MXPA00007815A - Metodo para modular la activacion de macrofagos. - Google Patents

Abstract

Los compuestos anionicos, incluidos los sulfonatos, son capaces de bloquear la activacion de macrofagos A? inducida (o activacion de macrofagos inducida por otras proteinas o peptidos amiloidogenicos). Estos compuestos pueden inhibir el proceso inflamatorio, por ejemplo, en el cerebro de un individuo que sufre de una enfermedad caracterizada por deposito A?, como puede ser la enfermedad de Alzheimer.

Description

/ ' MÉTODO PARA MODULAR LA ACTIVACIÓN DE MACROFAGOS Antecedentes de la invención Las proteínas a iloidogénicas son un grupo de proteínas capaces de organizarse en los depósitos de proteínas fibrilares extracelulares. estas proteínas, aunque de naturaleza diferente, tienen una serie de propiedades estructurales únicas: se unen al rojo Congo con la tinción y muestran una birrefringencia verde manzana cuando se observan bajo la luz polarizada. El depósito extracelular de la proteina Aß en regiones especificas del cerebro es una de las marcas de la enfermedad de Alz eimer. La proteina Aß se obtiene de una disociación proteolitica anormal de la proteina precursora, la ßAPP. Una vez depositada en el cerebro, forma placas seniles que se han encontrado en mayor número en los cerebros de pacientes con enfermedad de Alzheimer. También se ha demostrado que infiltran las paredes cerebro vasculares y causan angiopatia. Una pérdida progresiva de células neuronales acompaña del depósito de fibrillas amiloides Aß en placas seniles. In vi tro, Aß es altamente tóxica en neuronas según lo han demostrado algunos grupos. La Feria y col., recientemente han demostrado que las células neuronales cuando se exponen in vi tro a Aß soluble se vuelven apoptóticas. Una vez iternalizada, la proteina Aß se estabiliza e induce la fragmentación del DNA, lo cual es característico de apoptosis. Se ha demostrado que el dominio 25-35 de la proteina Aß es responsable de esta actividad excitotóxica. Estos resultados han llevado a los científicos a considerar que no solo la organización de las fibrillas Aß en placas seniles, lo cual se observa en la etapa tardía de la enfermedad, seria perjudicial para el hospedero sino aún la proteina Aß soluble puede inducir pérdida de células neuronales en la primera etapa del proceso de la enfermedad. También se han observado células microgliales activadas en cerebros de pacientes con enfermedad de Alzheimer. Se cree que el proceso de activación de estos macrofagos del cerebro es responsable de la presencia de mediadores inflamatorios en extractos de cerebro. Estos mediadores, por ejemplo, citocinas .inflamatorias, óxido nítrico e intermediarios de oxigeno reactivo pueden desempeñar una función importante en la inducción de la toxicidad de las células neuronales. Recientemente se ha demostrado que la proteina Aß soluble es capaz de internalizarse mediante las células microgliales e inducir un proceso de activación según se determina mediante la producción de mediadores inflamatorios como NO (Barger y col.) . Giulian y col. también demostraron que este proceso de activación se debe a un dominio especifico de Aß: el dominio de los residuos 10-16. Es posible que este proceso de activación se deba a la adherencia de la proteina (en particular el dominio 10-16 de la proteina Aß) a la superficie celular del macrofago.

Compendio de la invención 5 Ahora se ha descubierto que ciertos compuestos aniónicos, incluidos los sulfonatos, son capaces de bloquear la activación del macrofago inducida por Aß (o la activación del macrofago inducida por otras proteínas o péptidos amiloidogénicos) . Al interferir con la capacidad de la 10 proteina Aß para activar macrofagos, estos compuestos pueden • inhibir el proceso inflamatorio, por ejemplo, en el cerebro de un individuo que sufre de una enfermedad caracterizada por depósito de proteina Aß, como puede ser la enfermedad de Alzheimer. 15 Asi pues, en un aspecto, la invención ofrece un método para inhibir la activación de macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico . El método consiste en poner en contacto un macrofago en presencia de una proteina o péptido amiloidogénico con un compuesto aniónico, por • 20 ejemplo, un compuesto aniónico de las fórmulas I ó II, de modo que se inhiba la acción del macrofago. En un aspecto, la invención proporciona un método para inhibir la activación de macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico . El método consiste en poner en 25 contacto un macrofago en presencia de una proteina o péptido amiloidogénico con un compuesto aniónico, por ejemplo, un compuesto aniónico (por ejemplo, de las fórmulas I ó II), de modo que se inhiba la activación del macrofago. En una modalidad, el compuesto terapéutico puede tener la siguiente fórmula (fórmula I) : Q—[—?-?+]n en donde Y~ es un grupo aniónico a pH fisiológico; Q es una molécula portadora; X es un grupo catiónico; y n es un entero. El número de grupos aniónicos ("n") se selecciona de modo que no se impida la biodistribución del compuesto para un sitio elegido propuesto manteniendo al mismo tiempo la actividad del compuesto. Por ejemplo, el número de grupos aniónicos no es tan grande para inhibir el paso de una barrera anatómica, como puede ser la membrana celular, o entrar a través de una barrera fisiológica, como puede ser la barrera hematoencefálica, en situaciones donde se desea esta propiedad. En una modalidad, n es un entero entre 1 y 10. En otra modalidad, n es un entero entre 3 y 8. En otra modalidad, el compuesto puede ser representado por la siguiente fórmula (fórmula II) : en donde Z es XR ó R , R y R son cada uno independientemente hidrógeno, un grupo alifático sustituido o no sustituido, un grupo arilo, un grupo heterociclico o un catión formador de sal; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo, o un catión formador de sal; R es hidrógeno, alquilo • inferior, arilo o amino; X es, independientemente de cada aparición, O ó S; Y 1 y Y2 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno, alquilo, amino, hidroxio, alcoxi o ariloxi; y n es un entero desde 0 a 12. Los compuestos preferidos incluyen sulfatos, sulfonatos, fosfatos, carboxilatos y compuestos que incluyen +~ 10 combinaciones de estos grupos funcionales. Los compuestos particularmente preferidos incluyen sulfatos y sulfonatos de alquilo inferior sustituidos y no sustituidos (incluidos sin limitación: disulfato de 1, 4-butanodiol, 1,5- pentandisulfonato de sodio, taurino (2-amino-etansulfonato 15 de sodio) y homotaurino (ácido aminopropansulfónico) . Otros compuestos preferidos incluyen sulfonato de 3- (ciclohexilamino) -1-propano, 4- (2-hidroxietil) -1-piperazin- etansulfonato, ácido 3- (N-morfolino) propansulfónico, tetrahidrotiofen-1, l-dióxido-3, 4-disulfato de sodio 20 trihidratado," 4-hidroxibutan-l-sulfonato de sodio, 1,3,5- pentanotriol trisulfato de sodio, sulfato ácido de 2- aminoetilo, ácido fosfórmico, ácido fosfonoacético o Índigo carmín. Un compuesto preferido es ácido 3- aminopropansulfónico o una sal del mismo (véase el ejemplo, 25 infra) .

En otro aspecto, la invención ofrece un método para inhibir un proceso inflamatorio (por ejemplo, un proceso inflamatorio debido a la presencia de, o activación de macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico) . El método consiste en administrar a un individuo en necesidad del mismo (por ejemplo, un individuo que tenga depósito amiloide) una cantidad terapéutica eficaz de un compuesto aniónico, de modo que se inhiba el proceso inflamatorio, por ejemplo, mediante la inhibición de la activación de macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico, como puede ser Aß. En una modalidad preferida, el individuo es un individuo que sufre de enfermedad de Alzheimer. En ciertas modalidades, el compuesto aniónico es un compuesto representado por las fórmulas I ó II. Los compuestos preferidos incluyen sulfatos, sulfonatos, ' fosfatos, carboxilatos y compuestos que incluyen combinaciones de estos grupos funcionales. Los compuestos particularmente preferidos incluyen sulfatos y sulfonatos de alquilo inferior sustituidos y no sustituidos (incluidos sin limitación: disulfato de 1, 4-butanodiol, 1,5- pentandisulfonato de sodio, taurino (2-amino-etansulfonato de sodio) y homotaurino (ácido aminopropansulfónico) . Otros compuestos preferidos incluyen sulfonato de 3- (ciclohexilamino) -1-propano, 4- (2-hidroxietil) -1-piperazin- etansulfonato, ácido 3- (N-morfolino) propansulfónico, tetrahidrotiofen-1, l-dióxido-3, 4-disulfato de sodio trihidratado, 4-hidroxibutan-l-sulfonato de sodio, 1,3,5- • pentanotriol trisulfato de sodio, sulfato ácido de 2- aminoetilo, ácido fosfórmico, ácido fosfonoacético o Índigo carmín. Un compuesto preferido es ácido 3- aminopropansulfónico o una sal del mismo.

