MXPA02003846A

MXPA02003846A - Metodo para producir preparacion de liposomas.

Info

Publication number: MXPA02003846A
Application number: MXPA02003846A
Authority: MX
Inventors: Kasai Akihiro
Original assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co
Priority date: 1999-10-18
Filing date: 2000-10-03
Publication date: 2002-09-30
Also published as: CA2386155A1; WO2001028522A3; BR0015053A; HUP0203159A3; WO2001028522A2; KR20020063873A; AR026076A1; JP2003512314A; RU2002113171A; CN1411368A; AU7452900A; EP1221938A2; US6979461B1; HUP0203159A2

Abstract

Un objetivo de la presente invencion es proporcionar un metodo para producir una preparacion de liposomas que tiene una accion rapida excelente y una redispersion excelente en medio acuoso. La presente invencion proporciona un metodo para producir una preparacion de liposomas mediante secado a vacio en donde la solucion condensada de liposomas, que es obtenida mediante la eliminacion del solvente de la solucion de liposomas, se sujeta a secado a vacio sin congelamiento al tiempo que se burbujea la solucion condensada o despues de que se burbujea la solucion condensada.

Description

MÉTODO PARA PRODUCIR PREPARACIÓN DE LIPOSOMAS CAMPO TÉCNICO Esta invención se refiere a una preparación farmacéutica de liposomas que comprende, como un ingrediente activo, un derivado de ácido pipecólico cuya actividad inmunosupresora excelente ha atraído especial interés últimamente, particularmente un compuesto macrólido, por ejemplo, el compuesto tricíclico conocido como tacrolimus (FK506) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Más particularmente, la presente invención se refiere a una preparación de liposomas que comprende el ingrediente activo anterior establemente atrapado en liposomas y como consecuencia, capaz de mantener la solución estable en diversos medios tales como solución salina fisiológica, solución de glucosa para inyección, agua o jugos y, por lo tanto, que es aplicable a diversos métodos de administración incluyendo inyecciones tales como inyección intravenosa, inyección intramuscular e inyecciones tópicas para la administración intraarticular y similares, administración tópica tales como aplicación a la piel, instilación en el ojo, administración nasal, e inhalación, y además, administración oral y administración rectal, etc. En particular, una preparación de liposomas de la presente invención está caracterizada porque la preparación de liposomas anhidra de la invención tiene excelente claridad y no forma precipitados incluso cuando se redispersa en medio acuoso tal como plasma sanguíneo. También la presente invención se refiere a un método para producir la misma.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Como una preparación de liposomas que contiene tacrolimus, por ejemplo, han sido conocidos aquellos preparados mediante la incorporación de un estabilizador tal como colesterol en fosfolípido como un ingrediente principal para la formación de liposomas (Documento WO93/08802). Con tal constitución, ésta hace posible preparar una preparación líquida a partir de tacrolimus, la cual es ligeramente soluble en agua. Incluso si tal preparación se hace entrar en contacto con un fluido corporal, la cristalización de un ingrediente activo no se produce, de modo que la preparación muestra excelente biodisponibilidad y es estable. Por lo tanto, la preparación puede tomar cualquier forma de dosificación representada por inyección, instilación en el ojo, administración nasal, inhalación, absorbente percutánea, inyección tópica y similares. Además, también es posible mejorar la transmigración intensa de tacrolimus hacia un sitio donde la transmigración de tacrolimus es particularmente deseada, y suprimir su transmigración hacia un sitio donde la transmigración no es necesariamente deseada. Es conocido que excelentes efectos en la práctica, tales como el aumento de la eficacia farmacológica, la reducción de los efectos colaterales y la persistencia de la eficacia del fármaco, son obtenidos como resultado. La preparación de liposomas muestra un excelente efecto para el tratamiento de enfermedades isquémicas cerebrales tales como infarto cerebral. No obstante, ya que una membrana liposomal es muy estable, la preparación liposomal tiende a mostrar acción rápida insuficiente, como un anticoagulante, un agente fibrinolítico y un dilatador cerebrovascular utilizado come un tratamiento médico para el infarto cerebral. Por lo tanto, se ha requerido desarrollar un fármaco que tenga una acción rápida excelente, capaz de cumplir en una situación de emergencia tal como infarto cerebral y también que tenga una excelente propiedad de redispersión.

Un objetivo de la presente invención es mejorar los problemas descritos anteriormente, mediante lo cual se proporcione una preparación de liposomas que tenga acción rápida excelente y redispersión excelente en medio acuoso.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona un método para producir la preparación de liposomas mediante el secado a vacío, caracterizado porque la solución condensada de liposomas, obtenida al eliminar solventes de la solución de liposomas se sujeta a secado a vacío sin congelamiento al tiempo que se burbujea la solución condensada o después de burbujear la solución condensada. Y también, la presente invención proporciona una preparación de liposomas producida mediante el método de esta invención. Un ingrediente activo para el uso en la presente invención no está específicamente limitado a que el ingrediente activo sea aplicable a la preparación de liposomas. Como un ingrediente activo, se utiliza preferentemente un derivado de ácido pipecólico, más preferentemente un compuesto macrólido ejemplificado por un compuesto tricíclico de la siguiente fórmula general (I) o una ...»».&».* - n «..jAtnAat-n*--»». -...«Árfi?r^— sal farmacéuticamente aceptable del mismo, atrapada en liposomas. Con una constitución preferida, principalmente se utiliza la lecitina como un lípido formador de liposomas y es preferible que la preparación no contenga colesterol como un estabilizador. Una preparación de liposomas que contiene, como un ingrediente activo la 17-alil-l, 14-dihidroxi-12- [2- ( -hidroxi-3-metoxiciclohexil) -1-metilvinil] -23,25-dimetoxi-13, 19,21, 27 -tetrametil-11 , 28-dioxa-4-azatriciclo[22.3.1.04'9] octacos-18-en-2, 3, 10, 16-tetraona de la siguiente fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma; y como un lípido formador de liposomas, es particularmente preferida la lecitina. En la presente invención, se pone especial atención al hecho de que el derivado de ácido pipecólico, particularmente compuesto macrólido utilizado en la preparación de liposomas tiene acción de protección a los nervios, y se espera que el compuesto de macrólido muestre eficiencia farmacológica para proteger además de la necrosis a los nervios y células sobre la periferia de las células cerebrales, cuya necrosis fue provocada por la trombosis cerebral. No obstante, el uso de un fármaco no está limitado en la presente como una materia de curso.

