NO169959B - Fremgangsmaate for fremstilling av en antitumor-prolegemiddelforbindelse - Google Patents

Fremgangsmaate for fremstilling av en antitumor-prolegemiddelforbindelse Download PDF

Info

Publication number
NO169959B
NO169959B NO885200A NO885200A NO169959B NO 169959 B NO169959 B NO 169959B NO 885200 A NO885200 A NO 885200A NO 885200 A NO885200 A NO 885200A NO 169959 B NO169959 B NO 169959B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
drug
formula
substituted
carbon atoms
Prior art date
Application number
NO885200A
Other languages
English (en)
Other versions
NO885200D0 (no
NO169959C (no
NO885200L (no
Inventor
Peter D Senter
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of NO885200D0 publication Critical patent/NO885200D0/no
Publication of NO885200L publication Critical patent/NO885200L/no
Publication of NO169959B publication Critical patent/NO169959B/no
Publication of NO169959C publication Critical patent/NO169959C/no

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
    • C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse angår fremstilling av antitumor pro-legemidler, dvs. en antitumor legemiddelform som kan gjennomgå forandring i verten slik at et aktivt, fritt legemiddel frigjøres. Nærmere bestemt angår foreliggende oppfinnelse fremstilling av (a) disulfidbenzylcarbamatderivater av amino (primære og sekundære) antitumorlegemidler, og (b) disulfidbenzylcarbonatderivater av hydroxylholdige antitumorlegemidler som kan gjennomgå reduktiv spaltning av disulfiddelen og etterfølgende kjemisk fragmentering, slik at et aktivt, fritt legemiddel frigjøres.
En betraktelig del av forskningen har i de senere år vært fokusert på utviklingen av antitumormidler som har en høy grad av selektivitet overfor tumorer fremfor normalt vev. En vesentlig begrensning ved anvendelse av kjemoterapeutiske midler er deres dosebegrensende toksisitet. Et forsøk på å overvinne dette problem har vært å finne legemidler som ut-nytter forskjellene mellom neoplastiske og normale celler (D.E.V. Wilman, (1986)Biochem. Soc. Trans. 14, 375-382).
Det er påvist at faste tumorer ofte har utilstrekkelig vaskularisering, og at de kan eksistere i oxygenmanglende eller hypoksiske tilstander (A.C. Sartorelli, (1986) Biochem. Pharm. 35_, 67-69 og P.M. Fracasso og A.C. Sartorelli, (1986) Cancer Research 46_, 3939-3944) . I tillegg er forhøyede innhold av reduksjonsmidler som NADH, NADPH og glutathion,
blitt forbundet med humane tumorcellelinjer (A. Russo,
W. DeGraff, N. Friedman og J.B. Mitchell, (1986) Cancer Research 46_, 2845-2848; W.G. DeGraff, A. Russo og
J. B. Mitchell, (1985) J. Biol. Chem. 260, 8312-8315;
J.J. Lemasters, S. Ji og R.G. Thurman, (1981) Science 213, 661-663). Disse iakttagelser har vært incitamentet for omfattende forskning innenfor utviklingen og forståelsen av bioreduktivt aktiverte legemidler mot kreft som kan utvise forhøyet aktivitet under hypoksiske betingelser (A.C. Sartorelli, (1986) Biochem. Pharm. 35.67-69;
P.M. Fracasso og A.C. Sartorelli, (1986) Cancer Research 46, 3939-3944 og H.W. Moore, R. Czarniak og A. Hamdan, (1986) Drugs Explt. Clin. Res. 12_, 475-494). Cytotoksiske midler som fortrinnsvis aktiveres i tumorcellers reduserende miljø, kan ha betraktelig terapeutisk verdi.
Det er nå funnet en hittil ukjent strategi for frigivelse av legemiddel hvor svake reduksjonsmidler kan frem-kalle eliminering av aminoholdige legemidler fra benzylcarbamatdisulfid-legemiddelderivater. En rekke (a) disulfidbenzylcarbamat-pro-legemidler av amino-(primære og sekundære)-holdige antitumorlegemidler, og (b) disulfidbenzylcarbonatderivater av hydroxylholdige antitumorlegemidler, er uttenkt, fremstilt og undersøkt for cytotoksisitet in vitro på humane tumorcellelinjer, og for aktivitet i tumorbærende mus. Fig. 1 illustrerer fremstillingen av et eksempel på disulfidbenzylcarbamat. Fig. 2 illustrerer veien for eliminering av p-nitroanilin ved behandling av benzylcarbamat-anilinderivatet med dithiothreitol. Fig. 3 illustrerer en rekke mitomyein- og daunomycinderivater som pro-legemidler ifølge foreliggende oppfinnelse.
I eksemplene og tabellene henviser forbindelsesnumrene til de tilsvarende forbindelser angitt i figurene.
Foreliggende oppfinnelse angår således en fremgangsmåte for fremstilling av en antitumor-prolegemiddelfor-bindelse med generell formel (I)
hvori
D er en antitumorlegemiddeldel til hvis skjelett er knyttet en kjemisk reaktiv funksjonell gruppe ved hjelp av hvilken lege-middelskjelettet er bundet til disulfidbenzyloxycarbonyl-gruppen, idet D er avledet fra gruppen bestående av en primær aminogruppe med formel R<1>NH, en sekundær aminogruppe med formelR<1>R<2>N- og en alkoholgruppe med formel R^ O- r hvori R<1>, nårR<1>og R2 er innbyrdes uavhengige, er skjelettet av legemiddeldelen når D er avledet fra gruppen bestående av en primær amino-
gruppe og en sekundær aminogruppe,
R<2>, nårR<1>og R2 er innbyrdes uavhengige, valgt fra usubstitu-er te og substituerte, forgrenede og lineære alkylgrupper med 1-10 carbonatomer, hvor substituenten er valgt blant 1-3 alkoxygrupper med 1-3 carbonatomer og 1-3 halogenatomer, usubstituert og substituert fenyl, hvor substituenten er valgt blant 1-3 alkylgrupper med 1-3 carbonatomer, 1-3 alkoxygrupper med 1-3 carbonatomer og 1-3 halogenatomer, og usubstituert og substituert fenalkyl, hvori fenyldelen i tilfelle av substitu-sjon er substituert på samme måte som beskrevet ovenfor for substituert fenyl, og hvor alkyldelen er en polyalkylengruppe med 1-3 carbonatomer, eller hvor R<1>og R<2>sammen representerer skjelettet av legemiddeldelen D hvor en divalent gruppe er bundet kjemisk til nitrogenatomet som inngår i den sekundære aminogruppe, og R<3>er en organisk funksjonell gruppe valgt blant 3-nitrofenyl, 2-pyridyl og 4-fluorfenyl, og hvor orienteringen av gruppen -S-S-R3 på benzylcarbamatdelens fenyl-ring er valgt blant orto- og para-stillinger.
