FI68245C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter daerav - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter daerav Download PDFInfo
- Publication number
- FI68245C FI68245C FI793002A FI793002A FI68245C FI 68245 C FI68245 C FI 68245C FI 793002 A FI793002 A FI 793002A FI 793002 A FI793002 A FI 793002A FI 68245 C FI68245 C FI 68245C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- arg
- ser
- ala
- formula
- leu
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
- C07K5/0825—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp and Glp-amino acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/645—Secretins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/66—Thymopoietins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1021—Tetrapeptides with the first amino acid being acidic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/14—Angiotensins: Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Obesity (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
RÄ1£F*1 ΓΒ1 m,K«ULUTUSjULKAISU s O 9 λ r
B '' UTLÄGGNINGSSKRIFT 0 0^4 O
C (45) Patentti myönnetty 12 08 1935 Patent meddelat (51) Kv.lk.>t.CI.‘ c 07 K 7/32 SUOMI —FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansökning 793002 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 26.09.79 (23) Alkupäivä — Giltighetsdag 26.09.79 (41) Tullut Julkiseksi — Blivit offentlig 29.03.80
Patentti, ja rekisterihallitus Nähtäväkslpanon |. kuul.Julkaisun pvm.- 30.0**.85
Patent- och registerstyrelsen ' ’ Ansökan utlagd och utl.skrlften publicerad (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd proritet 28.09.78 Tanska-Danmark(DK) **30*»/78 (71) Nordisk Insulinlaboratorium, Niels Steensensvej 1, DK-2820 Gentofte, Tanska-Danmark(DK) (72) Hans Kofod, Lyngby, Tanska-Danmark(DK) (7*+) Berggren Oy Ab (5**) Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten pol ypept idi johdanna i sten tai niiden happoadditiosuolojen valmistamiseksi - Förfarande för framstäl1ning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter därav Tämä keksintö koskee menetelmää uusien polypeptijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava a-x-b-arg-c jossa kaavassa x on glu tai asp, a on vety tai x:ssä olevan α-aminoryhmän pienempi suojaryhmä, b on leu tai di- tai tripeptidi, joka on valittu ryhmästä, jonka muodostavat leu-ser, ser-ala, his-phe ja gly-gly-gly, ja kun x on glu, voi b lisäksi olla sidos tai sekretiinifragmentti leu-ser-arg-leu tai leu-ser-arg-leu-arg-asp-ser-ala, ja kun x on asp, voi b lisäksi olla sekretiinifragmentti ser-ala-arg- leu-glu ja 12. 1 , 2 c on -NR R , jossa R ja R ovat vety tai C--C^-alkyyli tai 3 3 b 3 c on -OR , jossa R on vety tai -Cg-alkyyli, jolloin R ei voi olla vety kun x on asp ja b on ser-ala,tai niiden happoaddi-tiosuolojen valmistamiseksi. Näille peptideille on luonteenomaista se, että niillä on in vitro seuraavat ominaisuudet: ne estävät glukoosin stimuloiman insuliinin erittymisen Langerhansin saarista vaikuttamatta glukagonin erittymiseen, sekä vaikuttavat voimistavasti insuliinin vaikutukseen glukoosiaineenvaihtoon 68245 2 eristetyissä rasvasoluissa ja in vivo vahvistavat glukoosi-aineenvaihtoa.
Kun a on α-aminoryhmän pienempi suDjaryhmä se voi esimerkiksi olla asetyyli tai propionyyli. C1-C^-alkyyliryhmä voi esimerkiksi olla metyyli, etyyli, propyyli, isopropvyli, butyyli, tert.butyyli, pentyyli tai heksyyli.
Esimerkkejä fysiologisesti hyväksyttävistä hapoista, jotka muodostavat happoadditiosuoloja edellä mainittujen polypeptidien kanssa, ovat HCl ja CH3COOH.
Julkaisussa Hpuben-Weyl: Methoder der organischen Chemie 15/2, Synthesen von Peptiden, s. 2-364 (1) on kuvattu peptidi-synteesejä, joissa erilliset aminohapot tai peptidit, jotka ovat tarkoituksenmukaisesti suojattuja, kytketään erilaisiin aminohappoihin tai peptideihin, jotka myös ovat suojatut tarkoituksenmukaisesti karboksyylihappoaktiivisten aineiden avulla, esim. käyttäen disykloheksyylikarbodi-imidiä, N-etyyli-N1 -(dimetyyliaminopropyyli)-karbodi-imidiä, o-nitrofenolia, p-nitrofenolia, pentakloorifenolia, jolloin samalla lisätään tai ollaan lisäämättä katalysoivia aineita. Peptidejä voidaan myöskin muodostaa entsymaattisen katalyysin avulla, esim. siten kuin Widmer F. ja Johansen J. T. ovat kuvanneet (4), tai geenin avulla yksinkertaisissa peptideissä käyttäen ns. geenimanipulaatiota, kuten esim. ovat kuvanneet Itakura K. ym. (5).
Keksinnön mukaisia polypeptidijohdannaisia voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla tavalla siten, että arginiinijohdannainen, jolla on kaava arg-c, jossa c tarkoittaa samaa kuin edellä, tai sen suojattu johdannainen yhdistetään sellaisen yhdisteen kanssa, jolla on kaava a-x-b, jossa a, x ja o tarkoittavat samaa kuin edellä tai peräkkäin yhdisteen a-x-b sisältävien yksinkertaisten aminohappojen tai peptidisekvenssien kanssa, jolloin ne funktionaaliset ryhmät, jotka eivät saa reagoida synteesissä, ovat suojatut, jonka jälkeen muodostunut peptidi haluttaessa muutetaan happoadditiosuolaksi, tai jos c on -OH, 68245 saatetaan muodostunut peptidi haluttaessa reagoimaan kaavan 12 3 R R NH mukaisen amiinin tai kaavan R OH mukaisen alkoholin 12 *"* kanssa, joissa kaavoissa R , R ja R-3 tarkoittavat samaa kuin edellä.
