NL7920016A - Werkwijze ter bereiding van in de zijketen gefluoreerde vitamine d verbindingen. - Google Patents
Werkwijze ter bereiding van in de zijketen gefluoreerde vitamine d verbindingen. Download PDFInfo
- Publication number
- NL7920016A NL7920016A NL7920016A NL7920016A NL7920016A NL 7920016 A NL7920016 A NL 7920016A NL 7920016 A NL7920016 A NL 7920016A NL 7920016 A NL7920016 A NL 7920016A NL 7920016 A NL7920016 A NL 7920016A
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- hydroxy
- fluorine
- vitamin
- compounds
- acyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/59—Compounds containing 9, 10- seco- cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems
- A61K31/593—9,10-Secocholestane derivatives, e.g. cholecalciferol, i.e. vitamin D3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C401/00—Irradiation products of cholesterol or its derivatives; Vitamin D derivatives, 9,10-seco cyclopenta[a]phenanthrene or analogues obtained by chemical preparation without irradiation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
- C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
- C07C2601/14—The ring being saturated
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
- C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
- C07C2601/16—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring the ring being unsaturated
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
- C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
- C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
- C07C2602/18—All rings being cycloaliphatic the ring system containing six carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
- C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
- C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
- C07C2602/24—All rings being cycloaliphatic the ring system containing nine carbon atoms, e.g. perhydroindane
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials
Description
Η
Werkwijze ter bereiding van in de zijketen gefInoreerde vitamine D verbindingen.
De uitvinding heeft betrekking op verbindingen met een vitamine D-achtige activiteit. De uitvinding heeft meer in het bijzonder betrekking op fluorderivaten van vitamine D.
Vitaminen D^ en D2 zijn algemeen bekende 5 middelen voor de regeling van de calcium- en fosfor-homeostasis. Deze verbindingen stimuleren bij normale dieren of mensen het calciumtransport in de ingewanden en de calcium-mobilisatie van de beenderen en zijn werkzaam bij het voorkomen van rachitis (Engelse ziekte). Uit onderzoekingen gedurende de laatste 10 jaren is echter 10 gebleken dat vitaminen D^ en D^ moeten worden gemetaboliseerd tot hun gehydroxyleerde vormen voordat zij een biologische activiteit vertonen. De huidige kennis wijst er bijvoorbeeld op dat 1.25-di-hydroxyvitamine D^, het gedihydroxyleerde metaboliet van vitamine D^, de verbinding is, die verantwoordelijk is voor de bovengenoemde 15 biologische effecten. Op analoge wijze is 1.25-dihydroxy-vitamine D^ de actieve vorm van vitamine D2.
Mededelingen ten aanzien van variërende vitamine D derivaten kunnen in ruime mate worden gevonden in de octrooi-literatuur en andere literatuur. In verband hiermee kan 20 bijvoorbeeld worden gewezen op de Amerikaanse octrooischriften 3.565.924 (25-hydroxycholecalciferol), 3.697.559 (1.25-dihydroxy-cholecalciferol), 3.741.996 (Ια-hydroxycholecalciferol), 3.743.661 (5.6-trans-25-hydroxycholecalciferol), 3.907.843 (la-hydroxyergo-calciferol), 3.715.374 (24.25-dihydroxycholecalciferol), 3.739.001 25 (25.26-dihydroxycholecalciferol), 3.786.062 (22-dehydro-25-hydroxy-cholecalciferol), 3.847.955 (1.24.25-trihydroxycholecalciferol), 3.906.014 (3-desoxy-la-hydroxycholecalciferol), 4.069.321 (de be- 7920016 reiding van variërende in de zijketen gefluoreerde vitamine D^ derivaten en in de zijketen gefluoreerde dihydrotachysterol^ ana- logen).
— 2 -
Gevonden werd eveneens dat gefluoreerde 5 vitamine D verbindingen eveneens een vitamine D-achtige activiteit bezitten. Dergelijke fluor-analogen zijn daarom bruikbare verbindingen voor de behandeling van variërende ziekten, zoals osteomalacia, osteodystrofie en hyperparathyroïdisme.
De uitvinding heeft meer in het bijzonder 10 betrekking op fluorvitamine D verbindingen met de algemene formule 1 en 5.6-trans-fluorvitamine D verbindingen met de algemene formule 2, waarin R voorstelt een steroïd-zijketen met de configuratie la of lb, waarin Rj wordt gekozen uit hydroxyl, 0-lager alkyl of 0-acyl, R£, R^, R^ en R^ worden gekozen uit waterstof, hydroxyl, 15 0-lager alkyl, 0-acyl of fluor, waarbij tenminste ëën van de groepen R^j R^ en R^ fluor moet voorstelen, en waarin Rg voorstelt waterstof of lager alkyl.
Deze fluorverbindingen worden bereid volgens een werkwijze, die omvat de behandeling van gehydroxyleerde 20 3.5-cyclovitamine D verbindingen met een fluoreermiddel, waarbij di rect de overeenkomstige fluor-3.5-cyclovitamine D verbindingen worden verkregen, waarin het fluoratoom zich bevindt aan het koolstof-atoom, dat oorspronkelijk werd bezet door de hydroxygroep of hy-droxygroepen van het uitgangsmateriaal. Deze fluorcyclovitamine D 25 intermediairen worden vervolgens gesolvolyseerd in een waterig of alkoholisch oplosmiddel, bevattende een zure katalysator, of in een oplosmiddel, bestaande uit een laag moleculair organisch carbon-zuur, waarbij zowel de 5.6-cis- als 5.6-translfluorvitamine D verbindingen met respectievelijk de algemene formules 1 en 2 worden 30 verkregen, waaruit eventueel de acylgroepen, indien aanwezig, in het uitgangsmateriaal of ingevoerd gedurende de solvolyse, kunnen worden verwijderd door hydrolyse (of reductie), waarbij de respectievelijke vrije hydroxy-verbindingen worden verkregen.
Geschikte uitgangsmaterialen voor dit fluo-35 reringsproces zijn onder andere hydroxy-3.5-cyclovitamine D verbindingen met de algemene formule 3, waarin R voorstelt een steroid- 7920016 — 3 — zijketen met de configuratie la of lb, R2, R3, R^ en R5 worden gekozen uit waterstof, hydroxyl, O-lager alkyl en O-acyl, waarbij tenminste êën van de groepen R^, R^ en R^ hydroxy moet zijn, en waarin Rg voorstelt waterstof of lager alkyl en Z voorstelt lager 5 alkyl.
In deze beschrijving verstaat men onder "lager alkyl" een koolwaterstofrest met 1 tot ongeveer 5 koolstof-atomen, die een normale of vertakte ketenconfiguratie kan bezitten (bijvoorbeeld methyl, ethyl, isopropyl, butyl en isobutyl) en onder 10 "acyl" een alifatische acylgroep met 1 tot ongeveer 5 koolstof- atomen (bijvoorbeeld acetyl, propionyl en butyryl) of een aromatische of gesubstitueerde aromatische acylgroep (bijvoorbeeld benzoyl, nitrobenzoyl of chloorbenzoyl).
De uitgangsmaterialen voor de fluorering, 15 dat wil zeggen de 3.5-cyclovitamine D verbindingen met de algemene formule 3, kunnen volgens bekende methodes worden bereid uit 3-hydroxyvitamine D verbindingen, die op hun beurt kunnen worden verkregen door synthese of door isolatie uit natuurlijke produkten (zie bijvoorbeeld Schnoes en DeLuca, Bioorganic Chemistry, 20 E.E. Van Tamelen, ed., Vol. 2, Chap. 12, pag. 299-335, Academie Press, N.Y., 1978).
3.5-cyclovitamine D verbindingen met de algemene formule 3 kunnen worden bereid volgens de procedures van Sheves en Mazur, J.Am.Chem.Soc. 97, 6249 (1975) en Paaren c.s., 25 Proc, Nat. Acad. Sci. USA 75, 2080 (1978). De door deze auteurs beschreven procedures zijn algemene procedures en uitgangsmaterialen met de formule 3 met een van de hierboven aangegeven zijketens zijn daarom gemakkelijk verkrijgbaar uit de beschikbare 3-hydroxyvitamine D verbindingen.
