MXPA06014505A - Derivado de 1??-metilcarbapenem y proceso para la preparacion del mismo. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a un nuevo derivado de 1??-metilcarbapenem, un proceso para la preparacion del mismo, y a una composicion farmaceutica que comprende el derivado de 1??-metilcarbapenem o una sal aceptable farmaceuticamente del mismo como un ingrediente antibacteriano activo.

Description

DERIVADO DE lß-METILCARBAPENEM Y PROCESO PARA LA PREPARACIÓN DEL MISMO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un nuevo derivado de Iß-metilcarbapenem, un proceso para la preparación del mismo y una composición farmacéutica que comprende el mismo. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN - Los antibióticos de carbapenem se consideran los antibióticos ideales por sus actividades más amplias y más fuertes contra las bacterias Gram positivas y Gram negativas que los antibióticos de cefalosporina y penicilina, en especial contra las cepas bacterianas resistentes. El imipenem (N-formimidoli tienamicina. MK-0787) , desarrollado por Merck en 1979, es el primer antibiótico de carbapenem que tiene una actividad antibacteriana excelente (J. Med. Chem. 1979, 22, 1435) .. Sin embargo, este se degrada fácilmente por la acción hidrolítica de la deshidropeptidasa-I renal humana secretada (DHP-I) en los ríñones, y se debe usar junto con la cilastatina, un represor de DHP-I. El meropenem (SM-7338) desarrollado por Sumitomo, Japón, es un antibiótico de iß-metilcarbapenem el cual supera la mayoría de las desventajas del imipenem (J. Antiobiot . 1990, 43, 519). El meropenem muestra una actividad antibacteriana comparable contra el MRSA (Staphylococcus aureus resistente a meticilina) y una actividad más potente contra la Pseudomonas aeruginosa que el imipenem, pero tiene una vida media in vitro más corta y una actividad antibacteriana menos potente contra las bacterias Gram positivas que el imipenem. También, el ertapenem, comercializado por Zeneca, UK y Merck en el 2001, tiene una vida media in vitro más extensa y es estable hacia la acción degradante de la ESBL (lactamasa beta de espectro extendido) y la AmpC, pero no tiene una buena actividad antibacteriana contra la Pseudomonas aeruginosa (Int. J. Antimicrob. Agents 2002, 20, 136) . Por consiguiente, los presentes inventores se han esforzado por desarrollar un nuevo antibiótico de carbapenem el cual está libre de las desventajas de los antibióticos existentes y que tiene una actividad antibacteriana excelente. BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Por consiguiente, un objetivo de la presente invención es proporcionar un nuevo derivado de lß-metilcarbapenem que tenga una actividad antibacteriana excelente u estabilidad superior ante la DHP-I. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un proceso para la preparación de tal derivado de lß-metilcarbapenem.

Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un intermediario útil para la preparación de lß-metilcarbapenem. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que comprende el derivado de lß-metilcarbapenem o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo como un ingrediente activo. De acuerdo con un aspecto de la por, se proporciona el derivado de lß-metilcarbapenem de fórmula (I) o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona un proceso para la preparación de un derivado de Iß-metilcarbapenem o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo . De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, se proporciona el derivado de tiol usado como un intermediario y un proceso para la preparación del mismo. De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende el derivado de lß-metilcarbapenem de la fórmula (I) o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo como un ingrediente antibacteriano activo . DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El derivado de lß-metilcarbapenem de la presente invención es un compuesto que tiene un isoxazol con un sustituyente de carboxilato, el cual se conecta vía un grupo vinilo en la posición 5 de la porción de pirrolidina del lß-metilcarbapenem. El derivado de lß-metilcarbapenem de la presente invención también se puede usar en forma de una sal, hidrato o solvato aceptable farmacéuticamente. La sal aceptable farmacéuticamente puede ser una sal de metal alcalino del compuesto de la fórmula (I) , preferiblemente una sal de sodio, o una sal de adición de ácido. El ácido puede ser un ácido inorgánico u orgánico, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico, ácido acético, ácido láctico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido metansulfonico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido 4-toluensulfonico, ácido gluturonico, ácido embonico, ácido glutámico o ácido aspártico. Como se muestra en el Esquema de reacción (I) , el compuesto inventivo de la fórmula (I) se puede preparar a partir del compuesto de enolfosfato de carbapenem de la fórmula (II) y el compuesto intermediario que tiene la estructura de tio de la fórmula (III) : Esquema de reacción (I) en donde , o 11 Alilo es -CH2-CH=CH2 y Alloc es -c°-c CH=cH2 El proceso de arriba comprende los pasos de : (a) hacer reaccionar los compuestos de fórmula (II) y de fórmula (III) en presencia de una base para obtener el compuesto de carbapenem protegido de fórmula (IX) ; y (b) someter el compuesto de fórmula (IX) a una reacción de desprotección. El intermediario de carbapenem de fórmula (II) usado como un material inicial en el paso (a) se puede preparar por el método convencional (Catchpole, C. R. et al., Antimicro.

