MXPA05002285A - Acido 6r-(3,6-dideoxi-l-arabino-hexopiranosiloxi)heptanoico, su proceso de preparacion y su efecto dauer. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a la determinacion de una estereoquimica, una sintesis y efecto dauer del acido 6R-(3,6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi)heptanioco como una fermona aislada del Caenorhabditis elegance relacionada a la contencion del envejecimiento y es estres. Se vuelve posible desarrollar sustancias medicas utilizando la feromona con relacion a los sistemas de envejecimiento, estres, metabolismo, transferencia de senales en vivo, y anti-cancer, obesidad y un agente de contencion para el envejecimiento y el estres.

Description

ÁCIDO 6R- (3, 6 -DIDEOXI-L-ARABINO-HEXOP RANOSILOX ) HEPTANOICO, SU PROCESO DE PREPARACIÓN Y SU EFECTO DAUER Campo Técnico La presente invención se refiere a una estéreo configuración absoluta del ácido 6R- (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico relacionada a la contención del envejecimiento y el estrés, su proceso de preparación y su efecto dauer (efecto de duración) . Más particularmente la presente invención se refiere a una determinación de la estereoquímica tridimensional del ácido 6R- (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico que es una feromona aislada primeramente del Caenorhabditis elegance, un intermediario requerido para la síntesis de la misma, un método de preparación y el efecto dauer de la feromona. Técnica Anterior Las feromonas que se ha vuelto conocidas como sustancias fisiológicas activas, se definen como sustancias que se crean en un cuerpo de animal y se secreta del cuerpo para actuar sobre otros individuos de la misma especie, induciendo mediante esto una activación o una variación específica de las feromonas fisiológicas. De acuerdo con los estudios previos, la feromona secretada de C. elegance existe en concentraciones extremadamente bajas, que tienen menos de 1,000 Daltones. La feromona se conoce como sustancia simple o relacionada a un compuesto, el cual es muy estable y no volátil, que tiene una propiedad cromatográfica tal como el hidróxido de ácido graso corto (Riddle, D.L., Science, 218: 578-580, 1982). En la tesis de Riddle, aunque un residuo de feromona se purifica parcialmente, aún no se conoce la configuración química exacta y las propiedades físicas de la feromona pura . Además , ya que un extracto de feromona de C . elegance utilizado por los investigadores es un extracto crudo parcialmente purificado, no existe forma de estudiar para encontrar un objetivo fisiológicamente exacto y los mecanismos biológicos. Por lo tanto, los inventores de la presente invención cultivaron en gran cantidad C. elegance conteniendo la feromona en el estado más grande que puede inducir la etapa dauer de la larva debido al ambiente de vida de estrés o agravado. Y después los inventores aislaron y purificaron la feromona secretada a partir de C. elegance, y determinaron la configuración química de una feromona purificada. Como resultado, se ha notado que la feromona purificada es ácido 6- (3 , 5-dihidroxi-6-metil-tetrahidro-piran-2-iloxi) heptanoico, que tiene la siguiente fórmula de estructura plana bidimensional (Paik et al., Solicitud de Patente Coreana No. 10-2002-0070591 y la solicitud del PCT No. PCT/ R03/02059) Sin embargo, no se conoce aún una configuración química tridimensional del compuesto de feromona bidimensional anterior y la síntesis total. Ya que el nuevo compuesto de feromona tiene 5 carbonos asimétricos, la configuración estereoquímica del compuesto de feromona puede estar provisto posiblemente con 36 estereoisómeros . Por lo tanto, debe determinarse esencialmente la configuración estereoquímica para sintetizar el compuesto de feromona idéntico a la feromona natural exacta que tiene una estereoquímica correcta. Además, con el fin de investigar el sistema de envejecimiento, estrés, metabolismo, transferencia de señal en vivo, desarrollar sustancias médicas relacionadas al anticáncer, obesidad y un agente de contención para el envejecimiento y el estrés, e investigar el cuerpo de la proteína objetivo activa de la feromona, se requiere inevitablemente desarrollar métodos para la síntesis completa para la producción en gran cantidad de la feromona. Por lo tanto, los inventores determinaron una configuración estereoquímica tridimensional de la feromona aislada a partir de C. elegance para sintetizar la feromona idéntica a la feromona natural utilizando tecnologías espectroscópicas . Además, los inventores realizaron exitosamente la síntesis total estereoespecífica, obteniendo mediante esto la feromona totalmente idéntica a la feromona natural . Este método proporciona la producción en gran cantidad de la feromona, superando la cantidad limitada de feromona natural. Además, se identifica que la feromona obtenida de acuerdo con la presente invención tiene efecto de formación dauer en la prueba in vivo utilizando C. elegance.

