MXPA03007743A - Combinacion de un taxano y una cinasa dependiente de ciclina. - Google Patents

Abstract

Se describe una composicion farmaceutica compuesta de Taxol(r), Taxotere(r), o los derivados, y una cinasa dependiente de ciclina, asi como una forma de administracion en donde el taxano se administra en forma intermitente y la cinasa dependiente de ciclina se administra en forma repetida durante el mismo ciclo.

Description

COMBINACIÓN DE UN TAXANO Y UNA CINASA DEPENDIENTE DE CICLINA La presente invención se refiere a las combinaciones de Taxol®, Taxotere® y sus análogos y otros compuestos que son terapéuticamente útiles en el tratamiento de enfermedades neoplásicas. Más específicamente, la invención se refiere a las combinaciones de Taxol®, Taxotere® y sus análogos con cinasas dependientes de ciclina.

Los taxanos y taxoides constituyen una familia de compuestos diterpeno que se encuentran en la naturaleza que incluyen un fármaco antitumoral potente, páclitaxel. El páclitaxel (Taxol®) , aislado originalmente de la corteza del árbol Pacific Yew {Taxus brevifolia) , ha demostrado ser altamente eficaz en terapias adyuvantes y neoadyuvantes para pacientes con cánceres dé mama y ovario. En fechas recientes, su análogo semisiñtético, docetaxel (Taxotere®) , también ha sido encontrado eficaz en quimioterapia de cáncer de mama, el cual ha ampliado el número de enfermedades sensibles a esta clase de fármacos antitumorales, incluidos los cánceres de pulmón y colon. Taxol® (páclitaxel) y Taxotere® (docetaxel) se unen a tubulina, inhiben el desensamble microtubular y deterioran la mitosis, bloqueando por este medio el progreso a través de la fase del ciclo celular y facilitando la apoptosis.

A pesar del indudable éxito clínico general de los taxoides, algunos tumores muestran resistencia a estos fármacos. Esta resistencia al fármaco puede ser una peculiaridad natural de un tumor, o puede desarrollarse en el tumor con el tiempo. Se han reportado tres mecanismos principales de resistencia a fármacos: (i) mutaciones puntuales del gen de tubulina, (ii) la selección de las isoformas de tubulina con baja unión a taxanos, y (iii) la expresión del fenotipo de resistencia a múltiples fármacos (MDR) mediado por la bomba de efusión de la glucoproteína P (P-gp) codificada por el gen mdrl. El mecanismo (iii) puede explicar la resistencia natural a Taxol® y Taxotere® en tumores qué suelen expresar en forma inherente P-gp, como pueden ser los cánceres de colon y riñon.

Las combinaciones o asociaciones de conformidad con la invención permiten evitar o retardar los fenómenos de resistencia pleiotrópica o "resistencia a múltiples fármacos" .

La preparación de Taxol®, Taxotere® y sus derivados forman el objeto, por ejemplo, de las Patentes Europeas EP 0,253,738 y EP 0,253,739 y la Solicitud Internacional PCT WO 92/09,589.

Ahora se ha encontrado, y esto forma el objeto de la presente invención, que la eficacia de Taxol®, Taxotere® y sus análogos puede mejorarse notablemente cuando estos se administren en combinación con al menos una sustancia que sea terapéuticamente útil en tratamientos anticáncer y tenga un mecanismo idéntico o diferente de estos taxanos.

Entre las sustancias que pueden utilizarse en asociación o en combinación con Taxol®, Taxotere® o sus análogos, se pueden mencionar enzimas como L-asparaginasa y cinasas dependientes de ciclina, como pueden ser flavopiridol, quercitina y genisteina. También es posible utilizar algunos agentes como modificadores de la respuesta biológica o inhibidores del factor de crecimiento como los interferones o interleucinas .

Puesto que la actividad de los productos depende de las dosis que se utilicen, es posible utilizar dosis mayores y aumentar la actividad disminuyendo al mismo tiempo los fenómenos de toxicidad o retardando su inicio mediante la combinación de los factores de crecimiento del tipo hematopoyético como G-CSF ó GM-CSF o ciertas interleucinas con Taxol®, Taxotere®, sus análogos o sus combinaciones con otras sustancias con actividad terapéutica.