El derivado de ácido pipecólico en la presente invención significa aquél, que tiene una actividad común capaz de tener una afinidad para la inmunofiJina tipo FKBP y que inhibe la actividad de la enzima peptidil-proril-isomerasa y/o rotamasa, y el cual tiene una estructura química común capaz de ser un derivado del ácido pipecólico. Un ejemplo específico del derivado de ácido pipecólico incluye un compuesto macrólido tal como un compuesto tricíclico de la siguiente fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: en donde cada uno de los pares adyacentes de R1 y R2, R3 y R4, y R5 y R6 independientemente: (a) es dos átomos de hidrógeno adyacentes; o (b) puede formar otro enlace formado entre los átomos de carbono a los cuales están unidos; y R2 puede también ser un grupo alquilo; R7 es un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo hidroxilo protegido, un grupo alcoxi, o un grupo oxo junto con R1; R8 y R9 son independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo; R10 es un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo alquilo sustituido con uno o más grupos hidroxilo, un grupo alquenilo, un grupo alquenilo sustituido con uno o más grupos hidroxilo, o un grupo alquilo sustituido con un grupo oxo; X es un grupo oxo, un estado donde un átomo de hidrógeno y un grupo hidroxilo se unen a un átomo de carbono, un estado donde dos átomos de hidrógeno están acoplados a un átomo de carbono, o un grupo representado por la fórmula -CH20-; Y es un grupo oxo, un estado donde un átomo de hidrógeno y un grupo hidroxilo están unidos a un átomo de carbono, un estado donde dos átomos de hidrógeno están unidos a un átomo de carbono, o un grupo representado por la fórmula =N-NR?:?R12 o N-OR13; R11 y R12 son independientemente un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo arilo, o un grupo tosilo; son independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo; R24 es un anillo opcionalmente sustituido que puede contener uno o más heteroátomos; y n representa un número entero de 1 ó 2. Además de las definiciones anteriores, Y, R10 y R23 conjuntamente con los átomos de carbono a los cuales están unidos, pueden ser un anillo heterocíclico saturado o insaturado de 5 o de 6 miembros que contiene átomos de nitrógeno, azufre y/o oxígeno, y el anillo heterocíclico puede estar sustituido con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste de un alquilo, un hidroxilo, un alquiloxi, un bencilo, un grupo de la fórmula -CH2Se (C6H5) , y un alquilo sustituido con uno o más grupos hidroxilo. Las definiciones usadas en la fórmula general anterior (I), y los ejemplos específicos y ejemplos preferidos de la misma son explicados y descritos con detalle. El término "inferior" significa, a no ser que se indique de otro modo, un grupo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos preferibles del "grupo alquilo" y una porción alquilo del "grupo alcoxi" incluyen un residuo de hidrocarburo alifático de cadena lineal o ramificada, por ejemplo, un grupo alquilo inferior tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, pentilo, neopentilo y hexilo. Los ejemplos preferibles del "grupo alquenilo" incluyen un residuo de hidrocarburo alifático de cadena lineal o ramificada que tiene un doble enlace, por ejemplo, un grupo alquenilo inferior tal como vinilo, propenilo (por ejemplo, alilo), butenilo, metilpropenilo, pentenilo y hexenilo. Los ejemplos preferibles del "grupo arilo" incluyen fenilo, tolilo, xililo, cumenilo, mesitilo y naftilo. Los grupos protectores preferibles en los "grupos hidroxilo protegidos" y en un "amino protegido" que se describen posteriormente incluyen el grupo 1-(alquiltio inferior) (alquilo inferior) tal como un grupo alquiltiometilo inferior (por ejemplo metiltiometilo, etiltiometilo, propiltiometilo, isopropiltiometilo, butiltiometilo, isobutiltiometilo, hexiltiometilo, etc.), más preferentemente, el grupo alquiltiometilo de 1 a 4 átomos de carbono, aún más preferentemente el grupo metiltiometilo; El grupo sililo trisustituido tal como un if? . i^ áiM..í,r^..M íí.-r¡ra¡t¡.., tri (alquilsililo inferior) (por ejemplo, trimetilsililo, trietilsililo, tributilsililo, ter- butildimetilsililo, tri-ter-butilsililo, etc.) o un alquil-diarilsililo inferior (por ejemplo, metildifenilsililo, etildifenilsililo, propildifenilsililo, ter-butildifenilsililo, etc.), más preferentemente el grupo tri (alquilsililo de 1 a 4 átomos de carbono) y el grupo alquildifenilsililo de 1 a 4 átomos de carbono, más preferentemente el grupo ter-butildimetilsililo y el grupo ter- butildifenilsililo; y Un grupo acilo tal como grupo alifático, acilo aromático o grupo acílo alifático sustituido con un grupo aromático, los cuales son derivados del ácido carboxílico, ácido sulfónico o ácido carbámico. Los ejemplos del grupo acilo alifático incluyen un grupo alcanoilo inferior opcionalmente que tiene uno o más sustituyentes adecuados tal como carboxilo, por ejemplo, formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutiplo, valerilo, isovalerilo, pivaloilo, hexanoilo, carboxiacetilo, carboxipropionilo, carboxibutirilo, carboxihexanoilo, etc . ; Un grupo ciclo (alcoxi inferior) (alcanoilo inferior) opcionalmente que tiene uno o más sustituyentes adecuados tal como alquilo inferior, por ejemplo, ciclopropiloxiacetilo, ciclobutiloxipropionilo, cicloheptiloxibutirilo, mentiloxiacetilo, mentiloxipropionilo, mentiloxibutirilo, mentiloxipentanoilo, mentiloxihexanoilo, etc.; un grupo canforsulfonilo; o Un grupo alquilcarbamoilo inferior que tiene uno o más sustituyentes adecuados tal como carboxilo o carboxilo protegido, por ejemplo, grupo carboxi (alquilcarbamoilo inferior) (por ejemplo, carboximetilcarbamoilo, carboxietilcarbamoilo, carboxipropilcarbamoilo, carboxibutilcarbamoilo, carboxipentilcarbamoilo, carboxihexilcarbamoilo, etc.), el grupo tri- (alquilsilil inferior) (alcoxicarbonil inferior) (alquilcarbamoil inferior) (por ejemplo, trimetilsililmetoxicarboniletilcarbamoilo, trimetilsililetoxicarbonilpropilcarbamoilo, trietilsililetoxicarbo ilpropilcarbamoilo, ter-butildimetilsililetoxicarbonilpropilcarbamoilo, tri-metilsililpropoxicarbonilbutilcarbamoilo, etc.) y similares . Los ejemplos del grupo acilo aromático incluyen un grupo aroilo opcionalmente que tiene uno o más sustituyentes adecuados tales como nitro, por ejemplo, benzoilo, toluoilo, xiloilo, naftoilo, •Ad8i*?t'' nitrobenzoilo, dinitrobenzoilo, nitronaftoilo, etc.; y Un grupo arensulfonilo que tiene opcionalmente uno o más sustituyentes adecuados tales como halógeno, por ejemplo, bencensulfonilo, toluensulfonilo, xilensulfonilo, naftalensulfonilo, fluorobencensulfonilo, clorobencensulfonilo, bromobencensulfonilo, yodobencensulfonilo, etc. Los ejemplos de los grupos acilo alifáticos sustituidos con un grupo aromático incluyen el grupo ar (alcanoilo inferior) que tiene opcionalmente uno o más sustituyentes adecuados tales como alcoxi inferior o trihalo (alquilo inferior), por ejemplo, fenilacetilo, fenilpropionilo, fenilbutirilo, 2-trifluorometil-2-metoxi-2-fenilacetilo, 2-etil-2-trifluorometil-2-fenilacetilo, 2-trifluorometil-2-propoxi-2-fenilacetilo, etc. Los grupos acilo más preferibles entre los grupos acilo anteriormente mencionados son el grupo alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono que tiene opcionalmente un grupo carboxilo, ciclo (alcoxi de 5 a 6 átomos de carbono) (alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono) que tiene dos alquilos de 1 a 4 átomos de carbono en la porción cicloalquilo, el grupo canforsulfonilo, el grupo carboxi- (alquilcarbamoilo de 1 a 4 átomos de carbono), el grupo tri (alquisilil de 1 a 4 átomos de carbono) (alcoxicarbonil de 1 a 4 átomos de carbono) (alquilcarbamoilo de 1 a 4 átomos de carbono) , el grupo benzoilo que tiene opcionalmente uno o dos grupos nitro, el grupo bencensulfonilo que tiene halógeno, o el grupo fenil (alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono) que tiene el grupo alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono y trihalo (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) . Entre éstos, los más preferibles son acetilo, carboxipropionilo, mentiloxiacetilo, canforsulfonilo, benzoilo, nitrobenzoilo, dinitrobenzoilo, yodobencensulfonilo y 2-trifluorometil-2-metoxi-2- fenilacetilo. Los ejemplos preferibles de "anillo heterocíclico saturado o insaturado de 5 o de 6 miembros que contiene átomos de nitrógeno, azufre y/o oxígeno" incluyen un grupo pirrolilo y un grupo tetrahidrofurilo. R24 es un anillo opcionalmente sustituido que puede contener uno o más heteroátomos, y preferentemente R24 puede ser un grupo ciclo (alquilo de 5 a 7 átomos de carbono) , el cual puede ser sustituido con sustituyentes adecuados y los siguientes pueden ser ejemplificados : (a) un grupo 3 , 4-d?-oxo-ciclohexilo, (b ) un grupo 3-R20 - 4 -R21-ciclohexilo , en el cual R20 es hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo oxo, o un grupo -OCH2OCH2CH2OCH3, y R21 es hidroxilo, -OCN, un grupo alcoxi, un heteroariloxi que puede estar sustituido por sustituyentes adecuados, 1-tetrazolilo, 2-tetrazolilo, un grupo -OCH2OCH2CH2OCH3, un grupo hidroxilo protegido, cloro, bromo, yodo, aminooxaliloxi, un grupo azido, p- toliloxitiocarboniloxi, o R25R26CHCOO- (en el cual R25 está opcionalmente protegido con hidroxilo o protegido con amino, y R26 es hidrógeno o metilo, o R20 y R21 se combinan uno con otro para formar un átomo de oxígeno en un anillo de epóxido; o (c) un grupo ciclopentilo, sustituido por metoximetilo, hidroximetilo opcionalmente protegido, aciloximetilo (en el cual la porción acilo opcionalmente contiene ya sea un grupo dímetilamino, que puede ser cuaternizado, o grupo carboxilo que puede ser esterificado, uno o más grupos amino y/o hidroxilo que pueden ser protegidos, o aminooxaliloximetilo . Un ejemplo preferido es un grupo 2-formil- ciclopentilo . Una porción "heteroarilo que puede ser sustituido por sustituyentes adecuados" del "heteroariloxi que puede ser sustituido por sustituyentes adecuados" puede ser las ejemplificadas por R1 del compuesto de la fórmula I de la patente europea EP-A-532, 088 , con la preferencia dada al 1-hidroxietilindol-5-ílo, la descripción de la cual se incorpora por referencia en la presente. El compuesto tricíclico (I) y su sal farmacéuticamente aceptable para el uso en la presente invención son bien conocidos por tener actividad inmunosupresora excelente, actividad antimicrobiana y otras actividades farmacológicas y, como tales, son de valor para el tratamiento o la prevención de reacciones de rechazo al trasplante de órganos o tejidos, reacción injerto versus huésped, enfermedades autoinmunes, y enfermedades infecciosas con un método de producción de éstos [patentes europeas EP-A-0184162, EP-A-0323042 , EP-A-423714, EP-A-427680, EP-A-465426, EP-A-480623, EP-A-532088, EP-A-532089, EP-A-569337, EP-A-626385, documentos O89/05303, WO93/05058, 096/31514, 091/13889, 091/19495, WO93/04680, WO93/5059, etc.], las descripciones de las cuales se incorporan por referencia en la presente. Particularmente, los compuestos que están designados como tacrolimus, FR900520 (ascomicina) , FR900523, y FR900525 son productos producidos por microorganismos del género Streptomyces, tal como Streptomyces tsukuba ensi s No. 9993 [depositado con el ] 6 Instituto Nacional d<=> Bioc enc a y Agencia de Tecnología Humana de Ciencia Industrial y Tecnología (antiguamente Agencia del Instituto de Investigac ón dc Fermentación de Ciencia Industrial y Tecnología), en 1- 3, Higashi 1-chome, Tsukuba-shi , Ibaraki, Japón, fecha de depósito Octubre 5 de 19P4, número de acceso FERM BP-927] o Streptomyces hygrcs cop cu eubespecie yakushimaensis No. 7238 [depositada con el Instituto Nacional de Biociencia y Agencia de Tecnología Humana de Ciencia Industrial y Tecnología (antiguamente Agencia del Instituto de Investigación de Fermentación de Ciencia Industrial y Tecnología), en 1-3, Higashi 1- chome, Tsukuba-shi, Ibaraki, Japón, fecha de depósito Enero 12 de 1985, número ' de acceso FERM BP-928] [patente europea EP-A-0184162] . El tacrolimus de la siguiente fórmula química, en particular, es un compuesto representativo.

