MX2013008112A - Derivado de oxazina cristalino y sus uso como inhibidor de base. - Google Patents

Derivado de oxazina cristalino y sus uso como inhibidor de base.

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Abstract

La invención se refiere a la [3-((3R,6R)-5-amino-3,6-dimetil-6- trifluoro-metil-3,6-dihidro-2H-(1 ,4-oxazin-3-iI)-4-fluoro-fenil)- amida del ácido 5-ciano-3-metil-piridin-2-carboxílico: (Ver Formula) en forma cristalina, a su preparación, a su uso médico, y a medicamentos que comprenden este compuesto en forma cristalina para usarse en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.

Description

DERIVADO DE OXAZINA CRISTALI NO Y SU USO COMO IN H IBI DOR DE BAC E CAM PO DE APLICABI LIDAD I N DUSTRIAL La presente divulgación se refiere generalmente a [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- d ihid ro- 2 H- [1 ,4]oxazin-3- il)- 4- fluoro- fen il]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico cristalina . La presente divu lgación también se refiere en general a una composición farmacéutica que comprende [3-((3R .6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2 H-[1 ,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil-piridina- 2- carboxílico cristalina así como a métodos de uso de la forma cristalina en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, y métodos para obtener tal material cristalino.
ANTEC EDENTES La enfermedad de Alzheimer es u na enfermedad neurodegenerativa devastadora . Sus formas esporádicas afectan a u na población de edad avanzada (aumento vertiginoso en la incidencia en mayores de 75 años de edad) , además, hay varias formas familiares con un comienzo de la enfermedad en la cuarta o quinta década de vida. Patológicamente, se caracteriza por la presencia de placas seniles extracelulares, y ovillos neurofibrilares intracelu lares en el cerebro del paciente. El componente central de las placas sen iles son peq ueños péptidos amiloides de 4 kDa. Estos se generan mediante el procesamiento proteolítico de una proteína de transmembrana grande, proteína precursora amiloide (PPA). La escisión de la PPA mediante beta- secretasa (BACE- 1) libera un fragmento de PPA- beta soluble, mientras que el extremo C largo de 99- aminoácidos permanece atado a la membrana. Este fragmento C-terminal es posteriormente procesado proteolíticamente mediante la gamma- secretasa (un complejo multi- enzimático de membrana) para generar péptidos amiloides de diversa longitud, principalmente entre 40 y 42 aminoácidos de longitud (J Hardy, Selkoe DJ (2002) Science, 297 (5580) :353- 356).
Si, bajo condiciones patológicas, la generación de estos péptidos se produce a una tasa aumentada, o si su eliminación del cerebro se altera, el aumento de las concentraciones cerebrales de péptidos amiloides conduce a la formación de oligómeros, fibrillas y, finalmente, las placas (Farris W, ( 2007) Am.J. Pathol;. 171 (1) :241-251). Se ha demostrado, que la deposición de los péptidos amiloides y las placas en el cerebro es el primer evento registrable en la patogénesis de la enfermedad de Alzheimer, y que es el desencadenante de la pérdida de sinapsis, contactos sinápticos, y neuronas (Grimmer T, ( 2009) Neurobiology of Aging, 30 (12) :1902-1909). La atrofia cerebral causada por la pérdida masiva de neuronas es seguida por alteraciones en cognición, memoria, orientación y la capacidad para realizar las tareas de la vida diaria, es decir, la demencia clínicamente manifiesta (Okello A, (2009) Neurology, 73 (10): 754 - 760).
BACE- 1, también conocido como Asp2 o Memapsina 2, es una proteasa aspártica de transmembrana altamente expresada en las neuronas. Se co- localiza con su sustrato PPA en el aparato de Golgi y compartimentos endocíticos (Willem M, Lammich S, Haass C (2009) Semin. Cell Dev. Biol; 20 (2) :175- 182). Los estudios knock- out en ratones han demostrado la ausencia de formación de péptidos amiloides, mientras que los animales estén sanos y fértiles (Ohno M, (2007) Neurobiol. Dis.; 26 (1) :134- 145). La ablación genética de BACE- 1 en ratones que sobre-expresan PPA ha demostrado la ausencia de formación de placas y la reversión de los déficits cognitivos (Ohno M (2004) Neuron; 41 (1) :27- 33). Los niveles de BACE- 1 son elevados en los cerebros de los pacientes esporádicos con Enfermedad de Alzheimer (Hampel H, Shen Y (2009) Scand. J. Clin. Lab. Invest.; 69 (1) :8- 12).
En conjunto, estos hallazgos sugieren que la inhibición de BACE- 1 puede ser una estrategia terapéutica favorable para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un novedoso derivado cristalino de oxazina, es decir, [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil-6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]-amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalino que tiene una actividad inhibidora de BACE, su preparación, su uso médico y medicamentos que contienen dicho derivado cristalino de oxazina.
La [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico ofrece ventajas sobre el correspondiente compuesto no cristalino en términos de por lo menos la estabilidad química y la facilidad de formulación.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En un primer aspecto de la invención, por lo tanto se proporciona [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina.
La estructura química de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]-amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico es Para evitar dudas, la invención proporciona [3- ((3R.6R)- 5-amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3-¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico cristalino en forma libre. El término "forma libre" se refiere al compuesto de por sí, sin la formación de sales.
En una modalidad de la invención, se proporciona [3- ((3R.6R)-5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin-3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico cristalino en forma sustancialmente pura.
Como se usa aquí, "sustancialmente puro", cuando se utiliza en referencia a [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalino significa tener una pureza superior al 90% por peso, incluso mayor que 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 y 99% por peso, y también incluyendo igual a 100% por peso aproximadamente de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6-dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4-fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico cristalino, con base en el peso del compuesto.
La presencia de impurezas de reacción y/o impurezas de procesamiento puede determinarse mediante técnicas analíticas conocidas en el estado de la técnica, tal como, por ejemplo, cromatografía, espectroscopia de resonancia magnética nuclear, espectrometría de masas, o espectroscopia infrarroja.
En un aspecto más específico, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, dos o tres picos que tiene valores de ángulo de refracción 2 teta (T) seleccionados a partir de 8.3, 9.0, 10.9, 12.9, 13.9, 15.4, 16.2, 17.1, 18.2 y 24.5° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dichos valores son más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluo rometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, dos, tres o cuatro picos con valores de ángulo de refracción 2 teta (T) seleccionados a partir de 8.3, 9.0, 10.9, 12.9, 13.9, 15.4, 16.2, 17.1, 18.2, y 24,5 °, cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dichos valores son más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 8,3 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es de más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 9.0 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 10.9 °, cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es de más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 12.9 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es de más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 13.9 0 cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 15.4 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente, en donde dicho valor es de más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 16.2 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1 ,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 17.1 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es de más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 18.2 °, cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es de más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con un pico en un ángulo de valor de refracción 2T de 24,5 ° cuando se mide utilizando radiación CuKa, más concretamente en donde dicho valor es más o menos 0.2° 2T.
En una modalidad, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico que tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X sustancialmente igual al patrón de difracción de polvo de rayos X mostrado en la Figura 1, cuando se mide utilizando radiación CuKa. Para más detalles véase el Ejemplo 7.
El término "sustancialmente igual", en referencia a posiciones de los picos de difracción de rayos X significa que la posición del pico y la variabilidad de la intensidad típicas se tienen en cuenta. Por ejemplo, un experto en la técnica apreciará que las posiciones de los picos (2T) muestran cierta variabilidad entre los aparatos, por lo general hasta 0.2 °. Además, el experto en la técnica apreciará que intensidades de pico relativas mostrarán variabilidad entre los aparatos, así como variabilidad debida al grado de cristalinidad, orientación preferida, superficie de la muestra preparada, y otros factores conocidos por los expertos en la materia, y deben ser tomados como medida cualitativa solamente.
Un experto en la técnica también apreciará que un patrón de difracción de rayos X se puede obtener con un error de medición que depende de las condiciones de medición empleadas. En particular, se conoce generalmente que las intensidades en un patrón de difracción de rayos X pueden variar dependiendo de las condiciones de medición empleadas. Debe entenderse que las intensidades relativas pueden variar dependiendo de las condiciones experimentales y, en consecuencia, el orden exacto de la intensidad no debe ser tomado en cuenta. Además, un error de medición del ángulo de difracción para un patrón de difracción de rayos X convencional es de alrededor de 5% o menos, y tal grado de error de medición debe ser tenido en cuenta como referente a los ángulos de difracción mencionados. Por lo tanto, se debe entender que la forma cristalina de la presente invención no se limita a la forma de cristal que proporciona un patrón de difracción de rayos X completamente idéntico al patrón de difracción de rayos X mostrado en la figura 1 adjunta divulgada en la presente. Cualquier forma de cristal que proporciona patrones de difracción de rayos X sustancialmente idénticos al descrito en la figura 1 adjunta está dentro del alcance de la presente invención. La capacidad para determinar las identidades sustanciales de los patrones de difracción de rayos X es de la competencia de un experto en la materia.
