MXPA05002092A

MXPA05002092A - Proceso mejorado para tratar material vegetal que contiene pectina.

Info

Publication number: MXPA05002092A
Application number: MXPA05002092A
Authority: MX
Inventors: Jan Aa Staunstrup Christensen
Original assignee: Cp Kelco Aps
Priority date: 2002-09-02
Filing date: 2003-09-02
Publication date: 2005-06-06
Also published as: US20060099302A1; IL166790A0; RU2005109428A; ZA200501250B; EP1546209A2; PL376541A1; WO2004020472A2; MA27391A1; WO2004020472A3; AU2003258488A1; RU2336280C2; CN1703429A

Abstract

La presente invencion describe un metodo para tratar material vegetal que contiene pectina. El material vegetal fresco se ajusta a un Ph entre 3.2 y 3.9 a una temperatura por debajo de 90¦C para suministrar la esterasa de pectina nativa en el material vegetal inactivo. De este modo, la desesterificacion minima tiene lugar durante el transporte del material vegetal, no durante el secado subsecuente y/o secado convencional del material vegetal. Ya que la enzima permanece inactiva, la actividad de la enzima puede re-establecerse en un punto final incrementando el Ph a aproximadamente 4.0. La pectina hecha de tal material vegetal tratado tiene un peso molecular mas elevado y una sensibilidad de calcio mas baja que la pectina hecha del mismo material vegetal, que no ha sido sometido a tal tratamiento.

Description

PROCESO MEJORADO ARA TRATAR MATERIA!. VEGETAL QUE CONTIENE PECTINA Campo de la Invención La presente invención se relaciona a un método mejorado para tratar un material de partida que contiene pectina para reducir o evitar cambios microbiológicos y/o enzimáticos y/o químicos de la pectina contenida en el material de partida que contiene pectina.

Antecedentes de la Invención e Información Relacionada La pectina es un polisacárido complejo asociado con las paredes celulares de la planta. Esta consiste de una estructura de ácido poligalacturónico alfa 1-4 enlazado interpuesto por residuos ramnosa y modificado con cadenas laterales de azúcar neutro y componentes sin azúcar tales como grupos acetilo, metilo y ácido ferúlico. Las cadenas laterales de azúcar neutro, que incluyen arabinano y arabinogalactanos, se unen a los residuos de ramnosa en la estructura. Los residuos de ramnosa tienden a agruparse juntos en la estructura. De tal manera, con las cadenas laterales unidas a esta región se refiere como región pilosa y el resto de la estructura se llama por lo tanto la región lisa. En la US 5, 929, 051, Ni, et al., describe pectina como un componente de pared celular de planta. La pared celular se divide en tres capas, membrana media, pared celular primaria y secundaria. La membrana media es la más rica en pectina. Las pectinas se producen y depositan durante el crecimiento de pared celular. Las pectinas son particularmente abundantes en tejidos de plantas suaves bajo condiciones de crecimiento rápido y contenido elevado de humedad. En las paredes celulares, las pectinas se presentan en la forma de un complejo de calcio. El envolvimiento de reticulación de calcio se justifica por el hecho que los agentes quelantes facilitan la liberación de pectina a partir de las paredes celulares como se describe por Nan i (US 1,634,879) y Maclay (US 2,375,376). De acuerdo a Dumitriu, S.: Polysaccharides, Structural diversity and functional versatility, Marcel Dekker, Inc., New York, 1998, 416-419, la pectina se utiliza en un rango de productos alimenticios. Históricamente, la pectina ha sido principalmente utilizada como un agente de gelificación para sistemas ricos en azúcares, con sabor a fruta o que contienen fruta, mermeladas o similares. Ejemplos son mermeladas tradicionales, mermeladas con contenido de azúcar reducido, jaleas puras, geles de confitería con sabor a fruta, geles de confitería sin sabor a fruta, glaseados reversibles al calor para la industria de la panadería, mermeladas resistentes al calor para la industria de panadería, ondulaciones para uso en helados, y preparaciones de fruta para yogur. Una porción sustancial de pectina se utiliza hoy para la estabilización de bebidas lácteas de pH bajo, incluyendo bebidas fermentadas y mezclas de jugo de fruta y leche . Los residuos de ácido galacturónico en pectina se esterifican parcialmente y se presentan como el metiléster. El grado de esterificación se define como el porcentaje de grupos carboxilo esterificados . La pectina con un grado de esterificación ("DE") sobre 50% se llama pectina de metil éster elevada ( HM") o pectina de éster elevada y una con un DE más bajo que el 50% se refiere como pectina de metiléster baja ("LM") o pectina de éster baja. La mayoría de la pectina encontrada en el material vegetal tal como frutas, vegetales y hierbas marinas son pectinas de HM. Los grupos de éster de acetato pueden además ocurrir en el carbono 2 ó 3 de los residuos del ácido galacturónico. El grado de esterificación del acetato ("DAc") se define como el porcentaje de residuos de ácido galacturónico que contienen un grupo de éster acetato. La mayoría de las pectinas nativas tienen una DAc baja, una excepción es la pectina de remolacha azucarera. Las pectinas son solubles en agua e insolubles en la mayoría de los solventes orgánicos. Las pectinas con un nivel muy bajo de esterificación de metilo y ácidos pécticos son para propósitos prácticos únicamente solubles como las sales de potasio o sodio. Las pectinas son más estables en pH 3-4. Debajo de pH 3, los grupos metoxilo y acetilo y cadenas laterales de azúcar neutro se remueven. A temperaturas elevadas, estas reacciones se aceleran y desdoblan de las uniones glicosidicas en donde surge la estructura de galacturonano . Bajo condiciones alcalinas y neutras, los grupos de metiléster se saponifican y la estructura de poligalacturonano se ruptura a través del desdoblamiento-eliminación-beta de las uniones glicosidicas en las terminaciones sin reducción de los residuos de ácido galacturónico metoxilado. Estas reacciones también proceden más rápido con temperatura incrementada. Los ácidos pécticos y pectinas de LM son resistentes a condiciones alcalinas y neutras ya que no existen únicamente números limitados de grupos metiléster. De acuerdo a.Kertesz, Z. I: The Pectic Substances, Interscience Publishers, Inc, New York, 1951, los materiales pécticos ocurren en todos los tejidos de las plantas. Sin embargo, de importancia industria son particularmente manzanas, betabeles, lino, toronjas, limones, limas, naranjas, papas y girasoles. Finalmente, también la pectina en zábila ha mostrado utilidad industrial. En la US 1,513,615, Leo describe un proceso enzimático para la solubilización de protopectina . Se observa que la pectasa no trabaja cuando se presenta ácido. Consecuentemente, desintegra las células de la fruta cocinándolas en agua y luego agregándoles carbonato de calcio después de lo cual agrega pectasa. De este modo, Leo incrementa el pH a un punto en donde la pectasa es activa para evitar el uso del ácido en la extracción subsecuente. En la US 1,497,884, Jameson establece solucionar el problema de que la cáscara contiene pectinasa, la cual remueve los grupos metilo en la pectina. Cuando la pectinasa se presenta, la pectina pierde grupos metilo y esto conduce a capacidad inferior de gel. Se resuelve el problema cortando primero la cáscara y luego destruyendo la pectinasa calentando la cáscara trozada justo por debajo de 100°C durante no más de 10 minutos. En la US 1,654,131, Leo inactiva las enzimas en la cáscara tratando la cáscara cortada en rebanadas o piezas con alcohol concentrado tal como etanol al 95%. De esta manera, se resuelve el problema de reducir la capacidad de gel de la pectina cuando la cáscara se seca en la presencia de ácidos y enzimas. Leo utiliza el hecho que el alcohol desnaturaliza las proteínas tales como enzimas, pero no utiliza ningún efecto en las enzimas a través de una reducción de pH. En la ÜS 2,020,572, Platt utiliza el mismo principio como en la US 1,497,884 y trata la cáscara finamente molida con calor para destruir las enzimas . En la US 2, 165, 902, Myers resuelve el problema que el secado al horno convencional de la cáscara no calienta la cáscara rápidamente lo suficiente para inactivar las enzimas. Él hace eso lixiviando la cáscara fresca molida con una solución de sulfato de cobre calentado de manera suficiente para inactivar la pectinasa. En la US 2,323,483, Myers inactiva enzimas en cáscara fresca lavando la cáscara fresca molida en agua a 90 °C durante 5 minutos. En la US 2,358,430, Willaman describe un proceso para la desesterificación enzimática de la pectina. Él trata una dispersión de pectina con pectasa a un pH 6.0 y a una temperatura, la cual es favorable para pectasa. Esa temperatura es de 40-45 °C, y después de un cierto tiempo en donde el pH se mantiene a 6.0, la reacción se detiene calentando a 70-80 °C o disminuyendo el pH a 3-4 y luego calentando . Willaman establece resolver el problema de los métodos convencionales para la desesterificación de pectina, es decir, en aquel periodo de desesterificación de álcali, resulta en capacidad reducida del gel de la pectina desesterificada resultante. Él hace eso permitiendo a la pectasa de enzima realizar la desesterificación en la pectina . En la US 2,444,266 Owens describe un proceso para hacer una serie de pectinas parcialmente desmetoxiladas de peso molecular elevado permitiendo a la enzima nativa a partir de la cáscara cítrica o pulpa de manzana hacerse reaccionar en la pectina antes de la extracción. Él enfatiza que la cáscara no debe haber sido tratada para inactivar la enzima . En la US 2,387,635, Bailey describe un proceso para preparar material vegetal que soporta pectina para la extracción de pectina. El método implica la remoción de constituyentes sólidos solubles antes de la extracción. El proceso comprende las etapas de ajustar el pH a 2.8-3.5, calentando el material de fuente pectosa a aproximadamente 90C durante aproximadamente 10 minutos, enfriando el material a aproximadamente 37-40C, agregando y cultivando en la presente una levadura, por lo que se rupturan las sustancias de carbohidrato no pectosa, ajustando el pH de la masa fermentada a aproximadamente 2.9 y calentando y recuperando subsecuentemente la pectina. El calentamiento inicial inactiva cualesquiera enzimas y microorganismos presentes. La fermentación remueve azúcares y otros sólidos solubles no deseados . En la GB A 453877, se describe un procedimiento para el tratamiento de una material vegetal que contiene pectina. La material vegetal se trata con un ácido orgánico o inorgánico antes de la extracción de la pectina, sin dañar la capacidad gelificante de la pectina. El procedimiento resulta en una capacidad gelificante alterada en la pectina resultante. El pH se mantiene a 0.1-2.5 durante el tratamiento . En la US 5,567,462, un procedimiento para la preparación de una composición pecto-celulósica se describe en donde la cáscara cítrica desmenuzada u otro material que contiene pectina se trata con una solución acuosa acidificada para solubilizar la pectina. La US 5,567,462 enseña el uso de ácidos que varían en pH de 1 a 3.3 para solubilizar la pectina. En la JP A 59-096105, se describe un procedimiento para obtener pectina de calidad elevada en buenos rendimientos. En este proceso, una solución de ácido mineral de al menos 0.01N (es decir, un pH de aproximadamente 0.3-2) se describe como un límite en la solubilización de la pectina . En la JP A 61-085402 se describe un proceso para producir una pectina de calidad elevada en rendimientos elevados poniendo en contacto material vegetal que contiene pectina seca con un ácido a una temperatura por debajo de 10C antes de la extracción. Los ácidos descritos son ácidos inorgánicos en una resistencia de 0.5-5.0N (es decir, un pH de aproximadamente 0.1-0.3). En resumen, la técnica anterior ha tratado con los problemas de enzimas en la cáscara. Sin embargo, estas enzimas han sido vistas como un problema y no como una oportunidad. De este modo, la mayor parte de las enzimas nativas han sido destruidas a través del uso del calor. De hecho, los estados de la técnica anterior que el secado en horno tradicional no es suficiente para destruir la enzima, y consecuentemente un calentamiento anterior en un sistema acuoso es necesario. Otro enfoque implica el uso de etanol para destruir las enzimas antes de secar la cáscara. Este método sin embargo, es peligroso debido al riesgo potencial de una explosión. Se conoce la utilización de enzimas nativas en la cáscara para desterificar pectina. Sin embargo, el principio es utilizado ya sea en pectina que ha sido extraída, o el principio es utilizado en cáscara fresca. Consecuentemente, existe una necesidad para hacer un material de partida que contiene pectina seca en donde las enzimas nativas han sido suministradas inactivas, de manera que no cambian la composición de la pectina en la cáscara fresca durante el transporte y durante el secado. También, las enzimas deben inactivarse en la cáscara seca durante el almacenamiento. Sin embargo, una vez que la cáscara seca va a extraerse, las enzimas deben otra vez llegar a ser activas de manera que una desesterificación in situ en la cáscara puede lograrse antes de la extracción de la pectina.