Trifunktionaaliset aminohapot, jotka sisältyvät peptideihin, voivat esiintyä joko suojaamattomina sivuketjuryhminä tai ne voivat olla suojattuja. N , joka tarkoittaa sivuketjutyppeä arginiinissä, voi olla esim. suojattu jollain seuraavalla ryhmällä: H+, -NC^, tosyyli, t-butyylioksikarbonyyli tai karbo-bentsoksi. Seriinissä oleva hydroksiryhmä voi synteesin aikana olla suojattu esim. t-butyyli- tai bentsyyli-eetterillä ja β-happoryhmä asparagiinihapossa voi olla suojattu bentsyyli-esterinä. Yleisesti voidaan kaikki kysymyksessä olevat funktionaaliset ryhmät suojata sinänsä tunnetulla tavalla. Primäärisesti käytetään sellaisia suojaryhmiä, jotka voidaan lohkaista vedyllä hajottamalla.
α-Aminoryhmien suojaamiseksi voidaan täten käyttää esim. t-butyyli-oksikarbonyyliä, karbobentsoksia, adamantyylioksikarbonyyliä tai isoborneyylioksikarbonyyliä. Pääasiallisesti käytetään t-butyyli-oksikarbonyyliä.
Esillä olevien peptidien erään sarjan suhteen on erikoisesti huomattava, että ne ovat suolistohormonisekretiinin osia tai tällaisten osien johdannaisia.
Sekretiini vaikuttaa pääasiallisesti eksokriinihaimaan, mutta on osoittautunut, että sekteriini vahvistaa farmakologisina annoksina insuliinin erittymistä vaikuttamatta kuitenkaan veren-sokeritasoon, kts. Hnk, K. ym (6). Mitä sekretiiniin tulee, ei ele voitu, osoittaa sellaisia vaikutuksia, joilla olisi jonkinlainen yhteys niihin vaikutuksiin, jotka aikaansaadaan keksinnön mukaisten peptidiryhmien avulla. Peptidi asp-ser-ala-arg-OH esiintyy organismeissa suolistohormonisekretiinin entsymaattisen hajoamisen johdosta, mutta kirjallisuudessa (2) on esitetty, että koko sekretiinimolekyylin tulee olla läsnä biologisen aktiivisuuden aikaansaamiseksi. Kuitenkin US-patenttijulkaisussa n:c 4 086 220 on esitetty, että sekretiinifragmenteilla 1-15, 1-16, 1-17 ja 1-18 on samalla tavoin kuin sekretiinillä biologinen aktiivisuus eksokriinihaimaan nähden.
4 68245
Nyt on yllättäen osoittautunut, että kysymyksessä olevilla peptideillä, jotka rakenteellisesti on johdettu sekretiinistä, on aivan erilainen vaikutus kuin itse sekretiinillä ja että tätä vaikutusta voidaan käyttää hyväksi käsiteltäessä hiljakkoin todettuja, nuorten henkilöiden diabeettisairauksia, joiden Langer-hansin saaria halutaan suojata. Peptidit estävät sen, että nämä saaret erittävät insuliinia samanaikaisesti kun välttämätön insu-liinimäärä, joka on annettava normaalitilan ylläpitämiseksi, pienenee.
Peptidien insuliinia vahvistavan vaikutuksen in vitro-määräykset glukoosiaineenvaihtoon ovat antaneet seuraavat tulokset, jolloin yleinen koemenetelmä on kuvattu toisaalla (3).
Taulukko 1 100 10 1 0,1 0,01 0 ^ug/ml ^ug/ml ^ug/ml ^ug/ml ^ug/ml ^ug/ml Peptidi 0 ng/ml 22 22 22 22 22 22 1 0,6 ng/ml 108 91 88 90 94 79 50 ng/ml 126 113 112 113 118 100 0 ng/ml 15 20 21 20 20 22 2 0,6 ng/ml 55 85 86 88 83 81 50 ng/ml 70 112 108 112 114 100 0 ng/ml 16 8 8 8 8 8 3 0,6 ng/ml 100 80 80 85 90 78 50 ng/ml 124 108 108 112 114 100 0 ng/ml 10 - - - 10 6 0,6 ng/ml 89 - - 62 50 ng/ml 121 - - - 100 0 ng/ml 32 29 20 7 0,6 ng/ml 88 87 70 50 ng/ml 108 110 - - - 100 insuliini 68245 5 1. glu-leu-ser-arg-OMe, 2HC1 2. glu-leu-ser-arg-leu-arg-OMe, 3HC1 3. asp-ser-ala-arg-OMe, 2HC1 6. glu-gly-gly-gly-arg-OMe, 2HC1 7. glu-his-phe-arg-OMe, 3HC1
Kaavio esittää glukoosiaineenvaihtoa rasvasoluissa funktiona läsnä olevan insuliinin ja peptidin määrästä, jolloin 50 ng/ml insuliinia + 0 ^,ug/ml peptidiä suuruiselle määrälle on annettu arvo 100 %. Kaikki muut arvot on laskettu suhteessa tähän.
Peptidien vaikutuksen in vitro-määräykset glukoosia stimuloivaan insuliinin eritykseen on suoritettu käyttäen sellaisia Langerhansin saaria, jotka on erotettu kollagenaasi-tekniikalla ja esihaudottu 1 vrk lämpötilassa 37°C. Erityskokeet suoritettiin käyttäen 10 mM glukoosia ja kolmea peptidiväkevyyttä.
—2 —1
Peptidi. 5 x 10 mmoolia 5 x 10 mmoolia 1 mmoolia 5 mmoolia 1 76 59 51 2 66 73 - 113 3 72 55 63 4 96 41-9 5 65 43 10 6 66 46 - 41 7 - 60 1. glu-leu-ser-arg-OMe, 2HC1 2. glu-leu-ser-arg-leu-arg-OMe, 3HC1 3. asp-ser-ala-arg-OMe, 2HC1 4. glu-leu-ser-arg-leu-arg-asp-ser-ala-arg-OMe, 4HC1 5. asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-OMe, 3HC1 6. glu-gly-gly-gly-arg-OMe, 2HCi 7. glu-his-phe-arg-OMe, 3HC1
Kaikkia peptidejä kokeiltiin niiden hydrokloridien muodossa yhde' sa 10 mM kanssa glukoosia ja arvot esittävät vaikutusta prosentteina pelkästään 10 mM glukoosin vaikutuksesta.
Peptidejä voidaan annostella injektoitavina preparaatteina seoksena insuliinin kanssa tai .ilman insuliinin läsnäoloa. Niitä voidaan myös annostella per os.
