NO176504B

NO176504B - Fremgangsmåte for fremstilling av en kosmetisk blanding

Info

Publication number: NO176504B
Application number: NO895112A
Authority: NO
Inventors: Hans Schaefer; Francine Watts; Christos Papantoniou; Claude Mahieu
Original assignee: Centre Rech Dermatolog Cir
Priority date: 1988-12-20
Filing date: 1989-12-19
Publication date: 1995-01-09
Also published as: DK647789A; CA2006028A1; JP2946098B2; US5292512A; CA2006028C; LU87410A1; PT92622A; KR900009062A; IE62032B1; EP0375520A1; DK647789D0; FI102142B1; DE68905914T2; NO176504C; NO895112L; AU4709989A; KR0140088B1; ZA899780B; FI896109A0; ATE87822T1

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte ved fremstilling av den art som er angitt i krav l's ingress.

Fremstilling av mikrokapsler hvor en aktive hovedbestanddel er innkapslet og ikke er i kontakt med de ytre omgivelser, er kjent (se f.eks. fransk patent 2.218.086 og EP 316.054). Ved påføring kan imidlertid mikrokapslene knuses for tidlig og frigjøre den aktive komponent umiddelbart.

Det er også kjent å fremstille naturlige eller syntetiske polymerer i form av mikrosfærer ved å fornette disse polymerene i suspensjon. En prosess for fremstilling av poly-e-alanin mikrosfærer er f.eks. beskrevet i fransk patent 2.530.250. Det er også kjent å fremstille mikrosfærer fra fettforbindelser.

Det er kjent at disse mikrosfærene kan fylles med kjemiske produkter, spesielt med aktive produkter (se spesielt det nevnte franske patent og USP 4.690.825).

I foreliggende oppfinnelse betyr aktivt produkt ethvert produkt med en aktivitet utifrå et kosmetisk synspunkt. Det faste produkt som danner mikrosfærene kan faktisk virke som et absorbent-substrat eller som et bindemiddel for mange kjemiske produkter (se EP 211.298). Mikrosfærene fylt med aktive produkter anvendes på en passende bærer hvor det faste substratet som danner mikrosfærene er meget lite eller ikke løselig. Denne bæreren kan være en vandig løsning eller en oljefase.

En kosmetisk blanding inneholdende slike mikrosfærer fylt med aktive produkter i en passende bærer, kan benyttes for påføring til en bestemt del av kroppen, spesielt ved påfør-ing på huden. Topiske applikasjoner har generelt ikke den ønskede effektivitet fordi epidermis (overhuden) danner en

barriere.

I henhold til foreliggende oppfinnelse er det funnet at mikrosfærer av en kosmetisk blanding er valgt fra et bestemt størrelsesområde, hvorved effektiviteten av det aktive produkt de inneholder blir betydelig økt på en uventet måte. Studier utført av søkernes firma har gjort det mulig å fast-slå at denne betydelige forbedringen var forbundet med mikrosfærenes inntrengning i talgaktige folliklene.

Ifølge oppfinnelsen fremstilles derfor en kosmetisk blanding for topisk applisering inneholdende en passende bærer, mikrosfærer av naturlige eller syntetiske polymerer eller fettaktige forbindelser med et smeltepunkt høyere enn 50°C, fylt med minst et aktivt produkt, karakterisert ved at minst 80 vekt-% av den anvendte mikrosfærene har en diameter på mellom 3 og 10 jjm.

Mikrosfærene med en diameter i det definerte område vil faktisk trenge inn i de talgaktige folliklene, men lite inn i selve huden. Mikrosfærene vil derfor selektivt og progres-sivt nå follikel-kanalen, hvor det aktive produktet de bærer vil diffundere inn i follikel-kanalene og omkringliggende vev. På den andre siden vil substratet som danner mikrosfærene bli utstøtt av hudfettet og/eller hårvekst. Enhver uønsket reaksjon av organismen mot den faste forbindelse som danner mikrosfærene blir på denne måten unngått.

Det bør legges merke til at når mikrosfærene har en diameter mindre en 3 pm, vil de trenge inn i follikel-kanalene og også hornlaget, i en høy konsentrasjon. Slik frigjøring av aktive forbindelser i hornlaget, f.eks. i tilfellet med anti-aknemidler, reflekteres ved opptreden av sekundære effekter som er uønsket, ihvertfall når det aktive produkt frigjøres i områder av frisk hud som berøres ved påføringen og som omgir follikel-kanalene, mens det i tilfelle med systemisk påføring, hvor den aktive forbindelsen frigjøres i ikke-vaskulariserte områder hvor hornlaget virker som en barriere. Generelt, i begge tilfellene, vil frigjøringen av aktive forbindelser i hornlaget medføre en reduksjon av blandingens effektivitet. Når mikrosfærene har en diameter som er større enn 10 pm vil de stort sett forbli på hudens overflate uten å trenge inn, noe som resulterer i ineffekti-vitet ved topisk applisering siden det aktive produkt bare frigjøres på hornlaget. I begge tilfeller er målretting av de aktive forbindelsene dårligere enn ved anvendelse av oppfinnelsen.

