NL8002690A - Heterocyclische derivaten van met oxyimino gesubsti- tueerde cefalosporinen, werkwijzen ter bereiding ervan en farmaceutische en veterinaire preparaten, die deze cefalosporinederivaten bevatten. - Google Patents

Description

' N.O. 28.983 -1- ïïitvinders: Giuliano Nannini, Ettore Perrone, Ferruccio Casabuona, Silvio Graaao.

Heterocyclische derivaten van met oxyimino gesubstitueerde cefalo-sporinen, werkwijzen ter bereiding ervan en farmaceutische en veterinaire preparaten, die deze cefalosporinederivaten bevatten.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op heterocyclische derivaten van met oxyimino gesubstitueerde cefalosporinen, werkwijzen ter bereiding ervan, farmaceutische en veterinaire preparaten die deze cefalosporinederivaten bevatten, alsmede werkwijzen ter be-5 reiding van de farmaceutische en veterinaire preparaten.

De verbindingen van de uitvinding hebben de algemene formule 1, waarin R een -(CH_) -COOR· voorstelt, waarin n nul, 1 of 2 is en R' 2 n een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen voorstelt, of waarin R een -NR‘Rn of -CONR'Rn-groep voorstelt, waarin 10 elk van de groepen R· en R", die gelijk of verschillend kunnen zijn een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen voorstellen, R^ een waterstofatoom of een de aminogroep beschermende groep voorstelt, 15 R^ een waterstofatoom, een de hydroxylgroep beschermende groep of een rechte of vertakte, verzadigde of onverzadigde alifatische koolwaterstofgroep met 1-6 koolstofatomen, voorstelt, die niet gesubstitueerd of gesubstitueerd kan zijn met een substituent zoals (a) hydroxy, (b) cyaan, (c) -GOOR', waarin R' de hiervoor ver-20 melde betekenissen heeft en/of (d) -C0NR,R,f, waarin R’ en R" de hiervoor vermelde betekenissen bezitten, en x 0, 1 of 2 is.

De onderhavige uitvinding heeft eveneens betrekking op farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten van de verbindingen met for-23 mule 1, alsmede alle mogelijke isomeren, bijvoorbeeld syn- en anti-isomeren, cis- en trans-isomeren en optische isomeren, en hun mengsels, de metabolieten voorzien van antibacteriele activiteit en de metabolische voorprodukten van de verbindingen met formule 1,

In de formules volgens de uitvinding betekent de golflijn (|), 30 dat de oxyiminogroep zowel in de syn- als in de anti-configuratie kan zijn.

Zoals hiervoor vermeld vallen de afzonderlijke syn- en anti-isomeren van de verbindingen met formule 1 en hun mengsels binnen het kader van de uitvinding.

35 De keten gebonden aan het koolstofatoom op de 7-plaats is steeds een 7P-keten.

800 2 6 90 -2-

In de verbindingen met formule 1 kan de 73-*keten één van beide tautomere vormen met de formule 1A (thiazolinevorm) en 1B (thiazoolvorm) hebben.

De uitvinding omvat zowel de verbindingen met formule 1, waarin 5 de 7β-keten in de thiazolinevorm (1A) is als die, waarin de 7P-keten in de thiazoolvorm (1B) is, alsmede de mengsels ervan.

Wanneer x 1 is zijn de resulterende verbindingen sulfoxiden en kunnen in de B- of S-configuratie zijn. Wanneer x 2 is zijn de verbindingen sulfonen.

is d>eze 10 Wanneer R^ een de aminogroep beschermende groep is,vbijvoor- beeld één van de beschermende groepen, die gewoonlijk worden toegepast in de peptidechemie, bijvoorbeeld formyl, een eventueel met halogeen gesubstitueerd alifatisch acyl met 1-6 koolstofatomen, bij voorkeur een chlooracetyl- of dichlooracetyl-, tert.butoxycarbonyl-, 15 p-nitrobenzyloxycarbonyl- of tritylgroep.

Wanneer B2 een de hydroxylgroep beschermende groep is, kan deze bijvoorbeeld een formyl-, acetyl-, chlooracetyl-, dichlooracetyl-, trifluoracetyl-, tetrahydropyranyl-, trityl- of silylgroep, in het bijzonder trimethylsilyl of dimethyl-tert.butylsilyl zijn.

20 Wanneer R^ een alifatische koolwaterstofgroep met 1-6 kool stofatomen is, is deze bij voorkeur alkyl met 1-6 koolstofatomen, in het bijzonder alkyl met 1-3 koolstofatomen of alkenyl of 2 of 3 koolstofatomen.

Een voorkeurs-groep van verbindingen volgens de uitvinding zijn 25 de syn-isomeren van de verbindingen met formule 1, waarin R -NH2, -NHCH^, -COOH, -C0NH2 of -CH2C00H voorstelt, R„ waterstof voorstelt, CH, R2 waterstof, methyl, ethyl, -CH2-C00H of -C-C00H, -CH2CN, -CH2-C0NH2 of -CH=CH-C00H voorstelt, CH^ 30 x 0, 1 of 2 is, en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan.

Een groep verbindingen volgens de uitvinding, die in het bijzonder de voorkeur verdienen, zijn de syn-isomeren van de verbindingen met formule 1, waarin 35 R -NH2, -COOH of -CH2C00H voorstelt, R^ waterstof voorstelt, R2 waterstof, methyl of ethyl voorstelt, x 0 is, en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan.

^0 Verbindingen volgens de uitvinding, die meer in het bijzonder 80 0 2 6 90 * ? -3- de voorkeur verdienen, zijn de syn-isomeren van de verbindingen met formule 1, waarin B -NH2 of -COOH, B^ waterstof, 5 E2 methyl of ethyl, x 0 voorstellen, en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan.

Farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten van verbindingen met formule 1 zijn zouten met anorganische zuren, bijvoorbeeld 10 zoutzuur en zwavelzuur, met organische zuren, bijvoorbeeld citroenzuur, wijnsteenzuur, appelzuur, maleinezuur, amandelzuur, fumaarzuur en methaansulfonzuur, met anorganische basen, bijvoorbeeld alkalime-taal, in het bijzonder natrium en kalium, aardalkalimetaal, in het bijzonder calcium en aluminium en alkalimetaal- of aardalkalimetaal-15 carbonaten, zouten (die alkalimetaal- en aardalkalimetaalzouten, die vormbaar zijn door reactie met hydroxiden, carbonaten of waterstof-carbonaten en het aluminiumzout door reactie met aluminiumhydroxide) of met organische basen, bijvoorbeeld organische aminen, in het bijzonder lysine, triêthylamine, procaine, dibenzylamine, N-benzyl-β-20 fenethylamine, (N.N*-dibenzyl)ethyleendiamine, dehydroabiëtylamine, N-ethylpiperidine, diethanolamine, N-methylglucamine, tris(hydroxy-methylamino)methaan en dergelijke. Ook inwendige zouten (dat wil zeggen zwitterionen) vallen binnen het kader van de uitvinding.

Specifieke voorbeelden van verbindingen volgens de uitvinding 25 zijn de volgende: (1) 3-[(8 -amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); (2) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-30 amino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-5-cefem-4-carbon- zuur (syn-isomeer); (3) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-cyaanmethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 35 (*0 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-bJpyridazinyl)thiomethyl]-7-aceet-amidoJ-3-cefem-1»—carbonzuur (syn-isomeer); (5) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-( 2-amino-4-thiazolyl)-2-carboxymethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4— carbonzuur (syn-isomeer); kO (6) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2- 800 2 6 90 -4- Λ amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1(B)-sulfinyl-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); (7) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1(S)-sulfinyl-3- 5 cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); (8) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2- amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(B)-sulfinyl-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); (9) 3-[(8-araino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2- 10 amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(S)-sulfinyl-3- cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); (10) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1-sulfonyl-3-cefem- 4-carbonzuur (syn-isomeer); 15 (11) 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1-sulfonyl-3-cefem- 4-carbonzuur (syn-isomeer); (12) 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2- . (2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-car- 20 bonzuur (syn-isomeer); (13) 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); (14) 3-[(8-aminooarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 25 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-ce fem-4- carbonzuur (syn-isomeer); (15) 3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]3-cefem-4-· carbonzuur (syn-isomeer); 30 (16) 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); (17) 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4- 35 carbonzuur (syn-isomeer); (18) 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); (19) 3—[(8-carboxymethyl-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 40 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4- 800 2 6 90 f % * -5- carbonzuur (syn-isomeer); (20) 3-[(8-p-carboxyethyl-6-tetrazool[l .3-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-raethoxyiminoaceetaπlido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 5 en de farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan.

De struktuurformules van de hiervoor genummerde verbindingen uitgedrukt in formule 1 zijn hierna in tabelvorm opgenomen.

Tabel.

Verbinding B R^ R2 x 10 1 -NH2 Η H nul 2 -NH2 H -CH^ nul 3 -NH2 H -CH2CN nul k -NH2 H -CH2C0NH2 nul 5 -NH2 H -CH2-C00H nul 15 6 -nh2 η h Kr) 7 -NH2 H H 1(S) 8 -nh2 h -ch3 Kr) 9 -NH2 H -CH3 Ks) 10 -NH2 ïï H 2 20 11 -NH2 H -CH3 2 12 -C00H Η H nul 13 -C00H H -CH, nul ______________2___ 14 -C0NH2 η H nul 13 -C0NH2 H -CH3 nul 25 16 -NHCH3 Η H nul 17 -NHCH-j H -CH3 nul 18 -C00H H -C_Hc nul ______ 19 -CH2C00H H -CH3 nul 20 -(CH2)2C00H H -CH3 nul 30 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen bereid worden vol gens een werkwijze bestaande uit: A) omzetting van een verbinding met formule 2, waarin x en R de hier- nnn ? n on -6- voor vermelde betekenissen bezitten en E een aminogroep of een groep met de formule -N=C=Y voorstelt, waarin Y zuurstof of zwavel is, of een reactief derivaat daarvan, met een verbinding met formule 3, waarin R^ en R^ elk van de hiervoor vermelde betekenissen hebben met 5 uitzondering van waterstof, of een reactief derivaat van een dergelijke verbinding met formule 3» en desgewenst verwijdering van de eventueel aanwezige beschermende groepen, of B) omzetting van een verbinding met formule waarin R^, R£ en x de hiervoor vermelde betekenissen bezitten, of een zout daarvan, met 10 een verbinding met formule 5» waarin R de hiervoor vermelde betekenissen heeft, of een reactief derivaat van een dergelijke verbinding met formule 5» en desgewenst verwijdering van eventueel aanwezige beschermende groepen, of C) omzetting van een verbinding met formule 6, waarin Rj, 2^ en x de 13 hiervoor vermelde betekenissen bezitten en Z een halogeenatoom, of een zout of een ester ervan voorstelt, met thioureum, waarbij een verbinding met formule 1 verkregen wordt, waarin R^ waterstof voorstelt, en desgewenst verwijdering van de eventueel in R^ aanwezige beschermende groep, en/of desgewenst omzetting van een verbinding 20 met formule 1 tot een zout daarvan of het verkrijgen van een vrije verbinding uit een zout en/of desgewenst het splitsen van een mengsel van isomeren tot de afzonderlijke isomeren en/of desgewenst omzetting van een verbinding met formule 1 in een andere verbinding met formule 1, 25 In de verbindingen met de formules 2, k en 6 kunnen, indien noodzakelijk, de vrije carboxylgroepen beschermd zijn op een gebruikelijke wijze voordat reactie plaats heeft. Voorbeelden van beschermende groepen zijn groepen die gewoonlijk worden toegepast in de synthese van peptiden, bijvoorbeeld tert.butyl, benzhydryl, p-meth-30 oxybenzyl, p-nitrobenzyl, trityl en trialkylsilyl. De beschermende groepen kunnen vervolgens aan het einde van de reactie op een bekende wijze verwijderd worden, bijvoorbeeld door voorzichtige hydrolyse met zuur of door katalytische hydrogenering, bijvoorbeeld met Pd/C bij omgevingsdruk. Aangezien echter verbindingen met formule 1,die 35 dergelijke beschermende groepen bevatten, behoren tot de onderhavige uitvinding, is verwijdering van de beschermende groepen geen essentiële werkwijzetrap.