Nombre químico: 17-alil-l , 14-dihidroxi-12- [2- ( 4-hidroxi-3-metoxiciclohexil) -1-metilvinil] -23, 25-dimetoxi-13, 19,21, 27-tetrameti1-11, 28-dioxa-4-azatriciclo[22.3.1.04'9]octacos-18-en-2,3, 10,16-tetraona. Los ejemplos preferidos de los compuestos tricíclicos (I) son aquellos en donde cada uno de los pares adyacentes de R3 y R4, y/o R5 y R6 independientemente forman otro enlace formado entre los átomos de carbono a los cuales están unidos; Cada uno de R8 y R23 es independientemente un átomo de hidrógeno; R9 es un grupo hidroxilo; R10 es un grupo metilo, un grupo etilo, un grupo propilo o un grupo alilo; X es un grupo oxo, un estado donde un átomo de hidrógeno y un grupo hidroxilo se unen a un átomo de carbono, un estado donde dos átomos de hidrógeno están acoplados a un átomo de carbono, o un grupo oxo; Y es un grupo oxo; Cada uno de R14, R15, R16, R17, R18, R19 y R22 es un grupo metilo; R24 es un grupo 3-R20-4-R21-ciclohexilo, en el cual R20 es un hidroxilo, un grupo alcoxi, un grupo oxo, o un grupo -OCH2OCH2CH2OCH3, y R21 es hidroxilo, -OCN, un grupo alcoxi, un heteroariloxi que puede estar sustituido por sustituyentes adecuados, 1-tetrazolilo, 2-tetrazolilo, un grupo -OCH2OCH2CH2OCH3, un grupo hidroxilo protegido, cloro, bromo, yodo, aminooxaliloxi, un grupo azido, p- toliloxitiocarboniloxi, o R25R26CHCOO-, en el cual R25 es hidroxilo opcionalmente protegido o amino protegido, y R26 es hidrógeno o metilo, o R20 y R21 conjuntamente forman un átomo de oxígeno en un anillo epóxido; y n es un número entero de 1 ó 2. Los compuestos tricíclicos más preferibles (I) son, además del tacrolimus, derivados de ascomicina tales como ascomicina halogenada (ASM 981) (por ejemplo, 33-epi-cloro-33-desoxiascomicina) , la cual es descrita en la patente europea EP-A-427, 680, ejemplo 66a, 32-0- (1-hidroxietilindol-5-il ) ascomicina (L- 732,531), la cual es descrita en la patente europea EP- A-532,088, 32- (lH-tetrazolil-1-il) ascomicina (ABT281), la cual es descrita en el documento O93/04680, etc. Como otros ejemplos preferibles del compuesto macrólido, pueden ser ejemplificados la rapamicina [THE MERCK INDEX (doceava edición), No. 8288] y sus derivados. Un ejemplo preferido de los derivados es un derivado O-sustituido en el cual el grupo hidroxilo en la posición 40 de la fórmula A ilustrada en la página 1 del documento WO 95/16691 está remplazado por -ORi en el cual Ri es hidroxialquilo, hidroalcoxialquilo, acilaminoalquilo o aminoalquilo, por ejemplo, 40-O-(2- hidroxi) etil-rapamicina, 40-O- (3-hidroxi) propil- rapamicina, 40-O- [2- (2-hidroxi) etoxi] etil-rapamicina y 40-0- (2-acetaminoetil) -rapamicina. Estos derivados O-sustituidos pueden ser producidos mediante la reacción de la rapamicina (o dihidro o desoxo-rapamicina) con un radical orgánico acoplado al grupo saliente (por ejemplo, RX donde R es un radical orgánico el cual se desea como el 0- sustituyente, tal como un alquilo, alilo, o porción bencilo, y X es el grupo saliente tal como CC13C(NH)0 o CF3S03) bajo condiciones de reacción apropiadas. Las condiciones pueden ser condiciones acidas o neutras, por ejemplo en presencia de un ácido similar al ácido trifluorometansulfónico, ácido canforsulfónico o ácido p-toluensulfónico o sus sales respectivas de piridinio o piridinio sustituido cuando X es CC13C(NH)0, o en presencia de una base como piridina, piridina sustituida, diisopropiletilamina o pentametilpiperidina cuando X es CF3S03. El derivado de rapamicina más preferible es 40-O- (2-hidroxi) etil-rapamicina, la cual es descrita en el documento WO94/09010, la descripción de la cual se incorpora por referencia en la presente. El compuesto tricíclico (I), y rapamicina y sus derivados tienen una estructura básica similar, por ejemplo la estructura del macrólido tricíclico, y al menos una de las propiedades biológicas similares (por ejemplo, actividad inmunosupresora). La sal farmacéuticamente aceptable del compuesto tricíclico (I) y rapamicina y sus derivados, puede ser una sal farmacéuticamente aceptable no tóxica, convencional, tal como sal con bases orgánicas o inorgánicas, específicamente una sal de metal alcalino tal como sal de sodio y sal de potasio, sal de metal alcalinotérreo tal como sal de calcio y sal de magnesio, sal de amonio, y sal de amina tal como sal de trietilamina y sal de N-bencil-N-metilamma . Con respecto a los derivados de ácido pipecólico y a los compuestos macrólidos utilizados en la presente invención, se debe entender que pueden ser confórmeros, y uno o más pares de estereoisómeros tales como isómeros ópticos debidos a los átomos de carbono asimétricos y a los isómeros geométricos debidos a los dobles enlaces, y tales confórmeros e isómeros son también incluidos dentro del alcance de la presente invención. Además, los derivados de ácido pipecólico y -^?-lhati-t?ti---°¿-al--^--s-t-^faa A •los compuestos macró ido= pueden estc-ir en la forma de un solvato, que está también incluido dentro deJ alcance de la presente invención. El solvato preferentemente incluye, por ejemplo, un hidrato y un etanclato. Además, los ejemplos Je los derivados de ácido pipecólico, que pueden ser utilizados para <A objeto de la presente invención, incluyen los siguientes: (1) los siguientes compuestos Way-124466 sintetizados por la reacción entre el 4-fenil-1, 2, 4- triazolin-3, 5-diona y rapamicina (Ocain et al., Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol. 192, No. 3, 1993); ..y,^..,. ^^^ ty+MJ^^^^ ^-^ti^^^j^l fo (2) compuestos derivados de acido pipecólico referidos como RAP-Pa (Charkraborty et al., Chemistry and Biology, 2 Marzo 1995: 157-161); (3) los siguientes compuestos derivados de ácido pipecólico (Ikeda et al., J. Am. Chem. Soc. 1S94, 116, 4143, 4144); (4) Wang et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 9, pp . 1161-1166, 1994, particularmente los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 2a-2d; (5) el siguiente derivado de ácido pipecólico (Birkenshaw et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 21, pp. 2501-2506, 1994); ¡?ldL A?.* Ajfitfcfej -A- (6) Holt et al., J. Am. Chem. Soc. 1993, 115, 9925-9938, particularmente los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 4-14; (7) los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos en Caffer et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 21, pp . 2507- 2510, 1994; (8) los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos en Teague et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 3, No. 10, pp. 1947- 1950, 1993; (9) Yamashita et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 2, pp. 325-328, 1994, particularmente los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 11, 12 y 19; (10) Holt et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 2, pp . 315-320, 1994, en particular los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 3-21 y 23-24; (11) Holt et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 3, No. 10, pp. 1977-1980, 1993, particularmente los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 3-15; (12) Hauske et al., J. Med. Chem. 1992, 35, 4284-4296, particularmente los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 6, 9-10, 21-24, 26, 28, 31-32 y 52-55; (13) los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos en Teague et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 13, pp . 