MXPA04001599A - Composiciones farmaceuticas que comprenden conjugados de polisacarido para inhibir la metastasis o prevenir la reparacion de un tumor maligno. - Google Patents

Abstract

Una composicion farmaceutica para inhibir la metastasis o para prevenir la reaparicion de un tumor maligno, que comprende como ingrediente activo un derivado de polisacarido que comprende un poliscarido que tiene un grupo carboxilo unido a una sustancia activa que tiene una actividad antitumoral, por medio de un aminoacido o un peptido que consiste de 2 a 8 aminoacidos, que son iguales o diferentes, o una sal de la misma; las substancias activas preferidas son derivados de camptotecina.

Description

COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE COMPRENDEN CONJUGADOS DE POLISACAR1DO PARA INHIBIR LA METASTASIS O PREVENIR LA REAPARICION DE UN TUMOR MALIGNO CAMPO TECNICO La presente invención se refiere a una composición farmacéutica para inhibir la metástasis o evitar la reaparición de un tumor maligno. Más particularmente, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica para inhibir la metástasis o evitar la reaparición de un tumor maligno, que comprende como el ingrediente activo un derivado de polisacárido que comprende un polisacárido que tiene un grupo carboxilo unido a una sustancia activa que tiene actividad anti-tumor, por ejemplo, un derivado de camptotecina de la fórmula (I) ó (II) como se mencionó a continuación, por medio de un aminoácido o un péptido que consiste en 2 u 8 aminoácidos que son iguales o diferentes, o una sal de los mismos.

TECNICA ANTECEDENTE Los tumores malignos son una de las causas principales de muerte en los países desarrollados, y la mayoría de los tumores malignos relacionados con la muerte se deben a metástasis en órganos distantes o reaparición acompañada por metástasis en órganos distantes después de una terapia tópica. La metástasis a órganos distantes puede ser provocada por metástasis hematógena o metástasis linfógena, y se sabe que un paciente que tiene metástasis linfógena tiene un alto riesgo de que reaparezca un tumor maligno después de la terapia tópica. Los principales órganos de reaparición son cerebro, pulmones, hígado y huesos. Especialmente, un tumor en el aparato digestivo, por ejemplo, cáncer de colón, del cual un gran número de pacientes sufre, con frecuencia invade y se dispersa en el hígado, y un cáncer de mama y un cáncer de pulmón también con frecuencia invade y se dispersa al hígado. Además, un linfoma y una leucemia linfática pueden dispersarse principalmente al sistema linfático, y se ha reportado que la metástasis al hígado también se observa a alta velocidad por medio de la autopsia. Con el fin de inhibir la reaparición incluyendo la metástasis a órganos distantes tales como metástasis al hígado y para prolongar la vida, se emplea una quimioterapia, etc., como un cuidado de soporte después de una terapia típica, pero la quimioterapia tiene una toxicidad potente y no puede utilizarse para administración crónica. Además, difícilmente se ha reportado que el tiempo de vida se prolonga más mediante un cuidado de soporte de quimioterapia que una terapia tópica sola. Por ejemplo, en las pruebas de quimioterapia post-cirugía para el paciente que es el sujeto de la cirugía de cáncer gástrico avanzado, uno de los cánceres de los órganos digestivos, las pruebas clínicas de varios agentes para tumores anti-malignos se han intentado, pero no se ha establecido aún ningún método terapéutico que exhiba una tasa de supervivencia notablemente mejor a una sola cirugía. Bajo estas circunstancias, se ha deseado encontrar un nuevo agente efectivo para inhibir la reaparición o para prolongar la vida después de la terapia tópica, que se aplique al ganglio linfático y los órganos distantes de metástasis con pocos efectos secundarios, y que sea adecuado para administración crónica. Por otro lado, WO 94/19376, WO 97/46260, WO 97/38727, JP-A-10-72467 y JP-A-10-95802 describe un derivado de polisacárido que comprende un polisacárido unido a una sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor por medio de un aminoácido o un péptido. Sin embargo, estas publicaciones describen el uso de estos polisacáridos en el tratamiento de cánceres al acumularse en el sitio de tumor y eliminando las células del tumor, pero nunca indican actividades para inhibir la metástasis o evitar la reaparición de un tumor maligno.