Med andre ord foreslår oppfinnelsen utvalg av mikrosfærenes størrelse for å forbedre deres selektive inntrengning i de talgaktige folliklene, i tilfelle med akner bringes det aktive produkt til målområdene uten uønskede sekundære effekter på de friske hudområdene som omgir follikel-kanalene, i tilfeller hvor det aktive produkt er en påføring som virker systemisk vil follikel-kanalene utgjøre en meget effektiv vei for generell administrering med hensyn til diffusjon av det aktive produkt inn disse kanalene, da det trenger i et høyt vaskularisert område.

Det er ikke innlysende at mikrosfærer som er i stand til å trenge inn gjennom hår-folliklene måtte ha de dimensjonene som er definert over. Midlere diameter til hårenes talgaktige ringåpninger er faktisk inkludert i et størrelse-område som er ganske forskjellig fra det som er indikert over i tilfellet med mikrosfærene, f.eks. i pannen er denne midlere diameteren mellom 52 pm og 82 pm. Hos mennesker er overflatearealet av disse hårtalg-ringåpningene (piloseba-ceous orifices) i pannen ca. 0.002 mm<2> (W.J. Cunliffe, W.D.H. Perera, P. Thackray, M. Williams, R.A. Forster og S.M. Williams, British Journal of Dermatology, 1976, 95, 153). Ved å anta at formen på follikel-kanalene er omtrent sirkulær, kan den midlere diameteren til hårtalg ringåpningene estimeres, i henhold til denne publikasjonen, til 50.5 pm. Denne diameteren, bestemt igjen av søkernes firma, ved måling av hårtalg-ringåpningene i pannen til seks friske frivillige, er funnet å være mellom 52 pm og 82 pm (se studie beskrevet i forsøk B i foreliggende beskrivelse). Denne betydelige forskjell mellom diameterområdene til hårtalg-ringåpningene og de effektive mikrosfærene fremstilt i oppfinnelsen, gjorde oppfinnelsen spesielt overraskende for spesialisten. Denne overraskende egenskapen er videre bekreftet ved det faktum at i nevnte USP 4.690.825 er stør-relsesantydningene bare rettet mot mikrosfærer med en diameter på mellom 10 og 100 pm.

Mikrosfærer med ønsket størrelse kan velges ut ved screen-ing, spesielt i et fuktig medium, mikrosfærer erholdt ved en prosess som gir mikrosfærer med et større område av størrel-ser. Det er også mulig å erholde mikrosfærer hvor størrelsen er i det ønskede område ved passende utførelse av prosessen for fremstilling av mikrosfærer. Mikrosfærenes størrelse kan f.eks. justeres ved å velge polymerisasjonsløsninger og fornettede midler, eller ved å modifisere rørehastigheten eller tiden i reaksjonsmediet. Disse forskjellige modifikasjonene er kjent teknikk og/eller ligger innen fagmannens kompe-tanse.

De naturlige eller syntetiske polymerene som kan brukes ved fremstilling av mikrosfærene i blandingen i foreliggende oppfinnelse, er valgt fra slike som kan påføres huden uten uønskede effekter og som er i stand til å danne mikrosfærer med ønskede dimensjoner. De må også være kompatible med det aktive produktet som brukes.

Polymerene som kan brukes i foreliggende oppfinnelse kan med fordel velges fra : styrenbaserte polymerer, som f.eks. polystyren, e-alanin-baserte polymerer, som poly-p<->alanin, polymerer erholdt fra akryl eller metakrylsyre, polyestere erholdt fra melkesyre og/eller hydroksy eddiksyre,

proteiner fornettet med enten ved glutaraldehyd eller ved et syrediklorid som tereftaloylklorid, eller i nærvær av en aktivator som karbodiimid,

varmekoagulerte proteiner (albumin).

Polymerene som kan brukes er fortrinnsvis valgt fra polymerer basert på poly-P-alanin og polyestere erholdt fra melkesyre eller hydroksyeddiksyre.

Fettforbindelser som kan brukes kan velges fra : derivater av alkoholer og fettsyrer, som tristearin,

semisyntetiske triglyserider eller glyserolmonostearat,

fettalkoholer som cetylalkohol.

Fettforbindelsene som kan brukes er fortrinnsvis valgt fra fettforbindelser med smeltepunkt på 50 - 100°C.

De aktive produktene som kan brukes i blandingen er de som kan påføres huden og kan velges fra : midler for behandling av akne som f.eks. forbindelser med virkning av retinoid-typen (vitamin A, retinsyre eller dets derivater),

- bensoylperoksider,

- vekstfaktorer med peptid-natur som proteinske eller epidermiske vekstfaktorer (EGF), - hudforsterkende midler som bensylnikotinat, hårbehandlingsmidler, spesielt midler mot tap eller midler for gjenvekst som minoxidil og anti-flassmid-ler om S-karboksymetyl cystein eller octopirox, anti-soppmidler som nystatin eller agnazol, astringenter som aluminiumklorid,

antibiotika som erythromycin og tetrasyklin, anti-viralia som vidarabin,

anti-hypertensorer som clonidin hydroklorid, anti-anginaler som nitroglyserin,

vasodilatorer som bradikynin,

midler for behandling av kardiovaskulære lidelser som peptider av tachykinin gruppen, f.eks. "forbindelse

P»,

ant i-inf laminat or i ske midler som aspirin eller

hydrokortisoner og dets derivater,

anti-allergener som kromoglysater,

anti-pruritica som fenotiazin derivater, neurostimulanter som kaffein eller teofyllin, anti-depressiva som litiumsalter og mer spesielt

litiumkarbonat,

naturlige forbindelser anvendt i neurobiologisk

forskning, som capsaicin,

anestetika som lidokain og prokain,

hormon stereoider som 17-cx-oestradiol og 17-e-oestradiol.