1581- 1584, 1994; y (14) Stocks et al., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, No. 12, 1457-1460, 1994, particularmente los compuestos derivados de ácido pipecólico descritos como los compuestos 2, 15-17. La preparación de liposomas de la presente invención puede ser producida mediante secado a vacío de una solución condensada de liposomas, la cual es obtenida al eliminar el solvente de la solución de liposomas, mientras que se burbujea la solución condensada, o después de que se burbujea la solución condensada. La solución condensada de liposomas puede ser burbujeada al cambiar la condición de la solución condensada de la condición de estabilidad a inestabilidad al vacío. Como un ejemplo, el burbujeo puede ser generado por cambio térmico, y más específicamente por la elevación de la temperatura de la solución condensada después de disminuir la temperatura de la solución condensada a condición de vacío. Tal cambio térmico de la solución condensada no está específicamente limitado a la elevación de la temperatura de la solución condensada a 20°C o más después de disminuir la temperatura de la solución condensada t -10°C o menor que es lo recomendado, y elevar la temperatura de la solución al intervalo de 20°C a 70°C después de disminuir la temperatura de la solución a -10°C o menor que es lo preferible. Más preferentemente, elevar la temperatura de la solución al intervalo de 25°C a 60°C después de disminuir la temperatura de la solución al intervalo de -20°C a -50°C que es lo recomendado, y lo más preferentemente, elevar la temperatura de la solución de 30°C a 50°C después de disminuir la temperatura de la solución a -30°C hasta -40°C. Como otro ejemplo, el burbujeo puede ser generado mediante el sometimiento de la solución condensada a condición de vacío mientras que fluye la solución condensada o después de que fluye la solución condensada. Por ejemplo, la solución condensada puede hacerse fluir al inclinar un recipiente lleno con la solución condensada. Cuando se genera el burbujeo mediante el cambio térmico o mediante el flujo, el burbujeo es preferentemente generado mientras se mantiene la solución condensada en su fase líquida. El método de secado a vacío de la invención es preferentemente conducido mediante la aplicación de condiciones de operación convencionales, al tiempo que se mantiene la solución condensada en su fase líquida. El "vacío" en la presente significa al menos condición de vacío medio y no necesariamente significa condición de vacío completo. De acuerdo a la presente invención, el método de liofilización, el cual puede dar como resultado disminución de la claridad cuando la preparación de liposomas liofilizada es redispersada en medio acuoso tal como plasma sanguíneo, debe ser evitado y el método de secado a vacío sin congelamiento de la solución condensada, es el recomendado. Como una condición esencial, la preparación de liposomas de la presente invención es obtenida mediante el proceso de producción anteriormente mencionado, y otras condiciones tales como la estructura, la composición, los ingredientes constituyentes, el proceso de preparación, el tamaño de los liposomas, y los tipos de compuestos que pueden ser utilizados en combinación con liposomas no están específicamente limitados, a no ser que estas condiciones afecten de manera adversa una acción rápida del fármaco y a no ser que estas condiciones aseguren el atrapamiento estable de los derivados de ácido pipecólico en liposomas. De este modo, la estructura del liposoma puede ser una vesícula unilaminar grande (LUV) , una vesícula multilaminar (MLV) o una vesícula unilaminar pequeña (SUV) . Por lo tanto, el tamaño puede estar en el intervalo de 200 a 1000 nm para LUV, de 400 a 3500 nm para MLV, y de 20 a 50 nm para SUV en diámetro de partícula. SUV que muestra poca acumulación en el sistema reticroendotelial (RES), es la preferida. Como el liposoma constituyente de la estructura liposomal, se utilizan fosfolípidos y nitrolípidos . En general, los fosfolípidos son los preferidos. Ejemplos de los mismos incluyen fosfolípidos naturales tales como lecitina de yema de huevo (fosfatidil-colina) , lecitina de soya, lisolecitina, esfingomielina, ácido fosfatídico, fosfatidil-serina, fosfatidil-glicerol, fosfatidil-inositol, fosfatidil-etanolamina, fosfatidil-glicerol, difosfatidil-glicerol, cardiolipin, plasmalógeno, y así sucesivamente o productos de hidrogenación obtenibles a partir de los fosfolípidos mediante tecnología convencional; y fosfolípidos sintéticos tales como dicetil-fosfato, diestearoilfosfatidil-colina, dipalmitoilfosfatidil-colina, dipalmitoilfosfatidiletanolamina, dipalmitoilfosfatidil-serina, eleostearoilfosfatidil-colina, eleostearoilfosfatidil-etanolamina, eleostearoilfosfatidil-serina, y así sucesivamente, las más preferidas son las lecitinas, y la más preferida es la lecitina de yema de huevo. Los lípidos que incluyen estos fosfolípidos pueden ser utilizados solos, o dos o más tipos de ellos pueden ser utilizados en combinación. En este caso, los lípidos en los cuales el grupo electronegativo en el grupo fosfatidilo y el grupo electropositivo en el grupo atómico (etanolamina, colina y así sucesivamente) que se enlazan a éstos son eléctricamente balanceados de modo que la molécula total es eléctricamente neutra. Por ejemplo, las lecitinas, esfingomielina, fosfatidil- J¿JJI_-JÍ_J, !^^^^Hgi¡^g^ etanolamina, diestearoilfosfatidil-colina y así sucesivamente son frecuentemente utilizadas solas. En contraste, los lípidos que son electronegativos como un todo, en los cuales el grupo atópico (tal como serina, glicerol, inositol o similares) combinados al grupo fosfatidilo (grupo electronegativo) es eléctricamente neutro, por ejemplo, fosfatidilserina, fosfatidilglicerol, fosfatidilinositol, y así sucesivamente o los lípidos tales como el ácido fosfatídico o el fosfato de dicetilo que son electronegativos, pueden ser utilizados independientemente como el lípido en esta invención, pero es más recomendado que éstos sean utilizados en combinación con el lípido neutro tal como aquellos mencionados anteriormente. Entre éstos, el ácido fosfatídico y el dicetilfosfato no actúan como el fosfolípido principal en la formación de liposomas pero son conocidos como aditivos para la formación de liposomas. Considerando la estabilidad y el manejo de la preparación liposomal en la presente invención, los aditivos tales como excipientes y/o estabilizadores pueden preferentemente ser utilizados. Los estabilizadores utilizados preferentemente en la presente invención incluyen, por ejemplo, lactosa, maltosa, estearilamina, a-tocoferol, gangliósido, sulfatidas de glucolípido ácido, y un tipo de glucolípidos ácidos y glucolípidos que tienen un grupo ácido sulfúrico. Cuando la preparación de liposomas es preparada al incorporar un estabilizador tal como colesteroles, puede ser fuertemente obtenida una acción rápida al mismo nivel que el se requiere en la presente invención y los colesteroles en general son similares para ejercer influencia no deseada sobre el daño cerebral. Por lo tanto, en vez de los colesteroles, son preferibles para utilizar la lactosa y la maltosa como un estabilizador en la presente invención. Los agentes activos de superficie tales como el agente activo de superficie de aceite de ricino endurecido de polioxietileno (HCO-60), pueden ser utilizados como un inhibidor de recristalización del compuesto macrólido, pero los agentes activos de superficie pueden ejercer influencia no deseada sobre las áreas afectadas como el cerebro. Por lo tanto, el inhibidor de recristalización preferentemente no es utilizado en la presente invención.

