MXPA06001322A - Uso de antagonistas del receptor de angiotensina ii, en especial de telmisartano, para aumentar la sensibilidad a la insulina. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere al uso de antagonistas del receptor de la angiotensina II para el tratamiento de personas en las que se diagnostico diabetes mellitus de tipo 2 o existe sospecha de una prediabetes, para la prevencion de diabetes o para el tratamiento del sindrome metabolico y la resistencia a la insulina en pacientes con presion arterial normal.

Description

USO DE ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR DE ANGIOTENSINA II, EN ESPECIAL DE TELMISARTANO, PARA AUMENTAR LA SENSIBILIDAD A LA INSULINA DESCRIPCION DE LA INVENCION La invención entra en el área de los antagonistas del receptor de la angiotensina II y se refiere a su uso para el tratamiento de personas con diagnóstico de diabetes o sospecha de prediabetes, para la prevención de la diabetes o para el tratamiento del síndrome metabólico y la resistencia a la insulina en pacientes con tensión arterial normal. La diabetes mellitus de tipo 2 es la manifestación de dos fenómenos patofisiológicos , a saber, una secreción reducida de insulina de las células beta del páncreas y una resistencia a la insulina de los órganos blanco hígado, musculatura esquelética y tejido graso. Por lo general, hay un trastorno complejo de ambos componentes. La enfermedad se diagnostica como hiperglucemia en ayunas, es decir, la concentración de azúcar en sangre después de un ayuno de 10-12 horas está por encima del valor límite de 125 mg de glucosa por di de plasma. Es posible un tratamiento dirigido de la diabetes manifiesta de tipo 2 por medio de compuestos de la clase de sustancias de las tiazolidindionas (glitazonas) . Estos compuestos mejoran la utilización de la insulina circulante y llevan así a una disminución de los valores de azúcar en sangre (sensibilizadores de insulina) .

Al mismo tiempo, se reducen los elevados niveles de insulina por medio de mecanismos de reacoplamiento, aliviando el páncreas. Los sensibilizadores de insulina, tales como troglitazona, rosiglitazona o pioglitazona, despliegan esta acción por medio de unión con determinados receptores nucleares, denominados PPAR-gamma {Peroxisomal Proliferator Activated Receptor, receptor activado del proliferador de peroxisomas) . Actúan como reguladores de la transcripción de una serie de genes que son importantes para el metabolismo de la glucosa y de los lipidos. A través de esta función, los ligandos PPAR-gamma como las prostaglandinas o las tiazolidindionas sintéticas (glitazonas) pueden contribuir con el tratamiento de la diabetes de tipo 2. Uno de los mecanismos principales de la reducción de la glucosa por medio de ligandos PPAR-gamma es la inducción de la diferenciación de adipocitos. La diferenciación adipocitica incrementada y la remodelación del tejido graso, provocadas a través de los ligandos PPAR-gamma, llevan a un desvio o una redistribución de ácidos grasos libres de la musculatura esquelética en el tejido graso, aumentando de esta manera el metabolismo de la glucosa en los músculos. Dado que al momento de la diagnosis, por ejemplo uno de cada dos pacientes con diabetes de tipo 2 presenta un síntoma de enfermedad cardíaca coronaria, se presumen las causas de la diabetes progresivamente en un trastorno metabólico complejo que se puede manifestar por una serie de factores de riesgo, tales como tolerancia alterada a la glucosa, mayor azúcar en sangre en ayunas, resistencia a la Insulina, hipertensión, dislipidemia o adiposidad sobre todo en el área del tronco, cara y cuello. Está particularmente marcada la predominancia de una resistencia a la insulina en pacientes con hipertrigliceridemia y bajo colesterol HDL. Se habla de prediabetes de tipo 2, síndrome metabólico, síndrome X o síndrome de resistencia a la insulina. En una primera fase, una respuesta a la insulina reducida de los órganos blanco origina un aumento de la secreción de insulina del páncreas para mantener el nivel de azúcar en sangre en el intervalo normal. Después de varios años de una producción de insulina excesiva o creciente, sucede que la distribución de la insulina por las células beta del páncreas ya no puede ser aumentada. Así comienza la fase de la tolerancia alterada a la glucosa. El organismo ya no puede captar suficientemente rápido los valores pico de la glucosa. Si el azúcar en sangre en ayunas sigue siendo alto, entonces la diabetes se hace manifiesta. El documento WO 95/06410 revela el uso de los antagonistas del receptor de la angiotensina II para el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas, incluyendo las enfermedades autoinmunes sistémicas. Como uno de varios ejemplos para las enfermedades autoinmunes sistémicas, se menciona la diabetes. ? las enfermedades autoinmunes se les asigna la diabetes mellitus de tipo 1 que aparece, la mayoría de las veces, en jóvenes de menos de 30 años, y con una correspondiente disposición genética, bajo la influencia de diversos factores, se produce una insulitis con posterior destrucción de las células B, de modo que el páncreas sólo puede producir muy poca insulina o bien no puede producirla. La diabetes mellitus de tipo 2 no es considerada una enfermedad autoinmune. Los antagonistas del receptor de la angiotensina II se usan para el tratamiento de hipertensión, asi como de daños posteriores de órganos terminales cardiovasculares que se asocian con la hipertensión. En la literatura especializada, se clasifican, por lo general, como metabólicamente neutros. Henriksen et al. informan acerca de una mejora de la sensibilidad a la insulina en el modelo animales a través del principio activo irbesartano (Hypertension 38:884-90, 2001). El objeto de la presente invención consiste en poner a disposición medicamentos que se pueden usar tanto para el tratamiento de una diabetes manifiesta de tipo 2, como también para el tratamiento de los primeros síntomas del trastorno metabólico complejo de la prediabetes y, así, para la prevención de una diabetes mellitus de tipo 2.

En el marco de la presente invención, se halló ahora-, sorprendentemente, que algunos pocos antagonistas del receptor de la angiotensina II y sus sales, además de la conocida acción hipotensiva, pueden elevar en un sistema celular la expresión de genera, de cuya transcripción se sabe que es regulada por el receptor PPARgamma. Esto abre nuevas posibilidades terapéuticas en el tratamiento y la prevención de la diabetes de tipo 2, síndrome metabólico y resistencia a la insulina. A fin de garantizar condiciones comparables, se observa y cuantifica este efecto en el marco de la presente invención con ayuda de una línea celular establemente transformada (comp. Ejemplo 2). En este caso se trata de células CHO que representan una transformación con dos construcciones génicas. La primera de estas construcciones codifica el gen de luciferasa de Photinus pyralis (de Wet JR, Mol Cell Biol (1987) 7:725) bajo el control de un promotor sintético con una quíntuple repetición de un sitio de unión de levadura Gal4 (comp. secuencia de banco de genes AF058756) . La segunda construcción codifica una proteína de fusión compuesta por el dominio de unión de ligandos del factor de transcripción humano PPARgamma2 (comp. secuencia de banco de genes U79012) , así como el dominio de unión de ADN de levadura GAL4 (aminoácidos 1-147; Sadowski I, Nucleic Acids Res (1989) 17:7539).