De uitgangsverbindingen, die gebruikt worden bij elk van de hiervoor vermelde werkwijzen A) tot C) kunnen, wanneer één of meer 40 asymmetrische koolstofatomen aanwezig zijn, optisch actieve of race- 800 2 6 90 ✓ -7- mische verbindingen zijn. Voorts kunnen de uitgangsverbindingen syn-of anti-isomeren en hun mengsels zijn, alsmede cis- of trans-isome-ren en hun mengsels.

Een reactief derivaat van de verbinding met formule 2 kan bij-5 voorbeeld een aminezout, een silylester of een metaalzout zijn. Een reactief derivaat van de verbinding met formule 3 is bijvoorbeeld een acylhalogenide, een anhydride, een gemengd anhydride, een azide, een reactieve ester of een zout, bijvoorbeeld zout gevormd met alka-limetalen of aardalkalimetalen, ammoniak of een organische base. Een 10 reactieve ester kan bijvoorbeeld p-nitrofenylester, 2.^.dinitrofenyl-ester, pentachloorfenylester, N-hydroxysuccinimideêster en N-hy-droxyftaalimideester zijn,

In de verbinding met formule 6 is Z bij voorkeur chloor of broom.

15 Een zout van een verbinding met formule 6 is bijvoorbeeld een alkalimetaal- of aardalkalimetaalzout van de -COOH-groep in de verbinding. Ook kunnen de vrije carboxyl-, carboxymethyl- of carboxy-ethylgroepen, mogelijk voorgesteld door de B-substituent, op analoge wijze in zoutvorm zijn gebracht.

20 De reactie tussen de verbinding met formule 2 of een reactief derivaat daarvan en de verbinding met formule 3 of een reactief derivaat daarvan kan bij omgevingstemperatuur of onder koeling, bij voorkeur van ongeveer -50°C tot ongeveer +40°C, in een geschikt oplosmiddel, bijvoorbeeld aceton, dioxan, tetrahydrofuran, acetonitri-25 le, chloroform, dichloormethaan, N.N-dimethylformamide, 1.2-dichloor-ethaan of in een mengsel van water en een oplosmiddel, dat met water mengbaar is, en, indien noodzakelijk, bij aanwezigheid van een base, bijvoorbeeld natriumwaterstofcarbonaat, kaliumwaterstofcarbonaat of een trialkylamine, of bij aanwezigheid van een ander zuurbindend 30 middel, zoals een epoxyalkaan, bijvoorbeeld epoxypropaan, worden uitgevoerd.

Wanneer de verbinding met formule 3 wordt omgezet met de verbinding met formule 2, waarin E amino is, als een vrij zuur of als een zout, is het gewenst, dat de reactie wordt uitgevoerd bij aan-35 wezigheid van een condensatiemiddel, bijvoorbeeld N.N'-dicyclo-hexylcarbodiimide, De eventuele verwijdering van de beschermende groepen kan bij het einde van de reactie op bekende wijze worden uitgevoerd. Bijvoorbeeld kan de tert.butoxycarbonylgroep verwijderd worden door behandeling met een oplossing van een zuur in water (bij-kO voorbeeld HC1 of ^SO^) en de monochlooracetylgroep kan verwijderd ann ? fi Qft -8- worden door behandeling met thioureum. De formyl- en de trifluorace-tylgroepen kunnen verwijderd worden door behandeling met kaliumwater-stofcarbonaat in water bevattende methanol; de tetrahydropyranyl-groep door behandeling met verdund zoutzuur en de tritylgroep door 5 behandeling met mierezuur of trifluorazijnzuur.

De reactie tussen de verbinding met formule k en het heterocyclische thiol met formule 5 kan worden uitgevoerd in water of in een mengsel van water en een organisch oplosmiddel, bijvoorbeeld aceton, ethanol, dioxan of tetrahydrofuran, bij aanwezigheid van ongeveer 10 twee equivalenten van een base, bijvoorbeeld natriumwaterstofcarbo-naat. De reactietemperatuur varieert bij voorkeur van ongeveer 5°C tot ongeveer 90°C en de pH wordt bij voorkeur gehandhaafd van ongeveer 5 tot ongeveer 7»5· Desgewenst kan een buffer worden gebruikt, bijvoorbeeld natriumfosfaat of natriumacetaat. Op andere wijze kan 15 dezelfde reactie worden uitgevoerd zonder een base en in een absoluut watervrij oplosmiddel, bij temperaturen die variëren van ongeveer 50°G tot ongeveer 120°C en voor reactieduren, die variëren van enkele uren tot enkele dagen. Het voorkeurs-oplosmiddel is acetonitrile en een inerte atmosfeer (bijvoorbeeld stikstof) kan raadzaam 20 zijn om de oxydatie van het heterocyclische thiol met formule 5 te voorkomen. De daarop volgende eventuele verwijdering van de beschermende groepen kan volgens bekende methoden worden uitgevoerd, bijvoorbeeld zoals hiervoor aangegeven.

De reactie tussen de verbinding met formule 6 of een zout of 25 een ester ervan met thioureum wordt bij voorkeur uitgevoerd in een aprotisch oplosmiddel, bijvoorbeeld N.N-dimethylformamide, N.N-di-methylaceetamide, dimethylsulfoxide, acetonitrile, hexamethylfosfor-triamide of in een mengsel van deze oplosmiddelen. De reactietemperatuur varieert bij voorkeur van ongeveer 0°C tot ongeveer 90°C. De 30 daarop volgende eventuele verwijdering van de beschermende groep, mogelijk aanwezig als Rg» kan worden uitgevoerd zoals hiervoor aangegeven.

Zowel de eventuele omzetting van een verbinding met formule 1 tot een zout ervan en de bereiding van een vrije verbinding uit een 35 zout of ester, alsmede de eventuele splitsing van een mengsel van isomeren tot de afzonderlijke isomeren en de eventuele omzetting van een verbinding met formule 1 tot een andere verbinding met formule 1, kunnen volgens bekende methoden worden uitgevoerd. Zo kunnen bijvoorbeeld de verbindingen met formule 1, waarin x 1 is en waarin het if o sulfoxide in de S-configuratie is, bij voorkeur worden verkregen uit 800 2 6 90 $ t # -9- de overeenkomstige verbindingen met formule 1, waarin x nul is, door behandeling met een oxyderend middel, in het bijzonder een perzuur, bijvoorbeeld perbenzoëzuur, permaleïnezuur, natriumperjodaat, waterstofperoxide of een mengsel daarvan, met een anorganisch of orga-5 nisch zuur, bijvoorbeeld mierezuur, azijnzuur of trifluorazijnzuur,

De reactie kan worden uitgevoerd in een oplosmiddel, bijvoorbeeld dioxan, tetrahydrofuran, chloroform, dichloormethaan, mierezuur, azijnzuur, benzeen, N.N-dimethylformamide, N.N-dimethylaceetamide of dergelijke. De reactietemperatuur is bij voorkeur van ongeveer -30°C 10 tot ongeveer +90°C.

Voor het verkrijgen van het sulfoxide met de R-configuratie, verdient het de voorkeur dezelfde oxydatiereactie uit te voeren op de tussenprodukten, bij voorkeur op de verbindingen met formule 2, waarin E amino voorstelt, na eerst deze aminogroep te hebben be-15 schermd door vorming van een Schiffse base. De Schiffse base kan bereid worden volgens bekende methoden, bijvoorbeeld door behandeling van het amine met formule 2 met een aldehyde zoals benzaldehyde, sa-licylaldehyde of p-nitrobenzaldehyde; aan het einde van de oxydatiereactie kan de vrije aminogroep verkregen worden, bijvoorbeeld door 20 behandeling met een hydrazinederivaat, bijvoorbeeld fenylhydrazine, 2.4-dinitrofenylhydrazine of een Girard-reagens. De carboxylgroep wordt bij voorkeur tijdens de oxydatiereactie beschermd door toepassing van bijvoorbeeld de hiervoor vermelde beschermende groepen.

De omzetting van sulfide tot sulfoxide, dat wil zeggen de om-25 zetting van een verbinding met formule 1, waarin x nul is tot de overeenkomstige verbinding, waarin x 1 is, kan worden uitgevoerd door toepassing van 1 - 1,2 mol equivalenten van het oxydatiemiddel per mol van de te oxyderen verbinding.

De omzetting van sulfide tot sulfon, dat wil zeggen de omzet-30 ting van een verbinding met formule 1, waarin x nul is, tot de overeenkomstige verbinding met formule 1, waarin x 2 is, kan worden uitgevoerd door dezelfde oxydatiemiddelen, gebruikt voor het verkrijgen van de sulfoxiden, onder toepassing in dit geval van ten minste twee mol equivalenten van het oxydatiemiddel per mol te oxyderen verbin-35 ding.

De verbinding met formule 2, waarin E amino is en x nul is, kan bijvoorbeeld bereid worden door reactie van 7-arainocefalosporanzuur of een zout daarvan met een verbinding met formule 5 onder toepassing van reactie-omstandigheden, die in de literatuur bekend zijn, bO De verbindingen met formule 2, waarin E -N=C=Y voorstelt en x -10- nul is» kan bereid worden door reactie van een verbinding met formule 2, waarin E amino is en x nul is, met fosgeen of thiofosgeen bij aanwezigheid van een waterstofchloride bindend middel, onder toepassing van bekende methoden.

5 De verbindingen met formule 3 zijn bekende verbindingen of kun nen volgens bekende werkwijzen bereid worden.

De verbindingen met formule k, waarin x nul is, kunnen bijvoorbeeld bereid worden door reactie van 7-aminocefalosporanzuur of een zout daarvan, met een verbinding met formule 3 of een reactief deri-10 vaat daarvan onder toepassing van reactie-omstandigheden, die analoog zijn aan de omstandigheden hiervoor beschreven voor de reactie tussen de verbinding met formule 2 en de verbinding met formule 3.

De verbindingen met formule 6, waarin x nul is, kunnen bijvoorbeeld bereid worden door omzetting van een verbinding met' formule 2, 15 waarin E amino is en x nul is, met een verbinding met formule 7» waarin Z de hiervoor vermelde betekenissen bezit, of een reactief derivaat daarvan, bijvoorbeeld één van de reactieve derivaten hiervoor aangegeven voor de verbinding met formule 3i onder toepassing van reactie-omstandigheden, die analoog zijn aan de omstandigheden 20 aangegeven voor de reactie tussen de verbinding met formule 2 en de verbinding met formule 3.

