NL1025116C2

NL1025116C2 - Nieuwe farmaca.

Info

Publication number: NL1025116C2
Application number: NL1025116A
Authority: NL
Inventors: Kevin Neil Dack; Dafydd Rhys Owen; Christine Anne Louise Watson
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2002-12-23
Filing date: 2003-12-23
Publication date: 2004-10-18
Also published as: US20040138274A1; NL1025116A1; PA8593601A1; EP1578735A1; UY28145A1; AU2003285641A1; PE20050122A1; BR0317644A; JP2006515297A; GT200300291A; CA2511360A1; GB0230025D0; TW200420548A; AR042647A1; WO2004056787A1

Description

5 10

. NIEUWE FARM&CA

De·' uitvinding, betreft een reeks, van met cyclopentyl 15 gesubstitueerde glutaaramidederivaten . en preparaten en toepassingen daarvan. De derivaten zijn krachtige en se-• lectieve remmers van neutraal endopeptidase (NEP) en kun-' . nen worden gebruikt voor het behandelen van een aantal .. . ziekten en aandoeningen, met name. cardiovasculaire stoor-20 nissen, in het bijzonder hypertensie.

Volgens een eerste aspect voorziet dé onderhavige uitvinding ih een verbinding met formule (I), een farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan 25.

' · *' , ,/ <ch*vl-r3 - R T T-i o . 35 waarin R1 is Ci-Cg alkyl, Ci~C6 alkoxyCi-C3 alkyl of Ci-C6 al-koxyCi-Cg alkoxyCi-C3 alkyl, 1025116- I 2 I R2 is waterstof of C1-C6 alkyl, I L is een aromatische heterocyclische ring die eventu- eel gesubstitueerd is met C1-C6 alkyl of halogeen, I R3 is C1-C6 alkyl die eventueel gesubstitueerd is met 5 een. halogeen-, alkoxy-, halogeenalkoxy-, alkylthio-, halo- geenalkylthio- of nitrilgroep, of R3 is fenyl of een aro- matische heterocyclyl, die elk onafhankelijk gésubstitu- I eerd. kunnen zijn -met één of meer alkyl-, halogeen-, halo- I geenalkyl-, alkoxy-, halogeenalkoxy-, alkylthio-, halo- 10 geenalkylthio- of nitrilgroepen, I R4 en R5 beide waterstof zijn, of één van R4 en R3 wa- I terstof is en de andere een biologisch labiele estervor- mende groep is die' in het lichaam van een patiënt wordt vervangen door waterstof, .

I 15 p is 0, 1 of.2 en I q is 1 of 2.

Tenzij anderszins wordt aangegeven kan een alkylgroep I recht of vertakt zijn en heeft deze 1 tot 6 koolstofatomen en bij voorkeur 1 tot 4.

20 Tenzij anderszins wordt aangegeven bevat een carbocy- I clylgroep 3 tot 8 ringatomen en kan deze verzadigd, onver- I zadigd of aromatisch zijn. Verzadigde carbocyclylgroepen I die de voorkeur verdienen zijn cyclopropyl, cyclobutyl, I cyclopentyl of cyclohexyl. Onverzadigde carbocyclylgroepen 25 die de voorkeur verdienen bevatten tot 3 dubbele bindin- gen. Een aromatische carbocyclylgroep die de voorkeur ver- I dient is fenyl. De uitdrukking carbocyclisch. ‘ dient op overeenkomstige wijze, te worden uitgelegd. Bovendien omvat I de uitdrukking carbocyclyl elke gecondenseerde combinatie I 30 van carbocyclylgroepen, bijvoorbeeld, naftyl, fenantryl, H indanyl en indenyl.

Tenzij anderszins wordt aangegeven bevat een hete- roctclylgro.ep 5. tot 7 ringatomen, waarvan tot 4 heteroato- I men kunnen zijn, zoals, stikstof, zuurstof én zwavel·, en I 35. kan deze verzadigd, onverzadigd en aromatisch zijn. Voor- beelden van heterocyclylgroepen zijn furyl, thienyl, pyr- I rolyl, pyrrolinyl, pyrrolidinyl, imidazolyl, dioxolanyl, 3 oxazolyl, thiazolyl, imidazolyl, imidazolinyl, imidazoli-dinyl, pyrazolyl, pyrazolinyl, pyrazolidinyl, isoxazolyl, isothiazolyl, oxadiazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, pyra-nyl, pyridyl, piperidinyl, dioxanyl, morfplino, dithianyl, 5 thiomorfolino, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, pipe-razinyl, sulfolanyl, tetrazolyl, triazinyl, azepinyl, oxa-zepinyl, thiazepinyl, diazepinyl én thiazolinyl. Bovendien omvat de uitdrukking.heterocyclyl gecondenseerde heterocy-clylgroepen, bijvoorbeeld benzimidazolyl, benzoxazolyl, 10 imidazopyridinyl, benzoxazinyl, benzothiazinyl,. oxazolopy-ridinyl, benzofuranyl, chinolinyl, chinazolinyl, chinoxa-liny.1, dihydrochinazolinyl, benzithiazolyl, ftaalimido, benzofuranyl, benzodiazepirtyl, indolyl en isoindolyl. De uitdrukking heterocyclisch dient op overeenkomstige wijze 15 te worden uitgelegd.

Halogeen betekent fluor, chloor,.broom of jood.

Tenzij anderszins wordt aangegeven bevat een halo-geenalkyl-,. halogeenalkoxy- of halogeenalkylthiogroep één of meer halogeenatomen, welke halogeenatömen gelijk of 20 verschillend kunnen zijn.

Bij voorkeur is R1 C1-C6 alkyl of Ci-C6alkoxyCi-C3-alkyl. Liever is R1 propyl.of methoxyethyl.

Bij voorkeur is R2 waterstof.

Bij voorkeur is L een niet-gecondenseerde aromatische 25 heterocyclische. ring die eventueel gesubstitueerd is mét Ci-C« alkyl. Liever is deze een vijftallige aromatische heterocyclische ring. Liever is deze oxazool, oxadiazool, imidazool of pyrazool. Nog liever is deze oxazool öf oxadiazool.

30 Bij voorkeur is R3 Ci~C6 alkyl of is R3 fenyl die onaf hankelijk gesubstitueerd kan zijn met één of meer Ci-Ce-alkyl-, halogeen-, halogeenCi-Ce alkyl-, Ci-C$ alkoxy-, .halogeenalkoxy-, C1-C6 alkylthio-, halogeenCi-C6 alkylthio-of nitrilgroepen. Liever is R3 fenyl die eventueel gesub-35 stitueerd is met halogeen. Nog liever is R3 fenyl, 4-fluorfenyl of 4-chloorfenyl.

1025118- 4

Met de uitdrukking "biologisch labiele estervormende groep" wordt in het vakgebied bedoeld een groep die voorziet in een ester die in het lichaam gemakkelijk kan worden gesplitst, zodat het overeenkomstige dizuur met de 5 formule {I) wordt vrijgemaakt, waarin R4 en R5 beide waterstof zijn. Een aantal van dergelijke estergroepen is bekend, bijvoorbeeld op het gebied van de penicillinen of bij ACE-remmers die hypertensiva.zijn, zoals enalapril en quinapril. Verbindingen met formule (Ij die dergelijke.bi-10 ologisch labiele estervormende groepen bevatten zijn met name gunstig bij het voorzien in verbindingèn die geschikt zijn voor orale toediening. De geschiktheid van een bepaalde estervormende groep kan worden beoordeeld door de gebruikelijke dierstudies of in vitro studies naar enzym-15 hydrolyse. Voor het optimale effect dient de ester slechts na absorptie te worden gehydrolyseerd. Dienovereenkomstig dient de ester resistent te zijn tegen hydrolyse voor absorptie . door spijsvérteringsenzymen, maar dient deze gemakkelijk te worden gehydrolyseerd door bijvoorbeeld enzy-20 men' uit de lever of het plasma. Op deze manier wordt het actieve dizuur na orale absorptie in de bloedstroom afgegeven.

Biologisch labiele . estervormende voorkeursgroepen zijn Ci-C6 alkyl, carbocyclyl, heterocyclyl of carbocy-25 ' clylalkyl die'elk gesubstitueerd kunnen zijn.

Biologisch labiele estervormende groepen die de voorkeur verdienen, zijn: i) Ca-C6 alkyl die eventueel gesubstitueerd is met hydroxy, oxo, halogeen, halogeenCi-C6-alkyl, Ci-C6 alkoxy, halogeenCi-Cö alkoxy,. · Ci-Ce alkylthio-, 30 halogeenCi-Cg alkylthio, nitril, carbocyclyl, heterocyclyl, carbocyclyloxy, heterocyclyloxy, C1-C7 . alkylcarbonyloxy, carbocyclylcarbonyloxy, heterocyclylcarbonyloxy, alkylcar-bonylamino en alkylaminocarbonyl., waarbij een carbocyclyl-of heterocyclylgroep eventueel gesubstitueerd is mèt C1-C6-35 alkyl, halogeen,· halogeenCi-Cg alkyl, Ci-Ce alkoxy, halo-geenCx-C6 alkoxy, Ci~C6 alkylthio, halogeenCi-C6 alkylthio of nitril, of ii) carbocyclyl of heterocyclyl, die eventu- .

5 eel gesubstitueerd is met Ci-C6 alkyl, halogeen, halogeen-Ci-C6-alkyl, C1-C6 alkoxy, halogeen-Ci-Cö alkoxy,. C1-C6 alkylthio, halogeenCi-Cö alkylthio of nitril. In de definities van i) en ii) is een carbocyolische groep bij voor-5 keur fenyl en een heterocyclische groep bij voorkeur een aromatische.

Biologisch labiele estervormende groepen die nog meer "voorkeur verdienen worden gekozen uit de opsomming: ethyl,, propyl, butyl, isobutyl, cyclopentyl, benzyl, Ι-ΙΟ (2,2-diethylbutyryloxy)ethyl, 2-ethylpropionyloxymethyl, 1-(2-ethylpropionyloxy)ethyl, 1-(2,4-dimethylbenzoyloxy)-ethyl, 1-benzoyloxy)benzyl, 1-(benzoyloxy)ethyl, 2-methyl-1-propionyloxypropyl, 2,4, 6-trimeth'ylbenzoyloxymethyl, 1- ' (2, 4,6-trimethylbenzyloxy)ethyl, pivaloyloxymethyl, fë-15 nethyl, fenpropyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1-naftyl, 2-naftyl, 2,4-dimethylfenyl, 4-t-butylfenyl,· 5-(4-methyl- 1,3-dioxalinyl-2-onyl)methyl, N,N-diethylaminocarbonyl-' methyl en 5-indanyl.

Bij voorkeur zijn R4 en R5 beide waterstof.

20 Bij voorkeur is p 0 of 1. Liever is p 0.

Bij voorkeur is q 1.

Een voorkeursverbinding voldoet aan de formule (1’) waarin R1, R2, R3, R4, R5, L, p en g de volgens het eerste aspect gegeven betekenis hebben.

25

O JL

• Η(/υγΛ^ΑγΝ\.(ΟΗί)ς·1·Η3 30 O O -.---1 (|,) : R2 (CH2Y^

O

35

Een voorkeursverbinding met de formule (I1) is die waarin 1025116- I .6 I R1 is Ci-Οζ alkyl of Ci-Cg alkoxyCi-C3 alkyl, . R2 is waterstof, I L is een niet-gecondenseerde vijftallige aromatische I heterocyclische ring die eventueel gesubstitueerd is met I '5 Ci-C6 alkyl, I R3 is C1-C6 alkyl of R3 is fenyl die onafhankelijk ge- I substitueerd kan. zijn met één of meer Ci-C* alkyl-, halo- I geen-, halogeenCi-Ce alkyl-, C1-C6 alkoxy-, halogeenal- I koxy-, Ci~C6 alkylthio-, halogeenCi-C6 alkylthio- of ni- I : 10 trilgroepen, I R4 en R5 beide waterstof zijn, of één vain R4 én R3 wa- I terstof is en de andere een biologisch'labiele estervor- I ' . mende groep is die wordt gekozen uit de. opsomming: i) C1-C6 alkyl die eventueel gesubstitueerd is met hydroxy, oxo, I 15 halogeen, halogeenCi-C6 alkyl, Cx-Ce alkoxy, halogeenCi-Cé I alkoxy, Cx~C6 alkylthio, halogeenCx~C6 alkylthio, nitril, I carbocyclyl, heterocyclyl, carbocyclyloxy, heterocycly- I loxy, alkylcarbonyloxy, carbocyclylcarbónyloxy, heterocy- clylcarbonyloxy, alkyicarbonylamino en alkylaminocarbonyl, I 20 waarbij een carbocyclyl- of heterocyclylgroep eventueel I gesubstitueerd is met Ci~C6 alkyl, halogeen, halpgeenCi-C6** I alkyl, Ci-Cé alkoxy, halogeenCi-C6 alkoxy, Ci-C6- alkylthio, I halogeenCi-C6 alkylthio of nitril, of· ii) carbocyclyl of I heterocyclyl die eventueel gesubstitueerd is met C1-C6- I 25 alkyl, halogeen, halogeenCi-Cg alkyl, Ci-Ce alkoxy, halo- I geen Ci-Cê alkoxy, C1-C6 alkylthio, halogeen Ci-Ce- alkyl- I thio of nitril, I p is 0 of 1 en I q is 1.

I 30 Een verbinding met de formule (I’) die meer voorkeur verdient is die waarin R1 is propyl of methoxyethyl, I R2 is waterstof, I L is o'xazool, oxadiazool, imidazool of pyraizool die I 35 elk gesubstitueerd kunnen zijn met Cj-Ce alkyl, R3 is fenyl, 4-fluorfenyl of 4-chloorfenyl, R4 en R5 beide waterstof zijn, p is 0 en 7 q is 1.

Een verbinding, met de formule (I) die bijzondere voorkeur verdient wordt gekozen uit: 5 (2S)-2-{1-[ (IS)-l-Carboxy-2-,(4-methyl-5-fenyloxazool-2- yl)ethoxycarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur (Voorbeeld 25), ·", (2S)-2-(l-[(lS)-l-Carboxy-2-[5-(4-fluorfenyl)oxazool-2-yl]ethylcarbamoyl)cyclopentylmethyl)-4-methoxyboterzuur 10 (Voorbeeld 26), (2R)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethyl-' carbamoyl]cyclopentylmethylJpentaanzuur (Voorbeeld·29), (2S)-2-(1-{(IS)-l-Carboxy-2-[5-(4-chloorfenyl)oxazool-2-yl]ethylcarbamoyl}cyelopentylmethyl)-4-methoxyboterzuur 15 (Voorbeeld 30), (2 S)— 2—{1—[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyl-[1.2.4]oxadiazool-3“ yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur (Voorbeeld 35), (2R)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(4-fenylpyrazool-l-yl)ethyl-20 carbamoyl]cyclopentylmethylJpentaanzuur (Voorbeeld 36) en (2S)-2-(1-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethylcarbamoyl] cyclopentylmethyl }-4-methoxyboterzuur (Voorbeeld 40) .

25 Ter vermijding van twijfel betekent de uitdrukking gesubstitueerd, tenzij anderszins wordt aangegeven, gesubstitueerd met één. of meer gedefinieerde groepen. In het geval waarin de groepen kunnen worden gekozen uit een aan-. tal alternatieve groepen kunnen de gekozen groepen gelijk 30. of verschillend zijn.

Ter vermijding van twijfel betekent· de uitdrukking onafhankelijk dat wanneer meer dan een substituent wordt gekozen uit een aantal mogelijke substituenten die subst-tuenten gelijk of verschillend kunnen zijn.

35 De farmaceutisch of veterinair aanvaardbare zouten - van de verbindingen van de onderhavige uitvinding die een basisch centrum bevatten zijn, bijvoorbeeld, niet-toxische 1025116- 8 zuuradditiezouten die worden gevormd uit anorganische zu- · ren zoals waterstofchloride, waterstofbromide, wa'terstof-jodide, zwavel- en fosforzuur, en met carbonzuren of met organosulfonzuren. Voorbeelden omvatten de HC1-, HBr-, 5 Hl-, sulfaat- of bisulfaat-, nitraat-, fosfaat- of waterstof fosfaat-, acetaat-, benzoaat-, succinaat-, saceha-.raat-, fumaraat-, maleaat-, lactaat-, citraat-, tartraat-, gluconaat-, camsylaat-, methaansulfonaat-, ethaansulfo-naat-, benzeensulfonaat-, p-tolueensulfonaat- en pamoaat-10 zouten. De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook voorzien in farmaceutisch of veterinair aanvaardbare metaalzouten, in het bijzonder niet-toxische alkaliën aardalkalimetaalzoufen, met basen.' Voorbeelden omvatten de natrium-, kalium-, aluminium-, calcium-, magnesium-, 15 zink- en· diethanolaminezouten. Voor een overzicht van geschikte farmaceutische zouten zie Berge et.al., J. Pharm. Sci., 66, .1-19, 1977; P.L. Göuld, International Journal, of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217, en Bighley et al., Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker 20 Inc., New York, 1996, Volume 13, bladzijde 453-497.

De farmaceutisch aanvaardbare, solvaten van de verbin-, ding van de onderhavige uitvinding omvatten de hydraten daarvan..

Eveneens vervat in de strekking van de onderhavige 25 uitvinding en de diverse zouten van de onderhavige uitvinding zijn de polymorfen daarvan.

Hierna zullen de verbindingen, hun farmaceutisch aanvaardbare zouten, huri solvaten of polymorfen, die volgens.

. een aspect'van de onderhavige uitvinding zijn gedefinieerd 30 (met uitzondering van de tussenproducten in de chemische werkwijzénj worden aangeduid als "verbindingen van de onderhavige uitvinding".

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen één of meer chirale centra bevatten en derhalve in een 35 aantal stereo-isomere vormen bestaan. Alle stereo-isomeren en mengsels daarvan zijn vervat in de strekking van de onderhavige uitvinding. Racemische verbindingen kunnen wor- 9 den gescheiden met behulp van preparatieve HPLC en een kolom met eert chirale stationaire fase, of anderszins worden . gescheiden, hetgeen de afzonderlijke enantiomeren oplevert, waarvoor werkwijzen worden gebruikt die voor deskun-5 digën bekend zijn. Bovendien kunnen chirale tussehproduc-ten. worden gescheiden en gebruikt voor het bereiden van chirale verbindingen van de onderhavige uitvinding.

De verbindingen van de onderhavige .uitvinding kunnen in één of meer tautomere vormen bestaan. Alle tautomeren 10 en mengsels daarvan zijn vervat in de strekking vah de onderhavige uitvinding. Een aanspraak op bijvoorbeeld 2-hydroxypyridinyl zou eveneens haar tautomere vorm a-pyridonyl bestrijken.

De onderhavige uitvinding omvat eveneens alle ge-.15 schikte isotopische variaties van een verbinding van de onderhavige uitvinding. Een isotopische variatie van een verbinding van de onderhavige uitvinding wordt gedefinieerd als een waarbij ten minste een atoom wordt vervangen door een atoom met hetzelfde atoomgetal maar een atoommas-20 sa die verschilt van. de atoommassa die doorgaans in de natuur wordt aangetroffen. Voorbeelden van isotopen die kunnen worden opgenomen in de verbindingen van de onderhavige uitvinding omvatten isotopen van waterstof, koolstof, stikstof, zuurstof, fosfor, zwavel, fluor en chloor, zoals

25 respectievelijk 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 170, 180, 32P, 35S, 18F

en 36C1. Bepaalde isotopische variaties van de onderhavige uitvinding, bijvoorbeeld die waarbij een radioactieve isotoop zoals 3H of 14C wordt opgenomen, zijn nuttig voor ver-delingsstudies van geneesmiddel en/of substraatweefsel. 30 Getritieerde, dus 3H-, en koolstof-14, dus 14C-isotopen verdienen met name de voorkeur vanwege hun gemakkelijke bereiding en detecteerbaarheid. Bovendien kan substitutie met isotopen zoals deuterium, dus 2H, bepaalde therapeutische voordelen opleveren die voortvloeien uit een grotere 35 .metabolische stabiliteit, bijvoorbeeld een toegenomen in vivo halfwaardetijd of een lagere dosering,, en dus in sommige omstandigheden de voorkeur verdienen. Isotopische va- 1025116- 10 riat.ies van de verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen in het algemeen worden bereid door middel van gebruikelijke procedures zoals door de illustratieve werkwijzen of door de bereidingen die worden beschreven in de 5 voorbeelden en bereidingen hierna, waarbij de geschikte isotopische variaties van geschikte reagentia worden gebruikt.

De verbindingen van de onderhavige .uitvinding kunnen door het remmen van NEP (met name EC. 3.4.24.11) de biolo-10 gische effecten van biologische actieve peptiden potentië-ren, en dus is er een grond voor de verbindingen van de onderhavige uitvinding voor het behandelen of voorkomen van een aantal ziekten en aandoeningen.

Shepperspn et al. hebben aangetoond dat de NEP-remmer .15 candoxatrilat de systolische. bloeddruk in hypertensieve ratten verlaagt [zie Clin. Sci (Lond), Vol. 80(3):265-9). Kosoglou et al. hebben aangetoond dat de NEP-remmer SCH34 82 6 de supiene' bloeddruk aanzienlijk verlaagde in een · klinische studie van 24 zwarte patiënten met essentiële 20 hypertensie [Circulation, Supplement III, Vol. 82, no. 4, bladzijde 554,. 2201). Stergiou et al, hebben aangetoond dat wanneer deze wordt toegevoegd aan de ACE-remmer lisi-nopril, candoxatril (de orale prodrug van candoxatrilat) leidde tot een duidelijke vermindering van .de bloeddruk, 25 zowel de supiene als die bij rechtop staan, in een klinische studie waarbij 37 hypertensieve patiënten waren betrokken [J. Hypertens, Vol. 12, · no. 11, bladzijde 1310-1311].. De verbindingen ..van de onderhavige uitvinding dienen dus ter behandeling of preventie van cardiovasculaire 30 · ziekten en aandoeningen, met name hypertensie, pulmonale hypertensie, perifere vaatziekte, .hartinsufficiëntie, angina, nierinsufficiëntie,. acute nierinsufficiëntie, cyclisch oedeem, ziekte, van Menièrë, hyperaldosteronemie • (primaire en secundaire) en hypercalciurie. De uitdrukking 35 hypertensie. omvat alle ziekten die worden' gekenmerkt door supranormalè bloeddruk, zoals essentiële hypertensie, pulmonale hypertensie, secundaire hypertensie, geïsoleerde .

11 systolische hypertensie, hypertensie die verband houdt met diabetes, hypertensie die verband houdt met atherosclerose en renovasculaire hypertensie, en strekt zich verder uit tot aandoeningen waarvoor een verhoogde bloeddruk een be-5 kende risicofactor is. De uitdrukking "behandeling van hypertensie" omvat dus de behandeling of preventie van complicaties die voortvloeien uit hypertensie, en andere daarmee geassocieerde co-morbiditeiten,.· waaronder .con-gestieve hartinsufficiëntie, angina, beroerte, glaucoom, 10 verminderde nierfunctie, waaronder nierinsufficiëntie, 'obesitas en metabolische ziekten (waaronder metabolisch syndroom). Metabolische ziekten omvatten met name diabetes en verminderde glucosetolerantie, met inbegrip van de complicaties . daarvan, zoals diabet.ische retinopathie en dia-15 betische neuropathie.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding, zouden met name doeltreffend, zijn bij het behandelen of voorkomen van hypertensie.

Wayman et al. [WO 02/079143) hebben aangetoond dat 20 NEP-remmers de bloeddoorstroming in de vagina en clitoris, verhogen ineen model van konijnen met vróuwelijke seksuele opwindingsstoornis (female sexual arousal disorder; FS-. AD) . De verbindingen van de onderhavige uitvinding zouden dus vrouwelijke seksuele dysfunctie, met name FSAD, behan-25 delen of voorkomen.

Wayman et al. (WO 02/03995) hebben aangetoond dat NEP-remmers de door zenuwen gestimuleerde erecties poten-tiëren in een model voor geanesthetiseerde honden met peniserecties. Dienovereenkomstig zouden de verbindingen van 30 de onderhavige uitvinding mannelijke erectiele dysfunctie (MED) behandelen of voorkomen.

Ten gevolge van hun vermogen tot het remmen van NEP zouden de verbindingen van de onderhavige uitvinding, kunnen behandelen of voorkomen: menstruele stoornissen, 35 vroegtijdige weeën, pre-eclampsie, endometriose en voort-plantingsstoornissen (in het bijzonder mannelijke en vrou- 1 0251 10- I 12 welijke infertilïteit, polycystisch ovariumsyndroom, fa- I lende implantatie)...

I . Bovendien zouden de verbindingen van de onderhavige I uitvinding kunnen behandelen of voorkomen: astma, ontste- I 5 king, leukemie, pijn, epilepsie, affectieve stoornissen, I dementie . en geriatrische verwardheid, septische shock, obesitas en gastro-intestinale stoornissen (in het bijzon- I der diarree en prikkelbare-darm-syndroom).·,. de wondgenezing I bevorderen . (in het bijzonder diabetische ert veneuze ulcera I 10 en doorligwonden), de maagzuurafscheiding moduleren, en I geschikt zijn voor de behandeling van hyperreninemie, cys- I tische fibrose, restenose, diabetische complicaties eh I atherosclerose.

Zoals deze hierin worden gebruikt omvatten de uit- I 15 drukkingen "behandelen" en "behandeling" palliatieve, cu- ratieve en profylactische behandeling.

I De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen op diverse bekende manieren, worden bereid. In de volgende ‘ reactieschema's en hierna zijn, tenzij anders wordt aange- I 20 geven, R1 tot en met R5, L, p en q gedefinieerd volgens het I eerste aspect. Deze werkwijzen vormen verdere aspecten van I : de onderhavige uitvinding.

I - In de gehele beschrijving worden de algemene formules aangeduid door de Romeinse cijfers I, II, HI, IV, enz.

I 25 Onderreeksen van deze algemene formules worden gedefini- I eerd als Ia, Ib, Ic, enz., ...., IVa, IVb, IVc, enz.

I . De verbindingen met de formule (Ia), .dus verbindingen I met dè algemene formule I waarin. R4 en. R5 waterstof zijn, I ; kunnen worden bereid volgens . reactieschema 1 door ont- I 30 schermen van een verbinding met de algemene formulé (II) I waarin P1 en P2, die gelijk of verschillend kunnen zijn, I 'geschikte beschermende groepen voor een carboxylgroep I zijn, zoals C:-C4 alkyl, allyl of benzyl, en bij voorkeur ethyl of t-butyl...

I 35 I 1 Π 91«.

13

Schema 1 . .

foV^v^ ° °' R2 (CH2)q-L-R3° .

(") \ ) 10 i X.

' ' v\ o o (\ so ' . V ° R* (CH^-L-R8 r’ Π '·.' \. · I (no , » ρ’'0γ^ν<0ΗΛ^° - 0 0 R* WL-RS° \· R, r—x , m .

O ' 02' s® ° . R (CH^-L-R8 20

(la) ·. I

Ontscherming kan worden uitgevoerd met behulp van 25 standaardmethodóïogie, zoals wordt beschreven in "Protecting Groups in Organic Synthesis” door T.W. Greene en P. Wutz. Wanneer P1 of P2 t-butyl is zijn de voorkeurscondities 9-40% trifluorazijnzuur in dichloormethaan (betrokkèn op volume) bij kamertemperatuur gedurende 1 tot 72 uur.

30 Wanneer P1 of P2 allyl is zijn voorkeurscondities pyrrolidine (4 equiv.), tetrakistrifenylfosfinepalladium (0) (katalytisch) in tetrahydrofuran. bij kamertemperatuur gedurende 2-3 uur. Wanneer P1 of P2 ethyl is zijn voorkeurscondities IN natriumhydroxide in' dioxaan, methanol of te- 35 trahydrofuran bij een temperatuur tussen kamertemperatuur en; die van terugvloeiing gedurende 2-18 uur. Wanneer P1 of P2 benzyl is zijn voorkeurscondities hydrogenolyse in een 1025 1IQ- H alcoholisch oplosmiddel zoals methanol . met waterstofgas bij atmosferische of verhoogde druk of een andere geschik- te waterstofbron, zoals ammoniumformiaat, in aanwezigheid I van een geschikte katalysator, zoals palladium-op-koolstof I 5 of palladiumhydroxide, bij een temperatuur tussen kamer- temperatuur en die van terugvloeiing gedurende 2-18 'uur.

I De ontscherming van de twee carboxylgroepen kan ge- I .lijktijdig of achtereenvolgens worden uitgevoerd via de tussenproducten met de formules (III) of (IV). Deze tus- 10 senproducten kunnen eventueel.worden geïsoleerd en gezui- verd.

Wanneer P1 en P2 gelijk zijn zal de ontscherming van beide carboxylgroepen in het algemeen gelijktijdig worden I uitgevoerd, hetgeen, het mogelijk maakt dat de verbindingen I 15 met de formule (Ia)' rechtstreeks worden bereid uit de ver- bindingen met de formule (II). Wanneer P1 en P2 verschil- I lend zijn kunnen, afhankelijk van de aard van P1 en P2 en I de condities die voor de ontschermingsreactie worden geko-v I zen, de twee carboxylgroepen achtereenvolgens of gelijk-, I 20 tijdig worden ontschermd.

