interferon," i Methods in Enzymology, bind 78 (S. Pestka, red.), Academic Press, New York, 387-394. 5. Hultgren C, Milich DR, Weiland O, Sallberg M. (1998). The antiviral compound ribavirin modulates the T helper (Th) 1/Th2 subset balance in hepatitis B and C virus-specific immune responses. J Gen Virol 1998; 79: 2381-2391. 6. McCormick JB, King IJ, Webb PA, Scribner CL, Craven RB, Johnson KM, Elliot LH, Belmont-Williams R. Lassa fever. Effective Therapy with ribavirin. N Engl J Med. 1986 Jan 2; 314(1): 20-6.
7. Mark D.F. et al., Proe. Nati. Acad. Sei. U.S.A., 81 (18) 5662-5666 (1984).
8. Pestka, S. (1986) "Interferon Standards and General Abbreviations," i Methods in Enzymology (S. Pestka, red.), Academic Press, New York 119, 14-23. 9. Rubinstein, S., Familletti, P.C., og Pestka, S. Convenient Assay for Interferons. J. Virol 1981; 37, 755-758.
10. Shepard H.M. et al., Nature 1981; 294, 563-565.
Claims (29)
1. Stabilisert HSA-fri flytende farmasøytisk sammensetning omfattende interferon-beta (IFN-beta),
karakterisert vedat formuleringen er en løsning som omfatter en buffer, et Poloxamer 188-overflateaktivt middel, et isotonisitetsmiddel og en antioksidant som er metionin.
2. Sammensetning ifølge krav 1,
karakterisert vedat nevnte IFN-beta er humant rekombinant IFN-beta.
3. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat bufferen foreligger i en mengde som er tilstrekkelig til å opprettholde preparatets pH innenfor pluss eller minus 0,5 enheter fra en angitt pH, hvor den angitte pH er fra 3,0 til 5,0.
4. Sammensetning ifølge foregående krav,
karakterisert vedat nevnte pH er 3,5 ± 0,2.
5. Sammensetning ifølge foregående krav,
karakterisert vedat nevnte pH er 4,5 ± 0,2.
6. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat bufferen foreligger i en konsentrasjon på fra 5 mM til 500 mM.
7. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat bufferen foreligger i en konsentrasjon på 10 mM.
8. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat bufferen er acetatbuffer.
9. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat isotonisitetsmiddelet er mannitol.
10. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat isotonisitetsmiddelet foreligger i en konsentrasjon på fra 0,5 mg/ml til 500 mg/ml.
11. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat isotonisitetsmiddelet foreligger i en konsentrasjon på 55 mg/ml.
12. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat nevnte Poloxamer 188-overflateaktive middelet foreligger i en konsentrasjon på fra 0,01 mg/ml til 10 mg/ml.
13. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat det overflateaktive middelet foreligger i en konsentrasjon på 1 mg/ml.
14. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat metioninantioksidanten foreligger i en konsentrasjon på fra 0,01 til 5,0 mg/ml.
15. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat metioninantioksidanten foreligger i en konsentrasjon på 0.1 mg/ml.
16. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat interferon-beta foreligger i en konsentrasjon på fra 10Hg/ml til 800 ng/ml.
17. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat interferon-beta foreligger i en konsentrasjon på fra 22, 44, 88 eller 264 ng/ml.
18. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat sammensetningen er en vandig løsning.
19. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat det videre omfatter et bakteriostatisk middel.
20. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat det bakteriostatiske middelet er benzylalkohol.
21. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat det bakteriostatiske middelet foreligger i en konsentrasjon på fra 0,1% til 2,0%.
22. Sammensetning ifølge ethvert av de foregående krav,
karakterisert vedat det bakteriostatiske middelet foreligger i en konsentrasjon på 0,2 eller 0,3%.
23. Fremgangsmåte for fremstilling av en stabilisert HSA-fri flytende sammensetning ifølge kravene 1-22,
karakterisert vedat den omfatter tilsetning av en beregnet mengde Poloxamer 188-overflateaktivt middel, metioninantioksidant og isotonisitetsmiddel til den bufrede løsningen og så tilsetning av interferon-beta (IFN-beta).
24. Beholder som er hermetisk forseglet under betingelser som er sterile og egnet for lagring før bruk,
karakterisert vedat den omfatter den flytende farmasøytiske sammensetningen ifølge ethvert av kravene 1 -22.
