MXPA05010134A - Anticuerpos anti-il-20, metodos y moleculas de enlace que se usan en la inflamacion. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de moleculas de polipeptido IL-20. IL-20 y IL-22 son citocinas que estan involucradas en procesos inflamatorios y enfermedades humanas. La presente invencion incluye anticuerpos anti-IL-20 y anti-IL-22RA y moleculas de enlace, asi como metodos para antagonizar IL-20 usando tales anticuerpos y moleculas de enlace.

Description

ANTICUERPOS ANTI-IL-20, METODOS Y MOLECULAS DE ENLACE QUE SE USAN EN LA INFLAMACION ANTECEDENTES DE LA INVENCION Las citocinas son proteínas pequeñas solubles que median una variedad de efectos biológicos que incluyen la regulación del crecimiento y diferenciación de muchos tipos celulares (ver por ejemplo, Arai et al., Annu. Rev. Biocheen. 55:783 (1990); Mosmann, Curr. Opin. Inmuno1. 3:311 (1991); Paul y Seder, Cell 76: 241 (1994) ) . Las proteínas que constituyen el grupo de las citocinas incluyen interleucinas , interferones, factores que estimulan a las colonias, factores de la necrosis del tumor y otras moléculas reguladoras. Por ejemplo, la interleucina 17 humana es una citocina que estimula la expresión de la interleucina 6, molécula 1 de adhesión intracelular, interleucina 8, factores que estimulan a la colonia de macrófagos de los granulocitos y la expresión E2 de la prostaglandina, y juegan un papel importante en la maduración preferencial de los precursores hematopoyéticos CD34+ en los neutrófilos (Yao et al., J. Immunol. 155:5483 (1995); Fossiez et al., J. Exp. Med.183:2593 (1996)) . Los receptores que enlazan citocinas están compuestos típicamente de una o más proteínas de membrana integral que enlazan a la citocina con alta afinidad y transducen este evento de enlace a la célula a través de porciones EEF: 166926 citoplásmicas de ciertas subunidades del receptor. Se han agrupado los receptores de la citocina en varias clases en base a las similitudes de sus dominios que enlazan ligandos extracelulares . Por ejemplo, las cadenas del receptor responsables de enlazar y/o transducir el efecto de los interferones, son miembros de la familia del receptor de la citocina clase II basados en un dominio extracelular del residuo 200 característico. Las actividades in vivo probadas de las citocinas y sus receptores ilustran el potencial clínico de, y la necesidad de otras citocinas, receptores de las citocinas, agonistas de citocinas y antagonistas de citocinas. Por ejemplo, las actividades in vivo probadas de la familia de la citocinas pro-inflamatorias ilustran el enorme potencial clínico de, y la necesidad de los antagonistas de las moléculas pro-inflamatorias . La presente invención se dirige a estas necesidades proporcionando antagonistas para las citocinas proinflamatorias IL-20 y IL-22. Tales antagonistas de la presente invención que pueden bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de IL-22, IL-20, o ambas IL-20 y IL-22, incluyen los receptores IL-22RA solubles y los anticuerpos anti-IL-22RA neutralizantes. Por consiguiente, la invención proporciona además el uso en enfermedades inflamatorias así como composiciones y métodos relacionados.

DESCRIPCION DETALLADA DE IA INVENCION 1. Visión global Entre otras invenciones, la presente invención proporciona nuevos usos para un receptor soluble, designado "Zcytorll" o "IL-22RA" y anticuerpos neutralizantes para los receptores de la citocina IL-22RA. La presente invención proporciona también fragmentos de polipéptidos IL-22RA solubles y proteínas de fusión para usarse en las enfermedades autoinmunes e inflamatorias humanas. Los anticuerpos anti-IL-22RA y receptores IL-22RA solubles de la presente invención incluyendo los anticuerpos anti-IL-22 A de la presente invención pueden usarse para bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de ya sea IL-22 o IL-20, o ambas, IL-20 e IL-22 en el tratamiento de enfermedades humanas específicas tales como psoriasis, artritis psoriático, artritis, endotoxemia, enfermedad de los intestinos inflamatoria (IBD) , colitis, y otras condiciones inflamatorias descritas en la presente . Una secuencia de nucleótidos ilustrativa que codifica al Zcytorll (IL- 22 A) se proporciona mediante la SEQ ID NO:l; el polipéptido codificado se muestra en la SEQ ID NO: 2. La IL-22RA es un subunidad del receptor para ambas IL-20 y IL-22. El Zcytorll (IL-22RA) se describe comúnmente en la Patente Americana de propiedad No. 5,965,704, la publicación O 02/12345 WIPO comúnmente de propiedad y la publicación WO 02/072607 IPO comúnmente de propiedad. El análisis de un clon del ADNc humano que codifica a IL-22RA (SEQ ID NO:l) revela una estructura de lectura abierta que codifica a los 574 aminoácidos (SEQ ID NO: 2) que comprende un dominio que enlaza al dominio extracelular de aproximadamente 211 residuos de aminoácidoss (residuos 18-228 de la SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3), un dominio de transmembrana de aproximadamente 23 residuos de aminoácidoss (229-251 residuos de la SEQ ID NO: 2) y un dominio intracelular de aproximadamente 313 residuos de aminoácidoss (252 a 574 residuos de la SEQ ID NO: 2) . Asi, las moléculas de la presente invención incluyen polipéptidos que contienen un dominio que enlaza a las citocinas que comprende 18-228 residuos de aminoácidoss de la SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO : 3. En una modalidad del receptor soluble de la presente invención, la IL-22R se fusiona a la región constante de la cadena pesada (se muestra una representación en la SEQ ID NO: 4) . Aquellos expertos en el arte reconocerán que estos limites del dominio son aproximados . Es posible la eliminación de los residuos de los extremos de los dominios . Como se describe abajo, la presente invención proporciona polipéptidos aislados que comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos del 70%, al menos del 80%, o al menos del 90%, o mayor que 95%, tal como 96%, 97%, 98%, o mayor que 99%, o más idénticas a la secuencia de los aminoácidos de referencia de 18-228 de la SEQ ID NO: 2, que se muestra también como la SEQ ID NO: 3, en donde el polipéptido aislado se enlaza específicamente con un anticuerpo que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 3. Los polipéptidos ilustrativos incluyen polipéptidos que comprenden ya sea residuos de aminoácidoss de la SEQ ID NO: 3 o los residuos de aminoácidoss de la SEQ ID NO: 3. Por otra parte, la presente invención proporciona también polipéptidos aislados descritos arriba que enlazan IL-22 (por ejemplo, la secuencia del polipéptido IL-22 humano como se muestra en la SEQ ID NO: 6). La secuencia del polinucleótido IL-22 humano se muestra en la SEQ ID NO: 5. La secuencia del polinucleótido IL-22 de ratón se muestra en la SEQ ID NO: 10, que corresponde al polipéptido que se muestra en la SEQ ID NO: 11. La presente invención proporciona también polipéptidos aislados como los descritos arriba que enlazan IL-20 (por ejemplo, la secuencia del polipéptido IL-20 humano como la que se muestra en la SEQ ID NO: 8; la publicación No. WO 99/27103 WIPO) . La secuencia del polinucleótido IL-20 humano se muestra en la SEQ ID NO: 7.

La presente invención proporciona también polipéptidos y epítopos aislados que comprenden al menos 15 residuos de aminoácidoss contiguos de una secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 3. Los polipéptidos ilustrativos incluyen polipéptidos que comprenden ya sea, o consisten de la SEQ ID NO:3, un epítopo antigénico del mismo, o un fragmento que enlaza IL-20 o IL-22 funcional del mismo. Por otra parte, la presente invención proporciona también polipéptidos aislados como los descritos anteriormente que enlazan a, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan la actividad de IL-22 o IL-20. La presente invención incluye también variantes del polipéptido IL-22RA, en donde la secuencia de aminoácidos de la variante del polipéptido comparte una identidad con los residuos de aminoácidoss de la SEQ ID NO: 3 seleccionada del grupo que consiste de al menos una identidad del 70%, al menos una identidad del 80%, al menos una identidad del 90%, al menos una identidad del 95%, o mayor que 95%, tal como 96%, 97%, 98%, o mayor que 99% o una mayor identidad, y en donde cualquier diferencia entre la secuencia de aminoácidos de la variante del polipéptido y la secuencia de aminoácidos correspondientes de la SEQ ID NO: 3 se debe a una o más sustituciones de aminoácidos conservadoras . Tales sustituciones de aminoácidos conservadoras se describen en la presente. Por otra parte, la presente invención proporciona también polipéptidos aislados como se describieron arriba que enlazan a, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan la actividad de IL-22 o IL-20. La presente invención proporciona además, anticuerpos y fragmentos de anticuerpos que se enlazan específicamente con tales polipéptidos . Los anticuerpos ej emplares incluyen anticuerpos de neutralización, anticuerpos policlonales , anticuerpos monoclonales murinos, anticuerpos humanizados derivados de anticuerpos monoclonales murinos, y anticuerpos monoclonales humanos . Los fragmentos del anticuerpo ilustrativos incluyen F(ab')2, F(ab)2, Fab', Fab, Fv, scFv, y unidades de reconocimiento mínimas . Los anticuerpos de neutralización enlazan preferiblemente IL-22RA tal que la interacción de IL-20 e IL-22 con IL-22 A se bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan; los anticuerpos que neutralizan anti-IL-22RA tal que el enlace de ya sea IL-20 o IL-22 para IL-22RA se bloquea, inhibe, reduce, antagoniza o neutraliza se abarcan también en la presente invención. Esto es, los anticuerpos anti-IL-22RA de neutralización de la presente invención pueden ya sea enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar cada una de IL-20 o IL-22 simplemente, o enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar IL-20 e IL-22 al mismo tiempo. La presente invención incluye además composiciones que comprenden un portador y un péptido, polipéptido o anticuerpos descritos en la presente. Además, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un portador farmacéuticamente aceptable y al menos un vector de expresión o virus recombinante que comprende tales vectores de expresión. La presente invención incluye además, composiciones farmacéuticas que comprenden un portador farmacéuticamente aceptable y un polipéptido o anticuerpo descrito en la presente. La presente invención contempla también anticuerpos anti-idiotipos o fragmentos de anticuerpos anti-idiotipo que enlazan específicamente a un anticuerpo o fragmento de un anticuerpo que se enlaza específicamente al polipéptido que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 3 o un fragmento de la misma. Un anticuerpo anti-idiotipo ejemplar se enlaza con un anticuerpo que enlaza específicamente a un polipéptido que consiste de la SEQ ID NO: 3. La presente invención proporciona también proteínas de fusión que comprenden un polipéptido IL-22RÁ y una porción de inmunoglobulina. En tales proteínas de fusión, la porción de inmunoglobulina puede ser una región constante de cadena pesada de inmunoglobulina tal como un fragmento Fc humano. La presente invención incluye además moléculas de ácidos nucleicos aislados que codifican a tales proteínas de fusión.

La presente invención proporciona también anticuerpos monoclonales y policlonales que enlazan a los polipéptidos que comprenden un dominio extracelular IL-22RA tales como receptores monoméricos, homodiméricos, heterodiméricos y multiméricos que incluyen receptores solubles. Por otra parte, tales anticuerpos pueden usarse para antagonizar el enlace de los ligandos IL-22RA, IL-22 ¦ (SEQ ID NO:6), e IL-20 (SEQ ID NO: 8), individualmente o junto con el receptor IL-22RA. Por otra parte, la sobreexpresión o sobreregulación de la IL-22 e IL-20 se muestra en las lesiones psoriáticas humanas y en muestras de piel con dermatitis atópica humana que sugieren que la IL-22, como la IL-20 se involucran también en la psoriasis humana, dermatitis atópica u otras enfermedades inflamatorias de la piel y tej idos epiteliales . Por otra parte, como se describe en la presente, la sobreexpresión de IL-20 o IL-22 en ratones transgénicos muestran un engrosamiento epidérmico y una complicación celular inmune indicativa de un fenotipo psoriático; además de la inyección de IL-22 en ratones normales mostraron un engrosamiento epidérmico y una complicación celular inmune indicativa de un fenotipo psoriático que se extirpó mediante el antagonista del receptor soluble IL-22RA.2 (zcytorl6; IPO Publicación No. WO 01/40467) . Tales datos in vivo sugieren además que la IL-22 pro-inflamatoria está involucrada en la psoriasis, dermatitis atópica u otras enfermedades inflamatorias de la piel y tejidos epiteliales. Como a tal, los antagonistas para la actividad de las IL-22 e IL-20, tales como los anticuerpos y receptores solubles con IL-22RA incluyendo anticuerpos de neutralización y monoclonales anti-humano-IL-22RA de la presente invención, son útiles en el tratamiento terapéutico de las enfermedades inflamatorias, particularmente como antagonistas para ambas, IL-22 e IL-20, solas o juntas en el tratamiento de la psoriasis. Por otra parte, los antagonistas para la actividad de la IL-22 tal como los receptores solubles io a la IL-22RA y anticuerpos incluyen anticuerpos de neutralización y monoclonales IL-22RA anti-humanas de la presente invención, útiles en el tratamiento terapéutico de otras enfermedades inflamatorias por ejemplo, como enlace, bloque, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar IL-22 e IL-20 (ya sea individualmente o juntas) en el tratamiento de la dermatitis atópica, IBD, colitis, Endotoxemia, artritis, artritis reumatoide y artritis psoriática, enfermedades respiratorias adultas (ARD) , choque séptico, falla de órganos múltiples, lesión del pulmón inflamatoria tal como asma o bronquitis, neumonía bacteriana, psoriasis, eczema, dermatitis por contacto y atópica, enfermedad del intestino inflamatoria tal como colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn. Estos y otros aspectos de la invención serán evidentes a partir de la referencia de la siguiente descripción detallada. Además, varias referencias se identifican abajo y se incorporan mediante la referencia en su totalidad. 2. Definiciones En la descripción que sigue, se usan extensivamente una variedad de términos. Las siguientes definiciones se proporcionan para facilitar la comprensión de la invención. Como se usa en la presente, "ácido nucleico" o "molécula de ácidos nucleicos" se refieren a los polinucleótidos tales como el ácido desoxirribonucleico (ADN) o ácido ribonucleico (AKN) , oligonucleótidos, fragmentos generados mediante la reacción de la cadena polimerasa (PCR) y fragmentos generados mediante cualquiera de ligación, escisión, acción de la endonucleasa y acción de la exonucleasa. Las moléculas de los ácidos nucleicos pueden estar compuestas de monómeros que son nucleótidos que se encuentran naturalmente (tales como ADN y ARN) , o análogos de nucleótidos que se encuentran naturalmente (por ejemplo, formas a-enantioméricas de nucleótidos que se encuentran naturalmente), o una combinación de ambas. Los nucleótidos modificados pueden tener alteraciones en porciones de azúcares y/o en porciones de bases de purina o pirimidina. Las modificaciones de azúcar incluyen por ejemplo, el reemplazo de uno o más grupos hidroxilo con halógenos, grupos alquilo, aminas, y grupos azido o azúcares pueden funcionalizarse como éteres o ásteres. Por otra parte, la porción de azúcar completa puede reemplazarse con estructuras estéricamente y electrónicamente similares tales como análogos de azúcar carbocíclicos y azúcares aza. Ejemplos de modificaciones en una porción base incluyen pirimidinas y purinas alquilatadas , pirimidinas o purinas acilatadas u otros sustitutos heterocíclicos bien conocidos. Los monómeros de ácidos nucleicos pueden enlazarse mediante enlaces fosfodiéster o análogos de tales ligaduras. Los análogos de las ligaduras del fosfodiéster incluyen fosforotioato, fosforoditioato, fosforoselenoato, fosforodiselenoato, fosforoanilotioato, fosforoanilidato, fosforamidato y similares. El término "molécula de ácidos nucleicos" incluye también a los llamados "ácidos nucleicos del péptido" , que comprende bases de ácidos nucleicos modificados o que se encuentran naturalmente unidas a una estructura de poliamidas . Los ácidos nucleicos pueden ser ya sea de hebra doble o de hebra sencilla. El término "complemento de una molécula de ácidos nucleicos" se refiere a una molécula de ácidos nucleicos que tiene una secuencia de nucleótidos complementaria y orientación inversa comparada con una secuencia de nucleótidos de referencia. Por ejemplo, la secuencia 5' ATGCACGGG 3' es complementaria a 51 CCCGTGCAT 31. El término "secuencia de nucleótidos degenerada" denota una secuencia de nucleótidos que incluye uno o más codones degenerados comparados con una molécula de ácidos nucleicos de referencia que codifican a un polipéptido. Los codones degenerados contienen diferentes tripletes de nucleótidos, pero que codifican al mismo residuo del aminoácido (es decir, los tripletes GAU y GAC que codifican a cada Asp) . El término "gen estructural" se refiere a una molécula de ácidos nucleicos que se transcriben en un ARN mensajero (ARNm) que se traduce entonces en una secuencia de aminoácidos característica de un polipéptido especifico. Una "molécula aislada de ácidos nucleicos" es una molécula de ácidos nucleicos que no se integran en el ADN genómico de un organismo. Por ejemplo, la molécula de ADN que codifica a un factor de crecimiento que se ha separado del ADN genómico de una célula es una molécula de ADN aislada. Otro ejemplo de una molécula de ácidos nucleicos aislados es una molécula de ácidos nucleicos sintetizados químicamente, que no se integran en el genoma de un organismo. Una molécula de ácidos nucleicos que se ha aislado de una especie particular es más pequeña que la molécula de ADN completa de un cromosoma de esa especie. Un "constmcto de la molécula de los ácidos nucleicos" es una molécula de ácidos nucleicos ya sea de hebra doble o sencilla que se ha modificado a través de la intervención humana que contiene segmentos de ácidos nucleicos combinados y yuxtapuestos en una configuración que no existe en la naturalez . "ADN lineal" denota moléculas de ADN no circulares que tienen extremos 3 ' y 5 ' libres . El ADN lineal puede prepararse a partir de moléculas de ADN circulares cerradas tales como plásmidos mediante la digestión enzimática o interrupción física. "ADN complementario (ADNc) " es una molécula de ADN de hebra sencilla que se forma a partir de una plantilla de ARNm mediante la enzima transcriptasa inversa. Típicamente, un cebador complementario a las porciones de ARNm se emplea para la iniciación de la transcripción inversa. Aquellos expertos en el arte usan también el término "ADNc" se refiere a una molécula de ADN de hebra doble que consiste de una molécula de ADN de hebra sencilla y su hebra de ADN complementaria. El término "ADNc" se refiere también a un clon de una molécula de ADNc sintetizada a partir de una plantilla de AR . Un "promotor" es una secuencia de nucleótidos que dirige la transcripción de un gen estructural. Típicamente, un promotor se localiza en la región 5' no codificante de un gen, próxima al sitio de partida transcripcional de un gen estructural . Los elementos de la secuencia dentro de los promotores que funcionan en la iniciación de la transcripción se caracterizan frecuentemente mediante las secuencias de nucleótidos de consenso. Estos elementos promotores incluyen sitios de enlace de la polimerasa de ARN, secuencias TATA, secuencias CAAT, elementos específicos de diferenciación (DESs; cGehee et al., Mol. Endocrinol. 7:551 (1993)), elementos de respuesta A P cíclicas (CREs) , elementos de respuesta del suero (SREs; Treisman, Seminars in Cáncer Biol. 1:47 (1990)), elementos de respuesta glucocorticoide (GREs) , y sitios de enlace para otros factores de transcripción tales como CRE/ATF (O'Reilly et al., J. Biol. Chem. 267: 19938 (1992)), AP2 (Ye et al., J. Biol. Chem. 269: 25728 (1994)), SP1, proteína que enlaza elementos de cAMP (CREB ; Loeken, Gene Expr. 3:253 (1993)) y factores octámeros (ver en general, Watson et al., eds . , Molecular Biology of the Gene, 4th ed. (The Benjamin/Cummings Publishing Company, 1C. 1987) , y Lemaigre y Rousseau, Biochem. J 303:1 (1994)). Si un promotor es un promotor inducible, entonces la proporción de la transcripción se incrementa en respuesta para un agente inductor. En contraste, la proporción de transcripción no está regulada por un agente inductor si el promotor es un promotor constitutivo. Se conocen también los promotores de represión.

Un "promotor del núcleo" contiene secuencias de nucleótidos esenciales para una función promotora que incluye el compartimiento TATA y el inicio de la transcripción. Mediante esta definición, un promotor del núcleo puede o no tener una actividad detectable en ausencia de secuencias específicas que pueden mejorar la actividad o confieren actividad específica al tejido. Un "elemento regulador" es una secuencia de nucleótidos que modula la actividad de un promotor del núcleo. Por ejemplo, un elemento regulador puede contener una secuencia de nucleótidos que se enlaza con los factores celulares que permiten la transcripción exclusivamente o preferencialmente en tejidos, células u organelos particulares. Estos tipos de elementos reguladores se asocian normalmente con genes que se expresan en forma de una "célula específica" "tejido especifico" u "organelo específico" . Un "mejorador" es un tipo de elemento regulador que puede incrementar la eficiencia o transcripción con respecto a la distancia u orientación del mejorador relativo al sitio de partida de la transcripción. "ADN heterólogo" se refiere a una molécula de ADN o una población de moléculas de ADN que no existen naturalmente dentro de una célula hospederoa dada. Las moléculas de ADN heterólogas para una célula hospederoa particular puede contener un ADN derivado de las especies de células hospederoas (es decir, ADN endógeno) siempre que el ADN hospedero se combina con el ADN no hospedero (es decir, ADN exógeno) . Por ejemplo, una molécula de ADN que contiene un segmento de ADN no hospedero que codifica a un polipéptido enlazado a un segmento de ADN hospedero que comprende un promotor de transcripción se considera ser una molécula de ADN heteróloga. Recíprocamente, una molécula de ADN heteróloga puede comprender un gen endógeno enlazado operablemente con un promotor exógeno. Como otra ilustración, una molécula de ADN que comprende un gen derivado de una célula del tipo silvestre se considera ser un ADN heterólogo si la molécula de ADN se introduce en una célula mutante que carece del gen del tipo silvestre . Un "polipéptido" es un polímero de residuos de aminoácidoss unido por enlaces de un péptido ya sea producido naturalmente o sintéticamente. Los polipéptidos de menos de alrededor de 10 residuos de aminoácidoss se refieren comúnmente como "péptidos" . Una "proteína" es una macromolécula que comprende una o más cadenas de polipéptidos . Una proteína puede comprender también componentes no peptídicos tales como grupos de carbohidratos . Los carbohidratos y otros sustituyentes no peptídicos pueden ser añadididos a una proteína mediante la célula en la cual se produce la proteína, y variará con el tipo de célula. Las proteínas se definen en la presente en términos de su estructura central de los aminoácidos; sustituyentes tales como grupos de carbohidratos que no se especifican generalmente pero que sin embargo pueden estar presentes . Un péptido o polipéptido codificado por una molécula de ADN no hospedera es un polipéptido o péptido "heterólogo" . Un "vector de clonación" es una molécula de ácidos nucleicos tales como un plásmido, cósmido o bacteriófago que tiene la capacidad de replicarse autónomamente en una célula hospederoa. Los vectores de clonación contienen típicamente uno o un número pequeño de sitios de reconocimiento de la endonucleasa de restricción que permiten la inserción de una molécula de ácidos nucleicos en una forma determinable sin pérdida de una función biológica esencial del vector, así como secuencias de nucleótidos que codifican a un gen marcador que es adecuado para usarse en la identificación y selección de células transformadas con el vector de clonación. Los genes marcadores incluyen típicamente genes que proporcionan resistencia a la tetraciclina o resistencia a la ampicilina. Un "vector de expresión" es una molécula de ácidos nucleicos que codifica a un gen que se expresa en una célula hospederoa. Típicamente, un vector de expresión comprende un promotor de transcripción, un gen y un terminador de la transcripción. La expresión del gen se coloca usualmente bajo el control de un promotor y tal gen se dice ser "enlazado operablemente al" promotor. De igual manera, un elemento regulador y un promotor del núcleo se enlazan operablemente si el elemento regulador modula la actividad del promotor del núcleo. Una "hospederoa recombinante" es una célula que contiene una molécula de ácidos nucleicos heterólogos tales como un vector de clonación o un vector de expresión. En el presente contexto, un ejemplo de una hospederoa recombinante es una célula que produce IL-22RA a partir de un vector de expresión. En contraste, la IL-22RA puede ser producida mediante una célula que es una "fuente natural" de la IL-22RA que carece de un vector de expresión. "Transformantes integradores" son células hospederoas recombinantes en las que el ADN heterólogo se ha integrado en el ADN genómico de las células . Una "proteína de fusión" es una proteína híbrida expresada por una molécula de ácidos nucleicos que comprende secuencias de nucleótidos de al menos dos genes. Por ejemplo, una pro eína de fusión puede comprender al menos parte de un polipéptido IL-22RA. fusionado con un polipéptido que liga una matriz de afinidad. Tal proteína de fusión proporciona un medio para aislar grandes cantidades de IL-22Ra usando cromatografía de afinidad. El término "receptor" denota una proteína asociada con las células que liga a una molécula bioactiva llamada un "ligando" . Esta interacción media el efecto del ligando en la célula. Los receptores pueden ser enlazados a la membrana, citosólicos o nucleares; monoméricos (por ejemplo, receptor de hormona que estimula a la tiroides, receptor beta-adrenérgico) o multiméricos (por ejemplo, receptor PDGF, receptor de la hormona del crecimiento, receptor IL-3, receptor GM-CSF, receptor G-CSF, receptor eritropoyetin y receptor IL-6) . Los receptores que ligan a la membrana se caracterizan por una estructura de múltiples dominios que comprenden un dominio que enlazan ligandos extracelulares y un dominio de efecto intracelular que está involucrado típicamente en una transducción de señal. En ciertos receptores que se ligan a la membrana, el dominio que se enlaza al ligando extracelular y al dominio de efecto intracelular se localizan en polipéptidos individuales que comprenden el receptor funcional completo. En general, el enlace del ligando al receptor resulta en un cambio conformacional en el receptor que provoca una interacción entre el dominio de efecto y otras moléculas en la célula, que a su vez conduce a una alteración en el metabolismo de la célula. Los eventos metabólicos que se enlazan frecuentemente a las interacciones del receptor-ligando incluyen la transcripción de genes, fosforilación, defosforilación, incrementa en la producción AMP cíclica, movilización del calcio celular, movilización de los lipidos de la membrana, adhesión celular, hidrólisis de los lípidos de inositol e hidrólisis de los fosfolípidos . Un "receptor soluble" es un polipéptido receptor que no se liga a una membrana celular. Los receptores solubles son comúnmente polipéptidos del receptor que enlaza al ligando que carece de dominios citoplásmicos y de una transmembrana y otras ligaduras para la membrana celular tal como vía glicofosfoinositol (gpi) · Los receptores solubles pueden comprender residuos de aminoácidoss adicionales tales como etiquetas de afinidad que proporcionan la purificación del polipéptido o proporcionan sitios para la unión del polipéptido a un substrato, o secuencias de región constante de inmunoglobulina. Muchos receptores de superficie celular tienen contrapartes solubles que se encuentran naturalmente, que se producen mediante la proteólisis o se traducen alternativamente con ARNm empalmados . Los receptores solubles pueden ser monoméricos, homodiméricos , heterodiméricos o multiméricos , con receptores multiméricos que no comprenden generalmente más de 9 subunidades, no comprenden preferiblemente más de 6 subunidades y más preferiblemente no comprenden más de 3 subunidades . Los polipéptidos del receptor se dicen estar sustancialmente libres de segmentos de polipéptidos intracelulares y de transmembrana cuando carecen de porciones suficientes de estos segmentos para proporcionar una transducción de señal o de ancla en la membrana, respectivamente. Los receptores solubles de receptores de citocinas clase I y clase II comprenden generalmente el dominio que enlaza a la citocina extracelular libre de un dominio intracelular y dominio de transmembrana. Por ejemplo, los receptores solubles representativos incluyen receptores solubles para CRF2-4 (a. k. a., IL-10RB) (Genbank No.de Acceso Z17227) como se muestra en la SEQ ID NO: 4 y la SEQ ID NO: 45; un receptor soluble para IL-10RA (Genbank Acceso Nos. U00672 y NM_001558) como se muestra en la SEQ IE NO: 46; un receptor soluble para pDIRSl (a.k.a., IL-20RB) (Genbank Acceso No. ??358305) como se muestra en la SEQ ID NO: 47; y un receptor soluble para IL-22RA (patente Americana No. 5,965,704) como se muestra en la SEQ ID NO: 3. Esto es adecuado dentro del nivel de un experto en el arte para delinear las secuencias de una secuencia de citocinas clase I o clase II que comprenden el dominio que enlaza a la citocina extracelular libre de un dominio de transmembrana y dominio intracelular. Por otra parte, un experto en el arte que usa un código genético puede determinar fácilmente polinucleótidos que codifican a tales polipéptidos del receptor soluble. El término "secuencia de señal secretora" denota una secuencia de ADN que codifica a un péptido (un "péptido secretor") éste, como un componente de un polipéptido más grande, dirige al polipéptido más grande a través de una trayectoria secretora de una célula que se sintetiza. El polipéptido más grande se desdobla comunmente para remover el péptido secretor durante el tránsito a través de la trayectoria secretora. Un "polipéptido aislado" es un polipéptido que está esencialmente libre de componentes celulares contaminados tales como carbohidratos, lípidos u otras impurezas de proteínas asociadas con el polipéptido en la naturaleza. Típicamente, una preparación de polipéptidos aislados contiene al polipéptido en una forma altamente purificada, es decir, al menos de alrededor de 80% de pureza, al menos alrededor de 90% de pureza, al menos alrededor de 95% de pureza, mayor que 95% de pureza tal como 96%, 97%, o 98% o más pura, o mayor que 99% pura. Una forma para demostrar que una preparación de una proteína particular contiene un polipéptido aislado es por su apariencia en forma de una banda simple que sigue a la electroforesis de gel de poliacrilamida de sulfato dodecil de sodio (SDS) de la preparación de la proteína y un teñido de Azul Coomasie brillante del gel. Sin embargo, el término "aislado" no excluye la presencia del mismo polipéptido en formas físicas alternas tales como dímeros o formas derivadas glicosiladas alternativamente. Los términos "amino-terminal" y "carboxilo terminal" se usan en la presente para denotar las posiciones dentro de los polipéptidos . Cuando el contexto lo permite, estos términos se usan con respecto a una secuencia particular o porción de un polipéptido para denotar la proximidad o posición relativa. Por ejemplo, una cierta secuencia colocada en el carboxilo terminal para una secuencia de referencia dentro de un polipéptido se localiza próxima a los términos carboxilo de la secuencia de referencia, pero no necesariamente en el término carboxilo del polipéptido completo. El término "expresión" se refiere a la biosíntesis de un producto del gen. Por ejemplo, en el caso de un gen estructural, la expresión involucra la transcripción del gen estructural dentro del ARNm y la traducción del ARNm en uno o más polipéptidos . El término "variante de empalme" se usa en la presente por denotar formas alternativas del APJSf transcrito a partir de un gen. Las variaciones de empalme surgen naturalmente a través del uso de sitios de empalme alternativos dentro de una molécula del ARN transcrito, o menos comúnmente entre las moléculas de ARN transcritos separadamente y puede resultar en varios ARNm transcritos a partir del mismo gen. Las variantes de empalme pueden codificar a los polipéptidos que tienen una secuencia de aminoácidos alterados . El término variante de empalme se usa también en la presente para denotar un polipéptido codificado por una variante de empalme de un ARNm transcrito a partir de un gen. Como se usa en la presente, el término "inmunomodulador" incluye citocinas, factores de crecimiento de células madre, linfotoxinas, moléculas coestimuladoras , factores ematopoyéticos y similares, análogos sintéticos de estas moléculas . El término ¾par complemento/anti-complemento" denota porciones no idénticas que forman un par estable asociado no covalentemente bajo condiciones apropiadas. Por ejemplo, biotina y avidina (o espreptavidina) son miembros prototípicos de un par complemento/anti-complemento . Otros pares de complemento/anti-complemento de ejemplo incluyen pares de receptor/ligando, pares anticuerpo/antígeno (o hapten o epítopo) , pares de polinucleótidos sentido/antisentido y similares. Cuando la disociación posterior del par complemento/anti-complemento es deseable, el par complemento/anti-complemento tiene preferiblemente una afinidad de enlace de menos de 109 M"1. Un "anticuerpo anti-idiotipo" es un anticuerpo que se liga con el dominio de región variable de una inmunoglobulina. En el presente contexto, un anticuerpo anti-idiotipo se liga con la región variable de un anticuerpo anti-IL-22RA y por consiguiente, un anticuerpo anti-idiotipo imita un epítopo de IL-22RA. Un "fragmento del anticuerpo" es una porción de un anticuerpo tal como F(ab')2, F(ab)2, Fab' , Fab y similares. Con respecto a la estructura, un fragmento del anticuerpo se enlaza con el mismo antígeno que se reconoce por el anticuerpo intacto. Por ejemplo, un fragmento del anticuerpo monoclonal anti-IL-22RA se liga con un epítopo de IL-22RA. El término "fragmento del anticuerpo" incluye también un polipéptido diseñado genéticamente o sintético que liga a un antígeno específico tal como polipéptidos que consisten de la región variable de cadena ligera, fragmentos "Fv" consisten de regiones variables de cadenas ligeras y pesadas, moléculas de polipéptidos de cadena simples recombinantes en donde las regiones variables pesadas y ligeras se conectan mediante un ligador de péptido ( "proteínas scFv" ) , y unidades de reconocimiento mínimas que consisten de residuos de aminoácidoss que imitan la región hipervariable . Un "anticuerpo quimérico" es una proteína recombinante que contiene los dominios variables y regiones determinantes complementarias derivadas de un anticuerpo de un roedor, aun cuando el resto de la molécula del anticuerpo se deriva de un anticuerpo humano. "Anticuerpos humanizados" son proteínas recombinantes en donde las regiones de determinación complementarias de u anticuerpo monoclonal se han transferido a las cadenas variables ligera y pesada de la inmunoglobulina murina en un dominio variable humano. La construcción de anticuerpos humanizados para el uso terapéutico en humanos que se derivan de anticuerpos murinos tales como aquellos que se enlazan o neutralizan a una proteína humana, se encuentra dentro de la experiencia de un experto en el arte . Como se usa en la presente, un "agente terapéutico" es una molécula o átomo que se conjuga a una porción del anticuerpo para producir un conjugado que es útil para la terapia. Ejemplos de agentes terapéuticos incluyen fármacos, toxinas, inmunomoduladores, quelatos, compuestos de boro, agentes fotoactivos o colorantes y radioisótopos. Una "etiqueta detectable" es una molécula o átomo que puede conjugarse a una porción del anticuerpo para producir una molécula útil para el diagnóstico. Ejemplos de etiquetas detectables incluyen queladores, agentes fotoactivos, radioisótopos, agentes fluorescentes, iones paramagnéticos u otras porciones marcadoras. El término "etiqueta de afinidad" se usa en la presente para denotar un segmento del polipéptido que puede unirse a un segundo polipéptido para proporcionar la purificación o detección del polipéptido secundario o proporciona sitios de unión del segundo polipéptido a un substrato. En un principio, cualquier péptido o proteína en la que se encuentra un anticuerpo u otro agente de enlace específico está disponible puede usarse como una etiqueta de afinidad. Las etiquetas de afinidad incluyen un tracto de poli-histidina, proteína A (Nilsson et al., EMBO J 4:1075 (1985); Nilsson et al., Methods Efazymol. 198:3 (1991), glutatión transferasa S (Smith y Johnson, Gene 67:31 (1988)), etiqueta de afinidad Glu-Glu (Grissenmeyer et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 82:1952 (1985)), substancia P, péptido FLAG (Hopp et al., Biotechnology 6:1204 (1988)), péptido que enlaza estreptavidina u otro dominio que enlaza epítopos antigénicos. Ver en general, Ford et al., Protein Expression and Puriflcation 2:95 (1991) . Las moléculas de ADN que codifican a las etiquetas de afinidad están disponibles a partir de proveedores comerciales (por ejemplo, Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ) . Un "anticuerpo desnudo" es un anticuerpo entero opuesto a un fragmento del anticuerpo que no se conjuga con un agente terapéutico. Los anticuerpos desnudos incluyen anticuerpos monoclonales y policlonales así como ciertos anticuerpos recombinantes tales como anticuerpos quiméricos y humanizados .

Como se usa en la presente, el término "componente del anticuerpo" incluye ambos, anticuerpo completo y un fragmento del anticuerpo. Un "inmunoconjugado" es un conjugado de un componente del anticuerpo con un agente terapéutico o una etiqueta detectable. Como se usa en la presente, el término "proteína de fusión del anticuerpo" se refiere a una molécula recombinante que comprende un componente del anticuerpo y un componente del polipéptido IL-22Ra. Ejemplos de una proteína de fusión del anticuerpo incluyen una proteína que comprende un dominio extracelular IL-22RA y ya sea un dominio Fe o una región que enlaza antígenos . Un "polipéptido diana" o un péptido diana" es una secuencia de aminoácidos que comprende al menos un epítopo y que se expresa en una célula de direccionamiento tal como una célula del tumor o una célula que lleva un antígeno del agente infeccioso. Las células T reconocen los epítopos de péptido presentados por la principal molécula compleja en histocompatibilidad para un polipéptido diana o péptido diana y típicamente lisan la célula de direccionamiento o alistan a otras células inmunes al sitio de la célula de direccionamiento, matando por medio de estas a la célula de direccionamiento. Un "péptido antigénico" es un péptido que ligará a la principal molécula compleja en histocompatibilidad para formar un complejo del péptido MHC que se reconoce por una célula T, induciendo así una respuesta de linfocitos citotóxica luego de la presentación de la célula T. Así, los péptidos antigénicos son capaces de enlazar a la principal molécula compleja en istocompatibilidad e inducir una respuesta de las células T citotóxicas tales como lisis celular o citocina específica liberada contra la célula de direccionamiento que liga o expresa al antígeno. El péptido antigénico puede ligarse en el contexto de una molécula compleja en histocompatibilidad principal clase I o clase II en una célula presente en el antígeno o en una célula de direccionamiento. En las eucariotas, el ARN de la polimerasa II cataliza la transcripción de un gen estructural para producir un ARNm. Una molécula de ácidos nucleicos pueden diseñarse para contener una plantilla del ARN de la polimerasa II en la que el ARN del transcrito tiene una secuencia que es complementaria al ARNm específico. El transcrito del ARN se nombra un UARN antisentido" y una molécula de ácidos nucleicos que codifican al ARN antisentido se llama un "gen anti-sentido" . Las moléculas del ARN anti-sentido son capaces de enlazar moléculas del ARNm resultando en una inhibición de la traducción del ARNm. Un oligonucleótido anti-sentido específico para IL-22RA" o un "oligonucleótido antisentido IL-22RA" es un oligonucleótido que tiene una secuencia (a) capaz de formar un triplete estable con una porción del gen IL-22RA, o (b) capaz de formar un duplo estable con una porción de un transcrito del ARNm del gen IL-22RA.

Un "ribozima" es una molécula de ácidos nucleicos que contiene un centro catalítico. El término incluye enzimas de ARN, ARNs de auto empalme, ARNs de auto desdoblamiento y moléculas de ácidos nucleicos que realizan estas funciones catalíticas . Una molécula de los ácidos nucleicos que codifican un ribozima se llama un "gen del ribozima" . Una "secuencia de guía externa" es una molécula de ácidos nucleicos que dirigen al ribozima endógeno, RNasa, P para especies particulares de ARNm intracelular que resultan en un desdoblamiento del ARNm mediante la RNasa P. Una molécula de ácidos nucleicos que codifican a una secuencia guía externa se llama un "gen de secuencia de guía externa" . El término "variante del gen IL-22RA" se refiere a moléculas de ácidos nucleicos que codifican a un polipéptido que tiene una secuencia de aminoácidos que es una modificación de la SEQ ID NO: 3. Tales variantes incluyen polimorfismos que se encuentran naturalmente de los genes IL-22RA así como genes sintéticos que contienen sustituciones de aminoácidos conservadores de la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 3. Las formas de variantes adicionales de los genes IL-22RA son moléculas de ácidos nucleicos que contienen inserciones o eliminaciones de las secuencias de nucleótidos descritas en la presente. Puede identificarse una variante del gen IL-22RA por ejemplo, determinando ya sea el gen que se híbrida con una molécula de ácidos nucleicos que tienen la secuencia de los nucleótidos de la SEQ ID N0:1, o su complemento, bajo condiciones severas . Alternativamente, las variantes de los genes IL-22RA pueden identificarse mediante la comparación de la secuencia. Dos secuencias de aminoácidos tienen una "identidad de secuencia de aminoácidos del 100%" si los residuos de los aminoácidos de las secuencias de dos aminoácidos son las mismas cuando se alinean para una correspondencia similar. De igual manera, dos secuencias de nucleótidos tienen "identidad de secuencia de nucleótidos del 100" si los residuos del nucleótido de las secuencia de los dos nucleótidos son los mismos cuando se alinean para una correspondencia máxima. Las comparaciones de la secuencia pueden realizarse usando programas de software estándar tales como aquellos incluidos en la serie de cómputo bioinformático LASERGENE que se produce por DNASTAR (Madison, Wisconsin) . Otros métodos para comparar a los dos nucleótidos o secuencias de aminoácidos determinando el alineamiento óptimo son bien conocidos por aquellos expertos en el arte (ver por ejemplo, Peruski y Peruski, The Internet and the New Bíology : Tools for Genomic and Molecular Research (ASM Press, Inc. 1997), Wu et al. (eds.), "Information Superhighway and Computer Databases of Nucleic Acids and Proteins," en Methods in Gene Biotechnology, páginas 123-151 (CRC Press, Inc. 1997), y Bishop (ed.), Guide to Human Genome Computing, 2nd Edition (Academic Press, Inc. 1998)). Se describen abajo métodos particulares para determinar la identidad de la secuencia. Independientemente del método particular usado para identificar una variante del gen IL-22RA o variante del polipéptido IL-22RA, una variante del gen o polipéptido codificada por una variante del gen puede ser funcionalizada caracterizada por su capacidad para ligar específicamente a un anticuerpo anti-IL-22RA. Una variante del gen IL-22RA o variante del polipéptido IL-22RA puede también funcionalizarse caracterizada por su capacidad para ligar a su ligando, IL-22 usando un ensayo biológico o bioquímico descritos en la presente . El término "variante alélica" se usa en la presente para denotar cualquiera de dos o más formas alternativas de un gen que se presenta en el mismo lugar cromosomal. La variación alélica surge naturalmente a través de una mutación, y puede resultar en un polimorfismo fenotípico dentro de las poblaciones . Las mutaciones del gen pueden ser silenciosas (no cambian en el polipéptido codificado) o pueden codificar polipéptidos que tienen una secuencia de aminoácidos alterados . El término variante alélica se usa también en la presente para denotar una proteina codificada por una variante alélica de un gen. El término "ortólogo" denota un polipéptido o proteína obtenida de una especie que es la contraparte funcional de un polipéptido o proteína de especies diferentes . Las diferencias de la secuencia entre los ortólogos son el resultado de la especiación. "Parálogos" son proteínas distintas pero estructuralmente relacionadas hechas por un organismo. Se cree que los parálogos surgen a través de una duplicación del gen. Por ejemplo, la cc-globina, ß-globina, y la mioglobina son parálogos entre sí . La presente invención incluye fragmentos funcionales de genes IL-22RA. Dentro del contexto de esta invención, un "fragmento funcional" de un gen IL-22RA se refiere a una molécula de ácidos nucleicos que codifican a una porción de un polipéptido IL-22RA que es un dominio descrito en la presente o al menos se liga específicamente con un anticuerpo anti-IL-22RA. Debido a la imprecisión de los métodos analíticos estándar, se comprende que los pesos moleculares y longitudes de los polímeros son valores aproximados . Cuando un valor tal se expresa como "alrededor de" X o "aproximadamente" X, el valor establecido de X se entenderá por ser preciso a ± 10%. 3. Producción de genes o polinucleótidos IL-22RA Las moléculas de ácidos nucleicos que codifican a un gen IL-22RA humano pueden obtenerse mediante una separación por exclusión de un ADNc humano o colección genómica usando sondas de polinucleótidos basados en la SEQ ID N0:1. Estas técnicas están bien establecidas y son estándar que pueden realizarse usando kits de clonación disponibles por proveedores comerciales. Ver por ejemplo, Ausubel et al. (eds. ), Short Protocole in Molecular Biology, 3rd Edición, John Wiley & Sons 1995; Wu et al., Methods in Gene Biotechnology, CRC Press, Inc. 1997; Aviv y Leder, Proc. Nat ? Acad. Sci. USA 69:1408 (1972); Huynh et al., "Constructing and Screening cDNA Libraries in gtll and Xgtll," en DNA Cloning: A Practical Approach Vol . I, Glover (ed.), página 49 (IRL Press, 1985) ; Wu (1997) en las páginas 47-52. Las moléculas del ácido nucleico que codifican a un gen IL-22RA humano pueden obtenerse también usando una reacción de la cadena polimerasa (PCR) con cebadores de oligonucleótidos que tienen secuencias de nucleótidos que se basan en las secuencias de nucleótidos del gen IL-22RA o ADNc . Los métodos generales para separar por exclusión colecciones con una PCR se proporcionan por ejemplo, en Yu et al., "Use of the Polymerase Chain Reaction to Screen Phage Libraries," en Methods in Molecular Biology, Vol. 15: PCR Protocols: Current Methods and Applications, White (ed.), Humana Press, Inc., 1993. Por otra parte, las técnicas para usar PCR para aislar a los genes relacionados se describen por ejemplo en Preston, "Use of Degenerate Oligonucleotide Primers and the Polymerase Chain Reaction to Clone Gene Family Members, " en Methods in Molecular Biology, Vol. 15: PCR Protocols: Current Methods and Applications, White (ed. ) , Humana Press, Inc. 1993. Como una alternativa, un gen IL-22RA puede obtenerse sintetizando a las moléculas de ácidos nucleicos usando mutuamente oligonucleótidos prolongados para cebar y las secuencias de nucleótidos descritas en la presente (ver por ejemplo, Ausubel (1995)). Las técnicas establecidas usando la reacción en cadena de la polimerasa proporciona la capacidad de sintetizar las moléculas de ADN de al menos dos kilobases en longitud (Adang et al., Plant Molec. Biol. 21:1131 (1993), Bambot et al., PCR Methods and Applications 2:266 (1993), Dillon et al., "Use of the Polymerase Chain Reaction for the Rapid Construction of Synthetic Genes," en Methods in Molecular Biology, Vol. 15: PCR Protocole: Current Methods and Applications, White (ed.), páginas 263-268, (Humana Press, Inc. 1993), y Holowachuk et al., PCR Methods Appl . 4: 299 (1995)). Para revisar la síntesis del polinucleótido ver por ejemplo, Click y Pasternak, Molecular Biotechnology, Principies and Applications of Recombinant DNA (ASM Press 1994), Itakura et al., Annu. Rev. Biochem. 53: 323 (1984), y Climie et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 87:633 (1990). 4. Producción de variantes del gen IL-22RA La presente invención proporciona una variedad de moléculas de ácidos nucleicos que incluyen moléculas de ADN y ARN, que codifican a los polipéptidos IL-22RA descritos en la presente. Aquellos expertos en el arte reconocerán fácilmente que, en vista de la degeneración del código genético, es posible una variación de la secuencia considerable entre estas moléculas del polinucleótido. Por otra parte, la presente invención proporciona también polipéptidos del receptor multimérico y heterodimérico, homodiméricos , monoméricos solubles aislados que comprenden al menos una subunidad del receptor IL-22RA que es sustancialmente homólogo al polipéptido del receptor de la SEQ ID NO: 3. Asi, la presente invención contempla moléculas de ácidos nucleicos que codifican al polipéptido IL-22RA que comprende nucleótidos degenerados de la SEQ ID NO:l y sus equivalentes del ARN. La tabla 1 establece los códigos de una letra para denotar las posiciones de nucleótidos degenerados . Las "resoluciones" son nucleótidos denotados por una letra código. "Complemento" indica el código para los nucleótidos complementarios. Por ejemplo, el código Y denota ya sea C o T, y su complemento R denota A o G, A es complementaria a T, y G es complementaria a C.

Tabla 1 Los codones degenerados que abarcan todos los posible codones para un aminoácido dado se establecen en la tabla Tabla 2 Aminoácido Código de Codones Codón una letra degenerado Cys C TGC TGT TGY Ser S AGC AGT TCA TCC TCG TCT WSN Thr T ACA ACC ACG ACT ACN Pro P CCA CCC CCC CCT CCN Ala A GCA GCC GCG GCT GCN Gly G GGA GGC GGG GGT GGN Asn N AAC AAT AAY Asp D GAC GAT GAY Glu E GAA GAG GAR Gln Q CAA CAG CAR His H CAC CAT CAY Arg R AGA AGG CGA CGC CGG CGT MGN Lys K AAA AAG AAR Met M ATG ATG lie I ATA ATC ATT ATH Leu L CTA CTC CTG CTT TTA TTG YTN Val V GTA GTC GTG GTT GTN Phe F TTC TTT TTY Tyr Y TAC TAT TAY Trp W TGG TGG Ter TAA TAG TGA TRR Asn|Asp B RAY Glu|Glu Z SAR Cualquiera X N Un experto en el arte apreciará que alguna ambigüedad se introduce al determinar el codón degenerado, representativo de todos los codones posibles que codifican a un aminoácido. Por ejemplo, el codón degenerado para la serina (WSN) puede, en algunas circunstancias, codificar a la arginina (AGR) y el codón degenerado para la arginina (MGN) puede, en algunas circunstancias, codificar a la serina (AGY) . Existe una relación similar entre los codones que codifican a la fenilalanina y la leucina. Así, algunos polinucleótidos que se incluyen en la secuencia degenerada, pueden codificar a las secuencias variantes de aminoácidos, pero un experto en el arte puede identificar fácilmente tales secuencias variantes mediante la referencia para las secuencias de los aminoácidos de la SEQ ID NO: 3. La variantes de las secuencias pueden probarse fácilmente para una funcionalidad descrita en la presente . Especies diferentes pueden exhibir "uso del codón preferencial" . En general, ver Grantham et al., Miel. Acids Res. 8:1893 (1980), Haas et al. Curr. Biol. 6:315 (1996), Wain-Hobson et al., Gene 13:355 (1981), Grosjean y Fiers, Gene 18: 199 (1982), Holm, Nuc. Acids Res. 14:3075 (1986), Ikemura, J. Mol. Biol. 158:573 (1982), Sharp y Matassi, Curr. Opin. Genet. Dev. 4:851 (1994), Kane, Curr. Opin. Biotechnol. 6:494 (1995), y Makrides, Microbiol. Rev. 60:512 (1996). Como se usa en la presente, el término "uso del codón preferencial" o "codones preferenciales" es un término del arte que se refiere a los codones de traducción de la proteina que se usan de manera más frecuente en células de ciertas especies, favoreciendo así, a una o a pocas representaciones de los codones posibles que codifican a cada aminoácido (Ver la tabla 2) . Por ejemplo, la treonina del aminoácido (THr) puede codificarse por ACA, ACC, ACG, o ACT, pero en ACC de células de mamíferos es el codón más comúnmente usado; en otras especies por e emplo, las células de insectos, levaduras, virus o bacterias, pueden preferirse codones Thr diferentes. Los codones preferidos para especies en particular pueden introducirse en los polinucleótidos de la presente invención mediante una variedad de métodos conocidos en el arte. La introducción de las secuencias de codón preferentes en el ADN recombinante por ejemplo, mejora la producción de la proteína creando la traducción de la proteína de manera más eficiente dentro de una especie o tipo celular en particular. Por lo tanto, las secuencias del codón degenerado descritas en la presente sirven como una plantilla para optimizar la expresión de los polinucleótidos en varios tipos celulares y especies comúnmente usadas en el arte y descritas en la presente. Las secuencias que contienen codones preferentes pueden probarse y optimizarse para la expresión en varias especies y probarse para una funcionalidad como la descrita en la presente. Un ADNc que codifica a la IL-22RA puede aislarse mediante una variedad de métodos, tales como sondeos con unADNc humano parcial o completo o con uno o más conjuntos de sondas degeneradas basadas en las secuencias descritas. Un ADNc puede también ser clonado usando una reacción de la cadena polimerasa con cebadores diseñados a partir de las secuencias IL-22RA humanas representativas descritas en la presente. Además, una colección del ADNc puede usarse para transformar o transfectar a las células hospederoas y la expresión del ADNc de interés puede detectarse con un anticuerpo en el polipéptido IL-22RA. Aquellos expertos en el arte reconocerán que la secuencia descrita en la SEQ ID N0:1 representa un alelo simple de la IL-22RA humana y que se espera que se presente la variación alélica y un empalme alternativo . Las variantes alélicas de esta secuencia pueden ser clonadas sondeando las colecciones genómicas o del ADNc a partir de individuos distintos de acuerdo con los procedimientos estándar. Las variantes alélicas de las secuencia del nucleótido descritas en la presente, incluyen aquellas mutaciones silenciosas y aquellas mutaciones resultado de los cambios en la secuencia de los aminoácidos, se encuentran dentro del alcance de la presente invención como proteínas que son variantes alélicas de la secuencia de los aminoácidos descrita en la presente. Las moléculas del ADNc generadas a partir de ARNm empalmado alternativamente que mantienen las propiedades del polipéptido IL-22RA que se incluyen dentro del alcance de la presente invención, son polipéptidos codificados por tales ADNc y AR m. Las variantes alélicas y las variantes de empalme de estas secuencias pueden clonarse sondeando el ADNc o las colecciones genómicas de distintos individuos o tejidos de acuerdo a los procedimientos estándares conocidos en el arte. Usando los métodos discutidos anteriormente, un experto en el arte puede preparar una variedad de polipéptidos que comprenden una subunidad del receptor IL-22RA soluble que es sustancialmente homologa a la SEQ ID NO:l, o que codifica a los aminoácidos de la SEQ ID NO: 3, o las variantes alélicas de la misma y mantiene las propiedades que enlazan al ligando del receptor IL-22RA tipo silvestre. Tales polipéptidos pueden incluir también segmentos de polipéptidos adicionales descritos generalmente en la presente. Dentro de ciertas modalidades de la invención, las moléculas de los ácidos nucleicos aisladas pueden hibridizar bajo condiciones severas en las moléculas de los ácidos nucleicos que comprenden secuencias de nucleótidos descritas en la presente. Por ejemplo, tales moléculas de los ácidos nucleicos pueden hibridizar bajo condiciones severas a las moléculas de los ácidos nucleicos que comprenden la secuencia de nucleótidos de la SEQ ID NO:l, o a las moléculas de los ácidos nucleicos que comprenden una secuencia de nucleótidos complementaria a la SEQ ID NO : 1, o fragmentos de las mismas.

En general, las condiciones severas se seleccionan por ser alrededor de 5°C inferiores al punto de fusión térmico (Tm) para la secuencia específica con un pH y una resistencia iónica definida. La Tm es la temperatura (bajo un pH y una resistencia iónica definida) en la cual el 50% de la secuencia de direccionamiento hibridiza a una sonda que coincide perfectamente. Siguiente a la hidridización, las moléculas de los ácidos nucleicos pueden lavarse para remover a las moléculas del ácido nucleico no ibridizado bajo condiciones severas, o bajo condiciones altamente severas. Ver por ejemplo, Sambrook et al.. Molecular Cloning: ? Laboratory Manual, Second Edition (Cold Spring Harbor Press 1989) ; Ausubel et al., (eds. ), Current Protocols in Molecular Biology (John Wiley y Sons, Inc. 1987) ; Berger y Kimmel (eds.), Guide to Molecular Cloning Techniques, (Academic Press, Inc. 1987); y Wetmur, Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol . 26:227 (1990)). El software del análisis de la secuencia tal como OLIGO 6.0 (LSR; Long Lake, ) y Primer Premier 4.0 (Premier Biosoft International ; Palo Alto, CA) , asi como los sitios en la Internet, son herramientas disponibles para analizar a una secuencia dada y calcular Tm basada en un criterio definido por el usuario. Dentro de las habilidades de un experto en el arte se encuentra la adaptación a la hibridización y condiciones de lavado en un híbrido del polinucleótido particular.

La presente invención proporciona también polipéptidos IL-22RA aislados que tienen una identidad de secuencia sustancialmente similar a los polipéptidos de la SEQ ID NO: 3, o sus ortólogos . El término "identidad de la secuencia sustancialmente similar" se usa en la presente para denotar polipéptidos que tienen al menos 70%, al menos 80%, al menos 90%, al menos 95%, tal como 96%, 97%, 98%, o mayor que 95% de identidad de secuencia para las secuencia mostradas en la SEQ ID N0:3, o sus ortólogos. Por ejemplo, pueden usarse variantes y receptores IL-22RA de los ortólogos para generar una respuesta inmune y producir anticuerpos reactivos cruzados para la IL-22RA humana. Tales anticuerpos pueden ser humanizados y modificados como se describe en la presente, y usarse terapéuticamente para tratar la psoriasis, artritis psoriática, IBD, colitis, endotoxemia así como en otras aplicaciones terapéuticas descritas en la presente. La presente invención contempla también a las moléculas del ácido nucleico variantes de IL-22RA que pueden identificarse usando dos criterios : una determinación de la similitud entre el polipéptido codificado con la secuencia de los aminoácidos de la SEQ ID NO: 3, y un ensayo de hibridización. Tales variantes IL-22RA incluyen moléculas de ácidos nucleicos (1) que permanecen hibridizados con una molécula de ácidos nucleicos que tienen la secuencia del nucleótido de la SEQ ID NO:l (o su complemento) bajo condiciones de lavado severas en las que la severidad del lavado es equivalente a 0.5x-2x SSC con 0.1% de SDS a 55-65°C, y (2) que codifica a un polipéptido que tiene al menos una identidad de secuencia de 70%, al menos 80%, al menos 90%, al menos 95%, o mayor que 95% tal como 96%, 97%, 98%, ó 99%, para la secuencia del aminoácido de la SEQ ID NO: 3. Alternativamente, las variantes IL-22RA pueden caracterizarse como moléculas de ácidos nucleicos (1) que permanecen hibridizadas con una molécula de ácidos nucleicos que tienen la secuencia del nucleótido de la SEQ ID NO:l (o su complemento) bajo condiciones de lavado altamente severas en las que la severidad del lavado es equivalente a 0.1x-0.2x SSC con 0.1% SDS a 50-65°C, y (2) que codifica a un polipéptido que tiene al menos una identidad de secuencia del 70%, al menos 80%, al menos 90%, al menos 95% o mayor que 95%, tal como 96%, 97%, 98%, ó 99% o mayor para la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 3. El porcentaje de la identidad de la secuencia se determina mediante métodos convencionales, ver por ejemplo, Altschul et al., Bull. Math. Bio. 48:603 (1986), y Henikoff y Henikoff, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 85:10915 (1992). De manera breve, dos secuencias de aminoácidos se alinean para optimizar las líneas de alineamiento usando un intervalo de penalidad abierta de 10, un intervalo de penalidad de extensión de 1, y la matriz de línea "BLOSUM62" de Henikoff y He ikoff {ibid.) como se muestra en la tabla 3 (los aminoácidos se indican por los códigos en una sola letra estándar) . El porcentaje de identidad se calcula entonces como: ([número total de coincidencias idénticas] / [longitud de la secuencia más grande más el número de intervalos introducidos en la secuencia más grande para alinear a las dos secuencias] ) (100) . Tabla 3 A R N D C Q E G H L K M F P S T W Y V A 4 R -1 5 N -2 0 6 D -2 -2 1 6 C 0 · -3 -3 -3 9 Q -1 1 0 0 -3 5 E -1 0 0 2 -4 2 5 G 0 -2 0 -1 -3 -2 -2 6 H -2 0 1 -1 -3 0 0 2 8 I -1 -3 -3 -3 -1 -3 -3 -4 -3 4 L -1 -2 -3 -4 -1 -2 -3 -4 -3 2 4 -1 2 0 -1 -3 1 1 -2 --1 -3 -2 5 M -1 -1 -2 -3 -1 0 -2 --3 -2 1 2 -1 5 F -2 -3 -3 -3 -2 -3 -3 -3 -1 0 0 -3 0 6 P -1 -2 -2 -1 -3 -1 -1 -2 -2 -3 -3 -1 -2 -< S 1 · -1 1 0 -1 0 0 0 -1 -2 -2 0 -1 -2 -1 4 T O -1 O -1 -1 -1 -1 -2 -2 -1 -1 -1 -1 -2 -1 1 5 W -3 -3 -4 -4 -2 -2 -3 -2 -2 -3 -2 -3 -1 1 -4 -3 -2 11 Y -2 -2 -2 -3 -2 -1 -2 -3 2 -1 -1 -2 -1 3 -3 -2 -2 2 7 V O -3 -3 -3 -1 -2 -2 -3 -3 3 1 -2 1 -1 -2 -2 -2 0 -3 -1 Aquellos expertos en el arte apreciarán que existen muchos algoritmos establecidos disponibles para alinear a las dos secuencias de aminoácidos. El algoritmo de búsqueda de similitud "FASTA" de Pearson y Lipman es un método de alineamiento de la proteína adecuado para examinar el nivel de identidad compartida por una secuencia de aminoácidos descrita en la presente y la secuencia de aminoácidos de una variante IL-22RA putativa. El algoritmo FASTA se describe por Pearson y Lipman, Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 85:2444 (1988), y por Pearson, Meth. Enzymol. 183:63 (1990). De manera breve, el primer FASTA caracteriza la similitud de la secuencia al identificar las regiones compartidas por la secuencia en cuestión (por ejemplo, SEQ ID NO: 2 o la SEQ ID NO: 3) y una secuencia de prueba que ya tiene una densidad muy alta de identidades (si la variable ktup es 1) o pares de identidades (si ktup=2) , sin considerar a las sustituciones, inserciones o eliminaciones de aminoácidos conservadoras . Las diez regiones con la densidad más alta de identidades se rescata entonces comparando la similitud de todos los aminoácidos apareados usando una matriz de sustitución de aminoácidos, y los extremos de las regiones se "cortan" para incluir solo aquellos residuos que contribuyen a un registro más alto. Si existen varias regiones con registros mayores al valor "de corte" (calculado mediante una fórmula predeterminada que se basa en la longitud de la secuencia y el valor ktup) , entonces las regiones iniciales cortadas se examinan para determinar si las regiones pueden unirse para formar un alineamiento aproximado con los intervalos. Finalmente, las regiones con registros más altos de las secuencias de aminoácidos se alinean usando una modificación del algoritmo (Needleman y Wunsch, J. Mol. Biol. 48: 444 (1970); Sellers, SIAM J. Appl . Math. 26:787 (1974)), que permite eliminaciones e inserciones de aminoácidos . Los parámetros ilustrativos para el análisis FASTA son: ktup=l, intervalo de penalidad abierta =10, intervalo de penalidad de extensión= 1, y matriz de sustitución BLOSU 62. Estos parámetros pueden introducirse en un programa FASTA modificando el archivo matriz de registro ("SMATRIX"), como se explicó en el apéndice 2 de Pearson, Meth. Enzymol. 183: 63 (1990). FASTA puede usarse también para determinar la identidad de secuencia de las moléculas de ácidos nucleicos usando una relación como la que se describió anteriormente . Para las comparaciones de la secuencia del nucleótido, el valor ktup puede estar en el intervalo de entre uno a seis, preferiblemente a partir de tres hasta seis, más preferiblemente tres, con otros parámetros establecidos que se describieron arriba. La presente invención incluye moléculas de ácidos nucleicos que codifican a un polipéptido que tiene un cambio de aminoácidos conservador, comparado con una secuencia de aminoácidos descrita en la presente. Por ejemplo, las variantes pueden obtenerse al estar contenidas en uno o más sustituciones de aminoácidos de la SEQ ID NO: 3, en cuyo aminoácido del alquilo se sustituye por un aminoácido del alquilo en una secuencia de los aminoácidos de IL-22RA, un aminoácido aromático se sustituye por un aminoácido aromático en una secuencia de aminoácidos de la IL-22RA, un aminoácido que contiene azufre se sustituye por un aminoácido que contiene azufre en una secuencia de aminoácidos de la IL-22RA, un aminoácido que contiene hidroxi se sustituye con un aminoácido que contiene hidroxi en una secuencia de aminoácidos de la IL-22 A, un aminoácido ácido se sustituye por un aminoácido ácido en una secuencia de aminoácidos de la IL-22RA, un aminoácido básico se sustituye por un aminoácido básico en una secuencia de aminoácidos de la IL-22RA, o un aminoácido dibásico monocarboxílico se sustituye por un aminoácido monocarboxílico dibásico en una secuencia de aminoácidos de la IL-22RA. Entre los aminoácidos más comunes, por ejemplo, una "sustitución de aminoácidos conservadora" se ilustra mediante una sustitución entre los aminoácidos dentro de cada uno de los siguientes grupos: (1) glicina, alanina, valina, leucina, e isoleucina (2) fenilalanina, tirosina y triptofano, (3) serina y treonina, (4) aspartato y glutamato, (5) glutamina y asparagina y (6) lisina, arginina e histidina. La tabla BL0SUM62 es una matriz de sustitución de aminoácidos derivada de aproximadamente 2,000 alineamientos múltiples locales de segmentos de la secuencia de la proteina que representa regiones altamente conservadas de más de 500 grupos de proteínas relacionadas (Henikoff y Henikoff, Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 89: 10915 (1992)). Por consiguiente, las frecuencias de sustitución de BLOSUM62 pueden usarse para definir las sustituciones de aminoácidos conservadoras que pueden introducirse en las secuencias de los aminoácidos de la presente invención. A pesar de que es posible diseñar sustituciones de aminoácidos basadas solamente a partir de las propiedades químicas (como se discutió arriba) , el lenguaje "sustitución de aminoácidos conservadora" se refiere preferiblemente a una sustitución representada por un valor BLOSUM62 mayor que 1. Por ejemplo, una sustitución de aminoácidos es conservadora si la sustitución se caracteriza por un valor BLOSU 62 de 0, 1, 2, ó 3. De acuerdo con este sistema, las sustituciones de aminoácidos conservadoras preferidas se caracterizan por un valor BLOSUM62 de al menos 1 (por ejemplo, 1, 2 ó 3) , mientras que las sustituciones de los aminoácidos conservadoras más preferidas se caracterizan por un valor de BLOSUM62 de al menos 2 (por ejemplo, 2 ó 3) . Las variantes particulares de IL-22RA se caracterizan por tener al menos 70%, al menos 80%, al menos 90%, al menos 95% o mayor que 95% tal como 96%, 97%, 98%, ó 99% o mayor que la secuencia de identidad para la secuencia de los aminoácidos correspondientes (por ejemplo, la SEQ ID NO: 3), en donde la variación en la secuencia de los aminoácidos se debe a una o más sustituciones de aminoácidos conservadora. Los cambios de aminoácidos conservadores en un gen IL-22RA pueden introducirse por ejemplo, sustituyendo los nucleótidos por los nucleótidos mencionados en la SEQ ID NO:l. Tales variantes de "aminoácidos conservadores" pueden ser obtenidos mediante mutagénesis dirigida por los oligonucleótidos, mutagénesis que explora al enlazador, mutagénesis usando la reacción de la cadena polimerasa y similares (ver Ausubel (1995); y McPherson (ed. ) , Directed Mutagénesis: A Practical Approach (IRL Press 1991)) . Una variante del polipéptido IL-22RA puede ser identificada por su capacidad de enlazarse específicamente a los anticuerpos anti-IL-22RA. Las proteínas de la presente invención pueden comprender también residuos de aminoácidoss que no se encuentran naturalmente. Los aminoácidos que no se encuentran naturalmente incluyen sin limitación, trans-3-metilprolina, 2 , -metanoprolina, cis-4- idroxiprolina, trans-4- hydroxiprolina, Jí-metilglicina, alo-treonina, metiltreonina, hidroxietilcisteína, hidroxietilhomocisteína, nitroglutamina, homoglutamina, ácido pipecólico, ácido carboxílico tiazolidina, deshidroprolina, 3 y 4-metilprolina, 3,3-dimetilprolina, tert-leucina, norvalina, 2-azafenilalanina, 3-azafenilalanina, 4-azafenilalanina, y 4-fluorofenilalanina. Varios métodos se conocen en el arte para incorporar los residuos de aminoácidoss que no se encuentran naturalmente en las proteínas. Por ejemplo, un sistema in vitro puede ser empleado en donde las mutaciones sin sentido se suprimen usando ARNts de supresión aminoacilada químicamente. Se conocen en el arte métodos para sintetizar a los aminoácidos y aminoacilatar ARNt . La transcripción y traducción de los plásmidos que contienen mutaciones sin sentido se llevan a cabo típicamente fuera del sistema de células libres que comprende un extracto de la E. coll S30 y enzimas comercialmente disponibles y otros reactivos. Las proteínas se purifican mediante cromatografía, ver por ejemplo, Robertson et al., J Am. Chem. Soc. 113: 2722 (1991), Ellman et al., Methods Enzymol. 202:301 (1991), Chung et al., Science 259:806 (1993), y Chung et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 50:10145 (1993) . En un segundo método, la traducción se lleva a cabo en oocitos Xenopus mediante microinyección de AR m mutado y ARNts de supresión químicamente aminoacilado (Turcatti et al., J".