I De verbindingen met de formule (Ib), dus verbindingen I met de formule(I) waarin R4 een biologisch labiele groep I is en R5 waterstof is, kunnen worden bereid uit de verbin- I dingen met formule (III) volgens reactieschema 2.

I 25 15

Schema 2 5 • 0 . 0 R2 (CH^-L-R30 io \ '..·· ^ . \ r' / \ * ., B.° " & ii /\ ,° 0 . ° R (CH^-L-R* 15 ΓΛ / (Vi

·V

0 0 R8 (CHjVLrR30 . ' · 20 ,' Ob) . . · / 25 De verbindingen met de formule (V) kunnen worden be reid door behandelen van verbindingen met de formule (III) met een alcohol R4-pH in aanwezigheid van een dehydrata-tiemiddel zoals carbonyldiimidazool of dicyclohexylcarbo-diimide en eventueel een katalysator zoals pyridine, di-30 methylaminopyridine of triethylamine, in een oplosmiddel zoals dichloormethaan of dimethylformamide bij een temperatuur tussen 0°C en de terugvloeiingstemperatuur van het oplosmiddel gedurende 1-24 uur. Als alternatief kunnen de verbindingen met formule (V) worden bereid door behandelen 35 van de verbindingen met de formule (III) met een alkyle-ringsmiddel R4-Xx, waarin X1 een vertrekkende groep is, zoals een chloor-, broom-, jood-, methaansulfonyloxy- of 1025 1 1 Q-j 16 trifluormethaansulfonyloxygroep, in aanwezigheid van een base zoals een alkalimetaalcarbonaat . (zoals kaliumcarbo-naat of cesiumcarbonaat) of een aminebase (zoals dicyclo-hexylamine), in een oplosmiddel zoals tetrahydrofuran of 5 dimethylformamide bij’ een temperatuur tussen kamertemperatuur en de terugvloeiingstemperatuur van het oplosmiddel gedurende 1-24 uur. De verwijdering van de beschermende groep P2 is zoals wordt beschreven voor reactieschema 1.

De verbindingen met de.formule (Ic), dus verbindingen 10 met de formule (I) waarin R1 waterstof is en R5 een biologisch labiele groep is, kan worden bereid uit de verbindingen met de formule (IV) volgens reactieschema 3.

Schema 3 15 ·'-··' 20 ° 0 Ff (CH2)q-L-R3° ^ (IV) _ 2C 0 0 R* Wq-L-Rs° ; 25 / ,-n / "" ° . 0 R2 (CH?)a-L*R3 ° 30 (lc) 35 Λ O ς 1 1 £ - 3,7

De verbindingen met de formule (VI) kunnen wórden bereid door middel van werkwijzen die analoog zijn aan die welke worden beschreven voor reactieschema 2 door in reactie brengen van verbindingen met de formule (IV) met R5-OH 5 of R5-Xx. Ontscherming geeft verbindingen met de formule (Ie) zoals wordt beschreven voor reactieschema 1.

Het zal duidelijk zijn dat sommige uitvoeringsvormen van P1 en P2 biologisch labiele groepen zijn zoals worden vereist voor R4 en R5. Sommige verbindingen met de formule 10 (III) zijn dus ook verbindingen met de formule (Ic) en sommige verbindingen met de formule (IV) zijn ook verbindingen met de formule (Ib) . Derhalve kan het in die verbindingen met de formules (I) waarin R4 en R5 ook als een beschermende groep voor een carboxylgroep kunnen dienen, 15 mogelijk zijn om het aantal manipulaties te verminderen dat nodig is om tot de gewenste verbinding te komen.

De verbindingen met de formule (II) kunnen worden bereid door koppelen van een zuur met de formule (Vli) en. een amine met de formule (VIII) volgens reactieschema 4.

20

Reactieschema 4 25 γ Γ\ h2Nv/Wp^o>2 p,0yO</OH + . ?\ 3° p Y li · R (ch2)„-l-rs o. o .

(VII) (VIII) ' · 30 „ ·. . . . .

35 0 0 R* (CH2)q-L.R3 (II) 1025116- \ I 18 I . Typische reactiecondities omvatten het vormen van het I zuurchloridé van verbindingen met' de formule; (VII), ge- .

I volgd door toevoeging van verbindingen met.de formule (VI- I II), eventueel in aanwezigheid van' een overmaat van een I 5 tertiair amine (zoals triethylamine, Hünig's base of N- I methylmorfolinë) in een geschikt oplosmiddel (zoals I . dichloormethaan of tetrahydrofuran) . bij kamertemperatuur I gedurende 1 tot 24 uur.

I Alternatieve reactiecondities omvatten het in reactie I i.0 brengen van de verbindingen met de formule (VII), I WSCDI/1,3-dicyclohexylcarbodiimide (DCC), ' 1-hydroxybenzo- I triazoolhydraat (HOBT)/HOAT en verbindingen met dè formule I (VIII), met een overmaat van een tertiair amine (zoals N- methylmorfoline', triethylamine of Hünig's base) in een ge- I 15 schikt oplosmiddel (bijvoorbeeld tetrahydrofuran, , I dichloormethaan of ethylacetaat) bij kamertemperatuur ge- I durende 4 tot 48 uur.

I Andere reactiecondities omvatten het in reactie bren- I gen van een .verbinding met de formule (VII), I 20 PYBOP®/PyBrOP®/Mukaiyama-reagens of TBTU en een overmaat I van een verbinding met de formule (VIII), met een over- I maat van een tertiair amine (N-methylmorfoline, triethyla- I mine of Hünig’s base) in een geschikt oplosmiddel (zoals I tetrahydrofuran, dichloormethaan of ethylacetaat) bij ka- I 25 mertemperatuur gedurende 4 tot 24 uur.

I Reactiecondities die de voorkeur verdienen omvatten I het in reactie brengen van verbindingen met de formule I (VIII) (1 equiv'.), een verbinding met de formule (VII) (1- I 1,1 equiv.), hydroxybenzotriazoolhydraat (HOBT) (1-1,1 I 30 equiv.) en WSCDI (1-1,1 equiv.) en 1-N-methylmorfoline (2 eqüiv.) of TBTU. (1-1,1 equiv.) en Hünig's base (1-2 I equiv.) in dichloormethaan bij kamertemperatuur gedurende I ongeveer 18 uur.

I Verbindingen met de formule (VII) kunnen worden be- I 35 reid met gepubliceerde werkwijzen of met 'eenvoudige modi- I ficaties van deze werkwijzen. Zie bijvoorbeeld: A.S. Cpok I et al., Europese octrooiaanvrage EP 1 258 474 A2 (Pfizer 19

Ltd. et al.); S. Challenger et al., Internationale octrooiaanvrage WO 02/79143 (Pfizer Ltd. et al.); C.G. Bar-, ber' et al., Internationale octrooiaanvrage WO 02/02513 (Pfizer Ltd. et al.); C.J. Cobley et al., Tetrahedron Let-5 ters,· 42 (42), 7481-7483 (2001); S. Challenger, Europese octrooiaanvrage Ό 644 176 Al (Pfizer Ltd.).

Verbindingen met de formule (VIII) kunnen worden bereid door middel van diverse routes die. afhankelijk zijn van de aard van de aromatische heterocyclische groep L, 10 zoals hierna verder zal worden toegelicht.

. Verbindingen met de formule (Villa) waarin Y1 CH of N is, dus verbindingen met de formule (VIII) waarin L oxa-zool of [1.3.4]oxadiazool is, kunnen worden bereid uit een zuur met de formule (IX), waarin P3 een beschermende groep 15 voor een aminegroep is, zoals t-butyloxycarbonyl (BOC), benzyloxycarbonyl (Cbz) of 9-fluorenyïmethoxycarbonyl (Fmoc), en een aminokèton of acylhydrazide met de formule (X) volgens reactieschema 5. .

20 Schema 5 '

SX /(CH2,P . (J · u T

P ^ ^ + i r'^^Vc>w, h 1 R H. ·-···· Λ /-y^R3 o R J, (IX) (X) (X,) ° · • . . H · ..Vv

Ο3^^(0Η*)Ρ -L

. X .^Y, -"’’V" ^ r! W-(f iï. j\ //"y' Λ A s R (ch.),—f h R V\, <XII) (Villa) 1025118- - I 20 I De condensatie van het zuur met de formule (IX) -en het amine of hydrazide met de formule (X) kan worden ver- I kregen . door de werkwijzen die worden gegeven voor de vor- I ming van een amidebinding in het bovenstaande reactiesche- I 5 ma 4. De voorkeurswerkwijzen zijn omzetting van het zuur I in het overeenkomstige zuurchloride met thionylchloride in I dimethylformamide en dichloormethaan bij kamertemperatuur I gedurende 18 uur, gevolgd door de.· toevoeging van triethylamine en het amine of hydrazide bij 0°C en gedu- I 10 rende 4 tot 6 uur roeren, of het behandelen van een oplos- I sing van de twee bestanddelen in dichloormethaan met I WSCDI, NMM en 1-hydroxybenzotriazool bij kamertemperatuur gedurende 18 uur.

I De ringsluiting van de verbindingen met de formule I .15 (XI) die de, aromatische heterocyclische verbindingen met I de formule (XII) geeft kan worden uitgevoerd volgens di- I verse standaardwerkwijzen. Zie bijvoorbeeld "Comprehensive I Heterocyclic Chemistry II", Pergammon, New York, 1996.

Wanneer Y1 CH is omvatten voorkeurswerkwijzen het be- I 20 handelen van verbindingen met de. formule (XI) met fos-

I foroxychlori.de (2-4 equiv.) in tolueen bij ongeveer 100eC

I gedurende ongeveer 1-2 uur, het behandelen van de verbin- I dingen met de formule (XI) met trifenylfosfine (2 equiv.), I triethylamine (4 equiv). en jood in tetrahydrofuran bij 25 -78°C gedurende 1 uur, -20°C gedurende 1 uur, vervolgens I bij kamertemperatuur gedurende 1 uur, en het behandelen I van de verbindingen met de formule (XI) met 2,.6-di-tert- I butylpyridine (1,2 equiv.), 1,2-dibroomtetrachloorethaan I (1,2 equiv.) en trifenylfosfine (1,2 equiv.) in dichloor- I 30 methaan bij kamertemperatuur gedurende 30 min., gevolgd I door 1,8-diazabicycklo[5.4.0]undec-7-een (1,2 equiv.) bij kamertemperatuur gedurende 1 uur.

I Wanneer Y1 N is, is een voorkeurswerkwijze het behan- I delen van de verbindingen, met de formule (XI) met 2- I 35 chloor-1,3-dimethylimidazoliniumchloride (1,2 equiv.) en I tri-ethylamine (2 equiv.) .in dichloormethaan bij kamertem- I peratuur gedurende 18 uur.

21

Ten slotte kan de beschermende groep P3 worden verwij-. derd door middel van de geschikte standaardwerkwijze, zoals wordt, gegeven in "Protecting Groups in Organic Synthesis" door T.W. Greene en P.. Wutz. Wanneer P3 Cbz is omvat-5 ten geschikte condities hydrogenolyse met waterstofgas of • een watérstöfdonor zoals ammoniumformiaat in een geschikt polair oplosmiddel zoals tetrahydrofuran, methanol of ethanol, in aanwezigheid van een katalysator zoals palla-dium-op-koolstof of palladiumhydroxide, en hydrolyse met 10 een sterk zuur zoals HBr, azijnzuur, methaansulfonzuur of -. trifluormethaansulfonzuur. Voorkeurscondities omvatten behandeling met waterstofgas bij 1Ö0-350 kPa in tetrahydrofuran of ethanol in aanwezigheid van 10% Pd/C (0,1 g katalysator /1 g verbinding) bij kamertemperatuur gedurende 15-15 50 uiir en behandeling met HBr (15 equiv.) in azijnzuur bij kamertemperatuur gedurende 1-18 uur. Wanneer P3 BOC is omvatten geschikte condities behandeling met een overmaat van een sterk zuur zoals waterstofchloride of trifluora-zijnzuur in een geschikt oplosmiddel zoals dichloorme-20 thaan, ethylacetaat of dioxaan. Voorkeurscondities omvatten behandeling met trifluorazijnzuur in dichloormethaan bij kamertemperatuur gedurende 1-2 uur en behandeling met een overmaat van 4M waterstofchloride in dioxaan bij kamertemperatuur gedurende 18 uur.

25 Verbindingen met de formule (VlIIb), dus verbindingen met de formule (VIII) waarin L [1.2.43oxadiazool is, kun-. nen worden bereid uit een zuur met de formule (IX), waarin P3 een beschermende groep voor een aminegroep is als eerder wordt beschreven, en een amidoxim .met de formule (XI-30 II) volgens reactieschema 6.

102511 22

Schema 6 5 ‘ °Y°V ' V°v

.p X ™ + .«yv- p X

R* (CHz)r“4 . . R2 10 0 /0 • ' (X«I) (Xiv) (IX) · · Ï ' ,γ^ρζ °γ°ν .

RZ (CHs),—^ Jl R* (CHJj- • ·, ' 'N^V N^R8 ·

·- I

(XV) 1 <Vlllb) 20 25 De condensatie van het zuur met de formule (IX) en het amidoxim met de formule (XIII) kan worden verkregen door middel van de werkwijzen die analoog zijn aan die welke worden gegeven voor de vorming van een amidebind.ing in het bovenstaande reactieschema 4.

30 Ringsluiting, die de verbindingen met de formule (XV) geeft, kan worden verkregen door middel van diverse standaardwerkwijzen. Zie bijvoorbeeld "Comprehensive Heterocyclic Chemistry II", Pergammon, New York, . 1996. Een voorkeurswerkwijze is het verhitten van de verbindingen tot 35 ongeveer 110-120°C.

23

Ten slotte kan de beschermende groep P3 worden verwijderd door middel van de geschikte standaardwerkwijze, zoals hierboven wordt gegeven voor reactieschema 5.

Verbindingen met de formule (VIIIc), dus verbindingen 5 met de formule (VIII) waarin L oxazool is, kunnen worden bereid uit een zuur met de formule (IX), waarin P3 een beschermende groep voor een aminegroep is als tevoren wordt beschreven, en een aminoalcohol met de formule (XVI) volgens reactieschema 7.

10

Schema 7

Vv' ov°v J

15 H iH, NH,· 1 p,'N'v^CH” + ho A —»- V i R. (0Ha-\ - W< A ·; (IX) (XVI) (XVII).

20 °Y°>’ . · ;·νν'·

Λκ-ΓΓ" X

25 u R R II

N^Yrs A O™") . (XIX) . · 30 · A " y (ch^-A Jl · N""YR9 (VIIIc) 35 1025116- I 24 M De condensatie van het zuur met de formule (IX) en de I aminoalcohol met de formule (XVI) kan worden verkregen I door middel van de werkwijzen die worden gegeven voor de I vorming van een amidebinding, in het bovenstaande reactié- I 5 schema 4.

I De verbindingen met de formule (XVII) kunnen worden I geoxideerd tot aldehyden met de formule (XVIII), en deze I kunnen worden verkregen door middel van diverse standaard- I werkwijzen. Een voorkeurswerkwijze is het behandelen van I 10 een oplossing van de verbinding in dichloormethaan met I Dess-Martin-perjodinaan bij kamertemperatuur, gedurende 2 I tot 3 uur.

I Ringsluiting, die verbindingen met . de formule (XIX) I geeft, kan worden verkregen door middel van diverse stan- I 15 daardwerkwijzen. Zie bijvoorbeeld "Comprehensive Heterocy- I die Chemistry II",. Pergammon, New York, 1996.

I Ten slotte kan de beschermende groep P3 worden verwij- I derd door middel van de geschikte standaardwerkwijze, zo- I als hierboven wordt gegeven voor reactieschema 5.

I 20 De verbindingen met de formule (VlIId), dus verbin- I dingen met de. formule (VIII) waarin L pyrazool, triazool, I . tetrazool of imidazoo.1 (afhankelijk van het feit of Y2, Y3 I en Y4 stikstof of koolstof zijn) is, p 0 is en q, kunnen I worden bereid uit een lacton met de formule (XX) waarin P3 I 25 een beschermende groep voor aminegróep is als tevoren I wordt beschreven, en een pyrazool of imidazool met de for- · I mule (XXI) volgens reactieschema 8.

I 1025118- 25

Schema 8 . .

: 5 '·'·' H0y_o ! R1 Rs Ra 10 . <XX) (XXI) (XXII) p1-ö H \=0 pï"°\ „ - As? 1025116- 20

De 'vorming van het zuur met de formule (XXII) kan worden verkregen door in reactie brengen van een imidazool 25 of pyrazool, triazool, tetrazool of imidazool met de formule (XXI) en een lacton met de formule (XX), eventueel in aanwezigheid van een base zoals kaliumcarbonaat of 1,8-diazabicyclo[5.4.0)undec-7-een, in. een geschikt oplosmiddel zoals acetonitril of dimethylformamide bij een tempe-30 r at uur · tussen 0°C en de terugvloeiingstemperatuur van het oplosmiddel gedurende 1 uur tot verscheidene dagen. Bij voorkeur wordt een equimolair mengsel van de twee bestanddelen in acetonitril gedurende 5 dagen geroerd bij kamertemperatuur. De reactie is met name geschikt voor berei-35 ding van imidazolen (dus wanneer Y2 en Y4 koolstof zijn en Y3 stikstof is).

I 26 .

Omzetting van het zuur met de formule (XXII) in de I ester met de formule (XXIIIj kan worden verkregen met be- I hulp van de werkwijzen die worden beschreven voor de be- I reiding van de verbindingen met de formule (V) in het bo- I 5 venstaande reactieschema 2.

Ten slotte kan de beschermende groep P3 worden verwij- I derd door middel van de geschikte standaardwerkwijze, zo- I als hierboven wordt gegeven voor reactieschema 5.

I Als alternatief kunnen de verbindingen met de formule I 10 (XXIII) van reactieschema 8 worden bereid uit een aziridi- I ne met de formule (XXIV) en een pyrazool, triazool, tetra- I zool of imidazool met de formule (XXI) of (XXV), waarin X2 een vertrekkende groep is zoals een halogeen- of sulfony- I loxygroep, en bij voorkeur een joodgroep, volgens reactie- 15 schema 9.

Schema 9 I .20 o P*-0 I (XXIV) · R’ I 25 (WI) . (XXIII) I f I 9 P*-°v I . p2 JJ Λ v» H V=0 .

I /r>f v® I » Γν .* -¾ — ':Λ<δί I ,xx,v) .(XXV, . * (XXVI) I 35 27

De vorming van de ester met de formule (XXIII) kan worden verkregen door in reactie brengen een pyrazool, triazool, tetrazoól of imidazool met de formule (XXI) en een aziridine met de formule (XXIV) in aanwezigheid van 5 een Lewis-zuur in een geschikt oplosmiddel bij een temperatuur tussen 0°C en de terugvloeiingstemperatuur van het oplosmiddel gedurende 1-24 uur. Bij voorkeur wordt een equimolair mengsel van de twee bestanddelen in dichloorme-thaan behandeld met boortrifluorideetheraat bij kamertem-10 peratuur gedurende 6 uur. De reactie is met name geschikt voor de bereiding van pyrazolën (dus wanneer Y2 stikstof is en Y3 en Y* koolstof zijn).

Esters met de formule (XXVI) kunnen op een analoge wijze worden bereid.

15 De omzetting van het zuur met de formule (XXVI) in de ester met de formule (XXIII) kan worden verkregen door reactie met een trialkylstannaan R3-Sn(alkyl)3 met behulp van de werkwijze die bekend staat als de Stille-koppeling (Organic Reactions, 50,-1, 1997). Bij voorkeur wordt een op-20 lossing van de verbinding met . de formule (XXVI) en tris(dibenzylideenacefon)dipalladium (0) (0,05 equiv.) in dimethylformamide behandeld met R3-Sn(butyl? (1,2 equiv.). en Cul (0,2 equiv.) en gedurende 90 minuten verhit tot 60°C.

25 Verbindingen met de formule (VlIIe), dus verbindingen met de formule (VIII) waarin p 0 · is en R2 waterstof is, kunnen worden bereid uit een verbinding met de formule (XXVII) waarin X3 een vertrekkende groep is zoals een halogeen- of sulfonyloxygroep, en bij voorkeur een broom-30 groep, en een dihydropyrazine met de formule (XXVIII) volgens reactieschema 10.

1025116- : 28

Schema 10 I 5 .

I “Λ--ΝI ·../

I ^^(CH^-L-R9 + o—4 V° “**' ^—I

I 10 p9 (CH^-L-R8 I : : m - I · · · P2"°\ · I __ _r° I 15 . (CHj),*L-R8 I (Vlile) I .20 .

I De vorming van de verbinding met de formule (XXIX) kan worden verkregen door in reactie brengen van een alky- leringsmiddel met de formule (XXVII) en een dihydropyrazi- 25 ne met de · formule (XXVIII), dat opk bekend staat als een

Schölkopf-hulpmiddel, volgens de werkwijzen-die worden be- I schreven in Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 20, 798, 1981. In I het algemeen wordt het dihydropyrazine behandeld met een I sterke base, zoals een alkalimetaalalkyl of -amide, bij 30 een temperatuur beneden -50eC, in een ether als oplosmid- del zoals diethylether, dioxaan of tetrahydrofuran, het- I geen wordt gevolgd door de toevoeging van het alkylerings- I middel. Bij voorkeur wordt een oplossing van dihydropyra- I zine in tetrahydrofuran bij -60°C behandeld met butylli- I .35 thium (1,2 equiv.) en vervolgens met het a.lkyleringsmid- I del, en het mengsel gedurende 18 uur geroerd bij -60°C.

H

29

Het ontstane dihydropyrazine mèt de formule (XXIX) kan worden gehydrolyseerd in aanwezigheid van zuur, hetgeen de verbinding met formule (VlIIe) geeft. Voorkeurscondities omvatten behandeling .van een oplossing van het 5 dihydropyrazine met 0,25M HC1 in tetrahydrofuran (2-3 equiv.) bij kamertemperatuur gedurende 5-18 uur. j Eén farmaceutisch aanvaardbaar zout van een verbinding met de formule (I) kan gemakkelijk worden bereid door samen mengen van oplossingen van een verbinding met de 10 formule (I) en het gewenste zuur of de gewenste base, naar gelang van hetgeen van toepassing is. Het zout kan neerslaan uit de oplossing en worden verzameld door filtratie of kan worden verkregen door afdamping van het oplosmid-del. * 15 Procedures voor het isoleren van de gewenste produc ten zijn voor deskundigen bekend, waarbij wordt verwezen naar literatuurpreceden.tèn en de voorbeelden en bereidin-gen hiervoor.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen 20 alleen worden toegediend, maar in het algemeen wordt toe- \ ...

gediend in vermenging met een geschikt(e) farmaceutisch(e) excipient, verdunningsmiddel of drager, die of dat wordt gekozen ten aanzien van de voorgenomen toedieningsroute en de farmaceutische standaardpraktijk.

25 De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen bijvoorbeeld oraal, buccaal of sublinguaal worden toegediend in de vorm van tabletten, capsules, een groot aantal kleine deeltjes, gelen, films, ovules, elixirs, oplossingen of suspensies die geur- en smaak- of kleurstoffen kun- 30 nen bevatten, voor onmiddellijke, vertraagde, gemodifici-eerde, ononderbroken, gepulseerde of gecontroleerde afgifte. De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook worden toegediend als snel dispergerende of snel oplossende doseervormen, of in de vorm van een hoogenergeti- 35 sche dispersie of als beklede deeltjes. Geschikte formuleringen van de verbindingen van de pnderhavige uitvinding kunnen desgewenst in beklede of onbeklede vorm zijn.

1 0251 ie- 30

Dergelijke vaste farmaceutische preparaten, bijvoorbeeld tabletten, kunnen excipiënten bevatten zoals micro-kristallijne cellulose, lactose, natriumcitraat, calcium-carbonaat, dibasische calciumfosfaat, glycine en zetmeel 5 (bij voorkeur maïs-, aardappel- of .tapiocazetmeel), evenals de.sintegreermiddelen zoals natriumzetmeelglyco-laat, croscarmellose-natrium en bepaalde complexe silicaten, alsmede bindmiddelen voor granulatie zoals polyvinyl-pyrrolidon, hydroxypropylmethylcellulose (HPMC), hydroxy-10 propylcellulose (HPC), saccharose, gelatine en acacia. Bovendien kunnen smeermiddelen zoals magnesiumstearaat, ste-arinezuur, glycerylbehenaat en talk worden opgénomen.

Algemeen voorbeeld 15 Een formulering van het tablet zou in een typisch ge val tussen ongeveer 0,01 mg en 500 mg van de actieve verbinding kunnen bevatten, terwijl het afgewogen gewicht van het tablet kan uiteenlopen van 50 tot 1000 mg. Een voorbeeld van een formulering voor een tablet van 10 mg wordt · 20 hierna toegelicht: - ' ·

Bestanddeel gew.%/gew.

Vrij zuur, vrije base of zoutvorm 10,000*

Lactose 64,125 25 Zetmeel 21,375

Croscarmellose-natrium - 3,000

Magnesiumsteraat 1,500 *De hoeveelheid wordt aangepast naar gelang, van de activi-30 teit van het geneesmiddel.

De tabletten worden vervaardigd door middel van een standaardwerkwijze, bijvoorbeeld rechtstreeks samenpersen of eèn natte of droge granulatiewerkwijze. De kernen van 35 de tabletten kunnen worden bekleed met een geschikte, bekleding. '

V

31

Vaste preparaten van een gelijksoortig type kunnen ook worden gebruikt als vulmiddelen in gelatine- of HPMC-capsules. Voorkeursexcipiënten omvatten in dit opzicht lactose, zetmeel, een cellulose, melksuiker of polyethy-5 leenglycolen met .een hoog molecuulgewicht. Voor waterige suspensies en/of elixirs kunnen de verbindingen van de onderhavige uitvinding worden gecombineerd met diverse zoet-of geur- en smaakstoffen, kleurstof of verven, met emulga-toren en/of suspendeermiddelen en met verdunningsmiddelen .10 zoals water, ethanol, propyleenglycol en glycerine, en combinaties daarvan.

Doseervormen voor gemodificeerde en pulserende afgifte kunnen excipiënten bevatten als die welke worden genoemd voor doseervormen voor onmiddellijke afgifte, teza-15 men met bijkomende excipiënten die fungeren als modifica-toren van de afgiftesnelheid waarbij deze worden aangebracht op en/of worden opgenomen in het lichaam van het middel. Modificatoren van de afgiftesnelheid omvatten, maar zijn niet exclusief beperkt tot, hydroxypropylmethyl-. 20 cellulose, methylcellulose, natriumcarbocymethylcellulose, ethylcellulose, celluloseacetaat, polyethyleenoxide, xan-thaangom, Carbomeer, ammoniomethacrylaatcopolymeer, gehy-drogeneerde ricinusolie, carnaubawas, paraffinewas, cellu-loseacetaatftalaat, hydroxypropylmethylcelluloseftalaat, 25 methacrylzuurcopolymeer, en mengsels daarvan. Doseervormen voor gemodificeerde of pulserende afgifte kunnen een of meer van een combinatie van modificerende excipienten voor de afgiftesnelheid bevatten. . Modificerende excipiënten voor de afgiftesnelheid kunnen zowel aanwezig zijn in de 30 doseervorm, dus binnen de matrix, alsmede op de doseer-vorm, dus op het oppervlak of de bekleding.

Snel dispergerende of oplossende doseerformuleringen (EDDF's) kunnen de volgende bestanddelen bevatten: aspar-taam, acesulfaamkalium, citroenzuur, croscarmellose-35 natrium, crospovidon, diascorbinezuur, ethylacrylaat, ethylcellulose, gelatine, hydroxypropylmethylcellulose, magnesiumstearaat, mannitol, methylmethacrylaat, muntgeur- 1025116- I 32 I en smaakstof, polyethyleenglycol, uitgegloeide silica, si- liciumdioxide, natriumzetmeelglycolaat, natriumstearylfu- I maraat, sorbitol, xylitol. De uitdrukkingen "dispergeren" of "oplossen” zoals hierin worden gebruikt voor het be- I 5 schrijven van de FDDF’s zijn afhankelijk van de oplosbaar- heid van het geneesmiddel dat wordt gebruikt, dat wil zeg- I gen dat wanneer het geneesmiddel onoplosbaar is een snel I .. dispergerende doseervorm kan worden gebruikt, en wanneer I het geneesmiddel oplosbaar is een snel oplossende doseer- 10 vorm kan worden bereid.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen I ook parenteraal worden toegediend, bijvoorbeeld intraca- I verneus, intraveneus, intra-arterieel, intraperitoneaal, I intrathecaal, intraventriculair, intra-uretraal, intra- I 15 sternaal, intracraniaal, intramusculair of subcutaan, of I ze kunnen worden toegediend door infusie of naaldloze in- I jectietechnieken. Voor een dergelijke parenterale toedie- I ning kunnen ze het best worden gebruikt in de vorm van een I steriele waterige oplossing die andere stoffen kan bevat- I 20 ten, bijvoorbeeld voldoende zputeh of glucose om de oplos- I sing isotonisch met het bloed te maken. De waterige oplos- singen dienen, als dat nodig is, op geschikte wijze gebuf- I ferd te zijn (bij voorkeur op een pH van 3 tot 9) . De be- I reiding van geschikte parenterale preparaten onder sterie- I 25 le omstandigheden wordt gemakkelijk gerealiseerd door far- I maceutische standaardtechnieken die voor deskundigen be- .