DESCRIPCION DE LA INVENCION Un objetivo de la presente invención es proveer una composición farmacéutica novedosa para inhibir la metástasis o prevenir la reaparición de un tumor maligno. Los inventores de la presente han estudiado intensamente, y han encontrado que un derivado de polisacárido que comprende un polisacárido que tiene un grupo carboxilo unido a una sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor por medio de un aminoácido o un péptido presenta un excelente efecto en la inhibición de metástasis y/o prevención de la reaparición de un tumor maligno, y ha logrado la presente invención. Es decir, la presente invención se refiere a la composición farmacéutica para inhibir la metástasis o evitar la reaparición de un tumor maligno, que contiene como el ingrediente activo un derivado de polisacárido que comprende un polisacárido que tiene un grupo carboxilo unido a una sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor por medio de un aminoácido o un péptido que consiste en 2 u 8 aminoácidos que son iguales o diferentes, o una sal de los mismos.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS La figura 1 muestra los días transcurridos después de la implantación del tumor y el número de animales sobrevivientes en modelos metastáticos del hígado M 5076.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA MODALIDAD PREFERIDA El polisacárido que tiene un grupo carboxilo de la presente invención incluye los mismos o aquellos descritos en la patente antes mencionada WO 94/19376 y WO 97/46260, e incluyen polisacárido que tiene originalmente grupos carboxilo en la estructura del mismo (por ejemplo, ácido hialurónico, ácido péctico, ácido aigínico, condrointina, heparina, etc.), y polisacáridos que no tienen originalmente un grupo carboxilo (por ejemplo pululano, dextrano, mañano, quitina, monoglucano, quitosano, etc.) pero a los que se les ha introducido grupos carboxilo, y polisácaridos que no tienen originalmente un grupo carboxilo en la estructura del mismo pero a los que se les ha introducido grupos carboxilo después de la formación del polialcohol (por ejemplo, polialcohol de polisacárido con un grupo carboxilo. El polisacárido que no tiene originalmente un grupo carboxilo pero al que se le ha introducido un grupo carboxilo significa uno que se prepara al sustituir un átomo de hidrógeno de una parte o todos los grupos de hidroxilo de polisacáridos que no tienen originalmente un grupo carboxilo con un grupo carboxialquilo de C1-4. En la presente invención, el polisacárido que tiene un polisacárido incluye uno que se prepara al tratar un polisacárido que originalmente no tiene un grupo carboxilo con un agente de reducción, y posteriormente seguido por una sustitución de un átomo de hidrógeno de una parte o todos los grupos hidroxilo del resultante con un grupo carboxialquilo de C-i-4. El polialcohol de polisacárido que tiene un grupo carboxilo incluye, por ejemplo, polialcohol de carboxi Ci-4 alquil-polisacárido que se prepara al tratar un polisacárido que originalmente no tiene un grupo carboxilo sucesivamente con periodato de sodio y borohidruro de sodio mediante el método descrito en WO 97/46260 para dar un polialcohol de polisacárido, que además se trata con un ácido alquilcarboxílico de Ci-4 halogenado. La porción alquilo del grupo carboxialquilo de C-|.4 que sustituye un átomo de hidrógeno de los grupos hidroxilo del polisacárido anterior (incluyendo un polialcohol de polisacárido) puede ser un grupo alquilo de cadena recta o un grupo alquilo de cadena ramificada. Preferiblemente el grupo carboxialquilo de C1-4 es, por ejemplo, grupo carboximetilo, grupo 1-carboxietilo, grupo 3-carboxipropilo, grupo 1-metil-3-carboxipropilo, grupo 2-metil-3-carboxi-propilo, grupo 4-carboxibutilo, etc., y grupo carboximetilo es el más preferido. En la presente invención, es el polisacárido que tiene un grupo carboxilo preferiblemente es polialcohol de carboxi alquilodextrano de C1-4 o polialcohol de carboxi alquilodextrano de Ci-4i y carboxi alquilodextrano de C1-4 se prefiere especialmente. El grado de formación de polialcohol (mediante la oxidación sucesiva con periodato de sodio y reducción con borohidruro de sodio) en el paso para preparar el polialcohol de carboxiCi-4alquilo-polisacárido como se mencionó anteriormente no se especifica, pero el polialcohol de polisacárido intermediario preferiblemente es uno obtenido al tratar un polisácarido bajo condiciones posibles para formar sustancialmente casi completamente el polialcohol. Además, en la presente invención, el polisacárido que tiene un grupo carboxilo preferiblemente es un dextrano carboximetilado o polialcohol de dextrano carboximetilado, y entre estos polisacáridos, particularmente el dextrano que tiene un peso molecular promedio de 20,000 a 500,000, se prefiere más, y el dextrano que tienen un peso molecular promedio de 50,000 a 350,000, se prefiere aún más (dicho peso molecular promedio se determina mediante el método de cromatografía de permeabilidad de gel (GPC), Shinseikagaku, Jikken Koza vol. 20, p. 7, Tokio-Kagaku-Dojin 5 de Noviembre de 1991 ).

Cuando se introduce un grupo carboxiaíquiío en polisacáridos, ei grado de introducción del mismo se expresa mediante "grado de sustitución" que se define por un número de grupos carboxiaíquiío (incluyendo grupos de cadenas de péptido introducidos por estos grupos) por un residuo de azúcar. También se expresa mediante ia siguiente ecuación. grado de _ Número de grupos carboxiaíquiío en la molécula sustitución Número total de residuos de azúcar en la molécula Cuando el grupo carboxiaíquiío es un grupo carboximetilo, el grado de sustitución se expresa ocasionalmente mediante el grado de carboximetilación (grado CM).

Cuando el polisacárido es dextrano, el grado de sustitución del mismo preferiblemente se encuentra en la escala de 0.3 a 0.8. Cuando el polisacárido es polialcohol de dextrano, el grado de sustitución preferiblemente se encuentra en la escala de 0.3 a 0.5.

El aminoácido o péptido de la presente invención juega un papel de espaciador existente entre un polisacárido que tiene un grupo carboxilo y una sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor, y el aminoácido o aminoácido que forma dicho péptido incluye aminoácidos naturales y aminoácidos sintéticos (incluyendo D-aminoácidos, L-aminoácidos, o mezclas de los mismos), y también incluye aminoácidos neutrales, aminoácidos básicos o aminoácidos ácidos. Además, el aminoácido de la presente invención puede no solamente ser un a-aminoácido, sino también ß-aminoácidos, ?-aminoácidos, e-aminoácidos, etc. Ejemplos de los aminoácidos son glicina, a-alanina, ß-alanína, valina, leucina, isoleucina, serina, treonina, sisteina, metionina, ácido aspártico, ácido glutámico, lisina citrulina, arginina, fenilalanina, tirosina, histidina, triptofano, prolina, hidroxiprolina, ácido ?-aminobutírico, ácido e-aminocaproico, etc. El péptido de la presente invención incluye uno que consiste en 2 a 8 aminoácidos, preferiblemente 2 a 5 aminoácidos, preferiblemente 2 a 5 aminoácidos, que son iguales o diferentes. Ejemplos de péptidos son glicil-glicil-L o D-fenilalanil-glicina, glicil-glicina, glicil-glicil-glicina, glicil-glicil-glicil-glicina, glicil-glicil-glicil-glicil-glicina, L- o D-fenilalanil-glicina, L- o D-tirosil-glicina, L- o D-leucil-glicina, L- o D-fenilalanil-citrulina y L- o D-valil-citrulina (la terminal N de estos péptidos se introduce en el grupo carboxilo de un polisacárido).