Agents Chemother. 1992, 36, 1928) .

Específicamente, la base usada en el paso (a) puede ser una amina terciaria tal como trimetilamina, trietilamina, N,N-diisopropilamina (DIPEA) , 2 , 6-lutidina, picolina, N,N-dimetilanilina, piridina y 4-dimetilaminopiridina, y es prepferible la N,N-diisopropilamina. Esta reacción se puede llevar a cabo a una temperatura que varía de -10 a 10 °C, preferiblemente a 0°C por 1 a 3 horas, preferiblemente 1.5 horas, el solvente usado en este paso es preferiblemente acetonitrilo. En el paso (b) , la desprotección del compuesto de carbapenem protegido de fórmula (IX) se puede llevar a cabo por cualquiera de los métodos convencionales. Por ejemplo, el grupo de protección se puede eliminar usando un catalizador de paladio tal como tetraquis (trifenilfosfin) paladio y di (trifenilfosfin) dicloropaladio junto con hidruro de tributilestaño (Bu3SnH) , preferiblemente una combinación de catalizador de tetraquis (trifenilfosfin) paladio e hidruro de tributilestaño a una temperatura que varía de -10 a 10°C, preferiblemente a 0°C por 1 a 3 horas, preferiblemente 1.5 horas . El solvente usado en esta reacción puede ser diclorometano, una mezcla de diclorometano y agua, o tetrahidrofurano, y es preferible el diclorometano. El compuesto de carbapenem desprotegido de fórmula (I) se puede hacer reaccionar además con un compuesto de metal alcalino, preferiblemente 2-etilhexanoato de sodio (SHE) o bicarbonato de sodio, bajo las mismas condiciones de desprotección por 10 a 60 minutos para obtener una sal de metal alcalino, preferiblemente una sal de sodio, del derivado de lß-metilcarbapenem de fórmula (I) . El compuesto intermediario de fórmula (III) usado en el Esquema de Reacción (I) se puede preparar de acuerdo con el Esquema de Reacción (II) : Esquema de Reacción (II) en donde , Alilo y Alloc son idénticos como se define previamente, Ms es metansulfonilo, y Ac es C?Hp3" PCL.

