MXPA04009060A - Particulas de tipo virus de papilomavirus humano. - Google Patents
Particulas de tipo virus de papilomavirus humano.Info
- Publication number
- MXPA04009060A MXPA04009060A MXPA04009060A MXPA04009060A MXPA04009060A MX PA04009060 A MXPA04009060 A MX PA04009060A MX PA04009060 A MXPA04009060 A MX PA04009060A MX PA04009060 A MXPA04009060 A MX PA04009060A MX PA04009060 A MXPA04009060 A MX PA04009060A
- Authority
- MX
- Mexico
- Prior art keywords
- hpv
- vlps
- vaccine
- vlp
- protein
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
- C07K14/01—DNA viruses
- C07K14/025—Papovaviridae, e.g. papillomavirus, polyomavirus, SV40, BK virus, JC virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
- C12N7/04—Inactivation or attenuation; Producing viral sub-units
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5258—Virus-like particles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20023—Virus like particles [VLP]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
La presente invencion se refiere a una composicion de vacuna que comprende VLPs que contienen proteinas L1 o derivados funcionales de proteina L1 de genotipos HPV 16, HPV 18, HPV 31 y HPV 45.
Description
PARTÍCULAS DE TIPO VIRUS DE PAPILOMAVIRUS HUMANO
La presente— invención- se- refiere- a~vacu nas— eontra~¾l~iiPV.~
Particularmente, la invención se refiere a vacunas que comprenden partículas de tipo virus (VLPs), especialmente partículas de tipo virus que comprenden proteínas del papilomavirus humano (HPV). Los papilomavirus son pequeños virus tumorales de ADN que son altamente específicos. Hasta el momento, se han descrito más de 1 00 genotipos de papilomavirus humanos (HPV) individuales. Los HPVs son generalmente específicos de la piel (por ejemplo HPV-1 y 2) o de las superficies mucosas (por ejemplo HPV-6 y 1 1 ), y habitualmente ca usan tumores benignos (verrugas) que persisten durante varios meses o años. Tales tumores benignos pueden ser incómodos para los individuos afectados, pero no tienden a ser una amenaza para la vida, con pocas excepciones . Algunos HPV están también asociados a cánceres. La asociación positiva más fuerte entre HPV y cáncer humano es la que existe entre HPV-16 y HPV-1 8 y carcinoma del cuello de la matriz. El cáncer del cuello de la matriz es la malignidad más común en los países desarrollados, apareciendo aproximadamente 500.000 nuevos casos en el mundo cada año. Ahora es técnicamente factible combatir activamente las infecciones primarias por HPV-16, e incluso los cánceres establecidos que contienen HPV-16, utilizando vacunas. Para una revisión de las perspectivas de vacunación profiláctica y terapéutica contra HPV-16 véase Cason J. , Clin . Immunother. 1 994; 1 (4) 293-306 y Hagenesee M E. , Infections ¡n Medicine 1 997 14(7) 555-556, 559-564. Aunque pueden aparecer variaciones menores, todos los g e n ?t? a s_d e_M P s—d es cri t os~t i enen al menos ocho genes tempranas, E1 a
E8, y dos genes tardíos L 1 y L2. Además, una región reguladora cadenas arriba alberga las secuencias reguladores que parecen controlar la mayoría de los sucesos transcripcionales del genoma de HPV. Se describen vacunas basadas en L1 de HPV en los documentos WO94/00152, WO94/20137, WO93/02184 y WO94/05792. Dicha vacuna puede comprender el antígeno L1 como monómero , un capsómero o una partícula de tipo virus. Los procedimientos para la preparación de VLP son bien conocidos en la técnica, e incluyen los enfoques de desensamblaje-ensamblaje de VLP para proporcionar una homogeneidad potenciada, por ejemplo como se describe en los documentos WO9913056 y US6245568. Tales partículas pueden comprender adicionalmente proteínas L2. Se describen vacunas basadas en L2, por ejemplo, en el documento WO93/00436. Otras vacunas de HPV están basadas en las proteínas tempranas, tales como E7, o en proteínas de fusión tales como L2-E7. A pesar del trabajo sobre vacunas HPV, no existe todavía una vacuna ampliamente eficaz contra el cáncer del cuello de la matriz. La presente invención se refiere a una vacuna mejorada contra el papilomavirus humano. En un primer aspecto, la presente invención se refiere a una composición de vacuna que comprende VLP que contienen proteínas L1 o derivados funcionales de proteína L1 de HPV 1 6, HPV 18, HPV 31 y HPV La invención se refiere también a un procedimiento de producción de^acun¾T"corñprendlendo el procedimiento combinar VLP que contienen proteínas L1 o derivados funcionales de proteínas L1 de HPV 16, HPV 18, HPV 31 y HPV 45. La invención se refiere además al uso de una mezcla de VLPs que contienen proteínas L1 o derivados funcionales de proteína L1 de HPV 16, HPV 1 8, HPV 31 y HPV 45 en la preparación de una vacuna para la prevención del cáncer del cuello de la matriz. La invención se refiere además a un procedimiento de prevención del cáncer del cuello de la matriz, comprendiendo el procedimiento suministrar a un individuo con riesgo de cáncer del cuello de la matriz una cantidad eficaz de una vacuna como se describe anteriormente, tal como una vacuna que comprende una mezcla de VLPs de HPV 16, HPV 18, HPV31 y HPV 45. Las VLPs de la presente invención pueden formarse a partir de proteína L1 completa de HPV o de ciertos derivados de L1 utilizando procedimientos estándar en la técnica, por ejemplo como los descritos en el documento W099/13056, incorporado a la presente memoria como referencia. Se prefiere que la proteína L1 utilizada para formar la VLP sea una proteína L1 truncada. Preferiblemente al menos una de las VLPs comprende una proteína L1 truncada, y preferiblemente todas las proteínas L1 en la vacuna de combinación son proteínas L1 truncadas. Preferiblemente, el truncamiento elimina una señal de localización nuclear.
Preferiblemente, el truncamiento es un truncamiento C-terminal, Preferiblemente, el truncamiento C-terminal elimina menos de 50 aminoácidos- más- preferiblemente menos de^ 40 aminoácidos. Lo mas preferiblemente, el truncamiento C-terminal elimina 34 aminoácidos de H PV 1 6 y 35 aminoácidos de HPV 1 8. Las proteínas L1 truncadas son derivados adecuadamente funcionales de proteínas L1 . Los derivados funcionales de proteína L1 son capaces de desencadenar una respuesta inmune (si es necesario, cuando se usa un adyuvante adecuado), siendo capaz la citada respuesta inmune de reconocer una VLP constituida por la proteína L1 completa y/o el tipo HPV del que derivaba la proteína L Í . Las VLPs de la invención pueden comprender también otros tipos de derivados funcionales de proteínas, incluyendo mutantes de proteínas L1 completas o truncadas de HPV tales como mutantes de eliminación , sustitución o inserción . Los derivados adecuados incluyen también secuencias de codón optimizadas. La proteína L1 o su derivado pueden ser también una proteína de fusión, tal como la fusión de la proteína L1 con L2 o una proteína temprana. Preferiblemente , las proteínas de fusión comprenden proteínas de un solo genotipo de HPV. Las VLPs preparadas a partir de proteínas L 1 quiméricas en las que se unen proteínas L1 de un genotipo a proteínas L1 de otros genotipos no son las preferidas. La proteína L1 o el derivado funcional de la proteína es capaz de formar una VLP adecuadamente, y la formación de VLP puede evaluarse mediante técnicas estándar tales como, por ejemplo, microscopía electrónica y dispersión dinámica de luz láser. Preferiblemente, la polidispersidad de las VLPs es menor de G l-5 — |?-t?¾¾-? referible mentedme ñor de~O71 , y más preferibl emente menor de 0,08 cuando se mide utilizando un Malvern Zetasizer 3000HS en condiciones como las descritas en la presente memoria. El uso del término "proteína" o la referencia a una proteína específica, por ejemplo "L1 " se considera en adelante en la presente memoria que incluye la referencia a derivados funcionales de proteína, a menos que se indique otra cosa o resulte obvio del contexto. En un aspecto preferido de la invención, la vacuna de la invención tiene sólo cuatro tipos de VLP - HPV 16, HPV 18, HPV 31 y HPV 45. Preferiblemente, las VLPs son VLPs sólo de L1 de cada uno de estos cuatro genotipos. Como alternativa, y la más preferida, la vacuna comprende una valencia de HPV adicional, haciendo una vacuna pentavalente. Preferiblemente, la valencia adicional es una VLP que comprende una proteína L1 o un derivado funcional, como anteriormente, de uno de HPV 52, 53, 58, 33, 35, 56 y 59. Preferiblemente, el quinto genotipo es HPV 33 cuando la vacuna es para uso en Sudamérica o HPV 52, 53 o 58 cuando la vacuna es para uso en Asia. La presente invención se extiende también a vacunas que comprenden 2 o más valencias adicionales, para proporcionar una vacuna con 6 o más genotipos. En una modalidad preferida, la combinación excluye las VLPs de genotipos 6a, 6b o HPV 1 1 .