25. Beholder ifølge krav 24,
karakterisert vedat den er en ferdigfylt sprøyte for enkeltdoseadministrering.
26. Beholder ifølge krav 24,
karakterisert vedat den er en flaske.
27. Beholder ifølge krav 24,
karakterisert vedat den er en patron for en autoinjektor.
28. Beholder ifølge krav 25 eller 26,
karakterisert vedat den er for enkeltdoseadministrering eller flerdoseadministrering.
29. Sett for flerdoseadministrering av en farmasøytisk sammensetning ifølge ethvert av kravene 18 til 21,
karakterisert vedat det omfatter en første beholder fylt med en farmasøytisk sammensetning ifølge ethvert av kravene 1 til 17 og en andre patron fylt med en løsning av det bakteriostatiske middelet.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP03101210 | 2003-05-01 | ||
US53016903P | 2003-12-17 | 2003-12-17 | |
PCT/EP2004/004806 WO2004096263A2 (en) | 2003-05-01 | 2004-04-29 | Human serum albumin-free stabilized interferon liquid formulations |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO20055666L NO20055666L (no) | 2005-11-30 |
NO335674B1 true NO335674B1 (no) | 2015-01-19 |
Family
ID=36908159
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO20055666A NO335674B1 (no) | 2003-05-01 | 2005-11-30 | HSA-frie, stabiliserte flytende utforminger av interferon-beta |
Country Status (29)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8309069B2 (no) |
EP (1) | EP1617861B1 (no) |
JP (2) | JP4870550B2 (no) |
KR (1) | KR101116058B1 (no) |
CN (1) | CN1816347B (no) |
AR (1) | AR044147A1 (no) |
AU (2) | AU2004233603B2 (no) |
BR (1) | BRPI0410488B8 (no) |
CA (1) | CA2521560A1 (no) |
DK (1) | DK1617861T3 (no) |
EA (2) | EA009995B1 (no) |
ES (1) | ES2417061T3 (no) |
HK (1) | HK1088847A1 (no) |
HR (1) | HRP20130512T1 (no) |
IL (1) | IL171709A (no) |
ME (1) | ME00404B (no) |
MX (1) | MXPA05011718A (no) |
MY (1) | MY151121A (no) |
NO (1) | NO335674B1 (no) |
NZ (2) | NZ566625A (no) |
PL (1) | PL1617861T3 (no) |
PT (1) | PT1617861E (no) |
RS (1) | RS52869B (no) |
SG (1) | SG159389A1 (no) |
SI (1) | SI1617861T1 (no) |
TW (1) | TWI272948B (no) |
UA (2) | UA80331C2 (no) |
WO (1) | WO2004096263A2 (no) |
ZA (2) | ZA200508124B (no) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2374530T3 (es) * | 2003-12-11 | 2012-02-17 | Ares Trading S.A. | Formulaciones líquidas de interferón estabilizado. |
CA2566364A1 (en) * | 2004-05-17 | 2005-11-24 | Ares Trading S.A. | Hydrogel interferon formulations |
WO2005117949A1 (en) * | 2004-06-01 | 2005-12-15 | Ares Trading S.A. | Stabilized interferon liquid formulations |
ATE543506T1 (de) * | 2004-06-01 | 2012-02-15 | Ares Trading Sa | Methode zur stabilisierung von proteinen |
ES2378686T3 (es) * | 2005-09-14 | 2012-04-17 | Ares Trading S.A. | Método para la determinación de poloxámeros |
US9925151B2 (en) | 2006-05-24 | 2018-03-27 | Merck Serono Sa | Cladribine regimen for treating multiple sclerosis |
WO2008066322A1 (en) * | 2006-11-28 | 2008-06-05 | Daewoong Co., Ltd. | A stable hsa-free and antioxidant-free pharmaceutical composition comprising interferon-beta |
JPWO2008065752A1 (ja) * | 2006-11-30 | 2010-03-04 | 国立大学法人北海道大学 | diRNAを有効成分とする免疫治療用薬剤 |
WO2008119160A1 (en) * | 2007-03-30 | 2008-10-09 | Pharmaderm Laboratories Ltd. | Biphasic lipid-vesicle composition and method for treating cervical dysplasia by intravaginal delivery |
WO2008145323A1 (en) * | 2007-05-31 | 2008-12-04 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Pharmaceutical formulation for interferons |
JP5563475B2 (ja) | 2007-12-20 | 2014-07-30 | メルク セローノ ソシエテ アノニム | Pegインターフェロン−ベータ製剤 |
KR20150074167A (ko) | 2012-10-26 | 2015-07-01 | 루핀 리미티드 | Peg 인터페론 알파-2b의 안정한 약학 조성물 |