Biol. Chem. 271:19991 (1996)) . Dentro de un tercer método, las células E. col! se cultivan en ausencia de aminoácidos naturales, esto es, para ser reemplazadas (por ejemplo, fenilalanina) y en presencia de los aminoácidos que no se encuentran naturalmente deseados (por ejemplo, 2-azafenilalanina, 3 -azafenilalanina, 4-azafenilalanina, o 4-fluorofenilalanina) . Los aminoácidos que no se encuentran naturalmente se incorporan en la proteina en lugar de su contraparte natural. Ver, Koide et al., Biochem. 33:7470 (1994) . Los residuos de aminoácidoss que se encuentran naturalmente pueden convertirse en especies que no se encuentran naturalmente mediante una modificación química in vitro. La modificación química puede combinarse con una mutagénesxs dirigida en el sitio para expandir adicionalmente el intervalo de las sustituciones ( ynn y Richards, Protein Sci. 2 :395 (1993) ) . Un número limitado de aminoácidos no conservadores, aminoácidos que no son codificados por el código genético, aminoácidos que no se encuentran naturalmente y aminoácidos naturales pueden ser sustituidos por los residuos de aminoácidoss IL-22RA. Los aminoácidos esenciales en los polipéptidos de la presente invención pueden identificarse de acuerdo a los procedimientos conocidos en el arte, tales como mutagénesis dirigida en el sitio o mutagénesis de exploración de la alanina (Cunningham y Wells, Science 244:1081 (1989), Bass et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 88:4498 (1991), Coom s y Corey, "Site- Directed Mutagenesis and Protein Engineering, " en Proteins: Analysis and Oesign, Angeletti (ed. ) , páginas 259-311 (Academic Press, Inc. 1998)). En la última técnica, las mutaciones de alanina simples se introducen en cada residuo dentro de la molécula y las moléculas mutantes resultantes se prueban para una actividad biológica para identificar los residuos de los aminoácidos que son críticas para la actividad de la molécula. Ver también, Hilton et al., J. Biol. Chem. 271: 4699 (1996) . A pesar de que el análisis de la secuencia puede usarse para definir además la región que enlaza al ligando IL-22RA, los aminoácidos que juegan un papel importante en la actividad que enlaza IL-22RA (tal como enlazar IL-22RA al ligando IL-22, o a un anticuerpo anti-IL-22RA) pueden también determinarse mediante el análisis físico de la estructura, determinado por técnicas tales como resonancia magnética nuclear, cristalografía, difracción de electrones, o etiquetación por fotoafinidad junto con la mutación de los aminoácidos del sitio de contacto putativa. Ver por ejemplo, de Vos et al., Science 255 : 306 (1992), Smith et al., J". Mol. Biol. 224:839 (1992), y Wlodaver et al., FEBS Lett. 309:59 (1992) . Las sustituciones de los aminoácidos múltiples pueden elaborarse y probarse usando métodos conocidos como la mutagénesis y la separación por exclusión, tales como aquellos descritos por Reidhaar-Olson y Sauer (Science 241: 53 (1988)) o Bowie y Sauer {Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86: 2152 (1989)). De manera breve, estos autores describen los métodos para aleatorizar simultáneamente dos o más posiciones en un polipéptido, seleccionar el polipéptido funcional y después secuenciar a los polipéptidos mutagenizados para determinar el espectro de sustituciones aceptables en cada posición. Otros métodos que pueden usarse incluyen despliegue de fagos (por ejemplo, Lowman et al., Biochem. 30: 10832 (1991), Ladner et al.. Patente Americana No. 5,223, 409, Huse, publicación internacional No. WO 92/06204, y mutagénesis dirigida en la región (Derbyshire et al., Gene 46:145 (1986), y Ner et al., ADN 7:127, (1988)). Por otra parte, la IL-22RA etiquetada con biotina o FITC puede ser usada para clonar la expresión de los ligandos IL-22RA. Las variantes de las secuencias del polipéptido y nucleótidos IL-22RA descritas pueden también generarse a través del entremezclado del ADN como se describió por Stemmer, Nature 370:389 (1994), Stemmer, Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 91: 10747 (1994), y la publicación internacional No. WO 97/20078. De manera breve, las moléculas de ADN variantes se generan mediante una recombinación homologa in vitro mediante una fragmentación aleatoria de un ADN progenitor seguido por un reasemblaje usando PCR, que da como resultado mutaciones en los puntos introducidos aleatoriamente. Esta técnica puede modificarse usando una familia de las moléculas de ADN progenitoras tales como las variantes alélicas o moléculas de ADN de distintas especies, para introducir una variabilidad adicional en el proceso. La selección o separación por exclusión de la actividad deseada, seguido por iteraciones adicionales de la mutagénesis y ensayos que proporcionan una rápida "evolución" de las secuencias seleccionando mutaciones deseables aun cuando existe una selección simultáneamente contra los cambios detrimentales . Los métodos de la mutagénesis como son descritos en la presente pueden combinarse con métodos de separación por exclusión- automáticos con alto rendimiento para detectar la actividad de los polipéptidos mutagenizados, clonados en las células hospederoas. Las moléculas de ADN mutagenizadas que codifican a los polipéptidos biológicamente activos, o polipéptidos que se enlazan con los anticuerpos anti-IL-22RA, pueden ser recuperados a partir de las células hospederoas y secuenciadas rápidamente usando un equipo moderno. Estos métodos permiten la determinación rápida de la importancia de los residuos de aminoácidoss individuales en un polipéptido de interés y pueden aplicarse a los polipéptidos de una estructura desconocida. La presente invención incluye también "fragmentos funcionales" de los polipéptidos IL-22Ra y las moléculas de los ácidos nucleicos que codifican tales fragmentos funcionales . El análisis de eliminación de rutina de las moléculas de ácidos nucleicos puede realizarse para obtener fragmentos funcionales de una molécula de ácidos nucleicos que codifican a un polipéptido IL-22RA. Como una ilustración, las moléculas de ADN que tienen la secuencia de los nucleótidos de la SEQ ID N0:1 pueden ser digeridas con la nucleasa Bal31 para obtener una serie de eliminaciones anidadas . Los fragmentos se insertan entonces en los vectores de expresión en la estructura de lectura propia, y los polipéptidos expresados se aislan y se prueban para la capacidad de ligar a los anticuerpos IL-22RA. Una alternativa para la digestión de la exonucleasa es usar la mutagénesis dirigida por los oligonucleótidos para introducir eliminaciones o codones de detención para la producción específica de un fragmento deseado. Alternativamente, los fragmentos particulares de un gen IL-22RA pueden sintetizarse usando la reacción de la cadena polimerasa. Esta metodología general se ejemplifica mediante estudios de truncamiento en o ambos términos de interferones que se han resumido por Horisberger y Di Marco, Pharmac. Ther.66: 507 (1995) . Por otra parte, las técnicas estándar para el análisis funcional de las proteínas se describe por ejemplo en Treuter et al., ' Molec. Gen. Genet. 240:113 (1993), Content et al . , "Expression and preliminary deletion analysis of the 42 kDa 2-5A synthetase induced by human interferon, " en Biological Interferon Systems, Proceedings of ISIR-TNO Meeting on Interferon Systems, Cantell (ed. ) , páginas 65-72 (Nijhoff 1987), Herschman, "The EGF Receptor," en Control of 24nimal Cell Proliferation, Vol. 1, Boynton et al., (eds.) páginas 169-199 (Academic Press 1985), Coumailleau et al., J. Biol. Chem. 270:29270 (1995); Fukunaga et al., «7. Biol. Chem. 270:25291 (1995); Yamaguc i et al., Biochem. Pharmacol. 50: 1295 (1995), y Meisel et al., Plant Molec. Biol. 30:1 (1996). El análisis de las secuencias particulares descritas en la presente proporciona un conjunto de fragmentos funcionales ilustrativos presentados en la tabla 4. Los nucleótidos que codifican a los dominios de variante funcional IL-22RA humanos descritos en la presente no se muestran en la tabla 4, pueden determinarse con respecto a la SEQ ID NO:l. Tales fragmentos funcionales incluyen por ejemplo, las siguientes secuencias de nucleótidos de los nucleótidos de la SEQ ID NO:l 85-381, 206-717, y 85-717 de la SEQ ID N0:1 y secuencias de los aminoácidos correspondientes codificadas de este modo como se muestra en la SEQ ID NO: 2 y la SEQ ID NO: 3 respectivamente. Tabla 4 Característica IL- Residuos de aminoácidoss (SEQ Nucleótidos (SEQ ID NO:1 ) 22RA ID NO:2) Primer dominio Ig 18-116 85-381 Segundo dominio Ig 25-228 206-717 Ambos dominios Ig 18-228 85-717 La presente invención contempla también fragmentos funcionales de un gen IL-22RA que tiene cambios de aminoácidos, comparado con una secuencia de aminoácidos descritos en la presente. Un gen IL-22RA variante puede identificarse en base a la estructura determinando el nivel de identidad con los nucleótidos descritos y las secuencias de aminoácidos discutidas arriba. Una metodología alternativa para identificar un gen variante en base a la estructura es determinar si una molécula de ácidos nucleicos que codifica un gen IL-22RA variante potencial puede hibridizar a una molécula de ácidos nucleicos que comprende una secuencia de nucleótidos tales como SEQ ID N0:1. La presente invención incluye también el uso de fragmentos funcionales de los polipéptidos IL-22RA, epítopos antigénicos, porciones que llevan epítopos de los polipéptidos IL-22 A y moléculas de ácidos nucleicos que codifican a tales fragmentos funcionales, epítopos antigénicos, porciones que llevan epítopos de los polipéptidos IL-22RA. Tales fragmentos se usan para generar polipéptidos para usarse en la generación de anticuerpos y moléculas de enlace que ligan, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan la actividad de IL-22 o ambos IL-20 e IL-22. Un polipéptido IL-22RA "funcional" o fragmento del mismo definido en la presente se caracteriza por su caapcidad para bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de diferenciación o proliferativa IL-20 o IL-22 inflamatorias, por su capacidad para inducir o inhibir las funciones celulares especializadas, o por su capacidad para ligar específicamente a un anticuerpo anti-IL-22RA, célula, IL-20 o IL-22. Como se describió previamente en la presente, la IL-22RA se caracteriza por una estructura y dominios del receptor de la citocina clase II descrita en la presente. Así, la presente invención contempla además, usar proteínas de fusión que comprenden: (a) moléculas de polipéptidos que comprenden uno o más dominios descritos arriba, y (b) fragmentos funcionales que comprenden uno o más de estos dominios . La otra porción del polipéptido de la proteína de fusión puede ser contribuida por otro receptor de la citocina clase II tal como IL-10 , IL-13R, IL-20RA, IL-20RB, IL-10RB (CRF2-4) , IL-22RA2, o por un péptido de señal secretora no relacionada y/o no nativa que facilita la secreción de la proteína de fusión. La presente invención proporciona también fragmentos de polipéptidos o péptidos que comprenden una porción que lleva epítopos de un polipéptido IL-22RA descrito en la presente. Tales fragmentos o péptidos pueden comprender un "epítopo inmunogénico" que es parte de una proteína que extrae una respuesta del anticuerpo cuando la proteína entera se usa como un inmunogeno. Los péptidos que llevan epítopos inmunogénicos pueden identificarse usando métodos estándar (ver por ejemplo, Geysen et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 81:3998 (1983)).

En contraste, los fragmentos del polipéptido o péptidos pueden comprender un "epítopo antigénico" que es una región de una molécula de la proteína en la cual un anticuerpo puede ligarse específicamente. Ciertos epítopos consisten de una extensión contigua o lineal de aminoácidos, y la antigenicidad de tal epítopo no se interrumpe por los agentes de desnaturalización. Se conoce en el arte que los péptidos sintéticos relativamente cortos pueden imitar epítopos de una proteína que puede usarse para estimular la producción de anticuerpos contra la proteína (ver por ejemplo, Sutcliffe et al., Science 219:660 (1983)). Por consiguiente, los péptidos que llevan epítopos antigénicos, péptidos antigénicos, epítopos, y polipéptidos de la presente invención son útiles para producir anticuerpos que se ligan con los polipéptidos descritos en la presente, así como para identificar y separar por exclusión los anticuerpos monoclonales anti-IL-22RA que se neutralizan y que pueden enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de IL-22 e IL-20 (individualmente o juntas) . Tales anticuerpos monoclonales de neutralización de la presente invención pueden ligarse a un epítopo antigénico IL-22RA. Los perfiles de hidrofilicidad Hopp/ oods pueden usarse para determinar las regiones que tienen el potencial más antigénico dentro de la SEQ ID NO: 3 (Hopp et al., Proc. Nati. Acad. Sci .78 : 3824-3828 , 1981; Hopp, J. Immun. Meth. 88:1-18, 1986 y Triquer et al., Protein Engineering 11 -. 153-169,1998} . El perfil se basa en una ventana de deslizamiento de seis residuos. Los residuos G, S y T ocultos y los residuos expuestos H, Y y W se ignoran. En IL-22RA estas regiones pueden determinarse por un experto en el arte. Por otra parte, los epitopos antigénicos IL-22RA dentro de la SEQ ID NO: 3 se predicen por una gráfica de Jameson-Wolf, por ejemplo, usando el programa Protean DNASTAR (DNASTAR, Inc., Madison, WI) sirven como epitopos antigénicos preferidos y pueden determinarse por un experto en el arte. Tales epitopos antigénicos incluyen (1) residuos de aminoácidoss 1 (Pro) a 6 (Asp) de la SEQ ID NO: 3; (2) residuos de aminoácidoss 26 (Ser) a 32 (Pro) de la SEQ ID NO:3; (3) residuos de aminoácidoss 41 (Lys) para 47 (Asp) de la SEQ ID NO: 3; (4) residuos de aminoácidoss 49 (Val) a 62 (Cys) de la SEQ ID NO: 3; (5) residuos de aminoácidoss 41 (Lys) a 62 (Cys) de la SEQ ID NO: 3; (6) residuos de aminoácidoss 84 (Ala) a 97 (Ser) de la SEQ ID NO: 3; (7) residuos de aminoácidoss 103 (Thr) a 108 (Asp) de la SEQ ID NO: 3; (8) residuos de aminoácidos 130 (Arg) a 135 (His) de la SEQ ID NO:3; (9) residuos de aminoácidoss 164 (Gly) a 166 (Lys) de la SEQ ID NO: 3; (10) residuos de aminoácidoss 175 (Tyr) a 179 (Glu) de la SEQ ID NO: 3; (11) residuos de aminoácidoss 193 (Lys) a 196 (Ala) de la SEQ ID N0:3; (12) residuos de aminoácidoss 203 (Lys) a 209 (Thr) de la SEQ ID NO:3. Epitopos adicionales incluyen los siguientes péptidos que son generados potencialmente a partir de IL-22RA humana de longitud completa no reducida desdoblada con CnBr: péptido 6 (SEQ ID NO: 56), péptido 7 (SEQ ID N0:57), péptido 8 (SEQ ID NO:58), péptido 9 (SEQ ID NO:59), péptido 10 (SEQ ID NO:60) y el péptido 11 (SEQ ID NO: 61). Las cisteínas se ligan con disulfuro que resulta en un enlace entre los pép idos 7 (SEQ ID NO: 57) y 10 (SEQ ID NO: 60. Específicamente, la SEQ ID NO: 56 corresponde a residuos de aminoácidoss 1 (Pro) a 92 (Met) de la SEQ ID NO: 3; SEQ ID NO: 57 correspondiente a los residuos de aminoácidoss 93 (Thr) a 120 (Met) de la SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 58 correspondiente a los residuos de aminoácidoss 121 (lie) a 160 (Met) de la SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 59 correspondiente a los residuos de aminoácidoss 161 (His) a 185 (Met) de la SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 69 correspondiente a los residuos de aminoácidoss 186 (lie) a 199 (Met) de la SEQ ID NO: 3 y la SEQ ID NO: 61 correspondiente a los residuos de aminoácidoss 200 (Cys) a 211 (Thr) de la SEQ ID NO:3. Además, los residuos de la SEQ ID NO: 2 (y residuos correspondientes de la SEQ ID NO: 3) que son importantes para enlazar al ligando-receptor que comprende Tyr-60, y Phe-164, Tyr-93, Arg-112, Lys-210, y Glu-211 de la SEQ ID NO: 2 y (los residuos correspondientes de la SEQ ID NO: 3). Por otra parte, los residuos principales para dirigir el enlace del ligando-receptor comprenden Tyr-60, y Phe-164 de la SEQ ID NO: 2 (y los residuos correspondientes de la SEQ ID NO: 3), y los residuos secundarios que comprenden los residuos 54 Tyr-93, Arg-112, Lys-210 y Glu-211 de la SEQ ID N0:2 y (los residuos correspondientes de la SEQ ID NO: 3) . En las modalidades preferidas, los epitopos antigénicos que neutralizan a los anticuerpos de enlace de la presente invención contendrían residuos de la SEQ ID NO: 2 (y los residuos correspondientes de la ' SEQ ID NO: 3) que son importantes para enlazar al ligando-receptor, por ejemplo, con IL-22RA y IL-20 e IL-22 (individualmente o juntos) . Los péptidos que llevan epitopos antigénicos y polipéptidos pueden contener al menos de cuatro a diez aminoácidos, al menos de diez a quince aminoácidos, o alrededor de 15 hasta alrededor de 30 aminoácidos de una secuencia de aminoácidos descritos en la presente. Tales péptidos que llevan epitopos y polipéptidos pueden producirse mediante la fragmentación de un polipéptido IL-22RA, o mediante la síntesis química del péptido como se describió en la presente. Por otra parte, los epitopos pueden seleccionarse mediante la exhibición del fago de las colecciones del péptido aleatorias (ver por ejemplo, Lañe y Stephen, Curr. Opin. Iwmunol. 5:268 (1993), y Córtese et al., Curr. Opin. Biotechnol. 7:616 (1996)) . Métodos estándar para identificar epitopos y producir anticuerpos de péptidos pequeños que comprenden un epítopo se describen por ejemplo por Mole, "Epítopo Mapping, "in Methods in Molecular Biology, Vol. 10, Manson (ed. ), páginas 105-116 (The Humana Press, Inc. 1992), Price, "Produc ion and Characterization of Synthetic Peptide-Derived Antibodies, "in Monoclonal Antibodies : Production, Engineering, and Clinical Application, Ritter and -Ladyman (eds. ), páginas 60-84 (Cambridge University Press 1995), y Coligan et al. (eds.), Current Protocols in Immunology páginas 9.3.1-9.3.5 y páginas 9.4.1-9.4.11 (John Wiley & Sons 1997) . Para cualquier polipéptido IL-22RA que incluye variantes y proteínas de fusión, un experto en el arte puede generar fácilmente una secuencia de polinucleótidos completamente degenerada que codifica a la variante usando la información establecida en las Tablas 1 y 2 de arriba. Por otra parte, aquellos expertos en el arte pueden usar un software estándar para inventar variantes IL-22RA basadas en las secuencias de aminoácidos y de nucleótidos descritas en la presente . 5. Producción de polipéptidos IL-22RA Los polipéptidos de la presente invención que incluyen polipéptidos de longitud completa, receptores monoméricos solubles, homodiméricos , heterodiméricos y multiméricos , receptores de longitud completa, fragmentos del receptor (por ejemplo, fragmentos que enlazan al ligando y epitopos antigénicos) , fragmentos funcionales y proteínas de fusión pueden producirse en las células hospederoas recombinantes siguiendo las técnicas convencionales. Para expresar a un gen IL-22RA, una molécula de ácidos nucleicos que codifica al polipéptido debe ser ligada operablemente a las secuencias regulatorias que controlan la expresión transcripcional en un vector de expresión y después, introducirse dentro de una célula hospederoa. Además de las secuencias reguladoras transcripcionales tales como los promotores y mejoradores, los vectores de expresión pueden incluir secuencias reguladoras traductoras y un gen marcador que es adecuado para la selección de células que llevan el vector de expresión. Los vectores de expresión que son adecuados para la producción de una proteina externa en células eucarióticas contienen típicamente (1) elementos de ADN procarióticos que codifican a un origen de replicación bacteriana y un marcador de resistencia antibiótico para proporcionar el crecimiento y selección del vector de expresión en una hospederoa bacteriana; (2) elementos de ADN eucarióticos que controlan la iniciación de la transcripción tales como un promotor, y (3) elementos de ADN que controlan el proceso de los transcritos tales como una transcripción de la secuencia de terminación/poliadenilación. Como se discutió arriba, los vectores de expresión pueden incluir también secuencias de nucleótidos que codifican a una secuencia secretora que dirige al polipéptido heterólogo en la trayectoria secretora de una célula hospederoa. Por ejemplo, un vector de expresión IL-22RA puede comprender un gen IL-22RA y una secuencia secretora derivada de cualquier gen secretado. Las proteínas IL-22RA de la presente invención pueden ser expresadas en células de mamíferos. Ejemplos de células hospederoas de mamíferos adecuadas incluyen células de riñon de mono verde africano (Vero; ATCC CRL 1587) , células de riñon embriónicas humanas (293 -HEK; ATCC CRL 1573) , células de riñón de hámster bebé (BHK-21, BHK-570; ATCC CRL 8544, ATCC CRL 10314) , células de riñón caninas (MDC ; ATCC CCL 34) , células de ovario de hámster chino (CHO-K1; ATCC CCL61 ; CHO DG44 (Chasin et al., Som. Cell. Molec. Genet. 12: 555,1986)), células pituitarias de rata (GHl ; ATCC CCL82) , células HeLa S3 (ATCC CCL2.2), células del hepatoma de rata (H-4-II-E; ATCC CRL 1548) células de riñón de mono SV40-transformada (COS-1; ATCC CRL 1650) y células embriónicas murinas (NIH- 3T3; ATCC CRL 1658) . Para una hospederoa de mamífero, las señales reguladoras transcripcional y traduccional pueden derivarse a partir de fuentes virales de mamíferos por ejemplo, adenovirus, virus del papiloma bovino, virus del simio o similares en las cuales las señales reguladoras se asocian con un gen particular que tiene un alto nivel de expresión. Las secuencias reguladoras transcripcional y traduccional pueden obtenerse también a partir de genes de mamíferos por ejemplo, genes de actina, colágeno, miosina y metalotioneina. Las secuencias reguladoras transcripcionales incluyen una región promotora suficiente para dirigir la iniciación de la síntesis del AR . Los promotores eucarióticos adecuados incluyen el promotor del gen I metalotioneina. de ratón (Hamer et al., J. Molec. Appl. Genet. 2:273 (1982)), el promoter TK del virus del Herpes (McKnight, Cell 31:355 (1982)), el promotor próximo SV40 (Benoist et al., Nature 290:304 (1981)), el promotor del virus del sarcoma Rous (Gorman et al., Proc. Na.t'1 Acad. Sci. USA 79:6777 (1982)), el promotor del citomegalovirus (Foecking et al., Gene 45:101 (1980)), y el promotor del virus del tumor mamario de ratón (ver generalmente, Etcheverry, "Expression of Engineered Proteins in Mammalian Cell Culture, " en Protein Engineering: Principies and Practice, Cleland et al. (eds.), páginas 163-181 (John Niley & Sons, Inc. 1996)) . Alternativamente, un promotor procariótico tal como el promotor de la polimerasa del A N T3 bacteriófago, puede usarse para controlar la expresión del gen IL-22RA en células de mamíferos si el promotor procariótico se regula por un promotor eucariótico {Zhou et al., Mol. Cell. Biol. 10:4529 (1990), y Kaufinan et al., Nucí. Acids Res. 19:4485 (1991)). En ciertas modalidades, una secuencia de ADN que codifica a un polipéptido del receptor soluble IL-22RA o un fragmento del polipéptido IL-22RA se enlaza operablemente a otros elementos genéticos requeridos para su expresión, que incluyen generalmente un terminador y promotor de trascripción dentro de un vector de expresión. El vector contendrá también comúnmente uno o más marcadores seleccionables y uno o más orígenes de replicación, a pesar de que aquellos expertos en el arte reconocerán que dentro de ciertos sistemas de marcadores seleccionadles pueden proporcionarse en los vectores individuales, y replicación del ADN exógeno puede ser proporcionado por la integración en el genoma de la célula hospederoa. La selección de promotores, terminadores, marcadores seleccionados, vectores y otros elementos es una cuestión del diseño rutinario dentro del nivel de un experto en el arte. Se describen muchos elementos en la literatura y están disponibles a través de los proveedores comerciales. Múltiples componentes de un complejo del receptor soluble puede ser co-transfectado en los vectores de expresión individuales o ser contenidos en un vector de expresión simple. Tales técnicas para expresar componentes múltiples de los complejos de la protexna son bien conocidas en el arte. Un vector de expresión puede introducirse en las células hospederoas usando una variedad de técnicas estándar que incluyen transfeccion de calcio fosfato, transfeccion mediada por los liposomas, suministro mediado por microproyectiles, electroporación y similares. Las células transfectadas pueden seleccionarse y propagarse para proporcionar células hospederoas recombinantes que comprenden el vector de expresión integrado de manera estable en el genoma de la célula hospederoa. Las técnicas para introducir vectores en células eucarióticas y técnicas para seleccionar tales transformantes estables usando un marcador seleccionadle dominante se describen por ejemplo, por Ausubel (1995) y por Murray (ed.). Gene Transfer and Expresión Protocols (Humana Press 1991) . Por ejemplo, un marcador seleccionable adecuado es un gen que proporciona resistencia a la neomicina antibiótica. En este caso, la selección se lleva a cabo en presencia de un fármaco del tipo neomicina tal como G-418 o similares. Los sistemas de selección pueden usarse también para incrementar el nivel de expresión del gen de interés, un proceso referido como "amplificación" . La amplificación se lleva a cabo cultivando los transfectantes en presencia de un nivel bajo del agente selectivo e incrementando después la cantidad del agente selectivo para seleccionar las células que producen niveles altos de los productos de los genes introducidos . Un marcador seleccionable amplificable adecuado es una dihidrofilato reductosa (DHFR) , que confiere resistencia al metotrexato. Pueden usarse también otros genes resistentes al fármaco (por ejemplo, resistencia a la higromicina, resistencia de múltiples fármacos, acetiltransferasa de puromicina) . Alternativamente, los marcadores que introducen un fenotipo alterado tal como una protelna fluorescente verde o proteínas de superficie celular tales como CD4 , CD8, MHC clase I, fosfatasa alcalina placental pueden usarse para especies de células transfectadas de células no transfectadas mediante tales medios como clasificación FACS o una tecnología de separación de cuentas magnéticas. Los polipéptidos IL-22RA. pueden ser producidos también mediante células de mamíferos cultivadas usando un sistema de suministro viral. Ejemplos de virus para este propósito incluyen adenovirus, retrovirus, virus del herpes, virus de la vaccinia y virus adeno asociados (AAV) . El adenovirus, un virus del ADN de doble hebra es normalmente el vector de transferencia del gen mejor estudiado para el suministro de los ácidos nucleicos heterólogos (para una revisión, ver Becker et al., Meth. Cell Biol. 43: 161 (1994), y Douglas y Curiel, Science & Medicine 4:44 (1997)). Las ventajas del sistema del adenovirus incluyen el acomodo de insertos de ADN relativamente grandes, la capacidad para crecer en altas concentraciones, la capacidad para infectar un amplio intervalo de tipos celulares de mamíferos, y flexibilidad que permite el uso con un gran número de vectores disponibles que contienen diferentes promotores . Al anular las porciones del genoma del adenovirus, pueden acomodarse insertos grandes (hasta de 7 Kb) de ADN heterólogos . Estos insertos pueden incorporarse en el ADN viral mediante la ligación directa o mediante la recombinación homologa con un plásmido co-transfectado . Una opción es eliminar el gen El esencial del vector viral, que resulta en la incapacidad par replicar a menos que se proporcione el gen El mediante la célula hospederoa. Las células 293 humanas infectadas con el vector del adenovirus (ATCC Nos. CRL-1573, 45504, 45505), por ejemplo, pueden hacerse crecer como células adherentes o en un cultivo de suspensión con una densidad relativamente alta para producir cantidades significativas de proteínas (ver Garnier et al., Cytotechnol . 15: 145 (1994)). La IL-22RA puede también ser . expresada en otras células eucarióticas superiores tales como células de aves, hongos, insecto, levaduras o de plantas. El sistema baculovirus proporciona un medio eficiente para introducir genes IL-22RA clonados en células de insecto. Los vectores de expresión adecuados se basan en el virus de polihedrosis nuclear múltiple Autographa californica (AcMNPV) , y contienen promotores bien conocidos tales como el promotor 70 (hsp) de la proteína de choque por calor Drosophila, el promotor del gen temprano-inmediato del virus de la polihedrosis nuclear Autographa californica (ie-1) y el promotor 39K temprano tardío, promotor plO del baculovirus, y el promotor Drosophila metalotioneina. Un segundo método para elaborar baculovirus recombinantes utiliza un sistema basado en transposones descrito por Luckow (Luckow, et al., J. Viril. 67:4566 (1993)). Este sistema que utiliza vectores de transferencia, se vende en el kit BAC-a-BAC (Life Technologies, Rockville, MD) . Este sistema utiliza un vector de transferencia, PFASTBAC (Life Technologies) que contiene un transposon Tn7 para mover el ADN que codifica al polipéptxdo IL-22RA en un genoma del baculovirus mantenido en la E. coli como un plásmido grande llamado un "bacmido" . Ver, Hill-Perkins y Possee, J". Gen. Virol. 71:971 (1990), Bonning, et al., J. Gen. Virol. 75:1551 (1994), y Chazenbalk, y Rapoport, J. Biol. Chem. 270:1543 (1995) . Además, los vectores de transferencia pueden incluir una fusión en la estructura con el ADN que codifica a una etiqueta del epítopo en el término C o N del polipéptxdo IL-22RA expresado, por ejemplo, la etiqueta del epítopo Glu-Glu (Grussenmeyer et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. 82:7952 (1985)). Usando una técnica conocida en el arte, un vector de transferencia que contiene un gen IL-22RA se transforma en una E. coli, y se separa por exclusión para los bacmidos que contienen un gen interruptor la.cZ indicativo del baculovirus recombinante . El ADN del bacmido que contiene el genoma del baculovirus recombinante se aislan entonces usando técnicas comunes . El vector PFASTBAC ilustrativo puede modificarse en un grado considerable. Por ejemplo, el promotor de polihedrina puede removerse y sustituirse con el promotor de la proteina básica del baculovirus (también conocida como Peor, p6.9 o el promotor MP) que se expresa ya sea en la infección del baculovirus y que se ha demostrado ser ventajoso para expresar a las proteínas secretadas (ver por ejemplo, Hill-Perkins y Possee, J. Gen. Virol. 71 :971 (1990), Bonning, et al., J".

Gen. Virol. 75:1551 (1994), y Chazenbalk y Rapoport, J". Biol. Chem. 270:1543 (1995) . En tales constructos del vector de transferencia, puede usarse una versión corta o larga del promotor de la proteína básica. Por otra parte, los vectores de transferencia pueden construirse para reemplazar las secuencias de señal secretoras IL-22RA nativas con las secuencia de señal secretoras derivadas de las proteínas de insectos. Por ejemplo, una secuencia de señal secretora de Glucosiltransferasa Ecdisteroide (EGT) , Melittin de miel de abeja (Invitrogen Corporation; Carlsbad, CA) , o baculovirus gp6 (PharMingen: San Diego, CA) pueden usarse en constructos para reemplazar la secuencia de señal secretora IL-22RA nativa. El virus o bacmidos recombinantes se usan para transfectar a las células hospederoas. Las células hospederoas de insectos adecuadas incluyen líneas celulares de IPLB-Sf-21, una línea celular de ovario pupal Spodoptera frugiperda tal como Sf9 (ATCC CRL 1711) , Sf2lAE, y Sf21 (Invitrogen Corporation; San Diego, CA) , así como 2 células Drosophila Schneider y la línea celular HIGH FIVEO (Invitrogen) derivada de Trichoplusla ni (Patente Americana No. 5,300, 435). El medio libre de suero disponible comercialmente puede usarse para hacer crecer y mantener las células . El medio adecuado son Sf900 IT™ (Life Technologies) o ESF 921™ (Expression Systems) para las células Sf9; y Ex-cell0405™ (JRH Biosciences, Lenexa, KS) o Express FiveO (Life Technologies) para las células T. ni. Cuando los virus recombinantes se usan, las células se hacen crecer típicamente hasta de una densidad de inoculación de aproximadamente 2-5 x 105 células para una densidad de 1-2 x 106 células al tiempo que se añade un linaje viral recombinante en una multiplicidad de infección (MOI) de 0.1 a 10, más preferiblemente cerca de 3. Técnicas establecidas para producir proteínas recombinantes en los sistemas de baculovirus se proporcionan por Bailey et al., "Manipulation of Baculovirus Vectors,"en Methods in Molecular Biology, Volume 7 : Gene Transfer and Expression Protocols, urray (ed. ) , páginas 1 7-168 (The Humana Press, Inc. 1991), por Patel et al., "The baculovirus expression system, " en DNA Cloning 2 : Expression Systems, 2nd Edition, Glover et al. (eds.), páginas 205-244 (Oxford University Press 1995) , por Ausubel (1995) en las páginas 16-37 a 16-57, por Richardson (ed.), Baculovirus Expression Protocols (The Humana Press, Inc. 1995), y por Lucknow, "Insect Cell Expression Technology, " en Protein Engineering.-Principies and Practice, Cleland et al. (eds.), páginas 183-218 (John Wiley & Sons, Inc. 1996) . Las células de hongos que incluyen células de levaduras pueden también usarse para expresar a los genes descritos en la presente . Las especies de la levadura de particular interés a este respecto incluyen Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris, y Pichia metha.no!ica. Los promotores adecuados para la expresión en las levaduras incluyen promotores de GALI (galactosa) , PGK (fosfoglicerato quinasa) , ADH (alcohol deshidrogenasa) , AOXI (alcohol oxidasa) , HIS4 (histidinol deshidrogenasa), y similares. Se han diseñado muchos vectores que clonan levaduras y están f cilmente disponibles . Estos vectores' incluyen vectores basados en YIp tales como los vectores Ylp5, YRp, tales como YRpl7, vectores YEp tales como los vectores YEpl3 y YCp, tales como YCpl9. Los métodos para transformar células S. cerevisiae con AND exogeno que producen polipéptidos recombinantes de los mismos se describen mediante por ejemplo, Ka asaki, Patente americana No. 4,599,311, Kawasaki et al., Patente americana No. 4,931,373, Brake, Patente americana No. 4,870,008, Welch et al., Patente americana No. 5,037,743, y Murray et al., Patente americana No. 4,845,075. Las células transformadas se seleccionan por el fenotipo determinado mediante el marcador seleccionable, normalmente resistente a los fármacos o con capacidad para desarrollarse en ausencia de un nutriente particular (por e emplo leucina) . Un sistema del vector adecuado para usarse en Saccharomyces cerevisiae es el sistema del vector POTI descrito por Kawasaki et al. (Patente americana No. 4,931,373), que permite que las células transformadas que van a seleccionarse mediante el crecimiento en el medio que contiene glucosa. Los promotores y terminadores adecuados adicionales para usarse en las levaduras incluyen aquellas de los genes de enzimas glicolíticas (ver por ejemplo, Kawasaki, Patente Americana No. 4,599,311, Kingsman et al., Patente americana No. 4,S15,974, y Bitter, Patente No. 4,977,092) y genes de alcohol deshidrogenasa . Ver también, las Patentes americanas Nos. 4,990,446, 5,063,154, 5,139,936, y 4,661,454.

Los sistemas de transformación para otras levaduras que incluyen Hansenula polymorpha, Schizosaccharomyces pombe, Kluyveromyces lactis, Kluyveromyces fragilis, Ustilago maydis, Pichia pastoris, Pichia methanollca, Pichia guillermondii y Candida maltosa se conocen en el arte. Ver por ejemplo, Gleeson et al., J. Gen. Microbiol. 132:3459 (1986), y Cregg, Patente Americana No. 4,882,279. Las células Aspergillus pueden utilizarse de acuerdo con los métodos de McKnight et al., Patente americana No. 4,935,349. Los métodos para transformar Acremonium chrysogenum se describen por Sumino et al., Patente americana No. 5,162,228. Los métodos para transformar Neurospora se describen por Lambowitz, Patente americana No. 4,486,533. Por ejemplo, el uso de Pichia methanolica como hospederoa para la producción de proteínas recombinantes se describen por Raymond, Patente americana No. 5,716,808, Raymond, Patente americana No. 5,736,383, Raymond efc al., Yeast 14:23 (1998), y en la publicación internacional Nos. WO 97/17450, O 97/17451, WO 98/02536, y WO 98/02565. Las moléculas de ADN para usarse en la transformación de la P. metanolica se preparará comúnmente como plásmidos circulares de hebra doble, que se linearizan preferiblemente previo a la transformación. Para la producción del polipéptido en P. methanolica, el promotor y terminador en el plásmido puede ser que el gen de la P. methanolica tal como un gen que utiliza el alcohol P. methanolica (AUGI o AUG2) . Otros promotores útiles incluyen aquellos de la sintasa dihidroxiacetona (DHAS) , deshidrogenasa del formato (F D) y genes catalasa (CAT) . Para facilitar la integración del ADN en el cromosoma de la hospederoa, se prefiere tener el segmento de expresión completa del plásmido flanqueado en ambos extremos por las secuencias de ADN hospederoas . Un marcador seleccionable adecuado para usarse en Pichia methanolica es un gen P. methanolica ADE2, que codifica a fosforibosil-5-aminoimidazol carboxilasa (AIRC; EC 4.1. 1.21), y que permite que las células hospederoas ade2 crezcan en la ausencia de adenina. Para los procesos industriales a gran escala, donde es deseable minimizar el uso de metanol, pueden usarse células hospederoas en las cuales se elimina el metanol de los genes (AUGI y AUG2) . Para la producción de las proteínas secretadas, las células hospederoas pueden ser insuficientes en los genes de la proteasa vacuolar [PEP4 y PRB1) . La electroporación se usa para facilitar la introducción de un plásmido que contiene ADN que codifica a un polipéptido de interés en las células P. methanolica. Las células de P. methanolica pueden transformarse mediante electroporación usando un campo eléctrico de pulsación que desciende exponencialmente que tiene una resistencia de campo de 2.5 a 4.5 kV/cm, preferiblemente alrededor de 3.75 KcV/cm, y un tiempo constante (t) de 1 a 40 milisegundos , más preferiblemente alrededor de 20 milisegundos. Los vectores de expresión pueden también introducirse en los protoplastos de la planta, tejidos de plantas intactos o células de plantas aisladas . Los métodos para introducir los vectores de expresión en el tejido de las plantas incluyen la infección directa o co-cultivación del tejido de la planta con Agrobacterium tumefaciens, suministro mediado por microproyectiles, inyección de ADN, electroporación y similares. Ver por ejemplo, Horsch et al., Science 227:1229 (1985), Klein et al., Biotechnology 20:268 (1992), y Miki et. al., "Procedures for Introducing Foreign DNA into Plants," en Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology, Glick et al. (eds.), páginas 67-88 (CRC Press, 1993). Alternativamente, los genes IL-22RA pueden expresarse en las células hospederoas procarióticas . Los promotores adecuados que pueden usarse para expresar a los polipéptidos IL-22RA en una hospederoa procariótica son bien conocidos por aquellos expertos en el arte e incluyen promotores capaces de reconocer la polimerasa T4 , T3, Sp6 y T7, los promotores PR y PL del bacteriófago lambda, trp, recA, choque por calor, lacüV5, tac, Ipp-lacSpr, phoA y promotores lacz de la E. col!, los promotores de de la B. subtilis, los promotores del bacteriófago lambda, el promotor bla de pBR322 y el promotor CAT del gen del cloranfenicol acetil transferasa. Los promotores procarióticos se han revisado por Glick, J". Ind. Microbiol. 1:277 (1987), Watson et al., Molecular Biology of the Gene, 4th Ed. (Ben amín Cummins 1987) , and por Ausubel et al. (1995) . Las hospederoas procarióticas adecuadas incluyen E. coli y Bacillus subtilus. Las cepas adecuadas de la E. coli incluye BL21 (DE3 ) , BL21 (DE3)pLysS, BL21 (DE3 ) pLysE, DH1, DH4I, DH5, DH5I, DH5IF' , DH5IMCR, DHIOB, DH10B, DH10B/p3, DH11S, C600, HB101, JM101, J 105, JM109, JM110, K38, RR1, Y1088, Y1089, CSH18 , ER1451, y ER1647 (ver por ejemplo, Bro n (ed.), Molecular Biology Labfax (Academic Press 1991) ) . Las cepas adecuadas de Bacillus subtilus incluye BR151, YB886, MI119, MI120 y B170 (ver por ejemplo, Hardy, "Bacillus Cloning Methods, " en la clonación del ADN: A Practical Approach, Glover (ed.) (IRL Press 1985)) . Cuando se expresa un polipéptido IL-22RA en las bacterias tales como E. coli, el polipéptido puede ser retenido en el citoplasma, típicamente como granulos insolubles o pueden ser dirigidos al especio periplásmico mediante una secuencia de secreción bacteriana. En el caso anterior, las células se lisan y los granulos se recuperan y desnaturalizan usando por ejemplo, isotiocianato guanidina o urea. Los polipéptidos desnaturalizados pueden entonces ser replegados y dimerizados diluyendo su parte desnaturalizada mediante diálisis contra una solución de urea y una combinación de glutation reducida y oxidada, seguido por una diálisis contra un solución salina amortiguada. En el último caso, el polipéptido puede recuperarse a partir del espacio periplásmico en una forma soluble y funcional interrumpiendo a las células (mediante por ejemplo, sonicación o cloque osmótico) para liberar los contenidos del espacio periplásmico y recuperar la proteína, obviando así, la necesidad de desnaturalización y replegado. Los métodos para expresar proteínas en hospederoas procarióticas son bien conocidos por aquellos expertos en el arte (ver por ejemplo, Williams et al . , "Expression of foreign proteins in E. coli using plasmid vectors and purification of specific polyclonal antibodies," en DNA Cloning 2: Expression Systems, 2nd Edition, Glover et al. (eds.), página 15 (Oxford University Press 1995), Ward et al.,"Genetic Manipulation and Expression of Antibodies, " in Monoclonal Antibodies: Principies and Applications, página 137 (Wiley-Liss, Inc. 1995) , y Georgiou, "Expression of Proteins in Bacteria, " en Protein Engineering : Principies and Practice, Cleland et al. (eds.), página 101 (John Wiley & Sons, Inc. 1996)). Los métodos estándar para introducir los vectores de expresión en células de bacterias, levaduras, insectos y de plantas, por ejemplo por Ausubel (1995) . Los métodos generales para expresar y recuperar la proteína externa producida por un sistema de células de mamífero se proporcionan por ejemplo, Etcheverry, "Expression of Engineered Proteins in Mammalian Cell Culture, " en Protein Eng-ineering- Principies and Practice, Cleland et al. (eds. ) , páginas 163 (Wiley-Liss, Inc. 1996) . Las técnicas estándar para recuperar a la proteína producida por un sistema bacteriano se proporciona por ejemplo, Grisshammer et al . , "Purification of over-produced proteins from E. coli cells," en DNA Cloning 2 : Expression Systems, 2nd Edition, Glover et al. (eds.), páginas 59-92 (Oxford University Press 1995) . Los métodos establecidos para aislar a las proteínas recombinantes de un sistema de baculovirus se describen por Richardson (ed.), Baculovirus Expression Protocols (The Humana Press, Inc. 1995) . Como una alternativa, los polipéptidos de la presente invención pueden sintetizarse mediante la síntesis de fase sólida exclusiva, métodos de fase sólida parcial, condensación del fragmento o síntesis de la solución clásica. Estos métodos de síntesis son bien conocidos por aquellos expertos en el arte (ver por ejemplo, Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85: 2149 (1963), Ste art et al., "Solid Phase Peptide Synthesis" (2nd Edition), (Pierce Chemical Co. 1984), Bayer y Rapp, Chem. Pept. Prot. 3:3 (1986), Atherton et al., Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach (IRL Press 1989) , Fields y Colowick, "Solid-Phase Peptide Synthesis," Methods in Enzymology Volume 289 (Academic Press 1997) , y Lloyd-Williams et al. , Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins (CRC Press, Inc. 1997)). Las variaciones en las estrategias de síntesis química total tales como "ligación química nativa" y "ligación de la proteína expresada" son también estándar (ver por ejemplo, Dawson et al., Science 256:776 (1994), Hackeng et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 94:7845 (1997), Dawson, Methods Enzymol. 287:34 (1997), Muir et al, Proc. Nati Acad. Sci. USA 95:6705 (1998), y Severinov y Muir, J. Biol. Chem. 273:16205 (1998)). Los péptidos y polipéptidos de la presente invención comprenden al menos seis, al menos nueve, o al menos 15 residuos de aminoácidoss contiguos de la SEQ ID NO: 3. Como ilustración, los polipéptidos pueden comprender al menos seis, al menos nueve, o al menos 15 residuos de aminoácidoss contiguos de la SEQ ID NO: 3. Dentro de ciertas modalidades de la invención, los polipéptidos comprenden 20, 30, 40, 50, 100 ó más residuos contiguos de estas secuencias de aminoácidos. Las moléculas de ácidos nucleicos que codifican a tales péptidos y polipéptidos son útiles como sondas y cebadores de reacción de la cadena polimerasa. Por otra parte, los polipéptidos IL-22RA y fragmentos de los mismos pueden expresarse como monómeros, homodímeros, heterodímeros o multímeros dentro de células eucarióticas superiores. Tales células pueden usarse para producir IL-22RA de polipéptidos del receptor monomérico, homodimérico, heterodimérico y multiraérico que comprenden al menos un polipéptido IL-22RA ("receptores que comprenden IL-22RA" o "polipéptidos del receptor que comprende IL-22RA")/ o pueden usarse como ensayos celulares en sistemas de separación por exclusión. Dentro de un aspecto de la presente invención, un polipéptido de la presente invención que comprende el dominio extracelular IL-22RA se produce por una célula cultivada, en donde la célula se usa para separar por exclusión los ligandos del receptor, que incluye el ligando natural IL-22, así como agonistas y antagonista del ligando natural. Para resumir esta metodología, un ADNc o gen que codifica al ' receptor, se recombina con otros elementos genéticos requeridos para su expresión (por ejemplo, promotor de transcripción) , y el vector de expresión resultante se inserta en una célula hospederoa. Las células que expresan el ADN y producen el receptor funcional se seleccionan y se usan dentro de una variedad de sistemas de separación por exclusión. Cada componente del complejo receptor monomérico, homodimérico, heterodimérico y multimérico pueden ser expresados en la misma célula. Por otra parte, los componentes del complejo receptor monomérico, homodimérico, heterodimérico y multimérico pueden también fusionarse a un dominio de transmembrana u otra porción de fusión de membrana para permitir la reunión del complejo y la separación por exclusión de los transíectantes , como se describió anteriormente. Para ensayar a los polipéptidos IL-20 e IL-22 antagonistas y los anticuerpos de la presente invención, las células de mamífero adecuadas para usarse en los receptores que comprenden IL-22RA u otros receptores conocidos por ligar IL-20 o IL-22 (por ejemplo, células que expresan IL-22RA/CRF2-4, y IL-20RA, IL-20RB, IL-22RA/IL-20RB, o IL- 20RA/IL-20RB) que traducen una señal mediada por un receptor incluyen células que expresan otras subunidades receptoras que pueden formar un complejo funcional con IL-22RA (o IL- 20RA) . Estas subunidades pueden incluir aquellas de la familia del receptor de interferón u otros receptores de las citocinas clase I o clase II, por ejemplo, CRF2-4 (Genbank No. de acceso Z17227) , IL-10R (Genbank Acceso Nos. U00672 y N_001558) , IL-22RA (que pertenece comúnmente a la Patente Americana No. 5,965,704), zcytor7 (IL-20RA) (que pertenece comúnmente a la Patente americana No.5 , 945 , 511) , IL-20RA/EL-20RB (Publicación WIPO No. WO 01/46232) , e IL-9R. Se prefiere también usar a una célula a partir de las mismas especies como el receptor que va a ser expresado. Dentro de una modalidad preferida, la célula depende del factor de crecimiento hematopoyético suministrado exógenamente para su proliferación. Las lineas celulares preferidas de este tipo son la línea celular TF-1 humana (ATCC número CRL-2003) y la línea celular AML-193 (ATCC número CRL-9589) , que son líneas leucémicas humanas dependientes de GM-CSF y BaF3 (Palacios y Steinmetz, Cell 42:727-734, (1985)) que es una línea celular pre-B murina dependiente de IL-3. Otras líneas celulares incluyen células BHK, COS-1 y CHO. Las células hospederoas adecuadas pueden diseñarse para producir las subunidades del receptor necesarias u otros componentes celulares necesarios para la respuesta celular deseada. Esta metodología es ventajosa debido a que las líneas pueden diseñarse para expresar las subunidades del receptor a partir de cualquier especie, superando así las limitaciones potenciales que surgen de la especificidad de las especies . Los ortólogos de las especies del ADNc del receptor humano pueden ser clonados y usados dentro de las líneas celulares de las mismas especies tales como un ADNc de ratón en la línea celular BaF3. Las líneas celulares que dependen de un factor de crecimiento hematopoyético tal como G -CSF o IL-3, pueden diseñarse entonces para volverse dependientes de otra citocina que actúa a través del receptor IL-22RA tal como IL-22. El receptor funcional que expresa a las células se usa dentro de los ensayos de separación por exclusión. Una variedad de ensayos adecuados se conocen en el arte . Estos ensayos se basan en la detección de la respuesta biológica en una célula objetivo o de direccionamiento. Tal ensayo es un ensayo de proliferación. Las células se cultivan en presencia o ausencia de un compuesto de prueba y se detecta la proliferación celular mediante por ejemplo, midiendo la incorporación de timidina tritiada o mediante un ensayo colorimétrico en la descomposición metabólica de bromuro de 3-(4, 5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil tetrazolio (MTT) (Mosman, J Immunol. Meth. 65: 55-63, (1983)). Un formato de ensayo alternativo usa células que se diseña además para expresar a un gen reportero. El gen reportero se liga a un elemento promotor que es responsable de la trayectoria que enlaza al receptor, y el ensayo detecta la activación de la transcripción del gen reportero. Un elemento promotor preferido a este respecto es un elemento de respuesta al suero, o SER. Ver por ejemplo, Shaw et al., Cell 56:563-572, (1989) . Un gen reportero preferido es un gen luciferasa (de Wet et al., Mol. Cell. Biol. 7:725, (1987)). La expresión del gen se detecta mediante luminiscencia usando métodos conocidos en el arte (por ejemplo, Baumgartner et al., J. Biol. Chem. 269:29094-29101, (1994) ; Schenborn y Goiffin, Promega Notes 41: 11, 1993) . Los kits del ensayo de la actividad de la luciferasa se encuentran disponibles comercraímente a partir de por ejemplo, Promega Corp., Madison, WI. Las lineas celulares de direccionamiento de este tipo pueden usarse para separar por exclusión las colecciones de químicos, medios de cultivo acondicionados con células, caldos de hongos, muestras de suelo, muestras de agua y similares. Por ejemplo, un banco de muestras de un medio acondicionado con células puede ensayarse en unas células de direccionamiento para identificar células que producen ligandos . Las células positivas se usan entonces para producir una colección de ADNc en un vector de expresión de un mamífero, que se divide en estanques, en células hospederoas y se expresan. La media de las muestras de las células transíectadas se ensayan después con una división posterior de estanques, re-transíección, subcultivos y reensayos de células positivas para aislar a un ADNc clonado que codifica al ligando. Varias líneas celulares sensibles a IL-20 se conocen en el arte o pueden ser construidas por ejemplo, la línea celular Baf3/DIRSl/cytoRll (Publicación IPO No. WO 02/072607) . Por otra parte, varias líneas celulares sensibles a IL-22 se conocen (Dumontier et al. , J. Immunol . 164: 1814-819, 2000; Dumoutier, L. et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. 97: 10144-10149,2000; Xie MH et al . , J. Biol . Chem. 275: 31335-31339,2000; Kotenko SV et al . , J. Biol. Chem. 276:2725-2732, 2001) , así como aquellas que expresan la subunidad IL-22RA del receptor IL-22. Por ejemplo, las siguientes células son sensibles a IL-22:TK-10 (Xie MH et al., supra. ) (carcinoma renal humano) ; S 480 (ATCC No. CCL-228) (adenocarcinoma del colón humano) ; HepG2 (ATCC No. HB-8065) (hepatoma humano) ; PC12 (ATCC No. CRL-1721) (modelo celular neuronal murino; feocromocitoma de rata) ; y MES13 (ATCC No. CRL-1927) (línea celular mesangial de riñon murino) . Además, algunas líneas celulares expresan IL-22RA (receptor IL-22) que son también candidatas a las líneas celulares sensibles a IL-22: A549 (ATCC No. CCL-185) (carcinoma de pulmón humano); G-361 (ATCC No. CRL-1424) (melanoma humano) ; y Caki-1 (ATCC No. HTB-46) (carcinoma renal humano) . Además, las líneas celulares sensibles a IL-22 pueden construirse por ejemplo, la línea celular Baf3/cytoR.il/CRF2-4 descrita en la presente (WIPO Publicación No. WO 02/12345) . Estas células pueden usarse en ensayos para valorar la funcionalidad de IL-22RA como un antagonista IL-20 o IL-22 o factor anti-inflamatorio. Una metodología de separación por exclusión adicional proporcionada mediante la presente invención, incluye el uso de polipéptidos del receptor híbrido. Estos polipéptidos híbridos caen dentro de dos clases generales . Dentro de la primera clase, el dominio intracelular de IL-22RA, se une al dominio que enlaza a un ligando de un segundo receptor. Una segunda clase de polipéptidos del receptor híbrido comprende el dominio extracelular (ligando-enlace) de IL-22RA (SEQ ID NO: 3) con un dominio intracelular de un segundo receptor, preferiblemente un receptor de citocinas hematopoyéticas y un dominio de transmembrana. Los monómeros, homodímeros, heterodímeros y multímeros IL-22RA híbridos de la presente invención son receptores de esta segunda clase que se expresan en células conocidas por su capacidad para responder a las señales traducidas por el segundo receptor. Al mismo tiempo, estas dos clases de receptores híbridos permiten la identificación de un tipo celular sensible al desarrollo de un ensayo para detectar IL-22 o IL-20. Por otra parte, tales células pueden usarse en presencia de IL-22 o IL-20 para ensayar a los antagonistas del receptor soluble de la presente invención en un ensayo tipo competición. En tal ensayo, una disminución en la proliferación o señal de la actividad de traducción de IL-22 o IL-20 en presencia de un receptor soluble de la presente invención demuestra una actividad antagonística . Por otra parte, los ensayos que enlazan al receptor soluble IL-22RA y los ensayos basados en células pueden usarse para valorar ya sea al receptor soluble que enlaza, inhibe, reduce, antagoniza o neutraliza la actividad de IL-22 o IL-20. 6. Producción de conjugados y proteínas de fusión IL-22RA üna clase general de análogos IL-22RA son variantes que tienen una secuencia de aminoácidos de la secuencia de aminoácidos descrita en la presente. Otra clase general de análogos IL-22R4 se proporciona mediante los anticuerpos anti-idiotipo y fragmentos de los mismos como los descritos abajo. Por otra parte, los anticuerpos recombinantes que comprenden dominios variables anti-idiotipo pueden usarse como análogos (ver por ejemplo, Monfardini et al., Proc. Assoc. Am. Physicians 105:420 (1996)). Puesto que los dominios variables de los anticuerpos IL-22R4 anti-idiotipo imitan a IL-22R4, estos dominios pueden proporcionar actividad que enlaza a la IL-22R4. Los métodos para producir anticuerpos catalíticos anti-idiopáticos se conocen por aquellos expertos en el arte (ver por ejemplo, Joron et al., Ann. N Y Acad. Sci. 612:216 (1992), Friboulet et al., Appl. Bíochem. Biotechnol. 47:229 (1994), y Avalle et al., Ann. N Y Acad. Sci. 864:118 (1998)).

Otra metodología para identificar a los análogos IL-22R4 se proporciona mediante el uso de colecciones combinatorias . Métodos para construir y separar por exclusión la exhibición del fago y otras colecciones combinatorias se proporcionan por ejemplo por ay et al., Phage Display of Peptides and Proteins (Academic Press 1996), Verdine, Patente americana No. 5,783,384, Kay, et . al., Patente americana No. 5,747,334, y Kauffinan et al., Patente americana No. 5,723, 323. Los polipéptidos IL-22R4 tienen ambos usos in vivo e in vitro. Como una ilustración, una forma soluble de IL-22R4 puede añadirse al medio de cultivo celular para inhibir los efectos del ligando IL-22R4 producido por las células cultivadas . Las proteínas de fusión de IL-22R4 pueden usarse para expresar IL-22R4 en una hospederoa recombinante y aislar la IL-22R4 producida. Como se describe abajo, las proteínas de fusión IL-22R4 particulares tienen también usos en el diagnostico y en terapias . Un tipo de proteína de fusión comprende un péptido que guía al polipéptido IL-22R4 de una célula recombinante. Para dirigir a un polipéptido IL-22R4 en la trayectoria secretora de una célula eucariótica, una secuencia de señal (también conocida como un péptido de señal, una secuencia líder, secuencia prepo o secuencia pre) se proporciona en el vector de expresión IL-22R4. Aun cuando la secuencia de señal secretora puede., derivarse de IL-22R4, una secuencia de señal adecuada puede también derivarse de otra proteína secretada o sintetizada de novo. La secuencia de señal secretora se enlaza operablemente a una secuencia que codifica IL-22R4 tal que las dos secuencias se unen en la estructura de lectura correcta y se colocan para dirigir el polipéptido sintetizado nuevamente en la trayectoria secretora de la célula hospederoa. Las secuencias de señal secretoras se colocan normalmente en 5' para la secuencia de nucleótidos que codifica al polipéptido de interés a pesar de que ciertas secuencias de señal secretoras pueden colocarse de cualquier forma en la secuencia de nucleótidos de interés (ver por ejemplo, elch et al., Patente americana No. 5,037,743; Holland et al., Patente americana No. 5,143,830). A pesar de que la secuencia de señal secretora IL-22RA u otra proteína producida por las células de un mamífero (por ejemplo, la secuencia de señal activadora del plasminógeno tipo tejido, como se describió por ejemplo en la Patente americana No. 5,641,655) es útil para la expresión de IL-22R4 en hospederoas de mamíferos recombinantes, se prefiere una secuencia de señal de levadura para la expresión en las células de levadura. Ejemplos de secuencias de señal de levadura adecuadas son aquellas derivadas de levaduras que se acoplan con el factor a fermona (codificada por el gen MFal) , invertasa (codificada por el gen SUC2) , o fosfatasa del ácido (codificada por el gen PH05) . Ver por ejemplo, Romanos et al . , "Expression of Cloned Genes in Yeast, "en ADN Cloning 2 : A Practical Approach, 2"d Edition, Glover and Hames (eds. ), páginas 123-167 (Oxford University Press 1995) . Los polipéptidos del receptor soluble IL-22RA pueden prepararse expresando un ADN trunco que codifica al dominio extracelular por ejemplo, un polipéptido que contiene la SEQ ID NO: 3, o la región correspondiente de un receptor no humano. Se prefiere que los polipéptidos del dominio extracelular se preparen en una forma sustancialmente libre de los segmentos del polipéptido intracelular y de transmembrana. Para dirigir la exportación del dominio receptor de la célula hospederoa, el ADN receptor se enlaza a un segmento de ADN secundario que codifica a un péptido secretor tal como un péptido secretor t-PA. Para facilitar la purificación del dominio del receptor secretado, una extensión C terminal tal como una etiqueta poli-histidina, sustancia P, péptido Flag™ (Hopp et al., Biotechnology 6: 1204-1210, (1988); disponible de Eastman Kodak Co.,New Haven, CT) u otro polipéptido o proteína en la que un anticuerpo u otro agente de enlace específico está disponible, puede fusionarse al polipeptido del receptor. Por otra parte, los epítopos antigénicos IL-22R4 de los dominios que enlazan citocinas extracelulares se preparan también como se describió arriba. En una metodología alternativa, un dominio extracelular del receptor de IL-22R4 u otro componente del receptor de la citocina clase I o II puede expresarse como una fusión con regiones constantes de cadena pesada de inmunoglobulina, típicamente un fragmento Fc que contiene dos dominios de región constante y una región de eje pero que carece de la región variable (Ver, Sledziewski, AZ et al.,patente americana No. 6,018,026 y 5,750,375). Los polipéptidos de la presente invención incluyen tales fusiones. Una de tales fusiones se muestra en la SEQ ID NO: 4. Tales fusiones se secretan típicamente como moléculas multiméricas en donde las porciones Fc son disulfuros enlazados entre sí y dos polipéptidos del receptor que se ordenan en proximidad cercana entre sí. Las fusiones de este tipo pueden usarse para purificar por afinidad el ligando similar de la solución como una herramienta del ensayo in vitro, para bloquear, inhibir, o reducir las señales in vitro mediante una titulación específica fuera del ligando, y como antagonistas in vivo administrándolas paralelamente para enlazar al ligando que circula, y desplazarlo de la circulación. Para purificar al ligando, una IL-22R4 quimera se añade a una muestra que contiene al ligando (por ejemplo, un medio del cultivo acondicionado con células o extractos del tejido) bajo condiciones que facilitan la temperatura en la que se enlaza al receptor-ligando (típicamente, la temperatura cercana a la fisiológica, pH y resistencia iónica) . El complejo del ligando quimera se separa entonces de la mezcla usando la proteína A, que se inmoviliza en un soporte sólido (por ejemplo, perlas de resina insolubles) . El ligando se eluye entonces usando técnicas químicas convencionales tales como en las que se usa una sal o un gradiente de pH. En una alternativa, la misma quimera puede ligarse a un soporte sólido, con un enlace y una elución como arriba. Las quimeras pueden usarse in vivo para regular las respuestas inflamatorias que incluyen respuestas de fase aguda tales como el suero amiloide A (SAA) , proteína reactiva C (CRP) , y similares. Las quimeras con alta afinidad de enlace se administra parenteralmente (por ejemplo, mediante inyección intramuscular, subcutánea o intravenosa) . Las moléculas circulantes que ligan al ligando se apartan de la circulación mediante procesos fisiológicos normales. Para su uso en los ensayos, las quimeras se ligan a un soporte vía la región Fc y se usa un formato ELISA. Para asistir en el aislamiento anti-IL-22R4 y los moléculas de enlace de la presente invención, puede emplearse ventajosamente un sistema que usa un receptor que enlaza al ligando (o un anticuerpo, un miembro de un par complemento/anti-complemento) o un fragmento de enlace del mismo, y un instrumento biosensor disponible comercialmente (BIAcore, Pharmacia Biosensor, Piscataway, NJ) . Tal receptor, anticuerpo, miembro de un fragmento o par complemento/anti-complemento se inmoviliza en la superficie de un chip del receptor. El uso de este instrumento se describe en Karlsson, J. Immunol. Methods 145:229-40, 1991 y Cunningham y Wells, J. Mol. Biol. 234:554-63, 1993. Un receptor, anticuerpo, miembro o fragmento se une covalentemente a la película dorada dentro de la célula que fluye. Una muestra de prueba se pasa a través de la célula. Si un ligando, epítopo o miembro opuesto del par complemento/anti-complemento se presenta en la muestra, se enlazará al receptor inmovilizado, anticuerpo o miembro, respectivamente, provocando un cambio en el índice refractivo del medio, que se detecta como un cambio en la resonancia del plasmón de superficie de la película dorada. Este sistema permite la determinación de proporciones de encendido y apagado, a partir de las cuales puede calcularse la afinidad de enlace y valorar la estequiometría de enlace. Alternativamente, el enlace del ligando/receptor puede analizarse usando una tecnología SELDI (??) (Ciphergen, Inc., Palo Alto, CA) . Por otra parte, la tecnología BIACORE descrita arriba puede usarse en experimentos de competición par determinar si los anticuerpos monoclonales diferentes se enlazan a los mismos o distintos epítopos en el polipéptido IL-22R4, y tales pueden usarse para ayudar en la exploración del epítopo para neutralizar a los anticuerpos de la presente invención que enlazan, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan a IL-22 o ambas IL-20 e IL-22. Los polipéptidos del receptor que enlaza al ligando pueden usarse dentro de otros sistemas de ensayo conocidos en el arte. Tales sistemas incluyen el análisis Scatchard para la determinación de afinidad de enlace (ver Scatchard, Ann. Y Acad. Sci. 51:660-72,1949) y ensayos calorimétricos (Cunningham et al., Science 253 : 545-48 , 1991; Cunningham et al., Science 245: 821-25,1991). La presente invención proporciona además una variedad de otras fusiones de polipéptidos y proteínas multiméricas relacionadas que comprenden una o más fusiones de polipéptidos. Por ejemplo, un receptor IL-22R4 soluble puede prepararse como una fusión a una proteína dimerizada como la descrita en las patentes norteamericanas Nos. 5,155,027 y 5,567,584. Las proteínas de dimerización preferidas a este respecto incluyen dominios de región constante de la inmunoglobulina, por ejemplo, IgGyl, y la cadena ligera Je humana. Las fusiones IL-22R4 solubles con la inmunoglobulina pueden ser expresadas en células diseñadas genéticamente para producir una variedad de análogos del receptor IL-22RA. Los dominios auxiliares pueden fusionarse a un receptor IL-22RA soluble para dirigirlo a las células específicas, tejidos o macromoléculas (por ejemplo, colágeno o células que expresan ligandos IL-22RA, IL-20 o IL-22) . Un polipéptido IL-22RA puede fusionarse a dos o más porciones tales como una etiqueta de afinidad para la purificación y un dominio de direccionamiento . Las fusiones del polipéptido pueden comprender también uno o más sitios de desdoblamiento, particularmente entre los dominios. Ver, Tuan et al., Connective Tissue Research 34:1-9, 1996. En las células bacterianas, es deseable frecuentemente expresar una proteína heteróloga como una proteína de fusión para disminuir la toxicidad, incrementar la estabilidad y para mejorar la recuperación de la proteína expresada. Por ejemplo, la IL-22RA. puede ser expresada como una proteína de fusión que comprende un polipéptido de glutatión S-transferasa. Las proteínas de fusión de glutatión S-transferasa son típicamente solubles y fácilmente purificables a partir de lisados de E. coli en columnas de glutatión inmovilizadas . En metodologías similares, una proteína de fusión IL-22RA que comprende un polipéptido de la proteína que enlaza a la maltosa puede aislarse con una columna de resina amilosa, mientras que una proteína de fusión que comprende el extremo C terminal de un gen A de la proteína trunca puede purificarse usando IgG-Sefarosa. Las técnicas establecidas para expresar a un polipéptido eterólogo como una proteína de fusión en una célula bacteriana se describen por ejemplo, por Williams et al ., "Expression of Foreign Proteins in E. coli Using Plasmid Vectors and Purification of Specific Polyclonal Antibodies," en DNA Cloning 2: A Practical Approach, 2da edición, Glover y Hames (Eds.), páginas 15-58 (Oxford University Press 1995). Además, se encuentran disponibles comercialmente los sistemas de expresión. Por ejemplo, el sistema de purificación de la proteina Xa PINPOINT Xa (Promega Corporation; Madison, WI) proporciona un método para aislar a una proteína de fusión que comprende un polipéptido que se biotinila durante la expresión con una resina que comprende avidina. Las etiquetas del péptido que son útiles para aislar polipéptidos heterólogos expresados ya sea en células procarióticas o eucarióticas incluyen etiquetas de polihistidina (que tienen una afinidad para la resina níquel-quelato) , etiquetas c-myc, proteína que enlazan calmodulin (aisladas con cromatografía de afinidad de calmodulin) , sustancia P, etiqueta RYIRS (que se ligan con los anticuerpos anti-RYIRS) , la etiqueta Glu-Glu y la etiqueta FLAG (que se enlaza con los anticuerpos anti-FLAG) . Ver por ejemplo, Luo et al., Arch. Biochem. Biophys. 329:215 (1996), Morganti et al., Biotechnol. Appl. Biochem. 23:67 (1996), y Zheng et al., Gene 186:55 (1997) . Las moléculas de ácidos nucleicos que codifican tales etiquetas de péptido están disponibles por ejemplo, de Sigma-Aldrich Corporation (St. Louis, MO) . Otra forma de proteínas de fusión comprenden un polipéptido IL-22RA y una región constante de cadena pesada de inmunoglobulina, típicamente un fragmento Fc, que contiene dos o tres dominios de región constante y una región de eje pero que carece de una región variable. Como una ilustración, Chang et al., Patente americana No. 5,723, 125, describe una proteína de fusión que comprende un interferón humano y una inmunoglobulina humana. El término C del interferón se liga al N terminal del fragmento Fc mediante una porción ligadora del péptido. Un ejemplo de un ligador del péptido es un péptido que comprende principalmente una secuencia inerte de una célula T que es inmunológicamente inerte. Un ligador de péptido ejemplar tiene una secuencia de aminoácidos: GGSGG SGGGG SGGGG S (SEQ ID NO: 9) . En esta proteína de fusión, una porción Fc ilustrativa es una cadena ?4 humana que es estable en la solución y tiene poca o ninguna actividad para activar al complemento. Por consiguiente, la presente invención contempla una proteína de fusión IL-22RA que comprende una porción IL-22RA y un fragmento Fc humano, en donde el término C de la porción IL-22RA se une al término N del fragmento Fc vía un ligador del péptido tal como un péptido que comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: . La porción IL-22RA puede ser una molécula IL-22RA o un fragmento de la misma. Por ejemplo, una proteína de fusión puede comprender los aminoácidos de la SEQ ID NO:3 y un fragmento Fe (por ejemplo, un fragmento Fe humano) (SEQ ID NO: 4) . En otra variación, una proteína de fusión IL-22RA comprende una secuencia IgG, una porción IL-22RA unida covalentemente al extremo aminoterminal de la secuencia IgG, y un péptido de señal que se une covalentemente al aminoterminal de la porción IL-22RA, en donde la secuencia IgG consiste de los siguientes elementos en el siguiente orden: una región de eje, un dominio CH2 y un dominio C¾ . Por consiguiente, la secuencia IgG carece de un dominio CHa. La porción IL-22RA muestra una actividad IL-22RA descrita en la presente, con capacidad para enlazarse con un ligando IL-22RA. La metodología general para producir las proteínas de fusión que comprenden ambas porciones con anticuerpos y sin anticuerpos se han descrito por LaRochelle et al., EP 742830 ( O 95/21258) . Las proteínas de fusión que comprenden una porción IL-22RA y una porción Fe pueden usarse por ejemplo, como en las herramientas del ensayo in vitro. Por ejemplo, la presencia de un ligando IL-22RA en una muestra biológica puede detectarse usando una proteína de fusión con la inmunoglobulina IL-22RA, en la cual se usa una porción IL-22RA para enlazar al ligando y una macromolécula, tal como una proteína A o un anticuerpo anti-Fc que se usa para enlazar a la proteína de fusión a un soporte sólido. Tales sistemas pueden usarse para identificar agonistas y antagonistas que interfieren con el enlace de los ligandos IL-22RA, por ejemplo, IL-22 o ambos IL-20 e IL-22, o sus receptores . Otros ejemplos de proteínas de fusión del anticuerpo incluyen polipéptidos que comprenden un dominio que enlaza al antígeno y un fragmento IL-22RA que contiene un dominio extracelular IL-22RA. Tales moléculas pueden usarse para dirigir los tejidos particulares para beneficiar la actividad que enlaza a IL-22RA. La presente invención proporciona además una variedad de otras fusiones de polipéptidos. Por ejemplo, parte o todos los dominios que confieren una función biológica pueden cambiarse entre IL-22RA de la presente invención con los dominios funcionalmente equivalentes de otro miembro de la familia del receptor de la citocina. Las fusiones del polipéptido pueden ser expresadas en células hospederoas recombinantes para producir una variedad de análogos de fusión IL-22RA. Un polipéptido IL-22RA puede fusionarse a dos o más porciones o dominios tales como una etiqueta de afinidad para la purificación y un dominio de direccionamiento. Las fusiones del polipéptido pueden comprender también uno o más sitios de desdoblamiento, particularmente entre los dominios. Ver por ejemplo, Tuan et al., Connective Tissue Research 34:1 (1996). Las proteínas de fusión pueden prepararse mediante métodos conocidos por aquellos expertos en el arte preparando cada componente de la proteína de fusión y conjugándolos químicamente. Alternativamente, un polipéptido que codifica a ambos componentes de la proteína de fusión en la estructura de lectura apropiada puede ser generado usando técnicas conocidas y expresadas mediante los métodos descritos en la presente. Los métodos generales para el desdoblamiento enzimático y químico de las proteínas de fusión se describen por ejemplo por Ausubel (1995) en las páginas 16-19 a 16-25. Los dominios . que enlazan IL-22RA pueden ser caracterizados adicionalmente mediante un análisis físico de la estructura, determinada mediante tales técnicas como las de resonancia magnética nuclear, cristalografía, difracción por electrones o etiquetación de fotoafinidad, junto con una mutación de aminoácidos en el sitio de contacto putativa de los agonistas del ligando IL-22RA. Ver por ejemplo, de Vos et al., Science 255:306 (1992), Smith et al., J. Mol. Biol. 224:899 (1992), y Wlodaver et al., FEBSLett . 309:59 (1992). La presente invención contempla también composiciones IL-22RA químicamente modificadas en las que el polipéptido IL-22RA se liga con un polímero. Los polipéptidos IL-22RA ilustrativos son polipéptidos solubles que carecen de un dominio de transmembrana funcional tal como un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss de la SEQ ID NO: 3. Típicamente, el polímero es soluble en agua de manera que el conjugado IL-22RA no precipite en un ambiente acuoso tal como un ambiente fisiológico. Un ejemplo de un polímero adecuado es uno que ha sido modificado para tener un grupo reactivo simple tal como un éster activo para la acilación o un aldehido para la alquilación. En esta forma, el grado de polimerización puede controlarse. Un ejemplo de un aldehido reactivo es un polietilen glicol propionaldehído, o mono- (Cl-CIO) alcoxi, o derivados de ariloxi de los mismos (ver por ejemplo, Harris, et al., Patente americana No. 5,252,714). El polímero puede ser ramificado o no ramificado. Por otra parte, una mezcla de polímeros puede usarse para producir conjugados IL-22RA. Los conjugados IL-22RA usados para la terapia pueden comprender porciones de polímeros solubles en agua farmacéuticamente aceptables . Los polímeros solubles en agua adecuados incluyen polietilen glicol (pEG) , mono- (C1-C10) alcoxi-PEG, ariloxi-PEG, poli- (N-vinil pirrolidona) EG, tresil monometoxi PEG, PEG propionaldehído, bis-succinimidil carbonato PEG, homopolimeros de propilen glicol, un co-polímero de polipropileno oxido/ethilen óxido, polioles polioxietilados (por ejemplo, glicerol) , polivinil alcohol, dextran, celulosa u otros polímeros basados en carbohidratos . El PEG adecuado puede tener un peso molecular de alrededor de 600 hasta alrededor de 60,000, que incluye por ejemplo, 5,000, 12,000, 20,000 y 25,000. Un conjugado IL-22RA puede también comprender una mezcla de tales polímeros solubles en agua.