Een daarbij verkregen verbinding met formule 8, waarin Z en S de hiervoor vermelde betekenissen bezitten en x nul voorstelt, kan worden omgezet tot een verbinding met formule 6, waarin waterstof 25 voorstelt, door nitrosering, bijvoorbeeld door toepassing als nitro-seringsmiddel van nitrosylchloride of een organisch of anorganisch nitriet, bijvoorbeeld amylnitriet, natriumnitriet of kaliumnitriet, bij aanwezigheid van een zuur, bijvoorbeeld zoutzuur of azijnzuur.

De nitroseringsreactie kan worden uitgevoerd bij omgevingstempera-30 tuur of onder koeling, waarbij het voorkeurs-temperatuurstrajekt ligt van ongeveer -20°C tot ongeveer 40°C, in een geschikt oplosmiddel, bijvoorbeeld dioxan, acetonitrile, tetrahydrofuran, azijnzuur of een mengsel van één van deze oplosmiddelen met water. Vóór de nitrosering kunnen de aanwezige carboxylgroepen, indien noodzakelijk, 35 worden omgezet tot de zoutvorm, bijvoorbeeld door behandeling met een alkalimetaalhydroxide, of worden beschermd, bijvoorbeeld met een hiervoor vermelde beschermende groep; de beschermende groepen kunnen vervolgens volgens bekende methoden aan het einde van de reactie verwijderd worden.

JfO De verbindingen met formule 6, waarin anders dan waterstof 800 2 6 90 -11- is, kunnen verkregen worden uit de overeenkomstige verbindingen, waarin S2 waterstof voorstelt, door een gebruikelijke veretherings-of veresteringsreactie.

De verbindingen met de formules 2, 4 en 6, waarin x 1 of 2 is, 5 kunnen verkregen worden door oxydatie van de overeenkomstige verbindingen, waarin x nul is, zoals hiervoor beschreven voor de analoge omzettingen met de verbindingen met formule 1.

Wanneer de uitgangsverbindingen met de formules 3, h en 6 syn-isomeren zijn, zijn de reactie-isomeren eveneens syn-isomeren en om-10 gekeerd. In sommige gevallen kan een kleine hoeveelheid van het anti-isomeer verkregen worden tezamen met het syn-isomeer. De scheiding van de isomeren kan volgens bekende methoden worden uitgevoerd, bijvoorbeeld door fraktionale.. kristallisatie of door chromatografie.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding hebben een sterke 15 anti-bacteriële activiteit bij mens en dier, niet alleen tegen gram-positieve en gram-negatieve bacteriën, die gewoonlijk gevoelig zijn voor cefalosporinen, zoals stafylococci, streptococci, diplococci, Klebsiella, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Salmonella, Shigella, Haemophilus en Neisseria, maar eveneens tegen de sterk β-lactamase 20 voortbrengende gram-negatieve microërganismen, zoals bijvoorbeeld Klebsiella aerogenes 1082 E, Escherichia coli Tem, Enterobacter cloacae P 991 indool-positief Proteus en dergelijke, alsmede tegen Pseudomonas aeruginosa-stammen, die gewoonlijk resistent zijn tegen de meeste cefalosporinen. Deze verbindingen zijn daarom in het bij-25 zonder geschikt voor de behandeling van infekties veroorzaakt door gram-negatieve bacteriën, bijvoorbeeld infekties van de urinewegen en infekties van de ademhalingswegen.

De activiteit van de verbindingen volgens de uitvinding zowel tegen bacteriën, die gewoonlijk gevoelig zijn voor cefalosporinen als 30 tegen β-lactamase-voortbrengers is groter dan die van cefazoline en cefuroxime.

Bijvoorbeeld is de verbinding 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]-pyridazinylJ-thiomethylj^-^-iP-amino-Jf—thiazolylj^-methoxyimino-aeeetamido j-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) (aangeduid als FCE 35 20127) ongeveer 2h maal actiever dan cefazoline tegen streptococci en ongeveer 30 maal actiever dan cefazoline en cefuroxime tegen de meeste gram-negatieve bacteriën. Bovendien is de verbinding FCE 20127 ongeveer 20 - 60 maal actiever dan cefuroxime tegen sommige β-lactamase-voortbrengers, zoals Klebsiella aerogenes 1082 E, Entero-kO bacter cloacae P 991 Escherichia coli Tem.

fton 2 fi 90 -12-

De verbinding FCE 20127 werd eveneens beproefd bij een reeks van 10 stammen van Pseudomonas aeruginosa, 4 stammen Proteus vulgaris en 4 stammen van Proteus morganii en bleek enkele malen actiever te zijn dan cefazoline en cefuroxime.

5 De verbinding 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)- thiomethylJ-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer)(aangeduid als FCE 20485) is ongeveer 5 maal actiever dan cefazoline tegen streptococci en ongeveer 32 maal actiever dan cefazoline en 40 maal actiever dan cefuroxime 10 tegen de meeste gram-negatieve bacteriën* Tegen Enterobacter aeroge-nes ATCC 8308, Enterobacter cloacae 1321 E, Salmonella typhi Watson en Shigella sonnei ATCC 11060 is de verbinding FCE 20485 15-50 maal actiever dan cefazoline en 50 - 100 maal actiever dan cefuroxime. Bovendien is de verbinding FCE 20485 ten minste 100 - 500 maal ac-15 tiever dan cefazoline en cefuroxime tegen Proteus vulgaris X 20 en Proteus mirabilis ATCC 9921. De verbinding FCE 20485 vertoonde eveneens een aanzienlijke in vitro activiteit tegen Pseudomonas aeruginosa G. en Bacteroides fragilis VPI 9032.

Een andere belangrijke eigenschap van de verbinding FCE 20485 20 is de zeer lange plasma-halfwaardetijd bij de muis (ongeveer 90 minuten) en bij de rat (ongeveer 100 minuten) na intraveneuze injektie, terwijl de plasma-halfwaardetijd van cefazoline respectievelijk 16 en 20 minuten is. Dienovereenkomstig vertoonde de verbinding FCE 20485 een sterke activiteit in vivo-proeven; bijvoorbeeld in muizen 25 geinfekteerd met Escherichia coli G, Klebsiella pneumoniae ATCC

100311 Proteus mirabilis ATCC 9921, Escherichia coli Tem., Haemophilus influenzae, Salmonella typhi Watson en Proteus vulgaris X 20, was de verbinding 20 - 200 maal actiever dan cefazoline.

De toxiciteit van de verbindingen volgens de uitvinding is vrij-50 wel verwaarloosbaar en zij kunnen daarom veilig voor therapeutische doeleinden gebruikt worden. Bijvoorbeeld is de benaderde acute toxiciteit (LDc-q) van de verbindingen FCE 10127 en FCE 20485 bij de muis bepaald met enkelvoudige intraveneuze toedieningen van toenemende doseringen en gemeten op de zevende dag van de behandeling groter dan 35 2000 mg/kg. Analoge activiteits- en toxiciteitsgegevens zijn gebleken voor de andere verbindingen van de uitvinding.

De verbindingen van de uitvinding zijn derhalve geschikt voor de behandeling van de infekties veroorzaakt door zowel gram-positieve als gram-negatieve microörganismen, zoals infekties van de ademha-40 lingswegens, bijvoorbeeld bronchitis, bronchopneumonia, pleuritis, 800 2 6 90 -13- hepatogalachtige en onderbuiksinfekties, bijvoorbeeld cholecystitis* peritonitis, bloed- en cardiovasculaire infekties, bijvoorbeeld sep-ticemie, urineweginfekties bijvoorbeeld pyelonefritis, cystitis; obstetrische en gynaecologische infekties, bijvoorbeeld cervicitis, 5 endometritis, oor-, neus- en keelinfekties, bijvoorbeeld otitis, sinusitis, parotitis. De verbindingen volgens de uitvinding kunnen aan mens of dier in verschillende doseringsvormen worden toegediend, bijvoorbeeld oraal in de vorm van tabletten, capsules, druppels of siropen, rectaal in de vorm van suppositoria, parenteraal, bijvoor-10 beeld intraveneus of intramusculair (als oplossingen of suspensies), waarbij intraveneuze toediening de voorkeur verdient in een noodsituatie, door inhalering in de vorm van aerosolen of oplossingen voor vernevelingsinrichtingen, intravaginaal in de vorm van katheters of topicaal in de vorm van lotions, crèmes en zalven.

15 De uitvinding omvat een farmaceutisch of veterinair preparaat, dat een verbinding volgens de uitvinding bevat tezamen met een farmaceutisch of veterinair aanvaardbaar versnijdingsmiddel. Dergelijke preparaten kunnen op een gebruikelijke wijze bereid worden door toepassing van de gebruikelijke versnijdingsmiddelen, gewoonlijk dra-20 gers en/of verdunningsmiddelen, die gebruikt worden voor andere ce-falosporinen. Gebruikelijke dragers of verdunningsmiddelen zijn bijvoorbeeld water, gelatine, lactose, zetmeelsoorten, magnesiumstearaat, talk, plantaardige oliën, cellulose en dergelijke. Dagelijkse doseringen in het trajekt van ongeveer 1 tot ongeveer 100 mg/kg lichaams-25 gewicht kunnen gebruikt worden bij verschillende diersoorten, waarbij de juiste dosis afhangt van de leeftijd, het gewicht en de toestand van het te behandelen individu en van de toedieningsfrequentie en toedieningsweg. Een voorkeurswijze van toediening van de verbindingen volgens de uitvinding is de parenterale; in dit geval kunnen 30 verbindingen aan volwassenen worden toegediend in een hoeveelheid van ongeveer 100 mg tot 200 mg per dosering, bij voorkeur ongeveer 150 mg per dosering, 1 - k maal per dag, opgelost in een geschikt oplosmiddel, bijvoorbeeld steriel water of een lidocaine waterstof-chloride-oplossing, voor intramusculaire injekties, en steriel water, 35 fysiologische zoutoplossingen, dextrose-oplossing of de gebruikelijke intraveneuze vloeistoffen of elektrolyten, voor intraveneuze injekties.

Voorts kunnen de verbindingen volgens de uitvinding gebruikt worden als anti-bacteriele middelen op een profylactische wijze, bij-kO voorbeeld bij het reinigen of als oppervlak desinfekterende prepara- 800 2 6 90 -Η- ten, bijvoorbeeld bij een concentratie van ongeveer 0,2 - 1 gew.# van dergelijke verbindingen gemengd met, gesuspendeerd of opgelost in gebruikelijke inerte droge of water bevattende dragers voor toepassing door wassen of spuiten. De verbindingen zijn eveneens ge-5 schikt als voedingssupplementen in diervoeders.

De volgende voorbeelden lichten de uitvinding toe.

De vaststelling van smeltpunten was in sommige gevallen enigszins moeilijk, aangezien de verbindingen de neiging hebben het oplosmiddel vast te houden.

10 De Ifi-spectra werden bepaald in een vaste fase (KBr) of in

O

Nujol w op een Perkin-Elmer spectrofotometer 125, terwijl de UV-spectra vastgesteld werden in een bufferfosfaatoplossing bij een pH van 7,½ of op een Bausch-Lomb-inrichting in 1% NaHCO^.