Descripción de la Invención Solución Técnica Por lo tanto, es un objetivo de la presente invención proporcionar un compuesto de feromona que tiene la fórmula estereoquímica (1-1) . (1-1) en donde X es hidrógeno, metal alcalino o alcalinotérreo y n es un entero de 1-6. Es otro objetivo de la presente invención, proporcionar un método para la producción en gran cantidad de la feromona con alto rendimiento. Es aún otro objetivo de la presente invención determinar una configuración estereoquímica tridimensional para sintetizar de manera exacta la feromona. Es aún otro objetivo de la presente invención proporcionar un intermediario para la producción en gran cantidad de la feromona con alto rendimiento. Es todavía otro objetivo de la presente invención proporcionar un uso de una feromona como agente médico para curar enfermedades relacionadas al envejecimiento y al estrés . Descripción de los Dibujos La Figura 1 es un espectro HR-MS-F B de una feromona de la fórmula estereoquímica (I) de acuerdo con la presente invención; La Figura 2 es un espectro IR de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 3 es un espectro 1H-NM de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 4 es un espectro "C-NMR de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 5 es un espectro 13C-NMR DEPT de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 6 es un espectro 2D-NMR HMBC de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 7 es un espectro 2D-NMR HMQC de la feromona de acuerdo con la presente invención,- La Figura 8 es un espectro 2D-NMR ROESY de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 9 es un espectro 2D-NMR TOCSY de feromona de acuerdo con la presente invención,- La Figura 10 es un espectro 2D-NMR NOE(l) de la feromona de acuerdo con la presente invención; La Figura 11 es un espectro 2D-NMR N0E(2) de la feromona de acuerdo con la presente invención; y La Figura 12 es un espectro 2D-NMR NOE(3) de la feromona de acuerdo con la presente invención; Modo de la Invención Una fórmula estereoquímica tridimensional (I) del ácido 6R- (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) eptanoico como un compuesto de feromona aislado de C. elegance se determinó de acuerdo al análisis espectroscópico tal como HR-MASS, IR, DEPT, 2D-N R (HMBC) , HMQC, NOE, ROESY y TOCSY) .

I El peso molecular puro de la feromona, ácido 6R- (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico, es de 276 daltones, y una fórmula monocular de la feromona es C13H2 O6. El número de masa de alta resolución calculado de la feromona es 276.1651. Se nota que el número de masa de alta resolución medido por un FAB de alta resolución es 276.1652, y este número de masa es casi idéntico al número de masa • calculado (ver la Figura 1) . Los grupos funcionales de los grupos carbonilo e hidroxi relativos de la molécula de feromona son idénticos mediante el análisis infrarrojo (IR) (ver la Figura 2) . ? fin de determinar la configuración estereoquímica tridimensional del nuevo compuesto de feromona de la fórmula (1) , se mide el espectro de resonancia magnética nuclear 2D- protón (aH-NMR) mediante el uso de dutro-metanol (CD3OD) como un solvente. También, se mide un espectro de resonancia magnética nuclear C-13 (13C-NMR) al utilizar dutro-metanol (CD3 OD) como un solvente. El desplazamiento químico se representa por ppm.

Después que se identifica la ubicación de cada carbono mediante aH-NMR (ver la Figura 3) , 13C-NMR (ver la Figura 4) y DEPT (ver la Figura 5) , el desplazamiento químico de 1H- y 13C- se mide al utilizar los espectros H BC (ver la Figura 6) , HMQC (ver la Figura 7) , ROESY (ver la Figura 8) , y TOCSY (ver la Figura 9) para identificar la relación exacta de ¾- y 13C. La Tabla 4 muestra el resultado del espectro HMBC.

A fin de medir la estéreo-interrelación en el espacio tridimensional, se utiliza la tecnología 1SJMR bidimensional de NOE. Las Figuras 10 a 12 muestran el espectro NOE obtenido .

El ácido 6R- (376-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico de la fórmula estereoquímica (I) se obtiene mediante una reacción de acoplamiento de los reactivos representados en las fórmulas (II) y (III) . hexopiranosa de la fórmula (II) se sintetiza como se muestra en la siguiente fórmula de reacción 1 a partir de monohidrato de L-ramnosa de la fórmula (IV) (Fórmula de Reacción 1) rendimiento; 95% ? rendimiento : 87% rendimiento: 85% rendimiento: 64% ix i i en donde, Bz es un grupo benzoilo o bencilo. El compuesto de la fórmula (V) se produce a partir del compuesto de la fórmula (IV) al proteger 4 grupos hidroxi del compuesto (IV) utilizando benzoilcloruro. El compuesto (VI) se produce al eliminar selectivamente el grupo benzoilo C-l del compuesto (V) uti1izando amonia . El compuesto cetona de la fórmula (VII) se produce al oxidar el grupo idróxido C-l del compuesto (VI) utilizando cloroclomato de piridinio (PCC) . El compuesto de la fórmula (VIII) se produce al eliminar selectivamente el grupo benzoilo C-3 del compuesto de la fórmula (VIII) . El compuesto de la fórmula (IX) se obtiene del compuesto de la fórmula (VIII) a través de la hidrogenación en la presencia de 10% de catalizador de carbono de paladio. En este punto, el grupo 0-benzoilo C-2 del compuesto de la fórmula (IX) tiene una dirección ß . Finalmente, al reducir el grupo cetona C-l del compuesto de la fórmula (IX) utilizando diisoamilborohidruro quiral, a-anómero de 2 , 4-di-0-benzoil-3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosa (II) se produce como un intermediario C-l estereoespecífico .

Otro reactivo, el compuesto de la fórmula (III) se produce de acuerdo con la siguiente fórmula de reacción 2 a partir de (R) - (+) -1,2-epoxipropano como materia prima. (Fórmula de Reacción 2) rendimiento : 65% Como se muestra en la fórmula de reacción (R) - (+) -1 , 2-epoxipropano se agrega al bromuro 4-pentil magnesio 1M, obteniendo un (2R) -7-octen-2-ol (III). El compuesto de la fórmula (I) se obtiene al hacer reaccionar al hacer reaccionar los compuestos de las fórmulas (II) y (III) a través de la siguiente fórmula de reacción 3.