Preferiblemente , la vacuna de la invención es al menos un 55% eficaz en la prevención del cáncer del cuello de la matriz, más preferiblemente- un~ 60%T^5%7~70%7~75%, preferiblemente urT $0% o aún más eficaz en la prevención del cáncer del cuello de la matriz. Para evitar dudas , el porcentaje de eficacia en la prevención del cáncer del cuello de la matriz significa la protección contra todos los cánceres del cuello de la matriz inducidos por infección por HPV, y no sólo la protección contra el cáncer causado por un genotipo. La prevención puede evaluarse adecuadamente , du rante 1 año después de la vacunación inicial, aunque las vacunas preferidas son igualmente eficaces durante 2, 3, 4, 5 o más años. El porcentaje de eficacia puede aumentarse seleccionando los genotipos de HPV apropiados para dirigir la formulación de vacuna a á reas geográficas especificas . Preferiblemente, la combinación de VLPs en la vacuna no reduce la inmunogenicidad de cada tipo de VLP. Particularmente, se prefiere q ue no haya interferencias entre las VLPs de HPV en la combinación de la invención, de tal modo que la vacuna de VLP combinada de la invención sea capaz de ofrecer una protección eficaz contra la infección por cada genotipo de HPV representado en la vacuna. De forma adecuada , la respuesta inmune contra un tipo de VLP dado en la combinación es de al menos u n 50% de la respuesta inmune de ese mismo tipo de VLP cuando se mide individualmente, preferiblemente un 100% o sustancialmente un 100% . Para respuestas a las VLPs de HPV 1 6 y H PV 1 8, la vacuna combinada de la invención estimula preferiblemente una respuesta inmune que es al menos un 50% de la proporcionada por una vacuna combinada de VLP de HPV 16/HPV 18. Convenientemente, la respuesta inmune generada por la vacuna de la invención está a un nivel en el que~se^o1ys v"á~to avía eFefecto protector de cada tipo de VLP. La respuesta inmune puede medirse adecuadamente, por ejemplo, mediante respuestas de anticuerpo, como se ilustra en la presente memoria. La vacuna de la invención puede utilizarse para tratar o prevenir la infección y/o enfermedad por HPV. Por ejemplo, la vacuna puede utilizarse terapéuticamente para reducir la carga viral y/o las infecciones que conducen al carcinoma del cuello de la matriz o secuelas CIN III. La invención se refiere por tanto al uso de la vacuna de la invención en el tratamiento terapéutico de enfermedades relacionadas con la infección por HPV y en la profilaxis de infección o enfermedad . La invención se refiere también al uso de la combinación de VLP de la invención en la generación de una respuesta inmune contra HPV 16, 1 8, 31 y 45. La vacuna de la invención puede formularse opcionalmente con VLP que proporcionen protección frente a verrugas genitales, tales como VLPs que contienen la proteína L1 de genotipos HPV 6a, 6b y/o HPV 1 1 . Preferiblemente, las VLPs comprenden la proteína L1 de HPV sola y ninguna proteína L2 ni fragmento de proteína. Las vacunas de la invención pueden comprender otras proteínas o fragmentos de proteína además de la proteína L1 o derivado.
Las proteínas/péptidos pueden suministrarse en forma quimérica con la proteína L1 en la VLFI, encapsuladas en una VLP o coformuladas en una mezcla con las VLPs. Pueden coadministrarse también otras proteínas o péptidos con la vacuna de la invención. ~E~n un aspecto~T1a vacuna comprende una proteína L2 de HPV o derivado de L2 tal como un péptido L2, por ejemplo como se describe en K. Kawana et al. Vaccine 19, (2001 ) pl496-1 502, incorporado a la presente memoria como referencia. En una realización preferida adicional, la vacuna de la invención puede formularse con antígenos tempranos de HPV tales como E1 , E2, E3, E4, E5, E6, E7, E8 o derivados inmunológicamente activos de los mismos. Cuando se suministran en forma quimérica, es preferible utilizar un fragmento inmunogénico de aproximadamente 30-60 aminoácidos del antígeno temprano. Opcionalmente, la vacuna puede formularse o coadministrarse también con antígenos no de HPV. Convenientemente, estos antígenos pueden proporcionar protección contra otras enfermedades, lo más preferiblemente enfermedades de transmisión sexual tales como virus del herpes simple, chlamydia y VIH. Los inventores prefieren particularmente que la vacuna comprenda gD o una forma truncada de la misma de HSV, preferiblemente la proteína gD2t como se describe en el documento W099/45957. De esta manera, la vacuna proporciona protección contra tanto HPV como HSV. Los antígenos de VIH preferidos se describen en los documentos WO/99 6884 y WO/0154719. La presente invención se refiere en general a una mezcla de VLPs que contienen proteínas de cápsida de HPV16, 18, 31 y 45, tales como VLP de sólo L1 . En una modalidad particularmente preferida, la invención proporciona una vacuna que comprende una mezcla de VLPs de HPV 1 6, VLPs de HPV 18, VLPs de HPV 31 y VLPs de HPV 45. La referencia en la presente- memoria^a^VCP^de- HPV~ Y6", por ejemplo, es una referencia a una VLP de L1 en la que la proteína L1 o el derivado de L1 es de HPV 16. El mismo principio de nomenclatura se aplica, por extensión, a otras VLPs descritas en la presente memoria, tales como VLPs de HPV 18, HPV 31 y HPV 45. Preferiblemente, cada VLP contiene proteína L1 de un solo genotipo de HPV. Dicha vacuna puede formularse mediante la producción de VLP individuales de HPV 16, 18, 31 y 45, seguida de la combinación de dichas VLP. Preferiblemente, no hay otras proteínas HPV en la VLP distintas de L1 . Se prefieren también las VLPs que contienen proteínas de un solo genotipo de HPV, tales como VLP con L1 y L2 de HPV 16. Sin embargo, en una modalidad alternativa de la invención, las
