NL7907187A - Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van dergelijke verbindingen. - Google Patents

Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van dergelijke verbindingen. Download PDF

Info

Publication number
NL7907187A
NL7907187A NL7907187A NL7907187A NL7907187A NL 7907187 A NL7907187 A NL 7907187A NL 7907187 A NL7907187 A NL 7907187A NL 7907187 A NL7907187 A NL 7907187A NL 7907187 A NL7907187 A NL 7907187A
Authority
NL
Netherlands
Prior art keywords
leu
arg
boc
ala
formula
Prior art date
Application number
NL7907187A
Other languages
English (en)
Original Assignee
Nordisk Insulinlab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nordisk Insulinlab filed Critical Nordisk Insulinlab
Publication of NL7907187A publication Critical patent/NL7907187A/nl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • C07K5/0825—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Glp-amino acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/645—Secretins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/66—Thymopoietins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1021—Tetrapeptides with the first amino acid being acidic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/14—Angiotensins: Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

* * v
S
Nordisk Insulinlaboratorium, Gentofte, Denemarken*
Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van dergelijke verbindingen.
De uitvinding heeft betrekking op een groep nieuwe therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van deze verbindingen. De polypeptiden volgens de uitvinding worden gekenmerkt doordat ze in vitro de door glucose gestimuleerde afscheiding van insuline uit de eilandjes van Langerhans versterken.
De polypeptiden volgens de uitvinding kunnen worden weergegeven door: a - x - y - arg - leu - d, waarin x een binding, een enkelvoudig aminozuur (b.v. leu, ile, ala, gly, ser, val, thr, lys, arg, asp, asn, glu, gin, met, phe, tyr, trp of his) of polypeptiden met tot 10 aminozuren inde keten, b.v. arg-leu, ala-arg-leu, ser-ala-arg-leu, asp-ser-ala-arg-leu of leu-ser-arg-leu-arg-asp-ser-ala-arg-leu) is, y een groep gin, glu of pglu, is, welke laatste groep staat voor ringgesloten glutaminezuur (pyroglutaminezuur), a een waterstof of kleine beschermende groep voor de o-aminogroep in het IT-eindstandige aminozuur is, b.v. acetyl of propionyl, d een groep -NR^R^ is» waarin R^ en Rg ieder onafhankelijk waterstof, een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen of een cycloalkylgroep met 3-8 koolstofatomen is (b.v. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert.butyl, pentyl, hexyl, cyclopentyl, cyclohexyl).
Rj en Rg kunnen ook aan elkaar gebonden zijn zodat ze een cyclische groep vormen met tenminste een heteroatoom, d.w.z. het amide gebonden stikstofatoom (b.v, pyrrol, pyrroline, pyrrolidine,en piperidine), en deze groep ^ kan desgewenst een aanvullend hetero-atoom bevatten, zoals stikstof, zuurstof, zuurstof of zwavel (b.v. pyrimidine, morfoline of thiomorfoline), en d kan ook een groep -OR^ zijn, waarin R^ waterstof, een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen (methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, 7907187 * •t 2 tert.butyl, pentyl, hexyl), een cycloalkylgroep met 3-8 koolstofatomen (cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl), benzyl, fenacyl, fthalimido-methyl, p-methylthioethyl, k-picolyl of gesubstitueerde benzylgroep is, waarin de substituenten bestaan uit tenminste één van de volgende 5 groepen: nitro, methoxy, methyl, halogeen (b.v. p-methoxybenzyl, 2, ^-dimethoxybenzyl). is bij voorkeur een alkylgroep met 1-6 koolstof- atomen, een benzylgroep of een gesubstitueerde benzylgroep.
