MXPA04007918A

MXPA04007918A - Derivados de fenalenona, procedimientos para su preparacion y utilizacion de los mismos.

Info

Publication number: MXPA04007918A
Application number: MXPA04007918A
Authority: MX
Inventors: Li Ziyu
Original assignee: Aventis Pharma Gmbh
Priority date: 2002-02-18
Filing date: 2003-02-04
Publication date: 2004-11-26
Also published as: AU2003210205A1; BR0307733A; AU2003210205B2; WO2003068946A1; DE10206849A1; EP1478731A1; AR038524A1; CA2476618A1; JP2005517710A; PE20030904A1

Abstract

El invento se refiere a derivados de fenalenona, a su produccion, con lo que se fermenta el microorganismo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, y se derivatizan las fenalenonas formadas durante dicha fermentacion, y a la utilizacion de derivados de fenalenona como medicamentos, especialmente para combatir enfermedades tumorales, infecciones bacterianas y/o micosis, y enfermedades reumaticas.

Description

Derivados de fenalenona, procedimientos para su preparación y utilización de los mismos El presente invento se refiere a derivados de fenalenona, a procedimientos para su preparación y a su utilización como productos farmacéuticos. El cáncer es una enfermedad de personas y animales que habitualmente provoca la muerte y que es provocada por el crecimiento incontrolado de células endógenas. Cáncer es la denominación de la formación de desarrollos malignos (malignomas) , de neoplasmas (tumores y carcinomas) o de la degeneración maligna, así como del trastorno en la maduración de leucocitos (leucemia, cáncer sanguíneo) . Las células cancerígenas o tumorales se forman por la conversión de células endógenas. La virulencia de la célula cancerígena se manifiesta en la autonomía del crecimiento, es decir en su capacidad de crecer sin inhibición de una manera infiltrante y sin ordenación en el plan constructivo de los órganos, con la destrucción de los tejidos. Una señal segura de la virulencia es la formación de depósitos alejados del tumor (metástasis) , después de la expansión hematógena o linfógena de células tumorales. El cáncer pertenece a las causas más frecuentes de mortandad del hombre y, por ello, existe una gran demanda de métodos y medios para la curación o el tratamiento de degeneraciones malignas. La posibilidad de una terapia de los tumores malignos incluye, además de la separación quirúrgica del tumor - a ser posible radical - la terapia radiológica utilizando rayos X, rayos a, ß y ?, la inmunoterapia y la quimioterapia. Actualmente, la inmunoterapia sólo es aplicable en medida limitada. Por quimioterapia de los tumores se entiende la administración de toxinas de células (agentes citostáticos) para el tratamiento de tumores y de células tumorales remanentes después del tratamiento quirúrgico o de la irradiación local. Estas sustancias intervienen específicamente en determinados procesos de la división celular, de modo que los tejidos con gran proporción de células en división, tales como el tejido tumoral de crecimiento rápido, reaccionan de manera más sensible. Se pueden emplear compuestos alquilantes tales como, por ejemplo, ciclofosfamida (The Merck Index, 12a edición, página 463), antimetabolitos tales como metotrexato (The Merck Index, 12a edición, página 1025) ,' alcaloides tales como vincristina (The Merck Index, 12a edición, página 1704) y antibióticos tales como daunomicina (The Merck Index, 12a edición, página 479) y adriamicina (The Merck Index, 12a edición, páginas 581-582) . Sin embargo, todos estos agentes tienen grandes inconvenientes debido a enormes efectos secundarios, de modo que la muerte de la persona enferma sólo se retarda, pero no se elude. Además, en las células degeneradas (cancerígenas) aparecen resistencias frente a los agentes empleados, los medicamentos actuales no actúan ya citostáticamente, sino de forma tóxica debido a los efectos secundarios. Además, se ha demostrado que una administración combinada o secuencial de agentes citostáticos supera la eficacia de un agente citostático individual (monoterapia) y, con ello, es posible que los considerables efectos secundarios en el caso de la poliquimioterapia no se sumen. Por todos estos motivos se requieren urgentemente nuevos agentes quimioterapéuticos y, por ello,, se investiga por todo el mundo. Se han descrito ya sustancias naturales con estructura fundamental de fenalenona. El fenaleno es un sistema anular condensado, no del todo aromático, el cual se descompone al aire. La fenalenona es su producto de oxidación, con un grupo carbonilo en posición 1. La solicitud de patente WO 99/60992 describe genéricamente fenalenonas, las cuales en todas las posiciones, excepto en Cl, pueden estar sustituidas con hidrógeno o alquilo Ci-C4/ preferentemente metilo, o alcoxi Ci-C4/ preferentemente metoxi , para su utilización como colorantes para el cabello. La solicitud de patente japonesa JP 60199849 describe el derivado de fenalenona 2, 7, 8, 9-tetrahidroxi-4-metoxi-5-metilfenalen-l-ona, el cual es eficaz como inhibidor del PDE, y puede ser utilizado para el tratamiento de arteriosclerosis , asma bronquial, diabetes y enfermedades cancerígenas . D. A. Frost y G. A. orrison J. Chem. Soc . , Perkin Trans . 1, 20, 2388-2396, 1973 describen el aislamiento de norxantoherqueína (2 , 3 , 4 , 7 , 8 , 9-hexahidroxi -5-metil-fenalen-l-ona) a partir de Penicillium herquei Bainer & Sartory. D. H. R. Barton et al., (Tetrahedron, 6, 48, 1959) describen el aislamiento de atrovenetina a partir de Penicillium atrovenetum, así como a partir de Penicillium herquei Bainer & Sartory. La atrovenetina se describe en Y. Ishikawa et al., (J. Am. Oil Chem. Soc. 68, 666-668, 1991) como antioxidante y, en el documento WO 00/45165, como agente citostático eficaz como anti -neoplástico . N. Narasimhachi et al. (J. Antibiotics, 25, 155, 1972) y J. Simpson (Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1979, 1233-1238) describen formas tautómeras del compuesto desoxi-herqueinona (2-O-metil-atrovenetina) , que se pueden aislar de Penicillium herquei y que exhiben actividad antiobiótica frente a organismos gram-positivos . El invento se basa en el objeto de proporcionar derivados alternativos de fenalenona, que se puedan utilizar en la terapia tumoral. El invento se refiere a un compuesto de la fórmula (I-A) o a un compuesto de la fórmula (I-B) en las cuales X es un grupo de la fórmula (I-C) o de la fórmula (I-D) y, si está presente, R2, son simultáneamente 1.0 H, o 2.0 alquilo Ci-C6, alquenilo C2-C6 o alquinilo C2-C6, en donde alquilo, alquenilo y alquinilo son lineales o ramificados y están opcionalmente mono- o di- sustituidos con: 2.1 -OH, 2.2 =0, 2.3 -O-alquilo d-C6, en donde alquilo es lineal o ramificado , 2.4 -O-alquenilo C2-C6, en donde alquenilo es lineal o ramificado, 2.5 -arilo, 2.6 -NH-alquilo Ci-C6, en donde alquilo es lineal o ramificado, 2.7 -NH-alquenilo C2-C6/ en donde alquenilo es lineal o ramificado, 2.8 -NH2 ó 2.9 halógeno, en donde los sustituyentes 2.1 a 2.9 también pueden estar sustituidos, además, con funciones -CN, -amida u -oxima, y/o una forma estereoisómera del compuesto de la fórmula ) o de la fórmula (I-B) y/o mezclas de esta forma en quier relación, y/o una sal fisiológicamente tolerable compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) .