NMH-spectra werden bepaald met een Bruker HX-90 (90 MHz) voor 15 de eindprodukten en met een Perkin-Elmer B-2^B (60 MHz) voor de tus-senprodukten in DMSO (dimethylsulfoxide) of CDCl^ met (CH^)^Si als inwendige standaard.

Voorbeeld I.

3-Γ (8-Amino-6-tetrazolof 1.5-b~lpyridazinyl)-thiomethyl-7-T 2-(2-20 amino-^— thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido_ -3-cefem-^·-carbonzuur (syn-isomeer).

Een geroerde oplossing van 70 ml watervrij dichloormethaan, die 4-Λ3 g (0,01 mol) 2-(2-tritylamino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoazijn-zuur en 1Λ1 ml (0,01 mol) triethylamine bevatte, werd tot 0°C ge-25 koeld en 2,08g (0,01 mol) fosforpentachloride werden in gedeelten toegevoegd. Na 10 minuten roeren bij 0°C en één uur bij omgevingstemperatuur werd het mengsel onder een verminderde druk ingedampt, opgenomen in aceton/benzeen, opnieuw ingedampt ter verwijdering van eventuele sporen fosforoxychloride en opgenomen in 50 ml watervrije 30 aceton. Triëthylaminehydrochloride werd vervolgens door filtratie verwijderd. De aldus verkregen oplossing van 2-(2-tritylamino^-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetylchloride in aceton werd druppelsgewijze toegevoegd aan een krachtig geroerde, met ijs gekoelde oplossing van 7-amino-3-[(8-amino-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thio-35 methyl]-3-cefem-4—carbonzuur, (3,8 g; 0,01 mol), NaHCO^ (0,8½ g) en triethylamine (2,82 ml) in een mengsel van water en aceton (75 ml : 50 ml). De suspensie werd 30 minuten bij 0 - 5°C en vervolgens 90 minuten bij omgevingstemperatuur geroerd, opgenomen in 500 ml ethyl-acetaat, gewassen met 50 ml verdund zoutzuur en vervolgens met 100 ml kO water bevattend natriumchloride, gedroogd met natriumsulfaat en tot 8002690 -15- droog ingedampt. Het residu werd geroerd met 5 ml dichloormethaan, waarna 50 ml ethylacetaat en 50 ml diethylether werden toegevoegd.

Het neergeslagen produkt werd verzameld, opgelost in 50 ml warme dichloormethaan, gekoeld en onder roeren behandeld met 100 ml diëthyl-5 ether. Na 20 minuten roeren werd de witte vaste stof gefiltreerd, met ether gewassen en gedroogd, waarbij 4,3 g 3-[(8-amino-6-tetra-zolo[l.5“b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)- 2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (ayn-isomeer) als een wit poeder verkregen werden.

10 2,0 g Van de hiervoor vermelde verbinding werden in gedeelten toegevoegd aan een geroerde, warme (55°C) oplossing van 13 ml miere-zuur in 13 ml water. Roeren en verwarmen bij dezelfde temperatuur werd 25 minuten aangehouden en vervolgens werd de vaste stof uit het gekoelde mengsel gefiltreerd. De vaste stof werd samengewreven met 15 10 ml 99-procentig mierezuur, waarna 2 ml water werden toegevoegd en zuiver trifenylmethanol werd gefiltreerd.

De zure moederlogen werden samengevoegd en ingedampt, waarbij een residu achterbleef. Na volledige verwijdering van water en mierezuur, gevolgd door samenwrijven met water bevattende ethanol, werd 20 1,225 g van een vaste stof verkregen. Het onzuivere produkt werd in 70 ml water gesuspendeerd en voldoende NaHCO^ werd toegevoegd om een oplossing te geven. De pH van de oplossing werd door toevoeging van 2N HC1 tot 2,0 verminderd en na 20 minuten werd het neergeslagen produkt verzameld, grondig met water gewassen en 18 uren bij 75°C ge-25 droogd. Aldus werden 1,13 g van de gewenste verbinding verkregen, die ontleedde zonder smelten boven 225°C.

Elementairanalyse: gevonden: C 37,90; H 3,14; N 26,78; S 16,83 berekend voor : C 38,35; H 3,04; N 27,33; S 17,07

30 IR (KBr)s 3320-3180 NH

[cm 1760 C=0 (β-lactam) - 1520 -C0NH- (sec.amide) 1030 =N-0-CH^ NMR, 100 MHz (DMSO-dg): 35 [£,dpm] 3,74 (2H,d.d.,2-CH2) J sj 17 \ • 3,88 (3H,s.,-OCH3)

4,36 (2H,d,d.,3-CH-jS) J ^ 13 H

c Z

5,20 (lH,d. ,6-H) J^5H

2

5,83 (1H,d.d.,7-H) J 7 5 2 + 8 H

z z ^•0 6,41 (lH,s. ,7-H bij pyridazinering)

O η Λ 0 Λ O A

-16- 6,82 (1H,s.,5-H bij thiazoolring) 6,80-7,80 (2H,breed s.,-NH2 bij thiazoolring) 8,02 (2H, breed s., -NH2 bij pyridazinering) 9,69 (1H, d., -CONH-) J 8 H .

z 5 Voorbeeld II.

3-[(8-Aminocarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 7-[2-(2-aminothiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon‘-zuur (syn-isomeer) werd verkregen door omzetting· van 2-(2-tritylami-no-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-azijnzuur met 7-amino-3-[(8-amino-10 carbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-4-car-bonzuur onder toepassing van de in voorbeeld I vermelde methode, smeltpunt 220°C (onder ontleding).

Elementairanalyse : gevonden: C 38,71? H 2,96; N 25,81; S 16,01; 15 berekend voor C^H^yN^OgS^ : C 38,57? H 2,89? N 26,04; 3 16,26 D.L.C. (0ΗΟ1^:ΜβΟΗ:Η00ΟΗ:Η20 = 140:75:20:20)

Hf = 0,42 IE (KBr) 2C=0 β-lactam 7-amino-3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiometh-20 yl]-3 -cefem-4-carbonzuur, gebruikt als uitgangsprodukt, werd als volgt bereid: 6-chloor-8-aminocarbonyl-tetrazolo|'l ,5-b]pyridazine.

Aan een ijskoude oplossing van 4,2 g (0,0244 mol) 3-hydrazino- 4-aminocarbonyl-6-chloorpyridazine (verkregen zoals vermeld in J.

25 Het. Chemistry, 7» (1970) 465 in 15# azijnzuur, werd druppelsgewijze een oplossing van 1,55 g natriumnitriet in 10 ml water toegevoegd.

Na één uur roeren bij 5 - 10°C werd het afgescheiden neerslag gefiltreerd, uit water gekristalliseerd, opnieuw gefiltreerd en onder een verminderde druk bij 50°C gedroogd, waarbij 3,44 g (77,5#) van 30 de gewenste verbinding, smeltpunt 226°C (ontl.) verkregen werden. Elementairanalyse: gevonden: C 30,11; H 1,44; N 42,00; Cl 17,69? berekend voor C^H^CIN^O: C 30,24; H 1,52; N 42,32; Cl 17,85.

6-Mercapto-8-aminocarbonyl-tetrazolo[1.5-b]pyridazine.

35 Aan een geroerde oplossing van 10 g (0,135 mol) NaSH.H20 in 150 ml water werden 10 g (0,05 mol) 6-chloor-8-aminocarbonyltetrazo-lo[l,5-b]pyridazine toegevoegd en het mengsel werd 90 minuten krachtig geroerd. Na koelen tot 0°C werd het mengsel aangezuurd met 23# HC1. Na één uur koelen bij 0°C werd de vaste stof verzameld, met een 40 kleine hoeveelheid koud water gewassen, waarbij de gewenste verbin- 800 2 6 90 -17- ding in kwantitatieve opbrengst werd verkregen, smeltpunt 185 - 187°C (ontl.).

IR (nujol): -SH 2480 cm"1 >C=0 1675 cm’1 5 D.L.C.: CHC1^:CH^0H:HC00H = 160:70:30 zuiver produkt UV (bufferfosfaat bij pH 7»4):)?max = 262; = 818.

I w&l

Elementairanalyse: gevonden: C 30,65; H 2,00; N 42,53* S 16,16 berekend voor C^NgOS: C 30,60; H 2,05; N 42,84; S 16,34.

10 7-Amino-3-f(8-aminocarbonyl-6-tetrazolor1.5-h1pyridazinyl)-thiomethyl]- 3-cefem-4-carbonzuur.

Aan een warme, (50 - 55°C) oplossing van 2 g (0,010 mol) 6-mer-capto-8-aminocarbonyltetrazolo[l.5-b]pyridazine en 2,8 g natriumwa-terstofcarbonaat in 90 ml bufferfosfaat (pH 6,4) werden 4,6 g (0,017 15 mol) 7-ACA in gedeelten toegevoegd en het mengsel werd 4 uren tot 60°C verwarmd. Na koeling tot 10°C werd het neergeslagen 7-amino-3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-4-carbonzuur door filtratie verzameld, De vaste stof werd in 150 ml Me2C0:H20 (1:2) gesuspendeerd, 30 minuten geroerd en opnieuw 20 gefiltreerd. Het verzamelde neerslag werd met Me2C0 gewassen en onder een verminderde druk bij 60°C gedroogd, waarbij de gewenste verbinding (80$), smeltpunt 228 - 230°C (ontl.) werd verkregen. Elementairanalyse: gevonden: C 37,93; H 2,93; N 27,13; S 15,45 25 berekend voor C^H^NgO^s C 38,22; H 2,96; N 27,43; S 15,70 IR (nujol) >C=0 β-lactam 1780 cm”1 UV (1¾ NaHCO^) Vmax = 249; ^max = 332.

Voorbeeld III.

Door toepassing van dezelfde methode werden de volgende verbin-30 dingen verkregen: 3- [(8-amino-6-tetrazolo[l-5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino- 4- thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(R)-sulfinyl-3-cefem-4-car-bonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1,5-b]pyridazinyl)-thiome thyl]-7-[2-(2-amino-35 4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(S)-sulfinyl-3-cefem-4-car-bonzuur (syn-isomeer); 3- [(8 -amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino- 4- thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1-sulfonyl-5-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); 40 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2- son 2fi 9n -18- (2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer).

Voorbeeld IV, 3-Γ (8-Carboxy-6-tetrazolor 1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-r 2-(2-5 amino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido. -.3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer).