Substitusjonsstillingen for gruppen -S-S-R 3 på fenyl-ringen i benzylcarbamatdelen velges blant ortho- og para-stillingen.
Eksempler på aminogruppeholdige legemidler er mitomycin-C, mitomycin-A, daunomycin, adriamycin, aminopterin, actinomycin, bleomycin og derivater derav, og et eksempel på de alkoholgruppeholdige legemidler er etoposid.
De anvendte forkortelser er følgende:
MMC = mitomycin C,
MMA = mitomycin A,
DAU = daunomycin,
PBS = fosfatbufret fysiologisk saltvann,
T/C = gjennomsnittlig overlevelsestid for lege-middelbehandlede mus (T) dividert med den gjennomsnittlige overlevelsestid for kontroll-mus (C) med tumorer x 100,
i.p. = intraperitonealt,
i.v. = intravenøst,
HPLC = høytrykksvæskekromatografi,
DTT = dithiothreitol,
PNA = p-nitroanilin.
Uttrykket "pro-legemiddel" som anvendes i beskriv-elsen, henviser til et forstadium eller en derivatform av et farmasøytisk aktivt stoff som er mindre cytotoksisk overfor tumorceller sammenlignet med stamlegemidlet, og som kan bli enzymatisk aktivert eller omdannet til den mere aktive stamform (se f.eks. D.E.V. Wilman, "Prodrugs in Cancer Chemotherapy", Biochemical Society Transactions, 14,
s. 375-382 (615th Meeting, Belfast 1986), og V.J. Stella et al., "Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery", Directed Drug Delivery, R. Borchardt et al., (red.), s. 247-267 (Humana Press 1985)).
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er kjennetegnet ved at man omsetter triklormethylklorformiat med benzylalkohol som er substituert i orto- eller para-stilling med en 3-nitrofenyldithio- eller 2-pyridyldithiogruppe og enn videre med et anti-tumorlegemiddel med formelen D, hvor D har den ovenfor angitte betydning i et inert løsningsmiddel, og om nødvendig utskifter 2-pyridylgruppen med en 4-fluorfenylgruppe ved omsetning med p-fluorthiofenyl.
Pro-legemiddelforbindelsene fremstilt ifølge' foreliggende oppfinnelse kan tilveiebringes som et farmasøytisk preparat for å anvendes i overensstemmelse med fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen til behandling av en vert, spesielt en pattedyrvert, som f.eks. en forsøksdyrvert, som er påvirket av en ondartet tumor. Det farmasøytiske preparat omfatter en antitumor-virksom mengde, dvs. en tumorvekstinhiberende mengde av pro-legemiddelforbindelsen ifølge oppfinnelsen og en farmasøytisk akseptabel bærer og eventuelt konvensjonelle, farmasøytisk akseptable tilsetninger og hjelpestoffer.
Den farmasøytiske bærer kan være fast eller flytende for å tilveiebringe faste eller flytende preparater. Preparater med fast form som er egnet til oral administrering, omfatter pulvere, tabletter, kapsler, kapletter, disperger-bare granulater og oblatkapsler. Egnede faste bærere omfatter minst ett bærerstoff som enten bare kan virke som en bærer, eller som i tillegg kan virke som fortynningsmiddel, aroma- stoff, oppløsningsmiddel, smøremiddel, suspenderingsmiddel, bindemiddel, tablettdesintegreringsmiddel, innkapslings-middel og lignende. Inerte faste bærere omfatter f.eks. magnesiumcarbonat, magnesiumstearat, talkum, sukker, lactose, pectin, dextrin, stivelse, gelatin, celluloseholdige materi-aler og lignende. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan tilveiebringes som sterile oppløselige forbindelser eller preparater, herunder oppløsninger, suspen-sjoner og emulsjoner derav som kan oppløses i sterilt vann eller et annet flytende medium til oral administrering eller parenteral administrering. Eksempler på flytende bærere som er egnet til oral administrering, omfatter vann, alkohol, polypropylenglycol, polyethylenglycol og blandinger av to eller flere av de ovennevnte midler. Eksempler på flytende bærere som er egnet til parenteral anvendelse, omfatter vann-til-injeksjon, fysiologisk saltvann og andre egnede, sterile injeksjonsmidler. Egnede buffere til anvendelse sammen med den flytende bærer for å tilveiebringe en egnet, bufret, isotonisk oppløsning omfatter trinatrium-orthofosfat, natriumbicarbonat, natriumcitrat, N-methylglucamin, L(+)-lysin og L(+)-arginin.
Det farmasøytiske preparat vil inneholde en mengde
av minst én forbindelse med formel (I) eller en blanding av én eller flere forbindelser eller en blanding av disse med andre antitumormidler. Den antitumor-virksomme mengde av en forbindelse med formel (I) kan varieres eller justeres innenfor et bredt område avhengig av den spesielle anvendelse, formen og styrken av den spesielle forbindelse som anvendes, og den ønskede konsentrasjon av forbindelsen i preparatet. Mengden av aktiv bestanddel ligger vanligvis i området mellom 0,5 og 90 vekt% basert på den samlede vekt av preparatet.