(Fórmula de Reacción 3) X ( Ri- H , benzoilo. benc'ilo) XI (R2: H, benzoilo, bencilo) El compuesto de acoplamiento, (2R) ~oct-7-en-2 -il-2 , 4-di-0-bencil-3 , 6-dideoxi-a-L-arabino-hexopiranosida (X) se obtiene a través de la acetilación de los compuestos de las fórmulas (II) y (III) en presencia del catalizador ácido de Lewis. El ácido (6R) -6- (2 , 4-di-0-bencil-3-6-dideoxi- -L-arabino-hexopiranosil) heptanoico (XI) como un ácido orgánico se produce a través de una sola reacción de doble enlace alifático terminal del compuesto de la fórmula (X) utilizando permanganato de potasio como un oxidante. Finalmente, el compuesto de la fórmula (I) se produce al eliminar los grupos benzoilo C-2 y C-4 del compuesto de la fórmula (XI) mediante hidróxido de sodio y acidificación utilizando amberlita. Además, el compuesto de la fórmula (I) reacciona con una base para formar sales de adición del compuesto de la fórmula (1-1) . Como la base, puede utilizarse sal de metal alcalino o alcalinotérreo que pueden ser farmacéuticamente permitidos . (1-1) en donde, X es hidrógeno, metal alcalino o alcalinotérreo y n es un entero 1-6. Se observa a través de la espectrometría (2D-NMR, IR, HRMS, rotación especifica = [a] D20 = -81.0(c=0.1, MeOH) ) que el espectro del compuesto totalmente sintético de la fórmula (I) es idéntico al de la feromona natural. Ya qué la síntesis total inicia con L-ramnosa, una configuración estéreo absoluta la cual se conoce bien, y un valor medido de todo el espectro del compuesto de la fórmula (I) es idéntico al de la feromona natural, puede observarse que la estereoconfiguración absoluta de la feromona natural aislada a partir de C. elegance es la fórmula (I) .

Además, en el curso de la síntesis de la fórmula de reacción 3 , se prepara una variedad de derivados de la fórmula (1-1) al acoplar otros ácidos orgánicos alcalinos que tienen una cadena de 1.6 carbonos, en lugar de la fórmula (III) . Además, en el curso de la síntesis de la fórmula de reacción 3, cuando se hacer reaccionar un 7S-estereoisómero de la fórmula (III) , puede sintetizarse el estereoisómero SS del compuesto (I) . En el curso de la preparación del compuestos de la fórmula (II) a partir del compuesto de la fórmula (IX) en la fórmula de reacción 1, cuando se utiliza el epímero C-1'ß del compuesto de la fórmula (II) obtenido, puede sintetizarse el compuesto de la fórmula (1-3) que tiene el estereoisómero C- (1-2) en donde, n es un entero 1-6 y X es H, metal alcalino o alcalinotérreo . Mediante la síntesis anterior, la feromona inventiva (I) y sus derivados pueden producirse en gran cantidad. Por lo tanto, es posible investigar el cuerpo de (1-3) la proteina objetivo activa de la feromona y la eficacia médica con relación a la supresión del envejecimiento y el estrés . ? continuación el efecto de formación dauer del compuesto del ácido 6 - (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico (i), que se sintetiza de acuerdo con la presente invención, se mide utilizando C. elegance . Es decir, el efecto de formación dauer de la feromona sintética se mide utilizando C. elegance bajo diferentes condiciones de alimentación, temperatura y densidad de apiñamiento entre si. Aunque debe pasarse de una primera semi-etapa L2 o una segunda semi-etapa L3 a una etapa adulta en condición en donde la alimentación y temperatura (15-25°C) sea apropiada y la densidad de apiñamiento sea baja, cuando se mezcla la - - feromona sintética, la etapa va al escenario de larva dauer. La C. elegance en la larva dauer no come ni se mueve, formándose en una conformación circular. Para comparación, siete C. elegance en la etapa de larva dauer y una C. elegance en la etapa adulta se observaron comparativamente. Como resultado, se nota que la feromona sintética afecta grandemente al efecto de formación dauer. En la fotografía 1 puede notarse que la C. elegance no crece sin movimiento. Fotografía 1 Ova dauer y adulto joven de C. elegance después del tratamiento de la feromona sintética La fotografía 2 muestra una imagen ilustrando que C. elegance va hacia el estadio de ova dauer.