Een geroerde oplossing van 200 ml watervrije dichloormethaan, die 11,35 g (0,0256 mol) 2-(2-tritylamino-if-thiazolyl)-2-methoxy-iminoazijnzuur (syn-isomeer) en 3,61 ml (0,0256 mol) triëthylamine 10 bevatte, werd tot 0°C gekoeld en 5,6 g (0,027 mol) fosforpentachlo-ride werden in gedeelten toegevoegd. Na 15 minuten roeren bij 0°C en één uur bij omgevingstemperatuur werd het mengsel onder een verminderde druk ingedampt, opgenomen met watervrije benzeen, opnieuw ingedampt teneinde eventuele sporen fosforoxychloride te verwijderen, 15 Deze behandeling werd tweemaal met 50 ml herhaald. Het residu werd in 50 ml watervrije aceton gesuspendeerd en het triëthylaminehydro-chloride werd vervolgens door filtratie verwijderd. De aldus verkregen oplossing van 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoace-tylchloride in aceton werd druppelsgewijze toegevoegd aan een krach-20 tig geroerde, ijskoude oplossing van 10 g (0,0232 mol) 7-amino-3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-if-carbonzuur en 15 g NaHCO^ in een mengsel van 500 ml water en 250 ml aceton. Het mengsel werd 30 minuten bij 0 - 5°C en vervolgens 90 minuten bij omgevingstemperatuur geroerd, het niet opgeloste bestand-25 deel werd gefiltreerd, en de aceton werd door verdamping onder een verminderde druk verwijderd, De water bevattende fase werd met 8% HC1 op een pH van 2 gebracht en met 3 x 400 ml ethylacetaat geëxtraheerd, met water bevattend natriumchloride gewassen, met natriumsul-faat gedroogd en tot droog ingedampt. Het residu werd met diëthyl-30 ether geroerd; na 20 minuten roeren werd de vaste stof gefiltreerd, met ether gewassen en gedroogd, waarbij 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo-[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-tri tylamino-4-thiazoly1)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-if-carbonzuur verkregen werd. De hiervoor vermelde verbinding werd in gedeelten toegevoegd aan een geroer-35 de, warme (55°C) oplossing van 1^0 ml 50-procentig mierezuur. Roeren en verwarmen bij dezelfde temperatuur werd 30 minuten aangehouden en vervolgens werd de vaste stof uit het gekoelde mengsel gefiltreerd. Het filtraat werd onder een verminderde druk tot droog ingedampt, waarbij een residu achterbleef. Na volledige verwijdering van water kO en mierezuur, gevolgd door samenwrijven met water werd een vaste stof 800 2 6 90 -19- verkregen. Het onzuivere produkt werd uit 50-procentige ethanol gekristalliseerd, waarbij 9,1 S (60%) van de gewenste verbinding verkregen werd, die bij 255°C ontleedde.

Elementairanalyse: 5 gevonden: C 38,10; H 2,91» N 23,34; S 15,93; berekend voor C^H^N^qS^O^: C 38,50; H 2,72; N 23*63; S 16,23.

DLC (CHCl^:Me0H:HC00H:H20 = 140:75:20:20) fif = 0,25

IB (KBr) '^3500-2300 cm”1 gebonden -C00H

10 1)1765 cm”1 ^C=0 β-lactam

Dl710 cm-1 C=0 zuur —1 1650 cm sec. amide —1 ( 1620-1580 cm £ (C=N) oxyme (\J (C-N) + J(N-H) 15 1540 cm”1 l) (C-N) + £(N-H) amide NMB, 100 MHz (DMSO-dg) S dpm 3.68 (1H, d, 2-CH2) 3,86 (1H, d, 2-ch2) 3,92 (3H, s, =N-0CH3) 20 4,36 (1H, d, 3-CH2-S) 4.69 (1H, d, 3-CH2-S) 5,21 (1H, d, 6-Η) 5,85 Oh, d-d, 7-H) 6,83 (1H, s, 5-H bij thiazoolring) 25 7,30 (2H, br-s, -NH2 bij thiazoolring) 8,02 OH, s, 7-H bij pyridazinering) 9,38 OH, d, -CONH).

7-Amino-3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-4-carbonzuur, dat als uitgangsprodukt werd gebruikt, werd· als 30 volgt bereid: 3-hydrazino-4-carboxy-6-chloorpyridazine.

Een mengsel van 20 g (0,103 mol) 3.6-dichloor-4-carboxypyrida-zine en 22 ml 98-procentig hydrazinehydraat in 200 ml 50-procentige ethanol werd onder roeren één uur onder terugvloeikoeling gekookt.

35 Na koeling tot 5°C werd het vaste neerslag verzameld en met 20 ml watervrije ethanol gewassen. De vaste stof werd in 100 ml water gesuspendeerd, het mengsel werd met 23-procentig HC1 op een pH van 1 -2 gebracht, na koeling tot 5°C werd de vaste stof gefiltreerd, onder een verminderde druk bij 80°C gedroogd, waarbij 18,29 g (93,4%) van 40 de gewenste verbinding met een smeltpunt van 198 — 201°C werden ver- 800 2 6 90 -20- kregen.

Elementairanalyse: gevonden: C 31,64; H 2,6k; N 29*32; Cl 18,53; berekend voor C^ClN^i C 31,84; H 2,67; N 29,71; Cl 18,80.

5 NMR (DMSO-dg) : 7,8 (1H, s, 5-H bij pyridazinering) 9,2 (4H, br-s, -COOH, -NHNHj); 6-chloor-8-carboxy-tetrazolor 1.5-b]pyridazine.

Aan een ijskoude suspensie van 1,88 g (0,01 mol) 3-hydrazino-4-carboxy-6-chloorpyridazine in 15-procentig zoutzuur werd druppelsge-10 wijze een oplossing van 0,70 g natriumnitriet in 5 ml water toegevoegd. Na één uur roeren bij 5 - 10°C werd het afgescheiden neerslag gefiltreerd en met watervrije ethanol gewassen. De vaste stof werd in 2N HC1 gesuspendeerd, het mengsel werd 30 minuten geroerd, de vaste stof werd gefiltreerd, met koud water gewassen en onder een 15 verminderde druk bij 70°C gedroogd, waarbij 1,73 g (87$) van de gewenste verbinding, smeltpunt 225°C, werden verkregen, Elementairanalyse: gevonden: C 29,95; H 0,98; N 35,15; Cl 17,58; berekend voor 0^^0^^2: C 30,09; H 1,00; N 35,09; Cl 17,76; 20 IS (nujol): >C=0 1750 cm“1 NMR (DMSO-dg): 8,33 (1H, s, 7-H bij pyridazinering) 6- mercapto-8-carboxy-tetrazolo[l.5-b]pyridazine.

Aan een geroerde oplossing van 10 g (0,135 mol) NaSH.I^O in 150 ml water werden 10 g (0,05 mol) 6-chloor-8-carboxytetrazolo-25 [l.5-b]pyridazine toegevoegd en het mengsel werd 2 uren krachtig geroerd.· Na koeling tot 0°C werd het reactiemengsel met 23-procentig HC1 aangezuurd. Na één uur koelen bij 0°C werd de vaste stof verzameld, met een kleine hoeveelheid koud water gewassen, waarbij 9 g (91,5#) van de gewenste verbinding met een smeltpunt van 210°C 30 (ontl.) werden verkregen.

Elementairanalyse: gevonden: C 30,41; H 1,52; N 35,61; S 16,19; berekend voor C,-H,N_0~S : C 30,45; H 1,53; N 35,52; S 16,26 5 5 5 2 IR (KBr) ( S-H) 2540 cm 35 >C=0 1725 cm"1 UV (bufferfosfaat bij pH 7,4) max = 258 E1cm = 962 7- amino-3-r(8-carboxy-6-tetrazolof1.5-b1pyridazinyl)-thiomethyl]-5~ cefem-4-carbonzuur.

40 Aan een warme (40°C) oplossing van 8,2 g (0,0415 mol) 6-mer- 800 2 6 90 -21- capto-8-carboxytetrazolo[l.5-b]pyridazine en 11,6 g natriumwater-stofcarbonaat in 265 ml van een fosfaatbuffer (pH 6,4), werden l8,5g (0,068 mol) 7-ACA toegevoegd en het mengsel werd 5 uren tot 60°C onder roeren verwarmd. Na koeling tot 20°C werd niet opgelost produkt 5 gefiltreerd en de oplossing werd met 23-procentig HC1 op een pH van 4,4 gebracht. Het neerslag werd gefiltreerd, met een mengsel van ace-ton en water in de verhouding 3 t 1 en vervolgens met aceton gewassen, waarbij het natriumzout van de gewenste verbinding (75%)1 smeltpunt > 270°C (ontl.) verkregen werd.

10 Elementairanalysej gevonden: C 35,80? H 2,66? N 22,43? S 14,66? Na 3,10; berekend voor C^H^gN^Ot^Na: C 36,19; H 2,33; N 22,72; S 14,86;

Na 5,32 IB (nujol) >C=0 p-lactam 1770 cm”1 15 ÜV (1% NaHCO,): Amax = 246; e]!* = 432.

3 icm

Het natriumzout werd in water gesuspendeerd en aangezuurd met 8-procentig HC1, waarbij een vaste stof verkregen werd, die werd gefiltreerd, en met water werd gewassen, waarbij de gewenste verbinding, smeltpunt 245°C (ontl.) werd verkregen.

20 Elementairanalyse: gevonden: C 38,43; H 2,90; N 23,53; S 15,10; berekend voor C.,H_N„0_So : C 38,13; H 2,70; N 23,94; S 15,66.

13 11 (5 c.

Voorbeeld V.

3- (S-Amino-ó-tetrazolof 1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl~l-7-F2-(2-amino-25 4-thiazdLyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-carbonzuur (syn-iso-meer).

0,9 g (0,00438 Mol) N.N'-dicyclohexylcarbodiimide werd aan een tot 0 - 5°C gekoelde oplossing van 3,675 g (0,0828 mol) 2-(2-trityl-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoazijnzuur in 13 ml watervrije di-30 chloormethaan toegevoegd. Na 40 minuten roeren bij 5°C en 30 minuten bij omgevingstemperatuur werd de verkregen suspensie met watervrije dichloormethaan verdund. De afgescheiden vaste stof, dicyclo-hexylureum (0,98 g, een kwantitatieve opbrengst), werd gefiltreerd en met verse dichloormethaan gewassen. De samengevoegde dichloor-35 methaanoplossingen werden tot droog ingedampt, waarbij het symmetrische anhydride van het uitgangszuur werd verkregen, dat onmiddellijk werd opgenomen in 30 ml watervrije aceton. De hiervoor verkregen oplossing werd druppelsgewijze onder roeren toegevoegd aan een in een ijsbad gekoelde oplossing van 7-amino-3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]-40 pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-4-carbonzuur (1,65 g; 0,00436 mol), q η n 9 on -22- triëthylamino (1,22 ml; 0,00872 mol) en NaHCO^ (0,347 g; 0,00414 mol) in 1:1 waterbevattende aceton (120 ml). Na één uur roeren bij 0 - 5°C werd het ijsbad verwijderd en na nog eens 2 uren werd het mengsel opgenomen in 500 ml ethylacetaat en met 100 ml 1 N water be-5 vattend zoutzuur geschud. Het onoplosbare bestanddeel (een geringe hoeveelheid niet omgezet 7-aminocefem) werd gefiltreerd, de organische laag werd met een oplossing van natriumchloride in water gewassen, met natriumsulfaat gedroogd, gefiltreerd en ingedampt. Een belangrijk deel van het uitgangs 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-10 methoxyiminoazijnzuur, aanwezig in het onzuivere reactiemengsel, werd neergeslagen uit 30 ml van een dioxan-oplossing, door langzaam 1,4 ml dicyclohexylamine toe te voegen. Na 20 minuten bij 20°C werd dit di-cyclohexylaminezout gefiltreerd, de oplossing met 200 ml ethylacetaat verdund, met 1 N zoutzuur aangezuurd en de water bevattende laag werd 15 verwijderd. De organische fase werd met een oplossing van natriumchloride in water gewassen, met natriumsulfaat gedroogd en tot een klein volume geconcentreerd en toegevoegd aan diëthylether, waarbij 3,1 g 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]-pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-20 carbonzuur (syn-isomeer) verkregen werden. Dit produkt werd met 50# water bevattend mierezuur, zoals beschreven in voorbeeld I, behandeld, waarbij de gewenste verbinding verkregen werd, die een DLC, IR en NMR vertoonde identiek aan het produkt bereid in voorbeeld I. Door toepassing van dezelfde methode werden de volgende verbin-25 dingen bereid: 3- [(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-cyaanmethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); M(8 -amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-30 amino-4-thiazolyl)-2-aminocarbonylmethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); >[(8 -amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-carboxymethoxyiminoaceetamido]-3-ce fem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 35 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2- amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(R)-sulfinyl-i-cefem- 4- carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8 -amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(S)sulfinyl-3-cefem-40 4-carbonzuur (syn-isomeer); 800 2 6 90 -23- 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-i.2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1-sulfonyl-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-5 [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3--cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer) 10 Voorbeeld VI.