Passende bærere er i vandig form eller i form av oljer.

Bæreren i vandig form kan være en vandig gel erholdt ved hjelp av et geldannende middel, som f.eks. fornettet poly-akrylsyre solgt under handelsnavnet "Carbopol" av B.F. Goodrich eller cellulose-derivatene solgt under navnet "Klucel" av Hercules, eller en hydroalkoholisk gel inneholdende f.eks. propen-glykol. Det er også mulig å bruke lippo-file vandige løsninger, som f.eks. en vandig løsning av silikon.

Oljene som kan brukes som bærere er væsker eller halvt faste stoffer som triglyserider av C8 - C^q fettsyrer og deres blandinger, vaselin, flytende parafin og lanolin.

Bærerens pH-verdi justeres fortrinnsvis til en basisk verdi.

Bæreren er i form av væske, gel, krem, pasta, pomade eller tørt pulver. For å erholde en pasta, pomade eller salve tilsettes en eksipient, som polyetenglykol, en voks som bivoks eller lanolin.

De kosmetiske blandinger i henhold til oppfinnelsen inneholder generelt 1-40 vekt-% mikrosfærer, hvorav minst 80 vekt-% av disse har en diameter på 3 - 10 p. De inneholder også 0.05 - 60 vekt-% aktivt produkt.

Mikrosfærene fremstilles på kjent måte. Polystyren mikrosfærer selges i stort omfang. De av poly-e-alanin kan f.eks. fremstilles ved prosessen beskrevet i fransk patent 2.530.250.

For å innføre det aktive produkt i mikrosfærene, blir det aktive produkt løst i et løsningsmiddel eller en blanding av løsningsmidler som har en tilstrekkelig affinitet for forbindelsen som utgjør mikrosfærene. Blant passende løsnings-midler, spesielt for poly-e-alaninsfærer, kan nevnes f.eks. vann, glyserol, etanol, dietenglykol, aceton og generelt vannløselige organiske løsningsmidler.

Fremgangsmåten er særpreget ved det som er angitt i krav 1's karakteriserende del, ytterligere trekk fremgår av kravene 2 - 6.

Når det er brukt et løsningsmiddel for å fylle mikrosfærene med aktivt produkt, kan mikrosfærene brukes som de er eller etter fjerning av resterende løsningsmiddel. Dette løsnings-middel kan ha forblitt i sfærene som løsningsmiddel for det aktive produkt og/eller som svellemiddel for selve mikrosfærene når polymeren som mikrosfærene er laget av sveller i løsningsmidlet. Når mikrosfærene brukes etter fjerning av løsningsmidlet, vil det aktive produkt være igjen innkapslet i (eller på) mikrosfærene etter tørking. Svelling av polymeren i et løsningsmiddel vil gi mikrosfærer i gelform, forut-satt at mengden av løsningsmiddel ikke overstiger visse grenser, som er forskjellig avhengig av polymeren. Mikrosfærer fylt med minst et aktivt produkt, tørket eller ikke, kan blandes méd den valgte bæreren.

Den kosmetiske blanding påføres huden på vanlig måte, fortrinnsvis ved forsiktig massasje. I en alternativ form er mikrosfærene fylt med et aktivt produkt i ioneform. I dette tilfelle, etter påføring av blandingen på huden, vil fri-gjøringen av aktivt produkt aksellereres ved ionoforese.

Oppfinnelsen vil bli nærmere forklart ved hjelp av eksemplene under. Forsøk A, B og C er målinger som er foretatt for å forklare den bemerkelsesverdige effektiviteten til blandingen fremstilt i henhold til oppfinnelsen.

FORSØK A.

I dette forsøket ble størrelsen på hårtalg-ringåpningene til mennesket bestemt. Undersøkelsen ble foretatt på seks friske frivillige (3 menn og 3 kvinner) i alderen 25 - 35 år. Mål-ingene ble foretatt i pannen.

Etter å ha renset et hudområde på 2 cm<2> med såpe, ble et fargestoff (mørk brun direkte farge "L'Oreal renivative", solgt av L'Oreal) valgt og påført i femten minutter, til venstre eller høyre side i pannen på hver person. Etter endt eksponeringstid ble det fargede området renset med litt vann for å fjerne overskudd av farge. Dette området ble fotogra-fert med mikrofotografisk utstyr ved hjelp av et "Olympus" kamera. Dette apparatet gjorde det mulig å ta standardiserte fotografier av det analyserte område (samme avstand og forstørrelse). Fargestoffet var ikke synlig 24 timer etter påføring.

Størrelsesfordelingen av hårtalg-ringåpningene ble bestemt ved billedanalyse ved hjelp av et "Quantimet 520" apparat fra Cambridge Instruments fra transparenter av pannen. Apparatet måler overflatearealet S av follikel-åpningene og beregner diameteren D av hver follikel i henhold til forme-len : D = 2 (S/it)<0>'<5>

Disse resultatene er vist i tabell 1.