En otro aspecto de la invención, la invención se refiere a una forma cristalina de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6-trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico con un termograma de calorimetría de barrido diferencial (CBD) sustancialmente igual a aquel que se muestra en la figura. 2. [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina, en la presente conocido a menudo como "el agente de la invención" o "un compuesto de la invención", exhibe propiedades farmacológicas valiosas, cuando se analizó in vitro o in vivo, y puede, por tanto, ser útil en medicamentos, en la terapia o para su uso como un producto químico de investigación, por ejemplo, como un compuesto de herramienta.
Por ejemplo, el agente de la invención es un inhibidor de proteasas aspárticas y puede ser utilizado para el tratamiento o prevención de una condición, enfermedad o trastorno que involucra el procesamiento de tales enzimas. En particular, el agente de la invención inhibe la beta- secretasa y, por tanto, la generación de beta- amiloide y la posterior agregación en oligómeros y fibrillas.
Las propiedades de inhibición del agente de la invención a las proteasas pueden evaluarse en las pruebas como se describen a continuación.
Prueba 1 : Inhibición de la BACE- 1 humana BACE- 1 recombinante (dominio extracelular, expresado en baculovirus y purificado mediante métodos estándar) en concentraciones de 0.1 a 10 nM se incuba con el compuesto de prueba en varias concentraciones durante 1 hora a temperatura ambiente en 10 a 100 mM de buffer de acetato, pH 4.5, que contiene CHAPS al 0.1%. Sustrato peptídico apagado por fluorescencia sintética, derivado a partir de la secuencia de PPA y que contiene un par adecuado fluoróforo- desactivador, se añade a una concentración final de 1 a 5 µ?, y el aumento de la fluorescencia se registra a una longitud de onda adecuada de excitación/emisión en un espectro- fluorímetro de microplacas durante 5 a 30 minutos en intervalos de 1 minuto. Los valores IC50 se calculan a partir del porcentaje de inhibición de actividad de la BACE- 1en función de la concentración del compuesto de prueba.
Prueba 2: La inhibición de la BACE- 2 humana BACE- 2 recombinante (dominio extracelular, expresado en baculovirus y purificado mediante métodos estándar) en concentraciones de 0.1 a 10 nM se incuba con el compuesto de prueba en varias concentraciones durante 1 hora a temperatura ambiente en 10 a 100 mM de buffer acetato, pH 4.5, que contiene CHAPS al 0.1%. Sustrato peptídico apagado por fluorescencia sintética, derivado de la secuencia de PPA y que contiene un par adecuado fluoróforo- desactivador, se añade a una concentración final de 1 a 5µ?, y el aumento de la fluorescencia se registra a una longitud de onda de excitación/emisión adecuada en un espectro-fluorímetro de microplacas durante 5 a 30 minutos en intervalos de 1 minuto. Los valores IC50 se calculan a partir de porcentaje de inhibición de actividad de la BACE- 2 en función de la concentración del com puesto de prue ba.
Prueba 3: I nh ibición de la catepsina D humana Catepsina D recombinante (expresada como procatepsina D en baculovirus, purificada con métodos normalizados y activada mediante incubación en buffer de formiato de sodio de pH 3.7) se incuba con el compuesto de prueba en varias concentraciones du rante 1 hora a temperatura ambiente en formiato de sodio o buffer de acetato de sodio a u n pH adecuado dentro del rango de pH 3.0 a 5.0. El sustrato peptídico sintético Mea- Gly- Lys- Pro- Me- Leu- Phe-Phe- Arg- Leu- Lys (D N P)- D- Arg- N H2 se agrega a una concentración final de 1 a 5 µ? , y el aumento de la fluorescencia se registra en la excitación de 325 n m y emisión a 400 n m en u n espectro- fluorímetro de microplacas de 5 a 30 minutos en intervalos de 1 minuto. Los valores I C50 se calculan a partir del porcentaje de inh ibición de la actividad de catepsina D en función de la concentración del compuesto de prueba .
Prueba 4: Inhibición de la li beración celular del péptido amiloide 1 - 40 Células ováricas de hámster chino son transfectadas con el gen humano para la proteína precursora amiloide . Las células se sembraron a u na densidad de 8000 células/pozo en placas de microtitulación de 96 pozos y se cultivaron durante 24 horas en medio de cultivo celular DMEM que contiene FCS al 1 0% . El compuesto de prueba se ag rega a las células a diferentes concentraciones, y las células se cultivan du rante 24 horas en presencia del compuesto de prueba. Los sobrenadantes se recogen, y la concentración del péptido amiloide 1- 40 se determina utilizando técnicas de inmunoensayo del estado del arte, por ejemplo un ELISA sándwich, inmunoensayo de fluorescencia homogénea resuelta en tiempo (FHRT), o inmunoensayo de electro- quimioluminiscencia. La potencia del compuesto se calcula a partir del porcentaje de inhibición de la liberación del péptido amiloide en función de la concentración del compuesto de prueba. [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfa y cristalina se evaluaron en la Prueba 1 y la Prueba 4 descritas anteriormente.
El compuesto de los ejemplos muestra los siguientes valores promedio de IC50 en la Prueba 1: Tabla 1 El compuesto de los ejemplos muestra los siguientes valores promedio de IC50 en la Prueba 4: Tabla 2 Como se utiliza en la presente, el término "veh ículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualqu iera y todos los solventes, med ios de dispersión , recu brimientos, surfactantes, antioxidantes, conservantes (por ejemplo, agentes antibacterianos, antimicóticos) , agentes isotónicos, agentes retardantes de la absorción , sales, conservantes , fármacos, estabilizadores de fármacos, aglutinantes, excipientes, agentes de desintegración, lubricantes, edulcorantes, aromatizantes, colorantes, y similares, y combinaciones de los mismos, como sería conocido por los expertos en la materia (véase, por ejemplo, Remington 's Pharmaceutical Sciences, 1 8 a ed . Mack Printing Company, 1 990, pp 1289 a 1 329). Salvo q ue cualquier vehículo convencional sea incompatible con el ingred iente activo, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas o farmacéuticas.
El término "u na cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto de la invención se refiere a una cantidad del compuesto de la invención que provocará la respuesta biológica o médica de un sujeto, por ejemplo, reducción o inhibición una actividad enzimática o proteica, o mejorar los síntomas, aliviar las condiciones, retardar o retrasar la progresión de la enfermedad, o prevenir una enfermedad, etc. En una modalidad no limitante, el término "una cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad del compuesto de la invención que, cuando se administra a un sujeto, es eficaz para (1) al menos parcialmente aliviar, inhibir, prevenir y/o mejorar una condición o un trastorno o una enfermedad (i) mediada por la BACE-1 o (i¡) asociada con la actividad de la BACE- 1, o (iii) que se caracteriza por la actividad (normal o anormal) de la BACE- 1, o (2) reducir o inhibir la actividad de la BACE- 1. En otra modalidad no limitante, el término "una cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad del compuesto de la invención que, cuando se administra a una célula o tejido, o un material biológico no celular, o un medio, es eficaz para al menos parcialmente reducir o inhibir la actividad de la BACE- 1. El significado del término "una cantidad terapéuticamente efectiva" como se ilustra en las modalidades anteriores para la BACE- 1 también se aplica por los mismos medios a otras proteínas /péptidos/enzimas relevantes, tal como la BACE- 2, o la catepsina O.
Como se utiliza en la presente, el término "sujeto" se refiere a un animal. Normalmente, el animal es un mamífero. Un sujeto también se refiere a por ejemplo, primates (por ejemplo, humanos, hombres o mujeres), vacas, ovejas, cabras, caballos, perros, gatos, conejos, ratas, ratones, peces, aves, etc. En ciertas modalidades, el sujeto es un primate. En otras modalidades, el sujeto es un ser humano.
Tal como se utiliza en la presente, el término "inhibir", "inhibición" o "inhibiendo" se refiere a la reducción o supresión de una determinada condición, síntoma o trastorno o enfermedad, o una disminución significativa en la actividad basal de una actividad o proceso biológico.