Fotografía 2 C. elegance en la ova dauer A continuación, como se muestra en la Tabla 3, puede notarse que el 100% del efecto de formación dauer puede obtenerse cuando 320 µg/placa de la feromona sintética y se utiliza. Tal resultado se vuelve la base para que avance la investigación y se requiera mucha cantidad de la feromona para una variedad de investigaciones. Por lo tanto, esto demuestra que la feromona sintética es importante. Es decir, ya que la síntesis de gran cantidad de feromona y una variedad de derivados se vuelve posible de acuerdo con la presente invención, puede esperarse investigación más preferible . DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Ahora se describirá la presente invención más aparente al describir en detalle modalidades ej emplificativas de la misma. Modalidad 1 Síntesis de 1 , 2 , 3 , 4-tetra-0-benzoil-L-ramnopiranosa (V) El monohidrato de L-ramnosa (IV) (7.5 g, 41.2 mmol) se disuelve en piridina seca (100 mi) , y después se agrega a esto benzoilcloruro (28.7 mi, 0.247 mmol) en un estado en donde la temperatura se disminuye a 0°C. La temperatura del reactivo se incrementa gradualmente hasta temperatura ambiente, y se agrega agua (15 mi) después de 16 horas, completando la reacción. El producto obtenido se extrae con CH2C1 (50 mi x 2) . Se lava mediante HCl 1M (40 mi x 2) y saturación de solución de NaHCO (40 mi) y se seca mediante MgS04. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (V) (22.7 g 95%, a : ß =2:1) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (tolueno/EtOAc , 10:1, v/v) . V a; un sólido blanco amorfo, Rf=0.58 (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v); [cc]D22=+82.0 (c=1.5, CHC13) [lit. 41n [a]D=+80.0 (c=1.5, CHCI3) ] ; IR (película) Vmax 3066, 3032, 2986, 1730, 1601, 1452, 1260, 1176, 1094, 1068, 1027, 965 cm"1; XH NMR (250 MHz, CDC13) d 8.22-7.25 (m, 20H, aromático H) , 6.57 (d, 1H, J = 1.6 Hz, H-l),6.01 (dd, 1H, J=3.4, 10.2 Hz, H-3) , 5.89 (dd, 1H, J= 1.9, 3.2 Hz, H-2), 5.82 (t, 1H, J=10.0 Hz, H-4) , 4.41-4.35 (m, 1H, H-5),1.42 (d, 3H, J=6.2 Hz-C¾) ; 13C NMR (62.9 MHz CDC13) d 165.8(2), 165.4, 164.1, 134.0, 133.8, 133.6, 133.4, 130.2(2), 130.1(2), 129.8(4), 129.1(2), 129.0 (2), 128.8(2), 128.7 (2), 128.6(2), 128.4 (2), 91.4 (C-l, a), 71.3, ,70.0, 69.8, 69.4, 17.8(C-6); Un valor calculado HRMS(FAB) para C34H28 a09 (M+ +Na) m/z es 603.1631, y un valor medido actual es 603.1637 Modalidad 2 Síntesis de 2 , 3 , 4-tri-O-benzoil-L-ramnopiranosa (VI) El compuesto (V) (22.4 g 38.6 mmol) se disuelve en eOH: THF (3.7, 400 mi), y después se burbujeó gas de NH3 durante 15 minutos a 0°C y se agita a 0°C durante 1 hora. El proceso de reacción se identificó mediante cromatografía de capa delgada mientras se repetía el proceso anterior. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (VI) (16 g 87%, a : ß =14:1) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v) . VI a; un sólido blanco, Rf=18 (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v) ; [ ]D23=+236.0 (c=1.0, CHCl3) ; IR (película) Vmax 3458, 3062, 2985, 2935, 1727, 1601, 1451, 1348, 1264, 1102, 1069, 1027 cm'1; ½ MR (250 MHz, CDC13) d 8.12-7.22 (m, 15H, aromático H) , 5.95 (dd, 1 H, J= 3.2, 10.1 HZ, H-3), 5.74-5.62 (m, 2H) , 5.49-5.48 (m, 1 H) , 4.54-4.43 (m, 1H, H-5) , 4.21 (d, 1H, J = 4.0 Hz, -OH), 1.37 (d, 3H, J = 6.2 HZ, -C¾) ; 13C NMR (62.9 MHz, CDC13) d 166.0, 165.9, 165.8, 133.6, 133.5, 133.3, 130.0(2), 129.9(2), 129.8(2), 129.4, 129.3, 129.2, 128.7(2), 128.5(2), 128.4(2), 92.3(0-1, a) 72.1, 71.5, 69.9, 66.7, 17.8(C-6); Un valor calculado HRMS (FAB) para C27H24Na03 (M+ +Na) m/z es 488.1369, y un valor medido actual es 499.1372 Modalidad 3 Síntesis de 2 , 3 , 4-tri-O-benzoil-L-ramnoono-l, 5-lactona (VII) PCC (30 g, 0.139 mmol) y navajas moleculares de 4 A bien secas se agregaron a un matraz bajo corriente de N2. Se agregó C¾C12 seco (250 mi) a un matraz y el matraz se agita durante 1 hora a temperatura ambiente y se enfría a 0°C. El compuesto (VI) (16 g, 33.6 