La inducción de la transcripción de los genes regulados por PPARgamma es conocida por las tiazolidindionas utilizadas como antidiabéticos (por ejemplo, rosiglitazonas) y activada por su unión con el receptor PPARgamma y su activación. En el marco del sistema de ensayo aplicado aqui, esta acción como cuantificarse como actividad de luciferasa inducida de la linea celular transformada. La misma inducción de la actividad de una luciferasa no se presenta en el caso de los antagonistas del receptor de la angiotensina II, contrariamente a lo esperado, por unión del principio activo con el receptor PPARgamma. La inducción es particularmente marcada para el principio activo telmisartano . Una unión de por ejemplo telmisartano con el receptor PPARgamma no puede ser detectada en los distintos sistemas de ensayo. Por ello, se presume que el aumento de la afinidad de proteínas de cofactores por PPARgamma por medio de un antagonista del receptor de la angiotensina II como telmisartano también lleva al reclutamiento de las proteínas de cofactores, cuando no existen ligandos PPARgamma sintéticos de gran afinidad. Esto produce luego una activación de la transcripción de genes mediada a través de estos cofactores que son regulados por el receptor PPARgamma. Como la inducción de estos genes es responsable de la acción antidiabética de las tiazolidindionas, se puede partir del hecho de que la inducción de estos genes por antagonistas del receptor de la angiotensina II como telmisartano despliega un efecto antidiabético comparable. Asi, estos principios activos son apropiados no sólo para el tratamiento de hipertensión, sino también para el tratamiento y la prevención de la diabetes mellitus de tipo 2. El descubrimiento de esta nueva acción terapéutica de los antagonistas del receptor de la angiotensina II y sus sales significa que se pueden emplear para la preparación de un medicamento para el tratamiento de personas, en las que se diagnosticó diabetes mellitus de tipo 2 o se sospecha de prediabetes, para la prevención de la diabetes o para el tratamiento del síndrome metabólico y la resistencia a la insulina en pacientes con tensión arterial normal. Son apropiados sobre todo para el tratamiento y la prevención de diabetes de tipo 2 y prediabetes de tipo 2. Quedan incluidos el tratamiento y la prevención del síndrome metabólico, el síndrome X o bien el síndrome de resistencia a la insulina. Cuando en el marco de esta invención se hace referencia a las personas por tratar, la presencia del tratamiento o de la prevención de la persona está en primer lugar, pero los principios activos y combinaciones de principios activos aplicados también se pueden emplear de modo correspondiente en la medicina veterinaria en mamíferos. La diabetes mellitus de tipo 2 se manifiesta en un valor de azúcar en sangre en ayunas que supera 125 mg de glucosa por di de plasma, y la determinación de los valores de glucosa en sangre representa un procedimiento estándar en la analítica médica de rutina. Si se realiza un ensayo de tolerancia a la glucosa, 2 horas después de la ingesta en ayunas de 75 g de glucosa el valor de azúcar en sangre de un diabético es de más de 200 mg de glucosa por di de plasma. En un ensayo de tolerancia a la glucosa, se administran a la persona por investigar, después de un ayuno de 10-12 horas, 75 g de glucosa por vía oral y se calcula el valor de azúcar en sangre inmediatamente antes de la ingesta y 1 ó 2 horas después de la ingesta de glucosa. En una persona sana, el valor de azúcar en sangre antes de la ingesta oscila entre 60 y 110 mg por di de plasma, una hora después de la ingesta, por debajo de los 200 mg por di y después de 2 horas, por debajo de los 140 mg por di. Si el valor al cabo de 2 horas es de 140 a 200 mg, se habla entonces de una tolerancia alterada a la glucosa. Es un indicio particularmente contundente de la presencia de una prediabetes cuando se puede comprobar una resistencia a la insulina. Así, puede ser que una persona requiera 2 a 3 veces más cantidad de insulina para mantener la homeostasis de glucosa que otra persona, sin que esto tenga un significado patológico directo. El método más representativo para la determinación de la resistencia a la insulina es el ensayo de clamp euglucémico-hiperinsulinémico .

La relación insulina a glucosa se determina en el marco de una técnica de infusión combinada de insulina-glucosa. Se habla de una resistencia a la insulina cuando la absorción de glucosa está por debajo del percentil 25 de la población investigada en segundo plano (definición de la OMS) . Algo más económico que la investigación con clamp son los llamados modelos mínimos, en los que, durante un ensayo de tolerancia a la glucosa intravenoso, se miden en intervalos temporalmente establecidos las concentraciones de insulina y glucosa en la sangre, calculando a partir de ello la resistencia a la insulina. Otro método de determinación es el modelo matemático HOMA. La resistencia a la insulina se calcula a través de la glucosa en plasma en ayunas y la concentración de insulina en ayunas. En el marco de este método no es posible distinguir entre resistencia a la insulina hepática y periférica. Para una evaluación de la resistencia a la insulina en la práctica diaria, estos procedimientos son poco apropiados. En la vida diaria clínica se toman, por lo general, otros parámetros para calcular la resistencia a la insulina. Para ello, se prefieren tomar, por ejemplo, las concentraciones de los triglicéridos del paciente, ya que elevados niveles de triglicéridos se correlacionan significativamente con la presencia de una resistencia a la insulina.