Como se utiliza en la presente, el término "tratar", "tratando" o "tratamiento" de cualquier enfermedad o trastorno se refiere en una modalidad a mejorar la enfermedad o trastorno (es decir, retardar o detener o reducir el desarrollo de la enfermedad o al menos uno de los síntomas clínicos de la misma). En otra modalidad "tratar", "tratando" o "tratamiento" se refiere a aliviar o mejorar al menos un parámetro físico incluyendo aquellos que no pueden ser discernibles por el paciente. En otra modalidad, "tratar", "tratando" o "tratamiento" se refiere a la modulación de la enfermedad o trastorno, ya sea físicamente, (por ejemplo, la estabilización de un síntoma discernible), fisiológicamente, (por ejemplo, la estabilización de un parámetro físico), o de ambas formas.
Como se utiliza en la presente, el término "prevención" de cualquier enfermedad o trastorno particular se refiere a la administración de un compuesto de la invención a un sujeto antes de que los síntomas de la enfermedad o trastorno sean evidentes.
Como se usa en la presente, un sujeto "necesita" un tratamiento si el sujeto se beneficia biológicamente, o médicamente o en su calidad de vida a partir de dicho tratamiento.
Tal como se utiliza en la presente, el término "agente" de la invención se utiliza como sinónimo del término "compuesto" de la invención y por lo tanto no tiene ninguna diferencia en significado.
Tal como se utiliza en la presente, el término "un", "uno", "el" y términos similares utilizados en el contexto de la invención (especialmente en el contexto de las reivindicaciones) deben ser interpretados para cubrir el singular y el plural a menos que se indique lo contrario en este documento o que claramente se contradiga con el contexto. El uso de cualquier y todos los ejemplos, o el lenguaje de ejemplo (por ejemplo, "tal como"), proporcionado en este documento es sólo para iluminar mejor la invención y no supone una limitación en el alcance de la invención de otra manera reivindicada.
Debido a sus propiedades de inhibición a las proteasas, el agente de la invención puede ser útil, eg., en el tratamiento o la prevención de una variedad de estados psicóticos, psiquiátricos, neurológicos o vasculares discapacitantes, por ejemplo de una condición, enfermedad o trastorno del sistema vascular o del sistema nervioso, en el que la generación o agregación beta- amiloide juega un papel, o, basado en la inhibición de la BACE- 2 (enzima de escisión de la proteína precursora del beta amiloide) o la catepsina D, que son homólogos estrechos de las aspartil proteasas tipo pepsina y la beta- secretasa y la correlación de la expresión de la BACE- 2 o la catepsina D con un potencial más tumorigénico o metastásico de las células tumorales, como medicamentos anticáncer, por ejemplo en la supresión del proceso de la metástasis asociada con las células tumorales. Dicha condición, enfermedad o trastorno del sistema vascular o del sistema nervioso es ejemplificada por, e incluye, sin limitación, un trastorno de ansiedad, tal como trastorno de pánico con o sin agorafobia, agorafobia sin historia de trastorno de pánico, una fobia animal u otra fobia particular, incluida la fobia social, trastorno de ansiedad social, ansiedad, trastorno obsesivo- compulsivo, trastorno de estrés, que incluye trastorno de estrés post- traumático o agudo, o un trastorno de ansiedad generalizado o inducido por sustancias, una neurosis, accidentes cerebrovasculares, epilepsia, accidentes cerebrovasculares especialmente parciales, accidentes cerebrovasculares simples, complejos o parciales evolucionando a accidentes cerebrovasculares secundariamente generalizados o accidentes cerebrovasculares generalizados [crisis de ausencia, ACVs mioclónicos, clónicos, tónicos, tónico- clónicos o atónicos], accidentes cerebrovasculares, migraña, un trastorno afectivo, que incluye un trastorno depresivo o bipolar, por ejemplo, trastorno depresivo mayor de un solo episodio o recurrente, depresión mayor, un trastorno distímico, distimia, trastorno depresivo NOS, trastorno maniaco bipolar I o bipolar II o trastorno ciclotímico; un trastorno psicótico que incluye esquizofrenia o depresión, neurodegeneracion, por ejemplo, neurodegeneracion derivada de la isquemia cerebral, un proceso degenerativo agudo, traumático o crónico del sistema nervioso, como la enfermedad de Parkinson, el síndrome de Down, demencia, por ejemplo, demencia senil, demencia con cuerpos de Lewy o demencia fronto- temporal, un trastorno cognitivo, deterioro cognitivo, por ejemplo, deterioro cognitivo leve, pérdida de memoria, una neuropatía amiloide, una neuropatía periférica, la enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Gerstmann- Straeussler- Scheinker, síndrome de Niemann- Pick, por ejemplo, enfermedad de Niemann-Pick tipo C, inflamación del cerebro, lesión cerebral, de la médula espinal o de nervios periféricos, por ejemplo, lesión traumática del cerebro (LTC), un traumatismo nervioso o un trauma cerebral, amiloidosis vascular, hemorragia cerebral con amiloidosis, corea de Huntington, esclerosis lateral amiotrófica, esclerosis múltiple o el síndrome frágil X, scrapie (enfermedad neurodegenerativa del sistema nervioso central que afecta ovinos), angiopatía amiloide cerebral, una encefalopatía, por ejemplo, encefalopatía espongiforme transmisible, accidente cerebrovascular, un trastorno de atención, por ejemplo, déficit de atención con hiperactividad, síndrome de Tourette, un trastorno del habla, incluyendo tartamudez, un trastorno del ritmo circadiano, por ejemplo, en personas que padecen los efectos del desajuste horario o trabajo por turnos, dolor, nocicepción, picazón, emesis, que incluye emesis aguda, retrasada o anticipatoria, tal como la emesis inducida por quimioterapia o radiación, enfermedad del movimiento o náuseas postoperatorias o vómitos, un trastorno alimenticio, incluyendo anorexia nerviosa o bulimia nerviosa, síndrome premenstrual, un espasmo muscular o espasticidad, por ejemplo, en pacientes parapléjicos, un trastorno de la audición, por ejemplo, tinnitus o una discapacidad auditiva relacionada con la edad, la incontinencia urinaria, glaucoma, miositis de cuerpos de inclusión, o un trastorno relacionado con sustancias, incluyendo el abuso o dependencia de sustancias, incluyendo una sustancia, como el alcohol, trastorno de abstinencia. Agentes de la invención también pueden ser útiles para mejorar la cognición, por ejemplo, en un sujeto que sufre de una enfermedad de demencia, tal como la enfermedad de Alzheimer, como pre- medicación antes de la anestesia o una intervención médica menor, tal como la endoscopia, incluyendo endoscopia gástrica, o como ligandos, por ejemplo, radioligandos o ligandos de tomografía por emisión de positrones (TEP).
Para las indicaciones mencionadas anteriormente, la dosis adecuada puede variar en función de, por ejemplo, el compuesto empleado como ingrediente farmacéutico activo, el huésped, el modo de administración, la naturaleza y gravedad de la condición, enfermedad o trastorno o el efecto deseado. Sin embargo, en general, se indica que los resultados satisfactorios en animales se obtienen a dosificación diaria de aproximadamente 0.1 a 100, preferiblemente de 1 a 50 mg/kg del peso corporal del animal. En los mamíferos más grandes, por ejemplo humanos, una dosis diaria indicada está en el rango de aproximadamente 0.5 a 2000, preferentemente de 2 a 200 mg aproximadamente, de un agente de la invención administrado convenientemente, por ejemplo, en dosis divididas hasta cuatro veces al día o en forma de liberación sostenida.
Un agente de la invención puede ser administrado mediante cualquier ruta convencional, en particular por vía entérica, preferentemente por vía oral, por ejemplo, en la forma de una tableta o cápsula, o por vía parenteral ej., en la forma de una solución o suspensión inyectable.
En un aspecto adicional, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende el agente de la invención como ingrediente farmacéutico activo en asociación con al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable y opcionalmente en asociación con otras sustancias auxiliares, tales como inhibidores de las enzimas de citocromo P450, agentes que previenen la degradación de ingredientes farmacéuticos activos por el citocromo P450, agentes que mejoran o aumentan la farmacocinética de los ingredientes farmacéuticos activos, agentes que mejoran o aumentan la biodisponibilidad de los ingredientes farmacéuticos activos, y así sucesivamente, por ejemplo, el zumo de pomelo, quetoconazol o, preferiblemente, ritonavir. Dicha composición se puede fabricar de manera convencional, por ejemplo, mediante la mezcla de sus componentes. Las formas de dosificación unitaria contienen, por ejemplo, de 0.1 a 1000 aproximadamente, preferiblemente de 1 a 500 mg aproximadamente de un agente de la invención.