Preferentemente, R1 y R2 son H o alquilo Ci-C6. Los centros de quiralidad, si no se indica de otro modo, se pueden presentar en la configuración R O S. El invento se refiere tanto a los compuestos ópticamente puros como también a mezclas de estereoisómeros tales como mezclas de enantiómeros y mezclas de diastereoisómeros , en cualquier relación. Los compuestos conformes al invento se diferencian de sustancias conocidas en la bibliografía por la polaridad, la estructura química, la actividad biológica o por otras propiedades físicas. La cepa Penicillium herquei Bainer & Sartory, DS 14142, forma sobre soluciones nutrientes que contienen glucosa, almidón, flor de avena o glicerina, los compuestos denominados penilenona de las fórmulas (II -A) y (II-B) , las cuales, a continuación, de forma resumida, se denominan compuestos de la fórmula (II) , (ll-A) (ll-B) y atrovenetina de las fórmulas (III-A) y (III-B) , las cuales, a continuación, de forma resumida, se denominan compuestos de la fórmula (III) , Los compuestos de las fórmulas (I-A) y (I-B) , en las cuales R1 es distinto de H, son formas isómeras, que se pueden aislar una de otra por separado, y las cuales se pueden convertir una en otra, por ejemplo separando el radical R1, según lo cual R1 es igual a H y, subsiguientemente, partiendo en cada caso del otro tautómero, se derivatizan para dar el otro isómero del compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) , en que R1 es distinto de H. En lo que sigue, los compuestos de las fórmulas (I-A) y (I-B) se denominan de forma resumida compuesto de la fórmula (I) . Los compuestos de las fórmulas (II-A) y (II-B) son tautómeros y, bajo condiciones habituales (por ejemplo a la temperatura ambiente) no se pueden separar uno de otro por separado. Los compuestos de las fórmulas (II -A) y (II-B) se denominan a continuación, de forma resumida, compuesto de la fórmula (II) . Los compuestos de las fórmulas (III-A) y (III-B) son igualmente tautómeros y, bajo condiciones habituales (por ejemplo a la temperatura ambiente) , no se pueden separar uno de otro por separado. Los compuestos de las fórmulas (III-A) y (III-B) se denominan a continuación, de forma resumida, compuesto de la fórmula (III) . Conforme al presente invento, los compuestos de las fórmulas (I-A) y (I-B) , en las cuales R1 es igual a H, se pueden derivatizar selectivamente conforme al presente invento haciendo reaccionar, de manera en sí conocida, los grupos hidroxilo con agentes alquilantes tal como se describe, por ejemplo, por Jerry March en el libro Advanced Organic Chemistry, John iley & Sons, 4a edición, 1992. Agentes alquilantes son, por ejemplo, derivados de diazometano, preferentemente trimetilsilildiazometano . Para llevar a cabo reacciones selectivamente, puede ser ventajoso introducir, antes de la reacción, de manera en sí conocida, grupos protectores adecuados. Los grupos protectores se separan después de la reacción y, a continuación, el producto de la reacción se purifica. Hasta el momento, no se ha descrito ninguna alquilación selectiva de fenalenonas para dar los compuestos conformes al invento. Por ejemplo, la reacción de desoxiherqueinona con diazometano conduce, según Suga et al., (Bull. Chem. Soc. Jpn., 56, 3661-3666, 1983) al dimetiléter de desoxiherqueinona o, respectivamente, al compuesto isómero trimetileter de ent-atrovenetina. Los compuestos de las fórmulas (I-A) y (I-B) , en las cuales R1 es igual a H, se pueden preparar, por ejemplo, por separación de éter de compuestos de las fórmulas (I-A) y (I-B) , en las cuales R1 es distinto de H. Separaciones de éter se pueden llevar a cabo según métodos en sí conocidos como se describe, por ejemplo, por Jerry March en el libro Advanced Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 4a edición, 1992. Por lo tanto, el invento se refiere, además, a un compuesto de la fórmula (I) , que tiene la fórmula (II) , o a una sal del compuesto de la fórmula (II) farmacológicamente tolerable . Por lo tanto, el invento se refiere, además, a un procedimiento para la preparación de un compuesto de la fórmula (II) , que comprende 1. cultivar el microorganismo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DS 14142 o uno de sus variantes o mutantes en un medio nutriente acuoso, 2. aislar y purificar un compuesto de la fórmula (II), y 3. convertir el compuesto de la fórmula (II), si es apropiado, en una sal farmacológicamente tolerable. El invento se refiere, además, a un procedimiento para la preparación de un compuesto de la fórmula (I) , que comprende 1. cultivar el microorganismo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142 o uno de sus variantes o mutantes, en un medio nutriente acuoso, 2. a) aislar y purificar un compuesto de la fórmula (II), o b) aislar y purificar el compuesto de la fórmula (III) , 3. a) derivatizar el compuesto de la fórmula (II) para dar un compuesto de la fórmula (I) , o b) derivatizar el compuesto de la fórmula (III) para dar un compuesto de la fórmula (I) , y 4. convertir el compuesto de la fórmula (I), si es apropiado, en una sal farmacológicamente tolerable. La cepa Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, sobre soluciones nutrientes que contienen glucosa, almidón, flor de avena o glicerina, forma penilenona, así como productos secundarios . Un material aislado de Penicillium herquei Bainer & Sartory se depositó en la Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM) , Mascheroder Weg IB, 38124 Braunsch eig, Alemania, según las Reglas del Tratado de Budapest, el 6 de marzo, 2001, bajo el siguiente número: DSM 14142. El hongo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, posee un sustrato de micelio gris hasta verde luminoso y muy poco micelio aéreo. Sobre medios de malta no se forman exudados y no se segregan colorantes al medio. En cultivo, la cepa forma los esporangios compactos característicos de Penicillium, 200-400 x 3,5-4,0 µ??, que son ásperos en la superficie. Las "métulas" son relativamente cortas, en su mayoría 4-6 - 10-12 x 3,5-5,0 ym y en forma de palo de golf. Las fiálidas están dispuestas en 6-10 verticilios, 7-10 x 3,0 µt?, en forma de ampollas. Los conidios son elípticos hasta "apiculados" de 3,5-5,0 x 3,0-3,5 im con una pared celular lisa. Los conidios se forman en cadenas paralelas de hasta 100 pm de longitud. El citado procedimiento abarca el cultivo, bajo condiciones aerobias, de Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, de sus mutantes y/o variantes, en un medio de cultivo que contiene al menos, en cada caso, una fuente de carbono y una fuente de nitrógeno, sales inorgánicas y, eventualmente, elementos traza. El cultivo se lleva a cabo, preferentemente, a una temperatura comprendida entre 20° y 35°C y a un pH comprendido entre 2 y 9. En lugar de la cepa DSM 14142 se pueden emplear también sus mutantes y variantes, siempre que produzcan los compuestos conformes al invento. Tales mutantes se pueden crear, de manera en sí conocida, por agentes físicos, por ejemplo por irradiación tal como con rayos utravioleta o rayos X, o por mutágenos químicos tales como, por ejemplo, etilmetanosulfonato (EMS) 2-hidroxi-4-metoxi-benzofenona (MOB) o N-metil -N ' -nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) . Como fuentes de carbono preferidas para la fermentación son adecuados los carbohidratos y los azúcar-alcoholes asimilables tales como glucosa, lactosa, sacarosa o D-manita, así como productos naturales que contienen carbohidratos tales como, por ejemplo, extracto de malta o extracto de levadura. Nutrientes que contienen nitrógeno adecuados son: aminoácidos, peptidos y proteínas, así como sus productos de degradación tales como caseína, peptonas o triptonas, además, extractos de carne, extractos de levadura, simientes molidas, por ejemplo de maíz, trigo, judías, soja, arroz o de la planta del algodón, residuos de destilación de la producción de alcohol, harinas cárnicas o extractos de levadura pero, también, sales de amonio y nitratos, pero en particular también péptidos obtenidos por síntesis o, respectivamente, biosíntesis. Como sales inorgánicas, la solución nutriente puede contener, por ejemplo, cloruros, carbonatos, sulfatos o fosfatos de metales alcalinos o alcalinotérreos , hierro, cinc, cobalto y manganeso . La formación de los compuestos conformes al invento transcurre particularmente bien, por ejemplo en una solución nutriente que contiene aproximadamente 0,05 a 5%, preferentemente 1 a 2% de extracto de malta; y 0,05 a 3%, preferentemente 0,05 a 1% de extracto de levadura; 0,2 a 5%, preferentemente 0,5 a 2% de glucosa; y 0,5 a 3%, preferentemente 1,5% a 3% de flor de avena. Los datos porcentuales se refieren, en cada caso, al peso de toda la solución nutriente. En esta solución nutriente, Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, forma una mezcla de los compuestos conformes al invento. Dependiendo de la composición de la solución nutriente, puede variar la parte cuantitativa de uno o de varios de los compuestos conformes al invento. Además, a través de la composición del medio se puede controlar la síntesis de compuestos individuales, de manera que un compuesto no se produzca en absoluto o, respectivamente, se produzca en una cantidad inferior al límite detectable del microorganismo. El cultivo del microorganismo se efectúa aeróbicamente, es decir, por ejemplo, sumergido, bajo sacudimiento o agitación en matraces sacudidores o termentadoras, o sobre medios sólidos, eventualmente bajo aporte de aire u oxígeno. Se puede llevar a cabo en un intervalo de temperaturas de aproximadamente 15 hasta 30 °C, preferentemente en aproximadamente 20 a 30°C, especialmente en 25 hasta 30°C. El intervalo de pH se debería situar entre 4 y 10, preferentemente entre 6,5 y 7,5. En general, el microorganismo se cultiva bajo estas condiciones durante un espacio de tiempo de 48 a 720 horas, preferentemente 72 a 350 horas. Ventajosamente, el cultivo se efectúa en un cierto número de etapas, es decir se preparan primero uno o varios cultivos previos en un medio nutriente líquido, los cuales se inoculan, después, en el medio de producción real, el cultivo principal, por ejemplo en la relación de volumen 1:10 - 1:100. El cultivo previo se obtiene, por ejemplo, inoculando el micelio en una solución nutriente y dejándole crecer durante aproximadamente 20 a 120 horas, preferentemente 48 a 72 horas. El micelio se puede obtener, por ejemplo, dejando crecer la cepa durante aproximadamente 1 a 42 días, preferentemente 21 a 35 días, sobre un medio nutriente sólido o líquido, por ejemplo agar de malta-levadura, agar de flor de avena o agar de dextrosa de patata . El transcurso de la fermentación y el rastreo de mutarites y variantes, los cuales producen los compuestos conformes al · invento, se puede efectuar de manera correspondiente a los métodos conocidos por el experto en la materia tales como, por ejemplo, ensayando la actividad biológica en bioensayos o por métodos cromatográficos tales como la cromatografía en capa delgada (CD) o la cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) . El hongo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, puede formar los compuestos conformes al invento por un cultivo de superficie o por un cultivo vertical sobre un medio nutriente sólido. Los medios nutrientes sólidos se preparan por adición de, por ejemplo, agar o gelatina a medios nutrientes líquidos. Además de esto, es posible obtener los compuestos conformes al invento por fermentación del hongo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, por el procedimiento de inmersión, es decir en suspensión acuosa. Los compuestos conformes al invento se pueden presentar tanto en el micelio como también en el filtrado del cultivo, la cantidad principal se encuentra habitualmente en la masa celular. Por ello, es conveniente separar la solución de fermentación por filtración o centrifugación. El filtrado se extrae con una resina de adsorción en forma de fase sólida. El micelio, pero también el cultivo de superficie se extraen convenientemente con un disolvente orgánico, por ejemplo metanol o propan-2-ol. Las extracciones se puede llevar a cabo en un amplio intervalo de pH, sin embargo es conveniente trabajar en un medio neutro o ligeramente ácido, preferentemente entre pH 3 y pH 7. Los extractos se puede concentrar y secar, por ejemplo, al vacío.