En la práctica, se parte, simplificando, un poco, del hecho de que las personas son resistentes,, a la insulina cuando presentan por lo menos 2 de- las siguientes propiedades: 1) sobrepeso u obesidad 2) hipertensión 3) dislipidemia (contenido alterado de la sangre en lipidos totales) 4) por lo menos un pariente de primer grado al que se hubiera diagnosticado una tolerancia a la glucosa alterada o diabetes de tipo 2. Sobrepeso significa aquí que el índice de masa corporal {Body Mass Index -BMI) está comprendido entre 25 y 30 kg/m2, siendo el BMI el cociente del peso corporal en kg y del cuadrado de la estatura en metros. En caso de obesidad, el BMI es mayor que 30 kg/m2. De la definición anterior de la resistencia a la insulina se ve claramente que para su tratamiento se indican y son apropiados agentes hipotensivos cuando en el paciente se comprueba, por ejemplo, la propiedad hipertensión. Un resultado de la presente invención es que algunos bloqueantes del receptor de la angiotensina II, pero sobre todo telmisartano, representan agentes hipotensivos preferidos debido a la propiedad de la activación PPAR-gamma, que también son apropiados para el tratamiento de resistencia a la insulina, cuando en el paciente no se comprueba una hipertensión, sino una tensión arterial normal. De esta manera se puede aplicar un tratamiento de diabéticos de tipo 2 con telmisartano simultáneamente con el tratamiento o el tratamiento de soporte de una dislipidemia . Las dosis usuales de telmisartano ocasionan una significativa reducción de los valores en plasma de colesterol LDL, colesterol total y/o triglicéridos . Como la resistencia a la insulina se considera un estado que ocasiona un progresivo aumento de la tensión arterial, su tratamiento con telmisartano puede considerarse una prevención de la hipertensión, pese a valores de tensión arterial' normales. Un indicio similar de la prediabetes es cuando se cumplen las condiciones para el síndrome metabólico, cuya característica principal es la resistencia a la insulina. De acuerdo con las directivas ATP IHINCEP (Executive Summary of the Third Report of the National Cholesterol Education Progra (NCEP) en el Journal of the American Medical Association 285:2486-2497, 2001), se habla del síndrome metabólico cuando un paciente presenta por lo menos 3 de las siguientes características: 1) obesidad abdominal, definida como la medida del talle >40 pulgadas o 102 cm en los hombres y >35 pulgadas o 94 cm en las mujeres 2) valores de triglicéridos >150 mg/dl 3) valores de colesterol HDL <40 mg/dl en hombres 4) hipertensión >130/>85 mm Hg 5) azúcar en sangre en ayunas de >110 mg/dl De esta definición del síndrome metabólico se ve claramente que, para su tratamiento, son apropiados los agentes hipotensivos cuando se detectó por ejemplo hipertensión en el paciente. Un resultado de la presente invención es que algunos bloqueantes del receptor de la angiotensina II, pero sobre todo telmisartano, representan agentes hipotensivos preferidos debido a la propiedad de la activación PPAR-gamma, que también son apropiados para el tratamiento de resistencia a la insulina, cuando en el paciente no se comprueba una hipertensión. Como también el síndrome metabólico es considerado un estado que ocasiona un aumento progresivo de la tensión arterial, su tratamiento con telmisartano también puede considerarse una prevención de la hipertensión, pese a valores de tensión arterial normales. También hay sospecha de prediabetes cuando el valor de azúcar en sangre en ayunas está por encima del valor normal máximo de 110 mg de glucosa por di de plasma, pero no supera el valor límite relevante para la diabetes de 125 mg de glucosa por di de plasma. Otro indicio para la prediabetes es una tolerancia alterada a la glucosa, es decir, un valor de azúcar en sangre de 140-200 mg de glucosa por di de plasma 2 horas después de ingerir en ayunas 75 g de glucosa en el marco de una prueba de tolerancia a la glucosa. También un valor en sangre de triglicéridos de más de 150 mg/dl permite suponer la presencia de prediabetes. Esta sospecha se refuerza con valores bajos en sangre de colesterol HDL. En las mujeres, los valores por debajo de 40 mg por di de plasma, en los hombres, los valores por debajo de 50 mg por di de plasma deben considerarse demasiado bajos. La determinación de triglicéridos y colesterol HDL en la sangre pertenece también a los procedimientos estándar en la analítica médica y se describe, por ejemplo, en: Thomas L (ed.): Labor und Diagnose", TH-Books Verlagsgesellschaft mbH, Francfort del Meno, 2000. Hay mayor sospecha de prediabetes cuando los valores de azúcar en sangre en ayunas superan al mismo tiempo 110 mg de glucosa por di de plasma. Cuando los valores en sangre medidos están en el intervalo de los valores límite, se puede utilizar como ayuda adicional para la decisión la relación de la medida del contorno a la medida de las caderas. Si esta relación supera en las mujeres el valor de 0.8 o en los hombres, el valor de 1, se indica un tratamiento . Se indican en especial para el tratamiento de diabetes o prediabetes los antagonistas del receptor de la angiotensina II cuando también se debe tratar una hipertonía. Éste es el caso cuando la presión arterial sistólica supera un valor de 140 mm Hg y la presión arterial diastólica supera un valor de 90 mm Hg. Si un paciente ya padece de una diabetes manifiesta, en la actualidad se recomienda reducir la presión arterial sistólica a un valor inferior a 130 mm Hg y la presión arterial diastólica, a un valor inferior a 80 mm Hg. Para alcanzar estos valores, se puede indicar según el caso la combinación de antagonistas del receptor de angiotensina II con un diurético o un antagonista del calcio. El término "diurético" comprende tiazidas o análogos de tiazida, tales como hidroclorotiazidas (HCTZ), clopamidas, xipamidas o clorotalidonas , antagonistas de aldosterona, tales como espironolactona o eplerenonas, como también otros diuréticos que son apropiados para el tratamiento de hipertensión, como furosemidas y piretanidas, y sus combinaciones con amiloridas y triamtereno. La presente invención da a entender que, para personas que son tratadas por una hipertensión, siempre se indican antagonistas del receptor de angiotensina II como telmisartano cuando se debe prevenir el desarrollo de una diabetes o se debe tratar una diabetes manifiesta. En sólo el 10% de todos los casos de hipertensión (hipertonía secundaria) se puede comprobar una causa identificable como, por ejemplo, una nefropatía. Por tratamiento y eliminación de la causa se puede subsanar, por lo general, la hipertonía secundaria. Pero en casi el 90% de los casos se trata de una hipertonía primaria, cuya causa exacta no es conocida, no siendo posible así una curación directa. Las repercusiones negativas de la hipertensión pueden reducirse por alteración de las costumbres de vida y un correcto tratamiento. La conjunción de distintos factores de riesgo o la aparición conjunta de distintos factores de riesgo parece causar la hipertensión. A menudo se observa, sobre todo, la conjunción de hipertensión con trastornos del metabolismo de las grasas y los azúcares. Estos trastornos pasan en principio inadvertidos, pero pueden ser reconocidos por medio de valores elevados de triglicéridos en sangre y glucosa, así como reducidos valores de colesterol HDL en sangre. Se pueden reconocer adicionalmente en un estadio algo más avanzado por una obesidad de progreso lento. Estos trastornos se pueden aclarar por medio de la creciente resistencia a la insulina. Cuanto menos efectiva sea la insulina, tanto más se confunde el metabolismo de grasas y azúcares. La combinación de todos estos trastornos eleva finalmente la probabilidad de padecer de una glucemia y de fallecer prematuramente de una cardíopatía o vasculopatía . Las estimaciones parten del hecho de que aproximadamente un tercio de los adultos en las regiones de la tierra que tienen superprovisión de alimentos está afectado por la conjunción de una hipertensión con trastornos del metabolismo de grasas y azúcares, y que esta cifra aumentará aún más. De ello resulta una necesidad de medicamentos que están en condiciones de contribuir a enlentecer o detener el avance de los trastornos metabólicos mencionados en una fase lo más temprana posible y, al mismo tiempo, evitar las repercusiones de una hipertensión dañinas para la salud. La presente invención divulga también un medicamento que se puede usar tanto para el tratamiento de hipertonía, como también para el tratamiento de una diabetes manifiesta de tipo 2 o los primeros síntomas del trastorno metabólico complejo de la prediabetes. De esta manera, la presente invención también comprende la prevención de la diabetes en pacientes que son tratados por hipertensión. Si por ello se usa de inmediato un antagonista apropiado del receptor de angiotensina II como telmisartano para el control de la presión arterial en caso de la presencia de los síntomas mencionados de prediabetes, se puede demorar o impedir así la aparición de una diabetes manifiesta de tipo 2. En el caso de los antagonistas del receptor de angiotensina II apropiados en el marco de la presente invención, se trata de compuestos para los que se puede excluir una unión con el dominio de unión de ligandos PPARgamma por test in vitro (comp. Ejemplo 1), mientras que activan celularmente, es decir, tras añadir al medio de cultivo una linea de células reporteras PPARgamma establemente transformada, la expresión de un gen de luciferasa también establemente transfectado (comp. Ejemplo 3). Los antagonistas del receptor de angiotensina II apropiados • no muestran una unión in vitro con el dominio de unión de ligandos de un receptor humano PPARgamma, pero llevan a una • inducción de la actividad de una luciferasa cuando son agregadas al medio de cultivo de una linea de células reporteras PPARgamma establemente transformadas que a) expresa una proteina de fusión compuesta por el dominio de unión con ligandos del factor de transcripción PPARgamma humano, asi como el dominio de unión de ADN de levadura GAL4 , y b) contiene un gel de luciferasa bajo el control de un sitio de unión de levadura Gal4 repetido cinco veces. La preparación de una linea de células reporteras PPARgamma de este tipo se describe en el Ejemplo 2. Una unión in vitro con el dominio de unión con ligandos del receptor PPARgamma2 humano no existe cuando no puede ser detectada en un AlphaScreen (Ullmann EF et al, Proc Nati Acad Sci USA (1994) 91:5426-5430). En lugar de un AlphaScreen, también se puede realizar un ensayo de . SPA (Mukherjee R et al., J Steroid Biochem Mol Biol (2002) 81:217-225) o un ensayo de RMN (Johnson BA et al . , J Mol Biol (2000) 298:187-194). Por lo general, con ninguno de estos procedimientos se puede detectar una unión con el receptor. En las páginas 7-18 del documento WO 95/26188 se halla una enumeración completa de antagonistas del receptor de angiotensina II. Los antagonistas del receptor de angiotensina II se describen, entre otros, en los documentos EP-A-253310, EP-A-323841, EP-A-324377, EP-A-420237, EP-A-443983, EP-A-459136, EP-A-475206, EP-A-502314, EP-A-504888, EP-A-514198, WO 91/14679, WO 93/20816, US 4,355,040 y US 4,880,804. Las formas de realización mencionadas con frecuencia son sartanos, tales como candesartano, eprosartano, irbesartano, losartano, olmesartano, tasosartano, telmisartano o valsartano. Son especialmente preferidos en el marco de la presente invención irbesartano, losartano y telmisartano. Los mejores resultados se logran claramente con telmisartano y sus sales. Las formas de administración preparadas contienen un equivalente de 20-200 mg, con preferencia 20, 40, 80, 120, 160 ó 200 mg del ácido libre del principio activo. Si el principio activo está combinado con HCTZ o clortalidona, la forma de administración contiene 10-50 mg, con preferencia 50, 25 ó 12.5 mg del diurético . La ventajosa acción divulgada en esta invención de cada uno de los antagonistas de angiotensina II es particularmente marcada para el principio activo telmisartano . Si la aplicación combinada de un bloqueante del receptor de angiotensina II con uno o varios otros principios activos terapéuticos es conveniente o necesaria, telmisartano representa un bloqueante preferido del receptor de angiotensina II, porque combina en un único principio activo una acción hipotensiva con una metabólica, por ejemplo, una acción antidiabética que también contribuye con la prevención de la diabetes. Por este motivo, las combinaciones de principios activos preformuladas de telmisartano con inhibidores de la HMG-Co A reductasa como simvastatina o atorvastatina implican un desarrollo posterior orientado a la terapia de enfermedades cardiovasculares, cardiopulmonares, pulmonares o renales, pero también el tratamiento de dislipidemia, osteoporosis o Alzheimer. Esto rige también para combinaciones de principios activos de telmisartano con rosiglitazona o pioglitazona o repaglinida o metformina o un inhibidor de DPP4 en una terapia contra diabetes. También en el tratamiento de la hipertensión con inhibidores del sistema renina-angiotensina (RAS) en combinación con un antagonista de calcio como amlodipina o nifedipina o un antagonista de la aldosterona como espironolactona o eplerenona, el telmisartano debe ser considerado un inhibidor preferido de RAS. La combinación con un antagonista de la aldosterona como eplerenona también representa para el tratamiento o la prevención de debilidad cardiaca o infarto cardiaco un importante desarrollo ulterior. Además de la hipertensión, los trastornos del metabolismo de las grasas (dislipidemias) y la diabetes mellitus también implican un elevado riesgo de ataque apopléjico, de modo que el telmisartano también representa en asociación con los inhibidores de la agregación de trombocitos como clopidogrel o dipiridamol, siempre combinado adicionalmente con ácido acetilsalicilico (ASA), una pareja preferida de combinación sobre todo para la profilaxis de un ataque apopléjico. El dipiridamol puede usarse para este fin en una dosis de 50 a 750 mg, con preferencia de 100 a 500 mg y, en especial, de 200 a 450 mg. ASA puede usarse en una dosis de 10 a 200 mg, con preferencia de 25 a 100 