VLPs pueden ser VLPs mixtas, comprendiendo una VLP mixta proteína L1 de un genotipo combinada con proteína L1 de un segundo genotipo, siendo las diferentes proteínas L1 proteínas L1 no quiméricas, sino que se asocian conjuntamente en la misma estructura de cápsida para formar VLPs ¡nmunogénicas. Las combinaciones preferidas incluyen cualquier permutación de los genotipos 16, 18, 31 y 45 - por ejemplo la invención puede comprender una VLP mixta HPV 16/HPV 18 en combinación con una VLP mixta HPV31 /HPV45, o VLPs mixtas 16/31 en combinación con VLPs mixtas 18145. Las combinaciones de más de dos genotipos de L1 en una VLP están también contemplada. Las VLPs mixtas pueden producirse mediante la expresión separada de~las~pToteína^=^ seguida de la combinación para formar VLPs, como se ejemplifica en la presente memoria. Como alternativa, pueden expresarse múltiples proteínas L1 en la misma célula, de uno o varias construcciones de ADN. Por ejemplo, pueden transformarse o transfectarse múltiples construcciones de ADN en células huésped, codificando cada vector una proteína L1 diferente. Como alternativa, puede utilizarse u n solo vector con múltiples genes L1 , controlados por un promotor compartido o por múltiples promotores individuales. Los elementos IRES pueden incorporarse también al vector, cuando sea apropiado. Utilizando dichas estrategias de expresión , las proteínas L 1 coexpresadas pueden copurificarse para la formación posterior de VLP, o pueden formar espontáneamente VLPs mixtas que pueden purificarse después. Cuando se utilizan VLPs mixtas, un proceso preferido para la producción de VLPs mixtas comprende la preparación de VLP de proteínas L 1 o derivados, tales como proteínas L1 , a partir de diferentes genotipos de papilomavirus, la mezcla de las proteínas si es necesario y el ensamblaje de las proteínas para producir VLPs mixtas. Las proteínas L1 pueden estar en forma de un extracto bruto, estar parcialmente purificadas o purificarse antes de la mezcla. Preferiblemente, las proteínas están al menos parcialmente purificadas antes de combinarse. Opcionalmente, puede llevarse a cabo u na purificación adicional de las VLPs mixtas después del ensamblaje. Cuando se utilizan antígenos adicionales, estos pueden añadirse cuando sea apropiado. En una realización, las VLPs mixtas pueden prepararse media n te — el — d ese n rs a m blaje e dos ó mas VLFs^ seguiclo por ía~ combinación de los componentes de las VLPs desensambladas en cualquier punto adecuado antes del reensamblaje. Este enfoque es adecuado cuando las VLPs se forman espontáneamente cuando se expresa la proteína L1 , como ocurre por ejemplo en algunas cepas de levadura. Cuando la expresión de la proteína L 1 no conduce a la formación espontánea de VLP, las preparaciones de proteínas L 1 o capsómeros pueden combinarse antes del ensamblaje en VLP. El ensamblaje de las VLPs se consigue generalmente mediante la eliminación de un agente red uctor. Como tal, en la producción de VLPs mixtas, la mezcla de proteínas tiene lugar preferiblemente antes de la eliminación de un agente reductor de la mezcla de proteínas. Preferiblemente, la producción de VLPs mixtas comprende la etapa de la formación de VLPs mixtas a partir de una mezcla de proteínas L1 disociadas mediante la eliminación de la mezcla de un agente reductor en condiciones que permiten que se formen las VLPs. Preferiblemente el proceso de reensamblaje es el resultado de la eliminación de un agente reductor, tal como ß-mercaptoetanol . Sin embargo, es conocido que la formación de VLP depende del pH , de los iones metálicos y de la salinidad, así como de la presencia de un agente reductor. Como tal, en ciertas circunstancias, puede preverse que las VLPs podrían formarse en presencia de un agente reductor. Es sólo importante para la invención que la mezcla de proteínas de diferentes genotipos ocurre antes del cambio de la condición ambiental que permite que se formen la VLPs mixtas, sea esta el pH, los iones metálicos, la Cuando se utilizan VLPs mixtas, preferiblemente los componentes de las VLPs se mezclan en las proporciones en que se desean en la VLP mixta final. Por ejemplo, una mezcla de la misma cantidad de una proteína L 1 parcialmente purificada de HPV 16 y HPV 18 proporciona una VLP mixta con cantidades aproximadamente iguales de cada proteína. Las soluciones de vacuna que comprenden VLPs mixtas pueden estabilizarse mediante composiciones conocidas en la técnica, tales como las de los documentos WO 98/44944, WO0045841 , incorporados a la presente memoria como referencia. Para todas las vacunas de la invención se prefiere utilizar la vacuna para la vacunación de chicas adolescentes de 10-1 5 años de edad, preferiblemente de 1 0-1 3 años. La vacuna puede administrarse también a mujeres después de una prueba de papanicolau anormal o después de la eliminación por cirugía de una lesión causada por HPV. Preferiblemente, la vacuna se suministra en régimen de 2 o 3 dosis, por ejemplo en un régimen de 0, 1 meses o un régimen de 0, 1 y 6 meses, respectivamente. Convenientemente, el régimen de vacunación incorpora una inyección de recuerdo después de 5 a 10 años, preferiblemente de 1 0 años. Preferiblemente, la vacuna es una formulación de vacuna líquida, au nque la vacuna puede liofilizarse y reconstituirse antes de la administración . Las vacunas de la invención pueden comprender también adyu antes en cOmbinac^ las VLPs de la invención se utilizan en combinación con aluminio, y se adsorben adecuadamente o se adsorben parcialmente sobre adyuvantes de aluminio. Se prefieren también adyuvantes que estimulan una respuesta dé tipo Th 1 tales como 3DMPL o QS21 . Convenientemente, el adyuvante es una sal de aluminio, preferiblemente en combinación con 3D-MPL, tal como fosfato de aluminio y 3D-MPL. Un adyuvante preferido es el hidróxido de aluminio, siendo especialmente preferida la combinación de hidróxido de aluminio y 3D-MPL. Cuando las VLPs se adsorben sobre adyuvantes que contienen aluminio, el adyuvante se añade preferiblemente antes de mezclar las VLPs para formar el producto de vacuna final. La vacuna puede comprender también aluminio o un compuesto de aluminio como estabilizante, y la presente invención se refiere también a una vacuna de combinación estabilizada en la que las VLPs están adsorbidas sobre una sal de aluminio. Convenientemente , las VLPs son más estables a lo largo del tiempo después de la adsorción sobre una sal de alu minio que en ausencia de alu minio. Las VLPs preferiblemente estabilizadas se obtienen o son obtenibles mediante procedimientos según el ejemplo 1 , sección C3. Las vacunas de la invención pueden proporcionarse mediante cualquiera de una variedad de rutas tales como oral, tópica , subcutánea, mucosa (típicamente intravaginal), intravenosa, intramuscular, intranasal , sublingual, intradérmica y a través de supositorio . La admin istración intramuscular-e^ntradérmica son la s~p re ferinas" La dosificación de VLP y otras proteínas variará con el estado, el sexo, la edad y el peso del individuo, con la vía de administración y el
HPV de la vacuna. La cantidad puede variar también con el número de tipos de VLP. Convenientemente, el suministro es de una cantidad de VLP adecuada para generar una respuesta protectora ínmunológica .