Un ejemplo de un conjugado IL-22RA comprende una porción IL-22RA y una porción de polialquil óxido unidas al N término de la porción IL-22RA. El PEG es un polialquil óxido adecuado. Como una ilustración, la IL-22RA puede modificarse con PEG, un proceso conocido como "PEGilación" . La PEGilación de IL-22RA puede llevarse a cabo mediante cualquiera de las reacciones de PEGilación conocidas en el arte (ver por ejemplo, EP 0 154 316, Delgado et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 9:249 (1992), Duncan y Spreafico, Clin. Pharacokinet . 27:290 (1994), y Francis et al., Int J Hematol 68:1 (1998)). Por ejemplo, la PEGilación puede realizarse mediante una reacción de acilación o mediante una reacción de alquilación con una molécula de polietilen glicol reactiva. En una metodología alternativa, los conjugados IL-22 A se forman mediante la condensación del PEG activado en el cual un grupo amino o hidroxi terminal de PEG ha sido reemplazado por un ligador activado (ver por ejemplo, arasiewicz et al., Patente americana No. 5,382, 657) . La Pegilación mediante la acilación requiere típicamente hacer reaccionar un derivado del éster activo de PEG con un polipéptido IL-22RA. Un ejemplo de un éster PEG activado es un PEG esterificado a la N-hidroxisuccinimida. Como se usa en la presente, el término "acilación" incluye los siguientes tipos de enlaces entre IL-22RA y un polímero soluble en agua: amida, carbamato, uretano y similares. Los métodos para preparar IL- 22RA PEGilatado mediante acilación comprenderá típicamente las etapas de (a) hacer reaccionar un polipéptido IL-22RA con PEG (tal como un éster reactivo de un derivado de aldehido de PEG) bajo condiciones en las cuales uno o más grupos PEG se unen a IL-22RA, y (b) obtener los productos de la reacción. Generalmente, las condiciones de reacción óptimas para los residuos de acilación se determinarán en base a los parámetros conocidos y los resultados deseados. Por ejemplo, la proporción más grande de PEG:IL-22RA, el porcentaje más grande del producto IL-22RA poliPEgilado. El producto de PEGilación mediante acilación es típicamente un producto IL-22RA pegilado, en donde los grupos e-amino lisina son Pegilados vía un grupo que enlaza al acilo. Un ejemplo de una ligadura de conexión es una amida. Típicamente, la IL-22RA resultante será de al menos 95% mono-, di-, o tripegilada, a pesar de que algunas especies con altos grados de PEGilación pueden formarse dependiendo de las condiciones de reacción. Las especies PEGiladas pueden separarse a partir de polipéptidos IL-22RA no conjugados usando métodos de purificación estándar tales como diálisis, ultrafiltración cromatografía de intercambio de ión, cromatografía de afinidad y similares. La PEGilación mediante alquilación involucra generalmente un derivado de un aldehido terminal de PEG con IL-22RA en presencia de un agente de reducción. Los grupos PEG pueden unirse al polipéptido vía un grupo -C¾- H. Por otra parte, los anticuerpos anti-IL-22RA o fragmentos del anticuerpo de la presente invención pueden ser PEGilados usando métodos en el arte y descritos en la presente. La derivación vía una alguilación reductiva para producir un producto monoPEGilado tiene la ventaja de que posee una reactividad diferencial o de diferentes tipos de grupos amino principales disponibles para la derivación. Típicamente, la reacción se realiza a un pH que permite tomar ventaja de las diferencias del pKA entre los grupos e-amino de los residuos de lisina y el grupo cx-amino del residuo N-terminal de la proteína. Mediante tal derivación selectiva, se controla la unión de un polímero soluble en agua que contiene un grupo reactivo tal como un aldehido a una proteína. La conjugación con el polímero ocurre predominantemente en el término N de la proteína sin una modificación significativa de otros grupos reactivos tales como los grupos amino de cadena lateral de lisina. La presente invención proporciona una preparación sustancialmente homogénea de los conjugados del monopolímero IL-22RA. La alquilación reductiva para producir una población sustancialmente homogénea de una molécula de conjugado IL-22RA y monopolímero puede comprender las etapas de: (a) hacer reaccionar un polipéptido IL-22RA con un PEG reactivo bajo las condiciones de alquilación en el pH adecuado para permitir una modificación selectiva del grupo a-amino en el término amino de IL-22RA, y (b) obtener los productos de la reacción. El agente de reducción usado para la alquilación reductiva debe ser estable en una solución acuosa y capaz de reducir solo la base Schiff en el proceso inicial de la alquilación reductiva. Agentes de reducción ilustrativos incluyen borohidruro de sodio, cianoborohidruro de sodio, dimetilamino borano, trimetil borano y piridina borano. Para una población sustancialmente homogénea de conjugados del monopolimero de IL-22RA, las condiciones de reacción de alquilación reductivas son aquellas que permiten la unión selectiva de la porción del polímero soluble en agua al Término N de IL-22RA. Tales condiciones de reacción proporcionan generalmente las diferencias de pKa entre los grupos amino lisina y el grupo a-amino en el término N. El pH afecta también la relación del polímero entre la proteína que va a ser usada. En general, si el pH es bajo, se deseará un gran exceso de polímeros en la proteína debido a que es menos reactiva que el grupo N-terminal, el y la mayoría de los polímeros se necesitan para obtener las condiciones óptimas. Si el pH es superior, el polímero: IL-22RA no necesita ser grande debido a que la mayoría de los grupos reactivos están disponibles. Típicamente, el pH caerá dentro del intervalo de 3 a 9 , ó de 3 a 6. Este método puede ser empleado para elaborar conjugados del receptor solubles homodiméricos, heterodiméricos o multiméricos que comprenden IL-22RA. Otro factor a considerar es el peso molecular del polímero soluble en agua. Generalmente, entre mayor el peso molecular del polímero menor el número de moléculas del polímero que se puedan unir a la proteína. Para las reacciones de PEGilación, el peso molecular típico es de alrededor de 2kDa hasta alrededor de 100 kDa, alrededor de 5 kDa hasta alrededor de 50 kDa, o alrededor de 12 kDa hasta el rededor de 25 kDa. La relación molar del polímero soluble en agua para IL-22RA estará generalmente en el intervalo de 1:1 a 100:1. Típicamente, la relación molar del polímero soluble en agua para IL-22RA será de 1:1 a 20:1 para la poliPEGilación y de 1:1 a 5.1 para la monoPEGilación. Los métodos generales para la producción de conjugados comprenden un polipeptido y porciones de polímeros solubles en agua que se conocen en el arte, ver por ejemplo, Karasiewicz et al., patente de E.U.A. No. 5,382,657, Greenwald et al., patente de E.U.A. No. 5,738,846, Nieforth et al., Clin Pharmacol. Ther. 59:636 (1996), Monkarsh et al., Anal. Biochem. 247:434 (1997)). Este método se puede emplear para elaborar conjugados del receptor soluble multiméricos o heterodiméricos, homodiméricos , que comprenden IL-22RA. La presente invención contempla composiciones que comprenden un péptido o polipeptido tal como un receptor soluble o anticuerpo aquí descrito. Tales composiciones pueden lio comprender además ion portador. El portador puede ser un portador orgánico o inorgánico convencional. Los ejemplos de los portadores incluyen agua, solución amortiguadora, alcohol, propilen glicol, macrogol, aceite de ajonjolí, aceite de maíz, y similares . 7. Aislamiento de los Polipéptidos IL-22RA Los polipéptidos de la presente invención se pueden purificar hasta al menos alrededor de 80% de pureza, hasta al menos alrededor de 90% de pureza, hasta al menos alrededor de 95% de pureza o más de 95% tal como 96%, 97%, 98%, o mayor de 99% de pureza con respecto a las macro moléculas, contaminantes , particularmente otras proteínas y ácidos nucleicos y libres de agentes infecciosos y pirogénicos . Los polipéptidos de la presente invención también se pueden purificar hasta un estado farmacéuticamente puro que sea mayor de 99.9% puro. En ciertas preparaciones, el polipéptido purificado está substancialmente libre de otros polipéptidos particularmente otros polipéptidos de origen animal. El fraccionamiento y/o métodos de purificación convencionales se pueden usar para obtener preparación de IL-22RA purificado de fuentes naturales (por ejemplo, fuentes de tejido humano), polipéptidos sintéticos IL-22RA y polipéptidos recombinantes IL-22RA y polipéptidos de fusión IL-22RA purificados a partir de células hospederoas recombinantes . En general, la precipitación con sulfato de amonio y la extracción con ácido o caotropo se puede usar para el fraccionamiento de muestras. Las etapas de purificación ejemplares pueden incluir hidroxiapatita, exclusión de tamaño, FPLC y cromatografía líquida de alto desempeño de base inversa. Tales medios cromatográficos incluyen dextranos derivados, agarosa, celulosa, poliacrilamida, sílices de especialidades, y similares. Los derivados PEI, DEAE, QAE y Q son adecuados . Los medios cromatográficos ejemplares incluyen aquellos medios derivados con los grupos fenilo, butilo, u octilo tales como Fenil-Sefarosa FF (Phamacia) , Toyopearl butilo 650 (Toso Haas, Montgomeryville, PA) , Octil-Sefarosa (Pharmacia) y similares por resinas poliacrílicas tales como Amberchrom CG 71 (Toso Haas) y similares. Los soportes sólidos adecuados incluyen perlas de vidrio, resinas basadas en sílice, resinas celulósicas, perlas de agarosa, perlas de agarosa reticuladas, perlas de poliestireno, resinas de poliacrilamida reticuladas y similares que son insolubles bajo las condiciones en las cuales se va a usar. Estos soportes se pueden modificar con grupos reactivos que permitan la unión de proteínas por grupos amino, grupos carboxilo, grupos sulfhidrilo, grupos hidroxilo, y/o porciones de carbohidrato.

Los ejemplos de las químicas de acoplamiento incluyen activación con bromuro de cianógeno, activación con N-hidroxisuccinimida, activación con epóxido, activación con sulfhidrilo, activación con hidrazida, y derivados de carboxilo y de amino para químicas de acoplamiento con carbodiimida. Estos y otros medios sólidos son bien conocidos y ampliamente utilizados en la técnica y están disponibles de proveedores comerciales . La selección de un método particular para el aislamiento y purificación de polipéptidos es una materia de diseño de rutina y se determina en parte por las propiedades de soporte elegido. Ver por ejemplo Affinity C romatograp y: Principies & Methods (Pharmacia L B Biotechnology 1988) , y Doonan, Protein Purification Protocols (The Humana Press 1996) . Las variaciones adicionales en el aislamiento y purificación de IL-22RA se pueden vislumbrar por aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo, los anticuerpos IL-22RA obtenidos como se describen a continuación, se pueden utilizar para aislar grandes cantidades de proteina por purificación de inmunoafinidad. Los polipéptidos de la presente invención también se pueden aislar por explotación de las propiedades particulares . Por ejemplo, se puede usar cromatografía de adsorción, de iones de metal inmovilizados (IMAC) para purificar proteínas ricas en histidina, incluyendo aquellas que comprenden etiqueta de polihistidina. Brevemente, se carga primero un gen con iones de metal bivalentes para formar un quelato (Sulkowski, Trends in Biochem. 3:1 (1985)). Las proteínas ricas en histidina se adsorberán con esta matriz con afinidades diferentes dependiendo del ion de metal usado, y serán eluidas por elución competitiva disminuyendo el pH o el uso de agentes fuertes de quelación. Otros métodos de purificación incluyen purificación de las proteínas glicosiladas por cromatografía de afinidad de lectina y cromatografía de intercambio de iones (M. Deutscher, (ed.), Meth. Enzymol. 182:259 (1990)). Dentro de las modalidades adicionales de la invención, se puede construir una fusión del polipéptido de interés y una etiqueta de afinidad (por ejemplo, proteína de enlace a maltosa y dominio de inmunoglobulina) para facilitar la purificación. Por otro lado, las proteínas de enlace a ligando del dominio extracelular IL-22RA se pueden explotar para purificación, por ejemplo, de los receptores solubles que comprenden IL-22RA por ejemplo al utilizar cromatografía de afinidad en donde el ligando IL-22 se enlaza una columna y el receptor que comprende IL-22RA se enlaza y se eluye posteriormente utilizando métodos de cromatografía estándar. Los polipéptidos IL-22RA o fragmentos de los mismos también se pueden preparar mediante síntesis química como se describe arriba. Los polipéptidos IL-22RA pueden ser monómeros o multímeros glicosilados o no glicosilados, PEGilados o no PEGilados y pueden o no incluir un residuo inicial de aminoácidos de metionina. 8. Producción de anticuerpos para las proteínas IL-22RA Se pueden obtener los anticuerpos para IL-22RA por ejemplo utilizando el producto en un vector de expresión IL-22RA o IL-22RA aislado a partir de una fuente natural como un antígeno. Los anticuerpos particularmente útiles IL-22RA "de enlace específicos" con IL-22RA. Los anticuerpos se consideran que se enlazan específicamente si los anticuerpos muestran al menos una de las siguientes dos propiedades: (1) anticuerpos que se enlazan a IL-22RA con un nivel de umbral de actividad de enlace y (2) anticuerpos que no reaccionan de forma cruzada significativamente con los polipéptidos relacionados a IL-22RA. Con respecto a la primera característica, los anticuerpos se enlazan específicamente si se enlazan a un prolipéptido IL-22RA, péptido o epítopo con una afinidad de enlace de (Ka) pf 106 M" o mayor, preferiblemente, 107 M"1 o mayor más preferiblemente 108 M"1 o mayor y aún más preferiblemente 109 M" 1 o mayor. La afinidad de enlace de un anticuerpo se puede determinar fácilmente por alguien de experiencia ordinaria en la técnica por ejemplo por análisis Scatchard, (Scatchard, Ann. NY Acad. Sci . 51:660 (1949)). Con referencia a la segunda característica, los anticuerpos no reaccionan significativamente de forma cruzada con moléculas relacionadas de polipéptidos por ejemplo si detectan IL-22RA, pero no polipéptidos actualmente conocidos usando un análisis estándar de inmunotransferencia Western. Los ejemplos de los polipéptidos -relacionados conocidos incluyen receptores conocidos de citocina. Se pueden producir los anticuerpos anti-IL-22RA usando péptidos y polipéptidos que transportan epítopos de IL-22RA antigénicos . Los péptidos y polipéptidos que transportan epítopos antigénicos de la presente invención, contienen una secuencia de al menos 9 o entre 15 o hasta alrededor de 30 aminoácidos contenidos dentro de SEQ ID NO: 3 u otra secuencia de aminoácidos aquí descritas. Sin embargo, los péptidos y polipéptidos que comprenden una porción mayor de una secuencia de aminoácidos de la invención, que contienen de 30 a 50 aminoácidos o cualquier longitud hasta, e incluyendo, la secuencia completa de aminoácidos de un polipéptido de la invención, son también útiles para inducir anticuerpos que se enlacen con IL-22RA. Es deseable que la secuencia de aminoácidos del péptido que transportan epítopos se seleccionen para proporcionar una solubilidad substancial en solventes acuosos (esto es, la secuencia incluye residuos relativamente hidrofílieos mientras que los residuos hidrofóbicos se evitan típicamente) . Por otro lado, la secuencia de aminoácidos que contienen residuos de prolina puede también ser deseable para producción de anticuerpos. Como una ilustración, los sitios antigénicos potenciales en IL-22RA se identificaron utilizando el método de Jameson- Wolf, Jameson y Wolf, CABIOS 4:181, (1988), como se implementa por el programa PROTEAN (versión 3.14) de LASERGENE (DINASTAR; Madison, I) , se utilizaron los parámetros en este análisis. El método Jameson-Wolf predice las determinantes antigénicas potenciales al combinar seis subrutinas principales para la predicción estructural de proteína. Brevemente, el método Hopp-Woods, Hopp et al., Proc. Nat'l Acad Sci. USA 78:3824 (1981), se utilizó 'primero para identificar secuencias de aminoácidos que representan áreas de la mayor hidrofilicidad local (parámetro: siete residuos promediados) . En la segunda etapa, el método de Emini, Emini et al., J. Virology 55:836 (1985), se usó para calcular las probabilidades de superficie (umbral de decisión de superficie del parámetro (0.6) = 1). Tercero, el método Karplus-Schultz , Karplus y Schultz, Naturwissenschaften 72:212 (1985), se utilizó para predecir la flexibilidad de la cadena de estructura (parámetro: umbral de flexibilidad (0.2)=1). En la cuarta y quinta etapa del análisis, se aplicaron predicciones de estructura secundarias a los datos usando los métodos de Chou-Fasman, Chou, "Prediction of Protein Structural Classes from Amino Acid Composition, " in Prediction of Protein Structure and the Principies of Protein Conformation, Fasman (ed.), páginas 549-586 (Plenum Press 1990), y Garnier-Robson, Garnier et al., Mol. Biol. 120:97 (1978) (parámetros Chou-Fasman: tabla de conformación = 54 proteínas; umbral de la región a = 103; umbral región ß = 105; parámetros de Garnier Robson: constantes de decisión y ß = 0) . En la sexta subrutina, se combinaron los parámetros de flexibilidad y los factores de accesibilidad de solvente/hidropatía para determinar un volumen de contorno de superficie designado como el índice antigénico. Finalmente, una función de amplitud de pico se aplicó al índice antigénico, lo cual amplía los picos principales de superficie al agregar 20, 40, 60, ó 80% del valor respectivo del pico para contar por la energía libre adicional derivada de la movilidad de las reacciones de superficie con relación a las regiones interiores. Sin embargo este cálculo no se aplicó a ningún pico importante que resida en una región de hélice, ya que las regiones de hélice tienden a ser menos flexibles . Los resultados de este análisis indicaron que las siguientes frecuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 3 proporcionarían péptidos antigénicos adecuados : se pueden usar los perfiles de hidrofilicidad de Hopp/Woods para determinar regiones que tengan el mayor potencial antigénico dentro de SEQ ID NO:3 (Hopp et al., Proc . Nati. Acad. Sci. 78:3824-3828, 1981; Hopp, J. Immun. eth. 8_8:1-18, 1986 y Triquier et al., Protein Engineering 11:153-169, 1998) . El perfil se basa en una ventana deslizante de seis residuos. Los residuos ocultos G, S, y T y los residuos expuestos H, Y, y W se ignoraron. Por otro lado, los epitopos antigénicos IL-22RA de dentro de SEQ ID NO: 3 como se predicen por gráfica de Jameson- olf, por ejemplo, usando el programa DNASTA (DNASTAR, Inc., adison, I) sirven como epitopos antigénicos preferidos y se pueden determinar por alguien experto en la técnica. Tales epitopos antigénicos incluyen (1) residuos de aminoácidoss 1 (Pro) a 6 (Asp) de SEQ ID N0:3; (2) residuos de aminoácidoss 26 (Ser) a 32 (Pro) de SEQ ID NO: 3; (3) residuos de aminoácidoss 41 (Lys) a 47 (Asp) de SEQ ID NO: 3; (4) residuos de aminoácidoss 49 (Val) a 62 (Cys) de SEQ ID NO: 3; (5) residuos de aminoácidoss 41 (Lys) a 62 (Cys) de SEQ ID NO:3; (6) residuos de aminoácidoss 84 (Ala) a 97 (Ser) de SEQ ID NO: 3; (7) residuos de aminoácidoss 103 (Thr) a 108 (asp) de SEQ ID NO: 3; (8) residuos de aminoácidoss 130 (Arg) a 135 (His) de SEQ ID NO: 3; (9) residuos de aminoácidoss 164 (Gly) a 166 de SEQ ID NO: 3; (10) residuos de aminoácidoss 175 (Tyr) a 179 (Glu) de SEQ ID NO: 3; (11) residuos de aminoácidoss 193 (Lys) a 196 (Ala) de SEQ ID NO: 3; (12) residuos de aminoácidoss 203 (Lys) a 209 (Thr) de SEQ ID NO: 3. La presente invención contempla el uso de cualquiera de los péptidos antigénicos 1 al 12 para generar anticuerpos para IL-22RA o como una herramienta para separar por exclusión o identificar anticuerpos monoclonales neutralizantes de la presente invención. La presente invención también contempla polipéptidos que comprenden al menos 1 a 10. La presente invención contempla el uso de algunos péptidos o epítopos antigénicos, aquí descritos para generar los anticuerpos para IL-22R, así como para identificar y separar por explución anticuerpos monoclonales anti-IL-22RA que sean neutralizantes y que puedan enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar, o neutralizar la actividad de IL-22 y IL-22 (individualmente o en conjunto) . Por otro lado, los antigenos adecuados también incluyen los polipéptidos IL-22RA que comprenden un enlace de citocinas IL-22RA o el dominio extracelular antes descrito en combinación con otro dominio extracelular de la citocina de clase I ó II tal como aquellos que forman los polipéptidos multiméricos o heterodiméricos IL-22RA solubles tales como IL-22RA/CRF2-4, IL-22RA/zcytorll, IL-22RA/zcytor, y similares. Los anticuerpos policlonales para la proteína recombinante IL-22RA o para el IL-22RA aislado de fuentes naturales se pueden preparar utilizando los métodos bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Ver por ejemplo, Green et al., "Production of Polyclonal Antisera," en Immunochemical Protocols ( anson, ed.), páginas 1-5 (Humana Press 1992), y Williams et al., "Expression of foreign proteins in E. coli using plasmid vectors y purification of specific polyclonal antibodies," en DNA Cloning 2: Expression Systems, 2nd Edition, Glover et al. (eds.) página 15 (Oxford University Press 1995) . La inmunogenicidad de polipéptido IL-22RA se puede incrementar mediante el uso de un adyuvante tal como alumbre (hidróxido de aluminio) o adyuvante completo o incompleto de Freund. Los polipéptidos útiles para la inmunización también incluyen polipéptidos de fusión tales como las fusiones de IL-22RA o una porción de los mismos con un polipéptido de inmunoglubulina o con una proteína de enlace a maltosa. El inmunógeno de polipéptido puede ser una molécula de longitud completa o una porción de la misma. Si la porción de polipéptido es de tipo de hapteno, tal porción se puede unir o ligar venta osamente a un portador macromolecular (tal como una hemocianina de una variedad de lapa (KLH) , albúmina de suero de bovino (BSA) , o toxoide tetánico) para inmunización. Aunque los anticuerpos policlonales se formulan típicamente en animales tales como caballos, vacas, perros, pollos, ratas, ratones, conejos, conejillos de indias, cabras u ovejas, un anticuerpo anti-IL-22RA de la presente invención también se puede derivar de un anticuerpo de un primate subhumano. Las técnicas generales para formular de forma diagnóstica y terapéutica anticuerpos útiles en mandriles se pueden encontrar por ejemplo en Goldenberg et al., solicitud de patente internacional No. O 91/11465, y en Losman et al., Int. J. Cáncer 46:310 (1990) . Alternativamente, los anticuerpos monoclonales anti-IL-22 A se pueden generar. Los anticuerpos monoclonales de roedor para antígenos específicos se pueden obtener por métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica (ver por ejemplo, Kohler et al., Nature 256:495 (1975), Coligan et al. (eds) Current Protocols in Immunology, Vol. 1, Páginas 2.5-2.6.7 (John iley & Sons 1991) ["Coligan"], Picksley et al., "Production of monoclonal antibodies against proteins express in E. coli," in DNA Cloning 2: Expression Systems, 2nd Edition, Glover et al. (eds.), página 93 (Oxford University Press 1995) ) . Brevemente, los anticuerpos monoclonales se pueden obtener al inyectar ratones con una composición que comprende un producto de genes IL-22RA, verificando la presencia de la producción de anticuerpos al retirar una muestra de suero, retirando el bazo para obtener linfocitos B, fusionando los linfocitos B con células de mieloma para producir hibridomas, clonando los hibridomas, seleccionando clones positivos que produzcan anticuerpos para el antigeno, cultivando los clones que producen anticuerpos al antlgeno y aislando los anticuerpos de los cultivos de hibridoma. Además, un anticuerpo anti-IL22RA de la presente invención se puede derivar de un anticuerpo monoclonal humano. Los anticuerpos monoclonales humanos se obtienen de ratones transgénicos que se han preparado por ingeniería para producir anticuerpos humanos específicos en respuesta a la prueba inmunogénica antigénica. En esta técnica, los elementos del lugar de cadena pesada y ligera humana se introducen en cepas de ratones derivados de las líneas celulares madre embriónicas que contienen las disrupciones dirigidas de los lugares de cadena ligera y de cadena pesada endógenos . Los ratones transgénicos pueden sintetizar anticuerpos humanos específicos para los antígenos humanos, y se pueden usar los ratones para producir hibridomas que secretan anticuerpos humanos. Los métodos para obtención de anticuerpos humanos a partir de ratones transgénicos se describen por ejemplo, por Green et al., Nature Genet . 7:13 (1994), Lonberg et al., Nature 368:856 (1994), y Taylor et al., Int. Immun. 6:579 (1994). Se pueden aislar y purificar los anticuerpos monoclonales a partir de cultivos de hibridoma por una diversidad de técnicas bien establecidas . Tales técnicas de aislamiento incluyen cromatografía de afinidad con una proteína de A sefarosa, cromatografía por exclusión de tamaño, y cromatografía por intercambio de iones (ver por ejemplo, Coligan en la paginas 2.7.1-2.7.12 y en las paginas 2.9.1-2.9.3; Baines et al., "Purification of Immunoglobulin G (IgG)," in Methods in Molecular Biology, Vol. 10, paginas 79-104 (The Humana Press, Inc. 1992)). Para los usos particulares, puede ser deseable preparar fragmentos de anticuerpos anti-IL-22RA. Se pueden obtener tales fragmentos de anticuerpos por ejemplo por la hidrólisis proteolítica del anticuerpo. Se pueden obtener los fragmentos de anticuerpos con digestión con pepsina o papaina de los anticuerpos enteros por métodos convencionales . Como una ilustración, se pueden producir fragmentos de anticuerpos por el desdoblamiento enzimático de anticuerpos con pepsina para proporcionar un fragmento 5S designado F(ab' )2- Este fragmento se puede además desdoblar usando un agente reducto de tiol para producir fragmentos monovalentes de 3.5S Fab' . Opcionalmente, se puede ejecutar la reacción de desdoblamiento usando un grupo de bloqueo para los grupos sulfhidrilos que resultan del desdoblamiento de ligaduras de bisulfuro. Como una alternativa, un desdoblamiento enzimático que utiliza pepsina produce 2 fragmentos monovalentes Fab y un fragmento Fe directamente. Estos métodos se describen por ejemplo por Goldenberg, Patente de EUA No. 4,331,647, Nisonoff et al., Aren Biochem. Biophys. 89:230 (1960), Porter, Biochem. J. 73:119 (1959), Edelman et al., in Methods in Enzymology Vol. 1, pagina 422 (Academic Press 1967) , y por Coligan en las pagiinas 2.8.1-2.8.10 y 2.10.4. Otros métodos de desdoblamiento de anticuerpos tales como la separación de cadenas pesadas para formar fragmentos monovalentes de cadena pesada y ligera, desdoblamiento adicional de fragmentos u otras técnicas enzimáticas químicas o genéticas también se pueden usar, con tal de que los fragmentos se enlacen al antígeno que se reconoce por el anticuerpo intacto. Por ejemplo, los fragmentos Fv comprenden una asociación de las cadenas VH y VL. Esta asociación puede ser no covalente, como se describe por Invar. Et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 69:2659 (1972) . Alternativamente, se pueden ligar las cadenas variables por un enlace bisulfuro intermolecular o reticularse por productos químicos tales como glutaraldehído (ver, por ejemplo, Sandhu, Crit. Rev. Biotech. 12:437 (1992)). Los fragmentos Fv pueden comprender cadenas VH y VL que se conectan por una ligadura de péptidos . Estas proteínas de enlace de antígenos de cadena sencilla (scFv) se preparan al construir un gen estructural que comprende secuencias de ADN que codifican los dominios VH y VL que se conectan por un oligonucleótido . Se inserta el gen estructural en un vector de expresión que se introduce posteriormente en una célula hospederoa tal como E. coli. Las células hospederoas recombinantes sintetizan una cadena sencilla de polipéptidos con un péptido ligador que hace el puente con los 2 dominios V. Se describen los métodos para producción scFvs por ejemplo por Whitlow et al . , Methods : A Companion to Methods in Enzymology 2:97 (1991) (ver también, Bird et al., Science 242:423 (19988), Ladner et al., Patente de EUA No. 4,946,778, Pack et al., Bio/Technology 11:1271 (1993), y Sandhu, supra) .

Como una ilustración, se puede obtener un scFV al exponer los linfocitos al polipéptido IL-22RA in vitro, y seleccionar colecciones de despliegue de anticuerpos en fagos o en vectores similares (por ejemplo, mediante el uso de una proteína IL-22RA etiquetada o inmovilizada o péptidos) . Los genes que codifican los polipéptidos que tienen dominios de enlace del polipéptido IL-22RA potenciales se pueden obtener por la selección de colecciones de péptidos aleatorias desplegadas en fagos (despliegue de fagos) o en bacterias, tales como E. coli . Se pueden obtener secuencias de nucleótidos que codifiquen los polipéptidos de diversas maneras, tal como mediante la mutagénesis aleatoria y la síntesis de polinucleótido aleatorio. Estas colecciones de despliegue de péptidos aleatorias se pueden usar para separar por exclusión péptidos que interactúen con un objetivo conocido que puede ser una protexna o polipéptido tal como un ligando o un receptor, una macromolécula biológica o sintética o substancias orgánicas o inorgánicas . Las técnicas para la creación y separación por exclusión de tales colecciones de despliegue de péptidos aleatorias se conocen en el arte (Ladner et al., Patente de EUA No. 5,403,484, Ladner et al., Patente de EUA No. 5,571,698 y Kay et al., Phage Display of Peptides and Proteins (Academic Press, Inc. 1996)), y las colecciones y kits de despliegue de péptidos aleatorios para seleccionar tales colecciones está disponible comercialmente por ejemplo de CLONTECH Laboratories, Inc. (Palo Alto, CA) , Invitrogen Inc. (San Diego, CA) , New England Biolabs, Inc (Beverly, MA) , and Pharmacia LKB Biotechnology Inc. (Piscataway, NJ) . Las colecciones de despliegue de péptidos aleatorias se pueden seleccionar usando las secuencias IL-22RA aquí descritas para identificar las proteínas que se enlazan a IL-22RA. Otra forma de un fragmento de anticuerpos es un péptido que codifica una sola región determinante de la complementariedad (CDR) . Los péptidos CDR (unidades mínimas de reconocimiento) se pueden obtener al construir genes que codifiquen el CDR de un anticuerpo de interés . Tales genes se preparan por ejemplo al usar la reacción en cadena de polimerasa para sintetizar la región variable del AR de células que producen anticuerpos (ver por ejemplo, Larrick et al., Methods: A Companion to Methods in Enzymology 2:106 (1991) , Courtenay-Luck "Genetic Manipulation of Monoclonal Antibodies, " , in Monoclonal Antibodies: Production, Engineering and Clinical Application, Ritter et al. (eds.), paginas 166 (Cambridge University Press 1995) , and Ward et al., "Genetic Manipulation and Expression of Antibodies," in Monoclonal Antibodies : Principies and Applications , Birch et al., (eds.) pagina 137 (Wiley-Liss, Inc. 1995)). Alternativamente, se puede derivar un anticuerpo anti-IL- 22RA a partir de un anticuerpo monoclonal humanizado. Los anticuerpos monoclonales humanizados se producen al transferir regiones determinantes de la complementariedad del ratón a partir de cadenas variables ligeras y pesadas de la inmunoglobulina de ratón en un dominio variable humano. Luego se substituyen los residuos típicos de los anticuerpos humanos en regiones de estructura de las contrapartes murinas. El uso de componentes de anticuerpos derivados · de anticuerpos monoclonales humanizados, hace obvios los problemas potenciales asociados con la inmungenicidad de las regiones constantes murinas . Las técnicas generales para clonación de dominios variables de inmunoglobulina murinos se describen por ejemplo por Orlandi et al., Proc. Nat'l Acad Sci. USA 86:3833 (1989) . Las técnicas para producción de anticuerpos monoclonales humanizados se describen por ejemplo por Jones et al., Nature 321:522 (1986), Cárter et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 89:4285 (1992), Sandhu, Crit. Rev. Biotechy. 12:437 (1992), Singer et al., J. Immun. 150:2844 (1993), Sudhir (ed.), Antibody Engineering Protocols (Humana Press, Inc. 1995), Kelley, "Engineering Therapeutic Antibodies," in Protein Engineering: Principies and Practice, Cleland et al., (eds.), paginas 399-434 (john Wiley & Sons, Inc. 1996) y por Queen et al., Patente de EU No. 5,693,762 (1997). Por otro lado, los anticuerpos anti-IL-22RA o fragmentos de anticuerpos de la presente invención se pueden pegilar usando métodos en el arte y aquí descritos . Se pueden preparar anticuerpos policlonales anti-idiotipos al inmunizar animales con anticuerpos anti-IL-22RA o fragmentos de anticuerpos utilizando técnicas estándar. Ver por ejemplo, Green et al., "Production of Polyclonal Antisera," in Methods In Molecular Biology: Inmunochemical Protocols, Manson (ed.), paginas 1-12 (Humana Press 1992). También, ver Coligan en la páginas 2.4.1-2.4.7. Alternativamente, se pueden preparar los anticuerpos monoclonales anti-idiotipos utilizando anticuerpos anti-IL-22RA o fragmentos de anticuerpos como inmunogenos con las técnicas antes descritas. Como otra alternativa, los anticuerpos humanizados anti-idiotipos o anticuerpos anti-idiotipos de primate subhumanos se pueden preparar utilizando las técnicas antes descritas. Los métodos para la producción de anticuerpos anti-idiotipos se describen por ejemplo, por Irie, Patente de EUA No. 5,208,146, Greene et al., Patente de EAU No. 5,637,677 y Varthakavi and Minocha, J. Gen. Virol. 77:1875 (1996) . Se puede conjugar un anticuerpo anti-IL-22RA con una etiqueta detectable para formar un inmunoconjugado anti-IL-22Ra. Las etiquetas detectables adecuadas incluyen por ejemplo un radioisótopo, una etiqueta fluorescente, una etiqueta quimioluminiscente, una etiqueta de enzima, una etiqueta bioluminiscente u oro coloidal. Los métodos para la elaboración y detección de tales inmunoconjugados etiquetados de forma detectable son bien conocidos por aquellos expertos ordinarios en la técnica y se describen con mayor detalle a continuación . La etiqueta detectable puede ser un radioisótopo que se detecte por autoradiografía. Los isótopos que son particularmente útiles para el propósito de la presente invención son 3H, 125I, 131i, 35S u 14C. También se pueden etiquetar inmunoconjugados anti-IL-22Ra con un, compuesto fluorescente. La presencia de una anticuerpo etiquetado fluorescentemente se determina al exponer el inmunoconjugado a la luz de una longitud de onda adecuada y detectar la fluorescencia resultante. Los compuestos de etiquetado fluorescentes incluyen isotiocianato de fluoresceina, rodamina, ficoeriteina, ficocianina, aloficonianina, o-ftaldehído, y fluorescamina. Alternativamente, se pueden etiquetar de manera detectable los inmunoconjugados anti-IL-22RA por acoplamiento de un compuesto de anticuerpos con un compuesto quimioluminiscente . La presencia de un inmunoconjugado etiquetado quimioluminiscente se determina por la detección de la presencia de luminiscencia que se eleva durante el curso de una reacción química. Los ejemplos de los compuestos de etiquetado de quimioluminiscente incluyen luminol, isoluminol, un éster aromático de acridinio, un imidazol, un acridinio y un éster de oxalato. Similarmente, se puede usar un compuesto bioluminiscente para etiquetar inmunoconjugados anti-IL-22RA de la presente invención. La bioluminiscencia es un tipo de quimioluminiscencia que se encuentra en sistemas biológicos en los cuales una protelna catalítica incrementa la eficiencia de la reacción quimioluminiscente . La presencia de una proteína bioluminiscente se determina al detectar la presencia de bioluminiscencia. Los compuestos bioluminiscentes que son útiles para etiquetado incluyen luciferina, luciferasa, o acuorina. Alternativamente, los inmunoconjugados de anti-lL-22RA se pueden etiquetar de forma detectable por la ligadura de un anticuerpo anti-IL-22RA componente de una enzima. Cuando el conjugado anti-IL-22RA-enzima se incuba en presencia de un substrato adecuado, la porción de la enzima reacciona con el substrato para producir una porción química que se puede detectar por ejemplo por medios espectrofotométricos , fluorométrieos o visuales. Los ejemplos de las enzimas que se pueden usar para etiquetar de forma detectable los inmunoconjugados poliespecíficos incluyen ß-galactosidasa, glucosa oxidasa, peroxidasa y fosfatasa alcalina. Aquellos de experiencia en la técnica sabrán de otras etiquetas adecuadas que se pueden emplear de acuerdo con la presente invención. El enlace de las porciones de marcador a los anticuerpos anti-IL-22RA se puede lograr usando técnicas estándar conocidas en el arte. La metodología típica a este respecto se describe por Kennedy et al., Clin. Chim. Acta 70:1 (1976), Schurs et al., Clin, Chim. Acta 81:1 (1977), Shih et al., Int'l J. Cáncer 46:1101 (1930), Stein et al., Cáncer Res. 50:1330 (1990) y Coligan, supra. Por otro lado, la conveniencia y versatilidad de la detección inmunoquímica se puede mejorar al utilizar los anticuerpos anti-IL-22Ra que se hayan conjugado con avidina, estreptavidina, y biotina (ver por ejemplo, Wilchek et al., (eds.), "Avidin-Biotin Technology," Methods In Enzymoplogy, Vol. 184 (Academic Press 1990), and Bayer et al., "Immunochemical Applications of Avidin-Biotin Technology," in Methods In Molecular Biology, Vol. 10, Manson /ed.), paginas 149-162 (The Humana Press, Inc. 1992) . Los métodos para efectuar inmunoensayos están bien establecidos. Ver por ejemplo, Cook and Self, "Monoclonal Antibodies in Diagnostic Immunoassays, " in Monoclonal Antibodies: Production, Engineering, and Clinical Application, Ritter and Ladyman (eds.), páginas 180-208, (Cambridge University Press, 1995) , Perry, "The Role of Monoclonal Antibodies in the Advancement of Immunoassay Technology," in Monoclonal Antibodies: Principies and Applications, Birch and Lennox (eds.), páginas 107-120 (Wiley-Liss, Inc. 1995), and Diamandis, Immunoassay (Academic Press, Inc. 1996) . La presente invención también contempla kits para efectuar en ensayo de diagnóstico inmunológico para la expresión del gen IL-22RA. Tales kits comprenden al menos un recipiente que comprende un anticuerpo anti-IL-22RA o fragmento de anticuerpo. Un kit también puede comprender un segundo recipiente que comprenda uno o más reactivos que puedan indicar la presencia de un anticuerpo IL-22RA o fragmentos de anticuerpo. Los ejemplos de tales reactivos indicadores incluyen etiquetas detectables tales como una etiqueta radioactiva, una etiqueta fluorescente, una etiqueta quimioluminiscente, una etiqueta de enzima, una etiqueta bioluminiscente, oro coloidal, y similares. Un kit también puede comprender un medio para transportar al usuario que los anticuerpos XL-22Ra o fragmentos de anticuerpos se usan para detectar la proteína IL-22RA. Por ejemplo, se pueden establecer instrucciones por escrito de que el anticuerpo cerrado o un fragmento de anticuerpo se pueda usar para detectar IL-22RA. Se puede aplicar al material escrito directamente a un recipiente o se puede proporcionar el material escrito en forma de un inserto de empaque. 9. Uso de los anticuerpos anti-IL-22RA para antagonizar el enlace de IL-22RA para IL-22 o ambos IL-20 e IL-22. Técnicas alternativas para generar o seleccionar anticuerpos útiles en la presente incluyen la exposición in vitro de linfocitos a los polipéptidos del receptor IL-22RA soluble o fragmentos del mismo tales como epítopos antigénicos, y la selección de colecciones de despliegue de anticuerpos en fagos o en vectores similares, (por ejemplo, a través del uso de polipéptidos del receptor IL-22RA solubles etiquetados o inmovilizados o fragmentos de los mismos tales como epitopos antigénicos) . Los genes que codifican los polipéptidos que tienen dominios de enlace potenciales tales como polipéptidos del receptor IL-22RA solubles o fragmentos de los mismos, tales como epitopos antigénicos, se pueden obtener por selección de colecciones de péptidos aleatorias desplegadas en fagos (despliegue de fagos) o en bacterias tales como E. coli. Las secuencias de nucleótidos que codifican los polipéptidos se pueden obtener de diferentes formas tales como mediante la mutagénesis aleatoria y la síntesis de polinucleótidos aleatorios . Estas colecciones de despliegue de péptidos aleatorias se pueden usar para separar por exclusión péptidos que interactúan con un objetivo conocido que puede ser una proteína o un polipéptido tal como un ligando o un receptor, una macromolécula sintética o biológica o substancias orgánicas o inorgánicas . Se conocen en el arte las técnicas para la creación y selección de tales colecciones de despliegue de péptidos aleatorias (Ladner et al., Patente de EUA No. 5,223,409; Ladner et al., Patente de EUA No. 4,946,778; Ladner et al., Patente de EUA No. 5,403,484 y Ladner et al., Patente de EUA No. 5,571,698) y colecciones de despliegue de polipéptidos aleatorias y kits para la separación por exclusión de tales colecciones están disponibles comercialmente por ejemplo de Clontech (Palo Alto, CA) , Invitrogen Inc. (San Diego, CA) , New England Biolabs, Inc. (Beverly, MA) y Pharmacia L B Biotechnology Inc. (Piscataway, NJ) . Las colecciones de despliegue de péptidos aleatorias se pueden seleccionar utilizando los polipéptidos del receptor IL-22RA solubles o fragmentos del mismos tales como secuencias del polipéptido de epitopos antigénicos aguí descritos para identificar proteínas que se enlazan a los polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA. Estos "polipéptidos de enlace" que interactúan con polipéptidos del receptor que comprende IL-22RA soluble se pueden usar para el etiquetado de células, para aislar polipéptidos homólogos por purificación de afinidad, pueden conjugarse directa o indirectamente a fármacos, toxinas, radionúclidos y similares. También se pueden usar estos polipéptidos de enlace en métodos analíticos tales como para colecciones de expresión seleccionadas y de actividad neutralizante por ejemplo, por enlace, bloqueo, inhibición, reducción, antagonismo, o neutralización de la interacción entre el ligando IL-22 y el receptor o el enlace viral a un receptor. También se pueden usar los polipéptidos de enlace para ensayos de diagnósticos para determinar los niveles en circulación de los polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA soluble, para detectar o cuantificar los receptores que comprenden IL-22RA solubles o no solubles como marcadores de patología subyacente o enfermedad. Estos polipéptidos de enlace también pueden actuar como antagonistas para bloquear o inhibir al receptor monomérico IL-22RA de enlace a membranas o soluble o al enlace del polipéptido homodimérico, heterodimérico o multimérico IL-22RA (por ejemplo, al ligando) y la transducción de señal in vitro o in vivo. De nuevo, estos polipéptidos de enlace sirven como el receptor monomérico anti-IL-22RA o los polipéptidos homodiméricos , heterodiméricos o multidiméricos anti-IL-22RA y que son útiles para inhibir IL-22 o la actividad de ambos IL-20 y IL-22, así como la actividad del receptor o el enlace de proteínas. Los anticuerpos formulados para los complejos de receptor naturales de la presente invención y los anticuerpos de enlace a epítopos IL-22RA y los anticuerpos monoclonales neutralizantes IL-22RA pueden ser modalidades preferidas ya que pueden actuar más específicamente contra el IL-22RA y pueden inhibir IL-22 o ambos IL-20 e IL-22. Por otro lado, la actividad antagonista y de enlace de los anticuerpos de la presente invención se pueden ensayar en ensayos de proliferación de IL-20 o IL-22, trampa de señal, luciferasa o ensayos de enlace en presencia de IL-20 o IL-22 respectivamente, y receptores solubles que comprenden IL-22RA y otros ensayos biológicos o bioquímicos aquí descritos. Los anticuerpos para los polipéptidos del receptor IL-22RA soluble (por ejemplo, anticuerpos para SEQ ID NO: 3) o fragmentos del mismo, tales como epítopos antigénicos se pueden usar para inhibir los efectos inflamatorios de IL-20, IL-22, o ambos IL-20 e IL-22 in vivo, para el uso terapéutico contra la psoriasis, dermatitis atópica, condiciones inflamatorias de la piel, endotoxemia, artritis, asma, IBD, colitis, artritis psoriática, artritis reumatoide, y otras condiciones inflamatorias inducidas por IL-20 e IL-22 etiquetando células que expresen los receptores IL-22RA par aislar polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA soluble por purificación de afinidad, para ensayos de diagnóstico para determinar los niveles en circulación de polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA soluble, para detectar o cuantificar receptores que comprenden IL-22RA soluble como marcador de una patología o enfermedad subyacente, en métodos analíticos que emplean FACS, para la separación por exclusión de colecciones de expresión, para generar anticuerpos anti-idiotípicos que pueden actuar como agonistas IL-22 o IL-20 y como anticuerpos neutralizantes o como antagonistas para enlazar, bloquear, inhibir, reducir o antagonizar la función del receptor IL-22RA, o para enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de IL-22 y/o IL-20 (ya sea individualmente o en conjunto) in vitro e in vivo. Las etiquetas directas adecuadas incluyen radionúclidos, enzimas, substratos, cofactores, biotina, inhibidores, marcadores fluorescentes, marcadores quimoluminiscentes, partículas magnéticas y similares; las etiquetas indirectas pueden caracterizar el uso de biotina avidina u otros pares de complemento/anticomplemento como intermediarios . Los anticuerpos en la presente también se pueden conjugar directa o indirectamente a fármacos, toxinas, radionúclidos y similares, y estos conjugados usarse para aplicaciones de diagnostico o terapéuticas in vivo. Por otro lado, los anticuerpos del IL-22RA soluble que comprende polipéptidos del rececptor o fragmentos del mismo, se pueden usar in vitro para detectar polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA desnaturalizados o no desnaturalizados o fragmentos de los mismos en ensayos por ejemplo técnicas "Western Blot" u otros ensayos conocidos en el arte. Los anticuerpos para el receptor soluble IL-22RA o para polipéptidos del receptor IL-22RA soluble homodiméricos , heterodiméricos o multiméricos, son útiles para etiquetar células que expresen los receptores correspondientes y ensayen sus niveles de expresión para purificación por afinidad dentro de los ensayos de diagnóstico para determinar los niveles en circulación de los polipéptidos del receptor, métodos analíticos que emplean clasificación de células activadas por fluorescencia. Por otro lado, los anticuerpos divalentes y los anticuerpos anti-idiotipicos se pueden usar como agonistas para imitar el efecto del ligando IL-22RA, IL-22 o IL-20. También se pueden conjugar directa o indirectamente los anticuerpos en el presente a fármacos, toxinas, radionúclidos, y similares y usarse estos conjugados para el diagnóstico in vivo o aplicaciones terapéuticas. Por ejemplo, los anticuerpos o polipéptidos de enlace que reconocen al receptor soluble IL-22RA o a los polipéptidos del receptor homodimérico, eterodimérico o multimérico IL-22RA soluble se pueden usar para identificar o tratar tejidos u órganos que expresen una molécula correspondiente anticomplementaria (esto es, un receptor de enlace a la membrana o soluble que comprende IL-22RA) . Más específicamente los anticuerpos para los polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA soluble o fragmentos bioactivos o porciones del mismo, se pueden acoplar a moléculas citotóxicas o detectables y suministrarse a un mamífero que tienen células, tejidos u órganos que expresan el receptor que comprende IL-22RA tales como las cánceres que expresan IL-22RA. Las moléculas detectables adecuadas se pueden unir directa o indirectamente a los polipéptidos que enlazan a los polipéptidos del receptor que comprenden IL-22RA tales como "polipéptidos de enlace" (incluyendo péptidos de enlace antes descritos) , anticuerpos o fragmentos bioactivos o porciones de los mismos. Las moléculas detectables adecuadas incluyen radionúclidos , enzimas, substratos, cofactores, inhibidores, marcadores fluorescentes, marcadores quimioluminiscentes, partículas magnéticas y similares. Las moléculas citotóxicas adecuadas se pueden unir directa o indirectamente al polipéptido o anticuerpo e incluir toxinas bacterianas o plantas (por ejemplo, toxina de la difteria, exotoxina de pseudomonas , risina, abrina y similares) , así como radionúclidos terapéuticos tales como yodo 131, renio 188 o itrio 90 (ya sea unido directamente al polipéptido o anticuerpo o unido indirectamente a través de medios de una porción de guelación por ejemplo) . Los polipéptidos de enlace o anticuerpos también se pueden conjugar a fármacos citotóxicos tales como la adriamicina. Para una unión indirecta de una molécula detectable o citotóxica, la molécula detectable o citotóxica se puede conjugar con un miembro de un par complementario/anti-complementario, en donde se enlaza el otro miembro al polipéptido de enlace o porción de anticuerpo. Para estos propósitos, la biotina/estreptavidina es un par complementario/anti-complementario ejemplar. En otra modalidad, las proteínas de fusión de toxina a polipéptido de enlace o las proteínas de fusión anticuerpo a toxina se pueden usar para la inhibición de tejidos o células direccionadas o para ablación (por ejemplo para tratar células o tejidos de cáncer) . Alternativamente, si el polipéptido de enlace tiene dominios funcionales múltiples (esto es, un dominio de activación o un dominio de enlace a ligando más un dominio de direccionamiento) , una proteína de fusión que incluye solamente el dominio de direccionamiento puede ser adecuado para dirigir una molécula detectable, una molécula citotóxica o una molécula complementaria a una célula o tipo de tejido de interés. En casos en donde la proteína de fusión incluye solamente un dominio sencillo que incluye una molécula complementaria, se puede conjugar la molécula anticomplementaria con una molécula detectable o citotóxica. Tales proteínas de fusión de la molécula complementaria del dominio representan así un vehículo de direccionamiento genérico para el suministro específico de células/tejidos de conjugados de moléculas citotóxicas/detectables de la anti-complementariedad. En otra modalidad, las proteínas de fusión de anticuerpo a citocina o de citocina a polipéptido que enlazan IL-22RA, se pueden usar para mejorar el exterminio in vivo de tejidos objetivo (por ejemplo, cánceres de bazo, pancreáticos, de sangre, linfoides, de colón y de médula ósea) si los objetivos del anticuerpo del receptor anit-IL~22RA o la citosina polipéptido de enlace a la célula hiperproliferativa (ver generalmente, Hornick et al., Blodd 8_9:4437-47, 1997). Las proteínas de fusión descritas permiten el direccionamiento de una citocina a un sitio deseado de acción, con lo cual se proporciona una concentración local elevada de citocina. Los anticuerpos adecuados anti-IL-22RA de monómero, homodímero, heterodímero o multímero que se dirigen a una célula indeseable o tejido (esto es, un tumor o una leucemia) y la citocina fusionada median la lisis de células objetivo mejoradas por células efectoras . Las citocinas adecuadas para este propósito incluyen por ejemplo el factor estimulante de colonias de macrófagos granulocitos (GM-CSF) y la interleucina 2. Alternativamente, los polipéptidos de enlace al receptor IL-22RA o proteínas de fusión a anticuerpos aquí descritas se pueden usar para mejorar el exterminio in vivo de tejidos objetivo al estimular directamente una trayectoria apoptótica modulada por el receptor IL-22RA, lo que resulta en la muerte celular de células hiperproliferativas que expresan los receptores que comprenden IL-22RA. 10. Usos terapéuticos de los polipéptidos que tienen actividad o anticuerpos para IL-22RA Las secuencias de aminoácidos que tienen actividad soluble IL-22RA se pueden usar para modular el sistema inmune al enlazar los ligandos de IL-22RA IL-20 e IL-22 (ya sea sencillos o juntos) así evitar el enlace del ligando IL-22RA con el receptor endógeno IL-22RA. Los antagonistas IL-22RA tales como los anticuerpos anti-IL-22RA, también se pueden usar para modular el sistema inmune al inhibir el enlace de ligando IL-22RA con el receptor endógeno IL-22RA. De esta manera, la presente invención incluye el uso de proteínas, polipéptidos y péptidos que tienen la actividad IL-22RA (tal como polipéptidos solubles IL-22RA, fragmentos de polipéptidos IL-22RA, análogos IL-22RA (por ejemplo, anticuerpos anti-idiotipo IL-22RA) y proteínas de fusión IL-22RA) a un sujeto que carece de una cantidad adecuada de este polipéptido o que produce un exceso de ligando IL-22RA. Los antagonistas IL-22RA (por ejemplo anticuerpos anti-IL-22RA) también se pueden usar para tratar a un sujeto que produce un exceso de ligando IL-22RA o IL-22RA. Los sujetos adecuados incluyen mamíferos tales como humanos. Por ejemplo, tales polipéptidos IL-22RA y los anticuerpos anti-IL-22RA son útiles en el enlace, bloqueo, inhibición, reducción, antagonización o neutralización de IL-20 e IL-22 (ya sea sencillos o en conjunto) en el tratamiento de psoriasis, dermatitis atópica, condiciones inflamatorias de la piel, artritis psoriática, artritis, endotoxemia, asma, enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) , colitis y otras condiciones inflamatorias aquí descritas. Por otro lado, se ha demostrado que el receptor IL-22RA. se enlaza a un ligando denominado factor inducible de células T (IL-22) (SEQ ID NO: 6; Dumoutier, L . Et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. 97:10144-10149, 2000; la secuencia de ratón IL-22 in Dumontier et al., J. Immunol. 164 : 1814-1819 , 2000). Por otro lado, el zcytorll (IL-22RA) comúnmente en propiedad (Patente de EUA No. 5,965,704) y el receptor CRF2-4 también se enlazan a IL-22 como un heterodímero (ver Publicación IPO WO 00/24758; Dumontier et al., J . Immunol . 164 : 1814-1819, 2000; Spencer, SD et al., J. Exp. Med. 187:571-578, 1998; Gibbs, VC and Pérmica Gene 186:97-101, 1997 (CRF2-4 cDNA) ; Xie, MH et al., J. Biol. Chem. 275: 31335-31339, 2000; and Kotenko, SV et al., J. Biol. Chem. 276:2725-2732, 2001). Por otro lado, el receptor IL-??ß puede estar involucrado como un receptor para IL-22, y se considera que es sinónimo con CRF2-4 (Dumoutier, L. Et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. 97:10144-10149, 2000; Liu Y et al., J. Immunol. 152; 181-1829, 1994 (IL-10R ADNc) . Por otro lado, se ha demostrado que el receptor IL-22RA se enlaza a un ligando denominado IL-20 (SEQ ID NO: 8, Publiación de IPO No. O 99/27103) . Dentro de las modalidades preferidas, la forma de receptor soluble de IL-22RA, SEQ ID NO: 3) es un monómero, homodímero, heterodímero, o multímero que se enlaza, bloquea, inhibe, reduce, antagoniza o neutraliza a IL-22 e IL-20 in vivo. Los anticuerpos y polipéptidos de enlace para tales monómero, homodxmeros, heterodímeros o multímeros de IL-22RA también sirven como antagonistas de la actividad IL-22RA y como antagonistas de IL-20 e IL-22RA (sencillos o en conjunto) como se describe en la presente. Además, se ha descrito en la presente, y se ha demostrado que ambos anticuerpos anti-IL-22 policlonales y monoclonales neutralizantes se enlazan, bloquean, inhibien, reducen, antagonizan o neutralizan la actividad de IL-22 e IL-20 en ensayos de neutralización basados en células. El IL-22 se ¦ ha demostrado que está inducido en presencia de IL-9 y se sospecha que está involucrado en la promoción de respuestas inmunes del tipo Thl y en la inflamación. El IL-9 estimula -la proliferación, activación diferenciación, y/o inducción de la función inmune en una diversidad de formas y está implicado en el asma, mastocitocis de pulmón y otras enfermedades así como activa las trayectorias STAT. Los antagonistas de la función IL-22 o IL-9 pueden tener un uso benéfico contra tales enfermedades humanas . La presente invención proporciona tales antagonistas novedosos de IL-22. El IL-22 se ha demostrado que está involucrado en sobreregular la producción de reactivos en fase aguda, tales como el amiloide A de suero (SAA) ocl-antiquimotripsina y haptoglobina y que la expresión de IL-22 se incrementa con la inyección de lipopolisacáridos (LPS) in vivo lo que sugiere que el IL-22 está involucrado en la respuesta inflamatoria (Dumoutier, L. et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. 97:10144-10149, 2000) . La producción de las proteínas en fase aguda tales como SAA, se considera un mecanismo de supervivencia de corto plazo en donde es benéfica la inflamación; sin embargo, el mantenimiento de proteínas en fase aguda por periodos prolongados contribuye a la inflamación crónica y puede ser dañino para la salud humana. Para una revisión, ver Uhlar, CM and Whitehead, AS, Eur. J. Biochem. 265:501-523, 1999, Baumann, H. And Gauldie, J. Immunology Today 15: 74-80, 1994. Por otro lado, la proteína de fase aguda SAA está implicada en la patogénesis de enfermedades inflamatorias crónicas severas, está implicada en la ateroesclerosis y en la artritis reumatoide y es el precursor de la proteína A amiloide depositada en la amiloidosis (Uhlar, CM and Whitehead, supra) .

Así, ya que el IL-22 actúa como una molécula pro-inflamatoria e induce la producción de SAA, serían útiles los antagonistas en el tratamiento de la enfermedad inflamatoria y de otras enfermedades asociadas con las proteínas de respuesta de fase aguda inducidas por IL-22. Tales antagonistas se proporcionan por la presente invención. Por ejemplo, el método de reducción de la inflamación inducida por IL—2 o inducida por IL-9 comprende administrar a un mamífero con inflamación una cantidad de una composición de un receptor que comprende IL-22RA soluble suficiente para reducir la inflamación. Por otro lado, un método de supresión de una respuesta inflamatoria en un mamífero con inflamación puede comprender (1) determinar un nivel de la proteína A amiloide de suero; (2) administrar una composición que comprende un polipéptido de un receptor de citocina IL-22RA soluble como se describe en la presente en un vehículo farmacéutico aceptable; (3) determinar un nivel posterior a la administración de la proteína amiloide A del suero; (4) comparar el nivel de la proteína amiloide A del suero en la etapa 1 hasta el nivel de la proteína amiloide A del suero en la etapa 3, en donde la falta de un incremento o disminución en el nivel de la proteína amiloide A del suero es indicador de la supresión de una respuesta inflamatoria. La evidencia experimental aquí descrita muestra que los antagonistas IL-22 tales como los receptores solubles y los anticuerpos, reducen de hecho los niveles de SAA en los modelos in vivo para enfermedades inflamatorias, demostrando que el enlace, bloqueo, inhibición, reducción, antagonización o neutralización de IL—20 tiene efectos anti-inflamatorios . La evidencia indica que un papel de IL-20 y sus receptores se involucran en la psoriasis . Esta enfermedad multigénica de la piel se caracteriza por una proliferación aumentada de queratinocitos , diferenciación alterada de queratinocitos, e infiltración de células inmunes en la piel. La primera línea de evidencia para un papel de IL-20 en la psoriasis es que la hiperqueratosis observada y la epidermis engrosada en ratones transgénicos que se asemeja a las anormalidades psoriáticas en humanos . Los niveles disminuidos de tonofilamento, aunque se relacionan a la queratinización defectuosa, son una característica sorprendente de la psoriasis humana. Se han encontrado inclusiones dentro de la mitocondria tanto en condiciones de piel hiperplástica que se presenta naturalmente como inducida químicamente en ratones . La causa de las inclusiones y sus efectos en la función de la mitocondria si lo hay se desconoce . Los ratones transgénicos IL-20 muestran muchas de las características observadas en la psoriasis humana. Por otro lado el AKNm del receptor IL-20 (ambos ARNm IL-2ORA. e IL-20RB) se sobreregula notablemente en la piel psoriática humana en comparación con la piel normal lo que sugiere además un papel para IL-20 en la psoriasis. Ambas subunidades del receptor IL-20 se expresan en queratinocitos a lo largo de la epidermis y también se expresan en un subconjunto de células endoteliales e inmunes . Se propone que una expresión creciente de un receptor activado IL-20 pueda alterar las interacciones entre las células endoteliales, células inmunes y queratinocitos, lo que conduce a la desregulación de la proliferación y diferenciación de queratinocitos. Además, los datos de ratones agénicos aquí descritos en donde el receptor IL-22RA se hace agénico, muestra que IL-22RA fue necesario para los efectos inflamatorios inducidos por IL-20 en pieles en animales transgénicos estos resultados proporcionan evidencia de que al bloquear efectivamente la actividad IL-22RA por ejemplo por medio de un agénico de un gen IL-22RA o similarmente por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, reduciría similarmente los efectos de la piel inducidos por IL-20 así como los efectos de la piel inducidos por IL-22 por ejemplo en psoriasis, IBD, colitis u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-20 y/o IL-22 incluyendo IBD, artritis, asma, artritis psoriática, colitis, condiciones inflamatorias de la piel, y dermatitis atópica. Por otro lado, IL-20 estimula la transducción de señal en la línea celular HaCaT de queratinocitos humanos, apoyando una acción directa de este ligando novedosos en la piel. Además, las proteínas IL-?ß, EGF y TNF-oc, conocidas por ser activas en los queratinocitos y por estar involucradas con señales proliferativas y pro-inflamatorias en la piel, mejora la respuesta para IL-20. En ambas células HaCaT y BHK que expresan el receptor IL-20, el IL-20 señala a través de STAT3. Como se indica en la discusión anterior y en los ejemplos posteriores, IL-20 está involucrado en la patología de la psoriasis . La presente invención es en particular un método para el tratamiento de la psoriasis al administrar agentes que se enlazan, bloquean, inhibien, reducen, antagonizan o neutralizan IL-20. Los antagonistas para IL-20 puede ser un receptor soluble que se enlaza a IL-20 tal como un IL-22RA soluble, o anticuerpos, anticuerpos de cadena sencilla o fragmentos de anticuerpos que se enlazan a IL-20 o al receptor IL-20 por ejemplo anticuerpos anti-IL-22RA. Los antagonistas evitarán así la activación del receptor IL-20. Por otro lado, debido a que IL-20 y IL-22 comparte IL-22RA como un receptor común, los antagonistas tales como el IL-22RA soluble o anticuerpos, anticuerpos de cadena sencilla o fragmentos de anticuerpos que se enlazan al receptor IL-22RA se pueden usara para enlazarse en paralelo, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar IL-22 o ambos actividades IL-20 e IL22. La psoriasis es una de las enfermedades dermatológicas más comunes que afectan del 1 al 2% de la población mundial. Es un trastorno crónico inflamatorio de la piel caracterizado por pápulas eritematosas marcadas firmemente y placas redondas cubiertas por escamas micáceas de color plateado. Las lesiones de la piel de la psoriasis son variablemente pruríticas. Las áreas traumatizadas a menudo desarrollan lesiones de psoriasis. Adicionalmente, otros factores externos pueden exacerbar la psoriasis incluyendo lesiones, tensión y medicamentos, por ejemplo litio, bloqueadores beta y antipalúdicos . La variedad más común de psoriasis se denomina del tipo placa. Los pacientes con psoriasis de tipo placa tendrán placas estables de crecimiento lento, las cuales permanecen básicamente sin cambio por periodos prolongados de tiempo. Las áreas más comunes para que suceda la psoriasis de placa son los codos, rodillas, superficie de los glúteos, y el cráneo. El involucramiento tiende a ser simétrico. La psoriasis inversa afecta las regiones intertrigenias que incluyen las axilas, ingles, región submamaria, y el ombligo y también tienden a afectar el cráneo, palmas y plantas del pies. Las lesiones individuales son placas firmemente notorias pero pueden ser húmedas debido a su ubicación. La psoriasis de tipo placa se desarrolla de forma lenta y corre un curso indolente. Raramente se remite de manera espontánea. La psoriasis de erupción (psoriasis guttate) es más común en niños que en adultos, jóvenes. Se desarrolla agudamente en individuos sin psoriasis o en aquellos con psoriasis de placas crónicas . Los pacientes presentan pápulas muy pequeñas en forma de escamas eritomatosas, frecuentemente después de un infección del tracto respiratorio superior con estreptococos beta hemoliticos . Los pacientes con psoriasis también pueden desarrollar lesiones en forma de pústulas. Estas se pueden localizar en las palmas y en las plantas de los pies o se pueden generalizar y asociar con fiebre, malestar, diarrea y artralgias . Alrededor de la mitad de todos los pacientes con psoriasis tienen involucramiento de las uñas de los dedos, que aparecen como una picazón con puntos, engrosamiento de uñas o hiperqueratosis sublingual. Alrededor de 5 al 10% de los pacientes con psoriasis tienen molestias asociadas con las articulaciones y estas se encuentran más a menudo en pacientes con participación de las uñas de los dedos . Aunque algunos tienen una presencia coincidente de los clásicos . Aunque algunos tienen la presencia coincidente de artritis reumatoide clásica, muchos tienen enfermedad de las articulaciones que cae en uno de 5 tipos asociados con la psoriasis (1) enfermedad limitada a articulaciones pequeñas sencillas o unas cuantas (70% de los casos) ; (2) enfermedad de tipo artritis reumatoide seronegativa; (3) involucramiento de articulaciones entre falanges distales; (4) artritis destructiva severa con desarrollo de artritis mutilans; y (5) enfermedad limitada a la espina.