mmol) disuelto en C¾C12 seco (250 mi) se agrega y se agita 4 horas a temperatura ambiente. La reacción finalizó al agregar Et20 frió (200 mi) y se filtró mediante gel de sílice. El solvente se concentra al vacío, y después el compuesto (VII) (13.54 g 85%) se aisla utilizando cromatografía en columna (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v) . VII; un sólido blanco amorfo, Rf=0.51 (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v); [a]D22=-10.0 (c=0.5, CHC13) ; IR(película) Vmax 3064, 3031, 2983, 2936, 1784, 1730, 1601, 1452, 1393, 1259, 1096, 1026 cm"1; ½ NMR (250 MHz; CDC13) d 8.10-7.29 (m, 15H, aromático H) , 6.28 (d, 1H, J = 3.8 Hz) , 6.05 (dd, 1H, J = 1.4, 3.8 Hz) , 5.34 (dd, 1H, J = 1.4, 11.0 Hz) , 4.96-4.85 (m, 1 H, H-5) , 1.61 (d, 3H, J = 6.3 Hz-CH) ; 13C NMR (62.9 MHz CDCl3) d 165.9(C-1), 165.1, 164.9, 164.8, 134.0, 133.9, 133.8, 130.1(4), 130.0(2), 128.7(5), 128.5(3), 128.4, 74.8, 74.1, 71.8, 67.6, 19.0(C-6); Un valor calculado HRMS (FAB) para C27H2308 (M+ +H) m/z es 475.1393, y un valor medido actual es 475.1393. Modalidad 4 Síntesis de 2,4-di-0-benzoil-3 , 6-dideoxi-L-eritro-hex-2-enona-l, 5-lactona (VIII) El compuesto (VII) (13.2 g, 27.8 mmol) se disuelve en Et3N:CHCl3 (1:4, 500 mi) bajo corriente de N2 y se agita durante 16 horas a temperatura ambiente. Después que la reacción se terminó, se lavó con agua. La capa orgánica se secó utilizando MgS0 anhidro. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (VIII) (6.37 g 65%) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (tolueno/EtOAc, 10 -.1, v/v) . VIII; un sólido blanco cristalino, Rf=0.53 (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v); mp 108-112°C (lit.40 mp 107-110°C) ; [ot]D21 = -93.1 (c = 1.0, CHC13) [lit.43 [a]D20= -93.0 (C = 1.0, CHCI3) ] ; IR (película) Vmax 3069, 3007, 2936, 2920, 1738, 1674, 1598, 1452, 1355, 1257, 1155, 1115, 1060 cm-1; ½ MR (250 MHz, CDC13) d 8.13-7.44 (m, 10H, aromático H) , 6.71 (d, 1H, J = 4.3 Hz, H-3), 5.69 (t, 1H, J = 4.7 Hz, H-4) , 5.00-4.90 (m, 1H, H-5) , 1.64 (d, 3H, J = 6.7 Hz -CH3) ; 13C R (62.9 MHz , CDCl3) d 165.5, 164.3, 158.0 (C-2), 140.8, 134.3,133.9, 130.5(2), 130.0(2), 128.7(5), 127.9, 125.6, 77.4, 68.6, 18.4(C-6); Un valor calculado HRMS (FAB) para C2oHi706 (M+ +H) m/z es 353.1025, y un valor medido actual es 353.1023. Modalidad 5 Síntesis de 2 , 4-di-0-benzoil-3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexono-1 , 5-lactona (IX) El compuesto (VIII) (6.1. g, 17.31 mmol) se disuelve en EtOAc (300 mi) y después se agrega 10%-Pd/C (400 mg) y se agita durante 3 horas a temperatura ambiente después de sustituirse con gas de hidrógeno. El reactivo se filtra al utilizar celita 545. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (IX) (502 g 85%) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (tolueno/EtOAc , 10:1, v/v) . IX; un sólido blanco, Rf=0.45 (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v) ; [oc]D21 = +18.4 (c = 1.0, CHC13) [lit.43 [a] D20= -18.2 (c = 1.0, CHCI3) ] ; IR(película) Vmax 3031, 2982, 2939, 1724, 1601, 1452, 1383, 1273,1114, 1070, 1028 cm-1; ¾ NMR (250 MHz, CDC13) d 8.11-7.43 (m, 10H, aromático H) , 5.90 (dd, 1H, J = 7.6, 12.0 Hz, H-2), 5.30-5.25 (m, 1H, H-4) , 4.87-4.77 (m, 1H, H-5) , 2.78-2.52 (m, 2H, H-3eq, 3ax) , 1.58 (d, 3H, J = 6.5 Hz, -CH 3 ) ; 13C NMR (62.9 MHz , CDCl3) d 168.0(C-1), 165.5(2) , 133.9, 133.8, 130.2(2), 129.9(2), 129.1, 129.0, 128.8(2), 128.6(2), 76.9, 70.5, 65.0, 30.2(C-3) , 19.3(C-6); Un valor calculado HRMS (FAB) para C20H19Oe (M+ +H) m/z es 355.1182, y un valor medido actual es 355.1178. Modalidad 6 Síntesis de 2 , 4-di-0-benzoil-3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosa (II) (1) Preparación de Diisoamilborohidruro 0.5M BH-THF 1M (65 mi) se agrega gradualmente. Se agitó durante 2 horas a 0°C bajo corriente de N2 y después se agrega gradualmente 2 , 3-dimetil-2-buteno 2M (65 mi) . Se agitó durante 2 horas a 0°C y se utilizó en la reacción (2) . (2) Síntesis de 2 , 4 -di-O-benzoil-3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosa (II) El compuesto (IX) (5 g, 14.11 mmol) disuelto en THF seco (15 mi) se agrega a Diisoamilborohidruro 0.5M (127 mi) preparado en la reacción (1) . Después, se agita durante 20 horas a temperatura ambiente . Después que se termina la reacción, se agrega agua (3 mi) y después se agita durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfría a 0°C, y entonces se agrega 30% de H202 (15 mi) y se agrega NaOH 3N para mantener el pH 7-8. El solvente THF se concentra al vacío y después se disuelve en CH2C12 (100 mi) y se lava con agua (50 mi) . La capa orgánica se seca utilizando MgS04. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (II) (4.72 g 93.8%, a:ß =4.6:1) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v) . II; un jarabe incoloro, Rf=0.23 (tolueno/EtOAc, 10:1, v/v) ; [a]D24 = +51.4 (c = 1.0, CHCl3) ; IR (película) Vmax 3448, 3065, 3027, 2979, 1720, 1601, 1452, 1270, 1112, 1095, 1068, 1025 cm"1; ¾ M R (250 MHz CDC13) d 8.15-7.43 (m, 10H, aromático H) , 5.29 (s, 1H, H-l) , 5.25-5.15 (m, 2H, H-2, H-4) , 4.39-4.28 (m, 1H, H-5) , 3.51 (d, 1H, J = 3.6 Hz, -OH), 2.44 (td, 1H, J = 3.8, 13.5 Hz ; H-3eq) , 2.29 (ddd, 1H, J = 3.1, 11.0, 13.7 Hz; H-3ax) , 1.30 (d, 3H, J = 6.2 Hz, -C¾) ; 13 C MR (62.9 MHz, CDCl3) d 166.0, 165.8, 133.5, 133.4, 130.0(3), 129.8(3), 128.6(4), 91.1(C-1, a), 71 0 (C-2) , 70.7(C-4), 67.0(C-5), 29.2(C-3), 18.0(C-6); Un valor calculado HRMS (FAB) para C2oH2i06 (M* +H) m/z es 357.1338, y un valor medido actual es 357.1334. Modalidad 7 Síntesis de (2R) -Octen-2 -ol (II) (1) Síntesis de bromuro de 4-pentenilmagnesio 5-bromo-l-penteno (2.8 mi), 23.5 mmol) disuelto en THF seco (20 mi) se agrega a suspensión de Mg (571 mg, 23.5 mmol) disuelto en THF seco (3 mi) gota a gota a través de 30 minutos. La mezcla de reacción se refluye durante 3 horas a 60°C, después de lo cual se enfria a temperatura ambiente, preparando mediante esto solución de Grignard. (2) Síntesis de (2R) -7-0cten-2-ol (III) (R) - (+) -1, 2-epoxipropano (1.12 mi), 16.0 mmol) se disuelve en THF seco (23 mi) y se agrega a este CuBr (230 mg, 1.6 mmol), después de lo cual la temperatura se reduce -78°C. La solución de bromuro de 4-pentenilmagnesio 1M (23 mi, 23.5 mmol) preparado en la reacción (1) se agrega a la mezcla de reacción. La temperatura se incrementa gradualmente hasta temperatura ambiente y la mezcla se agita durante 4 horas. La reacción se finaliza con solución de NH4C1 saturada (10 mi) . El producto obtenido se extrae con Et2= (20 mi X 2) y se lava con agua (10 mi) . La capa orgánica se seca utilizando gS04 anhidro. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (III) (1.3 g 65%) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (Et O/n-penteno 5:1, v/v) . III; un líquido incoloro, Rf=0.15 (Et O/n-penteno 5:1, v/v) ; [a]D23 = -10.7 (c = 0.28, CHC13) ; IR(película) Vmax 3357, 2969, 2930, 2858, 1641, 1460, 1416, 1374, 1305, 1122 cm"1; XH NMR (250 MHz, CDC13) d 5.89-5.73 (m, 1H, H-2), 5.03-4.92 (m, 2H, H-l) , 3.80-3.78 (m, 1H, H-7) , 2.07 (m, 2H, H-3) , 1.43-1.39 (m, 6H, H-4, 5, 6), 1.18 (d, 3H, J = 6.1 Hz ~CH3) ; 13C NMR (62.9 MHz ; CDC13) d 138.9(02), 114.4(C-1), 68.0(C-7), 39.2(C-6), 33.8(C-3), 29.0(C-4), 25.3(C-5) 23.5(C-8) Modalidad 8 Síntesis de (2R) -Oct-7~en-2 -il-2 , 4-di-O-benzoil- 3.6-dideoxi-a-L-arabino-hexopiranosa (X) El compuesto (II) (2.0 g, 5.61 mmol, leq) , el compuesto (III) (l/08g, 8.42 mmol) , y navajas moleculares de 4 ? (200 g) se disolvieron en CH2C12 seco (30 mi) bajo corriente de N2, después de los cual la temperatura se enfría a 0°C. Se agrega gradualmente BF3-Et20 (2.85 mi), 16.8 mmol, 4eq) y se agita durante 10 horas, después de lo cual se agrega Et3N (5 mi), y la reacción se finaliza y se filtra. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (X) (1.89 g 72%) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (n-hexano/EtOAc, 5:1, v/v) . VII; un jarabe incoloro, Rf=0.55 (n-hexano/EtOAc 5:1, v/v) ; [ ]D22 = +0.9 (c = 1.0, CHCI3) ; IR(película) Vmax 3069, 2974, 2933, 2859, 1723, 1602, 1451, 1316, 1267, 1152, 1108, 1068, 1025 cm"1; XH NMR (250 MHz; CDC13) d 8.14-7.42 (m, 10H, aromático H) , 5.93-5.76 (m, 1H) , 5.26-5.16 (m, 2H, H-2, H-4) , 5.07-5.00 (m, 3H, H-l) , 4.20-4.09 (m, 1H, H-5) , 3.85 (m, 1H) , 2.48-2.41 (m, 1H, ?-3'eq), 2.28-2.17 (m, 1H, ?-3'ax), 2.11 (m, 2H) , 1.68-1.37 (m, 6H) , 1.30 (d, 3H, J = 6.2 Hz) , 1.20 (d, 3H, J = 6.1 Hz) ; 13C NMR (62.9 MHz ; CDCl3) d 165.9, 165.7, 138.9, 133.3, 133.2, 129.9(3), 129.6(2), 128.5(4), 114.5, 93.8(C-1', ) , 72.5, 71.3, 70.7, 67.0, 37.0, 33.8, 29.8, 28.8, 25.3, 19.2, 17.9; Un valor calculado HRMS (FAB) para C28H3S06 (M+ +H) m/z es 467.2434, y un valor medido actual es 467.2438. Modalidad 9 Síntesis de ácido (6R) -6- (2 , 4-di-0-benzoil-3 , 6-dideoxi-a-L-arabino-hexopiranosil) heptanoico (XI) El compuesto (X) (1.8 g, 3.86 mmol) , se disuelven en acetona y después se agrega a este NaHC03 (972 mg, 11.57 mmol) . Después se agrega gradualmente Nn04 (3g, 19.29 mmol) y se agita durante 12 horas. Después la reacción se finaliza y se acidifica utilizando 10% de HCl (20 mi) . El producto obtenido se extrae con EtOAc (100 mi X 2) y se lava con salmuera (70 mi) . La capa orgánica se seca mediante MgS04 anhidro. La solución se concentra al vacío, y después el compuesto (XI) (1.51 g 87%) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (n-hexano/EtOAc, 5:1, v/v) . [a]D22 = -1.9 (c = 1.0, CHC13) ; IR(película) Vmax 3063, 2973 , 2935, 1721, 1602, 1451, 1316, 1267, 1109, 1068, 1025 cm"1; ¾ NMR (250 MHz , CDC13) d 10.69 (bs, 1H, -OH), 8.14- 7.42 (m, 10H, aromático H) , 5.26-5.17 (m, 2H, H-2', H-4'), 4.98 (s, 1H, H-l')/ 4.19-4.08 (m, 1H, H-5'), 3.87 (m, 1H) , 2.47-2.36 (m, 3H) , 2.28-2.17 (m, 1H, ?-3'ax), 1.72-1.45 (m, 6H) , 1.31 (d, 3H, J = 6.2 Hz) , 1.21 (d, 3H, J = 6.0 Hz) ; 13C NMR (62.9 MHz, CDC13) d 179.8, 165.8, 165.7, 133.3, 133.2, 130.0, 129.9(2), 129.8, 129.7(2), 128.5(4), 93.8(C-1', 0t) , 72.4, 71.2, 70.7, 67.1, 36.7, 34.0, 29.7, 25.2, 24.6, 19.1, 17.9; Un valor calculado HRMS (FAB) para C27H3308 (M+ +H) m/z es 485.2175, y un valor medido actual es 485.2165. Modalidad 10 Síntesis de ácido (6R) - (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico (I) El compuesto (XI) (472.9 mg, 0.976 mmol) se disuelve en MeOH (20 mi) se agrega NaMe (52.7 mg, 0.96 mmol) a 0°C. La temperatura se incrementa gradualmente hasta temperatura ambiente y la mezcla se agita durante 12 horas . después la reacción se finaliza, MeOH se concentra al vacío. Después, a fin de eliminar el sub-producto metilbenzoato, se disuelve en agua (20 mi) y se lava mediante CH2C12 (20 mi X 5) . El pH de la capa de solución se ajusta utilizando amberlita IR-120 (H+) (500 mg) . Después de la filtración, el agua se retira de la capa de solución por el método de secado por congelación y después el compuesto (I) (234 g, 87%) se aisla utilizando cromatografía en columna rápida (EtOAc/MeOH, 11:1 v/v) . I: un aceite incoloro, Rf=0.43 (EtOSc/MeOH, 11:1, v/v) ; IR(película) Vmax 3391, 2969, 2933, 1712, 1452, 1379, 1244, 1126, 1103, 1042, 1031 era"1; ½ NMR (500 MH2; CD3 OD) d 4.64 (s, 1H, H-I'), 3.80-3.77 (m, 1H, H-6) , 3.72-3.71 (m, 1H, H-2'), 3.63-3.59 (m, 1H, H-5'), 3.54-3.49 (m, 1H, H-4'), 2.30 (t, 2H, J = 7.5 Hz, H-2), 1.96-1.92 (m; 1H, ?-3'eq), 1.79-1.7 (m, 1H, ?-3'ax), 1.61 (m, 2H, H-3) , 1.56-1.50 (m, 2H, H-5), 1.47 (m, 2H, H-4) , 1.21 (d, 3H, J = 6.5 Hz; H-6'), 1-12 (d, 3H, J = 6.5 Hz; H-7) ; 13C NMR (125.7 MHz; CD3 OD) d 177.7(C-1), 97.6(C-1', a), 72.4(C-6), 71.3(C-5'), 70.1(C-2') , 68.5(C-4') , 38.2(C-5), 36.1 (C-3'), 35.0(C-2), 26.5(C-3) , 26.1(C-4) , 19.4(C-7) , 18.2 (C-6' ) ; Un valor calculado HRMS (PAB) para 013?2?06 (M+ +H) m/z es 277.1651, y un valor medido actual es 277.1652. Modalidad 11 Síntesis de sales de adición base (1-1 : n=4, X=Na) de ácido (6R) - (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico (I) El compuesto (I) (267 mg, 1.0 mmol) se disuelve en Me=H (10 mi) . Se agrega NaOMe (40.0 mg 1.0 mmol) a 0°C.