Convenientemente, cada dosis de vacuna comprende 1 -100 9 de cada VLFI , preferiblemente 5-80 µg , más preferiblemente 5-30 µ9 de cada VLP , lo más preferiblemente 5-20 µ9 de cada VLP, prefiriéndose especialmente
5 µ9 , 6 µ9, 1 0 µg , 1 5 µ9 O 20 9_ La vacuna multivalente de la presente invención se produce adecuadamente combinando VLP de L1 purificadas. Los procedimientos para la producción de VLP de L1 son bien conocidos en la técnica, e incluyen los procedimientos dados en los documentos W09531 532,
W0961 5247 , WOOO/09671 y US5888526, los contenidos completos de , los cuales se incorporan a la presente memoria. Adecuadamente, las VLPs de la invención se preparan med iante ensamblaje y desensamblaje de VLPS, para proporcionar VLP homogéneas y puras. Se dan ejemplos de procesos adecuados en los documentos WO0057906, US6245568 y WO9913056. Preferiblemente, las VLPs se preparan a partir de células de insecto tales como células Sf9 o Hi-5, aunque puede utilizarse también cualquier célula adecuada tal como células de E. coli o levadura, por ejemplo, S. Cerevisiae, S. pombe o Pichia sp. Preferiblemente, la purificación de las VLPs después de la expresión— d«H H cltjye^Ti¾^-T ¾"S~de^a¾— etap¾¾— de- cTomatoigTafí¾""d"e" intercambio aniónico (dimetilaminoeltilo - DMAE), cromatografía de intercambio aniónico (trimetilaminoetilo - TMAE), cromatografía de hidroxiapatito, filtración tal como filtración nanométrica o ultrafiltración o cromatografía de interacción hidrofóbica. Preferiblemente, se realiza al menos una etapa de intercambio aniónico durante la purificación, y más preferiblemente se utilizan dos etapas de intercambio aniónico. Preferiblemente, se realiza al menos una etapa de purificación por intercambio aniónico antes de mezclar las proteínas. Opcionalmente, puede emplearse una etapa de irradiación con UV. Para evitar dudas, las explicaciones completas de todos los documentos referidos en la presente memoria se incorporan como referencia. La presente invención se ilustra mediante los siguientes ejemplos y figuras no limitativos, en los que: Figura 1 ilustra las VLPs mixtas en comparación con VLPs de HPV 16 evaluadas por ME; Figuras 2 y 3 ilustran la distribución de tamaños de las VLPs mixtas; Figura 4 ilustra las respuestas de anticuerpos contra VLP 16 en una vacuna de combinación mixta de HPV 16, 1 8, 31 , 45 frente a un control de HPV 1 6; Figura 5 ilustra las respuestas de anticuerpo contra VLP 1 8 en una vacuna de combinación mixta de HPV 16, 18, 31, 45 frente a un control de HPV 18; Figtífa-eHta^tfa as^es uesta^^e^-ni ueTpO^oiitra- tP-S -e- ' una vacuna de combinación mixta de HPV 16, 18, 31, 45 frente a un control de HPV 31 ; y Figura 7 ilustra las respuestas de anticuerpo contra VLP 45 en una vacuna de combinación mixta de HPV 16, 18, 31, 45 frente a un control de HPV 45.
Ejemplo 1 La combinación de VLP de L1 de HPV 16 y HPV 18 se detalla en la presente memoria. Las proteínas L1 de los demás genotipos de HPV pueden producirse fácilmente mediante procedimientos similares, ya conocidos en la técnica. A Preparación de VLP de L1 de HPV 16118 La producción de VLP de HPV 16 y HPV 18 se llevó a cabo utilizando protocolos estándar, por ejemplo véase el documento W09913056. Las proteínas HPV 16/18 se expresaron en células de Trichoplusia ni (High Five™) (a una densidad de -350000 células/ml) infectadas con baculovirus recombinante (MOI de 0,3) que codifica el gen de L1 de interés de HPV 16 o 18. Las células se recogieron aproximadamente 72 horas después de la infección. B Recogida celular/extracción de antígenos El antígeno (L1-16/18) se extrajo de células Hi5 en un proceso de tres etapas de concentración, extracción y clarificación. La etapa de concentración consiste en eliminar hasta un 90% del medio de cultivo, y se realizó mediante filtración de flujo tangencial. La etapa de extracción se realizó— con un ta mpón— hipolónico— (XciS— 20mM,_pH 8,5). Se utilizó un volumen igual al volumen de cultivo para realizar la extracción. Se utilizó un tiempo mínimo de contacto de media hora con agitación suave. La clarificación se realizó mediante filtración de flujo tangencial. C Purificación El proceso de purificación se llevó a cabo a temperatura ambiente. Se añadió ß-mercaptoetanol (4% p/p) al extracto para desensamblar las VLPs en capsómeros, para ambos antígenos, L1 -16/18.
Se añadió glicerol hasta una concentración de 10% p/p justo antes de la adición de ß-mercaptoetanol. Todos los tampones utilizados se filtraron a través de filtros de
0,22 µ?? antes del almacenamiento a 2°C-8°C. Antes de cada proceso de purificación, las matrices de gel se esterilizaron y equilibraron con tampón apropiado antes de la carga de la muestra. Los regímenes de purificación se dan para la purificación separada de L1 tanto de HPV 16 como 18. Estos esquemas son aproximadamente similares, e implican las etapas de: Cromatografía de intercambio aniónico (dimetilaminoetilo - DMAE),
Cromatografía de intercambio aniónico (trimetilaminoetilo - TMAE),
Cromatografía de hidroxiapatito, Filtración nanométrica (Planova), Ultrafiltración, Cromatografía de interacción hidrófobo (utilizando Octilsefarosa) para HPV Cromatografía de intercambio aniónico (DEAE) para HPV 16; y F H t ra e i ó n e s t é ril^ Específicamente: Cl Purificación del antígeno L1 -18 Cromatografía de intercambio aniónico DMAE El extracto clarificado (proteína a una concentración de ~1 g/ml, con la proteína L1 a -150 mg/ml) se aplica a una columna de intercambio aniónico (dimetilaminometilo). La elución se realiza con tampón (Tris 20 mM I NACI 200 mm I ß-mercaptoetanol BME al 4%), pH 7,9 ± 0,2 . El antígeno se eluye en aproximadamente 5 volúmenes de columna y el perfil de elución se controla a 280 nm. Cromatografía de intercambio aniónico T AE El eluido de la primera etapa se diluye con 1 volumen de H20/BME al 4%. El eluido diluido se aplica después a una segunda columna de intercambio aniónico (trimetilaminoetilo). La elución se realiza con tampón (Tris 20 mM I NAcI 200 mM I BME al 4%), pH 7,9 ± 0,2. El antígeno se eluye en aproximadamente 4 volúmenes de columna y el perfil de elución se controla a 280 nm. Cromatografía de hidroxiapatito El eluido de la etapa de TMAE se aplica a una columna de hidroxiapatito (HA). Después de la aplicación de la muestra, el gel se eluye con aproximadamente 2,5 volúmenes de columna de tampón (NaH2P04 100 mM I NACI 30 mM I BME al 4%), pH 6,0 ± 0,2.
Filtración nanométrica (Planoya) El eluido HA se diluye para alcanzar las siguientes condiciones: tampón (NaH2P04 25 mM | NaCJ 10 mM I BME al 4%), pH J7J5
± 0,2. Después, se filtra sucesivamente a través de un prefiltro de
0,2 µ?? y a través de un filtro Planova 1 5N de 0, 12 m2. La filtración se realiza a una presión constante de 20 kPa ± 2 kPa. Ultrafiltración La ultrafiltración se realiza con un sistema de ultrafiltración de flujo tangencial equipado con membranas de poliétersulfona (módulo Céntramete 0, 1 m2, 1 00 kD). El eluido de Planova se trata para alcanzar las siguientes condiciones: tampón (NaH2P04 100 mM I NaCI 30 mM I BME al 4%) , pH 6,0 ± 0,2; después se carga en el sistema, se concentra 5 veces y se somete a diafiltración con inyección continua de -10 volúmenes de partida de tampón (NaH2P04 20 mm I NACI 500 mM), pH 6,0 ± 0,2 . Cromatografía de interacción hidrófoba (Octilsefarosa) El permeado de ultrafiltración se aplica a una columna de Octilsefarosa. Esta etapa de cromatografía se procesa en modo negativo con aproximadamente 5 volúmenes de columna de tampón (Na3P04 20 mM I NaCI 500 mM), pH 6,0 ± 0,2. Filtración estéril La solución de antígeno L1 -18 purificado se esteriliza mediante filtración a través de una membrana de 0,22 µ??. C2 Purificación del antígeno L1 -16 Cromatografía de intercambio aniónico DMAE El extracto clarificado se aplica a una columna de intercambio ^afliónie^-(difnetilam noetilo) La elución se realiza con tampón (Tris 20 mM I NACI 180 m I BME al 4%), pH 7,9 ± 0,2. El antígeno se eluye en aproximadamente 4 volúmenes de columna y el perfil de elución se controla a 280 nm. Cromatografía de intercambio aniónico TMAE El eluido de la primera etapa se diluye con 1 volumen de H20/BME al 4%. El eluido diluido se aplica entonces a una segunda columna de intercambio aniónico (trimetilaminoetilo). La elución se realiza con tampón (Tris 20 mM I NaCI 180 mM I BME al 4%), pH 7,9 ± 0,2 . El antígeno se eluye en aproximadamente 5 volúmenes de columna y el perfil de elución se controla a 280 nm. Cromatografía de hidroxiapatito (HA) El eluido de la etapa de TMAE se aplica a una columna HA. Después de la aplicación de la muestra, el gel se. eluye con aproximadamente 3 volúmenes de columna de tampón (NaH2P04 100 mM | NaCI 30 mM I BME al 4%), pH 6,0 ± 0,2. Filtración nanométrica (Planova) El eluido HA se diluye para alcanzar las siguientes condiciones: tampón (NaH2P0 25 mM I NaCI 1 0 mM I BME al 4%), pH 7,5 ± 0,2. Después, se filtra sucesivamente a través de un prefiltro de 0,2 µ?p y un filtro Planova 15N de 0, 12 m2 . La filtración se realiza a una presión constante de 20 kPa ± 2 kPa.