MEJOR MODO DE LLEVAR A CABO LA INVENCIÓN Ejemplos Los ejemplos de la presente invención serán ilustrados, pero la presente invención no está limitada a los siguientes ejemplos, y las modificaciones que pueden ser realizadas sin apartarse de los objetivos descritos anteriormente en la presente y posteriormente en la presente, también son incluidas en el alcance técnico de la presente invención.

Ejemplo 1 Se disolvieron 5 g de tacrolimus y 0.3 g de a- tocoferol en la cantidad adecuada de etanol para obtener 100 ml de una solución mixta. Después se disolvieron 100 g de lecitina de yema de huevo en la solución mixta, el etanol en la solución se eliminó a 40°C bajo 1330 Pa . La solución obtenida de este modo se dispersó perfectamente en 10 litros de solución acuosa de maltosa al 10% (aproximadamente 10.3 kg) mediante agitación para obtener la solución burdamente dispersa. Después de que la solución se dispersó, se emulsificó mediante un aparato de emulsificación de alta presión (DeBee 2000 fabricado por DeBee Co., Israel) bajo 241325 kPa de presión de emulsificación y 13790 kPa de retropresión, la dispersión se filtró para hacerse estéril a través de un filtro de 0.22 µm. Aproximadamente 10.4 g del filtrado se cargaron en un frasco (el frasco se lavó y se limpió antes de cargar el filtrado) . El tapón de caucho a vacío se presionó dentro del frasco (hasta la mitad del tapón) y se puso el frasco en la máquina de liofilización. La máquina se operó a 25°C bajo 3990 Pa para desairear el gas disuelto en el filtrado. El filtrado desaireado se condensó a 40°C bajo 1330 Pa para obtener la solución condensada. La solución condensada de enfrió a -40°C y la solución se burbujeó al elevar la temperatura de la solución a 40°C bajo condición de alto vacío (1.33 Pa) . La solución burbujeada se secó a vacío a 30°C bajo 13.3 Pa y luego el frasco se selló herméticamente después de que la solución se presurizó a presión atmosférica con gas nitrógeno. Las propiedades de la preparación de liposomas obtenida de este modo se mostrarán en la Tabla 1. ????.i. k?^t latetidhjttf» "• -• -*--*jf >—»- «-«»» • Ejemplo comparativo 1 (método de liofilización) Se disolvieron 5 g de tacrolimus y 0.3 g de a- tocoferol en cantidad adecuada de etanol para obtener 100 ml de una solución mixta. Después se disolvieron 100 g de lecitina de yema de huevo en la solución mixta, el etanol en la solución se eliminó a 40°C bajo 1330 Pa. La solución obtenida de este modo se dispersó burdamente en 10 litros de solución acuosa de maltosa al 10% (aproximadamente 10.3 kg) mediante agitador para obtener la solución dispersada burdamente. Después de que la solución se dispersó, se emulsificó mediante el aparato de emulsificación de alta presión (DeBee 2000) bajo 241325 kPa de presión de emulsificación y 13790 kPa de retropresión, la dispersión se esterilizó mediante filtración a través de un filtro de 0.22 µm. Aproximadamente 10.4 g del filtrado se cargaron en un frasco (el frasco se lavó y se limpió antes de cargar el filtrado) y se liofilizó. Las propiedades de la preparación de liposomas obtenida de este modo, se mostrarán en la Tabla 1.