Más específicamente, la invención se refiere a las combinaciones de Taxol®, Taxotere® y sus análogos con la cinasa dependiente de ciclina, flavopiridol .

Las cinasas dependientes de ciclina (CDK) son reguladores importantes que controlan la sincronización y coordinación del ciclo celular. Las CDK forman complejos reversibles con sus contrapartes obligadas ciclinas para controlar la transición a través de las uniones clave en el ciclo celular. Por ejemplo, el complejo CDK4-ciclina DI activado controla el progreso a través dé la fase Gl, mientras que el complejo CDKl-ciclina Bl controla la entrada en la fase mitótica del ciclo celular. Se sabe que las proteínas inhibidoras de las cinasas dependientes de ciclina (CDKI) endógenas se unen a las CDK o el componente ciclina e inhiben la actividad cinasa. En múltiples tumores como los melanomas, los cánceres pancreáticos y esofágicos, estas CDKI naturales están ausentes o mutadas. Así pues, los inhibidores selectivos de las CDK pueden probar ser agentes quimioterápicos eficaces .

El flavopiridol (cis-5, 7-dihidroxi-2- (2-clorofenil) - 8- [4- (3-hidroxi-l-metil ) -piperidinil] -l-benzopiran-4-ona) es una flavona sintética que ha demostrado que tiene actividad antitumoral contra algunas líneas de células tumorales como el carcinoma de pulmón humano, carcinoma de mama, y también inhibe el crecimiento tumoral en modelos de xenoinj ertos . Se ha demostrado que induce la interrupción en las fases Gl y G2 del ciclo celular. El flavopiridol es un inhibidor potente y selectivo de las CKD, y su actividad antitumoral se relaciona con su actividad inhibidora de las CDK. Estudios han demostrado que esta actividad inhibidora del crecimiento de las células tumorales ocurre en una forma específica del ciclo celular. Véase Bioorg. & Med. Chem. Letters 10: 1037-1041 (2000) .

El Taxotere® y flavopiridol tienen mecanismos diferentes que pueden mejorar la eficacia de cada uno. La eficacia mejorada de una combinación de conformidad con la invención se puede demostrar por la determinación de la sinergia terapéutica. Una combinación manifiesta sinergia terapéutica si es superior terapéuticamente a uno u otro de los constituyentes que se utilizan en su dosis óptima (T. H. Corbett y col. Cáncer Treatment Reports, 66: 1187 (1982)).

Para demostrar la eficacia de una combinación, puede ser necesario comparar la dosis máxima tolerada de la combinación con la dosis máxima tolerada de cada uno de los constituyentes individuales en el estudio pertinente. Esta eficacia puede cuantificarse, por ejemplo, por el logio de la muerte celular, el cual se determina de conformidad con la siguiente fórmula: logxo muerte celular = T - C (días) /3.32 x T¿ en la cual T - C representa el tiempo que tardan las células en crecer, el cual es el tiempo promedio en días para los tumores del grupo tratado (T) y los tumores del grupo tratado [sic] (C) hasta haber alcanzado un valor predeterminado (por ejemplo 1 g) , y ¿ representa el tiempo en dias necesario para que se duplique el volumen del tumor en los animales control (T. H. Corbett y col., Cáncer, 40, 2660-2680 (1977); F. . Schabel y col., Cáncer Drug Development, Part B, Methods in Cáncer Research, 17, 3-51, New York, Academic Press Inc. (1979) ) . Un producto es considerado activo si el log10 de la muerte celular es mayor que o igual a 0.7. Se considera que un producto es muy activo si el log^o de la muerte celular es mayor que 2.8.

La combinación, utilizada en su propia dosis máxima tolerada, en la que cada uno de los constituyentes estará presente en una dosis que generalmente no exceda su dosis; máxima tolerada, manifestará sinergia terapéutica cuando el logio de la muerte celular sea mayor que el valor del logio de la muerte celular del mejor constituyente cuando éste sea administrado solo.