De uitvinding heeft tevens betrekking op zuur-additiezouten van deze polypeptiden met zuren die voor het organisme 10 aanvaardbaar zijn, zoalsHCl of CH^COOH, en in staat zijn zouten te vormen met de polypeptiden.
De polypeptiden en peptidederivaten volgens de uitvinding kunnen op op zichzelf bekende wijze worden bereid, enkelvoudige aminozuren of peptiden kunnen, indien geschikt beschermd, worden gekoppeld 15 aan enkelvoudige aminozuren of peptiden die eveneens geschikt beschermd zijn, door middel van carbonzuur aktiverende verbindingen zoals beschreven in Houben-Weyl: Methoden der organischen Chemie 15/2, Synthesen van peptiden, blz. 2-36^ (1), b.v. door middel van dicyclohexylcarbo-diimide, N-ethyl-N’-(dimethylaminopropyl)-carbodiimide, o-nitrofenol, ' 20 p-nitrofenol, pentachloorfenol met of zonder toevoeging van katalyserende stoffen.
Bovendien kunnen de polypeptiden worden verkregen door enzymatische katalyse, b.v. zoals beschreven door F. Widmer en J. T. Johansen (3) of door middel van het geen van de afzonderlijke 25 peptiden volgens de z.g.n. geen manipulatie, b.v. zoals beschreven door K. Itakura c.s. (H),
Trifunktionele aminozuren die deel uitmaken van de polypepetiden kunnen ofwel onbeschermd zijn in de zijketengroep of beschermd zijn. N , hetgeen betrekking heeft op zijketen stikstof in 30 arginine kan b.v. beschermd zijn met een vein de volgende groepen: H+, -NOg, tosyl, tert.butyloxycarbonyl of carbobenzoxy. De hydroxygroep in serine kan b.v. worden beschermd door tert.butylether of benzylether tijdens de synthese en de p-zuurgroep in asparaginezuur kan worden beschermd als benzylester. In het algemeen kunnen alle aanwezige 35 funktionele groepen worden beschermd op op zichzelf bekende wijze.
7907187 4 Μ· Λ 3
Als 'beschermende groepen worden in de eerste plaats die groepen gebruikt, die hydrogenolytisch kunnen worden afgesplitst.
De α-aminogroepen kunnen b.v. worden beschermd door tert.butyloxycarbonyl, carbobenzoxy, adamantyloxycarbonyl of iso-5 borneyloxycarbonyl. In de eerste plaats wordt tert.butyloxycarbonyl gebruikt.
Een aantal van de polypeptiden volgens de uitvinding zijn delen of derivaten van delen van het darmhormoon seeretine.
Secretine beïnvloedt in de eerste plaats de 10 exocrine pancreas, maar er is aangetoond, dat secretine in farmakologische doseringen de.. afscheiding van insuline versterkt zonder echter invloed te hebben op het bloedsuikergehalte, Enk c.s. (5).
Er is nu gevonden dat de polypeptiden volgens de uitvinding, die qua struktuur zijn afgeleid van secretine, een insuline-15 vrijmakende werking bezitten, ofschoon Jorpes c.s. (2) vermeld, dat het gehele secretine molekuul aanwezig moet zijn om biologische werking te verschaffen. Bovendien is het onder dezelfde in vitro omstandigheden als voor de polypeptiden volgens de uitvinding niet mogelijk geweest om secretine invloed te laten uitoefenen op de vrijmaking van insuline lit 20 geïsoleerde eilandjes van Langerhans.
Amerikaans octrooischrift U.086.220 beschrijft echter, dat de secretine stukken 1-15, 1-16, 1-17 en 1—1Ö net als secretine biologische werking bezitten voor de exocrine pancreas.