El proceso de arriba comprende los pasos de (a) someter el compuesto de fórmula (VIII) y trifenilfosfina a una reacción de condensación para obtener el compuesto de fórmula (VII) ; (b) someter los compuestos de fórmula (VI) y de fórmula (VII) a una reacción de Witting en presencia de - una base, para obtener el compuesto de fórmula (V) ; (c) someter el compuesto de fórmula (V) y tioacetato de potasio a una reacción de sustitución en un solvente para obtener el compuesto de fórmula (IV) ; y (d) someter el compuesto de fórmula (IV) a desacetilación en un solvente para obtener el compuesto de fórmula (III) . El aldehido de fórmula (VI) usado como un material inicial en el paso (b) se puede preparar por el método convencional (Ohtake, N. et al., J. Antibiotics 1997, 50, 567) . Específicamente, en el paso (a) , el compuesto de bromoisoxazol de fórmula (VIII) se somete a una reacción de condensación con trifenilfosfina en un solvente, para obtener el compuesto de trifenilfosfonio de fórmula (VII) de acuerdo con el método convencional (DeShong, P. et al. J. Org. Chem. 1988, 53, . 1356) . El solvente puede ser acetonitrilo o diclorometano, preferiblemente, acetonitrilo, y la reacción se lleva a cabo a la temperatura que varía de 40 a 80°C, preferiblemente, a 80 °C por 2 a 5 horas, preferiblemente, 3 horas . En el paso (b) , el compuesto de fórmula (VII) se hace reacción en presencia de una base para obtener una ilida, y el compuesto de fórmula (VI) se hace reaccionar con esta para obtener el compuesto de vinilo de fórmula (V) . La base puede ser bistrimetilsililamina de sodio o bistrimetilsililamina de litio, preferiblemente, bistrimetilsiliamina de sodio, y la reacción se lleva a cabo a -78°C por 2 a 5 horas, preferiblemente, 3 horas. El solvente usado en este paso es preferiblemente tetrahidrofurano . En el paso (c) , el compuesto de fórmula (V) se somete a reflujo con tioacetato de potasio en un solvente, para obtener el compuesto de tioacetilo de fórmula (IV) , por 4 a 7 horas, preferiblemente, 5 horas, y el solvente puede ser una mezcla de acetona y dimetilformamida, acetonitrilo, acetona o dimetilformamida, preferiblemente, una mezcla de acetona y dimetilformamida (3 : 1 (v/v) ) . En el paso (d) , el compuesto de fórmula (IV) se somete a desacetilación usando tiometoxido de sodio en un solvente, para obtener el compuesto de fórmula (III) , a una temperatura que varía de -10 °C a la temperatura ambiente, preferiblemente, a 0°C por 20 a 60 minutos, preferiblemente, 30 minutos. El solvente puede ser alcohol alílico.

El derivado de lß-metilcarbapenem de la presente invención muestra una combinación marcadamente mejor de las actividades antibacterianas contra bacterianas Gram positivas y Gram negativas que incluyen las cepas aisladas clínicamente que los antibióticos conocidos tales como imipenem, meropenem y ertapenem. Este también es muy estable a la DHP-I, y exhibe una vida media y una biodisponibilidad in vivo las cuales son superiores a las de los fármacos convencionales. La presente invención también incluye dentro de su ámbito una composición farmacéutica para un agente antibacteriano que comprende una cantidad efectiva terapéuticamente del derivado de lß-metilcarbapenem de fórmula (I) , o una sal aceptable farmacéuticamente como un ingrediente activo junto con un portador aceptable farmacéuticamente. Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden administrar parenteralmente en la ruta intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, etcétera, y se formulan para la administración parenteral tal como inyección, de acuerdo con los métodos convencionales . El compuesto de fórmula (I) o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo se puede administrar como un ingrediente activo en una cantidad efectiva que varía de aproximadamente 0.1 a 100 mg/kg de peso corporal en el caso de mamíferos, incluyendo los humanos, preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 10 mg/kg por día en una dosis única o en dosis divididas. Sin embargo, la dosificación anterior debe ser monitoreada, y cambia en consideración de la idiosincrasia y el peso del paciente, el tipo y la seriedad de las enfermedades, las características del fármaco y el intervalo y la duración del fármaco . El siguiente . Ejemplo se destina para ilustrar adicionalmente la presente invención sin- limitar su alcance. Ejemplo: Preparación de ácido (IR, 5S, 6S, 8R, 3 ' S, 5' S) -2-{5' -[ácido (E) -2- (3 -carboxílico) o carboxilato-5-isoxazolo) etenil de sodio] irrolidin-3' -iltio} -6- (1-hidroxietil) -l-metilcarbapen-2-em-3 -carboxílico (Paso 1) Preparación de 3-aliloxicarbonil-5-bromometilisoxazol (fórmula (VIII) ) 2.30 g (12.6 mmol) de 3-aliloxicarbonil-5-hidroximetilsoxazol se disolvieron en 30 ml de diclorometano anhidro, se enfrió a -20 °C, y se agregaron a este 3.8 g (14.5 mmol) de trifenilfosfina. Se agregaron 4.7 g (14.2 mmol) de tetrabromuro de carbono a la mezcla a la misma temperatura, y se agitó por 30 minutos. La mezcla resultante se concentró bajo una presión reducida para remover el solvente, y el residuo se sometió a cromatografía en columna para obtener el compuesto del título (1.75 g, 56%) . XH NMR (300 MHz, CDCl3) d 4.58 (m, 2h) , 4.81 (m, 2H) , 5.21 (m, 2H) , 6.01 (m, 1H) , 6.65 (s, 1H) . (Paso 2) Preparación de bromuro de 3-aliloxicarbonil-5-isoxazolometiltrifenilfosfonio (fórmula (VII) ) 1.72 g (7 mmol) de 3-aliloxicarbonil-5-bromometilisoxazol preparado en el paso (1) se disolvió en 20 ml de acetonitrilo, y se agregaron a este 2 g (7.6 mmol) de trifenilfosfina. La solución se sometió a reflujo por 3 horas, se enfrió, y el sólido formado se filtró para obtener el compuesto del título (3.2 g, 90%) . XH RMN (300 MHz, CDC13) d 4.58 (m, 2H) , 4.81 (m, 2H) , 5.21 (m, 2H) , 6.27 (d, 2H, J=14.7 Hz) , 7.12 (s, 1H) , 7-67 (m, 6H) , 7.82 (m, 9H) . (Paso 3) Preparación de (3R, 5S) -5- [ (E) -2- (3-aliloxicarbonil-5-isoxazolo) etenil] -3 -metanosulfoniloxi-1-aliloxicarbonilpirrolidina (fórmula (V) ) 3.0 g (5.9 mmol) de bromuro de .3-aliloxicarbonil-5-isoxazolometiltrifenilfosfonio preparado en el paso (2) se agregaron a 30 ml de tetrahidrofurano, y la solución se enfrió a -78 °C. Se agregaron 6.2 ml (6.2 mmol) de bistrimetilsililamina/tetrahidrofurano gota a gota a este en tanto que se mantenía la temperatura a -78 °C y después se agitó por 30 minutos a -30 °C. La mezcla se enfrió de nuevo a -78°C, y 1.6 g (5.9 mmol) de metanosulfoniloxiformipirrolidina disueltos en 30 ml de tetrahidrofurano se agregaron gota a gota a la misma. Se permitió que la mezcla de reacción se calentara a la temperatura ambiente, se agitó por 3 horas, se enfrió a 0 °C y se agregó a está una solución saturada de cloruro de amonio. La mezcla resultante se concentró bajo presión reducida para remover el solvente, y se trató con 50 ml de agua y 50 ml de diclorometano. La capa de diclorometano se separó, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, se concentró bajo una presión reducida para remover el solvente, y el residuo se sometió a cromatografía de columna para obtener él compuesto del título (1.9 g, 76%) como un aceite incoloro.