Compendio de la Invención Se ha descubierto sorprendentemente ahora que cuando la cáscara fresca se ajusta a un pH de entre 3.2 y 3.9, a una temperatura por debajo de 90 °C, la esterasa de pectina nativa en la cáscara llega a ser inactiva. De este modo, la desesterificación mínima tiene lugar durante la transportación de la cáscara fresca y durante el lavado subsecuente y/o secado convencional de la cáscara fresca. Ya que la enzima permanece inactiva, la actividad de la enzima puede volverse a establecer en un punto posterior incrementando el pH sobre aproximadamente 4.0.

Descripción De-ballada de la Invención La presente invención se relaciona a un método mejorado para tratar un material de partida vegetal que contiene pectina antes de la extracción de la pectina del material de partida vegetal que contiene pectina. El material de partida vegetal que contiene pectina puede ser cualquier material que contiene pectina. Tales materiales incluyen frutas cítricas, otras frutas tales como manzanas, betabeles, restos de la fabricación de proteína de soya, linaza, o lino, zábila, botones de girasoles, etc. La presente invención es particularmente útil para tratar material de partida vegetal que contiene pectina, que tiene inherentemente un pH arriba de 4. Ejemplos de tales materiales vegetales son naranja, toronja, remolacha para forraje, remolacha azucarera y zanahorias. La presente invención comprende un método para tratar tal material vegetal, la pectina resultante hecha por extracción subsecuente de material de partida que contiene pectina tratada y los usos de la pectina. El método implica las siguientes etapas: Tan pronto como sea posible después que el material de partida vegetal que contiene la pectina ha sido manejado físicamente, por ejemplo, prensado, los restos, por ejemplo, la cáscara cítrica, la membrana y los sacos de jugos, se tratan con agua acidificada. Si esto no es factible, el tratamiento del material de partida vegetal que contiene pectina debe tener lugar tan pronto como sea posible después de un lavado de agua potable del material de partida vegetal que contiene pectina. El material de partida vegetal que contiene pectina puede tratarse cuando se origina o el material de partida vegetal que contiene pectina puede molerse o rebanarse para mejorar el tratamiento. El pH del agua acidificada puede variar en el rango de 3.2-3.9 y más preferiblemente dentro del rango de pH de 3.4-3.7. En valores de pH por debajo de aproximadamente 3.2, la pectina solubilizará, lo cual es indeseado. En valores de pH alrededor de 4 y mayores, por otro lado, la esterasa de pectina nativa llega a activarse e inicia la desesterificación y degradación de la pectina. El tratamiento con agua acidificada, o lavado con agua acidificada, puede realizarse en una forma discontinua o en forma continua. En un proceso de lavado discontinuo, una o más etapas de lavado puede utilizarse para remover tanto material soluble tal como azúcar como sea posible. Aunque más de tres etapas de lavado pueden utilizarse para remover aún más solutos, tres etapas de lavado producen un nivel aceptable de solutos sin incrementar el costo inaceptable. En un proceso de lavado continuo, el ácido se agrega al final de la linea de lavado, en donde los ácidos naturales si se presentan en el material de partida que contiene pectina tiene la concentración más baja. Tales técnicas de lavado de contracorriente continua son bien conocidas en la técnica. El ácido utilizado en la presente invención puede ser cualquier ácido inorgánico y cualquier ácido orgánico capaces de reducir el pH en el material de partida vegetal que contiene pectina al pH deseado. Ejemplos de ácidos inorgánicos incluyen ácido clorhidrico, ácido sulfúrico, dióxido de sulfuro, ácido nítrico, etc, y ejemplos de ácido orgánico incluyen ácido cítrico, ácido oxálico, ácido acético, etc. Otro medio para lograr el pH deseado del material de partida vegetal que contiene pectina es utilizar una solución regulada en lugar del ácido. Ejemplos de soluciones reguladas incluyen: Químicos Rango de Regulación Útil a 25°C Ácido Clorhídrico/ idrogencitrato disódico 2.0-4.0 Glicina/Ácido clorhídrico 2.2-3.6 Ftalato ácido de potasio/Ácido clorhídrico 2.2-4.0 Ácido cítrico/Citrato de sodio 3.0.-6.2 Acetato de Sodio/Ácido acético 3.7-5.6 Para evitar la extracción de la pectina contenida en el material de partida vegetal que contiene pectina, lavando con agua acidificada debe tener lugar a temperaturas por debajo de 90 °C, de preferencia por debajo de 50 °C y más preferiblemente por debajo de 35 °C. Para propósitos prácticos, el lavado con agua acidificada tomaría lugar a la temperatura del agua en la mano, que en la mayoría de los casos sería entre 10 °C y 30 °C, pero temperaturas más bajas del agua acidificada pueden utilizarse también. Cuando se utiliza un proceso de lavado discontinuo, es conveniente presionar ligeramente el material de partida vegetal que contiene pectina entre cada lavado para asegurar la remoción mejor posible de solutos. El prensado debe hacerse de tal manera que el material de partida vegetal que contiene pectina se prense únicamente libre de exceso de líquido, no en una manera, la cual provoque al material de partida vegetal que contiene pectina aplastarse en tal forma que presente dificultades de secado y/o separación después del proceso. El tiempo, durante el cual el material de partida vegetal que contiene pectina se lava con agua acidificada debe ser suficiente para reducir efectivamente el pH en el material de partida vegetal que contiene pectina a un pH dentro del rango de 3.2-3.9 y más preferiblemente dentro del rango de pH de 3.4-3.7. Este tiempo está normalmente en el rango de 5-60 minutos por etapa de lavado, de preferencia 5-30 minutos por etapa de lavado y más preferiblemente 10-20 minutos por etapa de lavado. Los tiempos de lavado más prolongados son posibles, pero no proporcionan ningún beneficio extra. Después del lavado con agua acidificada, la actividad de la esterasa vegetal en el material de partida vegetal que contiene pectina es inactivo o inactivado. De este modo, la esterasa vegetal, de origen natural en el material de partida vegetal que contiene pectina no realiza más su efecto de desesterificación en la pectina contenida en el material de partida vegetal que contiene pectina. De este modo, el material de partida vegetal que contiene pectina puede almacenarse o transportase dentro de la pectina contenida en el material de partida vegetal que contiene pectina que se desesterifica . Esto es importante, debido a que la esterasa vegetal desesterifica la pectina en el material de partida vegetal que contiene pectina en una forma de modo de bloque, que hace a la pectina resultante más sensible al calcio. Además, al evitar el bloqueo de los grupos de ácido carboxilo, el riesgo de despolimerización durante un secado y extracción subsecuente a temperaturas elevadas se minimiza. Al inactivar la esterasa vegetal, la pectina permanece sin cambio. La pectina en el material de partida vegetal que contiene pectina tratado puede extraerse subsecuentemente de acuerdo a métodos conocidos. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada puede también utilizarse para extracción inmediata de acuerdo con la técnica conocida. Alternativamente, el material de partida vegetal que contiene pectina tratada puede secarse y opcionalmente molerse antes que la pectina se extraiga del material de partida vegetal que contiene pectina tratada, seca. Esta opción es particularmente útil cuando la operación de tratamiento y la operación de extracción se ubican bastante lejos, y cuando el transporte de la cáscara tratada húmeda es impráctico . La presente invención es particularmente útil cuando el material de partida vegetal que contiene pectina tratada se seca subsecuentemente. El secado puede tener lugar en cualquier manera conocida con o sin vacio. Una temperatura de secado de menos de 80°C se recomienda para evitar crear un recubrimiento sólido en la superficie del material de partida vegetal que contiene pectina. Ya que la esterasa de planta se ha presentado inactivado y permanece inactivo durante la etapa de secado, la desventaja de principios conocidos del material de partida vegetal que contiene pectina seco que contiene pectina se evita. Durante el secado convencional, en donde la esterasa de planta no se inactiva, el calentamiento lento durante el secado conduce a severa desesterificación, lo cual la presente invención evita. Sin embargo, la presente invención también ofrece la posibilidad de reactivar la esterasa vegetal, de manera que la desesterificación de modo de bloque puede tener lugar en el material de partida vegetal que contiene pectina lavada con ácido seco o húmedo antes de la extracción. Esto se logra rociando el material de partida vegetal que contiene pectina lavado con ácido húmedo o seco con una solución de álcali, tal como hidróxido de sodio diluido o cualquier otro álcali adecuado para incrementar el pH del material de partida vegetal que contiene pectina sobre 4.0, de preferencia a 4.5-6.0 y más preferiblemente 4.5-5.5. Alternativamente, el material de partida vegetal que contiene pectina lavado con ácido seco o húmedo se puede suspender en el álcali diluido. La temperatura se elige como la temperatura óptima de la esterasa de planta, que está en el rango de 40-80 °C, de preferencia 50-70°C y más preferiblemente 60-70°C, y el tiempo se elige para alcanzar la desesterificación compacta deseada. Dependiendo de la temperatura, el tiempo varia de aproximadamente 1 hora a temperaturas elevadas a varias horas a temperaturas inferiores . La presente invención también se relaciona con la pectina extraída del material de partida vegetal que contiene pectina tratada. De este modo, al tratar el material de partida vegetal que contiene pectina de acuerdo con la presente invención resulta en pectina con baja sensibilidad al calcio. De hecho, la sensibilidad al calcio, cuando se mide como la relación de la resistencia a la ruptura entre un gel hecho con iones de calcio agregados y un gel hecho sin iones de calcio agregados en el rango de 0.90-1.40, de preferencia 0.90-1.20 y más preferiblemente 0.90-1.10. Esta mejora de la sensibilidad del calcio es particularmente útil para la pectina hecha de naranja, toronja y betabel. Además, la pectina es de un peso molecular más elevado que la pectina, que no experimenta el tratamiento de la presente invención. El peso molecular se incrementa por hasta 50%, con frecuencia por 10-40% y usualmente por 15-30%. El incremento en peso molecular se pronuncia particularmente cuando se utilizan naranja, toronja y betabel. Además, la USA SAG tradicional (re definición de la misma, véase posteriormente) de la pectina se incrementa. Al tratar el material de partida vegetal que contiene pectina de acuerdo con la presente invención, la USA SAG se incrementa por hasta 30%, más frecuentemente por hasta 5-25% y usualmente por 10-20%. El incremento en USA SAG se pronuncia particularmente cuando se utiliza naranja, toronja y betabel. La presente invención también se relaciona al uso del material de partida vegetal que contiene pectina tratada en la fabricación de pectina, en la fabricación de alimentos para animales y para uso en comestibles. La presente invención se relaciona también los usos de la pectina. Los usos incluyen comestibles, productos cosméticos, productos farmacéuticos y productos domésticos. La pectina de acuerdo con la presente invención es particularmente útil para hacer mermeladas y jaleas, para productos de panadería incluyendo mermeladas y pastas, ya sea laminadas o no, bebidas con proteínas acidificadas, preparaciones para el cuidado de heridas, productos de ostomia, etc.

Materiales y Métodos • Extracción de Pectina En esta solicitud, la pectina se extrae utilizando las siguientes etapas: 1. 15 litros de agua se calientan a 70 °C en un recipiente encamisado, de acero inoxidable que tiene un volumen de 18 litros y equipada con un agitador. 2. 500 g de cáscara se agregan al agua, el pH se ajusta a 1.7-1.8 por la adición de 62% de ácido nítrico. 3. la extracción se lleva a cabo a 70°C durante 7 horas mientras se agita. 4. Después de la extracción, el contenido del recipiente se filtra en un embudo Bücher utilizando tierra diatomácea como auxiliar de filtro. 5. El extracto filtrado se realizó por intercambio iónico mientras se agita agregando 50 mi de resina (Amberlite SR1L, producida por Rohm&Haas) por litro de extracto filtrado. Mientras se agita, el intercambio iónico se lleva a cabo durante 20 minutos mientras se agita. 6. El filtrado de intercambio iónico se filtra en un embudo Bücher equipado con una tela. 7. El filtrado de intercambio iónico filtrado se precipita agregándolo a tres partes de 80% de isopropanol mientras se agita suavemente. 8. El precipitado se recolecta en una tela de nylon y se prensa a mano para remover tanto isopropanol como sea posible . 9. El precipitado prensado a mano se lava una vez en 60% de isopropanol y luego se seca a 70 °C en un gabinete de secado a presión atmosférica. 10. Después del secado, la pectina se muele.