mg y, en especial, de 30 a 75 mg. Por ello, otro objeto de la presente invención son composiciones farmacéuticas que comprenden telmisartano o una de sus sales en combinación con • amlodipina o nifedipina, · eplerenona o espironolactona, • simvastatina o atorvastatina, • rosiglitazona . o pioglitazona o repaglinida o metformina, • dipiridamol o clopidogrel, en todos los casos en combinación con ácido acetilsalicílico, • una sulfonilurea, • un antagonista de aldosterona, • un inhibidor de la HMG-Co ? reductasa, • un inhibidor de DPP4 o • un inhibidor de la agregación de trombocitos, asi como su preparación. Estas combinaciones preformuladas de principios activos se elaboran, por lo general, con uno o varios excipientes de formulación, tales como manitol, sorbitol, xilita, sacarosa, carbonato de calcio, fosfato de calcio, lactosa, sal sódica de croscarmelosa (sal sódica de carboximetiléter de celulosa, reticulada) , crospovidona, glicolato de almidón sódico, hidroxipropilcelulosa (de baja sustitución) , almidón de maiz, polivinilpirrolidona, copolimerizados de vinilpirrolidona con otros derivados de vinilo (copovidona) , hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, celulosa microcristalina o almidón, estearato de magnesio, estearilfumarato de sodio, talco, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa, acetato-ftalato de celulosa, acetato de polivinilo, agua, agua/etanol, agua/glicerina, agua/sorbita, agua/polietilenglicol, propilenglicol, alcohol cetilestearilico, carboximetilcelulosa o sustancias con contenido graso como grasa dura o sus mezclas adecuadas, en preparaciones galénicas usuales, tales como comprimidos, grageas, cápsulas, polvos, suspensiones o supositorios. Se obtienen comprimidos, por ejemplo, por mezcla del o de los principios activos con uno o varios excipientes y posterior compresión. Los comprimidos pueden consistir también en varias capas. Ejemplos de excipientes son • diluyentes inertes, tales como manitol, sorbitol, xilita, sacarosa, carbonato de calcio, fosfato de calcio y lactosa; • desintegrantes, tales como sal sódica de croscarmelosa (sal sódica de carboximetiléter de celulosa, reticulada) , crospovidona, glicolato de almidón sódico, hidroxipropilcelulosa (de baja sustitución) y almidón de maíz ; • aglutinantes, tales como polivinilpirrolidona, copolimerizados de vinilpirrolidona con otros derivados de vinilo (copovidona) , hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, celulosa microcristalina o almidón; • lubricantes, tales como estearato de magnesio, estearilfumarato de sodio y talco; • agentes para lograr el efecto de depósito, tales como hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa, acetato-ftalato de celulosa y acetato de polivinilo; y • colorantes farmacéuticamente aceptables, tales como óxidos de hierro coloreados . El bloqueo de la aldosterona reduce la mortalidad y la morbilidad en pacientes con una marcada debilidad cardiaca. Si los pacientes, tratados por debilidad cardiaca sintomática e insuficiencia cardiaca izquierda con inhibidores de ACE, antagonistas del receptor de angiotensina, diurético o beta-bloqueantes, padecen de un infarto de miocardio, se pudo demostrar que el tratamiento adicional con el bloqueante selectivo de aldosterona eplerenona mejora sus oportunidades de supervivencia y lleva a una reducción de posteriores ingresos en el hospital (NEJM 348:1309-1321, 2003). En el grupo de pacientes investigados también se contemplaron los pacientes con diabetes, en los que había una insuficiencia cardíaca izquierda, pero no una debilidad cardíaca sintomática, ya que para este grupo de pacientes el riesgo de un evento cardiovascular es comparativamente igual que en pacientes con insuficiencia cardíaca izquierda y debilidad cardíaca sintomática. Si se tiene en cuenta esto, el descubrimiento aquí divulgado del efecto antidiabético del bloqueante del receptor de la angiotensina II telmisartano significa que está indicada su combinación con eplerenona en el tratamiento posterior de un infarto de miocardio sobre todo en aquellos pacientes que ya padecen de diabetes y en todos los casos de proteinuria diabética, o en los que existe una sospecha de prediabetes . Por ello, es objeto de la presente invención las formas de administración farmacéuticas en las que los dos principios activos telmisartano y eplerenona están combinados, por ejemplo un equivalente de 40-320 mg, con preferencia 80 ó 160 mg de telmisartano y un equivalente de 20-200 mg, con preferencia 25 ó 50 mg de eplerenona. Una forma de administración preferida son los comprimidos bicapa. Para el tratamiento de estos pacientes con simultáneos síntomas de una dislipidemia (por ejemplo, hipertrigliceridemia o hipercolesterolemia) es conveniente con frecuencia la combinación adicional con un reductor de lipidos como simvastatina o atorvastatina en la dosis usual de 2.5-40 mg, con preferencia 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 ó 40 mg. Se puede preparar una forma de administración correspondiente de telmisartano, eplerenona y atorvastatina o simvastatina, por ejemplo, como comprimido tricapa. El principio activo eplerenona se usa sobre todo en forma micronizada con un tamaño de partícula D90 de 25-400 micrones (comp. documento WO 00/33847) . La metformina es un antidiabético de buenos resultados que logra su efecto principal reduciendo la hiperproducción de glucosa en el hígado de un diabético. En el control terapéutico de la diabetes mellitus, el valor HbAlc, el producto de una glicación no enzimática de la cadena de hemoglobina B, un significado sobresaliente. Dado que su formación depende esencialmente del nivel de azúcar en sangre y el tiempo de vida de los eritrocitos, el HbAlc refleja, en el sentido de una "memoria de azúcar en sangre" el nivel medio de azúcar en sangre de las últimas 4-6 semanas. Los pacientes diabéticos cuyo valor HbAlc está bien regulado a largo plazo por una terapia intensiva antidiabética (es decir, < 6.5% de toda la hemoglobina de la muestra) , están mucho más protegidos de una microangiopatía diabética. La metformina sola logra en el diabético una mejora media del valor HbAlc en la magnitud de 1.0 - 1.5%. Esta reducción del valor HbAlC no es suficiente en todos los diabéticos para llegar al intervalo blanco deseado de < 6,5% y preferentemente < 6% de HbAlc. Por ello, se requieren medidas terapéuticas adicionales para incrementar la acción de la metformina. En el marco de la presente invención se halló, sorprendentemente, que el telmisartano actúa como activador de PPAR-gamma. De esta manera, el telmisartano posee el potencial de elevar la sensibilidad de la insulina del tejido graso, muscular y hepático para lograr, de esta manera, una reducción del azúcar en sangre. Las formas de administración de una combinación de repaglinida y . telmisartano contienen, por ejemplo, un equivalente de 0.25 a 5 mg, con preferencia 0.25 a 2 mg, y con preferencia especial 0.5 ó 1 ó 2 mg de repaglinida y un equivalente de 40-320 mg, con preferencia 80 ó 160 mg de telmisartano. Una combinación de telmisartano y metformina es particularmente apropiada en los diabéticos adiposos de tipo 2, ya que, por un lado, la metformina no lleva a un aumento del peso corporal contrariamente a otros antidiabéticos orales y, por otro lado, el telmisartano reduce la resistencia a la insulina como característica y causa importante de los elevados niveles de azúcar en sangre en estos diabéticos de tipo 2. En la mayoría de los diabéticos adiposos de tipo 2, como también en los prediabéticos , se comprueba un aumento de la presión arterial que pertenece también a los criterios del síndrome metabólico. Para este grupo de pacientes, el telmisartano implica un antihipertensivo preferido cuyas propiedades adicionales actúan favorablemente como sensibilizante de la insulina con un antidiabético de buenos resultados como metformina, a fin de tratar al mismo tiempo y de la misma manera distintos aspectos de las enfermedades diabetes de tipo 2, prediabetes de tipo 2 o síndrome metabólico o resistencia a la insulina. Con una administración complementaria de telmisartano, se puede lograr una mejora adicional del valor HbAlc en la magnitud 0.25 - 2%, con preferencia 0.25 - 1% y con preferencia especial 0.25 - 0.5%. Incluso una mejora del valor HbAlc inferior a 0.25% de la hemoglobina total significa un aporte conveniente al tratamiento de un diabético de tipo 2, pero actualmente no es mensurable de modo confiable. Tal como mostró el estudio ÜKPDS (United Kingdom Prospective Diabetes Study) , una reducción de la hipertensión también es activa como una terapia para reducir el azúcar en sangre, a fin de reducir en los diabéticos de tipo 2 complicaciones tardías, tales como nefropatia, neuropatía, retinopatía, como también todas las complicaciones macrovasculares . De esta manera, la combinación propuesta de telmisartano y metformina implica un aporte esencial a la reducción o incluso al impedimento de las secuelas preponderantes de la diabetes. Las formas de administración de una combinación de metformina y telmisartano contienen, por ejemplo, un equivalente de 450-900 mg, con preferencia 500 u 850 mg de metformina y un equivalente de 40-320 mg, con preferencia 80 ó 160 mg de telmisartano. Por ello, son objeto de la presente invención las formas de administración farmacéuticas en las que los dos principios activos telmisartano y eplerenona están combinados, por ejemplo un equivalente de 40-320 mg, con preferencia 80 ó 160 mg de telmisartano y un equivalente de 20-200 mg, con preferencia 25 ó 50 mg de eplerenona. Una forma preferida de administración son los comprimidos bicapa. La combinación de las cantidades preferidas de principios activos y excipientes da como resultados las siguientes masas : Tabla 1: Comprimidos con 80 mg de telmisartano TelmisartaiKs/metformina 80/500 mg 80/850 mg Hidrocloruro de metformina 643 mg 1094 mg (equivalente a 500 mg u 850 mg de metformina) Excipientes (aglutinantes 27 mg 46 mg y lubricantes) al menos Granulado de telmisartano 135 mg 135 mg SD (equivalente a 80 mg de telmisartano) Excipientes de la matriz 345 mg 345 mg de comprimidos de telmisartano (sorbitol y lubricantes) Total comprimido (por lo 1150 mg 1620 mg menos) Tabla 2: Comprimidos con 160 mg de telmisartano Las formas de administración de una combinación de repaglinida y telmisartano contienen, a modo de ejemplo, un equivalente de 0.25 a 5 mg, con preferencia 0.25 a 2 mg, y con preferencia especial 0.5 ó 1 ó 2 mg de repaglinida y un equivalente de 40-320 mg, con preferencia 80 ó 160 mg de telmisartano . Ej emplos : Ejemplo 1 Telmisartano, losartano e irbesartano no se unen in vltro con el dominio de unión de ligandos PPARgamma La proteina que contiene el dominio de unión de ligandos PPARgamma humanos (LBD) se produce como proteina de fusión de GST en E.coli y se purifica por cromatografía por afinidad. Para ello se subclona una sección de ADN que codifica los aminoácidos 205-505 del factor de transcripción PPARgamma2 humano (comp. entrada en banco de genes U79012) a través de los sitios de restricción insertados adicionalmente BamH I y Xho I en el vector de expresión pGEX-4T-l (Amersham) y se controla la secuencia de la sección. La expresión de la proteína de fusión se realiza en la cepa de E. coli BL21 (DE3) recomendada para vectores pGEX después de la inducción con 0.2 mM de IPTG durante 4 horas a 25°C. Las bacterias se pelletizan después de la inducción y se congelan en porciones en PBS, pH 7.4. Después de la desintegración en una prensa francesa, se purificó la proteína de fusión GST-PPARgamma-LBD disuelta con ayuda de una columna GSTrap (Pharmacia) . La elución se produjo por adición de 20 mM de glutatión reducido . Las fracciones de proteína GST-PPARgamma-LBD se desalinizan con ayuda de una columna de desanilización HiTrap (Pharmacia) y se determina la concentración de proteínas con un ensayo estándar. La proteína que contiene el dominio de unión de ligandos RXRalpha humanos (LBD) se produce como proteína de fusión His tag en E. coli y se purifica por cromatografía por afinidad. Para ello se subclona una sección de ADN que codifica los aminoácidos 220-461 del factor de transcripción RXRalpha humano (comp. entrada en banco de genes NM_002957, nt 729-1457) a través de los sitios de restricción insertados adicionalmente BamH I y Not I en el vector de expresión pET28c (Novagen) y se controla la secuencia de la sección. La expresión de la proteína de fusión se realiza en la cepa de E. coli BL21 (DE3) recomendada para vectores pET después de la inducción con 0.2 mM de IPTG durante 4 horas a 25 °C. Las bacterias se pelletizan después de la inducción y se congelan en porciones en PBS, pH 7.4. Después de desintegrar en una prensa francesa, se purifica la proteína de fusión His-RXRalpha-LBD disuelta con ayuda de una columna quelante HiTrap (Pharmacia) . La elución se realizó a través de una etapa de 500 mM de imidazol. Las fracciones de proteína His-RXRalpha-LBD se desalnizan con ayuda de una columna de desalinización HiTrap (Pharmacia) y se determina la concentración de las proteínas con un ensayo' estándar, a) AlphaScreen Los ensayos Alpha Screen se describieron por primera vez en Ullmann EF et al, Proc Nati Acad Sci USA (1994) 91:5426-5430. Las mediciones realizadas en el marco de este ejemplo se llevaron a cabo tal como se describe en Glickman JF et al., J Biomol Screen (2002) 7: 3-10. El tampón de ensayo está compuesto de 25 mM de Hepes pH 7.4, 100 mM de NaCl, 1 mM de DTT, 0.1% de Tween-20, 0.1% de BSA. Se incuban 3 nM de proteína de fusión GST-PPARgamma-LBD, 15 nM de péptido LXXLL biotinilado del cofactor CBP (equivalente al péptido divulgado en la página 218 de Mukherjee R et al., J Steroid Biochem Mol Biol (2002) 81:217-225 con una cisteína N-terminal adicional) y 10 g/ml de perlas aceptoras anti-GST o bien perlas donoras de estreptavidina (Applied Biosystems) en un volumen total de 12.5 µ? en presencia de distintas concentraciones de una sustancia de ensayo (en DMSO) durante 4 horas a temperatura ambiente. La concentración final de DMSO en el ensayo es del 1% (v/v) . Como control de fondo (NSB) sirve una disolución de DMSO al 1%. La medición se realiza en el medidor de fusión Packard.