Los compuestos de la fórmula (II) y de la fórmula (III) son sustancias que son inestables si no se toman medidas particulares durante el proceso de aislamiento y purificación. Se encontró que las penilenonas se pueden obtener con muy buenos rendimientos a partir de cultivos de la cepa DSM 14142, si 1) durante el proceso de aislamiento y purificación se trabaja bajo condiciones reductoras, por ejemplo siempre en presencia de ácido ascórbico, 2) el aislamiento se efectúa en medio ácido con un valor de pH inferior a 7, preferentemente en el intervalo de pH de 2 a 5, 3) durante la etapa de purificación sólo se utilizan, como soportes cromatográficos , agentes suaves tales como, por ejemplo, resinas adsorbentes, y 4) se excluye la presencia de aminas durante todo el proceso. Un método adecuado para el aislamiento de los compuestos conformes al invento es la distribución de disolventes de manera en sí conocida. Otro método de purificación es la cromatografía en resinas de adsorción tales como, por ejemplo, en Diaion® HP-20 (Mitsubishi Casei Corp., Tokio), en Amberlite® XAD 7 (Rohm and Haas, EE.UU.), en Amberchrom® CG, (Toso Haas, Filadelfia, EE.UU.) o en análogas. Además de esto, bajo las condiciones citadas, son adecuados numerosos soportes de fase inversa, por ejemplo RP8 y RPig tales como los que, por ejemplo, se han dado a conocer en general en el contexto de la cromatografía de líquidos a elevada presión (HPLC) . Una posibilidad adicional de purificación bajo las circunstancias citadas consiste en la utilización, de manera en sí conocida, de los denominados soportes de cromatografía de "fases normales" tales como, por ejemplo, gel de sílice o Al203 u otros. Un procedimiento de aislamiento alternativo es la utilización, de manera en sí conocida, de tamices moleculares tales como, por ejemplo, Fractogel® TSK HW-40, Sephadex® G-25 y otros. Además de esto, es posible obtener los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento por cristalización, después de su enriquecimiento, para lo cual se pueden usar, por ejemplo, disolventes orgánicos y sus mezclas, anhidros o con adición de agua. Un procedimiento adicional para el aislamiento y la purificación de los compuestos conformes al invento consiste en la utilización de intercambiadores de aniones, preferentemente en el intervalo de pH de 4 a 7, e intercambiadores de cationes, preferentemente en el intervalo de pH de 2 a 5. Especialmente adecuado para ello es la utilización de soluciones tampón, a las que se han añadido porciones de disolventes orgánicos. Sin embargo, también es posible aislar y/o purificar los compuestos conformes al invento por sublimación. Un método de purificación particularmente ventajoso para el aislamiento de los compuestos conformes al invento es la cristalización, la cual se lleva a cabo de manera en sí conocida. Los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento se pueden transformar en las correspondientes sales farmacológicamente tolerables según métodos conocidos por el experto en la materia. Por sales farmacológicamente tolerables de los compuestos conformes al invento se entienden tanto las sales inorgánicas, como también las sales orgánicas, como se describen en Remingtons Pharmaceu-tical Sciences (17a edición, página 1418 [1985]). Como sales entran en consideración, especialmente, sales de metales alcalinos, sales de amonio, sales de metales alcalinotérreos , sales con aminas fisiológicamente tolerables y sales con ácidos inorgánicos u orgánicos tales como, por ejemplo, HCl , HBr, H2S04, ácido maleico y ácido fumárico. Pero también entran en consideración complejos con iones metálicos tales como, por ejemplo, con calcio, magnesio, cinc, hierro u otros. Los compuestos de la fórmula (I) tienen una acusada tendencia a unir iones, preferentemente cationes, formando complejos. Sorprendentemente, se encontró que los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento tienen fuertes efectos citostáticos , por lo que son adecuados para la terapia y/o profilaxis de enfermedades provocadas por un crecimiento incontrolado de tejidos o células, o de enfermedades tumorales. Es particularmente digno de mención el que los compuestos conformes al invento no tienen ninguna resistencia cruzada con los agentes citostáticos convencionales. Se ha encontrado que los compuestos de la fórmula (I) inhiben a las proteína-quinasas . Las quinasas pertenecen a las transíerasas, las cuales transfieren radicales fosfato del adenosina- trifosfato a otros sustratos. Las proteínas y las enzimas son fosforiladas generalmente por las proteína-quinasas en cadenas laterales de serina, treonina o tirosina, y son modificadas en su actividad, lo cual se ha reconocido como principio extendido de regulación en el metabolismo y en la transducción de señales. En el caso de las enfermedades cancerígenas, el tejido enfermo se multiplica de forma incontrolada; por lo tanto, es deseable una intervención en la regulación de la proliferación controlada por quinasas. En la cascada de la multiplicación celular está implicado un número de quinasas. Varias de estas quinasas son inhibidas por los compuestos conformes al invento. Además de esto, hay que destacar un efecto inhibidor antimicrobiano de los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento sobre bacterias tales como, por ejemplo, Staphylococcus