30 Het Amerikaanse octrooischrift 4.069.321 beschrijft de bereüing van variërende in de zijketen gefluoreerde vitamine D^ derivaten en in de zijketen gefluoreerde dihydrotachy-sterolg analogen. De door deze onderzoekers voorgestelde bereidingsmethode omvat de fluorering van een precursor-steroïd en de daarna-35 volgende omzetting van het fluor-steroïd in de gewenste fluor- yjtamine D verbinding. _________________1 7 9 2 0 0 16 — 4
Gevonden werd nu echter dat in de zijketen en/of in ring A gefluoreerde vitamine D verbindingen of analogen met de algemene formules 1 en 2 veel gemakkelijker kunnen worden bereid door directe invoering van fluor in hydroxycyclovitamine D 5 verbindingen met de algemene formule 3 onder gebruikmaking van fluoreermiddelen, zoals dialkylaminozwaveltrifluoride, bijvoorbeeld diethylaminozwaveltrifluoride. Bij toepassing van dergelijke reagentia kunnen ëén of meer fluor-substituenten worden ingevoerd in een vitamine D molecuul door directe vervanging van de hydroxy-10 groep of hydroxygroepen in het uitgangsmateriaal.
Middleton (J.Org.Chem. 40, 574 (1975)) beschrijft de toepassing van diethylaminozwaveltrifluoride voor de vervanging van hydroxygroepen door fluor in organische verbindingen, maar de door deze auteur beschreven toepassingen zijn beperkt tot 15 eenvoudige en stabiele moleculen, die geen basis verschaffen voor de beoordeling van de doeltreffendheid van het reagens voor de directe invoering van fluor in vitamine D verbindingen zonder een wijziging van het gevoelige systeem van dubbelbindingen. Het is deze chemische reactiviteit van het vitamine D chromofoor, die an-20 dere op dit gebied deskundige onderzoekers heeft geleid tot het toepassen van indirecte en bewerkelijke procedures bij pogingen de synthese te bewerkstelligen van fluorvitamine D verbindingen.
Zo worden bijvoorbeeld in het Amerikaanse octrooischrift 4.069.321 methodes voorgesteld voor de bereiding van verscheidene fluor-25 vitamine D analogen, waarbij diethylaminozwaveltrifluoride slechts wordt gebruikt voor de invoering van fluor in precursor-steroïden, die vervolgens worden omgezet in fluorvitamine D analogen. Er is in feite slechts ëén eerdere toepassing beschreven van diethylaminozwaveltrifluoride voor de directe synthese van 25-fluorvitamine 30 uit 25-hydroxyvitamine (zie Onisko, Schnoes en DeLuca, Tetra hedron Letters (No. 13) 1107 (1977)). Dit enige voorbeeld verschaft echter geen aanwijzingen voor de algemene bruikbaarheid van het fluoreermiddel of voor praktische procedures ter bereiding van andere fluorvitamine D verbindingen.
35 Gevonden werd nu dat het bovengenoemde diethylaminozwaveltrifluoride-reagens kan worden gebruikt voor de__ 7920016 — 5 -- invoering van fluor op variërende plaatsen (bijvoorbeeld koolstof-atomen 24, 25, 26) van de zijketen van een cyclovitamine D molecuul, zowel als voor de invoering van fluor in koolstofatoom 1, en op geschikte wijze de doeltreffende bereiding mogelijk maakt 5 van een verscheidenheid van fluorvitamine D verbindingen (formules 1 en 2), waaronder die volgens het bovengenoemde Amerikaanse oc-troois chrift 4.069.321.
Een verder voordeel van de werkwijze volgens de uitvinding is de vorming van zowel 5.6-cis- als 5.6-trans-10 fluorvitamine D verbindingen uit hetzelfde cyclovitamine-uitgangs-materiaal en volgens hetzelfde proces, zodat geen afzonderlijke synthese nodig is voor deze beide gewenste produkten. Bovendien voorziet de toepassing van 3.5-cyclovitamine D uitgangsmaterialen in een in hoge mate geschikte tijdelijke bescherming van de C-3 15 plaats en het trieen-systeem gedurende de fluorering. In het bovengenoemde voorbeeld van Onisko c.s. wordt de C-3-hydroxygroep beschermd door vorming van een 3-0-acylgroep teneinde zowel de fluore-ring op C-3 als de omlegging van het trieen-chromofoor te voorkomen. Bevestigd kan nu worden dat de fluorering van een vita-20 mine D verbinding, die een ombeschermde C-3-hydroxygroep draagt, inderdaad leidt tot ongewenste produkten, waarin het trieen-chromofoor is gewijzigd. De toepassing van de stabiele 3.5-cyclovitamine D verbindingen met de algemene formule 3 als substraten voor de fluorering ondervangt niet alleen deze moeilijkheden, maar maakt 25 eveneens de geschikte regeneratie mogelijk van de gewenste C-3 substituent (C-3-hydroxy, 0-acyl en 0-alkyl) door een daarna volgende, door zuur gekatalyseerde solvolyse.
Tenslotte is eveneens waargenomen dat meer dan ëën fluoratoom op eenvoudige wijze gelijktijdig kan worden 30 ingevoerd door meervoudig gehydroxyleerde (bijvoorbeeld di- en trihydroxy-)cyclovitamine D uitgangsmaterialen te onderwerpen aan een fluorering. Omdat het fluoreringsproces de vervanging bewerkstelligt van een vrije hydroxygroep of vrije hydroxygroepen is het eveneens essentieel dat dergelijke groepen in het uitgangsmateriaal, 35 die niet door fluor moeten worden vervangen, op geschikte wijze worden beschermd, bijvoorbeeld door acylering, zoals acetylering_ i 7920016 — 6 of benzoylering. De bescherming van hydroxygroepen kan gemakkelijk worden bewerkstelligd volgens bekende methodes en na de fluo-rering kunnen de acylgroepen natuurlijk desgewenst gemakkelijk worden verwijderd door hydrolyse onder basische omstandigheden.
5 De inherente bescherming van de C-3 plaats en het trieen-systeem en de gelijktijdige vorming van zowel cisals trans-fluorvitamine-produkten zijn de meest opmerkelijke aspecten van de werkwijze volgens de uitvinding.
Het algemene karakter, het raam en de 10 veelzijdigheid van het directe fluoreringsproces, onder toepassing waarvan fluorvitamine D verbindingen met de algemene formule 1 en fluor-5.6-trans-vitamine D verbindingen met de algemene formule 2 kunnen worden bereid uit uitgangsmaterialen met de algemene formule 3, wordt meer specifiek geïllustreerd door de volgende typische 15 omzettingen.
(1) 25-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D_ -7-==-é-v—25-f luor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine
(fluorering) J J
ËÏcLp 2 * · D„ 7—=—ij--25-fluorvitamine D_ + 25-fluor-5.6-trans- 3 (solvolyse) 3 20 vitamine D^ (2) la-acetoxy-25-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ Ψ trap 1 (fluorering) la-acetoxy-25-fluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ 25 Ψ trap 2 (solvolyse) la-acetoxy-25-fluorvitamine D^ Ψ trap 3 (hydrolyse) 1«-hydroxy-25-fluorvitamine D^ + 30 la-acetoxy-25-fluor-5.6-trans-vitamine D^ Ψ trap 3 (hydrolyse) la-hydroxy-25-fluor-5.6-trans-vitamine D^ (3) la.25-dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ vtra^.A -> 1.25-difluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D„ (fluorering) J J 3 35 7—trap 2 > i,25-difluorvitamine D„ + 1.25-difluor-5.6-trans-(solvolyse) 3 -------------- 792 0 0 1 6 7 vitamine Dy (4) 25-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine tZlTcLD 1 —r-> 25-fluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D„ (fluorenng) j j 2 5 7—\^ 25-fluorvitamine D„ + 25-fluor-5.6-trans- (solvolyse) 2 vitamine B^ (5) 25.26-dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine ~(fluorering)* 25.26-difluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine 10 tr?P 2, > 25.26-difluorvitamine D0 + 25.26-difluor-5.6-(solvolyse) 3 trans-vitamine Dy
De cyclovitamine-uitgang snaterialen, aan-15 gegeven in reacties (1)-(5), worden bereid als beschreven door
Paaren c.s. en Mazur c.s. (zie de hierboven genoemde literatuur-plaatsen). Bij alle geïllustreerde voorbeelden vertegenwoordigt trap (1) de fluoreringsreactie onder gebruikmaking van diethyl-aminozwaveltrifluoride en trap (2) de door een zuur gekatalyseerde 20 solvolyse onder toepassing van de omstandigheden van Paaren c.s.