Tabla 1 *1 Contenido: cantidad de tacrolimus (mg/frasco) contenido en la preparación de liposomas seca se midió mediante HPLC. *2 Cantidad de Agua: cantidad de agua contenida en la preparación de liposomas seca se midió mediante el método de Karl Fischer. *3 Tiempo necesario para la redispersión: aproximadamente 9 ml de agua para la inyección y la f.M^ I?f». ^tiat??B* >?J i¡Í* * .^¡?^?* i preparación seca de liposomas se agregó a un recipiente y luego el recipiente de agitó manualmente a una amplitud de 40 cm (2 movimientos alternados/segundos) a temperatura ambiente y la solubilidad de la preparación de liposomas con el agua se midió cada 15 segundos. *4 pH: el pH de la solución redispersada (obtenida mediante la disolución de la preparación de liposomas con agua, ver *3) fue medido por electrodo de pH. *5 Permeabilidad: la permeabilidad de la solución redispersada se midió por espectrofotómetro (tamaño de célula de 1 cm x 1 cm) . *6 Diámetro promedio de partícula: el diámetro promedio de partícula del liposoma en la solución redispersada se midió por el método de dispersión de luz dinámico. *7 Precipitado: la solución redispersada se mezcló con plasma sanguíneo o solución fisiológica de cloruro de sodio a una proporción de 2 a 1 y la solución mixta obtenida de este modo se centrifugó y el precipitado en la solución se estimó visualmente. *8 Presión de filtración: la solución redispersada se filtró a través de manguito tipo inyección equipado con filtro de 0.22 µm y la presión de filtración se midió con autorradiografía.

La preparación de liposomas producida por el método de la presente invención contenía ligera cantidad de agua, pero la preparación de liposomas de la presente invención mostró excelente permeabilidad después de la redispersión sobre la preparación de liposomas del ejemplo comparativo 1 y también la claridad de la preparación de liposomas de la presente invención es mejor que la del ejemplo comparativo 1. La preparación de liposomas del ejemplo 1 no formó precipitados cuando se mezcló con plasma sanguíneo y mantuvo las propiedades favorables después de la redispersión.

Ejemplo 2 Se disolvieron 5 g de tacrolimus en cantidad adecuada de etanol para obtener 100 ml de una solución mixta. Después se disolvieron 100 g de lecitina de yema de huevo en la solución mixta, el etanol en la solución se eliminó a 40°C bajo 1330 Pa. La solución obtenida de este modo se dispersó burdamente en 10 litros de solución acuosa de maltosa al 10% (aproximadamente 10.3 kg) mediante agitador para obtener la solución burdamente dispersada. Posteriormente la solución dispersada se .A¿M*fa.feÍÉMilf í • lilil í »' ,?,Í ...i. ¿- I emulsificó mediante un aparato de emulsificación a alta presión (DeBee 2000) bajo 241325 kPa de presión de emulsificación y 13790 kPa de retropresión, la dispersión se filtró para esterilizarla a través de un filtro de 0.22 µm. Aproximadamente 10.4 g del filtrado se cargaron en un frasco (el frasco se lavó y se limpió antes de la carga del filtrado) . El tapón de caucho a vacío se presionó dentro del frasco (hasta la mitad del tapón) y se puso el frasco en la máquina de liofilización. La máquina se operó a 25°C bajo 3990 Pa para desairear el gas disuelto en el filtrado. El filtrado desaireado se condensó a 40°C bajo 1330 Pa para obtener solución condensada. La solución condensada se enfrió a -40°C y la solución se burbujeó al elevar la temperatura de la solución a 40°C bajo condiciones de alto vacío (1.33 Pa). La solución burbujeada se secó a vacío a 30°C bajo 13.3 Pa y luego el frasco se selló herméticamente después de que la solución se presurizó a presión atmosférica con gas nitrógeno. La preparación de liposomas obtenida de este modo mostró las mismas propiedades que la preparación de liposomas del ejemplo 1.

Ejemplo 3 De la misma manera que el ejemplo 2, se obtuvo la preparación de liposomas a partir de las siguientes prescripciones . Tacrolimus 3 mg Lecitina de yema de huevo purificada 100 mg Monohidrato de lactosa 1000 mg Para obtener 1103 mg La preparación de liposomas obtenida de este modo, del ejemplo 3 mostró las mismas propiedades que la preparación de liposomas del ejemplo 1.

Ejemplo 4 De la misma manera como en el ejemplo 1, la preparación de liposomas se obtuvo a partir de las siguientes prescripciones. Tacrolimus 3 mg Lecitina de yema de huevo purificada 100 mg a-tocoferol 0.3 mg Maltosa 1000 mg Para obtener 1103.3 mg La preparación de liposomas obtenida de este modo, del ejemplo 4 mostró las mismas propiedades que la preparación de liposomas del ejemplo 1. El método de producción de la presente invención puede lograr que la preparación de liposomas tenga excelente redispersión en medio acuoso (por ejemplo: excelente en claridad después de la redispersión, intervalo corto de distribución en el diámetro de partícula promedio y no forma precipitado cuando se mezcla con plasma sanguíneo) . De acuerdo a la presente invención, ya que el liposoma puede ser fácilmente desintegrado en comparación con una preparación de liposomas convencional que contiene colesterol, ésta hace posible esperar una acción más rápida excelente mediante la administración de bolo. Además, la preparación de la presente invención no contiene un surfactante, de modo que se hace posible obtener un excelente efecto sin ejercer ninguna influencia sobre los órganos circulatorios.