Midlere follikel-diameter ble funnet å være mellom 52 og 82 pm hos alle de undersøkte personer.

FORSØK B.

Det ble utført forsøk for å bestemme forholdet mellom mikrosfærenes størrelse og deres inntrengning gjennom hornlaget og folliklene i menneskets hud.

I disse forsøkene ble det brukt fluoriserende polystyren mikrosfærer med forskjellig diameter mellom 1 pm og 24 pm og som hadde karakteristika som vist i tabell 2. Disse porsjo-nene av polystyren mikrosfærer ble suspendert i en konsentrasjon på 10 vekt-% i en blanding av triglyserider av Cg - Cio fettsyrer markedsført under navnet "Mygliol 812" fra Dynamit Nobel. Forsøkene ble utført på ansiktshuden til kvinnelige pasienter i alderen 44 - 66 år.

Påføringene ble utført, omkring 4 timer etter kirurgisk ut-skjæring, på ansiktshud som ikke hadde vært frosset (lagring ved 4°C i kjølekammer). Huden ble frigjort fra dets subku-tane vev med en skalpell og deretter svakt strukket og satt fast med nåler på en bærer dekket med aluminium. Den kutane overflate ble forsiktig renset ved tørking med et papir-håndkle, etterfulgt av lett "stripping" utført med en klebende tape solgt under navnet "Transpore". De forskjellige suspensjonen av mikrosfærer blir deretter påført med en glass-spatel i 15 minutter, med 5 minutters massasje på 2.5 cm<2> påføringssteder avgrenset av plastringer festet med et cyanoakrylat polymer-basert klebemiddel solgt under navnet "Cyanolit". Etter endt applikasjonstid blir resten av produkt som ikke er trukket inn i huden fjernet med en bomullspinne etterfulgt av tre meget forsiktige påføringer på hudens overflate av et stykke klebende tape solgt under navnet "Transpore" (kleber seg lett til huden og forårsaker ingen ødeleggelse av hornlaget). Biopsi av påføringsstedene og også kontrollområder uten påføringer, blir tatt med en

"Punch biopsy" stanse 6 mm i diameter og fryses ned i flytende N2. Inntrengning av mikrosfærer i hornlaget og folliklene blir så demonstrert ved å bruke et fluorescens optisk mikroskop (fotomikroskop "IIIRS", Zeiss, V-Tyskland) på dypfrosset vertikale huddeler 10 - 15 pm tykke, preparert

ved hjelp av en cryomicrotom (Cryostat Bright, Bright Instrument Co. Ltd.)

De oppnådde resultater er som følger :

- mikrosfærer med 24 pm i diameter forble lokalisert på hudens overflate uten å trenge inn, - mikrosfærer 9 - 10 pm i diameter har en tendens til å samles opp rundt follikel-kanalene,

7 pm mikrosfærer er i stand til å trenge inn i de

talgaktige folliklene,

- mikrosfærer med 1-3 pm i diameter har en tendens til å trenge inn i både hornlaget og folliklene.

FORSØK C.

Forsøkene ble utført for å bestemme forholdet mellom mikrosfærenes størrelse og deres inntrengning i hornlaget og folliklene hos rotter.

I disse forsøkene ble det brukt mikrosfærer av poly-P-alanin og det ble prøvd tre prøver med midlere diameter på hen-holdsvis 2, 5 og 12 pm.

Mikrosfærene som ble brukt fremstilles ved å fornette poly-3-alanin ved hjelp av glutaraldehyd. Denne fremstilling er

beskrevet i fransk patent 2.530.250. Mikrosfærene blir gjort fluoriserende ved en intermediær reaksjon med heksametylen-diamin med rester av aldehydfunksjonelle grupper som er tilstede på overflaten, etterfulgt av en reaksjon med dansylklorid. De erholdte mikrosfærene har en meget kraftig homogen grønn fluorescens i ultrafiolett lys. Disse mikrosfærene har følgende egenskaper : Prøve 1: diameter 1.79 0.86 pm (90 % under 2.9 pm), Prøve 2: diameter 4.8 1.1 pm (90 % under 6.1 pm),

fremstilt i h.h.t. eksempel 1.

Prøve 3: diameter 12.4 ± 2.2 pm (90 % under 15.1 pm).

Måling av disse størrelsene ble utført ved fluorescens bildeanalyseteknikk med et "Quantimet 520" apparat solgt av Cambridge Instruments.

Påføringsprosedyren er som følger : etter bedøvelse med pen-tobarbital (30 mg/kg dose) blir 5 cm<2> prøveområder avgrenset med plaster fastlimt på ryggen av en naken hunnrotten (midlere vekt 170 - 180 g). Forskjellige applikasjoner ble påført i 2 timer i en mengde på 5 - 10 mg/cm<2> på prøve-stedene. For å finne innvirkningen av massasje på inntregningen av poly-e-alanin i talgaktige follikler, ble påfør-ingen utført ved å sammenligne to massasjeperioder, et minutt og fem minutter. Dyrene blir holdt fast under hele forsøket for å unngå enhver kontakt med påføringsstedene. Etter 2 timer ble overskuddet av produkt som ikke var trukket inn i huden forsiktig fjernet med en bomullspinne og det blir deretter forsiktig festet tre biter av klebende tape, markedsført under navnet "Transpore", på hudens overflate. Det blir tatt biopsier av påføringsstedene (6 mm i diameter) og disse fryses i flytende N2. Inntregningen av mikrosfærer i hornlaget og folliklene bestemmes ved hjelp av fluorescens optisk mikroskopi på dypfrosne vertikale hudsnitt med tyk-kelse 10 - 15 pm, fremstilt ved hjelp av cryomicrotom.