I . kend zijn.

De volgende doseerniveaus en de andere doseerniveaus I hierin zijn voor de gemiddelde menselijke patiënt met een I 30 gewichtbereik van ongeveer 65 tot 70 kg. De deskundige zal I dadelijk in staat zijn tot het bepalen van de doseerni- I veaus die nodig zijn voor een patiënt wiens gewicht buiten I dit bereik valt, zoals kinderen en ouderen.

I Voor orale en parenterale toediening aan menselijke I 35 patiënten zou het dagelijkse doseerniveau van de verbin- I dingen van de onderhavige uitvinding doorgaans tussen 0,01 33 mg/kg en 10 mg/kg (in enkelvoudige of verdeelde doses) liggen.

Tabletten of capsules van de verbinding van de onderhavige uitvinding kunnen dus 1 mg tot 500 mg actieve ver-5 binding bevatten voor een, twee of meermalen tegelijkertijd, naar gelang van hetgeen van toepassing is. De arts zal in elk geval de feitelijke dosering bepalen die voor elke individuele patiënt de meest geschikte zal zijn, en deze zal variëren met de leeftijd, het gewicht en de res-10 pons van de desbetreffende patiënt. De bovenstaande doseringen zijn voorbeelden van het gemiddelde geval. Er kunnen, uiteraard, individuele gevallen zijn waarin hogere of lagere dosèerbereiken gewettigd zijn, en deze vallen binnen de strekking van de onderhavige uitvinding.

15 De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook intranasaal of 'door inhalatie worden toegediend, en worden gemakkelijk afgegeven in de vorm'van een droge poe-derinhalator, of aangeboden als een aërosolspray uit een onder druk staande houder, pomp, spray, verstuiver of ver-20 nevelaar, met of zonder het gebruik van een geschikt drijfgas, bijv, dichloordifluormethaan, trichloorfluorme-thaan, dichloortetrafluorethaan, een hydrofluoralkaan zoals 1,1,1,2-tetrafluorethaan (HFA 134A [handelsmerk]) of 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropaan (HFA 227EA [handelsmerk]), 25 koolstofdioxide of een ander geschikt gas. Bij een onder druk staande aërosol kan de doseereenheid worden bepaald door een ventiel waarmee een afgemeten hoeveelheid kan worden afgegeven. De onder druk staande houder, pomp, spray, verstuiver of vernevelaar kan een. oplossing of sus-30 pensie van de actieve verbinding bevatten, bijv. met een mengsel van ethanol en het drijfgas als oplosmiddel, die bovendien een smeermiddel, bijv. sorbitantrioleaat, kan bevatten. Capsules en patronen '(die bijvoorbeeld uit gelatine zijn gemaakt) voor het gebruik in een inhalator of 35 insufflator kunnen zodanig worden geformuleerd dat deze een poedermengsel van een verbinding van de onderhavige 1025116- 34 uitvinding en een geschikte poedergrondstof zoals lactose of zetmeel bevatten.

Aërosol- of droge poederpreparaten worden bij voorkeur zo gemaakt dat elke afgemeten dosis of "puf" 1 tot 50 5 mg van een verbinding van de onderhavige uitvinding voor afgifte aan 'de patiënt bevat. De totale dagelijkse dosering met een aërosol zal in het bereik van 1 tot 50 mg zijn, die kan worden afgegeven in een enkelvoudige dosis of, gebruikelijker, in verdeelde doses gedurende de dag.

10 Als alternatief kunnen de verbindingen van de onder havige uitvinding worden toegediend in de vorm van een suppositorium of pessarium, of kunnen ze topicaal worden aangebracht in de vorm van een gel, hydrogel, lotion, oplossing, crème, zalf of stuifpoeder. De verbindingen van 15 de onderhavige uitvinding kunnen ook dermaai of transder-maal worden toegediend, bijvoorbeeld door het gebruik van een huidpleister. Ze kunnen ook worden toegediend langs de pulmonale, vaginale-of rectale routes.

Ook kunnen deze worden toegediend langs de oculaire 20 route, met name voor het behandelen van stoornissen van het oog. Voor oftalmisch gebruik kunnen de verbindingen . worden geformuleerd als fijnverdeelde suspensies in een isotonische, steriele zoutoplossing met een aangepaste pH- . waarde, of bij voorkeur, als oplossingen in isotonische, 25 steriele zoutoplossingen met een aangepaste pH-waarde, eventueel in combinatie met een conserveermiddel zoals een benzylalkoniumchloride. Als alternatief kunnen ze worden geformuleerd in een zalf zoals petrolatum.

Voor topicale toepassing op de huid. kunnen de verbin-30 dingen van de onderhavige uitvinding worden geformuleerd als een geschikte zalf die de actieve verbinding gesuspendeerd of opgelost bevat in, bijvoorbeeld, een mengsel met één of meer van de volgende: minerale olie, vloeibare petrolatum, witte petrolatum, propyleenglycol, polyoxyethy-35 leenpolyoxypropyleenverbindingen, emulgerende was en water. Als alternatief kunnen deze worden geformuleerd als een geschikte lotion of crème, gesuspendeerd of opgelost 35 in bijvoorbeeld een mengsel van één of meer van de volgende: minerale olie, sorbitanmonostearaat, een polyethyleen-glycol, vloeibare paraffine, polysorbaat 60, wassen van cetylesters, stearylalcohol, 2-octyldodecanol, benzylalco-5 hol en water.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnén ook worden gebruikt in combinatie met een cyclodextrine. Van cyclodextrinen is bekend dat ze inclusie- en niet-inclusiecomplexen met geneesmiddelmoleculen vormen. De 10 vorming van een geneesmiddel-cyclodextrinecomplex kan de oplosbaarheid, oplossingssnelheid, biologische beschikbaarheid en/of de stabiliteitseigenschappen van een ge-neesmiddelmolecuul. modificeren. Geneesmiddel-cyclo-dextrinecomplexen zijn in het algemeen nuttig voor de 15 meeste doseervormen en toedieningsroutes: Als een alternatief voor directe complexering met het geneesmiddel kan het cyclodextrine worden gebruikt als een hulpadditief, bijv. als een drager, verdunningsmiddel of solubiliseer-der. Alpha-, bèta- en gamma-cyclodextrinen worden het' 20 vaakst gebruikt en geschikte voorbeelden worden beschreven in WO-A-91/11172, WO-A-94/02518 en WO-A-98/55148.

Voor het behandelen van cardiovasculaire stoornissen, in het bijzonder hypertensie, kunnen de verbindingen van de onderhavige uitvinding worden gecombineerd met één of 25 meer actieve bestanddelen die worden gekozen uit de opsomming: a) blokkers van de angiotensinereceptor (ARB), zoals losartan, valsartan, telmisartan, candesartan, irbesartan, eprosartan en olmesartan, 30 b) blokkers van het calciumkanaal (CCB), zoals amlo- dipine, c) statinen, zoals atorvastatine, d) PDE5-remmers, zoals sildenafil, tadalafil, var-denafil, 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazine-l-ylsulfonyl)- 35 pyridine-3-yl]-3-ethyl-2-[2-methoxyethyl]-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-7-on; 5-(5-acetyl-2-butoxy-3-pyridinyl)-3-ethyl-2-(l-ethyl-3-azetidinyl)-2,6-dihydro- 1025116- . 36 7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-7-on en de pyrazolo[4,3- d]pyrimidine-4-onen die worden beschreven in WO 00./27848, met name N-[[3-(4,7-dihydro-l-methyl-7-oxo-3-propyl-lH-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-5-yl)-4-propoxyfenylJsulfonylJ-5 l-methyl-2-pyrrolidinepropaanamide [DA-8159 (voorbeeld 68 van WO 00/27848)), e) bèta-blokkers, zoals atenolol of carvedilol, ' f) ACE-remmers, zoals quinapril, enalapril en lisino- prii, . 10 g) alfa-blokkers, zoals doxazosine, h) selectieve antagonisten van de aldosteronreceptor (SARA), zoals eplerenon of spironolacton, i) agonisten van imidazoline Ii, zoals rilmenidine en moxonidine en .

15 j) antagonisten van de èndothelinerece’ptor en remmers van endotheline converterend enzym..

Voor het behandelen van FSAD kunnen de verbindingen van de onderhavige uitvinding worden gecombineerd met één of meer actieve bestanddelen die worden gekozen uit de op- 20 somming: .

a) PDE5-remmers, zoals sildenafil, tadalafil, var-denafil, 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazine-l-ylsulfonyl)-pyridine-3-yl)-3-ethyl-2-[2-methoxyèthyl)-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d)pyrimidine-7-on, 5-(5-acetyl-2-butoxy-3- 25. pyri-dinyl)-3-ethyl-2-(l-ethyl-3-azetidinyl)-2,6-di.hydro- 7H-pyrazolo[4,3-d)pyrimidine-7-on, en de pyrazolo[4,3-d]-pyrimidine-4-onen die worden beschreven in WO 00/27848, mét name N-[[3-(4,7-dihydro-l-methyl-7-oxo-3-propyl-lH-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-5-yl)-4-propoxyfenyl)sulfonyl)- 30 l-methyl-2-pyrrolidinepropaanamide [DA-8159 (voorbeeld 68 van WO 00/27848)], '

b) dopaminergische middelen, bij voorkeur apomorfine of een selectieve D2-, D3- of D2-/D3-agonist zoals prami-pexool en ropirinol (waarop aanspraak wordt gemaakt in WO

35 00/23056),. PNU95666 (waarop aanspraak wordt gemaakt in WO

00/40226), "Λ Λ *1 CZ Λ 1 Λ " 37 c) agonisten van de melariocortinereceptor, zoals me- . lanotan II, PT-14, PT-141, verbindingen yaarop aanspraak wordt gemaakt in WO 99/64002, WO 00/74679, WO 99/556-79, WO 01/05401, WO 00/58361, WO 01/14879,, WO 01/13112 en . WO· 5 99/54358, selectieve agonisten van de MC4-receptor, zoals die welke . worden beschreven door Martin et al. [European Journal of Pharmacology, . 454, 71-79 (2002)], met name (N-[(3R)- 1,2,3,4-tetrahydroisochinolinium-3-ylcarbonyl]-(IR)-1-(4-10 chloor-benzyl)-2-[4-cyclohexyl-4-(1H-1,2,4-triazool-l-ylmethyl)-piperidine-l-yl]-2-oxoethylamine (THIQ) en selectieve agonisten van de MC3-receptor, d) selectieve modulatoren van de estrogeenreceptor (SERM's), zoals lasofoxifeen en raloxifeen, 15. e) tibolon, f) een androgeen, zoals androsteron, dehydro-androsteroh, testosteron, androstaandion en een synthetisch androgeen en .

g) een oestrogeen, zoals oestradiol, oestron, oestri-20 ol en een synthetisch oestrogeen, of oestrogeenbenzoaat.

Voor het behandelen van MED kunnen de verbindingen . van de onderhavige uitvinding wórden gecombineerd met één of meer actieve bestanddelen die worden gekozen uit' de opsomming: 25 a) PDE5-remmers, zoals . sildenafil, tadalafil, var- denafil, 5-[2-ethöxy-5-(4-ethylpiperazine-l-ylsulfonyl)-pyridine-3-yl]-3-ethyl-2-[2-methoxyethyl]-2,6-dihydro-7H-pyrazool[4,3-d]pyrimidine-7-on, 5-(5-acetyl-2-butoxy-3- pyridinyl)-3-ethyl-2-(l-ethyl-3-azetidinyl)-2,6-dihydro-30 7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-7-on en de pyrazolo[4,3-d]-pyrimidine-4-onen die' worden beschreven in WO 00/27848, met name N-[[3-(4,7-dihydrö-l-methyl-7-oxo-3-propyl-lH-pyrazolo[4,3-d)pyrimidine-5-yl)-4-propoxyfenyl]sulfonyl)-l-methyl-2-pyrrolidinepropaahamide [DA-8159 (voorbeeld 68 35 . van WO 00/27848)], b) dopaminergische middelen, bij voorkeur apomorfine of een selectieve D2-, D3- of D2-/D3-agonist, zoals prami- 1025116- 38 pexool en ropirinol (waarop aanspraak wordt gemaakt in WO 00/23056), PNU95666 (waarop aanspraak - wordt gemaakt in WO 00/40226) en c) agonisteri van de melanocortinereceptor, zoals me-5 lanotan II, PT-14, PT-141, verbindingen waarop aanspraak wordt gemaakt in WO 99/64002, WO 00/74679, WO 99/55679, WO 01/05401, WO 00/58361, WO 01/14879, WO 01/13112 en WO 99/54358, selectieve agonisten van de MC4-receptor, zoals die welke worden beschreven door Martin et al. [European 10 Journal of Pharmacology, 454, 71-79 (2002)), met name (N-[(3R)-l,2,3,4-tetrahydroisochinolinium-3-ylcarbonyl]-(lR)-1-M-chloorbenzyD^-M-cyclohexyl^-dH-l^^-triazooi-l-ylmethyl ) piperidine-l-yl]-2-oxoethylamine (THIQ) en selectieve agonisten van de MC3-receptor.

15 Als een combinatie van actieve middelen wordt toege diend, dan kunnen ze gelijktijdig, afzonderlijk of achtereenvolgens worden toegediend.

'De onderhavige uitvinding omvat eveneens de volgende aspecten. De voorkeursuitvoeringsvormen die hierboven voor 20 het eerste aspect worden verklaard, strekken zich uit tot deze aspecten. .

De onderhavige uitvinding omvat bovendien: (i) Een farmaceutisch preparaat dat een verbinding van de onderhavige uitvinding, tezamen met een farmaceu- 25 tisch aanvaardba (a’) r (e) excipiënt, verdunningsmiddel of drager bevat.

(ii) Een verbinding van de onderhavige uitvinding voor het gebruik als eeh geneesmiddel.

(iii) Het gebruik van een verbinding van de onderha-30 vige uitvinding als een geneesmiddel voor het behandelen of voorkomen van een aandoening waarvoor een gunstige therapeutische respons’ kan worden verkregen door de remming van neutraal endopeptidase.

(iv) Het gebruik van· een verbinding van de onderhavi-35 ge uitvinding als een geneesmiddel voor het behandelen of voorkomen van cardiovasculaire ziekten en aandoeningen, bij voorkeur essentiële hypertensie, pulmonale hyperten- 39 sie, secundaire hypertensie, geïsoleerde systolische hy-pertensie, hypertensie die verband houdt met diabetes, hypertensie die verband houdt met atherosclerose, renovascu-laire hypertensie, congestieve hartinsufficiëntie, angina, 5 beroerte, glaucoom, verminderde nierfunctie, nierinsuffi-' ciëntie, obesitas, metabolische ziekten (waaronder metabolisch syndroom), diabetes en verminderde glucosetoleran-tie, met inbegrip van de complicaties daarvan, zoals diabetische retinopathie en diabetische neuropathie.

10 (v) Een werkwijze voor het behandelen of voorkomen van cardiovasculaire ziekten en aandoeningen ,(bij voorkeur essentiële hypertensie, pulmonale hypertensie, secundaire hypertensie, . geïsoleerde systolische hypertensie, hypertensie die verband houdt met diabetes, hypertensie die 15 verband houdt met atherosclerose, renovasculaire hypertensie, congestieve hartinsufficiëntie, angina, beroerte, glaucoom, verminderde nierfunctie, nierinsufficiëntie, obesitas, metabolische ziekten (waaronder metabolisch syndroom) , diabetes en verminderde glucosetolerantie, met in-20 begrip van de complicaties daarvan, zoals diabetische retinopathie en diabetische neuropathie) in een zoogdier, diè het behandelen van het zoogdier met een effectieve hoeveelheid van een verbinding van de onderhavige uitvinding omvat.

25 (vi) Een farmaceutisch preparaat voor het behandelen van een cardiovasculaire ziekte die een verbinding van de onderhavige uitvinding tezamen met een farmaceutisch aan-vaardba(a)r(e) excipiënt, verdunningsmiddel of drager bevat .

30 (vii) Een verbinding van de onderhavige uitvinding voor het gebruik bij het behandelen of voorkomen van cardiovasculaire ziekten en aandoeningen.

(viii) Het gebruik van een verbinding van de onderhavige uitvinding bij de vervaardiging van een geneesmiddel 35 voor het behandelen of voorkomen van cardiovasculaire ziekten en aandoeningen.

1025118- 40

De onderhavige uitvinding wordt toegelicht door de volgende niet-beperkende' voorbeelden waarin de volgende afkortingen en definities worden gebruikt: 5 ’ DCC/DCCI dicyclohexylcarbodiimide ES+ electrospray-ionisatie, positieve scan ES" electrospray-ionisatie, negatieve scan m/z piek in massaspectrum MS. ' massaspectrum 10 Prep bereiding TS+ thermospray ionisatie positieve scan WSCDI in water oplosbaar l-(3-dimethylamino- propyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloridé 15.. ^-Kernspinresonantiespectra. (Nuclear Magnetic Resonance, NMR) kwamen in alle gevallen overeen met de voorgestelde structuren. Kenmerkende chemische verschuivingen (δ) worden gegeven in delen-per-miljoen vanaf tetramethylsilaan, Waarbij de gebruikelijke afkortingén . voor de aanduiding 20 van de voornaamste pieken worden gebruikt: bijv. s, singlet; d, doublet; t, triplet; k, kwartet; m, multiplet; br., breed. De volgende afkortingen zijn. gebruikt voor algemene oplosmiddelen: CDCI3, deuterochloroform; DMSO, di-methylsulfoxide. De afkorting psi betekent ponden per 25 vierkante inch en LRMS betekent lage-resolutiemassaspec-trometrie. Waar dunnelaagchromatografie (thin layer chromatography, TLC) is gebruikt heeft deze betrekking op TLC over silicagel met behulp van silicagel 60. F254-platen, Rf is de afstand die wordt afgelegd door een verbinding, ge-30 dee}.d dqor de afstand die wordt afgelegd door het vloeistof front op een TLC-plaat. De smeltpunten werden bepaald met behulp van een Perkin Elmer DSC7-apparaat met een ver-warmingssnelheid van 20°C/minuut.

41 '

Voorbeeld 1 (2S)-2-{1-[(IS)-l-Ethoxycarbonyl-2-(4-methyl-5-fenyl-oxazool-2-ylj ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl)-4-methoxy- boterzuur 5 ' . h8c w; - ΓΛ NV° ° o.

... .0^9

.V

Trifluorazijnzuur (4 ml) werd toegevoegd aan een op-20 lossing van de diester van bereiding 76 (1,2 g, 2 mmol) in. dichloormethaan (8 ml) en het reactiemengsel gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en azeotropisch ingedampt uit tolueen (2x10 ml). Het onzuivere product werd gezuiverd door 25 kolomchromatografié over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloormethaan:methanol (99:1 tot 95:5), hetgeen het titelproduct, 1,04 g, opleverde.

[a]+ -18,94° (1,320 mg/ml) in methanol.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,22 (m, 3H), 1,64 (brm, 12H), 30 2,40 (s, 3H), 2,52 (m, 1H), 3,26 (s, 3H) , 3,41 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 4,20 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,44 (m, 2H), 7,57 (m, 2H); MS ES+:. m/z=501 [MH] + .

De volgende verbindingen met.de algemene formule die 35 hierna wordt getoond werden gemaakt door middel van de werkwijze die werd beschreven in voorbeeld 1, waarbij de 1025116- I 42 I geschikte tert-butylester als uitgangsmateriaal werd ge- I bruikt.

I R’ Γ-1 . l^RS

I O O · · CT Ndrs I in 95 11-8.

43

Ex R1 I L-Ra Ra Data .2 methoxy- _ / ethyl [a] = -16.67 (0.600 mg/mL) in ethyl methanol; ’HNMR (CDCI3i 400MHz): V / 1.22(m, 3H), 1.62(brm, 12H), 2.55(m, 1H), 3.23(s, 3H), 3.30-f\ 3.45(brm, 4H); 4.21 (m, 2H), 4.98(m, :Ν··ν° ' ’ ' 1H), 6.92(d, 1H), 7.12{t, 2H), 7.20(s, 1H), 7.58(m, 2H); MS ES- m/z i •Y . 503[M-H]‘ ! "3 1 methoxy- Γ"~/ξΓ ~ ethyl. [a] =-16.14 (0.85mg/mL) in ! ethyl ' u ] ' methanol; ’HNMR (CDCI3,400MHz): 1.26(t,3H), 1.52-2.20(brm 12H), I · 2.58(s, 1H), 3.28(s, 3H), 3.37- 3.59(m, 4H), 4.21(d, 2H), 4.99(s,

Wn 1H), 6.85(s, 1H), 7.34-7.47(m, 4H), Γ 7.60(m, 2H); MS ES-m/z 485 [M-H)‘ 4 propyl. -/¾¾. ethyl [a] = -1Ó.50 (0.40 mg/mL) in \\ \ methanol; 1HNMR (CDCI3,400MHz): 0.83(t, .3H), 1.24(m, 6H j, 1.63(m, V 8H), 2.01 (m, 2H), 2.19(m, 1H),. .

• </^*1 2.38(m, 1H). 3.47(m, 2H), 4.24(m, \=^n 2H), 5.03(d, 1H), 6.94(s, 1H), 7.17- i . 7.48(m, 6H); MS ES+m/z 47-1 [MHf 5 methoxy* ci ethyl [a] =-21.4 (0.7 mg/mL) in methanol ethyl · . ’HNMR (CDCI3,400MHz): 1.25(t, ζ \ 3H), 1.50-2.20(brm, 12H), 2.57(m, 1H), 3.26(s, 3H), 3.40(m, 2H),.

- \ 3.47{d, 2H), 4.21 (m, 2H), 4.99(m, /W 1H), 6.85(d, 1H), 7.24(s, 1H),

7-40<d' 2H>' 754(d· I

Μ In l I

10251 IQ-

I Ex R1 L-Ra Ra Data · I

I .6. propyl. ethyl [a] =-43.87 (2.02 mg/mL) in ! \\ \ methanol;’HNMR (CDCIs, 400MHz): : , 0.82(t, 3H), 1.22(m, 6H), 1.71(m, ·' \ 8H), 2.17(m, 3H), 2.38(m, 1H), 0 7 3.19(dd, 1H), 3.24(dd,· 1H), 4.19(m, W 2H), 4.88(m, 1H), 7.36(d, 1H), 7.49(m, 3H), 7.57(s, 1H), 8.05(m, f · 2H); MS ES+ m/z 493 [MNa]+ I 7 methoxy- /¾¾ isobutyl ’HNMR (CDCI3,400MHz): 0.88(d, \ ethyl I ] .. 6H), 1.64(m, 6H), 2.01 (m’, 7H), 3.28(s, 3H), 3.37(m, 2H), 3.46(m, .

. )¾¾ 2H), 3.95(m, 2H), 5.07(m, 1H), o l . 7.03(m, 1H), 7.30(m, 1H), 7.36(m, ' f . 1H), 7.41(m, 2H), 7.59(m, 2H), 10.06(brs, 1H) | T MS ES- m/z 513 [MH]' I 8 methoxy- . isopropyl 'HNMR (CDCI3,400MHz): 1.20(dd, .

ethyl \\ \ 3H), 1 ^23(dd, 3H)·, 1.63(m, 8H), . 1.91 (m, 2H), 2.07(m, 2H), 2.14(m, V ' 1H), 3.22(s, 3H), 3.39(m, 2H), γη- 3.43(m,3H),5.02(m, 1H), 6.95(d, A^N . 1JH), 7.28(m, 1H), 7.36(m, 1H), 7.40(m, 2H), 7.59(m, 2H) · h MS APCI.m/z 501 [MH]+ 9 methoxy- ethyl . [al = -11.74 (0.92mg/mL) in .

I ethyl· · ·.. f’V . methanol ’HNMR (CDCI3i 400MHz):1.26(t, ΓΛ ' 3H), 1.73(m, 8H), 1.92(m, 1H), °Y>N . 2.05(m, 1H), 2.18(m, 2H), 2.56(m, " j - 1H), 3.22(s, 3H), 3.30-3.47(brm, I y 4H), 4.18(m', 2H), 4.99(m, 1H), I . 7.19(d, 1H), 7.37(m, 1H), 7.40(m, I 2H), 7.63(m, 2H), 7.85(m, 1H) .. ‘______________MS ES+ m/z 487 fMHf _ · I methoxy- propyl [a] =-10.90 (2.00 mg/mL) in I etM W \ methanol I ’HNMR (DMSODe, 400MHz): I L 0.91 (m, 3H), 1.46-2.20(brm, 14H), Ιο Ί 2.57(s, 1H), 3.24(s, 3H), 3.38(d, 2H), ΓΝ 3.49(m, 2H), 4.14(m, 2H), 5.02(s, 1H). 6.98(0. 1H). 7.20-7.51 (m, 6H) MS ES+ m/z 501 [MH)+ .45 f .__' _.

I Ex I R1 I L-R3 | RS I Data .-; 1.1 . methoxy- /¾¾ butyl .. [a] = -11.52 (3.30 mg/mL) in ethyl Λ Λ methanol .

. .· ’HNMR (CDCI3, 400MHz): 0.85(t; 3H), 1.37(m, 2H), 1.51-2.30(brm, ., o( Ί ·. 14H),· 2.49(s, 1H), 3.23(s, 3H), ! X 3.38(m, 3H)’ 3.61 (m, 2H), 4.19(m, .i 1H), 5.08(m, 1H), 7.12(d, 1H), 7.20-• T 7.68(m, 6H) _____________MS ESI m/z 515 ΙΜΗΓ 12 methoxy- benzyl [a] =-17.82 (1.10 mg/mL) in .

ethyl .· ' \\ I methanol · 1HNMR (DMSOD6i 400MHz): 1.18- ] 1.47(m, 6H), 1.51-1.62(m,2H), 1.76(m, 1H), 1.84(m, 2H), 1.98(m, Λ 7 1H),2.17(m, 1H), 3.08{s,3H), 3.20- / N 3.32(m, 3H)j 3.38(m, 1H), 4.84(m, i · 1H), 5.Ó7(m, 2H), 7:31 (m, 5H), ' . 7.40(m, 2H), 7.57(m, 1H), 7.63(m, 2H), 8.14(m, 1H) ___________MS ES+ m/z 549 [ΜΗΓ__ 13 propyl /γ~λ · ethyl . 'HNMR (CDCI3> 400MHz): 0.81 (m, . \ \ : 3H), 1.16-1.37(m, 6H), 1.45-1.89(mj /=7 7H), 1.91(m, 1H), 2.00(m, 2H), . /=( 2.11(mt 1H), 2.36((71, 1H), 3.38(m, .

o^n 2H), 4.18(m, 2H), 5.02(m, 1H), 7.06(m, 1H), 7.31 (m, TH), 7.39(m, ., 2H), 7.65(m,2H), 7.84(m, 1H) T MS ES+ m/z 471 [MH]* . .

14 propyl /^5% ethyl [a) = +18.85 (1.433 mg/mL) in L j) methanol;’HNMR (CDCI3, 400MHz): .

0.86(1, 3H), 1.06(t, 3H), 1.18-1.39(m, F \ 4H), 1.47 T.77(m, 7H), 1.82(m, 1H), /S* ‘ 2.03(m, 2H), 2.13(m, 1H), 2.39(m, r lH),3.13(dd, 1H), 4-.43(dd, 1H), . j 3.89(m, 1H), 4.05(m, 1H), 5.92(m, ί 1H), 7.37(m, 1.H), 7.47(m, 2H), 7.62(m, 2H), 7.91 (m, 1H); MS ES+ m/z 493 [MNa]+ 10 251 19-i

Voorbeeld 15 (2S>-2-{1—[(IS)-l-Carboxymethyl-2-(5-fenyloxazool-2- ’ yl) ethylcarbaitioyl] cyclopentylmethvl}-4-methoxy-boterzuur 46 5 '··'·' · ''·’ 10 ]f \^-ch3 o

Deze verbinding werd bereid door middel van de wérk-15 wijze die werd beschreven in voorbeeld 1, waarbij dé dies-ter van bereidinig 100 als uitgangsmateriaal werd gébruikt. 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,77 (t, 3H), 1,13 (m,3H), 1,22-1,86 (m, 15H), 1,97 (m, 1H) ,„ 2,60 (m, 2H), 2,99 (m, 2H), 4,04 (m, 1H), 5,59 (m, 1H), 7,31 (m', 1H), 7,40 (m, 2H), 20 7,47 (m, 2H) , 7,65 (m, 2H); MS ES+: m/z-485 [MH)+.