• Resistencia a la Ruptura y temperatura IPPA a 65% de SS para H -pectina (fraguado lento) Se mide la resistencia a la ruptura en Texture Analyser (TA-XT2) en una jalea sintética a 65% de SS y pH 3.0. Se mide la resistencia a la ruptura en un nivel de calcio de 0 ppm de Ca2+ (ruptura de -Ca2+) y 90 ppm de Ca2+ (ruptura + Ca2+) .

Aparatos : 1. Balanza (carga máxima 3-6 kg) 2. Vaso de precipitados de vidrio (1000 mi), 2 piezas 3. Matraz de medición, (1000 mi), 2 piezas 4. Agitador magnético 5. Mezclador de Velocidad Elevada 6. Plancha Eléctrica, de 15 cm de diámetro, 1500 W 7. Cacerola, de acero inoxidable, 1.5 litros 8. Cucharón 9. Agitador a 500 rpm 10. Eje del agitador (HETO, articulo no. 000240, dibujo no. 0004259) 11. Pipeta 12. Baño María controlado termostáticamente Haake D-8-G 13. Recipientes de muestra de acero (diámetro interno de 50 mm, altura interior 74 mm) con tapas 14. Platos Petri (fondo) diámetro: 61 mm, altura 9 mm 15. Tapas para los platos petri 16. Gabinete de calentamiento a 25 °C + 2°C 17. Cinta Adhesiva 18. Rebanador de alambre de queso 19. Analizador de Textura tipo TA-XT2 20. Refractómetro 21. Medidor de pH 22. Cronómetro 23. Computador con Windows 24. Impresora 25. Programa de computador para la determinación de la temperatura de IPPA. El software está disponible de CPKelco.

Solución regulada NO. 1 (+Ca2+) : Citrato-monohidrato de potasio, K3CgH507 , ¾0 : 3.933 g Citrato-tetrahidrato de calcio, Ca3 (C6H507) 2, 4H20: 1.898 g Benzoato de sodio, C7Hs a02 : 1.000 g Monohidrato del ácido cítrico, C6H807, H20, 50% (peso/volumen): 25 mi (aprox.) Se disuelve en la secuencia mencionada en 900 mi de agua desionizada, se agrega ácido cítrico mientras se agita hasta que se disuelve el citrato de calcio. Se ajusta el pH a 3.4-3.5 con ácido cítrico y se transfiere cuantitativamente en un matraz de medición de 1000 mi el cual se llena hasta la marca con agua desionizada. Solución regulada No. 2 (-Ca2+) : Citrato-monohidrato de potasio, K3C6H507, H20: 3.933 g Benzoato de sodio, C7H5Na02 : 1.000 g Monohidrato del ácido cítrico, C6H807, ¾0, 50% (peso/volumen) : 18 mi (aprox.) Se disuelve como solución regulada No. 1. Solución de ácido cítrico, 50% peso/volumen: Monohidrato del ácido cítrico, C6H807, H20: 500 g Se disuelve el ácido cítrico en agua desionizada y se llena con agua desionizada a un total de 1000 mi. Solución de pectina: Agua en ebullición, desionizada: 380 mi Pectina (USA-SAG de grado 150) : x g Se pesa el agua y se agrega lentamente la pectina en el mezclado de velocidad elevada a. la velocidad 1. Después de la adición la velocidad se incrementa a velocidad 3 durante 5 minutos . Se enfria la solución a temperatura ambiente y se pesa a 400 g y se mezcla en un mezclador a velocidad elevada. Se pesan 121 g de pectina en un vaso de precipitados de vidrio de 250 mi. Cálculo de x g de pectina: (8.7 x 150) / (USA-SAG de grado asumido) = x g Fórmula: % de sólidos solubles: 65.0 ± 0.5 pH: 3.0 + 0.05 Gel + Ca2+: Solución Regulada No. 1 135 g Azúcar: 385 g Solución de Pectina: 120 g Solución de ácido cítrico, aproximadamente 50% (peso/volumen) : 3 mi (cantidad sugerida) Total, aproximadamente: 643 g Evaporación, aproximadamente: 43 g Rendimiento final : 600 g Gel-Ca2+: Solución regulada No. 2: 135 g Azúcar: 385 g Solución de pectina: 120 g Solución de ácido cítrico, aproximadamente 50% (peso/volumen) : 2.5 mi (cantidad sugerida) Total, aproximadamente: 642.5 g Evaporación, aproximadamente: 42.5 g Rendimiento final: 600 g Procedimiento : La determinación de la temperatura IPPA (desarrollada en CP Kelco) y .a preparación de la solución de muestra con o sin calcio: 1. Iniciar el programa, ütili ar los siguientes parámetros: • Temperatura de inicio: 95°C • Temperatura final: 15°C · Gradiente de temperatura l°C/minutos • Ingresar el nombre del archivo 2. Llenar agua desionizada en un recipiente metálico y colocarlo en el Baño María controlado termostáticamente Haake D-8-G. 3. Colocar el sensor de referencia en la mitad del recipiente y presionar INICIO. El Baño maría se calentará ahora a temperatura de inicio. 4. Pesar la solución regulada en una cacerola cubierta de brea (16 cm de diámetro, altura interior de 7.5 cm) . Agregar azúcar e iniciar el cronómetro. Calentar el hervidor mientras se agita (500 rpm) . 5. Agregar solución de pectina a partir del vaso de precipitados de vidrio de 250 mi (120 g) y raspar (resto en el vaso de precipitados de aproximadamente 1 g) y continuar la ebullición y agitación. 6. Ebullición continua durante 1 minuto. 7. Agregar cantidad calculada de solución de ácido cítrico. Continuar la ebullición y agitación durante 30 segundos. 8. Pesar hasta 600 g con agua desionizada o ebullir hasta evaporar. (en la práctica ligeramente más agua puede agregarse para alcanzar los sólidos solubles correctos) . 9. Remover la cacerola del calor y agitar utilizando un cucharón. Dejar durante 20 segundos antes de remover cualquier espuma. 10. Llenar dos recipientes de muestra (con tapas) para el baño maria termostáticamente controlado Haake D-8-G, y colocar los sensores a la mitad de los recipientes. Activar el botón verde PRESIONAR PARA CONTINUAR. Una vez que la diferencia de temperatura ha caido a menos de 2C, inicia el enfriamiento. Finalmente, la computadora calculará la temperatura de gelificación.

Determinación de resistencia a la ruptura: 1. Llenar inmediatamente después de la etapa 7, 3 platos petri (parte de fondo) (61 mm de diámetro, 9 MI de altura), todos equipados con corteza de cinta. 2. Cubrir los platos petri con tapas para evitar el secado del gel en reposo. 3. Dejar las jaleas durante 18-24 horas a 25 °C ± 2°C antes de medir la resistencia a la ruptura. Ruptura : 1. Remover la corteza de la cinta y cortar la parte superior de la jalea con un nivel de rebanador de alambre de queso con el borde del plato petri. 2. Medir la resistencia a la ruptura en TA-XT2 • Distancia de émbolo: 6 mm • Diámetro del émbolo: 12.7 mm • Velocidad del émbolo: 0.5 mm/s 3. Establecer los resultados como los promedios de las tres jaleas con Ca2+ y las tres jaleas sin Ca2+, respectivamente (ruptura +Ca) y (ruptura -Ca) 4. Medir los sólidos solubles. Pueden medirse en recipientes metálicos de temperatura de IPPA. Los sólidos solubles deben ser 64.5-65.5%. De otra manera, la prueba debe repetirse. 5. Medir el pH. Esto debe ser 2.95-3.05. De otra manera, la prueba debe repetirse con cantidad ajustada de ácido cítrico, véase apéndice. Notas : Ajustar el pH si está fuera del rango para análisis La cantidad de ácido cítrico en mi puede calcularse de acuerdo con las siguientes fórmulas si la composición de pectina se conoce: x = pH en una solución al 1%. Con calcio: Pectinas de limón y lima: 50% de solución de ácido cítrico = 0.0094x2 + 0.8926x + 0.2004 Pectinas de naranja: 50% de solución de ácido cítrico = 1.1364x2-6.7409x + 12.775 Sin calcio: Pectinas de limón y lima: 50% de solución de ácido cítrico = 0.0671x2 + 0.4573X + 0.8023 Pectinas de naranja: 50% de solución de ácido cítrico = 2.2727x2-14.482x + 25.551 Se sugiere únicamente la cantidad de ácido cítrico.

El pH en el producto final decide la cantidad de ácido cítrico agregada. Las fórmulas para calcular la cantidad de 50% de solución de ácido cítrico han sido generadas a través del retroceso de un número sustancial de muestras.

• Resistencia a la Ruptura y Temperatura de IPPA a 60% de SS para HM-pectina (fraguado rápido) Principio Se mide la resistencia a la ruptura en un Analizador de Textura (TA-XT2) en una jalea sintética a 60% de SS y pH 3.0. Se mide la resistencia a la ruptura en un nivel de calcio de 0 ppm de Ca2+ (ruptura -Ca2+) y 90 ppm de Ca2+ (ruptura +Ca2+) . Aparatos : 1. Balanza carga máxima 3-6 kg 2. Vasos de laboratorio de vidrio (1000 mi), 2 piezas 3. Matraz de medición, (1000 mi), 2 piezas 4. Agitador magnético 5. Mezclador de Velocidad Elevada 6. Plancha Eléctrica, diámetro: 15 cm, 1500 W 7. Cacerola, de acero inoxidable, 1.5 litros 8. Agitador a 500 rpm 9. Agitador a 500 rpm 10. Eje del agitador (HETO, artículo no. 000240, dibujo no. 0004259) 11. Pipeta 12. Baño María controlado termostáticamente Haake D-8-G 13. Recipientes de muestra de acero (diámetro interno de 50 mm, altura interior 74 mm) con tapas 14. Platos Petri (fondo) diámetro: 61 mm, altura 9 mm 15. Tapas para los platos petri 16. Gabinete de calentamiento a 25°C ± 2°C 17. Cinta Adhesiva 18. Rebanador de alambre de queso 19. Analizador de Textura tipo TA-XT2 20. Refractómetro 21. Medidor de pH 22. Cronómetro 23. Computadora con Windows 24. Impresora 25. Programa de computadora para la determinación de la temperatura de IPPA (desarrollado por CP Kelco) . Solución regulada No. 1 (+Ca2+) : Citrato-monohidrato de potasio, K3C6H507, H20: 3.933 g Citrato-tetrahidrato de calcio, Ca3 (C5H507) 2, 4H20: 1.898 g Benzoato de sodio, C7HsNa02: 1.000 g Monohidrato del ácido cítrico, C6H807, H20, 50% (peso/volumen): 25 mi (aprox.) Se disuelve en la secuencia mencionada 900 mi de agua desionizada y se transfiere cuantitativamente a un matraz de medición de 1000 mi el cual se llena hasta la marca con agua desionizada. La solución de pH debe ser 3.4-3.5.