aureus, Streptomyces murinus y frente a hongos tales como Asperglllus niger los cuales pueden provocar enfermedades infecciosas persistentes, que ponen en riesgo la vida. La eficacia antimicrobiana se puede demostrar, por ejemplo, a través de los denominados ensayos de difusión en agar. Así, penilenona sobre una placa de agar con un cultivo de Stre to/nyces murinus en una solución de 1 mg por cada mi provoca un halo de inhibición de 11 mm y, en una solución de 0,1 mg por cada mi, una halo de inhibición de 8 mm. Por lo tanto, los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento son igualmente adecuados para la terapia y/o profilaxis de infecciones bacterianas y/o enfermedades fúngicas. Los compuestos de la fórmula (I) se pueden utilizar también como antioxidantes. Los antioxidantes (inhibidores de la oxidación) son compuestos orgánicos que inhiben o impiden modificaciones no deseadas en las sustancias que se han de proteger, condicionadas por efectos del oxígeno. Antioxidantes se necesitan, por ejemplo, en plásticos para la protección contra el envejecimiento, en grasas para la protección contra el enranciamiento, en aceites frente a la conversión en resinas, en sustancias aromáticas frente el empeoramiento del olor, en productos alimentarios y en productos farmacéuticos. El efecto de los antioxidantes consiste, habitualmente , en que actúan como captadores de radicales para los radicales libres que aparecen en la oxidación. El efecto antioxidante de atrovenetina (compuesto de la fórmula (III)) fue descrito ya por Y. Ishikawa et al., J. Am. Oil Chem. Soc. 68, 666-668, 1991. Sin embargo, los antioxidantes microbianos son frecuentemente, en su efecto, demasiado débiles o no son bien tolerables. Por lo tanto, existe una gran demanda de antioxidantes nuevos, eficaces y tolerables. Los compuestos de la fórmula (I) son antioxidantes altamente activos, que superan considerablemente en su efecto a la atrovenetina : mientras que atrovenetina en solución y en forma sólida reacciona tan solo lentamente con el oxígeno del aire (por ejemplo, en el espacio de horas) , la penilenona de la fórmula (II) se combina, por ejemplo, con oxígeno en el espacio de segundos o en unos pocos minutos. Sin embargo, esta incrementada afinidad por oxígeno de la penilenona es de ventaja decisiva para sustancias muy sensibles a la oxidación. Otra peculiaridad química de los compuestos conformes al invento es la capacidad para formar complejos con cationes polivalentes, preferentemente de valencia 2 y 3 tales como, por ejemplo, con Ca2+, Mg2+, Zn2+ y Fe3+. La capacidad de formar complejos puede ser ventajosa para la preparación de medicamentos, así, por ejemplo, se han dado a conocer inhibidores de las metalo-proteasas de la matriz (MMPs) , los cuales están en condiciones de ligar el cinc de estas enzimas. Pero también son imaginables otras posibilidades de empleo en el caso de enfermedades cuyos rasgos se manifiestan en una concentración anormal de iones metálicos en el cuerpo. También es posible utilizar la capacidad de formar complejos de los compuestos conformes al invento fuera de la medicina, por ejemplo en la técnica del agua, en agentes para el cuidado corporal y en la técnica de la polimerización (Ullmans Enzyklopádie der Technischen Chemie, 5a edición, A 10, 95-100, 1985-1995) . Los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento puede actuar igualmente en el tratamiento de enfermedades reumáticas, por ejemplo de la artritis reumatoide . El principio de acción de la disminución del estrés oxidante en artritis reumatoides por captadores de radicales o antioxidantes fue descrito, por ejemplo, por Ostrakhovitch y Afanas (Biochemical Pharmacology, 2001, 743-746) . Por consiguente, el presente invento se refiere también a la utilización de los compuestos de la fórmula (I) conformes al invento como medicamentos, especialmente para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades tumorales, infecciones bacterianas, micosis, enfermedades reumáticas y enfermedades que se pueden tratar por la inhibición de metalo-proteasás de la matriz. Además, el presente invento se refiere a un producto farmacéutico con un contenido en al menos uno de los compuestos conformes al invento. Dicho producto farmacéutico se prepara por mezcladura de al menos un compuesto de la fórmula (I) con uno o varios excipientes fisiológicamente aceptables y se lleva a una forma de administración adecuada. Los productos farmacéuticos conformes al invento se pueden administrar por vía enteral (oral) , parenteral (intramuscular o intravenosa) , rectal o local (tópica) . Se pueden administrar en forma de soluciones, polvos (comprimidos, cápsulas, incluidas microcápsulas) , pomadas (cremas o geles) o supositorios . Como coadyuvantes fisiológicamente aceptables para formulaciones de este tipo entran en consideración las sustancias de carga y agentes extendedores sólidos o líquidos, disolventes, emulsionantes, lubricantes, correctores del sabor, colorantes y/o sustancias tampón, farmacéuticamente habituales. Como dosificación conveniente se administran 0,1 - 1000, preferentemente 0,2 - 100 mg/kg de peso corporal. Se administran convenientemente en unidades de dosificación que contienen al menos la cantidad diaria eficaz de los compuestos conformes al invento, por ejemplo 30 - 3000, preferentemente 50 - 1000 mg.