La psoriasis se puede tratar al administrar agentes que se enlazan, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan a IL-22, IL-20 o ambos IL-20 y IL-22. los antagonistas preferidos son un receptor soluble para IL-20 y IL22, tal como IL-22RA (SEQ ID NO: 3) o anticuerpos, fragmentos de anticuerpos o anticuerpos de cadena sencilla que se enlazan al receptor IL-22RA tales como anticuerpos neutralizantes de la presente invención. Talas antagonistas se pueden administrar solos o en combinación con otras terapias establecidas tales como lubricantes, queratolíticos, coritcosteroides tópicos, derivados tópicos de vitamina D, antralina, antimetabolitos sistémicos tales como metotrextato, terapia con luz ultravioleta psoraleno (PUVA) etretinato, isotretinoina, ciclosporina, y el derivado tópico de la vitamina D3 calciprotiol . Por otro lado, tales antagonistas se pueden administrar al individuo de manera subcutánea, intravenosa o transdermal usando un parche transdermal o crema que contenga el antagonista. Si se administra por vía subcutánea, el antagonista se puede inyectar en una o más placas psoriáticas . Si se administra trasndermalmente los antagonistas se pueden administrar directamente en la placas utilizando una crema, ungüento, pomada o solución que contiene el antagonistas . Los antagonistas para IL-20 o IL-22 se pueden administrar a un persona que tenga asma, bronquitis o fibrosis quistica u otra enfermedad inflamatoria del pulmón para tratar la enfermedad. Los antagonistas se pueden administrar por cualquier método adecuado que incluye lavado intravenoso subcutáneo y bronquial y el uso de inhalante que contiene el antagonista. El análisis de la distribución de tejidos del ARNm que corresponde al ADNc de IL-22RA muestra que el nivel de ARNm fue mayor en la placenta y el bazo, y el ligando al cual IL-22RA se enlaza (IL-22) está implicado en inducir una respuesta inflamatoria incluyendo la inducción de la respuesta en fase aguda (Dumoutier, L. et al., Proc Nat'l Acad. Sci. 97 : 10144-10149, 2000) . Así, las modalidades particulares de la presente invención se dirigen hacia el uso de IL-22RA soluble y anticuerpos anti-IL-22RA como antagonistas en un enfermedades inflamatorias e inmunes o condiciones tales como psoriasis, artritis psoriática, dermatitis atópica, condiciones inflamatorias de la piel, artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria del intestino (BD) , enfermedad de Crohn, diverticulosis , asma, pancreatitis, diabetes tipo 1 (IDDM) , cáncer pancreático, pancreatitis, enfermedad de Graves, cáncer de colón e intestinal, enfermedad autominmune, sepsis, transplante de órganos o de medula ósea, inflamación debida a la endotoxemia, trauma, cirugía o infección; amiloidosis, esplenomegalía, enfermedad de injerto contra hospedero, y donde la inhibición de la inflamación, supresión inmune, reducción de la proliferación de células hemapoyeticas, inmunes, inflamatorias o linfoides, macrófagos, células T (incluyendo las células Thl y Th2) , supresión de la respuesta inmune a un patógeno o antígeno u otras instancias en donde la inhibición de la citosinas IL-22 o IL-20 se desea. Por otro lado, los anticuerpos o polipéptidos de enlace que se enlazan a los polipétidos IL-22RA aquí decritos y los polipéptidos IL-22RA mismos son útiles para : 1) bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar las señalización por medio de los receptores IL-20 o IL-22 en el tratamiento de inflamación aguda, inflamación como resultado de trauma, lesión de tejidos, cirugía, sepsis o infección y enfermedades inflamatorias crónicas tales como ama, enfermedades inflamatorias del intestino (IBD) , colitis crónica esplenomegalio, artritis reumatoide, episodios inflamatorios agudos recurrentes (por ejemplo tuberculosis) y tratamiento de amiloidosis y ateroesclerosis, enfermedad de Castleman, asma y otra enfermedades asociadas con la inducción de la respuesta en fase aguda. 2) bloqueo, inhibición, reducción, antagonización o neutralización de la señalización por medio de receptores IL-20 o IL-22 en el tratamiento de enfermedades autoinmunes tales como IDDM, esclerosis múltiple (MS) , Lupus eritematosos sistémico (SLE) , miastemia gravis, artritis reumatoide e IBD para evitar o inhibir la señalización en células inmunes (por ejemplo linfocitos, monocitos, leucocitos) por medio de IL-22RA (Hughes C et al.., J. Immunol 153: 3319-3325, 1994) . Alternativamente, los anticuerpos tales como los anticuerpos monoclonales (MAb) para los receptores que comprenden IL-22RA, se pueden también usar como un antagonista para suprimir las células inmunes indeseables para tratar la enfermedad autoinmune . El asma, alergia y otras enfermedades atópicas se pueden tratar con un MAb contra por ejemplo los receptores solubles IL-22RA para inhibir la respuesta inmune o suprimir las células que atacan. El bloqueo, inhibición, reducción o antagonización de la señalización por medio de IL-22RA, usando los polipéptidos y anticuerpos de la presente invención, puede beneficiar también las enfermedades del páncreas, riñon, pituitaria y células neuronales . IDDM, NIDDM, pancreatitis, y carcinoma pancreático pueden beneficiarse. IL-22RA puede servir como un objetivo para la terapia de MAb de cáncer en donde un MAb antagonizante inhibe el crecimiento del cáncer y dirige el exterminio mediado por lo inmune. (Holliger P, and Hoogenboom, H: Nature Biotech. 16: 1015-1016, 1998). Los Mabs para los IL-22RA solubles también pueden ser útiles para tratar la nefropatias tales como glomerulosclerosis , neuropatía membranosa, amiloidosis (que también afecta el riñon entre otros tejidos), aterosclerosis renal, glomerulonefritis de diversos orígenes, enfermedades fibroproliferativas de del riñon así como la disfunción renal asociada con SLE, IDDM, diabetes de tipo II (NIDDM) , tumores renales y otras enfermedades . 3) agonizar, mejorar, incrementar o iniciar la señalización por medio de los receptores IL-20 ó IL-22 en el tratamiento de enfermedades auto inmunes tales como IDDM, MS, SLE, myasthemia gravis, artritis reumatoide y IBD. Los anticuerpos monoclonales y neutralizantes anti-IL-22RA pueden señalar los linfocitos u otras células inmunes para diferenciar, alterar la proliferación o cambiar la producción de citocinas o proteínas de la superficie celular que mejoren la autoinmunidad. Específicamente, la modulación de una respuesta celular de ayuda T hasta un patrón alterno de secreción de citosina puede desviar una respuesta auto inmune para mejorar la enfermedad (Smith JA et al., J. Immunol. 160: 4841-4849, 1998) . Similarmente, los heterodímeros agonistas anti-solubles IL-22RA/CRF2-4 , y los anticuerpos monoclonales de multímero se pueden usar para señalar, suprimir y desviar las células inmunes involucradas en el asma, alergia y enfermedad atópica. La señalización por medio de IL-22RA también puede beneficiar enfermedades del páncreas, riñon, pituitaria y células neuronales . IDDM, NIDDM, pancreatitis y el carcinoma pancreático se pueden beneficiar. IL-22RA puede servir como un objetivo para la terapia MAb del cáncer pancreático en donde una señalización de MAb inhibe el crecimiento del cáncer y dirige el exterminio mediado por lo inmune (Tutt, AL et al., J. Immunol. 161: 3175-3185, 1998). Similarmente, se puede tratar el carcinoma de células renales con anticuerpos monoclonales para los receptores solubles que comprende IL-22RA de la presente invención. Los polipéptidos solubles IL-22RA aquí descritos se pueden usar para enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad IL-22 ó IL-20, ya sea de manera sencilla o en conjunto con el tratamiento de la enfermedad autoinmune, enfermedad atópica, NIDDM, pancreatitis y disfunción renal como se describe arriba. Se puede usar una forma soluble de IL-22RA para promover una respuesta de anticuerpos mediada por las células Th y/o para promover la producción de IL-4 u otras citocinas por linfocitos u otras células inmunes . Los receptores solubles que comprenden IL-22RA de la presente invención son útiles como antagonistas de la citocina IL-20 ó IL-22. Tales efectos antagonistas se pueden lograr por la neutralización directa o por el enlace de IL-20 ó IL-22. Además de los usos antagonistas, los receptores solubles de la presente invención pueden enlazar a IL-22 y actuar como proteínas portadoras para la citosina IL-20 ó IL-22, con objeto de transportar el ligando a tejidos diferentes, órganos y células dentro del cuerpo. Como tales, los receptores solubles de la presente invención se pueden fusionar o acoplar a moléculas, polipéptidos, o porciones químicas que dirijan el complejo del ligando receptor soluble a un sitio específico tal como un tejido, célula inmune específica o tumor. Por ejemplo, en la infección aguda o en algunos cánceres, el beneficio puede resultar de la inducción de la inflamación y las proteínas de respuesta de fase aguda locales por la acción de IL-22. Así, los receptores solubles de la presente invención se puede usar para dirigir específicamente la acción de IL-20 ó IL-22. Ver, Cosman, D. Cytokine 5: 95-106, 1993; and Fernandez-Botran, R. Exp. Opin. Invest. Drgus 9: 497-513, 2000. Por otro lado, se pueden usar los receptores solubles de la presente invención para estabilizar el IL-22 ó IL-20, para incrementar la biodisponibilidad, longevidad terapéutica y/o eficacia del ligando por estabilización del ligando de la degradación o depuración o por direccionamiento del ligando hasta un sitio de acción dentro del cuerpo. Por ejemplo, el complejo IL-6/soluble IL-6R que se presenta naturalmente estabiliza IL-6 y puede señalizar a través del receptor gpl30. Ver Cosman, D. Supra. and Fernandez-Botran, R. Supra. Por otro lado, el IL-22RA se puede combinar con un ligando similar tal como IL-22 para comprometer un complejo de receptor soluble/ligando . Tales complejos se pueden utilizar para estimular las respuestas de las células que presentan una subunidad de un receptor de compañía tal como por ejemplo pDIRSl (IL-20RB) ó CRF2-4 (IL-10RB) . La especificidad celular de los complejos IL-22RA/ligando puede diferir de aquella que se observa para el ligando administrado solo. Adicionalmente, los complejos pueden tener diferentes propiedades farmacocinéticas tales como que afecten la vida media, respuesta/dosis y la especificidad del órgano o del tejido. Los complejos IL-22RA/IL-22 ó IL-22RA/IL-20 pueden así tener actividad agonista para mejorar una respuesta inmune o estimular las células mesangiales, o estimular las células hepáticas. Alternativamente, solamente los tejidos que expresan una subunidad de señalización se heterodimerizan con el complejo se pueden afectar análogos para la respuesta a los complejos IL6/IL6R (Hirota H. Et al., Proc. Nat'l. Acad. Sci. 92:4862-4866, 1995; Hirano, T. In Thomason, A. (Ed.) "The Cytokine Handbook" , 3rd Ed. , 208-209). Los complejos solubles receptor/citosina para IL12 y CNTF despliegan actividades similares . Por otro lado, la inflamación es una respuesta protectora por un organismo para repeler un agente invasor. La inflamación es un evento en cascada que involucra muchos mediadores celulares y humorales. Por un lado, la supresión de las respuestas inflamatorias puede dejar inmunocomprometido a un hospedero, sin embargo, si se deja sin verificar, la inflamación puede conducir a complicaciones serias que incluyen enfermedades inflamatorias crónicas (por ejemplo, psoriasis, artritis, artritis reumatoide, esclerosis múltiple, enfermedad inflamatoria del intestino y similares) . Choque séptico e insuficiencia de órganos múltiple. De manera importante, estos diversos estados de enfermedad comparten mediadores inflamatorios comunes. Las enfermedades colectivas que se caracterizan por inflamación tienen mayor impacto en la movilidad y mortalidad humana. Por lo tanto, esta claro que las proteínas anti-inflamatorias, tales como los anticuerpos IL-22RA y IL-22RA pueden tener un potencial terapéutico crucial para un basto número de enfermedades humanas y animales desde el asma y la alergia hasta la autoinmunidad y el choque séptico. 1. Artritis La artritis incluyendo osteoartritis, artritis reumatoide, articulaciones artríticas como resultado de una lesión y similares, son condiciones inflamatorias comunes que se beneficiarían del uso terapéutico de las proteínas antiinflamatorias tales como los polipéptidos IL-22RA de la presente invención. Por ejemplo, la artritis reumatoide (RA) es una enfermedad sistémica que afecta el cuerpo complejo y es una de las formas más comunes de artritis. Se caracteriza por la inflamación de la membrana que reviste la articulación lo cual provoca dolor, rigidez, calentamiento, enrojecimiento e hinchazón. Las células inflamatorias liberan enzimas que pueden digerir al hueso y al cartílago. Como resultado de la artritis reumatoide, el revestimiento de la articulación inflamada, el sinovio, puede invadir y dañar el hueso del cartílago lo que conduce a un deterioro de la articulación y dolor severo entre otro efectos fisiológicos. La articulación involucrada puede perder su forma y alineación resultando en dolor y perdida de movimiento. La artritis reumatoide (RA) es una enfermedad mediada por lo inmune que se caracteriza particularmente por inflamación y daño posterior al tejido, lo que conduce a una discapacidad severa y una mortalidad creciente. Se producen localmente una diversidad de citosinas en las articulaciones reumatoides . Diversos estudios han demostrado que los IL-1 y TNF-alfa, dos citocinas pro-inflamatorias prototípicas juegan un papel importante en los mecanismos involucrados en la inflamación sinovial y en la destrucción progresiva de las articulaciones . De hecho, la administración de TNF-alfa y de los inhibidores IL-1 en pacientes con RA ha conducido a una mejora dramática de los signos clínicos y biológicos de la inflamación y una reducción de los signos radiológicos de la erosión del hueso y la destrucción del cartílago. Sin embargo, a pesar de estos resultados alentadores, un porcentaje importante de los pacientes no responde a estos agentes, lo cual sugiere que otros mediadores también están involucrados en la patofisiología de la artritis (Gabay, Expert. Opion. Biol . Ther. 2(2): 135-149, 2002). Uno de estos mediadores puede ser el IL-20 ó IL-22 y como tal una molécula que se enlaza o inhibe la actividad de IL-22 ó IL-20 tales como los polipéptidos IL-22RA o lo anticuerpos anti IL-22RA o los moléculas de enlace pueden servir como un terapéutico valioso para reducir la inflamación en la artritis reumatoide y en otras enfermedades artríticas . Existen diversos modelos animales para la artritis reumatoide que se conocen en el arte. Por ejemplo, en el modelo de artritis inducido por colágeno (CIA) , los ratones desarrollan artritis inflamatoria crónica que se asemeja cercanamente a la artritis reumatoide humana. Ya que la CIA comparte características patológicas en inmunológicas similares con RA, esto hace un modelo ideal para seleccionar compuestos potenciales anti-inflamatorios humanos. El modelo CIA es un modelo bien conocido en ratones que depende tanto de la respuesta inmune y de una respuesta inflamatoria para que suceda. La respuesta inmune comprende la interacción de células B y células CD4+ T en respuesta al colágeno, lo cual se da como un antígeno y conduce a la producción de anticuerpos anti-colágeno . La fase inflamatoria es el resultado de las respuestas del tejido de los mediadores de la inflamación, como consecuencia de algunos de estos anticuerpos de reacción cruzada con el colágeno nativo del ratón y activan la cascada del complemento. Una ventaja en el uso del modelo CIA es que los mecanismos básicos de la patogénesis se conocen. Los epítopos relevantes de células T y células B en el colágeno de tipo II se han identificado y diversos parámetros inmunológicos (por ejemplo, hipersensibilidad de tipo retrasado y anticuerpos anti-colágenos) e inflamatorios (por ejemplo, citocinas, quimiocinas, y enzimas degradantes de la matriz) que se refieren a la artritis mediada inmune se han determinado, y se pueden usar así para evaluar la eficacia del compuesto de prueba en el modelo CIA (Wooley, Curr. Opin. Rheum. 3: 407-20, 1999; Williams et al., Immunol. 89: 9784-788, 1992; Myers et al., Life Sci. 61: 1861-78, 1997; and Wang et al., Immunol. 92: 8955-959, 1995). La administración de polipéptidos que comprende IL-22RA2 soluble (zcytorl6) , tales como zcytorl6-Fc4 u otras proteínas de fusión y solubles IL-22RA2 para estos ratones del modelo CIA, se usaron para evaluar el uso de IL-22RA2 como un antagonista para IL-22 usado para mejorar los síntomas y alterar el curso de la enfermedad. Por otro lado, los resultados que muestran la inhibición de IL-22 por IL-22RA2 proporcionan prueba del concepto que otros antagonistas IL-22, tales como IL-22RA o anticuerpos del mismo, también se puede usar para mejorar los síntomas y alterar el curso de la enfermedad. Ya que el ligando de IL-22RA2, IL-22, induce la protección de SAA, esta implicada en la patogénesis de la artritis reumatoide y IL-22RA2 se demuestra que puede inhibir la actividad de IL-22 y SAA in vitro o in vivo, la administración sistémica o local de IL-22RA2 que comprende polipéptidos, tales como zcytorl6-Fc4 u otros receptores solubles en IL-22 (por ejemplo, IL-22RA; SEQ ID N0:3) y anticuerpos anti-IL-22RA y proteínas de fusión pueden suprimir potencialmente la respuesta inflamatoria en RA. La inyección de 10 ug de zcytorl6-Fc (tres veces por semana durante 4 semanas) redujo significativamente el registro de la enfermedad (registro de la pata, incidencia de inflamación o enfermedad) . Otros terapéuticos potenciales incluyen los polipéptidos IL-22RA, anticuerpos anti-IL-22RA, o anticuerpos anti IL-22 o moléculas de enlace y similares. Un grupo ha demostrado que un anticuerpo anti-ratón IL-22 puede reducir los síntomas en el modelo CIA de ratón con relación a los ratones de control, mostrando conceptualmente así que los péptidos solubles IL-22RA y los anticuerpo neutralizantes para IL-22RA pueden ser benéficos en el tratamiento de la enfermedad humana. La administración de un anticuerpo monoclonal de rata específico de IL-22 de ratón sencillo (P3/1) reduce el síntoma de la artritis en los animales cuando se introduce profilácticamente o después de la artritis inducida por CIA se indujo en el modelo (Publicación WIPO 02/068476; publicada el 9 de Septiembre del 2002) . Por lo tanto, los polipéptidos solubles IL-22RA y los anticuerpos anti-IL22RA de la presente invención que incluyen los anticuerpos neutralizantes anti-humanos IL-22RA de la presente invención, se pueden usar para neutralizar IL-22 y IL-20 en el tratamiento de enfermedades humanas específicas tales como psoriasis, artritis psoriatica, artritis, endotixemia, enfermedad inflamatoria del intestinoa (IBD) , colitis, y otras condiciones inflamatorias aquí descritas . 2. Endotoxemia La endotoxemia es una condición severa que resulta comúnmente de agentes infecciosos tales como bacterias y otros agentes de enfermedades infecciosas, sepsis, síndrome de choque toxico o en pacientes inmunocompremetidos sometidos a infecciones oportunistas y similares. Las proteínas antiinflamatorias terapéuticamente útiles tales como los polipéptidos y anticuerpos IL-22 A de la presente invención pueden ayudar en evitar y tratar la endotoxemia en humanos y en animales. Los polipéptidos IL-22RA, anticuerpos anti-IL22RA o anticuerpos anti-IL-22 acompañados de enlace pueden servir como un terapéutico valioso para reducir la inflamación y los efectos patológicos en la endotoxemia. La endotoxemia inducida por lipopolisacáridos (LPS) se acopla a muchos de los mediadores proinflamatorios que producen efectos patológicos en las enfermedades infecciosas y la endotoxemia inducida por LPS en roedores es un modelo ampliamente utilizado y aceptable para estudiar los efectos farmacológicos de los agentes inmunomoduladores o proinflamatorios potenciales. El LPS, producido en bacterias gram negativas es un agente causativo importante en la patogénesis del choque séptico (Galusner et al . , Lancet 338 : 732, 1991) . Un estado tipo choque puede de hecho inducirse experimentalmente por una inyección sencilla de LPS en los animales . Las moléculas producidas por las células que responden a LPS pueden dirigir patógenos directa o indirectamente . Aunque estas respuestas biológicas protegen al hospedero contra los patógenos invasores también pueden provocar daños. Así, la estimulación masiva de la inmunidad innata que sucede como resultado de una infección bacteriana severa por gram negativas, conduce a una producción en exceso de citosinas y de otras moléculas, y al desarrollo de un síndrome fatal, síndrome de choque séptico que se caracteriza por fiebre, hipotensión, coagulación intravascular diseminada e insuficiencia múltiple de órganos (Dumitru et al . , Cell 103:1071-1083, 2000). Estos efectos tóxicos del LPS se relacionan principalmente con la activación de los macrófagos que conduce a la liberación de mediadores inflamatorios múltiples. Entre estos mediadores, el T F parece jugar un rol crucial como se indica por la prevención de la toxicidad de LPS por la administración de anticuerpos neutralizantes anti-TNF (Beutler et al., Science 229:869, 1985). Esta bien establecido que una inyección de 1 ug de E. coli LPS en un ratón C57B1/6 resultará en incrementos importantes en los IL-6, TNF-alfa, IL-1 en circulación y en las proteínas en fase aguda (por ejemplo, SAA) aproximadamente 2 horas después de la inyección. La toxicidad de LPS parece estar mediada por estas citocinas como una inmunización pasiva contra estos mediadores que puede resultar en una mortalidad disminuida (Beutler et al., Science 229:869, 1985). Las estrategias potenciales de inmunointervención para la prevención y/o tratamiento de choque séptico incluyen el antagonista del receptor anti-TNF mAb, IL-1, LIF, IL-10 y G-CSF. La administración de polipéptidos solubles que comprenden IL-22 A tales como Zcytorl6-Fc4 u otras proteínas de fusión solubles IL-22RA para estos modelos inducidos por LPS se uso para evaluar el uso de IL-22RA2 para mejorar los síntomas y alterar el curso de la enfermedad inducida por LPS. Por otro lado, los resultados muestran que la inhibición de IL-22 por IL-22RA2 proporciona prueba de concepto que otros antagonistas IL-22 tales como IL-22RA o anticuerpos del mismo también se pueden usar para mejorar los síntomas en un modelo inducido por LPS y alterar el curso de la enfermedad. El modelo mostró la inducción de IL-22 por inyección con LPS y el tratamiento potencial de la enfermedad por polipéptidos IL-22RA2. Ya que el LPS induce la producción de IL-22 pro-inflamatorio, SAA u otros factores pro-inflamatorios contribuyen posiblemente a la patología de la endotoxemia, la neutralización de la actividad IL-22, SAA u otros factores pro-inflamatorios por un polipéptido antagonista IL-22RA2 se puede usar para reducir los síntomas endotoxemia, tales como los que se observan en el choque endotóxico. Otros terapéuticos potenciales incluyen polipéptidos IL-22RA, anticuerpos anti-IL-22RA o anticuerpos anti-IL-22 o moléculas de enlace y similares. 3. Enfermedad inflamatoria del intestino, IBP En los Estados Unidos, aproximadamente 500,000 personas padecen de la enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) lo cual puede afectar al colón y al recto (colitis ulcerante) o ambos, intestino delgado y grueso, (enfermedad de Crohn) . No esta clara la patogénesis de estas enfermedades, pero involucra la inflamación crónica de los tejidos afectados. Los polipéptidos IL-22RA, anticuerpos anti-IL-22RA o anticuerpos IL-22 o moléculas de enlace, pueden servir como un terapéutico valioso para reducir la inflamación y los efectos patológicos en IBD y en enfermedades relacionadas . La colitis ulcerante (UC) es una enfermedad inflamatoria del intestino grueso denominada comúnmente el colón caracterizado por inflamación y ulceración de la mucosa o el revestimiento interior del colón. Esta inflamación provoca que el colón se vacie frecuentemente resultando en diarrea. Los síntomas incluyen heces flojas y calambres abdominales asociados, fiebre y pérdida de peso. Aunque la causa exacta e la UC no se conoce, la investigación reciente sugiere que las defensas naturales del cuerpo están operando contra proteínas en el cuerpo que el cuerpo piensa que son extrañas (una reacción autoinmune) . Debido a que tal vez se asemejan a proteínas bacterianas en el vientre estas proteínas pueden instigar o estimular el proceso inflamatorio que comienza a destruir el revestimiento del colon. A medida que se destruye el revestimiento del colon, las úlceras forman moco que libera pus y sangre . La enfermedad comienza usualmente en el área del recto y puede extenderse eventualmente a través del intestino grueso completo. Los episodios repetidos de inflamación conducen al engrosamiento de la pared del intestino y el recto con tejidos de cicatrización. La muerte del tejido del colón o sepsis puede suceder con enfermedad severa. Los síntomas de la colitis ulcerante varían en severidad y su comienzo puede ser gradual o repentino. Se pueden provocar ataques por muchos factores que incluyen infecciones respiratorias o tensión. Aunque no haya actualmente cura para el UC disponible, los tratamientos se enfocan en suprimir el proceso inflamatorio anormal en el revestimiento del colon. Los tratamientos incluyen inmunosupresores de corticoesteroides (por ejemplo azatioprina, mercaptopurina y metotrexato) y aminosalicilatos están disponibles para tratar la enfermedad. Sin embargo, el uso a largo plazo de inmunosupresores tales como los corticoesteroides y la azatioprina puede resultar en efectos colaterales serios que incluyen el adelgazamiento de huesos, cataratas, infección y efectos en el hígado y en la medula ósea. En pacientes en quienes las terapias actuales no son exitosas, la cirugía es un opción. La cirugía involucra el retiro de colon completo y el recto. Existen diversos modelos animales que pueden parcialmente imitar la colitis ulcerante crónica. El modelo más ampliamente usado es el del ácido 2 , 4 , 6-trinitrobensulfónico/etanol (TNBS) modelo de colitis inducida, que induce la inflamación crónica y la ulceración en el colón. Cuando se introduce el TNBS en el colón de ratones susceptibles por medio de instilación intra-rectal, induce una respuesta inmune mediada por células T en la mucosa colonica en este caso conduciendo a una inflamación masiva de la mucosa caracterizado por una infiltración densa de células T y de macrófagos a lo largo de la pared completa del intestino grueso. Adicionalmente, esta imagen histopatológica se acompaña por la imagen clínica de pérdida de peso progresiva (desgaste) , diarreas con sangre, prolapso rectal, y engrosamiento de la pared del intestino grueso (Neurath et al., Intern. Rev. Immunol. 19:51-62, 2000). Otro modelo de colitis utiliza sulfato de dextrano de sodio (DSS) que induce una colitis aguda manifestada por diarrea con sangre, pérdida de peso, acortamiento del colon y ulceración de la mucosa con infiltración de neutrofilos . La colitis inducida por DSS se caracteriza histológicamente por la infiltración de células inflamatorias dentro de lamina propria con hiperplasia linfoide, daño en las criptas focales, y ulceración epitelial. Estos cambios se cree que se desarrollan debido a un efecto toxico de DSS en el epitelio y por la fagocitosis de las células de lamina propria y la producción de T F-alfa y IFN-gamma. A pesar de su uso común, permanecen sin resolver diversas cuestiones referentes a los mecanismos de DSS sobre la relevancia para la enfermedad humana. El DSS se refiere como un modelo independiente de las células T debido a que se observan en animales tales como ratones SCID . La administración de los polipéptidos que comprenden IL-22 A2 solubles tales como zcytorl6-Fc4 u otras proteínas de fusión y solubles de IL-22RA2 para estos modelos TNBS o DSS se pueden usar para evaluar el uso de IL-22 A para mejorar los síntomas y alterar el curso de la enfermedad gastrointestinal. Por otro lado, los resultados que muestran la inhibición de IL-22 por IL-22RA2 proporcionan prueba del concepto de que otros antagonistas IL-22 tales como IL-22RA o anticuerpos para ello se pueden usar para mejorar los síntomas en los modelos colitis/IBD y alterar el curso de la enfermedad. Se observa una expresión creciente de IL-22 en te idos de colon en ratones con DSS por RT-PCR y la actividad sinérgica de IL-22 con IL-lbeta en líneas celulares intestinales. Indica que IL-22 puede jugar un papel en la respuesta inflamatoria en la colitis y la neutralización de la actividad IL-22 al administrar polipéptidos IL-22RA2 es un método terapéutico potencial para IBD. Otros terapéuticos potenciales incluyen polipéptidos IL-22RA, anticuerpos anit-IL-22RA o anticuerpos IL-22 o moléculas de enlace y similares. 4 Psoriasis La psoriasis es una condición crónica de la piel que afecta más de 7 millones de americanos . La psoriasis sucede cuando nuevas células de la piel crecen anormalmente lo que resulta en parches inflamados, hinchados y con escamas de la piel en donde la piel vieja no se ha eliminado lo suficientemente rápido. La psoriasis de placa, la forma más común se caracterizado por parches inflamados de la piel (lesiones) con escamas blancas plateadas en la partes superior. La psoriasis se puede limitar a unas cuantas placas o involucrar áreas moderadas a amplias de piel apareciendo más comúnmente en el cráneo, rodillas, codos y tronco. Aunque es altamente visible, la psoriasis no es una enfermedad contagiosa. La patogénesis de las enfermedades involucra inflamación crónica de los tej idos afectados . Los polipéptidos IL-22RA, anticuerpos anti-IL-22RA o anticuerpos IL-22 o moléculas de enlace pueden servir como un terapéutico valiosos para reducir la inflamación y los efectos patológicos en la psoriasis, en otras enfermedades inflamatorias de la piel, en la piel y alergias, mucosas y en enfermedades relacionadas. La psoriasis es un trastorno inflamatorio de la piel mediado por células T que puede provocar una incomodidad considerable. Es una enfermedad para la cual no hay cura y afecta a las personas de todas las edades. La psoriasis afecta aproximadamente al 2% de las poblaciones de Europa y de Norteamérica. Aunque los individuos con psoriasis media pueden controlar a menudo su enfermedad con agentes tópicos, más de 1 millón de pacientes en el mundo requieren de una terapia inmunodepresoras sistémica o ultravioleta. Desafortunadamente, la inconveniencia y riesgos de la radiación ultravioleta y las toxicidades de muchas terapias limitan su uso a largo plazo. Por otro lado, los pacientes usualmente tienen recurrencia de la psoriasis y en algunos casos rebote poco después de tener la terapia inmunosupresora. El IL-20 es un homólogo novedoso del IL-10 que se ha demostrado que provoca letalidad en neonatos con anormalidades en la piel incluyendo diferenciación epidemial aberrante en ratones transgénicos IL-20 (Blumberg H et al., Cell 104:9-19, 2001) el receptor IL-20 se sobreregula dramáticamente en la piel psoriática. Ya que el IL-20 comparte una subunidad del receptor (zcytor 11) con el receptor IL-20 y los ratones transgénicos IL-20 despliegan un genotipo similar, es posible que el IL-22 también este involucrado en enfermedades inflamatorias de la piel tales como psoriasis. La administración del polipéptido IL-22RA o de un anticuerpo anti-IL-22RA antagonista, ya sea subcutáneo o tópicamente puede reducir el potencial de inflamación y el síntoma. Otros terapéuticos potenciales incluyen polipéptidos IL-22RA, polipéptidos del receptor zcytorll/CRF2-4 solbules o anticuerpos anti IL-22 o moléculas de enlace y similares. Por otro lado, la sobreexpresión de IL-22 e IL-20 se demostró en lesiones psoriáticas en humanos, lo que sugiere que IL-22 como IL-20 también está involucrado en la psoriasis humana. Por otro lado como se describe en la presente, la sobre expresión de IL-20 o IL-22 en ratones transgémicos mostró un engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes indicativos de un fenotipo psoriatico y además la inyección de IL-22 en ratones normales mostró un engrosamiento de la epidermis e involucramiento de las células inmunes indicativo de un fenotipo psoriatico que se hizo en ablación por el antagonista del receptor soluble IL-22RA2 (zcytorl6; Publicación WIPO No. O 01/40467) . Tales datos in vivo sugieren además que la IL-22 pro-inflamatoria se involucra en la soriasis . Como tales, los antagonistas para actividad IL-22 e IL-20, tales como los anticuerpos y receptores solubles IL-22RA de ellos que incluyen los anticuerpos de neutralización y anti-humano-IL-22RA monoclonales de la presente invención, son útiles en el tratamiento terapéutico o las enfermedades inflamatorias, particularmente como antagonistas para ambos IL-22 e 11-20 solos o juntos en el tratamiento de la psoriasis. Por otra parte, los antagonistas para la actividad IL-22 tales como los receptores solubles IL-22RA y los anticuerpos de ellos que incluyen los anticuerpos que neutralizan y anti-humano-IL-22RA de la presente invención, son útiles en el tratamiento terapéutico de otras enfermedades inflamatorias por ejemplo, como agentes que ligan, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan IL-22 e 11-20 en el tratamiento de al dermatitis atópica, IBD, colitis, endotoxemia, artritis, artritis reumatoide y artritis psoriática, enfermedad respiratoria adulta (ARD) , choque séptico, falla de múltiples órganos, lesión del pulmón inflamatorio tales como asma o bronquitis, neumonía bacteriana, psoriasis, eczema, dermatitis atópica y por contacto y enfermedad del intestino inflamatorio tales como colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn. Por otra parte, los anticuerpos anti-IL-22R4 y los receptores solubles IL-22RA de la presente invención pueden usarse en la prevención y la terapia contra la pérdida de peso asociada con una variedad de enfermedades inflamatorias descritas en la presente, así como para el cáncer (por ejemplo, quimioterapia y caquexia) y enfermedades infecciosas. Por ejemplo, la pérdida de peso severa es un marcador clave asociado con los modelos para la septicemia, MS, RA, y modelos de tumor. Además, la pérdida de peso es un parámetro clave de muchas enfermedades humanas que incluyen cáncer, enfermedades infecciosas y enfermedades inflamatorias . La pérdida de peso se demostró en ratones inyectados con adenovirus IL-22 descritos en la presente. Los anticuerpos anti-IL-22 y antagonistas 11-22 tales como los receptores solubles IL-22RA y anticuerpos de ellos de la presente invención, así como el receptor zcytor 16 (IL-22R42) , puede probarse por su capacidad para prevenir y tratar la pérdida de peso en ratones inyectados con adenovirus IL-22 descrtos en la presente. Los métodos para determinar un régimen profiláctico o terapéutico para tales antagonistas IL-22 se conocen en el arte y pueden determinarse usando los métodos descritos en la presente . Los polipéptidos del receptor soluble IL-22RA y anticuerpos de ellos pueden también ser usados dentro de los sistemas diagnósticos para la detección de los niveles de circulación del ligando IL-22 o 11-20 y en la detección de IL-22 asociada con la fase aguda de la respuesta inflamatoria. Dentro de una modalidad relacionada, los anticuerpos u otros agentes que se ligan específicamente a los receptores solubles IL-22R4 de la presente invención pueden usarse para dertectar la circulación de los polipéptidos del receptor; recíprocamente, los receptores solubles IL-22R4 en sí mismos pueden usarse para detectar los polipéptidos IL-22 o IL-20 que actúan localmente o que circulan. Los niveles disminuidos o elevados del ligando o los polipéptidos del receptor pueden ser indicativos de las condiciones patológicas que incluyen inflamación o cáncer. Se sabe que IL-22 induce la fase aguda asociada con la respuesta inflamatoria. Por otra parte, la detección de las proteínas de fase aguda o moléculas tales como IL-20 o IL-22 pueden ser indicativas de una condición inflamatoria crónica en ciertas etapas de al enfermedad (por ejemplo, soriasis, artritis reumatoide, colitis, IBD) . La detección de tales condiciones sirve para ayudar en el diagnóstico de al enfermedad así como una ayuda para un médico para decidir sobre una terapia propia. La administración ¦ in útero para neutralizar los anticuerpos anti-IL-20 o IL-20 puede usarse para mostrar la eficacia in vivo en los modelos de la enfermedad reduciendo o eliminando el fenotipo de la piel enocnrado en las crías transgénicos IL-22 que sobreexpresan a IL-22, o crías transgénicos IL-20 que sobreexpresan IL-20. Existen precedentes en el arte para el tratamiento in útero con anticuerpos monoclonales de neutralización (mAbs) . En un caso, el desarrollo del subconjunto B-l de células B se afectó dramáticamente mediante el tratamiento de los ratones hembra preñados con mAb específico para la molécula de células específicas B , CD19 (por ejemplo, Krop I. Et al., Eur. J. Immunol. 26 (1) : 238-42 , 1996). Krop et al. inyectó ratones preñados programados intraperitonealmente con 500 ug de CD19 mAb anti-ratón (o un isotipo-coincidente control Ab de rata) en PBS que se inició en el día 9 de la gestación, con inyecciones posteriores cada día hasta el nacimiento. Las crías se inyectaron también una vez con 500 ug de estos anticuerpos en el día 10 de edad. En otro caso, Tanaka et al., encontró que el tratamiento in útero con el anticuerpo monoclonal para el receptor 11-2 de cadena beta abrogó completamente el desarrollo de la células epidérmicas dendríticas Thy-1+. Las dos subunidades distintas del receptor 11-2, es decir, la cadena alfa (IL-2R alfa) y la cadena beta (I1-2R beta) se expresan en la mayoría de las formas mutualmente exclusivas a través de ontogenia del timo fetal. En el bloqueo de I1-2R beta, una señal del componente de transducción de IL-2R administrando un mAb de neutralización al IL-2R beta resultó en la desaparición completa y selectiva de las células epidérmicas dendríticas de la piel Thy-1+. El desarrollo de cualquiera de otros subconjuntos de células T fue no comprometido. Esto indica que 11-2 juega un papel importante en el desarrollo de las células fetales V gama 5+ y sus descendientes (ver, Tanaka, et al., Int. Immunol .4 (4) : 487-9, 1992). Además, Schatteman GC et al., demostró que PDFG-A se requiere para el desarrollo cardiovascular murino normal usando un sistema in útero. Varia slíneas de evidencia sugieren que el se requiere la cadena A del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDFG-A) para el desarrollo cardiovascular embriónico normal. La introducción de anticuerpos de neutralización anti-PDGF-A en ratón deciduas in útero resultó en la interrupción selectiva de las interacciones ligando-receptor PDFG-A in vivo durante un periodo de 18-24 horas y permitió valorar si se requería PDFG- A para el desarrollo cardiovascular y cuando se requerirla (ver, Schattemann GC et al., Dev. Biol..176 (1) : 133-42, 1996). Estos resultados así como otros descritos en el arte, proporcionan la evidencia que neutralizar niAbs puede producir fuertes efectos in útero. De igual manera, los datos muestran que la eficacia para neutralizar IL-20 o IL-22 con anticuerpos monoclonales in vivo en modelos de enfermedades reduce o elimina el fenotipo de la piel encontrado en las crías transgénicas IL-20 e IL-22 que sobreexpresan IL-20 e IL-22 respectivamente. Estos ratones transgéncios nacen con una apariencia de piel "brillante" debido al menos en parte a un engrosamiento de al epidermis como la descrita en la presente. Las crías IL-20 TG que expresan niveles totalmente bajos de la citocina transgénica pueden recuperarse y sobrevivir a la procreación, pero los ratones IL-22 TG mueren poco después de nacer, generalmente antes de los 5 días de edad. Por ejemplo, los anticuerpos de neutralización para IL-20 incluyen anticuerpos tales como la neutralización de los anticuerpos monoclonales que pueden ligar epítopos antigénicos IL-20 y neutralizar actividad IL-20. Por consiguiente, los péptidos que llevan epítopos antigénicos y los polipéptidos de IL-20 son útiles para producir anticuerpos que se ligan con los polipéptidos IL-20 descritos en la presente, así como para identificar y separara por exclusión los anticuerpos monoclonales anti-Il-20 que neutralizan y que pueden ligar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de IL-20. Tales anticuerpos monoclonales de neutralización de la presente invención pueden ligar a un epítopo antigénico IL-20. Tales epítopos dentro de la SEQ ID NO: 8 predicha por una gráfica de Jameson-Wolf, por ejemplo, usando un programa DNASTAR Protean (DNASTA , Inc., Madison, WI) sirve como epítopos antigénicos preferidos y pueden ser determinados por un experto en el arte. Tales epítopos antigénicos incluyen: los residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 102 (Asp) de al SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 60 (lie) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 69 (Glu) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 81 (Cys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 96 (Lys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 102 (Asp) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 69 (Glu) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 81 (Cys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 96 (Lys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 102 (Asp) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 81 (Cys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 96 (Lys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 102 (Asp) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 81 (Cys) hasta 96 (Lys) de SEQ ID NO: 8; residuos de aminoácidos 81 (Cys) hasta 102 (Asp) de SEQ ID NO: 8; y residuos de aminoácidos 96 (Lys) hasta 102 (Asp) de SEQ ID NO: 8. Además de otros modelos de enfermedad descritos en la presente, la actividad de los anticuerpos anti-IL-22RA en el tejido inflamatorio derivados de lesiones psoriáticas humanas pueden medirse in vivo usando un modelo de ratón inmunodeficiente combinado severo (SCID) Varios modelos de ratón se han desarrollado en los cuales se implantan las células humanas en los ratones inmunodeficientes (colectivamente referidos como modelos de xenoinjerto) ; ver, por ejemplo, Cattan AR, Douglas E, Leuk. Res. 18:513-22, 1994 y Flavell, DJ, Hematological Oncology 14:57-82, 1996. Como un modelo de xenoinjerto in vivo para psoriasis, se implanta tejido de piel psoriática en el modelo de ratón SCID, y se enfrenta con un antagonista apropiado. Por otro lado, otros modelos animales de psoriasis en el arte pueden usarse para evaluar los antagonistas IL-20 y IL-22, tales como injertos de piel psoriática humana implantados en el modelo de ratón AGR129, y se enfrenta con un antagonista apropiado (por ejemplo, ver, Boyman, 0. et al., J. Exp. Med. Online publicación #20031482, 2004, incorporada en la presente para referencia) . Los anticuerpos anti-IL-22RA que enlazan, bloquean, inhiben, reducen, antagonizan o neutralizan la actividad del IL-22 o ambos IL-20 y IL-22 son antagonistas preferidos, sin embargo, los anticuerpos anti-IL-20 y anti-IL-22 (solos o en combinación) , IL-22RA soluble, así como otros antagonistas IL-20 y IL-22 pueden usarse en este modelo. Similarmente, los tejidos o células derivados de colitis humana, IBD, artritis, u otras lesiones inflamatorias, pueden usarse en el modelo SCID para evaluar las propiedades anti-inflamatorias de los antagonistas IL-20 y IL-22 descritos en la presente . Las terapias diseñadas para abolir, retardar o reducir la inflamación usando anticuerpos anti-IL-22RA o sus derivados, agonistas, conjugados o variantes pueden probarse mediante la administración de anticuerpos anti-IL22RA o compuestos solubles IL-22RA en ratones SCID que poseen tejidos inflamatorios humanos (por ejemplo, lesiones psoriáticas y similares) u otros modelos descritos en la presente. La eficacia del tratamiento se mide y se evalúa estadísticamente como un efecto anti-inflamatorio que se incrementa dentro de la población tratada durante un tiempo usando métodos bien conocidos en el arte. Algunos métodos de ejemplo incluyen pero no se limitan a, la medición de por ejemplo, en un modelo de psoriais, su espesor epidérmico, el número de células inflamatorias en la dermis superior y los grados de paraqueratosis . Tales métodos se conocen en el arte y se describen en la presente. Por ejemplo, ver Zeigler, M. et al. Lab Invest 81:1253, 2001; Zollner, T.M. et al. J. Clin. Invest . 109:671, 2002; Yamanaka, N. et al. MicrobioL, Immunol, 45:507, 2001; Raychaudhuri, S. P. et al. Br J. Dermatol . 144:931, 2001; Boehncke, W. H. et al. Arch. Dermatol. Res 291:104, 1999; Boehncke, W. H et al., J. Invest. Dermatol. 116:596, 2001; Nickoloff, B. J. et al. Am, J. Pathol. 146:580, 1995; Boehncke, W. H et al. J. Cutan. Pathol. 24:1, 1997; Sugai, J. M. et al . J. Dermatol. Sci 17:85 y Villadsen L. s. et al J. Clin. Invest. 112:1571, 2003. La inflamación puede también monitorearse en el tiempo usando métodos bien conocidos tales como citometria de flujo (o PCR) para cuantificar el número de células lesionadas o inflamatorias presentes en una muestra, registro (pérdida de peso, diarrea, sangrado rectal, longitud del colón) para IBD, registro de la enfermedad en la pata y el registro de inflamación para el modelo CIA RA. Por e emplo, las estrategias terapéuticas apropiadas para probar tal modelo incluyen el tratamiento directo usando anticuerpos anti-IL22R, otros antagonistas IL20 e IL22 (solos o juntos) , o conjugados o antagonistas relacionadas basados en la interacción de la interrupción de anticuerpos anti-IL22RA con sus ligandos IL20 e IL22, o para terapias basadas en células utilizando anticuerpos anti-IL-22RA o sus derivados, agonistas, conjugados o variantes. Por otra parte, la psoriasis es una enfermedad de la piel inflamatoria crónica que está asociada con los gueratinocitos epidérmicos hiperplásticos que se infiltran en las células mononucleares , que incluyen células T de memoria CD4+, neutrófilos y macrófagos (Christophers , Int . Arch. Allergy Immu ol. , 110:199, 1996) , Se cree comúnmente que los antígenos ambientales juegan un papel importante al iniciar y contribuir en la patología de la enfermedad. Sin embargo, se piensa que la pérdida de tolerancia de autoantigenos es la que media la patología de la psoriasis. Se piensa que las células dendríticas y las células T CD4+ juegan un papel importante en la presentación de antígenos y en el reconocimiento para mediar la respuesta inmune que conduce a la patología. Se ha desarrollado recientemente un modelo de psoriasis basado en el modelo de transferencia CD4+CD45RB (Davenport et al., Internat . Immunopharmacol . , 2 : 653-672) . Los anti-IL20, anti-IL22 o anticuerpos para IL20R y/o IL22R, tales como los anticuerpos anti-IL22RA de la presente invención o los IL-22RA solubles se administran a los ratones . La inhibición de los registros de la enfermedad (lesiones de la piel, citocinas inflamatorias) indica la efectividad de los antagonistas IL-20 e IL-22 en la psoriasis, por ejemplo, los anticuerpos anti-IL22RA o receptores solubles IL-22RA u otros antagonistas tales como los anticuerpos contra IL20 y/o IL22 o sus receptores. Dermatitis atópica Tanto IL-20 como IL-22 se sobreregulan en muestras de pacientes con dermatitis atópica humana (AD) . La AD es una enfermedad inflamatoria crónica común que se caracteriza por citocinas hiperactivadas del subconjunto 2 de las células T auxiliadoras (Th2) . A pesar de que la etiología exacta de AD se desconoce, se encuentran implicados múltiples factores que incluyen respuestas inmunes Th2 iperactivas , autoinmunidad, infección, alérgenos y predisposición genética. Las características clave de la enfermedad incluyen xerosis (resequedad de la piel) , pruritus (picazón de la piel) , conjuntivitis, lesiones de la piel inflamatoria, infección por Spaphylococcus aureus, eosinofilia sanguínea elevada, elevación del suero IgE e IgGl y dermatitis crónica con células T, mastocitos, macrófagos e infiltración de eosinofilos . Se ha reconocido la colonización de la infección con S. aureus para exacerbar la AD y perpetuar la cronicidad de esta enfermedad de la piel . La AD se encuentra frecuentemente en pacientes con asma y con rinitis alérgica y frecuente es una manifestación inicial de la enfermedad alérgica. Aproximadamente el 20% de la población en los países occidentales padecen de estas enfermedades alérgicas y la incidencia de AD en los países desarrollados se presenta a partir de razones desconocidas . La AD típicamente se inicia en la infancia y puede persistir frecuentemente durante la adolescencia hasta la edad adulta. Los tratamientos actuales para la AD incluyen corticosteroides tópicos, ciclosporina oral A, inmunosupresores no corticosteroides tales como tacrolimus (FK506 en forma de ungüento) , e interferón gama. A pesar de una variedad de tratamientos para AD, muchos de los síntomas en los pacientes no mejoran, o pueden tenerse reacciones adversas a los medicamentos que requieren de la búsqueda de otros agentes terapéuticos más efectivos. Los polipéptidos IL-22RA solubles y anticuerpos anti-IL22RA de la presente invención, que incluyen la neutralización de anticuerpos anti-humano IL-22RA de la presente invención pueden usarse para neutralizar IL-22 e IL-20 en el tratamiento de las enfermedades humanas específicas tales como la dermatitis atópica, condiciones de la piel inflamatoria y otras condiciones inflamatorias descritas en la presente. Para el uso farmacéutico, los anticuerpos solubles IL-22RA o anti-IL-22RA de la presente invención se formulan para un suministro parenteral, particularmente intravenoso o subcutáneo de acuerdo con los métodos convencionales . La administración intravenosa será mediante la inyección del bolus, liberación controlada, por ejemplo, usando mini-bombas u otra tecnología apropiada o mediante la infusión durante un periodo típico de una a varias horas. En general, las formulaciones farmacéuticas incluirán una proteína hematopoyética en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable tal como una solución salina, una solución amortiguada, dextrosa al 5% en agua o similares. Las formulaciones pueden incluir además uno o más excipientes, conservadores, solubilizadores, agentes de amortiguamiento, albúmina para prevenir la pérdida de la proteína en las superficie de los frascos. Cuando se utiliza tal como una combinación de terapia, las citocinas pueden ser combinadas en una formulación simple o pueden administrarse en formulaciones individuales, los métodos o formulaciones son bien conocidas en el arte y se describen por ejemplo, en Remington Pharmaceutical Scienes, Gennaro, ed. , Mack Publishing Co, , Easton, PA, 1990 que se incorpora en la presente mediante la referencia. Las dosis terapéuticas generalmente serán en el intervalo de 0.1 a 100 mg/kg al peso del paciente por día, preferiblemente de 0.5-20 mg/kg por día, con la dosis exacta determinada mediante un médico de acuerdo con los estándares aceptados, tomando en cuenta la naturaleza y severidad de las condiciones que se van a tratar, características del pacientes, etc. La determinación de la dosis se encuentra dentro del alcance del experto en el arte. Las proteínas se administrarán comúnmente durante un periodo de hasta 28 días después de la quimioterapia o trasplante de médula ósea o hasta que se obtiene un conteo de plaqueta de >20,000/mm3, preferiblemente >50,000/mm3. Más comúnmente, las proteínas se administrarán durante una semana o menos, durante un periodo de uno a tres días. En general, una cantidad terapéuticamente efectiva de los anticuerpos solubles IL-22RA o anti-IL22RA de la presente invención es una cantidad suficiente para producir un incremento significativamente clínico en la proliferación y/o diferenciación de las células progenitoras linfoides o mieloides que se manifestarán en un incremento en los niveles de circulación de las células maduras (por ejemplo, plaquetas o neutrófilos) . El tratamiento del trastorno de las plaquetas se continuará de esta manera hasta que se alcance un conteo de plaquetas de al menos de 20,000/mm3, preferiblemente 50,000/mm3. Los anticuerpos IL-22RA solubles o anti-IL-22RA de la presente invención pueden administrarse también en combinación con otras citosinas tales como IL-3, -6 y -11; factor de células madre, eritropoyetina, G-CSF y GM-CSF. Dentro de los regímenes de la terapia de combinación, la dosis diaria de otras citosinas será general: EPO, 150 U/kg, GM-CSF, 5-15 lg/kg, IL-3, 1.5 lg/kg y G-CSF, 1-25 lg/kg. La combinación de una terapia con EPO por ejemplo, se indica en pacientes anémicos con niveles de EPO bajos. Generalmente, la dosificación de IL-22RA soluble administrada (o análogo IL-22RA o proteína de fusión) o anticuerpos anti-IL-22RA variarán dependiendo de los factores tales como la edad del paciente, peso, estatura, sexo, condiciones médicas generales e historia médica previa. Típicamente, es deseable proporcionar al receptor una dosificación de anticuerpos anti-IL-22RA o IL-22 A solubles que se encuentran en el intervalo de alrededor de 1 pg/kg a 10 mg/kg (cantidad del agente/peso corporal del paciente, aunque se pueden administrar también dosificaciones más altas o inferiores cuando las circunstancias lo dicten. La administración de anticuerpos anti-IL-22RA o IL-22RA solubles a un sujeto puede ser intravenosa, intraarterial, intraperitoneal, intramuscular, subcutánea, intrapleural, intratecal, mediante una perfusión a través de un catéter regional, o mediante una inyección intralesional directa. Cuando se administran proteínas terapéuticas mediante inyecciones, la administración puede ser mediante infusión continua o mediante bolos múltiples o sencillos . Rutas adicionales de administración incluyen oral, mucosal-membrana, pulmonar y transcutánea. El suministro oral es adecuado para microesferas de poliéster, microesferas de zein, microesferas proteinoides, microesferas policianoacrilatos y sistemas basados en lipidos (ver por ejemplo, DiBase y Morrel, "Oral Delivery of icroencapsulated proteins" en Protein Delivery: Physical Systems, Sanders y Hendren (eds) , páginas 255-288 (Plenum Press 1997) ) . La posibilidad de un suministro intranasal se ejemplifica mediante una modalidad de administración por insulina (ver por ejemplo, Hinchcliffe y Illum, Adv. Drug Dellv. Rev. 35:199 (1999) ) . Las partículas secas o líquidas que comprenden IL-22RA pueden prepararse e inhalarse con la ayuda de dispersores de polvo seco, generadores de aerosol líquido o nebulizadores (por ejemplo, Petit y Gombotz, TIBTECH 16:343 (1998); Patton et al., Adv. Deliv. Rev. 35:235 (1999)). Esta metodología se ilustra mediante el sistema de administración de la diabetes AERX, qué es un inhalador portátil que suministra insulina aerosolizada en los pulmones . Los estudios han demostrado que las proteínas tan grandes como 48,000 kDa han sido suministradas a través de la piel en concentraciones terapéuticas con la ayuda de ultrasonido de baja frecuencia que ilustra la posibilidad de una administración subcutánea (Mitragotri et al., Science 269:850 (1995)) . El suministro transdérmico usando electroporación proporciona otros medios para administrar una molécula que tiene actividad de enlace (Potts et al., Pharm. Biotechnol. 10:213 81997)) . Una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-IL-22RA o IL-22RA soluble puede formularse de acuerdo con los métodos conocidos para preparar composiciones farmacéuticamente útiles, por 'medio de las cuales las proteínas terapéuticas se combinan en una mezcla con un portador farmacéuticamente aceptable . Se dice que una composición es un "portador farmacéuticamente aceptable" si su administración puede tolerarse por un paciente receptor. La solución salina amortiguada con fosfato es un ejemplo de un portador farmacéuticamente aceptable . Otros portadores adecuados son bien conocidos por aquellos expertos en el arte. Ver por ejemplo, Gennaro (ed. ) , Remingto's Pharmaceutical Sciences, 19 th edición (Mack Publishing Company 1995) . Para los propósitos de la terapia, las moléculas de los anticuerpos anti-IL-22RA o IL-22RA solubles y un portador farmacéuticamente aceptable se administra a un paciente en una cantidad terapéuticamente aceptable. Se dice que una combinación de una molécula terapéutica de la presente invención y un portador farmacéuticamente aceptable que va a ser administrada en una "cantidad terapéuticamente aceptable" si la cantidad administrada es fisiológicamente significativa, ün agente es fisiológicamente significativo si su presencia resulta en un cambio detectable en la fisiología de un paciente receptor. Por ejemplo, un agente usado para tratar la inflamación es fisiológicamente significativo su presencia alivia la respuesta inflamatoria. Una composición farmacéutica que comprende IL-22RA (análogo IL-22RA o proteína de fusión) o neutraliza al anticuerpo anti-IL-22RA puede ser suministrada en forma líquida en un aerosol o en forma sólida. Las formas líquidas se ilustran mediante soluciones inyectables y suspensiones orales. Ejemplo de formas sólidas incluyen cápsulas, tabletas y formas de liberación controlada. La forma más reciente se ilustra mediante bombas miniosmóticas e implantes (Bremen et al., Pharm. Biotechnol. 10:239 (1997); Ranade, "Implants in Drug Delivery" , en Drug Delivery Systems, Ranade y Hollinger (eds.), páginas 95-123 (CRC Press 1995); Bremer et al., "Protein Delivery with Infusión Pumps" , en Protein Delivery: Physical Systems, Sanders y Hendren (eds.), páginas 239-254 (Plenum Press 1997), Yewey et al., "Delivery of Proteins from a Controlled Reléase Injectable Implant" en Protein Delivery: Physical Systems, Sanders y Hendren (eds.) páginas 93-117 (Plenum Press 1997)). Los liposomas proporcionan un medio para suministrar polipéptidos terapéuticos a un sujeto intravenosamente, intraperitonealmente, intratecalmente, intramuscularmente, subcutáneamente o vía la administración oral, inhalación o administración intranasal. Los liposomas son vesículas microscópicas que consisten de una o más bicapas lípidas que rodean a los compartimentos acuosos (ver generalmente, Bakker-Woudenberg et al., Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 12 {Suppl. 1) :S61 (1993), im, Drug 46:618 (1993) y Ranade, "Site Specific Drug Delivery Using Liposomes as Carriers" , en Drug Deliveru Systems, Ranade y Hollinger (eds.) páginas 3-24 (CRC Press 1995) ) . Los liposomas son similares en composición a las membranas celulares y como resultado, los liposomas pueden administrarse de manera segura y son biodegradables . Dependiendo del método de preparación, los liposomas pueden ser unilamelares o multilamelares, y los liposomas pueden variar en tamaño con diámetros que se encuentran en un intervalo de 0.02 µp? o mayor que 10 µp?. Una variedad de agentes pueden ser encapsulados en los liposomas :partición de agentes hidrofóbicos en los agentes hidrofóbicos en las bicapas y partición de agentes hidrofílicos dentro de los espacios acuosos internos (ver por ejemplo, Machy et al., Liposomes In Cell Biology And Pharmacology (John Libbey 1987) , y Ostro et al., American J. Hosp.. Pharm. 45:1576 (1989)). Por otra parte, es posible controlar la disponibilidad terapéutica del agente encapsulado haciendo variar el tamaño de los liposomas, el número de bicapas, la composición lípida, así como las características de carga y superficie de los liposomas . Los liposomas pueden adsorber virtualmente cualquier tipo de célula y después liberarla lentamente del agente encapsulado. Alternativamente, un liposoma absorbido puede ser endocitosado mediante células que son fagocíticas. La endocitosis se continua mediante la degradación intralisosomal de los lípidos , liposomales y la liberación de los agentes encapsulados (Scherphof et al., Ann. N.Y. Acad. Sci. 446:368 (1985) ) . Después de la administración intravenosa, los liposomas pequeños (0.1 a 1.0 µp?) se absorben típicamente por las células del sistema reticuloendotelial, localizado principalmente en el hígado y bazo, considerando que los liposomas mayores que 3.0 µt? se depositan en los pulmones. La absorción preferente de los liposomas más pequeños mediante las células del sistema reticuloendotelial se han usado para suministrar agentes quimioterapéuticos en los macrófagos y tumores del hígado. El sistema reticuloendotelial puede ser entrampado mediante varios métodos que incluyen saturación con grandes dosis de partículas de liposomas o inactivación de macrófagos selectiva mediante medios farmacológicos (Claassen et al., Biochim. Biophys. Acta 802:428 (1984)). Además, la incorporación de fosfolípidos derivados de polietilen glicol o glicolípidos en las membranas de los liposomas que han demostrado resultar en una absorción significativamente reducida mediante el sistema reticuloendotelial (Alien et al., Biochim. Biophys. Acta 1068:133 (1991); Alien et al., Biochim. Biophys. Acta 1150:9 (1993)). Los liposomas pueden prepararse también para dirigirse a las células particulares u órganos haciendo variar la composición de fosfolípidos o insertando receptores o ligandos en los liposomas. Por ejemplo, los liposomas preparados con un alto contenido de tensoactivos no iónicos se han usado para dirigirse al hígado (Hayakawa et al., Patente Japonesa 04-244,018; Kato et al., Biol. Pharm. Bull. 16:960 (1993)). Estas formulaciones se prepararon mezclando fosfatidilcolina de soya, a-tocoferol y aceite de ricino hidrogenado etoxilado (HCO-60) en metanol, que concentra la mezcla bajo vacío y después reconstituye la mezcla con agua. Una formulación liposomal de dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) con una mezcla de esterilglucósido derivado de soya (SG) y colesterol (Ch) ha demostrado dirigirse al hígado (Shimizu et al., Biol. Pharm. Bull. 20: 881 (1997) ) .

Alternativamente, varios ligandos de direccionamiento se ligan a la superficie de los liposomas tales como anticuerpos, fragmentos de anticuerpos, carbohidratos, vitaminas y proteínas de transporte. Por ejemplo, los liposomas pueden modificarse con derivados galactosilípidos del tipo ramificados para dirigirse a los receptores de asialoglicoproteína (galactosa) , que se expresan exclusivamente en la superficie de las células del hígado (Kato y Sugiyama, Crit. Rev. Ther. Drug. Carrier Syst. 24:287 (1997); Muráis et al., Biol. Pharm. Bull. 20:259 (1997)). De igual manera, Wu et al., Hepatology (1998), han demostrado que los liposomas de etiquetación con asialofetuin conducen a la vida media de un plasma con liposomas reducidos y absorción ampliamente mejorada de liposomas etiquetadas con asialofetuin mediante los hepatocitos. Por otra parte, la acumulación hepática de los liposomas comprende derivados de galastosilípidos del tipo ramificados que pueden ser inhibidos por la preinfección de asialofetuin (Murahashi et al., Biol. Pharm. Bull. 20:259 (1997)). Los liposomas de albúmina de suero humanos poliaconitilados proporcionan otra metodología para dirigirse a las células del hígado ( amps et al . , Proc . Nat'l Acad. Sci . USA 94:11681 (1997)). Por otra parte, Geho, et al., Patente norteamericana No. 4,603,044 describe un sistema de suministro de las vesículas de los liposomas dirigido a los hepatocitos, que tiene una especificidad para los receptores hepatobiliares asociados con las células metabólicas especializadas del hígado. En una metodología más general con respecto al direccionamiento de los tejidos, las células de direccionamiento se preetiquetan con anticuerpos biotinilados específicos para un ligando expresado mediante las células objetivo (Harasym et al., Adv. Drug Deliv. Rev. 32:99 (1998)). Después de la eliminación del plasma del anticuerpo libre, se administran los liposomas conjugados con estreptavidina. En otra mitología, los anticuerpos de direccionamiento se unen directamente a los liposomas (Harasym et al, Adv. Drug Deliv. Rev. 32:99 (1998) ) . Los polipéptidos y anticuerpos pueden ser encapsulados dentro de los liposomas usando técnicas estándar de microencapsulación de proteínas (ver por ejemplo, Anderson et al., Infect. Immun. 31:1099 81981), Anderson et al., Cáncer Res. 50:1853 (1990) Y Cohén et al., Biochem. Biophys. Acta 1063:95 (1991), Alving et al. "Preparation and Use of Liposomes in Immunological Studies" en Liposome Technoloy, 2 edición, Vol. III, Gregoriadis (ed.), página 317 (CRC Press 1993), Wassef et al., Meth. Enzymol . 149:124 (1987)). Como se mencionó arriba, los liposomas terapéuticamente útiles pueden contener una variedad de componentes . Por ejemplo, los liposomas pueden comprender derivados lípidos de poli(etilen glicol) (Alien et al., Biochim. Biophys. Acta 1150:9 (1993)). 195 Las microesferas de polímeros degradables se han diseñado para mantener niveles sistémicos elevados de proteínas terapéuticas. Las microesferas se preparan a partir de polímeros degradables tales como poli (lactido-co-glicolido) (PLG) , polianhídridos , poli (orto ásteres), polímeros de etilvinil acetato no biodegradables cuyas proteínas se atrapan en los polímeros (Gombotz y Pettit, Bioconjugate Chem. 6:332 (1995); Ranade, "Role of Polyroers in Drug Delivery, " en Drug Delivery Systems, Ranade y Hollinger (eds.), páginas 51-93 (CRC Press 1995); Roskos y Maskiewicz. "Degradable Controlled Reléase Systems üseful for Protein Delivery" , en Protein ¦Delivery: Physical Systems, Sanders y Hendren (eds.) páginas 45-92 (Plenum Press 1997); Bartus et al., Science 281:1161 (1998); Putney y Burke, Nature Biotechnology 16:153 81998); Putney, Curr. Opin. Chem. Biol. 2:548 (1998). Las nanoesferas revestidas con (PEG) polietilen glycol proporcionan también portadores para la administración intravenosa de proteínas terapéuticas (ver por ejemplo, Gref et al., Pharm. Biotechnol. 10:167 (1997) ) . La presente invención contempla también polipéptidos modificados químicamente que tienen actividad IL-22RA de enlace tal como receptores solubles IL-22RA monoméricos, homodiméricos , heterodiméricos o multiméricos y antagonistas IL-22RA, por ejemplo, anticuerpos anti-IL-22RA o polipéptidos de enlace, o neutralizar anticuerpos anti-IL-22RA en donde un polipéptido se liga con un polímero, como se discutió arriba.