Breve descripción de los dibujos 10 La Figura 1 es una gráfica de barras que muestra el • efecto de algunas condiciones en la producción de óxido nítrico (NO) mediante macrofagos en cultivo celular. La Figura 2 es una gráfica en barras que muestra el efecto de diferentes condiciones sobre la producción de TNFa 15 inducido por Aß por macrofagos en cultivo celular. La Figura 3 es una gráfica que muestra la capacidad de un compuesto de la invención, el ácido 3- aminopropansulfónico, para bloquear o inhibir la activación de macrofagos. 20 Descripción detallada de la invención Los métodos de la invención proporcionan tratamientos terapéuticos para individuos que sufren de anomalías, incluida la inflamación y muerte de células neuronales, por 25 ejemplo, individuos que sufren de enfermedad de Alzheimer u otras enfermedades en las que están presentes proteínas o péptido amiloidogénicos . Al inhibir la capacidad de Aß para inducir el proceso de activación de los macrofagos, es • posible hacer más lento o evitar la pérdida de las células 5 neuronales debido al estado de inflamación del cerebro. Como se utiliza en la presente, los términos "inhibición de la activación de los macrofagos" o "inhibición de un proceso inflamatorio" se refiere a disminuir, inhibir, hacer más lento o aminorar, o invertir el transcurso o grado de 10 activación de los macrofagos o inflamación, respectivamente, • in vitro o en un individuo. En un aspecto, la invención proporciona un método para inhibir la activación de macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico. El método consiste en poner en 15 contacto un. macrofago en presencia de una proteina o péptido amiloidogénico con un compuesto aniónico de las fórmulas I ó II, de modo que se inhiba la activación del macrofago. En una modalidad, el compuesto siguiente fórmula (fórmula I) : Q—[—Y~X+]n • 20 en donde Y~ es un grupo aniónico a pH fisiológico; Q es una molécula portadora; X es un grupo catiónico; y n es un entero. El número de grupos aniónicos ("n") se selecciona de modo que no se impida la biodistribución del compuesto para un sitio elegido propuesto manteniendo al mismo tiempo la 25 actividad del compuesto. Por ejemplo, el número de grupos aniónicos no es tan grande para inhibir el paso de una barrera anatómica, como puede ser la membrana celular, o entrar a través de una barrera fisiológica, como puede ser • la barrera hematoencefálica, en situaciones donde se desean tales propiedades. En una modalidad, n es un entero entre 1 y 10. En otra modalidad, n es un entero entre 3 y 8. Un grupo aniónico de un compuesto terapéutico de la invención es una porción con carga negativa que, cuando se une a una molécula portadora, puede inhibir la activación de -_- 10 los macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico, o un fragmento de los mismos (por ejemplo, Aß, o fragmentos del mismo) . Para los propósitos de esta invención, el grupo aniónico tiene carga negativa a pH fisiológico. De preferencia, el compuesto terapéutico 15 aniónico imita la estructura de un proteoglucano sulfatado, es decir, es un compuesto sulfatado o un equivalente funcional del mismo. Los "equivalentes funcionales" de los sulfatos se proponen para incluir compuestos como sulfamatos, asi como bioisoésteres . Los bioisoésteres 20 comprenden- lo*s equivalentes bioisoestéricos tradicionales y los equivalentes bioisoestéricos no tradicionales. Los bioisoésteres tradicionales y no tradicionales de los grupos sulfato son conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Silverman, R. B. The Organic Chemistry of Drug Design and 25 Drug Actino, Academic Press, Inc.: San Diego CA, 1992, pp. 19-23) . Por consiguiente, un compuesto terapéutico de la invención puede comprender cuando menos un grupo aniónico que incluya sulfonatos, sulfatos, sulfamatos, fosfonatos, fosfatos, carboxilatos y grupos heterociclicos de las siguientes fórmulas: Dependiendo de la molécula portadora, más de un grupo aniónico puede estar unido a la misma. Cuando más de un grupo aniónico esta unido a una molécula portadora, los grupos aniónicos múltiples pueden ser el mismo grupo estructural (por ejemplo, todos sulfonatos) o, de otro modo, una combinación de diferentes grupos aniónicos (por ejemplo, sulfonatos y sulfatos, etc) . Se entenderá que el término "grupo aniónico" incluye sales, como son las sales acétales para uso farmacéutico, de un grupo aniónico. Para los ejemplos de los compuestos útiles que tienen grupos aniónicos en" la invención véase, por ejemplo, la Patente Estadounidense No. 5,643,562 (se incorpora en la presente como referencia) . En otra modalidad, el compuesto puede ser representado por la siguiente fórmula (fórmula II) : • en donde Z es Y3A ó RR4',, R" y R" son cada uno 5 independientemente hidrógeno, un grupo alifático sustituido o no sustituido (de preferencia una porción alifática de cadena lineal o ramificada teniendo desde 1 a 24 átomos de carbono en la cadena; o una porción alifática cíclica no sustituida o sustituida que tenga desde 4 hasta 7 átomos de 10 carbono en el anillo alifático; los grupos alifáticos y cíclicos alifáticos preferidos son grupos alquilo, de mayor preferencia alquilo inferior) , un grupo arilo, un grupo 3 heterociclico o un catión formador de sal; R es hidrógeno, 4 alquilo inferior, arilo, o un catión formador de sal; R es 15 hidrógeno, alquilo inferior, arilo o amino (incluido alquilamino, dialquilamino) (incluidas las porciones amino cíclicas), arilamino, diarilamino y alquilarilamino) ; X es, independientemente de cada aparición, O ó S; Y 1 y Y2 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno (por ejemplo, F, 20 Cl, Br ó I)", alquilo (de preferencia alquilo inferior) , amino, hidroxi, alcoxi o ariloxi; y n es un entero de 0 a 12 (de mayor preferencia de 0 a 6, de mayor preferencia 0 ó 1) . Un compuesto aniónico de la invención por lo común además contiene un contraión (es decir, X en la fórmula 25 general: Q—[—Y~X+]n) . Los grupos catiónicos incluyen átomos y porciones con carga positiva. Los grupos catiónicos incluyen átomos y porciones con carga positiva. Si el grupo catiónico es hidrógeno, H , entonces el compuesto es considerado un ácido, por ejemplo, ácido etansulfónico . Si el hidrógeno es sustituido por un metal o su equivalente, el compuesto es una sal del ácido. Las sales aceptables para uso farmacéutico del compuesto aniónico están dentro del alcance de la invención. Por ejemplo, X puede ser un metal alcalino aceptable para uso farmacéutico, catión alcalinotérreo, de valencia superior (por ejemplo, sal de amonio), contraión policatiónico o amonio. Una sal aceptable para uso farmacéutico preferida es una sal de sodio, pero también se contemplan otras sales dentro de su calidad como aceptable para uso farmacéutico. Dentro del compuesto aniónico, el (los) grupo (s) aniónico (s) esta unido de manera covalente a una molécula portadora. Las moléculas portadoras adecuadas incluyen carbohidratos, -polímeros, péptidos, derivados peptidicos, grupos alifáticos, grupos aliciclicos, grupos heterociclicoS, grupos aromáticos o combinaciones de los mismos. Una molécula portadora puede estar sustituida, por ejemplo, con uno o más grupos amino, nitro, halógeno, tiol o hidroxi . Como se utiliza en la presente, el término "carbohidrato" se propone para incluir mono-, oligo- y polisacáridos sustituidos y no sustituidos. Los monosacáridos son azúcares sencillos por lo común de la fórmula C6H12P6 que pueden estar combinados para formar oligosacáridos o polisacáridos. Los monosacáridos incluyen 5 enantiómeros y los esteroisómeros D y L de los monosacáridos. Los carbohidratos pueden tener múltiples grupos aniónicos unidos a cada porción monosacárido. Por ejemplo, en octasulfato de sacarosa, cuatro grupos sulfato están unidos a cada una de las dos porciones monosacárido. _.__ 10 Como se utiliza en la presente, el término "polimero" se propone para incluir moléculas formadas por la unión química de dos o más subunidades combinantes denominadas monómeros . Los monómeros son moléculas o compuestos que por lo común contienen carbono y son de peso molecular relativamente bajo 15 y de estructura simple. Un monómero puede ser convertido en un polimero por combinación con el mismo u otras moléculas o compuestos similares. Un polimero puede estar compuesto de una sola unidad repetidora idéntica o múltiples subunidades repetidoras diferentes (copolimeros) . Los polímeros dentro 20 del alcance" de esta invención incluyen polímeros y copolimeros sustituidos y no sustituidos de vinilo, acrilo, estireno y polímeros derivados de carbohidratos y sales de los mismos. En una modalidad preferida, el polimero tiene un peso molecular de aproximadamente 800-1000 Daltons. Los 25 ejemplos de los polímeros con grupos aniónicos unidos en forma covalente, adecuados (por ejemplo, sulfonatos o sulfatos) incluyen poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico-co-acrilonitrilo) ; poli (ácido- 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico-co-estireno) ; poli (ácido vinilsulfónico) ; poli (ácido 4-estirensulfónico de sodio); y sulfatos y sulfonatos obtenidos de los mismos: poli (ácido acrilico); poli (acrilato de metilo); poli (metacrilato de metilo) ; y poli (alcohol vinílico) ; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Los ejemplos de los polímeros obtenidos de carbohidratos con grupos aniónicos unidos en forma covalente convenientes incluyen los de la fórmula: en donde R es S?3~ ó OSO3-; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos . Los péptidos y derivados peptídicos también pueden actuar como " moléculas portadoras. El término "péptido" incluye dos o más aminoácidos unidos en forma covalente a través de un enlace peptídico. Los aminoácidos que pueden ser utilizados en las moléculas portadoras de péptidos incluyen los aminoácidos que ocurren en forma natural y que se encuentran en las proteínas como glicina, alanina, valina, cisteína, leucina, isoleucina, serina, treonina, metionina, ácido glutámico, ácido aspártico, glutamina, asparaglna, lisina, arginina, prolina, histidina, • fenilalanina, tirosina y triptofano. El término aminoácido 5 además incluye análogos, derivados y congéneres de los aminoácidos que ocurren en la naturaleza, uno o más de los cuales puede estar presente en un derivado peptídico. Por ejemplo, los análogos de los aminoácidos pueden tener cadenas laterales alargadas o acortadas o cadenas laterales 10 variantes con grupos funcionales adecuados. También • incluidos están los esteroisómeros D y L de un aminoácido cuando la estructura del aminoácido admite formas esteroisoméricas. El término "derivado peptídico" además incluye los compuestos que contienen molécula que imitan una 15 cadena principal peptidica pero no son aminoácidos (denominados peptido iméticos) , como las moléculas de benzodiazepina (véase, por ejemplo, James, G. L. y col., (1993) Science 260: 1937-1942). Los grupos aniónicos pueden estar unidos a un péptido o derivado peptidico a través de • 20 un grupo funcional en la cadena lateral de ciertos aminoácidos u otros grupos funcionales adecuados. Por ejemplo, el grupo sulfato o sulfonato puede estar unido a través de la cadena lateral hidroxilo de un residuo de serina. Es posible diseñar un péptido para interactuar con 25 un sitio de unión para un constituyente de la membrana basal (por ejemplo, un GAG) en un péptido Ab (como ya se describió) . Por consiguiente, en una modalidad, el péptido consiste en cuatro aminoácidos y grupos aniónicos • (sulfonatos) están unidos al primero, segundo y cuarto aminoácido. Por ejemplo, el péptido puede ser Ser-Ser-Y-Ser, en donde un grupo aniónico esta unido a la cadena lateral de cada residuo de serina y Y es cualquier aminoácido. Además de los péptidos y derivados peptidicos, es posible utilizar aminoácidos individuales como portadores en el compuesto ______ 10 aniónico de la invención. Por ejemplo, es posible utilizar ácido cistéico, el derivado sulfonato de cisteina. El término "grupo alifático" se propone para incluir compuestos orgánicos caracterizados por cadenas lineales o ramificadas, por lo común teniendo entre 1 y 22 átomos de 15 carbono. Los grupos alifáticos incluyen grupos alquilo, grupos alquenilo y grupos alquinilo. En las estructuras complejas, las cadenas pueden estar ramificadas o reticuladas. Los grupos alquilo incluyen hidrocarburos saturados teniendo uno o más átomos de carbono, incluidos 20 los grupos arlquilo de cadena lineal y grupos alquilo de cadena ramificada. Estas porciones hidrocarburo pueden estar sustituidas en uno o más carbonos con, por ejemplo, un grupo halógeno, un grupo hidroxilo, tiol, amino, alcoxi, alquilcarboxi, alquiltio o nitro. A menos que el número de 25 carbonos se especifique de otro modo, "alifático inferior" co o se utiliza en la presente significa un grupo alifático, como ya se definió (por ejemplo, alquilo inferior, alquenilo inferior, alquinilo inferior) , pero teniendo desde 1 hasta 6 átomos de carbono. Los representativos de estos grupos alifáticos inferiores, por ejemplo, de los grupos alquilo inferiores son metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, 2-cloropropilo, n-butilo, sec-butilo, 2-aminobutilo, isobutilo ter-butilo, 3-tiopentilo y similares. Como se utiliza en la presente, el término "amino" se entiende -NH2; el término "nitro" significa -N02; el término "halógeno" designa -F, -Cl, -Br ó -I; el término "tiol" significa SH; y el término "hidroxilo" significa -OH. Así pues, el término "alquilamino" como se utiliza en la presente significa un grupo alquilo, como ya se definió, teniendo un grupo amino unido al mismo. El término "alquiltio" se refiere a un grupo alquilo, como se define en lo anterior, teniendo un grupo sulfhidrilo unido al mismo. El término "alquilcarboxilo" como se utiliza en la presente significa un grupo alquilo, como ya se definió, teniendo un grupo carboxilo unido al mismo. El término "alcoxi" como se utiliza en la presente significa un grupo alquilo, como ya se definió, teniendo un átomo de oxigeno unido al mismo. Los grupos alcoxi representativos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, ter-butoxi y similares. Los términos "alquenilo" y "alquinilo" se refieren a grupos alifáticos insaturados análogos a los alquilos, pero que contienen cuando menos un enlace doble o triple, respectivamente. El término "grupo aliciclico" se propone para incluir estructuras de anillo cerrado de 3 o más átomos de carbono. Los grupos aliciclicos incluyen cicloparafinas o naftenos que son hidrocarburos cíclicos saturados, cicloolefinas que son insaturadas con dos o más enlaces dobles y cicloacetilenos que tienen un triple enlace. Estos no incluyen grupos aromáticos. Los ejemplos de las cicloparafinas incluyen ciclopropano, ciciohexano y ciclopentano. Los ejemplos de las cicloolefinas incluyen ciclopentadieno y ciclooctetraeno. Los grupos alicíclicos también incluyen estructuras de anillo fusionadas y grupos aliciclicos sustituidos como son los grupos aliciclicos sustituidos, con alquilo. En el caso de los aliciclicos estos sutituyentes además pueden comprender un alquilo inferior, un alquenilo inferior, un alcoxi inferior, un alquiltio inferior, un alquilamino inferior, un alquilcarboxilo inferior, un nitro, un hidroxilo, un -CF3, -CN o similares. El término "grupo heterocíclico" se propone para incluir estructuras anulares cerradas en las que uno o más de los átomos en el anillo es un elemento diferente de carbono, por ejemplo, nitrógeno u oxigeno. Los grupos heterociclicos pueden estar saturados o insaturados y los grupos heterocíclicos como pirrol y furano pueden tener carácter aromático. Estos incluyen estructuras anulares fusionadas como quinolina e isoquinolina. Otros ejemplos de grupos heterocíclicos incluyen piridina y purina. Los grupos heterocíclicos también pueden estar sustituidos en uno o más átomos constituyentes con, por ejemplo, un halógeno, un alquilo inferior, un alquenilo inferior, un alcoxi inferior, un alquiltio inferior, un alquilamino inferior, un alquilcarbonilo inferior, un nitro, un hidroxilo, -CF3, -CN o similares . El término "grupo aromático" se propone para incluir hidrocarburos cíclicos insaturados conteniendo uno o más anillos. Los grupos aromáticos incluyen grupos de un solo anillo, de 5 y 6 miembros que pueden incluir desde 0 hasta 4 heteroátomos, por ejemplo, benceno, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol triazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina y pirimidina, y similares. El anillo aromático puede estar sustituido en una o más posiciones del anillo con, por ejemplo, un halógeno, un alquilo inferior, un alquenilo inferior, un alcoxi inferior, un alquiltio inferior, uñ alquilamino inferior, un alquilcarboxilo inferior, un nitro, un hidroxilo, -CF3, -CN o similares. En una modalidad preferida del método de la invención, el compuesto aniónico administrado al individuo esta compuesto de cuando menos un grupo sulfonato unido en forma covalente a una molécula portadora, o una sal aceptable para uso farmacéutico de la misma. Por consiguiente, un compuesto aniónico puede tener la estructura: O—[—S03"X+_n En donde Q es una molécula portadora; X es un grupo catiónico; y n es un entero. Las moléculas portadoras convenientes y los grupos catiónicos son los que se describieron en lo anterior. El número de grupos sulfonato ("n") se selecciona de modo que no se impida la biodistribución del compuesto para un sitio elegido propuesto manteniendo al mismo tiempo la actividad del compuesto como ya se describió. En una modalidad, n es un entero entre 1 y 10. En otra modalidad, n es un entero entre 3 y 8. Como se describió al principio, un compuesto aniónico con múltiples grupos sulfonato puede tener los grupos sulfonato separados, de modo que el compuesto interactúe en forma óptima con un sitio de unión a HSPG dentro del péptido Ab. En las modalidades preferidas, la molécula portadora para un sulfonato (s) es un grupo alifático inferior (por ejemplo, un alquilo inferior) , alquenilo inferior o alquinilo inferior) , un grupo heterocíclico, un disacárido, un polimero o un péptido o derivado peptidico. Además, el portador puede estar sustituido, por ejemplo, con uno o más grupos amino, nitro, halógeno, tiol o hidroxi. En ciertas modalidades, la molécula portadora para un sulfonato (s) es un grupo aromático. Los ejemplos de los compuestos aniónicos poliméricos sulfonados, convenientes, incluyen poli (ácido 2- acrilamido-2-metil-l-propansulfónico; poli (ácido 2- acrilamido-2-metil-l-propansulfónico-co-acrilonitrilo) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico-co- estireno) ; poli (ácido vinilsulfónico) ; poli (ácido 4- estirensulfónico de sodio) ; un derivado ácido sulfónico de poli (ácido acrílico); un derivado del ácido sulfónico de poli (acrilato de metilo) ; un derivado ácido sulfónico de poli (metacrilato de metilo); y un derivado sulfonato de poli (alcohol vinilico) ; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Un polimero sulfonado preferido es poli (ácido vinilsulfónico) (PVS) o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, de preferencia la sal sodio del ' mismo. En una modalidad, el PVS teniendo un peso molecular de aproximadamente 800-1000 Daltons es el utilizado. El PVS puede ser utilizado como una mezcla de estereoisómeros o como un solo Isómero activo. Un disacárido sulfonado preferido es una sacarosa completa o parcialmente sulfonada, o una sal aceptable para uso farmacéutico de la misma, como puede ser octasulfonato de sacarosa. Otros sacáridos sulfonados incluyen ácido 5- deoxi-1, 2-0-isopropiliden-a-D-xilofuranosa-5-sulfónico (XXIII; mostrado como la sal de sodio) . Los compuestos aniónicos sulfonados, alifáticos inferiores preferidos incluyen ácido etansulfónico; ácido 2-aminoetansulfónico (taurino) ; ácido cistéico (3-sulfoalanina o un ácido a-amino-b-sulfopropiónico) ; ácido 1-propansulfónico; ácido 1, 2-etandisulfónico; ácido 1,3-propandisulfónico; ácido 1, 4-butadisulfónico; ácido 1,5-pentandisulfónico y ácido 4-hidroxibutan-l-sulfónico; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Otros compuestos aniónicos sulfonados alifáticos incluyen ácido 1-butansulfónico, ácido 2-propansulfónico, ácido 3-pentansulfónico, ácido 4-heptansulfónico, ácido 1-decansulfónico y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Los compuestos aniónicos alifáticos sustituidos, sulfonados, incluyen: ácido 3-amino-l-propansulfónico, sulfato del ácido 3-hidroxipropansulfónico, ácido 1, 7-dihidroxi-4-heptansulfónico, y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Todavía otros compuestos sulfonados incluyen ácido 2-[(4-piridinil) amido]etansulfónico y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Los compuestos aniónicos sulfonados, heterociclicos preferidos incluyen ácido 3- (N-morfolino) propansulfónico; y el ácido tetrahidrotiofen-1, l-dióxido-3, 4-disulfónico y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos.