XH RMN (300 MHz, CDCl3) d 2.16 (m, 1H) , 2.61 (m, 1H) , 3.08 (s, 3H) 3.68-3-72 (m, 1H) , 4.00 (m, 1H) , 4.60 (m, 3H) , 4.69 (m, 1H) , 5.25-5.45 (m, 5H) , 5.98 (m, 2H) , 6.48-6.50 (s, 2H) , 6.57 (m, 1H) . (Paso 4) Preparación de (3R, 5S) -3-tioacetil-5- [ (E) -2- (3-aliloxicarbonil-5-isoxazolo) etenil] -1-aliloxicarbonil-pirrolidina (fórmula (IV) ) 1.05 g (2.46 mmol) de (3R, 5S) -5- [ (E) -2- (3-aliloxicarbonil-5-isoxazolo) etenil] -3 -metansulfoniloxi-1-aliloxicarbonilpirrolidina preparada en el paso (3) se disolvieron en 30 ml de una mezcla de acetona y dimetilformamida (3:1 (v/v)), y 0.64 g (5.9 mmol) de tioacetato de potasio se agregaron a esta. La mezcla resultante se sometió a reflujo por 5 horas, se enfrió a la temperatura ambiente, y se concentró bajo presión reducida para remover el solvente. El residuo se trató con 50 ml de agua y 50 ml de diclorometano. La capa de diclorometano se separó, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, se concentró bajo una presión reducida para remover el solvente, y el residuo se sometió a cromatografía de columna para obtener el compuesto del título (0.75 g, 75%) como un aceite amarillo pálido. XH RMN (300 MHz, CDC13) d 189 (m, 1H) , 2.35 (s, 3H) , 2.70 (m, 1H) , 3.38 (m, 1H) , 4.00-4.09 (m, 2H) , 4.61 (m, 3H) , 4.88 (m, 3H) , 5.32-5.47 (m, 4H) , 6.05 (m, 2H) , 6.60 (m, 1H) . (Paso 5) Preparación de (IR, 5S, 6S, 8R, 3 ' S, 5' S) -2- {5' - [ (E) -2- (3-aliloxicarbonil-5-isoxazolo) etenil] -1-aliloxicarbonilpirrolidin-3 ' -iltio}-6- (1-hidroxietil) -1-metilcarbapen-2-em-3~carboxilato de alilo (fórmula (IX) ) 0.5 g (1.36 mmol) de (3R, 5S) -3-tioacetil-5- [ (E) -2- (3-aliloxicarbonil-5-isoxazolo) etenil] -1-aliloxicarbonil-pirrolidina preparada en el paso (4) se disolvieron en 10 ml de alcohol alílico, se enfrió a 0 °C, y se agregaron gota a gota a este 0.10 g (1.50 mmol) de trimetoxido de sodio. La mezcla resultante se agitó por 30 minutos a la misma temperatura, y se agregaron 1.5 ml de ácido clorhídrico 1N, para volver acida la solución. La solución resultante se concentró bajo presión reducida para remover el solvente, y se extrajo con acetato de etilo. El extracto se lavó con carbonato de sodio saturado, y la capa acuosa se extrajo con 50 ml de acetato de etilo. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, se concentró bajo una presión reducida para obtener el compuesto de fórmula (III) , el cual se uso en el siguiente paso sin purificación posterior. 0.67 g (1.36 mmol) de (IR, 5S, 6S, 8R) -2-difenilfosforiloxi-6- (1-hidroxietil) -l-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de alilo de fórmula (II) se disolvieron en 50 ml de acetonitrilo bajo una atmósfera de nitrógeno. 