Además, las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden componer en una forma sólida (incluyendo sin limitación cápsulas, tabletas, pastillas, gránulos, polvos o supositorios), o en forma líquida (incluyendo sin limitación soluciones, suspensiones o emulsiones). Las composiciones farmacéuticas pueden ser sometidas a operaciones farmacéuticas convencionales tales como la esterilización y/o pueden contener diluyentes inertes convencionales, agentes lubricantes o agentes amortiguantes, así como adyuvantes, tales como conservantes, estabilizantes, agentes humectantes, emulsificantes y buffers, etc.
Por lo general, las composiciones farmacéuticas son tabletas o cápsulas de gelatina que contienen el ingrediente activo junto con a) diluyentes, por ejemplo, lactosa, dextrosa, sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa y/o glicina; b) lubricantes, por ejemplo, sílice, talco, ácido esteárico, su sal magnesio o calcio y/o polietilenglicol, también para tabletas c) aglutinantes, por ejemplo, silicato de aluminio y magnesio, pasta de almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinilpirrolidona, si se desea d) desintegrantes, por ejemplo, almidones, agar, ácido algínico o su sal de sodio, o mezclas efervescentes; y/o e) absorbentes, colorantes, saborizantes y edulcorantes. Las tabletas se pueden recubrir con película o entéricamente según métodos conocidos en la técnica.
Composiciones adecuadas para la administración oral incluyen una cantidad eficaz del compuesto de la invención en forma de tabletas, comprimidos, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. Las composiciones para uso oral se preparan según cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas y tales composiciones pueden contener uno o más agentes seleccionados del grupo que consta de agentes edulcorantes, saborizantes, colorantes y conservantes con el fin de proporcionar preparaciones farmacéuticamente elegantes y agradables al paladar. Las tabletas pueden contener el ingrediente activo en mezcla con excipientes farmacéuticamente aceptables no tóxicos que son adecuados para la fabricación de comprimidos. Estos excipientes son, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio, agentes de granulación y desintegración, por ejemplo, almidón de maíz, o ácido algínico, agentes aglutinantes, por ejemplo, almidón, gelatina o acacia; y agentes lubricantes, por ejemplo estearato de magnesio, ácido esteárico o talco. Los comprimidos son recubiertos o no mediante técnicas conocidas para retrasar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar así una acción sostenida durante un período de tiempo más largo. Por ejemplo, un material de retraso de tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo pueden ser empleados. Las formulaciones para uso oral pueden presentarse como cápsulas de gelatina dura, donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en donde el ingrediente activo se mezcla con agua o un medio de aceite, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
Ciertas composiciones inyectables son soluciones isotónicas acuosas o suspensiones, y los supositorios se preparan ventajosamente a partir de emulsiones o suspensiones grasas. Dichas composiciones se pueden esterilizar y/o pueden contener adyuvantes, tales como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, promotores de solución, sales para regular la presión osmótica y/o buffers. Además, también pueden contener otras sustancias terapéuticamente valiosas. Dichas composiciones se preparan según los métodos convencionales de mezclado, granulación o recubrimiento, respectivamente, y contienen alrededor de 0.1 - 75%, o contienen alrededor de 1- 50%, del ingrediente activo.
Composiciones adecuadas para la aplicación transdérmica incluyen una cantidad eficaz del compuesto de la invención con un vehículo adecuado. Vehículos adecuados para la administración transdérmica incluyen solventes farmacológicamente aceptables absorbibles para ayudar al paso a través de la piel del huésped. Por ejemplo, los dispositivos transdérmicos están en la forma de un vendaje que comprende un elemento de soporte, un depósito que contiene el compuesto opcionalmente con los vehículos, opcionalmente una barrera de control de tasa para liberar el compuesto de la piel del huésped a una tasa controlada y predeterminada durante un prolongado período de tiempo y medios para asegurar el dispositivo a la piel.
Las composiciones adecuadas para la aplicación tópica, por ejemplo, a los ojos y la piel, incluyen soluciones acuosas, suspensiones, ungüentos, cremas, geles o formulaciones atomizables, por ejemplo, para la entrega en forma de aerosol o similares. Estos sistemas de liberación tópica, en particular, son apropiados para la aplicación tópica, por ejemplo, para el tratamiento de cáncer de piel, por ejemplo, para el uso profiláctico de las cremas solares, lociones, sprays, etc. Por lo tanto son particularmente adecuados para su uso en formulaciones tópicas, incluyendo formulaciones cosméticas bien conocidas en el estado de la técnica. Pueden contener solubilizantes, estabilizantes, agentes mejoradores de la tonicidad, buffers y conservantes.
Como se utiliza en la presente, una aplicación tópica también puede referirse a una inhalación o una aplicación intranasal. Que puede ser convenientemente entregada en forma de un polvo seco (ya sea solo, como una mezcla, por ejemplo una mezcla seca con lactosa, o una partícula de componente mixto, por ejemplo con fosfolípidos) desde un inhalador de polvo seco o una presentación de aerosol desde un recipiente presurizado, bomba, pulverizador, atomizador o nebulizador, con o sin el uso de un propulsor adecuado.
La invención proporciona además composiciones farmacéuticas anhidras y formas de dosificación que comprenden el compuesto de la invención como un ingrediente activo, ya que el agua puede facilitar la degradación de ciertos compuestos.
Las composiciones farmacéuticas anhidras y formas de dosificación de la invención se pueden preparar usando ingredientes anhidros o que contengan una baja humedad y condiciones de baja humectación o baja humedad. Una composición farmacéutica anhidra puede ser preparada y almacenada de manera que su naturaleza anhidra se mantiene. En consecuencia, las composiciones anhidras se empaquetan utilizando materiales conocidos para prevenir la exposición al agua de manera que puedan ser incluidas en adecuados kits de formulación. Ejemplos de envases adecuados incluyen, pero no se limitan a, láminas herméticamente selladas, plásticos, envases de dosis unitarias (ej., viales), empaques blíster, y empaques en tira.
La invención también proporciona composiciones farmacéuticas y formas de dosificación que comprenden uno o más agentes que reducen la tasa mediante la cual se descompone el compuesto de la presente invención como un ingrediente activo. Tales agentes, los cuales se conocen en la presente como "estabilizadores", incluyen, pero no se limitan a, antioxidantes como el ácido ascórbico, buffers del pH, o buffers de sal, etc.
Según lo anterior, en otro aspecto, la invención se refiere al agente de la invención para su uso como medicamento, por ejemplo para el tratamiento o prevención de una condición, enfermedad o trastorno neurológico o vascular, en el que la generación o agregación beta- amiloide juega un papel, o para la supresión del proceso de metástasis asociado con células tumorales. En otra modalidad, la invención se refiere al agente de la invención para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno mediado por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D. En una modalidad, la invención se refiere al agente de la invención para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve.
En otro aspecto, la invención se refiere al uso del agente de la invención como un ingrediente farmacéutico activo en un medicamento, por ejemplo, para el tratamiento o prevención de una condición, enfermedad o trastorno neurológico o vascular, en el que la generación o agregación del beta- amiloide juega un papel, o para la supresión del proceso de la metástasis asociado con células tumorales. En otra modalidad, la invención se refiere al uso del agente de la invención como un ingrediente farmacéutico activo en un medicamento para el tratamiento o prevención de una enfermedad o trastorno mediado por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D. En una modalidad, la invención se refiere al uso del agente de la invención como un ingrediente farmacéutico activo de un medicamento para el tratamiento o prevención de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve.
En otro aspecto, la invención se refiere al uso del agente de la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de una condición, enfermedad o trastorno neurológico o vascular, en el que la generación o agregación beta- amiloide juega un papel, o para la supresión del proceso de metástasis asociado con células tumorales. En otra modalidad, la invención se refiere al uso del agente de la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de una enfermedad o trastorno mediado por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D. En una modalidad, la invención se refiere al uso del agente de la invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve.