US10159646B2 (en) | 2013-08-12 | 2018-12-25 | Altum-Avro Pharma Partnership | Biphasic lipid-vesicle compositions and methods for treating cervical dysplasia by intravaginal delivery |
US8986732B2 (en) | 2013-08-12 | 2015-03-24 | Helix Biopharma Corporation | Biphasic lipid-vesicle compositions and methods for treating cervical dysplasia by intravaginal delivery |
EP3200767A1 (en) * | 2014-09-23 | 2017-08-09 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Stable, benzyl alcohol-free aqueous solution formulations containing alpha-type interferon |
US9937223B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-04-10 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9925233B2 (en) | 2015-01-30 | 2018-03-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744209B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9744239B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-08-29 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9687526B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-06-27 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
US9750785B2 (en) | 2015-01-30 | 2017-09-05 | Par Pharmaceutical, Inc. | Vasopressin formulations for use in treatment of hypotension |
KR101943160B1 (ko) | 2016-10-06 | 2019-01-30 | 에이비온 주식회사 | 인터페론 베타 변이체의 안정화 제제 |
KR20240118230A (ko) * | 2023-01-26 | 2024-08-05 | 에이비온 주식회사 | 인터페론 베타 건조 분말 제제 및 이의 제조방법 |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6936694B1 (en) | 1982-05-06 | 2005-08-30 | Intermune, Inc. | Manufacture and expression of large structural genes |
US4588585A (en) | 1982-10-19 | 1986-05-13 | Cetus Corporation | Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins |
US4737462A (en) | 1982-10-19 | 1988-04-12 | Cetus Corporation | Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β |
US4959314A (en) | 1984-11-09 | 1990-09-25 | Cetus Corporation | Cysteine-depleted muteins of biologically active proteins |
US5116943A (en) | 1985-01-18 | 1992-05-26 | Cetus Corporation | Oxidation-resistant muteins of Il-2 and other protein |
US5017691A (en) | 1986-07-03 | 1991-05-21 | Schering Corporation | Mammalian interleukin-4 |
US4879111A (en) | 1986-04-17 | 1989-11-07 | Cetus Corporation | Treatment of infections with lymphokines |
US4965195A (en) | 1987-10-26 | 1990-10-23 | Immunex Corp. | Interleukin-7 |
US4904584A (en) | 1987-12-23 | 1990-02-27 | Genetics Institute, Inc. | Site-specific homogeneous modification of polypeptides |
IT1272252B (it) | 1994-05-16 | 1997-06-16 | Applied Research Systems | Formulazioni liquide di interferone beta |
JP2758154B2 (ja) * | 1995-04-06 | 1998-05-28 | エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー | インターフェロンを含む液体製剤 |
ZA9610374B (en) * | 1995-12-11 | 1997-06-23 | Elan Med Tech | Cartridge-based drug delivery device |
WO1998028007A1 (en) * | 1996-12-24 | 1998-07-02 | Biogen, Inc. | Stable liquid interferon formulations |
US6013253A (en) | 1997-08-15 | 2000-01-11 | Amgen, Inc. | Treatment of multiple sclerosis using consensus interferon and IL-1 receptor antagonist |
JP4293497B2 (ja) * | 1997-09-23 | 2009-07-08 | レントシュレール ビオテクノロジー ゲー・エム・ベー・ハー | インターフェロン−β液状組成物 |
CA2311681A1 (en) * | 1997-12-08 | 1999-06-17 | Genentech, Inc. | Human interferon-epsilon: a type i interferon |
CZ298597B6 (cs) | 1998-04-28 | 2007-11-21 | Applied Research Systems Ars Holding N. V. | Zpusob postupné vazby polyethylenglykolových skupin na polypeptid |
DE59914392D1 (de) * | 1998-05-11 | 2007-08-09 | Basf Ag | Verfahren zur herstellung von isoxazolin-3-yl-acylbenzolen |
CN1175901C (zh) * | 1999-12-06 | 2004-11-17 | 天津华立达生物工程有限公司 | 一种稳定的干扰素水溶液 |
US6465425B1 (en) * | 2000-02-10 | 2002-10-15 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Microencapsulation and sustained release of biologically active acid-stable or free sulfhydryl-containing proteins |