Telmisartano Rosiglitazona Conc. / M PM SD PM SD NSB 619 21 573 17 1.00E-08 820 18 3.00E-08 642 41 1720 48 1.00E-07 606 10 8704 59 3.00E-07 644 56 27176 1232 1.00E-06 677 14 43233 1083 3.00E-06 720 35 52691 3771 1.00E-05 847 82 56366 4303 .00E-05 1111 135 Contrariamente a la rosiglitazona, un agonista PPARgamma conocido en la bibliografía con unión en LBD, no tiene lugar una activación directa de PPARgamma-LBD por mayores concentraciones de telmisartano, losartano e irbesartano (concentraciones de hasta 50 µ?) y, ligado a ello, un reclutamiento significativo del péptido LXXL.L. b) Ensayo de SPA Se halla una descripción del formato de ensayo de SPA en Mukherjee R et al., J Steroid Biochem Mol Biol (2002) 81:217-225. El tampón de ensayo está compuesto de 20 mM de Tris pH 7.5, 25 mM de KC1, 10 mM de DTT y 0.2% de Tritón X-100. Se incuban 30 nM de proteína de fusión GST-PPARgamma-LBD, 30 nM de His-RXRalpha-LBD, anticuerpos anti-GST (1:600, Amersham Pharmacia), 0.25 mg de perlas de unión con anticuerpos de protexna P A SPA PVT (Amersham Pharmacia) , 30 nM de rosiglitazona marcada con 3H en un volumen total de 100 µ? con diluciones de sustancia de ensayo durante 5 horas a temperatura ambiente. Como control de fondo (NSB) se añaden 10 µ? de rosiglitazona sin marcar en lugar de la rosiglitazona radiactiva, como valor máximo (Bmáx) se añade en lugar de una sustancia de ensayo el disolvente utilizado, por ejemplo DMSO. A continuación de la incubación, se centrifugan las tandas de ensayo durante 5 minutos a 2000 rpm en una centrifuga Hettich Universal 30Rf y se miden en el contador Packard TopCount NXT.