(zie de bovengenoemde literatuur) en trap (3) de hydrolyse van acyl-beschermingsgroepen of van acylgroepen, ingevoerd door solvolyse (indien aanwezig).
Het zal duidelijk zijn dat de bovengenoemde 25 reacties slechts ter illustratie dienen. Uit de voorbeelden blijkt dat de werkwijze geschikt kan worden gebruikt voor de invoering van fluor in zowel ring A als de zijketen van het steroïdmolecuul en meer in het bijzonder dat vitamine D verbindingen en analogen met fluor-substituenten aan een of meer koolstofatomen 1, 24, 25 30 of 26 gemakkelijk kunnen worden verkregen uit de overeenkomstig gehydroxyleerde cyclovitamine-uitgangsmaterialen.
Een voorkeursreagens voor de fluorering is diethylaminozwaveltrifluoride (Middleton, J.Org.Chem. 40, 574 (1975))· De reactie wordt geschikt uitgevoerd in een halogeenkoolstof-35 oplosmiddel, zoals methyleenchloride, tetrachloorkoolstof of tri- chloorfluormethaan,_bij. lage temperatuur, bijvoorbeelcL^78°C. Voor_ 7920016 8 de vervanging van hydroxygroepen door fluor zijn korte reactietijden, bijvoorbeeld 15-45 minuten, geschikt. Hoewel het reagens eveneens ketogroepen in het molecuul aantast geschiedt dit met een veel kleinere snelheid en daarom is een bescherming van eventueel 5 aanwezige keto-groepen gewoonlijk niet noodzakelijk onder omstandigheden waarin een vervanging van de hydroxygroepen wenselijk is.
Zoals hierboven werd vermeld en zoals werd geïllustreerd door de bovengenoemde reacties moeten de hydroxygroepen in het uitgangsmateriaal, die niet moeten worden vervangen door 10 fluor volgens de onderhavige werkwijze, worden beschermd, bijvoorbeeld geacyleerd (geacetyleerd of gebenzoyleerd). De acylering van hydroxygroep en is natuurlijk een algemeen bekende procedure en deze acylering wordt gewoonlijk bewerkstelligd door behandeling van de hydroxyverhinding met een acyleermiddel (bijvoorbeeld azijn-15 zuuranhydride of benzoylchloride) in een geschikt oplosmiddel (bijvoorbeeld pyridine). Primaire en secundaire hydroxygroepen in vitamine D verbindingen of hun analogen worden gemakkelijk geacyleerd onder gebruikmaking van dergelijke reagentia en oplosmiddelen bij kamertemperatuur (of enigszins verhoogde temperatuur, bij-20 voorbeeld 50°C) over een periode van 2-6 uren. De acylering van tertiaire hydroxygroepen vereist natuurlijk meer drastische omstandigheden, bijvoorbeeld verhoogde temperaturen (bijvoorbeeld 75-100°C) en geschikte reactietijden, bijvoorbeeld 4-24 uren. Het is van voorkeur de reactie uit te voeren in een stikstofatmosfeer 25 teneinde een ontleding van het materiaal te voorkomen. De selectieve acylering van specifieke hydroxylgroepen kan eveneens gemakkelijk worden bewerkstelligd. Zo kan bijvoorbeeld 1.25-dihydroxy- 6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg 1-acetaat of 1.24.25-trihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg 1.24-diacetaat worden verkregen door 30 acetylering van 1.25-dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg respectievelijk 1,24.25-trihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg bij kamertemperatuur, omdat onder dergelijke omstandigheden de tertiaire hydroxygroep niet reageert. Wanneer een selectieve acylering van chemisch identieke hydroxygroepen noodzakelijk is 35 kan een chromatografische scheiding van de produkten nodig zijn.
Zo kunnen de C-l en C-24 monoacetaten van 1.24.25-trihydroxy-6-___ 7920016 --9 -- 3.5-cyclovitamine worden bereid door de acetylering uit te voeren bij kamertemperatuur en de reactie te staken voordat een volledige acetylering is opgettieden. Onder dergelijke omstandigheden wordt een mengsel van vier verbindingen verkregen. Het niet-geace-5 tyleerde uitgangsmateriaal, het 1.24-gediacetyleerde produkt, en de 1-acetoxy- en 24-acetoxy-monogeacetyleerde verbindingen, waaruit de gewenste mono-acetaten (zowel als het 1,24-diacetaat) worden verkregen door chromatografie. Andere gedeeltelijk geacy-leerde produkten, die nodig zijn als uitgangsmaterialen voor de 10 daarna volgende fluorering, worden op analoge wijze verkregen.
Anderzijds kunnen gedeeltelijk geacyleerde verbindingen worden verkregen door eerst alle hydroxygroepen te acyleren en vervolgens een of meer van de acylgroepen door hydrolyse te verwijderen. Zo kan de 24.25-dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine 25-0-acyl- 15 verbinding worden verkregen door gedeeltelijke hydrolyse onder basische omstandigheden van het 24.25-di-O-acyl-derivaat. Deze voorbeelden worden gegeven om aan te tonen dat vele verschillende methodes bekend en beschikbaar zijn voor de bereiding van 0-be-schermde vitamine D verbindingen, die noodzakelijk kunnen zijn 20 voor de daarna volgende fluoreringsreactie.
Wanneer fluor eenmaal is ingevoerd in het molecuul kunnen alle acyl-beschermingsgroepen desgewenst in deze trap of op geschikte wijze door basische hydrolyse worden verwijderd, bijvoorbeeld door behandeling van het geacyleerde fluor-25 cyelovitamine-analoog met 5 %’s KOH in MeOH bij een temperatuur van 25-80°C gedurende 1-4 uren. Anderzijds kan de desacylering worden bewerkstelligd na de solvolyse van het cyclovitamine-inter-mediair tot de cis- en trans-vitamine-produkten, zoals hieronder zal worden beschreven.
30 Na de fluor-inyoering worden de fluor- cyclovitamine-derivaten blootgesteld aan een door zuur gekatalyseerde solvolyse onder gebruikmaking van bijvoorbeeld de omstandigheden, beschreven door Sheves en Mazur en Paaren c.s. in de bovengenoemde literatuurplaatsen.
35 Zoals blijkt uit de bovenstaande illustra tieve reacties leidt de solvolyse tot zowel de 5.6-cis-fluor-vita- ! 79^0016 10 mine D produkten als de overeenkomstige 5.6-trans-fluorvitamine D analogen. Deze gefluoreerde cis- en trans-reactieprodukten kunnen geschikt worden gescheiden door chromatografie in deze trap (zoals beschreven door Paaren c.s. in de bovengenoemde literatuur) en 5 kunnen vervolgens afzonderlijk worden blootgesteld aan een hydrolyse (indien acyl-beschermingsgroepen moeten worden verwijderd) onder toepassing van standaardomstandigheden, bijvoorbeeld 0,1M KOH in methanol bij 60°C gedurende 1-4 uren. Anderzijds kan de verwijdering van beschermingsgroepen natuurlijk eveneens worden 10 bewerkstelligd voor de scheiding van de cis- en trans-isomeren.