En otro aspecto, la invención se refiere a un método para el tratamiento o prevención de una condición, enfermedad o trastorno neurológico o vascular, en el que la generación o agregación beta-amiloide juega un papel, o para la supresión del proceso de metástasis asociado con células tumorales, en un sujeto en necesidad de tal tratamiento, prevención o supresión, tal método comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva del agente de la invención. En una modalidad, la invención se refiere a un método para la modulación de la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D en un sujeto, en donde el método comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva del agente de la invención. En otra modalidad, la invención se refiere a un método para el tratamiento o prevención de una enfermedad mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en un sujeto en necesidad de tal tratamiento o prevención, tal método comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva del agente de la invención. En aún otra modalidad, la invención se refiere a un método para el tratamiento o prevención de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve, en un sujeto en necesidad de tal tratamiento o prevención, tal método comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva del agente de la invención.
El agente de la invención se puede administrar como un único ingrediente farmacéutico activo o como una combinación con al menos otro ingrediente farmacéutico activo efectivo, ej., en el tratamiento o prevención de una condición, enfermedad o trastorno neurológico o vascular, en el cual la generación o agregación del beta- amiloide juega un papel, o en la supresión del proceso de metástasis asociado con células tumorales. Tal combinación farmacéutica puede estar en la forma de una dosificación unitaria, tal forma de dosificación unitaria comprende una cantidad predeterminada de cada uno de los al menos dos componentes activos en asociación con al menos un vehículo o diluyente farmacéutico aceptable. Por otra parte, la combinación farmacéutica puede estar en la forma de un paquete que comprende los al menos dos componentes activos por separado, ej., un paquete o un dispositivo dispensador adaptado para la administración concomitante o por separado de los al menos dos componentes activos, en el cual los componentes activos están dispuestos de manera separada. En otro aspecto, la invención se refiere a tales combinaciones farmacéuticas.
En otro aspecto, la invención por tanto se refiere a una combinación farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del agente de la invención y una segunda sustancia farmacológica, para la administración simultánea o secuencial.
En una modalidad, la invención proporciona un producto que comprende el agente de la invención y al menos otro agente terapéutico como una preparación combinada para uso simultáneo, separado o secuencial en la terapia. En una modalidad, la terapia es el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D.
En una modalidad, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende el agente de la invención y otro agente terapéutico. Opcionalmente, la composición farmacéutica puede comprender un excipiente farmacéuticamente aceptable, tal como se describe anteriormente.
En una modalidad, la invención proporciona un kit que comprende dos o más composiciones farmacéuticas separadas, al menos una de los cuales contiene el agente de la invención. En una modalidad, el kit comprende medios para retener por separado dichas composiciones, tales como un recipiente, una botella dividida o un empaque de aluminio dividido. Un ejemplo de tal kit es un empaque blister, utilizado normalmente para el envasado de tabletas, cápsulas y similares. El kit de la invención puede ser utilizado para la administración de las diferentes formas de dosificación, por ejemplo, por vía oral y parenteral, para la administración de las composiciones por separado a diferentes intervalos de dosificación o para titular las distintas composiciones entre sí. Para facilitar el cumplimiento, el kit de la invención comprende típicamente instrucciones para la administración.
En las terapias de combinación de la invención, el agente de la invención y el otro agente terapéutico pueden fabricarse y/o formularse por los mismos o diferentes fabricantes. Por otra parte, el compuesto de la invención y el otro terapéutico pueden ser reunidos en una terapia de combinación: (i) antes de entregar el producto de combinación a los médicos (ej., en el caso de un kit que comprende el compuesto de la invención y el otra agente terapéutico), (ii) por los propios médicos (o bajo la supervisión del médico) poco antes de la administración, (iii) en el propio paciente, ej., durante la administración secuencial de los compuestos de la invención y el otro agente terapéutico. En consecuencia, la invención proporciona el agente de la invención para su uso en el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el medicamento se prepara para la administración con otro agente terapéutico. La invención también proporciona el uso de otro agente terapéutico para el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el medicamento se administra con el agente de la invención.
La invención también proporciona el agente de la invención para su uso en un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el agente de la invención se prepara para la administración con otro agente terapéutico. La invención también proporciona otro agente terapéutico para el uso en un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el otro agente terapéutico se prepara para la administración con el agente de la invención. La invención también proporciona el agente de la invención para su uso en un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el agente de la invención se administra con otro agente terapéutico. La invención también proporciona otro agente terapéutico para el uso en un método para tratar una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en el que el agente terapéutico se administra con el agente de la invención.
La invención también proporciona el uso del agente de la invención para el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el paciente con anterioridad (ej., dentro de las 24 horas) ha sido tratado con otro agente terapéutico. La invención también proporciona el uso de otro agente terapéutico para el tratamiento de una enfermedad o condición mediada por la actividad de la BACE- 1, BACE- 2 o la catepsina D, en donde el paciente con anterioridad (ej, dentro de las 24 horas) ha sido tratado con el agente de la invención.
En una modalidad, la invención se refiere al compuesto de la invención en combinación con otro agente terapéutico en donde el agente terapéutico se selecciona a partir de: (a) inhibidores de la acetilcolinesterasa, tales como donepezilo (Aricept™), rivastigmina (Exelon™) y galantamina (Razadyne™); (b) antagonistas del glutamato, tales como la memantina (Namenda™); (c) medicamentos antidepresivos para bajo estado de ánimo e irritabilidad, tales como citalopram (Celexa™), fluoxetina (Prozac™), paroxeina ( P a x i I™ ) , sertralina (Zoloft™) y trazodona (Desyrel™); (d) ansiolíticos para la ansiedad, agitación nerviosa, conductas disruptivas verbales y resistencia, como el lorazepam (Ativan ™) y oxazepam (Serax ™); (e) medicamentos antipsicóticos para alucinaciones, delirios, agresividad, agitación, hostilidad y falta de cooperación, tales como el aripiprazol (Abilífy ™), clozapina (Clozaril ™), haloperidol (Haldol ™), olanzapina (Zyprexa ™), quetiapina (Seroquel ™), risperidona (Risperdal ™) y ziprasidona (Geodon ™)¡ (f) estabilizadores del ánimo, tales como carbamazepina (Tegretol ™) y divalproex (Depakote ™); (g) agonistas del receptor nicotínico alfa- 7; (h) antagonistas de mGluR5; (i) agonistas H3, y (j) vacunas de terapia amiloide.
En otra modalidad, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende: i) un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; ii) por lo menos un agente terapéutico seleccionado a partir de: (a) inhibidores de la acetilcolinesterasa, (b) antagonistas del glutamato, (c) medicamentos antidepresivos, (d) ansiolíticos, (e) medicamentos antipsicóticos, (f) estabilizadores del ánimo, (g) agonistas del receptor nicotínico alfa- (h) antagonistas de mGluR5; (i) agonistas de H3, y (j) vacunas de terapia amiloide, y iii) uno o más vehículos o diluyentes farmacéuticamente aceptables.
Los siguientes Ejemplos ilustran la invención.