For å teste innvirkningen av bæreren på inntrengningen av poly-e-alaninmikrosfærer, ble sistnevnte formulert med 10 vekt-% i følgende bærere :

Resultatene er som følger :

a) i suspensjon i vandig gel trenger mikrosfærer 2 pm i diameter inn i de forskjellige lagene av hornlag og også inn i

follikel-kanalene. 5 pm mikrosfærer er lite tilstede i hornlaget, etter 1 minutt massasje, og er lokalisert ved åpnin-gen til follikel-kanalene, tendensen til å trenge inn i folliklene er litt mer uttalt etter 5 minutters massasje. Mikrosfærer 12 pm i diameter trenger hverken inn i hornlaget eller follikel-kanalene.

b) vannsilikonbærer har innvirkning på inntrengning av 2 pm mikrosfærer, sistnevnte er tilstede i et større antall inne

i de talgaktige folliklene, og utviser en jevn fordeling i hornlaget. På den andre siden finnes det nesten ingen 5 pm mikrosfærer med denne bæreren i hornlaget, de er lokalisert meget dypt i folliklene i nærheten av talgkjertlene, i dette tilfelle har massasje en gunstig effekt på inntrengning av mikrosfærer i follikel-hulrommet. På samme måte som med vandig gel, trenger 12 pm mikrosfærer hverken inn i hornlaget eller follikel-kanalene.

Eksemplene 1-6 under beskriver fremgangsmåter ved fremstilling av poly-e-alaninmikrosfærer, fluoriserende eller fylt med aktive produkter, og har ønsket diameter.

EKSEMPEL 1.

Fremstilling av fluoriserende poly-p-alaninmikrosfærer.

Trinn A : Fremstilling av poly-3-alaninsfærer i suspensjon. I. 125 g toluen, 4 44 g t-butanol og 0,75 g kopolymer (okta-decen/maleinsyre anhydrid) (solgt under navnet "PA-18" av Gulf) plasseres i en 3 liters reaktor forsynt med en anker-type rører med diameter 90 mm, et nitrogeninnløp, en drypp-trakt og en destillasjonskolonne. Etter oppvarming av denne blandingen til 70°C blir 150 g akrylamid tilsatt. Temperaturen økes til 100°C og 90 ml av den azeotrope blandingen (vann/toluen/t-butanol) destilleres av. Etter endt destilla-sjon blir reaksjonsblandingen avkjølt til 80°C og rørehas-tigheten justeres til 600 omdr/min. En løsning av 3,30 kalium t-butylat i 62 g t-butanol tilsettes i løpet av 10 minutter, Drypptrakten renses med 75 g toluen. Etter røring i 5 timer ved 80"C avkjøles materialet til romtemperatur. II, 25 ml kons. HC1 tilsettes dråpevis til blandingen.

TRINN B: Fornetting av poly-e-alaninsfærer.

42 g vandig løsning av 25% glutaraldehyd tilsettes til suspensjonen av poly-P-alaninmikrosfærene fra trinn A, i løpet av 3 0 minutter med røring ved 600 omdr/min og temperatur 50°C. Etter 4 timer røring ved denne temperaturen avkjøles suspensjonen til romtemperatur.

Etter at materialet er flat til bunnen, fjernes overskuddet av løsningsmidler og mikrosfærene vaskes to ganger med 500 ml porsjoner etanol. Fjerning av væske etter hver vasking skjer ved sentrifuge ved 3500 omdr/min. Det utføres kontinuerlig vasking med 15 liter vann som fjernes og det endelige volumet blir 600 ml.

Det fornettede poly-e-alanin frysetørkes og det erholdes 135 g hvitt pulver, hvor midlere diameter til mikrosfærene er 4,80 ± 1,1 pm, bestemt ved bildeanalyseteknikk med et

"Quantimet 520" apparat.

TRINN C: Reaksjon med 1,6-diaminoheksan.

20 g 1,6 diaminoheksan tilsettes til en suspensjon av 20 g poly-P-alaninsfærer fra trinn B i 100 g vann. Røring i 24 timer ved romtemperatur og materialet filtreres fra på en nr. 4 glass-sinter og vasket til slutt med vann til nøytral pH.

TRINN D; Fiksering av fluoriserende produkt.

Mikrosfærene erholdt i trinn C blir suspendert i 80 ml bufferløsning med pH 8,9 (270 ml 0,1 M NaHC03 løsning til pH 8,9 ved tilsetting av 3 0 ml 0,1 M Na2C03). 2 g dansylklorid løst i 80 ml aceton tilsettes til denne suspensjonen. Blandingen varmes i 10 minutter under tilbakeløp og filtreres på en nr. 4 glass-sinter og til slutt vasket med aceton til alle spor av dansylklorid er forsvunnet, målt ved hjelp av UV-deteksjon ved 250 nm. Sfærene blir først tørket i luft og deretter under redusert trykk ved romtemperatur. Den endelige fargen på sfærene er lys gul.