De juist genoemde werking kan in het bijzonder 25 worden gebruikt voor het behandelen van diabetici, die zelf het vermogen om insuline uit de eilandjes van Langerhans vrij te maken, hebben verloren.
In vitro bepaling van de werking van de polypeptiden op de door glucose gestimuleerde insuline-afscheiding werd uitgevoerd met eilandjes van Langerhans die geïsoleerd waren door 30 collagenasetechniek en vooraf 2k uur bij 37°C waren geincubeerd. De afscheidingsproeven worden uitgevoerd met 10 mmol glucose en drie peptide concentraties.
35 7907187
* V
h -2 -1 peptide 5x10 mmol 5x10 mmol 5 mmol 1 1¾¾ 113 151 2 122 132 252
3 12¾ 127 ZkO
4 135 120 153 5 - 1U0 268 6 - 110 1U2 1. gln-arg-leu-OMe, 2HC1 2. glu-arg-leu-OMe, HC1 3. leu-gln-arg-leu-OMe, 2HC1 arg-leu-gla-arg-leu-OMe, 3HC1 5. ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-OMe, 3HC1 6. asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-OMe, 3HC1 Alle peptiden zijn onderzocht in de vorm van hun hydrochloriden tezamen met 10 mmol glucose en de waarde is berekend als percentage van de invloed van 1- mmol glucose alleen.
De peptiden kunnen worden toegediend als injektie- preparaten of per os.
De bereiding van de polypeptiden volgens de uitvinding wordt toegelicht in de onderstaande voorbeelden.
Voorbeelden
Alle in de beschrijving genoemde aminozuren zijn de natuurlijk vrijkomende L-vormen en hun afkortingen zgn volgens de 3-letter afkortingen als vastgelegd door IUPAC-IUB,
Verder worden de volgende afkortingen gebruikt; B0C: tert.butyloxycarbonyl TLC : dunne laag chromatografie DMF: dimethylformamide AcOH : azijnzuur TEA: triethylamine MeOH : methanol 0ÏÏ0 :o-nitrofenyl BAW623: butanol-1:azijnzuur: water * 6:2:3 0ΗΡ : p-nitrofenyl BAWP : butanol 1:azijnzuur: water:pyridine * 30:6:2^:20 EE : ethylacetaat HBT ; hydroxybenzotriazol
Bzl: benzyl SHI : chloroform-methanol- azijnzuur = 90:5:5 7907187 *' 9
V
ι 5 TFA: trifluorazijnzuur PCP: pentachloorfenyl DAPECI: dimethylaminopropyl- AAA: aminozuuranalys e ethyl-carbodiimide
De analysen van aminozuren werden uitgevoerd op 5 een Beckman 120C aminozuuranalysator.
TLC wordt uitgevoerd in BAW (A) en BAWP (B) en SHI (c).
Het zuiverheidskriterium voor beschermde poly-peptiden is de aanwezigheid van slechts een vlek in TLC in vloeibaar 10 A en C.
De volgende voorbeelden geven een toelichting van de gebruikte reakties.
Voorbeeld I
asn-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-OMe. 3HC1 15 BOC- (NCL) arg-leu-OMe 10 g leu-OMe, HC1 worden opgelost in 100 ml CHjjClg waaraan 8 ml TEA werden toegevoegd, daarna werd een oplossing toegevoegd van 16 g BOC-iNOgJarg in 75 al CH^Clg en 25 ml DMF. Het mengsel wordt gekoeld tot -5°C en daarna werden 9 g dimethylamino-20 propylethylcarbodiimide, HC1 toegevoegd. Ha voltooiing van de reaktie werd overmaat carbodiimide ontleedt met 15 % AcOH (150 ml). Het mengsel werd ingedampt tot een waterige fase die werd uitgeschud met ethyl-acetaat (3 x 100 ml) en het ethylacetaat werd gewassen met 3 x 50 ml 10 5»-ig citroenzuur, 3 x 50 ml verzadigde NaHCO^ en 3 x 50 ml water. Het ethyl-25 acetaat werd verdampt en het produkt werd gedroogd. Opbrengst: 20 g = 90 %.
BOC-gln»(H0^)arg-leu-OMe 2 g BOC-(ΝΟ^)arg-leu-OMe werden opgelost in 15 ml TFA waarna men het geheel onder roeren 15 min. liet staan. 125 ml droge 30 ether werden toegevoegd em een neerslag te vormen. Het neerslag werd na 15 min. roeren geïsoleerd door herhaald centrifugeren en wassen met droge ether. Het peptide TFA zout werd opge-ost in 50 ml DMF, waaraan 750 jü/ïEk en 3 g B0C-gln-0HP werden toegevoegd. Na 2h uur was de reaktie voltooid. Het produkt werd ingedampt tot een gele olie bij verlaagde druk.