Entre estos péptidos, glicil-glicil-L- o D-fen¡l-alanil-glicina, glicil-glicina, glicil-glicil-glicina, glicil-glicil-glicil-glicina, glicü-glicil-glicil-glicil-glicina, y L- o D-fenilalanil-gficina se prefieren. La sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor de ia presente invención puede incluir varios compuestos conocidos como un agente anti-tumor, y pueden ser agentes citotóxicos o agentes citoestáticos. El agente citotóxico preferiblemente es un derivado de canftotecina y derivados de taxano y el agente citostático son preferiblemente inhibidores de angiogénesis, inhibidores del receptor EGF. Más preferiblemente, el agente citotóxico es un derivado de canftotecina y el agente citostático es un inhibidor de angiogénesis. Ejemplos de derivados de canftotecina son compuestos descritos en JP-A-10-72467 de la fórmula (I): en donde R1 es un grupo alquilo inferior sustituido o no sustituido, X1 es un grupo de la fórmula: -NHR2 (R2 es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo inferior) y Alk es un grupo alquileno de C-i-e de cadena ramifica o cadena recta que tiene opcionalmente un átomo de oxígeno en la cadena del mismo. Entre los mismos, el compuesto preferido es 10-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-canftotecina. Otros ejemplos de los derivados de canftotecina son los compuestos descritos en JP-A-10-95802 de la fórmula (II). en donde dos grupos de R2 a R6 siendo adyacentes entre sí se combinan para formar un grupo alquiieno inferior, y uno de los átomos de carbono de dicho grupo alquiieno inferior se sustituye por un grupo amino, y los tres grupos restantes de R2 a R6 son un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo inferior o un átomo de halógeno. Entre los mismos, se prefiere el compuesto (1S, 9S)-1-amino-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H,12H-benzo[de]pirano[3',4':6,7]indolizino[1 ,2-b]quinolin-10,13(9H, 5H)-diona, etc. Ejemplos de derivados de taxano son Taxol, Taxotere, 13-[(2'R,3'R)-3,N-t-butiloxicarbonil-3'-cicloprop¡l]- 0-deacetil-baccatin III, etc. En el ingrediente activo de la presente invención, la relación del polisacárido y la sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor puede seleccionarse de conformidad con los tipos de polisacárido a utilizar, pero cuando el polisacárido es dextrano o polialcohol de dextrano, entonces el contenido de la sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor preferiblemente se encuentra en la escala de 0.1 a 20% en peso, más preferiblemente en la escala de 2 a 0% en peso, con base en el peso total del ingrediente activo. Entre los ingredientes activos de la presente invención, se prefieren los derivados de polisacárido o una sal de los mismos en donde un aminoácido o un péptido que consiste en 2 u 8 aminoácidos que son iguales o diferentes se introducen en una parte o todos los grupos carboxilo del polisacárido que tienen un grupo carboxilo a través de un enlace de ácido-amida, y la parte restante o todos los grupos amino o grupos carboxilo que no participan en la unión a los grupos carboxilo del péptido anterior se unen a los grupos carboxilo, grupos amino o grupo hidroxilo de la sustancia activa que tienen una actividad antí-tumor a través de un enlace de ácido-amida o un enlace éster. El ingrediente activo especialmente preferido es un derivado de polisacárido, en donde el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es dextrano carboximetilado, la sustancia activa que tiene una actividad antitumor es 10-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-canftotecina, y el péptido es glicil-glicil-glicina, o una sal del mismo. Especialmente se prefiere un derivado de polisacárido en donde el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es dextrano carboximetilado que tiene un peso molecular promedio de 60,000 a 200,000, y el grado de carboximetilación del mismo se encuentra en la escala de 0.3 a 0.8, o una sal del mismo.

Otro ingrediente preferiblemente activo es un derivado de polisacárido en donde el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es un polialcohol de carboxi-alquildextrano de Ci- , la sustancia activa que tiene una actividad anti-tumor es (1 S, 9S)-1-amino-9-etil-5-fluoro-2,3-dih¡dro-9-hidrox¡-4-metil-1 H,12H-benzo[de]pirano[3',4':6,7]indolizino[1 ,2-b]-quinolina- 10,13(9H,15H)-diona, y el péptido es glicil-glicil-L- o D-fenilalanil-glicina, o una sal del mismo, y especialmente se prefiere el derivado de polisacárido o una sal del mismo en donde el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es polialcohol de carboxi-alquildextrano de Ci- que tiene un peso molecular promedio de 200,000 a 400,000, y el grado de sustitución del mismo se encuentra en Ja escala de 0.1 a 0.5. El derivado del polisacárido o una sal del mismo del ingrediente activo de la presente invención puede prepararse de conformidad con los métodos descritos en WO 94/19376, WO 97/46260, WO 97/38727, JP-A-10-72467, y JP-A-10-95802. La composición farmacéutica de la presente invención que puede acumularse altamente en el sitio tal como el ganglio linfático o el hígado al cual puede dispersarse el cáncer, puede liberar una sustancia activa a una velocidad apropiada de manera que la sustancia activa afecte duramente las células normales y actúe sorprendentemente en el crecimiento de las células de tumor, y preferiblemente, la composición farmacéutica de la presente invención es útil en la inhibición de la metástasis o prevención de la reaparición de un tumor maligno. Especialmente, la composición farmacéutica de la presente invención es útil en la inhibición de la metástasis del ganglio linfático o metástasis del hígado, particularmente útil en la inhibición de metástasis del ganglio linfático. Además, entre la metástasis del ganglio linfático, la composición farmacéutica de la presente es útil en la inhibición de la metástasis en el ganglio linfático del colón, o metástasis en el ganglio linfático del pulmón. Además, la composición farmacéutica de la presente puede presentar sus efectos no sólo justo antes de la aparición de la metástasis sino también después de la aparición de la metástasis. Por lo tanto, la composición farmacéutica de la presente también es útil para la inhibición de la metástasis o prevención de la reaparición de un tumor maligno después de una terapia tópica (por ejemplo, cirugía, terapia por radiación, termoterapia, crioterapia, terapia de quemado por láser, etc.). Además, la composición farmacéutica de la presente también es adecuada para dosificación repetitiva durante largo plazo, y puede ampliarse junto con una terapia tópica. La composición farmacéutica de la presente preferiblemente se administra en forma parenteral (por ejemplo, inyección intravenosa), y generalmente se administra en forma de una preparación líquida tal como una solución, suspensión, emulsión, etc. La composición farmacéutica de la presente preferiblemente se formula en forma de una inyección o infusión por goteo al utilizar agua destilada para inyección, solución salina fisiológica, solución glucosa acuosa.