Otras formas de dosificación pueden ser vislumbradas por aquellos expertos en el arte, como se muestra por ejemplo por Ansel y Popovich, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 5ta edición (Lea & FEbiger 1990) , Gennaro (ed.), Reminston's Pharmaceutica.1 Sciences, 19 edición (Maca Publishing Company 1995) y mediante Ranade y Hollinger, Drug Delivery Systems (CRC Press 1996) . Como una ilustración, las composiciones farmacéuticas pueden ser suministradas como un kit que comprende un contenedor que comprende un polipéptido con un dominio extracelular IL-22RA, por ejemplo, receptores IL-22RA monoméricos, homodiméricos , heterodiméricos o multiméricos solubles o un antagonista IL-22RA (por ejemplo, un anticuerpo o un fragmento del anticuerpo que enlaza a un polipéptido IL-22RA, o neutralizar a un anticuerpo anti-IL-22RA) . Los polipéptidos terapéuticos pueden proporcionarse en la forma de una solución inyectable para una dosis simple o múltiple, o como un polvo estéril que se reconstituirá antes de la inyección. Alternativamente, tal kit puede incluir un dispersor de polvo seco, generador de aerosol líquido o nebulizador para la administración de un polipéptido terapéutico. Tal kit puede comprender además información escrita o indicaciones para el uso de una composición farmacéutica. Por otra parte, tal información puede incluir una instrucción en la que la composición IL-22RA se contraindica en pacientes con hipersensibilidad conocida a IL-22RA. Una composición farmacéutica que comprende anticuerpos anti-IL-22RA o moléculas de enlace (o fragmentos de anticuerpos anti-IL-22RA, fusiones del anticuerpo, anticuerpos humanizados y similares) , o un receptor soluble IL-22RA pueden ser suministrados en forma líquida, en un aerosol o en forma sólida. Las formas líquidas se ilustran mediante soluciones inyectables, aerosoles, gotas, soluciones topológicas y suspensiones orales. Ejemplos de formas sólidas incluyen cápsulas, tabletas y formas de liberación controlada. La última forma se ilustra mediante las bombas miniosmóticas e implantes (Bremen et al., Pharm. Biotectinol . 10:239 (1997); Ranade, "Implants in Drug Delivery" in Drug- Delivery Systems, Ranade y Hollinger (eds.) páginas 95-123 (CRC Press 1995); Bremer et al., "Protein Delivery with Infusión Pumps" en Protein Delivery: Physical Systems, Sanders y Hendren (eds.), páginas 93-117 (Plenum Press 1997) ) . Otras formas sólidas incluyen cremas, pastas, otras aplicaciones topológicas y similares . Los liposomas proporcionan un medio para suministrar polipéptidos terapéuticos a un sujeto intravenosamente, intraperitonealmente, intratecalmente, intramuscularmente, subcutáneamente, o vía de administración oral, inhalación o administración intranasal . Los liposomas son vesículas microscópicas que consisten de una o más bicapas lipidas que rodean compartimientos acuosos (ver generalmente Bakker-Woudenberg et al., Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 12 (Suppl. 1):S61 (1993), Kim, Drugs 46:618 (1993), y Ranade, "Site Specxfic Drug Delivery Using Liposomes as Carriers, " en Drug Delivery Systems, Ranade y Hollinger (eds.), páginas 3-24 (CRC Press 1995)). Los liposomas son similares en composición a las membranas celulares y como resultado, los liposomas pueden ser administrados de manera segura y son biodegradables . Dependiendo del método de preparación, los liposomas pueden ser unilamelar o multilamelar, y los liposomas pueden variar en tamaño con diámetros que van de un intervalo de 0.02 µp? a mayor de 10 um. Una variedad de agentes pueden ser encapsulados en los liposomas : partición de agentes hidrofóbicos en las bicapas y partición de agentes hidrofilicos dentro de los espacios acuosos internos (ver por ejemplo, Machy et al., Liposomes In Cell Biology And Plial-macology (John Libbey 1987), y Ostro et al., American J. Hosp. Pharm. 45:1576 (1989)). Por otra parte, es posible controlar la disponibilidad terapéutica del agente encapsulado haciendo variar el tamaño de los liposomas, el número de bicapas, composiciones lipidas así como las características de carga y superficie de los liposomas . Los liposomas pueden adsorber virtualmente cualquier tipo de célula y después liberarse lentamente al agente encapsulado. Alternativamente, un liposoma absorbido puede ser endocitosado por células que son fagocíticas . Alternativamente, un liposoma absorbido puede ser endocitosado por células que son fagocíticas. La endocitosis se continua mediante la degradación intralisosomal de lípidos liposomales y liberación de los agentes encapsulados (Scherphof et al., Ann. N. Y. Acad. Sci. 446:368 (1985)) . Después de la administración intravenosa, los liposomas pequeños (0. 1 a 1.0 µ??) se absorben típicamente mediante las células del sistema reticuloendotelial, localizado principalmente en el hígado y el bazo, considerando que los liposomas mayores que 3.0 µ?? se depositan en el pulmón. La absorción preferencial de liposomas más pequeños por células del sistema reticuloendotelial ha sido usada para suministrar agentes quimioterapéuticos en macrófagos y en tumores del hígado. El sistema reticuloendotelial puede ser entrampado mediante varios métodos que incluyen saturación con grandes dosis de partículas de liposomas, o inactivación del macrófago selectivo mediante medios farmacológicos (Claassen et al., Biochim. Biophys. Acta 802:428 (1984)) . Además, la incorporación de fosfolípidos derivados de glicolípidos o polietilen glicol en los liposomas de la membrana ha demostrado resultar en una absorción reducida significativamente mediante el sistema reticuloendotelial (Alien et al., Biochim. Biophys. Acta 1068:133 (1991); Alien et al., Biochim. Biophys. Acta 1150:9 (1993)). Los liposomas pueden prepararse para dirigir las células particulares u órganos variando la composición de fosfolípidos o insertando los receptores o ligandos en los liposomas . Por ejemplo, los liposomas preparados con un alto contenido de un tensoactivo no iónico han sido usados para dirigirse al hígado (Hayakawa et al., patente Japonesa 04- 244, 018; ato efc al., Biol. Pharm. Bu.ll. 16:960 (1993)). Estas formulaciones se prepararon mezclando fosfatidilcolina de soya, a-tocoferol y aceite de castor hidrogenado etoxilado (HCO-60) en metanol, concentrando la mezcla bajo vacio, y después reconstituir la mezcla con agua. Una formulación liposomal de dipalmitoilfofatidilcolina /DPPC) con una mezcla de esterilglucosido derivado de soya (SG) y colesterol (Ch) han demostrado también dirigirse al hígado (Shimizu et al., Biol. Phar77Z. Bull. 20:881 (1997)). Alternativamente, varios ligandos de direccionamiento pueden ligarse a la superficie de los liposomas, tales como los anticuerpos, fragmentos de los anticuerpos, carbohidratos, vitaminas y proteínas de transportes. Por ejemplo, los liposomas pueden modificarse con derivados galactosilípidos del tipo ramificado para dirigirse a los receptores de asialoglicoproteína (galactosa) , que son expresados exclusivamente en la superficie de las células del hígado ( ato y Sugiyama, Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst. 14:287 (1997); Murahashi et al.f Biol. Pharm. Bull. 20:259 (1997)). De igual manera, Wu et al., Hepatologv 27:772 1998), ha demostrado que la etiquetación de los liposomas con asialofetuin conducen a una vida media del plasma de liposomas reducidos y mejoran ampliamente la absorción de liposomas etiquetados con asialofetuin mediante los hepatocitos . Por otra parte, la acumulación hepática de los liposomas que comprende derivados galactosilípidos del tipo ramificado pueden ser inhibidos mediante la preinfección de asialofetuin (Murahashi et al., Biol . Pharm . Bull . 20:259 (1997)). Los liposomas de albúmina del suero humano poliaconitilado proporcionan otra metodología para dirigir los liposomas a las células del hígado (Kamps et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 94:11681 (1997)) . Por otra parte, Geho et al. Patente norteamericana No. 4,603,044, describe un sistema de suministro en las vesículas de los liposomas dirigido por los hepatocitos, que se han especificado para los receptores hepatobiliares asociados con las células metabólicas especializadas del hígado. En una metodología más general para el direccionamiento del tejido, las células objetivo se preetiquetan con anticuerpos biotinilados específicos para un ligando expresados mediante la célula objetivo (Harasym et al., Adv. Drug- Deliv. Rev. 32:99 (1998)). Después de la eliminación del plasma del anticuerpo libre, se administran los liposomas conjugados con estreptavidina. En otra metodología, los anticuerpos de direccionamiento se unen directamente a los liposomas (Harasym et al., Adv. Drug Deliv. Rev.32:99 (1998)). Los anticuerpos que neutralizan a los anti-IL-22RA y moléculas de enlace con actividad de enlace con IL-22 o IL-20, o receptor IL-22RA soluble pueden ser encapsulados dentro de los liposomas usando técnicas estándar de microencapsulación de proteínas (ver por ejemplo, Anderson et al., Infect. Immun. 31:1099 (1981), Anderson et al., Cáncer Res. 50:1853 (1990), y Cohén et al., Biochim. Biophys. Acta 1063 : 95 (1991), Alving et al. "Preparation and Use of Liposomes in Immunological Studies," en Liposome Technology, 2da edición, Vol. III, Gregoriadis (ed.), página 317 (CRC Press 1993), assef et al., Meth. Enzymol. 149:124 (1987)) . Como se observó arriba, los liposomas terapéuticamente útiles pueden contener una variedad de componentes. Por ejemplo, los liposomas pueden comprender derivados de lípidos de poli(etilen glicol) (Alien et al., Biochim. Biophys. Acta 1150:9 (1993)) . Las microesferas del polímero degradable se han diseñado para mantener niveles sistémicos altos de proteínas terapéuticas . Las microesferas se preparan a partir de polímeros degradables tales como poli (lacturo-co-glicólido) (PLG) , polianhidridos, poli (orto ásteres) , polímeros de etilvinil acetato no biodegradable en los cuales se atrapan las proteínas en el polímero (Gombotz y Pettit, Bioconjugate Chem. 6:332 (1995); Ranade, "Role of Polymers in Drug Delivery, " en Drug Oelivery Systems, Ranade and Hollinger (eds.), páginas 51-93 (CRC Press 1995); Roskos y Maskiewicz, "Degradable Controlled Reléase Systems Useful for Protein Delivery, " en Protein Delivery: Physical Systems, Sanders y Hendren (eds.), páginas 45-92 (Plenum Press 1997); Bartus et al., Science 281:1161 (1998); Putney y Burke, Nature Biotechnology 16:153 (1998) ; Putney, Curr. Opin. Chem. Biol . 2:548 (1998)) . Las nanoesferas revestidas con polietilen glicol (PEG) pueden proporcionar también portadores para la administración intravenosa de las proteínas terapéuticas (ver por ejemplo, Gref et al., Pharm. Biotechnol . 10.167 (1997)) . La presente invención contempla también al anticuerpo Anti-IL-22RA modificado químicamente o moléculas de enlace, por ejemplo, anticuerpos anti-Anti-IL-22RA o el receptor soluble IL-22RA ligado con un polímero, como se discutió arriba . Otras formas de dosificación pueden ser inventadas por aquellos expertos en el arte, como se muestra por ejemplo en Ansel y Popovich, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delively Systems, 5 edición (Lea & Febiger 1990) , Gennaro (ed.), Remington's Pharmaceutical Sciences, 19 edición (Mack Publishing Company 1995) , y por Ranade y Hollinger, Drug Delivery Systems (CRC Press 1996) .

La presente invención contempla composiciones de anticuerpos anti-IL-22, métodos y usos terapéuticos que comprenden un anticuerpo, péptido o polipéptidos descritos en la presente. Tales composiciones pueden comprender además un portador. El portador puede ser un portador orgánico e inorgánico convencional. Ejemplos de portadores incluyen agua, solución amortiguada, propilen glicol, macrogol, aceite de sésamo, aceite de maíz y similares. 12. Producción de ratones transgénicos Se demostró que la sobreexpresion de ambos, IL-20 e IL-22 en lesiones psoriáticas, se sugiere que tanto IL-20 como IL-22 están involucradas en la psoriasis humana. Por otra parte, como se describió en la presente, la sobreexpresion de IL-20 e IL-22 en ratones transgénicos demostró que el espesamiento epidérmico y la complicación de la célula inmune son indicativos de un fenotipo psoriático; además de una inyección de IL-22 en ratones normales que mostraron un espesamiento epidérmico y una complicación de la célula inmune indicativo de un fenotipo psoriático que se extirpó mediante el receptor antagonista zcytor (IL-22RA2) . Tales datos in vivo sugieren que la IL-22 pro-inflamatoria está involucrada en la psoriasis. Como tal, los antagonistas para la actividad de IL-22, tales como los anticuerpos monoclonales y que neutralizan anti-humano-IL-22RA de la presente invención, así como receptores IL-22RA solubles, son útiles en el tratamiento 205 terapéutico de las enfermedades inflamatorias, particularmente como antagonistas a IL-22 e IL-20 en el tratamiento de la psoriasis. Por otra parte, los agentes que se enlazan para, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar IL-22 o ambos IL-20 y actividad de IL-22 tales como los anticuerpos monoclonales y que neutralizan al anti-human-IL-22RA de la presente invención, así como receptores IL-22RA solubles, son útiles en el tratamiento terapéutico- de otras enfermedades inflamatorias, por ejemplo como antagonistas para IL-22 o ambas IL-20 e IL-22 en el tratamiento de la dermatitis atópica, IBD. colitis, endotoxemia, artritis, artritis reumatoide y artritis soriática, enfermedad respiratoria en adultos (ARD) , cloque séptico, paro de órganos múltiple, lesión de los pulmones inflamatoria tales como asma o bronquitis, neumonía bacteriana, soriasis, eczema, dermatitis atópica y por contacto, enfermedad de los huesos inflamatoria tales como colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn y similares . Dentro de un aspecto, la presente invención proporciona un método para producir un anticuerpo para un polipéptido que comprende: inocular un animal con un polipéptido seleccionado del grupo que consiste de: un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a. 60 (lie) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8, un polipeptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 69 (Glu) a 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 69 (Glu) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 69 (Glu) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO : 8 , un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 81 (Cys) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 81 (Cys) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, y un polipéptido que consiste deresiduos de aminoácidoss 96 (Lys) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, en donde el polipéptido produce una respuesta inmune en el animal para producir el anticuerpo, y aislar el anticuerpo del animal, en donde el anticuerpo se enlaza específicamente a un polipéptido IL-20 (SEQ ID NO: 8) . Dentro de una modalidad, se proporciona el método descrito arriba, en donde el anticuerpo producido por el método inhibe la actividad pro-inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8). Dentro de otra modalidad, se proporciona el método descrito arriba, en donde el anticuerpo reduce la actividad pro-inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8). Dentro de otra modalidad, se proporciona el método descrito arriba, en donde el anticuerpo neutraliza la interacción de IL-20 (SEQ ID NO: 8) con IL-22RA (SEQ ID NO: 2) . Específicamente, la neutralización mediante los anticuerpos se mide demostrando la neutralización de IL-20 (SEQ ID NO: 8) en un ensayo in vitro de neutralización basado en células . Dentro de un segundo aspecto, la presente invención proporciona un anticuerpo producido mediante el método descrito arriba, que liga a un polipéptido de la SEQ ID NO: 8. Dentro de una modalidad, se proporciona el anticuerpo descrito arriba, en donde el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste de: (a) un anticuerpo policlonal, (b) un anticuerpo monoclonal murino, (c) un anticuerpo humanizado derivado de (b) , (d) un fragmento del anticuerpo, y € un anticuerpos monoclonal humano. Dentro de una modalidad, el anticuerpo comprende además un radionúclido, enzima, substrato, cofactor, marcador fluorescente, marcador quimioluminiscente, etiqueta de un péptido, partículas magnéticas o toxinas. Dentro de otra modalidad, el anticuerpo comprende además una PEGilación. Dentro de un tercer aspecto, la presente invención proporciona un anticuerpo o fragmento de un anticuerpo que se enlaza a un polipéptido que comprende una secuencia de residuos de aminoácidoss como se muestra en la SEQ ID NO: 8, y reduce la actividad pro-inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8). Dentro de una modalidad se proporciona un anticuerpo o fragmento del anticuerpo que reduce la actividad pro-inflamatoria de ya sea IL-20 (SEQ ID NO: 8) o IL-22 (SEQ ID NO: 6). Dentro de una modalidad se proporciona el anticuerpo descrito arriba, en donde el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste de: (a) un anticuerpo policlonal, (b) un anticuerpo monoclonal murino, (c) un anticuerpo humanizado derivado de (b) , (d) un fragmento del anticuerpo, y € un anticuerpo monoclonal. Dentro de una modalidad, el anticuerpo comprende además un radionuclido, enzimas, substratos, cofactor, marcador fluorescente, marcador quimioluminiscente, etiqueta de un péptido, partículas magnéticas o toxinas. Dentro de otra modalidad, el anticuerpo comprende además PEGilación. Dentro de un cuarto aspecto, la presente invención proporciona un método para reducir o inhibir la proliferación inducida por IL-20 o diferenciación de células hematopoyéticas y progenitoras de células hematopoyéticas que comprenden cultivar médula ósea o células sanguíneas periféricas con una composición que comprende una cantidad de un anticuerpo como el descrito arriba, suficiente para reducir la proliferación o diferenciación de las células ematopoyéticas en la médula ósea o células sanguíneas periféricas comparadas con la médula ósea o las células sanguíneas periféricas cultivadas en ausencia del anticuerpo. Dentro de una modalidad, las células hematopoyéticas y las células progenitoras hematopoyéticas son células linfoides . Dentro de otra modalidad, las células linfoides son macrófagos o células T. Dentro de un quinto aspecto, la presente invención proporciona un método para reducir la inflamación inducida por IL-20 que comprende administrar a un mamífero con inflamación, una cantidad de una composición de un anticuerpo como el descrito arriba, suficiente para reducir la inflamación. Dentro de un sexto aspecto, la presente invención proporciona un método para suprimir una respuesta inflamatoria en un mamífero con una infamación que comprende: (1) determinar un nivel del suero de la proteína A amiloide; (2) administrar una composición que comprende un anticuerpo de acuerdo con la reivindicación 3 en un vehículo farmacéutico, (3) determinar un nivel de post administración del suero de la proteína A amiloide, (4) comparar el nivel del suero de la proteína A amiloide en la etapa (1) para el nivel del suero de la proteína A amiloide en la etapa (3) , en donde una carencia de incremento o una disminución en el nivel del suero de la proteina A amiloide es indicativo de la supresión de una respuesta inflamatoria. Dentro de un séptimo aspecto, la presente invención proporciona un método de suprimir una respuesta inflamatoria en un mamífero con inflamación que comprende: (1) determinar un nivel de proteína A amiloide de suero; (2) administrar una composición que comprende un anticuerpo de acuerdo a la reivindicación 5 en un vehículo farmacéuticamente aceptable; (3) determinar un nivel de post administración de la proteína A amiloide de suero; (4) comparar el nivel del suero de la proteína A amiloide en la etapa (1) para el nivel del suero de la proteína A amiloide en la etapa (3) , en donde una carencia de incremento o una disminución en el nivel del suero de la proteína A amiloide es indicativo de la supresión de una respuesta inflamatoria. Dentro de un octavo aspecto, la presente invención proporciona un método de supresión de . una respuesta inflamatoria en un mamífero con inflamación que comprende: (1) determinar un nivel del suero de la proteína A amiloide, (2) administrar una composición que comprende un anticuerpos de acuerdo con la reivindicación 16 en un vehículo farmacéuticamente aceptable, (3) determinar un nivel de post administración del suero de la proteína A amiloide, (4) comparar el nivel del suero de la proteína A amiloide en la etapa (1) para el nivel del suero de la proteína A amiliode en la etapa (3) , en donde xana carencia o un incremento en el nivel de la proteína A amiloide es indicativo de la supresión de una respuesta inflamatoria. Dentro de un noveno aspecto, la presente invención proporciona un método para tratar a un mamífero afligido con una enfermedad inflamatoria en la que IL-20 juega un papel, que comprende administrar un IL-20 antagonista al mamífero tal que la inflamación se reduce, en donde el antagonista que comprende un anticuerpo, fragmento del anticuerpo o un polipéptido de enlace liga específicamente a un polipéptido o un fragmento de un polipéptido de IL-22RA (SEQ ID NO: 3) o es polipéptido o fragmento de un polipéptido de IL-22RA (SEQ ID NO: 3) , y en donde la actividad inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8) se reduce. Dentro de una modalidad, la enfermedad es una enfermedad inflamatoria crónica. Dentro de otra modalidad, la enfermedad crónica se selecciona a partir de una enfermedad de los intestinos inflamatoria, colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn, artritis, dermatitis atópica o soriasis. Dentro de otra modalidad, la enfermedad es una enfermedad inflamatoria agua. Dentro de otra modalidad la enfermedad inflamatoria aguda se selecciona a partir de endotoxemia, septicemia, síndrome de choque tóxico o enfermedades infecciosas . Dentro de otra modalidad, el método proporciona el método descrito arriba, en donde el anticuerpo comprende además un radionuclido, enzima, substrato, cofactor, marcador fluorescente, marcador luminiscente, etiqueta de un péptido, partículas magnéticas, f rmaco o toxinas . Dentro de un décimo aspecto, la presente invención proporciona un anticuerpo que comprende un anticuerpo monoclonal que se liga a un epltopo de IL-20 humano (SEQ ID NO: 8) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 60 (lie) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 42 (lie) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 60 (lie) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 69 (Glu) a 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 69 (Glu) a 96 (Lys) de . la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 69 (Glu) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 81 (Cys) a 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8, un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 81 (Cys) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, y un polipéptido que consiste de residuos de aminoácidoss 96 (Lys) a 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8. Dentro de otra modalidad se proporciona el anticuerpo descrito arriba, en donde el anticuerpo reduce o neutraliza la actividad de IL-20 humana (SEQ ID NO: 8). Dentro de otra modalidad, el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste de: (a) un anticuerpo monoclonal murino, (b) un anticuerpo humanizado derivado de (a) , (c) un fragmento de un anticuerpo, y /d) un anticuerpo monoclonal humano. Dentro de otra modalidad, el anticuerpo comprende además PEGilación. Dentro de un onceavo aspecto, se proporciona un método para tratar una condición patológica en un sujeto asociada con la actividad IL-22RA que comprende administrar una cantidad efectiva del anticuerpo descrita arriba, para tratar de este modo la condición patológica. Dentro de una modalidad, la condición patológica es una condición inflamatoria crónica. Dentro de otra modalidad, la condición inflamatoria crónica se selecciona a partir de la enfermedad del intestino inflamatorio, colitis ulcerativa, enfermedad de Crohn, artritis, dermatitis atópica, o soriasis. Dentro de otra modalidad, la condición patológica es una condición inflamatoria aguda. Dentro de aún otra modalidad, la condición inflamatoria aguda se selecciona a partir de endotoxemia, septicemia, síndrome de choque tóxico o enfermedades infecciosas . La invención se ilustra además mediante los siguientes ejemplos no limitados. Ejemplo 1 Purificación del polipéptido IL-22RA2-FC4 de células BHK 570 transíectadas A menos que se señale de otra manera, todas las operaciones se efectuaron a 4°C. Se usó el siguiente procedimiento para purificación del polipéptido IL-22RA2 (polipéptido receptor soluble maduro de residuos 23 a 231 de SEQ NO: 13; polinucleótidos como se muestran en SEQ ID NO: 12) que contienen la fusión en la terminación C al Fc4 humano (SEQ ID NO: 14), designado IL-22RA2-Fc4. Alrededor de 16,500 mi de medios acondicionados de las células BHK 570 transfectadas con IL-22RA2-Fc4 se filtraron a través de un filtro esterilizador de 0.2 um y luego se complementaron con una solución de inhibidores de proteasa, hasta concentraciones finales de, 0.001 m leupeptina (Boerhinger-Mannheim, Indianapolis, IN) , 0.001 mM pepstatina (Boerhinger-Mannheim) y 0.4 mM Pefabloc (Boerhinger-Mannheim) . Una columna de proteína A50 Poros (20 mi volumen de lecho, Applied Biosystems) se lavó y empacó con 400 mi de PBS (Gibco/BRL) Los medios acondicionados complementados se pasaron por la columna con una relación de flujo de 15 mi/minuto, seguido por lavado con 800 mi de PBS (BRL/Gibco) . El IL-22RA2-Fc4 se eluyó de la columna con 0.1 M de glicina pH 3.0 y fracciones de 5 mi se recolectaron directamente sobre 0.5 mi de 2M Tris pH 7.8, para ajustar el pH final a 7.4 en las fracciones. El desempeño de la columna se caracterizó a través de la técnica "Western blot" de geles SDS-PAGE reductores de los medios de partida y circulación en la columna. La técnica "Western blot" usó anticuerpo anti-humano IgG HRP (Amersham) , que mostró una proteína inmunoreactiva a 60,000 Da en los medios de partida, con nada en la circulación, lo que sugiere una captura completa. Las fracciones eluidas de la proteína A50 se caracterizaron por reducción del gel SDS PAGE. Este gel mostró una banda intensamente teñida con Coomassie a 60,000 Da en las fracciones 3 a 11. Las fracciones 3 a 11 se acumularon.

El acumulado de elución de la Proteína A 50 se concentró de 44 mi a 4 mi usando un concentrador centrífugo de 30,000 Da Ultrafree Biomax (15 mi volumen, Millipore) . Una columna de filtración de gel Sephacryl S-300 (175 mi volumen del lecho; Pharmacia) se lavó con 350 mi de PBS (BRL/Gibco) . El acumulado concentrado se inyectó sobrer la columna con una relación de flujo de 1.5 ml/min, seguido por lavado con 225 mi de PBS (BRL/Gibco) . Los picos eluidos se recolectaron en fracciones de 2 mi.

Las fracciones eluidas se caracterizaron por geles SDS PAGE teñidos con plata, reductores y no reductores (Geno Technology) . Los geles SDS PAGE teñidos con plata reductores, mostraron una banda intensamente teñida a 60,000 Da en las fracciones 14-31, mientras que los geles SDS PAGE teñidos con plata no reductores mostraron una banda intensamente teñida a 160,000 Da en fracciones 14-31. Las fracciones 1-13 mostraron muchas bandas de diversos tamaños. Las fracciones 14- 31 se acumularon, concentraron hasta 22 mi usando un concentrador centrifugo de 30,000 Da Ultrafree Biomax (15 mi volumen, Millipore) Este concentrado se filtró a través de un filtro esterilizador de 0.2 µt? Acrodisc (Pall Corporation) . La concentración de proteína de las fracciones acumuladas concentradas se efectuó por análisis BCA (Pierce, Rockford, IL) y el material formó alícuotas, y se almacenó a -80°C de acuerdo con los procedimientos estándar. La concentración de las fracciones acumuladas fue 1.50 mg/ml. Ejemplo 2 Construcción de células BaF3 que expresan el receptor CRF2-4 (células BaF3/CRF2-4) y células BaF3 que expresan el receptor CRF2-4 con el receptor IL-22RA (células BaF3/CRF2-4/lL-22RA) Las células BaF3 que expresan el receptor de longitud completa CFR2-4, se construyeron usando 30µ de un vector de expresión CFR2-4, descrito a continuación. Las células BaF3 que expresan el recpetor CFR2-4 se designaron como BaF3 /CFR2 - 4. Estas células se usaron como un control, y además fueron transfectadas con el receptor de longitud completa IL-22RA (Patente de E.U.A. No. 5,965,704) y se usaron para construir una selección para la actividad de IL-22 como se describe a continuación. A. Construcción de células BaF3 que expresan el receptor CRF2-4 La secuencia de ADNc de longitud completa de CRF2-4 (No. Acceso al Genbank Z17227) se aisló de una biblioteca de ADNc de la linea celular Daudi, y luego se clonó en un vector de expresión pZP7P. BaF3, una línea celular pre-linfoide dependiente de la interleucina 3 (IL-3) derivada de la médula ósea murina (Palacios y Steinmetz, Cell 41:727-734, 1985; Mathey-Prevot et al., Mol. Cell. Biol . 6: 4133-4135, 1986), se mantuvo en medios completos (medio RPMI (JRH Bioscience Inc., Lenexa, KS) complementado con suero de becerro fetal inactivado por calor al 10%, 2 ng/ml de IL-3 murino (mIL-3) (R&D, Minneapolis, N) , 2 mM L-glutaMax-1™ (Gibco BRL) , 1 mM de piruvato de sodio (Gibco BRL), y antibiótico PSN (GIBCO BRL)). Previo a la electroporación, se preparó y purificó CRF2-4/pZP7P usando un kit Qiagen Maxi Prep (Qiagen) según las instrucciones del fabricante. Para la electroporación, las células BaF3 se lavaron una vez en medios RPMI libres de suero y luego se volvieron a suspender en medio RPMI libre de suero a una densidad celular de 107 células/ml . Un mi de células BaF3 resuspendidas se mezcló con 30 µg del ADN del plásmido CRF2-4/pZP7P y se transfirió a cámaras de electroporación desechables separadas (GIBCO BRL) . Después de una incubación por 15 minutos a temperatura ambiente se aplicaron dos choques en serie a las células (800 lFad/300V. ; 1180 lFad/300V.) suministrados por una aparato de electroporación (CELL-PORATOR™; GIBCO BRL) . Después de un tiempo de recuperación de 5 minutos, las células electroporadas se transfirieron a 50 mi de medios completos y colocaron en un incubador durante 15-24 horas (37 °C, 5% C02) . Las células luego se asentaron y volvieron a suspender en 50 mi de medios completos que contienen 2 9/p?1 de puromicina en un matraz T-162 para aislar el acumulado resistente a la puromicina. Los acumulados de las células BaF3 transfectadas , después denominadas células BaF3/CRF2-4, se ensayaron para su capacidad de señalización como se describe a continuación. Por otro lado, estas células fueron además transfectadas con el receptor IL-22RA como se describe a continuación. B. Construcción de células BaF3 que expresan receptores CRF2-4 y IL-22RA Células BaF3/CRF2-4 que expresan el receptor de longitud completa IL-22RA se construyeron como anteriormente, usando 30µg de un vector de expresión IL-22RA. Después de la recuperación, se seleccionaron los transfectantes usando 20C^g/ml de zeocina y 2µg/ml de puromicina. Las células BaF3/CRF2-4 que expresan el receptor IL-22RA se designaron como células BaF3/CRF2-4/lL-22RA. Estas células se usaron para seleccionar la actividad de IL-22 así como la actividad antagonista de IL-22RA2 aquí descrito. Ejemplo 3 Separación por exclusión para la actividad antagonista de IL- 22 usando células BaF3/CRF2-4/lL-22RA usando un Ensayo de Proliferación con Azul de Alamar A. Separación por exclusión para la actividad de IL-22 usando células BaF3/CRF2-4/IL-22RA usando un Ensayo de Proliferación con Azul de Alamar Se usó IL-22-CEE purificado (Ejemplo 4) para probar la presencia de actividad de proliferación como se describe a continuación. IL-22RA2-Fc4 purificado (Ejemplo 1) se usó para antagonizar la respuesta proliferativa del IL-22 en este ensayo como se describe a continuación. Células BaF3/CRF2-4/ L-22RA se asentaron y lavaron en los medios completos, (medio RPM (JRH Bioscience Inc., Lenexa, KS) complementado con suero de becerro fetal inactivado por calor al 10%, 2 ng/ml de IL-3 murino (mIL-3) (R&D, inneapolis, MN) , 2 mM L-glutaMax-1™ (Gibco BRL) , 1 mM de piruvato de sodio (Gibco BRL) , y antibiótico PSN (GIBCO BRL) ) , pero sin mIL-3 (después referido como "medios libres de mlL-3") · Las células giraron y se lavaron 3 veces para asegurar la eliminación de mIL-3. Las células luego se contaron en un hemocitómetro . Las células se colocaron en placas en un formato de 96 pozos a 5000 células por pozo en un volumen de 100 µ? por pozo usando los medios libres de mIL-3. La proliferación de las células BaF3/CRF2-4/IL-22RA se evaluó usando proteína IL-22-CEE diluida con medios libres de mIL-3 hasta concentraciones de 50, 10, 2, 1, 0.5, 0.25, 0.13, 0.06 ng/ml. 100 µ? de la proteína diluida se agregaron a las células BaF3/CRF2-4/IL-22RA. El volumen total de ensayo es de 200 µ?. Se incubaron las placas de ensayo a 37°C, 5% C02 durante 3 días tiempo en el cual Azul de Alamar (Accumed, Chicago, IL) se agregó a 20µ1/????. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 24 horas. Azul de Alamar da una lectura fluorométrica con base en el número de células vivas, y es así una medición directa de la proliferación celular en comparación con un control negativo. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 24 horas. Las placas se leyeron en un lector de placas Fmax™ (Molecular Devices Sunnyvale, CA) usando el programa SoftMax Pro, a longitudes de onda de 544 (Excitación) y 590 (Emisión) . Los resultados confirmaron la respuesta proliferativa dependiente de la dosis de las células BaF3/CRF2-4/lL-22RA para IL-22-CEE. La respuesta, cuando se mide, fue aproximadamente 15 veces sobre el respaldo en el extremo superior de 50ng/ml bajando hasta una inducción de 2 veces en el extremo inferior de 0.06ng/ml.

Las células BaF3 tipo silvestre, y células BaF3/CRF2-4 no proliferaron en respuesta a IL-22-CEE, demostrando que IL-22 es específico para el receptor heterodimérico de CRF2-4/IL-22RA. Con objeto de determinar si IL-22RA2 puede antagonizar la actividad de IL-22, el ensayo antes descrito se repitió usando IL-22RA2/FC4 purificado soluble. Cuando IL-22 se combinó con IL-221RA2 a lC^g/ml, la respuesta para IL-22 a todas las concentraciones se llevó al respaldo. El que la presencia de IL-22RA2 soluble genere ablación de los efectos proliferativos de IL-22, demuestra que es un antagonista potente del ligando IL-22. Este ensayo se puede usar para probar otros antagonistas de la actividad del IL-22 aquí descrito, tales como anticuerpos anti-IL-22RA. Ejemplo 4 Purificación de IL-22-CEE a partir de células BHK 570 A menos que se indique de otra manera, todas las operaciones se llevaron a cabo a 4°C. El siguiente procedimiento se usó para purificación del polipéptido IL-22 que contiene la etiqueta GluGlu (EE) en la terminación C (SEQ ID NO: 15; o SEQ ID NO: 16) . Medios acondicionados de las células BHK que expresan IL-22-CEE se concentraron con un cartucho en espiral Amicon S10Y3 sobre un ProFlux A30. Uns solución de un inhibidor de proteasa se agregó a los medios acondicionados concentrados hasta concentraciones finales de 2.5 mM de ácido etilendiaminatetraacético (EDTA, Sigma Chemical Co. St. Louis, O) , 0.003 mM de leupeptina (Boehlinger- Mannheim, Indianapolis , IN) , 0.001 mM de pepstatina (Boehringer-Mannheim) y 0.4 mM de Pefabloc (Boehringer-Mannheim) . Las muestras se retiraron para análisis y se congeló el volumen de la masa a -80°C hasta que comenzó la purificación. Las concentraciones totales de las proteínas objetivo de los medios acondicionados concentrados, se determinaron via SDS-PAGE y análisis "Western blot" con el anticuerpo anti-EE HRP conjugado. Se vació una columna de alrededor de 100 mi de anti-EE G- Sefarosa (preparada como se describe a continuación) en una columna de vidrio Waters AP-5, de 5 cm x 10 cm. La columna se empacó con flujo y se equilibró sobre un BioCad Sprint (PerSeptive BioSystems, Framingham, MA) con solución salina amortiguada de fosfato (PBS) pH 7. 4. Los medios acondicionados concentrados se deshielaron, se filtraron de forma estéril en 0.2 mieras, ajustaron el pH a 7.4, luego se cargaron en la columna durante la noche con una relación de flujo de alrededor de 1 ml/minuto. La columna se lavó con 10 volúmenes de columna (CVs) de solución salina amortiguada de fosfato (PBS, pH 7.4), luego se eluyó un tapón con 200 mi de PBS (pH 6. 0) que contiene 0.5 mg/ml del péptido EE (Anaspec, San José, CA) a 5 ml/minuto. El péptido EE usado tiene la secuencia EYMPME (SEQ ID NO: 15) . La columna se lavó durante 10 CVs con PBS, luego eluyó con 5 CVs de glicina 0.2M, pH 3.0. El pH de la columna eluida con glicina, se ajustó a 7.0 con 2 CVs de 5X PBS, luego se equilibró en PBS (pH 7.4) . Fracciones de cinco ral se recolectaron sobre la cromatografía de elución completa y se registraron absorbancias a 280 y 215 nM; los acumulados de circulación y lavado también se guardaron y analizaron. Las fracciones pico de elución del polipéptido y EE, se analizaron para la proteina objetivo, por medio de tinción con plata SDS-PAGE y Técnica "Western blot" con el anticuerpo conjugado anti-EE HRP. Las fracciones de elución del polipéptido de xnterest se acumularon y concentraron desde 60 mi a 5.0 mi usando un concentrador de giro de membrana de corte con un peso molecular de 10,000 Daltones (Millipore, Bedford, MA) según las instrucciones del fabricante. Para separar el IL-22-CEE de otras proteínas co-purificadoras , las fracciones acumuladas de elución del polipéptido concentrado, se sometieron a POROS HQ-50 (resina fuerte de intercambio de aniones de PerSeptive BioSystems, Framingham, MA) a pH 8.0. Se llenó una columna de 1.0 x 6.0 cm y se empacó con flujo sobre un BioCad Sprint. La columna se cargó con contraiones y luego se equilibró en 20mM TRIS pH 8.0 (Tris (Hidroximetil Aminometano) ) . La muestra se diluyó 1:13 (para reducir la resistencia iónica de PBS) luego se cargó sobre la columna Poros HQ a 5 ml/minuto. La columna se lavó durante 10 CVs con 20mM Tris pH 8.0 luego eluyó con un gradiente de 40 CV de 20 mM Tris/ cloruro de sodio 1M (NaCl) a ml/minuto. Se recolectaron fracciones de 1.5 mi sobre la cromatografía completa y se registraron absorbancias a 280 y 215 nM. Las fracciones del pico de elución se analizaron por medio de tinción con plata SDS-PAGE. Las fracciones de interés se acumularon y concentraron hasta 1.5-2 mi usando un concentrador de giro de membrana de corte de peso molecular de 10,000 daltones (Millipore, Bedford, . MA) según las instrucciones del fabricante. Para separar el polipéptido IL-22-CEE del péptido libre de EE y de cualesquiera proteínas co-purificadoras contaminantes, las fracciones concentradas acumuladas se sometieron a una cromatografía por exclusión de tamaño sobre una columna de 1.5 x 90 era Sephadex S200 (Pharmacia, Piscataway, NJ) equilibrada y cargada en PBS a una relación de flujo de 1.0 ml/min usando un BioCad Sprint. Se recolectaron fracciones de 1.5 mi a lo largo de la cromatografía completa y se registraron absorbancias a 280 y 215 nM. Las fracciones pico se caracterizaron vía tinción con plata SDS-PAGE, y solamente las fracciones más puras se acumularon. Este material representó el polipéptido purificado IL-22-CEE. Este material purificado se sometió finalmente a una columna de 4 mi ActiClean Etox (Sterogene) , para remover algunas endotoxinas remanentes . La muestra se circuló sobre una columna por gravedad equilibrada con PBS cuatro veces, luego la columna se lavó con un volumen simple de 3 mi de PBS, que se acumuló con la muestra "limpia" . El material luego se filtró estéril en 0.2 mieras y almacenó a -80°C hasta que se tomó una alícuota. Al aplicar la técnica "Western blot" , azul de Coomassie y geles SDS-PAGE teñidos con plata, el polipéptido IL-22-CEE fue una banda importante. La concentración de proteína del material purificado se efectuó por análisis BCA (Pierce, Rockford, IL) y se formó la alícuota de la proteína, y almacenó a -80°C según los procedimientos estándar. Para preparar anti-EE Sefarosa,un volumen de lecho de 100 mi de proteína G-Sefarosa (Pharmacia, Piscataway, NJ) se lavó 3 veces con 100 mi de PBS que contiene 0.02% de azida de sodio, usando una unidad de filtro de 500 mi de Nalgene de 0.45 mieras. El gel se lavó con 6.0 volúmenes de 200 mM de trietanolamina, pH 8.2 (TEA, Sigma, St. Louis, MO) , y se agregó un volumen igual de solución de anticuerpos EE que contiene 900 mg de anticuerpo. Después de una incubación durante la noche a 4°C, se removió el anticuerpo sin unir por lavado de la resina con 5 volúmenes de 200 mM TEA como fue antes descrito. La resina se volvió a suspender en 2 volúmenes de TEA, se transfirió a un recipiente adecuado, y se agregó dimetilpimilimidato-2HCl (Pierce, Rockford, IL) disuelto en TEA, hasta una concentración final de 36 mg/ml de gel de proteína G-Sefarosa. El gel se sacudió a temperatura ambiente por 45 min y el líquido se retiró usando la unidad filtro como fue antes descrito. Los sitios no específicos en el gel luego se bloquearon al incubar durante 10 min. a temperatura ambiente con 5 volúmenes de 20 mM de etanolamina en 200 mM de TEA. El gel luego se lavó con 5 volúmenes de PBS que contiene 0.02% de azida de sodio y se almacenó en esta solución a 4°C. Ejemplo 5 Efectos In vivo del polipéptido 1L-22 Ratones (hembras, C57BL/6N, 8 semanas de edad; Charles River Labs, Kingston, NY) se dividieron en tres grupos. Se hizo previamente un adenovirus que expresa un polipéptido IL-22 (SEQ ID NO: 6) usando métodos estándar. Al día 0, el adenovirus parental o IL-22 se administró al primero (n=8) y segundo (n=8) grupos, respectivamente, por medio de la vena de la cola, con cada ratón que recibe una dosis de ~1 x 1011 partículas en un volumen de -0.1 mi. El tercer grupo (n=8) no recibió tratamiento. Al día 12, se pesaron los ratones y se les sacó sangre . Las muestras se analizaron para un conteo sanguíneo completo (CBC) y química de suero. Las elevaciones estadísticamente importantes en los conteos de neutrófilos y plaquetas se detectaron en las muestras de sangre del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental. También, se redujeron significativamente los conteos de células de glóbulos rojos y linfocitos del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental. Además, los ratones tratados con el adenovirus IL-22 disminuyeron en peso corporal, mientras que los ratones tratados con adenovirus parental ganaron peso. También el nivel de suero de IL-22 se incrementó y el nivel de glucosa disminuyó el día 3. En resumen, los adeno-ratones IL-22 mostraron una respuesta en fase aguda, que también se puede iniciar por otras citocinas proinflamatorias tales como citocinas TNF-alfa, IL-1 beta, y gpl30. La respuesta en fase aguda es el comienzo de respuestas inflamatorias inmediatas por moléculas de reconocimiento del patrón. Las proteínas de fase aguda, proporcionan una protección mejorada contra microorganismos y modifican las respuestas inflamatorias por efectos en el tráfico celular y la liberación del mediador. Por ejemplo, SAA tiene una función potente de actividad de leucocitos que incluye la inducción de quimiotaxis, mejora de la adhesión de leucocitos a las células endoteliales y fagocitosis creciente. El entendimiento de los factores que inician y alteran la magnitud y duración de la respuesta en fase aguda, representan una etapa importante en el desarrollo de nuevas terapias para enfermedades inflamatorias e infecciosas . Los resultados sugieren que IL-22 afecta la hematopoiesis, esto es, formación de glóbulos sanguíneos in vivo. Como tal, IL-22 puede tener actividades biológicas que afecten diferentes células madre sanguíneas, resultando así en un incremento o disminución de ciertas células sanguíneas diferenciadas en un linaje específico. Por ejemplo, IL-22 parece reducir los linfocitos, lo cual se debe probablemente a la inhibición de las células progenitoras comprometidas que dan lugar a las células linfoides. IL- 22 también disminuye las células de glóbulos rojos, apoyando la noción de que IL-22 puede jugar un papel en la anemia, infección, inflamación y/o enfermedades inmunes, por la influencia en las células sanguíneas involucradas en estos procesos. Los antagonistas contra IL-22, tales como anticuerpos o su receptor soluble IL-22RA2, se pueden usar como reactivos terapéuticos en estas enfermedades. Por otro lado, estos experimentos usando adenovirus IL-22 en ratones, sugieren que la sobreexpresión de IL-22 incrementa el nivel de neutrófilos y plaquetas in vivo. Se cree que habrá otros factores (tales como citocinas y genes modificadores) involucrados en las respuestas al IL-22 en los sistemas animales completos. No obstante, estos datos apoyan fuertemente el involucramiento de IL-22 en la hematopoiesis . Así, IL-22 y sus receptores son reactivos/objetivos adecuados para diagnóstico y tratamiento de diversos trastornos, tales como inflamación, trastornos inmunes, infección, anemia, cánceres hematopoyéticos y otros cánceres, y similares. Ejemplo 6 Ratones transgénicos que expresan IL-22 A. Generación de ratones transgénicos que expresan IL-22 de ratón Los fragmentos de ADN de un vector transgénico que contiene secuencias de flanqueo 51 y 31 del promotor especifico linfoide ?µ^?, IL-22 de ratón (SEQ ID NO: 10; polipéptido mostrado en SEQ ID NO: 11) , el intrón de la insulina de rata II, ADNc de IL-22 y la secuencia poli A de hormona de crecimiento humana se prepararon usando métodos estándar, y usados para microinyección dentro de oocitos murinos fertilizados B6C3fl (Taconic, Gennantown, NY) , usando un protocolo estándar de microinyección. Ver, Hogan, B. et al., anipulating the Mouse Embryo. A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1994. Veinticinco ratones transgénicos para el IL-22 de ratón con el promotor EµLCK específico linfoide se identificaron entre 154 crías . Once de las crías transgénicas murieron dentro de las horas de nacimiento, 9 crías transgénicas con una apariencia brillante se les aplicó la necropsia el día de nacimiento, y 2 crecieron hasta la edad adulta. Los niveles de expresión fueron bajos en un animal adulto. Los tejidos de las crías con necropsia se - prepararon y examinaron histológicamente como se describe a continuación. La apariencia brillante de las crías neonatas, parecía asociarse con una rigidez de la piel, como si se deshidrataran, resultando en una reducción de una crianza adecuada. Sus movimientos se volveron rígidos en general. B. Análisis Genotípico y de Expresión de ratones transgénicos De la línea transgénica del IL-22 de ratón impulsada por el promotor ?µ????: promoter, antes descrito, crías recién nacidas se observaron para anormalidades al día uno (día de nacimiento) y se sacrificaron para recolección de tejidos. Se les dio a todas las crías un número de etiqueta único en la oreja, y se observaron aquellos designados por tener un fenotipo de piel brillante al momento del sacrificio. De las doce crías, seis se observaron por tener un fenotipo de piel brillante, con dos designados como fenotipos "severos" . Los fenotipos severos se definieron como crías pequeñas con poca movilidad cuya piel era especialmente brillante y muy seca. La piel se recolectó del costado lateral izquierdo de cada cría, y se congeló en medio alojado Tissue-Tek. La formación de genotipos confirmó que la piel brillante era un buen indicador de la situación transgénica, aunque no se recolectaron datos de expresión. Se hicieron secciones de bloques de piel congelados hasta 7 mieras en un criostato y se tiñeron para buscar la presencia de CD3 , CD4, CD8, macrófagos de ratón, células B, CD80, y MHC de clase II. El protocolo de tinción involucró el enlace de anticuerpos comercialmente disponibles para el tejido, detección con un anticuerpo secundario etiquetado con peroxidasa, y reacción con cormógeno DAB para visualizar la tinción. Se encontraron los animales transgénicos superiores en la clase II MHC y CD80, las cuales tiñen para células que presentan antígenos y células dendríticas respectivamente. El marcador macrófago también detectó más células en los transgénicos severos y no severos que en los animales de tipo silvestre, aunque la distribución de estas células estuvo muy localizada en la dermis alta. Los animales clasificados como fenotipos severos tuvieron la tinción más firme con todos los tres de estos marcadores, mostrando un incremento dramático en la intensidad celular y número cuando se compara con el tipo silvestre. Esta variabilidad se puede deber a una diferencia en el nivel de expresión de IL-22 en estas crías de origen transgéiiico . Las células postivas MHC de clase II se localizaron en la dermis inferior configurada en grupos abiertos sueltos, mientras que las células CD80 positivas estuvieron predominantemente debajo de la dermis ya sea encima o justo arriba de la capa de músculo/grasa. Estas dos poblaciones celulares no parecen traslaparse. Todos los otros marcadores fueron de tinción equivalente en todos los animales. La tinción con azul de toluidina para mastocitos, reveló desde una ligera hasta ninguna diferencia entre animales transgénicos y de tipo silvestre. C. Evaluación microscópica de tejidos de ratones transgénicos: IL-22 TG con promotor EuLck tiene una histología letal neonatal El día de nacimiento, las crías de carnadas que contienen transgénicos de IL-22, se les aplicó humanamente la eutanasia y la inmersión del cuerpo completo fijado en fomrmalina amortiguada al 10%. Seis transgénicos y dos crías no transgénicas se remitieron para preparación adicional . Cuatro de los seis transgénicos se observaron por tener piel brillante al momento de la eutanasia. Los tejidos fijos se fragmentaron en 5 secciones (sección longitudinal de la cabeza y secciones transversales del tórax superior e inferior y del abdomen superior e inferior) . Los tejidos se depositaron en parafina, se procesaron de rutina, seccionaron a 5 um (microtomo Jung 2065 Supercut, Leica Microsystems, etzlar, Alemania) y tiñeron con H&E. Los tejidos teñidos se evaluaron bajo un microscopio de luz (Nikon Eclipse E600, Nikon Inc., Melville, NY) por un patólogo veterinario certificado por un consejo (ACVP) . Al examinar en el microscopio, la epidermis de dos de las crías transgénicas se observó que era más gruesa que la epidermis de los otros seis ratones que incluye los controles. No se observaron ningunas otras anormalidades en la piel y otros tej idos de ninguno de los ratones . Las áreas representativas de piel de regiones correspondientes del tórax y abdomen formaron imágenes con el lente objetivo 40X y con una cámara digital CoolSnap (Roper Scientific, Inc., San Diego, CA) que se colocó al microscopio. El grosor de la epidermis luego se determinó usando un software de histomorfometría (Scion Image para Windows (N1H Image) , Scion Corp., Frederick, MD, v. B4.0.2). Los resultados mostrados en la Tabla. 5 fueron como siguen: Tabla 5 Hubieron números insuficientes de ratones para determinar importancia estadística; sin embargo, los transgénicos, especialmente aquellos con piel brillante, tiende a tener una epidermis más gruesa que los transgénicos no brillantes y los controles no transgénicos . Los transgénicos brillantes pueden tener un nivel superior de expresión de IL-22 que los transgénicos no brillantes; sin embargo, los niveles de expresión no se determinaron para estos ratones . Esto sugiere un rol para el IL-22 en la psoriasis, artritis psoriática, u otras condiciones inflamatorias de la piel u otras enfermedades inflamatorias . Ejemplo 7 Efectos In vivo del polipéptido IL-22 A. Ratones infectados con el adenovirus IL-22 muestran inducción de 5AA Ratones (hembras, C57BL/6N, 8 semanas de edad; Charles River Labs, Kingston, NY) se dividieron en tres grupos. Un adenovirus que expresa un polipéptido IL-22 (SEQ ID NO: 6) se preparó previamente usando métodos estándar. Al dia 0, el adenovirus IL-22 o parental se administró al primero (n=8) y segundo (n=8) grupos, respectivamente, por medio de la vena de la cola, con cada ratón que recibe una dosis de ~1 x 1011 partículas en un volumen de -0.1 mi. El tercer grupo (n=8) no recibió tratamiento. Al día 12, se pesaron los ratones y se sacó sangre de los ratones. Al día 20 del estudio, los ratones se sacrificaron, se registró el peso corporal, y la sangre y tejidos se recolectaron para análisis. Todas las muestras de sangre se analizaron para un conteo completo de sangre (CBC) y química de suero. En ambos días 12 y 20, las elevaciones estadísticamente importantes en los conteos de neutrófilos y plaquetas se detectaron en las muestras de sangre del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental. También, los conteos de linfocitos se redujeron significativamente del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental el día 12, pero en el día 20 se observó el efecto opuesto. Además, los ratones tratados con el adenovirus IL-22 disminuyeron en peso corporal, mientras que los ratones tratados con el adenovirus parental ganaron peso. La glucosa se redujo significativamente en ambos puntos de tiempo en las muestras de suero del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental. La albúmina de suero también se redujo significativamente rn ambos puntos de tiempo. Los niveles de nitrógeno urea en sangre se redujeron significativamente al día 20. Los niveles de globulina en suero se incrementaron significativamente en el grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental en ambos puntos de tiempo. Microscópicamente, se observó un cambio histomorfológico atribuido al IL-22 fue la regeneración tubular en el riñon. Aunque no es común en los ratones, hubo una incidencia creciente y severidad en este grupo de animales. La nefropatía se caracteriza por áreas multifocales de basofilia de células epiteliales corticales tubulares . Un experimento adicional, idéntico en diseño al antes descrito, se llevó a cabo con objeto de verificar los resultados y recolectar muestras adicionales. En este estudio, el peso corporal se registró cada tres días, la sangre se recolectó de los ratones 3 días después de la inyección con adenovirus, y los ratones se sacrificaron para recolección de sangre y tejido al día 10 (n=4 por grupo) y "día 20 (n=4 por grupo) . Los conteos elevados de neutrófilos y plaquetas se detectaron de nuevo en muestras de sangre del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental. Este efecto fue evidente para los neutrófilos el día 3, pero el conteo de plaquetas no fue significativamente diferente hasta el día 10. También, los conteos de linfocitos se redujeron significativamente del grupo administrado con el adenovirus IL-22 con relación al grupo tratado con adenovirus parental a 3 y 10, pero no fueron elevados al dia 20 como en el estudio previo. De nuevo, los ratones dados con el adenovirus IL-22 perdieron peso durante el curso del estudio, mientras que los tratados con el virus de control y los ratones no tratados ganaron peso. Los parámetros de química de suero fueron consistentes con el estudio previo. Los hallazgos histológicos de regeneración tubular en el riñon asociados con el tratamiento con adenovirus IL-22 fueron también confirmados en este estudio. Esto fue consistente con el hallazgo adicional de proteinurea moderada en ratones aplicados con el adenovirus IL-22 (día 20) . Los resultados sugieren que el IL-22 afecta la hematopoyesis, esto es, formación de glóbulos sanguíneos in vivo. Como tal, el IL-22 puede tener actividades biológicas que afectan diferentes células madre sanguíneas, resulta así en un incremento o disminución de ciertos glóbulos sanguíneos diferenciados en un linaje específico. Por ejemplo, IL-22 parece reducir los linfocitos, que se debe probablemente a la inhibición de la células progenitoras comprometidas que dan lugar a células linfoides, apoyando la noción de que el IL-22 puede jugar un papel en la anemia, infección, inflamación, y/o enfermedades inmunes al influenciar las células sanguíneas involucradas en estos procesos. Los antagonistas contra IL-22, tales como anticuerpos o su receptor soluble IL-22RA2, se pueden usar como reactivos terapéuticos en estas enfermedades. Por otro lado, estos experimentos usando el adenovirus IL-22 en ratones sugieren que la sobreexpresión de IL-22 incrementa el nivel de neutrófilos y plaquetas in vivo. Se conibe que haya otros factores (tales como citocinas y genes modificadores) involucrados en las respuestas a IL-22 en el sistema animal completo. No obstante, estos datos apoyan fuertemente el involucramiento de IL-22 en hematopoiesis . Así, IL-22, anticuerpos anti-IL-22, receptores solubles IL-22RA (por ejemplo, SEQ ID N0:3) , y anticuerpos anti-IL-22RA son reactivos/objetivos adecuados para el diagnóstico y tratamiento en una diversidad de trastornos, tales , como inflamación, trastornos inmunes, infección, anemia, cánceres hematopoyéticos y otros cánceres, y similares. La asociación de la expresión de IL-22 con pérdida de peso, aparición de proteína de fase aguda SAA, y perturbaciones metabólicas evidenciadas por glucosa, albúmina y nitrógeno urea en suero disminuidas, sugiere que IL-22 es una citocina que actúa de forma temprana en ciertas respuestas inflamatorias. Los ratones dados con el adenovirus IL-22 pueden representar un estado de inflamación crónica, tal como aquella observada en IBD, colitis ulcerante, artritis, psoriasis, artritis psoriática, asma, y similares.

Determinados procesos inflamatorios perjudiciales, pudieran inhibirse por el uso de un antagonista para IL-22, tales como anticuerpos anti-IL-22, y sus receptores, tales como receptores solubles IL-22RA (por ejemplo, SEQ ID N0:3) , y anticuerpos anti-IL- 22RA y similares. B. IL-22 es una citocina pro-inflamatoria : Nivel de Suero de SAA en Adeno-IL-22 ratones: Se llevó a cabo un ELISA para determinar el nivel de SAA en IL-22-Adeno ratones, usando un kit y protocolo de inmunoensayo de ratón SAA (Biosource International, California, USA) . Los estándares diluidos y las incógnitas se colocaron en placas junto con HRP-anti-ratón SAA en placas de ensayo pre-cubiertas con anticuerpo anti-ratón SAA. Se incubaron las placas por una hora a 37 grados C y luego se lavaron según las instrucciones del kit. Las placas se revelaron durante 15 minutos a temperatura ambiente usando TMB y detenidas con H2S04 2 , se leyó la absorbancia a 450 nm usando un Spectromax 190 (Molecular Devices, California, USA) . Los datos resultantes se analizaron usando Softmax Pro (Molecular Devices, California, USA) y Excel (Microsoft Corp., Lavado on, USA) . Ratones infectados con IL-22-Adenovirus tuvieron niveles altamente elevados de mSAA, de más de 10 veces, con relación al control Parental-Adenovirus .

C. Análisis de citometría de flujo de ratones infectados con adenovirus IL-22 Para analizar los efectos de la expresión de IL-22 in vivo por adenovirus, se aisló sangre periférica, bazo, y médula ósea de ratones C57BL/6N infectados con adenovirus IL-22, al día 10 y dia 20 después de infección. Aproximadamente 100 µ? de sangre se recolectaron en tubos heparinizados, luego se suprimieron las células de glóbulos rojos por lisis hipotónica (las células se lisaron en 4.5 mi de dH20 por -5 segundos antes de agregar 1.5 mi de NaCl al 3.6%). Los bazos se trituraron entre dos portaobjetos de vidrio congelados, y las células liberadas se circularon sobre una membrana Nytex (colador de células) y se peletizaron. La médula ósea se obtuvo al triturar un fémur en un crisol y mortero y al circular las células sobre un colador de células (Falcon) . Las células se volvieron a suspender en solución amortiguadora de lavado FACS (WB = HBSS/1% BSA/10 M hepes) , se contaron en azul de tripano, y lxl0e células viables de cada tipo formaron alícuotas en tubos de poliestireno de 5 mi. Las células se lavaron y peletizaron, luego se incubaron durante 20 min sobre hielo con cócteles de anticuerpos monoclonales etiquetados fluorescentemente (FITC, PE, y CyChrome) (PharMingen, San Diego, CA) reconociendo a diversos marcadores de la superficie celular, usados para identificar subconjuntos de células inmunes particulares. Estos marcadores incluyen los siguientes (listados en los grupos de 3 probados) .

Para tinción de sangre: CD3, Grl, y B220; para tinción de bazo: CD62L, CD44, y CD3 ; CD21, CD23, y B220; IgD, IgM, y B220; CDllb, Grl, y CD8 ; para tinción de médula ósea: CDllb, Grl, CD3; IgD, IgM, y B220. Las células se lavaron con 1.5 mi WB y se peletizaron, luego volvieron a suspenderse en 0.4 mi de WB y analizaron en un FACScan usando un software CellQuest (Becton Dickinson, Mountain View, CA) . Encontramos que la fracción de neutrófilos en la sangre de los ratones IL-22-adeno-tratados se elevó 4-13 veces en el Día 10 y 2-3-veces el Día 20. Al Día 10, esta diferencia resultó en una disminución paralela en la fracción de linfocitos y monocitos en la sangre. En la médula ósea, encontramos que el número total de células B disminuyó -1.5 veces, mientras que el porcentaje de células B maduras en recirculación se incrementó y el número total de células B inmaduras cayó ligeramente el Día 10. Al Día 20, no fueron evidentes muchas de estas diferencias, aunque se encontró un ligero incremento en la fracción de células B maduras en recirculación. En el bazo, el número total de células B disminuyó ligeramente (1.5-2-veces) en ambos días probados, mientras que al día 20, la fracción de las células B de la zona marginal (CD21+CD23-B220+) se incrementó por 2 veces y el número de células B foliculares (CD21+CD23+B220+) cayó 2 veces. Las células B de la zona marginal, se consideran ser la primera línea de defensa contra patógenos, ya que son más sensibles a los mitógenos de células B (por ejemplo, LPS} que las células B foliculares más comunes, y cuando encuentran su antígeno similar, se diferencian muy rápidamente en células que secretaron anticuerpos . Es posible que IL-22 mejore la conversión de células foliculares a células B de zona marginal, o que suprima selectivamente las células foliculares menos maduras. Los cambios en los números de células B encontrados en la médula ósea, pueden reflejar una diferenciación mejorada de células B pre/pro y/o inmaduras, o un flujo creciente de células B en recirculación de la sangre/bazo, y tal vez un incremento coincidente en la exportación de células B inmaduras a la periferia. El número real de células B maduras BM no se incrementa, entonces el IL-22 no puede mejorar su proliferación. Alternativamente, IL-22 puede bloquear, reducir o inhibir la diferenciación de células B inmaduras y por ello se incrementa la representación relativa de células B maduras . D. IL-22RA2-Fc4 neutraliza la actividad de IL-22 in vivo: SAA ELISA que muestra la expresión de SAA inducida por IL-22 se inhibe por una inyección de IL-22 A2-Fc : Para evaluar si IL-22RA2 puede inhibir la inducción SAA por ratones con IL-22 (hembras, C3H/HEJ, 8 semanas de edad; Jackson Labs, Bar Harbor, ME) se dividieron en cinco grupos de tres animales cada uno y se trataron por inyección IP de proteínas como se muestran en la Tabla 6 a continuación: Tabla 6 Las inyecciones de IL-22RA2 antecedieron la inyección con IL-22 por 15 minutos. Ambas inyecciones de proteínas se dieron por via intraperitoneal . Una muestra de sangre se tomó de cada ratón previo a tratamiento, luego a 2 y 6 horas después de tratamiento. Se preparó el suero de cada una de las muestras para medir SAA e IL-22. Se llevó a cabo un ELISA como se describió previamente para determinar el nivel de SAA en ratones tratados con IL-22 y un receptor soluble para IL-22, IL-22 A2-Fc4 aqui descrito. Los ratones tratados con 3 µg de IL-22 en conjunto con IL-22 A2-Fc4 a concentraciones entre 20-100ug mostraron una reducción en el nivel de SAA inducido por IL-22 solo hasta niveles de respaldo, lo que demuestra que 1L-22RA2 inhibió la actividad de inducción de SAA de IL-22 in vivo. Ejemplo 8 Expresión de IL-22 en un modelo de ratón de enfermedad inflamatoria del intestino La enfermedad inflamatoria del intestino (IBD) es una enfermedad multif ctorial, dividida en dos tipos, colitis ulcerante (UC) y enfermedad de Crohn (CD) . La etiología de estas enfermedades no se conoce actualmente y difieren las manifestaciones clínicas. La UC se restringe al colon, y los síntomas incluyen diarrea con sangre, pérdida de peso y dolor abdominal. Las características macroscópicas de la UC incluyen úlceras acentuadas y un colon recortado. En contraste, la enfermedad de Crohn puede también afectar otras partes del intestino. Los Síntomas incluyen diarrea (que es menos frecuente con sangre que la que se observa en UC) , fiebre de bajo grado y dolor. Las características macroscópicas incluyen intestino fibrótico y estenótico con contracciones, úlceras profundas, fisuras y fístulas. Diversos modelos animales están disponibles que imitan estas enfermedades humanas. Tres modelos comúnmente usados de colitis para la selección de nuevos fármacos son el modelo de rata inducido por el ácido 2,4, 6-trinitrobenceno sulfónico (TNBS) , el modelo de transferencia de células T de ratón, y el sulfato de dextrano sodio, o modelo de ratón inducido por DSS. El modelo se derivó de un modelo por el Dr. S. Murthy, usando un sistema de registro del índice de actividad de la enfermedad (S. N. S. Murthy, Treatment of Dextran Sulfate Sodium-Induced Murine Colitis by Intracolonic Cyclosporin, Digestive Diseases and Sciences, Vol. 38, No. 9 (Septiembre 1993), pp. 1722-1734).

En el estudio actual, la colitis aguda resultó cuando los ratones se alimentaron con DSS en su agua para beber por 6 días. Los animales mostraron pérdida de peso y diarrea sanguínea, imitando la condición de los pacientes UC. El mecanismo de la lesión DSS no está bien caracterizado, pero se cree que induce una respuesta inmune inflamatoria no específica e imita los efectos ambientales en el intestino. Es posible que se produzca H2S, que puede ser tóxico para las células . Además , suceden cambios en la flora luminal bacterial. Se han demostrado monocitos activados, macrófagos y mastocitos en el colon. Los mediadores para todos los tres modelos animales incluyen prostaglandinas inflamatorias, metabolitos de leucotrieno y citocinas . A. Método Se indujo la colitis por ingestión de DSS en ratones hembras Swiss Webster de Charles River Laboratories. Los ratones tenían 10 y 11 semanas de edad al inicio del estudio. A los ratones se les dio 4% DSS en el agua para beber por un periodo de 6 días [ratones tratados) ( o wse les dio solamente agua normal para beber (ratones de control) . Se usó un regsitro clínico del Indice de Actividad de la Enfermedad (DAI) , el cual comprende una combinación de medidads que incluyen la calidad de las heces, sangre oculta y pérdida de peso. El DAI se obtuvo diariamente por cada ratón comenzando un día después del tratamientocon DSS. Después de 6 días, el DSS se retiró del agua para beber de los ratones tratados . Todos los ratones se observaron por un registro clínico DAI hasta sacrificio a los 2, 7 ó 10 días a partir del comienzo del estudio. En cada uno de los días 2 y 7, cuatro ratones tratados con DSS y un ratón de control se sacrificaron. Al día 10, cuatro ratones tratados con DSS y dos ratones de control se sacrificaron. Para todos los animales después del sacrificio, se midió la longitud del colon. Se fijaron las secciones del colon en formalina amortiguada neutra al 10% para el análisis histológico o se congelaron para la extracción del ARNm. B. Registro Histológico y registro del índice de Actividad de Enfermedad (DAI) Los registros de índice histológico se obtuvieron siguiendo el método en la referencia 1. Generalmente, se marcaron las secciones del colon ciegas por un patólogo para registros de cripta, epitelio hiperplástico, distorsión de cripta e inflamación. Diariamente, cada ratón se clasificó como el registro clínico basado en pérdida de peso, consistencia de las heces y sangrado intestinal. Se asignaron registros mayores para cantidades crecientes de pérdida de peso, diarrea y sangrado.

El registro diario para cada ratón fue el grado medio obtenido a partir de tres resultados/observaciones .

C. Resultados Las longitudes del colon para ratones tratados con DSS fueron de alguna forma más cortas al día 7 y 10 que en los controles sin tratar, pero los resultados pueden no haber sido importantes (no se checaron por aplicación estadística) . Los registros clínicos DAI reflejaron una elevación en los síntomas de la enfermedad en ratones tratados con DSS, similar al que se observa en estudios anteriores usando este modelo. La sangre oculta fue mayor aproximadamente en los días 4 y 5, mientras que las heces flojas fueron más frecuentes en los días 6 y 7. Los resultados de histopatología muestran que los registros de enfermedad fueron diferentes de los controles en todos los días de sacrificio, especialmente en los días 7 (pico) y 10. Los registros de selección por histopatología fueron: controles=0.5, día 2, ratones tratados con DSS=8.8, día 7, ratones tratados con DSS=2l, día 10, ratones tratadoscon DSS=18. Los registros clínicos y de histopatología muestran que los ratones tratados con DSS tuvieron una importante enfermedad de colon con relación a los controles no tratados. Las muestras de tejido congeladas se usaron después para determinaciones de ARNm como se describe a continuación.

D. Expresión de Tejidos de ARN de IL-22 en Muestras de Colon con IBD urino usando RT-PCR: Para determinar la expresión relativa del ARN de ratón IL-22 (SEQ ID NO: 10; SEQ ID NO: 11) en un modelo de enfermedad inflamatoria del intestino, los colones distales de ratones tratados con DSS se recolectaron y se congelaron bruscamente en nitrógeno líquido. En este experimiento, los ratones se trataron con DSS y se tomaron muestras los días 2, 7 y 10 post-tratamiento. Las muestras de ratones normales no tratados también se recolectaron. El ARN luego se aisló de las muestras usando el kit est'nadar RNeasy Midiprep ILit (Qiagen, Valencia, CA) según las instrucciones del fabricante. Las reacciones por RT-PCR usaron el "Sistema Superscript de una etapa de etiqueta de Platino" (Life Technologies, Gaithersburg, MD) . Cada reacción de 25µ1 consistió de lo siguiente: 12.5 µ? de solución amortiguadora de reacción 2X, 0.5ul (20????1/µ1) ZC39,289 (SEQ ID NO:17), 0.5 µ? (20pmol/ul) ZC39,290 (SEQ ID NO: 18), 0.4 µ? de mezcla de polimerasa RT/Taq, lOul de agua libre de RNasa, 1.0 µ? de ARN total (100 ng/µ?) . La amplificación se llevó a cabo como sigue: un ciclo a 50° por 30 minutos seguido por 35 ciclos de 94°, 30 segundos; 58°, 30 segundos; 72°, 60 segundos; luego terminó con una extensión final a 72° por 7 minutos. 8 a 10 µ? del producto de reacción por PCR se sometió a electroforesis por gel de agarosa estándar usando un gel al 2% de agarosa. El tamaño del fragmento de ADNc predicho corregido se observó como sigue : Hubo una banda tenue en ambas muestras del día 2. Dos de tres muestras del día 7, generaron una banda fuerte mientras que la tercera muestra del día 7 sample generó una banda muy fuerte. Las tres muestras del dia 10 generaron una banda fuerte . Finalmente, las dos muestras de control 1 normal 1 no generaron ninguna banda. Estos resultados sugieren que puede haber una sobreregulación de IL-22 en ciertos tipos de respuestas inflamatorias en el colon, que incluye aquellas asociadas con IBD, UC, y CD. Los datos se resumen en la Tabla 7 a continuación, en donde se registró la expresión relativa como sigue: 0 = sin banda, 1 = banda tenue, 2 = banda fuerte, 3 = banda muy fuerte . Tabla 7 Ejemplo 9 IL-22RA2 disminuye IL-6 y los niveles de SAA en el modelo de Artritis Inducida por Colágeno (CIA) de ratón A. Modelo de Ratón de Artritis Inducida por Colágeno (CIA) Ratones machos de diez semanas de edad DBA/1J (Jackson Labs) se dividieron en 3 grupos de 13 ratones/grupo. Al día 21, a los animales se les dio una inyección sucutánea de 50-100 µ? de lmg/ml de colágeno Tipo II de pollo, formulado en Adyuvante Completo de Freund (preparado por Chondrex, Redmond, WA) , y tres semanas después al día 0, se les dio una inyección de 100 µ? (25µg) de LPS de E. coli 0111 :B4, preparado como 250 µg/ml de una alícuota liofilizada (Sigma, St. Louis, MO) . IL-22RA2 se administró como una inyección intraperitoneal 3 veces por semana durante 4 semanas, desde el Día 0 al Día 25. Los primeros dos grupos recibieron ya sea 100 o 10 µg de IL-22RA2 por animal por dosis, y el tercer grupo recibió el control vehículo, PBS (Life Technologies, Rockville, MD) . Los animales comenzaron a mostrar síntomas de artritis después de la inyección de LPS, con la mayoría de los animales desarrollando inflamación dentro de 2-3 semanas. Se evaluó el grado de enfermedad en cada pata al usar un calibrador para medir el grosor de la pata, y al asignar un registro clínico (0-3) a cada pata: 0=Normal, 0.5=Dedo (s) inflamados, 1= inflamación media de la pata, 2= inflamación moderada de la pata, y 3= inflamación severa de la pata como se detalla a continuación. Monitoreo de la Enfermedad: Los animales pueden empezar a mostrar signos de inflamación en la pata poco después de la segunda inyección de colágeno, y algunos animales pueden aún comenzar a tener signos de inflamación en los dedos de la pata antes de la segunda inyección de colágeno. La mayoría de los animales desarrollaron artritis dentro de 2-3 semanas de la inyección de refuerzo, pero algunos pueden requerir de un periodo más prolongado de tiempo. La incidencia de la enfermedad en este modelo es típicamente 95-100%, y 0-2 sin respuesta (determinados después de 6 semanas de observación) se observan típicamente en un estudio usando 40 animales. Observar que cuando la inflamación comienza, puede suceder una presencia transitoria común de inflamación de los dedos de la pata o de la pata en menor grado. Por esta razón, un animal no se considera que haya establecido la enfermedad hasta que se haya desarrollado una hinchazón persistente de la pata, notable. Todos los animales se observaron diariamente para evaluar la situación de la enfermedad en sus patas, lo cual se hizo al asignar un registro clínico cualitativo para cada una de las patas. Cada día, cada animal tiene sus 4 patas marcadas según su estado de enfermedad clínico. Para determinar el resgitro clínico, se puede pensar que la pata tiene tres zonas, los dedos, la pata misma (manus o pes) , y la articulación de la muñeca o tobillo. El grado y severidad de la inflamación con relación a estas zonas se observó que incluye la observación de todos los dedos para cualquier hinchazón de las articulaciones, uñas arrancadas o enrojecimiento, observación de cualquier evidencia de edema o enrojecimiento en cualquiera de las patas, y observación de cualquier pérdida de marcación anatómica fina de tendones o huesos, y evaluación de la muñeca o tobillo para cualquier edema o enrojecimiento, y observación de si la inflamación se extiende proximalmente hasta la pierna, ün registro por pata de 1, 2, ó 3 se basó primero en la impresión global de severidad, y segundo en cuantas zonas estuvieron involucradas. Se muestra a continuación la escala usada para el registro clínico. Registro Clínico: 0 = Normal 0.5 = Uno o más dedos involucrados, pero solamente están inflamados los dedos 1 = inflamación media involucrando la pata (1 zona) , e incluye un dedo o dedos 2 = inflamación moderada en la pata y puede incluir alguno de los dedos y/o muñeca/tobillo (2 zonas) 3 = inflamación severa en la pata, muñeca/tobillo, y algunos o todos los dedos (3 zonas) La enfermedad establecida se define como un registro cualitativo de la inflamación de la pata en el nivel 2 o más, que persiste durante la noche (dos días seguidos) . Una vez que se establee que está presente la enfermedad, se registra la fecha y se designa como el primer día del animal con "enfermedad establecida" . Se recolectó la sangre a lo largo del experimento para observar los niveles de suero de los anticuerpos anti-colágeno. Se aplicó la eutanasia a los animales al día 21, y se recolectó la sangre para el suero y para CBC. De cada animal, una pata afectada se recolectó en 10% NBF para histología y una se congeló en nitrógeno líquido y se almacenaron a -80°C para análisis de ARNm. También, 1/2 bazo, 1/2 timo, 1/2 ganglio linfático mesentérico, un lóbulo del hígado y el riñon izquierdo se recolectaron después en ARN para análisis de ARN, y 1/2 bazo, 1/2 timo, 1/2 ganglio linfático mesentérico, el hígado restante, y el riñon derecho se recolectaron en 10% NBF para histología. Se recolectó el suero y se congeló a -80°C para ensayos de inmunoglobulina y citocina. No se encontraron diferencias estadísticamente importantes entre los grupos cuando se analizaron los registros de las patas y los datos de medición, aunque hubo la sugerencia de que un grupo de tratamiento que recibe IL-22RA2 pudo haber tenido un retraso en el comienzo y avance de la inflamación de la pata. No hubieron diferencias importantes entre los grupos para cambios en el peso corporal, parámetros CBC, o niveles de anticuerpos anti-colágeno . Estos resultados tempranos indican que el IL-22RA2 no afecta adversamente el peso corporal, los glóbulos blancos o rojos, o la producción de anticuerpos, pero pueden reducir la inflamación. Además siguen en marcha las investigaciones sobre dosificación, mecanismo de acción y eficacia (por ejemplo, Ejemplo 10) .