3-Γ(8-Carboxy-6-tetrazolor1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl-7-f2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido -3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer), N.N'-Dicyclohexylcarbodiimide (0,9 g; 0,00438 mol) werd toege-15 voegd aan een tot 0 - 5°C gekoelde oplossing van 3»675 g (0,0828 mol) 2-(2-tritylaminö-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoazijnzuur in 13 ml watervrije dichloormethaan. Na 40 minuten roeren bij 5°C en 30 minuten bij omgevingstemperatuur werd de verkregen suspensie met water-vrije dichloormethaan verdund. De afgescheiden vaste stof, dicyclo-20 hexylureum (0,98 g, een kwantitatieve opbrengst), werd gefiltreerd en met verse dichloormethaan gewassen. De samengevoegde dichloor-methaanoplossingen werden tot droog ingedampt, waarbij het symmetrische anhydride van het uitgangszuur werd verkregen, dat onmiddellijk werd opgenomen in 30 ml watervrije aceton. De hiervoor verkregen op-25 lossing werd druppelsgewijze onder roeren toegevoegd aan een in een ijsbad gekoelde oplossing van 7-amino-3-[(8-carboxy-6-tetrazolo-[l•5~b]-pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-4-carbonzuur (1,78 g; 0,00436 mol), triéthylamino (1,22 ml; 0,00872 mol) en NaHCO^ (0,347 g; 0,004l4 mol) in 1:1 water bevattende aceton (120 ml). Na 30 één uur roeren bij 0 - 5°C werd het ijsbad verwijderd en na nog eens 2 uren werd het mengsel opgenomen in 500 ml ethylacetaat en geschud met 100 ml 1 N water bevattend zoutzuur. Het onoplosbare bestanddeel (een geringe hoeveelheid niet omgezet 7-aminocefem) werd gefiltreerd, de organische laag werd met een oplossing van natriumchloride in wa-35 ter gewassen, met natriumsulfaat gedroogd, gefiltreerd en ingedampt. Een belangrijk deel van het uitgangs 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)- 2-methoxyiminoazijnzuur, aanwezig in het onzuivere reactiemengsel, werd neergeslagen uit 30 ml dioxanoplossing door langzame toevoeging van 1,4 ml dicyclohexylamine. Na 20 minuten bij 12°G werd dit dicy-40 clohexylaminezout gefiltreerd, wérd de oplossing met 200 ml ethyl- 0 η n 9 fi Q Π -24- acetaat verdund, met 1 N zoutzuur aangezuurd en de water bevattende laag werd verwijderd. De organische fase werd met een oplossing van natriumchloride in water gewassen, met natriumsulfaat gedroogd en tot een klein volume geconcentreerd en toegevoegd aan diëthylether, 5 waarbij 3i3 g 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]-pyridazinyl)-thiometh-yl]-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) verkregen werden. Dit produkt werd behandeld met 50-procentig water bevattend mierezuur, zoals beschreven in voorbeeld IV, waarbij de gewenste verbinding verkregen werd, 10 die volgens DLC, IB en NMB identiek was aan het produkt bereid in voorbeeld IV.

Voorbeeld VII.

3-Γ(8-Amino-6-tetrazolor1.3-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-F2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur 15 (syn-isomeer).

Aan een oplossing van 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-trityl-oxyiminoazijnzuur (2,25 g; 0,00335 mol) en triëthylamine (0,47 ml; 0,00335 mol) in tot -5°C gekoelde watervrije dichloormethaan werd 0,697 g (0,00335 mol) fosforpentachloride in één keer toegevoegd. Na 20 20 minuten roeren bij -5°G en één uur bij omgevingstemperatuur werd het mengsel onder een verminderde druk zonder uitwendige verwarming ingedampt tot alle POCl^ was verwijderd. Het residu werd in 50 ml watervrije aceton opgenomen en het triëthylaminehydrochloride werd gefiltreerd. De aldus verkregen oplossing van 2-(2-tritylamino-4-25 thiazolyl)-2-trityloxyiminoacetylchloride in aceton werd druppelsgewijze toegevoegd aan een oplossing, die 7-amino-3-[(8-amino-6-tetra-zolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-3-cefem-4-carbonzuur (0,76 g; 0,002 mol)·, triëthylamine (0,562 ml; 0,004 mol) en NaHCO^ (0,281 g; 0,00335 mol) in water (35 ml) en aceton (25 ml) gekoeld tot 0°C, be-30 vatte.

Na de toevoeging werd de suspensie 30 minuten bij 0°C en vervolgens 90 minuten bij 25°C geroerd. Het reactiemengsel werd in 350 ml ethylacetaat onder krachtig roeren gegoten, 50 ml water werden toegevoegd en naderhand werd voldoende 2 N_ HCl toegevoegd om de 35 water bevattende fase op een pH van 2 te brengen. De organische fase werd afgescheiden, met een oplossing van natriumchloride in water gewassen, met natriumsulfaat gedroogd en tot droog ingedampt. De verkregen schuim werd samengewreven met diëthylether, waarbij 1,98 g van een onzuiver produkt werd verkregen, dat een aanzienlijke hoe-40 veelheid van het uitgangszuur bevatte. Een belangrijk deel van deze 8002690 -25- verontreiniging werd verwijderd door het onzuivere produkt op te lossen in 10 ml dioxan en de verkregen oplossing druppelsgewijze toe te voegen aan 70 ml diëthylether. Na 10 minuten roeren werd het witte neerslag door filtratie verzameld, waarbij 1,02 g 3-[(8-amino-5 6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-trityloxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) verkregen werden.

De hiervoor bereide verbinding (1 g) werd onder roeren toegevoegd aan ^0 ml van een 50-procentige oplossing van mierezuur in 10 water, die op 55°C (oliebad) werd gehouden. Na 35 minuten werd het mengsel tot 25°0 gekoeld en door afzuigen gefiltreerd; de vaste stof werd met 20 ml verse 50-procentige mierezuur en vervolgens met gedestilleerd water gewassen en verwijderd. De zure oplossingen werden samengevoegd en onder een verminderde druk ingedampt. Het residu 15 werd opgenomen in 99-procentige ethanol en opnieuw ingedampt, opgenomen in 99-procentige ethanol, ingedampt tot een klein volume (5 ml) en gefiltreerd. Het verkregen beige poeder werd opgelost in 20 ml van een 2-procentige oplossing van NaHCO^ in water en houtskool werd toegevoegd. De gefiltreerde oplossing werd met 2 N HC1 op 20 een pH van 2 gebracht en 5 minuten geroerd. Het neerslag werd door filtratie verzameld, grondig met water en later met kleine hoeveelheden ethanol gewassen en 16 uren bij 65°C gedroogd, waarbij 0,25 g 3-[(8 -amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-if-carbonzuur 25 (syn-isomeer) als een gebroken wit poeder, dat bij ongeveer 205°C zonder smelten ontleedde, verkregen werd.

Elementairanalyse i

gevonden C 36,81; H 2,88; N 27,73; S 16,92; berekend voor C^H^N^O^i C 37,15; H 2,75; N 28,03; S 17,20 30 IB (KBr) [cm"1] i 3^00 -NH

3000 -OH

1760 ^C=0 (p lactam) NMH, 100 MH (DMSO-d,-) z o [f ,dpm] i 3,61 (1H,d.,2-CH2) 35 ' 3,89 (1H,d.,2-CH2) J * 17 Hz 4,16 (1H,d.,3-CH2S) 60 (lH,d.,3-CH25) J ~ Hz 5*21 (1H,d.,6-H) 5,86 (1H,d.d.,7-H) *0 6,^2 (1H,s.,7-H bij pyridazinering) fton 2fi 90 -26- 6,76 (1H,s.,5-H bij thiazoolring) 7,20 (2H,breed s., -NHg bij thiazoolring) 8,02 (2H,breed s.i-NHg bij pyridazinering) 9,56 (1H,d.,-CONH-) 5 11,66 (1H,breed s.,=N-OH).

Door toepassing van dezelfde methoden werden de verbindingen 6, 7, 10, 12, 14 en 16 van de tabel bereid.

Voorbeeld VIII.

5-Γ(8-Amino-6-tetrazolor1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-r2-(2-10 amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiffiinoaceetamido.-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isoaeer),

Aan een geroerde oplossing van 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-iso-meer), (0,1*56 g, 0,001 mol) en NaECO^ (0,1^3 g, 0,0017 mol) in water 15 (10 ml),werd 8-amino-6-mercapto-tetrazolo[l,5-b]pyridazine (0,118 g, 0,0007 mol) toegevoegd. Een langzame stroom stikstof werd door de oplossing geleid en het mengsel werd 12 uur tot 50°C verwarmd, terwijl de pH op 6,8 werd gehouden. Na koeling werd de oplossing met 10-pro-centig HC1 aangezuurd, het neerslag door filtratie verzameld, met 20 water en vervolgens met ethanol gewassen. Verkregen werd 0,215 g van de verbinding (2), die volgens NMS, DLC en IR identiek was aan het produkt beschreven in voorbeeld I, afgezien van een ondergeschikte verontreiniging van het anti-isomeer.Docr toepassing van dezelfde methode werden de volgende verbindingen bereid: 25 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2- amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(R)-sulfinyl-3-cefem-if-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l·5-b]pyridazinyl)_thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-meth.oxyiminoaceetamido]-1(S)-sulfinyl-3-cefem-30 ^-carbonzuur (syn-isomeer)5 3-[(8 -amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1-sulfinyl-3-cefem-if-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[1.3-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-35 [2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-lf—thiazolyl )-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cef em-4-carbonzuur (syn-isomeer); 1*0 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2- 800 2 6 90 -27- amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-carboxymethyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-5 zuur (syn-isomeer); 3- [(δ-β-carboxyethyl-6-tetrazolo[1.3-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer).

Voorbeeld IX.

10 3-Γ(8-Amino-6-tetrazolor1»5-b]pyridazinyl)thiomethyl]-7-i2-(2-amino- 4- thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido3-5-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer ).