In afhankelijkheid van de exacte solvolyse-omstandigheden worden 5.6-cis- en trans-produkten met verschillende C-3 substituenten verkregen. Aldus verkrijgt men bij de uitvoering van de solvolyse in een medium, bestaande uit waterige dioxan en een katalytische 15 hoeveelheid zuur (bijvoorbeeld p-tolueensulfonzuur of methaan-sulfonzuur) gefluoreerde 5.6-cis- en -trans-produkten, die een C-3-hydroxy-substituent dragen. Bij de uitvoering van de solvolyse in een watervrij alkoholisch oplosmiddel (bijvoorbeeld methanol, ethanol, isopropanol, etc.), bevattende de genoemde zure kata^sa-20 toren, verkrijgt men 5.6-cis- en -trans-produkten, die een C-3 O-alkyl-substituent dragen, waarin de alkylgroep overeenkomt met het alkylgedeelte van het gebruikte alkohol-oplosmiddel. De solvolyse van fluorcyclovitamine D verbindingen in warme azijnzuur (bijvoorbeeld 50-60°C) geeft 5.6-cis- en -trans-fluorvitamine D 25 verbindingen, die een C-3-acetoxy-substituent dragen, en indien de solvolyse van fluorcyclovitaminen wordt uitgevoerd in dioxan/ mierezuur-oplosmiddelen worden de overeenkomstige 3-0-formyl-5.6-cis- en -trans-produkten verkregen. De toepassing van andere organische zuren (bijvoorbeeld trifluorazijnzuur) geeft natuurlijk 30 de analoge 3-0-acyl-produkten. Desgewenst kunnen deze C-3 0-geacy-leerde produkten gemakkelijk worden omgezet in de overeenkomstige C-3 hydroxyverbindingen door milde basische hydrolyse. Uitgaande van cyclovitamine D verbindingen met de algemene formule 3 omvat de bereiding van 5.6-cis- en -trans-fluorvitamine D verbindingen 35 volgens de werkwijze van de uitvinding dus een essentiële twee- trapsprocedure, namelijk (1) de directe fluor-invoering onder ge-_ 7920016 11 bruikmaking van een dialkylaminozwaveltrifluoride-reagens en (2) de daarna volgende solvolyse onder gebruikmaking van een zure katalysator. De voorafgaande hydroxy-bescherming (bijvoorbeeld door O-acylering) is slechts nodig in die gevallen waarin slechts éën 5 van meerdere aanwezige hydroxygroepen in het uitgangsmateriaal moet worden vervangen door fluor. Deze O-acyl-heschermingsgroepen kunnen desgewenst gemakkelijk worden verwijderd en zoals hierboven werd vermeld kan deze bescherming opheffende trap op een willekeurig moment na de fluor-invoering worden uitgevoerd. Bijvoorbeeld is de 10 verwijdering van de 0-beschermingsgroep mogelijk onmiddellijk na de fluorering (voor de solvolyse) of onmiddellijk na de solvolyse (voor de scheiding van de cis- en trans-produkten) of tenslotte na de scheiding van de cis- en trans-isomeren, die resulteren uit de solvolyse. Een keuze tussen deze mogelijkheden zal gebaseerd zijn 15 op de gemakkelijkheid van de praktische uitvoering en/of het gewenste specifieke produkt.
De uitvinding wordt verder toegelicht maar niet beperkt door de volgende voorbeelden.
Voorbeeld I
20 1α.25-dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg 1-acetaat 1.25- dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ (5 mg), bereid volgens de methode van Paaren c.s. (Proc. Nat. Acad. Sci. USA 75, 2080 (1978), wordt geacetyleerd met azijnzuur-anhydride (0,5 ml) en pyridine (2 ml) bij 50 C in een argon- 25 atmosfeer gedurende 2 uren. Na de gebruikelijke opwerking wordt het 1-acetaat-produkt (5,5 mg) geïsoleerd door hogedruk-vloeistof-chromatografie over een silicagel-kolom onder elutie met 2 Z's 2-propano1/hexaan.
Voorbeeld II
30 25-fluor-1q-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamineDg 1-acetaat 1.25- dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg 1-acetaat (3 mg) in CHgClg bij -78°C in een argonatmosfeer wordt behandeld met diethylaminozwaveltrifluoride (5 mg). Na verscheidene minuten laat men de temperatuur van het reactiemengsel oplopen tot 35 kamertemperatuur en vervolgens wordt de reactie beëindigd met 5 %'s KgCOg. Een verdere hoeveelheid CHgClg wordt toegevoegd, de 7920016 “12 organische fase wordt afgescheiden en het 25-gefluoreerde produkt wordt geïsoleerd door dunnelaagchromatografie onder gebruikmaking van een silicagel-plaat en 20 %'s ethylacetaat in hexaan als oplosmiddel, waarbij 2 mg zuiver produkt worden verkregen.
5 Voorbeeld III
25-fluor-1q-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg
Een monster van 25-fluorcyclovitamine-derivaat, zoals verkregen in voorbeeld II, wordt opgelost in 0,1M KOH/methanol-oplosmiddel en gedurende 2 uren verwarmd op 50°C.
10 Water wordt vervolgens toegevoegd en het gehydrolyseerde produkt wordt geëxtraheerd in ether. De zuivering door dunnelaagchromatografie op silicagel-platen onder ontwikkeling met 30 %’s ethylacetaat in Skellysolve B geeft zuiver 25-fluor-1-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg.
15 Voorbeeld IV
25-fluor-Ια-hydroxyvitamine Dg en 25-fluor-1a-hydroxy-5.6-transvitamine Dg
Een oplossing van 3 mg 25-fluor-la-acetoxy- 6-methoxy-3.5-cyclovitamine Dg (het produkt van voorbeeld II) in 20 een 3:1 mengsel van dioxan en water (1,5 ml), bevattende 0,2 mg p-tolueensulfonzuur wordt gedurende 15 minuten verwarmd op 55°C. Verzadigd NaHCOg (2 ml) wordt vervolgens toegevoegd en de produk-ten worden geëxtraheerd in ether. Het ether-oplosmiddel wordt gedroogd en afgedampt en het residu wordt gechromatografeerd op 25 silicagel-platen teneinde de 5.6-cis- en 5.6-trans-25-fluorvita-mine D produkten te scheiden. De ontwikkeling met 25 %'s ethylacetaat in Skellysolve B geeft 1 mg zuiver 25-fluor-la-acetoxy-vitamine Dg en 0,3 mg 25-fluor-la-acetoxy-5.6-trans-vitamine Dg.
De hydrolyse van 25-fluor-la-acetoxy vitamine Dg in 0,1 Μ Κ0Η/ 30 MeOH gedurende 2 uren bij 50°C geeft een enkelvoudig produkt, 25-fluor-la-hydroxyvitamine Dg! uv 265 nm (ε = 18.200); NMR (270 MHz) 0,55 (s, 18-CH3), 0,94 (d, J = 6 Hz, 21-CHg), 1,34 (d, J = 22 Hz, 26,27-(CHg)2), 4,23 (m, 3a-H), 4,43 (m, Ιβ-H), 5,33, 5,01 (2 m, 19-CH»), 5,85, 6,38 (AB kwartet, J - 11 Hz, 6 en 7-H's); ^ + 35 massaspectrum m/e 418, 3197 (M , 0,07, berekend 418, 3222); 400, 3141 (M+-H-0); .0,22; berekend 400, 31Α3)^_3_8.2,_3027___: 7920016 '13 · (Μ+-2 χΗ20), 0,23, berekend 382, 3031), 380, 3059 (M+-H20)-HF, 0,18, berekend 380, 3069), 362, 2974 (M+-2 x H20-HF, 0,18, berekend 362, 2997), 152, 0842 (0,42, berekend 152, 0840), 134, 0736 (1,00 berekend 134, 0734). Een analoge hydrolyse van 25-fluor-5 la-acetoxy-5.6-transvitamine D^ geeft 25-fluor-la-hydroxy-5.6-trans-vitamine D~ in zuivere vorm (λ 270 nm); massaspectrum,
j lfl.cl2C
m/e 418.