La dosis de la composición farmacéutica de la presente puede variar de conformidad con los métodos de administración, edad, peso, o condiciones de los pacientes, etc., pero generalmente se encuentra en la escala de 0.002 a 50 mg/kg, más preferiblemente en la escala de 0.01 a 5 mg/kg, en una sola dosis, convertida en una cantidad de la sustancia activa. En la especificación de la presente, el grupo alquilo inferior y el grupo alquileno inferior puede ser uno con 1 a 6 átomos de carbono, preferiblemente con 1 a 4 átomos de carbono, y el átomo de halógeno es un átomo de flúor, átomo de cloro, átomo de bromo, átomo de yodo, etc.

EXPERIMENTOS EJEMPLO 1 (Modelos metastáticos del hígado M 5076) Un millón de células M 5076 (células de sarcoma de ovario de ratón) se implantaron en ratones macho BDF1 (cinco semanas de edad, ocho animales por grupo) en la vena de la cola. Un compuesto prueba (compuesto A; el compuesto obtenido en la preparación 1 como se describe a continuación e Irinotecan (CPT-1 1 )) se disolvió en una solución salina fisiológica, y cada cantidad como se indica en el cuadro 1 que se menciona a continuación se administró intravenosamente a los ratones en el día 4, 8 y 12 después de la implantación, y se observaron los ratones 120 días después de la Implantación del tumor. En el grupo de control (no tratados con el compuesto prueba), únicamente se administró una solución salina fisiológica.

El tiempo de supervivencia (días) se midió tanto en los grupos tratados con el compuesto prueba como en los grupos de control, y la velocidad de prolongación de la supervivencia se calculó de conformidad con la siguiente ecuación. Los resultados se muestran en el cuadro 1 y la figura 1.

Velocidad de , Días de supervivencia en e! compuesto prueba . . prolongación de = i -grupo tratado -1 J x 100 supervivencia V Días de supervivencia en el grupo de control / CUADRO 1 Velocidad de prolongación Dosis Días de Error de (mg/kg) supervivencia estándar supervivencia (%) Compuesto A 15.00 1.24 de control 12.5 37.57 5.27 150.5 25 43.13 5.98 187.5 50 48.71 5.33 224.8 Irinotecan 80 22.50 0.5 50.0 Como se muestra en el cuadro 1 , el compuesto obtenido en la preparación 1 como se menciona a continuación (compuesto A) mostró una excelente actividad de tiempo de vida de prolongación en modelos metastáticos de hígado 5076. Mientras tanto, Irinotecan no es conocido como un agente para inhibir la metástasis o prevenir la reaparición de un tumor maligno, pero se analiza meramente como un fármaco de derivados de canftotecina.

EXPERIMENTO 2 (Modelos metastáticos HT-29) Un segmento (2 mm2) de células HT-29 (cáncer de colón de humano) se implantó en el apéndice vermiforme de ratones hembra 100NCr nu/nu (5 a 6 semanas de edad, 10 animales por grupo). Un compuesto prueba (compuesto A; el compuesto obtenido en la preparación 1 como se mencionó a continuación, compuesto B; el compuesto obtenido en la preparación 4 como se mencionó a continuación, e Irinotecan (CPT-1 1 )) se disolvió en una solución salina fisiológica, y cada cantidad como se indica en el cuadro 2 como se mencionó a continuación se administró intravenosamente al ratón, al ratón en el día 15, 19, 23 y 25 después de la implantación del tumor. Por otro lado, en el grupo de control (no tratado con el compuesto prueba), únicamente se administró solución salina fisiológica. La presencia o ausencia de la metástasis de cada órgano se verificó en el día 84 después de la implantación de un tumor. Los resultados se muestran a continuación en el cuadro 2.

CUADRO 2 Grupo Número de Ganglio linfático Hígado Pulmón Otros órganos*** Número de animales animales con metástasis MI* p** MI* p** MI* p** MI* p** p** Compuesto A 10 0 <0.01 0 1.0 0 0.21 0 1.0 0 <0.01 (40 mg/kg)**** Compuesto A 10 1 <0.01 0 1.0 1 0.58 0 1.0 2 <0.01 (20 mg/kg)**** Compuesto A 10 8 1.0 0 1.0 2 1.0 0 1.0 8 1 .0 (10 mg/kg)**** Compuesto A 10 6 0.3 0 1.0 1 0.58 2 1.0 6 0.30 (5 mg/kg)**** Compuesto B 10 0 >0.01 0 1.0 0 0.21 0 1.0 0 <0.01 (5 mg/kg)**** Compuesto B 10 6 0.30 1 1.0 1 0.58 1 1.0 6 0.3 (2.5 mg/kg)**** Irinotecan 10 7 0.58 0 1.0 1 0.58 1 1.0 7 0.58 (40 mg/kg) Irinotecan 10 9 1.0 2 1.0 2 1.0 0 1.0 9 1.0 (200 mg/kg) Control 10 9 - 1 - 3 - 1 - 9 - *: MI significa incidencia metastática promedio **: P significa derivación estándar, en donde todos los grupos tratados se compararon con el control mediante la prueba exacta de Fischer. ***: incluyendo diafragma, cavidad abdominal y cavidad torácica. ****: Dosis convertida en 10-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-canftotecina : Dosis convertida en (1 S, 9S)-1-amino-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H, 12H, benzo[de]pirano[3',4': 6,7]indolizino[1 ,2-b]quinolin-10,13 (9H,15H)-diona EXPERIMENTO 3 (Modelos metastáticos HT-29) Un segmento (2 mm2) de células HT-29 (cáncer de colón de humano) se implantó en el apéndice vermiforme de ratones hembra 100NCr nu/nu (5 a 6 semanas de edad, 10 animales por grupo). Ya que se observó la metástasis del ganglio linfático en el día 49 después de la implantación del tumor, un compuesto prueba (compuesto A; el compuesto obtenido en la preparación 1 como se mencionó a continuación, e Irinotecan (CPT-1 )) se disolvió en una solución salina fisiológica, y cada cantidad como se indica en el cuadro 3 como se menciona a continuación se administró intravenosamente a los ratones en los días 51 , 55, 59 y 63 después de la implantación del tumor. Por otro lado, en el grupo de control (no tratado con el compuesto prueba), únicamente se administró la solución salina fisiológica. La presencia o ausencia de la metástasis de cada órgano se verificó en el día 84 después de la Implantación del tumor. Los resultados se muestran en el siguiente cuadro 3.