Ved terapeutisk anvendelse for behandling av en pattedyrvert, f.eks. en forsøksdyrvert, som er angrepet av en ondartet tumor, administreres forbindelsen fremstilt ifølge foreliggende oppfinnelse i en mengde som er virksom for å inhi-bere tumorveksten, dvs. en tumorvekstinhiberende dosemengde. Den tumorvekstinhiberende mengde er vanligvis en mengde i området fra 0,1 til 15 mg/kg kroppsvekt/dag. Det vil være åpenbart at den faktiske foretrukne dose av forbindelsen varierer i vidt omfang avhengig av behovet hos dyret som skal behandles, det anvendte preparat og administreringsmåten. Mange faktorer som modifiserer virkningen av det anti-neoplastiske middel, vil tas i betraktning av den dyktige tek-niker, f.eks. dyrevertens alder, legemsvekt og kjønn, kost, tidspunktet for administrering, utskillelseshastighet, vertens tilstand, sykdommens alvor og lignende. Administrering kan utføres på én gang eller periodisk innenfor den maksimalt tolererte dose. Optimal administrering (eller anvendelse) under gitte forhold kan lett fastsettes av den dyktige tek-niker .
De følgende eksempler belyser foreliggende oppfinnelse. Medmindre annet er anført, er alle deler og prosent-angivelser basert på vekt og temperaturer i grader Celsius. Som nevnt ovenfor, henviser forbindelsesnumrene til de tilsvarende forbindelser vist i figurene.
Cellelinjer
HBS2 (human T-celleleukemi) og Namalwa (Burkitts lymfon) ble erholdt fra American Type Culture Collection (Gaithersburg, MD). Celler ble dyrket i RPMI 1640 medium supplert med 10% kvegfosterserum, penicillin og streptomycin ved 37°C i en fuktig 5% C02~atmosfære.
3 H- thymidm- inkorporerings forsøk
Cytotoksisitet av mitomycin- og daunomycinderivater ble målt ved inhibering av DNA-syntese. Legemidler ble seriefortynnet i PBS, og 100 yliter inneholdende 1x10 5 celler ble tilsatt hver brønn. Celler ble inkubert i 1 time ved 37°C, vasket to ganger og resuspendert i 200 yliter dyrk-ningsmedium. Etter inkubasjon ved 37°C i 19 timer ble 50 yliter av 1 y Ci[6- 3H]-thymidin (New England Nuclear, 15 Ci/mmol) tilsatt hver brønn og inkubert i 4 timer ved 37°C. Celler ble overført til millititer svplater ("Millipore") og utfelt med 25% kald trikloreddiksyre (TCA). Utfellingene ble vasket 10 ganger med 5% kald TCA. Filtre ble tørket, utstanset og tellet i "Econofluor" flytende scintillasjons-væske (New England Nuclear). Alle tellinger ble korrigert ved subtraksjon av bakgrunnstellinger.
Forsøk in vivo
Tumorforsøkene in vivo ble utført ved anvendelse av fremgangsmåter beskrevet av W.T. Bradner, W.C. Rose,
J.E. Schurig, A.P. Florczyk, J.B. Huftalen og J.J. Catino
(1985) i Cancer Res. 45_, 6475-6481. De lymfatiske leukemier P-388 og L-1210 ble anvendt til innledende undersøkelse av hhv. mitomycin- og daunomycinderivater. Utvalgte forbindelser ble undersøkt overfor subkutant implanterte B16 melanomer ved intravenøs behandling. Forsøksparametre er vist i fotnotene til tabellene.
Kjemiske fremgangsmåter
Smeltepunkter ble bestemt på et Thomas-Hoover smelte-punktsapparat og er ukorrigerte. NMR-spektre av alle legemiddelderivater ble opptatt på et Bruker WM 360 MHz-apparat. Rutine-NMR-spektre ble opptatt på et IBM NR 80 MHz-apparat. IR-spektre ble opptatt med et Nicolet 5 DX spektrometer, og uv/vis-spektre ble opptatt med et Hewlett Packard 8450 apparat. Ortho-, meta- og para-mercaptobenzylalkoholer, 1-3, ble fremstilt i overensstemmelse med fremgangsmåtene ifølge R. Grice og L.N. Owens, (1963) i J. Chem. Soc. 1963, 1947-1954.
Fremstilling av de blandede disulfider 4- 7
Sulfenylkloridene avledet fra 2,2'-dithiodipyridin og di-(3-nitrofenyl)-disulfid, ble fremstilt i overensstemmelse med fremgangsmåten ifølge R. Matsueda og K. Aiba, Chem. Lett. (1978) 951-952. Alle spor av oppløsningsmiddel og klor ble fjernet under vakuum, og bunnfallet ble suspen-dert i CH2CI2for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 0,1 M. Oppløsninger (0,1 M, 0,9 ekvivalent) av 1-3 i CH2C12ble tilsatt i en porsjon. Etter 5 minutter ved romtemperatur ble blandingen ekstrahert med mettet NaHCO^, mettet NaCl og tørket (MgS04). Produktet ble renset med lynkromatografi under eluering med 30% EtOAc i petroleumsether.
3- nitrofenyldisulfid ( 4); utbytte 41%, smp. 83-84°C,
<1>H-NMR (CDC13) <T: 1,75 (s, 1H, OH) , 4,68 (s, 2H, CH20H) , 7,2-7,6 (q, 4H, ArH).
Ortho- 2- pyridyldisulfid ( 5): utbytte 64%, smp. 50-52°C,<1>H-NMR (CDC13) 6 i 4,60 (br d, 1H, OH), 4,90 (d, 2H, ArCH2), 7,0-7,8 (m, 7H, ArH), 8,4-8,5 (m, 1H, ArH).
Meta- 2- pyridyldisulfid ( 6): utbytte 86%, gul olje,
<1>H-NMR (CDC13) S : 1,8 (s, 1H, OH), 4,65 (s, 2H, ArCH2), 6,9-7,8 (m, 7H, ArH), 8,35-8,60 (m, 1H, ArH).
Para- 2- pyridyldisulfid ( 7): utbytte 55%, gul olje,
<X>H-NMR (CDC13) 6 : 1,4-1,9 (br s, 1H, OH), 4,65 (s, 2H, ArCH2), 7,0-7,8 (m, 7H, ArH), 8,3-8,6 (m, 1H, ArH).
Generell fremgangsmåte for fremstilling av carbamatene 12, 17- 21, 24, 25
Fremstilling av 24
En oppløsning av 137 mg (0,55 mmol) benzylalkohol 5 og 0,044 ml pyridin (0,55 mmol) i 1 ml tørt dioxan ble i løpet av 3 minutter tilsatt en omrørt oppløsning av 0,032 ml (0,275 mmol) triklormethylklorformiat i 0,5 ml dioxan. Etter omrøring i 15 minutter ble en oppløsning av MMA (96 mg,
0,275 mmol) og triethylamin (0,153 ml, 1,1 mmol) i 4 ml dioxan tilsatt hurtig. Etter 5 minutter ble oppløsningsmidlene av-dampet, og en oppløsning av bunnfallet i CH2C12 ble ekstrahert med mettet NaHC03, NaCl og tørket (MgS04). Produktet ble renset ved lynkromatografi på en 2x20 cm Si02~kolonne ved separering av upolart materiale med 30% ethylacetat i petroleumsether (300 ml) og deretter eluering av carbamatet med 5% methanol i kloroform. Produktet 24 ble erholdt som et amorft, rødt, fast stoff som ble oppløst i 3 ml CH2C12 og tilsatt dråpevis til 30 ml petroleumsether. Et fint rødt,
stoff ble erholdt (125 mg, 73%), smp. 148-150°C.