790 7 1 8 7 6 50 ml EE werden toegevoegd en daarna overmaat BOC-gln-ONP en gevormd p-nitrofenol werden uitgewassen met verzadigd NaHCO^, Het produkt werd neergeslagen samen met een kleine hoeveelheid BOC-gln-ONP na drogen met MgSO^ en staan in de koude. Het residu van BOC-gln-ONP werd uitgewassen 5 door herhaald wassen van het neerslag met EE, Opbrengst: 2,1 g = 82 %.
BOC-leu-gln-(NOg) arg-leu-OMe 1,5 g BOC-gln-(NOg)arg-leu-OMe werden 15 min.behandeld met 15 ml TFA. 100 ml droge ether werden toegevoegd om een neerslag te vormen van peptidezout. Het peptidezout wordt geïsoleerd en gezuiverd 10 door herhaald wassen en centrifugeren in droge ether. Het peptide TFA zout werd opgelost in 15 ml DMF waaraan 700 jil TEA en 3,5 g BOC-leu-ONP werden toegevoegd. Na 2k uur was de reaktie voltooid en het produkt werd ingedampt tot een gele olie. De olie werd opgelost in ethylacetaat waaruit het produkt werd neergeslagen door toevoeging van ether en staan 15 in de koude. Het produkt werd geïsoleerd en grondig gewassen met ethylacetaat : ether 2:3. Opbrengst: 1,5 g * 84 B0C-(NOg)arg-leu-gln-(NOg)arg-leu-OMe 1 g B0C-leu-gln-(NOg)arg-leu-OMe werd behandeld met 15 ml TFA gedurende 15 min. 100 ml droge ether werden toegevoegd pn om het peptide TFA zout neer te slaan. Het peptide TFA zout werd geïsoleerd, grondig gewassen met droge ether en gedroogd. Het peptide TFA zout werd opgelost in 25 ml DMF, waaraan 1 g B0C-(NOg)arg-PCP, 300 mg HBT en 300 ^TEA werden toegevoegd. Gedurende de reaktie werden nog 300 mg aktieve ester en TEA toegevoegd tot basische reaktie. Nadat de reaktie 25 was afgelopen werd het produkt ingedampt tot een gele olie, die gesuspendeerd wordt in 100 ml EE. De EE-fase werd gewassen met water. De EE-fase werd ingedampt onder verlaagde druk en het residu werd gedroogd. Daarna werd het opgelost in 20 ml EE, en men liet de oplossing in de koude staan. Tijdens het staan sloeg het produkt in zuivere vorm neer.
30 Opbrengst: 900 mg = 70 %.
BOC-ala-(NOg) arg-leu-gln-(NOg)arg-leu-OMe 550 mg BOC-(NOg)arg-leu-gln-(N0g)arg-leu-OMe werden behandeld gedurende 15 min. met 15 ml TFA. Het TFA werd verdampt bij verlaagde druk en daarna werd droge ether toegevoegd. Het peptide-35 zout werd geïsoleerd, grondig gewassen met droge ether en gedroogd. Het 7907187 7 zout werd opgelost in 25 ml DMF, waaraan 500 mg BOC-ala-ONO en 130 ^il TEA. varen toegevoegd. ïïa beëindigen van de reaktie werd het produkt ingedampt tot een olie, die vast werd bij uitgieten van EE daarover.
Het produkt werd geïsoleerd, grondig gewassen met EE en gedroogd.
5 Opbrengst: kho mg = 7^ %· B0C-( OBzl) ser-ala- (NO,, )arg-leu-gln-( NO,,) arg-leu-OMe kho mg BOC-ala-(NOg) arg-leu-gln-(NOg)arg-leu-OMe werden gedurfde 20 min. behandeld met 15 ml TFA. Het TFA werd verdampt bij verlaagde druk tot ongeveer 5 ml. 75 ml droge ether werden toegevoegd, 10 waardoor het peptidezout neersloeg. Het peptidezout werd geïsoleerd, gewassen met droge ether en gedroogd. Het zout werd daarna opgelost in 20 ml DMF waaraan 500 mg B0C-(0Bzl)ser-0N0 en 100 ^ol TEA werden toegevoegd. Nadat de reaktie beëindigd was werd het produkt ingedampt tot een gele olie waarover EE werd uitgegoten waardoor het produkt neersloeg, dat geiso-15 leerd werd en grondig werd gewassen met EE en gedroogd. Opbrengst: 1*50 mg = 86 %.