Solución regulada No. 2 (-Ca ) : Citrato-monohidrato de potasio, K3C6H507, H20: 3.933 g Benzoato de sodio, C7H5NaC>2: 1.000 g Monohidrato del ácido cítrico, C6H807, H20, 50% (peso/volumen) : 18 mi (aprox.) Disuelta como No. 1. Solución de ácido cítrico, 50% peso/volumen: Monohidrato del ácido cítrico, C6H807, H2O: 500 g Se disuelve el ácido cítrico en agua desionizada y se llena con agua desionizada a un total de 1000 mi. Solución de pectina: Agua en ebullición, desionizada: 380 mi Pectina (USA-SAG de grado 150) : x g Se disuelve pectina en un mezclador a velocidad elevada durante 5 minutos. Se enfría la solución a temperatura ambiente y se pesa a 400 g y se mezcla en un mezclador a velocidad elevada. Se pesan 121 g de la solución de pectina en un vaso de precipitados de vidrio de 250 mi. Cálculo de x g de pectina: (8.7 x 150) / (USA-SAG de grado asumido) = x g Fórmula : % de sólidos solubles: 60.0 ± 0.5 pH: 3.0 + 0.05 Gel + Ca2+: Solución Regulada No. 1: 135 g Azúcar: 355 g Agua desionizada: 30 g Solución de Pectina: 120 g Solución de ácido cítrico, aproximadamente 50% (peso/volumen) : 3 mi (cantidad sugerida) Total: 643 g (aproximadamente) Evaporación: 43 g (aproximadamente) Rendimiento final: 600 g Gel-Ca2+: Solución regulada No. 2: 135 Azúcar: 355 Agua desionizada: 30 Solución de pectina: 120 Solución de ácido cítrico, aproximadamente 50% (peso/volumen) : 2.5 mi (cantidad sugerida) Total : 642.5 g (aproximadamente) Evaporación: 42.5 g (aproximadamente) Rendimiento final: 600 g Procedimiento : La determinación de la temperatura IPPA, la cual es la temperatura de gelificacion del gel hecho de acuerdo con la composición anterior y la preparación de la solución de muestra con y sin calcio: 1. Iniciar el programa. Utilizar los siguientes parámetros: • Temperatura de inicio: 95°C • Temperatura final: 15°C • Gradiente de temperatura: l°C/minutos • Ingresar el nombre del archivo 2. Llenar agua desionizada en un recipiente metálico y colocarlo en el Baño María controlado termostáticamente Haake D-8-G. 3. Colocar el sensor de referencia en la mitad del recipiente y presionar INICIO. El Baño maría se calentará ahora a temperatura de inicio. 4. Pesar la solución regulada en una cacerola cubierta de brea (16 cm de diámetro, altura interior de 7.5 cm) . Agregar azúcar e iniciar el cronómetro. Calentar el hervidor mientras se agita (500 rpm) . 5. Agregar solución de pectina a partir del vaso de precipitados de vidrio de 250 mi (120 g) y raspar (resto en el vaso de precipitados de aproximadamente 1 g) y continuar la ebullición y agitación. 6. La ebullición continúa durante 1 minuto. 7. Agregar una cantidad calculada de solución de ácido cítrico. Continuar la ebullición y agitación durante 30 segundos . 8. Pesar hasta 600 g con agua desionizada o ebullir hasta evaporar. (en la práctica ligeramente más agua puede agregarse para alcanzar los sólidos solubles correctos) . 9. Remover la cacerola del calor y agitar utilizando un cucharón. Dejar durante 20 segundos antes de remover cualquier espuma. 10. Llenar dos recipientes de muestra con tapas para el baño maria termostáticamente controlado Haake D-8-G, y colocar los sensores a la mitad de los recipientes. Activar el botón verde PRESIONAR PARA CONTINUAR. Una vez que la diferencia de temperatura ha caído a menos de 2C, inicia el enf iamiento. Finalmente, la computadora calculará la temperatura de gelificación. Determinación de resistencia a la ruptura: 1. Llenar inmediatamente después de la etapa 7, 3 platos petri (parte de fondo) (61 mm de diámetro, 9 mm de altura), todos equipados con corteza de cinta. 2. Cubrir los platos petri con tapas para evitar el secado del gel en reposo. 3. Dejar las jaleas durante 18-24 horas a 25°C ± 2°C antes de medir la resistencia a la ruptura. Ruptura : 1. Remover la corteza de la cinta y cortar la parte superior de la jalea con un nivel de rebanador de alambre de queso con el borde del plato petri. 2. Medir la resistencia a la ruptura en TA-XT2 • Distancia de émbolo: 6 mm • Diámetro del émbolo: 12.7 mm • Velocidad del émbolo: 0.5 mm/s 3. Establecer los resultados como los promedios de las tres jaleas con Ca2+ y las tres jaleas sin Ca2+, respectivamente (ruptura +Ca) y (fractura -Ca) 4. Medir los sólidos solubles. Pueden medirse en recipientes metálicos de temperatura de IPPA. Los sólidos solubles deben ser 59.5-60.5. De otra manera, la prueba debe repetirse. 5. Medir el pH. Este debe ser 2.95-3.05. De otra manera, la prueba debe repetirse con cantidad ajustada de ácido cítrico, véase apéndice. Notas : Ajustar el pH si está fuera del rango para análisis La cantidad de ácido cítrico en mi puede calcularse de acuerdo con las siguientes fórmulas si la composición de pectina se conoce: x = pH en una solución al 1%. Con calcio: Pectinas de limón y lima: 50% de solución de ácido cítrico = 0.0094x2 + 0.8926 x 0.2004 Pectinas de naranja: 50% de solución de ácido cítrico = 1.1364x2-6.7409 x + 12.775. Sin calcio: Pectinas de limón y lima: 50% de solución de ácido cítrico -0.0671x2 + 0.4573x + 0.8023 Pectinas de naranja: 50% de solución de ácido cítrico = 2.2727x2-14.482x + 25.551 La cantidad de ácido cítrico se sugiere únicamente. El pH en el producto final decide la cantidad de ácido cítrico agregada. Las fórmulas para calcular la cantidad de 50% de solución de ácido cítrico han sido generadas a través del retroceso de un número sustancial de muestras.

• Determinación del grado de USA SA6 de pecbina de éster elevado Principio : El método de grado USA SAG es un método, el cual expresa directamente la capacidad de adhesión del azúcar de la pectina. El método asume un gel que contiene 65% de sólidos solubles en un pH de 2.2-2.4, y que estos hundimientos de gel al 23.5%. El método requiere que se haga un rango de geles que contengan diferentes concentraciones de pectina. Para un gel, el cual cumple los requerimientos, la relación entre la pectina y el azúcar se calcula. Si esta relación es 1:150, la pectina es USA SAG de 150 grados. Aparatos : 1. Balanza analítica 2. Báscula de Laboratorio (carga máxima 3-5 kg, precisión de 0.2 g) 3. Cacerola de acero inoxidable, 1.51, 15 cm de diámetro 4. Plancha Eléctrica, 15 cm de diámetro, 1500 W 5. Motor agitador, velocidad ajustable 500-1000 rpm 6. Perno agitador (HETO; articulo No. 000240, dibujo No. 0004259) 7. Vasos de laboratorio (1000 mi y 150 mi) 8. Espátula 9. Cronómetro 10. Termómetro, 100 °C 11. Medidor de pH 12. Vasos de SAG y cinta 13. Ridgelimeter 14. Rebanador de queso de alambre 15. Refractómetro 16. Incubador Químicos: Azúcar Ácido tartárico (solución de 488 g por litro) Agua desionizada Preparación de jalea: 1. Pesar en 1000 mi del vaso de precipitados 650/(650-x) g de azúcar (x = firmeza asumida de pectina) . 2. Transferir 20-30 g del azúcar pesada en un vaso de precipitados de 150 mi seco y agregar la muestra de pectina pesada (el peso de pectina para utilizarse en una jalea se expresa como: 650 g/grado asumido) . 3. Mezclar la pectina y el azúcar completamente en el vaso de precipitados agitando con espátula. 4. Verter 410 mi de agua desionizada/destilada en la cacerola de acero inoxidable, embetunada 1500 mi, y colocar el perno agitador en éste. Verter la mezcla de pectina/azúcar en agua -toda de una vez- mientras se agita a 1000 rpm. La agitación continúa durante dos minutos (es importante tan rápidamente como sea posible sumergir la solución de pectina/azúcar en el agua y transferir cualesquiera trazas de pectina/azúcar en el vaso de precipitados pequeño a la cacerola) . 5. Después de 2 minutos, colocar la cacerola en la plancha eléctrica pre-calentada, y agitar a 500 rpm. 6. Cuando los contenidos alcanzan un punto de ebullición circulante completo, agregar el azúcar restante y continuar el calentamiento y agitación hasta que se disuelva el azúcar y hasta que el peso neto del baño del lote de jalea sea 1015 g. 7. La plancha eléctrica debe establecerse de manera que el tiempo de calentamiento completo para la jalea sea 5-8 minutos (carga total, 1500 W) . 8. Después de pesar el lote de 1015 g en la báscula de laboratorio, dejarlo reposar en la tabla durante un minuto. Luego volcar la cacerola, de manera que los contenidos estén casi por derramarse, y descremar rápidamente de cualquier espuma. Colocar el termómetro en el lote y continuar agitando suavemente hasta que la temperatura alcanza exactamente 95 C. 9. Verter rápidamente el lote en dos vasos SAG previamente preparados cada uno conteniendo 1.75-2.25 mi de solución de ácido tartárico y equipado con cinta adhesiva permitiendo llegar a aproximadamente 1 cm sobre los bordes. 10. Después de 15 minutos, cubrir los vasos con tapas, y cuando la temperatura alcanza 30-35°C, colocar los vasos en un incubador a 25 ± 3°C durante 20-24 horas. Medición : 1. Después de 20-24 horas de almacenamiento de las jaleas, remover las tapas de los vasos y remover la cinta. Utilizar un rebanador de queso de alambre, cortar la capa superior y desechar . 2. Luego voltear cuidadosamente la jalea fuera del vaso a una posición invertida en una placa de vidrio cuadrada abastecida con Ridgelimeter . 3. Iniciar el cronometraje una vez que la jalea está en la placa de vidrio. Si la jalea se reclina ligeramente a un lado, esta puede usualmente corregirse ladeando suavemente la placa de vidrio en la otra dirección. 4. Colocar la placa y la jalea cuidadosamente en la base del Ridgelimeter de manera que la jalea se centre bajo el tornillo de micrómetro, que debe atornillarse entonces cerca de la superficie de la jalea. 5. Dos minutos después que se inicia el cronometraje, poner el punto del tornillo del micrómetro en contacto con la superficie de la jalea y registrar la lectura de Ridgelimeter a 0.1 adyacente. 6. Medir el pH si el gel SAG se pierde o es atipico para inspección visual de manejo. El pH debe estar entre 2.2 y 2.4. De otra manera, la muestra debe volverse a examinar. Cálculo del grado de jalea de la pectina: 1. Utilizar la tabla de calibre Ridgelimeter, convertir la lectura de Ridgelimeter a un Factor 1 (véase la Figura 1) . 2. Utilizar la tabla para corregir sólidos solubles, los sólidos solubles medidos se convierten en un Factor 2 (véase la figura 2) . 3. Cuando se multiplica el grado asumido de la prueba por los factores de corrección, se obtiene el grado verdadero. · Grado asumido x Factor 1 x Factor 2 = grado verdadero Porcentaje SAG Porcentaje SAG Porcentaje SAG de lectura Factor 1 de lectura Factor 1 de lectura Factor 1 idgelimiter Ridgelimiter Ridgelimiter 19.0 1.2Q0 22.0 1.0B7 25.0 0.936 19.1 1.195 22.1 1.082 25.1 0,933 19.2 1.190 22.2 1.057 25.2 0.928 19.3 1.186 223 1.054 25-3 0.925 19.4 1.182 22.4 1.048 25.4 0.921 19.5 1.177 22.5 1.044 25.5 0.917 19.6 1-173 22.6 1.040 25.6 0.913 19.7 1.168 22.7 1.035 25,7 0.910 19.8 1.163 228 1.031 25.8 O.906 19.9 1-158 22.9 t.027 25.9 0.9Q2 20.0 1.155 23.0 1.022 26.0 0.898 20.1 1.150 23.1 1.018 26.1 0.895 20.2 1.146 23.2 1.013 26.2 0.892 20.3 1.142 23.3 1.009 26.3 0.8T8 20.4 1.137 23.4 1.0D5 26.4 0.885 20.5 1.133 :?:::·::235·:?:·;::·:: ¾·???00:¾:;¾· 26.5 0.881 20.6 1.128 23.6 099 26.6 0.878 " 20,7 1.124 23.7 0.992 26.7 0.875 20.8 1.120 23.8 0.987 26.8 0.872 205 1.115 23.9 0.983 26.9 0.868 21.0 1.110 24.0 0.978 27.0 0-864 21.1 1.107 24.1 0.974 27.1 0.882 21.2 1.102 24.2 0.969 27.2 0.859 21.3 1-097 24.3 0.965 27.3 0.856 21.4 1.093 24.4 0.960 27.4 0.853 21.5 1.088 24.5 0.957 27.5 0.850 21.6 1.084 24.6 0.953 27.6 0.847 21.7 1.080 24.7 0.948 27.7 0.844 21.8 1.076 24.8 0-944 27.8 0.842 21.9 1.072 24.9 0,940 27.9 0.838 Figura 1.: Tabla de calibración Ridgelimeter Los Valores de Correlación para Análisis SAG "Intercambiados" Figura 2. Valores de Correlación • Determinación de peso molecular para pectina Principio : Se estima el peso molecular midiendo la viscosidad relativa de una solución de pectina al 0.1% utilizando Na-hexametafosfato . Aparato: 1. Viscosimetro Witeg-Ostwald o similar (dos minutos) con 100 a 150 segundos. Tiempo de evacuación para el agua (25°C) . 2. Baño María termostático transparente, 25°C + 0.3°C. 3. Cronómetro Digital. Reactivos : 1. Solución de Na-hexametafosfato: a) Se disuelve 20.0 g de Na-hexametafosfato en 1800 mi de agua desaireada de intercambio iónico (hervida) . b) el pH se ajusta a 4.50 ± 0.05 con 1 M de HC1. c) La solución se diluye con agua desaireada de intercambio iónico, (hervida) hasta 2000 mi) . Procedimiento : 1. Los viscómetros utilizados deben limpiarse como se establece en la sección: Limpieza/Mantenimiento de viscómetros . 2. Se mide el tiempo de evacuación para solución de hexametafosfato (sección: medición de tiempo de evacuación) en los viscosímetros utilizados para cada vez una nueva solución de hexametafosfato se prepara y para cada nuevo día de trabajo en donde las soluciones de pectina se miden. Inmediatamente antes de medir la cantidad necesaria de solución de hexametafosfato, se filtra a través de un filtro de vidrio #3. 3. El sistema de muestra de pectina para la determinación de peso molecular se hace como sigue: a) Lavar con ácido la pectina como se describe en el método para la determinación de AGA y DE (Método NO. 378 del Control GENU) . b) Aproximadamente 90 g de solución de hexametafosfato se pesan en un vaso de precipitados embarrado con imán, c) Calentar la solución a 70°C mientras se agita. Mantener la agitación hasta que la pectina se disuelva completamente, e) Enfriar la solución a 25°C. f) Pesar a 100.0 g con solución de hexametafosfato . g) Filtrar a través de un filtro de vidrio # 3. 4. Para cada determinación de peso molecular se mide el tiempo de evacuación (sección: Medir el tiempo de evacuación) para la solución de pectina/hexametafosfato en dos diferentes viscómetros. 5. El peso molecular se calcula (sección: Cálculo) de manera separada para cada viscómetro utilizando el último tiempo de evacuación medido para la solución de hexametafosfato en el viscómetro en cuestión. 6. Debe ser menor la diferencia entre dos pesos moleculares calculados que 3500 el valor promedio se calcula. Redondear el valor del múltiplo más cercano de 1000 y ese será el resultado del método. 7. Debe ser la diferencia entre los dos pesos moleculares calculados 3,500 o más, los viscómetros deben limpiarse y una nueva medición de tiempo de evacuación para solución de exametafosfato debe realizarse. Medición del tiempo de evacuación: 1. El viscómetro se enjuaga dos veces con la muestra. 2. Verter 5.00 mi de la muestra en el viscómetro y colocarlo en el baño maria termostático a 25.0°C ± 0.3°C al menos 15 minutos antes de la medición. 3. Se mide el tiempo en dos evacuaciones. La diferencia entre los tiempos debe ser más de x segundos, la medida se repite hasta que tengan dos mediciones consecutivas las cuales difieren no más de x segundos. • x = 0.2 segundos en la medición de solución de hexametafosfato . • x = 0.4 segundos en la medición de muestras 4. El tiempo de evacuación que se necesita para cálculos adicionales es el valor promedio de los dos o tres resultados de medición idénticos o casi idénticos. Limpieza/Mantenimiento de los viscómetros: 1. Haber completado el trabajo: enjuagar una vez con agua de intercambio iónico y luego una vez con 1 M de HCl. 2. Remojar entre los días de trabajo: 1 M de HCl. 3. Nuevo dia de trabajo antes de la medición: enjuagar dos veces en el agua de intercambio iónico (no desaireada) (hervida) ) . 4. Obstructor: enjuagar cuidadosamente con un alambre de cobre delgado. Cálculo : Se calcula la viscosidad relativa, como sigue: Nr = {t0-( /t0) }/{th-(K/th) }, En donde to y t¾ son tiempos de evacuación para la solución de pectina y solución de hexametafosfato, respectivamente. El parámetro puede con suficiente exactitud fijarse a 107 s2 utilizando viscosimetro Witeg-Ostwald. De otra manera, K puede calcularse como sigue: K = {Q x tv2}/{Q + (0.226 X L x tv) } , En donde Q = volumen de la bombilla del viscómetro en cm3, L = longitud de tubo capilar en cm y tv = tiempo de evacuación para agua en segundos . El peso molecular, Mw, de pectina se calcula como sigue: w = { (nr1 p-l) x P}/k x C, En donde P se fija a 6 y k se fija a 4.7 " 10"5 moles x g-1; C es el porcentaje en peso de pectina en el sistema de muestra-es decir, 0.1% con los valores numéricos insertados, se obtiene : M = 1.277 · 106 (nf 1/6-1) g/moles.