0.28 ml (1-64 mmol) de N,N-diisopropiletilamina se agregaron a esta a 0°C, y a la mezcla resultante se agregaron 0.46 g (1-36 mmol) del compuesto de fórmula (III) obtenido arriba, disuelto en 10 ml de acetonitrilo. La mezcla se agitó a la misma temperatura por 1.5 horas, y se trató con 50 ml de acetato de etilo y 100 ml se solución saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, se concentró bajo una presión reducida, y el residuo resultante se sometió a cromatografía de columna para obtener el compuesto del título (0.48 g, 65%) como una espuma amarilla pálida. XH RMN (300 MHz, CDCl3) d 1.28 (d, 3H, J=7.2 Hz) , 1.36 (d, 3H, J= 6.2 Hz) , 1.89 (m, 1H) , 2.18 (m, 1H) , 2.74 (m, 1H) , 3.28 (m, 1H) , 3.40 (m, 2H) , 3.73 (m, 1H) , 4.18 (m, 1H) , 4.2H), 4.58-4.89 ( , 7H) , 5.24-5.48 (m, 6H) , 5.96 (m, 3H) , 6.56 (m, 3H) . ' (Paso 6) Preparación de ácido (IR, 5S, 6S, 8R, 3 ' S, 5-' S) -2-{5' - [ (E) -2- (3 -carboxílico) o ácido carboxilato de sodio-5-isoxazolo) etenil] irrolidin-3 ' -iltio} -6- (1-hidroxietil) -1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (fórmula (I) ) 100 mg '(0.17 mmol) de (IR, 5S, 6S, 8R, 3 ' S, 5' S) -2- {5- [ (E) -2- (3-aliloxicarbonil-5-isozaxolo) etenil] -1-aliloxicarbonil-pirrolidin-3 ' -iltio} -6- (1-hidroxietil) -l-metilcarbapen-2-em-carboxilato de alilo preparado en el paso (5) se disolvieron en 2 ml de diclorometano bajo una atmósfera de nitrógeno. 6.0 mg (0.0052 mmol) de tetraquis (trifenilfosfin) paladio [0] se agregaron a esta a 0°C, y a este se agregaron gota a gota 0.093 ml (0.35 mmol) de hidruro de tributilestaño. La solución se agitó a la misma temperatura por 1.5 horas para obtener el compuestote (E) -2- (3-ácido carboxílico-5-isoxazolo) etenilo . Para obtener el compuesto de (E) -2- (3 -carboxilato de sodio-5-isoxazolo) etenilo, 0.042 g (0.26 mmol) de 2-etilhexanoato de sodio se agregaron a la solución' de reacción de arriba, y se agitó por 30 minutos. La mezcla se lavó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La capa acuosa se secó por congelamiento, y el residuo se purificó por cromatografía de columna Diaion HP-20 (solución acuosa de tetrahidrofurano al 3%) para obtener el compuesto del título (41.7 mg, 52%) como un sólido blanco. Pf: 243-245°C IR (KBt) : 3390, 2968, 1748, 1614 cm"1 XH RMN (300 MHz, D20) d 1.09 (d, 3H, J=7.1 Hz) , 1.15 (d, 3H, J=6.3 Hz) , 1.59 (m, 1H) , 2.59 (m, 1H) , 3.07 (m, 1H) , 3.18-3.32 (m, 1H) , 3.39 (m, 1H) , 3.82 (m, 1H) , 3.99 (m, 1H) , 4.06-4.13 (m, 2H) , 6.46.6.62 (m, 3H) . 13C RMN (75 MHz, D20) d 176.4, 168.3 166.2, 161.4, 140.0, 132.5, 128.7, 118.8, 102.3, 65.1, 60.5, 58.5, 55.9, 53.0, 42.7, 40.5, 36.4, 20.0, 15.0. FABHRMS (m/z) Cale, para C2oH22N307S a2 (M+Na) + : 494.0975, Encontrado: 494.0974. Ejemplo de prueba 1; Prueba de Actividad Antibacteriana Las actividades antibacterianas in vivo del compuesto de 3-carboxilato de sodio de la presente invención preparado en el Ejemplo de arriba se midieron contra las cepas estándar (Tabla 1) , cepas Gram positivas aerobias, aisladas clínicamente (Tabla 2); cepas Gra'm negativas aeróbicas, aisladas clínicamente;, Cepas Gram negativas aeróbicas, aisladas clínicamente; cepas Gram positivas anaeróbicas, aisladas clínicamente (Tabla 4) y las cepas Gram negativas anaeróbicas, aisladas clínicamente, usando bacterias Gram positivas tales como Streptococcuss y Staphylococcus, bacterias Gram negativas tales como Escherichia, Salmonella, Krebsiella y Enterobacter. Se usaron el imipenem (IPM) , meropenem (MPM) y ertapenem (EPM) eomo los grupos de control .