Voorbeeld 16 (2S) -2-{ 1- [, (IS) -l-Carboxy-2- (5-fenyloxazool-2-yl)ethyl-25 carbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxybóterzure propyl- ester .

30 H*C<p

35 ° ' ° O^YpH

47

De diester van bereiding 101 (0,34 g, 0,61 mmol) werd toegevoegd, aan een oplossing van trifluorazijnzuur (2 ml) in dichloormethaan (10 ml) en het reactiemengsel gedurende 2 dagen geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel 5 werd in vacuüm geconcentreerd, opgelost in dichloormethaan (20 ml), gewassen met water (20 ml), gedroogd op magnesi-umsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titel-product opleverde.

1H-NMR (CDC13, 400.MHz): 0,93 (t, 3H), .1,44-1, 76 (m, 9H), 10 1,83 (m, 2H), 2,08 (m, 3H), 2,51 (m, 1H), 3,25 (s,'3H), 3,36 (m, 2H), 3,42 (m, 2H), 3,61 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 4,92 (m, .ΊΗ), 7,18 (m, 1H), 7,32-7,44 (m, 4H), 7,60 (m, 2H) ; MS ES-: m/z=499 [MH]'.

15 De volgende verbindingen werden gemaakt door middel .

van de hierboven beschreven werkwijzen waarbij de geschikte t-butylester als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

Voorbeeld 17 20 (2S)— 2 —{1—[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethyl- carbamoyl]cyclopentylmethyl)-4-methoxyboterzure butylester 25

H.c-* V

.1^ Γ-Ύ oG> n

CT OH

De titelverbinding werd bereid door een werkwijze te 35 volgen die gelijksoortig was aan die in voorbeeld 16, waarbij de diester van bereiding 102 als uitgangsmateriaal, werd gebruikt.

1025116- I 48 I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,90 (t, 3H), 1,39 (m, 2H), 1,47- I 1,77 (m, 9H), 1,82 (m, 2H), 2,00-2,19 (m, 3H), 2,53 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,29 (m, 3H), 3,66 (m, 1H), 4,02 (m, I 2H), 4,89. (m, 1H), 7,23-7,44 (m,. 4H), 7,63 (m, 2H) ; I 5 MS ES-: m/z=513 [M-H]“.

I Voorbeeld 18 I (2S)-2-{1-[(IS)-l-Cyclopentyloxycarbonyl-2-(5-fenyloxa- I zool-2-yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl)-4-methoxy- .10 boterzuur I 15 I HO—v°\ I : ° I 20 . Trifluorazijnzuur (1ml) werd toegevoegd aan een op- I lossing van de diester van bereiding 93 (170 mg, 0,29 I 25 mmol) in dichloormethaan (3 ml) en het reactiemengsel ge- I durende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactie- mengsel werd in vacuüm geconcentreerd én azeotropisch in- I gedampt uit dichloormethaan (x6), hetgeen het titelproduct opleverde.

I 30 1H-NMR (DMSO-De, 400 MHz): 1,38-1,66 (m, 14H), 1,74 (m, I 3H) , 1,91 (m, 2H), 2,00 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 3,15 (m, I 3H), 3,19 (m, 3H), 3,31 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 5,04 (m, I 1H)·, 7,34 (m, 1H), 7,43 (m, 2H), 7,53 (m, 1H) , 7,65 (m, I 1H), 8,02 (m, 1H), I · 35 MS ES-: m/z=525 [M-H]".

I De volgende verbindingen werden bereid door middel I van de werkwijze die werd beschreven in het bovenstaande 49 voorbeeld 18, waarbij de geschikte tert-butylester als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

Voorbeeld 19 5 (2S)-2-{1-[(IS)-1-(1-Ethylpropoxycarbonyl)-2-(5-fenyl- oxazool-2-yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-roethoxy-boterzuur h3c—\ /

15 0==/ H

OH O V—\ ··./· H3C—/ . CHg · 20 1H-NMR (DMSO^De, 400 MHz): 0,75 (m, 6H), 1,19-1,61 (m, 11H), 1,76 (m, 2H), 1, 90 (m, 3H), 2,18 (m, 1H), 3,09 (m, 1H) , 3,13 (s, 3H), 3,38 (m, 3H), 4,61 (m, 1H), 4,81 (m, 1H), 7,.32 (m, 1H), 7,44 (m, 2H), 7,52 (ra, 1H), 7,62 (m, 25. 2H), 8,03 (m, 1H), ‘ MS ES+: m/z=529 [M-H)+.

1025116« 50 . Voorbeeld 20 (2S)-2-{1-[(IS)-1-(2-Butoxyethoxycarbonyl)-2-(5-fenyl-oxazool-2-yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxy-boterzuur 5 f\ io v=/ 15 ·' 0 °^Ns^Nch, .

0 OH

20 ^-NMR (CDCI3, 400' MHz·) : 0,86 (t, 3H) > 1,35- (m, 2H), 1,46- 25 1,79 (m, 10H) , 1,99 (m, 2H), 2,08 (m, 2H) , 2,57 (m, 1H), 3,28 (s, 3H), 3,42 (m, 4H), 3,58 (m, 2H), 3,64 (m, 2H), 4,36 (m, 2H), 5,06 (m, 1H), 6,92 (m, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,44 (m, 2H), 7,62 (m, 2H) ; MS ES+: m/z=559 [MH] 30 -J * . : 1 n·?^ 1 1«-

Voorbeeld 21 (2S)—2—{1—[(IS)-1-Ethoxycarbonyl)-2-(4-fenylimidazool-l- yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl)-4-methoxyboterzuur 51 5 CH ' I 3

Lr-i 15

De diester van bereiding 107 (17 mg, 0,032 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van trifluorazijnzuur (0,5 ml) in dichloormethaan (5 ml) en het reactiemerigsel gedurende. 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactie-20 mengsel werd in vacuüm geconcentreerd en vervolgens azeo-tropisch ingedampt uit tolueen (3x15 ml), ethylacetaat (15 ml) en dichloormethaan (15 ml), hetgeen het titelproduct opleverde; 20 mg.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,25 (m, 3H), 1,37-2,18 (m, 13H), 25 3,11 (s, 3H), 4,21 (m, 4H), 4,40 (m, 1H), 4,82 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 7,37 (m, 5H), 7,65 (m, 2H),9,26 (m, 1H); • MS ES+: m/z=486 [MH]+.

10251 IQ-

Voorbeeld 22 (2R)-2-{1-[(lS)-l-Butoxycarbonyl)-2-(5-fenyloxazool-2- yl)ethylcarbamoyl)cyclopentylmethyl)pentaanzuur 52 5 0 h3c ΓΛ 10 ho~^ i H o o 15

De diester van bereiding 99 (325 mg, 0,55 mmol) werd opgelost, in dichloormethaan (3 ml), de oplossing behandeld met trifluorazijnzuur (3 ml) en het reactiemengsel gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur..Het reactiemeng- 20 sel werd verdund met tolueen (20 ml) en in vacuüm geconcentreerd in een koudwaterbad om het trifluorazijnzuur te verwijderen. Het reactiemengsel werd verdeeld tussen ethylacetaat (25 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (20 ml) en de organische laag gedroogd op magnesiumsulfaat en· 25 in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat (75:25 tot 70:30), hetgeen het titelproduct opleverdë; 255 mg.

[a]= -11,67° (1,08 mg/ml) in methanol.

30 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz): 0,86 (m, 6H), 1,27-1, 62 (m, 16H), 1,83 (m, 1H), 2,06 (m, 1H) , 2,29 (m, 1H), 3,41 (m, 2H), 4,16 (m, 2H), 4,95 (m, 1H), 7,30 (m, 1H) , 7,41 (m, 3H), 7,64 (m, 2H), 8,05 (m, 1H); .

MS ES+: m/z=499 [MH]+.

35 De volgende verbinding.werd gemaakt door de hierboven verkregen bereiding te volgen en de geschikte diester als uitgangsmateriaal te gebruiken.

Voorbeeld 23 (2R)-2-{1—[2-(5-Fenyloxazool-2-yl)-(IS)-1-propóxycarbonyl- ethylcarbarooyl]cyclopentylmethyl}pentaanzuur 53 5 CH, /=/ k I—\ . Nv°

10 ! V"H I

p. 0 15

De ti.telverbinding werd bereid door middel van een w.érkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd beschreven in voorbeeld 22 uit de diestér van bereiding 98.

[a]<= -16, 73° . (1,160 mg/ml) in methanol; 20 *H-NMR (CD30D, 400 MHz): 0,85 (t, 3H), 0,90 (t, 3H), 1,20 (m, 2H), 1,30-1,70 (m, 10H), 1,80 (m, 1H), 2,00 (m, 2H), .2,05 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 3,40 (m, 2H), 4,05 (m, 2H), 4,95 (m, 1H), 7,35 (t, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,45 (t, 2H)., 7,65 (d, ,2H), 8,05 (d, 1H) ; 25; MS ES+: m/z=485 [MH)\

Voorbeeld 24 (2S)-2-{l-[(IS)-l-Carboxy-2-(4-fenylimidazool-l-yl)ethyl-carbamoyl]cyclopentylmethyl)-4-methoxyboterzuur 30 CH3 35 O ![ X lil

0 0^0H

1025116- 54

Een oplossing van de ester van beréiding 105· (17 mg, 0,033 mmol) in dighloormethaan (5 ml) werd behandeld met trifluorazijnzuur (0,5 ml) en het reactiemengsel gedurende 5 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel 5 werd in vacuüm geconcentreerd en azeotropisch ingedampt uit tolueen (3x15 ml), ethylacetaat (15 ml) en dichloor-methaan (10 ml), hetgeen het product opleverde; 11,1 mg. 1H-NMR (CD30D, 400 MHz): 1,41-1,94 (m, 11H), 3,21 (m, 6H), 4,77 (m, 2H), 7,52 (m, 3H), 7,71 . (m, 2H), 7,94 (m, 1H), 10 8, 91 (m, 1H); .

. MS ES-: m/z=456 [MH]

Voorbeeld 25· (2S)-2-{1- [ (IS)-l-Carboxy-2-(4-methyl-5-fenyloxazool-2-15 yl)ethoxycarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur ?Ha h3c . - 20 O /==\ '

' SGhY

h0Vv^><ynt

0 ° O^OH

25 •De ester van voorbeeld 1 (500 mg,. 1 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 1 M natriumhydroxide (4 ml) in dioxaan (12 ml), het reactiemengsel gedurende 5 uur ge-30 roerd bij 50°C, waarna men gedurende nog 18 uur liet staan bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, aangezuurd met 2M zoutzuur (20 ml) en geëxtraheerd met ethylacetaat (2x30 ml). De organische vloeistoffen werden gedroogd op magnesiumsulfaat eri in va-35 cuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel,.waarbij werd geë- 55 lueerd met; dichloormethaan: methanol: azijnzuur (90:10:1), hetgeen hét titelproduct opleverde.

[α)= -6,54° (1,620 mg/ml) in methanol. '· ^-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,58 (brm, 12H), 2,06 (s, 3H), 5 2,18 (m, 1H), 2,48 (s, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,36 (s, 2H), 3,48 (d, 2H), 4,94 (d, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,42 (m, 2H), 7,57 (m, 1H); MS ES+: m/z=473 [MH]+.

De volgende verbindingen werden bereid door middel 10 van de werkwijze die werd beschreven in voorbeeld 25, waarbij de geschikte monoester als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

Voorbeeld 26 15 (2S)-2-(1-[(lS)-l-Carboxy-2-[5-(4-fluorfenyl)oxazool-2- yl]ethylcarbamoyl}cyclopentylmëthyl}-4-methoxyboterzuur F · ! o j—v nvo ·

25 Π°Υ^Ύ I

0 ° Or^OH

^-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,63 (brm, 12H), 2,56 (brs, 1H), 30 3,33 (s, 3H), 3,46 (t, 2H), 3,58-3,77 (m, 2H), 5,06 (m, 1H), 7,16 (t, 4H), 7,21 (s, 1H), 7,38 (s, 1H); MS ES-:' m/z=475 [M-H]‘.

1025116- I 56 I Voorbeeld 27 I (2R) -2-{1-[(IS)-l-Carboxymethyl-2-(5-fenyloxazool-2-yl·]- I ethvlcarbamovl}cvclopentvlmethyl)pentaanzuur I 5 O ' I 9Hi Γλ I Γ Λ-- ' I °XjX* o I . 15 I [a] = -13,13° (0,960 mg/ml) in methanol; I . 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,83 (t, 3H),. 1,20-1,52 (m, 3H), I 1,54-1,81 (m, 7H), 1,86 (m, 1H), 2,00-2,19 (m, 3H), 2,36 (m, 1H), 2,53 (dd, 1H), 2,66 (dd, 1H), 3,38 (m, 1H), 3,60 I 20 (m, 1H) , 4,94 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,38 I (m, 2H), 7,61 (m, 3H); I MS ËS—: m/z=455 [M-H]'.

I Voorbeeld 28 I 25 (2S)-2-(1-( (lSJ-l-Carboxy^-is-fenylJ-U^^loxadiazool-S- I yl]ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur I 30 h3c-o / \ 3 \_^ L) .

I 0 J

I O

I 35 0H

I 1025116- 57

Een oplossing van de ester van voorbeeld 42 (50 mg, 0,10 mmol) in dioxaan (1,5 ml) werd behandeld met 2M na-triumhydroxideoplossing (1,5 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactie-5 mengsel werd aangezuurd met 2M zoutzuur en geëxtraheerd met ethylacetaat (30 ml) . De organische laag werd afge scheiden en. gewassen met geconcentreerde zoutoplossing,-gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het product werd azeotropisch ingedampt uit ether voordat 10 werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloormethaanrmetha-nolrazijnzuur (100:0:0 tot 90:10:1). De geschikte fracties werden gecombineerd en in vacuüm geconcentreerd voordat azeotropisch werd ingedampt uit tolueen en ether, hetgeen 15 het titelproduct opleverde, 24 mg.

[a)= -7,19° (1,03 mg/ml) in methanol.

1H-NMR (aceton, 400 MHz): 1,38-1,63 (m, 10H), 1,83 (m, 2H), 2; 43 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 3,34 (m, 3H), 3,59 (m, 1H), 5,13 (m, 1H), 7,57 (m, 4H), 8,08 (m, 2H); 20 MS ES-: m/z=458 [M-H)“.

Voorbeeld 29 (2R) -2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-ylj ethyl-carbamoyl]cyclopentylmethyl}pentaanzuur 25 * ‘ yT-CH3 30

° %^OHN

• 35

De ester van voorbeeld 4 (130 mg, 0,2 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 1M natriumhydroxide (6 ml) 1 025116- H in methanol (9 ml) èn het reactiemengsel gedurende 18 uur Η geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, verdund met water (15 ml) en de wa- terlaag gewassen met ethylacetaat (15 ml) . De waterlaag 5 werd aangezuurd tot pH = 1 met 2M zoutzuur en geëxtraheerd in ethylacetaat (3x20 ml) . Deze organische vloeistoffen werden gecombineerd, gedroogd op magnesiumsulfaat en in I vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezui- I verd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd I .10 geëlueerd met dichloormethaan:methanol' (100:0 tot 95:5), I hetgeen het titelproduct opleverde.

I [a]«= -14,0° (0,70 mg/ml) in methanol.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,94 (t, 3H), 1,19-1,64 (m, 13H), I 2,11 (m, 1H), 2,36 (m, lH), 3,49 (m, 2H), 4, 98 (m, 1H), 15 7,17 (d, 1H) , 7,28 (m, 2H), 7,37 (m, 3H); I MS ES-: m/z=441 [M-H]".

I De volgende verbindingen werden gemaakt door middel I van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd I beschreven in voorbeeld 29, waarbij de geschikte alkyles- I 20 ter als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

I Voorbeeld 30 (25)-2-(1-[(IS)-l-Carboxy-2-[5-(4-chloorfenyl)oxazool-2- yl ] ethyl carbamoyl·} cy clopentylmethyl} - 4 -methoxyboter zuur I 25 0 0 ο^°π 35 lH-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1, 47-1,72 (brm, 8H), 1,91 (m, 2H), 2,18 (m, 2H), 2,54 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,36 (brs, 2H), 59 3,47 (m, 2H), 4,97 (d, 1H) , 7,15 (d, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,39 (d, 2H), 7,54 (d, 2H) ; • MS APCI: m/z=493 [MH]+.

5 Voorbeeld 31 (2S) —2—{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(4-fenyloxa2ool-2-vl]ethyl-carbamoyl] cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur 10 ✓CH8 r==/==Z/

Vo.y 15 ο ο

CT OH

[a]= +3-,08° (0,91 mg/ml) in methanol.

20 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz): 1,31 (m, 1H), 1,51-1,93 (m, 8H), 2,03 (m, 3H), 2,44 (m, 1H) , 3,21 (s, 3H), 3,29 (m, 2H), 3,42 (m, 2H), 5,13 (m, 1H) , 7,23 (m, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,72 (m, 2H), 8,13 (m, 1H); MS ES-: m/z=457 [MH]".

25 1025116- I Voorbeeld 32 I (2R)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(2-fenyloxazool-5-yl)ethyl- carbamoyl]cyclopentylmethyl}pentaanzuur 1:-5 I "V o I ·° .

OH \ I n I 15.

2M natriumhydroxide (5 ml) ,werd toegevoegd aan een I oplossing van de ester van voorbeeld 6 (150 mg, 0,31 mmol) in tetrahydrofuran (5 ml) en het reactiemengsel gedurende I 3 uur verhit onder terugvloeiing. Het reactiemengsel werd I 20 in vacuüm geconcentreerd, aangezuurd met 2M zoutzuur (10 ml) en geëxtraheerd in ethylacetaat (2x25 ml) . De organi- I sche vloeistoffen werden gecombineerd, gewassen met gecon- I centreerde zoutoplossing (25 ml), gedroogd op magnesium- I sulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product I 25 werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, I waarbij werd geëlueerd met dichloormethaan:methanol I (95:5). De juiste fracties werden gecombineerd en in vacu^ I um geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 120 I mg.

I 30 [a]= -30,01° (1,02 mg/ml) in methanol.

I 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,82 (m, 3H), 1,27 (m, 3H), 1,64 I (m, 8H), 2,11 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 2,40 I (s, 1H), 3,18 (dd, 1H), 3,22 (dd, 1H), 4,82 (d, 1H), 7,46 I (s, 3H), 7,62 (s, 2H), 8,04 (m, 2H); I 35 MS APCI: m/z=443 [MH]+.

I 10251Ifi- 61

Voorbeeld 33 (2R)r2-{l-[(IS)-l-Carboxv-2-(5-fenvloxazool-4-yl]ethyl-carbamoyl }cyclopentylmethyl)pentaanzuur 5 ΓΛ 10 o °o=^ OH N^O 15

De titelverbinding werd bereid door middel van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd be-, schreven in voorbeeld 32, waarbij de ester van voorbeeld 14 als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

20 1H-NMR (CDCr3, 400 MHz) : 0,85 (t, 3H), 1,30 (m, 3H), 1,60 .

(m, 8H), 2,00 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 2,40 (brm, 1H), 3, 30 (m,· 1H), 3,45 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,45 . * (m, 3H), 7> 60 (d, 2H), 7,90 (s, 1H); MS ES-: m/z=441 [MH)\ 25 ' ; 1025116- I 62 I Voorbeeld 34 I (2R)-2-{1—[(IS)-l-Carboxy-2-(4-fenyloxazool-2-yl)ethyl- B carbamoyl]cyclopentylmethyl}pentaanzuur

B

I ” ^ η I “y^^Yt I 0 0 cAoH .

I 15

De diester van. bereiding 7'8 (200 mg, 0,43 mmol) werd I 20 toegevoegd aan een oplossing van triflüorazijnzuur (1 ml) I in dichloormethaan (4 ml) en het reactiemengsel gedurende I 5 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel I . wérd in vacuüm geconcentreerd eh behandeld met 2M natrium- I hydroxideoplossing (2 ml) in dioxaan (4 ml) en gedurende 5 I 25 uur geroerd bij 50°C. Het reactiemengsel werd in vacuüm I geconcentreerd en het residu verdund met ethylacetaat (20 I ml en 2M zoutzuur (10 ml). De organische laag werd afge- scheiden en gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm -ge- concentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door 30' kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd I met dichloormethaan:methanol=95:5, hetgeen het titelpro- I duet gaf; 90 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 40.0 MHz): 0,85 (t, 3H), 1,02-1,49 (m, 11H), I 1,77 (m, 1H), 1,88 (m, 1H.) , 2,01 (m, 1H), 2,16 '(m, 1H), I · 35 3,19 (dd, 1H), 3,30 (dd, 1H), 5,04 (m, 1H), 7,24 (m, 1H), I 7,36 (m, 2H), 7,71 (m, 2H), 7,89 (m, 1H), 8,63 (m, 1H); I MS ES+: m/z=441 [MH]+.

I il 0251 16* 63

De volgende producten werden bereid door middel van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd beschreven in voorbeeld 34, waarbij de geschikte diester als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

5

Voorbeeld 35 (2S)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyl)-[1,2,4]oxadiazool-3-• yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl)-4-methoxyboterzuur 10 o___· ° ° oX: 20 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz) : 1,68 (m, 8H), 1, 84 (m, 1H), 2,07 (m, 2H), .2,28 (m, 1H), 2,57 (m, 1H)', 3,28 (s, 3H), 3,32- 3,54 (brm, 4H), 4,96 (m, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,54 (m, 2H), 7,60 (m, 1H), 8,09 (m, 2H); MS ES+: m/z«460 [MH)+.

25 ' ' 1025116- I 64

Voorbeeld 36 I (2R)-2-(1-[(IS)-l-Cafboxy-2-(4-fenylpyrazool-l-yl)ethyl- carbamoyl]cyclopentylmethyljpentaanzuur ' I CH, V~T\ I .

I 10 : ' I ^ ° «A* 15 [a]= +16,83° (0,820 mg/ml) in methanol.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,18-2,20 (m, 18H), 4,91 (m, 1H), I 5,07 (m, 2H), 7,23 (m, 1H), 7,42 (m, 4H), 7,57 (m, 1H), I 8,19 (m, 1H), 8,26 (m, 1H); I MS ES-: m/z=440 [MH]\ I 20 I Voorbeeld 37 I (2R)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(4-isobutyloxazool-2-yl]ethyl- I carbamoyl}cyclopentylmethyl)pentaanzuur I 25 ...CHs I . H3C“\ chs . · . . ,

'7 C ΛΛ °YN

30 H0 ! 0 · 0 cAoh , 35 [a]= -1,9° (1,06 mg/ml)in methanol.

65 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,86 (m, 9H), 1,20-1,42 (m, 3H) , 1,44-1,71 (m, 9H), 1,96-2,17 (m, 3H), 2,34 (m, 3H), 3,41 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,36 (m, 1H); MS ES+: m/z=421 [MH]+.

5 '

Voorbeeld 38 (2R)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(4-ethyloxazool-2-yl)ethyl-carbamoyl ]cyclopentylmethyl)pentaanzuur ID H,C ...

• FV H

K,' r~\ °n^n

o 0 A

. 0 PH

Bereid als beschreven in voorbeeld 34, maar het reac-tiemengsél werd geroerd met natriumhydroxide en dioxaan, 20 gedurende 7 uur bij 80°C.

[a]· -4,0° (1,75 mg/ml) in methanol.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,86 (t, 3H), 1,17 (t, 3H), 1,24- 1,73 (m, 12H), 1,96-2,21 (m, 3H), 2,52 (m, 2H), 3,39 (m, 2H), 4,85 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,29 (m, 1H); 25 MS ES-: m/z=393 [MH]+.

1025116- I 66 I Voorbeeld 39 I (2S)—2—{1—[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyl-[1.3.4]oxadiazool-2- yl)ethylcarbamoyl]cycldpentylmethyl}-4-methoxyboterzuur .

I 5 I a.....

H '4·.

I 10 :U

I 15 De diester van bereiding 89 (80 mg, .0,2 mmol) werd opgelost in dichloormethaan (3 ml), het reactiemengsel be-.

I handeld met tfifluorazijnzuur (0,5 ml) en vervolgens ge- I durende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het' reactie- mengsel werd in vacuüm geconcentreerd én ‘ azeotropisch in- I 20 gedampt uit tolueen. Het residu wérd gezui.verd door Tcolom- I chromatografie over silicagel,: waarbij werd geëlueerd met I . dichloormethaan-.methanol :azijnzuur=97:3:0,5-, hetgeen een I kleurloze, vaste stof opleverde.. De vaste stof werd opge- I lost in methanol (3 ml) en behandeld met 2M natriumhy- I 25 droxideoplossing (1 ml). Het reactiemengsel werd gedurende I 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel I werd iri vacuüm geconcentreerd en het residu verdeeld tus-' I sen 2M zoutzuur (10 ml) en ethylacetaat (10 ml). De lagen I werden gescheiden én de waterlaag werd geëxtraheerd met I ' 30 ethylacetaat (2x10 ml). De gecombineerde organische ex- .

I tracten werden gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm I geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd I met dichloormethaan:methanol:azijnzuur=95:5:0,-5, hetgeen I 35 het titelproduct opleverde; 30 mg.

I [a]= -7,40° (1,00 mg/ml) in methanol; 67 ^-NMR (CD3OD, 400 MHz): 1,38-1,83 (m, 9H), 1,96-2,17 (m, 3H), .2,39 (m, 1H), 3>24 (s, 3H)., 3,29 (m, 3H), 3,48 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), -5,10- (m,· 1H), 7,54 (m,. 3H), 8,02 (m, 2H) ; 5 MS ES+: m/z=460,2 (MH]\

Voorbeeld 40 (2S)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethyl-carbamoyl] cyclopentylmethyl } -4-methoxyboterzuur 10 <fH.

0 0 r‘- . 20

De diester van bereiding 80 <200 mg, 0,36 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 1M natriumhydroxide (7 ml) in methanol (8 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 25 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, verdund met water en gewassen met ethylacétaat (15 ml). De waterlaag werd aangezuurd met 2M zoutzuur en het' witte neerslag geëxtraheerd in ethyla-cetaat (3x15 ml). De organische vloeistoffen werden gecom-30 bineerd, gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het product werd toegevoegd aan een oplossing, van trifluorazijnzuur in dichloormethaan en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertempëratuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en azeotro-35 pisch ingedampt uit tolueen. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij 1025118- I 68 H werd geëlu'eerd met dichloormethaan:methanols100:O tot I .95:5, hetgeen het titelproduct ople.verde; 132 mg.

I ‘ [a]= -6,00° (0,80 mg/ml) in methanol.

I ^H-NMR (CDCls, 400 MHz): 1,61 (br, 9H), 1,82-2,24 (brm, I 5 4H), 3,26 (s, 3H), 3,40 (s, 2H) , 3,58 (s, 2H), 5>01 (s, I 1H), 7,19 (s, 1HJ, 7,21-7,43 (m, 4H), 7,61 (m, 2H)/ I MS ES-: m/zs=457 [M-H]'.

Voorbeeld 41 I .10 (2R) —2—{1—[(IS)-l-Carboxy-2-(3-fenyl[1,2,4]oxadiazool-5- yl)ethylcarbamóyl]cyclopentylmethyl}pentaanzuur I O 0 ^ .

OH - 20 I Een oplossing van de diester van bereiding 90 (170 I 25 mg, 0,29 mmol) in dioxaan (2 ml) werd behandeld met 2M na- triumhydroxideoplossing (2 ml) en het reactiemengsel.gedu- I rende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactie- I mengsel werd aangezuurd met 0,5M zoutzuur tot pH=l en ge- I extrahe.èrd met ethylacetaat (1x80 ml, lx 20 ml). De orga- I 30 nische vloeistoffen werden gecombineerd, gewassen met ge- I concentreerde zoutoplossing, gedroogd op magnesiumsulfaat I en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd I azeotropisch ingedampt uit tolueen voordat werd opgèlost I in dichloormethaan (2 ml). Het reactiemengsel werd behan- I 35 deld met trifluorazijnzuur (1 ml) en gedurende 40 min. ge- I roeid bij kamertemperatuur, meer trifluorazijnzuur (1 ml) werd toegevoegd en het reactiemengsel gedurende nog 30 ex-.

69 tra minuten geroerd. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en azeotropisch ingedampt uit tolueen. Het onzuivere product werd gezuiverd doör kolomchromatografie. over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloorme-5 thaan:methanol:azijnzuur (97,5:2,5:0,5), hetgeen het ti-télproduct opleverde; 19 mg.

[a}= -16,55° (1,10 mg/ml) in methanol.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,81 (t, 3Hj, 1,13-1,64 (m, 10H), 1,92 (m, 1H), 1,97-2,17 (m, 3H), 2,29 (m, 1H) , 3,49 (dd, 10 1H), 3,62 (dd, 1H),'4,99 (m, 1H), 7,46 (m, 3H), 8,04 (m, 2H) ; MS ES-: m/z=442 [M-H]".