6 68245
Koskien keksinnön mukaisten peptidien tehokasta määrää on tunnettua, että diabeetikkojen insuliinin tarve vaihtelee henkilöstä toiseen eikä ole edes vakio päivästä toiseen puhumattakaan pidem-mästä ajanjaksosta. 0,5 IU/kg ruumiinpainoa 24 tuntia kohti on hyvä mutta summittainen keskiarvo, joka saattaa päteä länsimaissa. Näin ollen on tärkeätä, että insuliinihoidosta riippuvainen diabeetikko ensimmäisen ja täydellisen tutkimuksen jälkeen tuntee itsensä ja tarpeensa vaihtelevissa olosuhteissa, esim. ruokavalionsa koostumuksen ja laadun sekä terveydentilansa sekä myös että hän käy säännöllisesti lääkärin tutkimuksissa ja että hoitoa {annosta) muutetaan, jos tähän on tarvetta. Näin ollen on myöskin tärkeätä, että kyseessä olevat peptidit sisällytetään hoito-ohjelmaan ja että oikea annos valitaan yksilöllisesti lääkärin yksilöllisen tutkimuksen ja sitä seuraavien rutiinikokeiden perusteella käyttäen erilaisia insuliini/pepti-dipitoisuuksia. Sopiva alkumäärä voi olla ekvimolaarinen määrä, mutta hoidettavan diabeetikon yksilöllinen reaktio voi vaatia huomattavia muutoksia tässä suhteessa.
Esimerkit
Kaikki selityksessä esitetyt aminohapot ovat luonnossa esiintyviä L-muotoja ja niiden lyhennelmät vastaavat IUPAC-IUB vahvistamia 3-kirjaimisia lyhennyksiä.
Sitä paitsi on käytetty seuraavia lyhennyksiä: tl 7 68245 BOC: tertbutyylioksikarbonyyli TLC : ohutkerroskromatografia DMF: dimetyyliformamidi AcOH : etikkahppo TEA: trietyyliamiini MeOH : metanoli ONO: o-nitrofenyyli BAW623: butanoli-1-:etikkahappo: . . _ , . vesi = 6:2:3 ONP: p-nitrofenyyli , -, · .... BAWP : butanoli-1: etikkahappo: EE : etyyliasetaatti vesi:pyridiini = 30:6:24:20
Bzl. bentsyyli hbt : hydroksibentsotriatsoli TFA: trif luorietikkahappo _T.T ,, c . , ,, SHI : kloroformi-metanoli-etik- PCP: pentakloorifenyyli kahappo = 90:5:5 AAA: aminohappoanalyysi DAPECI: dimetyyliaminopropyyli- etyylikarbodi-imidi
Aminohappoanalyysit suoritettiin käyttäen "Beckman 120C" aminohappo-analyysilaitetta.
TLC-määräys suoritettiin käyttäen BAW (A) ja BAWP (B) ja SHI (C).
Puhtauskriteeri suojatuille peptideille on ainoastaan yhden täplän esiintyminen TLC-määräyksessä nesteissä A ja C.
Seuraavat esimerkit kuvaavat käytettyjä reaktioita.
Esimerkki 1 asp-ser-ala-arq-OMe, 2HC1 BOC-ala-(NO^)arg-OMe 5 g (NO2) arg-OMe, HC1 lietetään 75 ml:aan DMF. Tähän lisätään 2500 yul TEA ja 5 g BOC-ala-ONO. 20 tunnin reaktion jälkeen on BOC-ala-ONO käytetty loppuun ja reaktioliuos haihdutetaan keltaiseksi öljyksi, joka liuotetaan 150 ml:an EE. EE-faasi pestään perusteellisesti kyllästetyllä NaHCO-^lla muodostuneen O-nitrofenolin poistamisexsi. Tämä haihdutetaan jälleen ja jäännös liuotetaan 25 ml:aan EE, johon lisätään kuivaa eetteriä siksi, kunnes sameus säilyy. Seoksen annetaan sitten seistä 3 vrk lämpötilassa 5°C sakan muodostamiseksi.
Tuote erotetaan, pestään kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa. Saanto: 4 g = 66 % teoreettisesta saannosta.
NO, BOC-(OBzl)ser-ala-arq-OMe 4 g BOC-ala-(NO2)arg-OMe liuotetaan TFA:han (50 ml) ja liuoksen annetaan seistä samalla sekoittaen 20 min. Sitten lisätään kuivaa eetteriä (150 ml). Sitten sekoitetaan 30 min suolan saostamiseksi.
8 68245
Peptidi-TFA-suola erotetaan sentrifugoimalla ja pestään kuivalla eetterillä. Kuivattu suola liuotetaan 35 ml:aan DMF ja tähän lisätään 2 ml TEA ja 4,2 g BOC-(OBzl)-ser-ONO. 1 vuorokauden kuluttua on reaktio päättynyt TLC:n avulla määrättynä. DMF haihdutetaan alipaineessa lämpötilassa 30-35°C. Tähän lisätään EE (150 ml) ja pestään 5 %:sella NaHC03:lla ja H20:lla.
EE-faasi haihdutetaan pieneen tilavuuteen ja siihen lisätään petroli-eetteriä 60-80° siksi, kunnes sameus säilyy. Seosta säilytetään kylmässä siksi, kunnes sakan yläpuolella olevassa nesteessä ei enää voida todeta tuotetta. Tuote erotetaan ja pestään kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa. Saanto:5 g = 87 % teoreettisesta saannosta.