APLICABILIDAD INDUSTRIAL Por lo tanto, la preparación de liposomas de la presente invención es particularmente útil para el tratamiento y prevención de enfermedades en donde una acción rápida de la eficacia del fármaco es esperada, por ejemplo, enfermedades isquémicas cerebrales (por ejemplo, daño a la cabeza, hemorragia en el cerebro (por ejemplo, hemorragia subaracnoidea, hemorragia intracerebral) , infarto cerebral, trombosis cerebral, embolismo cerebral, paro cardiaco, apoplejía, ataque isquémico transitorio (TÍA) , encefalopatía hipertensiva) . Con base en el efecto farmacológico de un derivado de ácido pipecólico como un ingrediente activo, particularmente un compuesto macrólido, por ejemplo, el compuesto (I) tricíclico, la preparación de liposomas de la presente invención es útil para el tratamiento y prevención de las siguientes enfermedades y condiciones: reacciones de rechazo por trasplante de órganos o tejidos tales como el corazón, riñon, hígado, médula ósea, piel, córnea, pulmón, páncreas, intestino delgado, extremidades, músculos, nervios, discos intervertebrales, tráquea, mioblastos, cartílagos, etc . ; reacciones injerto versus huésped después del trasplante de médula ósea; enfermedades autoinmunes tales como artritis reumatoide, lupus sistémico eritematoso, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia gravis, diabetes tipo I, etc.; infecciones provocadas por microorganismos patógenos (por ejemplo Aspergillus fumigatus, Fusarium oxysporum, Trichophyton asteroides, etc.); enfermedades de la piel inflamatorias o hiperploliferativas o manifestaciones cutáneas de enfermedades mediadas inmunológicamente (por ejemplo psoriasis, dermatitis atópica, dermatitis por contacto, dermatitis eczematoide, dermatitis seborreica, liquen plano, pénfigo, penfigoide buloso, epidermolisis bulosa, urticaria, angioedema, vasculitides, eritema, eosinofilia dérmica, lupus eritematoso, acné, y alopecia areata) ; enfermedades autoinmunes del ojo (por ejemplo queratoconjuntivitis, conjuntivitis vernal, uveítis asociada con la enfermedad de Behcet, queratitis, queratitis herpética, queratitis cónica, distrofia epitelial corneal, queratoleucoma, pénfigo ocular, úlcera de Mooren, escleritis, oftalmología de Graves, síndrome de Vogt-Koyanagi-Harada, queratoconjuntivitis seca (ojo seco), flicténula, iridociclitis, sarcoidosis, oftalmopatía endocrina, etc.); enfermedades de las vías respiratorias ÍMy¡ líiüVi ll l? l i^ m^ ^ obstructivas reversibles [asma (por ejemplo asma bronquial, asma alérgico, asma intrínseco, asma extrínseco, y asma por polvo) , particularmente asma crónico o inveterado (por ejemplo asma tardío e hiperrespuesta de las vías respiratorias) bronquitis, etc. ] ; inflamaciones mucosales o vasculares (por ejemplo úlcera gástrica, daño vascular isquémico o trombótico, enfermedades isquémicas del intestino, enteritis, enterocolitis necrosante, daños intestinales asociados con quemaduras térmicas, enfermedades mediadas por leucotrieno B4); inflamaciones intestinales/alergias (por ejemplo enfermedades celiacas, proctitis, gastroenteritis eosinofílica, mastocitosis, enfermedad de Crohn y colitis ulcerativa) ; enfermedades alérgicas relacionadas a los alimentos con manifestación sintomática remota del tracto gastrointestinal (por ejemplo migraña, rinitis y eczema) ; enfermedades renales (por ejemplo nefritis intestinal, síndrome de Goodpasture, síndrome urémico hemolítico, nefropatía diabética) , y síndrome nefrótico (por ejemplo glomerulonefritis); enfermedades nerviosas (por ejemplo miositis múltiple, síndrome de Guillain-Barre, enfermedad de Meniere, neuritis múltiple, neuritis solitaria, infarto cerebral, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica (ALS) y radiculopatía) ; enfermedades endocrinas (por ejemplo hipertiroidismo, y enfermedad de Basedo ) ; enfermedades hemáticas, (por ejemplo aplasia de células rojas puras, anemia aplástica, anemia hipoplástica, púrpura trombocitopénica idiopática, anemia hemolítica autoinmune, agranulocitosis, anemia perniciosa, anemia megaloblástica, y aneritroplasia) ; enfermedades óseas (por ejemplo osteoporosis); enfermedades respiratorias (por ejemplo sarcoidosis, fibrosis pulmonar, y neumonía intersticial idiopática) , enfermedades de la piel (por ejemplo dermatomiositosis, leucoderma vulgaris, ictiosis vulgaris, fotosensibilidad, y linfoma de células T cutáneo) ; enfermedades circulatorias (por ejemplo arteriosclerosis, aterosclerosis, síndrome de aortitis, poliarteritis nodosa, y miocardosis) ; enfermedades del colágeno (por ejemplo escleroderma, granuloma de Wegener, y síndrome de Sjogren) ; adiposis; fascitis eosinofílica; enfermedades periodontales (por ejemplo daño a la gingiva, periodontio, hueso alveolar o sustancia ósea dental) ; alopecia de patrón masculino, alopecia senil; distrofia muscular; pioderma y síndrome de Sezary; enfermedades asociadas con las anormalidades cromosómicas (por ejemplo síndrome de Down) ; enfermedad de Addison; enfermedades mediadas por el oxígeno activo [por ejemplo daños a órganos (por ejemplo desórdenes de órganos por circulación isquémica (por ejemplo corazón, hígado, riñon, tracto digestivo, etc.) asociados con preservación, trasplante, o enfermedades isquémicas (por ejemplo trombosis, infarto cardiaco)]; enfermedades intestinales (por ejemplo choque por endotoxinas, colitis seudomembranosa, y colitis inducida por radiación o por fármacos) ; enfermedades renales (por ejemplo insuficiencia renal aguda isquémica, insuficiencia renal crónica) ; enfermedades pulmonares (por ejemplo toxicosis Hlíí l1 -MiiJilillll JÉUlItlI-" y*-y-t»?*~~«>y**~ -^ ..^«t.jt-^. .^.fc» provocada por oxígeno pulmonar o fármacos (por ejemplo paracort, bleomicina, etc.), cáncer pulmonar, y enfisema pulmonar) ; enfermedades oculares (por ejemplo cataratas, enfermedad por exceso de hierro (siderosis bulbi), retinitis pigmentosa, placas seniles, heridas al cuerpo vitreo, quemaduras a la córnea por sustancias alcalinas) ; dermatitis (por ejemplo erotema multiforme, dermatitis bulosa por inmunoglobulina A lineal, dermatitis por cemento) ; y otras enfermedades (por ejemplo gingivitis, periodontitis, pancreatitis, y enfermedades provocadas por contaminación ambiental (por ejemplo contaminación del aire), envejecimiento, carcinogénicas, metástasis de carcinoma, e hipobaropatía) ; enfermedades provocadas por liberación de histamina o liberación de leucotrieno C4; restenosis de arterias coronarias después de angioplastia y prevención de adhesiones postquirúrgicas; enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias (por ejemplo, edema mucosal primario, gastritis atrófica autoinmune, menopausia prematura, esterilidad masculina, diabetes mellitus juvenil, ... í ^.....- ..^^..¿L,^*-^..* * **^-»* *» *.. A% pénfigo vulgaris, penfigoide, oftalmitis del sistema nervioso simpático, uveítis inducida por lentes, leucopenia idiopática, hepatitis crónica activa, cirrosis idiopática, lupus eritematoso discoide, orquitis autoinmune, artritis (por ejemplo artritis deformante) , o policondritis) ; infección por Virus de Inmunodeficiencia Humana (HIV) , SIDA; conjuntivitis alérgica; y cicatrices hipertróficas y queloides debidas a trauma, quemaduras, o cirugía. Además, el compuesto macrólido tal como el compuesto (I) tricíclico tiene una actividad regenerativa del hígado y/o actividades de estimulación de hipertrofia e hiperplasia de hepatocitos. Por lo tanto, la composición farmacéutica de la presente invención es útil para el tratamiento y prevención de enfermedades hepáticas [por ejemplo enfermedades inmunogénicas (por ejemplo enfermedades hepáticas autoinmunes crónicas tales como enfermedades hepáticas autoinmunes, cirrosis biliar primaria o colangitis esclerosante), resección hepática parcial, necrosis hepática aguda (por ejemplo necrosis provocada por toxinas, hepatitis viral, choque, o anoxia) , hepatitis B, hepatitis no A y no B, hepatocirrosis , e tlf-JiliiJiriiiil" - ' ^^' --— tl? nñ"ifr ' ¿ ^ j|^^^^ insuficiencia hepática (por ejemplo hepatitis fulminante, hepatitis de inicio tardío e insuficiencia hepática "aguda a crónica" (insuficiencia hepática aguda o enfermedades hepáticas crónicas)]. Además, la preparación de la presente invención también es útil para mejorar el efecto de la prevención y/o tratamiento de diversas enfermedades, debido a la actividad farmacológica útil de los macrólidos tricíclicos, tal como aumento de la actividad del efecto quimioterapéutico, actividad de infección por citomegalovirus, actividad antiinflamatoria, inhibición de la actividad contra peptidil-prolil-isomerasa o rotamasa, actividad antimalarial, actividad antitumoral, y así sucesivamente .