Voorbeeld V
la.25-difluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine 10 Een oplossing van 1 mg 1.25-dihydroxy-6- methoxy-3.5-cyclovitamine D^ (bereid volgens de methode van Paaren c.s. (Proc. Nat. Acad. Sci. USA 75, 2080 (1978)) in CH2C12 bij -78°C in een argonatmosfeer wordt behandeld met diethylaminozwavel-trifluoride (2 mg). Na 10 minuten laat men de temperatuur van het 15 reactiemengsel oplopen tot kamertemperatuur en de reactie wordt vervolgens beëindigd met 5 %’s K^COy Na de gebruikelijke op-• werking (zie bijvoorbeeld voorbeeld II) wordt 1.25-difluor-6- methoxy-3.5-cyclovitamine D^ (250yUg) geïsoleerd in zuivere vorm door hogedruk-vloeistofchromatografie onder gebruikmaking van een 20 silicagel-kolom, waarbij men elueert met 10 %'s tetrahydrofuran/ hexaan. Anderzijds kan het produkt worden gezuiverd door dunnelaag-chromatografie op silicagel onder gebruikamking van 20 %’s ethyl-acetaat in Skellysolve B als ontwikkelingsmiddel.
Voorbeeld VI
25 la.24(R)25-trihydroxy-6-methoxy-3♦5-cyclovitamine D^ 1.24-diacetaat
Een pyridine-oplossing (0,2 ml) van 10 mg 24 (R) 25-dihydroxyvitamine wordt behandeld met 1,5 equivalent p-tolueensulfonylchloride bij 0 C gedurende 48 uren. Verdunning met verzadigde NaHCO^-oploss ing en extractie met ether geeft het ruwe 30 3-tosyl-produkt. Dit produkt in 2 ml MeOH wordt behandeld met 25 mg NaHCOg en in een stikstofatmosfeer gedurende 20 uren op 50°C verhit. Verdunning met water en extractie met ether geeft het cyclovitamine-produkt. Chromatogragie van het produkt op silicagel-platen (40 %’s ethylacetaat in Skellysolve B) geeft 4 mg 24(R).25- 35 dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ in zuivere vorm.
Dit produkt wordt geoxydeerd_door_behande=_1 7920016 - 14 ling met SeC^ volgens de procedures van Paaren c.s. (Proc. Nat.
Acad. Sci. USA 75, 2080 (1978)): 4 mg van het cyclovitamine in CH2Cl2-oplossing (0,5 ml) worden behandeld met Se02 (1 mg) en lO^ul 70 %’s t-butylhydroperoxyde gedurende 30 minuten bij 25°C.
5 Na de toevoeging van NaOH-oplossing (10 %) wordt het 1-hydroxy-cyclovitamine-produkt geëxtraheerd in ether. Afdamping van het oplosmiddel geeft een olie, die gechromatografeerd wordt op silica-gel-platen onder gebruikmaking van 50 %’s ethylacetaat in Skelly-solve B, waarbij 1,5 mg la.24(R).25-trihydroxy-6-methoxy-3.5-10 cyclovitamine D^ worden verkregen. Dit produkt wordt geacetyleerd onder gebruikelijke omstandigheden (0,2 ml azijnzuuranhydride in 1 ml pyridine, 50°C, 2 uren). Verdunning van het reactiemengsel met water, extractie met ether en afdamping van de ether geeft ongeveer 2 mg la.24(R).25-trihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ 1.24-15 diacetaat, dat voldoende zuiver is voor de daarna volgende fluo- rering.
Voorbeeld Vil 25-fluor-l.24(R)-dihydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^ 1.24-diacetaat 20 Het diacetoxy-cyclovitamine-produkt, ver kregen in voorbeeld VI, wordt gefluoreerd onder gebruikelijke omstandigheden (CH2C12 oplosmiddel, 3 mg diethylaminozwaveltrifluo-ride, -78°C, 15 minuten). Men laat de temperatuur van het reacde-mengsel vervolgens oplopen tot kamertemperatuur en beëindigt de 25 reactie met 5 %’s K^CO^-oplossing, waarna een verdere hoeveelheid CH2C12 wordt toegevoegd. De organische fase wordt afgescheiden en het 25-gefluoreerde produkt wordt geïsoleerd en gezuiverd door dunnelaagchromatografie op silicagel-platen onder gebruikmaking van 25 %’s ethylacetaat in Skellysolve B als oplosmiddelsysteem, 30 waarbij 1 mg 25-fluor-la.24(R)-dihydroxy-5-methoxy-3.5-cyclo-vitamine D^ 1·24-diacetaat wordt verkregen.
Voorbeeld VIII
25-fluor-1α.24(R)-dihydroxyvitamine D^ en 25-fluor-la.24(R)-di-hydroxy-5.6-trans-vitamine D^ 35 Een dioxan-oplossing van het 25-fluor- cyclovitamine-produkt als verkregen in voorbeeld VII wordt verwarmd ; 7920016 _ 15 ...
op 55°C en behandeld met een 1:1 mengsel van dioxan en 98 %'s mierezuur (200^ul). Na 15 minuten wordt ijswater toegevoegd en worden de produkten met ether geëxtraheerd. Na de afdamping van het oplosmiddel wordt het residu opgenomen in dioxan/methanol 5 (1:1, 1 ml) en behandeld met 0,1 ml van een waterige K^CO^- oplossing gedurende 5 minuten (teneinde de C-3-formiaat-groepen te hydrolyseren). Extractie van de produkten in ether en chromato-grafie op silicagel-platen (onder gebruikmaking van 40 %’s ethyl-acetaat in Skellysolve B) geeft 0,3 mg 25-fluor-la.24(R)-dihydroxy-10 vitamine 1.24-diacetaat en 0,1 mg 25-fluor-rla.24(R)-dihydroxy- 5.6-trans-vitamine 1.24-diacetaat. Het eerste produkt wordt ge-hydrolyseerd (0,1 M KOH/MeOÏÏ, 50°C, 3 uren) tot 25-fluor-la.24(R)-dihydroxyvitamine D^. Een analoge hydrolyse van het 5.6-trans-diacetaat geeft 25-fluor-la.24(R)-dihydroxy-5.6-trans-vitamine D^.
15 Voorbeeld XX
25-fluorvitamine en 25-fluor-5»6-trans-vitamine
Een oplossing van 15 mg 25-hydroxy-6-methoxy- 3.5-cyclovitamine (bereid volgens de methode van Paaren c.s.,
Proc. Nat. Acad. Sci. USA 75, 2080 (1978)) in 0,5 ml dichloor-20 methaan wordt druppelsgewijze toegevoegd aan een afgekoeld (-78°C) mengsel van diethylaminozwaveltrifluoride (30 mg) in 0,5 ml C^C^· Na roeren gedurende 5 minuten wordt het koelbad verwijderd en het reactiemengsel verwarmd tot kamertemperatuur. Waterig NaHCOg (4 %fs, 5 ml) en 10 ml worden toegevoegd. Na de af- 25 scheiding van de organische fase, wassen met ^0, droging (Na2S0^) en afdamping van het oplosmiddel wordt het produkt, 25-fluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^, gezuiverd op silicagel-dunnelaag-platen, die ontwikkeld worden met 10 %’s ethylacetaat in Skellysolve B, waarbij 10 mg produkt worden verkregen. Dit intermediair 30 wordt direct gesolvolyseerd onder toepassing van de omstandigheden volgens Paaren c,s. (zie de bovengenoemde literatuur) (2,5 ml van een 3:1 mengsel van dioxan/water, bevattende 0,2 mg p-tolueen-sulfonzuur, verwarmd op 55°C gedurende 15 minuten, gevolgd door toevoeging van NaHCO^ (3 ml) en extractie van het produkt in ether) 35 waarbij een 3:1 mengsel (opbrengst 50 %) van 25-fluorvitamine en 25-fluor-5.6-transvitamine D^ wordt verkregen. Scheidingdóor_! 7920016 - 16 TLC op silicagel onder gebruikmaking van 15 %’s ethylacetaat in Skellysolve B als oplosmiddel geeft 25-fluorvitamine D^ als kleurloze olie: uv (EtOH) ^max 265 nm; ir (CCl^) 3620 (hydroxyl), 3080 cm * (exocyclisch methyleen); nmr (CDCl^) δ 6,24 (d, J = 11 5 Hz, 1H, C-6), 6,03 (d, J = 11 Hz, 1H, C-7), 5,05 (m, 1H, C-19), 4,82 (d, J = 2,6 Hz, 1H, C-19), 3,95 (t van t, Jj = 7,1 Hz, J2 = 3,6 Hz, 1H, C-3), 1,34 (d, JRF = 21,3 Hz, 6H, C-26,27), 0,93 (d, J = 6 Hz, 3H, C-21), 0,54 (s, 3H, C-18); massaspectxum m/e (relatieve intensiteit) 402, 3284 (13, M+, 402, 3298 berekend voor 10 C2?H430F), 360 (4), 271 (4), 253 (5), 136 (100), 118 (88), 61 (12), 59 (1); homogeen op glc (t_ = 3,6 en 3,9 min voor de pyro- en iso- K.
pyro-derivaten 2 mm x 6’ 3 % OV-101, 260 C oven-isotherm).