La eficacia de las combinaciones en los tumores sólidos puede determinarse experimentalmente de la siguiente manera: Los animales sometidos al experimento, generalmente ratones, se injertan bilateralmente en forma "subcutánea con 30 a 60 mg de un fragmento tumoral durante el día 0. Los animales portadores de tumores se mezclan antes de ser sometidos a los diferentes tratamientos y controles. En el caso de tratamiento de tumores avanzados, se permite que los tumores se desarrollen al tamaño deseado, eliminando los animales que tengan tumores con crecimiento insuficiente. Los animales seleccionados se distribuyen al azar para ser sometidos a los tratamientos y controles. Los animales no portadores de tumores también pueden ser sometidos a los mismos tratamientos que los animales portadores de tumores para poder disociar el efecto tóxico del efecto especifico en el tumor. La quimioterapia por lo reglar comienza desde 3 a 22 dias después del injerto, dependiendo del tipo de tumor, y se observa a los animales cada dia. Los diferentes grupos de animales se pesan 3 ó 4 veces por semana hasta que se logra una pérdida de peso máxima, y los grupos entonces se pesan al menos una vez a la semana hasta el término del estudio.

Los tumores se miden 2 a 3 veces por semana hasta que el tumor alcance aproximadamente 2 g, o hasta que el animal muere si esto ocurre antes de que el tumor pese 2 g. Se sacrifica a los animales y se les somete a autopsia.

La actividad antitumoral se determina de conformi con los diferentes parámetros que se muestran en Tablas 1 y 2.

Para un estudio de las combinaciones en leucemias, los animales son injertados con un número de células especifico, y se determina la actividad antitumoral por el aumento en el tiempo de supervivencia de- los ratones tratados con relación a los controles. Se considera que el producto es activo si el aumento en el tiempo de supervivencia es mayor que 27%, y se considera muy activo si es mayor que 75% en el caso de leucemias P388.

En los ejemplos siguientes, los ratones fueron injertados con adenocarcinoma mamario ?? 13/C'y fueron tratados con combinaciones de Taxotere® y flavopiridol con diferentes programas de administración " y de diferentes modos de administración. El ~ ' Taxol y Taxotere, asi como flavopiridol pueden ser administrados por via oral asi como por vía intravenosa. Algunos de estos programas muestran evidente sinergia terapéutica.

Otros objetivos y ventajas de la invención quedarán establecidos en parte en la descripción siguiente, y en parte será evidente a partir de la descripción, o pueden aprenderse por la práctica de la invención'. Los objetivos y ventajas de la invención se llevarán a cabo y lograrán por medio de los elementos y combinaciones particularmente señalados en las reivindicaciones anexas.

Se debe entender que la descripción general antes mencionada y la siguiente descripción detallada son para propósitos de ej emplificación y explicación solamente y no son restrictivos de la invención como se reclama.

Ejemplo 1 Para determinar la actividad de cada uno de los constituyentes de la combinación, Taxotere® y flavopiridol fueron administrados solos ' a ratones portadores de MA 13/C. El Taxotere® se administró por via intravenosa los dias 15 y 21; la dosis en cada día fue 30 mg/kg para una dosificación total de 60 mg/kg. Utilizada sola, esta dosificación condujo a un logio de muerte celular de 4.7 y una respuesta completa en los" 5 ratones así tratados. La administración de flavopiridol solo durante los días 15 y 21 en una dosis de 6 mg/kg cada día, o una dosis total de 12 mg/kg, dieron como resultado respuestas no completas en los 5 ratones sometidos a prueba .

Luego se combinaron los compuestos en dos formas y se probaron en un programa intermitente. En la primera combinación, de flavopiridol se administró primero durante los días 15 y 20 (dosis total 9 mg/kg) y Taxotere® se proporcionó durante los días 16 y 21 siguientes (dosis total 45 mg/kg) . Cuando se proporcionaron de este modo, el logio de la muerte celular fue 5.5 y dio origen a 5 de 5 respuestas completas en los ratones tratados. En este programa intermitente, el log^o de la muerte celular fue mejor que cuando se administró Taxotere® solo y todavía proporcionó 5 de 5 respuestas completas a pesar del hecho de que se administró 25% menos Taxotere® y 25% menos flavopiridol en esta combinación en comparación con el control.