CUADRO 3 Grupo Número de Ganglio linfático Hígado Pulmón Otros órganos*** Número de animales animales con metástasis MI* MI* MI** p** MI* p** p** Compuesto A 10 0 <0.01 0 1.0 0 0.21 2 1.0 2 <0.01 (40 mg/kg) **** Compuesto A 10 2 <0.01 0 1.0 0 0.21 1 1.0 3 <0.01 (30 mg/kg) **** Irinotecan 10 8 1.0 1 1.0 0 0.21 1 1.0 8 1.0 (40 mg/kg) Control 10 9 - 1 - 3 - 1 - 9 - * : MI significa incidencia metastática **: P significa derivación estándar, donde todos los grupos tratados se comparan con el control por la prueba exacta de Fischer *** Incluye diafragma, cavidad abdominal y caja torácica **** Dosis convertida en 10-(3'-aminoprop¡loxi)-7-etil-(20S)-camptotecina EXPERIMENTO 4 (Modelos metastáticos de H460) Se implantó un segmento (2 mm2) de células H460 (cáncer de pulmón humano) en el pulmón izquierdo de ratones hembra 100NCr nu/nu (de 5 a 6 semanas de edad, 10 animales por grupo). Como se observó metástasis en el día 14° después de la implantación del tumor en otro grupo de control, se disolvió un compuesto de prueba (compuesto A; el compuesto que se obtuvo en la preparación 1 que se menciona más adelante, compuesto B; el compuesto que se obtiene la preparación 4 que se menciona más adelante, e Irinotechan (CPT-1 1 )) en una solución salina fisiológica, y se administró cada cantidad que se indica en el cuadro 4 siguiente, en forma intranevonosa a los ratones en los días 14°, 8 o, 22d0 y 26° después de la implantación del tumor. Por otro lado, en el grupo de control (no tratado con el compuesto de prueba) sólo se administró una solución salina fisiológica. Se revisó la ausencia o la presencia de metástasis en cada órgano en el día 36° después de la implantación del tumor. Los resultados aparecen en el siguiente cuadro 4.

CUADRO 4 Grupo Numero de Ganglio linfático Hígado Pulmón Número de animales animales con metástasis MI* MI* p** MI** p** p** Compuesto A 10 1 <0.01 0 1.0 0 0.54 1 <0.01 (40 mg/kg) **** Compuesto A 10 2 0.05 0 1.0 2 0.58 3 0.245 (20 mg/kg) **** Compuesto A 10 1 O.01 0 1.0 0 0.54 1 0.02 (10 mg/kg) **** Compuesto A 10 2 0.05 0 1.0 1 1.0 2 0.06 (5 mg/kg) **** Compuesto B 10 2 0.05 0 1.0 1 1.0 2 0.06 (5 mg/kg) ***** Compuesto B 10 1 <0.01 0 1.0 0 0.54 1 0.02 (2.5 mg/kg) ***** Irinotecan 10 0 <0.01 0 1.0 1 1.0 1 0.02 (40 mg/kg) Irinotecan 10 2 0.05 0 1.0 0 0.54 2 0.06 (80 mg/kg) Control 20 13 - 0 - 2 - 12 * : MI significa incidencia metastática **: P significa derivación estándar, donde todos los grupos tratados se comparan con el control por la prueba exacta de Fischer ****: Dosis convertida en 10-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-camptotecina *****: Dosis convertida en (1S,9S)-1-amino-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-met¡l- H,12H-benzo[de]pirano[3',4':6,7]indolizino[1 ,2-b]quinolina-10,13(9H,15H)-diona PREPARACIONES PREPARACION 1 Preparación de CM-dextran-7-etil-10-f3'-(glici)-qlicil qlicilamino)propiloxi1-(20S)-camptotecina (CM-Dextran significa carboximetildextrano, de aquí en adelante, el mismo) (1 ) Clorhidrato de 0-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-camptotecina (500 mg) se disolvió en acetonitrilo (25 mi), y al mismo se le agregaron sucesivamente t-butoxicarbonil-glicil-glicil-glicina (345 mg), N-metilmofolina (121 mg), N-hidrox¡benzotriazol (161 mg) y clorhidrato de 1-(3-dimetilamino-propil)-3-etilcarbodi¡mida (228 mg), y la mezcla se agitó durante una noche. El producto precipitado fue recogido mediante filtración, se purificó por cromatografía de columna de gel de sílice para producir un polvo espumoso amarillo pálido, que fue recristalizado a partir de n-propanol para dar 7-etil-10-(3'-(t-butoxicarbonil-glicil-glicil-glic¡lamino)propiloxi]-(20S)-camptotecina (663 mg) como cristales incoloros.