<1>H-NMR (CDC13) <$ :• 1,80 (s, 3H, CH3)f3,2 (s, 3H, 0CH3), 3,3-3,8 (m, 4H), 4,05 (s, 3H, 0CH3), 4,95 (m, 1H),
>5,3 (ABq, 2H, ArCH2), 7,1-7,4 (m, 4H, ArH), 7,5-7,7
(m, 3H, ArH), 8,47 (d, 1H, ArH).
IR (KBr) V : 3400, 1570 cm"<1>.
uv/vis (CH30H) X maks. nm (1 og£): 520 (3,01), 319 (4,03) , 285 (3,95) .
i
Fremgangsmåten ved fremstillingen av 24 ovenfor ble i alt vesentlig fulgt under egnet utskiftning av utgangs-thiofenolderivat og/eller legemiddel for fremstilling av de angitte forbindelser i figurene.
Benzylcarbamatdisulfid 12: utbytte 41% gult faststoff, smp. 158-160°C,<1>H-NMR (CDC13) 6 : 1,60 (s, 1H, NH), 5,25 (s, 2H, CH20H), 7,2-8,4 (m, 12H, ArH), uv/vis X maks. 313 nm (1 og £ = 4,18) .
MMC benzylcarbamat 17: utbytte 55% blått pulver, smp. 100-101°C (lit 102-104°) (H. Sasaki, E. Mukai, M. Hashida, T. Kimura og H. Sezaki (1983), Int. J. Pharmaceutics 15, 49-59).
MMC benzylcarbamatdisulfid 18: utbytte 63% blått pulver, smp. 96-98°C,<1>H-NMR (pyr-d5) 6: 1,90 (s, 3H, CH3)f3,07 (s, 3H, 0CH3), 3,4-3,55 (m, 2H), 3,8-4,05 (m, 3H), 4,6-5,0 (m, 3H), 4,85 (s, 3H), 5,35-5,70 (m, 3H), 6,8-7,7 (m, 7H, ArH), 8,35 (d, 1H, ArH), IR (KBr) v : 3400, 1692, 1600, 1552 cm"<1>, uv/vis (CH30H) X maks. 365 nm (log 2. = 4,32).
MMC benzylcarbamatdisulfid 19: utbytte 98% blått pulver, smp. 90-92°C,<1>H-NMR (pyr-d5) <f : 1,90 (s, 3H, CH3), 3,05 (s, 3H, CH3), 3,3-3,5 (m, 3H), 3,7 (m, 2H), 3,9-4,0 (m, 2H), .4,5-4,8 (m, 3H) , 4,80 (s, 3H) , 5,0-5,1 (m, 2H) , 5,50 (dd, 2H, ArCH»), 6,8-7,7 (m, 7H, ArH), 8,3-8,4 (m, 1H, ArH),
IR (KBr) J 3400, 2920, 1690, 1600, 1550 cm — 1, uv/vis (CH30H) maks. 357 nm (log t= 4,31).
MMC benzylcarbamatdisulfid 20; utbytte 92% blått pulver,
smp. 99°C (spaltn.),<1>H-NMR (pyr-d5) <£" : 1,95 (s, 3H, CH3), 3,15 (s, 3H, 0CH3), 3,4-4,2 (m, 6H), 4,6-5,0 (m, 2H), 5,20
(s, 2H, ArCH2), 5,6 (dd, 1H), 6,9-7,8 (m, 7H, ArH), 8,35-8,5 (m, 1H, ArH), IR (KBr) v : 3400, 2920, 1690, 1552 cm"<1>,
uv/vis (CH30H) A maks. 356 nm (log £ = 4,31).
MMC benzylcarbamatdisulfid 21: utbytte 70% blått pulver,
smp. 97-98°C, ^H-NMR (pyr-d5) 8 : 1,85 (s, 3H, CH3), 3,03
(s, 3H, CH3), 3,17 (m, 2H), 3,65 (d, 1H), 3,85-3,95 (m, 1H), 4,55 (d, 1H), 4,70 (t, 1H), 5,0-5,1 (m, 2H, ArCH2), 5,5
(dd, 1H), 7,2-7,9 (m, 7H), 8,30 (s, 1H, ArH), IR (KBr)
v: 3400, 2920, 2690, 1600, 1560, 1350 cm<-1>, uv/vis (CH30H) X max nm (logfc) 356 (4,32), 242 (4,50).
MMA benzylcarbamatdisulfid 23: utbytte 43% rødt pulver,
smp. 78-81°C,<1>H-NMR (pyr-d5) 6 : 1,83 (s, 3H, CH3), 3,05
(s, 3H, 0CH3), 3,35 (m, 2H), 3,7 (d, 1H), 3,85 (s, 3H, 0CH3), 3,9 (q, 1H), 4,2 (d, 1H), 4,6-4,9 (m, 2H), 5,08 (s, 2H, ArCH2), 5,46 (q, 1H), 7,0-7,6 (m, 5H, ArH), IR (KBr)
0: 3400, 2900, 1735, 1580, 1280 cm<-1>.
MMA benzylcarbamatdisulfid 25: utbytte 69% rødt pulver,
smp. 73°C (spaltn.),<1>H-NMR (pyr-d5) S : 1,83 (s, 3H, CH3) , 3,20 (s, 3H, 0CH3), 3,3-4,5 (m, 6H), 4,0 (s, 3H, 0CH3), 5,2
(s, 2H, ArCH2), 6,9-7,7 (m, 7H, ArH), 8,4-8,6 (d, 1H, ArH),
IR (KBr) ^ : 3400, 1690, 1580 cm"<1>, uv/vis (CH30H) A maks. nm (log;£) 520 (2,90), 3,9 (3,88), 285 (3,83).
MMA benzylcarbamatdisulfid 26: en oppløsning av 11,3 yliter (0,106 mmol) p-fluorthiofenol i 1 ml aceton ble tilsatt til
en oppløsning av 65 mg (0,106 mmol) 23 i 3 ml aceton i løpet av 3 minutter. Etter 5 minutter ble oppløsningsmidlet av-dampet, og produktet ble renset ved preparativ TLC under eluering med 5% CH30H i CHC13. Det ønskede produkt ble opp-samlet, oppløst i 2 ml CH2C12og utfelt ved dråpevis tilset-ning til 10 ml petroleumsether. Utbytte 26 mg (39%) rødt pulver, smp. 133-135°C.
<X>H-NMR (CDCI3) 6 : 1,80 (s, 3H, CH3), 3,18 (s, 3H, 0CH3), 3,30-3,70 (m, 6H), 4,05 (s, 3H, 0CH3), 4,2-4,3 (m, 2H), 4,87-4,97 (q, 1H), 5,1-5,25 (q, 2H, ArCH2), 6,95-7,05 (t, 2H, ArH), 7,2-7,4 (m, 5H, ArH), 7,60 (d, 1H, ArH), IR (KBr)
0 : 3400, 1690, 1580 cm"<1>, uv/vis (CH30H) A. maks. 338 nm.
MMA benzylcarbamatdisulfid 27 ble fremstilt ut fra 25 som beskrevet ved fremstillingen av 26. Utbytte av rødt pulver var 39%, smp. 70°C,<X>H-NMR (pyr-d,.)<f : 1,70 (s, 3H, CH3) f 3,05 (s, 3H, CH3), 3,3-3,4 (m, 2H), 3,7 (d, 1H), 3,85
(s, 3H, 0CH3), 3,80-4,0 (m, 2H), 4,2 (d, 1H), 4,7 (t, 1H), 5,05 (s, 2H, ArCH2), 5,47 (m, 1H), 6,8-7,0 (m, 2H, ArH), 7,3-7,5 (m, 2H, ArH), 7,35 (2, 4H, ArH), IR (KBr)
0: 3400, 1690, 1580 cm"<1>, uv/vis (CH30H) A maks. 518, 319 nm.
DAU benzylcarbamat 29: benzylklorformiat (6,3 yliter,
44,3 ymol) ble tilsatt til en oppløsning av 25 mg (44,3 ymol) DAU i 1 ml CH2C12inneholdende 12,4 ymol (88,6 ymol) triethylamin. Etter 2 minutter ved romtemperatur ble oppløs-ningen-delt mellom 0,1% CH3C00H (pH 4) og CHC13. CHC13-fasen ble vasket to ganger med pH = 4-bufferen for å fjerne uomsatt DAU, deretter med mettet NaCl og tørket (MgS04). Produktet ble erholdt som et findelt, rødt, fast stoff
(24 mg, 82%) som var ustabilt på silicagel, smp. 60°C (de-komp.).
<*>H-NMR (CDCI3) 8: 1,25 (d, 3H, CHCH3), 1,7-1,95 (m, 3H), 2,05-2,15 (m, 1H), 2,25-2,5 (m, 2H), 2,40 (s, 3H, COCH3), 3,1 (q, 2H), 3,6-3,7 (d, 1H), 3,8-4,0 (m, 1H), 4,05 (s, 3H, 0CH3), 4,15-4,3 (m, 1H), 4,4-4,6 (m, 1H), 5,03 (s, 2H, ArCH2), 5,05-5,50 (m, 3H), 7,1-7,5 (m, 6H, ArH), 7,76 (t, 1H, ArH), 8,05 (d, 1H, ArH), 13,28 (s, 1H, OH), 13,97 (s, 1H, OH),
IR (KBr) v: 3400, 1720 cm"<1>, uv/vis (CH30H) Xinsfcanm (log e) 494
(4,11), 478 (4,11), 289 (3,96), 252 (4,45), 234 (4,59).
DAU benzylcarbamatdisulfid 30 ble fremstilt ut fra DAU og 7 som beskrevet ved fremstillingen av 24. Produktet ble renset i overensstemmelse med rensingen av 29.