BOC-(β-Bzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NO^)arg-OMe 3 g BOC-(OBzl) ser-ala-(N02) arg-OMe liuotetaan 25 m.l:aan TFA. Liuoksen annetaan seistä 20 min sitä samalla sekoittaen. Sitten lisätään 150 ml eetteriä peptidi-TFA-suolan saostamiseksi, tämä erotetaan sentrifugoimalla ja pestään kuivalla eetterillä. Peptidi-TFA-suola liuotetaan, 25 ml:an DMF, johon lisätään 2,5 g BOC-(β-Bzl)asp-ONO ja 800 ^ul TEA 100 ^ul erinä 8 tunnin kuluessa. 20 tunnin kuluttua reaktio on päättynyt ja DMF haihdutetaan alipaineessa lämpötilassa 30-35°C. Sitten lisätään EE, jolloin tuote saostuu. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä kylmässä siksi, kunnes sakan yläpuolella olevassa liuoksessa ei enää voida todeta peptidiä. Tuote erotetaan ja pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä. Saanto: 3,6 g = 88 % teoreettisesta saannosta.
asp-ser-ala-arg-OMe, 2HC1 3,6 g BOC-(8-Bzl)asp-(OBzl)ser-ala-(N02)arg-OMe hydrataan käyttäen 3 g 10 %:sta Pd/C 10 %:sessa AcOH/MeOH:ssa siksi, kunnes vetyä on kulunut teoreettinen määrä sekä TLC-analyysissä ilmenee toinen aine muodostuneen ammoniumasetaatin lisäksi. Peptidi erotetaan suodattamalla, katalysaattori pestään huolellisesti pois ja tuote haihdutetaan öljyksi. Muodostunut ammoniumasetaatti poistetaan johtamalla kerran kuivan piioksidigeelipatsaan lävitse käyttäen elutoimisaineena 5 %:sta AcOH/MeOH. Erotettua puhdasta, BOC-suojattua peptidiä käsitellään 1-n NCl/AcOH 30 min. Tuote erotetaan saostamalla kuivalla eetterillä ja sakka pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä. Saanto 2 g = 82 % teoreettisesta saannosta.
68245 9
Aminohappoanalyysista saadaan seuraavat tulokset: asp:ser:ala:arg = 1,01:0,69:1,00:0,92.
Seriiniä on muodostunut vähän hydrolyysimenetelmän mukaan määrättynä. Rf(Ä) = 0,08 Rf(B) = 0,25 Sp. (hajoaa) 164°
Kokonaissaanto: 44 % teoreettisesta määrästä.
Esimerkki 2
Samalla tavoin kuin esimerkissä 1 on kuvattu valmistettiin seuraava tuote: asp-ser-ala-arg-leu-gln-arg-OMe, 3HC1.
Esimerkki 3 glu-leu-ser-arq-leu-arg-asp-ser-ala-arg-OMe, 4HC1 BOC-(NOt)arg-(gBzl)asp-(QBzl)ser-ala-(NO^)arg-QMe 1,5 g BOC-(BBzl) asp-.(OBzl) ser-ala-(NO2) arg-OMe käsitellään 30 ml:lla TFA 20 min. Tähän lisätään 200 ml kuivaa eetteriä TFA-suolan saosta-miseksi. Suola erotetaan ja pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä, jonka jälkeen se kuivataan alipaineessa. Peptidi-TFA-suola liuotetaan 30 ml:aan DMF, tähän lisätään 1,4 g BOC-(NO2)arg-PCP, 1,4 g HBT ja 225 ^ul di-isopropyylietyyliamiinia.
Reaktioseosta käsitellään edelleen haihduttamalla keltaiseksi öljyksi, joka liuotetaan 200 ml:aanEE. EE-faasi pestään perusteellisesti NaHC03:lla (5 %, 3 x 50 ml) ja vedellä (3 x 50 ml). EE-faasi kuivataan MgS04:llä, suodatetaan ja haihdutetaan amorfiseksi aineeksi, joka pestään EE:n avulla. Saanto 1,35 g = 72 %.
BOC-leu-(NO2)arg-(BBzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NO^)arg-OMe 9 50 mg BOC-(NO2)arg-(BBzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NO2)arg-OMe käsitellään 15 min 20 ml:11a TFA. Tähän lisätään 200 ml kuivaa eetteriä tuotteen saostamiseksi. Tämä erotetaan ja pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä. Peptidi-TFA-suola kuivataan alipaineessa.
Suola liuotetaan 20 ml:an DMF, johon lisätään 700 mg BOC-leu-ONO ja 150 ^,ul TEA. 11 tunnin pituisen reaktion jälkeen on peptidisuola käytetty ja reaktioseos haihdutetaan keltaiseksi öljyksi. Lisättäessä 50 ml EE saostuu haluttu 6-peptidi. Suoritettaessa perusteellinen pesu EE:n avulla saadaan haluttu tuote puhtaana. Saanto: 1,0 g = 94%.
10 68245 BOC-(NO2)arg-leu-(NO2)arq-(gBzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NO2)arg-OMe 1 g BOC-leu-(N02)arg-(BBzl)asp-(OBzl)ser-ala-(N02)arg-OMe käsitellään 15 min kuluessa 15 ml:ila TFA. Tämän jälkeen lisätään 200 ml kuivaa eetteriä siksi, kunnes peptidi-TFA-suola on saostunut. Tämä erotetaan ja pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa. Peptidisuola liuotetaan 20 ml:aanDMF, johon lisätään 1,7 g BOC-(N02)arg-PCP, 4G0 mg HBT ja 130 ^ul TEA.
Reaktion päättymisen jälkeen suoritetaan haihduttaminen alipaineessa, jolloin saadaan ruskehtavaa öljyä, joka kiinteytyy kun sitä käsitellään EE:llä. Sakka pestään perusteellisesti EE:n avulla (4 x 100 ml) ja vedellä (3 x 100 ml). Tuote kuivataan alipaineessa. Saanto 1,1 g = 93 %.
BOC-(OBzl)ser-(N02)arg-leu-(NOq)arg-(gBzl)asp-(OBzl)ser-ala-NO^)-arg-OMe 800 mg BOC-(NO2)arg-leu-(NO2)arg-(gBzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NO2)arg-OMe käsitellään 15 min 15 ml:11a TFA. Tähän lisätään 150 ml kuivaa eetteriä peptidi-TFA-suolan saostamiseksi. Tämä erotetaan, pestään perusteellisesti, kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa. Suola liuotetaan 20 ml:an DMF, johon lisätään 1 g BOC-(OBzl)ser-CNC:a ja 9 0 yiil TEA.
Reaktio on päättynyt 5 vrk:n kuluttua ja tämän jälkeen suoritetaan haihduttaminen, jolloin saadaan kellertävää öljyä, johon lisätään 75 mi EE suojatun 8-peptidin saostamiseksi. Tämä erotetaan ja pestään perusteellisesti EE:n avulla. Saanto 800 mg = 88 %.