Voorbeeld 42 15 (2S)-2-{l-[(IS)-l-Carboxy-2-(3-fenyl-[1.2.4]oxadiazool-5- yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzure ethylester 20 ..

Q

25 O—/ d

O

OH

30

De diester van bereiding 104 (90 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van 10% Pd/C (10 mg) in ethanol (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 2 uur bij kamertemperatuur geroerd onder een druk van 50 psi waterstof. Het' reactie-35 mengsel werd gefiltreerd door Arbocel, er werd gewassen met ethanol en in vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij 1025 J18- I werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat = 70:30 en vervol- I gens opnieuw door kolomchromatografie over silicagel met B dichloormethaan:methanol:azijnzuur = 95:5:0,5. Hét onzui- B vere product, werd verhit in 10% kaliumcarbonaatoplossing B 5 en pentaan:ethylacetaat. = 90:10 toegevoegd. Het reactie- B mengsel werd gefiltreerd door katoenwatten en de waterlaag B afgescheiden. De waterlaag werd aangezuurd mét 2M 'zoutzuür B en geëxtraheerd met ethylacetaat (10 ml). De organische B laag werd gedroogd, op magnesiumsulfaat> gefiltreerd en in B 10 vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz) :.1,20 (t, 3H), 1,39-1,69 (m, 7H), I 1,82 (m, 2H), 2,09 (m, 3H), 2,47 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), .

I -3,48 (m, 3H), 3,62 (m, 3H), 4,04 (m, 2H), 5,06 (m, 1H), I 7,23 (m, 2H), 7,48. (m, 3H), 8,01 (m, 1H) ; I 15 MS ES+: m/z=488 [MH]+.

I Bereiding 1 .

I (2S)-2-Benzyloxycarbonylaminobarnsteenzure 1-ethylester ’ CHa .

I 20 Η°γ° 0J

I T^°

I O^NH

25 30 Een oplossing van N-carbobenzyloxy-L-asparaginezuur- anhydride (100 g) in ethanol (600 ml) werd gedurende 18 uur gekookt onder terugvloeiing. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, opnieuw opgelost in ethylacetaat (250 ml) en geëxtraheerd in verzadigde natriumwaterstof-35 carbonaatoplossing (2x200 ml). De waterfase werd aangezuurd met 2M zoutzuur en het reactiemengsel geëxtraheerd in ethylacetaat (3x200 ml). De organische vloeistoffen 71 werden gecombineerd, gedroogd op magnesiumsulfaat en in ' vacuüm geconcentreerd. Het product werd opgèlost in ether (500 ml) en dicyclohexylamine (92 ml) toegevoegd, hetgeen een neerslag vormde dat werd verzameld door filtratie. De 5 vaste stof werd opnieuw opgelost in het minimale volume warme ethanol en geroerd tot zich een neerslag vormde dat werd verzameld door filtratie. De vaste stof werd vervolgens nog eenmaal herkristalliseerd uit ethanol. Het product werd gesuspendeerd in ether en gewassen met 2M zwa-10 velzuur (2x100 ml) . De organische oplossing werd gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde ; 22 g. Herhaalde herkristalli- · satie van de moederlogen, uit ethanol leverde nog 70 g op. 1H-NMR (DMSO-De, 400 MHz).: 1,16 (s, 3H) , 2,57 (d, 1H), 2, 65 . 15 (d, 1H), 4,06 (d, 2H), 4,39 (m, 1H), 5,02 (s, 2H), 7,11 (m, 5H), 7,71 (d, 1H).

Bereiding 2

Aziridine-l,2-dicarbonzurë (2S)-2-benzylester, 1-tert-bu-20 tylester

... . H3C

. >rCH8 O^O CHS

30 Aziridinê-(2S)-2-carbonzure benzylestér (Buil. Chem.

Soc. Japan, 51(5), 1577-1578, verbinding 3) (373 mg, 2,12 mmol) werd toegevöegd aan een oplossing van di-tert-butyldicarbonaat (508 mg, 2,33 mmol), trièthylamine (589 μΐ, 4,23 mmol) en 4-dimethylaminopyridine (enkele kristal-35 len) in dichloormethaan (20 ml), en· het reactiemengsel gedurende 7 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactie-mengsel werd gewassen met 2M zoutzuur (20 ml), gedroogd op 1025113- H magnesiumsulfaat en gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen- taan:ethylacetaat (90:10), hetgeen het titelproduct ople- H verde; 394 mg, 5 1H-NMR (CDC13, .400 MHz): 1,46 (s, 9H), 2,43 (m, 1H), 2;56 I (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 5,24 (m, 2H), 7,39 (m, 5H); I MS ÊS+: m/z=300 [MNa]+.

I Bereiding 3 I 10 3, 6-Diethoxy-(2R)-2-isopropyl-2,5-dihydropyrazine I . 15.

: OH3 I 20 I Boortriflüoride-diethylethercomplex (75,4 g, 396,6 mmol) werd in een kolf gebracht onder een deken van stik- I stof gas, gewassen met ether (200 ml en 100 ml) en opgelost 25 in dichloormethaan (600 ml). R-(-)-3-isopropyl-2,5- I piperazinedion (22,5 g, 144 mmol) werd portiegewijs aan de kolf toegevoegd en het reactiemengsel gedurénde 48 uur;ge- I . roerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd lang- zaam uitgegoten in een geroerde suspensie van natriumwa- I 30 terstofcarbonaatpoeder (100 g) in water en ijs (1000 ml).

I De organische laag werd afgescheiden, gewassen met geconr centreerde zoutoplossing (100 ml), gedroogd op magnesium- I sulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product I werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, I 35 waarbij werd geëlueerd met pentaan: ethylacetaat (60:40), hetgeen het titelproduct opleverde; 29,4 g.

73 XH-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,80 (d, 3H), 1,05 (d,. 3H), 1,30 (m, 6H), 2,25 (m, 1H), .4,00 (m, 3H),.4,10 (m, 3H), 4,20 (m, 1H); MS ES+: m/z=213 [MH]+.

5 '

Bereiding 4 1-[(2S)-2-(tert-Butoxycarbonyl)-4-methoxybutyl]cyclopen-taancarbonzure benzylester 10 . . . . . .

HsCs? ?h, S ΓΛ

HgC——O. A<C Jl 15 CH3 t ' 0. o 20 1-[ (2S)-2-(tert-Butoxycarbonyl)-4-methoxybutyl)cyclo- pentaancarbonzuur (6,0 g, 20 nunol) (WO 0279143, bladzijde 71, bereiding 69) werd opgelost in Ν,Ν-dimethylformamide (20 ml) en het reactiemengsel behandeld met cesiumcarbo-naat (8,02 g, 24,6 mmol) en gedurende 30 min. geroerd bij 25 kamertemperatuur. Benzylbromide (2,92 ml, 24,6 mmol) werd . toegevoegd en het reactiemengsel gedurende 18 uur onder stikstof geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdund met ethylacetaat (150 ml) en gewassen met water (2x100 ml) en verzadigde natriumwaterstofcarbonaatop-30 lossing (100 ml). De organische laag werd gedroogd op mag-nesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het ti-telproduct opleverde; 8,2 g.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,24 (s, 9H), 1,43-1,69 (m, 8H), 1,82 (m, 2H), 2,14 (m, 3H), 2,36 (m, 1H), 3,25' (m, 4H),. 35 5,14 (m, 2H), 7,38 (m, 5H); MS ES+: m/z=413 [MNa]+.

1025116- I Bereiding 5 Η 1-[(2S)-(2-Carboxv-4-methoxybutyl)cyclopentaancarbonzure benzylester II HlC\

h°>A->C'oxJO

I o I 15 Een oplossing van de tert-butylester van bereiding 4 I (8,19 g, 20 mmol) in dichloormethaan (80 ml) werd portie- I gewijs behandeld met trifluorazijnzuur (8 ml) en het reac- I tiemengsel gedurende 72 uur geroerd bij kamertemperatuur.

I Het reactiemengsel werd verdund met tolueen (100 ml) en in I 20 vacuüm geconcentreerd voordat aieotropisch werd ingedampt uit tolueen, ethylacetaat en ether, hetgeen het titelpro- I duet opleverde; 6,8 g.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,51 (m, 2H), 1,62 (m, 6H), 1,85.

I (m, 3H), 2,12 (m, 1H), 2,39 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), 3,36 I 25 (m, 2H), 5,08 (dd, 1H), 5,15 (dd, 1H), 7,36 (m, 5H); I MS ES+: m/z=357 [MNa]+.

1025116- 75

Bereiding 6 1-[4-Methoxy-(2S)-2-propoxycarbonylbutyl]cyclopentaanzure benzylester, 5

HaC^

3 O

Ό'ίΟ o jfjl 10 o o • 15 '

Een oplossing van het carbonzuur van bereiding 5 '(3,ff g, 11,4 mmol) in Ν,Ν-dimethylformamide.(12 ml) werd behandeld met cesiumcarbonaat (4,5 g, 13,7 mmol) en het reac-tiemengsel gedurende 1 uur geroerd bij kamertemperatuur. 20 1-Broompropaan (1,25 ml, 13,8 mmol) werd toegevoegd en het reactiemengsel gedurende 48 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdund met ethylacetaat (100 ml), gewassen met water (3x150 ml), gedroogd op mag-nesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het ti-25 telproduct opleverde; 3,95 g.

^-NMR (CDC13, 400 MHz) : 0,94 (t, 3H), 1,41-1,69 (m, 9H), 1,84 (m, 2H), 2,16 (m, 3H), 2,43 (m, 1H), 3,22 (m, . 5H), 3, 99 (m, 2H), 5,12 (m, 2H), 7,35 (m, 5H) ; MS ES+: m/z=399 [MNa]+.

30 De volgende verbindingen werden bereid uit het zuur van bereiding 5 door middel van de werkwijze van bereiding 6, waarbij het geschikte alkylhalogenide werd gebruikt.

1025118- I 76 I Bereiding 7 Η 1-[(2S)-(2-Butoxycarbonyl-4-methoxybutyl)]cyclopentaan- carbonzure benzylester 1.5 I h8c^ I 10 Η,Ι^λ. £—\ I . 0 0 I . 15 · I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,95 (t, 3H), 1,42-1,64 (ra, 11H), I 20 1,83. (m, 2H), 2,11 (m, 3H), 2,43 (m, 1H), 3,22 . (m, 5H), I 4,04 (m, 2H), 5,02 (dd, 1H), 5,14 (dd, 1H), 7,36 (m, 5H), I MS ES+: m/z=413 [MNa]\

Bereiding 8 I 25 1-[(2S)-(2-Ethoxycarbonyl-4-methoxybutyl)]cyclopentaan- carbonzure benzylester

HgC^ · I H3C\^0Vs^k>>3><C^

I O O

I 35 I 4 1 1R- 77 ^-NMR (CDC13/ 400 MHz): 1,27 (m, 3H), 1,42-1,79 (m, 9H), 1,86 . (m, 2H), 2,09 (m, 4H), 2,44 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 4,11 (m, 2H), 5,08 (dd, 1H), 5,14 (dd, 1H), 7,36 (m, 5H); MS ES+: m/z=385 [MNa]+.

5

Bereiding 9 1-(4-Methoxy-(2S)-2-propoxycarbonylbutyl)cyclopentaan-carbonzuur 10 S o

°v^>V0H

15 O * ’O ' 20 10% Pd/C (100 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van de benzylester van bereiding 6 (1,0 g, 2,7 .mmol) in tetrahydrofuran (5 ml) en het reactiemengsel gedurènde 48 uur geroerd onder een water stof druk van 50 psi. Het reac-tiemengsel werd gefiltreerd door Arbocel®, gewassen met 25 dichloormethaan en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 0,77 g.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,96 (t, 3H), 1,24-1,92 (m, 10H), . 2,14 (m, 4H), 2,56 (m, 1H), 3,30 (s, 3H), 3,38 (m, 2H), 3,98 (m, 2H); 30 MS ES+: m/z=309 [MNa]+.

De volgende verbindingen werden bereid door middel van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd beschreven in bereiding 9, waarbij de geschikte benzylester als uitgangsmateriaal werd gebruikt.

35 1025116- I Bereiding 10 I It [ (2S) - (2-Butoxycarbonyl-4-inethoxybutv:l) ] cyclopentaan- carbonzuur I Hacx I ΓΛ I 10 I 0 0 I 15 I 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,90 (t, 3H), 1,40 (m, 3H), 1,52- I 20 1,77 (m, 8H), 1,83 (m, 2H), 2,15 <m, 4H), 3,27 (s, 3H), I 3,36 (m, 2H), 4,01 (m, 2H); I MS ES+: m/z=323 [MNa]+.

I Bereiding 11 25 1-[(2S) -(2-Ethoxycarbonyl-4-methoxybutyl)]cyclopentaan- carbonzuur H3C-n 30 /-, O HO^0 35 1iA.

79

Deze verbinding werd bovendien gezuiverd door kolom-chromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat:azijnzuur=80:20:1, hetgeen het titel-product opleverde.

5 [a]- -12,97°; 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz) : 1,24 .(t, 3H), 1,43 (m, 1H), 1,56 (m, 1H), 1,63-1,78 (m, 5H), 1,81-1,93 (m, 2H), 2,10 (m, 5H), 2,53 (m, 1H), 3,06 (s, 3H), 4,09 (m, 2H); MS ES+: m/z=295 [MNa]+.

10

Bereiding 12 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-N-(l-methyl-2-oxo-2-fenyl-ethyl)succinaminezure ethylester 15 .0 ... *H.

.0.

25

Thionylchloride (4,4 ml, 60 mmol) en N,N-dimethyl-formamide (1 druppel) werden toegevoegd aan een oplossing van het zuur van bereiding 1 (4,22 g, 15 mmol) in dichloormethaan (50 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 30 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en het product (1 g, 3 mmol) opgelost in dichloormethaan (10 mi). Hieraan werd een oplossing van 2-amino-l-fenylpropaan-l-on (EP. 51234, blz. 17, bereiding b) (3 mmol) en triethylamine (0,94 μΐ, 6 mmol) 35 in dichloormethaan (10 ml) toegevoegd die was gekoeld tot 0°C. Het reactiemengsel werd gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdund met 1025118- H dichloormethaan (30 ml), gewassen met 2M. zoutzuur (40 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd.

Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromato- grafie, waarbij werd geëlueerd met pentaanrethylacetaat 5 (66:33 tot 33:66), hetgeen het titelproduct opleverde; 918 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,23 (m, 3H), 1,38 (d, 3H), 2,77 (m, 1H), 2,99 (m, 1H), 4,18 (m, 2H), 4,58 (brs, 1H), 5,13 I (s, 2H), 5; 51 (m, 1H), 5,96 (brm, 1H), 6,69 (brm, 1H), I 10 7,32 (m, 5H), 7,45 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7,92 (d, 2H); MS APCI: m/z=427 [MH]+.

De volgende verbindingen werden bereid door middel van de werkwijze die werd beschreven in bereiding 12, waarbij het zuur van bereiding 1 en het geschikte aromati- 15 sche amine werd gebruikt.

I Bereiding 13 I (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-N- [2- (4-fluorfenyl) -2-oxo- I ethyl]succinaminezure ethylester 20 I IJ.

I 25 ] F

I ίχΜ'-; I 30 I Het gebruikte amine was 2-amino-l-(4-fluorfenyl)- ethanon (US 4049650, blz. 4, voorbeeld VIA], [a]=* -10,67°.

35 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,21 (t^ 3H) , 2,85 (d, 1H), 3,02 (d, 1H), 4,20 (m, 2H), 4,61 (m, 1H),'4,65 (s, 2H), 5,14 81 (s^ 2H) , 6,00 (m, 1H), 6,68 (m, 1H), 7,16 (t, 2H), 7,32 (s, 5H), 7,94 (m, 2H); MS APCI: m/z=431 [MH]+.

5 . Bereiding-14 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-N-(2-oxo-2-fenylethyl)-succinaminezure ethylester 10

JL

15 (j^° "l ^ 20 Deze verbinding werd gewassen met verzadigde natrium- waterstofcarbonaatoplossing (100 ml).

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,23 (m, 3H), 2,86 (d, 1H), 3,05 (d, 1H) , 4,21 (m, 2H), 4,63 (s, 1H), 4,71 (s, 2H), 6,00 (s, 1H), 6,63 (s, 1H), 7,11-7,66 (brm, 8H), 7,93 (d, 2H); 25 MS ES+: m/z=435 [MNa]+.

102511e- I 82 I Bereiding 15 I 4-(Ν'-Benzoylhydrazino)-(2S)-2-benzyloxycarbonylamino-4- I oxoboterzüre ethylester

I O O

I 15 I Het gebruikte amine was benzoylhydrazine (Inorganics I . Chemica Acta, 1995, 231 (1-2), 237-239). De in plaats van I triethylamine gebruikte base was pyridine. Het oplosmiddel I voor de reactie was ether en deze werd uitgevoerd bij 0°C.

I 20 I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz) : 1,22 (t, 3H), 2,96 (dd, 1H), 3,07 I (dd, 1H), 4,13 (m, 1H), 4,22 (m, 2H), 5,10 (m, 2H), 6,09 I (m, 1H), 7,27 (m, 5H), 7,42 (m, 2H), 7,58 (m, 1H), 9,03 I (m, 1H), 9,16 (m, 1H); I 25 MS ES+: m/z=436 [MNa]+.

1025118- 83

Bereiding 16 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-N-[2-(4-chloorfenyl)-2-oxo-ethyl]succinaminezure ethylester 5 10 . O Hfi 15 '

Een oplossing van het zuur van bereiding 1 (9 g, 19,5 iranol) in dichloormethaan (60 ml) werd behandeld met thio-nylchloride (.5,5 ml, 78,3 mmol) en N,N-dimethylformamide (1 druppel) en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd 20 bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens in vacuüm geconcentreerd, hetgeen een gele olie opleverde.

2-Amino-1-(4-chloorfenyl)ethanon (ÜS 4049650, bladzijde 5, voorbeeld VII) (4 g, 23,4 mmol) werd opgelost in dichloormethaan (60 ml), gekoeld tot 0°C en behandeld met 25 triethylamine (6,5 ml, 46,8 mmol). Dit werd toegevoegd aan.

de gele olie en het reactiemengsel gedurende 6 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd gewassen met 2M zoutzuur (40 ml) en verzadigde natriumwaterstofcarbo-naatoplossing (30 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in 30 vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde. 1 1025116* H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,26 (t, 3H), 2,84 (d, 2H) , 4,20 (m, 2H), 4,62 (m, . 1H), 4,70 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 7,21-7,39 (brm, 5H), 7,43 (d, 2H), 7,88 (d, 2H); 35 MS ES+: m/z=469 [MNa]+.

I 84 I Bereiding 17 (3S) -3-Benzyloxycarbonylamino-4- (2-oxo-2-fenylethylcarba- I moyl)boterzure methylester I o. / ^ ^ o i

I 10 .. X J

I ij ° 'S'V/S' o I 15 I Deze verbinding werd bereid door middel van de werk- I wijze die werd beschreven in bereiding 16 met -(S)- ben- I zyloxycarbonylaminoglutaarzure monomethylester en 2-amino- I 1-fenylethanon en zuiveren van het onzuivere product door I 20 kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd I met pentaan:ethylacetaat=66:33 tot 33:66. Het product werd I vervolgens fijngewreven in ether, hetgeen de titelverbin- I ding gaf.

I [a]= -5,46°.

I 25 1H-NMR (DMS0-D6, 400 MHz): 2,41 (m, 2H), 2,58 (m, 2H), 3,54 I (s, 3H), 4,18 (m, 1H) , 4,55 (dd, 1H), .4,61 (dd, 1H), 4,97 I (m, . 2H),. 7,36 (m, 5H), 7,52 (m, 2H), 7,64 (m, 1H);, 7,95 I (m, 2H), 8,28 (m, 1H); I MS ES+: m/z=435 [MNa]+.

I 30 I 1noR11 85

Bereiding 18 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-N-((2S)-2-hydroxy-l-fenyl-ethyl)succinaminezure benzylester 0=\ 10 ou η \

XWJO

3 CH. H

• O .

15 (2S)-2-Amino-2-fenylethanol (0,44 g, 3,2 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van (2S)-2-tert- butoxycarbonylaminobarnsteenzure 1-benzylester (0,87 g, 2,7 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide-20 hydrochloride (0,52 g, 2,7 mmol), 1-hydroxybenzo-triazoolhydraat (0,36 g, 2,6 mmol) en 4-methylmorfoline (0,74 ml, 6,7 mmol) in dichlo.ormethaan (25 ml), en het re-actiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdund met dichloormethaan 25 (20 ml), gewassen met 2M zoutzuur (30 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloormethaan: methanol (95:5), hetgeen het titelproduct opleverde; 30 0,77 g.

1H-NMR (DMSO-De, 400 MHz) : 1,26 (s, 9H), 2, 60 (m, 2H), 3,48 (brs, 2H), 4,77 (m, 2H), 5,06 (s, 2H), 7,25 (m, 10H), 8,17-8,38 (m, 2H) ; MS ES+: m/z=465 [MNa]+.

10251 ί g- .35 I Bereiding 19 I Methyl-(2S)-4-({[(1Z)-amino(fenyl)methyleen]amino)oxv)-2- [(tert-butoxycarbonyl)amino]-4-oxobutanoaat I ? NHa .

I 10 HsC\/CH=S · l· 0 Ί^1\ o · I 15 I Een oplossing van (2S)-2-tert-butoxycarbonylamino- I .barnsteenzure 1-benzylester (2,16 9/ 6,68 nmol) in I dichloormethaan (10 ml) werd behandeld met N-hydroxy- I benzamidine (1 g, 7,34 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3- 20 ethylcarbodiimidehydrochloride (1,41 g, ‘ 7,34 mmol), 1- I hydroxybenzotriazoolhydraat (991 mg, 7,34 mmol) en 4.- I methylmorfoline (1,1 ml, 10 mmol), en het reactiemengsel I gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reac- I tiemengsel werd verdund met dichloormethaan (100 ml) en I 25 gewassen met verzadigde natriumwaterstofcarbonaatoplossing I (50 mij en geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). De orga- I nische laag werd gedroogd op magnesiumsulfaat, in vacuüm I -geconcentreerd en azeotropisch ingedampt uit ether. Het I vaste product werd fijngewreven met diisopropylether (30 I 30 ml) en methanol (1,5 ml) en vervolgens herkristalliseerd uit ethylacetaat, hetgeen het titelproduct opleverde.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,41 (s, 9H), 1,59 (m, 2H), 3,08 I (dd, 1H), 3,20 (dd, 1H), 5,78 (m, 1H), 5,24 (m, 2H), 5,56 I (m, 1H), 7,37 (m, 5H), 7,48 (m, 3H), 7,69 (m, 2H); I . 35 MS ES+: m/z=464 [MNa]+.

I 1025116- .87

Bereiding 20 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-N-(2-hydroxy-(IR)-1-fenyl-ethyl)succinaminezure ethylester

De titelverbinding werd bereid uit het zuur van be-5 reiding 1 en 2-amino-2-fenylethanol · door de procedure te volgen die werd beschreven in bereiding 19.

Q

° \

OH

is [QpAVu, [a]« +12/45°.

20 1H-IÏMR (CDC13, 400 MHz): 1,18 (m, 3H) , 1,76-1,97 (m, 3H), 3,79 (m, 2H), 4,09 (m, 2H), 4,58 (m, 1H), 4,99 (m, 1H), 5,12 (m, 2H), 6, 08 (m, 1H), 6,57 (m, 1H), 7,19-7,38 (m, 10H), MS ES+: m/z=»851 [M2Na]\ 25 Bereiding 21 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-N-((IR)-l-hydroxymethyl-3-methylbutyl)succinaminezure benzylester \

OH

30 0=.NH CH, ckv o 1025116- H (2S)-2-tert-Butoxycarbónylaminobarnsteenzure 1-ben- zylester (3,43 g, 10,6 mmol) en (R)-(-)-leucinol (1,49 g, 12,7 mmol) werden toegevoegd aan een oplossing van l-(3- dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride I 5 (2,44 g, 12,7 mmol), 1-hydroxybenzótriazoolhydraat (1,75 g, 12,7 mmol) en 4-methylmorfoline (2,9 ml, 12,7 mmol) in dichloormethaan (30 ml). Het reactiemengsel werd vervol- gens gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd verdund met ethylacetaat (100 ml) en I 10 gewassen met 2M zoutzuur (100 ml), vervolgens gedroogd op I magnesiumsulfaat en in vacuüm gèconcentreerd. Het onzuive- I re product werd gezuiverd door kolomchromatografié over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloormethaan: me- I thanol (95:5)/ hetgeen het titelproduct opleverde; 3,0 g, 15 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,87 (m, 6H); 1,29 (m, 2H), 1,35 I (s, 9H), 1,53 (m, 1H); 2,88 (m, 2H) / 3,41 (m, 1H), 3,57 I (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 5,14 (m, 2H), 5,77 I (m, 2H), 7,31 (m, 5H); I MS TSP+: m/z=424 [MH]+.

I 20 I Bereiding 22 I (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-N-((IR)-1-hydroxymethyl- I propyl)succinaminezure benzylester I De titelverbinding werd gemaakt met (R)-2-amino-l- I 25 butanol en (2S)-2-tert-butoxycarbonylaminobarnsteenzure I benzylester door de bereiding te volgen die werd beschre- I ven in bereiding 21.

I 30

I NH

35 OH, Η I

89 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,86 (t, 3H), 1,40 (s, 9H), 1,49 (ra, 2H), 2,63-2,89 (m, 2H), 3,40 (ra, 2H), 3,75 (m, 1H), 4,49 (m, 1H), 5,12 (m, 2H), 6,79 (ra, 1H), 5,94 (m, 1H), 7,31 (m, 5H); 5 MS ES+: m/z=417 [MNa]+ .

Bereiding 23 (2S)-2-tert-Butoxvcarbonylamino-N-(2-oxo-(1R)-1-fenyl-ethyl)succinaminezure benzylester 10

JUOyJO

8 o 20

Dess-Martin-perjodinaan (2,1 g, 4 mmol) werd toegê-voegd aan een oplossing van de alcohol van bereiding 18 (1,47 g, 3 mmol) in dichloormethaan (20 ml). Er vormde 25 zich een witte suspensie en het reactiemengsel en het reactiemengsel werd gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd behandeld met natriumthio-sulfaatoplossing in water (2 g in 20 ml)/ verzadigde na-triumwaterstofcarbonaatoplossing in water (20 ml) en ether 30 (40 ml). Het reactiemengsel werd geroerd tot de oplossing helder wérd. De organische vloeistoffen werden gecombineerd, gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (20 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd doof kolom-35 chromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat= 2:1 tot 1:1.

1025113- I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,42 (s, 9H), 3,31 (d, 2H), 4,84 I (brs, 1H), 5,18 (d, 2H), 5,69 (brd, lfl), 7,34 (m, 2H), I 7,40 (s, 3H), 7,53 (m, 2H), 7,64 (d, 2H), 7,79 (s, 1H), I 8,24 (m, 2H), 9,04 (m, 1H); I 5 MS TSP+: m/z=441 [MH]+.

Bereiding 24 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-N-(2-oxo-(lRV-l-fenyl- H ethyl)succinaminezure ethylester I 10

I ’ O

15 O H 0 I ° I 20

Dess-Martin-perjodinaan (2,92 g, 6,89 mmol) werd por- I tiegewijs toegevoegd aan een oplossing van de alcohol van I bereiding 20 (1,9 g, 4.6 mmol) in dichloormethaan (30 ml) 25 en het reactiemengsel gedurende 3 uur geroerd bij. kamer- I temperatuur. Waterige oplossingen van natriumthiosulfaat I (4 g in 20 ml) en natriurawaterstofcarbonaat (30 ml) werden I vervolgens toegevoegd en het reactiemengsel werd geroerd I tot zich een oplossing vormde. Ether (100 ml) werd aan het 30 reactiemengsel toegevoegd, de organische laag afgescheiden I en gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (50 ml). Het reactiemengsel werd gedroogd op natriumsulfaat en in vacuum geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 1,9 g· 35. 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,1-4 (t, 3H), 2,83 (dd, 1H), 3,03 (dd, 1H), 4,08 (m, 2H), 4,55 (m, 1H), 5,12 (m, 2H), 5,52 1n 9 S11R- 91 (m, 1H), 4/96 (m, 1H), 6,76 (m, 1H), 7,21-7,42 (m, 10H), 9,58 (m, 1H) ; • . MS ES+: m/z=435 [MNa]t.

De volgende verbindingen werden gemaakt door middel 5 van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd beschreven in bereiding 24, waarbij de geschikte uitgangs-alcohol werd gebruikt.

Bereiding 25 10 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-N-((IR)-l-formyl-3-methyl- butyl)succinaminezure benzylester

Vy^ ' · _ -NH ch,

CH3 O

Het onzuivere product werd bovendien gezuiverd door 25 kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd. geëlueerd met ethylacetaattpentaan (50:50), hetgeen het titelproduct opleverde.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,89 (m, 6H), 1,37 (s, 9H), 1,62 (m, 3H), 2,88 (m, 1H), 2,91 <m, 1H), 4,47 (m, 2H), 5,14 30 (m, 2H), 5,66 (m, 1H), 6,00 (m, 1H), 7,27 (m, 5H), 9,46 (m, 1H); MS TSP+: m/z=421 JMH) + .