Literatura : Povl E. Christensen: Los Métodos de Graduación de Pectina en Relación al Peso Molecular (Viscosidad Intrínseca) de la Pectina. Food Research, vol. 19, p. 163-171 (1954) . Christian J.B. Smit and Edwin F. Bryant: Propiedades de Fracciones de Pectina Separadas en Columnas de Dietilaminoetilcelulosa . Journal of Food Science, vol. 32, p. 197-199 (1967) • Determinación del grado de esterificacion (DE) y ácido galacturónico (GA) en pectina sin amida Principio: Este método pertenece a la determinación del % de DE y % de GA en pectina, el cual no contiene amida y éster de acetato . Aparatos : 1. Balanza analítica 2. Vaso de precipitados de vidrio, 250 mi, 5 piezas 3. Vaso de medición, 100 mi 4. Bomba de vacío 5. Matraz de succión 6. Filtro de vidrio de crisol no. 1 (embudo Büchner y papel filtro) 7. Cronómetro 8. Tubo de prueba 9. Gabinete de secado a 105 °C 10. Desecador 11. Agitador magnético e imanes 12. Bureta (10 mi, exactitud ± 0.05 mi) 13. Pipetas (20 mi: 2 piezas, 10 mi; 1 pieza) 14. Medidor de pH/autobureta o fenolftaleina Químicos : 1. Agua libre de dióxido de carbono (agua desionizada) 2. Isopropanol (IPA) , 60% y 100% 3. Clorhidrato (HCl) , 0.5 N y 37% humeante 4. Hidróxido de sodio (NaOH) , 0.1 N (corregido a cuatro fracciones, por ejemplo 0.1002), 0.5 N 5. Nitrato de plata (AgN03) , 0.1 N 6. Ácido nítrico (HN03) 3 N 7. Indicador, fenolf aleina, 0.1% Procedimiento-Determinación de % de DE y % de GA (alcohol acídico: 100 mi del 60% de IPA + 5 mi de HCl 37% humeante) : 1. Pesar 2.0000 g de pectina en un vaso de precipitados de vidrio de 250 mi 2. Agregar 100 mi de alcohol acídico y agitar en un agitador magnético durante 10 minutos. 3. Filtrar a través de un crisol de filtro de vidrio pesado, seco. 4. Enjuagar el vaso de precipitados completamente con 6 x 15 mi de alcohol acidice 5. Lavar con 60% de IPA hasta que el filtrado esté libre de cloruro* (aproximadamente 500 mi) . 6. Lavar con 20 mi de 100% de IPA. 7. Secar la muestra durante 2 ¾ horas a 105°C. 8. Pesar el crisol después de secar y enfriar en un desecador . 9. Pesar exactamente 0.4000 g de la muestra en un vaso de precipitados de 250 mi. 10. Pesar dos muestras para doble determinación. La desviación entre la doble determinación debe ser máximo de 1.5% absoluto. Si la desviación excede 1.5% la prueba debe repetirse . 11. Humectar la pectina con aproximadamente 2 mi de 100% de IPA y agregar aproximadamente 100 mi de agua desionizada libre de dióxido de carbono mientras se agita en un agitador magnético . * (Prueba de cloruro: Transferir aproximadamente 10 mi del filtrado al tubo de prueba, agregar aproximadamente 3 mi de 3 N HNO3, y agregar unas pocas gotas de AgN03. El filtrado estará libre de cloruro si la solución es clara, de otra manera existirá una precipitación de cloruro de plata) . La muestra está ahora lista para titulación, ya sea por medio de un indicador o utilizando un medidor de pH/autobureta . Procedimiento-Determinación del % de DE únicamente (Alcohol acidico: 100 mi de 60% de IPA + 5 mi de HC1 37% humeante) : 1. Pesar 2.00 g de pectina en un vaso de precipitados de vidrio de 250 mi. 2. Agregar 100 mi de alcohol acidico y agitar en un agitador magnético durante 10 minutos. 3. Filtrar a través de un embudo Büchner con el papel de filtro. 4. Enjuagar el vaso de precipitados con 90 mi del alcohol acidico . 5. Lavar con 1000 mi de 60% de IPA. 6. Lavar con aproximadamente 30 mi de 100% de IPA. 7. Secar la muestra durante aproximadamente 15 minutos en el embudo Büchner con succión al vacio. 8. Pesar aproximadamente 0.40 g de la muestra en un vaso de laboratorio de vidrio de 250 mi. 9. Pesar dos muestras para doble determinación. La desviación entre las dobles determinaciones debe ser máximo de 1.5% absoluta. Si la desviación excede 1.5% la prueba debe repetirse . 10. Humectar la pectina con aproximadamente 2 mi de 100% de IPA y agregar aproximadamente 100 mi de agua desionizada mientras se agita en un agitador magnético.