BOC-leu-(OBzl)ser-(NO2)arg-leu-(NO2)arq-(Bzl)asp-(OBzl^ser-aia-(NQ2)arg-OMe 600 mg BOC- (OBzl) ser- (N02) arg-leu- (NO2) arg- (β-Ezl)asp- (OBzl) ser-ala-(M02)arg-OMe käsitellään 15 ml:lia TFA 15 min, jonka jälkeen peptidi-TFA-suola saostetaan 150 ml:n avulla kuivaa eetteriä. Peptidi-TFA-suola pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa .
Peptidi-TFA-suola liuotetaan 25 m Isaan DMF, johon lisätään 55 ,ui / TFA ja 1,3 g BOC-.Leu-OitiO.
Reaktion päättymisen jälkeen suoritetaan haihduttaminen, jolloin saadaan kiteinen massa, johon kaadetaan EE:tä siksi, kunnes suojattu 11 68245 9-peptidi on saostunut. Tämä suojattu peptidi pestään perusteellisesti EE:llä. Tuote kuivataan alipaineessa. Saanto 550 mg = 85 %.
BOC-(γΒ2ΐ)glu-leu-(OBzl)ser-(NO.,)arg-leu-(NO2)arg-(βΒζ!)asp-(OBzl)-ser-ala-(NC^)arg-OMe 350 mg BOC-leu- (OBzl) ser- (NO2) arg-leu- (N02) arg- (βΒζΙ) asp- (OBzl) ser-ala- (N02)arg-OMe käsitellään 15 min 15 ml :11a TFA. Tähän lisätään 200 ml kuivaa eetteriä peptidi-TFA-suolan saostamiseksi. Tämä erotetaan, pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa .
Peptidi-TFA-suola liuotetaan 15 ml:aan DMF, johon lisätään 75 ^ul TEA ja 1,2 g BOC-(γΒζΙ)glu-ONO.
Reaktion päättymisen jälkeen haihdutetaan DMF alipaineessa, lisätään 50 ml EE, jolloin tuote saostuu. Suojattu 10-peptidi erotetaan ja pestään perusteellisesti EErllä siksi, kunnes O-nitrofenoli ja BOC-(γ-Bzl) glu-ONO osoittavat negatiivista reakt iota,. Saanto: 3 50 mg = 88 %.
glu-leu-ser-arg-leu-arg-asp-ser-ala-arg-OMe, 4HC1 350 mg suojattua 10-peptidiä hydrataan käyttäen 600 mg 10 %:sta Pd/C seoksessa, jossa on 25 ml metanolia, 25 ml DMF ja 10 ml AcOH. Reaktion päättymisen jälkeen erotetaan katalyytti suodattamalla ja pestään perusteellisesti. Kootut uutteet haihdutetaan öljyksi, joka puhdistetaan preparatiivisen TLC:n avulla. Erotettua puhdasta amino-pääteasemassa suojattua 10-peptidiä käsitellään 25 ml:11a 1-n HCl/AcOH 30 min, jonka jälkeen haluttu tuote saostetaan lisäämällä kuivaa eetteriä. Tuote pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä ja kuivataan alipaineessa. Saanto 200 mg = 71 % teoreettisesta määrästä.
Aminohappomääräykset:
Teoriassa: glu:leu:ser:ala:asp:arg = 1:2:2:1:1:3 Käytännössä: 1,06:1,90:1,55:1,00:1,09:3,1 Sp. 170°C (hajoaa) TLC: R(Ä) = 0,08 R(B) = 0,29.
Esimerkki 4
Samalla tavoin kuin esimerkissä 4 valmistetaan glu-leu-ser-arg-leu-arg-OMe, 3HC1.
68245 12
Esimerkki 5 glu-leu-ser-arg-OMe, 2HC1 BOC-(OBzl)ser-(NO^)arg-OMe 6 g BOC-(OBzl) ser liuotetaan 50 mitään CI^Cl2 ja jäähdytetään lämpötilaan -5°C. Tähän lisätään hitaasti tipottain 4 g DAPECI'a 100 ml:ssa CH2CI2· Tähän lisätään seos, jossa on 5 g (N02)arg-OMe, HCl ja 2,8 ml TEA 100 ml:ssa DMF. Reaktion päättymisen jälkeen haihdutetaan alipaineessa. Sitten lisätään 50 ml vettä ja 150 ml EE. Orgaaninen faasi pestään vedellä, 5 %:sella NaHC03:lla, vedellä, 10 %: sella sitruunahapolla ja vedellä. EE-faasi kuivataan K^SO^tn avulla.
Suodattamisen ja öljyksi haihduttamisen jälkeen saadaan tuote käsittelemällä petrolieetterillä ja erotetaan amorfisena, valkoisena aineena. Saanto 7 g = 75 %.
BOC-(γ-Bzl)glu-leu-ONP
1.4 g BOC-(γ-Bzl)glu liuotetaan 50 ml:an CH2CI2 ja jäähdytetään läm pötilaan -5°C. Sitten lisätään 1 g DAPECI'a 25 mlrssa CH2CI2 hitaasti niin, että lämpötila ei ylitä -2°C. 30 minuutin kuluttua lisätään 1 g leu-ONP, HCl kiteisessä muodossa ja tähän lisätään tipottain 485 yUl TEA 25 ml:ssa CH2Cl2 6 tunnin kuluessa.
Reaktion päättymisen jälkeen suoritetaan haihduttaminen alipaineessa. Seos liuotetaan EE:hen. Tämän jälkeen uutetaan nopeasti kerran 0,1-n NaOHrlla ja kolmasti vedellä. EE-faasi kuivataan.
Haihdutettaessa EE-faasi kiteytyy tuote. Saanto 1,2 g = 66 %.
BOC-(γΒζ!)glu-leu-(OBzl)ser-(NO?)arg-OMe 1.5 g BOC-(OBzl)ser-(N02)arg-OMe käsitellään 20 ml :11a 1-n HCl/AcOH 15 min. Tähän lisätään 150 ml kuivaa eetteriä, jolloin muodostuu sakka. Sakka erotetaan, pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä ja kuivataan*.
1,2 g BOC-(γΒζΙ)glu-leu-ONP liuotetaan 50 ml:an DMF, johon lisätään (OBzl)ser-(NO2)arg-OMe, HCl ja TEA, kunnes reaktio on emäksinen.
Reaktioseos pidetään hieman emäksisenä 6 vrk, jonka jälkeen seos haihdutetaan alipaineessa. Sitten lisätään EE:tä, jolloin reagoimaton (OBzl)ser-(N02)arg-OMe saostuu.