Voorbeeld X
25-fluorvitamine en 25-fluor-5.6-trans-vitamine P2 15 Een methyleenchloride-oplossing van 25- hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D2 (bereid uit 25-hydroxy-vitamine D2 volgens de procedures van Paaren c.s., Proc. Nat.
Acad. Sci. _75, 2080 (1978)) wordt gefluoreerd en het produkt, 25-fluor-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D2 wordt geïsoleerd op de in 20 voorbeeld IX beschreven wijze. Na de solvolyse van dit intermediair op exact dezelfde wijze als beschreven in voorbeeld IX wordt een (4:1) mengsel van 25-fluorvitamine D2 en 25-fluor-5.6-trans-vitamine D2 verkregen, dat wordt gescheiden op silicagel-dunnelaag-platen (12 %'s ethylacetaat/Skellysolve B als oplosmiddel), 25 waarbij men verkrijgt zuiver 25-fluorvitamine D0 (uv, λ 265 nm; mol.gew. =414) en 25-fluor-5,6-trans-vitamine D„ (uv, λ 270 L max nm; mol.gew. = 414).
Voorbeeld XI
25-fluor-24(R)-hydroxyvitamine en 25-fluor-24(R)-hydroxy-5.6-30 trans-vitamine D^
Uit 24(R).25-dihydroxyvitamine D^ wordt het vereiste 3.5-cyclovitamine D intermediair, 24(R) .25-hydroxy-6-methoxy-3.5-cyclovitamine D^, bereid als beschreven in voorbeeld VI. Deze verbinding (5 mg) wordt geacetyleerd (0,3 ml azijnzuuranhy-35 dride in 1,5 ml pyridine bij 50°C gedurende 2 uren) onder vorming van het overeenkomstige 24-monoacetaat-derivaat (5 mg). Dit produkt ' 792 00 1 6 17 wordt direct gefluoreerd en geïsoleerd als beschreven in voorbeeld VII en het gewenste 25-fluor-produkt wordt vervolgens gezuiverd door dunnelaagchromatografie (15 % ethylacetaat in Skellysolve B).
De solvolyse van dit materiaal op exact dezelfde wijze als be-5 schreven in voorbeeld VIII geeft het verwachte mengsel van 3-for-myloxy-24-acetoxy-25-fluorvitamine D^ en het overeenkomstige 5.6- trans-isomeer, dat wordt onderworpen aan een hydrolyse (0,1M KOH/methanol, 1,5 uur, kamertemperatuur) ter verwijdering van de formyl- en acetylgroepen. Af damping van oplosmiddel, toevoeging 10 van water en extractie met ether geeft 2,5 mg ruwe produkten. Hogedruk-vloeistofchromatografie op een 0,7 x 25 cm kolom met silicagel van 5 micron, waarbij men elueert met 2 %’s isopropanol/ hexaan, geeft 25-fluor-24(R)-hydroxyvitamine (1 mg): uv λ 265 nm; nmr δ 0,55 (singlet, 18-methyl), 0,94 (doublet J =
HlclX
15 5,9 Hz, 21-methyl), 1,34, 1,33 (twee doublets, J = 22 Hz elk, 26- en 27-methyl), 3,52 (multiplet, 24S-proton), 3,95 (multiplets 3a-proton), 4,82, 5,06 (multiplets, 19-protonen) 6,04, 6,24 (ΔΒ kwartet, J = 12 Hz, 6.7-protonen); massaspectrum m/e (samenstelling, m/e berekend) 418, 3264 (C27H4302F, 418, 3247); 398,3132 20 (C27H4202; 398,3185); 385,2904 (C^H^OF; 385,2906), 271,2050 (C19H2?0; 271,2061), 253,1962 (CjgH^; 253,1956); 136,0891 (CgH^O; 136,0888), 118,0783 (CgH^; 118,0782); en 25-fluor-24(R)-hydroxy- 5.6- trans-vitamine L: uv λ 272 nm; wanneer men het aanvan-kelijke solvolyse-produktmengsel onderwerpt aan een hydrolyse met
25 0,1M waterig kaliumcarbonaat als beschreven in voorbeeld VIII
wordt de 3-formylgroep verwijderd en door chromatografie van het resulterende mengsel (silicagel-platen, 20 %Ts ethylacetaat/ Skellysolve B als oplosmiddel) verkrijgt men zuiver 24(R)-acetoxy-25-fluor-vitamine en 24(R)-acetoxy-25-fluor-5.6-trans-vitamine 30 D3.
Biologische activiteit van fluorvitamine D verbindingen.
De nieuwe fluorvitamine D verbindingen, bereid als hierboven beschreven, vertonen een aanzienlijke vitamine D-achtige biologische activiteit wanneer zij worden onder-35 zocht op vitamine D-deficiënte dieren, De door deze fluorvitamine- D verbindingen vertoonde vitamine D-achtige activiteiten omvatten i 7920016 — 18 de stimulering van het calciumtransport in de ingewanden, de stimulering van de calcium-mobilisatie uit de beenderen en de calci-ficering van de beenderen. Voor het aantonen van deze effecten is een wenselijk proefdier een pas gespeende mannetjes rat, die 5 wordt gehouden op een vitamine D-deficiënt laag calciumdieet of op een vitamine D-deficiënt laag fosfordieet, zoals beschreven door Suda c.s., J. Nutr. 100, 1049 (1970). Bij dieren, die gehouden worden op een laag calciumdieet, kan de calcium-absorptie van de ingewanden worden bepaald met de binnenste buiten gekeerde darm-10 zak-techniek volgens Martin en DeLuca (Am. J. Physiol. 216, 1351 (1969)) en de calcium-mobilisatie van de beenderen kan worden bepaald door de stijging van het serum-calcium-gehalte, zoals bijvoorbeeld beschreven door Blunt c.s., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 61, 1503 (1968); de mate van de endochondrale calcificering kan 15 worden vastgesteld volgens de "lijn-proef" methode, beschreven in de U.S. Pharmacopeia (15th revision, pag. 889, Mack Publ. Easton,
Pa. (1955)), onder gebruikmaking van dieren, die op een laag fosfordieet worden gehouden.
Onder toepasang van dergelijke methodes 20 kan de biologische werking van de nieuwe fluorvitamine D verbindingen volgens de uitvinding gemakkelijk worden aangetoond. Aldus zal een dosis van 5^ug van 25-fluorvitamine D2, toegediend aan vitamine D-deficiënte, calcium-arme dieren, een aanzienlijke stimulering bewerkstelligen van het calciumtransport van de inge-25 wanden en een verhoging van de serumcalcium-niveaus binnen 24 uren na de toediening.
Op analoge wijze zal een dosis van l^ug van la-hydroxy-25-fluorvitamine D2 in hoge mate doeltreffend zijn bij het stimuleren van het calciumtransport in de ingewanden en 30 van, de calcium-mobilisatie van de beenderen (zoals gemeten aan de stijging van de serumcalciunr-niveaus), terwijl de verbinding eveneens de calcificering van rachitische beenderen, zoals bepaald via de ’’lijn-proef'score, bevordert.
Fluor-5.6-trans-vitamine D verbindingen 35 vertonen eveneens een uitgesproken vitamine D-achtige activiteit.
7920016 — 19
Zo is bijvoorbeeld 25-fluor-5.6-trans-vitamine werkzaam bij de stimulering van bet calciumtransport van de ingewanden, de calcium-mobilisatie van de beenderen en de genezing van rachitis bij deze proefdieren.