Después la temperatura se incrementa gradualmente hasta temperatura ambiente y la mezcla se agita durante 1 hora. Después la reacción se finaliza, MeOH se concentra al vacío y se filtra. Después, se retira el agua de la capa de solución por el método de secado por congelación y el compuesto (1-1) (271 mg, 95%) se aisla. Ejemplo de Prueba Medición de la actividad del efecto de formación dauer Para identificar el efecto de formación dauer de la feromona inventiva, se mide la actividad después que se administra el compuesto de feromona al medio de cultivo de agar S. basal sin peptona (Vowels y Thomas, Genetics 130: 105-123, 1992) . El efecto de formación dauer del compuesto inventivo con respecto a C. elegance se muestra en la Tabla 3. Tabla 3 (Actividad del efecto de formación dauer de la feromona de C. elegance) Efecto de la formación Dauer de la Feromona en OP 50(160 ug/placa) 40 80 180 320 640 Concentración [?µ/placa] Tabla 4 (Resultado del análisis del espectro de la feromona, ácido 6R- (3.6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanóico Posición d? (mult, J) 6C NBC 1 177.3 2, 3 2 230 (t,7. 5) 34.6 1, 3 3 1.64 (m) 25.5 2, 4, 5, 6 4 1.47 (m) 25.1 2, 3, 5 5 1.50-1.48 (m) 37.1 3, 4, 6, 7 6 3.80-3.77 (m) 71.3 5, 7, 1' 7 1.14 (d,6 .5) 18.3 5, 6 1' 4.66 (s) 96.6 2' , 3' , 6 2' 3.73-3.72 (m) 69.0 1' , 3' 3' 1.97-1.95 (m) 34.9 1' , 4' , 5' 1.79-1.74 (m) 4' 3.54-3.59 (m) 67.4 3' , 5' , 6' 5' 3.64-3.62 (m) 70.2 3 ' , 4' S' 1.24 (d,6 -5) 17.2 4' , 5' Aplicabilidad Industrial Como se describe arriba, la presente invención se determinó primeramente por la configuración estereoquímica de la feromona, del ácido 6R-6- (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanóico y sus sales. Con base en este hecho, se realizó exitosamente la síntesis total efectiva, superando mediante esto la aislación diminuta de la feromona obtenida de C. elegance haciendo posible la producción en gran cantidad de la feromona. De acuerdo con lo anterior, se vuelve posible desarrollar sustancias médicas utilizando la feromona con relación a los sistemas de envejecimiento, estrés, metabolismo, transferencia de señal en vivo, y anti-cáncer, obesidad y un agente de supresión para el envejecimiento y el estrés . Además se vuelve posible también investigar el cuerpo de la proteina objetivo activa de la feromona. Aunque la presente invención se ha mostrado y descrito particularmente con referencia a las modalidades ejemplificativas de la misma, se entenderá por aquellos de experiencia ordinaria en la técnica que pueden hacerse en la misma varios cambios en la forma y detalles sin apartarse del espíritu y alcance de la presente invención como se define por las reivindicaciones anexas.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de feromona que tiene la fórmula estereoquímica (1-1) (1-1) en donde, X es H, metal alcalino o alcalinotérreo y n es un entero 1-6. 2. El compuesto de feromona de la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula (1-1) es del ácido 6R-(3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico . 3. El compuesto de feromona de la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula (1-1) es sal de metal alcalino o alcalinotérreo del ácido 6R- (3 , 6-dideoxi-L-arabino-hexopiranosiloxi) heptanoico . 4. El compuesto de feromona de la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula (1-1) es estereoisómero de forma S que tiene la fórmula estereoquímica (1-2) . 5. El compuesto de feromona de la reivindicación 1, en donde el compuesto de la fórmula (1-1) es el estereoisómero de forma S C-l' que tiene la fórmula estereoquímica (1-3) . (1-3) 6. ün intermediario de feromona que tiene fórmula (X) . (X) en donde, ¾ es H, un grupo benzoilo o bencilo. 7. Un intermediario de feromona que tiene la fórmula (XI) . (XI) en donde, R2 es H, un grupo benzoilo o bencilo. 8. Un método de preparación para un compuesto de feromona que tiene la fórmula estereoquímica (1-1) , el método comprende las etapas de: acetalación del compuesto de la fórmula (II) con el compuesto de la fórmula (III) en la presencia del catalizador de ácido de Lewis; convertir un doble enlace terminal alifático del reactivo de acoplamiento producido a un ácido orgánico mediante un oxidante; y retirar dos grupos de protección 0-benzoilo del grupo desoxiramnosilo mediante una base y acidificarlo mediante un ácido . (i-i) (11) (III) en donde Bz es un grupo benzoilo o bencilo. 9. El método de preparación de la reivindicación 8, en donde el catalizador es BF3-Et20 y navajas moleculares. método de preparación de la reivindicación 8, en donde el oxidante que es KMn04 y HC03 se utiliza como un agente complementario. 11. El método de preparación de la reivindicación 8, en donde la base es de NaOH o KOH y el ácido es ácido tipo resina de amberlita. 12. El método de preparación de la reivindicación 8, en donde el compuesto de la fórmula (II) se obtiene del compuesto de la fórmula (VII) . (Vil) 13. El método de la reivindicación 12, en donde el compuesto de la fórmula (VII) se obtiene al oxidar el compuesto de la fórmula (VI) . (VI) 14. El uso de un compuesto de feromona de ácido 6R- (3, 6-dideoxi-L-arabino- exopiranosiloxi) heptanoico · que tiene la fórmula estereoquímica (1-1) y sus sales alcalinas y alcalinotérreas como agentes medicinales para curar enfermedades relacionadas al envejecimiento y el estrés. ( 1- 1 ) en donde, X es H, metal alcalino o alcalinotérreo es un entero 1-6.