Cuando se invirtieron los constituyentes de la combinación y Taxotere® se administró primero durante los días 15 y 20 y flavopiridol se administró durante los días 16 y 21 en las mismas cantidades, el logio de la muerte celular fue levemente menor que con Taxotere® solo, pero de nuevo hubo 5 de 5 respuestas completas. La Tabla 1 muestra estos resultados y que la combinación de flavopiridol y Taxotere® administrados en cantidades 25% menores tuvo una eficacia similar a la de Taxotere® solo.

Tabla I Combinación flavopiridol-Taxotere® en ratones portadores de ?? 13/C: 24 horas de diferencia Td = 2.2 días; tiempo para que el control .llegue a 1 g = 20.3 días; carga promedio al inicio del tratamiento = 130-160 mg CR = respuesta completa; IV = intravenoso; bwl = pérdida de peso corporal en el nadir; (DT) = dosis total; HNTD = dosis no tóxica más alta; Ick = logio muerte celular Ejemplo 2 Se aumentaron los dias en los que se administró flavopiridol, y se descubrió que cando los ratones portadores de MA 13/C fueron expuestos a dosis semejantes de flavopiridol administradas durante 8 dias en un ciclo de 10 dias mientras que Taxotere® se administró durante el primero y último día del ciclo de 10 dias, hubo una evidente sinergia.

La Tabla 2 más adelante muestra la dosis total no tóxica más alta de cada componente solo - 96.8 mg/kg de Taxotere® y 23.2 mg/kg de flavopiridol. Cuándo se administraron los constituyentes en combinación, Taxotere® administrado durante los dias 14 y 23 y flavopiridol durante los dias 14-17 y 20-23, tres combinaciones fueron claramente sinérgicas y una cuarta tuvo igual eficacia que Taxotere® solo. Todas las cuatro combinaciones mostraron 6 de 6 respuestas completas; es decir, 100% de respuestas completas.

Se realizó un estudio de dosis-respuesta en tres brazos en ratones C3H/HeN portadores de tumores que podían ser medidos al comienzo del tratamiento (230 mg) . El modelo elegido fue un adenocarcinoma mamario murino MA 13/C, seleccionado basándose en su quimiosensibilidad a docetaxel. Los ratones fueron tratados con Flavo (es decir, una vez al día, el día 14 a 17, y el día 20-23 después del implante del tumor), o docetaxel (es decir, los días 14 y 23) , o su combinación. Resultados: a la dosis no tóxica más alta (HNTD, 2.9 mg/kg/dosis, dosis total de 23.2 mg/kg) , Flavo administrado IV como un solo agente fue inactivo con un logaritmo de muerte celular neto de 0.4 (log de la muerte celular neta = retardo en el crecimiento de tumor - duración del tratamiento / 3.32 x tiempo de duplicación del tumor) , y sin regresión completa (CR) [sic] . La HNTD de docetaxel solo (48.1 mg/kg/inyección, dosis total de 96.8 mg/kg) se encontró muy activa" (log de la muerte celular neta 3, CR 6/6). Se obtuvo clara sinergia en la combinación no tóxica más alta (flavo a 1.93 mg/kg/dosis y docetaxel a 53.2 mg/kg/inyección) con un logaritmo de la muerte celular neta de 7.6 y CR 6/6. Esta combinación fue bien tolerada induciendo un 13% de pérdida de peso corporal en el nadir que ocurrió 6 días después del último tratamiento. La sinergia se mantuvo en dos niveles de dosis inferiores adicionales en comparación con la HNTD de docetaxel. Esta sinergia también se observó cuando se administró Flavo por vía oral .

TABLA II Combinación flavopiridol-Taxotere® Exposición repetida" al adenocarcinoma mamario MA 13/C Td = 2.2 días; tiempo para que el control llegue a 1 g = 17.8 días; tumor promedio cargado al ;principio del tratamiento = 210-260 mg; CR = respuesta completa; IV = intravenoso; bwl = pérdida de peso corporal en el nadir; (DT) = dosis total; HNTD = dosis no tóxica, más alta; Ick = logio muerte celular. ¡ Ejemplo 3 Se inyectó Taxotere IV durante los dias 14 y 25 después del implante de tumor. Flavo se administró por vía oral una vez al día desde el dia 14 hasta el 18 y desde el dia 21 hasta el 25.