Aan de geroerde oplossing van 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-trityl-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-eefem-4-carbonzuur 15 (0,697 g; 0,001 mol) in watervrije acetonitrile (50 ml) werd 8-amino- 6-mercaptotetrazolo[l,5-b]pyridazine (0,336 g; 0,002 mol) toegevoegd en de verkregen suspensie· werd 24 uren onder een langzame stroom stikstof onder terugvloeikoeling gekookt. Een andere hoeveelheid van de mercaptoverbinding (0,168 g, 0,001 mol) werd toegevoegd en na 20 nog eens 16 uren roeren bij de temperatuur waarbij terugvloeikoeling plaats heeft, werd het mengsel gekoeld, het niet opgeloste bestanddeel (niet omgezette mercaptoverbinding) gefiltreerd, de acetonitri-le-oplossing tot droog ingedampt, de verkregen schuim opgenomen in 5 ml warme dichloormethaan en werden 25 ml diethylether toegevoegd.

25 Het verkregen witte neerslag werd door filtratie verzameld en gewassen met een kleine hoeveelheid ethylacetaat en vervolgens met diethylether, waarbij 0,650 g 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetami-do]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) verkregen werd. Dit produkt 30 werd omgezet met 50-procentig water bevattend mierezuur, zoals beschreven in voorbeeld I, waarbij de gewenste verbinding verkregen werd, die volgens DLC, IK en NMR identiek was aan het produkt bereid in voorbeeld I.

Door dezelfde methode toe te passen werden de volgende verbin-35 dingen bereid: 3-[(8 -amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2- amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinylJ-thiomethyl]-7-[2-(2-40 amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamidoJ-3-cefem-4-carbonzuur 8002690 -28- (syn-isomeer); 3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); 5 3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon- zuur (syn-isomeer); 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-10 zuur (syn-isomeer); 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2- (2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-15 amino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-carboxymethyl-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); • 20 3-[(8-p-carboxyetbyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7- [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-aceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer).

Voorbeeld X, 3- Γ(8-Carboxy-6-tetrazolor1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-i2-(2-25 amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamidoJ-3~cefem-A—carbonzuur (syn-isomeer),

Aan een geroerde oplossing van 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino- 4- thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) (0,^56 g, 0,001 mol) en NaHCO^ (0,143 g, 0,0017 mol) in wa- 30 ter (10 ml), werd 8-carboxy-6-mercapto-tetrazolo[l.5-b]pyridazine (0,138 g, 0,0007 mol) toegevoegd. Een langzame stroom stikstof werd door de oplossing geleid en het mengsel werd 12 uren tot 50°C verwarmd, terwijl de pH op 6,8 werd gehouden. Na koeling werd de oplossing met 10-procentig HC1 aangezuurd, het neerslag door filtratie 35 verzameld, met water en vervolgens met ethanol gewassen. Verkregen werd 0,245 g van de gewenste verbinding, die volgens NMR, DLC en IR identiek was aan het produkt beschreven in voorbeeld IV, behalve een ondergeschikte verontreiniging van het anti-isomeer.

Voorbeeld XI.

40 3f(8-Carboxy-6-tetrazolof1.5-b1pyridazinyl)-thiomethyl]-7-F2-(2- 80 0 2 6 90 -29- amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-q—carbonzuur (syn-isomeer).

Aan een geroerde oplossing van 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-trityl-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur 5 (0,697 g» 0,001 mol) in watervrije acetonitrile (50 ml), werd 8-carboxy-6-mercapto-tetrazolo[l,5-bJpyridazine (0,394 g, 0,002 mol) toegevoegd en de verkregen suspensie werd onder een langzame stroom stikstof 24 uren onder terugvloeikoeling gekookt.

Een^ ander deel van de mercaptoverbinding (0,168 g, 0,001 mol) 10 werd toegevoegd en na nog eens 16 uren bij de temperatuur waarbij terugvloeikoeling plaats heeft werd het mengsel gekoeld, het onopgeloste bestanddeel (niet omgezette mercaptoverbinding) gefiltreerd, de acetonitrile-oplossing tot droog ingedampt, de verkregen schuim opgenomen in 5 nil warme dichloormethaan en 25 ml diëthylether toege-15 voegd. Het verkregen witte neerslag werd door filtratie verzameld en gewassen met een kleine hoeveelheid ethylacetaat en vervolgens met diëthylether, waarbij 0,730 g 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5~b]pyri-dazinyl)thiomethyl]-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-aceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) verkregen werd. Dit 20 produkt werd omgezet met 50-procentig water bevattend mierezuur, ’ zoals beschreven in voorbeeld IV, waarbij de gewenste verbinding werd verkregen, die volgens DLC, IR en NMR identiek was aan het produkt bereid in voorbeeld IV.

Voorbeeld XII.

25 3-Γ(8-Amino-6-tetrazolor1.5-b1pyridazinyl)-thiomethyl]-7-f2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-5-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer).

Trap Ai 4-chlooracetoazi.jnzuur.

30 g (0,182 Mol) ethyl 4-chlooracetoacetaat werden met 200 ml 30 37-procentig water bevattend HC1 15 uren bij omgevingstemperatuur geroerd, waarna het reactiemengsel in ijs/water werd gegoten, met ethylacetaat werd geëxtraheerd, met natriumsulfaat werd gedroogd en zonder uitwendige verwarming tot droog werd ingedampt, waarbij 17,4 g (opbrengst 70%) 4-chlooracetoazijnzuur verkregen werden. Het 35 onzuivere produkt werd zonder verdere zuivering bij de volgende trap gebruikt.

NMR 60 MH (CDC1„) : 3,71 (2H,s.,C0CHoC00H) Z 3 —2 4,20 (2H,s.,C1CH2C0) 9,98 (1H,breed s.,C00H).

40 Trap B: 4-chlooracetoacetylchloride.

afin ? fi on -30-

Oxalylchloride (1*71 ml? 0,02 mol) werd toegevoegd aan een oplossing van 2,if g (0,017 mol) if-chlooracetoazijnzuur in watervrije benzeen, gevolgd door een druppel N.N-dimethylformamide. Na 15 uren roeren bij 25°C werd de oplossing tot droog ingedampt, met watervrije 5 benzeen opgenomen en opnieuw ingedampt, waarbij 2,7 g van een donker olieachtig produkt werd verkregen, dat als zodanig bij de volgende acyleringstrap (trap C) werd gebruikt. Ook kan if-chlooracetoacetyl-chloride bereid worden door omzetting van diketeen, opgelost in een geschikt inert oplosmiddel, bijvoorbeeld dichloormethaan, met chloor, 10 volgens de methode beschreven in Helv. Chim. Acta, 60, (1977) 1256. Trap Ci 3-Γ(8-amino-6-tetrazolori«5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-(if-chloor-3-oxobutyramido)-3-cefem-if-carbonzuur.

7-Amino-3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 3-cefem-if-carb onzuur (3»8 g; 0,01 mol) werd gesuspendeerd in 50 ml· 15 N.N-dimethylformamide en 8,13 g (0,0if mol) N.0-bis(trimethylsilyl)-aceetamide werden toegevoegd. Na 2 uren roeren bij omgevingstemperatuur was vrijwel al het uitgangsprodukt opgelost. Een oplossing van 2,35 g (ongeveer 0,015 mol) if-chlooracetoaeetylchloride in 20 ml watervrije dichloormethaan werd druppelsgewijze toegevoegd aan het tot 20 -30°C gekoelde mengsel. Het mengsel werd 2 uren bij -30°O geroerd en werd in nog eens één uur op omgevingstemperatuur gebracht, waarna ifO ml isopropanol werden toegevoegd teneinde de gesilyleerde verbindingen te ontleden. De oplosmiddelen werden onder een verminderde druk verdampt en het olieachtige residu werd verdeeld tussen water 25 en ethylacetaat. De organische laag werd afgescheiden, met een oplossing van natriumchloride in water gewassen, tot een klein volume onder verminderde druk geconcentreerd en diëthylether werd toegevoegd om de precipitatie te voltooien. De vaste stof werd door filtratie verzameld, met verse ether gewassen en onder een verminderde 30 druk gedroogd, waarbij if, 6 g van de gewenste verbinding verkregen werd, die zonder verdere zuivering bij de volgende trap werd gebruikt.

NMB, 60 MH (DMSO-d/-) z o [& dpm] : 3,6-3,7 (^Η,β+d.d. ,2-CH2 +C0CH2C0) 55 - 35 (2H,d.d.,3-CH2S) if,57 (2H,s.,C1-CH2C0) 5,08 (1H,d.,6-H) 5,69 (1H,d.d.,7-H) 6,38 (1H,s.,7-H bij pyridazinering) ifO 7,95 (2H,breed s., -NH2 bij pyridazinering) 800 2 6 90 , ’ -31- 9*02 CONH).

Trap Pi 3-Γ(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl1-7- (4-chloor-2-hydroxyimino-5-oxobutyramido)-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer).

5 Aan een geroerde oplossing van 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]- pyridazinyl)thiomethyl]-7-(4-chloor-3-oxobutyramido)-3-cefem-4-car-bonzunr (6,72 g; 0,0171 mol) in 60 ml azijnzuur werd een oplossing van 1,63 g (0,0239 mol) natriumnitriet in 6 ml water bij 5 - 10°C toegevoegd. Na 3,5 uren roeren bij omgevingstemperatuur werd het re-10 actiemengsel met een zoutoplossing afgeschrikt en met 4 x 200 ml ethylacetaat geëxtraheerd, De samengevoegde extrakten weidaxmet water gewassen, met natriumsulfaat gedroogd en ingedampt tot een schuim. Samenwrijven van dit produkt met diëthylether gaf de gewenste verbinding als een beige poeder, 6,3 g, 15 DLC (silicagelplaten, CHCiyMeOH/HCOOH 160:40:20) gaf een enkele vlek met een enigszins lagere R^-waarde dan het uitgangsprodukt.

NMR, 60 MH (DMSO-d/-) z o {j dpm] i 3,60 (2H,d.d.,2-CH2) • 4,35 (2H,d.d.,3-CH2S) 20 4,74 (2H,s.,C1CH2C0) 5,08 (lH,d.,6-H) 5,70 (1H,d.d.,7-H) 6,38 (1H,s.,7-H bij pyridazinering) 7,96 (2H breed s, -NIL, bij pyridazinering) 25 9*21 (1H,d.,-CONH-) 13,00 (1H,s., =N-OH).

Trap E; 3-Γ(S-amino-ó-tetrazolof1.5-blpyridazinyl)-thiomethyl]-7- 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem- 4-carbonzuur (syn-isomeer).

30 Verbinding (1).

3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-(4-chloor-2-hydroxyimino-3-oxobutyramido)-3-cefem-4-carbonzuur (5,12 g; 0,01 mol) werd opgelost in 25 ml watervrije N.N-dimethylaceetamide. 0,76 g (0,01 Mol) thioureum werd toegevoegd en het mengsel werd 3 35 uren bij omgevingstemperatuur geroerd. De verkregen oplossing werd onder roeren druppelsgewijze toegevoegd aan 250 ml ethylacetaat. Een gomachtig produkt sloeg neer; de bovenstaande moederlogen werden verwijderd en het residu werd zorgvuldig samengewreven met vers ethylacetaat tot een poeder werd verkregen. Het poeder werd door filtra-40 tie verzameld en gedroogd. Aldus werd een in N.N-dimethylaceetamide 800 2 6 90 -32- opgelost produkt van het hydrochloridezout van het gewenste produkt verkregen. Dit produkt werd opgelost in water bevattend NaHCO^ en 5 maal met ethylacetaat en vervolgens met diëthylether gewassen. Stikstof werd 15 minuten doorgeborreld, houtskool werd toegevoegd, de 5 houtskool werd gefiltreerd en de oplossing werd met 2 N HC1 zuur gemaakt. Het kristallijne neerslag werd verzameld en grondig met water en vervolgens met ethanol gewassen, waarbij 3*8 g van de gewenste verbinding verkregen werd, volgens DLC, IR, NMR identiek aan het produkt bereid in voorbeeld VII.