Utbytte av rødt pulver var 69%, smp. 75-78°C,<1>H-NMR (CDC13) 6: 1,25 (d, 3H, CHCH3), 1,7-1,9 (m, 2H), 2,05-2,37 (m, 3H), 2,40 (s, 3H, CH3), 3,10 (q, 2H), 3,6-3,9 (m, 2H). 4,08 (s, 3H, OCH3), 4,2 (d, 1H), 4,4 (br s, 1H), 4,98 (s, 2H, ArCH3), 4,05-5,45 (m, 3H), 7,0-7,65 (m, 8H, ArH), 7,77 (t, 1H, ArH), 8,0 (d, 1H, ArH), 8,4-8,45 (m, 1H, ArH), 13,28 (s, 1H, OH), 13,97 (s, 1H, 0H), IR (KBr) v: 3400, 2920,
1715 cm"<1>, uv/vis (CH3OH) A maks.nm (log e) 494 (3,93), 476 (3,93), 289 (4,12), 252 (4,51), 233 (4,63).
Reaksjon av MMC benzylcarbamatdisulfider 18- 20 med dithiothreitol
Til en 83:17 CH3OH:H20-oppløsning ved 30°C inneholdende 18, 19 eller 20 (0,81 mM) , tris-(hydroxymethyl)-amino-methanbuffer (17 mM), EDTA (0,08 mM) ved pH 7,2, ble tilsatt 100 mM dithiothreitol (sluttkonsentrasjon 2 mM). Frigivelsen av MMC ble målt ved HPLC under anvendelse av en 10 cm "Whatman Partasil 5 ODS-3" revers fase-C-18-kolonne og følg-ende gradientsystem: 30% CH30H i 0,1% acetat (pH 6) til 95% CH3OH i 6 minutter, fortsatt i 8 minutter, gjennomstrøm-ningshastighet 2 ml/minutt, påvisning ved 340 nm.
Et antitumor-pro-legemiddel inneholdende det alkohol-gruppehoIdige legemiddel, etoposid, som er bundet til disulfidbenzyldelen ved en carbonatbinding istedenfor en carbamatbinding, ble fremstilt ved vesentlig å følge den ovenfor beskrevne "generelle fremgangsmåte for fremstilling av carbamater" bortsett fra at etoposid (162 mg, 0,275 mmol) ble anvendt istedenfor MMA beskrevet ovenfor i eksemplene, for å tilveiebringe produktet som et hvitt, fast stoff.
Modellundersøkelser
For å fastslå at benzylcarbamater med disulfid-substituenter i egnede stillinger ville gjennomgå fragmentering av carbamatet ved disulfidreduksjon, ble det foretatt itiodellundersøkelser ved anvendelse av p-nitroanilin som en fraspaltbar gruppe. Fremstillingen av modell-benzylcarbamat 12 er avbildet i fig. 1. I vandig methanol som var bufferinnstilt til mellom pH 6 og 8, var 12 stabil i flere dager. Ved behandling med dithiothreitol ble disulfidbindingen imidlertid redusert, og p-nitroanilin ble frigjort. Den antatte reaksjonsvei for eliminering av p-nitroanilin er vist i fig. 2.
Reaksjonsforløpet ble overvåket med uv/vis-spektro-skopi hvor 14 ( Å maks. 371 nm) var lett gjenkjennelig i forhold til utgangsmaterialet 12 ( X maks. 313 nm). HPLC ble anvendt for å bekrefte frigivelsen av p-nitroanilin. Det ble vist at 14 ble dannet på en pH-avhengig måte, og at frigivelsen var hurtigere ved nøytrale eller basiske pH-verdier. Det ble også iakttatt en litt hurtigere frigivelse av 14 ved 37°C enn ved romtemperatur.
Fremstilling og reaktivitet av pro- legemidler
En rekke mitomycin- og daunomycinderivater ble fremstilt ved kondensering av legemidlene med benzylklorformiat eller klorformiatene 8-11 (fig. 3). Disulfidene 26 og 27 ble avledet fra 24 og 25 ved å erstatte thiopyridylgruppen med p-fluorthiofenol. De således erholdte legemiddelderivater var kun svakt oppløselige i vann, men kunne lett opp-løses i vandige, organiske oppløsninger.
I bufret, vandig methanol ved pH 7,2 gjennomgikk de tre derivater av mitomycin C 18, 19 og 20 hurtig reduksjon med dithiothreitol, men etterfølgende eliminering av mitomycin C skjedde ved forskjellig hastighet. Under reaksjonsbetingelsene frigjorde para-disulfidet (20) hurtigst mitomycin C (t-^2= 10 minutter) , og ortho-disulfidet (18) var signifikant langsommere (i^/2= 72 mi-nutter) • Som forventet, frigjorde meta-isomeren ikke noe mitomycin C, selv ikke etter 18 timer. Reduksjon av daunomycin-disulfid 30 førte til en lignende fragmenteringsreaksjon, og daunomycin ble frigjort. De enkle benzylcarbamater 17, 23 og 29 var stabile under reaksjonsbetingelsene.
In vitro forsøk
Legemiddelderivatene ble undersøkt for in vitro aktivitet på to humane lymfoid-cellelinjer, Namalwa og HSB-2. Cellene ble utsatt for legemidlene i 1 time i PBS, ble vasket og inkubert i 19 timer. Levedyktighet ble bestemt ved om-fanget av 3H-Thy-mkorporering i DNA i forhold til en ube-handlet kontrollgruppe. IC5Q-verdiene er vist i tabell 1.
Resultatene viser at de mest aktive MMC-derivater 18, 20 og 21 var de derivater som kunne gjennomgå den thiol-formidlede benzylcarbamat-eliminasjonsreaksjon. Disse forbindelser var faktisk signifikant mer aktive enn MMC selv. Det mest cytotoksiske MMC-pro-legemiddel var disulfidet 20 som var minst 20 ganger mer cytotoksisk enn MMC. De ikke-spaltbare MMC-derivater 17 og 19 var mye mindre cytotoksiske enn MMC. En lignende tendens kunne iakttas for DAU-derivatene 29 og 30. Det spaltbare DAU-pro-legemiddel 30 var mye mer cytotoksisk enn det ikke-spaltbare derivat 29, men noe mindre aktivt enn DAU. Alle MMA-derivatene var meget cytotoksiske. Under de betingelser som ble anvendt ved forsøket in vivo, var benzylcarbamat 23 mer aktivt enn MMA.
Forsøk in vivo
Tre murine tumormodeller ble anvendt til vurdering av in vivo-aktiviteten av legemidlene. De terapeutiske virkninger av optimale i.p. legemiddeldoser overfor i.p.-administrerte tumorer er vist i tabell 2. I rekken av MMC-derivater var det minst aktive middel 17, et ikke-spaltbart MMC-derivat. Det mest aktive MMC-derivat var para-benzylcarbamat-disulfidet 20 som var signifikant mere aktivt enn MMC overfor P388. Alle MMA-derivatene var mindre aktive
enn stamlegemidlet. De to daunomycinderivater 2 9 og 30 var inaktive.