US6887462B2 (en) | 2001-04-09 | 2005-05-03 | Chiron Corporation | HSA-free formulations of interferon-beta |
AR034749A1 (es) * | 2001-07-09 | 2004-03-17 | Schering Ag | Formulaciones de interferon beta humano |
ES2374530T3 (es) | 2003-12-11 | 2012-02-17 | Ares Trading S.A. | Formulaciones líquidas de interferón estabilizado. |
CA2566364A1 (en) | 2004-05-17 | 2005-11-24 | Ares Trading S.A. | Hydrogel interferon formulations |
ATE543506T1 (de) | 2004-06-01 | 2012-02-15 | Ares Trading Sa | Methode zur stabilisierung von proteinen |
-
2004
- 2004-04-23 TW TW093111368A patent/TWI272948B/zh not_active IP Right Cessation
- 2004-04-29 JP JP2006505383A patent/JP4870550B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-29 EP EP04730264.1A patent/EP1617861B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-29 CN CN2004800188759A patent/CN1816347B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-29 RS YU20050821A patent/RS52869B/sr unknown
- 2004-04-29 ME MEP-2008-604A patent/ME00404B/me unknown
- 2004-04-29 ZA ZA200508124A patent/ZA200508124B/xx unknown
- 2004-04-29 PT PT47302641T patent/PT1617861E/pt unknown
- 2004-04-29 UA UAA200509798A patent/UA80331C2/uk unknown
- 2004-04-29 SG SG200705206-1A patent/SG159389A1/en unknown
- 2004-04-29 NZ NZ566625A patent/NZ566625A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-04-29 DK DK04730264.1T patent/DK1617861T3/da active
- 2004-04-29 CA CA002521560A patent/CA2521560A1/en not_active Withdrawn
- 2004-04-29 BR BRPI0410488A patent/BRPI0410488B8/pt active IP Right Grant
- 2004-04-29 KR KR1020057020444A patent/KR101116058B1/ko active IP Right Grant
- 2004-04-29 SI SI200432066T patent/SI1617861T1/sl unknown
- 2004-04-29 MX MXPA05011718A patent/MXPA05011718A/es active IP Right Grant
- 2004-04-29 NZ NZ542912A patent/NZ542912A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-04-29 AU AU2004233603A patent/AU2004233603B2/en not_active Expired
- 2004-04-29 US US10/554,602 patent/US8309069B2/en active Active
- 2004-04-29 WO PCT/EP2004/004806 patent/WO2004096263A2/en active Application Filing
- 2004-04-29 ES ES04730264T patent/ES2417061T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-29 EA EA200501699A patent/EA009995B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2004-04-29 PL PL04730264T patent/PL1617861T3/pl unknown
- 2004-04-29 UA UAA200704143A patent/UA94032C2/ru unknown
- 2004-04-29 EA EA200800327A patent/EA200800327A1/ru unknown
- 2004-04-29 MY MYPI20041605 patent/MY151121A/en unknown
- 2004-04-30 AR ARP040101486A patent/AR044147A1/es not_active Application Discontinuation
-
2005
- 2005-11-01 IL IL171709A patent/IL171709A/en active IP Right Grant
- 2005-11-30 NO NO20055666A patent/NO335674B1/no unknown
-
2006
- 2006-10-03 HK HK06110914.6A patent/HK1088847A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-10-04 ZA ZA200708484A patent/ZA200708484B/xx unknown
-
2009
- 2009-03-31 AU AU2009201261A patent/AU2009201261A1/en not_active Abandoned
-
2011
- 2011-07-15 JP JP2011156524A patent/JP5346065B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2013
- 2013-06-11 HR HRP20130512TT patent/HRP20130512T1/hr unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO335674B1 (no) | HSA-frie, stabiliserte flytende utforminger av interferon-beta | |
AU2005249233B2 (en) | Stabilized interferon liquid formulations | |
US7858082B2 (en) | Method of stabilizing proteins | |
US20070248674A1 (en) | Hydrogel Interferon Formulations | |
US7846427B2 (en) | Stabilized interferon liquid formulations | |
KR20070030855A (ko) | 단백질을 안정화하는 방법 | |
KR101191536B1 (ko) | 안정화된 인터페론 액상 제제 | |
MXPA06006579A (en) | Stabilized interferon liquid formulations | |
MXPA06013308A (es) | Formulaciones de hidrogel que contienen interferon. |