Telmisartano Irbesartano Losartano Conc / M PM SD PM SD PM SD NSB 217 9 217 9 217 9 Bmáx 911 15 911 15 911 15 1.00E-07 837 49 913 54 915 43 3.00E-07 802 28 810 49 835 11 1. OOE-06 818 27 815 51 901 10 3.00E-06 818 20 779 26 814 53 1. OOE-05 703 30 723 37 787 46 3.00E-05 691 222 648 40 784 96 1.00E-04 545 18 510 81 611 17 Contrariamente a los agonistas PPARgamma directos que se unen con PPARgamma-LBD, tampoco tiene lugar con muy grandes excesos de telmisartano, losartano o irbesartano un desplazamiento de la rosiglitazona radiactiva dependiente de la concentración del saco de unión, c) Ensayos por RMN Contrariamente a un ligando PPARgamma directo, por ejemplo rosiglitazona, no tiene lugar en la medición del espectro 15N TROSY de PPARgamma-LBD en presencia de las sustancias de ensayo telmisartano una interacción de la sustancia de ensayo con aminoácidos del saco de unión. Los aminoácidos del saco de unión presentan en presencia de las sustancias de ensayo el mismo posicionamiento que en ausencia de un ligando. Ejemplo 2: Producción de una linea de células reporteras PPJURgamma establemente transformadas Una sección de ADN que codifica los aminoácidos 205-505 de lfactor de transcripción PPARgamma2 humano (equivalente a los nucleótidos 703-1605 de la secuencia del banco de genes U79012) se incorpora a través de sitios de restricción BamH I e Hind III insertados adicionalmente en el sitio de clonación múltiple del vector pFA-CMV (Stratagene) y se verifica la secuencia. El plésmido resultante pFA-CMV/hPPARgamma2-LBD codifica de modo N-terminal del PPARgamma-LBD en igual cuadricula de lectura un dominio de unión de ADN Gal4. Adicionalmente, el plásmido codifica una resistencia a neomicina. La línea celular CHO-K1 (ATCC CCL-61) se cotransfecta con los plásmidos pFA-C V/hPPARgamma2-LBD y pFR-Luc (Stratagene) . pFR-Luc codifica el gen de luciferasa bajo el control de un sitio de unión de levadura Gal4 repetido cinco veces. La transfección se realiza con Lipofectamin2000 de acuerdo con las indicaciones del fabricante. Después de la transfección, las células se cultivan en medio (Ham' s F12 con 10% de suero fetal de ternero) en presencia de 0.5 mg/ml de G-418. Después de un cultivo de seis días, se pasan las células y se mantienen en cultivo durante otros 10 días. Las colonias resultantes, resistentes a la neomicina, se separan en el microscopio, se colocan en placas de 96 pocilios y se cultivan. Se obtienen distintas lineas celulares transformadas con los plásmidos contenidos (por ejemplo, clon Nros. 10, 11, 13 etc.), que se siguen conservando en medio de cultivo. Las lineas celulares se investigan en cuanto a la inducibilidad del gen de luciferasa por un agonista PPARgamma, por ejemplo rosiglitazona, y se hacen reaccionar con una señal aumentada de luciferasa a la estimulación con un agonista PPARgamma. Ejemplo 3: Telmisarfcano , losartano e irbesartano activan PPARgamma de modo celular La linea celular CH0-K1 derivada del clon transformado 11 del Ejemplo 2 se siembra en placas de fondo plano de 96 pocilios con una densidad de 3 x 104 células/200 µ?/pocillo y se cultiva durante la noche en medio Ham's F-12 con 10% de suero fetal de terno y 0.5 mg/ml de G-418. Al cabo de 24 horas, se cambia a un medio sin adición de G-418. Las sustancias de ensayo se llevan con un disolvente apropiado, por ejemplo DMSO, a 100 veces la concentración deseada y se diluyen con el medio colocado de la placa de cultivo celular 1:100. Como control de fondo sirve el disolvente utilizado, por ejemplo DMSO, en igual concentración. 24 horas después de incorporar la sustancia, se descartan los sobrenadantes y se lavan las células dos veces con 150 µ? de tampón de lavado por vez (25 m de tricina, 16.3 mM de MgSC>4 , pH 7.8). Después de los pasos de lavado, se añaden por tanda de ensayo 50 µ? de tampón de lavado con 150 µ? de tampón de ensayo de luciferasa (25 mM de tricina, 0.5 mM de EDTA, 0.54 mM de NaTPP, 16.3 mM de MgS04, 1.2 mM de ATP, 0.05 mM de luciferina, 56.8 mM de 2-mercaptoetanol, 0.1% de Trition X-100, pH 7.8). La medición de la luminiscencia se realiza después de un tiempo de espera de cinco minutos en el contador Packard TopCount NXT. La actividad de la luciferasa se obtiene por la integración de las unidades relativas de luciferasa (RLÜ) de los primeros diez segundos de empezada la medición.