La muestra está ahora lista para titulación, ya sea por medio de un indicador o utilizando un medidor de pH/autobureta . Nota: Es muy importante que las muestras con % de DE <10% se titulen muy lentamente, ya que la muestra se disolverá únicamente de manera lenta durante la titulación. Titulación utilizando un indicador: 1. Agregar 5 gotas del indicador de fenolftaleina y titular con 0.1 N de NaOH hasta que cambie de color (registrado como titulo VI) . 2. Agregar 20.00 mi de 0.5 N de NaOH, mientras se agita. Dejar reposar durante exactamente 15 minutos. Cuando se reposa la muestra se debe cubrir con una lámina. 3. Agregar 20.00 mi de 0.5 N de HCl mientras se agita y hasta que el color desaparece. 4. Agregar 3 gotas de fenolftaleina y titular con 0.1 N de NaOH hasta el cambio de color (registrado como titulo V2) . Prueba Ciega (Se lleva a cabo la doble determinación) : Agregar 5 gotas de fenolftaleina a 100 mi de dióxido de carbono libre o agua desionizada (el mismo tipo como el utilizado para la muestra) , y titular en un vaso de precipitados de vidrio de 250 mi con 0.1 N NaOH hasta que cambia de color (1-2 gotas) . Agregar 20.00 mi de 0.5 N de NaOH y dejar la muestra reposar sin tocar durante exactamente 15 minutos. Cuando se reposa la muestra debe cubrirse con una lámina. Agregar 20.00 mi de 0.5 N HC1 y 3 gotas de fenolftaleina, y titular hasta el cambio de color con 0.1 N de NaOH (registrado como Bl) . La cantidad máxima permitida para la titulación es 1 mi de 0.1 N de NaOH: Si se titula con más de 1 mi, 0.5 N de HC1 debe diluirse con una pequeña cantidad de agua desionizada. Si la muestra ha mostrado cambio de color en adición de 0.5 N de HC1, 0.5 N de NaOH debe diluirse con una pequeña cantidad de agua libre de dióxido de carbono. La dilución permitida máxima con agua es tal que las soluciones están entre 0.52 y 0.48 N. Titulación utilizando medidor de pH/Autobureta : Al utilizar autobureta del tipo ABU 80, pueden aplicarse los siguientes parámetros: Muestra con % de DE < 10 Prueba Cié Banda proporcional 0.5 5 Segundos de retraso 50 5 Velocidad-Vl 10 5 Velocidad-V2 15 5 1. Titular con 0.1 N de NaOH a pH 8.5 (registra el resultado como titulo VI) . 2. Agregar 20.00 mi de 0.5 N de NaOH mientras se agita, y se deja la muestra reposar sin agitación durante exactamente 15 minutos. Cuando se reposa la muestra debe cubrirse con una lámina. 3. Agregar 20.00 mi de 0.5 N de HCl mientras se agita y agitar hasta que el pH es constante. 4. Subsecuentemente, titular con 0.1 N de NaOH a pH 8.5 (registrar el resultado como titulo V2) . Prueba Ciega (Se lleva a cabo la doble determinación) : 1. Titular 100 mi de dióxido de carbono libre o agua desionizada (el mismo tipo como se utiliza para la muestra) agua a pH 8.5, con 0.1 N de NaOH (1-2 gotas). 2. Agregar 20.00 mi de 0.5 N de NaOH mientras se agita y dejar la muestra de la Prueba Ciega reposar sin agitar durante aproximadamente 15 minutos. Cuando se reposa la muestra se debe cubrir con una lámina. 3. Agregar 20.00 mi de 0.5 N de HCl mientras se agita, y se agita hasta que el pH es constante. 4. Titular a pH 8.5, con 0.1 N de NaOH (registrado como Bl) . La cantidad máxima permitida para la titulación es 1 mi de 0.1 N de NaOH. Si la titulación con más de 1 mi, 0.5 N de HCl debe diluirse con una pequeña cantidad de agua desionizada. Si el pH no cae por debajo de 8.5 además de 0.5 N de HCl, 0.5 N de NaOH debe diluirse con una pequeña cantidad de agua libre de dióxido de carbono. La dilución máxima permitida con agua es tal que las diluciones están entre 0.52 y 0.48 N. Cálculo : • Vi = Vi + (V2-Bi) · % de DE (Grado de Esterificación) = { (V2-Bi) x 100}/Vt • % de DFA (Grado de Ácido Libre) = 100 % de DE • % de GA* (Grado de ácido galacturónico) = (194.1 x Vt x N x 100) /400 * Con base libre de ceniza y humedad 194.1: Peso molecular para GA N: Normalidad corregida para 0.1 N de NaOH utilizada para titulación (por ejemplo, 0.1002 N) 400: peso en mg de la muestra lavada y seca para la titulación % de Pectina pura = { (cantidad de pectina secada, lavada con ácido) x 100} / (cantidad pesada de pectina) • Sensibilidad del Calcio-CS-99-2 Principio : Se ajusta una solución de pectina a pH 3.60 utilizando un regulador de acetato de Na 3.0 M. La muestra se disuelve calentando en un baño maria a 75 °C durante 5-10 minutos. Luego, se agrega 272 ppm de calcio a la muestra (sobre 70°C) . La viscosidad de la muestra se mide normalmente con un viscómetro LVT utilizando el Eje no. 1 ó 2 a 60 rpm, 5°C, 19 +/- 3 horas después. La medición debe realizarse sin el circuito protector. Aparatos : 1. Vasos de viscosidad, 48 mm de diámetro interno, altura 110 mm. 2. Imanes, aproximadamente 30 mm de longitud 3. Baño maría (75°C) con agitador magnético 4. Lámina u otro material de cubierta tolerante al calor 5. 5 mi y 20 mi de pipetas y abastecedores 6. medidor de pH Reactivos : 1. 90-100% de ??? 2. Solución de CaCl2 (32 g/1 de CaCl2, 2H20) 3. 3.0 M de regulador de acetato de Na. Preparación regulada para 2 litros, 3.0 M de regulador de acetato de sodio, pH 3.60: 1. 81.64 g de acetato de Na, 3¾0 se disuelve en un vaso de precipitados utilizando aproximadamente 1200 mi de agua de intercambio iónico. 2. La solución se transfiere cuantitativamente a un matraz de medición de 2000 mi. 3. En una capucha, 309 mi de ácido acético al 100% se agrega, y el matraz de medición se llena a la marca con agua de intercambio iónico. 5 litros: 204 g de acetato de Na, 3H20, 772 mi de ácido acético al 100%. El pH de la solución es 3.60 +/- 0.05. Si se duda acerca de la preparación verifique el pH. Concentración de solución de pectina: 0.4%: pesar 0.64 g de la muestra (pectina no estandarizada) 0.5.: pesar 0.80 g de la muestra (pectina estandarizada) Procedimiento : 1. Pesar la muestra de pectina en un vaso de viscosidad. 2. Agregar 5.0 mi de IPA. 3. Agitar la muestra en un agitador magnético mientras se agrega 130 mi de agua en ebullición (aproximadamente 85°C) . Es importante que el vidrio de viscosidad se cubra (con por ejemplo, una lámina) durante toda la agitación. 4. Agregar 20 mi de 3.0 M de regulador de acetato de Na pH 3.60. 5. Agitar la muestra en un baño maria de 75°C durante 5 minutos mínimos con un imán. Si la muestra contiene aglomerados, debe repetirse el procedimiento de disolución. 6. Agitar la muestra con vórtice de aproximadamente 2 cm. Agregar 5 mi de solución de calcio (CaCl2, 2H20, 32 g/1) . El tiempo de adición máximo es 2 segundos. Mezclar la muestra durante aproximadamente 10 segundos. IMPORTANTE : Si el vórtice desaparece mientras se agrega el calcio - y/o la gelación local o se observan burbujas de aire atrapadas - la muestra se marca pre-gelificada como un resultado del análisis. Si la muestra se mide después como una muestra normal, el resultado obtenido será demasiado bajo. El análisis podría entonces realizarse en una concentración de pectina más baja. 7. Remover el imán y cubrir el vaso con por ejemplo una lámina . 8. Colocar la muestra en un baño maría de 5°C durante 19 + 3 horas. Asegurar que el nivel acuoso del baño maria sea igual al nivel de la superficie de muestra. 9. Si las burbujas de aire se presentan en la superficie de muestra, remover suavemente éstas antes de la medición de la muestra. Medir la viscosidad después de 1 minuto a 5°C con un Viscómetro LVT, utilizando el eje no. 2 a 60 rpm. Para las lecturas después 10 en el viscómetro, se realiza la medición con el eje no. 1. Para medir las lecturas sobre 100, colocar la muestra en un baño maria a 5°C durante 19 ± 3 horas. Luego, medir la viscosidad utilizando el eje no. 3 a 60 rpm. Utilizar el factor apropiado para calcular la viscosidad (cP-centipoise) . El valor CS es igual a la viscosidad calculada.

• Claridad de una solución de pee ina al 1%- solución fría Principio: La claridad de una solución de pectina al 1% se determina con un espectrofotómetro . Aparatos : 1. Vaso de precipitados, 250 mi 2. 100% de IPA 3. Imán 4. Agitador magnético 5. Agua Desionizada 6. Matraz de medición, 100 mi 7. Pipeta 8. Espectrofotómetro Procedimiento: 1. Pesar 1 g de pectina en un vaso de precipitados de 250 mi. 2. Humectar con 3 mi de 1PA. 3. Colocar un imán en el vaso de precipitados. 4. Colocar el vaso de precipitados en un agitador magnético. 5. Agregar 96 mi de agua desionizada mientras se agita. 6. Agitar hasta que se disuelva la pectina. 7. Medir la transmisión o absorbancia en un espectrofotómetro a 655 nm. 8. Establecer los resultados como % de T (transmisión) o % de Abs (absorbancia) • Determinación del azúcar residual en las cáscaras Propósito: La determinación del azúcar residual en las cáscaras se hace lavando con 50% de isopropanol. Aparatos : 1. Vaso de precipitados de vidrio, 600 mi 2. Balanza (exactitud 0.2 g) 3. Agitador magnético 4. Imán 5. Filtros de papel (toscos) por ejemplo tipo AGF 614 6. Gabinete de secado a 65-70 °C 7. Embudo Büchner 8. Bomba al vacio Soluciones : Isopropanol, 50% Procedimiento : 1. Pesar una muestra de cáscara de 10 g en un vaso de precipitados de vidrio de 600 mi. 2. Agregar 200 mi de isopropanol al 50% 3. Agitar durante 4 horas en un agitador magnético. 4. Lavar las cáscaras y filtrar con 250 mi de isopropanol al 50%. 5. Colocar el filtro y la muestra en el gabinete de secado a 65-70 °C durante la noche y pesar. Cálculo del azúcar residual en cáscaras, %: { (SS x 10) -(neto x 95) } x 100/ (SS x 10), en donde SS = Porcentaje de materia seca antes de lavar y secar Neto = Peso de las cáscaras lavadas y secas 95 = Porcentaje de materia seca establecida en cáscaras lavadas y secas · La determinación del pH en pectina HM y LM-solución fría Principio : Se determina el pH en una solución de pectina preparada fria al 1%. Materiales : 1. Vaso de precipitados, 250 mi 2. 100% de IPA 3. Imán 4. Agitador magnético 5. Agua Desionizada 6. Pipeta 7. Medidor de pH Procedimiento : 1. Pesar 1 g de pectina en un vaso de precipitados de 250 mi. 2. Humectar con 3 mi de IPA. 3. Colocar el imán en el vaso de precipitados. 4. Colocar el vaso de precipitados en un agitador. 5. Agregar 95 g de agua desionizada. 6. Agitar hasta que se disuelva la pectina. 7. Calibrar el medidor de pH con soluciones reguladas de pH 7.00 preparadas a partir del ftalato ácido de potasio e hidrogenfosfato disódico, y con pH 4.01 preparada a partir de ftalato ácido de potasio, respectivamente a 25°C. Ambos reguladores deben disolverse en agua lograda a través de osmosis inversa seguida por doble intercambio iónico.

Subsecuentemente, se mide el pH en la solución de pectina a 25°C.

• Determinación de pérdida en secado de pectina HM y LM Principio: La pérdida en el secado se determina secando una cantidad conocida de pectina durante 2 horas a 105°C en un gabinete de secado. Aparatos : 1. Gabinete de secado a 105 °C 2. Vaso de precipitados de prueba 3. Balanza de análisis 4. Desecador Proceso: 1. Secar el vaso de precipitados de prueba durante al menos 30 minutos a 105°C. Enfriar el vaso de precipitados de prueba en un desecador y pesarlo. 2. Transferir una cantidad conocida, por ejemplo 2.000 g de pectina en el vaso de precipitados de prueba. 3. Colocar el vaso de precipitados de prueba con pectina en un gabinete de secado a 105 °C durante 2 horas. 4. Enfriar el vaso de precipitados de prueba con pectina en un desecador y pesarlo. Pérdida Calculada en secado: % de pérdida en el secado = { (g de pectina sin secar-g de pectina seca) } x 100/ (g de pectina sin secar) • Determinación de actividad de esterasa de planta Principio : La hidrólisis de la metilesterasa que se integra a la pectina bajo pH constante. El requerimiento del titulante se mide como una función de tiempo y la actividad se determina como una unidad = grupos carboxilo desmetilados de moles por minutos. Aparatos: 1. Balanza Analítica (exactitud 0.1 g) . 2. Baño María a 5°C. 3. Cronómetro. 4. Medidor de pH. 5. Motor agitador, ajustable 50-2000 rpm 6 Centrífuga. 7. Mezclador Waring 8. Valorador. Químicos y Soluciones: 1. Cloruro de sodio, grado analítico. 2. Hidróxido de sodio, grado analítico. 3. Carbonato ácido de sodio, grado analítico. 4. Agua de intercambio iónico con una conductividad por debajo de 1 ms/cm. 5. 0.0625 M de carbonato ácido de sodio. 6. 1 de carbonato ácido de sodio. Procedimiento : 1. Pulverizar la cáscara. 2. Pesar 50.0 g de cáscara y transferirla a 2.0 litros del vaso de precipitados de plástico. 3. Agregar el agua de intercambio iónico a una consistencia trabajable. 4. Agregar cloruro de sodio a una concentración de 1 molar. 5. Ajustar el pH a 6.0 con 0.5 M de hidróxido de sodio. 6. Colocar el vaso de precipitados de plástico en un baño maria de 5°C y agitar lentamente durante 2 horas. Ajustar el pH cada media hora. 7. Centrifugar la masa a 9000 rpm durante 30 minutos. 8. Recuperar el sobrenadante para la determinación de la actividad de la esterasa de planta. 9. Una solución de pectina se hace disolviendo 20.0 g de pectina cítrica que tiene un DE de 72% y 23.4 g de cloruro de sodio en 700 mi de agua de intercambio iónico en ebullición mezclando en un mezclador Waring durante 34 minutos. 10. Enfriar la solución de pectina a temperatura ambiente y ajustar el peso neto a 1000 g. 11. Calentar 100.0 g de la solución de pectina a 60 °C. 12. Ajustar el pH de la solución de pectina a 5.50 con 1 M de carbonato ácido de sodio y agregar inmediatamente 5 mi del sobrenadante anterior. La cantidad del sobrenadante puede ser más de 5 mi o menos de 5 mi dependiendo de la actividad de esterasa de planta actual en el sobrenadante. 13. Comenzar la titulación con 0.0625 M de carbonato ácido de sodio y registrar la curva de titulación. 14. Determinar la pendiente (p) de la parte lineal de la curva de titulación. 15. Calcular la actividad de esterasa de la planta como Unidades/ml = p x 62.5/mi de sobrenadante.

Método para la determinación del tratamiento con ácido en el material de partida vegetal que contiene pectina: Un medio para determinar si el material de partida vegetal que contiene pectina ha sido tratado con agua acidificada va a utilizar la siguiente prueba para determinar el pH del material de partida vegetal que contiene pectina. Esta prueba es de utilidad para material de partida vegetal que contiene pectina, el cual tiene inherentemente un pH sobre 4. Los ejemplos de tales materiales de partida vegetales que contiene pectina son naranja, toronja, remolacha forrajera, remolacha azucarera, manzanas y zanahorias. Para materiales de partida vegetales que contienen pectina que tienen inherentemente un pH de 4 o inferior, otros medios para determinar si el material de partida vegetal que contiene pectina ha sido tratado con agua acidificada debe utilizarse.