Ultrafiltración La ultrafiltración se realiza con un sistema de ultrafiltración de flujo tangencial equipado con membranas de poliétersulfona (módulo
Centramate 0, 1 m2, 100 kD). El eluido de Planova se trata para alcanzar las siguientes condiciones: tampón (NaH2P04 100 mM I NaCl 30 mM I BME al 4%), pH 6,0 ± 0,2; después se carga en el sistema, se concentra 5 veces y se somete a diafiltración con inyección continua de -10 volúmenes iniciales de tampón (NaH2P04 20 mM / NACI 500 mM), pH 6,0 ± 0,2. Cromatografía de intercambio aniónico DEAE El eluido de ultrafiltración se ajusta a la conductividad del tampón de equilibrio (Na3P04 20 mM I NaCl 250 mM), pH 6,0 ± 0,2 y se aplica a una columna de intercambio aniónico (dietilaminoetilo). La elución se realiza con tampón (NaH2P04 20 mM I NaCl 500 mM), pH 6,0 ± 0,2. El antígeno se eluye aproximadamente en 3 volúmenes de columna y el perfil de elusión se controla a 280 nm. Filtración estéril La solución de antígeno purificado L1 -16 se esteriliza mediante filtración a través de una membrana de 0,22 µ?t? C3 Cada tipo de VLP se adsorbe independientemente para producir un monovalente adsorbido concentrado. Preparación de monovalente adsorbido concentrado de VLPI6: Se adsorben 60 µg de VLPs purificadas de HPV16 en 150 µg de A13+, de AI(OH)3, a un pH de 6,0 ± 0,2, durante una hora a temperatura ambiente con agitación suave. Este monovalente adsorbido concentrado se almacena a +4°C. La adsorción se comprueba centrifugando la
-p re para ci ón— y cu a n tif i can d o Ja s VL Ps_e n_eJ_so_bj_en a dante, Preparación de monovalente adsorbido concentrado de VLP18: Se adsorben 60 µg de VLPs purificadas de HPV18 sobre 150 g de A13+ de AI(OH)3, a un pH de 6,0 ± 0,2, durante una hora a temperatura ambiente con agitación suave. Este monovalente adsorbido concentrado se almacena a 4°C. La adsorción se comprueba centrifugando la preparación y cuantificando las VLPs en el sobrenadante. D Preparación de vacuna final: Se combinaron monovalentes adsorbidos concentrados preparados mediante el procedimiento anterior para formar una suspensión que contenía 20 µ? de cada VLP por dosis. La vacuna final se almacena a +4°C. La adición de VLP de HPV 31 y 45 a una concentración de 20 µg de cada VLP completa la vacuna tetravalente. Los productos brutos adsorbidos combinados, o los productos brutos adsorbidos individuales, pueden mezclarse adicionalmente con adyuvantes tales como 3D-MPL. Ejemplo 2 A Preparación de VLP de L1 de HPV 16/18 La producción de VLP de HPV 16 y HPV 18 se llevó a cabo utilizando protocolos estándar, como anteriormente B Formación de VLPs mixtas El proceso de la invención implica el desensamblaje y después reensamblaje de las VLPs de H PV 16 y 1 8, de tal modo que el reensamblaje de L1 de HPV 1 6 y 1 8 se lleva a cabo conjuntamente para permitir-la -formacióJijde una VLP mixta. Las VLP de HPV 16 y 1 8 pueden combinarse en cualq uier punto adecuado del proceso anterior al punto en que las VLPs se reensamblan . A modo de ejemplo se han ensayado dos estrategias específicas: 1 mezclar ambos antígenos después de la etapa de HA, Basándose en la concentración de L1 en las combinaciones de HA, los dos componentes se mezclan para alcanzar una concentración igual de HPV16 y 1 8 para iniciar la etapa de ultrafiltración (UF). En este caso, después de la etapa de ultrafiltración se realiza una etapa de Octilsefarosa como para la pu rificación de HPV 1 8, seguida de un etapa de DEAE como se realiza en el procedimiento de HPV 16. 2 mezclar ambos extractos y copurificar. Basándose en la concentración de L1 en los extractos, las dos valencias se mezclan para alcanzar una concentración igual de HPV16 y 18 para iniciar la etapa de DMAE. De nuevo, después de la etapa de ultrafiltración, se realiza una etapa de Octilsefarosa como para HPV 1 8, seguida de una etapa de DEAE como se realiza en el procedimiento de HPV 1 6
VLP mixta de HPV16-HPV18 en la etapa UF
VLP mixta de HPV16-HPV18 en la etapa de DMAE Se aplica el mismo diagrama de flujo, pero la mezcla se realiza en la etapa de DMAE en lugar de en la etapa de UF. La concentración utilizada para la elusión en etapas de intercambio aniónico DMAE TMAE es de 200 mM. Resultados VLPs mixtas de HPV16-HPV18 en la etapa de UF Se produjeron dos lotes de VLPs mixtas (números de lote 31 b165c y 31 b166c) combinando proteínas L1 de HPV 16 y HPV 18. Pureza por SDS-Page La pureza de las VLPs mixtas era tan buena como la de los productos brutos "clásicos" de HPV 16 o HPV 18. La pureza de los productos brutos era mayor del 95%. Datos de ME - Fig 1 La ME de 31 B165C (retenido de UF después de la maduración) se comparó con un lote clásico de HPV16 (39B122c). Las VLPs estaban bien formadas, de tamaño homogéneo, sin agregación; están presentes algunas bandas de capsómeros en ambos experimentos . Distribución de tamaños La distribución de tamaños de las VLPs se determinó utilizando un Malvern Zetasizer 3000 HS. Las muestras se midieron sin diluir en una cubeta de plástico para análisis de Malvern (800 µ?/cubeta)- Las condiciones técnicas fueron: - longitud de onda del láser: 532 nm, - potencia del láser: 50 mW, - luz dispersada detectada a 90°, - temperatura: 25°C, - duración: determinación automática por el software, número: 3 medidas consecutivas, - diámetro z medio: por análisis acumulativo, - distribución de tamaño: por el procedimiento Contin. Los resultados clásicos para VLPs de L1 de HPV1 8 son: 70-80 nm con buena polidispersidad (< 0, 1 ) Los resultados clásicos para VLPs de L1 de HPV16 son: 60-70 nm con buena polidispersidad (< 0, 1 ) Para VLPs mixtas, se obtuvieron los siguientes resultados: 31 B165c : 85 nm con buena polidispersidad (0,08). Las VLP están casi completamente formadas al inicio de la maduración 31 B166c : 76 nm con buena polidispersidad (0,08). La distribución de tamaños del lote 31 B 165c y 31 B 166c medida por dispersión dinámica de luz láser se muestra en las Figuras 2 y 3. J_P_deJiPJM 6^HP^^8 mezclados en la etapa de DMAE El lote no°. 