Los compuestos aniónicos sulfonados aromáticos incluyen: ácido 1, 3-bencendisulfónico, ácido 2, 5-dimetoxi-l, 4-bencendisulfónico, ácido 4-amino-3-hidroxi-l-naftalensulfónico, ácido 3, 4-diamino-l-naftalensulfónico y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. En otra modalidad del método de la invención, el compuesto aniónico que se administra al individuo esta compuesto de cuando menos un grupo sulfato unido en forma covalente a una molécula portadora, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo. Por consiguiente, el compuesto aniónico puede tener la estructura: O—[—OS03~X+]n en donde Q es una molécula portadora; X es un grupo catiónico; y n es un entero. Las moléculas portadoras convenientes y los grupos catiónicos son los descritos en lo anterior. El número de grupos sulfato ("n") se selecciona de modo que no se impida la biodistribución del compuesto para un sitio elegido propuesto manteniendo al mismo tiempo la actividad del compuesto aniónico como se describió al principio. En" una modalidad, n es un entero entre 1 y 10. En otra modalidad, n es un entero entre 3 y 8. Como se describe al principio, un compuesto aniónico con múltiples grupos sulfato puede tener los grupos sulfatos separados de modo que el compuesto interactúe de manera óptima con un sitio de unión AG dentro de un péptido Ab.