B0C- (β-Bzl) asp- (OBzl) ser-ala- (NOg) arg-leu-gln- (NO,,) -arg-leu-OMe 300 mg B0C-(OBzl)ser-ala-(NOg)arg-leu-gln-(N02)arg-20 leu-OMe werden behandeld met 15 ml TFA gedurende 20 min. 100 ml droge ether werden toegevoegd. Het peptide TFA zout werd geïsoleerd, gewassen met droge ether en gedroogd. Het zout werd opgelost in 20 ml DMF waaraan 500 mg B0C-(β-Bzl)-asp-0N0 en 50 TEA werden toegevoegd.Nadat de reaktie voltooid was werd het produkt ingedampt tot een gele olie 25 waarover EE werd uitgegoten om het produkt neer te slaan. Het produkt werd geïsoleerd in zuivere vorm bij grondig wassen met droge ether en daaropvolgend drogen. Opbrengst: 300 mg = 85 %> asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-OMe, 3HC1 300 mg BOC-(β-Bzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NOg)arg-leu-2o gln-(NC>2)-arg-leu-OMe werden gehydrogeneerd bij 1 at met Hg over Pd/c in 10 #-ig AcOH/MeOH. Na voltooiing van de hydrogenering werd de katalysator afgefiltreerd en zeer grondig gewassen. Het produkt werd ingedampt tot een olie, die werd overgebracht op een droge siliciumdioxydegelkolom en de stof werd daarop gezuiverd met 5 %-ig AcOH/MeOH. Het zuivere tussen-25 produkt werd behandeld met 15 ml 1n HCl/AcOH gedurende 30 min. 100 ml 7907187 8 droge ether werden toegevoegd om het produkt neer te slaan. Dit werd grondig gewassen met droge ether. Opbrengst: 200 mg = 85 %, AAA: ala:asp:ser:gln:leu:arg = 1,00:1,05:0,61+: 0,90:1,96:0,95 5 Serine is gering aanwezig ten gevolge van de hydrolyse-methode.
TLC : Rf(A) = 0,29 Rf(B) * 0,1+5 smpt. (ontl.) = 170°C.
Totale opbrengst: 20 % van de theoretische.
10 Voorbeeld II
De volgende peptiden gln-arg-leu-OMe. 2HC1 AM: glu:leu:arg:NH3 = 1,05:1,00:0,95:1,13 Theorie = 1,00:1,00:1,00:1,00
TLC: Rf(A) = 0,28 Smpt. (ontl.) * 125°C
15 leu-gln-arg-leu-OMe. 2HC1 AM: glu:leu:arg:NH3 * 1,00:2,00:0,93:0,96 Theorie = 1,00:2,00:1,00:1,00 TLC: Rf(A) = 0,35 Smpt. (ontl.) = 116°C arg-leu-gln-arg-leu-OMe. 3HC1 20 AM: glu:leu:arg:ΙΊΗ^ = 1,00:1,95:1,80:0,93
Theorie = 1,00:2,00:2,00: 1,00 TLC: Rf^Aj = 0,31 Smpt. (ontl.) = 15l+°C ala-arg-leu-gln-arg-leu-OMe. 3HC1 ser-ala-arg-leu-gln-varg-leu-OMe, 3HC1 25 AM: glu:leu:ser:ala:arg:NH3 = 0,99:1,80:0,73:1,00: 1,75:1,00
Theorie = 1,00:2,00:1,00:1,00: 2,00:1,00
TLC: Rf^ * 0,27 Smpt. (ontl. )=11+0°C
30 werden bereid uit de overeenkomstigebeschermde peptiden uit voorbeeld I door katalytisch hydrogeneren en daaropvolgende afsplitsing van de B0C groep met 1n HCl/AcOH.
7907187 9
Voorbeeld III
De peptiden glu-arg-leu-OMe, 2HC1 TLC: Rf^j * °>35 Smpt. (ontl.) = 135°C en Fglu-arg-leu-OMe-HCl 5 AM: glu-leu:arg = 1,04:1,00:0,9^
Theorie = 1,00:1,00:1,00 TLC: Rf(A) = 0,40 Smpt. (ontl.) = 115°C werden op overeenkomstige wijze bereid met gln-arg-leu-OMe, 2HC1, in voorbeeld I door B0C-gln-0HP te vervangen door resp. B0C-(β-Bzl)glu-10 0N0 en B0C-%lu-0HP.
Bibliografie (1) Houben-Weyl: Methoden der organischen Chemie 15/2, Synthesen von Peptiden, biz. 2-364, (197^) Georg Thieme Verlag, 15 Stuttgart.
(2) J.E. Jorpes en V. Mutt:
Secretin, Cholecystokinin, Pancreosymin and Gastrin, blz. 30 (1973) Springer-Verlag, Berlin.
(3) F. Widmer en J.T. Johansen, Carlsberg, 20 Res. Commun. vol. 44, blz. 3746 (1979) (4) K. Itakura c.s., Science 198, blz. 1056 (1977).
(5) B. Enk, K. Kolendorf, T. Deckert - Ugeskrift for Laeger (een wekelijkse publicatie voor doktoren), 134, no. 49, blz. 2577-2580 (1972).
790 7 1 8 7