31 B167B se preparó a partir de los lotes E18L1 C005 (HPV18) y 39B167 (HPV16). Pureza por SDS-Page La pureza de las VLPs mixtas era tan buena como ambos productos brutos "clásicos". La pureza de los productos brutos era mayor del 95%. Distribución de tamaños La distribución de tamaños de las VLPs se determinó utilizando un Malvern Zetasizer 3000 HS. Los resultados clásicos para VLPs de L1 de HPV18 son: 70-80 nm con buena polidispersidad (< 0,1 ) Los resultados clásicos para VLPs de L1 de HPV16 son: 60-70 nm con buena polidispersidad (< 0,1 ) Para las VLPs mixtas, se obtuvieron los siguientes resultados: HPV16-HPV1 8 31 B 167S : 74 nm con buena polidispersidad (0,07). Las VLPs estaban casi completamente formadas al inicio de la maduración Ejemplo 3 - Producción de una vacuna de combinación mixta HPV 16, 18, 31 , 45. Introducción Se realizó un estudio de inmunogenicidad en ratones Balb/C utilizando una combinación de VLP de L1 16, 18, 31 y 45 truncadas C-terminales junto con adyuvante aluminio + 3D-MPL (en la presente memoria "adyuvante A" - 50 de sal de aluminio y 5 µ9 de 3D-MPL) Se inmunizaron 4 grupos de 10 ratones dos veces por — intramuscular_eLdJa_^y_^1_respectivamente con : 1 . VLP 31 (2 µ9)/ adyuvante A 2. VLP 45 (2 µg)/ adyuvante A 3. VLP 16 (2 µg) y VLP 18 (2 µ9)/ adyuvante A 4. VLP 16 (2 µ?), VLP 18 (2 µ9), VLP 31 (2 µg ) , VLP 45 (2 µ9)/ adyuvante A Las respuestas de anticuerpo contra VLP 16, 18, 31 y 45 se controlaron en los sueros tomados el día 35 (14 días después de dosis il). Los resultados se muestran en las figuras 4-7 Respuesta de anticuerpo contra VLP 16 • Se inducen fuertes respuestas de anticuerpo en sueros post II mediante VLP 16 formulada con VLP 1 8 en adyuvante A (grupo 3) o con la combinación completa (grupo 4) • Se mide un nivel similar de anticuerpos dirigidos contra VLP 16 en ambos grupos, y no se observa interferencia. Respuesta de anticuerpo contra VLP 18 • Se inducen fuertes respuestas de anticuerpo en sueros post II por VLP 18 formulada con VLP 16 sobre adyuvante A (grupo 3) o por la combinación completa (grupo 4). • Se mide un nivel similar de anticuerpos dirigidos contra VLP 18 en ambos grupos (menos de 1 ,5 veces de diferencia) y no se observó interferencia. Respuesta de anticuerpo contra VLP 31 • Se inducen fuertes respuestas de anticuerpo en sueros post II por VLP 31 formulada sola sobre adyuvante (grupo 1 ) o por la combinación completa (grupo 4). • Se mide un nivel similar de anticuerpos dirigidos contra VLP 31 en ambos grupos, por lo tanto no se observa interferencia. Respuesta de anticuerpo contra VLP 45 • Se inducen fuertes respuestas de anticuerpo en sueros post II por VLP 45 formulada sola en adyuvante A (grupo 2) o por la combinación completa (grupo 4). • Se mide un nivel similar de anticuerpos dirigidos contra VLP 45 en ambos grupos, por tanto no se observa diferencia.
Conclusiones No se observa interferencia cuando las cuatro VLP (VLP 16, 1 8, 31 y 45) se suministran como combinación.
Claims (1)
- REIVINDICACIONES 1 . Una composición de vacuna que comprende VLPs que — contienen pjOteínas_L1 o derivados funcionales de proteína L1 de genotipos HPV 16, H PV 1 8, HPV 31 y HPV 45 en donde la respuesta inmune generada por la vacuna está a un nivel en el cual el efecto productivo de cada tipo de VLP aún se observa. 2. Una vacuna según la reivindicación 1 , que comprende una mezcla de VLPs de HPV 1 6, VLP de HPV 1 8, VLP de HPV 31 y VLP de HPV 45, comprendiendo cada VLP proteínas L1 o derivados funcionales de proteína L 1 de un solo genotipo de HPV. 3. Una vacuna según la reivindicación 2, en la que las VLPs son VLPs de sólo L 1 que comprenden proteína L 1 de HPV o derivados fu ncionales de proteína 1 1 y ninguna otra proteína de HPV. 4. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende VLPs constituidas esencialmente sólo por proteínas de HPV 1 6, HPV 1 8, HPV 31 y HPV 45. 5. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que al menos una proteína L1 es una proteína L1 truncada. 6. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la composición comprende una VLP que contiene una proteína L1 o un derivado fu ncional de la misma de un genotipo HPV adicional. 7. Una composición de vacuna según la reivindicación 6, en la que la VLP adicional comprende una proteína L 1 o derivado funcional de proteína L 1 seleccionado de uno de HPV 33, 52, 53, 58, 35, 56 y 59. 8. Una composición de vacuna según cualquiera de las -reivindicaciones precedentes, que es al menos eficaz en un 60% en la prevención del cáncer del cuello de la matriz. 9. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende adicionalmente un antígeno temprano de HPV o un fragmento inmunológicamente activo del mismo seleccionado de E 1 , E2, E3, E4, E5, E6, E7 o E8. 1 0. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, formulada con un antígeno derivado de un organismo causante de un enfermedad de transmisión sexual. 1 1 . Una composición de vacuna según la reivindicación 1 0, en la que el antígeno es un antígeno de HSV o un fragmento inmunológicamente activo del mismo. 1 2. Una composición de vacuna según la reivindicación 10, en la que el antígeno es un antígeno de VIH o un fragmento inmunológ icamente activo del mismo. 1 3. Una composición de vacuna según la reivindicación 10, en la que el antígeno es un antígeno de chlamydia o un fragmento inmunológicamente activo del mismo. 14. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende una proteína L2 de HPV o un fragmento de la misma. 1 5. Una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende adicionalmente un adyuvante. 1 6. Una composición de vacuna según la reivindicación 1 5, en-la-que_eJ_adyuvante es una sal de aluminio. 1 7. Una composición de vacuna según la reivindicación 16, en la que la sal de alu minio es hidróxido de aluminio . 1 8. Una composición de vacuna según la reivindicación 16 o 17, que comprende adicionalmente 3D-MPL. 1 9. Una composición de vacu na según cualquiera de las reivindicaciones 1 -1 8, en la que las VLPs contienen proteínas L1 que no son quiméricas. 20. Un procedimiento de producción de vacuna, comprendiendo el procedimiento combinar VLPs que contienen proteínas L1 o derivados funcionales de proteína L1 de HPV 16, H PV 1 8, HPV 31 y HPV 45 para formar una vacuna según cualquiera de las reivindicaciones 1 -19. 21 . Uso de una mezcla de VLPs de HPV 1 6, HPV 1 8, HPV .31 y HPV 45 que comprenden la proteína L 1 o un derivado funcional de la misma en la preparación de una vacuna para la prevención o el tratamiento de un trastorno relacionado con la infección por HPV. 22. Un procedimiento de prevención de la infección por HPV o de tratamiento de una enfermedad relacionada con la infección por HPV, comprendiendo el procedimiento suministrar a un individuo con riesgo de infección o enfermedad una cantidad eficaz de una composición de vacuna según cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 23. Una composición de vacu na estabilizada que comprende una vacuna según una cualquiera de las reivindicaciones 1 -1 8, en la que las VLPs de HPV 16, 1 8, 31 y 45 se adsorben sobre hidróxido de aluminio afltes-de_m.e.z£la rse . 24. Una composición de vacuna, un procedimiento, o uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 -23, en los que la respuesta inmune contra un tipo de VLP dado en la vacuna es al menos un 50% de la respuesta del mismo tipo de VLP cuando se mide individualmente.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GBGB0206360.0A GB0206360D0 (en) | 2002-03-18 | 2002-03-18 | Viral antigens |