P.f.: 157-159°C. (2) Se emulsificó 7-etil-10-(3'-(t-butoxicarbonil-glicil-glic¡l- gl¡c¡lam¡no)propiloxi]-(20S)-camptotecina (3.86 g) en agua purificada (64 mi) y al mimo se le añadieron 6N de una solución acuosa de ácido clorhídrico (32 mi), y la mezcla se hizo reaccionar a temperatura ambiente bajo agitación durante 2 horas. Se concentró el solvente, y al mismo se le añadió n-propanol para precipitar el producto polvoso. Se recogió mediante filtración el producto polvoso resultante, y se recristalizó a partir de n-propanol acuoso para dar clorhidrato de 7-etil-10-(3'-(glicil-glicil-glicilamino)propiloxi]-(20S)-camptotecina (2.56 g) como cristales amarillos. (3) Se disolvió sal de sodio de CM-Dextran (CM-grado = 0.44, 50 g) en agua (2.5 litros), y el valor de pH del mismo se ajustó a pH 5.0 con 0.2N de una solución acuosa de ácido clorhídrico, bajo agitación a 15°C, y a la misma se añadió clorhidrato de 7-etil-10-(3'-(glicil-glicil-glicilamino)propiloxi]-(20S)-camptotecina (4.01 g). A la mezcla se le añadió clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (50 g), durante lo cual el valor de pH de la solución de reacción se mantuvo a 5.0-5.5 con 0.2N de ácido clorhídrico. La mezcla reaccionó a 15°C bajo agitación durante 1 hora, y se diluyó hasta el volumen total de 10 litros con agua purificada. Mientras el valor de pH se mantuvo a más de pH 4.0, las fracciones moleculares inferiores fueron removidas utilizando un módulo de ultrafiltracion (ACP-1010, fabricado por Asahi Kasei Industries, Ltd.), y el valor de pH del mismo se ajustó a pH 8 con 0.1 N de una solución acuosa de hidróxido de sodio, y después se sometió a una resina de intercambio de iones MSC-1 (tipo Na, fabricada por Dowex). Las fracciones que contenían los compuestos deseados se concentraron, y se filtraron a través de un filtro (0.45 µ??). El resultante se mezcló con etanol (10 litros) con agitación, y al mismo se le añadieron gota a gota una salmuera 3M (40 mi) bajo agitación. Los precipitados resultantes se recogieron mediante filtración, y se disolvieron en agua purificada (21 litros). El valor de pH de la solución se ajustó a pH 4.0 con 0.2N de una solución acuosa de ácido clorhídrico y se volvió a someter a ultrafiltración, durante la cual el valor de pH se mantuvo a pH 4.0. El solvente se concentró al volumen total de 1.5 litros y se filtró a través de un filtro (0.45 µ?t?), el resultante se mezcló con etanol (9 litros), y ai mismo se le añadió gota a gota salmuera 3M (35 mi) bajo agitación. Los precipitados resultantes fueron recogidos mediante filtración, y se lavaron sucesivamente con etanol y acetona, se concentraron bajo una presión reducida para producir el compuesto deseado (54.9 g) como un polvo amarillo pálido. El contenido como clorhidrato de 10-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-camptotecina fue confirmado como 4.2% por absorción a 367.5 nm. De acuerdo con el análisis de GPC (cromatografía de permeación de gel), el peso molecular promedio del producto deseado fue de 121 kDa, y el grado de distribución (Pm/Nm) fue de 1 .47.

PREPARACION 2 Preparación de CM-dextran-13-r(2'R,3'S)-3'-N-tert-butoxicarbon¡l- 3'-fenil-2'-O-L-fenilalanil-qlicil-isoserinill-10-deacil-baccatina III (Bz es un grupo benzoilo, de aquí en adelante, el mismo). Se disolvió CM-Dextran (2008 mg, CM-grado: 0.47, el peso molecular promedio: 170 kDa) con agitación en agua purificada (90 mi), y al mismo se le añadió mesilato de 13-[(2'R, 3'S)-3'-N-tert-butoxicarbonil-3'-fenil- 2'-O-L-fenilalanil-glicil-isoseriniI]-10-deacil-bacctatina III (1 19 mg) y dimetiíformamida (90 mi), y la mezcla se agitó para disolverla. A la mezcla se le agregó con agitación ácido 2-etoxi-1 -(2H)-quinolinocarboxílico (4.0 g), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. A la solución de reacción se le añadió etanol (720 mi) con agitación, y a la misma también se le añadió gota a gota salmuera 3M (1.8 mi) bajo agitación. Los precipitados fueron recogidos mediante centrifugado, y se disolvieron en agua (200 mi), y el valor de pH de la solución se ajustó a pH 7 con 0.2N de una solución acuosa de hidróxido de sodio. La solución fue vertida en etanol (800 mi) con agitación, y a ia misma se le añadió gota a gota salmuera 3M (4 mi) bajo agitación. Los precipitados resultantes fueron recogidos mediante centrifugado, y se purificaron de la misma manera que en la preparación 1-(3) para dar el compuesto deseado (600 mg) como un polvo blanco. El contenido de la substancia activa: 2.4 % (UV método, (?=276 nm)).

PREPARACION 3 Preparación de CM-dextran-2'-Q-fenilalanil-qlicil-taxol Se disolvió CM-Dextran (1 .29 g, CM-grado: 0.47, el peso molecular promedio: 170 kDa) con agitación en agua purificada (70 mi), y al mismo se le añadió mesilato de 2'O-fenil-alanil-gliciItaxol (77 mg) y dimetilformamida (70 mi), y la mezcla fue agitada adicionalmente para disolverla. Se añadió ácido 2-Etoxi-1 (2H)-quinolinocarboxílico (2.59 g) a la mezcla bajo agitación, y la mezcla reaccionó con agitación durante una noche. La solución de reacción fue añadida a etanol (700 mi) con agitación, y a la misma se le añadió gota a gota salmuera 3M (1 .4 mi) bajo agitación. Los precipitados se recogieron mediante centrifugado, y se disolvieron en agua (240 mi), y se mezclaron con etanol (1200 mi) bajo agitación. Se añadió salmuera 3M (4.8 mi) gota a gota a la mezcla bajo agitación, para la precipitación. De la misma manera, la precipitación se repitió adicionalmente tres veces para dar el producto deseado (746 mg) como un polvo blanco. El contenido de la substancia activa: 4.8% (UV método (?=273 nm)).