Claims (6)

  1. 2. Polypeptidederivaat volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat x een groep leu, ala, gly of sér is oP een peptide is met ten hoogste 10 aminozuren in de keten, bij voorkeur arg-leu, ala-arg-leu, ser-ala-arg-leu, asp-ser-ala-arg-leu of leu-ser-arg-leu-arg-asp-ser-ala-arg-leu, en a, y en d dezelfde betekenis hebben als in conclusie 1, 25 of zuuradditiezouten daarvan.
  2. 3. Werkwijze voor de bereiding van polypeptidederivaten met de formule volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men een aminozuurderivaat met formule leu-d, waarin d de bovenstaande betekenis heeft, of geblokkeerd derivaat daarvan, koppelt met de verbinding met 30 formule a-x-y-arg, waarin arg geblokkeerd en a, x en y de bovenstaande betekenis-^hebben, of achtereenvolgens aan enkelvoudige bindingen van de verbinding en desgewenst een gevormd peptide omzet in de zuuradditiezout. U. Werkwijze volgens conclusie 3 voor het bereiden van een verbinding met de formule 35 asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-d 7907187 * waarin d de betekenis beeft als in conclusie 1, met het kenmerk, dat men een leucinederivaat met formule leu-d, waarin d de bovenstaande betekenis heeft, of een geblokkeerd derivaat daarvan achtereenvolgens koppelt aan de aminozuren, arg, gin, leu, arg, ala, ser en asp, waarin 5 de funktionele groepen, die niet reageren tijdens de synthese geblokkeerd zijn en zonodig of desgewenst door blokkerende groepen uit het reaktie-produkt verwijdert.
  3. 5. Werkwijze volgens conclusie U, met het kenmerk, dat men een aminozuurderivaat met de formule leu-d, waarin d de 10 bovenstaande betekenis heeft, laat reageren met een verbinding met de formule B0C-(N0g)arg, en de gevormde verbinding met de formule BOC-(HOg)arg-leu-d na afsplitsen van de BOC groep, laat reageren met BOC-gln-ONP onder vorming van de verbinding BOC-gln-(WO g)arg-leu-d, en deze verbinding, 15 eveneens na afsplitsen van de BOC groep, laat reageren met BOC-leu-OHP, het reaktieprodukt met de formule BOC-leu-gln-(NOg)arg-leu-d na afsplitsing van de BOC groep laat reageren met BOC-(NOg)arg-PCP, het reaktieprodukt met de formule 20 BOC-(NOg)arg-leu-gln-(HOg)arg-leu-d laat reageren met BOC-ala-ONO onder vorming van de verbinding BOC-ala-(NOg)arg-leu-gln-(NOg)arg-leu-d, deze verbinding na afsplitsing van de BOC groep laat reageren met B0C-( OBzl) -ser-ΟΙΓΟ onder vorming van de verbinding 25 BOC-(OBzl)-ser-ala-(NOg)arg-leu-gln-(NOg) arg-leu-d, deze verbinding na afsplitsing van de BOC groep laat reageren met BOC-($-Bzl)-asp-ONO onder vorming van een verbinding BOC-(S-Bzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NOg)arg-leu-gln-(NOg)arg-leu-d 30 en deze verbinding hydrogeneert tot het gewenste peptidederivaat en deze desgewenst omzet in een zuuradditiezout.
  4. 6. Werkwijze volgens conclusie ^ voor het bereiden van een peptidederivaat met de formule asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-ORg waarin Rg een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen, een cycloalkylgroep met 35 3-8 koolstofatomen, een benzyl, fenacyl, fthalimidomethyl, 3-methylthio- 7907187 methyl, ^-picolyl of gesubstitueerde benzylgroep is, vaarin de substituenten nitro, methoxy, methyl of halogeen zijn, met het kenmerk, dat men het overeenkomstige peptide met de formule asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-OH 5 of een reaktie derivaat daarvan, laat reageren met een alkohol met de formule RgOH, waarin Rg de bovenstaande betekenis heeft, of met een reaktief derivaat daarvan.
  5. 7. Werkwijze volgens conclusie U, voor het bereiden van een peptidederivaat met de formule 10 asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-NR^ R2 waarin R^ en Rg de bovenstaande betekenis hebben, met het kenmerk, dat men een verbinding met de formule asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-leu-OH of een reaktief derivaat daarvan, laat reageren met een amine met de 15 formule HHR^Rg, waarin R^ en Rg de bovenstaande betekenis hebben.
  6. 8. Farmaceutisch preparaat met een versterkende werking op de door glucose gestimuleerde afscheiding van insuline, met het kenmerk, dat dit als aktieve verbinding een polypeptide-derivaat met de formule 1 bevat in voor toediening geschikte vorm. !: /ƒ 7907187
NL7907187A 1978-09-28 1979-09-27 Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van dergelijke verbindingen. NL7907187A (nl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK430478 1978-09-28
DK430478 1978-09-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NL7907187A true NL7907187A (nl) 1980-04-01