PCT/EP2003/002826 WO2003077942A2 (en) | 2002-03-18 | 2003-03-17 | Virus-like particles of human papillomavirus |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
MXPA04009060A true MXPA04009060A (es) | 2005-01-25 |
Family
ID=9933201
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
MXPA04009060A MXPA04009060A (es) | 2002-03-18 | 2003-03-17 | Particulas de tipo virus de papilomavirus humano. |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7217419B2 (es) |
EP (2) | EP2044953A1 (es) |
JP (2) | JP2005524674A (es) |
KR (2) | KR20050002868A (es) |
CN (1) | CN100528226C (es) |
AP (1) | AP1872A (es) |
AR (1) | AR039005A1 (es) |
AU (1) | AU2003218787B2 (es) |
BR (1) | BR0308444A (es) |
CA (1) | CA2479304C (es) |
EA (1) | EA011477B1 (es) |
EC (1) | ECSP045300A (es) |
GB (1) | GB0206360D0 (es) |
IL (2) | IL163814A0 (es) |
IS (1) | IS7426A (es) |
MX (1) | MXPA04009060A (es) |
MY (1) | MY139031A (es) |
NO (1) | NO20044326L (es) |
NZ (1) | NZ535085A (es) |
OA (1) | OA12787A (es) |
PL (1) | PL212981B1 (es) |
TW (1) | TW200400046A (es) |
UA (1) | UA85536C2 (es) |
WO (1) | WO2003077942A2 (es) |
ZA (1) | ZA200407029B (es) |
Families Citing this family (41)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8791237B2 (en) | 1994-11-08 | 2014-07-29 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for treatment of non-hodgkins lymphoma |
US8956621B2 (en) * | 1994-11-08 | 2015-02-17 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions and methods for treatment of cervical dysplasia |
CZ301212B6 (cs) * | 1998-10-16 | 2009-12-09 | Smithkline Beecham Biologicals S. A. | Vakcinacní prostredek |
US8771702B2 (en) * | 2001-03-26 | 2014-07-08 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Non-hemolytic LLO fusion proteins and methods of utilizing same |
GB0206360D0 (en) * | 2002-03-18 | 2002-05-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Viral antigens |
US7858098B2 (en) | 2002-12-20 | 2010-12-28 | Glaxosmithkline Biologicals, S.A. | Vaccine |
CA2519112C (en) * | 2003-03-24 | 2012-09-11 | Merck & Co., Inc. | Optimized expression of hpv 31 l1 in yeast |
MY140664A (en) * | 2003-09-29 | 2010-01-15 | Merck Sharp & Dohme | Optimized expression of hpv 45 l1 in yeast |
US20080160040A1 (en) * | 2004-04-15 | 2008-07-03 | Ghim Shin-Je | Plant-produced compositions for treating papillomavirus infection and related methods |
US7758866B2 (en) | 2004-06-16 | 2010-07-20 | Glaxosmithkline Biologicals, S.A. | Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52 |
GB0413510D0 (en) * | 2004-06-16 | 2004-07-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
WO2005123125A1 (en) * | 2004-06-16 | 2005-12-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine against hpv16 and hpv18 and at least another hpv type selected from hpv 31, 45 or 52 |
US8399610B2 (en) * | 2004-08-05 | 2013-03-19 | University College Cardiff Consultants Limited | HPV vaccine comprising peptides from host cell proteins |
GB0417430D0 (en) * | 2004-08-05 | 2004-09-08 | Uc3 | A novel HPV vaccine comprising peptides from host cell proteins |
CN101193653B (zh) * | 2005-02-01 | 2013-03-27 | 美国政府健康及人类服务部 | 用于诱导广泛交叉中和抗体的乳头瘤病毒l2 n末端肽 |
WO2006113209A1 (en) | 2005-04-15 | 2006-10-26 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods and compositions for producing an enhanced immune response to a human papillomavirus immunogen |
EA013325B1 (ru) * | 2005-04-26 | 2010-04-30 | Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. | Вакцина |
MX2007013472A (es) * | 2005-04-26 | 2008-04-02 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna. |
CN1328287C (zh) * | 2005-12-29 | 2007-07-25 | 西安交通大学 | Hpv16 l1蛋白模拟肽及其用于制备hpv16诊断试剂和疫苗的用途 |
WO2008026869A1 (en) * | 2006-08-28 | 2008-03-06 | Sungkyunkwan University Foundation For Corporate Collaboration | A dna vaccine for treating or preventing cervical cancer comprising a gene encoding hpv protein |
US7955603B2 (en) | 2006-09-29 | 2011-06-07 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Norovirus vaccine formulations |
US20100272753A1 (en) * | 2006-10-26 | 2010-10-28 | The Johns Hopkins University | Recombinant Adenovirus Vaccines |
WO2008115631A2 (en) * | 2007-02-08 | 2008-09-25 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Plant-produced compositions for treating papillomavirus infection and related methods |
US7709010B2 (en) * | 2007-03-09 | 2010-05-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Papillomavirus vaccine compositions |
US9428555B2 (en) | 2007-04-29 | 2016-08-30 | Beijing Wantai Biological Pharmacy Enterprise Co., Ltd. | Truncated L1 protein of Human Papillomavirus type 16 |
BRPI0815818A2 (pt) * | 2007-04-29 | 2016-08-02 | Beijing Wantai Biological Pharmacy Entpr Co Ltd | proteína l1 truncada do papiloma vírus humano tipo 18 |
EP2154149B1 (en) * | 2007-05-29 | 2019-07-10 | Xiamen University | A truncated l1 protein of human papillomavirus 6 |
CN101952320B (zh) * | 2007-06-18 | 2013-08-14 | 上海泽润安珂生物制药有限公司 | 具有免疫原性的物质 |
US8088392B2 (en) * | 2007-06-18 | 2012-01-03 | Yunxu Cao | Capsid proteins and uses therefore |
US20100266636A1 (en) | 2007-09-18 | 2010-10-21 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Method of conferring a protective immune response to norovirus |
SG10201601660YA (en) | 2007-09-18 | 2016-04-28 | Takeda Vaccines Inc | Method of conferring a protective immune response to norovirus |
US8100843B2 (en) * | 2009-03-24 | 2012-01-24 | GM Global Technology Operations LLC | Shape memory polymer medical cast |
EP2445525A2 (en) | 2009-06-25 | 2012-05-02 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Novel human papillomavirus (hpv) protein constructs and their use in the prevention of hpv disease |
CN102178944A (zh) * | 2010-09-17 | 2011-09-14 | 大连雅立峰生物制药有限公司 | 人乳头瘤病毒16和18型l1蛋白在昆虫细胞中的表达及应用 |
AU2012282658B2 (en) | 2011-07-11 | 2014-11-27 | Takeda Vaccines, Inc. | Parenteral norovirus vaccine formulations |
CN102552897B (zh) * | 2012-01-18 | 2013-10-30 | 广东华南联合疫苗开发院有限公司 | 一种宫颈癌预防性vlp疫苗 |
KR101559622B1 (ko) * | 2012-07-30 | 2015-10-13 | 중앙대학교 산학협력단 | 인유두종바이러스 바이러스 유사입자의 고효율 정제방법 |
CN104211782B (zh) * | 2013-06-04 | 2017-11-17 | 厦门大学 | 截短的人乳头瘤病毒45型l1蛋白 |
US10799574B2 (en) * | 2014-10-24 | 2020-10-13 | Hpvvax. Llc | Method and composition for treating cancer or skin lesion using a vaccine |
MX2017005418A (es) * | 2014-10-24 | 2017-11-30 | Hpvvax Llc | Tratamiento de cancer y lesion de piel. |
EP3419661A4 (en) * | 2016-02-27 | 2019-10-23 | Hpvvax, Llc | METHOD AND COMPOSITION FOR TREATING CANCER OR SKIN INJURY USING A VACCINE |
Family Cites Families (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9113809D0 (en) | 1991-06-26 | 1991-08-14 | Cancer Res Campaign Tech | Papillomavirus l2 protein |
DE122007000023I1 (de) | 1991-07-19 | 2007-08-09 | Univ Queensland St Lucia | Impfsstoff gegen Humanes Papillomavirus (typ 18) |
DE122007000096I1 (de) | 1992-06-25 | 2008-03-27 | Papillomavirus vakzine | |