Noen MMC- og MMA-derivater ble undersøkt for aktivitet overfor subkutant implanterte B16 melanomer. Ved disse forsøk ble legemidlene administrert i.v. på 1., 5. og 9. dag etter implantering av tumoren. Resultatene er vist i tabell 3. De spaltbare MMC-pro-legemidler 20 og 21 var nesten like aktive som MMC. Signifikant mindre aktivitet ble iakttatt for benzylcarbamat MMC 17. MMA viste seg å være mer aktiv enn MMC overfor denne tumormodell. De spaltbare pro-legemidler 24-27 var like aktive som MMA, idet 24 viste litt større aktivitet. Det ikke-spaltbare MMA-derivat 23
var mye mindre aktivt enn MMA.
Det er utviklet en hittil ukjent klasse av pro-legemidler hvor legemiddelfrigivelse skjer under svake reduk-sjonsbetingelser. Fragmenteringen skyldes ustabiliteten av ortho- og para-substituerte mercaptobenzylcarbamater. Kjemisk beslektede reaksjoner er iakttatt med benzisoxazolylcarba-mater under basiske betingelser (D.S. Kemp og CF. Hoyng
(1975) Tetrahedron Lett. 1975, 4625-4628) og amidobenzyl-carbamater etter amidbindingshydrolyse (P.L. Carl,
P.K. Chakrovarty og J.A. Katzenellenbogen (1981) J. Med.
Chem. 24.» 479-480) . Disse reaksjoner er alle mekanistisk beslektede og innledes ved frigivelse av elektrontettheten fra det avbeskyttede heteroatom i7T-systemet. Dette fører til frigivelsen av C02og aminkomponenten i carbamat. De enestående trekk ved de heri beskrevne fragmenteringer er anvendelsen av svovel som heteroatom og utstøtelse av et legemiddel i kjemisk umodifisert aktiv form. Videre beskrives en sammenheng mellom heteroatom-orientering og reaksjons-hastighet. Legemiddelutstøtelse skjer hurtigst ved para-orientering og langsommere når disulfidet befinner seg i ortho-stilling i forhold til carbamatet. Som forventet, induseres ingen fragmentering ved reduksjon av meta-benzylcarbamatdisulfider. Hastighetsforskjellene mellom ortho-
og para-mercaptobenzylcarbamat-fragmentering kan være av betydning ved utviklingen av optimal frigivelseshastighet.
De pro-legemidler av MMC som var i stand til fragmentering (18, 20, 21), var vesentlig mer cytotoksiske enn MMC, mens de stabile derivater (17 og 19) var mye mindre cytotoksiske (tabell 1). På lignende måte var DAU-pro-legemidlet 30 mer aktivt enn det stabile derivat 29. Dette viser at frigivelsen av MMC og DAU fra pro-legemidlene er nødvendig for maksimal cytotoksisk virkning. Det faktum at 18, 20 og 21 har lavere IC50~verdier enn MMC, kan antyde at de opptas mer effektivt eller frigir andre cytotoksiske midler, som thiokinonmethider under fragmentering (fig. 2).
Det er bemerkelsesverdig at en sammenheng mellom legemiddelfrigivelse og cytotoksisitet ikke kunne iakttas for MMA-derivatene. Det ikke-spaltbare MMC carbamat 23 var mer cytotoksisk enn MMA eller noe annet MMA-pro-legemiddel. MMA har vist seg å avvike fra MMC på et antall vesentlige områder. Legemidlet.har et mye lavere reduksjonspotensial og er mottakelig for nucleofilt angrep i 7-methoxystillingen (B.S. Iyengar, H. Cheng, W.A. Remers og W.T. Bradner (1981) J. Med. Chem. _2_4, 925-981) . Det er derfor mulig at lege-midlet utøver den cytotoksiske virkning via reduksjonsveier som omfatter reduksjon eller alkylering, selv med substi-tuenter på aziridinylnitrogenatomet. Alternativt er det mulig at carbamatet på 23 hydrolyseres under de anvendte betingelser ved in vitro forsøk.
De cytotoksiske virkninger av MMC-pro-legemidlene samsvarer godt med P-388-forsøkene (tabell 2). De ikke-spaltbare MMC-derivater 17 og 19 var mindre aktive enn MMC overfor P-388, noe som stemmer overens med det som ble iakttatt in vitro. Høyere aktiviteter ble iakttatt for de spaltbare pro-legemidler 18, 20 og 21. Det para-substituerte MMC-benzylcarbamat 20 var ikke bare 20-25 ganger mer cytotoksisk enn MMC i vevskultur, men også vesentlig mer aktivt i P-388-tumormodellen.
Alle de spaltbare MMC og MMA pro-legemidler som ble undersøkt overfor subkutant implantert B16 melanomer, viste antitumoraktivitet (tabell 3). De ikke-spaltbare derivater 17 og 23 viste liten aktivitet. Det faktum at der er liten forskjell mellom de spaltbare pro-legemidler og stamlege-midlene overfor B16, kan antyde at pro-legemidlene gjennomgår fragmentering når de administreres systemisk. En slik nedbrytning er tydeligvis ikke så uttalt ved i.p.-administrering av tumorlegemidler, idet et legemiddel 20 var vesentlig mer aktivt enn MMC (tabell 2). Disse iakttagelser kan antyde at forbedret aktivitet av i.v. administrerte pro-legemidler kan oppnås med mer stabile disulfidderivater. Stabiliteten av disulfider in vivo kan påvirkes av elek-troniske og steriske faktorer. Det har vist seg at sterisk hindring kan stabilisere disulfidbindinger i f.eks. anti-stoff-ricin A immunkonjugatkjeder (N.R. Worrell, A.J. Cumber, G.D. Parnell, A. Mirza, J.A. Forrester og W.C.J. Ross (1986) Anti-Cancer Drug Design 1, 179-188). Stabiliteten in vivo av de beskrevne pro-legemidler kan kontrolleres på lignende måte.
Det er følgelig iakttatt og utviklet en hittil ukjent klasse av antitumor-pro-legemiddelderivater som gjennomgår fragmentering ved disulfidbindingsreduksjon. Det har vist seg at en slik fragmentering fører til frigivelse av et kjemisk umodifisert stamlegemiddel. Pro-legemidlene er minst like cytotoksiske som stamlegemidlet in vitro, og flere pro-legemidler har uttalt antitumoraktivitet in vivo. Det er mulig at den heri beskrevne frigivelsesstrategi kan være nyttig ved utvikling av legemiddelderivater som kan virke selektivt på celler med forhøyet innhold av reduksjonsmidler, eller på vev i hypoxiske omgivelser.