En las modalidades preferidas, la molécula portadora para un sulfato (s) es un grupo alifático inferior (por ejemplo, un alquilo inferior) un alquenilo inferior o • alquinilo inferior) , un grupo aromático, un -disacárido, un 5 polímero o un péptido o derivado peptídico. Además, el portador puede ser sustituido, por ejemplo, con uno o más grupos amino, nitro, halógeno, tiol o hidroxi. Los ejemplos de los compuestos aniónicos poliméricos sulfatados convenientes, incluyen poli (ácido 2-acrilamido-2- 10 metilpropilsulfúrico) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metilpropil sulfúrico-co-acrilinitrilo) ; poli (ácido 2-acrilamido-2- metilpropil sulfúrico-co-estireno) ; poli (ácido vinilsulfúrico) ; poli (4-estirensulfato de sodio); un derivado sulfato de poli (ácido acrilico); un derivado 15 sulfato de poli (acrilato de metilo); un derivado sulfato de poli (metacrilato de metilo) ; y un derivado sulfato de poli (alcohol vinilico) ; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Un disacárido sulfatado preferido es octasulfato de 20 sacarosa o la sal aceptable para uso farmacéutico de la misma. Otros sacáridos sulfatados incluyen la forma acida de 2, 3-disulfato de metil-a-D-glucopiranósido, 4,6-0- benciliden-a-D-glucopiranósido 2, 3-disulfato de metilo, pentasulfato de 2, 3, 4, 3' , 4' -sacarosa, 2, 5-disulfato de 25 1, 3 : , 6-di-O-bencilideno-D-manitol, 2, 5-disulfato de D- manitol, tetrasulfato de 2, 5-di-O-bencil-D-manitol; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Los compuestos aniónicos sulfatados, alifáticos • inferiores, preferidos para uso en la invención incluyen 5 ácido etilsulfúrico; ácido 2-aminoetan-l-ol sulfúrico; ácido 1-propanol sulfúrico; ácido 1,2-etandiol disulfúrico; ácido 1, 3-propandiol disulfúrico; ácido 1, 4-butanodiol disulfúrico; ácido 1, 5-pentanodiol disulfúrico; y ácido 4- butanodiol monosulfúrico; y las sales aceptables para uso 10 farmacéutico de los mismos. Otros compuestos aniónicos alifáticos sulfatados que se contemplan para uso en la invención incluyen la forma acida de disulfato de 1,3- ciclohexanodiol, trisulfato de 1, 3, 5-heptanotriol, trisulfato de 2-hidroximetil-l, 3-propanodiol, trisulfato de 15 2-hidroximetil-2-metil-l, 3-propanodiol, tetrasulfato de 1, 3, 5, 7-heptanotetraol, pentasulfato de 1, 3, 5, 7, 9-nonano; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. Otros compuestos aniónicos sulfatados que se contemplan para uso en la invención incluyen la forma acida de trisulfato de 20 2-amino-2-hidroximetil-l, 3-propanodiol, disulfato de 2- benciloxi-1, 3-propanodiol, sulfato del ácido 3- hidroxipropilsulfámico, disulfato de 2, 2 ' -iminoetanol, disulfato del ácido N, N-bis (2-hidroxietil) sulfámico; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. 25 Los compuestos aniónicos sulfatados, heterocíclicos preferidos incluyen ácido 3- (N-morfolino) propansulfúrico; y el ácido tetrahidrotiofen-1, l-dióxido-3, 4-dioldisulfúrico y las sales aceptables para uso farmacéutico de loa mismos . La invención además contempla el uso de pro-fármacos que se convierten in vivo en los compuestos aniónicos utilizados en los métodos de la invención (véase, por ejemplo, R. B. Silverman, 1992, "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action", Academic Press, C. 8) . Estos pro-fármacos pueden ser utilizados para modificar la biodistribución (por <______. 10 ejemplo, para permitir que los compuestos que normalmente no cruzarían la barrera hematoencefálica crucen la barrera hematoencefálica) o la farmacocinética del compuesto aniónico. Por ejemplo, un grupo aniónico, por ejemplo, un sulfato o sulfonato, puede ser esterificado, por ejemplo, 15 con un grupo metilo o un grupo fenilo para producir un éster sulfato o sulfonato. Cuando el éster sulfato o sulfonato se administra a un individuo, el éster se disocia, de manera enzimática o no enzimática, por reducción o hidrólisis, para mostrar el grupo aniónico. Tal éster puede ser cíclico, por 20 ejemplo, un "sulfato o sultone [sic] cíclico, o dos o más porciones aniónicas pueden ser esterificados a través de un enlace éster. Los compuestos aniónicos cíclicos ejemplares incluyen, por ejemplo, el ácido 2-sulfobenzóico, propansultone, butansultone, sulfato de 1, 3-butanodiol 25 cíclico, ácido a-cloro-a-hidroxi-O-toluensulfónico sultone [sic] y 2,2-dióxido de 6-nitronaft-[l, 8cd]-l, 2-oxatiol . En una modalidad preferida, el pro-fármaco es un sulfato o sultone cíclico. Un grupo aniónico puede ser esterificado con porciones (por ejemplo, esteres aciloximetilo) que se desdoblan para revelar un compuesto aniónico intermedio que posteriormente se descompone para producir el compuesto aniónico activo. En otra modalidad, el pro-fármaco es una forma reducida de un sulfato o sulfonato, por ejemplo, un tiol, que se oxida in vivo al compuesto aniónico. Además, una porción aniónica puede ser esterificada a un grupo que sea activamente transportado in vivo, o que sea captado selectivamente por órganos específicos. El éster puede ser seleccionado para permitir orientación específica de los compuestos aniónicos hacia órganos específicos, como esta descrito más adelante para las porciones portadoras. Las moléculas portadoras útiles en los compuestos aniónicos incluyen moléculas portadoras previamente descritas, por ejemplo, carbohidratos, polímeros, péptidos, derivados peptidicos, grupos alifáticos, grupos aliciclicos, grupos heterdcícucos, grupos aromáticos o combinaciones de los mismos. Los polímeros convenientes incluyen vinil sustituido y no sustituido, acrilo, estireno y polímeros y copolimeros obtenidos de carbohidratos y sales de los mismos. Las moléculas portadoras preferidas, incluye un grupo alquilo inferior, un grupo heterociclico, un disacárido, un polimero o un péptido o derivado peptidico. Las moléculas portadoras útiles en la presente invención también pueden incluir porciones que permitan al compuesto aniónico ser suministrado en forma selectiva a un órgano u órganos elegidos. Por ejemplo, si se desea suministrar un compuesto taniónico [sic] al cerebro, la molécula portadora puede incluir una porción capaz de orientar el compuesto aniónico al cerebro, ya sea por transporte activo o pasivo (una "porción orientadora"). Como ejemplo, la molécula portadora puede incluir una porción redox, como se describe en, por ejemplo, las Patentes Estadounidenses 4,540,564 y 5,389,623 de Bodor. Estas patentes describen fármacos vinculados a las porciones dihidropiridina que pueden ingresar al cerebro, donde éstas se oxidan a una especie piridinio con carga que es atrapada en el cerebro. Asi pues, el medicamento se acumula en el cerebro. Los compuestos piridina/dihidropiridina ejemplares de la invención incluyen 1- (3-sulfopropil) -1, 4-dihidropiridina, 2- (nicotinilamido) -etansulfonato de sodio y 1- (3-sulfopropil) -piridinio betaina. Otras porciones portadoras incluyen compuestos, como aminoácidos o tiroxina, que pueden ser transportadas de manera pasiva o activa in vi vo . Un compuesto ejemplar es fenilalanitaurina, en el cual la molécula de taurina se conjuga a una fenilalanina (un aminoácido grande, neutro) . Esta porción portadora puede ser eliminada por via metabólica in vivo, o puede permanecer intacta como parte de un compuesto aniónico activo. Los miméticos estructurales de los aminoácidos (y otras porciones de transporte activo) • también son útiles en la invención (por ejemplo, 1- 5 (aminometil) -1- (sulfometil) -ciciohexano) . Otros miméticos de aminoácido ejemplares incluyen p- (sulfometil) fenilalanina, p- (1, 3-disulfoprop-2-il) fenilalanina y 0- (1, 3-disulfoprop-2- il) tirosina. Se conocen múltiples porciones orientadoras, e incluyen, por ejemplo, asialoglucoproteínas (véase por 10 ejemplo, Wu, Patente Estadounidense No. 5,166,320) y otros ligandos que son transportados a las células a través de la endocitosis mediada por receptores (véase en lo siguiente para otros ejemplos de porciones orientadoras que pueden estar unidas en forma covalente o no covalente a una 15 molécula portadora) . Además, los compuestos aniónicos de la invención pueden unirse a proteínas amiloidogénicas, por ejemplo, el péptido Ab, en la circulación y asi ser transportadas al sitio de acción. Las estrategias de orientación y de los pro-fármacos 20 antes descritas pueden estar combinadas para producir un compuesto aniónico que puedan ser transportado como un profármaco a un sitio de acción deseado y luego desenmascarado para mostrar un compuesto aniónico activo. Por ejemplo, la estrategia de dihidropirina de Bodor (véase supra) puede ser 25 combinada con un pro-fármaco cíclico, como por ejemplo en el compuesto 2- (1-metil-l, 4-dihidronicotinil) amidometil-propansultone [sic]. En una modalidad, el compuesto aniónico en las composiciones farmacéuticas es un polimero sulfonado, por ejemplo, poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico-co-acrilonitrilo) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfónico-co-estireno) ; poli (ácido vinilsulfónico) ; poli (ácido 4-estirensulfónico de sodio); un derivado sulfonado de poli (ácido acrilico) ; un derivado sulfonado de poli (acrilato de metilo); un derivado sulfonado de poli (metacrilato de metilo); y un derivado sulfonado de poli (alcohol vinílico); y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos. En otra modalidad, el compuesto aniónico en las composiciones farmacéuticas es un polimero sulfatado, por ejemplo, poli (ácido 2-acrilamldo-2-metil-l-propansulfúrico) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfúrico-co-acrilonitrilo) ; poli (ácido 2-acrilamido-2-metil-l-propansulfúrico-co-estireno) ; poli (ácido vinilsulfúrico) ; poli (4-estirensulfato de sodio); un derivado sulfato de poli (ácido acrílico); un derivado sulfato de poli (acrilato de metilo); un derivado sulfato de poli (metacrilato de metilo); y un derivado sulfato de poli (alcohol vinilico) ; y las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos.