FLAVOPIRIDOL (po) - DOCETAXEL (iv) Exposición prolongada MA 13/C =320 mg - peso de tumor durante el dia 14 (BCM - 1252) - experimento No.

Como en el Ejemplo 2, la combinación de docétaxel y Flavo repetido diariamente se encontró más activa que los compuestos solos, en dosificaciones equitóxicas. La sinergia se muestra por el aumento log 4 en las células muertas .

Otras modalidades de la invención serán evidentes para los expertos en la técnica a partir de la consideración de la especificación y la práctica de la invención descrita en la presente. Se pretende que la especificación y los ejemplos sean considerados solo ejemplares, siendo indicado el verdadero alcance y espíritu de la invención por las siguientes reivindicaciones .

Claims (17)

REIVINDICACIONES

1. Una combinación farmacéutica compuesta de al menos dos constituyentes, en donde un constituyente es Taxotere® y el segundo constituyente es una cinasa dependiente de ciclina.

2. La combinación farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la cinasa dependiente de ciclina es flavopiridol .

3. Un método de administración de los constituyentes de la combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, en donde la administración es separada.

4. Un método de administración de los constituyentes de la combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque la administración es separada y en tiempos diferentes .

5. Una combinación farmacéutica que tiene sinergia terapéutica en el tratamiento de enfermedades neoplásicas y que contiene Taxotere® y flavopiridol .

6. La combinación farmacéutica de la reivindicación 5, caracterizada porque los constituyentes de la combinación se administran por separado y en tiempos diferentes.

7. La combinación farmacéutica de la reivindicación 5, caracterizada porque Taxotere® se administra durante el primero y último día de un ciclo de 10 dias, y flavopiridol se administra durante los primeros 4 dias y los últimos 4 dias del ciclo de 10 dias .

8. La combinación farmacéutica ~ " de la reivindicación 5, caracterizada porque Taxotere® se administra durante los dias 14 y 23 y flavopiridol se administra durante los dias 14 al 17 y los dias 20 al 23.

9. La combinación farmacéutica de la eivindicación 5f caracterizada porque la enfermedad eoplásica es cáncer de mama.

10. La combinación farmacéutica de la reivindicación 5, caracterizada porque la enfermedad neoplásica es cáncer de pulmón.

11. Un método de administración de los constituyentes de la combinación de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque los constituyentes se administran por separado, y en donde el flavopiridol se administra por vía oral.

12. Un método de administración de los constituyentes de la combinación de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque los constituyentes se administran por separado, y en tiempos diferentes, y en donde el flavopiridol se administra por vía oral.

13. La combinación farmacéutica 'de la reivindicación 5, caracterizada porque flavopiridol se administra por vía oral.

14. La combinación farmacéutica de la reivindicación 14, caracterizada porque Taxotere® se administra durante los días 14 y 25, y flavopiridol se administra por vía oral durante los días 14 a 18 y los días 21 a 25.

15. La combinación farmacéutica para el tratamiento de enfermedades neoplásicas caracterizada porque un constituyente es Taxol®, Taxotere®, o los derivados de estos, y el segundo constituyente es flavopiridol, en donde los constituyentes se administran por separado y en diferentes tiempos, y en donde el flavopiridol se administra por vía oral.

16. La combinación farmacéutica de la reivindicación 14, caracterizada porque la enfermedad neoplásica es cáncer de mama. 17. La combinación farmacéutica de la reivindicación 14, caracterizada porque la enfermedad neoplásica es cáncer de pulmón. 18. La combinación farmacéutica de la reivindicación 16, caracterizada porque la enfermedad neoplásica es cáncer de mama.

17. La combinación farmacéutica de la reivindicación 16, caracterizada porque 1 enfermedad neoplásica es cáncer de pulmón.