Los siguientes Ejemplos pretenden servir para la ilustración más detallada del invento, sin que se quiera limitar de algún modo el alcance del invento.

Ejemplo 1: Preparación de un cultivo en glicerina de Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142 mi de solución nutriente (extracto de malta 2,0%, extracto de levadura 0,2%, glucosa 1,0%, (NH4)2HP04 0,05%, pH 6,0) en un matraz Erlenmeyer estéril de 100 mi se' inoculan con la cepa Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, y se incuban durante 6 días a 25°C y 140 rpm en una máquina sacudidora rotativa. 1,5 mi de este cultivo se diluyen, a continuación, con 2,5 mi de glicerina al 80% y se almacenan a -135°C.

Ejemplo 2: Preparación de un cultivo previo de Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, en matraz Erlenmeyer 100 mi de solución nutriente (extracto de malta 2,0%, extracto de levadura 0,2%, glucosa 1,0%, ( H4)2HP0 0,05%, pH 6,0) en un matraz Erlenmeyer estéril de 300 mi se inoculan con la cepa Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, y se incuban durante 4 días a 25°C y 140 rpm en una máquina sacudidora rotativa. 2 mi de este cultivo previo se inoculan, a continuación, para la preparación de los cultivos principales.

Ejemplo 3: Preparación de un cultivo principal de Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142 Un matraz Erlenmeyer estéril de 300 mi, que contiene 100 mi de la siguiente solución nutriente extracto de malta 2,0%, extracto de levadura 0,2%, glucosa 1,0%, (NH4)2HP04 0,05%, pH 6,0 se inocula con un cultivo desarrollado sobre un tubito inclinado (la misma solución nutriente, pero con 2% de agar) o con 2 mi de un cultivo previo (véase el Ejemplo 2) , y se incuba en una máquina sacudidora a 140 rpm y 25°C. La producción máxima de uno o más compuestos de las penilenonas conformes al invento se alcanzó al cabo de aproximadamente 144 horas. Para la inoculación de termentadoras de 10 a 200 1 bastó con un cultivo sumergido de 96 a 144 horas de vida (cantidad de inoculación, aproximadamente 10%) de la misma solución nutriente. Las condiciones para estas termentadoras son: Temperatura 25 °C Velocidad de agitación: 200 rpm Ventilación 15 1 min"1 Por adición repetida de solución etanólica de poliol se puede reprimir la formación de espuma. El máximo de producción se alcanza al cabo de aproximadamente 96 a 144 horas.

Ejemplo 4: Aislamiento de los compuestos (II) y (III) litros de solución de cultivo, obtenida según el Ejemplo 3, se centrifugaron y la masa celular (0,5 litros) se extrajo con 2 litros de metanol , a los que se había añadido ácido ascórbico al 0,1%. La fase metanólica filtrada, transparente, se concentró al vacío hasta un volumen de 1 1 y se aplicó a una columna de 1 litro de capacidad repleta con resina adsorbente MCI Gel® CHP20P. Dimensiones de la columna: anchura x altura: 7 cm x 27 cm. La elución se realizó utilizando un gradiente de solución de 10% de propan-2-ol hasta 90% de propan-2-ol en solución acuosa al 0,1% de ácido ascórbico. El efluente de la columna (140 ml/minuto) se recogió en fracciones de 250 mi cada una. Las fracciones 23 a 26 que contenían penilenona (mezcla de los compuestos de las fórmulas (II-A) y (II-B) , denominadas de forma resumida compuestos de la fórmula (II) ) , y las fracciones 43 a 51 que contenían atrovenetina (mezcla de los compuestos de las fórmulas (III-A) y (III-B) , denominadas de forma resumida compuestos de la fórmula (III) ) , las cuales se examinaron por análisis HPLC, se reunieron y se concentraron al vacío. Las fracciones reunidas se concentraron, en cada caso, al vacío y se almacenaron en frío. De las fracciones 23 a 26 cristalizó penilenona (260 mg del compuesto de la fórmula (II) ) y las fracciones 43 a 51 proporcionaron 1,2 g de atrovenetina (compuesto de la fórmula (III) ) . Los cristalizados se separaron por filtración bajo atmósfera protectora de argón y se almacenaron en frío bajo exclusión de oxígeno.