7920016
Claims (18)
1. Werkwijze ter bereiding van fluorvita-mine D verbindingen en fluor-5.6-trans-vitamine D verbindingen met de formules 1 en 2, waarin R voorstelt een steroïd-zijketen 5 met de configuratie la of lb, waarin Rj voorstelt hydroxy, 0-acyl of 0-lager alkyl, R^, Rg, R^ en R^ elk worden gekozen uit waterstof, hydroxy, 0-lager alkyl, 0-acyl en fluor, waarbij tenminste één van de groepen R^, R^ en R^ fluor is, en Rg voorstelt waterstofstof of lager alkyl, met het kenmerk, dat men 3.5-cyclovitamine D ver-10 bindingen met de formule 3, waarin Z voorstelt lager alkyl, R voorstelt een steroïd-zijketen met de configuratie la of lb, R2, Rg, R^ en R^ elk worden gekozen uit waterstof, hydroxy, 0-acyl, 0-lager alkyl en fluor, waarbij tenminste één van de groepen Rg, R^ en R^ hydroxy moet zijn, en Rg voorstelt waterstof of lager 15 alkyl, behandelt met een fluoreermiddel, het gefluoreerde produkt wint, het gewonnen produkt onderwerpt aan een door zuur gekatalyseerde solvolyse, waarbij een produkt, omvattende een mengsel van fluorvitamine D en fluor-5.6-trans-vitamine D produkten, wordt verkregen, deze produkten chrömatografisch scheidt en deze produk-20 ten elk wint.
2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men een of meer hydroxy groepen, aanwezig in het 3.5-cyclovitamine D uitgangsmateriaal, tegen fluorering beschermt door acylering alvorens de behandeling met het fluoreermiddel 25 wordt uitgevoerd.
3. Werkwijze volgens conclusies 1 of 2, met het kenmerk, dat men een of meer beschermende acylgroepen of eventuele acylgroepen, ingevoerd gedurende de solvolyse, verwijdert door hydrolyse onder basische omstandigheden, voor of na de chroma- 30 tografische scheiding van de solvolyse-produkten.
4. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het fluoreermiddel een dialkylaminozwaveltrifluoride is,
5. Werkwijze volgens conclusie 4, met het 35 kenmerk, dat het fluoreermiddel diethylaminozwaveltrifluoride is.
6. Verbindingen met de algemene formule 1, 7920016 waarin R voorstelt een steroïd-zijketen met de formule lb, waarin Rj voorstelt hydroxy, 0-acyl of O-lager alkyl, R2 voorstelt waterstof, hydroxy of O-acyl, R^, R^ en R,. elk worden gekozen uit waterstof, hydroxy, O-acyl, O-lager alkyl en fluor, waarbij tenminste 5 een van de groepen R^, R^ en R^ fluor is, en Rg voorstelt waterstof of lager alkyl.
7. Verbindingen volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat R^ fluor voorstelt.
8. Verbindingen volgens conclusie 6, met 10 het kenmerk, dat R^ fluor voorstelt.
9. Verbindingen volgens conclusies 7 of 8, met het kenmerk, dat Rj hydroxy voorstelt.
10. Verbindingen volgens conclusie 9, met het kenmerk, dat R2 waterstof of hydroxy voorstelt.
11. Verbindingen volgens conclusie 6, waarin Rg voorstelt methyl, met de stereochemische configuratie van de zijketen van ergosterol.
12. Verbindingen met de algemene formule 2, waarin R voorstelt een steroïd-zijketen met de formule la of lb, 20 waarin Rj voorstelt hydroxy, O-acyl of O-lager alkyl, R2 voorstelt waterstof, hydroxy of O-acyl, R^, R^ en R,. elk worden gekozen uit waterstof, hydroxy, O-acyl, O-lager alkyl en fluor, waarbij tenminste een van de gföepen R^, R^ en R^ fluor is. en Rg voorstelt waterstof of lager alkyl.
13. Verbindingen volgens conclusie 12, met het kenmerk, dat R. fluor voorstelt. - 4
14. Verbindingen volgens conclusie 12, met het kenmerk, dat R^ fluor voorstelt.
15. Verbindingen volgens conclusies 13 of 30 14, met het kenmerk, dat R^ hydroxy voorstelt.
16. Verbindingen volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat R2 waterstof of hydroxy voorstelt.
17. Verbindingen volgens conclusie 12, waarin Rg voorstelt methyl, met de stereochemische configuratie 35 van de zijketen van ergosterol.
18. 25-fluor-vitamine ^2'_____________ 7920016 19. la-hydroxy-25-fluorvitamine 20. 25-fluor-5.6-trans-vitamine - 21. 25-fluor-5.6-trans-vitamine D^. 22. la-hydroxy-25-fluor-5.6-trans-vitamine · 23. 24-hydroxy-25-fluor-5.6-trans-vitamine D^. 24. la-hydroxy-25-fluor-5.6-transvitamine D^. 25. 1a.24(R)-dihydroxy-25-fluor-5.6-trans- vitamine Dg 7920016
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US92827978 | 1978-07-26 | ||
| US05/928,279 US4188345A (en) | 1978-07-26 | 1978-07-26 | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL7920016A true NL7920016A (nl) | 1980-05-30 |
Family
ID=25456012
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL7920016A NL7920016A (nl) | 1978-07-26 | 1979-07-24 | Werkwijze ter bereiding van in de zijketen gefluoreerde vitamine d verbindingen. |
| NL7920012A NL7920012A (nl) | 1978-07-26 | 1979-07-24 | Werkwijze ter bereiding van 1-gefluoreerde vitamine d verbindingen. |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL7920012A NL7920012A (nl) | 1978-07-26 | 1979-07-24 | Werkwijze ter bereiding van 1-gefluoreerde vitamine d verbindingen. |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4188345A (nl) |
| JP (2) | JPS6312868B2 (nl) |
| AU (1) | AU521131B2 (nl) |
| BE (1) | BE877918A (nl) |
| CH (2) | CH641445A5 (nl) |
| DK (2) | DK154211C (nl) |
| FR (1) | FR2433514B1 (nl) |
| GB (1) | GB2026494B (nl) |
| IE (1) | IE48463B1 (nl) |
| IL (1) | IL57801A (nl) |
| NL (2) | NL7920016A (nl) |
| NZ (1) | NZ190939A (nl) |
| SE (2) | SE8001746L (nl) |
| WO (2) | WO1980000339A1 (nl) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4196133A (en) * | 1979-03-05 | 1980-04-01 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 24,24-Difluoro-25-hydroxycholecalciferol |
| US4410515A (en) * | 1981-04-01 | 1983-10-18 | Massachusetts General Hospital | Vitamin D glycosides and a method of use |
| JPS59501264A (ja) * | 1982-06-30 | 1984-07-19 | マサチユ−セツツ ゼネラル ホスピタル | ビタミンｄグリコシド類 |
| US4428946A (en) * | 1982-07-26 | 1984-01-31 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of preventing milk fever in dairy cattle |
| US4448721A (en) * | 1982-09-20 | 1984-05-15 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Hydroxyvitamin D2 compounds and process for preparing same |
| GB2145091B (en) * | 1983-08-18 | 1987-08-12 | Wisconsin Alumni Res Found | Vitamin d3 derivatives |
| US4661294A (en) * | 1985-03-18 | 1987-04-28 | The General Hospital Corporation | Biologically active 1-thio derivatives of vitamin D |
| US5401731A (en) * | 1989-06-29 | 1995-03-28 | Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S (Lovens Kemiske Fabrik Productionsaktieselskab) | Vitamin D analogues |
| TR25295A (tr) * | 1992-02-26 | 1993-01-01 | Simfer Dayanikli Tueketim Mamu | Kati yakit yakan sobalar icin yanma havasi ön isitma sistemi |
| US5384314B1 (en) * | 1994-03-11 | 1997-08-05 | Hoffmann La Roche | 1alpha-fluoro-25-hydroxy-16-ene-23-yne-cholecalciferol |
| AU717238B2 (en) * | 1995-09-21 | 2000-03-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Calcitriol derivatives and their uses |
| US5952317A (en) * | 1995-09-21 | 1999-09-14 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Calcitriol derivatives and their uses |