Ejemplos Lista de abreviaturas DMAP 4- dimetilaminopiridina DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido EDC hidrocloruro de 1- (3- dimetilaminopropil)- 3- etilcarbodiimida EtOAc acetato de etilo h hora(s) nBuLi n- butil-litio NEt3 trietilamina Pd2 (dba) 3 tris (dibencilidenacetona) dipaladio (0) TBME tere- butil- metil- éter tBu3P tri- terc- butil fosfina TFA ácido trifluoroacético THF tetrahidrofurano TLC cromatografía de capa delgada Información de cromatografía general Método HPLC H1 (RtHi): Dimensiones de columna HPLC: 3,0 x 30 mm Tipo de columna HPLC: Zorbax SB- C18, 1 ,8 m Eluyente HPLC: A) agua + 0,05% vol .- % TFA, B) ACN + 0,05% Vol- % TFA Gradiente HPLC: 30- 100% B en 3.25 min, flujo = 0,7 ml/min Método LCMS H3 (RTH3): Dimensiones de columna HPLC: 3,0 x 30 mm Tipo de columna HPLC: Zorbax SB- C18, 1 ,8 Mm Eluyente HPLC: A) agua + 0,05% vol .- % TFA, B) ACN + 0,05% Vol- % TFA Gradiente HPLC: 10- 100% B en 3.25 min, flujo = 0,7 mi / min Método UPLC H5 (RtHS): Dimensiones de columna HPLC: 2,1 x 50 mm Tipo de columna HPLC: Acquity UPLC HSS T3 C18, 1,7 pm Eluyente HPLC: A) agua + 0,1 vol .- % TFA, B) ACN + 0,1 vol- % TFA Gradiente HPLC: 5- 100% B en 1.5 min, flujo = 1,0 mi / min Ejemplo 1 : Preparación de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6-trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]-amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina a) 2 - (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- propano- 2- ol A una solución de diisopropil amina (57,3 mi, 402 mmol) en THF (500 mi) se añadió bajo argón una solución de nBuLi 1,6 M en hexano (260 mi, 416 mmol) por debajo de - 50 ° C. Después de agitar durante 30 minutos a - 75 0 C, se agregó 4- bromo- 1- fluoro- benceno (31,1 mi, 277 mmol) manteniendo la temperatura por debajo de - 70 0 C. Después de agitar durante 2 horas a - 75 0 C, acetona (41,2 mi, 554 mmol) por debajo de - 65 0 C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a - 75 0 C, se calentó a - 50 0 C y se vertió sobre solución de NH4CI acuosa al 10%. La mezcla se extrajo con TBME, las fases orgánicas se lavaron con una solución acuosa de KHS0 , solución saturada de NaHC03 y salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró. El producto crudo se cristalizó a partir de hexano para proporcionar el compuesto del título como cristales blancos: TLC (hexano- EtOAc 3:1): Rf = 0,45; UPLC RtH5 = 1.045 min; H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,74 (dd, 1H), 7,36 (m, 1H), 6,93 (dd, 1H), 2,04 (d, 1H), 1,63 (s, 6H). b) 4- Bromo- 1- fluoro- 2- isopropenil- benceno A una solución de 2 - (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- propano- 2-ol (119.7g, 498 mmol) en CH2CI2 (50 mi) se agregó hidroquinona (2,74 g, 24,9 mmol) y H3PO4 250 mi 85 %. La mezcla de reacción resultante se agitó durante 3,5 horas a 50 0 C. La mezcla se vertió en agua helada y se extrajo con CH2CI2. Las fases orgánicas se lavaron con 2N NaOH acuoso y agua, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron. El producto crudo se disolvió en hexano y se filtró a través de un buffer de gel de sílice para obtener después de la concentración a 600 mbar, el compuesto del título como un aceite incoloro: TLC (hexano): Rf = 0,52; UPLC RtH5 = 1.416 min; 1H NMR (360 MHz , CDCI3): d 7,43 (dd, 1H), 7,37 (m, 1H), 6,94 (dd, 1H), 5,27 (d, 2H), 2,13 (s, 3H). c) (S)- 2- (5- Bromo- 2- fluoro- fenil)- propano- 1,2- diol A una suspensión de K3Fe (CN) 6 (186 g, 561 mmol), K2C03 (78 g, 561 mmol), (DHQ) 2- PHAL (1,311 g, 1,674 mmol) y K20s02 (OH) 4 (0,378 g, 1 mmol) en t- BuOH- H20 1:1 (1600 mi) se agregó 4- bromo- 1- fluoro- 2- isopropenil- benceno (36 g, 167 mmol) a 0 ° C y la mezcla de reacción se agitó durante 14 h a 00 C. Después de la adición cuidadosa de Na2S205 (100 g) a 0- 5 0 C la mezcla de reacción se agitó durante 1 h antes de la extracción con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con una solución de NaS303 al 5% y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,46; UPLC RtH5 = 0.767 min; ESIMS : 266, 268 [(M + NH4) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,71 (dd, 1H), 7,27 (m, 1H), 6,83 (dd, 1H), 3,85 (d, 1H) , 3,62 (d, 1H), 2,94 (S, 3H), 2,01 (S, 1H), 1,43 (S, 3H). d) (S)- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- metil- oxirano A una solución de (S)- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- propano-1,2- diol (37,35 g, 150 mmol) en CH2CI2 (400 mi) se agregó NEt3 bajo argón (41,8 mi , 300 mmol) y cloruro de mesilo por goteo (12,8 mi, 165 mmol) a 0- 5 ° C. Después de agitar durante 0,5 horas a 0- 5 0 C la mezcla de reacción se agregó a 1N HCI frío y se extrajo con CH2CI2. Los extractos combinados se lavaron con HCI 1 N, H20 y una solución saturada de NaHC03, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron. El mesilato crudo se disolvió en TBME (500 mi) y 200 mi de 2N NaOH acuoso y después de agitar durante 2 horas a 25 0 C la mezcla se extrajo con TBME. Los extractos combinados se lavaron con una solución de NaH2P04 y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para proporcionar el enantiómero- (S) como un aceite incoloro: 78% ee (Chiralpak AS- H 1218, hexano- EtOH 97:3, 0,4 mi / min), TLC (hexano- acetato de etilo 3:1): Rf = 0,69; UPLC RtH5 = 1.186 min; 1H NMR (360 Hz, CDCI3): d 7,46 (dd, 1H), 7,30 (m, 1H), 6,83 (dd , 1H), 2,88 (d, 1H), 2,72 (d, 1H), 1,59 (s, 3H). e) (S)- 1- azido- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- propano- 2-ol A una solución de (S)- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- metil-oxirano (51,85 g, 224 mmol) en EtOH (800 mi) se agregó NaN3 (36,8 g, 531 mmol) , NH4CI (60,6 g, 1,122 mmol) y 18- corona- 6 (59,8 g, 224 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 6 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró a la mitad de su volumen. El aceite residual se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con una solución de NaHC03 saturada y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo claro: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,70; UPLC RTH3 = 1.115 min; 1H RMN (360 MHz, CDCI3): d 7,72 (dd, 1H), 7,32 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 3,73 (d, 1H), 3,51 (d, 1H), 2,44 (s, 1H) , 1 ,50 (s, 3H). f) (S)- 1- amino- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- propano- 2-ol A una suspensión de LiAIH4 (4,65 g, 122 mmol) en THF (250 mi) se agregó una solución de (S)- 1- azido- 2- (5- bromo- 2- fluoro-fenil)- propano- 2- ol bajo argón a 0- 5 0 C (33,4 g, 122 mmol) en THF (150 mi) durante un período de 30 min. Después de agitar durante 1 hora a 0- 50 C, la reacción se apagó mediante la adición cuidadosa de agua (4,7 mi), 4 N NaOH (4,7 mi) y agua (14,1 mi) y se agitó de nuevo durante 3 horas a 25 ° C. La suspensión de color blanco se secó con MgS04, se filtró y se concentró. El producto solidificado se re- cristalizó a partir de TBME- hexano para proporcionar el compuesto del título como cristales de color beige: 98% ee (Chiralpak AD- H- hexano EtOH 75 a 25 + 0,05% NEt3), TLC (CH2CI2- MeOH 10:1) Rf = 0,10; UPLC RtH5 = 0.558 min; ESIMS: 248, 250 [(M + H) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,76 (dd, 1H), 7,25 (m, 1H), 6,82 (dd , 1H), 4.16 (br s, 1H), 3,19 (d, 1H), 2,72 (d, 1H), 1,44 (s, 3H), 0,95 (br s, 2H). g) N- [(S)- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- hidroxi- propil]-2- nitro- bencenosulfonamida A una solución de (S)- 1- amino- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)-propano- 2- ol (34,7 g, 140 mmol) en THF (400 mi) se agregó cloruro de 2- nitro- bencenosulfonilo (34,9 g, 154 mmol) a 0- 50 C y después 1N NaOH acuoso durante un período de 0,5 h. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 20 ° C. La mezcla de reacción se diluyó con TBME y se lavó con agua y una solución de NaH2P0 y salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto de título después de la cristalización a partir de TBME- hexano como cristales de color beige: TLC (tolueno, acetato de etilo 3:1): Rf = 0,51; UPLC RtH5 = 1.118 min; ESIMS: 450, 452 [(M + NH4) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,98 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,65 (m , 2H), 7,59 (dd, 1H), 7,24 (m, 1H), 6,79 (dd, 1H), 5,60 (t, 1H), 4.16 (br s, 1H), 3,55 (dd, 1H), 3,44 (dd , 1H), 2,51 (s, 1H), 1,51 (s, 3H). h) (R)- 2- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- metil- 1- (2- nitro-bencenosulfonilo)- aziridina A una solución de N- [(S) - 2 - (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2-hidroxi- propil]- 2- nitro- bencenosulfonamida (20,8 g, 48 mmol) en CH2CI2 (400 mi) se agregó PPh3 (19,2 g, 72,4 mmol) a 0- 5 0 C y azodicarboxilato de dietilo (11,6 mi, 72,4 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a 25 0 C y se concentró. El compuesto del título se obtuvo después de la purificación cromatográfica sobre gel de sílice (hexano- acetato de etilo 20:01-02:01) como cristales amarillos: TLC (tolueno, acetato de etilo 3:1): Rf = 0,69; UPLC RtH5 = 1.308 min; 1H RMN ( 360 MHz, CDCI3): d 8,31 (m, 1H), 7,28 (m, 3H), 7,60 (dd, 1H), 7,42 (m, 1H), 6,91 (dd, 1H), 3,24 (s, 1H), 2,81 (s, 1H), 2,06 (s, 3H). i) éster etílico del ácido (R)- 2- [(R)- 2- (5- Bromo- 2- fluoro-fenil)- 2- (2- nitro- bencenosulfonilamino)- propoxi]- 3,3,3-trifluoro- 2- metil- propionico A una suspensión de NaH (2,53 g 60% en aceite mineral, 63 mmol) en DMF (160 mi) se agregó por goteó éster etílico del