68245 13 EE-faasi uutetaan perusteellisesti 3 x 30 ml:11a 10 %:sta sitruuna-happoa, vedellä, 2 x 50 ml :11a 0,1-n NaOH ja vedellä.
EE-faasi kuivataan, suodatetaan ja haihdutetaan valkoiseksi, amorfiseksi aineeksi, joka on puhdasta TLC-analyysissä. Saanto: 1,31 g = 77 %.
glu-leu-ser-arg-OMe, 2HC1 1,31 g BOC-(γΒζΙ)glu-leu-(OBzl)ser-(N02)arg-0Me hydrataan käyttäen 1 g Pd/C (10 %) 150 ml:ssa 10 %:sta AcOH/MeOH.
Reaktion päättymisen jälkeen erotetaan katalyytti suodattamalla ja pestään perusteellisesti. Kootut orgaaniset faasit haihdutetaan alipaineessa öljyksi.
Tämä öljy liuotetaan 20 %:seen AcOH:oon ja jäähdytyskuivataan.
Jäähdytyskuivattu aine liuotetaan 50 ml:aan 1-n HCl/AcOH ja se saa seistä 30 min. Tähän lisätään 200 ml kuivaa eetteriä sakan muodostamiseksi. Saostunut tuote pestään perusteellisesti kuivalla eetterillä ja kuivataan.
Saanto: 600 mg = 66 %
Sp. (hajoaa) = 160°C
Aminohappoanalyysi: glu:leu:ser:arg = 1:1:1:1 Käytännössä: 1,07:1,00:0,71:0,84 TLC: R(a) = 0,21 R(B) = 0,47
Farmakologiset kokeet Rotat
Valmistetaan injektoitava valmiste seuraavasti: 3,08 mg asp- ser-ala-arg-OMe, 2HC1 liuotetaan 200 ^ul:aan 0,9 %:sta NaCl.
Tämä liuos lisätään 20 ml:aan insuliiniliuosta (40 IU/ml), jolloin saadaan liuos, joka on ekvimolaarinen peptidin ja insuliinin suhteen. Tätä valmistetta annettiin ruiskeena laskimon sisäisesti normaaleille rotille määrässä, 1,5 mg/kg peptidiä + 0,5 IU/kg insuliinia. Vertailun vuoksi annettiin samankaltaisille rotille ruiskeena insuliinivalmistetta, joka sisälsi 0,5 IU/kg.
Keksinnön mukainen valmiste johtaa veren glukoosipitoisuuden alentumiseen 30 %:iin alkuarvosta, kun taas pelkkä insuliini vain alentaa pitoisuutta 60 %:iin alkuarvosta.
68245 14
Koe toistettiin käyttäen diabeettisia rottia. Keksinnön mukainen valmiste alensi veren glukoosipitoisuutta 40 %:iin alkuarvosta, kun taas pelkkä insuliini vain alensi pitoisuutta 65 %:iin alkuarvosta.
Nämä tulokset osoittivat selvästi kyseessä olevien valmisteiden tehokkuutta.
Marsut
Annettiin marsuille laskimonsisäisenä ruiskeena seuraavia valmisteita.
1. Insuliini (0,5 IU/kg) 2. 2 ^,ug/kg asp-ser-ala-arg-OMe, 2 HC1 + 0,5 IU/kg insuliinia 3. 4 mg/kg asp-ser-ala-arg-OMe, 2 HC1 (eli 2000-kertainen määrä valmisteeseen 2 nähden) + 0,5 IU/kg insuliinia.
Valmisteet 1 ja 3 johtivat veren glukoosipitoisuuden alentumiseen 60 ja vastaavasti 30 %:iin alkuarvosta, kun taas valmiste 2 aikaansai alkuarvon alentumisen 35 %:iin. Näin ollen voidaan tehdä se johtopäätös, että kun peptidin tehokas määrä kerran on saavutettu, niin tämän määrän lisääminen ei vaikuta juuri lainkaan saavutettuun lopputulokseen.
Kirjallisuusviiteluettelo 1. Houben-V/eyl: Methoden der organischen Chemie 15/2, Synthesen von Peptiden, s. 2-364, (1974), Georg Thieme Verlag, Stuttgart.
2. J.E. Jorpes ja V. Mutt.
Secretin, Cholecystokinin, Pancreozymin ja Gastrin, s. 30 (1973) Springer Verlag, Berlin.