PREPARACION 4 Preparación de carboximetildextran-polialcohol-(1S,9S)-1-(qlicil-qlicil-L-fen¡lalanil-qlicilamino)-9-et¡l-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H,12H-benzorde1-piranor3'.4':6,7lindolizinon .2-b1quinoli-10,13(9H.15HVdiona (1 ) Preparación de (1 S, 9S)-1-(t-butoxicarbonil-glicil-gIicil-L-feniIalanil-glicilamino)-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H,12H-benzo[de]pirano-[3',4':6,7]indolizin[1 ,2-b]quinolin-10,13(9H, 15H)-diona: Boc-Gly-Gly-Phe-Gly A una solución de clorhidrato de (1 S,9S)-1-amino-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H,12H-benzo[de]pirano-[3',4':6,7]indolizin[1 ,2-b]quinolin-10,13(9H,15H)-diona (167 mg; 0.354 mmoles), t-butoxicarbonil-glicil-glicil-L-fenilalanil-glicina (463 mg; 1 .06 mmoles) y monohidrato de 1-hidroxibenzotriazol (HOBT) (143 mg; 1.06 mmoles) en dimetilformamida (DMF) (10 mi), se les añadió clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodimimida (EDC) (270 mg; 1.42 moles), trietilamina (148 µ?; 1.06 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (DMAP) (5 mg; 0.04 mmoles). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 15 horas y el solvente se concentró bajo presión reducida. El residuo fue disuelto en cloroformo, y la mezcla fue lavada, secada y el solvente fue evaporado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía de columna de gel de sílice (solvente; cloroformo: metanol = 50:1 a 10:1 ) para dar el compuesto del título (228 mg, rendimiento: 75%) como un sólido amarillo pálido. IR (Nujol); 3290, 1710, 1655 crn 1 ESI-MS; 854 (M+H) (2) Preparación de (1S,9S)-1 -(glicil-glicil-L-fenil-alanil- glicilam¡no)-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-h¡droxi-4-metil-1 H,12H- a A una solución de (1 S,9S)-1 -(t-butoxicarbonil-glicil-glicil-L-fen¡lalan¡l-gl¡cilamino)-9-etil-5-f^ benzo[de]pirano-[3',4':6,7]indolic¡no[1 ,2-b]quinolin-10,13(9H,15H)-diona (220 mg; 0.258 mmoles) en dioxano (4 mi) se le añadieron 4N de una solución de cloruro de hidrógeno en dioxano (6 mi) bajo agitación en un baño de hielo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Se añadió éter dietílico (30 mi) a la mezcla de reacción, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. Los precipitados fueron recogidos por filtración, y se secaron para dar el compuesto del título (176 mg, rendimiento; 86%) como un polvo amarillo. IR (Nujol); 3250, 1745, 1660, 1605, 1535 cm"1 ESI-MS; 754 (M+H) (3) Preparación de polialcohol de dextrano (PA-Dextrano): Se introdujo un regulador acético (0.1 M, pH 5.5, 1000 mi) en un matraz de fondo redondo de tres cuellos (capacidad de 3 litros). Se añadió Dextran T-500® (10.0 g fabricado por Amersham Pharmacia Biotech AB) en pequeñas porciones al regulador durante un período de 30 minutos a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante aproximadamente 30 minutos hasta que la solución se volvió clara, y después se enfrió la mezcla a 5°C (temperatura interior) en un baño. Por separado se añadió a un matraz (capacidad ? litro) periodato de sodio (33.0 g) y agua (1000 mi), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente, y después se enfrió a 5°C. A la solución de dextrano anterior se le añadió con agitación la solución anterior de periodato de sodio a 5°C, y la mezcla se mantuvo a 5°C durante 5 días en un lugar oscuro. El exceso de periodato de sodio se removió añadiendo etilenglicol (10 mi), y la mezcla fue agitada adicionalmente a 5°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 3°C, y se le añadió 8 de una solución acuosa de hidróxido de sodio durante lo cual se mantuvo la temperatura de reacción a menos de 6°C (el valor de pH de la mezcla de reacción se volvió de más de pH 9). A la mezcla de reacción se le añadió borohidrato de sodio (14 g) en pequeñas porciones con agitación, y la mezcla fue agitada a 5°C durante 1 noche. Para remover el exceso de borohidrato de sodio, el valor de pH de la mezcla de reacción fue ajustado a menos de pH 5.5. añadiendo a la misma ácido acético de 3 a 6°C, y la mezcla fue agitada adicionalmente durante 2 horas. El valor de pH de la mezcla de reacción fue ajustado a aproximadamente pH 7.8 con 8M de una solución acuosa de hidróxido de sodio. La mezcla fue sometida a diálisis contra agua (Spectora®/Por 3 membranas, corte de peso molecular <3500), y se liofilizó para dar el poliaicohol de dextrano (8.34 g) como un polvo amorfo. (4) Preparación de poliaicohol de carboximetildextrano (CM-PA- Dextran): Se puso agua (155 mi) en un matraz de fondo redondo de tres cuellos (capacidad 500 mi), al mismo se le añadió con agitación poliaicohol de dextrano (5.18 g) a temperatura ambiente durante un período de 10 minutos. La mezcla fue agitada durante aproximadamente 10 a 30 minutos hasta que la mezcla se volvió clara, y después se agregó hidróxido de sodio (pelas, 97.0%, 21.8 g) a la solución de poliaicohol de dextrano en pequeñas porciones bajo agitación, durante la cual se mantuvo la temperatura interior de 30 a 40°C en un baño de hielo. El matraz de reacción se puso en un baño, y la mezcla fue agitada a 30°C. Se agregó ácido cloroacético (31.1 g) con agitación en pequeñas porciones en la mezcla de reacción a 30 a 40°C. Después de la adición, la mezcla fue agitada adicionalmente a 30°C en un baño durante 20 horas. La mezcla de reacción se enfrío en un baño de hielo, y la mezcla fue neutralizada agregándole ácido acético bajo agitación (es decir, el valor de pH se ajusto a menos de pH 9).