ácido (R)- 3,3,3- trifluoro- 2- hidroxi- 2- metil- propiónico bajo argón (11,99 g, 63 mmol) y después de agitar durante 0,5 horas a 20 ° C (R)- 2 -(5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- metil- 1- (2- nitro- bencenosulfonilo)-aziridina (21,85 g, 52,6 mmol). La reacción se mantuvo a 25 0 C durante 16 h. La mezcla se agregó a 2N HCI acuoso frío y se extrajo el producto con TBME. Capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución de NaHC03 saturada y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron. El sólido residual se re-cristalizó a partir de TBME- hexano para proporcionar el compuesto del título como cristales amarillos: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,59; UPLC RtH5 = 1.444 min; ESIMS: 618, 620 [(M + NH4 ) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,83 (dd, 1H), 7,61 (m, 3H), 7,48 (dd, 1H), 7,27 (m, 1H), 6,73 (s, 1H), 6,60 (dd, 1H), 4,33 (m, 2H), 3,84 (s, 2H), 1,84 (s, 3H), 1,57 (s, 3H), 1,33 (t, 3H). j) (R)- 2- [(R)- 2- (5- Bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- (2- nitro-bencenosulfonilamino)- propoxi]- 3,3,3- trifluoro- 2- metil-propionamida Una solución de éster etílico del ácido (R)- 2- [(R)- 2- (5-bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- (2- nitro- bencenosulfonilamino)- propoxi]-3,3,3- trifluoro- 2- metil- propionico (26,6 g, 44,2 mmol) en 7N NH3en MeOH (75 mi) se agitó durante 16 horas a 50 ° C. El disolvente se eliminó a presión reducida y el sólido residual se re- cristalizó en Et20 para proporcionar el compuesto del título como cristales amarillos: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,35; UPLC RtH5 = 1.184 min; ESIMS: 589, 591 [(M + NH4) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,85 (d, 1H), 7,64 (m, 3H), 7,44 (d, 1H), 7,41 (dd, 1H), 7,26 (m , 1H), 6,68 (br s, 1H), 6,57 (dd, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,54 (br s, 1H), 4,24 (d, 1H), 3,93 (d, 1H), 1.79 ( s, 3H), 1,67 (s, 3H). k) N- [(R)- 1- (5- Bromo- 2- fluoro- fenil)- 2- ((R)- 1- ciano-2,2,2- trifluoro- 1- metil- etoxi)- 1- metil- etil]- 2- nitro-bencenolosulfonamida A una solución de (20,83 g, 35,6 mmol) en CH2CI2 (300 mi) se agregó NEt3 bajo argón (12,5 mi, 89 mmol) y a 0- 5 °C anhídrido trifluoroacético (6,15 mi, 42,7 mmol). Después de agitar durante 4 horas a 25 0 C la mezcla de reacción se añadió a una solución de NaHC03 frío y el producto se extrajo con CH2CI2. Los extractos combinados se lavaron con agua fría 0,1 N HCI acuoso, agua y una solución de NaHC03 saturada, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título como un aceite de color amarillo, que fue utilizado como tal para el siguiente paso: TLC (hexano- acetato de etilo 1 : 1): Rf = 0,73; UPLC RtHs = 1.364 min; ESIMS: 571, 573 [(M + NH4) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,89 (d, 1H), 7,62 (ddd, 1H ), 7,57 (ddd, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,29 (m, 1H), 6,58 (dd, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,17 (s, 2H), 1,81 (s, 3H) , 1,72 (s, 3H).
I) (2R.5R)- 5- (5- Bromo- 2- fluoro- fenil)- 2,5- dimetil- 2-trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡lamina A una solución de N- [(R)- 1- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2-((R)- 1- ciano- 2,2,2- trifluoro- 1- metil- etoxi)- 1- metil- etil]- 2- nitro-bencenosulfonamida (6,54 g, 11,8 mmol) y N- acetil- cisteína (2,4 g, 26,0 mmol) en MeOH (80 mi) se agregó K2C03 (3,62 g, 26,0 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80 0 C durante 16 h. Después de la separación del disolvente, el residuo se disolvió en agua y se extraje con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con una solución de NaHC03 saturada y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título después de la purificación cromatográfica sobre gel de sílice (hexano- acetato de etilo 10:01- 01:02 contiene 0,03% NEt3) como un aceite amarillo : TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,58; UPLC RtH5 = 0.843 min; ESIMS: 369, 371 [(M + H) +]; 1H NMR (360 Hz, CDCI3): d 7,66 (dd, 1H ), 7,35 (m, 1H), 6,91 (dd, 1H), 3,97 (m, 2H), 1,53 (s, 3H), 1,49 (s, 3H). m) (2R, 5R) - 5- (2- fluoro- fenil)- 2,5- dimetil- 2-trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ilamina Una solución de (2R.5R)- 5- (5- bromo- 2- fluoro- fenil)- 2,5-dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ilamina (1,66 g, 4,5 mmol) y acetato de sodio (0,369 g, 4,5 mmol) en MeOH (50 mi) se hidrogenó más del 10% Pd- C durante 6 horas a 50 ° C. El catalizador se filtró sobre Celite y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en una solución de NaHC03 saturada y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,19; UPLC RtHs = 0.777 min; ESIMS: 291 [(M + H) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 7,41 (dt, 1H), 7,26 (m, 1H), 7,11 (t, 1H), 7,05 (dd, 1H), 4,11 (dd, 1H) , 3,94 (dd, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49 (s, 3H). n) (2R.5R)- 5- (2- Fluoro- 5- nitro- fenil)- 2,5- dimetil- 2-trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ilamina A una solución de (2R, 5R)- 5- (2- fluoro- fenil)- 2,5- dimetil- 2-trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ilamina (1.035 g, 3,57 mmol) en H2S04 (6 ml) se agregó KN03 en porciones (0,379 g, 3,74 mmol) bajo enfriamiento con hielo- agua. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 250 C, se diluyó con agua y se alcalinizó con K2C03 bajo refrigeración. El producto se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se lavaron con solución de NaHC03 saturada y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía en gel de sílice (hexano- acetato de etilo 04:01- 01:01 contiene 0,05% de NEt3) proporcionó el compuesto del título como un aceite amarillo claro: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,50; UPLC RtH5 = 0,749 min; ESIMS: 336 [(M + H) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 8,48 (dd, 1H), 8,14 (m, 1H), 7,15 (dd, 1H), 4.20 (br s, 2H), 4,04 (dd, 1H), 3,91 (dd, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49 (s, 3H). o) Ester tere- butilo del ácido [(2R.5R)- 5- (2- Fluoro- 5-nitro- fenil)- 2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H-[1,4]oxazin- 3- il]- carbámico A una solución de (2R.5R)- 5- (2- fluoro- 5- nitro- fenil)- 2,5-dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ilamina (1,14 g, 3,4 mmol) en ACN (20 ml) se agregó BoczO (0,891 g, 4,08 mmol) y NEt3 (0,72 ml, 5,1 mmol) y la mezcla se agitó durante 16 horas a 25 ° C. La mezcla de reacción se evaporó y el aceite residual se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (hexano- acetato de etilo 20:01- 07:03) para proporcionar el compuesto del título después de la cristalización de Et20- hexano como cristales de color beige: TLC (hexano- acetato de etilo 03:01 ): Rf = 0,37; UPLC RtH5 = 1.355 min; ESIMS: 436 [(M + H) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 11.04 (br s, 1H), 8,24 (m, 2H), 7,30 (dd, 1H), 4,41 (dd, 1H), 4,11 (dd, 1H), 1,68 (s, 3H), 1,51 (s, 9H), 1,49 (s, 3H). p) Ester tere- butilo del ácido [(2R,5R)- 5- (5- Amino- 2-fluoro- fenil)- 2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H-[1,4]oxazin- 3- il]- carbámico Una solución de éster tere- butilo del ácido [(2R.5R)- 5- (2-fluoro- 5- nitro- fenil)- 2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H-[1,4]oxazin- 3- il]- carbámico (0,98 g, 2,25 mmol) en isopropanol-THF 2:1 (24 mi) se hidrogenó más del 5% Pd- C durante 4 horas a 50 0 C. El catalizador se filtró sobre Celite y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título después de la cristalización de TBME- hexano como cristales de color beige: TLC (hexano-acetato de etilo 1:1): Rf = 0,42; UPLC RtH5 = 0.955 min; ESIMS: 406 [(M + H) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 6,82 (dd, 1H), 6,52 (m, 2H), 4,30 (dd, 1H), 3,97 (dd, 1H), 3,06 (br s, 2H), 1,58 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,46 (s, 9H). q) Éster tere- butílico del ácido ((2R,5R)- 5- {5- [(5- ciano- 3-metil- piridina- 2- carbonil)- amino]- 2- fluoro- fenil}- 2,5- dimetil-2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- carbámico A una solución de éster tere- butílico del ácido [(2R.5R)- 5- (5-amino- 2- fluoro- fe n i I )- 2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- di h id ro-2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I]- carbámico (82 mg, 0,20 mmol) en DMF (2 mi) se agregó ácido de 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico (42 mg, 0,26 mmol), EDC.HCI (51 mg, 0,26 mmol), HOAt (31 mg, 0,22 mmol) y DIPEA (0,09 mi, 0,52 mmol) y la mezcla de reacción se mantuvo a 25 0 C durante 16 h. La mezcla se concentró, el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con solución de NaHC03 saturada y salmuera, se secó sobre gS04, se filtró y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (hexano- acetato de etilo 20:01-01:01) para proporcionar el compuesto del título como una espuma de color amarillo claro: TLC (hexano- acetato de etilo 1:1): Rf = 0,81; UPLC RtH5 = 1.437 mm; ESIMS: 550 [(M + H) +]; 1H NMR (360 MHz, CDCI3): d 10,96 (s br , 1H), 9.95 (br s, 1H), 8,63 (s, 2H), 7,88 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,54 (dd, 1H), 7,08 (dd, 1H), 4.34 (d , 1H), 4,02 (d, 1H), 2,77 (s, 3H), 1,63 (s, 3H), 1,47 (m, 12H). r) [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- ¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-Ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalino.