El compuesto aniónico puede también tener la estructura: en la cual Z es XR 2 ó R4 , R1 y R2 son cada uno independientemente hidrógeno, un grupo alifático sustituido o no sustituido (de preferencia una porción alifática de cadena lineal o ramificada teniendo desde 1 hasta 24 átomos de carbono en la cadena; o una porción alifática cíclica no sustituida o sustituida teniendo desde 4 hasta 7 átomos de carbono en el anillo alifático; los grupos alifáticos y alifáticos cíclicos preferidos son grupos alquilo, de mayor preferencia alquilo inferior) , un grupo arilo, un grupo heterociclico o un catión formador de sal; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo, o un catión formador de sal; X es, 4 - independientemente para cada aparición, O ó S; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo o amino; Y 1 y Y2 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno, (por ejemplo, F, Cl, Br ó I)," alquilo inferior, amino (incluido alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino) , hidroxi, alcoxi o ariloxi; y n es un entero desde 0 a 12 (de mayor preferencia de 0 a 6, de mayor preferencia 0 ó 1) . Estos compuestos están descritos en la Solicitud Estadounidense serie No. 08/912,574, los contenidos de la cual se incorporan en la presente como referencia. Los compuestos aniónicos preferidos para uso en la invención incluyen compuestos en los cuales R 1 y R2 son cationes formadores de sales aceptables para uso farmacéutico. Se apreciará que la estequiometria de un compuesto aniónico para un catión formador de sal (si lo hay) variará dependiendo de la carga de la porción aniónica del compuesto (si lo hay) y la carga del contraión. En una modalidad particularmente preferida, R 1, R2 y R3 son cada uno -=_ ?o independientemente un catión sodio, potasio o calcio. En ciertas modalidades en las cuales cuando menos R 1 ó R2 es un grupo alifático, el grupo alifático tiene entre 1 y 10 átomos de carbono en la cadena lineal o ramificada, y de mayor preferencia es un grupo alquilo inferior. En otras 15 modalidades en las cuales cuando menos R 1 ó R2 es un grupo alifático, el grupo alifático tiene entre 10 y 24 átomos de carbono en la cadena lineal o ramificada. En ciertas modalidades preferidas, n es 0 ó 1; de mayor preferencia, n es 0. En ciertas modalidades preferidas, de los compuestos 20 terapéuticos," Y 1 y Y2 son cada uno hidrogeno. En ciertas modalidades preferidas, el compuesto aniónico de la invención puede tener la estructura: 25 en la cual R 1, R2 , R 3, Y 1, Y2 X y n son como ya se definió . En las modalidades más preferidas , el compuesto aniónico de l a invención puede tener la estructura : en la cual R 1, R2, R3, Y1, Y2 y X son como ya se definió, Ra y Rb son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo, arilo o heterociclilo, ó Ra y b, tomados junto con el átomo de _at 10 nitrógeno al cual están unidos, forman una porción cíclica teniendo desde 3 hasta 8 átomos en el anillo, y n es un entero desde 0 a 6. En ciertas modalidades preferidas, Ra y Rb son cada uno hidrógeno. En ciertas modalidades preferidas, un compuesto de la invención consiste en un a-aminoácido (o 15 éster de un a-aminoácido) , de mayor preferencia un L-a- aminoácido o éster del mismo. Los grupos Z, Q, R1, R2, R3, Y1, Y2 y X son cada uno independientemente seleccionados de modo que no se impida la biodistribución del compuesto aniónico para un sitio elegido 20 propuesto manteniendo al mismo tiempo la actividad del compuesto aniónico. Por ejemplo, el número de los grupos aniónicos (y la carga total del compuesto terapéutico) no debe ser tan grandes como para inhibir el paso de una barrera anatómica, como puede ser una membrana celular, o 25 entrar a través de una barrera biológica, como puede ser la barrera hematoencefálica, en situaciones donde se desean estas propiedades. Por ejemplo, se ha reportado que los esteres de fosfonoformato tienen propiedades de biodistribución diferentes de, y en algunos casos superiores a, las propiedades de biodistribución de fosfonoformato (véase, por ejemplo, las Patentes Estadounidenses Nos. 4,386,081, y 4,591,583 de Helgstrand y col., y la Patente Estadounidense No. 5,194,654 y 5,463,092 de Hostetler y col) . Asi pues, en ciertas modalidades, cuando menos uno de R 1 ó R2 es un grupo alifático (de mayor preferencia un grupo alquilo) , en el cual el grupo alifático tiene entre 10 y 24 átomos de carbono en la cadena lineal o ramificada. El número, longitud y grado de ramificación de las cadenas alifáticas pueden ser seleccionados para proporcionar una característica deseada,, por ejemplo, lipofilicidad. En otras modalidades, cuando menos uno de R 1 o R2 es un grupo alifático (de mayor preferencia un grupo alquilo) , en el cual el grupo alifático tiene entre 1 y 10 átomos de carbono en la cadena lineal o ramificada. Nuevamente, el número, longitud y grado de ramificación de las cadenas alifáticas pueden ser seleccionados para proporcionar una característica deseada, por ejemplo, lipofilicidad o facilidad para desdoblar el éster por enzimas. En ciertas, modalidades, un grupo alifático preferido es un grupo etilo. En otra modalidad, el compuesto aniónico de la invención puede tener la estructura : en la cual G representa hidrogeno o uno o más sustituyentes sobre el anillo arilo (por ejemplo, alquilo, arilo, halógeno, amino y similares) y L es un grupo alquilo sustituido (en ciertas modalidades, de preferencia un alquilo inferior) , de mayor preferencia un alquilo sustituido con hidroxi o un alquilo sustituido con una base nucleósido. En ciertas modalidades, G es hidrógeno o un grupo donador de electrones. En las modalidades en las cuales G es un grupo captador de electrones, G es de preferencia un grupo captador de electrones en la posición meta. El término "grupo captador de electrones" es conocido en la técnica, y, como se utiliza en la presente, se refiere a un grupo que tiene una captación de electrones mayor que el hidrógeno. Se conoce una variedad de grupos captadores de electrones, e incluye halógenos (por ejemplo, flúor, cloro, bromo y yodo"), nitro, ciano y similares. Del mismo modo, término "grupo donador de electrones", como se utiliza en la presente, se refiere a un grupo que es menos captador de electrones que el hidrógeno, en las modalidades en las cuales G es un grupo donador de electrones, G puede estar en posición orto, meta o para.

Ciertas modalidades preferidas, L es una porción seleccionada del grupo que consiste en: La Tabla 1 menciona los datos pertinentes a la caracterización de estos compuestos utilizando las técnicas reconocidas . 15 Tabla 1 COMPUESTO 31P NMR 13? N R FAB-MS IVa -6.33(DMS0-d6) 60.97 CH20H(d, J=6Hz) 245.2 66.76 CHOH(d, J=7.8Hz) 121.65, 121.78, 121.99, 125.71, 129.48, 129.57, 126.43 CH Aromático 134.38 Anilma C-N 150.39 Fentl C-0(d, J=7Hz) 171.57 P-C=0(d, J=234Hz) IVb -6.41(DMSO-d6) 13.94 CH3 456 22.11, 24.40, 28.56, 28.72, 28.99, <_____ 10 29.00, 31.30, 33.43. <CH2).?" 65.03 CH2-O (°) 66.60 C?l2-OP(d, J=5.6Hz) 67.71 CH2-OH(d, J=6 Hz) 121.73, 121.10, 125.64, 126.57, 129.40, 129.95, CH Aromático 134.04 Anilina C-N 150.31 Fend C-0 15 171.44 P-C-0(d, J=6.7 Hz) 172.83 O-CO rvc -6.46(DMSO-d6) 13.94 CH3 471 22.11, 25.10, 28.68, 28.72, 28.85, 29.00, 30.76, 31.31, 32.10, -(CH2)10- 43.36 CH2-S 20 68.43 CH2-OH 68.43 CH-OH(d, J=6.3 Hz) 68.76 P-0-CH2-9d, J=5.8 Hz) 121.75, 122.03, 125.62, 126.37, 129.30, 129.53, CH Aromático 134.23 Anilina C-N 150.37 Fenil C-0(d, 5=6.7 Hz) 171.47 P-C=0(d, J=234.0 Hz) 25 198.47 S-C=0 Tabla 1 (Continuación) COMPUESTO 31P NMR 13C M FAB- SI- IVd -6.61(DMSO-d6) 13.94 CH3 416 22.06, 25.14, 28.24, 28.35, 31.09, 32.14 -CH2)6- 43.40 CH2-S 68.50 P-0-CH -(d, J=5.8 Hz) 68.77 CH-OH(d, 6.4 Hz) 121.78, 122.59, 125.69, 127.06, _______ 10 129.43, 129.59 CH Aromático 133.39 Anilina C-N 150.38 Fenil C-0(d, J=6.7 Hz) 171.47 P-C=0(d, J=234.4 Hz) 198.54 S-C=0 IVe -5.76(D20) N/A N/A 15 IVf -7.00(DMSO-d6) N/A N/A IVg -6.60(DMSO-D6) 70.84 CH2-OH 321 72.17 CH-OH 121.68, 121.79, 121.85, 125.71 127.10, 20 127.92, 129.36, 129.50, 129.59 CH Aromático 134.51 Anilina C-N 142.34 C.-CH Aromático 150.37 Fenil C-0(d, J=6.2 Hz) 171.59 P-CO(d, J=232.6 Hz) 25 Se observará que la estructura de algunos compuestos aniónicos de esta invención incluye átomos de carbono asimétricos. Se debe entender en consecuencia que los isómeros (por ejemplo, enantiómeros y dias-terómeros) que surgen de esta asimetría están incluidos dentro del alcance de esta invención. Estos isómeros pueden ser obtenidos en forma prácticamente pura por técnicas de separación convencionales y por síntesis con control estérico. Para los propósitos de esta solicitud, a menos que se señale expresamente lo contrario, un compuesto aniónico debe ser construido para incluir los estereoisómeros R ó S en cada centro quiral . En ciertas modalidades, un compuesto aniónico de la invención contiene un catión (es decir, en ciertas modalidades, cuando menos uno de R 1, R2 ó R3 es un catión) . Si el grupo catiónico es hidrógeno, H , entonces el compuesto aniónico es considerado un ácido, por ejemplo, ácido fosfonofórmico. Si el hidrógeno es reemplazado por un ion metálico o su equivalente, el compuesto aniónico es una sal del ácido. Las sales aceptables para uso farmacéutico del compuesto aniónico están dentro del alcance de la invención.