B. Datos Anti-colágeno .de ELISA en modelo de ratón CIA Muestras de suero se recolectaron a los días 0, 7, 14, 21 y 28 con relación a la fecha de la prueba inmunogénica con LPS (dia 0) del modelo urino de artritis inducida por colágeno (Ejemplo 9A anterior) . Las muestras de suero se seleccionaron por ELISA para concentraciones de anticuerpos anti-colágeno. No hubieron efectos estadísticamente importantes del tratamiento con IL-22RA2 en los grupos de tratamiento grupos con 100 µg o 10µg sobre los niveles de anticuerpos anti-colágeno en comparación con los controles de PBS . A continuación está una descripción de los métodos y materiales ELISA anti-colágeno. Los reactivos usados para los ELISA anti-colágeno fueron placas de microtitulación Maxisorp de 96 pozos (NUNC, Rochester, Y) , colágeno tipo II de pollo (Chondrex, Redmond, WA) , Super Block (Pierce, Rockford, IL) , peroxidasa de raíz de rábano (HRP) conjugada con anti-ratón de cabra IgG+A+M (H+L) (Zymed, South San Francisco, CA) y substrato de diclorohidrato de o-fenilendiamina (Pierce, Rockford, IL) . Las soluciones amortiguadoras usadas en todos los ensayos fueron, solución amortiguadora diluyente ELISA B (PBS + 0. 1% BSA + 0.05% Tween (Sigma, St. Louis, MO) ), solución'amortiguadora de lavado ELISA C (PBS + 0.05% Tween) y solución amortiguadora de revelado NovoD (0.063M de citrato de sodio, 0.037M de ácido cítrico) , H202 (Sigma) y ¾S04 1N (VWR, Tuk illa, WA) .

Aproximadamente 100 µ?? de sangre periférica se recolectaron por sangrado retro-orbital en los tubos separadores de suero (Becton Dickinson) . El suero se recolectó por centrifugación (2-3 min, 16,000 x g, 4-6°C) y se almacenaron a -20°C hasta el análisis. Para determinar los niveles de anticuerpo anti-colágeno Ig, se recubrieron las placas ÜNC con 10 g/mL de colágeno tipo II de pollo (Chondrex, Redmond WA) y se incubaron durante la noche a 4°c. Las placas se lavaron con ELISA C, se bloquearon (5 minutos, temperatura ambiente) con Super Block (Pierce, Rockford, IL) , y lavaron con ELISA C. Las muestras de suero diluidas (diluidas en ELISA B 5 veces desde 1:5000 a 1:625,000) se agregaron a las placas ELISA por triplicado y se incubaron las placas durante la noche a 4°C. Después de la incubación, las placas se lavaron con ELISA C, y se agregó anti-ratón Ig Fe de cabra etiquetado por peroxidasa (Zymed, 1:2000 en ELISA B) . Se incubaron las placas (temperatura ambiente, 90 minutos) , se enjuagaron de nuevo usando ELISA C, y se reveló la actividad de HRP usando un substrato de diclorohidrato de o-fenilendiamina (10 mL NovoD + 1 tableta de OPD + 10 L de H202, Pierce) . La reacción se detuvo con H2S04 1N. Las mediciones de densidad óptica relativa de muestras de suero a una dilución de 1:25,000 se tomaron a 490 mn usando un Spectra MAX 190, y los datos se analizaron usando el software SoftMax Pro (Molecular Devices Corporation, Palo Alto, CA) .

C. IL-6 y análisis SAA en el modelo de ratón CIA Muestras de suero del dia 0, se cosecharon de ratones CIA (Ejemplo 9A arriba) 4 hr después de la administración de 25 µg de LPS intraperitonealmente . Se seleccionaron las muestras para IL-6 y concentraciones de suero amiloide A (SAA) por kits ELISA comerciales adquiridos por Biosource International (Camarillo, CA) según las instrucciones del fabricante. Los niveles de IL-6 fueron 9651+/-1563 pg/ml, 10,865 +/-1478 pg/ml y 15 , 006+/-2 , 099 pg/ml en los grupos de ratones sometidos a 100 µg de IL-22RA2, 10 µg de IL- 22RA2 y control con PBS, respectivamente. La concentración de IL-6 en el grupo de los ratones CIA expuestos a la dosis de 100 µg de IL-22RA2 fue significativamente inferior comparada con ratones de control con PBS con p=0351. La importancia estadística se calculó usando PLSD de Fisher con un nivel de importancia de 5% (ABACUS Concepts, INC, Berkeley, CA) . Además, las concentraciones de SAA fueron 381 +/-40 µg/mlí 348 +/-37 µg/ml y 490 +/-50 µg/ml en los grupos de ratones sometidos a 100 µg de IL-22RA2, 10 µg de IL- 22RA2 y grupos de control con PBS, respectivamente. La concentración de SAA en el grupo de los ratones CIA expuestos a la dosis de 10 µg de IL-22RA2 fue significativamente menor comparado con ratones de control PBS p=.0257. La importancia estadística se calculó usando PLSD de Fisher con un nivel de importancia de 5% (ABACUS Concepts, INC, Berkeley, CA) .

Ejemplo 10 Anti-IL-22RA mAbs o anti-IL-22 mAbs inhiben la severidad de la enfermedad en un modelo CIA de ratón El modelo de artritis inducida por colágeno (CIA) es un modelo de ratón para artritis reumatoide que refleja en un amplio grado la enfermedad observada en humanos. (Moore, Methods Mol. Biol. 225: 175-179,2003 : aksman, Scand. J. Immunol.. 56: 12-34, 2002). Los ratones se inmunizaron con 2 dosis de colágeno emulsificadas en CFA en la base de la cola. Esto resulta en hinchazón de las patas que se incrementa en un periodo de tiempo y puede registrarse y medirse visualmente usando calibradores. Además, los anticuerpos de suero anticolágeno se correlacionan bien con la severidad de la enfermedad. Con base en los datos que muestran que IL-20 y IL-22 inducen inflamación, anti-IL-22RA y anti-IL-22 mAbs se administran a los grupos de ratones inmunizados con colágeno, y se evalúan los efectos en los registros de enfermedad. Una disminución en los registros de la pata y grosor de la pata después de la administración de anti-IL-22RA mAbs o anti-IL-22 mabs, sugiere que IL-20 y IL-22 promueven una respuesta inmune continua en un modelo de autoinmunidad y al bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar su función pueden inhibir trastornos autoinmunes . La inhibición del suero T Fa y anticuerpos anti-colágeno también sugiere que el bloqueo de IL-22RA puede ser benéfico en enfermedad autoinmune.

Así, para determinar si el anti-IL-22RA mAbs o anti-IL-22 mAbs tienen un efecto en la autoinmunidad, se probaron en un modelo de ratón para artritis reumatoide-artritis inducida por colágeno (CIA) . Específicamente, a los ratones DBA1J ratones se les daban inyecciones de colágeno para inducir artritis tipo reumatoide. La inoculación al día 0 es una inyección subcutánea de un homogeneizado que consiste de Adyuvante Completo de Freund (CFA) y colágeno tipo II (50-100 µ?, preparado como 2mg/ml de colágeno) . La inyección se da cerca de la base de la cola. Al día 21, se administró una segunda inoculación, la única diferencia es que el homogeneizado se prepara usando Adyuvante Incompleto de Freund (IFA) , en lugar del CFA. Los registros de la pata y grosor se miden diariamente. Los grupos de ratones reciben PBS, 20-200ug de anticuerpo monoclonal que coincide con el isotipo de control o 20-200 ug de anti-IL-22RA mAb o anti-IL-22 mAb i.p 2X o 3X/semana durante 1-4 semanas comenzando con la segunda inyección de colágeno. Los ratones se observan diariamente hasta el día 30. Los ratones se sacrifican al día 30, se toma el suero para análisis de anticuerpos anti-colágeno y análisis de citocinas en suero (TNFO) . La inhibición de los registros de la pata, grosor de la pata, TNFa en suero y anticuerpos anti-colágeno en suero por la administración de anti-IL-22RA o anti-IL-22 mAbs sugiere que el bloqueo de IL-22RA puede enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar IL-22, e inhibir una respuesta inmune continua en un modelo de autoinmunidad y puede inhibir trastornos autoinmunes . Ejemplo 11 Expresión del receptor IL-22, IL-22RA, en el modelo de ratón DSS La RT-PCR cuantitativa se efectuó para medir los niveles de expresión de IL-22RA de ratón en los colones de ratones con IBD inducida por DSS (Ejemplo 8) . El A E se aisló del colon normal de ratón y de los colones distales de ratones tratados con DSS de los días de tratamiento 2, 7 y 10. La RT-PCR se efectuó usando instrumento y protocolos Applied Biosystems 7700 TaqMan. Brevemente, el software "Primer Express" se usó para los cebadores diseñados contra la secuencia de ratón IL-22RA (ZC39776 (SEQ ID NO: 19) y ZC39777 (SEQ ID NO:20)) y una sonda TaqMan etiquetada con FAM/TAMRA (ZC38752 (SEQ ID NO: 21)) de acuerdo con los lineamientos de Applied Biosystems. 25ng de ARN se agregaron a cada reacción, junto con reactivos de núcleo PE/Applied Biosystems TaqMan EZ RT-PCR y los cebadores y sondas antes mencionados. Las reacciones por RT-PCR se corrieron por duplicado bajo las siguientes condiciones: 50°C durante 2 minutos, 60 °C por 30 minutos, 95 °C por 5 minutos, 40 ciclos de 94 °C durante 20 segundos y 60°C durante 1 minuto. Los valores de expresión se compararon con una curva estándar de números conocidos de moléculas de un transcrito sintético de ARN de ratón, y la expresión se reporta como número absoluto de moléculas de IL-22RA de ratón por reacción. Los datos preliminares sugieren que la expresión del IL-22RA de ratón, puede ser ligeramente subregulada en los colones distales de ratones del día 7 y día 10 con IBD inducida por DSS cuando se compara a los niveles de expresión en colon normal de ratón. Ejemplo 12 IL-22 e Indicadores Proinflamatorios en un modelo de endotoxemia moderado: Modelo de ratón para endotoxemia inducida por LPS A. Modelo de ratón para endotoxemia inducida por LPS: Evaluación de citocinas proinflamatorias y temperatura corporal en el modelo de endotoxemia de ratón inducido por LPS Se diseñó un experimento in vivo para examinar el efecto de IL-22RA2 (IL-22RA2) en un modelo de ratón LPS de endotoxemia media. Para evaluar inicialmente el modelo, se midieron las citocinas proinflamatorias y la temperatura del cuerpo para recolectar los datos de referencia para el modelo. Brevemente, ratones de seis meses Balb/c (CRL) hembras se inyectaron con 25 g LPS (Sigma) en PBS estéril intraperitonealmente (IP) . Muestras de suero se recolectaron a 0, i, 4, 8, 16, 24, 48 y 72 hr de grupos de 8 ratones por cada punto de tiempo. Muestras de suero se ensayaron para los niveles de citocina inflamatoria. Los niveles de IL-lb, IL-6, T Fa, IL-10 y proteína A amiloide de suero (SAA) se midieron usando kits ELISA comerciales adquiridos de Biosource International (Camarillo, CA) . Los niveles de TNFa tuvieron un pico a 4000pg/ml y los niveles de IL-10 fueron 341 pg/ml a 1 hr después de la inyección por LPS. 4 hr después de la inyección por LPS, los IL-6, IL-lb y el IL-10 fueron 6,100 pg/ml, 299 pg/ml y 229 pg/ml, respectivamente. Los niveles de SAA en suero fueron 0.405 mg/ml por 4 hr después de la inyección de LPS. Las concentraciones de SAA en suero continuaron incrementándose hasta 3.9 mg/ml por 24 hr después de LPS, sin embargo, niveles de SAA mayores a 1 hasta 2 mg/ml en suero son difíciles de medir con precisión o reproducibles con el kit existente de ELISA, debido a las interacciones entre SAA y otros componentes del suero. Estos resultados indicaron que las citocinas proinflamatorias, además del IL-22 (Ejemplo 11B) , se produjeron de hecho en este modelo. Así, se establecieron los siguientes criterios como marcadores biológicos para el modelo LPS de endotoxemia media: niveles de suero de TNFa 1 hr después de LPS, niveles de suero de IL- 6, 4 hr después de LPS y niveles de suero de SAA 4 y 8 hr después de LPS . Las temperaturas del cuerpo en un grupo separado de animales se observaron al. implantar quirúrgicamente dispositivos de telemetría en el curso de 72 hr del experimento. Las temperaturas del cuerpo en los ratones cayó como máximo por 2°C desde 37.07°C a 34.98°C, 30 minutos después de la inyección de LPS . La inyección de 100 ug de proteína de fusión IL-22RA2-FC 30 minutos antes de la inyección con LPS, redujo significativamente alrededor del 50% de la inducción con SAA en el punto de tiempo de 4hr y 8hr, mientras que 10 ug de IL-22RA2-Fc no tuvieron un efecto importante. No hubo un cambio importante para el nivel de TNF-alfa y el nivel de IL-6. La inyección de IL-22RA2-Fc redujo el conteo de neutrófilos en circulación en un punto de tiempo de lhr. Se demostró que la administración de IL-22RA2-FC puede neutralizar la actividad de IL-22 en términos de la inducción de SAA. B. Detección de la actividad de IL-22 en suero de ratón del modelo de endotoxemia de ratón inducido por LPS usando células BaF3/CRF2-4/IIL-22RA en un Ensayo de Proliferación con Azul de Alamar Células BaF3/CRF2-4/lL-22RA, aquí descritas, se asentaron y lavaron en PBS 2 veces para asegurar la eliminación del mlL-3, y luego se hicieron girar una tercera vez y volvieron a suspender en los medios completos (RPMI 1640, 10% FBS, 1% GlutaMAX, 1% de piruvato de sodio) , pero sin mIL-3 (después referido en la presente como "medio libre de mIL-3"). Las células luego se contaron en un hemocitómetro . Las células se colocaron en placas en un formato de 96 pozos a 5000 células por pozo en un volumen de 100 µ? por pozo usando los medios libres de mIL-3. El suero de los ratones con endotoxemia inducida por LPS descrito en el Ejemplo 11A anterior, se diluyó hasta 2% en medios libres de mIL-3 en la hilera superior de la placa y luego se diluyeron en serie 1:2 hasta las 7 hileras restantes en la placa de 96 pozos, dejando un volumen de 100 µ? en cada pozo. Esto luego se agregó a los 100 µ? de células, para concentraciones finales de suero de 1%, 0.5%, 0.25%, 0.125%, 0.063%, 0.031%, 0.016%, y 0.018% en un volumen total de ensayo de 200 µ? . Las placas de ensayo se incubaron a 37°C, 5% C02 por un tiempo de 4 dxas en el cual Azul de Alamar (Accumed, Chicago, IL) se agregó a 20 µ?/????. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 16 horas. El azul de Alamar dio una lectura fluorométrica basada en el número de células vivas, y es asi una medición directa de la proliferación celular en comparación con un control negativo. Las placas se leyeron en un contador multietiquetas Wallac Victor 2 1420 (Wallac, Turku, Finlandia) a longitudes de onda 530 (Excitación) y 590 (Emisión) . Los resultados no mostraron una proliferación importante arriba de los niveles de respaldo en los puntos de tiempo de 0 hora, 1 hora, 8 hora, y 16 horas. Muestras de suero del punto de tiempo de 4 horas mostraron incrementos desde 4 veces hasta más de 10 veces en proliferación arriba del respaldo, indicando la presencia de IL-22 en esas muestras. C. Modelo de endotoxemia de ratón inducido por LPS: Experimento para evaluar los efectos de IL-22RA2 Se probó la capacidad del tratamiento con IL-22RA2 para efectuar indicadores porinflamatorios con una dosis simple de 25 µg de LPS IP en ratones . Todas las muestras se analizaron por SAA, IL-22 y conteos de neutrófilos en circulación. Los subconjuntos de cada grupo se analizaron para niveles de citocinas en particular (muestras de 1 hora se seleccionaron para T F alfa, muestras de 4 horas se analizaron para IL-6) . Los animales se sacrificaron en los puntos de tiempo indicados en la Tabla 8 a continuación y se recolectaron la sangre entera y el suero y se formaron alícuotas para análisis . 72 ratones C57BL/6N hembras (CRL) se les aplicó una dosis sencilla IP de IL- 22RA2 como se describe en la Tabla 8, a continuación. Los ratones de control fueron C57BL/6N (CRL) . 30 minutos después, recibieron otra inyección IP de 25 ig LPS (Sigma) en 100 µ?, para iniciar la cascada de la endotoxemia. Los ratones en cada grupo se sacrificaron a los puntos de tiempo correspondientes como se indica en la Tabla 8, 50 µ? de sangre entera se recolectaron para medir los números totales de los neutrófilos circulantes y el resto se giraron para suero y se formaron alícuotas de los diversos ensayos aquí descritos .

Tabla 8 Grupo No Tratamiento LPS Sacrificio Muestras A 8 100 µg de 25 µq IP, 30 1 hora Alícuotas de IL-22RA2 IP min post tx suero Sangre para CBC B 8 10 µ9 de IL- 25 µg IP, 30 1 hora Alícuotas de 22RA2 IP min post tx suero Sangre para CBC C 8 200 µ? de 25 g IP, 30 1 hora Alícuotas de PBS IP min post tx suero Sangre para CBC D 8 100 µg de 25 µg IP, 30 4 horas Alícuotas de 1L-22RA2 IP min post tx suero Sangre para CBC E 8 10 µq de IL- 25 µg IP, 30 4 horas Alícuotas de 22RA2 IP min post tx suero Sangre para CBC F 8 200 µ? de 25 µg IP, 30 4 horas Alícuotas de PBS IP min post tx suero Sangre para CBC G 8 100 µg de 25 µg IP, 30 8 horas Alícuotas de IL-22RA2 IP min post tx suero Sangre para CBC H 8 10 µg de IL- 25 µg IP, 30 8 horas Alícuotas de 22RA2 IP min post tx suero Sangre para CBC Grupo No Tratamiento LPS Sacrificio Muestras J 8 200 µ? de 25 µg 1P, 8 horas Alícuotas de PBS IP 30 min suero Sangre post t para CBC K 5 controles ninguno Pre LPS Alícuotas de suero Sangre para CBC D. IL-22RA2-FC4 neutraliza la inducción de SAA in vivo: ELISA de SAA mostrando expresión de SAA inducida por LPS en el modelo de endotoxemia de ratón inducido por LPS se inhibe por la inyección de IL-22RA2-Fc4 : Para evaluar si el IL-22RA2 puede inhibir la inducción de SAA en el modelo de ratón de endotoxemia inducida por LPS, ratones se inyectaron con IL-22RA2, 30 minutos previo a la inyección LPS, como se muestra en la Tabla 8 en el Ejemplo 11C anterior . Un ELISA para determinar los niveles de SAA en las muestras a la 4a hora y 8a hora se efectuó usando el Kit de Inmunoensayo para Ratón SAA (BioSource International, California) siguiendo las instrucciones del fabricante. En el punto de tiempo de la 4a hora, ratones tratados con l00 g o 10µg de IL-22RA2 mostraron una reducción dependiente de la dosis, estadísticamente importante en los niveles de SAA con relación a los ratones inyectados con PBS. En el punto de tiempo de la 8 hora, los ratones tratados con lOC^g, continuaron mostrando una reducción estadísticamente importante en los niveles de SAA con relación a ratones inyectados con PBS . Esto indica que la presencia de IL-22RA2 puede para inhibir la inducción de SAA por LPS in vivo. Ejemplo 13 Efectos In vivo del polipéptido IL-22 en la piel A. Acantosis inducida por IL-22 Ratones (hembras, C3H/HEJ, 8 semanas de edad; Jackson Labs, Bar Harbor, ME) se dividieron en tres grupos de seis animales y un grupo de 4. El IL-22 producido por BHK humana se administró por infusión constante por medio de bombas mini-osmóticas, lo que resulta en concentraciones de suero en régimen local y permanente, proporcionales a la concentración del IL-22 contenido en la bomba. Bombas mini-osmóticas Alzet (modelo 2002; Alza Corporation Palo Alto, CA) se cargaron bajo condiciones estériles con proteína IL-22 (A601F, 0.22 mL) diluida en solución salina amortiguada de fosfato (pH 7. 0) hasta una concentración dentro de una bomba de 2 mg/mL para el grupo 1 de ratones, 0.2 mg/mL para el grupo 2 de ratones, 0.02 mg/mL para el grupo 3 de ratones, o 0 mg/mL (solamente diluyente) para el grupo 4 de ratones. Las bombas se implantaron subcutáneamente en los ratones a través de una incisión de 1 cm en la piel dorsal, y la piel se cerró con cierres estériles para heridas . Estas bombas se diseñaron para suministrar sus contenidos a una relación de 0.5 µ? por hora durante un periodo de 14 días. Usando esta relación nominal de infusión, se calcularon los niveles de dosis para ser 24 µg/día/ 2.4 µg/diaí 0.24 g/dia y 0 µg/dí para los grupos 1-4 , respectivamente . Al final del periodo de 14 díaa, a los ratones se les aplicó la eutanasia y una muestra de piel de un cuadro de aproximadamente 1 cm que rodea el área de la bomba se recolectó de cada ratón. La piel se fijó en 10% de formalina amortiguada neutral. Las muestras fijas en formalina de la piel se depositaron en parafina, se procesaron de rutina, se hicieron secciones a 5 um y tiñeron con hematoxilina y eosina. Los tejidos se examinaron microscópicamente en forma ciega por un patólogo veterinario certificado por un consejo ACVP. Se observaron los cambios histológicos, y la severidad de la acantosis (esto es, engrosamiento de la epidermis) registrada de una forma subjetiva usando el siguiente sistema de marcado: 0 normal, 1 acantosis mínima, 2 acantosis media, 3 acantosis moderada y 4 acantosis severa. Además, la piel de los grupos seleccionados formó imágenes con una cámara digital CoolSnap (Roper Scientific, Inc., San Diego, CA) y el grosor epidemial se midió usando un software de histomorfometría (Scion Image para Windows, v.4.02, Scion Corp., Frederick, MD) . La administración de IL-22 a 2.4, y 24 µg/día resultó en engrosamiento de la epidermis como se muestra por el registro promedio de acantosis (ver s) consistentemente mayor que el observado en la piel del grupo de control. Por otro lado, los animales tratados con IL-22 también tuvieron infiltrados de células tnononucleares en la epidermis. Estos infiltrados no se observaron en los controles tratados con vehículo. Los registros de acantosis del grosor epidemial y las mediciones del grosor de la piel (en unidades genéricas de pixeles) por grupos se muestran en la Tabla 9 a continuación, como siguen: Tabla 9 B. Efecto de IL-22RA2 en la acantosis inducida por IL-22 Ratones (hembras, C3H/HEJ, 8 semanas de edad; Jackson Labs, Bar Harbor, ME) se dividieron en ocho grupos de ocho animales cada uno. IL-22 se administró por infusión constante por medio de bombas mini-osmóticas, como se describe en el Ejemplo 12A. Las bombas Alzet mini-osmóticas (modelo 2001; Alza Corporation Palo Alto, CA) se cargaron bajo condiciones estériles con protelna IL-22 (A#601F, 0.22 mL) diluida en solución salina amortiguada de fosfato (pH 7.0) hasta una concentración dentro de la bomba de 0.22 mg/mL por grupo de 1-2 ratones, 0.45 mg/mL para el grupo de 3-4 ratones, 0.9 mg/mL para el grupo de 5-6 ratones, o 0 mg/mL (solamente diluyente) para el grupo de 7-8 ratones. Estas bombas se diseñaron para suministrar sus contenidos a una relación de 0.5 µ? por hora durante un periodo de 14 días. Usando esta relación nominal de infusión, se calcularon los niveles de dosis para ser 10 µg/día en los grupos 1-2, 5 µg/día para los grupos 3-4, 2.5 µg/día en los grupos 5-6 y 0 µg/día para los grupos 7-8. Para cada par de grupos a un nivel de dosis dado de IL-22, uno de los grupos se inyectó tres veces (días 1,3, y 5) con 0.1 mg de proteína IL-22RA2 Fe humana (aquí descrita) por vía interperitoneal . El otro grupo se inyectó de la misma forma con vehículo (PBS) . Al día 8 del estudio, se les aplicó la eutanasia a los ratones y una muestra de piel de aproximadamente 1 cm cuadrado que rodea al área de la bomba se recolectó de cada ratón. La piel se fijó en 10% de formalina amortiguada neutral. Las muestras fijas en formalina de la piel se depositaron en parafina, se procesaron de rutina, se hicieron secciones a 5 um y tiñeron con hematoxilina y eosina. Los tejidos se examinaron microscópicamente en forma ciega por un patólogo veterinario certificado por el consejo ACVP. Este estudio se registró en una forma diferente que en el ejemplo previo. Se determinó el número de capas en la epidermis, desde elstratum basalis al stratum granulosum. Con base en los resultados, las secciones se registraron como siguen: 0 normal (2-3 capas) , 1 engrosamiento medio (3-4 capas) , 2 engrosamiento moderado (4-6 capas) y 3 engrosamiento severo (>6 capas) . La administración de IL-22 a 2.5, 5, 10 µg/día resultó en el engrosamiento de la epidermis (ver Tabla 10) . Por otro lado, los animales tratados con IL-22 también tuvieron infiltrados de células mononucleares en la epidermis . Estos infiltrados no se observaron en los controles tratados con vehículo. Paralelo con la administración de 100 //g de IL-22RA2 (3 inyecciones) disminuyó la cantidad de engrosamiento de la epidermis en ratones tratados con 5 µg de IL-22/día. Los registros de acantosxs del grosor epidermal por grupos se muestran en la Tabla 10, a continuación, como siguen: Tabla 10: El engrosamiento de la epidermis y los infiltrados inmunes se observaron también en pieles psoriáticas humanas . El fenotipo de la piel observado en la inyección subcutánea con IL-22, indicó además el rol potencial de IL-22 en la patogénesis de psoriasis. El hecho de que el IL-22RA2-FC puede neutralizar el fenotipo de piel inducido por IL-22 sugiere el uso potencial de otros antagonistas IL-22 tales como y anticuerpo anti-IL-22 neutralizantes o el receptor soluble para el tratamiento de psoriasis y otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-22. C. Efecto de los receptores IL-22RA solubles, y anticuerpos anti-IL-22RA sobre la acantosis inducida por IL-22 o inducida por IL-20 La actividad de los receptores IL-22RA solubles, o un anticuerpo para IL-22RA, para inhibir la actividad in vivo de IL-22 o IL-20 se evalúa de una forma similar, usando el punto final histológico de acantosis provocada por infusión subcutánea de proteína IL-22 o IL-20. En un ejemplo de este modelo, se implantaron ratones C3H/HEJ con bombas mini-osmóticas subcutáneas como se describe en ejemplos 12(A) y 12 (B) arriba. Durante el periodo de exposición a IL-22 o IL-20, los ratones se trataron por inyección con el anticuerpo monoclonal purificado para IL-22 o se inyectaron similarmente con vehículo como control . Al final del periodo de infusión con IL-22, se tomarían muestras de la piel del área de la bomba para análisis histológico. Similar al antagonista IL-22 del receptor IL-22RA2 soluble, receptores solubles de IL-22RA del antagonista IL-22 o IL-20, o anticuerpos anti-IL-22RA de la presente invención, se espera que muestren una reducción en el engrosamiento de la epidermis y en los infiltrados de células inmunes provocados por IL-22 o IL-20, y así ser útiles como antagonistas IL-22 o IL-20 como terapéuticos para psoriasis y otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-22 o IL-20. Ejemplo 14 IL-22 se sobreregula en muestras de la piel psoriática humanas Muestras de ARN: Muestras de la piel normales así como de piel de pacientes con psoriasis se obtuvieron. Las últimas incluyeron piel de psoriasis de tipo placas estable y de piel adyacente no involucrada. Se aisló el ARN de muestras de la piel humana usando métodos convencionales . La integridad y calidad de las muestras de ARN se probaron en un Bioanalizador Agilent 2100 (Agilent Technologies, aldbronn Alemania) . Cebadores y Sondas para RT-PCR Cuantitativa RT-PCR cuantitativa en tiempo real usando el Sistema de Detección de Secuencias ABI PRISM 7700 (PE Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA) se ha descrito previamente (Ver, Heid, C. A. et al., Genome Research 6: 986-994, 1996; Gibson, U. E. M. et al. , Genome Research 6: 995-1001,1996 ; Sundaresan, S. et al., Endocrinology 139: 4756-4764, 1998. Este método incorpora el uso de una sonda especifica de genes que contiene reportero y colorantes fluorescentes de apagado. Cuando la sonda está intacta la emisión del colorante reportero se niega debido a la proximidad cercana del colorante de apagado. Durante la extensión del PCR usando cebadores delantero y reverso adicionales específicos de genes, la sonda se desdobla por la actividad nucleolítica 5' a 3' de la polimerasa de ADN rTth, la cual libera el colorante reportero de la sonda, lo que resulta en un incremento en la emisión fluorescente. Los cebadores y sondas usados para RT-PCR cuantitativa en análisis de tiempo real de expresión de IL-22 se diseñaron usando el software de diseño de cebadores Primer Express (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) . Los cebadores para el IL-22 humano se diseñaron abarcando una unión de intrón-exón para eliminar la amplificación del ADN genómico. El cebador delantero, ZC42459 (SEQ ID NO: 22) y el cebador reverso, ZC42458 (SEQ ID NO: 23) se usaron en una reacción PCR (a continuación) a una concentración de 800 riM para sintetizar un producto de 72 pares de bases. La sonda correspondiente IL-22, ZC42460 (SEQ ID NO: 24) se sintetizó y etiquetó internamente en ZymoGenetics . La sonda de IL-22 se etiquetó en el extremo 5' con un colorante reportero fluorescente (6-carboxi-fluoresceína) (FA ) (PE Applied Biosystems) y en el extremo 3' con un colorante fluorescente de apagado (6-carboxi-tetrametil-rodamina) (TAMRA) (PE Applied Biosystems) . C. RT-PCR cuantitativa en tiempo real Los niveles relativos del ARNm de IL-22 se determinaron al analizar las muestras de ARN total usando el kit de reactivos de núcleo TaqMan EZ RT-PCR (PE Applied Biosystems) . El agotamiento del transcrito de IL-22 se hizo para generar una curva estándar usada para cuantificación. La curva consistió de diluciones en serie de 10 tantos en el intervalo desde alrededor de le8 a le3 copias totales del mensaje completo para IL-22 con cada punto de la curva estándar analizado por triplicado. Las muestras de ARN total de la piel también se analizaron por triplicado para los niveles de transcrito de IL-22 humano, y para niveles de hGUS como un control endógeno. En un volumen total de 25 µ?, cada muestra de ARN se sometió a una reacción TaqMan EZ de RT-PCR (PE Applied Biosystems) que contiene: aproximadamente 25 ng de ARN total en agua tratada con DEPC (libre de Dnasa/Rnasa) ; cebadores apropiados (aproximadamente 800 hM ZC 42459 (SEQ ID NO:22) y ZC 42458 (SEQ ID N0:23); sonda apropiada (aproximadamente 100 nM ZC 42460 (SEQ ID NO: 24); solución amortiguadora IX TaqMan EZ; 3 mM de acetato de manganeso; 300 µ? de cada d-CTP, d-ATP, y d-GTP y 600 µ? de d-UTP; polimerasa de ADN rTth (0.1 ?/µ?) ; y AmpErase UNG (0.01 U/µ?) . Las condiciones de ciclo térmico por PCR fueron como siguen: una etapa inicial de tratamiento con UNG de un ciclo a 50°C durante 2 minutos; seguido por una etapa de transcripción reversa (RT) de un ciclo a 60°C por 30 minutos; seguido por una desactivación de la etapa UNG de un ciclo a 95°C por 5 minutos; seguido por 40 ciclos de amplificación a 94°C durante 20 segundos y 60°C durante 1 minuto. Los niveles relativos de ARN de IL-22 se determinaron al usar el Método de Curva Estándar como se describe por el fabricante, PE Biosystems (Boletín de usuario#2: Sistema de Detección de Secuencias ABI Prism 7700, Cuantificación Relativa de Expresión de Genes, 11 de Diciembre, 1997) . Las mediciones de hGUS se usaron para normalizar los niveles de IL-22. Los datos se muestran en la Tabla 11 a continuación. Tabla 11 Muestra de Piel IL-22 Normal 0 No involucrada 0 Involucrada 1149 El ARNm de IL-22 fue indetectable en muestras de la piel de pacientes normales o de áreas no involucradas . En contraste, hubo una sobreregulación dramática para el mensaje de IL-22 en la piel involucrada de pacientes con psoriasis. Estos datos suportan una fuerte asociación de enfermedad para el IL-22 con la psoriasis humana. La sobreexpresión de IL-22 como se muestra lesiones psoriáticas humanas, sugiere que el IL-22 se involucra en la psoriasis humana. Por otro lado, como es aqui descrito, la sobreexpresión de IL-22 en ratones transgénicos mostró engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes indicativas de un fenotipo psoriático, y además la inyección de IL-22 en ratones normales mostró engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes indicativo de un fenotipo psoriático que se formó por ablación por el antagonista del receptor soluble IL-22RA2. Tales datos in vivo sugieren además que el IL-22 pro-inflamatorio está involucrado en la psoriasis. Como tales, los antagonistas para la actividad de IL-22, tales como los anticuerpos monoclonales anti-humano-IL-22 de la presente invención, así como los receptores solubles y anticuerpos para ello, son útiles en el tratamiento terapéutico de enfermedades inflamatorias, particularmente como antagonistas para IL-22 en el tratamiento de psoriasis. Por otro lado, los antagonistas para la actividad de IL-22, tales como los anticuerpos monoclonales anti-humanos IL-22 de la presente invención, así como receptores solubles y anticuerpos de ellos, son útiles en el tratamiento terapéutico de otras enfermedades inflamatorias por ejemplo como antagonistas para IL-22 en el tratamiento de dermatitis atópica, IBD, colitis, endotoxemia, artritis, artritis reumatoide, y artritis psoriática, enfermedad respiratoria de adultos (ARD) , choque séptico, insuficiencia múltiple de órganos, lesión inflamatoria del pulmón tales como asma o bronquitis, neumonía bacteriana, psoriasis, eczema, dermatitis atópica, y enfermedad inflamatoria del intestino tales como colitis ulcerante y enfermedad de Crohn.

Ejemplo 15 IL-22 se sobreregula en muestras de la piel con dermatitis atópica humana Muestras de la piel normales (n=4) así como de piel de pacientes con dermatitis atópica (n=4) se obtuvieron. El ARN se aisló de muestras de la piel humana usando métodos convencionales. La integridad y calidad de las muestras de ARN se probó en el Bioanalizador Agilent 2100 (Agilent Technologies, Waldbronn Alemania) . Cebadores y Sondas para RT-PCR cuantitativa La RT-PCR cuantitativa en tiempo real usando el Sistema de Detección de Secuencias ABI PRISM 7700 (PE Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA) se ha descrito previamente (Ver, Heid, C. A. et al., Genome Research 6: 986-994,1996; Gibson, U. E. M. et al., Genome Research 6: 995-1001,1996; Sundaresan, S. et al., Endocrinology 139: 4756-4764, 1998. Este método incorpora el uso de una sonda específica de genes que contiene colorantes fluorescentes de apagado y reportero. Cuando la sonda está intacta la emisión del colorante reportero se niega debido a la proximidad cercana del colorante de apagado. Durante la extensión del PCR usando cebador delantero y reverso adicionales específicos de genes, la sonda se desdobla por la actividad nucleolítica 5' a 3' de la polimerasa de ADN rTth la cual libera el colorante reportero de la sonda que resulta en un incremento en la emisión fluorescente. Los cebadores y sondas usados para RT-PCR cuantitativa en análisis de tiempo real de la expresión de IL-22 se diseñaron usando el software para diseño de cebadores Primer Express (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) . Los cebadores para el IL-22 humano se diseñaron abarcando una unión de intrón-exón para eliminar la amplificación del ADN genómico. El cebador delantero, ZC42459 (SEQ ID NO: 22) y el cebador reverso, ZC42458 (SEQ ID NO: 23) se usaron en una reacción PCR (a continuación) a una concentración de 800 nM para sintetizar un producto de 72 pares de bases. La sonda correspondiente IL-22, ZC42460 (SEQ ID NO: 24) se sintetizó y etiquetó internamente en ZymoGenetics . La sonda de IL-22 se etiquetó en el extremo 5' con un colorante reportero fluorescente (6-carboxi-fluoresceina) (FAM) (PE Applied Biosystems) y en el extremo 3' con un colorante fluorescente de apagado (6-carboxi-tetrametil-rodamina) (TAMRA) (PE Applied Biosystems) . C. RT-PCR cuantitativa en tiempo real Los niveles relativos del ARNm de IL-22 se determinaron al analizar muestras de ARN total usando el kit de reactivos de núcleo TaqMan EZ RT-PCR (PE Applied Biosystems) . El agotamiento del transcrito IL-22 se hizo para generar una curva estándar usada para cuantificación. La curva consistió de diluciones en serie 10 veces en el intervalo desde alrededor de le8 a le3 copias totales del mensaje completo para IL-22 con cada punto de la curva estándar analizado por triplicado. Las muestras de ARN total de la piel también se analizaron por triplicado para los niveles de transcrito de IL-22 humano y para niveles de hGUS como un control endógeno. En un volumen total de 25 µ?, cada muestra de ARN se sometió a una reacción TaqMan EZ de RT-PCR (PE Applied Biosystems) que contiene: aproximadamente 25 ng de ARN total en agua tratada con DEPC (libre de Dnasa/Rnasa) ; cebadores apropiados (aproximadamente 800 nM ZC 42459 (SEQ ID NO: 22) y ZC 42458 (SEQ ID NO: 23); sonda apropiada (aproximadamente 100 nM ZC 42460 (SEQ ID NO: 24); solución amortiguadora IX TaqMan EZ; 3 mM de acetato de manganeso; 300 µ? de cada d-CTP, d- T , y d-GTP y 600 µ? de d-UTP; polimerasa de ADN rTth (0.1 U/µ?) ; y AmpErase ÜNG (0.01 ?/µ?) . Las condiciones de ciclo térmico por PCR fueron como siguen: una etapa inicial de tratamiento con ÜNG de un ciclo a 50°C durante 2 minutos; seguido por una etapa de transcripción reversa (RT) de un ciclo a 60°C por 30 minutos; seguido por una desactivación de la etapa UNG de un ciclo a 95°C por 5 minutos; seguido por 40 ciclos de amplificación a 94°C durante 20 segundos y 60 °C durante 1 minuto . Los niveles relativos de ARN de IL-22 se determinaron al usar el Método de Curva Estándar como se describe por el fabricante, PE Biosystems (Boletín de usuario#2 : Sistema de Detección de Secuencias ABI Prism 7700, Cuantificación Relativa de Expresión de Genes, 11 de Diciembre, 1997) . Las mediciones de hGUS se usaron para normalizar los niveles de IL-22. El ARNm de IL-22 fue indetectable en muestras de la piel de pacientes normales. En contraste, hubo una sobreregulación dramática para el mensaje IL-22 en 3 de 4 muestras de la piel de pacientes con dermatitis atópica (alrededor de 400-2300 copias) . Estos datos soportan una fuerte asociación de enfermedad para IL-22 con la dermatitis atópica humana. La sobreexpresión de IL-22 como se muestra en pieles con dermatitis atópica humanas, sugiere que el IL-22 se involucra en la dermatitis atópica humana. Por otro lado, como es aquí descrito, la sobreexpresión de IL-22 en ratones transgénicos mostró engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes indicativas de un fenotipo de dermatitis atópica, y además la inyección de IL-22 en ratones normales mostró engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes indicativo de un fenotipo de dermatitis atópica que se formó por ablación por el antagonista del receptor soluble IL-22RA2. Tales datos in vivo sugieren además que el IL-22 pro-inflamatorio está involucrado en la dermatitis atópica. Como tales, los antagonistas para la actividad de IL-22, tales como los anticuerpos monoclonales anti-humano-IL-22 de la presente invención, asi como los receptores solubles y anticuerpos para ello, son útiles en el tratamiento terapéutico de enfermedades inflamatorias, particularmente como antagonistas para IL-22 en el tratamiento de dermatitis atópica. Por otro lado, los antagonistas para la actividad de IL-22, tales como los anticuerpos monoclonales anti-humanos IL-22 de la presente invención, así como receptores solubles y anticuerpos de ellos, son útiles en el tratamiento terapéutico de otras enfermedades inflamatorias por ejemplo como antagonistas para IL-22 en el tratamiento de dermatitis atópica, IBD, colitis, endotoxemia, artritis, artritis reumatoide, y artritis psoriática, enfermedad respiratoria de adultos (ARD) , choque séptico, insuficiencia múltiple de órganos, lesión inflamatoria del pulmón tales como asma o bronquitis, neumonía bacteriana, dermatitis atópica, eczema, dermatitis atópica y de contacto, y enfermedad inflamatoria del intestino tales como colitis ulcerante y enfermedad de Crohn. Ejemplo 16 Anticuerpos Policlonales Humanos IL-22 Los anticuerpos anti IL-22 policlonales se prepararon al inmunizar 2 conejos hembras blancos de Nueva Zelandia con el polipéptido IL-22 humano recombinante maduro purificado (residuos de aminoácidoss 22 (Ala) a 167 (lie) de SEQ ID NO: 6), producidos de las células BHK (IL-22-BHK) . Se les dio a cada conjeo una inyección intraperitoneal (IP) inicial de 200 µg de protelna purificada en Adyuvante Completo de Freund seguido por inyecciones IP de refuerzo de 100 µg de péptido en Adyuvante Incompleto de Freund cada tres semanas. De siete a diez dias después de la administración de la segunda inyección de refuerzo (3 inyecciones en total) , los animales se desangraron y el suero se recolectó. Los animales luego se reforzaron y sangraron cada tres semanas. Los anticuerpos policlonales específicos de IL-22 humanos, se purificaron por afinidad del suero de conjeo inmune usando una columna de proteínas CNBr-SEFAROSA 4B (Pharmacia LKB) que se preparó usando 10 mg de IL-22-BHK humano de proteína recombinante purificada de antígeno específico por gramo de CNBr-SEFAROSA, seguido por una diálisis 20X en PBS durante la noche. Los anticuerpos humanos específicos de IL-22 se caracterizaron por ELISA usando 500ng/ml de la proteína humana recombinante purificada IL-22-BHK como objetivo del anticuerpo. El límite inferior de detección (LLD) del anticuerpo purificado de afinidad antihumano IL-22 de conejo es 280 pg/ml en su IL-22-BHK humano de antígeno recombinante purificado específico. Los anticuerpos humanos policlonales específicos de IL-22 se caracterizaron además por su capacidad para bloquear la acti-vidad proliferativa celular ("ensayo de neutralización") del IL-22-BHK humano recombinante purificado en células BaF3/CRF2-4/IL-22RA (Ejemplo 2 y Ejemplo 3) . Un exceso 50X molar de los anticuerpos policlonales humanos específicos de IL-22 fue suficiente para inhibir la proliferación de las células . Ejemplo 17 Anticuerpos monoclonales Anti-humanos IL-22 Anticuerpos monoclonales se prepararon al inmunizar 4 ratas hembras Sprague-Dawley (Charles Ri er Laboratories, Wilmington, MA) , con el polipéptido IL-22 humano recombinante maduro purificado (residuos de aminoácidoss 22 (Ala) a 167 (lie) de SEQ ID NO:6), producidos de células BHK (IL-22-BHK) . Se les dio a cada una de las ratas, una inyección intraperitoneal (IP) inicial de 100 µ de la proteína IL-22 recombinante humana purificada en Adyuvante Completo de Freund (Pierce, Rockford, IL) seguido por inyecciones IP de refuerzo de 50 µg de la proteína recombinante purificada en Adyuvante Incompleto de Freund cada dos semanas . De siete a diez días después de la administración de la tercera inyección de refuerzo, los animales se desangraron y el suero se recolectó. Las muestras de sueros de rata específicas de IL-22 humano se caracterizaron por ELISA usando ob éticos de anticuerpos de 500 ng/ml de IL-22-BHK humano biotinilado y 500 ng/ml de IL-22 de ratón biotinilado, muIL-22-?. coli biotinilado (R+D Systems, inneapolis, MN) . Tres muestras de suero de rata se habían titulado al IL-22-BHK humano biotinilado de objetivo de anticuerpo específico a una dilución de 1:1 E5 y al muIL-22-?. coli biotinilado de objetivo de anticuerpo específico a una dilución de 1:1E4. Los esplenocitos y las células de ganglio linfático se cosecharon de 2 ratas de alta titulación y se fusionaron a células de mieloma SP2/0 (ratón) usando PEG 1500 en dos procedimientos de fusión por separado (relación de fusión 4:1, esplenocitos a células de mieloma, "Antibodies A Laboratory Manual, E. Harlo y D. Lañe, Cold Spring Harbor Press). Después de 10 días de crecimiento posteriores a la fusión, los acumulados de hibridoma que producen anticuerpos específicos se identificaron por ELISA usando la proteína recombinante biotinilada IL-22-BHK humana y la proteína recombinante biotinilada muIL-22-?. coli como objetivos de anticuerpos por separado. Los acumulados de hibridoma positivos en ambos protocolos ELISA se analizaron además por su capacidad para bloquear o reducir la actividad proliferativa celular ("ensayo de neutralización") de muL-22-?. coli purificado recombinante en células BaF3/CRF2-4/lL-22RA (Ejemplo 2 y Ejemplo 3) . Los acumulados de hibridoma que producen resultados positivos solamente por ELISA o por ELISA y el "ensayo de neutralización" se clonaron al menos dos veces por dilución limitante . Los anticuerpos monoclonales purificados de los medios de cultivo de tejidos se caracterizaron para su utilidad en un ELISA para la determinación cuantitativa de IL-22 humano nativo y recombinante en muestras de suero de ratón y de humano. Los dos anticuerpos seleccionados resultaron en un ensayo cuantitativo con un límite inferior de detección de aproximadamente 1 ng/ml de huIL-22-?. coli recombinante en 100% de suero humano Los anticuerpos monoclonales purificados de los medios de cultivo de tejidos se caracterizaron por su capacidad para bloquear o reducir la actividad proliferativa celular ("ensayo de neutralización") de huIL-22-?. coli o muIL-22-?. coli purificado recombinante en células BaF3/CRF2-4/lL-22RA (Ejemplo 2 y Ejemplo 3) . Seis anticuerpos monoclonales "neutralizantes" se identificaron de esta manera. Los hibridomas que expresan los anticuerpos monoclonales neutralizantes al IL-22 humano antes descrito se depositaron con el depositario de patentes de la American ype Tissue Culture Collection (ATCC; Manassas VA) como depósitos originales bajo el tratado de Budapest y se les dio el siguiente No. de Acceso ATCC: clon 266.16.1.4.4.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA- 5035); clon 266.5.1.2.2.3 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5033) ; clon 267.17.1.1.4.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5038); clon 267.4.1.1.4.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5037) ; clon 266.12.6.1.3.2.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5034) ; clon 266.19.1.10.5.2 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5036) ; y clon 267.9.1.1.4.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5353) . Ejemplo 18 Anticuerpos monoclonales anti-IL-22RA Anticuerpos monoclonales se prepararon al inmunizar 4 ratas de Lewis (Rockland Immunochemicals, Gilbertsville, PA) , con la proteína de fusión recombinante purificada y desdoblada, muIL-22RA-Fc (SEQ ID N0:4) . Se les dio a cada una de las ratas una inyección intraperitoneal (IP) inicial de 100 de la proteína de fusión recombinante purificada en Adyuvante Completo de Freund (Pierce, Rockford, IL) seguido por inyecciones IP de refuerzo de 50 µg de la proteina recombinante purificada en Adyuvante Incompleto de Freund cada dos semanas durante cuatro semanas . Después de las primeras cuatro semanas de inmunizaciones, inyecciones IP de refuerzo de 50ug de la proteina recombinante purificada desdoblada acoplada a la emocianina de una variedad de lapa de la proteína portadora (KLH, Pierce, Rockford, IL) en Incompleto de Freund, se administraron cada dos semanas durante cuatro semanas. De siete a diez días después de la administración de la cuarta inyección de refuerzo, los animales se desangraron y el suero se recolectó. Las muestras de suero de rata específicas de muIL-22RA se caracterizaron por ELISA usando 500 ng/ml de la proteína de fusión recombinante purificada muIL-22RA-Fc como el objetivo del anticuerpo específico y una proteína de fusión no relacionada como un objetivo de anticuerpo no específico. Los esplenocitos se cosecharon de una rata de alta titulación y fusionaron a células de mieloma SP2/0 (ratón) en un protocolo optimizado de fusión mediado por PEG (Rockland Immunochemicals) . Después de 12 días de crecimiento posteriores a la fusión, los acumulados de hibridoma productores de anticuerpos específicos se identificaron por ELISA usando 500 ng/ml de cada una de la proteína de fusión recombinante purificada muIL-22RA-Fc-Bv como el objetivo de anticuerpo específico y una proteína de fusión no relacionada como un objetivo de anticuerpo no específico. Los acumulados de hibridoma positivos para el objetivo específico de anticuerpo solamente se analizaron además por su capacidad para bloquear o reducir la actividad proliferativa celular ("ensayo de neutralización") de muIL-22-?. coli recombinante purificada sobre células BaF3/CRF2-4/lL-22RA (Ejemplo 2 y Ejemplo 3) y una capacidad para enlazar el análisis FACS para las células BaF3/CRF2-4/lL-22RA (Ejemplo 2 y Ejemplo 3) como objetivo del anticuerpo. Los acumulados de hibridomas que producen un resultado positivo específico en el ensayo ELISA y resultados positivos en el FACS o "ensayo de neutralización", se clonaron al menos dos veces por dilución limitante. Anticuerpos monoclonales en medios de cultivo de tejidos se caracterizaron por su capacidad para bloquear o reducir la proliferación de células BaF3/CRF2-4/IL-22RA (Ejemplo 2 y Ejemplo 3) , que crecen en la presencia de proteínas recombinantes purificadas muIL-22-?. coli o huIL-22-???. Catorce anticuerpos monoclonales "neutralizantes" se han identificado y se han clonado nueve anticuerpos monoclonales .

Los hibridomas que expresan los anticuerpos monoclonales neutralizantes para el IL-22RA de ratón antes descritos, se depositaron con el depositario de patentes de la American Type Tissue Culture Collection (ATCC; Manassas VA) , como depósitos originales bajo el Tratado de Budapest y se les dieron los siguientes números de acceso de ATCC: clon R2.1.1G11.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####3 ) ; clon R2.1.5F4.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####]); clon R2.1.5H8.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####]); clon R2.1.12G7.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC clon R2.1.13C8.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC PTA-5037) ; clon R2.1.15E2.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####]); clon R2.1.16C11.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####]), clon R2.1.18C8.1 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####] ) y clon R2.1. 21G8. 2 (Designación de Depósito de Patente ATCC [####]). Ejemplo 19 Afinidad de enlace de dos anti-Ms-IL-22RA MAb de rata anticuerpo específico de cabra-anti-rata IgG-Fc gamma (Jackson) se inmovilizó encima de un chip CM5 Biacore. Se optimizó el ensayo para enlazar cada mAb sobre la superficie de captura anti-Rata y luego una serie de concentraciones de IL-22RA se inyectó a través del mAb para ver la asociación (Ka) y disociación (Kd) . Después de pruebas preliminares, se observó el enlace no específico entre la proteína de fusión y la superficie de captura del chip. Un vial de IL-22RA que tenía la etiqueta Fc4 desdoblada por trombina se adquirió y probó posteriormente para no mostrar ningunos efectos de respaldo. Después de cada corrida, se regenró la superficie de vuelta al anticuerpo anti-Rata con 2 inyecciones de 20mM de HC1. Se generaron los datos por cada MAb y software de evaluación (software BIAevaluation versión 3.2, Pharmacia BIAcore, Uppsala, Suecia) se usó para evaluar la cinética del enlace del anticuerpo anti-IL-22RA a la proteína IL-22RA, como se muestran en Tabla 12 a continuación: Tabla 12 **Los constantes de relación de asociación (Ka) disociación en equilibrio (Kd) para cada anti IL-22RA ??? muestran y los valores caen en los límites de la máquina. Chi2 se refiere a la suma de los cuadrados de los residuos entre las curvas de enlace y las curvas de ajuste de evaluación. Entre más cerca de 0, mayor confianza en los datos. Como se muestra por la Tabla 12, ambos Mab de anti-IL- 22RA se enlazan fuertemente a la proteína IL-22 A, como es evidente por el enlace en la concentración pico-molar al IL-22RA (etiqueta Fc4 desdoblada por trombina) . Estos datos se muestran con buena confianza con base en los bajos valores de Chi2 y muestrq que el clon mAb R2.1.5F4.1 tiene una afinidad ligeramente más fuerte por el receptor IL-22RA. Ejemplo 20 Análisis Inmunohistoquímico de la expresión de proteína IL-22 in vivo en muestras de tejido A. Resumen El análisis inmunohistoquímico (IHC) de la expresión de proteína IL-22 y localización, se logró usando anticuerpo monoclonal anti-humano IL-22 (anti-hlL-22) (Mab 266.19.1.10.5.2) en las siguientes muestras de tejido: una rejilla multi-Normal humana y rejilla de Tumor; pancreatitis humana, muestras de enfermedad del pulmón y renal; muestras de la piel con psoriasis humana; INS IL-22 TG (expresada del promotor de insulina de la rata) y WT de páncreas de rató ; muIL-22-EuLCK TG y muestra WT de piel de ratón; y muestra de colon de ratón DSS (WT y IL-22 KO) . Por otro lado se comparó el patrón de tinción del anticuerpo anti-hIL-22 monoclonal MAB 266.19.1.10.5.2 (Ejemplo 17) vs. Anticuerpo policlonal (anti-IL-22 de conejo) (Ejemplo 16) . Los anticuerpos monoclonales MAb anti-humanos IL-22 de rata 266.16.1.4.4.1, y MAb 266.19.1.10.5.2 (Ejemplo 17) que se probaron, demostraron teñir la mayoría de BHK/IL-22 humano (>50%) pero también algunas de las células de BHK/ratón IL-22 (1-5%), y se usaron para investigar la distribución de tejidos y expresión de IL-22 en muestras tanto de modelo animal como de paciente humano y se uaron para comparar el patrón de tinción con anticuerpo de conejo policlonal para confirmar los resultados . B . Materiales y Métodos Células y tejidos fijados en formalina y alojados en parafina de modelos animales de ratón y de fuentes humanas, se formaron en secciones a 5µt?. Las células incluyeron células BHK que expresan IL-22 humano o de ratón y de tipo silvestre como control positivo y control negativo, respectivamente. Los tejidos humanos incluyeron un portaobjetos de control Multi-tejido (NormalGrid™; Biomeda, Foster City, CA) con 50 secciones de diversos tejidos humanos normales (por ejemplo, cerebro, glándula pituitaria, glándula adrenal, riñon, mama, corazón, estómago, intestino delgado, intestino grueso, hígado fetal, hígado, piel, páncreas, pulmón, amígdalas, ovario, testículos, próstata, útero, placenta, tiroides y bazo) ; un portaobjetos de control multi-tejido ( umorGrid™; Biomeda, Foster City, CA) con 50 secciones de diversos tumores humanos (por ejemplo, pulmón adeno Ca.f hígado adeno Ca. , riñon adeno Ca. , colon adeno Ca., mama adeno Ca., tiroides adeno Ca. , estómago adeno Ca. , próstata adeno Ca., páncreas adeno Ca. , ovario adeno Ca., linfoma, melanoma, sarcoma de e ings, sarcoma epitelioide, sarcoma MFH, Rabdo sarcoma, carcinoide, sin diferenciar Ca., mesotelioma, teretoma y seminoma) ; carcinoma de pulmón de CHTN (Cooperation Human Tissue Network, Cleveland, Ohio) ; páncreas normal, páncreas con pancreatitis crónica, pulmón con inflamación perivascular crónica, riñónes con glomerulosclerosis multifocal, glomerulonefritis mesangioproliferativa, o fibrosis intersticial de glomerulos escleróticos de NDRI (National Disease Research Interchange, Philadelphia, PA) ; y muestras psoriáticas de la piel de humanos. Los tejidos de ratón incluyeron colones del modelo animal de enfermedad inflamatoria del intestino (modelo DSS aquí descrito, ratones Swiss Webster hembras) y del modelo animal de IL-20 WT y colitis KO (DSS ratones, tipo silvestre y ratones hembras agénicos con IL-20 (IL-20) ) tratados con vehículo o 4% DSS en agua para beber durante 7 días; y muestras de la piel de modelos animales transgénicos (TG) que incluyen animales TG y de control con mIL-22-EuLCK TG y mlL-22-INS. Se tiñó una sección por bloque/portaobjetos con hematoxilina y eosina (H&E) para examen histológico y la sección posterior se tiñó inmunohistoquímicamente para la expresión y localización de proteína IL-22. Para la inm nohistoquímica, las secciones de células y tejidos se colocaron en portaobjetos de microscopio ChemMateTM Capillary Gap Plus (BioTek, Winooski, Vermont) , secados en horno a 60°C por 60 minutos y desparafinados usando condiciones estándar de 3 x 5 minutos en xileno, 4 minutos en 100% de EtOH, 3 minutos en 100% de EtOH, y 2 minutos en 95% de EtOH. Las secciones de tejido luego se sometieron a un proceso de recuperación de epítopos inducido por enzimas de 20 minutos a 37°C con pepsina (NeoMarkers Fremont CA) seguido por una. etapa de bloqueo de avidina/biotina hecha según las instrucciones de los fabricantes (Zymed, South San Francisco, CA) . Se emplearon el aparato de inmunotinción automatizado TechMate 500™ y el protocolo inmunohistoquímico de inmunoperoxidasa (IP) con un sistema de detección de un complejo de avidina-biotina (Ventana Biotek Systems, Tucson, AZ) para la tinción. El aparato de inmunotinción automzatizado TechMate 500™ empleó el principio de acción capilar, y el protocolo IP utilizó un tipo de immunotinción referido como técnica de "intercalado" . Las secciones se prebloquearon con 5% de suero normal de cabra (Vector, Burlingame CA) en PBS durante 10 minutos seguido por 1 lavado de solución amortiguadora IX (Signet, Dedham MA) y luego incubaron con un anticuerpo primario contra IL-22 (MAB 266.19.1.10.5.2) (Ejemplo 17), purificado por PAS a 2.04mg/ml) diluido a 1:800 por 30 minutos a temperatura ambiente seguido por lavado con solución amortiguadora 5X. El anticuerpo primario se diluyó en solución amortiguadora de dilución de anticuerpos TechMate 500™ (Ventana) . IgG anti-rata de cabra biotinilado (Vector) diluido a 1:200 más 5% de suero de cabra normal y 2.5% de leche deshidratada sin grasa en PBS se usó como los anticuerpos de unión secundarios durante 25 minutos a temperatura ambiente seguido por un lavado con solución amortiguadora IX y lavado con solución amortiguadora 2&3 IX (Signet) . Las secciones de los tejidos luego se sometieron a un bloqueo por 3X7 minutos con peróxido de hidrógeno al 3% (HP) (Ventana) seguido por un lavado con solución amortiguadora 2&3 3X. El etiquetado con inmunoperoxidasa se efectuó con un kit de peróxidos DAB (Ventana) , incubando con un complejo de avidina-biotina (ABC) por 30 minutos seguido por lavdo con solución amortiguadora 5X y diaminobenzidina (DAB) por 4X4 minutos seguido por lavado con solución amortiguadora 2X 2&3 y lavado con agua IX (Signet, Cat. No. 2340) . Los tejidos luego se contratiñeron con verde de metilo (Dako, Cat. No. S1962) durante 10 minutos seguido por lavado con solución amortiguadora 2X y lavado de agua 3X. El control incluyó sueros primarios no inmunes usando control de isotipo de anticuerpo primario de rata (Zymed) para reemplazar el anticuerpo primario. La inmunotinción se observó usando un microscopio Olympus BH-2 y las imágnes se capturaron por una cámara digital CoolSNAP HQ (Roper Scientific, Tucson, AZ) . C. Resultados Lineas celulares de control positivo y negativo: MAB 266.19.1.10.5.2, un anticuerpo monoclonal anti-hIL-22 , demostró tinción positiva tanto en el IL-22 humano que expresan células BHK (+++) y células BH que expresan IL-22 murino (+) , y sin tinción sobre las células de tipo silvestre BHK (-) . Todas las lineas celulares BHK positivas y negativas se tiñeron con control negativo de isotipo de rata para reemplazar el anticuerpo primario que no mostró tinción (-) , lo cual indicó que el anticuerpo es específico para el ligando IL-22. El anticuerpo no tuvo inmunoreactividad cruzada con IL-22 humano y de ratón. Tejidos humanos: Se examinaron Rejilla multi-Normal humana y rejilla de Tumor; páncreas, muestras de enfermedad renal y pulmón; y muestras de la piel con psoriasis humana. Estos tejidos humanos incluyeron 1) . cerebro, glándula pituitaria, glándula adrenal, mama, riñon, corazón, estómago, intestino delgado, intestino grueso, hígado fetal, hígado, piel, páncreas, pulmón, amígdalas, ovario, útero, testículos, placenta, tiroides y bazo sobre portaobjetos de control Multi-tejido (NormalGrid™) / tejidos humanos normales; 2). Pulmón adeno Ca. , hígado adeno Ca. , riñon adeno Ca. , tiroides adeno Ca., estómago adeno Ca. , próstata adeno Ca. , páncreas adeno Ca. , ovario adeno Ca., linforma, melanoma, sarcoma de e ings, sarcoma epitelioide, sarcoma MFH, sarcoma Rhabdo, carcinoide, sin diferenciar Ca. , mesotelioma, teratoma, y seminoma, en portaobjetos de control Multi-tej idos (TumorG id) / tejidos anormales humanos/tumor; 3) . Páncreas normal, páncreas con pancreatitis crónica, pulmón con inflamación perivascular crónica, pulmón Ca., riñon con glomerulosclerosis muítifocal, riñon con glomerulonefritis mesangioproliferativa, riñon con fibrosis intersticial de glomerulos escleróticos de CHTN y/o NDRI ; 4) . Tejidos de Ratón: INS IL-22 TG y páncreas de ratón WT se examinaron. Las células dispersas a través de las isletas en las INS IL-22 TG de páncreas demostraron fuerte tinción positiva (+++) con Mab MAB 266.19.1.10.5.2 y WT de páncreas no mostró tinción (-) . Comparación de los anticuerpos monoclonales y policlonales . El anticuerpo policlonal anti-IL-22 (Ejemplo. 16) se demostró que fue sensible, mientras que el anticuerpo monoclonal MAB 266.19.1.10.5.2 fue específico. El anticuerpo policlonal mostró tinción positiva en IL-22 humano que expresa células BHK (+++) , en IL-22 murino que expresa células BHK (+) , en diversas muestras de tejido humanas y de ratón (+) , y en las isletas de ratones con INS mIL-22 TG (+++) . Un mayor porcentaje de las isletas de los transgénicos (vs. Tipo silvestre) contenían tinción positiva. La tinción en las isletas transgenxcas se distribuyó generalmente a través de la isleta (+++) mientras que la tinción en las isletas de tipo silvestre se limitó generalmente a la periferia de la isleta (+) . Sin embargo, este anticuerpo también mostró tinción no especifica en las células de control negativas WT BHK (+) . ??? 266.19.1.10.5.2 mostró tinción positiva sobre el IL-22 humano que expresa células BHK (+++) , en IL-22 murino que expresa células BHK (+) , y en las isletas de ratones con INC mIL-22 TG (+++) . La tinción en las isletas transgénicas se distribuye generalmente a lo largo de la isleta (+++) mientras que las isletas de tipo silvestre demostraron tinción negativa (-) . Ejemplo 21 IL-20 es sobreregulado en muestras de la piel psoriática humana A. muestras de ARN: Muestras de la piel normales así como piel de pacientes con psoriasis se obtienen. La última incluye piel involucrada de psoriasis y de piel no involucrada adyacente . El ARN se aisla de muestras humanas de la piel usando métodos convencionales . La integridad y calidad de las muestras de ARN se probó en el bioanalizador Agilent 2100 (Agilent Technologies, Waldbronn Alemania) .