Telmisartano Irbesartano Losartano Rosiglitazona Conc. /M PM SD PM SD PM SD PM SD NSB 466 188 466 188 466 188 741 141 1.00E-08 2761 178 3.00E-08 8256 708 1.00E-07 35265 2947 3.00E-07 760 255 491 70 874 475 86859 6139 1.00E-06 2859 455 657 65 589 70 106252 30018 3.00E-06 24498 2290 1028 342 672 88 143232 14064 1.00E-05 61397 7853 3292 556 709 163 150989 24245 3.00E-05 58790 2055 22133 4202 3271 585 l.OOE-04 29600 6936 11322 1668 Por medio del antagonista del receptor de angiotensina II telmisartano se produce una activación particularmente potente de la via de PPARgamma en la linea de células reporteras PPARgamma. Una activación a través de otros antagonistas del receptor de angiotensina II como losartano e irbesartano recién tiene lugar con mayores concentraciones de ensayo y en pequeña escala.

Ejemplo 4 Experimentos con adipocitos 3T3-L1 y células PC12W Se cultivan preadipocitos de ratón 3T3-L1 en DMEM (medio Eagle modificado con Dulbecco) con 10% de suero fetal de ternero (FBS) . Se cultivan células PC12 en DMEM con 5% de FBS y 10% de suero de caballo. En ambos casos, los medios contienen 1% de penicilina / estreptomicina. La diferenciación de adipocitos se induce durante 2-3 días después de la confluencia celular con la adición de una disolución de diferenciación. Ésta contiene 1 umol/l de dexametasona, 0.5 mmol/1 de 3-isobutil-l-metilxantina, 1.67 µp???/? de insulina y 10% de FBS.

Para la comparación, se induce la diferenciación también con una disolución de diferenciación que contiene adicionalmente telmisartano. Al cabo de 48 horas (día 2), se reemplaza el medio por DMEM que contiene 10% de FBS y 1.67 umol/1 de insulina o bien 10% de FBS y 1.67 pmol/l de insulina y telmisartano. Luego se estimulan las células durante otras 48 horas y antes de ser finalmente analizadas (día 4) . Acumulación de lipidos en adipocitos 3T3-L1 Se lavan células con PBS y se fijan con una disolución al 3,7% de formaldehído durante 2 minutos. Después de la fijación, las células se colorean durante 1 hora a temperatura ambiente con una disolución de depósito al 0,5% diluida con agua 3:2 de Oil Red-0 en isopropanol. Después de lavar, las células se investigan en el microscopio óptico. 10 µp???/? de telmisartano producen una mayor acumulación de lipidos que se hace visible por medio de una coloración incrementada de Oil Red-O. La diferenciación de adipocitos 3T3-L1 también es favorecida por el telmisartano.

Estimulación de la expresión de aP2 en células 3T3-L1 El aislamiento de ARN, la transcripción inversa y la cuantificación de la expresión génica se producen con un sistema de detección de secuencias ABI 7000 para tiempo real PCR (descrito en Janke et al, Diabetes 51:1699-707, 2002). Como control endógeno para el tiempo real PCR sirven los genes domésticos 18 S rRNA e hipoxantina guanina fosforibosiltransferasa (hprt) . La inducción observada depende de la concentración aplicada de telmisartano. 10 ymol/l de telmisartano estimulan la expresión de la proteina 2 adiposa del gen marcador adipogénico (aP2) en células 3T3-L1 3.1 ± 0.3 veces (p<0.01). En comparación, una concentración de 10 umol/l del ligando PPARgamma pioglitazona estimula la expresión de aP2 4.5 ± 1 veces (p<0.01) .

Ensayo de reporteros de transcripción Para investigar si la inducción de la adipogénesis por medio de telmisartano .es el resultado de una estimulación de la actividad PPARgamma, se realizan experimentos de transfección con construcciones reporteras de PPRE (elemento de respuesta PPAR) . La transfección transitoria y los ensayos de luciferasa empleados se describen en Kintscfter et al, Circ Res. 91:e35-44, 2002. Se transfectan adipocitos 3T3-L1 (dia 4) o bien células PC12W con Lipofectamine 2000 (Invitrogen) en presencia de 1 g (para células 3T3-L1) o bien 50 ng (para células PC12W) de una construcción reportera, vectores de expresión de PPARgamma2 y RXRalpha, asi como 10 ng de un vector de control reportero de renilla luciferasa. En el caso de la construcción reportera se trata de una fusión del elemento de respuesta PPAR de 3xacil-CoA oxidasa (PPRE) con Tk-luciferasa . Los vectores de expresión PPARgamma2 y RXRalpha utilizados se corresponden con los vectores descritos por Elbrecht et al, Biochem Biophys Res Com 224: 431-437, 1996 y Joseph et al, J Biol Chem 277(13) : 11019-11025, 2002. En el caso del vector de control reportero de luciferasa, se trata del plásmido pRL-CMV (Promega) . Después de 4 horas, se reemplaza el medio de transfección por DMEM con 10% de FBS, que adicionalmente contiene telmisartano, pioglitazona o el portador DMSO. Se mide la actividad de la luciferasa al cabo de 24 horas. El tratamiento con adipocitos 3T3-L1 con 10 µp???/? de telmisartano llevan a una inducción de la actividad de transcripción de PPARgamma 3.4 + 0.9 veces (p<0.05) en comparación con una inducción de 5.2 ± 1.1 veces por 10 µ????/? de pioglitazona. Las células PC12W tienen déficit de receptores ???.