Por ejemplo, cuando menos uno de R 1, R2 ó R3 puede ser un metal alcalino aceptable para uso farmacéutico (como Li, Na ó K) , un catión amonio, catión alcalinotérreo (por ejemplo, Ca2+, Ba2+, Mg2+) , catión de valencia superior o contraión policatiónico (por ejemplo, un catión poliamonio) . (Véase, por ejemplo, Berge y col., (1977) "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci . 66: 1-19) . Se apreciará que la estequiometria de un compuesto aniónico para un contraión formador de sal (si lo hay) variará dependiendo de la carga de la porción aniónica del compuesto (si lo hay) y la carga del contraión. Las sales aceptables para uso farmacéutico preferidas incluyen la sal de sodio, potasio o calcio, pero también se contemplan otras sales dentro de su característica de aceptable para uso farmacéutico. El término "esteres aceptables para uso farmacéutico" se refiere a los productos esterificados relativamente no tóxicos de los compuestos aniónicos de la presente invención. Estos esteres pueden ser preparados in si t u durante el aislamiento final y purificación de los compuestos aniónicos o haciendo reaccionar por separado el compuesto aniónico purificado y su forma acida libre o hidroxilo con un agente esterificador adecuado; cualquiera de los cuales son métodos conocidos por los expertos en la técnica. Los "ácidos carboxilicos y ácidos fosfónicos pueden ser convertidos en esteres de acuerdo con los métodos bien conocidos para los expertos en la técnica, por ejemplo, a través del tratamiento con un alcohol en presencia de un 3 catalizador. Un grupo éster preferido (por ejemplo, cuando R es alquilo inferior) es un grupo etil éster.

El término "alquilo" se refiere a los grupos alifáticos saturados, incluidos los grupos alquilo de cadena lineal, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (aliciclicos), grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo y grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo. En las modalidades preferidas, el alquilo de cadena lineal o de cadena ramificada tiene 30 o menos átomos de carbono en su cadena principal (por ejemplo, C1-C30 para la cadena lineal, C3-C30 para la cadena ramificada) y de mayor preferencia 20 o menos. De la misma manera, los cicloalquilos preferidos tienen desde 4 hasta 10 átomos de carbono en su estructura de anillo, y de mayor preferencia tienen 4-7 átomos de carbono en la estructura de anillo. El término "alquilo inferior" se refiere a los grupos alquilo que tienen desde 1 hasta 6 carbonos en la cadena, y a los cicloalquilos que tienen desde 3 hasta 6 carbonos en la estructura del anillo.

Además, el término "alquilo" (incluido "alquilo inferior") como se utiliza en la especificación y las cláusulas se propone para incluir "alquilos no sustituidos" y "alquilos "sustituidos", este último de los cuales se refiere a las porciones alquilo teniendo sustituyentes que reemplazan a un hidrógeno o uno o más carbonos de la cadena principal hidrocarburo. Estos sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, halógeno, hidroxilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ariloxicarboniloxi, carboxilato, alquilcarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquiltiocarbonilo, alcoxi, fosfato, fosfonato, fosfinato, ciano, amino (incluido alquilamino, • dialquilamino, arilamino, diarilamino y alquilarilamino) , 5 acilamino (incluido alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoilo y ureido) , amidino, imino, sulfhidrilo, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfato, sulfonato, sulfamoilo, sulfonamido, nitro, trifluorometilo, ciano, azido, heterociclilo, aralquilo o una porción aromática o 10 heteroaromática. Los expertos en la técnica comprenderán que las porciones sustituidas en la cadena hidrocarburo pueden en si mismas ser sustituidas, si es adecuado, los cicloalquilos pueden además ser sustituidos, por ejemplo, con los sustituyentes antes descritos. Una porción 15 "aralquilo" es un alquilo sustituido con un arilo (por ejemplo, fenilmetil (bencilo) ) . El término "alcoxi", como se utiliza en la presente, se refiere a una porción que tiene la estructura -O-alquilo, en la cual la porción alquilo es como se describe antes. 20 El término "arilo" como se utiliza en la presente incluye grupos aromáticos de un solo anillo de 5 y 6 miembros que puede incluir desde 0 hasta 4 heteroátomos, por ejemplo, benceno, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol, triazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina y 25 pirimidina, y similares. Los grupos arilo también incluyen grupos aromáticos fusionados policilicos como pueden ser naftilo, quinolilo, indolilo y similares. El anillo aromático puede estar sustituido en una o más posiciones del anillo con tales sustituyentes, por ejemplo, como ya se describió para los grupos alquilo. Los grupos alquilo preferidos incluyen grupos fenilo sustituidos y no sustituidos. El término "ariloxi", como se utiliza en la presente, se refiere aun grupo que tiene la estructura -O-arilo, en el cual la porción arilo es como ya se definió. El término "amino", como se utiliza en la presente, se refiere a una porción no sustituida o sustituida de la fórmula -NRaRb, en la cual Ra y Rb son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo, arilo o heterociclilo, ó Ra y Rb, tomados junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman una porción cíclica teniendo desde 3 hasta 8 átomos en el anillo. Asi pues, el término "amino" se propone para incluir porciones amino cíclicas, como son los grupos piperidinilo o pirrolidinilo, a menos que "se establezca de otro modo. Un "grupo amino sustituido con amino" se refiere a un grupo amino en el cual cuando menos uno de Ra ó Rb esta además sustituido con un grupo amino . En una modalidad preferida, R 1 ó R2 pueden ser (para cuando menos una aparición) una porción alifática de cadena larga. El término "porción alifática de cadena larga" como se utiliza en la presente, se refiere a una porción que tiene la porción alifática de cadena lineal o ramificada (por ejemplo, una porción alquilo o alquenilo) que tiene desde 10 hasta 20 carbonos en la cadena alifática, por ejemplo, la porción alifática de cadena larga es una cadena alifática de un ácido graso (de preferencia un ácido graso que se encuentra en la naturaleza) . Las porciones alifáticas de cadena larga representativas incluyen cadenas alifáticas de ácido esteárico, ácido oleico, ácido linolénico y similares. En ciertas modalidades, el compuesto aniónico de la invención puede tener la estructura: en la cual R 1 R2 son cada uno independientemente hidrogeno, un grupo alifático, (de preferencia una porción alifática de cadena ramificada o lineal teniendo desde 1 hasta 24 átomos de carbono, "de mayor preferencia desde 10-24 átomos de carbono, en la cadena; o una porción alifática cíclica no sustituida o sustituida teniendo desde 4 hasta 7 átomos de carbono en el anillo alifático) , un grupo arilo, un grupo 3 heterocíclico o un catión formador de sal; R es hidrógeno, 1 2 alquilo inferior, arilo, o un catión formador de sal; Y y Y son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno (por ejemplo, F, Cl, Br ó I), alquilo inferior, amino, hidroxi, alcoxi o ariloxi; y n es un entero desde 0 a 12. Los compuestos aniónicos preferidos para uso en la invención incluyen compuestos en los cuales R 1 y R2 son cationes formadores de sal aceptables para uso farmacéutico. En una modalidad particularmente preferida, R 1, R2 y R3 son cada uno independientemente un catión sodio, potasio o calcio, n es 0. En ciertas modalidades, preferidas de los compuestos terapéuticos, Y 1 y Y2 son cada uno hidrógeno. Los compuestos aniónicos particularmente preferidos son sales de fosfonoformato. El fosfonoformato de trisodio (foscarnet sodio o Foscavir® esta a la disposición en el comercio (por ejemplo, de Astra) , y su farmacología clínica ha sido investigada (véase, por ejemplo, "Physician' s Desk Reference", 51a ed., pp. 541-545 (1997)). En otra modalidad, el compuesto aniónico utilizado en la invención puede ser un aminofosfonato, un bifosfonato, un derivado fosfonocarboxilato, un derivado fosfonato o un fosfonocarbohidrato.

Formulaciones aceptables para uso farmacéutico En el método de la invención, el compuesto aniónico puede ser administrado en una formulación aceptable para uso farmacéutico. La presente invención pertenece a cualquiera de las formulaciones aceptables para uso farmacéutico, como son los polímeros sintéticos o naturales en la forma de complejos macromoleculares, nanocápsulas, microesferas o perlas, y formulaciones a base de lipidos que incluyen emulsiones aceite en agua, micelas, micelas combinadas, vesículas de membrana sintética y eritrocitos nuevamente obturados . En una modalidad, las formulaciones farmacéuticamente aceptables consisten en una matriz polimérica. Los términos "polimero" ó "polimérico" son reconocidos en la técnica e incluyen un sistema estructural que consiste en unidades monoméricas repetidoras que son capaces de suministrar un compuesto aniónico, de modo que ocurra el tratamiento de un estado elegido. Los términos también incluyen copolimeros y homopolimeros, por ejemplo, de origen sintético o natural. Los polímeros lineales, polímeros - ramificados y polímeros reticulados también están incluidos.