3. Gliemann, J. Diabetologia 3^, 382, (1967).
4. Widmer, F. ja Johansen, J.T., Carlsberg, Res. Commun, voi. 44, s. 3746 (1979).
5. Itakura, K. ym. , Science 198, s. 1056 (1 977).
6. Enk, B., Kölendorf, K., Deckert, T. - Ugeskrift for Laeger, 134, n:o 49, s. 2577-80 (1972).
Claims (5)
1. Analogiamenetelmä polypeptidijohdannaisen valmistamiseksi, joka vaikuttaa estävästi glukoosin stimuloimaan insuliinierit-tymiseen ja voimis Lavasti glukoosiaineenvaihtoon ja jolla on yleinen kaava a-x-b-arg-c jossa kaavassa x on glu tai asp, a on vety tai x:ssä olevan α-aminoryhmän pienempi suojaryhmä, b on leu tai di-tai tripeptidi, joka on valittu ryhmästä, jonka muodostavat leu-ser, ser-ala, his-phe ja gly-gly-gly, ja kun x on glu, voi b lisäksi olla sidos tai sekretiinifragmentti leu-ser-arg-leu tai leu-ser-arg-leu-arg-asp-ser-ala, ja kun x on asp, voi b lisäksi olla sekretiinifragmentti ser-ala-arg- leu-glu ja 12. 1 . 2 c on -NR R , jossa R ja R ovat vety tai Ck-C -alkyyli tai 3.3 16 3 c on -OR , jossa R on vety tai C^-Cg-alkyyli, jolloin R ei voi olla vety kun x on asp ja b on ser-ala, tai sen happoaddi-tiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että argi-niinijohdannainen, jolla on kaava arg-c, jossa c tarkoittaa samaa kuin edellä, tai sen suojattu johdannainen yhdistetään sellaisen yhdisteen kanssa, jolla on kaava a-x-b, jossa a, x ja b tarkoittavat samaa kuin edellä tai peräkkäin yhdisteen a-x-b sisältävien yksinkertaisten aminohappojen tai peptidi-sekvenssien kanssa, jolloin ne funktionaaliset ryhmät, jotka eivät saa reagoida synteesissä, ovat suojatut, jonka jälkeen muodostunut peptidi haluttaessa muutetaan happoadditiosuolaksi, tai jos c on -OH, saatetaan muodostunut peptidi haluttaessa rea- 12 3 goimaan kaavan R R NH mukaisen amiinin tai kaavan R OH mukaisen alkoholin kanssa, joissa kaavoissa R , R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä. 16 68245
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen analogiamenetelmä sellaisen yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava asp-ser-ala-arg-c jossa kaavassa c tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 1, tunnettu siitä, että arginiinijohdannainen, jolla on kaava arg-c, jossa c tarkoittaa samaa kuin edellä tai on sen suojattu johdannainen, yhdistetään peräkkäisesti aminohappojen ala, ser ja asp kanssa, jolloin ne funktionaaliset ryhmät, jotka eivät saa reagoida synteesissä, ovat suojattuja, jonka jälkeen reaktiotuote, mikäli se on tarpeellista tai niin halutaan, vapautetaan suojaryhmistä.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen analogiameneftelmä, tunnettu siitä, että arginiinijohdannainen, jolla on kaava (NO2) arg-c jossa c tarkoittaa samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan sellaisen yhdisteen kanssa, jolla on kaava BOC-ala-ONO, jonka jälkeen muodostunut yhdiste, jolla on kaava N0_ I * BOC-ala-arg-c BOC-ryhmän poislohkaisemisen jälkeen saatetaan reagoimaan BOC-(OBzl)-ser-ONO:n kanssa niin, että muodostuu yhdiste NO, f z BOC-(OBzl)ser-ala-arg-c, joka samalla tavoin BOC-ryhmän pois lohkaisemisen jälkeen saatetaan reagoimaan yhdisteen BOC-(S-Bzl)-asp-ONO kanssa, jonka jälkeen reaktiotuote, jolla on kaava BOC-(β-Bzl)asp-(OBzl)ser-ala-(NO^)arg-c hydrataan halutuksi peptidijohdannaiseksi.
4. Patenttivaatimuksen 2 mukainen analogiamenetelmä peptidi-johdannaisen valmistamiseksi, jolla on kaava asp-ser-ala-arg-OR jossa kaavassa on C^-Cg-alkyyli, tunnettu siitä, 68245 17 että vastaava peptidi, jolla on kaava asp-ser-ala-arg-OH tai sen reaktiokykyinen johdannainen saatetaan reagoimaan alkoholin kanssa, jolla on kaava R6OH, jossa R6 tarkoittaa samaa kuin edellä, tai sen reaktiokykyisen johdannaisen kanssa.
5. Patenttivaatimuksen 2 mukainen analogiamenetelmä peptidi-johdannaisen valmistamiseksi, jolla on kaava asp-ser-ala-arg-NR1R2 . 1 . 2 jossa kaavassa R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä, tunnettu siitä, että yhdiste, jolla on kaava asp-ser-ala-arg-OH tai sen reaktiokykyinen johdannainen, saatetaan reaqoimaan amii- 1 2 1 o nxn kanssa, jolla on kaava HNR R , jossa R ja R tarkoittavat samaa kuin edellä. 68245 18
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK430478 | 1978-09-28 | ||
| DK430478 | 1978-09-28 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI793002A FI793002A (fi) | 1980-03-29 |
| FI68245B FI68245B (fi) | 1985-04-30 |
| FI68245C true FI68245C (fi) | 1985-08-12 |
Family
ID=8132257
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI793002A FI68245C (fi) | 1978-09-28 | 1979-09-26 | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter daerav |
| FI793001A FI68244C (fi) | 1978-09-28 | 1979-09-26 | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter daerav |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI793001A FI68244C (fi) | 1978-09-28 | 1979-09-26 | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter daerav |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4356119A (fi) |
| JP (2) | JPS5576849A (fi) |
| AT (1) | AT375338B (fi) |
| AU (2) | AU526149B2 (fi) |
| BE (2) | BE879086A (fi) |
| CA (2) | CA1140116A (fi) |
| CH (2) | CH648567A5 (fi) |
| DE (2) | DE2939135A1 (fi) |
| ES (2) | ES484926A1 (fi) |
| FI (2) | FI68245C (fi) |
| FR (2) | FR2437399A1 (fi) |
| GB (2) | GB2031436B (fi) |
| IT (2) | IT1125421B (fi) |
| NL (2) | NL7907187A (fi) |
| NO (2) | NO148923C (fi) |
| SE (2) | SE7907938L (fi) |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA616330A (en) * | 1961-03-14 | Schwyzer Robert | Polypeptide and derivatives thereof and process for their manfuacture | |
| CA798855A (en) * | 1968-11-12 | Bernardi Luigi | Process for preparing a new undecapeptide | |
| CA685075A (en) * | 1964-04-21 | Schwyzer Robert | Polypeptides and process for their manufacture | |
| GB1064417A (en) * | 1963-12-09 | 1967-04-05 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Process for the preparation of copolypeptides |
| US3400118A (en) * | 1966-05-27 | 1968-09-03 | Squibb & Sons Inc | Intermediates in the preparation of secretin |
| US3832337A (en) * | 1970-07-28 | 1974-08-27 | Squibb & Sons Inc | Peptide enzyme inhibitors |