PPARgamma 2 y su compañero heterodímero RXRalpha se sobreexpresan en células PC12W y se mide la transcripción dependiente de PPARgamma en presencia o ausencia de 10 pmol/l de telmisartano o pioglitazona. Como las células PC12W no expresan PPARgamma, no se mide en ausencia de PPARgamma2 / RXRalpha exógeno una regulación de la actividad de PPARgamma. Después de la sobreexpresión del heterodimero PPARgamma 2 / RXRalpha, el telmisartano induce también en las células PC12W deficientes en receptores ATa la actividad de PPARgamma 1.9 ± 0.4 veces (p<0.05). En comparación, la pioglitazona induce la actividad de PPARgamma 4.2 + 1.4 veces (p<0.01). Esto comprueba que la activación de la actividad de PPARgamma por medio de telmisartano se realiza de modo independiente el bloqueo del receptor ???. Los datos significan también que las concentraciones de telmisartano, necesarias para la estimulación de la actividad de PPARgamma, se pueden lograr en el plasma sanguíneo de pacientes que se tratan contra hipertensión con telmisartano. Esto significa que un tratamiento contra hipertensión con telmisartano puede mejorar adicionalmente la sensibilidad a la insulina, lo cual repercute positivamente sobre el nivel de azúcar en sangre.

Ejemplo 5: Ejemplos de formulación Comprimido 1 Con la compresión directa de la sal sódica de telmisartano con excipientes y estearato de magnesio, se obtienen comprimidos de la siguiente composición : Componentes: mg Sal sódica de telmisartano 41.708 Manitol 149.542 Celulosa microcristalina 50.000 Sal sódica de croscarmelosa 5.000 Estearato de magnesio 3.750 Total 250.000 Comprimido 2 Con la compresión directa de la sal sódica de telmisartano con excipientes y estearato de magnesio, se obtienen comprimidos de la siguiente composición: Componentes: mg Sal sódica de telmisartano 83.417 Sorbitol 384.083 Polividona K25 25.000 Estearato de magnesio 7.500 Total 500.000 Comprimido 3 Se mezclan hidroclorotiazida, sal sódica de telmisartano, sorbitol y óxido de hierro rojo en un mezclador de caída libre ("Free Fall Blender") , se pasan por un tamiz de 0.8 mm y, tras añadir estearato de magnesio, se elabora en un mezclador de caída libre hasta formar una mezcla pulverulenta . Esta composición de principios activos y excipientes se prensa en comprimidos con una prensa para comprimidos apropiada (por ejemplo, Korsch EKO o Fette P1200) . Se preparan comprimidos con la siguiente composición, en donde la cantidad de sal sódica de telmisartano contenida por comprimido equivale a una cantidad de 80 mg del ácido libre del telmisartano.

Las sales sódicas de telmisartano de los comprimidos de los tres lotes se disuelve tras agitar durante 30 minutos (75 rpm) en 900 mi de tampón fosfato 0.1 M pH 7.5 a 92 ± 1.5 %, 96 ± 1.8 % o 100 ± 1.0 %. La hidroclorotiazida se disolvió luego de 30 minutos en 900 mi de HC1 (100 rpm) a 69 + 6.3 %, 72 ± 2.1 % o 78 ± 1.8 %.

Claims (20)

1. REIVINDICACIONES 1. Uso de un antagonista del receptor de angiotensina II o una de sus sales para preparar un medicamento para el tratamiento de personas, en las que se diagnosticó diabetes mellitus de tipo 2 o existe sospecha de una prediabetes, para la prevención de diabetes o para el tratamiento del síndrome metabólico y la resistencia a la insulina en pacientes con presión arterial normal.
2. 2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque en las personas por tratar el valor de azúcar en sangre en ayunas supera 125 mg de glucosa por di de plasma .
3. 3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque en las personas por tratar el valor de azúcar en sangre en ayunas es de 110-125 mg de glucosa por di de plasma.
4. 4. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, 'caracterizado porque en las personas por tratar se mide 2 horas después de la ingesta en ayunas de 75 g de glucosa un valor de azúcar en sangre superior a 20C mg de glucosa por di de plasma.
5. 5. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque en las personas por tratar se mide 2 horas después de la ingesta en ayunas de 75 g de glucosa un valor de azúcar en sangre de 140-200 mg de glucosa por di de plasma .
6. 6. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque en las personas por tratar el valor de triglicéridos en sangre supera 150 mg/dl.
7. 7. Uso de acuerdo con la reivindicación 6, caracterizado porque en las personas por tratar el valor de HDL en sangre en mujeres es inferior a 40 mg por di de plasma, en los hombres, inferior a 50 mg por di de plasma.
8. 8. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 6 y 7, caracterizado porque en las personas por tratar el valor de' azúcar en sangre en ayunas supera 110 mg de glucosa por di de plasma .
9. 9. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 1-8, caracterizado porque en las personas por tratar la presión arterial sistólica supera un valor de 140 mm Hg y la presión arterial diastólica supera un valor de 90' mm Hg.
10. 10. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 1, 2 y 4, caracterizado porque en las personas por tratar la presión arterial sistólica supera un valor de 130 mm Hg y la presión arterial diastólica supera un valor de 80 mm Hg.
11. 11. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 1-10, caracterizado porque en las personas por tratar la relación de medida de cintura a medida de cadera en las mujeres supera el valor 0,8 y en los hombres supera el valor 1.
12. 12. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque el antagonista del receptor de la angiotensina II posee la propiedad de activar, tras añadir al medio de cultivo una linea de células reporteras PPARgamma establemente transformadas, la expresión de un gen de luciferasa establemente transfectado, son unirse in vitro con el dominio de unión de ligandos PPARgamma.
13. 13. Uso de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizado porque el antagonista del receptor de la angiotensina II no muestra in vitro una unión con el dominio de unión de ligando de un receptor PPARgamma humano, mientras que el antagonista del receptor de la angiotensina II lleva a la inducción de la actividad de una luciferasa, cuando se añade al medio de cultivo de una linea celular establemente transformada, que expresa una proteina de fusión compuesta por el 'dominio de unión de ligando del factor de transcripción PPARgamma humano, asi como el dominio de unión de ADN de levadura GAL4 y contiene un gel de luciferasa bajo el control de un sitio de unión de levadura Gal4 repetido cinco veces. 14. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque en el caso del antagonista del receptor transcripción PPARgamma humano, asi como el dominio de unión de ADN de levadura GAL4 y contiene un gel de luciferasa bajo el control de un sitio de unión de levadura Gal4 repetido cinco veces.
14. 14. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque en el caso del antagonista del receptor de la angiotensina II se trata del principio activo telmisartano .
15. 15. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque la forma de administración del medicamento contiene 20-200 mg de telmisartano.
16. 16. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque el antagonista del receptor de la angiotensina II se combina con un diurético.
17. 17. Uso de acuerdo con la reivindicación 16, caracterizado porque la forma de administración del medicamento contiene 10-50 mg de HCTZ o clortalidona .
18. 18. Medicamento que contiene un antagonista del receptor de la angiotensina II, para el tratamiento de personas, en las que se diagnosticó diabetes mellitus de tipo 2 o hay una sospecha de prediabetes, para la prevención de diabetes o para el tratamiento del síndrome metabólico y la resistencia a la insulina en pacientes con presión arterial normal.
19. 19. Medicamento de acuerdo con la reivindicación 18, caracterizado porque en el caso del antagonista del receptor de la angiotensina II se trata del principio activo telmisartano .
20. 20. Composición farmacéutica que comprende telmisartano en combinación con a) amlodipina o nifedipina, b) eplerenona o espironolactona, c) simvastatina o atorvastatina, d) rosiglitazona o pioglitazona o repaglinida o metformina, e) dipiridamol o clopidogrel, en todos los casos en combinación con ácido acetilacetilico, f) un antagonista de aldosterona, g) un inhibidor de HMG-Co A reductasa, h) un inhibidor de DPP4, i) una sulfonilurea o j ) un inhibidor de la agregación de trombocitos .