Específicamente, el compuesto de prueba se diluyó serialmente al doble y se agregó a cada cepa de bacterias cultivada en un medio de cultivo de agar diluido, y se incubaron a 37 °C por 18 a 20 horas para determinar la •concentración inhibitoria mínima (MIC) a la cual se inhibió el crecimiento de cada cepa. Los resultados se muestran en las Tablas 1 a 5, y MIC50 y MIC90 representan las concentraciones a las cuales se inhibió el crecimiento de las cepas a los grados de 50% y 90%, respectivamente.

Tabla 1 Tabla 2 Tabla 3 Tabla 4 Tabla 5 Como se puede observar en la Tabla 1 , el compuesto de 3-carboxilato de sodio preparado en el Ejemplo mostró excelente actividad antibacteriana contra las cepas Gram positivas y Gram negativas, similar al meropenem.

Los resultados en la Tabla 2 muestran que el compuesto de 3 -carboxilato de sodio del Ejemplo exhibe actividades antibacterianas excelentes contra todas las cepas, excepto el Enterococcus faecium, y fue mejor contra el Streptococcus pneumoniae que los compuestos de control . Este también mostró actividades inhibitorias contra las cepas- Gram negativas aerobias, las cuales fueron equivalentes a las del IPM y el MPM, como se muestra en la Tabla 3 , y el compuesto inventivo inhibe efectivamente el crecimiento de las cepas Gram positivas y Gram negativas anaerobias, como se muestra en las Tablas 4 y 5. Por , lo tanto, el compuesto de la presente invención tiene una combinación mucho más deseable de actividades antibacterianas contra las cepas Gram positivas y Gram negativas que cualquier otro de los antibióticos de carbapenem existentes . Ejemplo de Prueba 2; Estabilidad a la DHP-I Para investigar la estabilidad del compuesto de 3-carboxilato de sodio de fórmula (I) preparado en el Ejemplo a la DHP-I secretada en los ríñones, se llevo a cabo el siguiente experimento. La DHP-I usada en el experimento se aisló del córtex del riñon de un porcino. La cantidad de enzima a la cual la concentración de imipenem se redujo a la mitad por hidrólisis a 30 °C por 30 minutos se definió como una unidad. 50 µg/ml de un fármaco de prueba y una unidad de DHP-I se agregaron a 1 ml de amortiguador de MOPS (pH 7.0), la mezcla se mantuvo a 30 °C y los valores de OD a 299 nm se midieron después de 0.5, 1 , 2 , 4 horas . La vida media del meropenem en presencia de DHP-I se definió como 1.00, y la estabilidad relativa de cada fármaco se midió usando imipenem (IPM) y meropenem (MPM) como controles. Los resultados se muestran en la Tabla 6. Tabla 6 Como se puede observar en la Tabla 6, el compuesto de 3-carboxilato de sodio del Ejemplo mostró una estabilidad aproximadamente 25 veces mayor que el imipenem, y una estabilidad aproximadamente 4.5 veces mayor que el meropenem. Por lo tanto, el compuesto del Ejemplo es mucho más biodisponible que los controles. Ejemplo de Prueba 3: Prueba Farmacocinética El comportamiento farmacocinético del compuesto de 3-carboxilato de sodio del Ejemplo se determinó .como sigue. Ratas de Sprague-Dawley machos (pesando 250 g, 14-15 semanas de edad, 5 ratas/grupo) y perros Beagle. (pesando 10 kg, 3 perros/grupo) se mantuvieron alimentándolos con alimento sólido en condiciones idénticas por más de 7 días. Los animales de prueba se mantuvieron en ayuno por más de 24 horas antes de ser evaluados . Cada uno de los compuestos del Ejemplo y el meropenem se disolvieron en agua destilada, y se inyectaron de manera intravenosa a una dosificación de 20 mg/kg de peso corporal a las ratas y 5 mg/kg de peso corporal a los perros. Se sustrajeron muestras de sangre de los animales a las 0.25, 0.5, 0.75, 1, 2, 3, 4, 8, 12 y 24 horas después de la inyección. 500 µl de cada muestra de sangre se centrifugaron a 12,000 rpm por 30 segundos, el sobrenadante se filtró a través de un filtro de 0.22 µm, y se analizaron por HPLC/UV, y el resultado se lista en la Tabla 7. Columna: Simetría (5 µm, 23.9 x 150 mm, Waters, EEUU) Fase móvil: Amortiguador de fosfato 30 mM (pH 3.0) : acetonitrilo=85 : 15 Volumen : 30 µl Caudal: 0.5 ml/min Detección: UV 260 nm (para el Ejemplo) y 298 nm (para el MPM) .

Tabla 7 Como se puede observar en la Tabla 7, el compuesto de 3-carboxilato de sodio del Ejemplo muestra una vida media de aproximadamente 3 veces más extensa y una biodisponibilidad aproximadamente 4 veces mayor que el meropenem en las ratas .

Su vida media y su disponibilidad observadas para los perros" también fueron excelentes . Aunque la invención se ha descrito con respecto a las modalidades especificas de arriba, se .debe reconocer, que se pueden hacer varias modificaciones y cambios y que también caen dentro del ámbito de la invención como se define por las reivindicaciones que siguen.

Claims (22)