Por ejemplo, los materiales poliméricos convenientes para formar la formulación aceptable para uso farmacéutico y que se emplean en la presente invención incluyen polímeros de origen natural como albúmina, alginato, derivados de celulosa, colágena, fibrina, gelatina y polisacáridos, asi como polímeros sintéticos como poliésteres (PLA, PLGA) , polietilen glicol, poloxómeros, polianhídridos y plurónicos . Estos polímeros son biocompatibles con el sistema nervioso, incluido el sistema nervioso central, son biodegradables dentro del sistema nervioso central sin producir subproductos de degradación tóxicos y poseen la capacidad de modificar la forma y duración de liberación del compuesto aniónico manipulando las características cinéticas del polímero. Como se utiliza en la presente, el término "biodegradable" significa que el polimero se degradará con el tiempo mediante la acción de enzimas, por acción hidrolitica y/o por otros mecanismos semejantes en el cuerpo del individuo. Como se utiliza en la presente, el término "biocompatible" significa que el polimero es compatible con un tejido vivo o un organismo vivo no siendo tóxico o perjudicial y no causando un rechazo inmunológico. Los polímeros pueden ser preparados utilizando los métodos conocidos en la técnica (Sandler, S. R.; Karo, W. Polymer Syntheses; Harcourt Brace : Boston, 1994; Shalaby, W.; I ada, Y.; Langer, R.; Williams, J. Polymers of Biological and Biomedical Significance (ACS Symposi um Series 540; American Chemical Society: Washington, DC, 1994) . Los polímeros pueden ser diseñados para ser flexibles; la distancia entre las cadenas laterales bioactivas y la longitud de un enlazador entre la cadena polimérica y el grupo pueden ser controlados. Otros polímeros y métodos convenientes para su preparación están descritos en las Patentes Estadounidenses Nos. 5,455,044 y 5,576,018, los contenidos de las cuales se incorporan en la presente como referencia. Las formulaciones poliméricas de preferencia se forman mediante la dispersión de este compuesto aniónico dentro del polimero licuado, como está descrito en la Patente Estadounidense No. 4,883,666, las enseñanzas de la cual se incorporan en la presente por referencia, o por métodos tales como la polimerización en masa, polimerización interfacial, polimerización en solución y polimerización de anillos como está descrito en Odian G., Principies of Polimerization and ring opening polimerization, 2a ed. , John Wiley & Sons, New York, 1981, los contenidos del cual se incorporan en la presente como referencia. Las propiedades y características de las formulaciones se controlan variando parámetros tales como la temperatura de reacción, concentraciones del polimero y el compuesto aniónico, los tipos de disolventes utilizados y los tiempos de reacción. Además del compuesto aniónico y el polimero aceptable para uso farmacéutico, la formulación aceptable para uso farmacéutico "utilizado en el método de la invención puede contener portadores y/o excipientes aceptables para uso farmacéutico, adicionales. Como se utiliza en la presente, "portador aceptable para uso farmacéutico" incluye cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacterianos y antimicóticos, agentes isotónicos y retardadores de la absorción y similares que sean fisiológicamente compatibles. Por ejemplo, el portador puede ser conveniente para inyección en • el fluido cerebroespinal. Los excipientes- incluyen los 5 estabilizadores y desintegrantes aceptables para uso farmacéutico . El compuesto aniónico puede estar encapsulado en uno o más polímeros aceptables para uso farmacéutico, para formar una microcápsula, microesfera o microparticula, términos 10 utilizados en la presente de manera indistinta. Las microcápsulas, microesferas y microparticulas son los polvos de flujo libre tradicionales que consisten en partículas esféricas de 2 milímetros o menos de diámetro, por lo común 500 mieras o menos de diámetro. Partículas menores que una 15 miera se conocen tradicionalmente como nanocápsulas, nanoparticulas o nanoesferas. Para la mayor parte, la diferencia entre una microcápsula y una nanocápsula, una microesfera y una nanoesfera o micropartícula y nanopartícula es el tamaño, generalmente hay poca, si es que 20 hay alguna, diferencia entre la estructura interna de los dos. En un aspecto de la presente invención, el diámetro promedio es menor que aproximadamente 45 mieras, de preferencia menor que 20 mieras y de mayor preferencia entre aproximadamente 0.1 y 10 mieras. 25 En otra modalidad, las formulaciones aceptables para uso farmacéutico consisten en formulaciones a base de lipidos. Cualquiera de los sistemas de suministro de medicamentos basado en lípidos, conocido, puede ser utilizado en la práctica de la invención. Por ejemplo, los liposomas multivesiculares (MVL) , liposomas multilamelares (también conocidos como vesículas multilamelares ó "MLV"), liposomas unilamelares, incluidos los liposomas unilamelares pequeños (también conocidos como vesículas unilamelares o "SUV") y grandes liposomas unilamelares (también conocidos como vesículas unilamelares grandes ó "LUV") , todos pueden ser utilizados a condición de que se pueda establecer una velocidad de liberación prolongada del compuesto aniónico encapsulado. En una modalidad, la formulación a base de lipidos puede ser un sistema de liposoma multivesicular . Los métodos para elaborar sistemas de suministro de medicamentos de liposomas vesiculares de liberación controlada están descritos en la solicitud del PCT serie Nos. US96/11642, US94/12957 y US94/04490, los contenidos de las cuales se incorporan en la presente como referencia. La compo'Sición de la vesícula de membrana sintética por lo común es una combinación de fosfolipidos, por lo común en combinación con esteroides, especialmente colesterol. También es posible utilizar otros fosfolipidos u otros lipidos . Los ejemplos de los lipidos útiles en la producción de vesículas de membrana sintética incluyen fosfatidilgliceroles, fosfatidilcolinas, fosfatidilserinas, fosfatidiletanolaminas, esfingolípidos, cerebrósidos y gangliósidos . Los fosfolipidos preferidos incluyen fosfatidilcolina de huevo, dipalmitoilfosfatidilcolina, diestearoilfosfatidilcolina, dioleoilfosfatidilcolina, dipalmitoilfosfatidilglicerol y dioleoilfosfatidilglicerol. En la preparación de las vesículas a base de lipidos que contienen un compuesto aniónico, variables tales como la eficacia de la encapsulación del compuesto aniónico, labilidad del compuesto aniónico, homogeneidad y tamaño de la población de vesículas resultante, la relación compuesto aniónico a lípido, permeabilidad, inestabilidad de la preparación y aceptabilidad farmacéutica de la formulación deben ser consideradas (véase Szoka, y col., Annual Revi ews of Biophysics and Bioengineering, 9: 467, 1980; Deamer y - col., en Liposomes, Marcel Dekker, New York, 1983, 27; y Hope y col., Chem. Phys . Lipids, 40: 89, 1986, los contenidos de los cuales se incorporan en la presente como referencia) . " Administración de la formulación aceptable para uso fa macéutico En una modalidad, el compuesto aniónico se administra mediante la introducción al sistema nervioso central del individuo, por ejemplo, en el fluido cerebroespinal del individuo. En ciertos aspectos de la invención, el compuesto aniónico se introduce intratecalmente, por ejemplo, en un ventrículo cerebral, el área lumbar o la cisterna magna. Las formulaciones aceptables para uso farmacéutico pueden prepararse fácilmente en vehículos acuosos y ser introducidas a través de agujas hipodérmicas tradicionales o utilizando bombas para vía intravenosa. Antes de la introducción, las formulaciones pueden ser esterilizadas con, de preferencia, radiación gamma o esterilización por haz de electrones, como se describe en la Patente Estadounidense No. 436,742, el contenido de la cual se incorpora en la presente como referencia. En otra modalidad de la invención, la formulación del compuesto aniónico se administra a un individuo en forma intratecal. Como se utiliza en la presente, el término "administración intratecal" se propone para incluir el suministro de una formulación del compuesto aniónico directamente al fluido cerebroespinal de un individuo, mediante las- técnicas que incluyen inyección cerebro ventricular lateral a través de punción con cortadora o de cisterna o lumbar o similares (descritos en Lazorthes y col., Advances in Drug Delivery Systems and Applications in Neurosurgery, 143-192y Oamaya y col., Cáncer Drug Delivery, 1: 169-179, los contenidos del cual se incorporan en la presente como referencia) . El término "región lumbar" se propone para incluir el área entre la tercera y cuarta vértebras lumbares (la parte inferior de la espalda) . El término "cisterna magna" se propone para incluir el área donde termina el cráneo y comienza la médula espinal en la parte posterior de la cabeza. El término "ventrículo cerebral" se propone para incluir las cavidades en el cerebro que son continuas con el canal central de la médula espinal. La administración de un compuesto aniónico a cualquiera de los sitios antes mencionados puede lograrse mediante inyección directa de la formulación del compuesto aniónico o mediante el uso de bombas para administración intravenosa. Para inyección, la formulación del compuesto aniónico de la invención puede ser formulada en soluciones líquidas, de preferencia en buffers compatibles con los líquidos fisiológicos como solución de Hank o solución de Ringer. Además, la formulación del compuesto aniónico puede ser formulada en forma sólida y redisuelta o suspendida inmediatamente antes de su uso. También se incluyen las formas liofiiizadas . La inyección puede ser, por ejemplo, en la forma de una inyección de bolo o por via intravenosa continua (por ejemplo, utilizando bombas para vía intravenosa) de la formulación del compuesto aniónico.

Duración y concentraciones de la administración En otra modalidad del método de la invención, la formulación aceptable para uso farmacéutico proporciona liberación prolongada, por ejemplo, "liberación lenta" del compuesto aniónico a un individuo durante cuando menos una, dos, tres o cuatro semanas después de que se administra al individuo la formulación aceptable para uso farmacéutico. Como se utiliza en la presente, el término "suministro prolongado" se propone para incluir el suministro continuo de un compuesto aniónico in vi vo durante un periodo de tiempo después de la administración, de preferencia cuando menos siete días, una semana o algunas semanas. La liberación prolongada del compuesto aniónico puede ser demostrada, por ejemplo, mediante el efecto terapéutico continuado del compuesto aniónico durante el tiempo (por ejemplo, la liberación prolongada del compuesto aniónico puede ser demostrada mediante la inhibición continua de la muerte de las células neuronales durante el tiempo) . De otro modo, la liberación prolongada del compuesto aniónico puede ser demostrada detectando la presencia del compuesto aniónico in vivo con el tiempo. En una modalidad, la formulación aceptable para uso farmacéutico proporciona liberación prolongada del compuesto aniónico a un individuo durante menos que 30 días después de que el compuesto aniónico se administra al individuo. Por ejemplo, la formulación aceptable para uso farmacéutico, por ejemplo, la formulación de "liberación lenta", puede proporcionar liberación prolongada del compuesto aniónico a un individuo durante una, dos, tres o cuatro semanas después de que el compuesto aniónico se administra al individuo. De otro modo, la formulación aceptable para uso farmacéutico puede proporcionar liberación prolongada del compuesto aniónico a un individuo durante más de 30 días después de que el compuesto aniónico se administra al individuo. La formulación farmacéutica utilizada en el método de la invención contiene una cantidad eficaz para uso terapéutico del compuesto aniónico. Una "cantidad eficaz para un efecto terapéutico" se refiere a una cantidad eficaz, a las dosis y durante los periodos de tiempo necesarios, para obtener el resultado deseado. Una cantidad eficaz para efectos terapéuticos del compuesto aniónico puede variar de acuerdo con los factores tales como estado de la enfermedad, edad y peso del individuo, y la capacidad del compuesto aniónico (solo o en combinación como uno o más de otros compuestos) para producir una respuesta deseada en el individuo. Los regímenes de dosificación pueden ser ajustados para proporcionar la respuesta terapéutica óptima. Una cantidad eficaz para efectos terapéuticos también es aquella en la que cualquier efecto tóxico o perjudicial del compuesto aniónico se considera respecto a los efectos terapéuticamente benéficos. Un intervalo no limitante para la concentración eficaz para efectos terapéuticos de un compuesto aniónico es 100 mM a 1 mM. Además se debe entender que para cualquier individuo específico, los regímenes de dosificación específicos deben ser ajustados con el tiempo de acuerdo con la necesidad individual y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración del compuesto aniónico y estos intervalos de dosificación establecidos en la presente con ejemplares solamente y no se pretende limitar el alcance o la práctica de la invención reclamada. Los compuestos preferidos de la invención incluyen sulfatos, sulfonatos, fosfatos, carboxilatos y compuestos que incluyen combinaciones de estos grupos funcionales. Los compuestos particularmente preferidos incluyen sulfatos y sulfonatos de alquilo inferior sustituidos y no sustituidos - (incluidos sin limitación: disulfato de 1, 4-butanodiol, 1,5- pentandisulfonato de sodio, taurino (2-amino-etansulfonato de sodio) y homotaurino (ácido 3-aminopropansulfónico) . Otros compuestos preferidos incluyen sulfonato de 3- (ciclohexilamino) -1-propano, 4- (2-hidroxietil) -1-piperazin- 1-etansulfonato, ácido 3- (N-morfolino) propansulfónico, tetrahidrotiofen-1, l-dióxido-3, 4-disulfato de sodio trihidratado, 2-hidroxibutan-l, sulfonato de sodio, 1,3,5- pentanotriol trisulfato de sodio, sulfato ácido de 2- aminoetilo, ácido fosfonofórmico, ácido fosfonoacético o índigo carmín. Un compuesto preferido es ácido 3-aminopropan sulfónico o una sal del mismo (véase el Ejemplo, infra) . • En otro aspecto, la invención proporciona un método para 5 inhibir un proceso inflamatorio (por ejemplo, un proceso inflamatorio debido a la presencia de, o la activación de macrofagos por una proteina o péptido amiloidogénico) . El método consiste en administrar a un individuo en necesidad del mismo por ejemplo, un individuo que tenga depósito 10 amiloide) una cantidad para efecto terapéutico de un compuesto aniónico, de modo que se inhiba el proceso inflamatorio, por ejemplo, mediante la inhibición de la activación de los macrofagos mediante una proteína o péptido amiloidogénico, como puede ser Aß. En una modalidad 15 preferida, el individuo es un individuo que sufre de enfermedad de Alzheimer. En ciertas modalidades, el compuesto aniónico es un compuesto representado por las fórmulas I ó II. Los compuestos terapéuticos preferidos incluyen sulfatos, sulfonatos, fosfatos, carboxilatos y 20 compuestos que incluyen combinaciones de estos grupos funcionales. Los compuestos particularmente preferidos incluyen sulfatos y sulfonatos de alquilo inferior sustituidos y no sustituidos (incluidos sin limitación: disulfato de 1, 4-butanodiol, 1, 5-pentandisulfonato de sodio, 25 taurino (2-amino-etansulfonato de sodio) y homotaurino (ácido 3-aminopropansulfónico) . Otros compuestos preferidos incluyen sulfonato de 3- (ciclohexilamino) -1-propano, 4- (2-hidroxietil) -1-piperazin-l-etansulfonato, ácido 3- (N-morfolino) propansulfónico, tetrahidrotiofen-1, l-dióxido-3, 4-disulfato de sodio trihidratado, 2-hidroxibutan-l, sulfonato de sodio, 1, 3, 5-pentanotriol trisulfato de sodio, sulfato ácido de 2-aminoetilo, ácido fosfonofórmico, ácido fosfonoacético o índigo carmín. Un compuesto preferido es el ácido 3-aminopropansulfónico o una sal del mismo.