Family

ID=8132257

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL7907187A NL7907187A (nl) 1978-09-28 1979-09-27 Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van dergelijke verbindingen.
NL7907188A NL7907188A (nl) 1978-09-28 1979-09-27 Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van deze verbindingen.

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NL7907188A NL7907188A (nl) 1978-09-28 1979-09-27 Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van deze verbindingen.

Country Status (16)

Country Link
US (1) US4356119A (nl)
JP (2) JPS5576849A (nl)
AT (1) AT375338B (nl)
AU (2) AU533684B2 (nl)
BE (2) BE879086A (nl)
CA (2) CA1140116A (nl)
CH (2) CH648567A5 (nl)
DE (2) DE2939135A1 (nl)
ES (2) ES484926A1 (nl)
FI (2) FI68244C (nl)
FR (2) FR2437400A1 (nl)
GB (2) GB2031436B (nl)
IT (2) IT1125422B (nl)
NL (2) NL7907187A (nl)
NO (2) NO148923C (nl)
SE (2) SE7907938L (nl)

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA798855A (en) * 1968-11-12 Bernardi Luigi Process for preparing a new undecapeptide
CA685075A (en) * 1964-04-21 Schwyzer Robert Polypeptides and process for their manufacture
CA616330A (en) * 1961-03-14 Schwyzer Robert Polypeptide and derivatives thereof and process for their manfuacture
GB1064417A (en) * 1963-12-09 1967-04-05 Kyowa Hakko Kogyo Kk Process for the preparation of copolypeptides
US3400118A (en) * 1966-05-27 1968-09-03 Squibb & Sons Inc Intermediates in the preparation of secretin
US3832337A (en) * 1970-07-28 1974-08-27 Squibb & Sons Inc Peptide enzyme inhibitors
US3856770A (en) * 1972-03-08 1974-12-24 Akzona Inc Psychopharmacologically active tetra-, penta-, hexa-, and heptapeptides
NL175174C (nl) * 1972-03-31 1984-10-01 Akzo Nv Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat als actief bestanddeel bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van deze peptiden.
NL175988C (nl) * 1972-05-24 1985-02-01 Akzo Nv Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat dat afgeleid is van een de aminozuren 4-10 omvattend, fragment van adrenocorticotroop hormoon als actief bestanddeel bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van deze peptiden.
NL175618C (nl) * 1972-07-15 1984-12-03 Akzo Nv Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van dergelijke peptiden.
DE2315271C3 (de) * 1973-03-27 1975-09-11 Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen L- Norleucin-13-Motilin, Verfahren zu dessen Herstellung und dasselbe enthaltendes Mittel
GB1532211A (en) * 1974-10-25 1978-11-15 Wellcome Found Lh-rh peptide analogues
US3975365A (en) * 1975-01-27 1976-08-17 G. D. Searle & Co. Inhibitory octapeptides angiotensin II
DE2602443A1 (de) * 1975-04-04 1976-10-21 Univ California Biologisch aktive polypeptide
US4171299A (en) * 1975-04-04 1979-10-16 The Regents Of The University Of California Polypeptide agents for blocking the human allergic response
US4058512A (en) * 1975-04-28 1977-11-15 Ab Kabi Synthetic peptides having growth promoting activity
US4024121A (en) * 1976-01-27 1977-05-17 Schally Andrew Victor (Pyro)-Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR and intermediates
SE436645C (sv) * 1976-04-29 1996-07-22 Bonnierfoeretagen Ab Antigeniskt aktiv polypeptid, som kan användas vid cancerdiagnosticering och vid framställning av antikroppar
US4110321A (en) * 1976-07-12 1978-08-29 Folkers Karl Synthetic tridecapeptide [Gln4 ]-neurotensin having hormonal activity
US4086220A (en) * 1976-08-09 1978-04-25 G. D. Searle & Co. Fragments of secretin