B. Cebadores y Sondas para RT-PCR Cuantitativa La RT-PCR cuantitativa en tiempo real usando el Sistema de Detección de Secuencias ABI PRISM 7700 (PE Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA) se ha descrito previamente (Ver, Heid, C. A. et al., Genome Research 6: 986-994,1996; Gibson, U. E. M. et al., Genome Research 6: 995-1001,1996; Sundaresan, S. et al., Endocrinology 139: 4756-4764, 1998. Este método incorpora el uso de una sonda específica de gen que contiene ambos colorantes fluorescentes reportero y de apagado. Cuando la sonda está intacta la emisión del colorante reportero se niega debido a la proximidad cercana del colorante de apagado. Durante la extensión PCR usando cebadores delantero y reverso específicos de genes adicionales, la sonda se desdobla por la actividad nucleolítica 5' a 3' de la polimerasa de ADN rTth que libera el colorante reportero de la sonda, lo que resulta en un incremento en la emisión fluorescente. Los cebadores y sondas usados para los análisis de RT-PCR cuantitativa en tiempo real de la expresión de IL-20 se diseñaron usando el software de diseño de cebador Primer Express (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) . El cebador delantero, ZC40541 (SEQ ID NO: 25) y el cebador reverso, ZC 40542 (SEQ ID NO: 26) se usaron en una reacción PCR (abajo) a una concentración de 800 nM para sintetizar un producto de 71 bp. La correspondiente sonda IL-20 TaqMan®, ZC 40544 (SEQ ID NO: 27) se sintetizó y etiquetó por PE Applied Biosystems. La sonda IL-20 se etiquetó en el extemo 5' con un colorante reportero fluorescente (6-carboxi-fluoresceína) (FAM) (PE Applied Biosystems) y en el extremo 3' con un colorante fluorescente de apagado (6-carboxi-tetrametil-rodamina) (TARA) (PE Applied Biosystems) . C. RT-PCR cuantitativa en tiempo real Los niveles relativos de IL-20 ARNm se determinaron por análisis de muestras de ARN total usando el kit de reactivos de núcleo TaqMan EZ RT-PCR (PE Applied Biosystems) . El transcrito Runoff IL-20 se hace para generar una curva estándar usada para la cuantificación. La curva consiste de diluciones en serie de 10 veces en el intervalo desde alrededor de le8 hasta le3 de copias totales del mensaje completo para IL-20 con cada punto de la curva estándar analizado por triplicado. Las muestras de ARN total de la piel también se analizaron por triplicado para niveles de transcrito IL-20 humano y para niveles de hGUS como un control endógeno. En un volumen total de 25 µ?, cada muestra de ARN se somete a la reacción TaqMan EZ RT-PCR (PE Applied Biosystems) que contiene: aproximadamente 25 ng de ARN total en agua tratada con DEPC (libre de Dnasa/Rnasa) ; cebadores apropiados (aproximadamente 800 nM ZC40541 (SEQ ID NO: 25) y ZC40542 (SEQ ID NO: 26); sonda apropiada (aproximadamente 100 nM ZC40544 (SEQ ID NO: 27); amortiguador IX TaqMan EZ; 3 mM acetato de manganeso; 300 µ? de cada uno de d-CTP, d-ATP, y d-GTP y 600 µ? de d-ÜTP; polimerasa de ADN rTth (0.1 ?/µ?) ; y AmpErase UNG (0.01 ?/µ?) . Las condiciones de ciclización térmica PCR fueron como siguen: una etapa de tratamiento UNG inicial de un ciclo a 50°C durante 2 minutos; seguido por una etapa de transcripción reversa (RT) de un ciclo a 60°C durante 30 minutos; seguido por la desactivación de la etpa UNG de un ciclo a 95°C durante 5 minutos; seguido por 40 ciclos de amplificación a 94°C durante 20 segundos y 60°C durante 1 minuto . Los niveles de ARN IL-20 relativos se determinaron usando el Método de Curva Estándar como se describe por el fabricante, PE Biosystems (User Bulletin #2: Sistema de Detección de Secuencia ABI Prism 7700, Relative Quantitation of Gene Expression, diciembre 11, 1997) . Las mediciones hGUS se usaron para normalizar los niveles IL-20. Los datos se muestran en la Tabla 13 abajo. Tabla 13 Muestra de Piel IL-20 Normal 2903 No involucrada 7233 Involucrada 27,695 Aunque IL-20 ARNm fue detectable en muestras de la piel de pacientes normales o de áreas no involucradas, hay una sobreregulacion para el mensaje IL-20 en piel involucrada de pacientes con psoriasis. Las subunidades del receptor para IL-20, que incluye IL-20RA, IL-22RA (IL-22RA) , e IL-20RB se expresan en piel enferma y normal humana. Estos datos soportan una fuerte asociación de enfermedad para IL-20 para psoriasis humana. La sobreexpresión de IL-20 como se muestran en lesiones psoriáticas humanas, lo que sugiere que IL-20 está involucrada en psoriasis humana. Por otro lado, como se describe en la presente, la sobreexpresión de IL-20 en ratones transgénicos muestra un engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes que es indicativo de un fenotipo psoriático. Tales datos in vivo sugieren además que IL-20 está involucrada en psoriasis. Como tal, los antagonistas para la actividad de IL-20, tales como los anticuerpos monoclonales anti-IL-22RA humano de la presente invención, asi como receptores solubles y anticuerpos de estos, y anticuerpos monoclonales y neutralizantes anti-IL-20, son útiles terapéuticamente como antagonistas para IL-20 en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, tales como psoriasis, así como otras indicaciones como se describe en la presente. Ejemplo 22 IL-20 se sobreregula en muestras de la piel humana con dermatitis atópica C. muestras de ARN: Muestras de la piel normales así como piel de pacientes con dermatitis atópica se obtienen. El ARN se aisla de muestras humanas de la piel usando métodos convencionales . La integridad y calidad de muestras de ARN se probó en el Bioanalizador Agilent 2100 (Agilent Technologies, Waldbronn Alemania) . D. Cebadores y Sondas para RT-PCR Cuantitativa La RT-PCR cuantitativa en tiempo real usando el Sistema de Detección de Secuencias ABI PRISM 7700 (PE Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA) se ha descrito previamente (Ver, Heid, C. A. et al., Genome Research 6: 986-994, 1996; Gibson, U. E. M. et al., Genome Research 6: 995-1001, 1996; Sundaresan, S. et al., Endocrinology 139: 4756-4764, 1998. Este método incorpora el uso de una sonda especifica de gen que contiene colorantes fluorescentes tanto reportero como de apagado. Cuando la sonda está intacta la emisión del colorante reportero se niega debido a la proximidad cercana del colorante de apagado. Durante la extensión PCR usando cebadores delantero y reverso específicos de genes adicionales, la sonda se desdobla por la actividad nucleolítica 5' a 3' de la polimerasa de ADN rTt que libera el colorante reportero de la sonda lo que resulta en un incremento en la emisión fluorescente. Los cebadores y sondas usados para RT-PCR cuantitativa en análisis de tiempo real de la expresión de IL-20 se diseñaron usando el software de diseño de cebador Primer Express™ (PE Applied Biosystems, Foster City, CA) . El cebador delantero, ZC40541 (SEQ ID NO: 25) y el cebador reverso, ZC 40542 (SEQ ID NO: 26) se usaron en una reacción PCR (abajo) a una concentración 800 nM para sintetizar un producto de 71 bp. La correspondiente sonda IL-20 TaqMan®, ZC 40544 (SEQ ID NO: 27) se sintetizó y etiquetó por PE Applied Biosystems . La sonda IL-20 se etiquetó en el extemo 5' con un colorante reportero fluorescente ( 6-carboxi-fluoresceína) (FAM) (PE Applied Biosystems) y en el extremo 3' con un colorante fluorescente de apagado (6-carboxi-tetrametil-rodamina) (TAMRA) (PE Applied Biosystems) . C. RT-PCR cuantitativa en tiempo real Los niveles relativos de IL-20 ARNm se determinaron por análisis de muestras de ARN total usando el kit de reactivos de núcleo TaqMan EZ RT-PCR (PE Applied Biosystems) . El transcrito Runoff IL-20 se hace para generar una curva estándar usada para la cuantificación. La curva consiste de diluciones en serie de 10 veces en el intervalo desde alrededor de le8 hasta le3 de copias totales del mensaje completo para IL-20 con cada punto de la curva estándar analizado por triplicado. Las muestras de ARN total de la piel también se analizaron por triplicado para niveles de transcrito IL-20 humano y para niveles de hGUS como un control endógeno. En un volumen total de 25 µ?, cada muestra de ARN se somete a la reacción TaqMan EZ RT-PCR (PE Applied Biosystems) que contiene: aproximadamente 25 ng de ARN total en agua tratada con DEPC (libre de Dnasa/Rnasa) ; cebadores apropiados (aproximadamente 800 nM ZC40541 (SEQ ID NO: 25) y ZC40542 (SEQ ID NO: 26); sonda apropiada (aproximadamente 100 nM ZC40544 (SEQ ID NO: 27) ; solución amortiguadora IX TaqMan EZ; acetato de manganeso 3 mM; 300 µ? de cada uno de d-CTP, d-ATP, y d-GTP y 600 µ? de d-UTP; la polimerasa de ADN rTth (0.1 ?/µ?) ; y AmpErase ÜNG (0.01 U/µ?) . Las condiciones de ciclización térmica PCR fueron como siguen: una etapa de tratamiento ÜNG inicial de un ciclo a 50°C durante 2 minutos; seguido por una etapa de transcripción reversa (RT) de un ciclo a 60°C durante 30 minutos; seguido por la desactivación de la etapa ÜNG de un ciclo a 95°C durante 5 minutos; seguido por 40 ciclos de amplificación a 94 °C durante 20 segundos y 60 °C durante 1 minuto. Los niveles de ARN IL-20 relativos se determinaron usando el Método de Curva Estándar como se describe por el fabricante, PE Biosystems (boletín de usuario #2: ABI Prism 7700 Sequence Detection System, Relative Quantitation de Gene Expression, Deciembre 11, 1997) . Las mediciones hGUS se usaron para normalizar los niveles IL-20. El IL-20 ARNm fue detectable a un nivel bajo (alrededor de 800 copias) en muestras de la piel. En contraste, hay una sobreregulación para el mensaje IL-20 en pieles de pacientes con dermatitis atópica (alrededor de 8600 copias) . Las subunidades del receptor para IL-20, que incluyen IL- 20RA) , IL-22RA, e IL-20RB se expresan en piel enferma y normal humana. Estos datos soportan una fuerte asociación de enfermedad por IL-20 para dermatitis atópica humana. La sobreexpresión de IL-20 como se muestran en pieles con dermatitus atópica humana, lo que sugiere que IL-20 está involucrada en en la dermatitis atópica humana. Por otro lado, como se describe en la presente, la sobreexpresión de IL-20 en ratones transgénicos muestra un engrosamiento de la epidermis e involucramiento de células inmunes lo que indica un fenotipo de dermatitis atópica. Tales datos in vivo sugieren además que IL-20 está involucrada en la dermatitis atópica. Como tal, los antagonistas para la actividad de IL-20, tales como los anticuerpos monoclonales anti-IL-22RA humano de la presente invención, así como receptores solubles y anticuerpos de estos, y anticuerpos monoclonales y neutralizantes anti-IL-20, son útiles terapéuticamente como antagonistas para IL-20 en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, tales como dermatitis atópica, así como otras indicaciones como se describe en la presente. Ejemplo 23 Sobreregulación de IL-8 por IL-20 Queratinocitos neonatales epidermales humanos normales (NHEK) (de Clonetics) en el pasaje 2 se colocaron en placas y se hacen crecer hasta confluencia en placas de cultivo de tej idos de 12 pozos . El KGM (Medio de crecimiento de queratinocito) se adquiere de Clonetics . Cuando las células alcanza la confluencia, se lavaron con medio KGM menos factores de crecimiento = KBM (medio basal de queratinocito) . Las células se cosechan del suero en KBM durante 72 horas antes de la adición de los compuestos de prueba. La trombina a 1 I.U./mL y tripsina a 25nM se usaron como controles positivos. Se agregó 1 mL de media/pozo. El KBM sólo se usó como el control negativo. El IL-20 se hace en medio KBM y se agrega a concentraciones variadas, desde 2.5µg/ml bajando hasta 618ng/mL en el primer experimento y desde 2.5µg/mL bajando hasta 3ng/mL en el segundo experimento. Las células se incubaron a 37°C, 5% C02 durante 48 horas. Los sobrenadantes se retiraron y se congelaron a -80°C durante varios días antes de evaluar para niveles de IL-8 y GM-CSF. El kit de inmunoensayo de IL-8 # D8050 (RandD Systems, Inc.) y el kit de inmunoensayo de GM-CSF humano # HSGMO (RandD Systems, Inc.) se usaron para determinar la producción de citocinas siguiendo las instrucciones del fabricante. Los resultados indican que la expresión de IL-8 y GM-CSF se inducen por IL-20. Ejemplo 24 Sobreregulacion de Citocinas Inflamatorias por IL-20 La línea de célula de queratinocito humano, HaCaT se hace crecer a 37°C por varios días posterior a la confluencia en matraces de cultivo de tejido T-75. En este punto, el medio de crecimiento normal (DMEM + 10% FBS) se remueve y se reemplaza con medio libre de suero. Las células luego se incubanb durante dos días a 37°C. El DMEM luego se remueve y cuatro matraces de células por tratamiento se trataron con una de cada una de las siguientes condiciones durante cuatro horas a 37°C: alfa IL-1 recombinante humano (rh) a 5 ng/mL, alfa IL-1 rh a 20 ng/mL, alfa IL-1 rh a 5 ng/mL + IL-20 a ^g/mL, IL-20 a ^g/mL, o rh IL-10 a 10 ng/mL. Después del tratamiento de citocina, el medio se removió y las células se lisan usando una solución de tiocianato de guanidio. El ARN total se aisla del lisado celular por un mezclado durante la noche en un gradiente de cloruro de cesio. Al día siguiente, el peletizado de ARN se volvió a suspender en una solución TE/SDS y el etanol se precipita. El ARN luego se cuantifica usando a espectrofotómetro, seguido por un tratamiento de DNasa como por la Sección V. B. Del manual del usuario de configuración de expresión del ADNc Clontech's Atlas™ (versión PT3140-1/PR9X390 , publicado el 11/5/99) . La calidad de las muestras de ARN se verifica por cálculos de pureza con base en las lecturas spec, y por visualización en gel de agarosa. La contaminación genómica de las muestras de ARN se regula por análisis PCR del gen beta-actina. ' Los protocolos de Clontech para enriquecimiento polyA+, síntesis de sonda e hibridación para configuraciones Atlas se siguen (ver arriba, más el manual del usuario del sistema de etiquetado de ARN total puro Atlas™, PT3231-1/PR96157 , publicado el 6/22/99) . Brevemente, el polyA+ ARN se aisla de 50 mg de ARN total usando perlas magnéticas recubiertas con estreptavidina (por Clontech, Palo Alto, CA) y un separador de partículas magnético. El PolyA+ ARN luego se etiqueta con aifa32p_dATp pQr medj_0 de RT-PCR. Los cebadores CDS de Clontech específicos para los genes 268 genes en la configuración de citocina/receptor humano Atlas™ (Cat. #7744-1) se usaron en la reacción. La sonda etiquetada se aisla usando cromatografía de columna y se cuenta en un fluido de escintilación. Las configuraciones Atlas™ se hibridizan previamente con Clontech ExpressHyb más 100 mg/mL de ADN de esperma de salmón desnaturalizado caliente por al menos treinta minutos a 68 °C con agitación continua. Las membranas luego se hibridizan con 1.9 x 10s CPM/mL (un total de 1.14 x 107 CP ) durante la noche a 68°C con agitación continua. Al día siguiente, las membranas se lavan durante treinta minutos x 4 en 2X SSC, 1% SDS a 68°C, más durante treinta minutos x 1 en 0. IX SSC, 0.5% SDS a 68°C, seguido por un lavado a temperatura ambiente final durante cinco minutos en 2X SSC. Las membranas de configuración luego se colocan en bolsas plásticas Kodak selladas y expuestas a una pantalla formadora de imágenes de fósforo a temperatura ambiente. Al día siguiente, las pantallas de fósforo se revisan en un formador de imágenes de fósforo y se analizan usando el software de Clontech Atlaslmage™ 1.0. Genes Sobreregulados por IL-20: 1. El factor de necrosis de tumor (TNF) se sobreregulo 1.9-2.4 veces por IL-20. 2. Factores de crecimiento de placenta 1 y 2 (PLGF) se sobreregularon 1.9-2.0 veces por IL-20. 3. Receptor del factor II coagulante se sobreregulo 2.0-2.5 veces por IL-20. 4. El receptor de calcitonina se sobreregulo 2.2-2.3 veces por IL-20. 5. La proteína enlazada al hialuronato inducible por TNF TSG-6 se sobreregulo 2.1-2.2 veces por IL-20. 6. El precursor del receptor 1 del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , receptor de la proteína tirosina cinasa (FLT-1) (SFLT) se sobreregulo 2.1-2.7 veces por IL-20. 7. La RP-8 (proteína de enlace por calcio en macrófagos relacionados con MIF) se sobreregulo 2.9-4.1 veces por IL-20. 8. la MRP-14 (proteína de enlace por calcio en macrófagos relacionados con MIF) se sobreregulo 3.0-3.8 veces por IL-20. 9. La relaxina H2 se sobreregulo 3.14 veces por IL-20. 10. El receptor III beta del factor de crecimiento transformante (TGFS) 300 kDa se sobreregulo 2.4-3.6 veces por IL-20.

Tratamiento de Genes que Muestran Sinergia con IL-20 + IL-1: 1. La proteína morfogénica ósea 2a se sobrereguló 1.8 veces con tratamiento de IL-20 solo, 2.5 veces con tratamiento de IL-1 solo, y 8.2 veces con tratamiento conjunto tanto de IL-20 como IL-1. 2. La MRP-8 se sobrereguló 2.9 veces con tratamiento de IL-20 solo, 10.7 veces con tratamiento de IL-l solo y 18.0 veces con tratamiento conjunto de tanto IL-20 como IL-1. 3. La proteína de diferenciación eritroide (EDF) se sobrereguló 1.9 veces con tratamiento de IL-20 solo, 9.7 veces con tratamiento de IL-1 solo y 19.0 veces con tratamiento conjunto de tanto IL-20 como IL-1. 4. La MRP-14 (proteína de enlace por calcio en macrófagos, relacionada con MIF) se sobrereguló 3.0 veces con tratamiento de IL-20 solo, 12.2 veces con tratamiento de IL-1 solo y 20.3 veces con tratamiento conjunto de tanto IL-20 como IL-1. 5. El factor de crecimiento tipo EGF enlazado a la heparina se sobrereguló 2.0 veces con tratamiento de IL-20 solo, 14 veces con tratamiento de IL-1 solo y 25.0 veces con tratamiento conjunto de tanto IL-20 como IL-1. 6. La proteína tipo beta-tromboglobulina se sobrereguló 1.5 vez con tratamiento con IL-20 solo, 15 veces con tratamiento con IL-1 solo y 27 veces con tratamiento conjunto de tanto IL-20 como IL-1. 7. El factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) se sobrereguló 1.7 veces con tratamiento de IL-20 solo, 25 veces con tratamiento de IL-1 solo y 48 veces con tratamiento conjunto tanto de IL-20 como IL-1. 8. El factor quimiotáctico y activante del monocito MCAF se sobrereguló 1.3 veces con tratamiento de IL-20 solo, 32 veces con tratamiento de IL-1 solo y 56 veces con tratamiento conjunto de tanto IL-20 como IL-1. Ejemplo 25 Fenotipo Transgénico IL-20 IL-20 tanto de ratón como de humano se sobreexpresaron en ratones transgénicos usando una variedad de promotores . El promotor de albúmina de ratón específico de hígado, que dirige la expresión de IL-20 humano, se usó inicialmente en un intento para realizar niveles circulantes de proteína. Los estudios posteriores se llevaron a cabo usando el promotor de queratina 14 (K14) , el cual dirige primariamente la expresión a la epidermis y otros epitelios escamosos estratificados; el promotor de metanolotioneina-1, el cual da un amplio patrón de expresión; y el promotor E LCK, el cual conduce la expresión en células de linaje linfoide. Se obtienen resultados similares en todos los cuatro casos, posiblemente debido a que estos promotores todos alcanzan niveles circulantes de IL-20.

En todos los casos, las crías transgénicas que expresan el transgen IL-20 son más pequeñas que las carnadas no transgénicas, tienen ion apariencia brillante con piel arrugada, tirante, y mueren dentro de los primeros días después de nacer. Las crías tienen leche en sus estómagos, lo que indica que son capaces de amamantarse. Estos ratones tienen extremidades, cola, regiones nostrila y de la boca hinchadas y tienen dificultad para moverse. Además, los ratones son frágiles, carecen de tejido adiposo visible y han desarrollado la pérdida de oreja y dedos . Los bajos niveles de expresión en el hígado (menos de 100 moléculas/célula de ARNm) son suficientes para tanto la letalidad neonatal como las anormalidades en la piel. Los ratones transgénicos sin un fenotipo visible ya sea que no expresa el transgen, no se expresa en niveles detectables , o son de mosaico . El análisis histológico de la piel de los ratones transgénicos IL-20 muestran una epidermis engrosada, hiperqueratosis y una córnea de estrado compacto en comparación con las carnadas no transgénicas. Cortezas serocelulares (costras) se observaron ocasionalmente. El análisis microscópico de electrón (EM) de la piel de ratones transgénicos muestra inclusiones de lipoide intramitocondrial, gránulos de queratohialina manchados, y relativamente algunos tonofilamentos similares a los que se observan en modelos de piel psoriática humana y enfermedad de la piel del ratón. Además, muchos de los ratones transgénicos tienen linfocitos tímicos apoptóticos . No se detectan otras anormalidades por análisis histopatológico . Estos resultados histológicos y EM soportan y extienden las alteraciones de la piel gruesa observadas . Ejemplo 26 Construcción del vector de expresión para la expresión de IL- 22RA-muFc humano soluble Una fusión receptor-muFc soluble IL-22RA humana (mostrada como IL-22RA-C (mG2a) que contiene el dominio extracelular de IL-22RA fusionado a la región Fe de la cadena pesada gamma 2a de murino (mG2a) , se preparó. Un plásmido de expresión que contiene IL- 22RA-C(mG2a) se construyó por medio de recombinación homologa usando dos fragmentos de ADN separados y el vector de expresión pZMP40. Los fragmentos de la secuencia de polinucleótido de IL-22RA (SEQ ID NO: 1) , y mG2a SEQ ID NO: 39 se generaron por amplificación PCR usando los siguientes cebadores: (a) IL-22RA cebadores ZC45,593 (SEQ ID NO:28), y ZC45,592 (SEQ ID NO:29); y (b) cebadores mG2a ZC45,591 (SEQ ID NO:30), y ZC45,594 (SEQ ID NO:31). El primer fragmento contiene la región que codifica el dominio extracelular IL-22RA, la cual se hace usando un polinucleótido IL-22RA (por ejemplo, SEQ ID NO:l) como la plantilla. El primer fragmento incluye un traslape 5' con una secuencia de vector pZMP40 parcial, el segmento IL-22RA, y un traslape 3 ' que contiene una secuencia enlazadora y una secuencia mG2a parcial. Condiciones PCR: 1 ciclo, 94°C, 5 minutos; 35 ciclos, 9 °C, 1 minuto, seguido por 55°C, 2 minutos, seguido por 72°C, 3 minutos; 1 ciclo, 72°C, 10 minutos . El segundo fragmento incluye un traslape 5' con una secuencia enlazadora y una secuencia IL-22RA parcial, segmento mG2a, y un traslape 3 ' que contiene una secuencia parcial del vector pZMP40. La región Fe de cadena pesada gamma 2a e murino (mG2a) (SEQ ID NO: 39) se generó a partir de un clon del ADNc de cadena pesada Ig gamma 2a de murino. El mG2a contiene los dominio de articulación, CH2, y CH3 de la región constante de cadena pesada gamma 2a de inmunoglobulina de murino. Condiciones PCR: 1 ciclo, 94°C, 5 minutos; 35 ciclos, 94°C, 1 minuto, seguido por 55°C, 2 minutos, seguido por 72°C, 3 minutos; 1 ciclo, 72°C, 10 minutos. Las mezclas de reacción PCR se corren en un gel de agarosa al 1% y una banda que corresponde a los tamaños de los insertos se extraen con gel usando un kit de extracción en gel QIAquick (Qiagen) . El plásmido pZMP40, el cual se corta con BglII, se usó en una recombinación de tres vías con ambos de los fragmentos de inserto PCR. El plásmido pZMP40 es un vector de expresión de mamífero que contiene un cásete de expresión que tienen el promotor MPSV, y sitios de restricción múltiples para inserción de secuencias codificadoras; un origen E. coli de replicación; una unidad de expresión del marcador seleccionable de mamífero que comprende un promotor SV40, aumentador y origen de replicación, un gen DHFR, y el terminador SV40; y secuencias URA3 y CEN-ARS requeridas para la selección y replicación en S. cerevisiae. El plásmido pZMP40 se construyó a partir de pZMP21 (depositado en American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110- 2209, y designado No. PTA-5266) por la adición de varios sitios de enzimas de restricción al polienlazador. Cien microlitros de células de levadura de competencia (S. cerevisiae) se combinan independientemente con 10 µ? del ADN insertado y lOOng del vector pZMP40 cortado, y la mezcla se transfiere a una cubeta de eleetroporación de 0.2-cm. La mezcla levadura/ADN se electropulsa usando establecimientos de energía (BioRad Laboratories, Hercules, CA) de 0.75 kV (5 kV/cm) , oo ohms, y 25 µ?. Seiscientos µ? de sorbítol 1.2 M se agregan a la cubeta, y la levadura se coloca en una alícuota de ???µ? y 300µ1 en dos placas URA-D y se incuba a 30°C. Después de alrededor de 72 horas, los transformantes de levadura Ura+ de la placa sencilla se volvieron a suspender en 1 mi de ¾0 y se mezclan brevemente para peletizar las células de levadura. El peletizado celular se volvió a suspender en 0.5 mi de solución amortiguadora de lisis (2% Tritón X-100,1% SDS, 100 mM NaCl, 10 mM Tris, pH 8.0, 1 m EDTA) . Los quinientos microlitros de la mezcla de lisis se agregaron al tubo de Eppendorf que contiene 250 µ? de perlas de vidrio lavadas en ácido y 300 µ? de fenol-cloroformo, se procesó en vórtice durante 3 minutos, y se revolvió durante 5 minutos en un centrífugo Eppendorf a máxima velocidad. Trescientos microlxtros de la fase acuosa se transfieren a un tubo fresco, y el ADN se precipita con 600µ1 de etanol (EtOH) y 30µ1 de acetato de sodio 3M, seguido por centrifugación durante 30 minutos a velocidad máxima. El tubo se decantó y el peletizado se lavó con 1 mL de etanol al 70%. El tubo se decantó y el peletizado de ADN se volvió a suspender en 30µ1 de TE. La transformación de las células hospederoas de E. coli electrocompetentes (DH12S) se da usando 5 µ? de la preparación de ADN de levadura y 50 µ? de células. Las células se electropulsan a 2.0 kV, 25 µ?, y 400 ohms . Después de la electroporación, 1 mi SOC (2% Bacto Tryptone (Difco, Detroit, MI), extracto de levadura al 0.5% (Difco), 10 m NaCl, 2.5 mM KC1, 10 mM MgC12, 10 mM MgS04, 20 mM glucosa) se agregó y luego las células se colocaron en una alícuota de 50 µ? y 200 µ? en dos placas LB AMP (caldo LB (Lennox) , 1.8% BactoTM Agar (Difco) , 100 mg/L Ampicilina) . Los insertos de tres clones para el constructo se sometieron al análisis de secuencia y un clon para cada constructo, que contiene la secuencia correcta, se seleccionó. El plásmido de ADN de escala más grande se aisla usando un kit comercialmente disponible (kit de mega plásmido QIAGEN, Qiagen, Valencia, CA) de conformidad con las instrucciones del fabricante. Ejemplo 27 Expresión y Purificación de polipéptido soluble IL-22RA-muFc humano Tres conjuntos de 200µ del constructo IL-22RA-C (mG2a) (Ejemplo 22) se digieren cada uno con 200 unidades de Pvu I a 37°C durante tres horas y luego se precipitaron con IPA y se asentaron en un tubo de microfuga de 1.5 mL. El sobrenadante se decantó por completo del peletizado, y el peletizado se lavó con 1 mL de etanol al 70% y se permitió que se incubara durante 5 minutos a temperatura ambiente . El tubo se gira en una microfuga durante 10 minutos a 14,000 PM y el sobrenadante se decantó por completo del peletizado. El peletizado luego se volvió a suspender en 750 µ? del medio PF-CHO en un ambiente estéril, y se permitió que se incubara a 60°C durante 30 minutos. Las células 5E6 APFDXB11 se asentaron en cada uno de los tres tubos y se volvieron a suspender usando la solución ADN-medio. Las mezclas de ADN/célula se colocan en una cubeta hueca de 0.4 cm y se procesa en electroforesis usando los siguientes parámetros: 950 , alta capacitancia, y 300 V. Los contenidos de las cubetas se remueven luego, se agrupan, y diluyen hasta 25 mLs con un medio PF-CHO y se colocan en un matraz agitador 125 mL. El matraz se coloca en un incubador sobre un agitador a 37 °C, C02 6%, y agitación a 120 RPM. La linea celular se somete a selección de nutriente seguida por la etapa de amplificación hasta metotrexato lOOnM (MTX) , luego hasta 500nM MTX, y finalmente hasta 1 µ? MTX. La etapa de amplificación se sigue por un orden de célula CD8. El orden de célula CD8 se realiza al tomar un grupo amplificado MTX luM estable y con tinción aproximadamente de células 5E6 con un anticuerpo anti-CD8 FITC monoclonal (BD PharMingen, cat# 30324X) usando la concentración recomendada por los fabricantes. Las células teñidas se procesan y ordenan en un citómetro de flujo FACS Vantage (BD) . El 5% superior de las células se recolectaron y se retira. La expresión se confirma por técnica de inmunotransferencia Western, y la línea celular se hace en escala y la purificación de proteína usando los siguientes métodos estándar. Ejemplo 28 Neutralización de huIL-22RA por sueros de ratones inmunizados con huL22RA-mG2a A. Ensayo de neutralización basado en célula para probar la inhibición de IL-20 y/o IL-22. La línea celular pre-B dependiente del factor BaF3 se co-transfectó con IL-22RA y se usó IL- 20RB (pDIRSI) (células BAF/IL-22RA/IL-20RB; Ejemplo 38) para evaluar el potencial de neutralización de los anticuerpos anti-IL-22RA al antagonizar la IL-20 en el receptor IL-22RA/IL-20RB . Similarmente, se usó el BaF3 co- transfectado con IL-22 A y IL-10RB (CRF2-4) (células BAF/lL-22RA/CRF2-4; Ejemplo 2) para evaluar el potencial de neutralización de anticuerpos anti-IL-22RA al antagonizar la IL-22 en el receptor IL-22RA/IL10RB . La proliferación en presencia de IL-20 ó IL22 en su respectiva línea celular que expresa el receptor, e inhibición de tal proliferación en presencia de los anticuerpos antagonistas, se evaluó usando un ensayo azul de Alamar como se describe en el Ejemplo 3. La inhibición de la proliferación en estas células es indicativa de actividad neutralizante en este ensayo. B. El suero anti-IL-22RA neutraliza ambas IL-20 e IL-22 en el Ensayo de neutralización basado en célula. Usando el ensayo descrito en Ejemplo 28A, el suero de los ratones agénicos IL-22RA inmunizados con huIL-22RA-muG2a (Ejemplo 30 (A) (1)) se agregó como una dilución en serie a 1%, 0.5%, 0.25%, 0.13%, 0.06%, 0.03%, 0.02%, y 0%. Las placas de ensayo se incubaron a 37°C, 5% C02 durante 4 días, tiempo en el cual Azul de Alamar (Accumed, Chicago, IL) se agregó a 20µ1/????. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 16 horas. El Azul de Alamar da una lectura fluorométrica con base en el número de células vivas, y de esta manera una medición directa de la proliferación celular en comparación con un control negativo. Las placas se leyeron en el contador de etiqueta múltiples allac Víctor 2 1420 (Wallac, Turku, Finlandia) a longitudes de onda de 530 (Excitación) y 590 (Emisión) . Los resultados muestran que el suero de los siete animales inmunizados podrá neutralizar la señalización de ambos huIL-22 y huIL20 a través de huIL-22RA. Por ejemplo, a la concentración del 1%, el suero de cinco animales (16517, 16518, 16519, 16520, y 16527) neutraliza completamente la proliferación inducida por huIL-22, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores. Por otro lado, a la concentración del 1%, el suero de los otros dos animales (16471 y 16701) inhibe alrededor del 90% de la proliferación inducida por huIL-22, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores. Similarmente, a las concentraciones de 1% y 0.5%, el suero de cinco animales (16517, 16518, 16519, 16520, y 16527) neutraliza completamente la proliferación inducida por huIL-20, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores. Por otro lado, a la concentración del 1%, el suero del animal 16701 neutraliza completamente la proliferación inducida por huIL-20, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores . A la concentración del 1%, el suero del animal 164 71 neutraliza alrededor del 95% de la proliferación inducida por huIL-20, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores. De esta manera, los sueros de los siete animales son capaces de neutralizar la proliferación inducida por ambos IL-20 ó IL-22 a través del receptor huIL-22RA. Estos resultados además demuestran que los anticuerpos para IL-22RA podrían antagonizar la actividad de los ligandos pro-inflamatorios, IL-20 y IL-22 a bajas concentraciones. Estos resultados proporcionan una evidencia adicional de que bloquean efectivamente la actividad IL-22RA al enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar IL-20 o la actividad de IL-22 (individualmente o en conjunto) , por ejemplo por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, podría ser ventajoso en reducir los efectos de IL-20 y IL-22 (solo o en conjunto) in vivo y puede reducir la inflamación inducida por IL-20 y/o IL-22, tales como los apreciados en los efectos en la piel inducidos por IL-20, así como efectos en la piel inducidos por IL-22, por ejemplo en la psoriasis, EDD9 colitis, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-20, y/o IL-22 que incluyen IBD, artritis, asma, artritis psoriática, colitis, condiciones inflamatorias de la piel, y dermatitis atópica. Ejemplo 29 Generación de células P815/hIL-22RA e inmunización de ratones A. Generación de células P815/hlL-22RA e inyección en ratones para generación de anticuerpos anti-hIL-22RA: Las células T P815 (ATCC No. TIB-64) se transfectaron con un vector plásraido que contiene la secuencia de ADNc hIL-22RA (por ejemplo, SEQ ID N0:1) y un marcador de resistencia a la puromicina seleccionable, usando el reactivo Fugene de conformidad con el protocolo del fabricante (Roche, Indianapolis, IN) . Las células se colocan bajo selección de Puromicina 48 horas después de la transfección. Los transfectantes resistentes a la Puromicina se clonaron por dilución limitada, y se separan por exclusión para su nivel de expresión de superficie celular hIL-22RA por citometría de flujo, usando IL-22 humano biotinilado (huIL-22-biotina) . Brevemente, las células se incubaron con 5 µg/ml huIL-22-biotina durante 30 minutos en hielo y luego se lavan. El enlace de huIL-22-biotina a las células luego se detecta usando estreptavidina etiquetada en PE a 1:500. Las células se analizaron en un citómetro de flujo Facscan usando el software Cellguest (Becton Dickinson, San José, CA) . El clon de célula P815/IL-22RA seleccionado se hace crecer y luego se cosecha por inyección. Las células se recolectaron, se lavaron tres veces en PBS, se contaron, se volvieron a suspender a 1x10a células por mililitro, y se irradiaron con 10,000 rads. La suspensión celular luego se transfecta a una jeringa de Iml, y se inyecta por la ruta intraperitoneal en ratones DBA/2. Los ratones se sobrealimentan en una manera idéntica 3 semanas después y los sueros se separan por exclusión para enlazarse a la línea de célula transfectante hIL-22RA.

Brevemente, los sueros se diluyeron 1:100 en solución amortiguadora Facs (HBSS, 2% BSA, .02% Na 3) , y luego se incuba con células de riñon humano 293 bloqueadas con Fe que sobreexpresan hIL-22RA. El enlace de anticuerpos anti-IL-22RA a las células luego se detecta usando IgG de an i-ratón de cabra conjugado con fluoresceína diluido hasta 1:200 (Southern Biotech, Birmingham, AL) . Las células se analizaron como se describió previamente. Los ratones se sobrealimentan nuevamente un total de 3 veces más y los sueros se separan por exclusión como se describe. Se seleccionan dos ratones para fusión de hibridoma, usando métodos estándar en el arte para la generación de anticuerpos monoclonales (Ejemplo 25) , con base en el nivel de su suero enlazado a los transfectantes hIL-22RA. El método anterior también se usa para la generación de células P815 que expresan el receptor heterodimérico IL-22RAs, tales como IL-22RA/CRF2-4 (células P815/IL-22RA/CRF2-4) , IL-22RA/pDIRSl (células P815/lL-22RA/pDIRSl) , o IL-22RA/CRF2-4/pDIRSl (células P815/IL-22RA/CRF2-4/pDIRSl) , por ejemplo para inmunizar ratones para la generación de anticuerpos monoclonales contra IL-22RA y receptores heterodiméricos que comprenden IL-22RA. Ejemplo 30 Generación de IL-22RA (IL-22RA) ttiAbs murino anti-humano A. Inmunización para la generación de anticuerpos anti-IL-22RA: (1) Usando IL-22RA-muFc soluble Ratones agénicos IL-22RA de seis a doce semanas de edad (Ejemplo 26) se inmunizan por inyección intraperitoneal con 25-50 ug de proteína IL-22RA-muFc humana soluble (Ejemplo 23) mezclada 1:1 (v:v) con adyuvante Ribi (Sigma) en un programa bisemanal. Siete a diez días después de la tercera inmunización, se toman muestras de sangre por medio de sangrado retroorbital, el suero se cosecha y evalúa para su capacidad para inhibir el enlace de IL-22 o ambos IL-20 y IL-22 para IL-22RA en ensayos de neutralización (por ejemplo, aquí descritos) y para teñir IL-22RA transfectada contra células 293 no transfectadas en un ensayo de tinción FACS . Los ratones continúan inmunizados y las muestras de sangre se toman y evalúan como se describe anteriormente hasta que las concentraciones de neutralización alcanzan una estabilización. En tal momento, los ratones con las concentraciones de neutralización más altas se inyectan intravascularmente con 25-50 ug de proteína IL-22RA-FC soluble en PBS. Tres días después, el bazo y ganglios linfáticos de estos ratones se cosecharon y usaron para la generación de hibridomas, por ejemplo usando células de mielorna de ratón (P3-X63-Ag8.653.3.12.11) u otras líneas de células apropiadas en el arte, usando métodos estándar conocidos en el arte (por ejemplo, ver Kearney, J. F. et al., J Immunol. 123: 1548-50, 1979; y Lañe, R. D. J Immunol Methods 81: 223-8, 1985) . (2) Uso de transfectantes P815 que expresan el receptor IL- 22RA. Ratones hembras DBA/2 de seis a diez semanas de edad se inmunizan por inyección intraperitoneal de 1 x 105 células P815 transfectadas, vivas, por ejemplo células P815/IL-22RA, P815/IL-22RA/CRF2-4, P815/lL-22RA/pDIRSl O células P815/IL-22RA/CRF2-4/pDIRSl (Ejemplo 24) (por ejemplo, 0.5 mi a una densidad celular de 2 xlO5 células/ml) . Antes de la inyección, las células se mantienen en la fase de crecimiento exponencial . Para inyección las células se cosechan, se lavan tres veces con PBS y luego se volvieron a suspender en PBS hasta una densidad de 2 x 105 células/ml. En este modelo, los ratones desarrollan un tumor de ascitos dentro de 2-3 semanas y progresan hasta morir por 4-6 semanas salvo que una respuesta inmune al antígeno objetivo transfectado se monte. A las tres semanas, los ratones sin ningún aumento de volumen abdominal evidente (indicativo de ascitos) se vuelven a inmunizar como anteriormente a intervalos de 2-3 semanas. Siete a diez días después de la segunda inmunización, se toman muestras de sangre por medio de sangrado retroorbital, el suero se cosecha y evalúa para su capacidad de inhibir el enlace de IL-22 o ambos IL-20 e IL-22 al IL-22RA en ensayos de neutralización (por ejemplo, aquí descrito) y a la cepa IL-22RA transfectada contra células 293 no transfectadas en un ensayo FACS de tinción. Los ratones continúan a inmunizarse y se toman muestras de sangre y se evalúan como es antes descrito hasta que las concentraciones de neutralización alcanzan una planicie. En tal momento, los ratones con las concentraciones de neutralización más altas se inyectaron intraperitonealmente con 1 x 105 células P815 transfectadas, vivas. Cuatro días después, el bazo y ganglios linfáticos de estos ratones se cosechan y se usan para la generación de hibridomas, por ejemplo usando células de mieloma de ratón (P3-X63-Ag8.653.3.12.11) u otras líneas de células apropiadas en el arte, usando métodos estándar conocidos en el arte (por ejemplo, ver earney, J. F. et al., supra.; y Lañe, R. D. supra. ) . Una alternativa al esquema de inmunización anterior con células P815 transfectadas, vivas, involucra la inyección intraperitoneal de 1-5 x 106 células transfectadas, irradiadas, cada 2-3 semanas. En este enfoque, los animales no desarrollan y mueren de ascitos . Al contrario, los animales se monitorean para neutralizar la respuesta inmune a IL-22RA en su suero como se resume anteriormente, iniciando con un sangrado después de la segunda inmunización. Una vez que las concentraciones de neutralización han alcanzado un nivel máximo, los ratones con las concentraciones más altas se les da una inyección intraperitoneal, de pre-fusión, de 5 x 10s células irradiadas y cuatro días después, el bazo y ganglios linfáticos de estos ratones se cosechan y se usan para la generación de hibridomas, por ejemplo usando células de mieloma de ratón (P3-X63-Ag8.653.3.12.11) u otras líneas de células apropiadas en el arte, usando métodos estándar conocidos en el arte (por ejemplo, ver Kearney, J. F. et al., supra. ; y Lañe, R. D . supra. ) . B. Separación por exclusión de las Fusiones de Hibridoma para Anticuerpos que enlazan IL-22RA e Inhiben el Enlace de IL-22 a IL-22RA: Se llevaron a cabo dos separaciones por exclusión primarias diferentes en los sobrenadantes de hibridoma a 8-10 días después de la fusión. Para el primer ensayo, los anticuerpos en los sobrenadantes se probaron por su capacidad para enlazarse a la proteína IL-22 A-muFc humana soluble enlazada a la placa por ELISA usando reactivos de segunda etapa de cadena ligera anti-ratón kappa y anti-lambda de cabra conjugado a HRP para identificar anticuerpos de ratón enlazados. Ara demostrar la especificidad para la porción IL-22RA de la proteína IL-22RA-muFc, los sobrenadantes positivos en el ensayo inicial se evaluaron en una proteína irrelevante fusionada a la misma región Fe de murino (mG2a) . El anticuerpo en aquellos sobrenadantes que se enlazan a IL-22RA-muFc y no a la proteína de fusión que contiene muFc irrelevante se consideran que son específicas para IL-22RA. Para el segundo ensayo, los anticuerpos en todos los sobrenadantes de hibridoma se evaluaron por ELISA por su capacidad para inhibir el enlace de IL-22 humana biotinilada a la IL-22RA-muFc enlazada a la placa. Todos los sobrenadantes que contienen anticuerpos que se enlazan específicamente a IL- 22RA, si inhiben el enlace de IL-22 a IL-22RA o no en el ensayo ELISA, se prueban posteriormente por su capacidad para inhibir el enlace (y el efecto pro-proliferativo concomitante) de IL-20 o IL-22 a células Baf3 transfectadas IL-22RA/IL-20RB y IL-22RA/CRF2-4 , respectivamente. Todos los sobrenadantes que fueron de neutralización positiva ya sea en el ensayo de inhibición de IL-22 o ambos de los ensayos de inhibición IL-20 e IL-22 se evaluaron posteriormente por su capacidad a la cepa IL-22RA transfectada contra células Baf3 no transfectadas por análisis FACS . Este análisis se diseña para confirmar que la inhibición del enlace de IL-22 a IL-22RA/CRF2-4 , o el enlace de IL-20 a IL-22RA/IL-20RB, se debe realmente a un anticuerpo que se enlaza específicamente al receptor IL-22RA. Adicionalmente, ya que el análisis FACS se efectuó con un reactivo de segunda etapa anti-IgG, los resultados positivos de FACS indican que el anticuerpo neutralizante posiblemente es de la clase IgG. Por estos medios, un pozo maestro se identifica que enlaza IL-22RA en el ELISA enlazado a la placa, lo que inhibe el enlace de IL-22 a IL-22RA en el ensayo de inhibición basado en ELISA, bloquea la interacción de IL-20 y IL-22 con las células Baf3 transfectadas IL-22RA/IL-20RB e IL-22RA/CRF2-4 (Ejemplo 28), respectivamente, y fue fuertemente positivo para la tinción de ambas células Baf3 transfectadas IL-22RA/IL-20RB e IL-22RA/CRF2-4 con un reactivo de segunda etapa IgG anti-ratón.

D. Clonación de Hibridomas que Producen Anticuerpo Específico Anti-IL-22RA: Un hibridoma que produce una anti-IL-22RA mAb que neutraliza de forma cruzada el enlace de IL-20 e IL-22 para transfectar apropiadamente las células BaF3 se clonan por un enfoque de dilución de baja densidad estándar (menos de 1 célula por pozo) . Aproximadamente 5-7 días después de sembrar, los clones se separaron por exclusión por ELISA en IL-22RA-muFc humano enlazado a la placa seguido por una nueva prueba de pozos positivos por ELISA en la proteína de fusión que contienen muFc irrelevante como see describe anteriormente . Los clones seleccionados, cuyos sobrenadantes se enlazan a IL-22RA-muFc y no la proteína de fusión que contienen muFc irrelevante, se confirman adicionalmente por la actividad de anticuerpo específica al repetir tanto los ensayos de neutralización así como el análisis FACS. Todos los clones positivos del anticuerpo IL-22RA seleccionados clonaron un mínimo de dos veces para ayudar a asegurar la capacidad de clonación y para evaluar la estabilidad de la producción de anticuerpo. Se realizan rondas adicionales de clonación y se separan por exclusión como se describe hasta aquí, preferiblemente, al menos el 95% de los clones resultantes son positivos para neutralizar la producción de anticuerpo anti- IL-22RA.

E . Caracterización Bioquímica de la Molécula que se Reconoce por Anti-IL-22RA mAbs: La confirmación bioquímica de que la molécula objetivo, IL-22RA, reconocida por la supuesta anti-IL-22RA mAbs es realmente IL-22RA, se realiza por immunoprecipitation estándar seguido por análisis SDS-PAGE o' los procedimientos de "Técnica de inmunotransferencia western" , empleando ya sea preparaciones de membrana soluble de células Baf3 no transfectadas contra IL-22RA transfectadas . Por otro lado, las preparaciones de membrana solubles de líneas de células no transfectadas que expresan IL-22RA se usan mostrando que la mAbs reconoce la cadena del receptor nativa así como la transfectada. Alternativamente, las mAbs se prueban por su capacidad el inmunoprecipitado específico o la técnica de inmunotransferencia Western de la proteína IL-22RA-muFc soluble. Ejemplo 31 Neutralización de huL22RA por Sueros de ratones inyectados con células P815 transfectadas con huL22RA Usando el ensayo de neutralización basado en células descrito en Ejemplo 28, el suero de los ratones inyectados con células P815 transfectadas con huIL-22RA vivas (Ejemplo 30.A.2) se agregó como una dilución en serie a 1%, 0.5%, 0.25%, 0.13%, 0.06%, 0.03%, 0.02%, y 0%. Las placas de ensayo se incubaron a 37 °C, 5% C02 durante 4 días tiempo en el cual el Azul de Alamar (Accumed, Chicago, IL) se agregó a 20µ1/????. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 16 horas. Los resultados muestran que el suero de cuatro animales podrá neutralizar la señalización de tanto huIL-22 como huIL20 a través de huIL-22RA. A la concentración del 1%, el suero de seis animales (7125, 7127, 7128, 7118, 7124 y 7117) neutraliza entre 50% y 80% de la proliferación inducida por huIL-22, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores . Por otro lado, a la concentración del 1 %,el suero de cuatro animales (7125, 7127, 7118, y 7117) neutraliza entre 40% y 70% de la proliferación inducida por huIL20, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores . Estos resultados además demuestran que los anticuerpos para IL-22RA podrán realmente antagonizar la actividad de los ligandos pro-inflamatorios, IL-20 y IL-22 a bajas concentraciones. Estos resultados proporcionan evidencia adicional de que bloquean efectivamente la actividad IL-22RA al enlazar, bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar la actividad de IL-20 o IL-22 (individualmente o en conjunto) , por ejemplo por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, podría ser ventajoso en reducir los efectos de IL-20 y IL-22 (solo o en conjunto) in vivo y puede reducir la inflamación inducida por IL-20 y/o IL-22, tal como la apreciada en efectos de la piel inducidos por IL-20, así como efectos de la piel inducidos por IL-22, por ejemplo en psoriasis, IBD, colitis, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-20 y/o IL-22, que incluye IBD, artritis, asma, artritis psoriática, colitis, condiciones inflamatorias de la piel, y dermatitis atópica. Ejemplo 32 Fenotipo de Ratones Agénicos IL-22RA A. Generación de ratones que portan modificaciones genéticas 1. Generación de ratones transgénicos que expresan IL-20 murino con un brillo neonato a) . Constructo para expresar IL-20 murino del promotor K14. Con objeto de investigar la función biológica de IL-20 in vivo, un constructo transgénico se hace, en el cual el IL-20 de murino se conduce por el promotor 14 humano (también ver, Ejemplo 21) . Los oligonucleótidos se diseñaron para generar un fragmento PCR que contiene una secuencia ozak de consenso y la región que codifica IL-20 de murino. Estos oligonucleótidos se diseñaron con un sitio Fsel en el extremo 5' y un sitio AscI en el extremo 3' para facilitar el clonado en pRSK14 , un vector transgénico estándar, que contiene un promotor específico de célula epitelial y queratinocito humano.

Las reacciones PCR se llevaron a cabo con alrededor de 200 ng de plantilla IL-20 de murino (SEQ ID NO: 33) y los oligonucleótidos se diseñan para amplificar la longitud completa de la IL-20 (SEQ ID NO: 34) . Las condiciones de reacción PCR se determinaron usando métodos conocidos en el arte. Los productos por PCR se separaron por electroforesis en gel de agarosa y se purifican usando un kit de extracción en gel QiaQuxck™ (Qiagen) . El fragmento de ADN de tamaño correcto, aislado, se digirió con Fsel y Asc (Boerhinger- annheim) , se precipita en etanol y se liga sobre pRSK14, digerido previamente con Fsel y AscI. El plasmido pRS 14, diseñado para que exprese un gen de interés en queratxnocito y epitelial en ratones transgénicos, contiene un cásete de expresión flanqueado por alrededor de 3 Kb del promotor 14 especifico de queratina humano. Alrededor de un microlitro de reacción de ligado se procesa por eletroforesis en células competentes DH10B ElectroMax™ (GIBCO BRL, Gaithersburg, MD) de conformidad con la dirección del fabricante y se siembran en placas LB que contienen 100 µg/ml de ampicilina', y se incuban durante la noche. Las colonias se pinchan y se hacen crecer en un medio LB que contiene 100 9/t?1 de ampicilina. Se preparó ADN Miniprep de los clones pinchados y se separan por exclusión del IL-20 de murino insertado por la digestión de restricción de Fsel y AscI combinados, y electroforesis en gel de agarosa posterior. El constructo TG con ADNc correcto insertado se confirma por análisis de secuencias . Las Maxipreps de del pRSK14-IL-20 de murino se realizan. b) Generación y caracterización de ratones transgénicos K14 IL-20. Un fragmento Notl de alrededor de 4 b en longitud se aisla del vector transgénico (TG) que contiene las secuencias de flanqueo 5 ' y 3 ' del promotor de queratina especifico K1 , IL-20 de ratón (SEQ ID NO:33; polipéptido mostrado en la SEQ ID NO: 34), el intrón Gormon, ADNc IL-20 y las secuencias de señal polyA de la hormona de crecimiento humana. Se usó para la microinyección en oocitos de murino B6C3fl fertilizados (Taconic, Gennantown, NY) . La microinyección y la producción de ratones transgénicos se produce como se describe en Hogan, B. et al. Manipulating the Mouse Embryo, 2da ed. , Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY, 1994. Una reacción TaqMan™ RT-PCR se usó para cuantificar la expresión de TG ARN al usar cebadores de PCR específicos para la porción de señal polyA de la hormona de crecimiento humano del transgen. Todos los constructos TG que expresan IL-20 exhiben una alta relación de mortalidad paranatal, y las crias TG que nacen típicamente exhiben un fenotipo "brillante" . La apariencia brillante de las crías neonatas aparecen para estar asociadas con una rigidez de la piel, como si se secara, lo que resulta en una reducción de la lactancia apropiada. Sus movimientos se vuelven más rígidos en general . Histopatológicamente, las crías brillantes tienen la epidermis engrosada y la capa de queratina compacta. La mayoría de estas crías brillantes que fallan mueren dentro de los primeros 5 días, y las crías supervivientes y destetadas en general no expresan el transgen (por análisis de transcrito) , o son quiméricas (por baja transmisión del transgen de la carnada) . Una línea que expresa la IL-20 de murino, conducida por el promotor 14, se estabiliza. El nivel de expresión en la piel y el timo fue bajo, y todos los neonatos nacen con un fenotipo brillante. En general esta línea tiene 20% de progenie TG, lo que indica que el 50-60% de las crías transgénicas muere en el útero, (en una capa hemizigótica el 50% de la progenie será TG.) 2. Generación de ratones con expresión IL-22RA extirpada; ratones IL-22RA agénicos a) . Generación del Constructo Agénico (KO) para IL-22RA murino . Para estudiar adicionalmente la función biológica de IL- 22RA in vivo, una cepa de ratón agénico (KO) se crea para extirpar la expresión IL-22RA. Primero, sondas de ADNc IL-22RA de ratón se usaron para separar por exclusión una colección BAC genómica 129/SvJ de ratón. Los clones que contienen el lugar de interés genómico IL-22RA se identificaron y caracterizaron. El polinucleótido IL-22RA de murino se muestra en la SEQ ID NO: 1 y el polipéptido en la SEQ ID NO: 2. Para crear el constructo agénico para extirpar IL-22RA, puede hacerse un vector agénico usando la técnica de clonación ET (Zhang et al. 1998. A new logic for DNA engineering using recombination in E. coli. Nat. Genet. Vol. 20: 123-8). Brevemente, el vector O contiene una extremidad 5' 1.8 kb (extremidad corta) , un marcador IRES-LacZ/MClneo seleccionadle, y una extremidad 3' 10 Kb (extremidad larga) del gen IL-22RA. En el vector KO, los exones 2, 3 y 4 así como los intrones 2 y 3 de la secuencia genómica IL-22RA se reemplazan por el marcador IRES-LacZ/MClneo seleccionable de manera que una eliminación de alrededor de 4.4 Kb se generó por recombinación homologa en células ES. Después de la linearización del vector KO por la enzima de restricción Pmel, se electropora en células 129/SvJ ES. La selección de eventos de recombinación homologa, así como identificación de clones ES recombinantes se realizan como se describe en Robertson, E. J. et al. Teratocarcinomas and Embryonic Stem Cells: A Practical Approach, 2nd ed. , IRL Press Limited, Oxford, 1987. b) . Creación y análisis de ratones con expresión IL-22RA extirpada. Los clones ES positivos, en los cuales la eliminación los Exones 2-4 e Intrones 2-3 del lugar de interés genómico IL-22RA se presenta, se expanden. Se inyectan en blastocistos de ratones C57Bl/6j . Después de una breve re-expansión de los blastocistos inyectados, se introducen en madres adoptivas pseudo-preñadas para generar quimeras . La inyección de bastocistos, sangrado quimérico y posterior transmisión de línea de germinado de IL-22-RA mutado se realizan como se describe en Robertson, E. J. et al. Teratocarcinomas and Embryonic Stem Cells: A Practical Approach, 2da ed., IRL Press Limited, Oxford, 1987. Los ratones mutantes KO se identificaron por estrategia de formación de genotipos PCR. Tres cebadores PCR, ZC22901 (SEQ ID NO:35), ZC45039 ( (SEQ ID NO-.36), ZC38573 (SEQ ID NO: 37) se usaron en una reacción PCR multiplexada para detectar el alelo de tipo silvestre y el alelo mutante. El alelo de tipo silvestre (WT) proporciona un fragmento de ADN de 229 bp en longitud, mientras que el alelo mutante genera un fragmento de ADN de 371 bp en longitud. El apareamiento de ratones hemicigóticos produce una relación normal de progenie de Homocigoto (HOM) , Heterocigoto (Het) , y tipo silvestre (WT) , así como una relación de sexo normal . Al inspeccionar los ratones a través de PhysioScreen (peso corporal colectado, peso de tejido, cuentas de sangre completa (CBC) , química clínica, observación gruesa, e HistoPathology) no revela diferencias aparentes entre los animales HOM, Het, y WT.

B. El IL-22RA fue necesario para inducir IL-22 SAA: SAA ELISA mostrando la expresión SAA inducida por IL-22 está ausente en ratones agénicos IL-22RA: Para evaluar si IL-22RA fue necesario para la inducción SAA en ratones inyectados con IL-22, los ratones KO IL-22RA se inyectaron con 5ug IL-22 y sangraron 6 hr posteriormente. Un Elisa para determinar los niveles de SAA en las muestras de suero se efectuó usando el kit de inmunoensayo de ratón SAA (BioSource International, California) siguiendo las instrucciones del fabricante, con el suero diluido 1:1000. Cuatro de cinco ratones WT muestra niveles de SAA elevados en respuesta a la inyección IL-22, mientras que cuatro de cinco ratones KO HOM IL-22RA muestra niveles básales de SAA. Ambos ratones KO Het IL-22RA probados tienen niveles SAA elevados, pero son menores que los niveles de SAA en los ratones WT elevados. Esto indica que IL-22RA fue necesario para la inducción de SAA por IL-22. Estos resultados proporcionaron evidencia de que bloquean efectivamente la actividad IL-22RA, por ejemplo por medio de un gen IL-22RA agénico o similarmente por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, reduciendo similarmente la inflamación inducida por IL-22, por ejemplo en la psoriasis, IBD, colitis, endotoxemia, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-22. C. La IL-22RA fue necesaria para el engrosamiento epitelial inducido por IL-22: La administración de proteína pura IL-22 por medio de minibomba osmótica implantada sub-cutáneamente no causa engrosamiento de la epidermis en ratones KO IL-22R. Para evaluar si IL-22RA fue necesaria para inducir el engrosamiento IL-22 epitelial, IL-22 se administró subcutáneamente a ratones HO y IT KO IL-22RA por medio de mini-bombas osmóticas. Las bombas administran IL-22 a una relación de 18.4 µL por día durante 7 días. Cuatro ratones KO HOM y 6 WT IL-22RA reciben proteína IL-22, mientras que 3 HOM y 1 WT reciben PBS. Muestras de suero de ratones IL-22 tratados se probaron en el ensayo de proliferación BaF3 para confirmar la presencia de IL-22. Las células BaF3 transfectadas con IL- 22RA y CRF2-4 requieren la presencia de ya sea IL-22 o IL3 murino hasta proliferar. Estas células se asentaron y lavaron en los medios completos, sin medio mIL-3 (RPMI (JRH Bioscience Inc., Lenexa, KS) complementado con suero de becerro fetal al 10% inactivado por calor, 2mM L-glutaMax-1™ (Gibco BRL) , 1 mM piruvato de sodio (Gibco BRL) , y antibióticos PSN (GIBCO BRL) ) (posteriormente referidos como "medio libre de mIL-3"). Las células se revuelven y se lavan 3 veces para asegurar la remoción de mIL-3. Las células luego se cuentan en un hemocitómetro y se colocan en un formato de 96 pozos a 5000 células por pozo en un volumen final de 200 ul por pozo usando el medio libre de mIL-3. El suero de ratón se presenta en los pozos a 1%, 0.5%, 0.25% ó 0.125%. Las placas de ensayo se incubaron a 37°C, 5% C02 durante 3 días tiempo en el cual Azul de Alamar (Accumed, Chicago, IL) se agregó a 20µ1/????. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 24 horas. El Azul de Alamar dio una lectura fluorométrica con base en el número de células vivas, y de esta manera una medición directa de la proliferación celular en comparación con un control negativo. Las placas se incubaron de nuevo a 37°C, 5% C02 durante 24 horas . Las placas se leen en el contador multietiquetas Wallac Víctor 2 1420 (Wallac, Turku, Finlandia) a longitudes de onda 530 (Excitación) y 590 (Emisión) . Los resultados muestran que ninguno de los animales inyectados con PBS tienen actividad de IL-22, mientras que 1 de 1 animal Het, 2 de 4 animales HOM, y 3 de 6 animales T tienen actividad detectable de IL-22. La proliferación inducida por este suero se bloquea por la presencia de 1 µg/ml de IL-22BP, con la condición de que sea IL-22 específica. Muestras de la piel de ratones de control WT y Het agénicos (KO) tratados con IL-22 y no tratados con IL-22RA HOM se fijaron por inmersión en formalina amortiguada al 10%. Los tejidos se ajustan y colocan en parafina, se procesaron de rutina, se seccionaron a 5 µp? (Jung 2065 Supercut microtome, Leica Microsystems, etzlar, Alemania) y tiñeron con H&E. Los tejidos teñidos se evaluaron bajo un microscopio de luz (Nikon Eclipse E600, Nikon Inc., Melville, NY) por un patologlsta veterinario certificado del consejo ACVP. Cada muestra de piel se evaluó en una escala 0 (ninguna) hasta 4 (severa) para severidad de la inflamación en el tejido que bordea el sitio de implante de la bomba en la hipodermis, en una escala 0 (ninguna) hasta 3 (difusa) para la extensión de engrosamiento de la epidermis (acantosis) , y el número de capas epiteliales se cuentan en la parte más gruesa de la epidermis . No se encuentra diferencia entre los ratones HOM y los ratones WT a los que se les ha dado PBS . Los resultados de estos dos grupos se acumularon en un grupo PBS . La desviación media y estándar se determina para cada grupo de tratamiento y se muestran en la Tabla 14 abajo. Tabla 14 Tratamiento PBS control HOM K0:IL-22 WT: IL-22 Número de ratones 4 4 6 Grosor epitelial 3.5±1.0 3.2±0.5 5.9±2.3 Extensión de acantosis 0.5+1.0 0.2±0.5 1.9+1.3 Inflamación 1.5±1.0 1.2+1.0 2.0+1.0 Los resultados muestran una tendencia hacia un grosor epitelial incrementado y acantosis en ratones WT tratados con IL-22 y menos grosor epitelial y acantosis en ratones HOM IL-22RA cuando se exponen a IL-22.

Estos resultados proporcionaron evidencia de que bloqueando efectivamente la actividad IL-22RA, por ejemplo por medio de un gen IL-22RA agénico o similarmente por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, similarmente se reduciría los efectos de la piel inducidos por IL-22, por ejemplo en psoriasis, IBD, colitis, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL- 22. D . IL-22RA fue necesario para el brillo inducido por IL-20 de la piel de crías neonatas : Híbridos de ratones transgénicos que expresan IL-20 murino con ratones KO IL-22RA producen crías transgénicas que no brillan Para evaluar si IL-22RA fue necesario para inducir brillo IL-20 de crías TG neonatas, el trangen K14 muIL-20 se cruza con la línea IL-22RA KO, y los neonatos se observaron para el fenotipo brillante. Sesenta y nueve crías han nacido con una relación de genotipo Mendeliano. Todos los TG en el respaldo Het KO fueron brillante, mientras que ninguno de los no TG, ni los TG en el respaldo HOM KO fueron brillantes. Un ensayo de proliferación con azul de alamar usando células BaF3 que expresan IL-20RA y IL-20RB se efectuó para evaluar la presencia de IL-20 en el suero del ratón. Estas células proliferan en respuesta a ya sea IL-20 o IL3 murino. 'El procedimiento fue el mismo como el que se describe en la Sección C, arriba. Los resultados del ensayo muestran que todos los ratones TG tienen una actividad IL-20 comparable, y al mismo nivel como IL-20 TG en el respaldo C57BL/6N. La ausencia de cualquier fenotipo neonato brillante indica que el fenotipo neonato de la piel depende de la presencia de IL-22 A. El ensayo de proliferación muestra que todos los ratones TG tienen una actividad IL-20 comparable, y al mismo nivel como IL-20 TG en el respaldo C57BL/6N. La ausencia de cualquier fenotipo neonato brillante indica que el fenotipo neonato de la piel depende de la presencia de IL-22RA. Al dia tres después del parto, las crias de carnadas que contienen 14 muIL-20 TG en el respaldo IL-22RA KO se les practica la eutanasia humanamente y el cuerpo completo se fija por inmersión en formalina amortiguada al 10%. Los tejidos fijados se ajustan en secciones cruzadas del tórax y abdomen, se colocan en parafina, se procesaron de rutina, se seccionan a 5 um (Jung 2065 Supercut microtome, Leica Microsystems, Wetzlar, Alemania) y tiñeron con H&E. Los tejidos teñidos se evaluaron bajo un microscopio de luz (Nikon Eclipse E600, Nikon Inc., Melville, NY) de manera ciega por un patólogo veterinario certificado por el consejo ACVP. Las anormalidades de los tej idos se notan y el número de capas epiteliales en la epidermis del tórax anterior dorsal se cuentan. Los tejidos de los tres IL-20 TG en el respaldo HOM IL-22RA KO (IL-20 TG/IL-22RA KO HOM) y tres no TG en el respaldo IL-22RRA HOM KO (no TG/BL-22RA KO HOM) se examinaron en microscopio y se encontraron que no contienen anormalidades . Los tejidos de dos IL-20 TG en ratones de respaldo Het IL-22RA KO (IL-20 TG/IL-22RA KO Het) también se examinaron. Los números de capas epiteliales en la epidermis fueron similares en todos los animales. Sin embargo, la epidermis de los dos ratones IL-20 TG/IL-22RA KO Het fue hipereosinofílica en comparación con los otros animales y exhibe menos granularidad en el estrato granuloso. No se observaron ningunas otras anormalidades en la piel u otros tejidos de cualesquiera de los ratones . Estos resultados proporcionaron evidencia que bloquear efectivamente la actividad de IL-22RA, por ejemplo por medio de un gen agénico IL-22RA o similarmente por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, similarmente podría reducir los efectos en la piel inducidos por IL-20, así como los efectos en la piel inducidos por TL-22, por ejemplo en psoriasis, IBD, colitis, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-20, y/o IL-22 que incluyen IBD, artlritis, asma, artritis psoriática, colitis, condiciones inflamatorias de la piel, y dermatitis atópica. Ejemplo 33 Análisis de Imágenes Histomorfométricas de Ratones Agénicos IL-22RA Una línea de ratones transgénicos (TG) kl4 IL-20 m se ha estabilizado, y los neonatos TG exhiben un fenotipo brillante. El transgen se expresa por el promotor kl4, el cual dirige la expresión a las células que producen queratina en la piel. Una línea de ratones agénicos (KO) IL-22RA también se ha establecido, y no se observan cambios importantes en los ratones sin prueba inmunogénica. Las dos líneas se cruzan juntas y los neonatos se colectan teniendo los siguientes cuatro genotipos diferentes: (1) TG/-HOM: que expresan el transgen kl4 IL-20 m en un respaldo que no expresa IL-22RA; (2) TG/-Het: que expresa el transgen kl4 IL-20 m en un respaldo que expresa algo de IL-22RA de una copia del gen IL-22RA; (3) T/HOM: que no expresa el transgen kl4 IL-20 m en el respaldo que no expresa IL-22RA; y (4) WT/Het: que no expresa el transgen kl4 IL-20 m en un respaldo que expresa algo de IL-22RA de una copia del gen IL-22RA. Thirtyreinta y cuatro crías neonatas de estos genotipos variados se les practica la eutanasia el día 3, aproximadamente 48 horas después del parto (Tabla 15) : Tabla 15 TG/-HOM* TG/-Het* WT/HOM* WT/Het* (Grupo 1) (Grupo 2) (Grupo 3) (Grupo 4) Total n=10 n=10 n=9 n=5 TG=transgénico; WT=tipo silvestre; HOM=homozigoto; Het=heterozigoto; y n=número de crías. Cada cría se corta transversalmente en tres secciones (tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen) a través del cuerpo y la cabeza se descarta. Los especímenes de tejido, 4.0-5.0mm de grosor, se fijan en formalina amortiguada neutral al 10%, se procesa en bloques de parafina y se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E) por examen histológico de rutina y análisis de imagen histomorfométrico . La epidermis del área dorsal de la médula espinal en cada muestra de tejido se elige para análisis de imagen histomorfométrico usando un microscopio Olympus BH-2, una videocámara (Dage-MTI, Michigan City, IN) y el software BioQuant True Color windows 98 (R&M Biometrics, Inc. Nashville, TN 37209) con el siguiente orden: Parámetro: mag. 10X, Z apagado 0; Configuración: longitud (Dm) ; Medición: modo manual y aditivo. El grosor (Dm) de la epidermis y el estrato córneo o la capa de la córnea de cada muestra de piel se miden individualmente 10 veces, con alrededor de 0. Imm de intervalo entre cada medida, en cada campo microscópico lOx y el valor medio, SD y SEM se obtienen por cálculo Excel. Todas las secciones se ordenan aleatoriamente y miden de manera ciega. Después de la medida, las secciones se abren, y los resultados se agrupan para grupos de tratamiento. Los resultados finales por grupo de tratamiento se clasifican como sigue: 1. Grosor epidermal promedio (Dm) en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen, y luego se sub-clasifica como (a) Grosor epidermal promedio en el tórax de la parte anterior; (b) Grosor epidemial promedio en el tórax de la parte posterior; y (c) Grosor epidemial promedio en el abdomen. 2. Grosor promedio del estrato córneo (C3m) en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen, y se sub-clasifica como (a) Grosor promedio del estrato córneo en el tórax de la parte anterior,- (b) Grosor promedio del estrato córneo en el tórax de la parte posterior,-y (c) Grosor promedio del estrato córneo en el abdomen. 3. Grosor promedio de la epidermis más estrato córneo en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen. Los datos resultantes se analizan usando software GraphPad InStat (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA. 92121). Se aplica el análisis de una vía de variación (ANOVA) para examinar la importancia estadística de las diferencias en los valores medios del grupo 1 al grupo 4. La prueba de Comparaciones Múltiples Tukey-Kramer se usó para la determinación de diferencias estadísticas en los valores medios entre dos grupos (*P<0.05; **P<0.01; ***P<0.001; ****P<0.0001) . Observaciones de P<0.05 se consideran significantes. (1) Resultados histomorfométricos (a) Grosor epidemial promedio (µp?) en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen El grosor epidermal se incrementa importantemente en las crías transgénicas IL-20 que carecen de una copia del gen IL- 22RA (TG/-Het) contra las crías transgénicas IL-20 sin con expresión de IL-22RA (TG/-HOM, P=0.001***) y contra las carnadas de control (WT/HOM, P=0.001*** y WT/Het, P=0.001***), respectivamente (Tabla 16) . Las crías TG/-Het muestran un grosor incrementado de epidermis no gueratinizada posiblemente debido a la hipertrofia queratinicito. Este incremento pudiera involucrar todas las tres capas no queratinizadas (basal, de picadura, y granular) pero más a menudo afectan la capa de la célula de picadura. La epidermis de la cría TG/-Het incrementa alrededor de 25% en el grosor y la picadura se vuelve prominente. Aunque la epidermis de las crías TG/-HOM es ligeramente más gruesa que los controles (WT/HOM y WT/Het) y estadísticamente no indica una diferencia importante entre los grupos (P>0.05). El grosor epidermal en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen también se comparan. La epidermis normalmente delgada del abdomen es más gruesa que el tórax de la parte posterior y el tórax de la parte posterior es más grueso que el tórax de la parte anterior (Tabla 16) . Tabla 16 TG/-HOM TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=28) (N=30) (N=27) (N=15) Media 32.58±1.25 41.05±2.04 31.3111.08 30.83±1.43 Los resultados representan valores medios ± SEM. N=número de secciones medidas.