Ej|emplo 1 Macrofagos (macrofagos provenientes de médula ósea -células RAW) fueron incubados en medio libre de suero con fibrillas Aß?-40 (Aß?_4o es un polipéptido que corresponde a los residuos 1-40 de la proteina Aß) (concentración final 2.5 µM) con o sin la presencia de lipopolisacáridos (LPS) (0.01 µg/ml) como un co-inductor de la activación. Los macrofagos fueron incubados durante la noche. Los sobrenadantes fueron cosechados y las citocinas inflamatorias TNFa, y IL-6, asi como óxido nítrico fueron medidos. El TNFa, IL-6 fueron medidos mediante un ELISA, mientras que el NO fue medido por el reactivo de Griess. Los controles negativos consistieron en células incubadas con LPS o Aß solo. El control positivo consistió en células incubadas con TÜPS y IFN? en concentraciones conocidas para inducir una activación óptima de estas células. Como se muestra en las Figuras 1 y 2, el ácido 3-aminopropansulfónico (presente en solución como la forma de sal) se encontró que bloquea aproximadamente 60 „ de la producción de TNFa inducida por Aß, mientras que la producción de IL-6 no se mostró afectada. La producción de NO también mostró ser inhibida por el ácido 3-aminopropansulfónico, mientras que este compuesto no pareció tener un efecto significativo sobre el TNFa y NO producidos por las células RAW en presencia de LPS e IFN?. Los contenidos de todas las referencias, patentes publicadas y solicitudes de patentes publicadas mencionadas en esta solicitud, incluidos los antecedentes, se incorporan en la presente como referencia.

Ejemplo 2 El siguiente ejemplo demuestra la capacidad de los compuestos de la invención para inhibir la activación de microglia inducida por Aß. Células THP-1 de microglia humana fueron cebadas con LPS (lipopolisacáridos) (0.25 µg/ml) y luego se incuban con una preparación 5 uM de péptido Aß fibrilar. La activación fue determinada midiendo la cantidad de IL-lß liberada en el sobrenadante del cultivo celular. La capacidad del compuesto para bloquear o inhibir el proceso de activación fue determinada comparando la cantidad de citosina (en este caso IL-lß) presente en el sobrenadante cuando las células fueron incubadas con un compuesto obtenido en el sobrenadante de las células control (incubadas con Aß) . Cuando las células fueron tratadas con un compuesto sulfonado, en este caso, ácido 3-aminopropansul fónico, una disminución importante (mostrada en la Figura 3) en la cantidad de IL-lß fue observada en una concentración de 10 M a 10 M, indicando inhibición de microglia. Los expertos en la técnica se darán cuenta o podrán averiguar utilizando no más que experimentación habitual, numerosos equivalentes a los procedimientos específicos aquí descritos. Estos equivalentes son considerados dentro del alcance de esta invención y están cubiertos por las siguiente cláusulas.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES Un método para inhibir la activación de macrofagos mediante una proteina o péptido amiloidogénico, consiste en: poner en contacto un macrofago en presencia de una proteína o péptido amiloidogénico con un compuesto aniónico, de modo que se inhiba la activación del macrofago. El método de la reivindicación 1, en donde el compuesto aniónico tiene la estructura: Q—[—Y~X+]n en donde Y~ es un grupo aniónico a pH fisiológico; Q es una molécula portadora; X es un grupo catiónico; y n es un entero seleccionado de modo que no se impida la biodistribución del compuesto para un sitio elegido propuesto manteniendo al mismo tiempo la actividad del compuesto. El método de la reivindicación 1, en donde el compuesto anióníco" tiene la estructura: en donde Z es XR2 o R4, R1 y R2 son cada uno independientemente hidrógeno, un grupo alifático sustituido o no sustituido, un grupo arilo, un grupo heterociclico, o un catión formador de sal; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo o un catión formador 4 de sal; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo o 5 amino; X es, independientemente de cada aparición, 0 ó S; Y 1 y Y2 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno, alquilo, amino, hidroxi, alcoxi o ariloxi; y n es un entero desde 0 a 12. 4. El método de la reivindicación 1, en donde el compuesto 0 aniónico se selecciona del grupo que consiste en disulfato de 1, 4-butanodiol, 1, 5-pentandisulfonato de sodio, taurino (2-amino-etansulfonato de sodio) y homotaurino (ácido 3-aminopropansulfónico) . 3- (ciclohexilamino) -1-propano, 4- (2-hidroxietil) -1-5 piperazin-1-etansulfonato, ácido 3- (N- morfolino) propansulfónico, tetrahidrotiofen-1 , 1-dióxido- 3, 4-disulfato de sodio trihidratado, 2-hidroxibutan- 1, sulfonato de sodio, 1, 3, 5-pentanotriol trisulfato de sodio, sulfato ácido de 2-aminoetilo, ácido p fosfonofórmico, ácido fosfonoacético o índigo carmín, las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos . 5. El método de la reivindicación 1, en donde el compuesto aniónico es ácido 3-aminopropansulfónico o una sal 5 aceptable para uso farmacéutico dei mismo. Un método para inhibir un proceso inflamatorio, consiste en: administrar a un individuo en necesidad del mismo una cantidad terapéutica eficaz de un compuesto amónico, de modo que se inhiba el proceso inflamatorio. El proceso de la reivindicación 6, en donde el compuesto aniónico tiene la estructura: Q—[—Y"X+]n en donde Y~ es un grupo aniónico a pH fisiológico; Q es una molécula portadora; X es un grupo catiónico; y n es un entero seleccionado de modo que no se impida la biodistribución del compuesto para un sitio elegido propuesto manteniendo al mismo tiempo la actividad del compuesto. El método de la reivindicación 6, en donde el compuesto aniónico tiene la estructura: en donde Z es XR o R , R y R son cada uno independientemente hidrógeno, un grupo alifático sustituido o no sustituido, un grupo arilo, un grupo heterocíclico, o un catión formador de sal; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo o un catión formador de sal; R es hidrógeno, alquilo inferior, arilo o amíno; X es, independientemente de cada aparición, O ó S; Y 1 y Y2 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno, alquilo, amino, hidroxi, alcoxi o ariloxi; y n es un entero desde 0 a 12. 9. El método de la reivindicación 6, en donde el compuesto aniónico se selecciona del grupo que consiste en disulfato de 1, 4-butanodiol, 1, 5-pentandisulfonato de sodio, taurino (2-amino-etansulfonato de sodio) y homotaurino (ácido 3-aminopropansulfónico) . 3- (ciclohexilamino) -1-propano, 4- (2-hidroxietil) -1- piperazin-1-etansulfonato, ácido 3- (N- morfolino) propansulfónico, tetrahidrotiofen-1, 1-dióxido- 3, 4-disulfato de sodio trihidratado, 2-hidroxibutan- 1, sulfonato de sodio, 1, 3, 5-pentanotriol trisulfato de sodio, sulfato . ácido de 2-aminoetilo, ácido fosfonofórmico, ácido fosfonoacético o índigo carmín, las sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos . 10. El método de la reivindicación 9, en donde el compuesto aniónico- es ácido 3-aminopropansulfónico o una sal del mismo . 11. El método de la reivindicación 9, en donde el individuo es un individuo que sufre de enfermedad de Alzheimer. 12. El método de la reivindicación 11, en donde el proceso inflamatorio se debe a la activación de macrofagos mediante una proteína o péptido amiloidogénico, o un fragmento de los mismos. El método de la reivindicación 12, en donde la proteína o péptido amiloidogénico es Aß.