US5437951A (en) | 1992-09-03 | 1995-08-01 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Self-assembling recombinant papillomavirus capsid proteins |
US5618536A (en) | 1992-09-03 | 1997-04-08 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Chimeric papillomavirus-like particles |
DE122007000090I1 (de) | 1993-03-09 | 2008-03-27 | Univ Rochester | Herstellung von menschlichem papillomavirus hüllprotein und virus-ähnlichen teilchen |
ATE204762T1 (de) | 1993-03-23 | 2001-09-15 | Smithkline Beecham Biolog | 3-0-deazylierte monophosphoryl lipid a enthaltende impfstoff-zusammensetzungen |
GB9326253D0 (en) | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccines |
ATE328068T1 (de) * | 1994-05-16 | 2006-06-15 | Merck & Co Inc | Papillomavirus vakzine |
ATE325875T1 (de) * | 1994-10-07 | 2006-06-15 | Univ Loyola Chicago | Papillomavirusähnliche partikel, fusionsproteine sowie verfahren zu deren herstellung |
AR004464A1 (es) | 1994-11-14 | 1998-12-16 | Merck Sharp & Dohme | Un metodo para producir una proteina de capside de papilomavirus |
JP3693449B2 (ja) | 1996-04-05 | 2005-09-07 | 三菱製紙株式会社 | 抗菌防黴剤およびそれを含有する繊維状物質 |
DK0973546T3 (da) | 1997-04-08 | 2004-06-28 | Merck & Co Inc | Stabiliserede formuleringer med human papillomavirus |
EP1700911B1 (en) | 1997-09-05 | 2016-04-06 | Medimmune, Inc. | In vitro method for disassembly/reassembly of papillomavirus virus-like particles (VLPs) |
GB9720585D0 (en) | 1997-09-26 | 1997-11-26 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
CA2324289C (en) | 1998-03-09 | 2010-07-13 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Combined vaccine compositions |
GB9806666D0 (en) | 1998-03-27 | 1998-05-27 | Stanley Margaret | Antigen preparation and use |
KR20010072470A (ko) | 1998-08-14 | 2001-07-31 | 폴락 돈나 엘. | 사람 유두종바이러스 바이러스-유사 입자의 정제방법 |
EP1105495B2 (en) | 1998-08-14 | 2009-01-21 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Method for producing yeast expressed hpv types 6 and 16 capsid proteins |
CZ301212B6 (cs) | 1998-10-16 | 2009-12-09 | Smithkline Beecham Biologicals S. A. | Vakcinacní prostredek |
PT1150712E (pt) * | 1999-02-05 | 2008-12-22 | Merck & Co Inc | Formulações para a vacina do vírus do papiloma humano |
US6245568B1 (en) * | 1999-03-26 | 2001-06-12 | Merck & Co., Inc. | Human papilloma virus vaccine with disassembled and reassembled virus-like particles |
GB9921147D0 (en) | 1999-09-07 | 1999-11-10 | Smithkline Beecham Biolog | Novel composition |
GB9921146D0 (en) | 1999-09-07 | 1999-11-10 | Smithkline Beecham Biolog | Novel composition |
AP2002002592A0 (en) | 2000-01-31 | 2002-09-30 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine for the prophylactic or therapeutic immunization against HIV. |
US6908613B2 (en) | 2000-06-21 | 2005-06-21 | Medimmune, Inc. | Chimeric human papillomavirus (HPV) L1 molecules and uses therefor |
US7279306B2 (en) * | 2000-07-06 | 2007-10-09 | Georgetown University | Stable (fixed) forms of viral capsid proteins, and viral capsid protein fusions, preferably papillomavirus L1 proteins, and uses thereof |
GB0110431D0 (en) * | 2001-04-27 | 2001-06-20 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Novel compounds |
AU2003213065A1 (en) * | 2002-02-14 | 2003-09-04 | Novavax, Inc. | Novel insect cell line |
GB0206360D0 (en) * | 2002-03-18 | 2002-05-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Viral antigens |
GB0206359D0 (en) * | 2002-03-18 | 2002-05-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Viral antigens |
AU2003293942B2 (en) | 2002-12-20 | 2009-12-10 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | HPV-16 and -18 L1 VLP vaccine |
MY140664A (en) | 2003-09-29 | 2010-01-15 | Merck Sharp & Dohme | Optimized expression of hpv 45 l1 in yeast |
-
2002
- 2002-03-18 GB GBGB0206360.0A patent/GB0206360D0/en not_active Ceased
-
2003
- 2003-03-17 AP APAP/P/2004/003136A patent/AP1872A/en active
- 2003-03-17 BR BR0308444-2A patent/BR0308444A/pt not_active Application Discontinuation
- 2003-03-17 AU AU2003218787A patent/AU2003218787B2/en active Active
- 2003-03-17 OA OA1200400239A patent/OA12787A/en unknown
- 2003-03-17 WO PCT/EP2003/002826 patent/WO2003077942A2/en active Application Filing
- 2003-03-17 MY MYPI20030925A patent/MY139031A/en unknown
- 2003-03-17 JP JP2003575995A patent/JP2005524674A/ja active Pending
- 2003-03-17 UA UA20040907208A patent/UA85536C2/ru unknown
- 2003-03-17 EA EA200401064A patent/EA011477B1/ru active Protection Beyond IP Right Term
- 2003-03-17 KR KR10-2004-7014693A patent/KR20050002868A/ko active Application Filing
- 2003-03-17 EP EP08171147A patent/EP2044953A1/en not_active Withdrawn
- 2003-03-17 CA CA2479304A patent/CA2479304C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-03-17 MX MXPA04009060A patent/MXPA04009060A/es active IP Right Grant
- 2003-03-17 US US10/508,222 patent/US7217419B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-03-17 EP EP03712047A patent/EP1492562A2/en not_active Ceased
- 2003-03-17 PL PL372937A patent/PL212981B1/pl unknown
- 2003-03-17 IL IL16381403A patent/IL163814A0/xx unknown
- 2003-03-17 NZ NZ535085A patent/NZ535085A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-03-17 KR KR1020107028371A patent/KR20110009249A/ko not_active Application Discontinuation
- 2003-03-17 CN CNB038063476A patent/CN100528226C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-03-18 TW TW092105904A patent/TW200400046A/zh unknown
- 2003-03-18 AR ARP030100944A patent/AR039005A1/es unknown
-
2004
- 2004-08-26 IS IS7426A patent/IS7426A/is unknown
- 2004-08-30 IL IL163814A patent/IL163814A/en active Protection Beyond IP Right Term
- 2004-09-02 ZA ZA2004/07029A patent/ZA200407029B/en unknown
- 2004-09-17 EC EC2004005300A patent/ECSP045300A/es unknown
- 2004-10-12 NO NO20044326A patent/NO20044326L/no not_active Application Discontinuation
-
2007
- 2007-05-10 US US11/746,841 patent/US7416846B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2008
- 2008-07-18 US US12/175,874 patent/US7815915B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2009
- 2009-12-10 JP JP2009280524A patent/JP2010090158A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
MXPA04009060A (es) | Particulas de tipo virus de papilomavirus humano. | |
US7205125B2 (en) | Mixed Virus-like particles | |
EP2716653B1 (en) | Truncated human papillomavirus type 33 protein l1 | |
AU2002310802B2 (en) | Multivalent vaccine comprising an HIV antigen and an HSV antigen and/or an HPV antigen | |
AU2002310802A1 (en) | Multivalent vaccine comprising an HIV antigen and an HSV antigen and/or an HPV antigen | |
EP2318042B1 (en) | Vaccine against hpv | |
WO2004052395A1 (en) | L2-peptide of the human papillomavirus associated with virus-like particles |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
FG | Grant or registration |