1025116- H Bereiding 26 H (2S)-2-tert-Butoxvcarbonylamino-N-((IR)-1-formylpropyl)- succinaminezure benzylester I 5 I v^ch·

NH

I: “ ·χζ^οθ· I 0 I 15 I Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchro- I 20 matografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met I dichloormethaan:methanol (95:5).

I XH-NMR (CDC13/ 400 MHz) : 0,92 (t, 3H),, 1,39 (s, 9H), 1,66 I (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 2,82 (dd, 1H), 2,96 (dd, 1H), 4,43 I (in, 1H), 4,58 (m, 1H), 5,18 (m, 2H), 5,69 (m, 1H), 6,24 I 25 (m, 1H), 7,32 (m, 5H), 9,50 (m, 1H); I MS TSP+: m/z=393 [MH)+.

1 η·?*» 1 1 ft- 93

Bereiding 27 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-methyl-5rfenyloxa2ool-2-yl)propion2ure ethylester 5 N·—---/ 10 hTl

° V

^CH, 15

Fosforoxychloride (671 μΐ, 7 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van het amide van bereiding 12 (1,025 g, 2 mmol) in tolueen (15 ml) en het reactiemengsel gedurende 20 90 min. geroerd bij 100°C. Het reactiemengsel werd uitge goten over ijs (20 ml), geëxtraheerd in. dichloormethaan (2x50 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie, waarbij werd geëlueerd met pen-25 taan:ethylacetaat (80:20 tot 66:33), hetgeen het titelpro-duct gaf; 598 mg.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,20 (m, 3H), 2,37 (s, 3H), 3,21-3,41 (brm, 2H), 4,11 (m, 2H), 4,78 (brs, 1H), 5,14 (s, 2H), 5,92 (s, 1H), 7,38 (m,, 8H), 7,50 (m, 2H) ; 30 MS ES+: m/z=431 [MNa]+.

De volgende verbindingen werden gemaakt door middel van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd beschreven in bereiding 27, waarbij de geschikte precursor van de heteroring werd gebruikt.

35- 1025116- I 94 I Bereiding 28 Η (2S) -2-Benzyloxycarbonylairtino-3- [5- (4-fluorfenyl) oxazool- 2-yl]propionzure ethylester ’ I /° I ^ %-o I '10 To I 0 v I 15 I 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,21 (t, 3H), 3,25-3,42 (brm, 2H), I 4,19 (m, 2H), 4,80 (brs, 1H), 5,11 (s, 2H), 5,96 (brs, I 1H), 7,08 (m, 3H), 7,31 (m,. 5H), 7,54 (m, 2H) ; I MS ES+: m/z-435 [MNa]+.

I 20 I Bereiding 29 (2S) -2-Benzylox'ycarbonylainino-3- (5-fenyloxazool-2-yl) - I propionzure ethylester I 25 I r~i Jb' I 30 . ηΛ_; I y\ . 0 \—CHa 35 95 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,20 (m, 3H)', 3,40 (ro, 2H), 4,21 (m, 2H), 4,82 (s, 1H), 5,13 (s, 2H), 5,96 (d, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,21-7,42 (brm, 10H); MS ES+: m/z=811 [M2Na]+.

5

Bereiding 30 (3S)-3-Benzyloxvcarbonylamino-4-(5-fenyloxazool-2-yl)-boterzure methylester io .

15 \ \γ^°κ if 'cH.

O

20

Na koelen tot 0°C werd het reactiemengsel geëxtraheerd in ethylacetaat (40 ml) en vervolgens gewassen met een verzadigde natriumwaterstofcarbonaatoplossing (30 ml). 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 2,72 (m, 2H), 3,21 (m, 2H), 3,68 25 (s, 3H), 4,14 (m, 1H), 5,08 (m, 2H), 5,77 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,22-7,41 (m, 10H); MS ES+: m/z=395 [MH]+.

1025116- I 96 I Bereiding 31 I (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-[5-(4-chloorfenyl)oxazool- I 2-yl)propionzure ethylester I LX o

I °L J

I 10 /r° I 0 ^-CH, I 15 I Fosforoxychloride (3f6 ml) werd toegevoegd aan een I oplossing van het amide van bereiding 16 (8,62 g, 19,3 I mmol) in tolueen (150 ml) en het reactiemengsel gedurende I . 1 uur geroerd bij 100°C. Het reactiemengsel werd uitgego- 20 ten over ijs (20 ml), geëxtraheerd in dichlóormethaan (400 I ml en 200. ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm I geconcentreerd. Ether (100 ml) werd toegevoegd, het reac- I tiemengsel geschud en in vacuüm geconcentreerd. Het onzui- I vere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over I 25 silicagel, waarbij werd geëlueerd met pehtaan:ethylacetaat I (80:20 tot 50:50). De juiste fracties werden opnieuw ge- zuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij I werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat (80:20 tot 75:25 I tot 66:33 tot 50:50), hetgeen het titelproduct opleverde.

I 30 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,24 (t, 3H), 3,34-3,49 (brm, 2H), I 4,20 (m, 2H), 4,82 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,93 (d, 1H), I 7,19 (s, 1H), 7,24 (s, 5H), 7,37 (m, 2H), 7,46 (d, 2H); I MS APCI: m/z=429 [MH]+.

I 1025116- 97

Bereiding 32 (2S)-2-tert-Butoxvcarbonylamino-3-(4-fenyloxazool-2-yl)-propionzure benzylester

' O

10 0 \ 9«. fi 1 L J) η,οΛ^κ'Ι0

CH3 O

15

Een oplossing van trifenylfosfine (1,3 g, 4,96 mmol), triethylamine (1,3 ml, 9,34 mmol) en jood (1,1 g, 4,34 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) werd gekoeld tot -78°C. Een oplossing van het amide van bereiding 23 (0,96 g, 2,18 20 mmol) in tetrahydrofuran (7 ml) werd toegevoegd en het re-actiemengsel gedurende 1 uur geroerd bij -78°C. Het reac-tiemengsel werd vervolgens gedurende 1 uur bij -20°C en vervolgens gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het reactiemengsel werd verdund met dichloormethaan (50 25 ml), gewassen met natriumthiosulfaatoplossing (50 ml) en 2M ζο^ζυμΓ (50 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat (80:20), hetgeen het 30 titelproduct opleverde; 230 mg.

1H-NMR (CDCls, 400 MHz): 1,43 (s, 9H), 3,29 (m, 2H), 4,83 (m, 1H), 5,18 (m, 2H), 5,68 (m, 1H), 7,47 (m, 7H), 7,74 (m, 3H), 7,79 (m, 1H); 35 MS TSP: m/z=423 [MH]+.

1025118- I 98 I Bereiding 33 I (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(5-fenyl-[1.3.41oxadia- I zool-2-yl)propionzure ethylester

I ; P

I °-^ rVN

I 10 tr\ I cT£ ^~CH3 l l5 I Het amide van bereiding 15 (650 mg, 1,6 mmol) werd I opgelost in dichloormethaan (10 ml) en het reactiemengsel I behandeld met 2-chloor-l,3-dimethyl-4,5-dihydro-3H-imida- I zool-l-ium tetrafluorboraat (657 mg, 2,4 mmol) en I 20 triethylamine (445 μΐ, 3,2 mmol). Het reactiemengsel werd I gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur voordat in I vacuüm werd geconcentreerd. Het onzuivere product werd ge- I zuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij I werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat (100:0 tot 50:50).

I 25 Het verzamelde product werd opgelost in tolueen en gedu- I rende 8 uur verhit tot 80 °C. Het reactiemengsel' werd in I vacuüm geconcentreerd en het residu opgelost in dichloor- I methaan (10 ml) voordat werd gewassen met 2M zoutzuur (5 I ml) en verzadigde natriumwaterstofcarbonaatoplossing (5 I 30 ml) . Het· reactiemengsel werd vervolgens gedroogd op magne- I siumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere I product werd gezuiverd door kolomchromatografie over sili- I cagel, waarbij werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat I (90:10 tot' 80:20), hetgeen het titelproduct opleverde; 12 I 35 mg.

I 1 n?511R- 99 XH-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,25 (t, 3H)‘, 3,49 (m, 2H), 4,22 (m, 2H), 4,87 (m, 1H), 5,16 (m, 2H), 5,87 (m, 1H), 7,32 (m, 5H), 7,51 (m, 3H) , 7,99 (m, 2H); MS ES+: m/z=813 [M2Na]\ 5

Bereiding 34 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-(3-fenyl-Γ1.2.4]oxadia-zool-5-yl)propionzure benzylester 10 20

Het amide van bereiding 19 (815 mg) werd gedurende 5 uur verhit tot 114 °C en vervolgens liet men de gesmolten vaste stof afkoelen tot kamertemperatuur. Het product werd fijngewreven met pentaan:ether, hetgeen het titelproduct 25 opieverde; .693 mg.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,44 (s, 9H), 3,48 (dd, 1H), 3,47 (dd, 1H), 4,92 (m, 1H), 5,20 (m, 2H), 5,61 (m, 1H), 7,25 (m, 5H), 7,51 (m, 3H), 8,02 (m, 2H) ; ^ MS ES+: m/z=446 [MNa]+.

30 1025116- I 100 I Bereiding 35 H (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(4-fenyloxazool-2-yl) - I propionzure ethylester I 10 // V—CH.

I O

I 15 I 2, 6-Di-tert-butylpyridine (1,4 ml, 6,1 mmol), 1,.2- I dibroomtetrachloorethaan (1,98 g, 6,1 mmol) en trifenyl- I fosfine (1,59 g, 6,1 mmol) werden toegevoegd aan een op- lossing van het amide van bereiding 24 (2,1 g, 5,1 mmol) I 20 in dichloormethaan (30 ml) en het reactiemengsel gedurende 30 min. geroerd bij kamertemperatuur. 1,8-Diazabicyclo- I [5.4.0Jundec-7-een (910 μΐ, 6,1 mmol) werd toegevoegd en I het reactiemengsel gedurende nog 50 min. geroerd. Het re- I actiemengsel werd verdund met dichloormethaan (50 ml), ge- 25 wassen met 2M zoutzuur (30 ml), natriumwaterstofcarbonaat- I opossing (30 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (30 ml), I gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd.

Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromato- I grafie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met ethyla- 30 cetaatrpentaan (20:80 tot 30:70), hetgeen het titelproduct opleverde; 700 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,22 (m, 3H), 3,33 (m, 1H), 3,41 I (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 4,81 (m, 1H), 5,12 I (m, 2H), 7,24-7,42 (m, 8H), 7,66 (m, 2H), 7,82 (m,' 1H) ; I 35 MS ES-: m/z=393 [M-H)‘.

I 1025116- 101

De volgende verbindingen werden gemaakt met de bereiding die werd beschreven in bereiding 35 en de geschikte precursor van de heteroring.

5 Bereiding ,36 (2S)-2-tert-Butoxycarbonyramino-3-(4-isobutyloxazool-2-yl)propionzure benzylester /CH» 10 ,_/ \ /==^ CH.

Y Λ ” u s i 20 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,91 (d, 6H), 1,24 (m, 1H) , 1,41 (s, 9H) , 2,29 (m, 2H), 3,20 (m, 1H), 3,28 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 5,15 (m, 2H), 5,59 (m, 1H), 7,32 (m, 5H); MS ES+: m/z=403 [MH]\ 25 Bereiding 37 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamiho-3-(4-ethyloxazool-2-yl)-propionzure benzylester .CH3

A

dS Kil·

35 CHs O

1025116- 102 I ^-NMR (CDC13, 400 MHz) : 1,17 (t, 3H), 1,40 (s, 9H), 2,46 I (m, 2H), 3,20 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 4,76 (m, 1H), 5,16.

(m, 2H), 5,59 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,33 (m, 5H); I MS ES+: m/z=375 [MH]+.

I Bereiding 38 I 3, 6-Diethoxy- (2R) ^-isopropyl- (5S) -5- (2-fenyloxazool-5-yl- I methyl)-2,5-dihydropyrazine I 10 jf)

I H.C

I \*\j I %,·( j H,c 0^\ * CH, I 20 I n-Butyllithium (3,4 ml, 5,46 mmol) werd druppelsge- wijs toegevoegd aan een oplossing van. het pyrazine van be- I reiding 3 (1,05 g, 4,97 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) van -60°C en het reactiemengsel gedurende 1 uur geroerd.

I 2,5 Een oplossing van 5-broommethyl-2-fenyloxazool (J. Chem.

I Sóc. Perkin Trans., 1, 1984(2), 255-260> verbinding 19) I (1,3 g, 5,46 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) werd bij -60°C druppelsgewijs aan het reactiemengsel toegevoegd en men liet het reactiemengsel gedurende 18 uur opwarmen tot 30 kamertemperatuur. De reactie werd afgebroken met ammonium-chlorideoplossing (30 ml) en het mengsel geëxtraheerd in ethylacetaat (2x50 ml). De organische vloeistoffen werden gecombineerd, gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (50 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm gecon-35 centreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door ko-lomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd 1ηος11 --- 103 met pentaanrethylacetaat (95:5 tot 90:10), hetgeen het ti-telproduct opleverde; 1,33 g.

XH-NMR <DMSO-D6, 400 MHz): 0,60 (m, 3H), 0,91 (m, 3H), 1,20 (m, 3H), 1,26 (m, 3H), 2,15 (m, 1H), 2,83 (dd, 1H), 2,98 5 (dd, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,97-4,16 (brm, 4H), 4,24 (m, 1H), 7,51 (m, 3H), 7,79 (s, 1H), 7,91 (m, 2H); MS APCI: m/z=370 [MH)+.

Bereiding 39 10 (2R)-2-Isopropyl-3,6-dimethoxy-(5S)-5-(5-fenyl-[1.2.43- oxadiazool-3-ylmethyl)-2,5-dihydropyrazine o 15 O—/ n^n 20 I CH.

CH, 25 Deze verbinding werd bereid door middel van de werk wijze die werd beschreven in de bovenstaande bereiding 38, waarbij 2-isopropyl-3,6-dimethoxy-2,5-dihydropyrazine en 3-chloormethyl-5-fenyl[1.2.4]oxadiazool als de uitgangsmaterialen werden gebruikt.

30 1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,71 (m, 3H), 1,04 (m, 3H), 2,22 (m, 1H), 3,16 (m, 1H), 3,37 (m, 1H), 3,61 (s, 6H), 3,85 (m, 1H), 4,46 (m,lH), 7,57 (m, 3H), 8,09 (a, 2H); MS ES+: m/z=707 [M2Na]+.

1 0251 1 fti Μ 104 Η Bereiding 40 I 3/6-Diethoxy-(2R)-2-isopropyl-(5S)-5-(5-fenyloxazool-4-yl- methyl)-2,S-dibydropyrazine I 5 I 10

I CHS

I 15 I Deze verbinding werd bereid door middel van de werk- I wijze die werd beschreven in bereiding 38,-waarbij het py- I razine van bereiding 3 en 4-brpommethyl-5-fènyloxazool als de uitgangsmaterialen werden gebruikt.

I 20 JH-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,67 (d, 3H) , 1,04 (d, 3H), .1,11 I (m, 3H), 1,26 (m, 3H), 2,24 (m, 1H), 3,15 (dd, 1H), 3,37 I (dd, 1H), 3,74 (m, 2H), 3,92 (m, 1H), 4,06 (m,. 1H), 4,23 I (m, 1H) , 4,42 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,40 <m, 2H), 7,69 I (m, 2H), 7,81 (m, 1H); I 25 MS APCI: m/z=370 [MH]+.

Bereiding 41 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-(4-fenylimidazool-l- yl)propionzuur 105 5

/V

____ / —OH _/ /F 'y chschs 10 H 0 15 4-Fenylimidazool (265 mg, 1,84 mmól) werd toegevoegd aan een oplossing van (2-oxooxetaan-3-yl)carbaminezure tert-butylester (WO 9007111, bladzijde 37, stap 4) (370 mg, 1,84 mmol) in acetonitril (10 ml) én het reactiemeng-sel gedurende 5 dagen geroerd bij kamertemperatuur. 68 mg 20 witte, kristallijne, vaste stof werd verzameld door filtratie, en fijnwrijven van het reactiemengseï, gevolgd door filtratie leverden nog 100 mg op.

1H-NMR (CDC13, + TFA,: 400 MHz): 1,50 (s, 9H), 4,46 (m, 1H), .4,68 (dd, 1H), 4,80 (dd, 1H), 5, 82 (m, 1H), 7,21 (m, 1H), 25 7,32 (m, 1H), 7,39 (m, 2H), 7,61 (m, 2H), 8,64 (s, 1Ή); MS APCI: m/z*=332 [MH] + .

10251 IQ- I 106 H Bereiding 42 Η (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-(4-joodpyrazool-l-yl)- H propionzure benzylester I 5 , I Y\ I rif I 10 CH> 1 I 15 I 4-Joodpyrazool (0,84 g, 4 mmol) en boortrifluoride- I diethylethercömplex (1 druppel) werden toegevoegd aan een oplossing, van het product van bereiding 2 (0,8 g,. 3 mmol) I in dichloormethaan (10 ml) en. het reactiemengsel gedurende I 20 6 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel I werd in vacuüm geconcentreerd en gezuiverd door kolomchro- I matografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen- I taan:ethylacetaat =89:11 tot 80:20.

I MS ES+: m/z=494 [MNa)+.

I 25 1025116-

Bereiding 43 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-U-fenvlpyrazool-l-yl)- propionzure benzylester 107 5 CH.

O ^CH, 0X/jAo σ'Vo 15 ’

Tris(dibenzylideenaceton)dipalladium(O) (20 mg, 0,22 mmol) werd opgelost in N,N-dimethylformamide (5 ml) en het pyrazool van bereiding 42 (227 mg, 0,48 mmol) toegevoegd.

. Het reactiemengsel werd verhit tot 60eC en tri-^n-20 butylfenyltin (212 mg, 0,58 mmol) en koperjodide (20 mg) werden toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 90 min. geroerd bij 60eC .voordat het in vacuüm werd geconcentreerd en verdund met ether (20 ml) . Het reactiemengsel werd gewassen met 10% kaliumfluoride-oplossing, gedroogd 25 op magnesiumsulfaat en gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen-taanrethylacetaat (89:11 tot 80:20), hetgeen het titelpro-duct opleverde; 53 mg.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,44 (s, 9H), 4,58 (m, 1H), 4,67 30 (m, 2H), 5,17 (m, 1H), 5,21 (m,. 2H), 5, 64 (m, 1H), 7,18- 7,43 (m, 10H), 7,76 (m, 2H); MS ES+: m/z=444 [MNa]+.

1025116- I 108 I Bereiding 44 I (2S) -2-Benzyloxvcarbonylamino-3- (5-fenyloxazool-2-yl)- I propionzuur I i

10 ϋ Λ N

I h y°* I o I 15 I De este.r van bereiding 29 (1,5 g, 3,8 mmol) werd toe- gevoegd aan een 1M oplossing van natriumhydroxide (11,4 I ml) in methanol (40 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 I 20 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd I vervolgens in vacuüm geconcentreerd en gesuspendeerd in 2M · I zoutzuur (30 ml). Het product werd geëxtraheerd in ethyla- cetaat (2x50 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacu-, I xom geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 1,4 I .25 g.

I lH-NMR (CDC13, 400 MHz): 3,60 (m, 2H), 4,82 (m, 1H), 5,13 I .(rn, 2H), 5,96 (m, 1H), 7,30-7,44 (m, 9H), 7,57 (m, 2H); I MS ES+: m/z-367 [MH]+.

I 1025|.le-

Bereiding 45 (2S)-2-Amino-3-(2-fenvloxazool-5-yl)propionzure ethylester 109 5 T*2 lï~~\ °Ύ CH.

10 0,25M Zoutzuur (30 ml) werd toegevoegd aan een oplos-sing van het pyrazine van bereiding 38 (1,29 g, 3,5 mmol) 15 in tetrahydrofuran (30 ml) -en het reactiemengsel gedurende 5 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, basisch gemaakt mét natri-umwaterstofcarbonaatoplossing (60 ml) en geëxtraheerd in ethylacetaat (3x30 ml) . De organische vloeistoffen werden 20 gecombineerd, gewassen met geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromato-grafie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen-taan:ethylacetaat (50:50 tot 40:60 tot 30:70), hetgeen het 25 titelproduct opleverde; 567 mg.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,24 (t, 3H), 3,01 (dd, 1H), 3,19 (dd, 1H), 4,02 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 7,43 (m, 3H), 7,38 (m, 1H), 8,01 (m, 2H); MS ES+: m/z=283 [MNa]+.

30 1025116- I 110 H Bereiding 46 I (2S) -2-Amino-3- (5-"fenyl- [1.2 ♦ 4 j oxadiazool-3-vl) propionzure methylester °ν°Η3 ίο I 15 0,25M zoutzuur (15 ml) werd toegevoegd aan een oplos- sing van het pyrazine van bereiding 39 (417 mg, 1,22 mmol) I in tetrahydrofuran (3 ml) en het reactiemengsel stond ge- I durende 18 uur bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel I werd geëxtraheerd met ethylacetaat (2x10 ml) en de organi- I 20 sche extracten werden gewassen met verzadigde natriumbi- I carbonaatoplossing (10 ml), water (10 mij en geconcen- I treerde zoutoplossing (10 ml) . De oplossing werd gedroogd I op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het on- I zuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie I 25 over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloorme- I thaan:methanol (98:2), hetgeen het titelproduct opleverde; I 250 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 3,17 (dd, 1H), 3,32 (dd, 1H), 3,78 I (s, 3H), 4,07 (ra, 1H), 7,54 (m, 3H), 8,12 (m, 2H); I 30 MS ES+: m/z=248 [MH] + .

I 1 no*\ 1 1 ft-

Bereiding 47 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazool-4-yl)propionzure ethylester

Ill 5 , Λ o^V^CH, 10 *

Deze verbinding werd bereid door middel van de werk-15 wijze die werd beschreven in bereiding 46 uit het pyrazine van bereiding 40.

‘H-NMR .(.CDCls, 400 MHz): 1,21 (t, 3H), 2,20 (m, 2H), 3,18 (dd, 1H), 3,34 (dd, 1H), 4,06 (m, 1H), 4,13 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,65 (m, 2H), 7,88 (m, 1H); 20 MS APCI: 'm/z-261 [MH]+.

Bereiding 48 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-(4-fenylimidazool-l-yl)-propionzure ethylester 25 Λ v-or> H ° 35 1025116- 112

Ethanol (1 ml) werd toegevoegd aan een oplossing van het carbonzuur van bereiding 41 (135 mg,'0,41 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride (0,86 mg, 1,64 mmol), 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (0,61 5 mg, 0,44 mmol) en 4-methylmorfoline (165 mg, 1,64 mmol) in dichloormethaan (10 ml) en het reactiemengsel gedurendè 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd uitgegoten in water (50 ml) en geëxtraheerd met dichloormethaan (3x50 ml). De organische vloeistoffen werden ge- 10 combineerd, gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (50 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 161 mg.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,26 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 4,26 (m, 2H), 4,70 (m, 2H), 4,81 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 7,18 15 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,39 (m, 2H), 7,77 (m, 2H), 7,84 (m, 1H); MS ES+: m/z=382 [MNa]+.

Bereiding 49 · 20 (2S)-2-Benzyloxycarbonylamino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)- propionzure tert-butylester

25 f~X

30 ^ /r*0 f )cCH3

HgC CHS

35 10251 ie- 113

Het carbonzuur van bereiding 44 (1,4 g, 3,8 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van N,N'- dicyclohexylcarbodiimide (0,87 g, 4,2 inmol), dimethylpyri-dine-4-ylamine (50 mg, 0,41 mmol) en tert-butanol (1,1 g, 5 14,9 mmol) in dichloormethaan (20 ml) en het reactiemeng- sel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het react iemengsel werd gefiltreerd om de onoplosbare stoffen te verwijderen en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over sili-10 cagel, waarbij werd geëlueerd met pentaan:ethylacetaat (87,5:12,5 tot 80:20 tot 50:50), hetgeen het titelproduct opleverde; 980 mg.

lH-NMR (CDCls, 400 MHz) : 1,41 (s, 9H), 3,28 (dd, 1H), 3,41 (dd, 1H), 4,74 (m, 1H), 5,18 (m, 2H), 5,88 (m, 1H), 7,22 15 (m, 2H), 7,39 (m, 7H), 7,62 (m, 2H); MS ES+: m/z*=42l [M-H]".

Bereiding 50 (2S) -2-7\mino-3- [5- (4-fluorfenvl) oxazool-?2-yl]propionzure 20 ethylester

HjN N—r» 25 ° ( CH, 30 35 1025116- 114 H Een oplossing van waterstofbromide in azijnzuur .(1,1 H ml) werd toegevoegd aan een oplossing van het beschermde I amine van bereiding 28 (547 mg, 1,23 mmol) in azijnzuur I (1,1 ml) en het reactiemengsel gedurende 1 uur geroerd bij.

5 kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm gecon- I centreerd, verdund met ethylacetaat (20 ml) en geneutrali- I seerd met natriumwaterstofcarbonaatoplossing. De organi- sche laag werd afgescheiden, gedroogd op magnesiumsulfaat I en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd I 10 gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij I werd geëlueerd met ethylacetaat:dichloormethaan:metha- nol:ammoniumhydroxide (100:0:0:0 . tot 0:90:10:1), hetgeen het titelproduct opleverde; 180 mg.

I ^-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,22 (t, 3H), 3,05-3,36 (brm, 2H), 15 3,95 (m, 1H), 4,19 (m, 2H), 7,07 (m, 2H), 7,12 (m, 1H), I 7,56 (m, 2H); I MS ES+: m/z=301 [MNa]+.

I De volgende verbindingen werden gemaakt door middel van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd I 20 beschreven in bereiding 50, waarbij het geschikte, door I CBz beschermde amine werd gebruikt.

I Bereiding 51 I (2S)-2-Amino-3-(4-methyl-5-fenyloxazool-2-yl)propionzure I 25 ethylester I CH.

I HiN\ N-V * I <° I CH3 I 35 I 1 n OiM 1 115 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,22 (t, 3H)., 2,37 (2, 3H) , 3,13 (m, 1H), 3,22 (m, 1H) , 3,97 (m, 1H), 4,18 (m, 2H), 7,24 (m, 1H), 7,35 (m, 2H), 7,52 (m, 2H); MS ES+: m/z=297 [MNa)+.

.. 5 : '

Bereiding 52 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazooi-2-yl)propionzure ethyl-ester, hydrochloride 10

X

15 ^

20 Deze verbinding werd geïsoleerd na fijnwrijven met 2M

waterstofchloride in ether in plaats daarvan.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,09 (t, 3H), 3,22 (s, 2H), 4,32 (m, 3H), 7>21-7,74 (brm, 6H); MS ES+: m/z*»261 [MH] + .

25

Bereiding 53 (2S)-2-Amino-3-[5-(4-chloorfenyl)oxazool-2~yl]propionzure ethylester, hydrochloride 30 O ‘ CH, 35 1025116~ I 116 H Deze verbinding werd niet gezuiverd door kolomchroma- tografie, maar werd in plaats daarvan opgelost in I . dichloormethaan (40 ml), gewassen met waterstofchloride in H ether en in vacuüm geconcentreerd.

I 5 [a)= +31,82°.

I 1H-NMR (CDC13, 400. MHz): 1,24 (t, 3H), 3,52 (d, 2H), 4,31 I (m, 2H), 4,60 (t, 1H), 7,47 (d, 3H), 7,68 (d, 2H); I MS APCI: m/z=295 [MH]+.

I 10 Bereiding 54 I (3S)-3-Amino-4-(5-fenyloxa2QOl-2-yl)boterzure methylester I 15 7^ i CH, I 20 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 2,64 (m, 2H), 3,04 (m, 2H), 3,71 I 25 (s, 3H), 4,36 (m, 1H), 7,23 (m, 1H), 7,31 (m, 1H), 7,39 I (m, 2H), 7,58 (m, 2H); I MS ES+: m/z=261 [MH]+.

117

Bereiding 55 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)propionzuurhydro-bromide 5 10 15 Watérstofbromide in azijnzuur (1 mi) werd toegevoegd aan een oplossing van het met CBz beschermde amine van bereiding 44 (435 mg, 1,19 mmol) in azijnzuur (3 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Diethylether (5 ml) werd aan het reactiemengsel toe-20 gevoegd voordat het werd behandeld met. ©en ultrasoonbad, gefiltreerd en gedroogd onder hoog vacuüm, hetgeen het ti-telproduct opleverde; 410 mg.