Se añadió agua (160 mi) a la mezcla, y ésta fue sometida a diálisis contra agua (membrana (membrana Spectora®/Por 3, corte de peso molecular <3500), y se liofilizó para dar polialcohol de carboximetildextrano (6.53 g) como un polvo amorfo. (5) preparación de carboximetildextrano-polialcohol-(1 S,9S)-1 - (glicil-glicol-L-fenilalanil-glicilamino)-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidrox¡-4-metil-1 H,12H-benzo[de]pirano[3',4':6,7]indolizino[1 ,2-b]qu¡nol¡na-10,13(9H,15H)-diona: Se puso agua (40 mi) en un matraz de fondo redondo (capacidad 100 mi), y se agregó a la misma polialcohol de carboximetildextrano (1.0 g) a temperatura ambiente con agitación durante un período de 5 minutos. La mezcla fue agitada durante aproximadamente 30 minutos hasta que se volvió clara. Se añadió una solución de (1S,9S)-1-(glicil-glicil-L-fenilalanil-gl¡cilamino)-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H.12H-benzo[de]pirano[3',4':6,7]indolizino[1 ,2-b]quinolina-10,13(9H,15H)-diona en dimetilformamida (100 mg/ 0 mi) con agitación a la mezcla, y se añadió adicionalmente a la misma dimetilformamida (15 mi), y la mezcla fue agitada durante 10 minutos. A la mezcla se le añadió gota a gota con agitación una solución de 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1 ,2. Dihidroquinolina (EEDQ) en dimetil-formamida (1.0 g/10 mi) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada adicionalmente durante 18 horas. La mezcla de reacción fue sometida a diálisis contra agua (membrana Spectora®/Por 3, corte de peso molecular <3500), y se purificó adicionalmente con una columna de intercambio de cationes (columna BioRad AG® P-50, tipo Na-, 30 mi). La fracción principal fue sometida a diálisis (membrana Spectora®/Por 3, corte de peso molecular <3500), y se liofilizó para dar un producto crudo, el cual fue pulverizado con acetona, se recogió mediante filtración y se secó para dar el producto deseado (904 mg) como un polvo amarillo claro.

APLICACION EN LA INDUSTRIA La composición farmacéutica de la presente invención puede tener una alta acumulación en el sitio, como en el ganglio linfático o en el hígado, hacia los cuales se pueden esparcir los cánceres, y sorpresivamente actúa sobre el crecimiento de las células tumorales sin afectar las células normales, y por lo tanto la composición farmacéutica de la presente invención es útil en la inhibición de la metástasis, particularmente en la inhibición de la metástasis del ganglio linfático o metástasis del hígado, o en la prevención de la reaparición de un tumor maligno. Además, la presente composición farmacéutica puede exhibir sus efectos no sólo antes del inicio de la metástasis, sino también después del inicio de la metástasis. Por lo tanto, la presente composición farmacéutica también es útil para la inhibición de la metástasis o para la prevención de la reaparición de un tumor maligno después de la terapia tópica (por ejemplo, cirugía, terapia de radiación, termoterapia, crioterapia, terapia de quemadura por láser, etc.).

Claims (9)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES 1. - Una composición farmacéutica para inhibir la metástasis o para prevenir la reaparición de un tumor maligno, caracterizada porque comprende como ingrediente activo un derivado de polisacárido que comprende un polisacárido, el cual tiene un grupo carboxilo unido a una substancia activa que tiene actividad antitumoral por medio de un aminoácido o de un péptido que consiste en 2 a 8 aminoácidos que son iguales o diferentes, o una sal de la misma. 2. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la substancia activa que tiene una actividad antitumoral es un derivado de camptotecina de la fórmula (I): en donde R es un grupo alquilo inferior substituido o no substituido, X1es un grupo de la fórmula: -NHR2 (R2 es un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo inferior) y Alk es un grupo alquileno de C1-6 de cadena recta o cadena ramificada que tiene opcionalmente un átomo de oxigeno en la cadena del mismo, o un compuesto de la fórmula (II): en donde dos grupos de R2 a R6 que son adyacentes entre sí se combinan para formar un grupo alquileno inferior, y uno de los átomos de carbono de dicho grupo alquileno inferior se sustituye por un grupo amino, y los tres grupos restantes de R2 a R6 son un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo inferior o un átomo de halógeno. 3.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 o con la reivindicación 2, caracterizada además porque el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es un carboxi-alquildextrano de Ci-4 o un polialcohol de carboxi-alquildextrano de Ci-4. 4.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 o con la reivindicación 2, caracterizada además porque el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es un carboxi-alquildextrano de C-i-4. 5.- La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 , 2, 3 y 4, caracterizada además porque el péptido es un miembro seleccionado del grupo que consiste en glicil-glicil-L- o D-fenilalanil-glicina, glicil-glicina, glicil-glicil-glicina, glicil-glicil-glicil-glicina, glicil-glicil-glicil-glicil-glicina, L- o D-fenilalanil-glicina, L- o D-tirosil-glicina, L- o D-leucil-glicina, L- o D-fenilalanil-citrulina y L- o D-valil-citrilina. 6. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es un dextrano carboximetilado, la substancia activa que tiene una actividad antitumoral es 10-(3'-aminopropiloxi)-7-etil-(20S)-camptotecina, y el péptido es glicil-glicil-glicina. 7. - La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque el polisacárido que tiene un grupo carboxilo es un polialcohol de carboxi-alquildextrano de Ci-4l la substancia activa que tiene una actividad antitumoral es (1 S,9S)-1 -amino-9-etil-5-fluoro-2,3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-1 H,12H-benzo[de]- y el péptido es glicil-glicil-L- o D-fenil-alanil-glicina. 8. - La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 caracterizada además porque es una composición farmacéutica para inhibir la metástasis de un tumor maligno. 9. - La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 caracterizada además porque es una composición farmacéutica para prevenir la reaparición de un tumor maligno.