Ejemplo 5: Aislamiento y purificación por HPLC Columna : Superspher 100 RP-18e®, 250-4 con columna previa, Fase móvil 2 minutos: 5% de acetonitrilo en ácido fosfórico al 0,1%, 18 minutos: gradiente de 5% a 100% de acetonitrilo en ácido fosfórico al 0,1%, a continuación 100% de acetonitrilo, permaneciendo igual . Caudal: 1 mi por minuto, Detección por absorción UV a 210 nm. Para los compuestos de la fórmula (II) se encontró el tiempo de retención de 13,5 minutos, y para el compuesto de la fórmula (III), 20,5 minutos.

Ejemplo 6: Caracterización del compuesto de la fórmula (II) Las propiedades fisico-químicas y espec-troscópicas de penilenona se pueden resumir tal como sigue: Aspecto : sustancia cristalina amarilla, soluble en disolventes orgánicos polares y de polaridad media, no muy soluble en agua. El punto de fusión no se pudo determinar debido a descomposición. Bajo condiciones reductoras, estable en un medio ligeramente ácido. Por influencia de oxígeno en medio neutro o en presencia de aminas, la penilenona se vuelve verde .

Fórmula empírica: Ci4Hi0O6 Peso molecular: 274,23 Por espectrometría de masas ESI+ se encontró un ion molecular 275,2 [M+H]+, medido bajo condiciones ESI (negativo) 273 [M-H] " y, respectivamente, 271 [M-3H]".

Máximos de UV: 215 nm, 248 (hombro) nm, 275 (hombro) , 389 nm.

Tabla 1 : Datos RMN y de desplazamientos químicos 1H y 13C de la penilenona de la fórmula (II) en D S0-d6 a 300 K (en ppm; la numeración por motivo del análisis por RMN no corresponde a la nomenclatura de la IUPAC) . (ll-A) (ll-B) a) Para C3 y C5 no se observa señal alguna en el espectro 13C Ejemplo 7: Obtención de los derivados del monometiléter de la penilenona de las fórmulas (IV-A) y (IV-B) 40 mg del compuesto de la fórmula (II) (penilenona, aislada correspondientemente al Ejemplo 4) se disolvieron en 30 mi de tetrahidrof rano y se mezclaron con 0,5 mi de (trimetilsilil) -diazometano 2,0 M, disueltos en hexano [Aldrich, n° de catálogo 36.283-2] . Al cabo de una hora, la reacción se finalizó por adición de agua y el disolvente se separó por destilación al vacío. El producto de reacción se separó, después, en una columna Nucleosil HD® (21 mm x 250 mm) . El eluyente utilizado era un gradiente de 10% a 99% de acetonitrilo en ácido acético al 0,1%. El caudal de la columna, 20 mi por minuto, se recogió fraccionadamente. Las fracciones, que contenían el producto de la metilación, se reunieron en cada caso, se concentraron al vacío y se cristalizaron. Se obtuvieron 6 mg del dimetiléter de la penilenona de la fórmula (IV-A) , fórmula empírica: CiSH1406/ peso molecular: 302,29, y 1 mg del dimetiléter de la penilenona de la fórmula (IV-B) , fórmula empírica: Ci6H1406, peso molecular: 302,29.

Dimetiléter de la penilenona de la fórmula (IV-A) : Máximos de UV: 216 nm, 242 nm, 280 nm(hombro), 387 nm.

Tabla 2 : Datos RMN y de los desplazamientos 1H y 13C químicos d del dimetiléter de penilenona de la fórmula (IV-A) en DMSO-d6 a 300 K (en ppm; la numeración por motivo de la evaluación por RMN no corresponde a la nomenclatura de la IUPAC) . a) C3 y C5 no se pueden diferenciar claramente.

Dimetiléter de la penilenona de la fórmula (IV-B) Máximos de UV: 213 nm, 241 nm y 390 nm.

Tabla 2 : Datos RMN y de los desplazamientos XH y 13C químicos d del dimetiléter de la penilenona de la fórmula (IV-B) en DMSO-d6 a 300 K (en ppm la numeración por motivo de la evaluación por RMN no corresponde a la nomenclatura de la IUPAC) .

(IV-B) Ejemplo 8: Obtención de los derivados de atrovenetina (V-A) y (V-B) 100 mg del compuesto de la fórmula (III) (atrovenetina, preparada conforme al Ejemplo 4) se disolvieron en 5 mi de tetrahidrofurano y se mezclaron con 1 mi de (trimetilsilil) -diazometano 2,0 M, disueltos en hexano [Aldrich, n° de catálogo 36.283-2]. Al cabo de 15 minutos, la reacción se finalizó por adición de agua y el disolvente se separó por destilación al vacio. El producto de reacción se separó, después, en una columna Nucleosil AB® (21 mm x 250 mm) . Como eluyente sirvió un gradiente de 10% a 99% de acetonitrilo en ácido trifluoroacético al 0,02%, el cual con hidróxido de amonio se estableció a pH 4,5. El caudal de la columna, 15 mi por minuto, se recogió fraccionadamente. Las fracciones, que contenían los productos de la metilación, se reunieron en cada caso, se concentraron al vacío y se cristalizaron. Se obtuvieron 24 mg del monometiléter de atrovenetina (V-A) , fórmula empírica: C2oH2o06, peso molecular: 356,38, y 10 mg del monometiléter de atrovenetina (V-B) , fórmula empírica: C2oH2o06, peso molecular: 356,38.