EKSEMPEL 2.

Fremstilling av poly-3-alaninmikrosfærer fylt med benzoylperoksid.

TRINN At Fremstilling av poly-p<->alaninmikrosfærer i suspensjon.

Dette trinnet er identisk med trinn A i eksempel 1.

TRINN B; Fornetting av poly-3-alaninmikrosfærer.

18 g vandig suspensjon inneholdende 25 vekt-% glutaraldehyd tilsettes jevnt over 15 minutter til en suspensjon av poly-e-alaninmikrosfærer erholdt i trinn A, røres kraftig (600 omdr/min) ved 50<*>C. Etter røring i 4 timer ved denne temperaturen blir suspensjonen avkjølt til romtemperatur. Etter at materialet er falt til bunnen blir overflødig løsnings-middel fjernet og mikrosfærene vaskes 2 ganger med 500 ml porsjoner etanol. Fjerning av væske etter hver vask skjer ved hjelp av sentrifugering (3500 omdr/min). Det vaskes kontinuerlig med 15 1 vann som fjernes til et endelig volum på 600 ml. Den svellede polymer blir til slutt frysetørket og det blir erholdt 132 g hvitt pulver hvor mikrosfærene har en midlere diameter på 4,05 ± 2,02 pm, målt ved samme metode som i trinn B, eksempel 1.

TRINN C; Reduksjon av resterende aldehydfunksjonellegrupper.

2,2 1 vann tilsettes til 150 g fornettet poly-3-alaninmikrosfærer erholdt i trinn B og homogeniseres ved røring. Etter avkjøling til 5 - 10°C blir det sakte tilsatt en kjølt løs-ning av natriumborhydrid i vann (5,3 NaBH4 i 600 ml vann ved 5°C). Reaksjonsblandingen holdes ved 5 - 10'C i 5 timer og pH justeres til 7 ved tilsetting av eddiksyre.

Etter sentrifugering dispergeres det faste stoffet i 450 ml vann og vaskes med 5 liter vann (vasking i en "Amico" celle med et 0,2 pm Diapor filter, trykk 2 bar og røring). De hydratiserte mikrosfærene frysetørkes. Fraværet av farge i Schiffs reagens gjør det mulig å konkludere med at de resterende aldehydfunksjonellegruppene er redusert. Analyse av mikrosfærenes diameteren viser at disse er identiske med de originale mikrosfærene.

TRINN D: Innføring av aktivt produkt.

44,5 g benzoylperoksid (75 vekt-%) løses i en blanding av

1.125 g aceton og 375 g vann, 50 g av mikrosfærene erholdt i trinn C suspenderes i denne løsningen. Suspensjonen konsen-treres i en "rotavapor" ved redusert trykk ved en temperatur som ikke overstiger 35°C til en total vekt på 262 g suspensjon.

Benzoylperoksidinnholdet i suspensjonen er 9,1 vekt-%.

EKSEMPEL 3. Fremstilling av poly-e-alaninmikrosfærer fylt med benzylnikotinat.

TRINN A- C: Fremstilling av mikrosfærer.

Trinnene A-C utføres som i eksempel 2.

TRINN D: Innføring av aktivt produkt.

2 g benzylnikotinat oppløses i en blanding av 40 g vann og 4 0 g etanol. 10 g mikrosfærer fra trinn C suspenderes i denne løsningen. Suspensjonen røres i 2 timer og etanolen fjernes i "rotavapor", hvor temperaturen holdes under 35°C. Til slutt frysetørres mikrosfærene.

EKSEMPEL 4.

Fremstilling av poly-3-alaninmikrosfærer fylt med bensylnikotinat.

Trinnene A-C utføres som i eksempel 1 og trinn D for inn-føring av bensylnikotinat som aktivt produkt utføres som i eksempel 3.

EKSEMPEL 5.

Fremstilling av poly-3-alaninmikrosfærer fylt med retinsyre.

TRINN A- C: Fremstilling av mikrosfærer.

Trinn A-C ble utført som i eksempel 2.

TRINN D: Innføring av aktivt produkt.

15 mg butylhydroksytoluen (antioksidant) blir løst i 30 g

1,2-propylenglykol ved 30°C. 24 mg retinsyre løses i 10 g av blandingen erholdt over ved romtemperatur under argon uten tilgang på lys. Den erholdte løsningen filtreres med et 0,2 pm "Millipore" filter. 5 g av mikrosfærene fremstilt i trinn C suspenderes i denne løsningen argon uten tilgang på lys. Blandingen skjer med en spatel. Etter to timers absorpsjon erholdes et gult pulver. Bestemmelse av retinsyre i spektro-fotometer (lambda = 358,8 nm) etter desorpsjon av aktiv forbindelse i dimetylsulfoksid.

EKSEMPEL 6.

Fremstilling av poly-e-alaninmikrosfærer fylt med clonidinhydroklorid.

TRINN A- C: Fremstilling av mikrosfærer.

Trinnene A-C ble utført som i eksempel 2. -

TRINN D: Innføring av aktivt produkt.