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para producir una preparación de liposomas mediante secado a vacío, en donde: la solución condensada en liposomas, que es obtenida al eliminar solvente de la solución de liposomas, se sujeta a secado a vacío sin congelamiento al tiempo que se burbujea la solución condensada o después de burbujear la solución condensada.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el burbujeo es generado al elevar la temperatura de la solución condensada después de disminuir la temperatura de la solución condensada a condición de vacío.

3. El método de conformidad con la reivindicación 2, en donde la temperatura de la solución condensada es elevada a 20°C o más después de que la temperatura de la solución condensada se disminuye a -10°C o menos.

4. El método de conformidad con la reivindicación 3, en donde la temperatura de la solución condensada es elevada al intervalo de 30°C a 50°C después de que la temperatura de la solución condensada se disminuye al intervalo de -30°C a -40°C.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el burbujeo es producido al someter la solución condensada a condición de vacío mientras fluye o después de que fluye la solución condensada.

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la solución condensada es burbujeada mientras se mantiene su fase líquida.

7. El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde el método está dirigido a producir la preparación de liposomas que contiene, como un ingrediente activo, un derivado de ácido pipecólico o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. El método de conformidad con la reivindicación 7, en donde el derivado de ácido pipecólico es un compuesto macrólido de la siguiente fórmula general (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma: Í»tutmé»á???y? >-»j^f^..J..^ taaj.fjJAi en donde cada uno de los pares combinados con los átomos de carbono adyacentes respectivos de R1 y R?, R^ y R4, y R5 y R6: (a) representa un átomo de hidrógeno; o (b) puede formar otro enlace entre los átomos de carbono respectivos a los cuales están combinados; y R2 puede también ser un grupo alquilo; R7 representa un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo, un grupo hidroxilo protegido, o un grupo alcoxi, o puede combinarse con R1, con lo cual representa un grupo oxo; R8 y R9 independientemente representan un átomo de hidrógeno o un grupo hidroxilo; R10 representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo alquilo sustituido con uno o más grupos hidroxilo, un grupo alquenilo, un grupo alquenilo sustituido con uno o más grupos hidroxilo, o un grupo alquilo sustituido con un grupo oxo; X representa un grupo oxo, un estado donde un átomo de hidrógeno y un grupo hidroxilo se combinan con un átomo de carbono, un estado donde dos átomos de hidrógeno se combinan con un átomo de carbono, o un grupo representado por la fórmula -CH20-; Y es un grupo oxo, un estado donde un átomo de hidrógeno y un grupo hidroxilo se combinan con un átomo de carbono, un estado donde dos átomos de hidrógeno se combinan con un átomo de carbono, o un grupo representado por la fórmula N-NR R o N-OR ; R 11 y R >12 independientemente representan un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo arilo, o un grupo tosilo; R13, R14, R15, R16, R17, R18, R19, R22 y R23 independientemente representan un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo; R24 representa un anillo opcionalmente sustituido capaz de contener uno o más heteroátomos; y n representa un número entero de 1 o 2; con una condición de que, además de las definiciones anteriores, Y, R10 y R23 pueden combinase con los átomos de carbono con los cuales están combinados, mediante lo cual representan un grupo heterocíclico saturado o insaturado de 5 o de 6 miembros que contiene átomos de nitrógeno, azufre y/o oxígeno, y el grupo heterocíclico puede estar sustituido con uno o más grupos seleccionados del grupo que consiste de un grupo alquilo, un grupo hidroxilo, ¿to ^^ un grupo alquiloxi, un grupo bencilo, un grupo de la fórmula -CH2Se (C6H5 ) , y un grupo alquilo sustituido con uno o más grupos hidroxilo.

9. El método de conformidad con la reivindicación 1, en donde la lecitina es principalmente utilizada como el lípido formador de liposomas .

10. El método de conformidad con la reivindicación 9, en donde el liposoma no contiene colesterol .

11. El método de conformidad con la reivindicación 8, en donde el compuesto macrólido (I) es 17-alil-l, 14-dihidroxi-12- [2- (4-hidroxi-3-metoxiciclohexil) -1-metilvinil ] -23, 25-dimetoxi-13, 19,21,27-tetrametil-ll,28-dioxa-4-azatriciclo [22.3.1. O4'9] octacos-18-en-2, 3, 10, 16-tetraona o su hidrato.

12. La preparación de liposomas obtenida por el método de conformidad con la reivindicación 1.