Claims (5)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av en antitumor-pro-legemiddelforbindelse med generell formel (I)
hvori D er en antitumorlegemiddeldel til hvis skjelett er knyttet en kjemisk reaktiv funksjonell gruppe ved hjelp av hvilken lege-middelskjelettet er bundet til disulfidbenzyloxycarbonyl-gruppen, idet D er avledet fra gruppen bestående av en primær aminogruppe med formel R^H, en sekundær aminogruppe med formel R1!*2!*- og en alkoholgruppe med formel R<1>0-, hvoriR<1>, nårR<1>og R2 er innbyrdes uavhengige, er skjelettet av legemiddeldelen når D er avledet fra gruppen bestående av en primær aminogruppe og en sekundær aminogruppe, R<2>, nårR<1>og R2 er innbyrdes uavhengige, valgt fra usubstitu-erte og substituerte, forgrenede og lineære alkylgrupper med 1-10 carbonatomer, hvor substituenten er valgt blant 1-3 alkoxygrupper med 1-3 carbonatomer og 1-3 halogenatomer, usubstituert og substituert fenyl, hvor substituenten er valgt blant 1-3 alkylgrupper med 1-3 carbonatomer, 1-3 alkoxygrupper med 1-3 carbonatomer og 1-3 halogenatomer, og usubstituert og substituert fenalkyl, hvori fenyldelen i tilfelle av substitu-sjon er substituert på samme måte som beskrevet ovenfor for substituert fenyl, og hvor alkyldelen er en polyalkylengruppe med 1-3 carbonatomer, eller hvor R<1>og R<2>sammen representerer skjelettet av legemiddeldelen D hvor en divalent gruppe er bundet kjemisk til nitrogenatornet som inngår i den sekundære aminogruppe, og R3 er en organisk funksjonell gruppe valgt blant 3-nitrofenyl, 2-pyridyl og 4-fluorfenyl, og hvor orienteringen av gruppen -S-S-R<3>på benzylcarbamatdelens fenyl-ring er valgt blant orto- og para-stillinger, karakterisert vedat man omsetter triklormethylklorformiat med benzylalkohol som er substituert i orto-eller para-stilling med en 3-nitrofenyldithio- eller 2-pyridyldithiogruppe og enn videre med et anti-tumorlegemiddel med formelen D, hvori D har den ovenfor angitte betydning i et inert løsningsmiddel, og om nødvendig utskifter 2-pyridylgruppen med en 4-fluorfenylgruppe ved omsetning med p-fluorthiofenyl.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisert vedat man ved omsetningen anvender et anti-tumorlegemiddel D som er valgt blant legemidler inneholdende primære eller sekundære aminer.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2,karakterisert vedat man ved omsetningen anvender et anti-tumorlegemiddel D som er valgt blant mitomycin-C, mitomycin-A, daunomycin, adriamycin, aminopterin, actinomycin, oleomycin og derivater derav.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisert vedat man som anti-tumorlegemiddel D ved omsetningen anvender en alkohol med formel E^ OH hvori R<1>har den i krav 1 angitte betydning.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 4,karakterisert vedat man som anti-tumorlegemiddel ved omsetningen anvender etoposid.
NO885200A 1987-11-23 1988-11-22 Fremgangsmaate for fremstilling av en antitumor-prolegemiddelforbindelse NO169959C (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12431487A 1987-11-23 1987-11-23