37,6 mg clonidinhydroklorid løses i 15 g vann uten tilgang på lys og 3 g mikrosfærer fremstilt i trinn C tilsettes deretter til 12 g av løsningen. Blandingen skjer med en spatel. Etter 2 timers absorpsjon erholdes et hvitt pulver. Mikrosfærene frysetørkes. Bestemmelse av clonidinhydroklorid i det endelige produkt utføres v.h.a. HPLC-analyse etter desorpsjon av aktiv hovedkomponent.

Beregnet konsentrasjon : 1 %.

EKSEMPEL 7.

Fremstilling av poly-e-alaninmikrosfærer fylt med minoxidil.

TRINN A- C: Fremstilling av mikrosfærer.

Trinnen A til C ble utført som i eksempel 2.

TRINN D: Innføring av aktivt produkt.

2 g minoxidil løses ved 30°C i en blanding av 75 g etanol og 75 g vann. 8 g poly-e-alaninsfærer erholdt i trinn C til-føres til denne løsningen. Blandingen røres i 1 time i "rotavapor" og løsningsmidlet fordampes til det erholdes en gel. Gelen fryses under røring og frysetørkes.

Beregnet konsentrasjon : 11,6% (ved UV bestemmelse ved 230 nm etter suspendering i etanol).

EKSEMPEL 8.

Fremstilling av fett-substansmikrosfærer fylt med retinsyre.

TRINN A: Fremstilling av løsning av aktiv bestanddel.

200 mg av all-transretinsyre løses i 5 ml 1,-2-dikloretan uten tilgang på lys.

TRINN B: Belegning av aktiv bestanddel med fett-substansmikrosfærer .

4,75 g tristearat og 250 mg glyserolmonostearat has i en

rustfri stålreaktor med et N2-innløp, magnetisk rører og en varmeplate. Blandingen skjer ved røring ved 80'C. Løsningen av aktiv hovedbestanddel i trinn A tilsettes uten tilgang på lys. Blandingen røres ved 80'C og blåses under et N2-trykk på 7 bar til en sprøytedyse koblet til reaktoren (Apparat "1/4 JCO-SS-SU.B15B-SS", Emani). Mikrosfærene inneholdende retinsyrebelegget med blandingen av tristearin-glyserolmonostearat fett-substans blir så dannet nedstrøms av denne sprøytedysen inne i et filtreringskammer (lengde 85 cm), og samles på en rist (Millipore, 24 cm diameter, fortrinnsvis, "1 YY30 293 58"). Det erholdes et gulfarget pulver. Retin-syreinnholdet i de erholdte mikrosfærene er 2,78 vekt-%.

Diameter til mikrosfærene bestemt vha. bildeanalyse (MOP-Videoplan Apparatus, Kontron) er 4,43 ± 1,08 jam.

Eksemplene 9 til 18 under vedrører fremstilling av kosmetiske blandinger av mikrosfærer fylt med aktivt produkt fremstilt i eksemplene 2 til 8.

EKSEMPEL 9.

Fremstilling av poly(laktid-ko-glykolid) mikrosfærer fylt med 6-[3-(l-adamantyl-4-metoksyfenyl)]-2-naftonsyre.

0,5 g poly(laktid-ko-glykolid) solgt av Dupont under navnet "medisorb 5050 DL" og 5 mg 6-[3-(l-adamantyl-4-metoksy-fenyl)]-2-naftonsyre løses i 15 ml metylklorid. Den erholdte organiske løsningen emulgeres med mekanisk røring (2 000 omdr/min) i 100 ml av en vandig gel inneholdende 0,3 hydroksypropyl cellulose solgt av Aqualon under navnet "Klucel HF". Den mekaniske røringen fortsetter i 2 timer og dette gir en progressiv og fullstendig fordamping av mety-lenklorid.

De erholdte mikrosfærene gjenvinnes, vaskes tre ganger med destillert vann og frysetørkes. Størrelsesfordelingen av mikrosfærene erholdt ved denne metode analyseres under mikroskop. Sfærenes diameter er mellom 1 og 15 pm med midlere størrelse 5 pm, mer enn 80% av sfærene har en diameter på 3 - 10 pm.

Innkapslingene sjekkes på følgende måte :

1) inspeksjon av mikrosfærene ved optisk mikroskopi (fluorescens) viser fluoriserende sfærer og fravær av frie krystaller av aktiv hovedbestanddel. 2) inspeksjon ved elektron mikroskopi bekrefter fraværet av krystaller utenfor sfærene og fravær av krystaller på sfærenes overflate.

For å evaluere graden av innkapsling av aktiv hovedbestanddel i sfærene blir en prøve av de erholdte sfærene over (100 mg) ekstrahert med tetrahydrofuran (5 ml), filtreres, og filtratet analyseres ved HPLC. Graden av innkapsling av 6-[3-(l-adamantyl-4-metoksyfenyl)]-2-naftonsyre er 0,75%.

EKSEMPEL 10.

Fremstilling av poly(laktid-ko-glykolid) mikrosfærer fylt med retinsyre.

Mikrosfærer fylt med retinsyre kan erholdes på samme måte som ved fremstillingen i eksempel 9 : 5 mg 6-[3-(l-adaman-tyl-4-metoksyfenyl)]-2-naftonsyre erstattes med 2 mg retinsyre.

EKSEMPEL 11.

Fremstilling av triglyserid mikrosfærer fylt med N-benzyl-fenyl-acetoksyacetamid.