| US5976784A (en) * | 1996-09-20 | 1999-11-02 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Calcitriol derivatives and their uses |
| CA2289209C (en) | 1997-05-16 | 2006-07-25 | Women & Infants Hospital | Cyclic ether vitamin d3 compounds, 1.alpha. (oh) 3-epi-vitamin d3 compounds and uses thereof |
| AU2007298673A1 (en) | 2006-04-06 | 2008-03-27 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 2- substituted-1alpha, 25-dihydroxy-19,26,27-trinor vitamin D analogs and uses thereof |
| EP2001841B1 (en) * | 2006-04-06 | 2012-06-13 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 2-methylene-1 alpha-hydroxy-18,19,21-trinorvitamin d3 analogs and uses thereof |
| WO2008035207A2 (en) * | 2006-04-06 | 2008-03-27 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 2-methylene-1alpha-hydroxy-19,21-dinorvitamin d3 analogs and uses thereof |
| WO2007118198A2 (en) * | 2006-04-06 | 2007-10-18 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 2-METHYLENE-1α,25-DIHYDROXY-19,21-DINORVITAMIN D3 ANALOGS AND USES THEREOF |
| US7538098B2 (en) * | 2006-04-06 | 2009-05-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 19-nor-vitamin D analogs with 1,2 or 3,2 heterocyclic ring |
| WO2008125901A2 (en) * | 2006-04-06 | 2008-10-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 2-methylene-1alpha,25-dihydroxy-18,19,21-trinorvitamin d3 and uses thereof |
| US7763598B2 (en) * | 2006-04-10 | 2010-07-27 | Wisconsin Alumni Research Foundation | 1α-hydroxy-2-(3′-hydroxypropylidene)-19-nor-vitamin D compounds with a 1,1-dimethylpropyl side chain |
| US8377913B2 (en) * | 2007-11-20 | 2013-02-19 | Abbvie Inc. | Vitamin D receptor activators and methods of making |
| US8814007B2 (en) | 2010-12-31 | 2014-08-26 | Medline Industries, Inc. | Dispenser with directional flow controlling flange and corresponding systems |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3833622A (en) * | 1969-03-17 | 1974-09-03 | Upjohn Co | Crystalline 25-hydroxycholecalciferol hydrate and structurally related compounds |
| US4069321A (en) * | 1975-10-14 | 1978-01-17 | Merck & Co., Inc. | Blocked cholecalciferol and dihydrotachysterol 3 derivatives |
-
1978
- 1978-07-26 US US05/928,279 patent/US4188345A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-07-06 NZ NZ190939A patent/NZ190939A/xx unknown
- 1979-07-13 IL IL57801A patent/IL57801A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-07-24 WO PCT/US1979/000529 patent/WO1980000339A1/en unknown
- 1979-07-24 CH CH249680A patent/CH641445A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-07-24 JP JP54501224A patent/JPS6312868B2/ja not_active Expired
- 1979-07-24 CH CH2497/80A patent/CH650237A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-07-24 WO PCT/US1979/000528 patent/WO1980000338A1/en unknown
- 1979-07-24 NL NL7920016A patent/NL7920016A/nl unknown
- 1979-07-24 NL NL7920012A patent/NL7920012A/nl unknown
- 1979-07-24 JP JP54501218A patent/JPS6312867B2/ja not_active Expired
- 1979-07-25 AU AU49206/79A patent/AU521131B2/en not_active Ceased
- 1979-07-26 FR FR7919368A patent/FR2433514B1/fr not_active Expired
- 1979-07-26 BE BE0/196477A patent/BE877918A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-07-26 GB GB7926135A patent/GB2026494B/en not_active Expired
- 1979-08-08 IE IE1496/79A patent/IE48463B1/en not_active IP Right Cessation
-
1980
- 1980-03-05 SE SE8001746A patent/SE8001746L/xx unknown
- 1980-03-05 SE SE8001747A patent/SE8001747L/xx unknown
- 1980-03-25 DK DK127480A patent/DK154211C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-03-25 DK DK127580A patent/DK156716C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1980000338A1 (en) | 1980-03-06 |
| JPS55500430A (nl) | 1980-07-17 |
| CH650237A5 (de) | 1985-07-15 |
| NZ190939A (en) | 1982-09-07 |
| FR2433514A1 (fr) | 1980-03-14 |
| DK154211B (da) | 1988-10-24 |
| JPS55500428A (nl) | 1980-07-17 |
| IE791496L (en) | 1980-01-26 |
| SE8001746L (sv) | 1980-03-05 |
| AU521131B2 (en) | 1982-03-18 |
| GB2026494B (en) | 1982-12-15 |
| WO1980000339A1 (en) | 1980-03-06 |
| DK127580A (da) | 1980-03-25 |
| DK127480A (da) | 1980-03-25 |
| CH641445A5 (de) | 1984-02-29 |
| FR2433514B1 (fr) | 1986-05-23 |
| DK154211C (da) | 1989-03-13 |
| JPS6312867B2 (nl) | 1988-03-23 |
| DK156716C (da) | 1990-02-19 |
| SE8001747L (sv) | 1980-03-05 |
| BE877918A (fr) | 1979-11-16 |
| JPS6312868B2 (nl) | 1988-03-23 |
| DK156716B (da) | 1989-09-25 |
| IE48463B1 (en) | 1985-01-23 |
| IL57801A0 (en) | 1979-11-30 |
| IL57801A (en) | 1984-03-30 |
| AU4920679A (en) | 1980-01-31 |
| GB2026494A (en) | 1980-02-06 |
| US4188345A (en) | 1980-02-12 |
| NL7920012A (nl) | 1980-05-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NL7920016A (nl) | Werkwijze ter bereiding van in de zijketen gefluoreerde vitamine d verbindingen. | |
| US5532391A (en) | Homologated vitamin D2 compounds and the corresponding 1α-hydroxylated derivatives | |
| EP0386793B1 (en) | Novel 1 alpha-hydroxyvitamin d2 epimer and derivatives | |
| US4234495A (en) | Process for preparing 1α-hydroxyvitamin D compounds from 1α-hydroxy-3,5-cyclovitamin D compounds | |
| SK66194A3 (en) | 20-methyl-substituted vitamin d derivatives, method of their production, pharmaceutical preparates containing these matters and their use | |
| WO1979000513A1 (en) | Process for preparing 1a-hydroxylated compounds | |
| GB2127023A (en) | Synthesis of 25-hydroxyvitamin d2 and related compounds | |
| IL107185A (en) | History of 52-carboxylic acid, processes for their preparation and pharmaceutical preparations containing them | |
| US4226788A (en) | 24,24-Difluoro-1α,25-dihydroxycholecalciferol | |
| EP0730577B1 (en) | 26,28-methylene-1alpha,25-dihydroxyvitamin d2 compounds | |
| US5250523A (en) | Side chain unsaturated 1α-hydroxyvitanim D homologs | |
| US4201881A (en) | 24,24-Difluoro-1α,25-dihydroxycholecalciferol | |
| NL8420327A (nl) | Isomeren van hydroxyvitamine d2. | |
| WO1991012239A1 (en) | HOMOLOGATED VITAMIN D2 COMPOUNDS AND THE CORRESPONDING 1α-HYDROXYLATED DERIVATIVES | |
| US4265822A (en) | Process for preparing 1-hydroxylated vitamin D compounds from 5,6-trans-vitamin D compounds | |
| AU629831B2 (en) | Side chain unsaturated 1 alpha-hydroxyvitamin d homologs for the treatment of leukemia | |
| US5354744A (en) | Side chain unsaturated 1 alpha-hydroxyvitamin D analogs | |
| US4263214A (en) | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation | |
| US4229358A (en) | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation | |
| US5036061A (en) | Process for the preparation of 1 alpha,25-dihydroxylated vitamin D2 and related compounds | |
| US4224230A (en) | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation | |
| US4226787A (en) | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation | |
| US4229357A (en) | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation | |
| US4230627A (en) | Fluorovitamin D compounds and processes for their preparation | |
| NL8520021A (nl) | 1alpha-hydroxyvitamine d2 analoga en werkwijze voor het bereiden daarvan. |