Cuando se prueba la cáscara seca, se obtiene una muestra de diez gramos (10 g) y se agrega la muestra a un vaso de precipitados. Cuando se prueba una cáscara húmeda, se incrementa el tamaño de la muestra a cincuenta gramos (50 g) . Agregar 150 mi de agua desionizada o destilada al vaso de precipitados. Agitar la mezcla de cáscara/agua durante 15 minutos utilizando una barra de agitación magnética a temperatura ambiente . Después de 15 minutos, medir el pH. De preferencia, el pH se mide utilizando un medidor de pH tal como un pH M290 (disponible de Radiometer) equipado con un electrodo tal como PHC2401-8 (disponible de Radiometer) . Por ejemplo, el material de partida vegetal que contiene pectina seca que exhibe un pH de 5 seria indicativo del material que ha sido tratado con agua acidificada, de preferencia el material de partida de planta que contiene pectina seca que exhibe un pH por debajo de aproximadamente 4.4, más preferiblemente por debajo de aproximadamente 4.0, aún más preferiblemente que exhibe un pH de entre 4.0 y 3.5.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos se ofrecen a manera ilustración, no a manera de limitación. • Ejemplo Comparativo Este ejemplo repite el proceso para tratar cáscara de naranja como se describe en la US 2,387,635 (Bailey, H.S.) Se agregaron 8 litros de cáscara de naranja rallada (medida por desplazamiento) a 4.67 litros de agua en ebullición. Se agregó una cantidad de 62% del ácido nítrico para asegurar un pH en el rango de 2.8-3.6 durante el calentamiento. Resulta, que una cantidad de 80 mi de ácido nítrico al 62% proporcionó un pH de 3.4, durante el calentamiento. La cantidad relativamente elevada de ácido necesaria para reducir el pH se explicó por la capacidad de regulador relativamente elevada de la cáscara fresca y la cantidad baja de agua agregada. Después de 10 minutos, la masa se enfrío y la cáscara se separó en un tamiz. La cáscara se prensó entonces utilizando una prensa hidráulica, y la cáscara prensada se roció apenas en varias bandejas de secado y se secó a 70°C en un gabinete de secado a presión atmosférica. Se extrajeron subsecuentemente 500 g de la cáscara seca de acuerdo al método "Extracción de pectina", y la pectina resultante se etiquetó Ejemplo 1 Comparativo. Resultados: Muestra % de HNO3 en mi PH de G de extracto Pectina Rendimiento Actividad Azúcar de extracto a precipitado g/i de esterasa extracción 25°C de planta Unidad/g Ejemplo 49.0 60 1.76 12725 79.20 6.22 0 Comparativo 1 *: Transmisión ? partir de este ejemplo, es evidente que el método utilizado en la US 2,387,635 proporciona un material de naranja con un contenido elevado de azúcares. De este modo, el método descrito en la US 2,387,635 no proporciona una remoción eficiente de azúcares a partir de la cáscara de naranja. Además, con el contenido elevado de azúcares en la cáscara, el rendimiento resultante de pectina es bajo. Cuando se observa la pectina resultante, la USA SAG es baja y entonces es el peso molecular. Esto indica que la pectina ha sido despolimerizada durante el calentamiento subsecuente de la suspensión de cáscara de naranja/agua. Finalmente, este ejemplo muestra que al calentar la suspensión de cáscara de naranja/agua en aproximadamente 90°C, la actividad de la esterasa de planta ha sido eliminada completamente.

Ej emplo 1 En este ejemplo, el tratamiento con ácido se realiza a temperatura ambiente y con una cantidad más elevada de agua. Se agregaron 8 litros de cáscara de naranja rallada (medida por reemplazo) en 24 litros de agua, para lo cual habla sido agregada previamente una cantidad de ácido para alcanzar el pH en la mezcla de cáscara/agua en el rango de 2.8-3.6. Resulta, que una cantidad de 20 mi de 62% del ácido nítrico resultó en un pH de 3.2 de la mezcla de cáscara/agua. La mezcla de cáscara/agua se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Después de este periodo, la cáscara se separó a partir del líquido, y la cáscara recuperada se prensó bajo presión ligera en una prensa hidráulica para remover el agua en exceso sin triturar la cáscara. La cáscara prensada se agregó entonces a 24 litros de agua potable a la cual se agregó previamente una cantidad de ácido para alcanzar un pH en la mezcla de la cáscara/agua en el rango de 2.8-3.6. Resulta, que una cantidad de 15 mi de ácido nítrico al 62% resultó en un pH de 3.2 de la mezcla de cáscara/agua.

La cantidad más baja del ácido necesario en esta etapa se explica por la primera etapa habiendo removido una porción del ácido natural de la cáscara. La mezcla de cáscara/agua se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos, y la cáscara se separó entonces del liquido. Se prensó la cáscara recuperada bajo presión ligera en una prensa hidráulica para remover el agua en exceso sin triturar la cáscara. Esta última etapa de lavado se repitió, después de lo cual la cáscara recuperada y prensada se dispersó apenas en varias bandejas y se secó a 70 °C en un gabinete de secado a presión atmosférica . 500 g de la cáscara seca se extrajo subsecuentemente de acuerdo al método "Extracción de pectina", y la pectina resultante se etiquetó Ejemplo 1. Resultados : Muestra % de HNO3 en mi pH de G de extracto Pectina Rendimiento Actividad Azúcar de extracto a precipitado 9 g/i de esterasa extracción 25°C de planta Unidad/g Ejemplo 1 16.8 60 1.74 8300 82.60 9.95 42 Muestra SAG % de % de % de DE % de GA Pm % de TS 1% de % de T* Rendimiento Pureza PH de Pectina Ejemplo 213 29.9 94.9 63.7 83.2 10???? 96.3 3.34 87.5 1 *: Transmisión Este ejemplo muestra que cuando se aplica el método de la presente invención, menos azúcar permanece en la cáscara lavada con ácido, y consecuentemente, el rendimiento de pectina se incrementa dramáticamente. Además, el lavado con agua acidificada provoca un incremento en ambos USA SAG y en el peso molecular comparado al ejemplo comparativo. De hecho, la relación de USA SAG del ejemplo 1 comparado con los USA SAG del ejemplo comparativo es 1.20. De este modo, al tratar la cáscara de naranja de acuerdo con la presente invención, un 20% de incremento en USA SAG se logra. De manera correspondiente, la relación entre el peso molecular de la pectina que resulta del ejemplo 1 y la pectina que resulta de ejemplo comparativo es 1.23. De este modo, el peso molecular se incrementa por 23% cuando la cáscara de naranja se trata de acuerdo con la presente invención.

Ejemplo 2 En este ejemplo, se repitió el ejemplo comparativo con naranjas frescas directamente elegidas de un árbol de naranja. Sin embargo, este ejemplo utilizó vapor en lugar de agua en ebullición. El procedimiento fue el mismo como en el ejemplo 1. Sin embargo, después de lavar tres veces con agua acidificada, el residuo de la cáscara ligeramente prensada se colocó en un embudo Bücher. A la evacuación del embudo Bücher se adaptó un tubo, y se inyectó vapor entonces en la cáscara a través del tubo. El vapor continuó durante 3 minutos. Con un termopar, la temperatura interior de la cáscara se midió, y se produjo que una temperatura de 90 °C se lograra después de 2 minutos de llenar de vapor. Después del vapor, la cáscara se procesó adicionalmente como en el ejemplo 1. La pectina resultante se etiquetó "D".

Con la cáscara de naranja completamente fresca, el USA SAG fue aproximadamente 16% más elevado que en el ejemplo comparativo. De manera similar, el peso molecular fue aproximadamente 14% más elevado.

Ejemplo 3 Este ejemplo se basa en el ejemplo 1 con 1 excepción de que la cáscara de naranja utilizada fue 1 cáscara de naranja del ejemplo.2. De este modo, se realizó e tratamiento a temperatura ambiente, lavando tres veces en p 3.5, seguido por un secado. La cáscara seca se extrajo de 1 misma manera como en los ejemplos 1 y 2. Resultados : Este ejemplo muestra que al lavar con agua acidificada provoca un incremento en ambos USA SAG y en el peso molecular comparado con el ejemplo comparativo. De hecho, la relación de USA SAG del ejemplo 3 comparada con el ejemplo 2 es 1.12. De este modo, al tratar la cáscara de naranja de acuerdo con la presente invención, un incremento de 12% en USA SAG se logra. De manera correspondiente, la relación entre el peso molecular de la pectina que resulta del ejemplo 3 y la pectina que resulta del ejemplo 2 es 1.25. De este modo, el peso molecular se incrementa por 25% cuando la cáscara de la naranja se trata de acuerdo con la presente invención. Entonces, independiente de la frescura de la fruta de naranja, la presente invención proporciona un incremento sustancial en ambos USA SAG y el peso molecular de la pectina resultante .

Ejemplo 4 La presente invención se incrementó hasta 1000 veces y el proceso operó durante varios días. De este modo, la cáscara fresca se lavó en un proceso de contracorriente de 4 etapas con agua. El pH resultante de los ejemplos comparativos vario entre 4.5 y 5.2. Para lavado con ácido, el pH se ajustó a 3.4-3.6. El tratamiento fue a 30 grados C. Después del lavado, la cáscara se secó continuamente. Las muestras se tomaron durante la prueba, y estos ejemplos se extrajeron después de la fórmula utilizada en el ejemplo 1. Resultados : Lavado Acuoso 228° 239 246 1.03 (Ejemplo) Lavado Acuoso 235° 202 193 0.96 (Ejemplo) Lavado Acuoso 238° 184 209 L14 (Ejemplo) Cuando se utiliza agua potable o agua acidificada, los valores SAG no son significativamente diferentes. Sin embargo, al observar la relación entre las resistencias a la ruptura hechas con y sin adición de calcio, las tratadas con agua potable, producen pectina con una relación por debajo de 0.83. La cáscara lavada con agua acidificada produce pectina eon una relación sobre 0.94. Esto muestra que la cáscara tratada con agua acidificada resulta en pectina de una sensibilidad de calcio sustancialmente inferior. De hecho, los geles que contienen calcio hechos de pectina que resultan de un lavado de la cáscara en agua potable muestran evidencia clara de pre-gelificación, mientras que este fenómeno no se observó en los geles correspondientes hechos de pectina que han sido lavados con agua acidificada.

Ejemplo 5 Se presenta este ejemplo para demostrar el efecto de la temperatura de lavado de agua acidificada en la cáscara seca y la pectina resultante. Se utilizaron aproximadamente 25 kg de cáscara de naranja fresca. La cáscara se trozó y se trató como se detalla posteriormente. En el ejemplo 5 comparativo, un tercio de la cáscara se lavó 3 veces sin ácido. El pH del agua de lavado se midió a pH 5.18. El resto de la cáscara se trató con agua acidificada en donde la última etapa de la mezcla se calentó á varias temperaturas .

Lavado acuoso acidificado Se agitó la cáscara durante 15 minutos a temperatura ambiente, con "3 volúmenes" de agua. El pH se ajustó a 3.5 por ácido nítrico y luego se separó la cáscara en una vvbandeja de secado". Se tuvo cuidado de agregar el ácido al agua antes de agregar la cáscara. Se prensó la cáscara ligeramente en una prensa hidráulica para remover el agua acidificada en exceso. Se tuvo cuidado de evitar triturar la cáscara. Se volvió a cargar la cáscara en un segundo lote de 3 volúmenes de agua y el pH se ajustó a 3.5. Se agitó la mezcla de agua acidificada con cáscara durante 15 minutos adicionales. La cáscara se separó en una bandeja de secado. Se prensó la cáscara como en la etapa previa. Se dividió la cáscara en dos (2) porciones igualmente medidas.

Se repitió el procedimiento durante una tercera vez con 3 volúmenes de agua y el pH se ajustó a 3.5. El pH se registró antes de la separación de la cáscara en una bandeja de secado. En la tercera y final etapa de lavado de agua acidificada, se utilizaron varias temperaturas. El Ejemplo 5a se lavó a 25 °C. El Ejemplo 5b se lavó a 65 °C. Todos los ejemplos de la cáscara se prensaron utilizando una prensa hidráulica para remover el agua en exceso. Se dispersó la cáscara tratada, prensada en varias bandejas de secado. La cáscara tratada, prensada se secó entonces en un gabinete de secado a aproximadamente 70 °C y con suficiente flujo de aire durante la noche (aproximadamente 15 horas) hasta que se consideró "seca". Tabla 5.1 Tocas las muestras se extrajeron utilizando extracción de pectina HM estándar modificada en recipientes de 50 litros: (25 horas, 75°C, 1000 gramos de cáscara, 40 litros de agua, pH 1.9-2.1). Después de la extracción, las muestras se filtraron sobre tierra diatomácea, se realizó un intercambio iónico utilizando 50 mi de resina (Amberlite SR 1L de Rohm&Haas) por litro de jugo, y precipitado 1:3 en 80% de IPA, seguido por un lavado en 60% de IPA.