| US3856770A (en) * | 1972-03-08 | 1974-12-24 | Akzona Inc | Psychopharmacologically active tetra-, penta-, hexa-, and heptapeptides |
| NL175174C (nl) * | 1972-03-31 | 1984-10-01 | Akzo Nv | Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat als actief bestanddeel bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van deze peptiden. |
| NL175988C (nl) * | 1972-05-24 | 1985-02-01 | Akzo Nv | Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat dat afgeleid is van een de aminozuren 4-10 omvattend, fragment van adrenocorticotroop hormoon als actief bestanddeel bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van deze peptiden. |
| NL175618C (nl) * | 1972-07-15 | 1984-12-03 | Akzo Nv | Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van dergelijke peptiden. |
| DE2315271C3 (de) * | 1973-03-27 | 1975-09-11 | Max-Planck-Gesellschaft Zur Foerderung Der Wissenschaften E.V., 3400 Goettingen | L- Norleucin-13-Motilin, Verfahren zu dessen Herstellung und dasselbe enthaltendes Mittel |
| GB1532211A (en) * | 1974-10-25 | 1978-11-15 | Wellcome Found | Lh-rh peptide analogues |
| US3975365A (en) * | 1975-01-27 | 1976-08-17 | G. D. Searle & Co. | Inhibitory octapeptides angiotensin II |
| US4171299A (en) * | 1975-04-04 | 1979-10-16 | The Regents Of The University Of California | Polypeptide agents for blocking the human allergic response |
| DE2602443A1 (de) * | 1975-04-04 | 1976-10-21 | Univ California | Biologisch aktive polypeptide |
| US4058512A (en) * | 1975-04-28 | 1977-11-15 | Ab Kabi | Synthetic peptides having growth promoting activity |
| US4024121A (en) * | 1976-01-27 | 1977-05-17 | Schally Andrew Victor | (Pyro)-Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR and intermediates |
| SE436645C (sv) * | 1976-04-29 | 1996-07-22 | Bonnierfoeretagen Ab | Antigeniskt aktiv polypeptid, som kan användas vid cancerdiagnosticering och vid framställning av antikroppar |
| US4110321A (en) * | 1976-07-12 | 1978-08-29 | Folkers Karl | Synthetic tridecapeptide [Gln4 ]-neurotensin having hormonal activity |
| US4086220A (en) * | 1976-08-09 | 1978-04-25 | G. D. Searle & Co. | Fragments of secretin |
-
1979
- 1979-09-24 US US06/078,424 patent/US4356119A/en not_active Expired - Lifetime
- 1979-09-25 SE SE7907938A patent/SE7907938L/ not_active Application Discontinuation
- 1979-09-25 SE SE7907939A patent/SE7907939L/ not_active Application Discontinuation
- 1979-09-26 AU AU51245/79A patent/AU526149B2/en not_active Ceased
- 1979-09-26 AU AU51246/79A patent/AU533684B2/en not_active Ceased
- 1979-09-26 FI FI793002A patent/FI68245C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-09-26 FI FI793001A patent/FI68244C/fi not_active IP Right Cessation
- 1979-09-27 NO NO793112A patent/NO148923C/no unknown
- 1979-09-27 AT AT0634679A patent/AT375338B/de not_active IP Right Cessation
- 1979-09-27 DE DE19792939135 patent/DE2939135A1/de not_active Withdrawn
- 1979-09-27 NL NL7907187A patent/NL7907187A/nl not_active Application Discontinuation
- 1979-09-27 NL NL7907188A patent/NL7907188A/nl not_active Application Discontinuation
- 1979-09-27 CA CA000336681A patent/CA1140116A/en not_active Expired
- 1979-09-27 CA CA000336694A patent/CA1158640A/en not_active Expired
- 1979-09-27 NO NO793111A patent/NO148922C/no unknown
- 1979-09-27 GB GB7933541A patent/GB2031436B/en not_active Expired
- 1979-09-27 CH CH8714/79A patent/CH648567A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-09-27 FR FR7924077A patent/FR2437399A1/fr active Granted
- 1979-09-27 GB GB7933540A patent/GB2031435B/en not_active Expired
- 1979-09-27 CH CH8715/79A patent/CH648568A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-09-27 DE DE19792939109 patent/DE2939109A1/de not_active Withdrawn
- 1979-09-27 FR FR7924078A patent/FR2437400A1/fr active Granted
- 1979-09-28 IT IT26111/79A patent/IT1125421B/it active
- 1979-09-28 BE BE0/197391A patent/BE879086A/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-09-28 IT IT26112/79A patent/IT1125422B/it active
- 1979-09-28 BE BE0/197392A patent/BE879087A/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-09-28 ES ES484926A patent/ES484926A1/es not_active Expired
- 1979-09-28 JP JP12522179A patent/JPS5576849A/ja active Pending
- 1979-09-28 JP JP12522079A patent/JPS5569550A/ja active Pending
- 1979-09-28 ES ES484928A patent/ES484928A1/es not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100658961B1 (ko) | 공유적으로 가교결합된 인슐린 이량체, 이를 포함하는 약제학적 조성물 및 진단 키트, 및 이의 제조방법 | |
| US8642544B2 (en) | N-terminus conformationally constrained GLP-1 receptor agonist compounds | |
| CN111253475B (zh) | Glp-1激动多肽化合物及其盐与合成方法及用途 | |
| EP2036923A1 (en) | Improved derivates of amylin | |
| US20100021480A1 (en) | Bioactive substance-blood protein conjugate and stabilization of a bioactive substance using the same | |
| JPH06501950A (ja) | 環状ペプチド、その調製法およびその薬理組成物としての使用 | |
| BG61125B2 (bg) | Циклични вазоактивни пептидни аналози | |
| US4237046A (en) | Polypeptides and methods of preparation | |
| CN113429471B (zh) | 长效glp-1多肽类似物及其制备方法和应用 | |
| AU641366B2 (en) | Peptide compounds | |
| US20040122013A1 (en) | Analogs of nocicettin | |
| US5786335A (en) | Sulfhydryl containing peptides for treating vascular disease | |
| US8080522B2 (en) | Polyethlene glycol modifications of thymosin alpha-1 | |
| CA2405704C (en) | Bombesin analogs for treatment of cancer | |
| FI68245B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva polypeptidderivat eller syraadditionssalter daerav | |
| Botos et al. | Synthesis and biological activities of arginine-vasopressin analogs designed from a conformation-activity approach | |
| JP2004002331A (ja) | 肝臓癌の治療 | |
| JPH07316195A (ja) | 新規なＰＴＨｒＰ関連ペプチド及びその用途 | |
| JPH051798B2 (fi) | ||
| EP0360481B1 (en) | New pentapeptide and a process for the preparation thereof | |
| US4265884A (en) | Therapeutically active polypeptides or acid addition salts thereof and a process for producing such compounds | |
| CN115960258B (zh) | 一类GLP-1/glucagon/Y2受体三重激动剂及其应用 | |
| EP1370587A2 (en) | Antiangiogenic peptides derived from endostatin | |
| KR100359713B1 (ko) | 펩신방출을억제하기위한펩티드 | |
| JP2782232B2 (ja) | プロテアーゼ阻害剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: NORDISK INSULINLABORATORIUM |