1H-NMR (DMSO-De, 400 MHz): 3,41 (m, 2H), 4,4 4 (m, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,44 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7,71 (m, 2H), 8,40 25 (m, 3H); MS ES+: m/z=233 [MH]+. · 1025116“ I 118 I Bereiding 56 H (2S) -2-Amino-3- (5-fenyloxazool-2-yl)propionzure_' tert- H butylester

I /-'"K CH

I Λ·ίΚν^' I 10 h2n ^ o 15 I Een oplossing van het beschermde amine van bereiding I 49 (0,98 g, 2,3 mmol) in tetrahydrofuran (5 ml) werd be- handeld met 10% Pd/C (100 mg) en het reactiemengsel gedü- I rende 48 uur geroerd bij kamertemperatuur en 15 psi. Het I 20 reactiemengsel werd gefiltreerd door Arbocel®, nagewassen I met dichloormethaan en in vacuüm geconcentreerd. Het on- .zuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen- I taan:ethylacetaat= 50:50 tot dichloormethaan:methanol = I 25 95:5, hetgeen het titelproduct opleverde; 460 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,43 (s, 9H), 3,19 (dd, 1H), 3,37 I (dd, 1H), 3,99 (m, 1H), 7,22 (m, 2H), 7,26 (m, 1H), 7,37 I (m, 1H), 7,73 (m, 2H); I MS ES+: m/z-289 [MH]+.

I 30 I 1 Π 9 5 1 1 fi-

Bereiding 57 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyl-[1.3.4]oxadiazool-2-yl)propionzure ethylester 119 5 ' .

CH, 10

Het beschermde amine van bereiding 33 (200. mg, 5 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van 10% Pd/C (20 15 mg) in ethanol (7 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 uur bij kamertemperatuur geroerd onder een waterstofdruk van 50 psi. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door Arbo-cel® en in vacuüm geconcentreerd. Het product werd opnieuw opgelost in ethanol (5 ml), behandeld met meer Pd/C (50 20 mg) en opnieuw gedurende nog 18 uur ingezet onder de bovenstaande condities. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door Arbocel® en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over sili-cagel, waarbij werd geëlueerd met (95:5:0,5) dichloor-25 methaan:methanol:ammoniumhydroxide, hetgeen het titelpro-,duct .opleverde; 50 mg.

1H-NMR (CDCI3, 400 MHz): 1,23 (t, 3H), 1,85 (m, 2H), 3,27 (dd, 1H), 3,38 (dd, 1H) , 3,41 (m,- 1H), 4,07 (m, 1H), 4,24 (m, 2H), 7,52 (m, 3H), 8,04 (m, 2H); 30 MS ES+: m/z=523 [M2H] + .

f 025 I J

I 120 I Bereiding 58 I (2S)-2-Amino-3-(4-fenyioxazool-2-yl)propionzure ethylester I 5 I v · CHj I 10 I 10% Pd/C (100 mg) werd toegevoegd aan een oplossing I 15 van het beschermde amine van bereiding 35 (700 mg, 178 I mmol) in ethanol (10 ml) en -het reactiemengsel gedurende I 18 uur bij kamertemperatuur geroerd onder een waterstof- I druk van 50 psi. Het reactiemengsel werd gefiltreerd door I Arbocel®, gewassen met methanol en in vacuüm gecóncen- I 20 treerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolom- chromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met I dichloormethaan:methanol:azijnzuur=95:5:0,5, hetgeen het I titelproduct opleverde; 330 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,04 (t, 3H), 1,82 (m, 2H), 3,16 I 25 (m, 1H), 3,27 (m, 1H), 3,98 (m, 1H),.4,19 (m, 2H), 7,23 I (m, 1H), 7,39 (m, 2H), 7,71 (m, 2H), 7,83 (m, 1H).

I in?*i

Bereiding 59 (2S) -2-Amino-3- (4-fenyloxazool-2-yl)propionzure benzyles- ter 121 5 NH- Λ N'— O Ό 15

Trifluora2ijnzuur (1 ml) werd töegevoegd aan een oplossing van het beschermde amine van bereiding 32 (220vmg, 0,5 mmol) in dichloormethaan (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 1 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactie-20 mengsel werd verdund met ethylacetaat (25 ml) gewassen met verzadigde natriumwaterstofcarbonaatoplossing in water (10 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde.

MS ES+: m/z=323 [MH]\ 25

Bereiding 60 (2S)-2-Amino-3-(4-fenylpyrazool-l-yl)propionzure benzyles-ter o 30 \ 35 1 025 1 | I 122 I Het beschermde amine van bereiding 43 (185 mg, 0,44 I mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van trifluorazijn- I zuur (2 ml) in dichloormethaan (4 ml) en het reactiemeng- I sel gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het re- I 5 actiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, verdund met I ethylacetaat (20 ml) en gewassen met natriumwaterstofcar- bonaatoplossing (10 ml). De organische laag werd gedroogd I op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen I het titelproduct opleverde; 142 mg.

I 10 MS ES+: m/z-344 [MNa]+.

I Bereiding 61 (2S) -2-Amino-3- (3-fenyl^ [1.2.4.] oxadiazool-5-yl)propionzure I benzylester, trifluoracetaat I 15 xyo - I 20 I «ίΝ j I o I 25 .

I Het beschermde amine van bereiding 34 (617 mg) werd I toegevoegd aan een oplossing van trifluorazijnzuur (5 ml) I in dichloormethaan (5 ml) en het reactiemengsel gedurende I 30 1 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel I werd in vacuüm geconcentreerd en tweemaal azeotropisch in- I gedampt uit tolueen en vervolgens uit ethylacetaat en I ether, hetgeen het titelproduct opleverde; 635 mg.

I XH-NMR (CD3OD, 400 MHz): 3,71 (m, 2H), 4,76 (m, 1H), 5,25 I 35 (dd, 1H), 5,36 (dd, 1H), 7,22 (m, 3H),.7,34 (m, 2H), 7,52 I (m, 3H), 8,02 (m, 2H); I MS ES+: m/z=346 [MNa]+.

Bereiding 62 (2S)-2-Amino-3-(4-isobutyloxazool-2-yl)propionzure benzyl- ester 123 e CH.

. w ΓΛ CH> °γΝ 0 15

Het beschermde amine van bereiding 36 (0,92 g, 2,3 mmol) werd opgelost in dichloormethaan (20 ml) en het. re-actiemengsel behandeld met trifluorazijnzuur (5 ml). De gele oplossing werd gedurendé 4 uur geroerd bij kamertem-20 peratuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en het residu verdund met ethylacetaat (20 ml). Het reactiemengsel werd vervolgens gewassen met natriumwaterstof-carbonaatoplossing (20 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct op-25 leverde.

MS ES+: m/z=325 [MNa)+.

I 5 r<CHi I ó I : \ C) I io iAt/°\/^ I Hy*r if

m Q

I 15 I De titelverbinding werd bereid uit het amine van ver- I binding 37 door middel van de werkwijze die werd beschre- I ven in bereiding 62.

I MS ES+: m/z=275 [MH]+.

I 20 I Bereiding 64 I (2S)-2-Amino-3-(4-fenylimidazool-l-yl)propionzure ethyles- I tey I 25 I r~CH* I 30 I 35 Het beschermde amine van bereiding 48 (108 mg, 0,3 I mmol) werd toegevoegd aan 4M waterstofchloride in dioxaan I (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij 125 kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en het residu verdeeld tussen dichloormethaan (50 ml) en kaliumcarbonaatoplossing (50 ml). Dé waterfase werd geëxtraheerd met meer dichloormethaan (50 ml) en de 5 organische vloeistoffen werden gecombineerd, gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 79 mg.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz) : 1,26 (m, 3H), 1,43 (m,. 1H), 1,97 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 4,22 (m, 3H), 7,40 (m, 2H), 7,58 10 (m, 1H), 7,77 (m, 2H).

Bereiding 65 (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)-propionzuur 15 CH, / .>y

A\ IJ

HO ° 25

Di-tert-butyldicarbonaat (343 mg, 1,25 mmol) werd toegevoegd aan een oplossing van het amine van bereiding 55 (410 mg, 1,31 mmol) en triethylamine (530 mg, 5,24 30 mmol) in dichloormethaan (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en het product gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloormethaan: methanol (‘95:5 tot 35 90:10), hetgeen het titelproduct opleverde? 240 mg.

10251J9- I 126 ^-NMR (DMSO-De, 400 MHz) : 1,27 (s, 9H), 3,35 (m, 2H), 4,32 I (m, 1H), 7,37 (m, 1H), 7,41 (m, 2H), 7,51 (m, 1H), 7,64 I (m, 2H); I MS ES+: m/z=333 [MH]+.

I Bereiding 66 (2S)-2-Amino-3-(5-fenvloxazool-2-yl)propionzure propyles- I ^er 10 I IS ' o I 20 I 1-Propanol (30 ml) die bij 0°C werd geroerd, werd ge- durende 10 min. druppelsgewijs behandeld met acetylchlori- I de (8 ml). Men liet het reactiemengsel opwarmen tot kamer- temperatuur en het werd gedurende 1 uur geroerd. De ester I 25 van bereiding 52 (600 mg, 2,3 mmol) werd toegevoegd en het I reactiemengsel gedurende 3 uur tot 40°C en vervolgens ge- durende 18 uur tot 70eC verhit. Het reactiemengsel werd in I vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde.

I ^-NMR (CDCla, 400 MHz): 0,80 (t, 3H), 1,56 (m, 2H), 3,41 30 (m, 2H), 4,06 (m, 2H), 4,57 (s, 1H), 7,16-7,79 (brm, 6H), 8,76 (s, 2H); MS ES+: m/z=275 [MH]+.

De volgende verbindingen werden bereid door middel van een werkwijze die gelijksoortig was aan die welke werd 35 beschreven in bereiding 66.

10251 1 ft-

Bereiding 67 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)propionzure isobutyl- esterhydrochloride 127 5

io 'jT

VtfT CH, 15 De titelverbinding werd bereid uit de ester van be reiding 52 en isobutanol. Na gedurende 18 uur verhitten tot 70eC werd het ónzuivere product azeotropisch ingedampt uit tolueen en in vacuüm geconcentreerd.

1H-NMR (DMSO-De, 400 MHz): 0,91 (m, 6H), 1,82 (m, 1H), 3,46 20 (m, 2H), 3,91 (m, 2H), 4,58 (m, lH), 7,33 (m, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,62 (m, 1H), 7,66 (m, 2H), 8,77 (m, 2H); MS ES+: m/z=289 [MH]+.

Bereiding 68 25 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)propionzure isopropyl- ester, hydrochloride NH2 ch3 1025116* 35 I 128 H De titelverbinding werd bereid uit de ester van bere- riding 52 en isopropanol. Na gedurende 48 uur verhitten H tot 70°C werd het onzuivere product azeotropisch ingedampt uit tolueen en in vacuüm geconcentreerd.

I 5 [a]= +26, 03°.

I 1H-NMR (DMSO-D6, 400 MHz): 1,02 (ddf 3H), 1,13 (dd, 3H), I 3,44 (m, 2H), 4,45 (s, 1H), 4,95 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), I 7,21 (m, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,62 (m, 1H), 8,82 (s, 2H).

I 10 MS ES+: m/z=275 [MH]+.

I Bereiding 69 I (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)propiorizure butyles- I ter,hydrochloride I 15 I - o I 25 I De titelverbinding werd bereid uit de ester van be reiding 52 en n-butanol.

[a]= +25,21°.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,77 (t, 3H), 1,18 (m, 2H), 1,45 30 (m, 2H), 3,47 <m, 2H), 4/08 (m, 2H), 4,54 (m, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,46 (m, 2H), 7, 61 (m, 1H), 7,72 (m, 2H), 8,.62 (m, 2H); MS ES+: m/z=289 [MH]+.

Bereiding 70 (2S)-2-Amino-3-(5-fenvloxazool-2-vl)propion2ure cyclopen- tylester, hydrochloride 129 5 10 Ó 15 De titelverbinding werd bereid uit cyclopentanol en de ester van bereiding 52. Na gedurende 72 uur verhitten tot 70°C werd'het onzuivere product fijngewreven met ether en in vacuüm geconcentreerd.

1H-NMR (CDCl3, 400 MHz): 1,38-1,83 (m, 8H), 4,48 (m, 1H), 20 5,13 (m, 1H), 7,37 (m, 2H), 7,44 <m, 2H), 7,69 (m, 2H); MS ES+: m/z=301 [MH]+.

Bereiding 71 (2S)-2-Amino-3-t5-fenyloxazool-2-yl)propionzure 1-ethyl-25 propylester,hydrochloride so Xcyo CHa CHj 35 rt025j}©- 130 I De titelverbinding werd bereid uit pentaan-3-ol en de ester van bereiding 52. Na gedurende 72 uur verhitten tot I 70°C werd het onzuivere prpduct fijngewreven met ether en I in vacuüm geconcentreerd.

I 5 1H-NMR (DMSO-D6, 400 MHz): 0,80 (s, 6H), 1,37-1,61 (m, 4H), I 4,44 (m, 1H), 4,59 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 7,37 (m, 1H), I 7,46 (m, 2H), 7,62 (m, 1H), 7,68 (m, 2H), 8,61 (m, 2H) ; I MS ES+: m/z=303 [MH]\ I 10 Bereiding 72 I (3S)-3-Amino-4-(5-fenyloxazool-2-yl)boterzure ethylester, I hydrochloride I 15 HJ·.

I 0^0 I 20 25 De ester van bereiding 54 (720 mg, 2,6 mmol) werd toegevoegd aan een.verzadigde oplossing van waterstofchlo-ride in ethanol (30 ml) en het reactiemengsel gedurende 1 uur geroerd bij 70eC. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd, fijngewreven met ether en ethylacetaat, en 30 gefiltreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 614 mg. 1H-NMR (DMSO-D6, 400 MHz): 1,17 (t, 3H), 3,84 (m, 2H), 3,22 (dd, 1H), 3,29 (dd, 1H), 3,92 (m, 1H), 4,09 (m, 2H), 7,36 (m, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,60 (m, 1H), 7,64 (m, 2H), 8,45. (m, 2H); 35 MS ES+: m/z=275 [MNa]\

Bereiding 73 (2S)-2-Amino-3-(5-fenyloxazool-2-yl)propionzure 2-butoxy- ethylester, hydrochloride 131 5 ,__ - ·.

• PS

»vr-Y 0 CHa 0 15

Waterstofbromide werd door een oplossing van de ester van berèiding 52 (430 mg, 1,26 mmol) in n-butoxyethanol (10 ml) geborreld en hét reactiemengsel gedurende 72 uur geroerd bij 70°C. Het reactiemengsel werd in vacuüm, gecon-20 centreerd en verdeeld tussen ethylacetaat en natriumbicar-bonaatoplossing in water. De organische laag werd gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie-over silicagel, waarbij werd geëlueerd met dichloorme-25 thaan:methanol = 95:5 tot 90:100, vervolgens fijngewreven met waterstofchloride in ether, hetgeen het titelproduct opleverde; 211 mg.

1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 0,84 (t, 3H), 1,24 (m, 2H), 1,45 (m, 2H), 3,56 (m, 3H), 3,76 (dd, 1H), 3,92 (dd, 1H), 4,32 30 (m, 2H), 4,81 (m, 1H), 7,29-7,42 (m, 4H), 7,59 (m, 2H), 9,29 (m, 2H); MS ES+: m/z=355 [MNa]+.

1025116- I 132 I Bereiding 74 H (2S)-2-tert-Butoxycarbonylamino-3-(5-fenyloxazool-2-yi)- I propionzure benzylester

I H,C

I η,6-7 CH> I 10 V° \__y— °

Bereiding 75 (2S) -2-Amino-3- (5-i-fenyloxazool-2-yl)propion2ure benzyles- ter 133 5 h2n 10 __Γ \—o qJ ».O-Q.

15 20

Een oplossing van het beschermde amine van bereiding 74 (220 mg, 0,52 ramol) in dichloormethaan (2 ml) werd behandeld met trifluorazijnzuur (1 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reac-25 tiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en verdeeld tussen ethylacetaat en natriumwaterstofcarbonaatoplossing (x2). De organische laag werd gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij 30 werd geëlueerd met dichloormethaan:methanol (95:5), hetgeen het titelproduct opleverde; 127 mg.

aH-NMR (DMSO-De, 400 MHz): 3,13 (m, 2H), 3,87 (m, 1H), 5,06 (m, 2H), 7,26 (m, 6H), 7,42 (m, 2H), 7,51 (m, 1H), 7,62 (m, 2H); 35 MS ES+: m/z=345.[MNa]+.

1025116- I 134 I Bereiding 76 I (2 S) —2-{1-[(IS)-l-Ethoxycarbonyl-2-(4-methyl-5-fenyloxa- . zool-2-yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxv- boterzure tert-butylester I ?Hs H,c 7==^ I ,o /-, o

I H*c H

I ^γθγ\Χ/Νγ I CHV° 0 cAo' I 15 k

I CHJ

I 20

Het amine van bereiding 51 (1,03 g, 3,7 mmol) werd I toegevoegd aan een oplossing van l-[(2S)-2-tert- I butoxycarbonyl)-4-methoxybutyl]cyclopentaancarbonzuur (WÓ I 0279143, bladzijde 71, bereiding 69) (1,3 g, 4 mmol), 1- I 25 (3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride I (0,85 g, 4 mmol), 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (0,60 g, 4 I mmol) en 4-methylmorfoline (1 ml, 9 mmol) in dichloorme- I thaan (20 ml), en het reactiemengsel gedurende 18 uur ge- I roerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd ver- I 30 dund met ethylacetaat (50 ml), gewassen met 2M zoutzuur I (30 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm gecon- centreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door ko- I lomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd I met pentaan:ethylacetaat (80:20 tot 66:33 tot 50:50), het- I · 35 geen het titelproduct opleverde; 1,30 g.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,21 (s, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,56- I 1,75 (brm, 12H), 2,04 (s, 1H), 2,37 (s, 3H), 3,25 (s, 3H), I 102511e- 135 3,32 (m, 2H), 3,40 (m, 2H), 4,18 (m, 2H), 4,97 (m, 1H), 7,20 (d, 1H), 7,25 (m, 2H), 7,42 (m, 1H), 7,51 (d, 2H); MS ES+: m/z=579 [MNa]+.

De volgende verbindingen met de, hierna getoonde alge-5 mene formule werden gemaakt door middel van de werkwijze die werd beschreven in bereiding 76, waarbij het geschikte zuur en het geschikte amine werden gebruikt.

10 R’ l^r3

H.C ? H I

* h3c^0s^O<^nyJ

CH. O O

8 O ^OR5 15

Preo RJ L-Ra __ Ra Jdate ................

• 77 methoxyethyf / ethyl HNMR (CDCIa, 400MHz): 1.23(m, 3H), 1.40(s, 9H), f \ 1.48*1.77(m, 12H), 2.04(m, 9 n >=/ 1H) 3.24<s, 3H), 3.32(m, ^ n=y 2H), 3.45(m, 2H), 4.17(m, 2H), 5.04(d, 1H), 7.12(m, ; 'V 4H), 7.24(s, 1H); MS ES+ m/z 583[MNa)+ 25 30 35 10251 1e I 136 I Prep W L-RJ R6 data 78. propyl benzyl 'HNMR (CDCI* 400MHz): \ V 0.78(m,3H), 1.34(s,9H), W/ . 1.42-1.81(m,13H),3.20- 5 T—J 3.48(m, 2H), 5.12(m, 3H), . / \ 7.20(m, 5H), 7.26-7.57(m, °N^n 6H), 7.77(s, 1H); MS ES+ .

I m/z611fMbfa]4 .

I in 791 mèthoxyethyl ~ "ethyl ,’hnMR (CDCI3i 400MHz): . . . \\ \ 1.21(m, 3H), 1.39(s, 9H), 1.42-1.81 (brm, 13H), T 3.22(s, 3H), 3.31 (m, 2H), 3.41 (m, 2H), 4.19(m, 2H), . 5.04(m, 1H), 7.11((1,1H),

ΓΝ 7.20-7.63(brm,· 6H); MS

ES+ m/z 1108 [M2Na]+ I "8Ö methoxyethyl propyl ’HNMR (CDCI3i 400MHz): \\\ 0.34(t,3H), 1.40(s,9H), 1.45-1.98(brm, 15H), \ 3.22(s, 3H). 3.31 (t,2H), 20 3.36(d,1H), 3.47((1,1H), o I 4.09(m,2H),5.07(m, 1H), ΓΝ 7.10(d, 1H),7.19-7.64(brm, 6H); MS ES+ m/z 1136 ' [MzNaf I 25 81 methoxyethyl butyl VHNMR (C0CI3,400MHz): I \\ \ 0.82(t, 3H), 1.40(s, 9H), . 1.43-2.11 (brm, 16H), . .

\ ' 2.16(m, 1H),3.22(s,3H), /=¾¾ 3.31 (m, 3H), 3.48(d, 1H), I C> I · 4.13(m, 2H), 5.04(m, 1H), Y^N 7.09(d, 1H), 7,20-7.47(brm, 30 6H); MS ES+ m/z 1164 y [M2Na]+ 35 xNa gedurende 18 uur roeren werd het reactiemengsel in va- I cuüm geconcentreerd en gezuiverd door koloinchromatogr.afie als beschreven.

137 ' Prep IR1 IL-R». I R* [data 82 methoxyethyl Cl ethyl ’HNMR (CDCI3,400MHz): \ 1.2Ö(s, 3H), 1.39(s, 9H), 1.44-1.82(brm, 12H), \\ λ 2.36(m, 1Ή), 3.22(s, 3H), 3.30(m, 3H), 3.51 (s, 1H), \ 4.19(m,2H),5.04(m,1H), /5^ . 7.06(d,1H), 7.24(1 H), °vl 7.37(d, 2H), 7.51 (d, 2H) r “ 83 propyl ethyl ’HNMR (CDCI3, 400MHz): .if Λ 0.82(t, 3H), 1.44(s, 9H), l' 1.40-1.71 (m, 12H), 1.80(d, • · ^ ' 1H), 2.01 (m, 4H), 2.04(m, L 1H), 3.09(dd, 1H), 3.21(dd, 0 ^ P . 1H), 4.17(m, 2H), 4.86(m, \=J 1H), 7.36(m, 1H), 7.43(m, Γ 3H), 7.56(m, 1H), 8.01 (mi 1 2H) f MS ES+m/z 549 [MNa)+ 84 methoxyethyl /¾¾¾ isobutyl ’HNMR (CDCI3,400MHz): £ · \ 0.88(m, 6H), 1.40(s, 9H), 1.47-2.10(brm,(14H), 3.23(s, 3H), 3.27(m, 2H), L. 3.48(m, 1H), 3.91 (m, 3H), ..

0 \ 5.06(m, 1H), 7.11(d, 1H) WN . 7.22-7.72(brm, 6H) MS APCI m/z 571 [MH]+

T

85 methoxyethyl /¾¾. isopropyl ’HNMR (CDCI3) 400MHz): £ \ 1.16(dd,3H), 1.19(dd,3H), V/ 1.38(s, 9H), 1 ;43(m, 2H), \ 1.61(m, 6H), 2.02(m, 4H), 2.31 (m,1H), 3.20(st3H), 0 I 3.27(m, 4H), 3.43(m, .1H), \^N 5.02(m, 1H), 7.08(d, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.31 (m, 1H), w 7.38(m, 2H), 7.57(m, 2H) Y MS ES+ m/z 579 [MNaf 402.5116- I 138 I Prep I R1 . L-Ra I Ra I data I 86 methoxyethyl a—> ethyl 'HNMR (CDCI3,400MHz): \ \ 0.84(m, 3H), i.38(s, 9H), W/ 1.37-1.51 (brm,2H), 1.59- / 1.84^,6^,2.08^,4^, !=\ 2.37(m, 1H), 3.45(s, 3H), O^N 3.44(m, 4H), 4.17(m, 2H), T 5.03(m, 1H) 7.27(m, 2H), 7,38(m, 2H), 7.66(m, 2H), V 7.82(8,1H) ____;___MS ES+m/z 1108 fMgNaf 87 . ~ methoxyethyl methyl 'HNMR (CDCI3,400MHz): (l l '1.40(s, 9H), l.49-1.72(m, ·\1 Λ 10H), 2.07(m, 2H), 2.37(m, 1H), 3.23(s, 3H), 3.32(m, I 3H), 3.44(m, 1H), 3.76(m, 3H), 5.06(m, 1H), 6.98(d, \ / 1H), 7.56(rh, 2H), 7.60(m, Y=N 1H), 8.09(m, 2H)

I Y

I 88 .' methoxyethyl r=\ ethyl ’HNMR (CDCl3l 400MHz): L n 0.82(t, 3H), 1.08(t, 3H), \_J7 1.23(m, 2H), 1.31 (m, 1H), Λ_0 1.42(s, 9H), 1.58(m, 7H), /1 \ 1.79(m, 1H), 1.97(m, 3H), 2.22(m, 1H), 3.19(dd, 1H), . 3.51 (dd, 1H), 3.97(m, 1.H), 4.05(m, 1H), 4.93(m, 1H), 7.42(m, 4H), 7.61 (m, 2H), 7;86(m, 1H) __;___MS APCl m/z 527 ΓΜΗΊ* I 89 methoxyethyl ethyl 'HNMR (CDCI3l 400MHz): I U \ 1.22(t, 3H), 1.38(8,9H), V // 1.42-1.81 (m,9H),2.03(m, 3H), 2^36(m, 1H), 3.21 (s, . ' 3H), 3.31 (m, 2Ή), 3.46(dd, /^N 1H),3.58(dd,1H),4.23(m, °v^A . 2H), 5.09(m, 1H), 6.94(d, Ί 1H), 7.53(m, 3H), 8.04(m, 2H) I y MS ES+ m/z 1109 [M2Na]+ I 102511e~ 139

Prep TT L-R3 , R* data 90 propyl benzyl *HNMR (CDCI3,400MHz): // η . 0.82(t,3H), 1.17-1.78(m, 20H), 2.05(m, 3H), 2.19(m, / 1H), 3.49(m, 2H), 3.63(m, N5=( · 1H),5.17(m,3H),7.07(d, I . N 2H), 7.24(m, 3H), 7.51 (m, 3H), 8.00{mf 2H) \ MS ES+ m/z 612 [MNaf ~91 propyl " 7ΞΞΓ benzyl ’HNMR (CDCI3,400MHz): / Y 0.84(1,3H), 1.17-1.77(m, \-J7 20H), 2.02(m, 3H), 2.27(m, v~\ 1H), 4.52(dd, 1H), 4.70(dd, V-TV tH), 4.97(m, 1H), 5.14(m, /[ V 2H), 7.08(dj 1H), 7.19- 7.46(m, 10H), 7.75(m, 2H) MS ES+m/z 610 [MNaf 92 methoxyethyl butoxyethyl ’HNMR (CDCIa, 400MHz): ff ^ 0.87(t, 3H), 1.16-1.36(m, L* 3H), 1.39(s, 9H), 1.49(rrv, 4H), 1.59-1.73(m,4H), I 1.78(m,2H),2.03(m, 3H), _2.33(m, 1H), 3.21 (s, 3H), \ / 3.32{m, 2H), 3.38(m, 3H), >=N . 3.57(m, 3H),.4.29(m, 2H), ' ' * 5.12(m, 1H),7.36(m, 1H), Γ 7,42(m, 2H), 7.59(m, 2H), 7.64(m, 1H) ____.__;__MS ES+ m/z 637 fMNaf 93 methoxyethyl cyclopentyl ’HNMR (CDCI3,400MHz): (K \ 1.40(s, 9H), 1.51-1.82(m, \ // 16H),2.03(m,4H),2.32(m, --( 1H), 3.24(s, 3H), 3.31 (m, 3H), 3.57(m, i H), 4.98(m, /^5] 1H), 5.19(m, 1H), 7.15(d, °Wn 1H), 7.26(m, 2H), 7.41 (m, X 2H), 7.59(m, 2H) MS ES+ m/z 605 [MNa]* I I y I I _ 1025 Jig- I 140 I Prep. I R1 L-Ra Rb I data I 94 methoxyethyl 3-pentyl ’HNMR (CDCI3,400MHz): ζ \ 0.80(t, 3H), 0.85(t, 3H), \ /7 ' 1.34(s,9H), 1.47-1' .81 (m.

13H), 2.06(m, 3H), 2.32(m, V 1H), 3.22(s, 3H), 3.28(m, 2H), 3.40(dd, 1H), 3.58(dd, 1H), 4.79(m, 1H), 5.07(m, V^N 1H), 7.24(m, 3H), 7.41 (mf ./ 2H), 7.60{m, 2H) f MS ES+ m/z 607 [MNa]+ ' I 95 methoxyethyl benzyl ’HNMR(DMSOD6, fl I 400MHz): 1.31 <st9H), ' U 1.37-1.64(m, 7H), 1.80(m, 3H), 1.96(m, 2H), 2.14(m, I 1H), 3.09(m, 1H), 3.29(m,.