El epitelio escamoso de la piel en el tórax de la parte anterior de las crías TG/- Het muestra un incremento en el grosor acompañado por hipertrofia de las células epidemiales (queratinocitos) ; sin embargo no hay diferencia estadística comparado con otros grupos, el TG/-HOM, WT/HOM y WT/Het (P=0.1565, Tabla 17). Se aprecia que resulta de su artefacto histológico, por ejemplo, variabilidad sección a sección, la arquitectura natural de la epidermis, o que no hay mucho efecto en la piel delgada en el tórax de la parte anterior. Nota: el procedimiento histológico o sección de tejido del tórax de la parte anterior puede desacalificarse para análisis histomorfornétrico para obtener importancia estadística. Tabla 17 TG/-HOM TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=10) (N=10) (N=9) (N=5) Medio 29.18+2.2433.20±2.2427.28±0.6 29.38+1.77 Los resultados representan valores medios + SEM. N=número de secciones medidas El IL-20 (TG/-) con una copia del gen IL-22RA (Het) muestra un valor medio incrementado del grosor epidermal en comparación con el TG/-HOM (P<0.05*), WT/HOM (P<0.001*** ) , y WT/Het (P<0.01*), respectivamente (Tabla 18). Las estadísticas indican importancia extrema entre los grupos (P<0.0001****) . La epidermis TG/-Het incrementa alrededor del 29% de lo de WT/Het. El fenotipo de crías IL-20 (TG/-) con ausencia de IL- 22RA (HO ) reensambla en parte a de las crías que carecen de una copia del gen IL-22RA (Het) asociado con epidermis engrosada que con de las carnadas de control (WT/HOM y WT/Het) , sin embargo, no se demuestra diferencia estadística en comparación con los controles (P>0.05). La epidermis TG/-HOM incrementa alrededor de 14% del de WT/HOM. Como con las IL-20 TG/-crías, las crías deficientes del receptor IL-22RAm (WT/HOM y WT/Het) demuestra relativamente un adelgazamiento del grosor epidemial. De forma importante, el resultado histomorfométrico del grosor epidemial en el tórax de la parte posterior fue un hallazgo consistente correlacionado con el grosor epidemial promedio en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen (Tabla 15) , lo que indica que el procedimiento histológico y la sección de tejido del tórax de la parte posterior lleva a cabo la mejor calidad para el análisis de imágenes histomorfométrico . Tabla 18 TG/-H0M TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=10) (N=10) (N=9) (N=5) Medio 35.91+1.37 43.79±2.35 30.83±1.86 30.94±2.83 Los resultados representan valores medios + SEM. N=número de secciones medidas . Los resultados del grosor epidemial promedio en el abdomen (Tabla 19) fueron similares a los del tórax de la parte posterior (Tabla 18) excepto que el TG/-H0M no muestra diferencias comparado con las carnadas de control (WT/HOM y WT/Het, P>0.05). hay algunas variaciones en las secciones de tejido y también se pierden dos secciones, esto es, sin epidermis que cubra el área dorsal en el grupo TG/-HOM. Tabla 19 TG/-HOM TG/-Het WT/HOM WT/Het (M=8) (N=10) (N=9) (N=5) Medio 32.35+1.44 46.33+3.10 35.81+1.90 32.16+2.97 Los resultados representan valores medios ± SEM. N=número de secciones medidas. (b) Grosor promedio (µt?) del estrato córneo en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen A pesar del grosor epidermal incrementado en las crías transgénicas IL-20 (TG/-) en el respaldo ni expresan IL-22RA (HOM)' o expresan una copia del gen (Het) , la reducción predominante del estrato córneo o grosor de la capa cornificada se observó en las pieles TG/-HOM y TG/-Het en comparación con las carnadas de control (WT/HOM y WT/Het) y las estadísticas indican una importancia extrema entre los grupos (P<0.0001****, Tabla 20). Las crías TG/-Het muestran alrededor de 36%, 50% y 49% de cantidades reducidas de queratina en la superficie de la epidermis contra TG/-HOM (P<0.01**), WT/HOM (P<0.001***) y WT/Het (P<0.001***) , respectivamente. Las crías TG/ -HOM muestran alrededor de 22% de reducción importante en el grosor del estrato córneo en comparación con su control (WT/HOM, P<0.05*) y sólo 17% de reducción contra el WT/Het lo que revela nada de importancia estadística (P>0.05). Los grosores del estrato córneo en las crías de control, WT/HOM y WT/Het fueron de alrededor del mismo. Aparentemente, el estrato córneo en el tórax de la parte posterior es más grueso que aquel en el abdomen y el abdomen es más grueso que aquel en el tórax de la parte anterior. Tabla 20 TG/-HO TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=8) (N=10) (N=9) (N=5) Medio 33.26±2.6921. 1+1.27 42.54+2.01 40.31+3.82 Los resultados representan valores medio + SEM. N=número de secciones medidas . El grosor promedio del estrato córneo en el tórax de la parte anterior (Tabla 21) se asemeja al del tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen (Tabla 20) , sin embargo una reducción importante de estrato córneo sólo se encuentra en TG/-Het vs . TG/-H0M (P<0.05*) y vs . WT/HOM (P<0.01**), respectivamente. La desviación estándar y el error estándar del medio fue más alto de lo que puede ser debido a la sección pobre, muestras de piel perdidas, arquitectura natural de la epidermis, o que no hubo mucho efecto en el tórax de la parte anterior. Nota: el procedimiento histológico o sección de tejido del tórax de la parte anterior puede descalificarse para análisis histomorfométrico con objeto de obtener resultados de calidad. Tabla 21 TG/-HOM TG/-Het T/HOM WT/Het (N=28) (N=30) (N=26) (N=14) Medio 34.96+3.53 18.14+3.99 40.47+4.38 32.96+8.11 Los resultados representan valores medios ± SEM. N=número de secciones medidas El resultado del grosor promedio del estrato córneo en el tórax de la parte posterior (Tabla 22) fue similar al del tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen pero con tres excepciones: (1) TG/-H0M vs. TG/-Het y TG/-H0M vs. WT/HOM no muestran diferencias estadísticas (P<0.05); (2) TG/-H0M vs . WT/Het muestra una diferencia importante (P<0.01**); (3) El estrato córneo en el WT/Het se engruesa remarcablemente lo que puede ser consecuencia del artefacto de procesamiento de tejido, por ejemplo, la gueratina expandida o hinchada cuando se coloca en una solución hipotónica o se deja en un baño de agua mucho tiempo. Tabla 22 TG/-H0M TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=10) (N=10) (N=8) (N=4) Medio 35.64±3.4 24.22+1.54 44.35±3.51 53.77±7.21 Los resultados representan valores medios ± SEM. N=número de secciones medidas .

Sólo los TG/-HOM vs. WT/HOM y TG/-Het vs . WT/HOM muestran una diferencia estadística importante, P<0.05* y P<0.001***, respectivamente (Tabla 23) . Las TG/-crías exhiben una reducción en el grosor de estrato córneo en el abdomen en comparación con sus carnadas de control (WT/HOM y WT/Het) . Tabla 23 TG/-HOM TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=8) (N=10) (N=9) (N=4) Medio 28.84+4.36 21.86+1.30 42.4513.15 33.25±3.96 Los resultados representan valores medios ± SEM. N= úmero de secciones medidas (c) Grosor promedio (µp?) de epidermis más estrato córneo en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen Las crías TG/-Het exhiben un incremento importante en el grosor epidemial y una reducción importante en el grosor del estrato córneo en comparación con las carnadas de control (WT/HOM y WT/Het) y las crías TG/-HOM producen un resultado similar pero con un efecto mínimo (Tabla 24) . Tabla 24 TG/-HOM TG/-Het WT/HOM WT/Het (N=10) (N=10) (N=9) (N=4) Estrato córneo 32.58 41.05 31.31 30.83 Epidermis 33.26 21.41 42.54 40.31 Los resultados representan valores medios . N=número de crías (d) Señalización de IL-20 a través de tanto IL-20RA como IL-22RA La epidermis es un epitelio continuamente renovado, estratificado, dependiente del balance entre la proliferación, la diferenciación, y muerte celular por homeostasis. En la epidermis normal, una capa basal mitóticamente activa se da para diferenciar terminalmente queratinocitos que migran fuera y se desprenden por último de la superficie de la piel como escamas enucleadas, la queratina o capa cornificada localizada en el estrato córneo. Aunque muchas proteínas se conocen que funcionan para mantener la homeostasis epidemial, la coordinación molecular de estos eventos se entiende pobremente. IL-20 es una proteína que interactúa con el receptor novedosa y sus señales a través de cualesquiera de los receptores IL20RA o IL-22RA (IL-22RA) se expresa en una capa de piel asociada con la proliferación de queratinocitos . Los neonatos transgénxcos XL-20 exhiben un grosor anormal y un fenotipo de piel brillante. La deficiencia de IL-22RAm (HOM) en ratones no muestra respuesta al tratamiento IL-22, mientras que los ratones de tipo silvestre con el gen IL-22RA y tratados con IL-22 demuestran un incremento importante en el grosor epidemial (P<0.001***, ver los resultados en el análisis de imagen histomorfométrico IL-22RAm KO/IL-22, PID 59.2). Para investigar si la ausencia de IL-22RA tiene un efecto en el fenotipo brillante observado en los neonatos K14 IL-20m TG, ratones transgénicos que expresan ectópicamente IL-20 se emparejan con IL-22RA homozigoto (HOM) o IL-22RA heterozigoto (Het) deficiente. Un análisis de imagen cuantitativo del grosor epidemial se realiza previamente en algunas crías en el tórax de la parte posterior de este estudio (esto es, 19 crías, 1 sección por cría, para un total de 19 secciones) pero no se obtiene importancia estadística debido al número limitado de animales estudiados y la variación dentro de los grupos . La aspiración del presente estudio fue cuantificar histomorfométricamente más muestras de piel en el tórax de la parte anterior, tórax de la parte posterior y abdomen de cada cría del mismo estudio (esto es, 34 crías, 3 secciones por cría, para un total de 102 secciones) para explorar la biología de IL-20 y obtener resultados cuantitativos confiables . Para un análisis de imagen efectivo, se asegura que la orientación de la piel en el bloque de parafina sea consistente y las muestras de piel se miden de las mismas ubicaciones respectivas en todos los individuos y grupos de crías. Se realizan dos tipos de mediciones: (1) El grosor de epidermis se midió 10 veces por campo microscópico lOx en cada muestra de piel, cada una en el lado dorsal de la columna vertebral, para investigar el papel de IL-20 para mediar la proliferación de queratinocito y la diferenciación; (2) El grosor de la capa cornificada o el estrato córneo se midió de la misma manera para correlacionar los resultados con la apariencia de piel brillante en los neonatos IL-20 TG. El análisis de imagen histomorfométrico del grosor epidemial revela que los neonatos TG/-Het, que expresan el transgen kl4 IL-20m en un respaldo expresa algo de IL-22RA de una copia del gen IL-22 A que exhibe epidermis engrosada y los neonatos TG/-HOM, que expresan el transgen kl4 IL-20m en el respaldo no expresan IL-22RA, no tiene un cambio importante. El grosor epidemial se incrementa importantemente en las crías transgénicas IL-20 que carecen de una copia del gen IL-22RA (TG/-Het) contra las crías transgénicas IL-20 que carecen de ambas copias de los genes IL-22RA (TG/-HOM, P=0.001***) y contra las carnadas de control (WT/HOM, P=0.001*** y T/Het, P=0.001***). Las crías TG/-Het muestran un grosor incrementado de la epidermis no queratinizada principalmente debido a la hipertrofia de los ceratinocitos en la capa de pinchado. La epidermis de la cría TG/-Het incrementa alrededor del 25% en grosor, mientras que la epidermis de crías TG/-HOM sólo son ligeramente más gruesas, incrementando alrededor de 4-5%, que los controles (WT/HOM y WT/Het) y las estadísticas no indican una diferencia importante entre la TG/-HOM y su control WT/HOM (P>0.05) . Los resultados histomorfométricos del estrato córneo muestran que a pesar del engrosamiento de la epidermis in los neonatos TG/-Het, la reducción predominante de queratina o el grosor de capa cornificada se observa en pieles TG/-HOM y TG/-Het en comparación con las carnadas de control (WT/HOM y WT/Het) y las estadísticas indican una importancia extrema entre los grupos (P<0.0001****) . Las crías TG/-Het muestran alrededor del 36%, 50% y 49% de cantidades reducidas de queratina en la superficie de la epidermis contra las TG/-HOM (P<0.01**), WT/HOM (P<0.001***) y WT/Het (P<0.001***) , respectivamente. Las crías TG/-HOM muestran alrededor de 22% de reducción importante en el grosor del estrato córneo en comparación con su control (WT/HOM, P<0.05*) y sólo 17% de reducción contra la WT/Het (P>0.05). Los grosores del estrato córneo en las crías de control, WT/HOM y WT/Het son de alrededor de los mismos . La reducción en el grosor promedio del estrato córneo en los neonatos TG/-HOM y TG/-Het aparentemente se correlaciona con el grueso encontrado en el saco, en el cual el nivel de grosor de los neonatos IL-20 (TG)/IL-22RA (Het) parece tener un brillo reducido (por ejemplo, con menos queratina) , llamado un lustre, mientras que los neonatos IL-20 (TG) /IL-22RA (HOM) no brillan (por ejemplo, con más queratina) . Histológicamente, la queratina en el estrato córneo en las TG/-crías aparece para ser más compacto que en las crías WT. En conjunto, la epidermis engrosada asociada con queratinocitos hipertróficos y la capa delgada del estrato córneo en los neonatos transgénicos IL-20 puede explicar porque exhiben un fenotipo de piel brillante.

La hipertrofia incrementada y la diferenciación terminal desordenada de los queratinocitos se observaron en los neonatos transgénicos IL-20 con un agénico objetivo de una copia del gen IL-22RA (Het) . La piel exhibe hipertrofia en los queratinocitos pero falla para diferenciar completamente, la carencia de gueratina del estrato córneo. Los neonatos transgénicos IL-20 con ruptura de dos copias de los genes IL-22RA (HOM) exhiben a fenotipo que reensambla la piel TG/-Het pero muestra un efecto menor o mínimo (Figuras 12-15) . Se aprecia que la ausencia de IL-22RA (HOM) tiene un efecto parcial en el fenotipo brillante observado en los neonatos K14 IL-20m TG y la ausencia de IL-22RA (Het) tiene un efecto mínimo o ninguno en el fenotipo brillante. En otras palabras, la señalización de IL-20, una proteína que interactúa con el receptor novedosa que se señala a través de ya sea IL- 20EA o el receptor IL-22RA (IL-22RA) probablemente no se obstruye por la expresión deficiente de una copia del gen IL-22RA (Het) pero se obstruye parcialmente por la expresión deficiente de dos copias del gen IL-22RA (HOM) . Estos resultados proporcionaron evidencia de que bloquear efectivamente la actividad IL-22RA, por ejemplo por medio de un gen IL-22RA agénico o similarmente por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22RA de la presente invención, similarmente reduciría los efectos en la piel inducidos por IL-20, así como los efectos en la piel inducidos por IL-22, por ejemplo en psoriasis, IBD, colitis, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-20, y/o IL-22. Ejemplo 34 Efecto de IL-22 en Ratones Agénicos IL-22RA Treinta y seis ratones que incluyen 23 IL-22RA KO (HOM) y 13 controles (WT) se trataron ya sea con IL-22 o PBS administrado subcutáneamente por el implante de una minibomba con un tubo o solo la minibomba (Tabla 25) : Tabla 25 HO /PBS HOM/IL-22 WT/PBS WT/lL-22 (Grupo) (Grupo 2) (Grupo 3) (Grupo 4) Machos n=3 n=10 n=3 n=8 Hembras n=0 n=10 n=0 n=2 Total n=3 n=20 n=3 n=10 La muestra de piel, 1.5-2.5cm en longitud y 4.0-5.0mm de grosor, del sitio bombeado de cada animal se obtiene por examen histológico de rutina y análisis de imagen histomorfométrico. Todos los especímenes de tejido se fijan en formalina amortiguada neutral al 10% y se procesan en bloques de parafina. Seis secciones en segmentos, 5um en grosor y lOum de intervalo entre las secciones adyacentes con epitelio que cubre la superficie completa, de cada muestra de piel por animal, se tiñeron con hematoxilina y eosina (H&E) . El análisis de imagen histomorfométrico de las muestras de la piel se efectuó usando un microscopio Olympus BH-2, una cámara de video (Dage-MTI, Michigan City, IN) y el software BioQuant True Color Windows 98 (R&M Biometrics, Inc. Nashville, T 37209) con el siguiente establecimiento: Parámetro: mag. 10X, Z apagado 0; Configuración: longitud (um) ; Medición: modo manual y aditivo. El grosor (um) de la epidermis se midió 5 veces en cada campo microscópico lOx de un total de 4 campos capturados desde el centro de 0.4cm de cada sección de piel (por ejemplo, un campo microscópico lOx = O.lcm y cuatro campos microscópicos 10x=0.4cm) . Un total de 6 secciones de cada animal se midieron y el valor medio, SD y SEM se obtienen por cálculo Excel. Todas las secciones se ordenan aleatoriamente y se miden de manera ciega. Después de la medición, las secciones se abren, y los resultados se emparejan a los grupos de tratamiento. Los resultados finales por grupo de tratamiento se clasifican como sigue: 1. El grosor epidermal de ratones HOM y WT machos y hembras . 2. El grosor epidermal de ratones HOM y WT machos . Los datos resultantes se analizan usando el software GraphPad InStat (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA 92121). Se aplica un análisis de una vía de variación (ANOVA) para examinar la importancia estadística de las diferencias en los valores medios desde el grupo 1 hasta el grupo 4. La prueba de comparaciones múltiples Tukey-Kramer y la prueba T no emparejada se aplican para analizar la importancia en los valores medios entre los dos grupos. Las observaciones de P<0.05 se consideran importantes. III. Resultados histomorfométricos (1) Grosor epidermal (µ???) de ratones machos y hembras HOM y WT El grosor epidermal se incrementa importantemente en las pieles de ratones WT tratados con IL-22 (WT/IL-22) contra los controles WT/PBS (P=0.0001). La piel de ratón IL-22RAm KO tratado con IL-22 (HOM/IL-22) muestra un valor medio incrementado del grosor epidermal en comparación con los controles HOM/PBS, sin embargo las estadísticas no indican diferencias importante entre los dos grupos (P>0.05). La reducción predominante del grosor epidermal se observó en los ratones IL-22RA KO en comparación con los ratones WT (por ejemplo, HOM/IL-22 vs . WT/IL-22: P<0.001) (Tabla 26). Tabla 26 HOM/PBS HOM/IL-22 WT/PBS WT/IL-22 (N=3) (N=19) (N=3) (N=10) Medio 14.15+0.1919.01+1.0323.34+5.49 43.08+1.85 Los resultados representan valores medios ± SEM. N=número de animal . (2) Grosor epidermal (um) de ratones machos HOM y WT El grosor epidermal se incrementa alrededor de 2 veces las pieles de ratón macho WT tratadas con IL-22 (WT/IL-22) cuando se compara con controles de macho WT/PBS (P=0.0001), sin embargo, las epidermis de ratón macho IL-22RAm KO tratadas con IL-22 (HOM/IL-22) sólo muestran ligeramente un incremento en comparación con los controles machos HOM/PBS (P>0.05). De forma importante, los ratones IL-22RAm KO exhiben una marcada reducción del grosor epidemial cuando se comparan con sus controles, los ratones WT machos (por ejemplo, HOM/PBS VS WT/PBS: P<0.05; HOM/IL-22 VS WT/IL-22 : P<0.001) (Tabla 27). Tabla 27 HOM/PBS HOM/IL-22 WT/PBS WT/IL-22 (N=3) (N=9) (N=3) (N=8) Medio 14.15±0.19 15.86±0.75 23.34±5.49 41.41±1.71 Los resultados representan valores medios + SEM. (3) El grosor epidemial (um) de ratones HO y WT, machos vs. hembras La epidermis de los ratones hembras se encontró más gruesa que aquella de los ratones machos (por ejemplo, HOM/IL-22/machos VS HOM/lL-22/hembras : P<0.01; WT/lL-22/machos VS WT/IL- 22/hembras: P<0.05) (Tabla 28). Tabla 28 HOM/IL-22 HOM/IL-22 WT/lL-22 WT/IL-22 (Machos, N=9) (Hembras, N=10) (Machos, N=8) (Hembras, N=2) Medio 15.86+0.75 21.85+1.3 41.41+1.71 49.75+4.82 Los resultados representan valores medios ± SEM. (4) Grosor epidemial (µp?) de ratones HO , bomba IL-22 vs . Bomba IL-22 con tubo Las epidermis de ratones IL-22RAm KO (HOM) con bomba y tubo IL-22 se encontraron significativamente más gruesas que las de los ratones IL-22RAm KO (HOM) sólo con bomba (P<0.0001, por prueba T dispar) (Tabla 29) . Tabla 29 HOM c/bomba IL-22 HOM c/bomba con tubo IL-22 (M=8 y F=2, N=10) (M=2 y F=8, N=10) Medio 15.85±0.65 23.30+1.36 Los resultados representan valores medios + SEM. M: machos; F: hembras; N: número total de ratones. IV. Discusión: Tomado en conjunto, la aspiración de este estudio es caracterizar los efectos epidemiales en las pieles tratadas con IL-22 de ambos ratones IL-22Ram KO y WT y se relatan estos hallazgos para indicaciones clínicas. Se realiza un análisis de imagen cuantitativo para determinar el grosor de la epidermis en las secciones de la piel teñidas con H&E. Las muestras de piel de cada animal se miden histomorfométricamente 120 veces (esto es, 20 veces/cada sección X 6 secciones en segmento de cada ratón = 120 mediciones) y el grosor epidermal promedio se obtiene por un cálculo Exel. El estudio histomorfométrico demuestra que IL-22 resulta en un incremento importante en el grosor epidermal especialmente en los ratones WT con presencia del receptor IL-22RA (P<0.0001 por ANO A, considerado extremadamente importante) y muestra mínimos o inferiores efectos en los ratones IL-22RAm KO (HOM) con ausencia del receptor IL-22RA (P>0.05). El grosor epidemial en los ratones WT tratados con IL-22 se incrementó alrededor de 43% que los tratados con PBS (por ejemplo, WT/PBS, P<0.001), mientras que los ratones IL-22RAm KO (HOM) tratados con IL-22 sólo muestran un 26% de incremento en el grosor epidemial en comparación con el control (HOM/PBS, P>0.05). Los ratones IL-22RAm KO exhiben epidermis más delgadas cuando se comparan con los ratones WT (P<0.001). En general, los efectos biológicos de IL-22 en la piel del ratón sugieren que este factor puede estar involucrado en la regulación del crecimiento epidemial y la proliferación. E emplo 35 Farmacocinéticos del Anticuerpo Monoclonal Anti-humano IL-20 (Clon #262.7.1.3.2.4) El anticuerpo monoclonal de prueba, IL-20 mAb anti-humano, (clon #262.7.1.3.2.4) se proporciona en alícuotas de 3x3 mL a una concentración de 1.08 mg/mL (determinada por absorbancia UV a 280 nM) y se almacenaron a -80°C hasta su uso. El vehículo fue IX PBS (50mM NaP04, 109mM NaCl) , pH 7.3. El mAb se descongela a temperatura ambiente antes de usarse y las alícuotas 1 y 2 se usaron como se proporcionan por los grupos de dosificación de 100 µg IV y SC, respectivamente. La mitad de la alícuota 3 se diluyó 1:2 en IX PBS para el grupo de dosis de 50 µg SC y la segunda mitad de la alícuota 3 se diluyó 1:10 en IX PBS para el grupo de dosis de 10 µg SC. Se recibieron ratones hembras SCID (n=96) , de Charles River Labs. Los animales se revisan de salud cuando llegan y se alojan en grupos (3 animales por j ula) . Los ratones fueron de 12 semanas de edad con un peso corporal promedio de 22 g al inicio del estudio. A. Protocolo de Dosificación Ratones hembras SCID (n=24/grupo de dosis) se colocan aleatoriamente en cuatro grupos de dosificación (ver Tabla 30) . El grupo 1 se le administró el anti-huIL-20 mAb por medio de inyección IV de aproximadamente 93 µL en la vena de la cola y los Grupos 2, 3, y 4 se les administró el mAb por medio de inyección SC de aproximadamente 93 µL en la parte anterior del cuello . B. Colección de Muestras Antes de la colección sanguínea, los ratones se anestesiaron completamente con halotano o isofluorano. Las muestra de sangres se recolectaron por medio de pinchazo cardiaco por todos los puntos de tiempo, excepto el punto de tiempo de 1S8 hr (colectado por medio de sangrado ocular y los mismos animales se sangran nuevamente al punto dé tiempo de 504 hr por medio de pinchazo cardiaco) . La sangre se recolectó en tubos separados de suero y se permite que forme coágulos durante 15 minutos . Las muestras se centrifugan posteriormente por 3 minutos a 14,000 rpm. Después de la centrifugación, las alícuotas de 125-150UL se dispenden en tubos eppendorf etiquetados y se almacenaron inmediatamente a -80°C hasta el análisis (Tabla 30) . Tabla 30 * Los mismos animales se usaron para los puntos de tiempo 168 y 504 hr. C. Cuantificación de las Concentraciones de Suero Anti-huIL-20 mAb por ELISA Un ensayo inmunosorbente enlazado a la enzima (ELISA) se desarrolla y califica para analizar las muestras de suero del ratón de los animales dosificados con anti-IL-20 mAb 267.7. 1.3.2.4 durante los estudios farmacocinéticos . Este ensayo se diseña para tomar ventaja de un anticuerpo secundario comercialmente disponible y una detección colorimétrica usando MB. Las diluciones usadas para la curva estándar se modificaron para mejorar la definición de la porción lineal de la curva estándar. Una curva estándar en el intervalo de 100 ng/mL hasta 0.231 ng/mL con diluciones de 2 veces permite la cuantificación de las muestras de suero del ratón. Las muestras QC se diluyeron hasta 1:100, 1:1000 y 1:10000 en suero de ratón SCIE al 10% y se calcularon de nuevo a partir de la curva estándar. D. Análisis Farmacocinético Se descargan la concentración de suero contra los datos de tiempo en un software inNonlin Professional .0 (Pharsight, Inc.; Cary, NC) para análisis farmacocinético. El análisis no compartimiento se usa para determinar los parámetros f rmacocinéticos con base en los datos medios en cada punto de tiempo. E . Resultados Las concentraciones medias de suero anti-humano IL-20 mAb después de la administración de 100 µg IV y 100, 50, y 10 µ<$ SC se muestran en la Tabla 31: Tabla 31 LTR: menos que reportable Después de la administración IV, la concentración mAb contra el perfil de tiempo demuestra un declive biexponencial.

Después de la administración SC, el mAb aparece para tener una fase de absorción lenta, con una eliminación limitada la relación de absorción. Los parámetros farmacocinéticos de suero con base en los datos medios en cada punto de tiempo se muestran en la Tabla 32 : Tabla 32 ND: no determinable debido a la carencia de datos en la fase de eliminación terminal de la concentración contra perfil de tiempo Después de la administración IV, el mAb demuestra una liberación muy lenta (Cl = 0.002 mL/hr) y una vida media de eliminación larga (ti/2,xz « 21 días) . El mAb demuestra un volumen de etapa de estudio de distribución (Vss = 1.3 mL) que es menor que el volumen sanguíneo en un ratón (*¾ 1.7 mL) , lo que sugiere que el mAb no altera substancialmente el comportamiento vascular. La concentración máxima calculada de nuevo (C0) fue mayor que el esperado con base en la dosis inyectada y el volumen sanguíneo en el ratón. Esto, junto con el Vss pequeño, sugiere que el mAb puede confinarse, a una gran extensión, en la fracción del suero de la sangre. Después de la administración SC, los valores Cmax se incrementan linealmente con la dosis. A la dosis SC de lOC^g, el mAb tiene un ti2, z de aproximadamente 25 días con una liberación y un volumen aparente de distribución similar al que sigue a la dosis IV. La biodisponibilida fue del 86%. A menos las dos dosis SC, más parámetros farmacocinéticos no podrán estimarse debido a la carencia de una fase de eliminación terminal medible, aún a través de muestras tomadas a 504 horas. La absorción del mAb después de la dosificación SC aparece para alcanzar un estado de estudio con la eliminación durante la duración del estudio. Ejemplo 36 Antagonistas IL-20 e IL-22 en un modelo de psoriasis y colitis CD4+CD45RBhi (CD25') A. Resumen La transferencia de CD4+CD45RBhi o células CD4+CD25-T en ratones SCID sinérgicos resulta en la colitis en los ratones. La co-transferencias de células T reguladoras (CD4+CD25+ o CD4+CD45RB10) inhibe esta colitis. Después de la transferencia de las células CD4+CD25-T en los ratones, si los ratones se inyectan adicionalme te con enterotoxina B estafilococcal (SEB) , los ratones no sólo desarrollan colitis, sino también psoriasis. Los anticuerpos contra IL-22RA, IL-20, IL-22, IL20R y/o IL-22R, o los receptores IL-22RA solubles se administran a partir de 0-21 días después de la transferencia de la célula y los síntomas de colitis y psoriasis se monitorean. La inhibición del registro psoriático o colitis (histología) indica que IL-21 puede inhibir estas enfermedades autoinmunes. B . Diseño del estudio Bazos y ganglios linfáticos inguinales se aislaron de ratones B10.D2. Se forman suspensiones de célula sencilla y se cuentan. Usando el sistema Miltenyi Bead, las células CD25+ se ordenan por selección positiva. Las células se tiñeron con CD25-PE (BD Pharmingen) a una dilución de 1:100 y se incubó durante 15 minutos . El anticuerpo en exceso se lavó y las células se incubaron con lOul de perlas anti-PE/106 células durante 20 minutos. Las células se lavaron con PBS y se pasan sobre una columna LS (Miltenyi Biotech) . Las células que se pasan a través de la columna (CD25-) se mantienen para un análisis adicional. Un cóctel enriquecido con CD4 (Stem Cell Technologies) se agregó (1:100) a estas células CD25 y se incubó durante 15 minutos . Las células se lavaron con PBS . Se agregó una dilución 1:10 de tetrámero anti-biotina a las células- durante 15 minutos seguido por un coloide magnético (60µ1/106 células) durante 15 minutos (todos de Stem Cell Technologies) . Las células se pasan a través de una columna negativa (0.5", Stem Cell Technologies). Las células que se pasan a través son las células CD4+CD25. La pureza se analiza usando citometrla de flujo. Se inyectan 0.4 x 10s células i.v. en ratones CB-17 SCID sin tratar en un volumen total de 200 DI. Los ratones se inyectaron i.p. con 10 Dg SEB al día siguiente (di) . Los síntomas de la psoriasis y colitis se siguen desde las 2-5 semanas. Los ratones se registran para enfermedad de psoriasis bajo los siguientes criterios. 0 - sin lesiones, 1 - lesiones suaves en el cuello, 2 - lesiones severas en el cuello y la espalda (tronco) 3 - lesiones muy severas en el cuello, espalda y la barriga de los ratones. El grosor de la oreja también se mide como una medida de la severidad de la enfermedad. Los grupos de ratones se inyectaron i.p. con PBS, 100 Dg de anticuerpo de control o 10-100 Dg de anticuerpos contra IL-22RA, IL-20, IL-22, IL- 20R o IL-22R, o IL-22RA soluble desde los días 1-30 bajo un régimen de dosis diferente (3X/semana o 2X/semana). C. Resultados y Conclusión La inhibición de los síntomas psoriáticos y de colitis en los ratones tratados con anticuerpo indica que la inhibición de la función IL-20 y/o IL-22 puede inhibir síntomas autoinmunes en este modelo de psoriasis y colitis.

Ejemplo 37 Antagonistas IL-20, é IL-22 en un modelo de psoriasis de transplante SCID-hu Piel con psoriasis humana injertada en un ratón SCED puede mantener sus características clínicas, de microscopio de luz , y psoriáticas inmunohistoquímicas por varias semanas . Este modelo proporciona un sistema para evaluar terapias pretendido para restaurar tejido lesionado a un fenotipo normal. Una vez que la piel humana se injerta exitosamente, los anticuerpos contra IL-22RA, IL-20, IL-22, IL-20R y/o IL-22R, o receptores IL-20 o IL-22 solubles pueden administrarse por varias semanas, y el grosor epidemial se puede analizar para evaluar el efecto de estos antagonistas en la psoriasis. B . Diseño del estudio Biopsias de pinchado de 6 mm de grosor completo que consiste de la epidermis completa y varios mm de dermis se obtienen de voluntarios adultos saludables y las pieles se lesionan psoriáticamente . Se obtienen de cuatro a seis biopsias de cada donador. Una biopsia de pinchado de cada donador se transplanta en la superficie dorsal del ratón SCID receptor (CB-17, Taconic) . Los animales se mantienen en un ambiente libre de patógenos . El tratamiento se inicia después de un injertado exitoso (2-3 semanas después del transplante) como sigue: una biopsia para control negativo (PBS o isotipo mAb) , una biopsia para control positivo (Ciclosporina A) , y 2- 3 biopsiás para tratamiento con IL-22RA anti-humano, IL-20 anti-humano, IL-22 mAb anti-humano o receptores solubles para IL-20 o IL-22 (inyección intraperitoneal, tres veces a la semana durante 2-4 semanas en un horario M- -F) . C. Análisis cuantitativo: Las observaciones clínicas y evaluaciones se harán regularmente a través de los experimentos, y se registrarán. La severidad de las lesiones psoriáticas se evalúa para escamosidad, endurecimiento, y eritema de una manera ciega. Los parámetros pueden registrarse usando la escala de tres puntos: 0 = carencia completa de involucramiento cutáneo; 1 = involucramiento ligero; 2 = involucramiento moderado; 3 = involucramiento severo. Al final del periodo de dosificación cada animal se le realiza la eutanasia y los tejidos se colectan para histología e IHC. (1) Parte de los tejidos se fija en formalina y se tiñe con hematoxilina y eosina. El área epidermal se mide como una función de los cambios en el grosor epidermal por unidad de longitud usando el software NIH Image. Las áreas múltiples de cada transplante se cuantifican para proporcionar un valor n alto y un área epidermal media. (2) el número de células mononucleares inflamatorias por campo de polvo alto (0.103 x 0.135 mm) en la dermis superior; (3) el grado de paraqueratosis está en una intervalo en una escala arbitraria desde 0 hasta 3, donde 0 es no paraqueratosis, 1 es paraqueratosis en menos de un tercio de la sección, 2 fue paraqueratosis en más de un tercio pero menos de dos tercios de la sección, y 3 es paraqueratosis en más de dos tercios de la sección. (4) El resto del tejido se teñirá por Ki67 (marcador de queratinocitos proliferantes) , para evaluar el número de longitud de queratinocitos por milímetro ciclizado Ki67 de la sección. La severidad reducida de la psoriasis como se mide por grosor epidemial, indica que la neutralización de la función IL-20 y IL-22 puede ser efectiva en un modelo de psoriasis. Para cuantificar la severidad reducida de psoriasis, se mide el grosor epidermal, el número de células inflamatorias en la dermis superior, los números de ceratinocitos cliclantes Ki67, y los grados de paraqueratosis. Al reducir significativamente los cuatro parámetros para los grupos tratados en comparación con los ratones de control, se indica el uso terapéutico potencial de los antagonistas IL-20, IL-22. Ejemplo 38 Separación por exclusión para la actividad del antagonista IL- 20 usando células BaF3/lL-22RA/lL-20RB usando un Ensayo de Proliferación con Azul de Alamar La línea celular pre-B dependiente del factor BaF3 se co-transfectó con IL-22RA y IL-20KB (Ver, método en el Ejemplo 3) y se trató con IL-20 a diversas concentraciones. La proliferación se evaluó usando un ensayo de azul de Alamar como se describe en Ejemplo 3. La proliferación estimulada por IL-20 en una manera dependiente de la dosis a concentraciones esperadas para una citocina, demuestra que IL-20 enlaza y activa el receptor IL-22RA./IL-20RB heterodimérico a concentraciones esperadas para la citocina. Los controles negativos que contienen BaF3 no transfectado no proliferan. Con objeto de determinar si los anticuerpos anti-IL-22RA son capaces de antagonizar la actividad IL-20, el ensayo antes descrito se realiza usando anticuerpos anti-IL-22RA como un antagonista para la actividad IL-20. Cuando IL-20 se combina con tal antagonista, la respuesta a IL-20 se lleva hasta niveles de respaldo. La presencia de tal antagonista que extirpa o reduce los efectos proliferativos de IL-20, demuestra que es un antagonista del ligando IL-20. Este ensayo se puede usar para probar otros antagonistas de la actividad IL-20 descritos en la presente, tales como polipéptidos antagonistas que comprenden el receptor IL-22RA soluble. Ejemplo 39 Neutralización de IL-20 y la actividad de IL-22 por anticuerpo monoclonal anti-huL22RA Usando el ensayo de neutralización basado en células descrito en el Ejemplo 28, un anticuerpo monoclornal anti-huIL-22RA de ratón purificado (Ejemplo 30 (D) ) se agregó como una dilución en serie, por ejemplo, a 10µg/ml, 5 g/ml, 2.5µg/ml, 1.25µ ??1, 625ng/ml, 313ng/ml, 156ng/ml y 78ng/ml. Las placas de ensayo se incubaron a 37°C, 5% C02 durante 4 días tiempo en el cual el Azul de Alamar (Accumed, Chicago, IL) se agregó a 20µ1/????. Las placas se incubaron de nuevo a 37 °C, 5% C02 durante 16 horas. Los resultados muestran que el anticuerpo monoclornal anti-huIL-22RA purificado podrá neutralizar la señalización de tanto hulL-22 como hulL-20 a través de huIL-22RA. A la concentración de lC^g/ml, la proliferación que neutraliza completamente el anticuerpo inducida por huIL-22 o huIL-20, con la inhibición de la proliferación que disminuye en una forma dependiente de la dosis a las concentraciones inferiores . Un Ab de ratón de control negativo agrupado por isotipo, probado a las concentraciones descritas anteriormente, no proporciona inhibición de la proliferación de cualquier citocina. Estos resultados demuestran además que los anticuerpos monoclonales para IL-22RA podrán verdaderamente antagonizar la actividad de los ligandos pro-inflamatorios , IL-20 y IL-22 a bajas concentraciones . Estos resultados proporcionan evidencia adicional de que bloqueando efectivamente la actividad IL-22RA, por ejemplo por medio de un anticuerpo monoclonal neutralizante para IL-22 A de la presente invención, podría ser ventajoso para bloquear, inhibir, reducir, antagonizar o neutralizar los efectos de IL-20 y IL-22 (solo o en conjunto) in vivo y puede reducir la inflamación inducida por IL-20 y/o IL-22, tal como se aprecia en los efectos de la piel inducidos por IL-20, así como los efectos en la piel inducidos por IL-22, por ejemplo en psoriasis, IBD, colitis, u otras enfermedades inflamatorias inducidas por IL-20, y/o IL-22 que incluye IBD, artritis, asma, artritis psoriática, colitis, condiciones inflamatorias de la piel, y dermatitis atópica. Ejemplo 40 Tratamiento de ratones transgénicos IL-20 e IL-22 preñados con anticuerpo monoclonal anti-IL-22RA neutralizante Para probar el anticuerpo monoclonal IL-22RA. anti-ratón (mAb) para neutralizar la actividad in vivo, ratones IL-22 Tg (Tg) y transgénicos IL-20 preñados se inyectaron intraperitonealmente con IL-22RA mAb anti-ratón. Las crias recién nacidas luego se evalúan para la presencia o ausencia del fenotipo de piel "brillante" que caracteriza normalmente estas cepas de ratones . Específicamente, ratones IL-20 Tg machos (que se generan usando la queratina-14) o IL-22 Tg (usando el promotor de insulina) se preñan a hembras C57BL/6N en estimulación y las hembras cruzadas se identifican por la presencia de un tapón vaginal al día siguiente. Cada hembra preñada se coloca al lado en una jaula separada y se monitorea diariamente. Los grupos de tratamiento incluyen al menos 4 hembras preñadas cada uno, para permitir un análisis estadísticamente importante para ambas crías Tg y no Tg. Con base en la experiencia previa con estos ratones Tg, la carnada usualmente está en el intervalo de aproximadamente 6 hasta 8 crías por carnada, de las cuales entre 2 hasta 3 son Tg+. Siete a nueve días después, los ratones se preñan (edad embriónica 7-9; e7-9) , las hembras se inyectan intraperitonealmente con 250-500ug de el IL-22RA mAb anti-ratón de rata (isotipo IgG2a de rata) en un volumen de 200-250ul de PBS. Se usan agujas cortas a un ángulo de inyección poco profundo para evitar inyectar directamente el útero. Las hembras preñadas se inyectan de esta manera 3 días en la semana (Lunes, Miércoles, y Viernes) durante 2 semanas (hasta que nacen) con objeto de acceder exitosamente a los embriones desarrollados . Los grupos de control (de no menos de 4 ratones hembras preñadas cada uno) incluyen lo siguiente: isotipo de control de rata IgG2a mAb, IL-22 mAb anti-humano/ratón (isotipo IgGl de rata) , y un isotipo de control de rata IgGl mAb. Como el control para la neutralización de IL-20 murino, las hembras preñadas se inyectaron ya sea con una proteína de fusión IL-20R-Fc4 soluble que puede enlazarse y neutralizar IL-20 humano y de murino o una protelna de control Fc4. A partir de los días 1 hasta 2 después del nacimiento, las crías se monitorean cercanamente para la aparición del fenotipo de piel brillante. Al día 2, las crías se les practica la eutanasia y una porción de la cola se colecta para aislado de ADN para determinar el genotipo (Tg o no Tg) de cada cría. Las muestras de la piel se colectan para análisis histológico con objeto de evaluar si las crías exhiben las capas de célula epidemial engrosadas que usualmente caracterizan estos ratones Tg. También se colecta sangre del tronco de las crías (y un sangrado ocular de las madres un día después del nacimiento) para cuantificar, por medio de ELISA, los niveles de anti-IL-22RA mAb en el suero de cada ratón. Debido a que estos Abs son inhibidores potentes de IL-20 y/o IL-22 in vivo, las crías Tg tienen piel normal (esto es, no engrosamiento de la epidermis o apariencia "brillosa" ) . Ejemplo 41 Antagonistas IL-20 e IL-22 en un modelo de posriasis para cultivo de órganos Puede mantenerse una piel de placa psoriática humana en un cultivo de órgano, y las características histológicas anormales de piel lesionada se mantienen en ausencia de factores de crecimiento exógeno. Los anticuerpos contra IL-22RA, IL-20, IL-22, IL20R y/o IL-22R, o receptores IL-20 o IL-22 solubles pueden administrarse, y las características histológicas de la piel psoriática lesionada pueden aliviarse. B. Diseño del estudio Biopsias de punción de 2 mm de grosor completo, que consisten de la epidermis completa y varios mm de dermis se obtienen de voluntarios adultos saludables o de piel lesionada psoriática. Inmediatamente durante la biopsia, el tejido se sumerge en . medio de cultivo que consiste de medio basal queratinocito (KBM) (Clonetics Inc, Walkersville, MD) . El medio de cultivo se complementa con CaC12 para llevar la concentración de ca2+ final hasta 1.4 m (Varani et al, 1993, 1994). Las biopsias luego se incubaron en pozos de un plato de 96 pozos que contiene 200 ul de Ca2+ complementado KBM con o sin tratamientos adicionales de anticuerpos contra IL-20, IL-22, IL-22RA humano, o receptores solubles de IL-20 o IL-22. Los cultivos se incubaron a 37°C en una atmósfera de 95% aire y 5% C02 durante 8 días . C. Análisis cuantitativo: Al final del periodo de incubación, el tejido se fija en formalina amortiguada al 10% y se examina histológicamente después de teñir con hematoxilina y eosina. La apariencia del tejido psoriático expuesto a los anticuerpos o receptores solubles podrá ser más cercanamente reensamblada que la del tejido normal, incluyendo la siguiente observación: las células epiteliales básales de forma irregular, inicialmente desorganizadas, desarrollan una apariencia más de columna con la polaridad restaurada; regresan los bordes epidemiales rete, con algunas áreas de la expansión celular epitelial en el especio dermal; y hay menos degeneración general de las capas epidemiales superiores. El modelo de cultivo de órgano proporciona un medio rápido y sensible para determinar si un compuesto particular tiene potencial como un agente anti-hiperproliferativo. La característica histológica anormal puede aliviarse en presencia de un antagonista IL-20, IL-22, lo que sugiere la efectividad de tal agente en el tratamiento de la psoriasis . Ejemplo 42 Mapeo de las Regiones de mIL22R¾ (zCytoRllm) que se enlazan a m&bs R2.1.5F4.1 y R2.1.15E2.1 neutralizantes A. Epítopos sobre IL-22RA murino en donde los anticuerpos monoclonales neutralizantes se enlazan. Los experimentos descritos a continuación aspiran a identificar una región o regiones en la secuencia de aminoácido de la proteína del receptor soluble IL-22RA de murino (SEQ ID NO: 62) que son importantes para la actividad del receptor, o para enlace del anticuerpo antagonista o neutralizante. .La proteína IL-22RA-Fc murina, que se ha desdoblado previamente con trombina para remover el Fe, luego se desdobla en la C-terminal para los residuos de metionina en la secuencia por incubación con bromuro de cianógeno (CNBr) . Los péptidos generados por CNBr se fraccionan, y las fracciones se probaron para actividad de enlace como se detecta por ELISA y la reactividad por análisis Western usando anticuerpos monoclonales con propiedades neutralizantes, clones R2.1.5F4.1 y R2.1.15E2.1. Durante el desdoblamiento con CNBr, los siguientes péptidos se generan potencialmente a partir de mIL-22RA de longitud completa no reducidos (Tabla 33) . Bajo condiciones no reducidas, las cisteinas se enlazan al disulfuro, lo que puede resultar en una ligadura interna en el péptido 1 y un ligado entre los péptidos 3 y 5. Los residuos en negrita están potencialmente involucrados en el enlace del ligando que corresponde con los residuos IL-22RA humano involucrados potencialmente en el enlace del ligando en SEQ ID NO: 2 o SEQ ID NO: 3, como se describe en Ejemplo 42B. Específicamente, SEQ ID NO: 8 corresponde a los residuos de aminoácidoss 16 (His) hasta 83 (Met) de SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO: 49 corresponde a los residuos de aminoácidoss 84 (Glu) hasta 109 (Met) de SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 50 corresponde a los residuos de aminoácidoss 110 (Thr) hasta 137 (Met) de SEQ ID NO: 42, SEQ ID NO: 51 corresponde a los residuos de aminoácidoss 138 (Leu) hasta 177 (Met) de SEQ ID NO: 42, y SEQ ID NO: 52 que corresponde a los residuos de aminoácidoss 163 (His) hasta 208 (Pro) de SEQ ID NO: 42 o 163 (His) hasta 212 (Arg) de SEQ ID NO: 62. Tabla 33 Número de péptido Desde Hasta Socusncís Péptido 1 CNBr 1 68 HTTVDTSGLLQHVKFQSSNFENILTWDGGP ASTSDTVYSVEYKKYGERKWLAKAGCQRJ TQKFCNLTM (SEQ ID NO:48) No reducido: las cisteínas en el pé Dtido 1 se ligan Péptido 2 CNBr 69 94 ETRNHTEFYYAKVTAVSAGGPPVTKM (SEQ ID NO:49) Péptido 3 CNBr 95 122 TD FSSLQHTTIKPPDVTCIPKVRSIQM (SEQ ID NO:50) No reducido: los péptido 3-5 se ligan Péptido 4 CNBr 123 162 LVHPTLTPVLSEDGHQLTLEEIFHDLFYRLE LHVNHTYQ (SEQ ID NO:51) Péptido 5 CNBr 163 212 HLEGKQREYEFLGLTPDTEFLGSITILTPILS KESAPYVCRVKTLPLVPR (SEQ ID NO:52) 1. Desdoblamiento y Aislado CNBr de Fracciones de Péptido Se liofilizó 50 µg de mIL22RA y se reconstituyó en ?d?µ?? de ácido fórmico (70%) . Se agregó ?µ?? de 5M CNBr disuelto en acetonitrilo. La muestra se mezcló y se dejó que reaccionara durante 18 horas a temperatura ambiente en la oscuridad. 150 µ? de la mezcla de reacción se dividieron en fracciones por CLAR de fase inversa ajustada con una columna Zorbax SB300-C8 analítica. Los picos se separaron usando un gradiente de partida a 25% acetonitrilo (0.085% TFA) y 75% agua (0.1% TFA) y terminando a 95% acetonitrilo (0.085% TFA) y 5% agua (0.1% TFA) . El análisis UV muestra tres picos principales y dos picos menores, los cuales se recolectaron. Cada fracción se divide a la mitad; una porción se expone a ELISA, la otra porción se liofiliza y reconstituye en 150 µL de solución salina amortiguada en fosfato (PBS) . El análisis UV de las fracciones PBS confirma la recuperación de todos los picos colectados de la columna analítica. Las fracciones PBS se exponen a análisis Western. 2. ELISA Las fracciones CLAR que contienen secuencias de péptido de IL-22RA desdobladas con CNBr se diluyeron hasta una concentración estimada igual usando solución amortiguadora CLAR (90% acetonitrilo, 10% H20, 0.09% ácido trifluoroacético) . Las muestras se cargan a placas microtituladas de noventa y seis pozos en 4 pozos cada uno a 100 µ??/???? y se permite que seque durante la noche a temperatura ambiente en humo. Las placas se lavaron con solución amortiguadora ELISA C (PBS, 0.05% Tween-20), y luego se bloquea con solución amortiguadora ELISA B (PBS, 0.1% BSA, 0.05% Tween-20) durante 2 horas a 37°C. Dos anticuerpos monoclonales (mAb) para IL22RA (Clon R2.1.5F4.1, y Clon R2.1.15E2.1) se diluyeron hasta 2 µg/mL en ELISA B. Cada mAb se agregó a cada muestra de secuencia de péptido a 100 µL/pozo y se incubaron las placas por 60 minutos a 37°C. Las placas se lavaron para remover el anticuerpo no enlazado, y un anticuerpo secundario (IgG anti-rata de cabra conjugado a peroxidasa de rábano gigante (Jackson) ) se diluyó hasta 1 ^g/mL en solución amortiguadora ELISA B y se agregó a todos los pozos a 100 µL/pozo. Se incubaron las placas durante 1 hora a 37°C. Los pozos se lavaron con solución amortiguadora ELISA C, y luego se incubaron con substrato TMB 1 Componente HRP Micropozo (BioFx) por 5 minutos . La reacción se detuvo por la adición de 450 nm de reactivo de detención para micropozo TMB (BioFx) y las placas se leyeron a una absorbancia de 450 nm en un lector de placa Dynatech ELISA (Molecular Devices) . Los resultados indican que mAb R2.1.5F4.1 reacciona con la reacción #4 CLAR de la reacción mIL22RA CNBR, lo que también produce una banda en los experimentos de técnica de inmunotransferencia Western. 3. Western Las fracciones CLAR que contienen secuencias de péptidos de IL22RA desdobladas con CNBr se liofilizaron durante la noche a temperatura ambiente, y se reconstituyen en PBS. Las muestras se mezclan entonces con solución amortiguadora de muestra no reducida (Invitrogen) y se hierven durante 10 min. Las muestras se cargan y se procesan por electroforesis por SDS-PAGE en geles al 4-12% Bis-Tris (Invitrogen) usando solución amortiguadora de corrida lx MES-SDS (Invitrogen) y se transfiere a nitrocelulosa (0.2 Dm; Bio-Rad) en solución amortiguadora de transferencia de metal al 20%, todo a temperatura ambiente. Los filtrados se permiten que sequen durante la noche a temperatura ambiente. Los filtrados se bloquean con leche en polvo descremada al 10% en solución amortiguadora A (50 mM Tris, pH 7.4, 5 mM EDTA, 0.05% Igepal CA-630, 150mM NaCl, 0.25% gelatina) durante 30 minutos a temperatura ambiente, ün anticuerpo monoclonal (mAb) para IL22RA (Clon R2.1.5F4.1) se diluyó hasta 2 g/mL en solución amortiguadora A que contiene leche en polvo descremada al 2.5%. Las inmunotransferencias se incubaron en este anticuerpo primario durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación, las inmunotransferencias se lavaron tres veces en la solución amortiguadora A y se incubaron 1 hora a temperatura ambiente con una dilución 1:5000 del anticuerpo secundario (peroxidasa de rábano gigante IgG anti-rata de cabra; Jackson, Inc) en solución amortiguadora A con leche en polvo descremada al 2.5%. Las inmunotrasnferencias luego se lavan, se desarrollan con un substrato guimioluminiscente (substrato de técnica de inmunotransferencia Western Lumi-Light; Roche) , y se expone usando un formador de imágenes luminiscente (Mannheim Boehringer Lumi-Imager) . Usando una exposición de 30 minutos, el gel no reducido muestra blandas muy fuertes para las fracciones #4 y #5, junto con una banda tenue para la fracción #3. La fracción #4 también se probó positiva en el ELISA. Procesado de secuencia de terminal N de la fracción activa #4 De las cinco fracciones de péptidos CNBr colectados de la columna de fase inversa analítica, la fracción #4 muestra una actividad en el ELISA y también fue positivo por la técnica de inmunotransferencia Western. Para identificar los péptidos presentes en la fracción activa #4, la muestra se expone a la degradación Edman usando métodos bien conocidos. Se identifican tres terminales N de la fracción activa que son consistentes con los péptidos 2 (SEQ ID NO:49) , 3 (SEQ ID NO:50), y 5 (SEQ ID NO:52). Estos resultados indican que los anticuerpos se enlazan a los péptidos 2 (SEQ ID N0:49), 3 (SEQ ID NO: 50) , y 5 (SEQ ID NO: 52) .

Tabla 34 Discusión Se aislan cinco fracciones de una mezcla de péptidos mIL22RA desdoblados por CNBr . De estos , sólo la fracción #4 fue activa en un ELISA y positiva por Western. La degradación Edman identifica tres terminales N consistentes con los péptidos CNBr 2 (SEQ ID NO:49) , 3 (SEQ ID NO:50), y 5 (SEQ ID NO: 52) en la fracción #4. Dentro de estas regiones, seis residuos están potencialmente involucrados en el enlace del ligando. Estos residuos son Y93, R112, 210, y E211 de la SEQ ID NO: 2, los cuales también corresponden a los residuos Y78, R97, K195, y E196 de SEQ ID NO: 62. El residuo Y60 y F164 de SEQ ID NO: 42 también están involucrados en el enlace del ligando. B. Epítopos en IL-22RA humano en donde los anticuerpos monoclonales neutralizantes se enlazan. Los experimentos descritos a continuación aspiran a identificar una región o regiones en el dominio extracelular para la secuencia de aminoácidos de la proteína IL-22RA humana (SEQ ID NO: 2) que son importantes para la actividad del receptor, o para el enlace de un anticuerpo antagonista o neutralizante. La proteína IL-22RA del receptor soluble humano (por ejemplo, que comprende SEQ ID NO: 3, tal como, IL-22RA-FC desdoblada con trombina para remover el Fe) , luego se desdobla en la C-terminal para los residuos de metionina en la secuencia por la incubación con bromuro de cianogeno (CNBr) , u otro agente conocido en el arte el cual desdobla la proteína humana en los fragmentos definidos . Los péptidos generados por CNBr se fraccionan, y las fracciones resultantes se prueban para actividad de enlace como se detecta por ELISA y reactividad por análisis Western, usando anticuerpos monoclonales con propiedades neutralizantes . Se predicen cuatro cisteínas para enlzarse con disulfuro con un patrón de ligado de Cys71-Cys79 y Cys204-Cys217 de SEQ ID NO: 2. Durante el desdoblamiento con CNBr, los siguientes péptidos se generan potencialmente de IL-22RA humano de longitud completa no reducido: péptido 6 (SEQ ID NO: 56), péptido 7 (SEQ ID NO: 57); péptido 8 (SEQ ID NO: 58); péptido 9 (SEQ ID NO:59); péptido 10 (SEQ ID NO: 60); y péptido 11 (SEQ ID NO: 61) (Tabla 35). Las cisteínas se enlazan al disulfuro, lo que resulta en un ligado posible entre los péptidos 7 (SEQ ID NO: 57) y 10 (SEQ ID NO: 60. Específicamente, SEQ ID NO: 56 corresponde a los residuos de aminoácidoss 1 (Pro) hasta 92 (Met) de SEQ ID NO:3; SEQ ID NO: 57 corresponde a los residuos de aminoácidoss 93 (Thr) hasta 120 (Met) de SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO -.58 corresponde a los residuos de aminoácidoss 121 (lie) hasta 160 (Met) de SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 59 corresponde a los residuos de aminoácidoss 161 (His) hasta 185 (Met) de SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 60 corresponde a los residuos de aminoácidoss 186 (lie) hasta 1S9 (Met) de SEQ ID NO: 3 y SEQ ID NO: 61 corresponde a los residuos de aminoácidoss 200 (Cys) hasta 211 (Thr) de SEQ ID NO: 3.

Tabla 35 Numero de péptido Desde Hasta Secuencia Péptido CNBr 6 1 92 Pro Glu Asp Pro Ser Asp Leu Leu Gin His Val Lys Phe Gln Ser Ser Asn Phe Glu Asn lie Leu Thr Trp Asp Ser Gly Pro Glu Gly Thr Pro Asp Thr Val Tyr Ser lie Glu Tyr Lys Thr Tyr Gly Glu Arg Asp Trp Val Ala Lys Lys Gly Cys Gln Arg lie Thr Arg Lys Ser Cys Asn Leu Thr Val Glu Thr Gly Asn Leu Thr Glu Leu Tyr Tyr Ala Arg Val Thr Ala Val Ser Ala Gly Gly Arg Ser Ala Thr Lys Met (SEQ ID NO:56) Péptido CNBr 7 93 120 Thr Asp Arg Phe Ser Ser Leu Gln His Thr Thr Leu Lys Pro Pro Asp Val Thr Cys De Ser Lys Val Arg Ser lie Gln Met (SEQ ID NO:57) Péptido CNBr 8 121 160 lie Val His Pro Thr Pro Thr Pro lie Arg Ala Gly Asp Gly His Arg Leu Thr Leu Glu Asp lie Phe His Asp Leu Phe Tyr His Leu Glu Leu Gln Val Asn Arg Thr Tyr Gln Met (SEQ ID NO : 58) Numero de péptido Desde Hasta Secuencia Péptido CNBr 9 151 185 His Leu Gly Gly Lys Gln Arg Glu Tyr Glu Phe Phe Gly Leu Thr Pro Asp Thr Glu Phe Leu Gly Thr lie Met (SEQ ID NO: 59) Péptido CNBr 10 186 199 lie Cys Val Pro Thr Trp Ala Lys Glu Ser Ala Pro 10 Tyr Met (SEQ ID NO: 60) Péptido CNBr 11 200 211 Cys Arg Val Lys Thr Leu Pro Asp Arg Thr Trp 11 Thr (SEQ ID NO: 61) 4. Desdoblamiento y Aislado CNBr de Fracciones de Péptido, Western y ELISA, y procesado en secuencia de terminal N Alrededor de 50 µ de IL22RA humana se liofiliza y se reconstituye, fracciona, colecta y analiza usando el análisis Western, y ELISA como se describe en el EJEMPLO 42A, para identificar fracciones que contienen anticuerpos monoclonales anti-IL-22RA, y los cuales enlazan TL-22RA como se muestra por ELISA y análisis Western. Las fracciones de péptido CNBr que se colectan de la columna de fase inversa analítica, luego se prueban para actividad en el ELISA y se confirman como positivo por la técnica de inmunotransferencia Western. Para fracciones positivas, los péptidos se identifican por medio de degradación Edman usando métodos bien conocidos. Discusión El péptido CNBr de ratón #5 (SEQ ID NO: 52) corresponde a los péptidos CNBr humanos #9, y #10 (SEQ ID NO: 59 y SED ID NO: 60); el péptido CNBr de ratón #2 (SEQ ID NO: 49) corresponde al CNBr humano #6 (SEQ ID NO: 56); y el péptido CNBr de ratón #3 (SEQ ID NO: 50) corresponde al CNBr humano #7 (SEQ ID NO: 57) . De las fracciones que se aislaron de la mezcla de los péptidos IL-22RA humanos que desdoblan CNBr, seis residuos con las posibles regiones están potencialmente involucrados en el enlace del ligando: Los residuos de SEQ ID NO: 2 (y los residuos correspondientes de SEQ ID NO: 3) que son importantes para el enlace ligando-receptor Tyr-60, y Phe-164, Tyr-93, Arg- 112, Lys-210, y Glu-211 de SEQ ID NO: 2 y (y los residuos correspondientes de SEQ ID NO: 3). Por otro lado, los residuos primarios de SEQ ID NO: 2 (y los residuos correspondientes de SEQ ID NO: 3) que son importantes para dirigir el enlace receptor-ligando comprenden Tyr-60, y Phe-164 de SEQ ID NO:2 (y los residuos correspondientes de SEQ ID NO: 3), y los residuos secundarios comprenden los residuos Tyr-93, Arg-112, Lys-210, y Glu-211 de SEQ ID NO: 2 y (y los residuos correspondientes de SEQ ID NO: ) . De lo anterior, se apreciará que, no obstante las modalidades específicas de la invención se han descrito en la presente para propósitos de ilustración, pueden hacerse varias modificaciones sin desviarse del espíritu y alcance de la invención. En consecuencia, la invención no se limita excepto como por las reivindicaciones adjuntas. Se hace constar que con esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a cabo la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (39)

1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones. 1. Un método para producir un anticuerpo para un polipéptido caracterizado porque comprende: inocular un animal con un polipéptido seleccionado del grupo que consiste: a) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; b) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 60 (lie) de la SEQ ID NO: 8; c) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8; d) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8; e) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; f) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; g) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8; h) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8; i) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; j) un polipéptido gue consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; k) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8; 1) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; m) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; n) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 81 (Cys) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; o) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 81 (Cys) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; y P) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 96 (Lys) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, en donde el polipéptido induce una respuesta inmune en el animal para producir el anticuerpo; y aislar el anticuerpo del animal; y en donde el anticuerpo se enlaza específicamente al polipéptido IL-20 (SEQ ID NO: 8) .
2. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el anticuerpo reduce la actividad pro-inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8) .
3. 3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el anticuerpo producido por el método neutraliza la interacción de IL-20 (SEQ ID NO: 8) con IL-22RA (SEQ ID NO: 2) . .
4. El método de conformidad con la reivindicación 3 , caracterizado porque la neutralización por el anticuerpo se mide mostrando la neutralización de IL-20 (SEQ ID NO: 8) en un ensayo in vitro de neutralización basado en célula.
5. 5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el anticuerpo reduce la actividad pro-inflamatoria de tanto IL-20 (SEQ ID NO: 8) y IL-22 (SEQ ID NO: 6) .
6. 6. Un anticuerpo producido por el método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se enlaza a el polipéptido de la SEQ ID NO: 8.
7. 7. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 2 , caracterizado porque el anticuerpo es (a) un anticuerpo policlonal, (b) un anticuerpo monoclonal de murino, (c) un anticuerpo humanizado derivado de (b) , (d) un fragmento de anticuerpo, o (e) un anticuerpo monoclonal humano.
8. 8. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el anticuerpo comprende además un radionúclido, enzima, substrato, cofactor, marcador fluorescente, marcador quimioluminiscente, etiqueta de péptido, partícula magnética, o toxina.
9. 9. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 7 , caracterizado porgue el anticuerpo comprende además PEGilación.
10. 10. Un anticuerpo o f agmento de anticuerpo que se enlaza al polipéptido, caracterizado porque comprende una secuencia de residuos de aminoácidos como se muestra en la SEQ ID NO: 8; y reduce la actividad pro-inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8) .
11. 11. El anticuerpo o fragmento de anticuerpo de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el anticuerpo o fragmento de anticuerpo reduce la actividad pro-inflamatoria de ya sea IL-20 (SEQ ID NO: 8) o IL-22 (SEQ ID NO: 6) .
12. 12. El anticuerpo o fragmento de anticuerpo de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porgue el fragmento de anticuerpo es (a) un anticuerpo policlonal, (b) un anticuerpo monoclonal de murino, (c) un anticuerpo humanizado derivado de (fc>) , (d) un fragmento de anticuerpo, o (e) un anticuerpo monoclonal humano.
13. 13. El anticuerpo o f agmento de anticuerpo de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el anticuerpo comprende además un radionúclido, enzima, substrato, cofactor, marcador fluorescente, marcador quimioluminiscente, etiqueta de péptido, partícula magnética, fármaco, o toxina.
14. 14. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el anticuerpo comprende además PEGilación.
15. 15. Un método para reducir o inhibir la proliferación o diferenciación inducida por IL-20 de células hematopoyéticas y células progenitoras hematopoyéticas, caracterizado porgue comprende cultivar células de médula ósea o de sangre periférica con una composición que comprende una cantidad de un anticuerpo de conformidad con la reivindicación 3 suficiente para reducir la proliferación o diferenciación de las células hematopoyéticas en las células de médula ósea o de sangre periférica en comparación con las células de médula ósea o de sangre periférica cultivadas en ausencia del anticuerpo.
16. 16. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque las células hematopoyéticas y células progenitoras hematopoyéticas son células linfoides .
17. 17. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque las células linfoides son macrófagos o células T.
18. 18. Un método para reducir la inflamación inducida por IL-20, caracterizado porque comprende administrar a un mamífero con inflamación una cantidad de una composición de un anticuerpo de conformidad con la reivindicación 3 suficiente para reducir la inflamación.
19. 19. Un método para reducir la inflamación inducida por IL-20, caracterizado porque comprende administrar al mamífero con inflamación una cantidad de una composición de un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de conformidad con la reivindicación 10, suficiente para reducir la inflamación.
20. 20. Un método para suprimir una respuesta inflamatoria en una mamífero con inflamación, caracterizado porgue comprende: (1) determinar el nivel de proteína A amiloide en suero; (2) administrar una composición que comprende un anticuerpo de conformidad con la reivindicación 3 en un vehículo farmacéutico aceptable; (3) determinar un nivel posterior a la administración de proteína A amiloide en suero; (4) comparar el nivel de proteína A amiloide en suero en la etapa (1) hasta el nivel de proteína A amiloide en suero en la etapa (3) , en donde una carencia de incremento o una reducción en el nivel de proteína A amiloide en suero indica una supresión de la respuesta inflamatoria.
21. 21. Un método para suprimir una respuesta inflamatoria en un mamífero con inflamación, caracterizado porque comprende: (1) determinar el nivel de proteína A amiloide en suero; (2) administrar una composición que comprende un anticuerpo de conformidad con la reivindicación 5 en un vehículo farmacéutico aceptable; (3) determinar un nivel posterior a la administración de proteína A amiloide en suero; (4) comparar el nivel de proteína A amiloide en suero en la etapa (1) hasta el nivel de proteína A amiloide en suero en la etapa (3 ) , en donde una carencia de incremento o una reducción en la proteína A amiloxde en suero nivel indica una supresión de una respuesta inflamatoria.
22. 22. Un método para suprimir una respuesta inflamatoria en un mamífero con inflamación, caracterizado porque comprende: (1) determinar el nivel de proteína A amiloide en suero; (2) administrar una composición que comprende un anticuerpo de conformidad con la reivindicación 16 en un vehículo farmacéutico aceptable; (3) determinar un nivel posterior a la administración de proteína A amiloide en suero; (4) comparar el nivel de proteína A amiloide en suero en la etapa (1) hasta el nivel de proteína A amiloide en suero en la etapa (3) , en donde una carencia de incremento o una reducción en proteína A amiloide en suero nivel indica una supresión de una respuesta inflamatoria.
23. 23. Un método para tratar un mamífero que sufre de una enfermedad inflamatoria en la cual IL-20 juega un papel, caracterizado porque comprende : administrar un antagonista IL-20 al mamífero de tal manera que la inflamación se reduce, en donde el antagonista comprende un anticuerpo, fragmento de anticuerpo, o polipéptido de enlace que enlaza específicamente el polipéptido o fragmento de polipéptido de IL-22RA (SEQ ID NO: 3) o es el polipéptido o fragmento de polipéptido de IL-22RA (SEQ ID NO: 3); y en donde la actividad inflamatoria de IL-20 (SEQ ID NO: 8) se reduce.
24. 24. Un método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porgue la enfermedad es una enfermedad inflamatoria crónica.
25. 25. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la enfermedad es una enfermedad inflamatoria crónica que comprende enfermedad inflamatoria del intestino, colitis ulcerativa, Enfermedad de Crohn, artritis, dermatitis atópica, o psoriasis.
26. 26. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque la enfermedad es una enfermedad inflamatoria aguda.
27. 27. El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque la enfermedad es una enfermedad inflamatoria aguda que comprende endotoxemia, septicemia, síndrome de choque tóxico o enfermedad infecciosa.
28. 28. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el anticuerpo comprende además un radionúclido, enzima, substrato, cofactor, marcador fluorescente, marcador quimioluminiscente, etiqueta de péptido, partícula magnética, fármaco, o toxina.
29. 29. Un anticuerpo, caracterizado porque comprende un anticuerpo monoclonal que se enlaza a un epítopo antigénico de IL-20 humano (SEQ ID NO: 8) sel eccionado del grupo que consiste de: a) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; b) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 60 (lie) de la SEQ ID NO: 8 ; c) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8; d) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8; e) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; f) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 42 (lie) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; g) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 69 (Glu) de la SEQ ID NO: 8; h) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8; i) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; j ) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 60 (lie) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; k) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 81 (Cys) de la SEQ ID NO: 8; 1) un polipéptido que consiste de los residuos de 405 aminoácidos 69 (Glu) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 89; m) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 69 (Glu) hasta 102 (Asp) de la SEQ CD NO: 8; n) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 81 (Cys) hasta 96 (Lys) de la SEQ ID NO: 8; o) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 81 (Cys) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8; y p) un polipéptido que consiste de los residuos de aminoácidos 96 (Lys) hasta 102 (Asp) de la SEQ ID NO: 8, en donde el anticuerpo reduce o neutraliza la actividad de IL-20 humano (SEQ ID NO: 8) .
30. 30. El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque el anticuerpo reduce o neutraliza la actividad de IL-20 humano (SEQ ID NO: 8) .
31. 31. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque el anticuerpo es seleccionado del grupo que consiste de: (a) un anticuerpo monoclonal de murino, (b) un anticuerpo humanizado derivado de (a) , (c) un fragmento de anticuerpo, y (d) un anticuerpo monoclonal humano.
32. 32. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque el anticuerpo comprende además PEGilación.
33. 33. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque es seleccionado del grupo que consiste de: (a) un anticuerpo monoclonal de murino, (b) un anticuerpo humanizado derivado de (a) , (c) un fragmento de anticuerpo, y (d) un anticuerpo monoclonal humano.
34. 34. El anticuerpo de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado porgue comprende además PEGilación.
35. 35. Un método para tratar una condición patológica en un sujeto asociada con la actividad IL-20, caracterizado porgue comprende administrar una cantidad efectiva del anticuerpo de conformidad con la reivindicación 29, por ello tratando la condición patológica.
36. 36. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porgue la condición patológica es una condición inflamatoria crónica.
37. 37. El método de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porgue la condición inflamatoria crónica comprende enfermedad inflamatoria del intestino, colitis ulcerativa. Enfermedad de Crohn, artritis, dermatitis atópica, o psoriasis.
38. 38. El método de conformidad con la reivindicación 36, caracterizado porgue la condición patológica es una condición inflamatoria aguda.
39. 39. El método de conformidad con la reivindicación 38, caracterizado porgue la condición inflamatoria aguda comprende endotoxemia, septicemia, síndrome de chogue tóxico, o enfermedad infecciosa.