Resultados : Tabla 5.2.

* En jugo diluido Tabla 5.3 Este ejemplo demuestra que el método de la presente invención puede realizarse de temperaturas de ambiente a al menos 65 °C. Esto conserva una CS baja, sin cambiar la SAG.

Ejemplo 6 Se repitió el procedimiento del ejemplo 5. En el ejemplo 6 comparativo, un tercio de la cáscara se lavó 3 veces sin ácido. El pH del agua lavada se midió a pH 4.89. En el ejemplo 6a, el lavado acuoso acidificado se condujo a 25 °C. En el Ejemplo 6b, el lavado acuoso acidificado final se condujo a 70°C. Tabla 6.1.

Resultados : Tabla 6.2.

Ejemplo HNO » pH de jugo Peso de jugo Peso de pectina Rendimiento (mi) extraído 25°C precipitado (g) (g) (g/L*) Ej. 6 Comparativo 80 2.04 10000 37 3.7 Ejemplo 6a 55 2.06 10000 52 5.2 Ejemplo 6b 55 1.93 10000 56 5.6 *En jugo diluido Tabla 6.3 Este ejemplo demuestra que el método de la presente invención puede realizarse de temperaturas ambiente a al menos 70°C. Eso conserva un CS bajo, sin cambiar el SAG.

Ejemplo 7 Este ejemplo se presenta para demostrar el efecto del lavado de agua acidificada en la cáscara seca y la pectina resultante producida de una fruta cítrica diferente de la naranja, principalmente toronja. Aproximadamente 30 kg de toronja fresca se hicieron jugo y la cáscara se trozó como en el ejemplo 5. En el ejemplo comparativo 1, la cáscara trozada se agita con "3 volúmenes" de agua durante 15 minutos a temperatura ambiente. El pH del agua se registró después de 15 minutos de agitación, y la cáscara se separó en una bandeja de secado. La cáscara se prensó ligeramente en una prensa hidráulica para remover el agua en exceso. Se tuvo cuidado para evitar triturar la cáscara. La cáscara se volvió a cargar en un segundo lote de 3 volúmenes de agua y se agitó durante 15 minutos adicionales a temperatura ambiente. El pH del agua se registró después de 15 minutos de agitación, y la cáscara se separó en una bandeja de secado. Esta etapa de lavado se repitió durante una tercera vez . La cáscara tratada, prensada se secó entonces en un gabinete de secado a aproximadamente 70 °C y con suficiente flujo de aire durante la noche (aproximadamente 15 horas) hasta que se consideró "seca". Lavado acuoso acidificado En el ejemplo 7, se trató la cáscara como en el ejemplo 7 comparativo, excepto que se lavó la cáscara con agua acidificada que contiene 9 mi de 62% de HN03 en un pH de 3.5 a 3.8. Se tuvo cuidado para agregar el ácido al agua antes de que se agregara la cáscara para asegurar que la cáscara no se expusiera al ácido concentrado. Tabla 7.1 Ejemplo Agua HN03 pH Peso de la (L) (mi) cascara (g) Ejemplo 7 Comparativo 1er lavado 22 - -4.2 - 2o. lavado 22 - -5.7 - 3er lavado 22 - -6.2 523 Ejemplo 7 1er lavado 22 9 + 2 - 3.6 - 2o. lavado 22 8 + 3 - 3.6 - 3er. Lavado 22 11 + 1 - 3.5 601 Todos los ejemplos de la cáscara seca se extrajeron utilizando el siguiente método de extracción de pectina. En un pequeño extractor, se cargaron 15 litros de agua a 70 °C. Quinientos gramos (500 g) de cáscara seca se agregaron entonces al extractor y el pH del agua se ajustó a 1.7 por la adición de 62% de HNO3. El ácido adicional puede agregarse al extractor después de 15 minutos si es necesario para mantener el pH. La extracción se mantiene a una temperatura de 70 °C y el pH 1.7 durante 7 horas . Después de la extracción, las muestras se filtraron sobre tierra diatomácea, se realizó un intercambio iónico utilizando 40 mi de resina (Amberlite SR1L de Rohm&Haas) por litro de jugo, y se precipitaron 1:3 en 80% de IPA, seguido por un lavado en 60% de IPA. La pectina resultante se seca en un gabinete de secado y el peso de la pectina resultante se determina . Resultados : Tabla 7.2.

Tabla 7.3 Este ejemplo demuestra la mejora en la pectina obtenida de cáscara de toronja seca tratada cuando se compara con la pectina obtenida de cáscara de toronja seca no tratada.

Ejemplo 8 Este ejemplo se presenta para demostrar el efecto del lavado acuoso acidificado en la cáscara seca y la pectina resultante producida de una fruta diferente de cítrico, principalmente manzana. Cincuenta (50 kg) de las manzanas (Belle de Boskoop) se obtuvieron. La cáscara de las manzanas se preparó como en el Ejemplo 7.

Tabla 8.1 Se extrajeron las muestras utilizando extracción de pectina H estándar modificada en recipientes de 18 litros (7 horas, 70°C, 450 gramos de cáscara, 13.5 litros de agua, ácido como se describe) . Después de la extracción, las muestras se filtraron sobre tierra diatomácea, se realizó un intercambio iónico utilizando 50 mi de resina (Amberlite SR1L de Rohm&Haas) por litro de jugo, y se precipitaron 1:3 en 80% de IPA, seguidas por un lavado en 60% de IPA. Resultado : Tabla 8.2 Tabla 8.3 Este ejemplo demuestra la mejora en la pectina obtenida de cáscara de manzana seca cuando se compara con la pectina obtenida de cáscara de manzana seca sin tratar. El resultado es Pm elevado, SAG más elevado y CS más bajo.

Ejemplo 9 En este ejemplo, se repitió el ejemplo 1 en la planta, es decir, el ejemplo 1 se ascendió 1000 veces. Un lote se trató de acuerdo al ejemplo 1 con ácido, mientras que otro lote se trató de acuerdo al ejemplo 1, sin embargo, sin lavar con ácido. El lote subsecuentemente seco de la cáscara se midió de acuerdo al "Método para la determinación del tratamiento de ácido del material de partida vegetal que contiene pectina". Además, la actividad de la esterasa de planta se determinó en ambos lotes de acuerdo al método "Determinación de la actividad de esterasa de planta".

Resultados Este ejemplo muestra que la actividad enzimática en la cáscara de naranja se conserva durante un tratamiento de ácido de acuerdo con la presente invención.

Además, este ejemplo muestra que el tratamiento de ácido de acuerdo con la presente invención resulta en una pectina derivada de la cáscara de naranja tratada con ácido, la cual es sustancialmente menos sensible al calcio que la pectina derivada de la misma cáscara de naranja que no ha sido tratada con ácido. La sensibilidad al calcio más baja se ilustra además por el hecho, que un tratamiento de ácido resulta en una relación más elevada entre la resistencia a la ruptura de un gel hecho con la adición de iones de calcio, comparada con la resistencia a la ruptura de un gel hecho sin la adición de iones de calcio. Aunque la invención anterior ha sido descrita en detalle para propósitos de claridad de entendimiento, será obvio que pueden practicarse ciertas modificaciones dentro del alcance de las reivindicaciones anexas.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un método para controlar la actividad de la esterasa de pectina en un material de partida vegetal, que contiene pectina en donde el material de partida vegetal es un material de partida de fruta antes de la extracción de pectina a partir del material de partida vegetal que contiene pectina que comprende las etapas de: obtener un material de partida vegetal que contiene pectina, poner en contacto el material de partida vegetal que contiene pectina con un agua acidificada que tiene un pH de entre 3.2-3.9 a una temperatura de < 70 °C y recuperar un material de partida vegetal que contiene pectina tratada. 2. El método de la reivindicación 1, en donde el agua acidificada tiene un pH de entre 3.4-3.7. 3. El método de la reivindicación 1, en donde el agua acidificada se acidifica utilizando un ácido inorgánico u orgánico. 4. El método de la reivindicación 1, en donde el agua acidificada se acidifica utilizando un ácido inorgánico seleccionado de ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, dióxido de azufre y ácido nítrico. 5. El método de la reivindicación 1, en donde el agua acidifica se acidifica utilizando un ácido orgánico seleccionado del grupo que consiste de ácido cítrico, ácido oxálico y ácido acético. 6. El método de la reivindicación 1, en donde el agua acidificada se acidifica utilizando un sistema regulador que es capaz de mantener el pH del agua acidificada dentro del rango de entre 3.2-3.9. 7. El método de la reivindicación 5, en donde la solución regulada es capaz de mantener el pH del agua acidificada dentro del rango de entre 3.4-3.7. 8. El método de la reivindicación 6, en donde el sistema regulador se selecciona del grupo que comprende ácido clorhidrico/citrato ácido de disodio, glicina/ácido clorhídrico, ftalato ácido de potasio/ácido clorhídrico, ácido cítrico/citrato de sodio, y acetato de sodio/ácido acético . 9. El método de la reivindicación 1, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina se pone en contacto con un agua acidificada a una temperatura de <50°C. 10. El método de la reivindicación 9, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina se pone en contacto con agua acidificada a una temperatura de <30°c. 11. El método de las reivindicaciones 1-10, que comprende además la etapa de secar el material de partida vegetal que contiene pectina para producir una pectina tratada seca, que contiene material de partida vegetal que contiene pectina. 12. El método de acuerdo con las reivindicaciones 1-11, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina se selecciona del grupo que consiste de frutas cítricas y manzanas. 13. El método de acuerdo con las reivindicaciones 1-12, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina comprende frutas cítricas. 14. El método de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina comprende naranj a . 15. El método de acuerdo con la reivindicación 12, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina comprende manzanas . 16. Un material de partida vegetal que contiene pectina tratada hecho de acuerdo con las reivindicaciones 1-15 para uso en extracción de pectina. 17. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada de la reivindicación 16, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina tratada exhibe un pH por debajo de 4.5 cuando se extrae con agua desionizada. 18. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada de la reivindicación 17, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina tratada exhibe un pH por debajo de 4.0 cuando se extrae con agua desionizada. 19. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada de la reivindicación 18, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina tratada exhibe un pH de entre 4.0 y 3.5 cuando se extrae con agua desionizada. 20. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada de la reivindicación 16, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina tratada comprende cáscara cítrica. 21. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada de la reivindicación 20, en donde el material de partida vegetal que contiene pectina tratada comprende cáscara de cítrico seca. 22. El material de partida vegetal que contiene pectina tratada hecho de la reivindicación 21 en donde el material que contiene pectina tratada comprende cáscara de naranja seca. 23. Un material de partida vegetal que contiene pectina tratada hecho de acuerdo con las reivindicaciones 1-15 para uso como alimento para animales. 24. Un material de partida vegetal que contiene pectina tratada hecho de acuerdo con las reivindicaciones 1-15 para uso como un ingrediente en comestibles. 25. Una pectina, caracterizada por el peso molecular de la pectina que es hasta 50% más elevado que el peso molecular de una pectina obtenida extrayendo un material de partida vegetal que contiene pectina similar, pero no tratada, obtenible por la extracción de un material de partida vegetal que contiene pectina tratado por el método de acuerdo con las reivindicaciones 1-15. 26. La pectina de acuerdo con la reivindicación 25, caracterizada por el peso molecular de la pectina que es 10-40% más elevada que el peso molecular de una pectina obtenida extrayendo un material de partida vegetal que contiene pectina similar, pero no tratada. 27. La pectina de acuerdo con la reivindicación 26, caracterizada por el peso molecular de la pectina que es 15-30% más elevado que el peso molecular de una pectina obtenida extrayendo un material de partida vegetal que contiene pectina similar, pero no tratada. 28. Una pectina, caracterizada por una relación entre la sensibilidad del calcio de la pectina y la sensibilidad de calcio de una pectina extraída de un material de partida vegetal que contiene pectina, lavada, similar, pero no tratada en el rango de 0.90-1.40, obtenible por la extracción de un material de partida vegetal que contiene pectina tratada por el método de acuerdo con las reivindicaciones 1-15. 29. La pectina de acuerdo con la reivindicación 28, caracterizada por una relación entre la sensibilidad del calcio de la pectina y la sensibilidad de calcio de una pectina extraída de un material de partida vegetal, que contiene pectina similar, pero no tratada en el rango de 0.90-1.20. 30. La pectina de acuerdo con la reivindicación 29, caracterizada por una relación entre la sensibilidad de calcio de la pectina y la sensibilidad de calcio de una pectina extraída de un material de partida vegetal que contiene pectina similar, pero no tratada en el rango de Ó.90-1.10.