Mikrosfærer fremstilles fra triglyserider, nemlig en hydro-genert palmeolje solgt under navnet "Softisan 154" av Dynamit Nobel, ved en sprøyteprosess ved hjelp av en sprøyteenhet under trykk.

Triglyseridet og den aktive hovedbestanddelen, nemlig N-benzylfenyl-acetoksyacetamid med en konsentrasjon på 15 vekt-% i forhold til massen av triglyserider, smeltes ved 90°C under N2 uten tilgang på lys i en termostatert rustfri stålreaktor. Den smeltede blandingen føres med nitrogen

(0,5 x IO<2> kPa trykk) opp til dysen med en viss hastighet og sprøytingen skjer ved dysen under et N2 trykk (3 x IO<2> kPa).

Sprøytingen utføres i en forseglet rustfri stålbeholder ved en temperaturgradient på omkring -150'C ved bunnen til 20°C ved toppen. Denne gradienten erholdes ved tidligere innfør-

ing av flytende nitrogen i bunnen av beholderen.

Som en generell regel er midlere diameter til de erholdte sfærene avhengig av dysetypen, sprøyte-nitrogentrykket og strømningshastigheten av væsken. Jo mindre strømnings-hastighet desto mindre er dråpene som forlater dysen og dermed mikrosfærene i bunnen av beholderen. Jo høyere sprøytetrykk, desto mindre er sfærenes diameter, og mer homogen størrelsefordeling.

I dette eksempelet ble det erholdt jevne mikrosfærer uten frie krystaller av aktiv hovedkomponent som er synlige under mikroskop. Diameteren til sfærene varierer fra 1 - 15 pm med en midlere diameter under 10 pm. Andelen av aktiv komponent ble bestemt til 15% vha. HPLC.

EKSEMPEL 12.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Ved påføring på huden med massasje til den trenger fullstendig inn, to ganger daglig i 30 dager, har denne blandingen utmerkede antiakne egenskaper.

EKSEMPEL 13.

Det ble fremstilt en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden ved massasje til den har trukket fullstendig inn, to ggr. daglig i 30 dager, utviser den utmerkede antiakneegenskaper.

EKSEMPEL 14.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden med massasje til den er fullstendig trukket inn, 2 ggr. daglig i 30 dager, utviser den utmerkede antiakneegenskaper.

EKSEMPEL 15.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden med massasje til den trekker fullstendig inn, 2 ggr. daglig i 30 dager, til visse deler av kroppen, f.eks. brystene, vil blandingen bidra til å gjøre dem fastere.

EKSEMPEL 16.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden med massasje til den trekker fullstendig inn, til visse deler av kroppen f.eks. nakken, vil den medvirke til å gjøre dem fastere.

EKSEMPEL 17.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden med massasje til den trekker fullstendig inn, 2 ggr. daglig i 30 dager, utviser denne blandingen utmerkede antiakneegenskaper.

EKSEMPEL 18.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

EKSEMPEL 19.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden med massasje til den trekker fullstendig inn, 2 ggr. daglig i 2 til 3 uker, utviser denne blandingen utmerkede antihypertensive egenskaper.

EKSEMPEL 20.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Denne gelen påføres til hodebunner som har mistet betydelige mengder hår. Etter 3 mnd. behandling med 1 ml pr. påføring ble det observert en betydelig forbedring.

EKSEMPEL 21.

Det ble fremstilt en gel med følgende sammensetning :

EKSEMPEL 22.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

EKSEMPEL 23.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

EKSEMPEL 24.

Det fremstilles en gel med følgende sammensetning :

Når denne blandingen påføres huden med massasje til den trekker fullstendig inn, 2 ggr. daglig i 30 dager, utviser denne blandingen utmerkede antiinflammatoriske egenskaper.

Claims

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av en kosmetisk blanding for topisk påføring, hvilken blanding inneholder, i en egnet bærer, 1-40 vekt-% mikrosfærer av polymerer eller fett-substanser med et smeltepunkt høyere enn 50°C, inn i hvilke mikrosfærer er absorbert minst én aktiv bestanddel og hvor polymeren er valgt fra gruppen bestående av styrenbaserte polymerer, a-alaninbasert polymerer, polymerer avledet fra akryl- og metakrylsyre, polyestere avledet fra melkesyre og/eller glykolsyre, fornettede proteiner og varmekoagulert protein, karakterisert ved at den aktive forbindelse er absorbert i mikrosfærene, hvoretter oppløsningsmidlet for en aktiv bestanddel fjernes, og at mikrosfærene før eller etter absorpsjon klassifiseres til å ha en størrelsesfordel-ing slik at 80 vekt-% av mikrosfærene har en diameter i området 3-10 pm, hvoretter mikrosfærene blandes med bæreren og eventuelt andre hjelpemidler.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at fett-substansene er valgt fra gruppen bestående av fett-alkoholer og derivater av alkoholer og fettsyrer har et smeltepunkt i området 50 - 100°C.

3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at den inneholder Vitamin A, retinsyre eller en av dens derivater, eller benzoylperoksid, som middel for behandling av akne.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at den inneholder minoxidil som antitap eller hårvekstmiddel og S.karboksymetyl-cystein eller octopirox som antiseborrheisk middel. 6. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at ved at den inneholder aspirin eller hydrokortison eller dets derivater som anti-inflammatorisk middel.