Also Published As

Publication number Publication date
NO793112L (no) 1980-03-31
JPS5576849A (en) 1980-06-10
AU526149B2 (en) 1982-12-16
BE879086A (fr) 1980-03-28
JPS5569550A (en) 1980-05-26
CH648568A5 (de) 1985-03-29
AU533684B2 (en) 1983-12-08
DE2939135A1 (de) 1980-04-17
DE2939109A1 (de) 1980-04-10
FI793001A (fi) 1980-03-29
SE7907939L (sv) 1980-03-29
GB2031436B (en) 1982-10-20
FI68244C (fi) 1985-08-12
BE879087A (fr) 1980-03-28
AU5124579A (en) 1980-04-03
GB2031436A (en) 1980-04-23
IT7926112A0 (it) 1979-09-28
FI793002A (fi) 1980-03-29
IT1125421B (it) 1986-05-14
FR2437400B1 (nl) 1984-06-15
ES484928A1 (es) 1980-07-01
AU5124679A (en) 1980-04-03
FR2437400A1 (fr) 1980-04-25
NO148923C (no) 1984-01-11
SE7907938L (sv) 1980-03-29
GB2031435B (en) 1982-11-10
NO793111L (no) 1980-03-31
CA1158640A (en) 1983-12-13
FI68244B (fi) 1985-04-30
ES484926A1 (es) 1980-07-01
IT1125422B (it) 1986-05-14
NL7907188A (nl) 1980-04-01
IT7926111A0 (it) 1979-09-28
AT375338B (de) 1984-07-25
FI68245B (fi) 1985-04-30
GB2031435A (en) 1980-04-23
CH648567A5 (de) 1985-03-29
NO148923B (no) 1983-10-03
FR2437399A1 (fr) 1980-04-25
CA1140116A (en) 1983-01-25
FI68245C (fi) 1985-08-12
ATA634679A (de) 1983-12-15
NO148922C (no) 1984-01-11
NO148922B (no) 1983-10-03
US4356119A (en) 1982-10-26
FR2437399B1 (nl) 1983-01-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69615838T2 (de) Cyclische wirkstoff-vorläufer verbindungen von peptiden und peptid-nukleicsäuren mit verbesserter metabolischer stabilität und zellmembran permeabilität
KR100558131B1 (ko) 멜라노코르틴 수용체 리간드를 함유하는 약제학적 조성물및 멜라노코르틴 수용체 리간드를 함유하는 약제의제조방법
KR100658961B1 (ko) 공유적으로 가교결합된 인슐린 이량체, 이를 포함하는 약제학적 조성물 및 진단 키트, 및 이의 제조방법
Carpino et al. [(9-Fluorenylmethyl) oxy] carbonyl (Fmoc) amino acid chlorides in solid-phase peptide synthesis
JP7250814B2 (ja) 新規ｇｌｐ－１類似体
US20140162943A1 (en) N-terminus conformationally constrained glp-1 receptor agonist compounds
JPS63101399A (ja) ペプチド誘導体
NZ528770A (en) New effectors of dipeptidyl peptidase IV for topical use
FR2626882A1 (fr) Conjugues de derives de vinca comportant une chaine detergente en position c-3
JP6438563B2 (ja) 新規なエキセナチド類似体及びその用途
JP2021513990A (ja) 疎水性アウリスタチンｆ化合物およびそのコンジュゲート
CN113429471A (zh) 长效glp-1多肽类似物及其制备方法和应用
KR20230104118A (ko) Glp-1 전구약물 및 이의 용도
NL7907187A (nl) Therapeutisch aktieve polypeptiden, zuuradditiezouten daarvan en een werkwijze voor de bereiding van dergelijke verbindingen.
CN107298708B (zh) 一种带有醚键的胰高血糖素样肽-1(glp-1)类似物及其应用
EP0101929B1 (en) Polypeptide-diesters, their production and use
JPS5831337B2 (ja) アンジオテンシン２類似体及びその製法
WO1991013081A1 (fr) Substance physiologiquement active capable de passer a travers une biomembrane
US4265884A (en) Therapeutically active polypeptides or acid addition salts thereof and a process for producing such compounds
WO1995024421A1 (fr) Derive peptidique
JP7434616B2 (ja) プロドラッグおよびその使用
JP2010150253A (ja) 肝癌を治療するための薬剤
JP2782232B2 (ja) プロテアーゼ阻害剤
KR0141973B1 (ko) 신규의 생리활성 펩티드 및 이를 유효성분으로서 함유한 칼슘대사 조절제
CN116970042A (zh) 抗病毒多肽类似物

Legal Events

Date Code Title Description
A85 Still pending on 85-01-01
BV The patent application has lapsed