Monometiléter de atrovenetina (V-A) : Máximos de UV: 218 nm, 260 nm(hombro) , 394 nm.

Tabla 3 : Datos RM y de los desplazamientos ¾ y 13C químicos d del monometiléter de atrovenetina (V-A) en DMSO-ds a 300 K (en ppm; la numeración por motivo de la evaluación por RMN no corresponde a la nomenclatura de la IUPAC) .

Monometileter de atrovenetina (V-B) : Máximos de UV: 222 nm, 282 nm, 385 nm.

Tabla 4 : Datos RM y de los desplazamientos 1H- y 13C-químicos d del monometileter de atrovenetina (V-B) en DMSO-d6 a 300 K (en ppm; la numeración por motivo de la evaluación por RMN no corresponde a la nomenclatura de la IUPAC) .

Claims

Reivindicaciones Compuesto de la fórmula (I o un compuesto de la fórmula (I-B) en las cuales X es, o bien un grupo de la fórmula (I-C) o de la fórmula (I-D) y R1 y, si está presente, R2, significan al mismo tiempo 1.0 H, o 2.0 alquilo Ci-C3, alquenilo C2- e o alquinilo C2-C6, en donde alquilo, alquenilo o alquinilo son lineales o ramificados y están opcionalmente mono- o di- sustituidos sustituidos, con: 2.1 -OH, 2.2 =0, 2.3 -O-alquilo Ci-C6, en donde alquilo es lineal o ramificado, 2.4 -O-alquenilo C2-C6, en donde alquenilo es lineal o ramificado, 2.5 -arilo, 2.6 -NH-alquilo CI-CÉ, en donde alquilo es lineal o ramificado, 2.7 -NH-alquenilo C2-C6, en donde alquenilo es lineal o ramificado, 2.8 -NH2 ó 2.9 halógeno, en donde los sustituyentes 2.1 a 2.9 también pueden estar sustituidos, además, con funciones -CN, -amida u -oxima, y/o una forma estereoisómera del compuesto de la fórmula (I-A) o de la fórmula (I-B) y/o 'mezclas de esta forma en cualquier relación, y/o una sal fisiológicamente tolerable del compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) . 2. Un compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) conforme a la reivindicación 1, en donde R1 y R2 son H o alquilo Ci-C3. 3. Un compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) conforme a una o varias de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizado porque tiene la fórmula (II -A) Me OH (ll-A) o la fórmula (II-B) o sus sales fisiológicamente tolerables. 4. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) conforme a una o varias de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizado porque comprende 1. cultivar el microorganismo Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142 o uno de sus variantes o mutantes en un medio nutriente acuoso,
2. a) aislar y purificar un compuesto de la fórmula (II- A) o de la fórmula (III-B)
3. a) derivatizar el compuesto de la fórmula (II-A) o (II-B) para dar un compuesto de la fórmula (I-A) o (I- B) , o b) derivatizar el compuesto de la fórmula (III-A) o (III-B) para dar un compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) , y
4. convertir el compuesto de la fórmula (I-A) o (I-B) , si es apropiado, en una sal farmacológicamente tolerable .
5. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de la fórmula (II-A) o (II-B) conforme a la reivindicación 3, caracterizado porque comprende 1. cultivar el microorganismo Penicilliu herquei Bainer & Sartory, DSM 14142, o uno de sus variantes o mutantes, en un medio nutriente acuoso, 2. aislar y purificar un compuesto de la fórmula (II-A) o (II-B), y 3. convertir el compuesto de la fórmula (II-A) o (II-B), si es apropiado, en una sal farmacológicamente tolerable.
6. El procedimiento conforme a la reivindicación 4, realizándose la derivatización mediante un agente alquilante .
7. El procedimiento conforme a la reivindicación 6, siendo el agente alquilante un derivado de diazometano.
8. La utilización de un compuesto conforme a una o varias de las reivindicaciones 1 a 3 para la preparación de un producto farmacéutico.
9. La utilización de un compuesto conforme a la reivindicación 8 para la preparación de un producto farmacéutico para el tratamiento y la profilaxis de enfermedades tumorales.
10. La utilización de un compuesto conforme a la reivindicación 8 para la preparación de un producto farmacéutico para el tratamiento y la profilaxis de enfermedades bacterianas infecciosas y/o micosis.
11. La utilización de un compuesto conforme a la reivindicación 8 para la preparación de un producto farmacéutico para el tratamiento y la profilaxis de enfermedades reumatoides.
12. La utilización de un compuesto conforme a la reivindicación 8 para la preparación de un producto farmacéutico contra enfermedades que se pueden tratar por inhibición de metaloproteinasas de la matriz.
13. La utilización de un compuesto conforme a una o varias de las reivindicaciones 1 a 3 como antioxidante.
14. Un producto farmacéutito con un contenido en al menos un compuesto conforme a una o varias de las reivindicaciones 1 a 3, y uno o varios excipientes fisiológicamente tolerables.
15. La cepa Penicillium herquei Bainer & Sartory, DSM 14142.