10 Door dezelfde methode toe te passen, werden de volgende verbin dingen bereid: 3-[(8-amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-^-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1(B)-sulfinyl-3-cefem-if-car-bonzuur (syn-isomeer); 15 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1(S)-sulfinyl-3-cefem-A—car-bonzuur (syn-isomeer); 3-[(8 -amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-araino-2f-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetaraido]-1-sulfonyl-3-cefem-4-carbon-20 zuur (syn-isomeer); 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[1.5-b]pyridaziny1)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer); 3-[(8-aminocarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-25 [2—( B-amino-^-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-5-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer); 3-[(8-methylamino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2- (2-amino-*f-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-J+-carbonzuur (syn-isomeer).

30 Voorbeeld XIII.

Aan een water bevattende suspensie van 3-[(8-amino-6-tetrazolo-[1.5-b] pyridazinyl)- thiome thyl}?-[ 2- (2-amino-2f-thiazolyl )-2-methoxy-iminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) (5,63 g) in water (80 ml) werd de· stoechiometrische hoeveelheid NaHCO^ toegevoegd,zo-35 dat volledige oplossing van de verbinding verkregen werd. Deze oplossing werd vervolgens gelyofiliseerd, waarbij het natriumzout van 3-[(8-amino-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-if-carbonzuur (syn-isomeer), smeltpunt > 2Α·0°0 (ontl.), verkregen werd. kO Elementairanalyse: 800 2 6 90 w -33- gevondeni Na 3*80; berekend: Na 3»90 IH (KBr) 1760 cm"’1^‘C=0 (β-lactam).

Voorbeeld XIV.

Aan de water bevattende suspensie van 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo-5 [1.3-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-meth-oxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer), (5*92 g) in water (80 ml) werden twee equivalenten NaHCO^ toegevoegd, zodat volledige oplossing van de verbinding verkregen werd. Deze oplossing werd vervolgens gelyofiliseerd, zodat het dinatriumzout van 3-[(8-10 carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridaZinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer), smeltpunt >270°C (ontl.) verkregen werd.

Elementairanalyse: gevonden: Na 6,91* berekend: Na 7*19; 15 IK (KBr) 1765 cm“1^C=0 (β-lactam).

Voorbeeld XV.

Aan een oplossing van 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazi-nyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]- 3-cefem-'if-carbonzuur (syn-isomeer), (5*92 g) in aceton (^00 ml) wer- · 20 den twee equivalenten van een 30-procentige oplossing van natrium 2-ethylhexanoaat in isopropanol toegevoegd. Na 30 minuten roeren bij omgevingstemperatuur werd het mengsel met petroleumether verdund en het verkregen neerslag werd gefiltreerd, waarbij het dinatriumzout van 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-25 (2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer), smeltpunt >270°C (ontl.) verkregen werd. Elementairanalyse: gevonden: Na 6,91; berekend: Na 7*19; IS (KBr) 1765 cm ^0=0 (β-lactam).

30 Voorbeeld XVI.

Een injekteerbaar farmaceutisch preparaat werd bereid door 100 -500 mg van het dinatriumzout van 3-[(8-carboxy-6-tetrazolo[l.5-bj-pyridazinyl)-thiome thyl]-7-[2-(2-amino-4-thia zoly1)-2-methoxyimino-aceetamido]-3-cefem-*f-carbonzuur (syn-isomeer) in steriel water of 35 een steriele normale zoutoplossing (1-2 ml) op te lossen.

4o 800 2 6 90

Claims (10)

1. Verbinding met formule 1, waarin R een -(CHp^COOR'-rgroep voorstelt, waarin n nul, 1 of 2 is en R' een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen voorstelt, of waarin R een

5 -NR'R’^-of -CONR,Rn-groep voorstelt, waarin elk van de groepen R' en R·*, die gelijk of verschillend kunnen zijn, een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen voorstellen, R^ een waterstofatoom of een de aminogroep beschermende groep voorstelt, R^ een waterstofatoom, een de hydroxylgroep beschermende groep of een rechte 10 of vertakte, verzadigde of onverzadigde alifatische koolwaterstof-groep met 1-6 koolstofatomen voorstelt, die niet gesubstitueerd kan zijn of gesubstitueerd kan zijn met een substituent zoals (a) hydroxy, (b) cyaan, (c) -C00R·, waarin R’ de hiervoor vermelde betekenissen bezit en/of (d) -C0NR'RH, waarin R' en R" de hiervoor ver-15 melde betekenissen bezitten, en x 0, 1 of 2 is, en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan.

2. Syn-isomeer van een verbinding met formule 1, zoals gedefinieerd in conclusie 1, waarin R -NH2, -NHCH^, -C00H, -C0NH2 of -CHgCOOH,

20 R„ waterstof, CH, 1 (3 R2 waterstof, methyl, ethyl, -CH2C00H, -C-C00H, -CH2CN, -C^-CONI^ of -CH=CH-C00H, en CH^ x 0, 1 of 2 voorstellen en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan.

3. Syn-isomeer van een verbinding met formule 1, zoals gedefi nieerd in conclusie 1, waarin R -NH2, -C00H of -CH2C00H, R^ waterstof, R2 waterstof, methyl of ethyl en 30 x nul voorstellen en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan. k. Syn-isomeer van een verbinding met formule 1, zoals gedefinieerd in conclusie 1, waarin R -NH2 of -C00H, 35 waterstof, R2 methyl of ethyl en x 'nul voorstellen, en farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten ervan, 5· 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2- 4-0 (2-amino-if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-if-carbonzuur 800 2 6 90 -35- en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 6. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten er- 5 van. 7. 3-[(8-Carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]3-cefem-4-carbon-zuur en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 8. 3-[(8-Carboxy-6-tetrazolo[l.3-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7- 10 [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon- zuur en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 9. 3—C(8-Amino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridaziny1)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten er- 15 van. 10. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-cyaanmethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan, 20 11. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-bjpyridazinyl)-thiomethyl]-7- [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-aminocarbonylmethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 12. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7- 25 [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-carboxymethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4- carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 13. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1(R)-sulfinyl-3- 30 cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch· en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 14. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-1(s)-sulfinyl-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch· en veterinair aan- 35 vaardbare zouten ervan. 15· 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(R)-sulfinyl-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch· en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 40 16. 3-[(8-Amino-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7- 8002690 -36- [2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-1(S)-sulfinyl-3-cefem-4-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch-en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 17. 3-L(8-Amino-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7- 5 [2-(2-ηπΐηο-4-ΐ1ιΐηζο]^1)-2-hydroxyiminoaceetamido] -1 -sulfonyl-3-cefem-b~carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 18. 3-[.(8-Amino-6-tetrazolo[_1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-raethoxyiminoaceetamido]-1-sulfonyl-3-ce- 10 fem-^-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 19. 3-[(8-Carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]-7-[2-(2ramino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-carbon-zuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair-aanvaardbare zou- 15 ten ervan. 20. 3-[(8-Aminocarbonyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thio-methyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem- carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 20 21. 3-[(8-Aminocarbonyl-6-tetrazolo[l,5-b]pyridazinyl)-thio- methyl]-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-b-carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 22. 3-[(8-Methylamino-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 25 7-[2-(2-amino-zf-thiazolyl)-2-hydroxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-car- bonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 23. 3-[ (8-Methylamino-6-tetrazolo[l. 5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-4-car- 30 bonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. 2b. 3-[(8-Carboxy-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethylJ- 7-[2-(2-amino-if-thiazolyl)-2-ethoxyiminoaceetamido]-3-cefem-2f-carbon-zuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zou- 35 ten ervan. 25. 3-[(8-Carboxymethyl-6-tetrazolo[1.5-b]pyridazinyl)-thio-methyl]-7-[2-(2-amino—if-thiazolyl)-2-methoxyiminoaceetamido]-3-cefem-*)—carbonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan. bO 26. 3-[(8-Carboxyethyl-6-tetrazolo[l.5-b]pyridazinyl)-thiomethyl]- 800 2 6 90 -37- 7-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-me thoxyiminoaceetamidoj^-cefem—if—car-bonzuur (syn-isomeer) en farmaceutisch en veterinair aanvaardbare zouten ervan.

27. Werkwijze ter bereiding van cefemcarbonzuurderivaten, met 5 k e t kenmerk, dat men verbindingen met formule 1, waarin de symbolen de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten, op een op zichzelf bekende wijze bereidt.

28. Werkwijze ter bereiding van cefemcarbonzuurderivaten, met het kenmerk, dat men verbindingen met formule 1, waarin de 10 symbolen de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten bereidt, doordat men A) een verbinding met formule 2, waarin x en B de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten en E een aminogroep of een -N=C=Y-groep voorstelt, waarin Y zuurstof of zwavel is, of een reactief de-15 rivaat daarvan omzet met een verbinding met formule 3* waarin en Ι?2 de bij conclusie 1 vermelde betekenissen behalve waterstof bezitten, of een reactief derivaat van een dergelijke verbinding met formule 3 en desgewenst de beschermende groepen, indien aanwezig, verwijdert, of

20 B) een verbinding met formule 4, waarin R^ R2 en x de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten of een zout daarvan, omzet met een verbinding met formule 5i waarin R de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezit, of een reactief derivaat van een dergelijke verbinding met formule 5» en desgewenst de beschermende groepen, indien 25 aanwezig, verwijdert, of C) een verbinding met formule 6, waarin R, R^ en x de bij conclusie 1 vermelde betekenissen bezitten en Z een halogeenatoom of een zout of ester ervan, omzet met thioureum, waardoor een verbinding met formule 1 verkregen wordt, waarin R^ waterstof voorstelt en desgewenst 30 de eventueel aanwezige beschermende groep in R2 verwijdert en/of desgewenst een verbinding met formule 1 tot een zout daarvan omzet of een vrije verbinding verkrijgt uit een zout of ester en/of desgewenst een mengsel van isomeren tot afzonderlijke isomeren splitst en/ of desgewenst een verbinding met formule 1 tot een andere verbinding 35 niet formule 1 omzet.

29. Farmaceutisch of veterinair preparaat, gekenmerkt door de aanwezigheid van één of meer verbindingen volgens conclusies 1 - 26 en een farmaceutisch of veterinair aanvaardbare drager en/of een dergelijk verdunningsmiddel.

30. Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch of veterinair 800 2 6 90 -38- preparaat, met het kenmerk, dat men één of meer verbindingen volgens conclusies 1 - 26 in een voor een dergelijke toepassing geschikte vorm brengt. ****** 800 2 6 90