-Av 3H), 3.39(m,1H). 4.00(m, \ / 1H), 4.86(m, 1H),5.08(m, V=N 2H), 5.58(m, 1H)7.30(m, · 5H), 7.42(m, 2H), 7.53(m, V 2H), 7.62(m, 2H), 8.12(m, ’ 1H) __- ' ·_____MS ES-f m/z 627 fMNaf I 96 propyl GHS. benzyl 1HNMR(CDCI3,400MHz): / .- Ö.83(m, 3H), 0.89(m, 6H), 1.19-1.36(m, 3H), 1.39(st / 9H), 1.42-1.66(m,7H), r^\ 1.78{m, 1H), 1.83-2.05(m, I N 4H), 2.13(m, 3H), 3.17(dd, 0^/ 1H), 3.39(dd, 1H), 5.02(m, 1H), 5.09(m, 2H), 7.19- 7.39(m,6H) .y MS ES+m/z 569 [MHf "97 pröpyï : H3C benzyl ’HNMRiCDCla, 400MHz): 7 ' 0.74(t, 3H), 1.11 (t, 3H), 7 1.20-1.98(m, 23H), 2.18(m, r^\ 3H), 2.39(m, 2H), 3.13(dd, Λ // tH), 3.34(dd, 1H), 4.97(m, 1H), 5.08(m, 2H), 7.16(m, 1H), 7.21-7.33(m, 5H) y MS ES+ m/z 541 [MHf in

Prep I 1 l-Ra . I R° data ^ 98 propyl propyl MS ES+ m/z 563 [MNa]+ Ö ^ 99 propyl butyl MS ES+ m/z 577 [MNa]+ A · 15 . w · 20 Bereiding 100 (2R)—2—{1—[(IS)-l-Ethoxycarbonylmethyl-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}pentaanzure tert- butylester 25 30 A/~\ NV°

H3¥y^YV

CHa O 0 k/O^CHs 35 0 1025116- I 142 I De titelverbinding werd bereid met 1-[(2R)-2-(tert- butoxycarbonylpentyl)]cyclopentaancarbonzuur(WO 0202513, I bereiding 2) en het amine van bereiding 72 door middel van de werkwijze die werd beschreven in bereiding 76, behalve I 5 dat het reactiemengsel werd verdund met dichloormethaan I (50 ml) in plaats van ethylacetaat.

I [a]= -16,73°.

I ^-NMR (CDCI3, 400 MHz): 0,82 (t, 3H), 1,22 (m, 3H), 1,37 I (s, 9H), 1,40-1,96 (m, 14H), 2,17 (m, 1H), 2,58 (dd, 1H),’ I 10 2,63 (dd, 1H), 3,14 (dd, 1H), 3,21 (dd, 1H), .4,10 (m, 2H), I 4,78 (m, 1H), 6,94 (m, 1H), 7,17 (m, 1H)7,23 (m, 1H), I 7,39 (m, 2H), 7,59 (m, 2H); I MS ES+: m/z=563 [MNa]+.

I De volgende verbindingen met de hierna getoonde alge- 15 mene formule werden eveneens bereid door middel van de I werkwijze die hierboven werd beschreven met het geschikte zuur en amine.

I 20 -sssv -¾¾ 0< O \ CHa I CH3 3 I 30 35 I 1025118- 143 ,. Ex. No. R4____Data 1 101 propyl ’HNMFKCDCig, 400MHz): 0.8Ï(m, 3H), 1.39(s, 9H), 1.42-1.92(m, 14H), 2.44(n\ 1H), 3.25(s, 3H), 3.2B(m, 2^,3.49(01,2^,3.98(01,2^,5.05(111,18)6.94^.

1H), 7.22(01,1H), 7.37(m, 1H), 7.42(m, 2H), 7.59(m, --;_ 2H); MS ES+ m/z 579 fMNal*__ 102 buty' ^HNMR(CDCI3,400MHZ): 0.86(m, 3H), 1.40(s, 9H), 10 1.43-1.92(01,14H), 2.02(m, 3H), 2.44(οι, 1H), 3.25(s, 3H), 3J27(oi, 2H), 3.41(01,1H), 4.01(m, 2H), 4.89(01, 1H), 6.96(01,1H), 7.20(01,1H). 7.28(01,1H), 7.41(01, U-L. ... _2H), 7.60(01,2H); MS ES+ 01/z593 fMNaf 15 Bereiding 103 (2R)-2-{l-[(lS)-l-Ethoxycarbonvl-2-(5-fenyloxazool-2-yl)-ethylcarbamoyl3-cyclopentylmethyl)pentaanzure tert-buty- lester 20

HSC

'V-tF'I Ο " ,ν0νΟ 25 0 0 o^9

HSCT

30

Het aminehydrochioride van bereiding 52 (260 mg# 1 mmol) werd opgelost in water (15 ml) en gewassen met ethylacetaat (2x10 ml) . De waterfase werd basisch gemaakt met verzadigde kaliumcarbonaatoplossing en geëxtraheerd 35 met ethylacetaat (3x20 ml). De organische vloeistoffen werden gecombineerd, gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het product werd toegevoegd aan een 1025116- I 144 I oplossing van l-[ (2R)-2-(tert-butoxycarbonylpentyl).]- I cyclopentaancarbonzuur (WO 0202513, bereiding 2) (284 mg, I 1 mmol), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide- I hydrochloride (293 mg, 1,5 mmol), 1-hydroxybenzo- 5 triazoolhydraat (2Q5 mg, 1,5 mol) en 4-methylmorfoline I (434 μΐ, 4 mmol) in dichloormethaan (7 ml) en het reactie- I mengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het I onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie I over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen- I 10 taanrethylacetaat (83:17 tot 66:33), hetgeen het titelpro- I duet opleverde; 120 mg.

I XH-NMR (CDC13, 400 MHz) : 0,82 (m, 3H), 1,22 (m, 3H), 1,40 I (s, 9H), 1,57-2,41 (brm, 14H), 3,61 (m, 2H), 4,18 (m, 2H), I 5,06 (d, 1H), 7,05 (d, 1H), 7,18-7,63 (brm, 6H); I 15 MS ES+: m/z=54? [MNa]+.

I Bereiding 104 I (2S)-2-{l-[ (IS)-l-Benzyloxycarbonylmethyl-2-(3-fenyl- I [1.2.43oxadiazool-5-yl)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}- I 20 4-methoxyboterzure ethylester I H*c-C>^ H\ I H ° > H3C— O N-y I 30 I Het carbonzuur van bereiding. 11 (156 mg, 0,57 mmol) .

I werd toegevoegd aan èen oplossing van O- (lH-bénz'otriazool- I 35 l-yl)-N,N,N',Ν'-tetramethyluroniumtetrafluorboraat (275 I mg, 0,85 mmol), 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (116 mg, I 0,858 mmol) en N-ethyldiisoopropylamine (294 μΐ, 1,72 145 mmol) in dichloormethaan (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 5 min. geroerd. Het amine van bereiding 61 (275 mg, 0,63 mmol) werd toegevoegd en het reactiemengsel gedurende 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. N,N-5 Dimethylformamide (20.0 μΐ) en meer N-ethyldiisopropylamine (200 μΐ) werden toegevoegd en het reactiemengsel gedurende nog 18 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd in vacuüm geconcentreerd en het onzuivere product gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij 10 werd geëlueerd met pentaamethylacetaat (100:0 tot 95:5 tot 90:10), hetgeen het titelproduct oplevërde, dat samen met een bijproduct werd geëlueerd. De juiste fracties werden in vacuüm geconcentreerd, opgelost in ether (50 ml), gewassen met 2M zoutzuur (20 ml), verzadigde natriumwater-15 stofcarbónaatoplossing (20 ml) en geconcentreerde zoutoplossing (20 ml), gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 100 mg.

1H-NMR CCDC13, 400 MHz): 1,17 (t, 3H), 1,58-1,79 (m, 9H), 20 2,06 (m, 3H), 2, 44 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,25 (m, 2H), 3,48 (dd, 1H), 3,63 (dd, 1H), 3,99 (m, 2H), 5,16 (m, 2H), 7,06 (d, 1H), 7,24 (m, 5H), 7,51 (m, 3H), 7,98 (m, 2H); MS ES+: m/z«600 [MNa]\ 1025 U6- I 146 I Bereiding 105 I (2S)-2-{1-[(lS)-i-Carboxv-2-(4-fenylimidazool-l-yl)ethyi- I carbamoyl]cyclopentylmethyl·}-4-methoxyboterzure tert-bu- I ' tylester 1.5 I ?Hs

I t r I

I 10 HaC°·

I CH, Ο o 0^OH

I 15 I 1M natriumhydroxide (1 ml) werd toegevoegd aan een I oplossing van de diester van bereiding 107 (47 mg, 0,087 I mmol) in dioxaan (3 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 I 20 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd I in vacuüm geconcentreerd en verdeeld tussen water (20 ml) en ethylacetaat (20 ml). De waterlaag werd aangezuurd met I ijsazijn en geëxtraheerd met ethylacetaat (2x20 ml). De I organische vloeistoffen werden gecombineerd, gedroogd op I 25 magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd. Het product I werd azeotropisch ingedampt uit tolueen .(3x20 ml), ethyla- I cetaat (20 ml) en dichloormethaan (20 ml),-hetgeen het ti- I telproduct opleverde; 19 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,23 (m, 3H), 1,43 (s, 9H), 1,50- I 30 1,87 (m, 8H), 2,07 (m, 3H), 3,26 (s, 3H), 3,41 (m, 2H), I 4,54-4,86 (m, 3H), 5,02 . (m, 1H), 6, 94 (m, 1H), 7,31 (m, I 3H), 7.,71-7,86 (m, 2H), 8,62 (m, 1H) ; I MS ES+: m/z=512 [MNa]+.

I 1 ηος1 1 O.

147

Bereiding 106 (2R)-2-{l-[(lS)-l-Carboxy-2-(3-fenyl-[1.2.41oxadiazool-5-yj)ethylcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzure ethylester ' 5 h3c—er_

OH

.15

De diester van bereiding 104 (90 mg) werd toegevoegd aan een suspensie van 10% Pd/C (10 mg) in ethanol (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 2 uur bij kamertemperatuur geroerd onder 50 psi waterstofdruk. Het reactiemengsel 20 werd gefiltreerd door Arbocel®, waarbij werd geëlueerd met ethanol en het filtraat in vacuüm werd geconcentreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door kolomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd met pen-taan:éthylacetaat (70:30). Het product hiervan werd verhit 25 in 10% kaliumcarbonaatoplossing en behandeld met pen-taanrethylacetaat = 90:10-oplossing, hetgeen een neerslag opleverde. Het mengsel werd gefiltreerd en de waterlaag afgescheiden voordat werd aangezuurd met 2M zoutzuur en geëxtraheerd in ethylacetaat (10 ml) . De organische laag 30 werd gedroogd op magnesiumsulfaat en in vacuüm geconcentreerd, hetgeen het titelproduct opleverde; 6 mg.

1H-NMR (CDC13/ 400 MHz): 1,19 (m, 3H), 1,40-1,76 (m, 7H), 1,81 (m, 2H), 2,08 (m, 3H), 2,47 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 3,51 (m, 2H), 3,63 (m, 2H), 4,02 (m, 2H), 5,04 (m, 1H), 35 7,25 (m,.2H), 7,46 (m, 2H), 8,03 (m, 1H); MS ES+: m/z=488 [MH]+.

1025116- 148 I Bereiding 107 I (2S)-2-f1-[(lS)-l-Ethoxycarbonyl-2-(4-fenylimidazool-l- H yl)ethvlcarbamoyl]cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzure I tert-butylester I ?* o I L, Γ-η I ** ° ö Xo^TiT^ I ° 0 cHa 15 I Het amine van bereiding 64 (19 mg, 0,074 mmol) werd I toegevoegd aan een oplossing van 1-[(2S)-2-(tert-

I butoxycarbonyl)-4-methoxybutyl]cyclopentaancarbonzuur (WO

I 20 0279143, bladzijde 71, bereiding 69) (22 mg, 0,074 mmol.), 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimidehydrochloride I (15,4 mg, 0,082 mmol), 1-hydroxybenzotriazoolhydraat (11 mg, 0,082 mmol) en 4-methylmorfoline (42 mg, 0,37 mmol) in I dichloormethaan (5 ml) en het reactiemengsel gedurende 18 25 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd I uitgegoten in water (50 ml) en geëxtraheerd met dichlöor- methaan (2x50 ml). De gecombineerde organische vloeistof- I fen werden gedroogd op natriumsulfaat en in vacuüm gecon- centreerd. Het onzuivere product werd gezuiverd door ko- I 30 lomchromatografie over silicagel, waarbij werd geëlueerd I met pentaan:ethylacetaat= 99:1 tot 95:5, hetgeen het ti- I telproduct opleverde; 20 mg.

I 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 1,32 (t, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,49- I 1,88 (m, 9H), 2,02 (m, 3H), 2,22 (m, 1H), 3,27' (s, 3H), I 35 3, 36 (m, 2H), 4,24 (m, 2H),4,41 (dd, 1H), 4,55 (dd, 1H), I 4,87 (m, 1H), 6,42 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,37 (m, 3H), I 7,66 (m, 1H), 7,78 (m, 2H); 149 MS ES+: m/z=564 [MNa]\

Biologische assays

Assay 1: ICso-waarden van de verbindingen van de onderhavi-5 ge uitvinding tegen NEP en ACE werden bepaald met behulp van de werkwijzen die werden beschreven in gepubliceerde octrooiaanvrage EP 1097719-A1, paragraven [0368] tot en met [0376]. De hierna gepresenteerde ICso-waarden werden bepaald met behulp van NEP (EC.3.4.24.11) uit menselijke 10 nieren.

Assay 2: Dit is een modificatie van assay 1 die is aangepast voor krachtige, hechtbindende remmers.

15 Materialen

Buffer: 50 mM Tris met pH*7,4.

Buffer die 4% DMSO bevat: 4 ml' DMSO toegevoegd aan 96 ml buffer.

20 Enzym: NEP uit menselijke nieren (bereid met de werk wijze van Kenny en Booth, Biochem. J., 142, 575, 1974). De volumina worden bewaard bij -70°C. De NEP-activiteit van elk preparaat wordt bepaald dóór serieverdunningen van het preparaat in deze assay zonder remmer, een verdunning die 25 10 tot 15% omzetting van het substraat verkrijgt wordt in de remmerstudies gebruikt.

Remmers: de remmers worden opgelost in DMSO, hetgeen eén 10 mM oplossing geeft die vervolgens verder wordt verdund tot 1 mM in DMSDO. Een verdere verdunning wordt ge-30 maakt (40 μΐ in 960 μΐ buff er), hetgeen 4 x 10"5 M remmer in buffer geeft die 4% DMSO bevat. Alle verdere verdunningen worden gemaakt in buffer die 4% DMSO bevat. De remmers worden getest met een dosis-responskromme over acht punten (halve log-eenheden) in tweevoud. Uit de gegevens worden 35 de ICso-waarden berekend.

Substraat: Het substraat (Abz-D-Arg-Arg-Leu-EDDnp, K.M. Carvalho et al., Analytical Biochem, 237, 167-173 102511Q- I 150 H (1996)) wordt bewaard bij -70°C. Een voorraadoplossing van I 2 mM wordt gemaakt in buffer en de volumina tot 1 maand I bewaard bij -70°C.

I Stopoplossing: Fosforamidon (Sigma R7385) 300 H 5 nM in buffer. Volumina van 300 μΜ oplossing worden bewaard I bij -20°C en 1000 maal verdund in buffer.

I Product: Twee monsters die overeenkomen met 100% om- I zetting van substraat in product worden, in de assay opge- nomen om het percentage omzetting van het substraat te 10 kunnen bepalen. Voeg 200 μΐ 25 μΜ product en 100 μΐ stop- oplossing toe. Een voorraadoplossing hiervan wordt gevormd I . door incuberen van 1 ml 25 μΜ substraat met 20 μΐ voor- I raadoplossing van enzym gedurende de nacht b.ij 37 °C, on- derverdelen in kleine volumina en bewaren bij -70°C.

I ' 15 I Uitrusting

Platen: Black Costar plaat met 96 putjes Cat#3915 I Fluorescentieaflezer: BMG Fluostar,. lees af bij I ex.320, em.420.

I 20 I Werkwijze I 1. Voeg 50 μΐ remmer toe (4x assay-conc.) I 2. Voeg 80 μΐ buffer toe I 3. Voeg 50 μΐ enzymverdunning (1:800) toe

I 25 4. Incubeer gedurende 1 uur bij 37°C

5. Start de reactie door toevoegen van 20 μΐ substraat

I 6. Incubeer gedurende 3 uur bij 37°C

I 7. Voeg 100 μΐ stopoplossing toe I 8. Lees de fluorescentie af met éen Fluorstar I 30 (ex.320/em.420) I Opgenomen in elke assay zijn: I . Blancoproeven zonder enzym (enzym vervangen door buf- I fer en verdunning van de verbinding vervangen door 4% 35 DMSO-buffer).

. Controles (verdunning van de verbinding vervangen door 4% DMSO buffer).

151

Totaal product (zie hierna).

De verbindingen van de onderhavige uitvinding zijn remmers van NEP.

5 De titelverbindingen van de voorbeelden zijn krachti ge remmers van NEP.

De titelverbindingen van de voorbeelden 25-27, 29-31, 34-36, 39 en 40 vertoonden een IC5<>-waarde tegen NEP van minder dan of gelijk aan 10 nM, zoals werd vastgesteld 10 door middel van assay 1.

Zoals werd bepaald door middel van assay 2 vertoonde de titelverbinding van voorbeeld 26 een ICso-waarde tegen NEP van 0,3 nM en een selectiviteit ten opzichte van ACE van meer dan 100 maal; de titelverbinding van voorbeeld 29 15 liet een ICso-waarde tegen NEP van 0,7 .nM en een selectiviteit ten opzichte van ACE van meer dan 100 maal zien; de titelverbinding van voorbeeld 30 vertoonde een ICso-waarde tegen NEP van 0,3 nM en een selectiviteit ten opzichte van ACE van meer dan 100 maal, en de titelverbinding van voor-20 beeld 40 liet een ICso-waarde tegen NEP van 0,3 nM en een selectiviteit ten opzichte van ACE van meer dan 100 maal zien.

« 1025116'

Claims

2. Verbinding volgens conclusie 1, waarin R1 Ca-C6-alkyl of Cj.-C6 alkoxyCj.-C3 alkyl is.
3. Verbinding volgens conclusie 2, waarin R1 propyl of 10 methoxyethyl is.
4. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, waarin R3 waterstof is.
5. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, waarin L een niet-gecondenseerde aromatische heterocyclische 1. ring is die eventueel gesubstitueerd is met Ci-C* alkyl.
6. Verbinding volgens conclusie 5, waarin L een vijftallige aromatische heterocyclische ring is.
7. Verbinding volgens conclusie 6, waarin L oxazool, oxadiazool, imidazool of pyrazool is.
8. Verbinding volgens conclusie 7, waarin L oxazool of oxadiazool is.
9. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, waarin R3 Ci-C$ alkyl is of R3 fenyl is die onafhankelijk gesubstitueerd kan zijn met één of meer Ci-Ce alkyl-, halo- 25. geen-, halogeenCi-Ce alkyl-, Ci-C6 alkoxy-, halogeenalkoxy-, Ci-C6 alkylthio-, halogeenCa-C6 alkylthio- of nitrilgroe-pen.
10. Verbinding volgens conclusie 9, waarin R3 fenyl is die eventueel gesubstitueerd is met halogeen.
11. Verbinding volgens conclusie 10, waarin R3 fenyl, 4-fluorfenyl of 4-chloorfenyl is.
12. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, waarin de biologisch labiele estervormende groepen Ci-C6alkyl, carböcyclyl of heterocyclyl zijn, die elk gesub- 35 stitueerd kunnen zijn.
13. Verbinding volgens conclusie 12, waarin de biologisch labiele estervormende groepen zijn: 1025116 I 154 I i) Ci-C6 alkyl die eventueel gesubstitueerd is met hydroxy, I oxo, halogeen, halogeenCx-C6 alkyl, Cx-C6 alkoxy, halo- I geenCi-Ce alkoxy, Cx-C6 alkylthio, halogeenCx-Ce alkylthio, I nitril, carbocyclyl, heterocyclyl, carbocyclyloxy, hetero- 5 cyclyloxy, Ci-C7 alkylcarbonyloxy, carbocyclylcarbonyloxy, I heterocyclylcarbonyloxy, alkylcarbonylamino en alkylamino- I carbonyl, waarbij een carbocyclyl- of heterocyclylgroep eventueel gesubstitueerd is met Cx-Cg alkyl, halogeen, ha*· logeenCi-Ce alkyl, Cx-C6 alkoxy, halogeenCx-Cg alkoxy, Cx-Cg- I 10 alkylthio, halogeenCx-Cg alkylthio of nitril, of I ii) carbocyclyl of heterocyclyl, die eventueel gesubstitu- I eerd is met Cx-C6 alkyl, halogeen, halogeen-Cx-Cg alkyl, Cx- I Cg alkoxy, halogeen-Cx-Cg alkoxy, C1-C6 alkylthio, halo- geenCx-Ce alkylthio of nitril. I 15 14. Verbinding volgens conclusie 13, waarin een car- I bocyclische groep fenyl is en een heterocyclische groep I aromatisch is.
15. Verbinding volgens conclusie 12, waarin biolo- gisch labiele estervormende groepen worden gekozen uit de I 20 opsomming: ethyl, propyl, butyl, isobutyl, cyclopentyl, benzyl, 1-(2,2-diethylbutyryloxy)ethyl, 2-ethylpropionyl- I oxymethyl, 1-(2-ethylpropionyloxy) ethyl, 1-(2,4-dimethyl- I benzoyloxy)ethyl, 1-(benzoyloxy)benzyl, 1-(benzoyloxy)- I ethyl, 2-methyl-1-propionyloxypropyl, 2,4,6-trimethylben- I 25 zoyloxymethyl, 1-(2,4,6-trimethylbenzoyloxy)ethyl, piva- I loyloxymethyl, fenethyl, fenpropyl, 2,2,2-trifluorethyl, 1-naftyl, 2-naftyl, 2,4-dimethylfenyl, 4-t-butylfenyl, 5- I (4-methyl-l,3-dioxalinyl-2-onyl)methyl, N,N-diethylamino- carbonylmethyl en 5-indanyl. I 30 16. Verbinding volgens een van de conclusies 1-11, waarin R4 en R5 beide waterstof zijn.
17. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, I waarin p 0 of 1 is.
18. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, 35 waarin q 1 is.
19. Verbinding volgens een voorgaande conclusie, waarbij de verbinding voldoet aan de formule (I') o o 0') Rf 10 o
20. Verbinding volgens conclusie 19, waarin R1 ie Ci-C6 alkyl of Ci-C6 alkoxyCi-C3 alkyl,
15 R2 is waterstof, L is een niet-gecondenseerde vijftallige aromatische heterocyclische ring die eventueel gesubstitueerd is met Ci-Ce alkyl, R3 is Ci“Cg alkyl of R3 is fenyl die onafhankelijk ge-20 .substitueerd kan zijn met één of meer Ci-C6 alkyl-, halogeen-, halogeenCi-Ce atlkyl-, Ci-C« alkoxy-, halogèen-alkoxy-, Ci-Ce alkylthio-, halogeenCi-Ce alkylthio- of ni-trilgroepen, R4 en R5 beide waterstof zijn, of één van R4 en R5 wa-25 terstof is en de andere een biologisch labiele estervor-mende groep is die wordt gekozen uit de opsomming: i) Cx-C6 alkyl die eventueel gesubstitueerd is met hydroxy, oxo, halogeen, halogeenCi-C6 alkyl, Ci-Cg alkoxy, halogeenCi-C6 alkoxy, Ci-C6 alkylthio, halogeenCi-C6 alkylthio, nitril, 30 carbocyclyl, heterocyclyl, carbocyclyloxy, heterocyclyl-oxy, alkylcarbonyloxy, carbocyclylcarbonyloxy, hetero-cyclylcarbonyloxy, alkylcarbonylamino en alkylaminocarbo-nyl, waarbij een carbocyclyl- of heterocyclylgroep eventueel gesubstitueerd is met Ci-C6 alkyl, halogeen, haloge-35 enCi-Ce- alkyl, Ci-C6 alkoxy, halogeenCi-C6 alkoxy, Ci-Ce alkylthio, halogeenCi-C6 alkylthio of nitril, of ii) carbocyclyl of heterocyclyl, die eventueel gesubstitueerd is 1025116 I met Ci-C6- alkyl, halogeen, halogeenCi-C6 alkyl, Ci-C6 al- I koxy, halogeen Ci-C6 alkoxy, Ci-C6 alkylthio, halogeen Ci-C6 I alkylthio o£ nitril, p is 0 of 1 en H 5 q is 1.
21. Verbinding volgens conclusie 19, waarin I R1 is propyl of methoxyethyl, I R2 is waterstof, L is oxazool, oxadiazool, imidazool of pyrazool, die I 10 elk gesubstitueerd kunnen zijn met Cj.-C6 alkyl, I R3 is fenyl, 4-fluorfenyl of 4-chloorfenyl, I R4 en R5 beide waterstof zijn, I p is 0 en I q 1 is. I 15 22. Verbinding volgens conclusie 1, die wordt gekozen I uit: I (2S)-2-{l- [ (IS)-l-Carboxy-2-(4-methyl-5-fenyloxazool-2- I yl) ethoxycarbamoyl ] cyclopentylmethyl} - 4 -methoxyboterzuur, I (2S)-2-{1-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-(4-fluorfenyl)oxazool-2- I 20 yl]ethylcarbamoyl}cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur, I (2R)-2-{l-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethyl- I carbamoyl ] cyclopentylmethyl }pentaanzuur, I (2S)-2-(1-{(IS)-l-Carboxy-2-[5-(4-chloorfenyl)oxazool-2- I yl]ethylcarbamoyl}cyclopentylmethyl)-4-methoxyboterzuur, I 25 (2S)-2-{l-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyl[1.2.4]oxadiazool-3- I yl) ethylcarbamoyl ] cyclopentylmethyl} - 4 -methoxyboterzuur, I (2R) -2-{l- [ (IS) -l-Carboxy-2- (4-fenylpyrazool-l-yl)ethyl- I carbamoyl] cyclopentylmethyl Jpentaanzuur en I (2S)-2-{l-[(IS)-l-Carboxy-2-(5-fenyloxazool-2-yl)ethyl- I 30 carbamoyl] cyclopentylmethyl}-4-methoxyboterzuur.
23. Gebruik van een verbinding volgens een voorgaande I conclusie, een farmaceutisch aanvaardba(a)r(e) zout, sol- I vaat, polymorf of prodrug daarvan, bij de vervaardiging I van een geneesmiddel voor het behandelen of voorkomen van I 35 een aandoening waarvoor een gunstige respons wordt verkre- I gen door de remming van neutraal endopeptidase. • I
24. Gebruik volgens conclusie 23, waarbij de aandoening een cardiovasculaire ziekte of aandoening is.
25. Gebruik volgens conclusie 24, waarbij de aandoening hypertensie is.
26. Gebruik volgens conclusie 23, waarbij de aandoe ning vrouwelijke seksuele dysfunctie of mannelijke erec-tiele dysfunctie is.
27. Verbinding volgens een van de conclusies 1-22, een farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan, 10 voor gebruik als geneesmiddel.
28. Gebruik volgens conclusie 23, waarbij de aandoening wordt gedefinieerd in één van de conclusies 24, 25 en 26.
29. Farmaceutisch preparaat dat een verbinding vol-15 gens een van de conclusies 1-22, een farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan, tezamen met een farmaceutisch aanvaardba(a)r(e) excipiênt, verdunningsmiddel of drager omvat.
30. Combinatie van een verbinding volgens een van de 20 conclusies 1-22 en één of meer actieve bestanddelen die worden gekozen uit de opsomming: a) blokkers van de angiotensinereceptor (ARB), zoals losartan, valsartan, telmisartan, candesartan, irbesartan, eprosartan en olmesartan, 25 b) blokkers van het calciumkanaal (CCB), zoals amlo- dipine, c) statinen, zoals atorvastatine, d) PDE5-remmers, zoals sildenafil, tadalafil, var-denafil, 5-[2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazine-l-ylsulfonyl)- 30 pyridine-3-yl]-3-ethyl-2-[2-methoxyethyl]-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-7-on,* 5- (5-acetyl-2-butoxy-3-pyridinyl)-3-ethyl-2-(l-ethyl-3-azetidinyl)-2,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-dj pyrimidine-7-on en de pyrazolo[4,3- d] pyrimidine-4-onen die worden beschreven in WO 00/27848, 35 met name N- [ [3-(4,7-dihydro-l-methyl-7-oxo-3-propyl-lH-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine-5-yl) -4-propoxyfenyl] sulfonyl] - 1025116 Η I 158 Η 1-methyl-2-pyrrolidinepropaanamide [DA-8159 (voorbeeld 68 I van WO 00/27848)], e) bèta-blokkers, zoals atenolol of carvedilol, f) ACE-remmers, zoals quinapril, enalapril en lisino- 5 pril, I g) alfa-blokkers zoals doxazosine, h) selectieve antagonisten van de aldosteronreceptor I (SARA), zoals eplerenon of spironolacton, I i) agonisten van imidazoline Ιχ, zoals rilmenidine en I 10 j) antagonisten van de endothelinereceptor en remmers I van endotheline converterend enzym.