Publications (4)

Publication Number Publication Date
NO885200D0 NO885200D0 (no) 1988-11-22
NO885200L NO885200L (no) 1989-05-24
NO169959B true NO169959B (no) 1992-05-18
NO169959C NO169959C (no) 1992-08-26

Family

ID=22414126

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO885200A NO169959C (no) 1987-11-23 1988-11-22 Fremgangsmaate for fremstilling av en antitumor-prolegemiddelforbindelse

Country Status (11)

Country Link
EP (1) EP0317956A3 (no)
JP (1) JPH01165586A (no)
KR (1) KR910007977B1 (no)
AU (1) AU605648B2 (no)
DK (1) DK651188A (no)
FI (1) FI885360A (no)
IL (1) IL88427A0 (no)
NO (1) NO169959C (no)
NZ (1) NZ226956A (no)
PT (1) PT89063B (no)
ZA (1) ZA886812B (no)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0540263A1 (en) * 1991-10-23 1993-05-05 Cancer Research Campaign Technology Limited Bacterial nitroreductase for the reduction of CB 1954 and analogues thereof to a cytotoxic form
US6159706A (en) * 1997-12-23 2000-12-12 Newbiotics, Inc. Application of enzyme prodrugs as anti-infective agents
US7303760B2 (en) 1999-04-23 2007-12-04 Alza Corporation Method for treating multi-drug resistant tumors
US7238368B2 (en) 1999-04-23 2007-07-03 Alza Corporation Releasable linkage and compositions containing same
CA2369595C (en) * 1999-04-23 2010-10-05 Alza Corporation Conjugate having a cleavable linkage for use in a liposome
TW200616604A (en) 2004-08-26 2006-06-01 Nicholas Piramal India Ltd Nitric oxide releasing prodrugs containing bio-cleavable linker
DE102005042044A1 (de) * 2005-09-02 2007-03-08 Behr Gmbh & Co. Kg Mechanisch gefügter Wärmetauscher

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0006227B1 (en) * 1978-06-16 1984-12-27 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antithrombotic pharmaceutical preparation containing 2,2'-dithiobis benzamide derivatives and new 2,2'-dithiobis benzamide derivatives
EP0116208B1 (en) * 1982-12-07 1988-03-30 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Mitomycin analogues
US4803212A (en) * 1983-04-11 1989-02-07 Bristol-Myers Company Amino disulfides
PL138836B1 (en) * 1983-07-08 1986-11-29 Politechnika Gdanska Process for preparing novel n-substituted derivatives of anthracycline antibiotics
US4642352A (en) * 1983-12-23 1987-02-10 Bristol-Myers Company Acylamino mitosanes
JPS60255789A (ja) * 1984-06-01 1985-12-17 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd マイトマイシン誘導体，その製造法および抗腫瘍剤
AU581673B2 (en) * 1984-09-04 1989-03-02 Bristol-Myers Company Substituted 7-oxomitosanes
WO1986004898A1 (en) * 1985-02-22 1986-08-28 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Disulfide compounds and antineoplastic agents
IL77334A (en) * 1985-12-16 1991-04-15 Univ Bar Ilan Synthesis of 9-epipodophyllotoxin glucoside derivatives and some novel intermediates therefor

Also Published As

Publication number Publication date
NO885200D0 (no) 1988-11-22
JPH01165586A (ja) 1989-06-29
KR910007977B1 (ko) 1991-10-05
FI885360A0 (fi) 1988-11-18
NZ226956A (en) 1991-11-26
KR890007725A (ko) 1989-07-05
EP0317956A2 (en) 1989-05-31
FI885360A (fi) 1989-05-24
NO169959C (no) 1992-08-26
DK651188D0 (da) 1988-11-22
DK651188A (da) 1989-05-24
PT89063B (pt) 1993-03-31
AU2582688A (en) 1989-05-25
EP0317956A3 (en) 1990-02-21
NO885200L (no) 1989-05-24
IL88427A0 (en) 1989-06-30
AU605648B2 (en) 1991-01-17
ZA886812B (en) 1989-07-26
PT89063A (pt) 1988-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7230004B2 (en) Cyclopamine analogues and methods of use thereof
KR101381454B1 (ko) 열역학적으로 안정한 형태의 ｂａｙ 43-9006 토실레이트
NO169958B (no) Fremgangsmaate for fremstilling av et konjugat av et antitumorlegemiddel
CZ20033296A3 (cs) Benzoylsulfonamidy a sulfonylbenzamidiny jako protinádorové sloučeniny
CN113993519A (zh) 细胞周期蛋白依赖性激酶12(cdk12)的降解剂及其用途
WO2010005534A2 (en) Proteasome inhibitors for selectively inducing apoptosis in cancer cells
TWI843806B (zh) 作為ｎｒｆ２活化劑之羥基吡啶并氧氮呯
CA3135740A1 (en) Cancer treatments targeting cancer stem cells
EP2129653B1 (en) Novel p2y12 receptor antagonists
NO169959B (no) Fremgangsmaate for fremstilling av en antitumor-prolegemiddelforbindelse
CN116082312A (zh) 用作cdk7激酶抑制剂的化合物及其应用
CN106977472B (zh) 苯并异硒唑酮修饰亚硝脲类化合物合成及其应用
CN114450278B (zh) 一个烟醇醚衍生物的马来酸盐及其晶型和应用
KR100352734B1 (ko) 3&#39;-아지리디노-안트라사이클린유도체
EP4365182A1 (en) Gemcitabine anticancer derivative and anticancer pharmaceutical use
KR20190020122A (ko) 라파마이신 신호전달 경로 저해제의 기계적 표적 및 이의 치료학적 적용
US5616563A (en) Glutathione N-hydroxycarbamoyl thioesters and method of inhibiting neoplastic growth
CN107383015A (zh) 烷硫端基寡PEG修饰的氨基吡唑并[3,4‑d]嘧啶衍生物及抗非小细胞肺癌的应用
CN108864114B (zh) 选择性a2a受体拮抗剂
CA2070799C (en) Thioxanthenone antitumor agents
CN112608326B (zh) 呋喃并[2,3-b]喹啉-3,4（2H,9H)-二酮衍生物、其制备方法及应用
CN115417877B (zh) 组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备和在制备抗癌症药物上的应用
RU2809986C2 (ru) Новые производные феосферида, обладающие цитотоксической, противоопухолевой активностью и способностью преодолевать лекарственную устойчивость
WO2024125595A1 (zh) 吉西他滨抗癌衍生物及其抗癌医药用途和制备方法
AU768570B2 (en) Benzimidazole compounds