1. REIVINDICACIONES 1. El derivado de Iß-metilcarbapenem de fórmula (I) o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo,
2. 2. El derivado de la. reivindicación 1, caracterizado porque, la sal es una sal de sodio. 3. Un proceso para la preparación del derivado de la reivindicación 1, caracterizado porque comprende los pasos de: (a) hacer reaccionar los compuestos de fórmula (II) y de fórmula (III) en presencia de una base, para obtener el compuesto de carbapenem protegido de fórmula (IX) ; y (b) someter el compuesto de fórmula (IX) a una reacción de desprotección. et) en donde ,
3. Alilo es -CH2-CH=CH2 y Alloc es -C°-CH2CH=CH¡> .
4. 4. El proceso de la reivindicación 3, caracterizado porque la base usada en el paso (a) se selecciona del grupo que consiste de trimetilamina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, 2 , 6-lutidina, picolina, N,N-dimetilanilina, piridina y 4-dimetilaminopiridina.
5. 5. El proceso de la reivindicación 3, caracterizado porque el paso (a) se lleva a cabo en acetonitrilo.
6. 6. El proceso de la reivindicación 3, caracterizado porque el paso (a) se lleva a cabo a una temperatura que varía de -10 a 10°C por 1 a 3 horas.
7. 7. El proceso de la reivindicación 3, caracterizado porque la desprotección se lleva a cabo haciendo reaccionar los compuestos de fórmula (IX) con hidruro de tributilestaño en presencia de un catalizador seleccionado del grupo que consiste - de tetraquis (trifenilfosfin) paladio y di (trifenilfosfin) dicloropaladio .
8. 8. El proceso de la reivindicación 3, caracterizado porque la desprotección se lleva a cabo a una temperatura que varía de -10 a 10°C por 1 a 3 horas, en un solvente seleccionado del grupo que consiste de diclorometano, una mezcla de bicloruro de carbono, diclorometano y agua, y tetrahidrofurano .
9. 9. ' Un proceso para preparar la sal de sodio de la reivindicación 2, el cual se caracteriza porque comprende hacer reaccionar el compuesto de fórmula (I) con 2-etilhexanoato de sodio (SHE) o bicarbonato de sodio.
10. 10. El proceso de la reivindicación 9, caracterizado porque la preparación de la sal de sodio se lleva a cabo a una temperatura que varía de -10 a 10°C por 10 a 60 minutos.
11. 11. El derivado de tiol de fórmula (III), el cual se usa para la preparación del compuesto de la reivindicación 1, {HD caracterizado porque, o Alilo es -CH2-CH-CH2 y Alloc es -C°-CH2CHSCH2 _
12. 12. Un proceso para la preparación del derivado de tiol de fórmula (III) de la reivindicación 11, caracterizado porque comprende los pasos de : (a) someter el compuesto de fórmula (VII) y trifenilfosfina a una reacción de condensación para obtener el compuesto de fórmula (VII) ; (b) someter los compuestos de fórmula (VI) y fórmula (VII) a una reacción de Witting en presencia de una base y un solvente para obtener el compuesto de fórmula (V) ; (c) someter el compuesto de fórmula (V) y tioacetato de potasio a una reacción de substitución en un solvente, para obtener el compuesto de fórmula (IV) ; y (d) someter el compuesto de fórmula (IV) a desacetilación en un solvente, para obtener el compuesto de fórmula (III) ,
13. OH) ?teOí ,.? V-N, > AilOC (VI) en donde , o li Alilo es -CH2-CH=CH2, Alloe es -8~CH2-CH=CH2 f Ms es metanolsulfonilo, y Ac es s~c . 13. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque la reacción de condensación se lleva a cabo en acetonitrilo o diclorometano a una temperatura que varía de 40 a 80 °C por 2 a 5 horas.
14. 14. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque la base usada en el paso (b) es bistrimetilsililamina de sodio o bistrimetilsililamina de litio.
15. 15. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque el solvente usado en el paso (b) es tetrahidrofurano.
16. 16. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque la reacción de Witting se lleva a cabo a una temperatura que varía de -78 °C por 2 a 5 horas.
17. 17. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque el solvente usado en el paso (c) es acetonitrilo, acetona, dimetilformamida, o una mezcla de los mismos.
18. 18. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque la reacción de substitución se lleva a cabo por reflujo, por 4 a 7 horas.
19. 19. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque el solvente usado en el paso (d) es alcohol alílico.
20. 20. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque la reacción de desacetilación se lleva a cabo usando tiometóxido de sodio .
21. 21. El proceso de la reivindicación 12, caracterizado porque, la desacetilación se lleva a cabo a una temperatura que varía de -10°C a la temperatura ambiente por 20 a 60 minutos .
22. 22. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende el derivado de lß-metilcarbapenem de la reivindicación 1 o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo como un ingrediente activo antibacteriano.