A una solución de éster tere- butílico del ácido ((2R,5R)- 5- {5- [(5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carbonil)- amino]- 2- fluoro- fenil}-2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)-carbámico en CH2CI2 (0,3 mi) se agregó TFA (0,6 mi) y la mezcla de reacción se mantuvo a 25 0 C durante 2 h. La reacción se agregó a una solución de K2C03 fría de 10% acuoso y el producto se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS0 , se filtraron y se concentraron, luego se purificaron por CombiFlash (120 g de gel de sílice, hexano -(CH2CI2/MeOH 10:1) gradiente de 10:01a 0:10) para proporcionar [3-((3R,6 )- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H-[1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil-piridina- 2- carboxílico como una espuma incolora. [3- ((3R,6R)- 5-amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3-¡I)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico amorfo (2,6 g, 5,6 mmol) se disolvió en EtOH (15 mi) y después de calentar a 400 C, la solución se saturó con H20 (ca.6- 7 ml_). La cristalización se mantuvo durante 16 horas a 25 ° C antes de que los cristales fueran recolectados, se lavó con EtOH- H20 frió y se secó a alto vacío durante 16 horas a 25 ° C para proporcionar el compuesto del título como agujas de color blanco: pf 101- 102 ° C UPLC RtH5 = 0.957 min; ESIMS: 450 [(M + H) +]; 1H NMR (600 MHz, DMSO- d6): d 10.73 (br s, 1H), 8,98 (s, 1H), 8,41 (s, 1H ), 7,80 (dd, 1H), 7,73 (m, 1H), 7,16 (dd, 1H), 6,08 (s, 2H), 3,92 (d, 1H), 3,80 (d, 1H), 2,54 (s, 3H) , 1,47 (s, 3H), 1,42 (s, 3H).
Preparación de ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico El ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico utilizado en el paso q) anterior se puede preparar de la siguiente manera: a) Ester tere- butilo del ácido 5- Bromo- 3- metil- piridina-2- carboxílico A una solución de 10,20 g (47,2 mmol) del ácido 5- bromo- 3- metil- piridina- 2- carboxílico y 20,61 g (94 mmol) de di- terc-butilodicarbonato en 100 mi de THF se agregó 0,577 g de DMAP. La evolución del C02 comenzó inmediatamente y la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. TBME y NaHC03 acuoso saturado se añadió. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con NaHC03 sat aq y salmuera, y se secó con MgS04.H20. la cromatografía en gel de sílice (hexano / acetato de etilo 1- 7%) proporcionó el compuesto del título como un líquido amarillo.
HPLC: RTH3 = 3.018 min; ESIMS [M + H] + = 272, 274 (1 Br); 1H- RMN (360 MHz, CDCI3):ó 8.59 s, 1H), 7,77 (s, 1H), 2,52 (s, 3H), 1,65 (s, 9H). b) Ester tere- butílico del ácido 5- Bromo- 3- metil- piridina-2- carboxílico Una mezcla de 6,0 g (22,05 mmol) de éster tere- butílico del ácido 5- bromo- 3- metil- piridina- 2- carboxílico, 1,813 g (15.43 mmol) Zn(CN)2, 0,144 g de Zn en polvo (2,205 mmol) y 0,571 g (0,551 mmol) Pd2 (dba)3.CHCI3 se suspendieron en 10 mi de DMF bajo una atmósfera de nitrógeno. Se agregó tBu3P (0,321 mi, 1,323 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 horas a 60 ° C. Después de ser enfriada la mezcla se diluyó con TBME, se filtró sobre Celite y se lavó con salmuera en tres ocasiones. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (hexano / acetato de etilo 15.5%) para dar el compuesto del título como un sólido blanco apagado. TLC (hexano / AcOEt 3:1): Rf = 0,31; HPLC: RTH3 = 2.431 min; ESIMS [M + Na] + = 241; 1H- RMN (360 MHz, CDCI3): d 8,78 (s, 1?), 7,88 (s, 1H), 2,56 (s, 3H), 1,67 (s, 9H), FT-IR: 2231 cm- 1 (CN). c) Ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxilico A una solución de 8,50 g (38,9 mmol) de éster tere- butílico del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en 51 mi (389 mmol) de 1,3- dimetoxibenceno se agregaron 85 mi de TFA y se agitó durante 6,5 h . La mezcla de reacción se diluyó con tolueno y se evaporó. El residuo se recogió en tolueno y se evaporó (2x). El producto se cristalizó en TBME / hexanos para dar el compuesto del título como un polvo blanco. HPLC: Rtm = 2.314 min; ESIMS [M + Na] + = 163; 1H- RMN (360 MHz, CDCI3): d 8,77 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 2,87 (s, 3H).
Ejemplo 2: El primer procedimiento alternativo para la preparación de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluoro-metil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina a) Éster tere- butílico del ácido ((2R,5R)- 5- {5- [(5- ciano- 3-metil- piridina- 2- carbonil)- amino]- 2- fluoro- fenil}- 2,5- dimetil-2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- carbámico A una solución de éster tere- butílico del ácido [(2R.5R)- 5- (5-amino- 2- fluoro- fenil)- 2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro-2H- [1,4]oxazin- 3- il]- carbámico (Ejemplo 1 paso p) (2,2 g, 5,43 mmol) en DMF (20 mi) se agregó a 0- 50 C ácido 5- ciano- 3- metil-piridina- 2- carboxílico (0,968 g, 5,97 mmol), EDC (1,095 g, 7,05 mmol), HOAt (1,182 g, 8,68 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 250 C durante 16 h. La mezcla de reacción se agregó a una solución de NaHC03 saturada y el producto se extrajo con TBME. Las capas TBME combinadas se lavaron con H20 y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron para obtener después de la cristalización a partir de diisopropiléter el compuesto del título como cristales incoloros UPLC RtH5 = 1,472 min); ESIMS: 550; [(M + H) +]; 1H RMN (400 MHz, CDCI3): d 11,11 (s, 1H), 10,11 (s, 1H), 8,79 (br s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,84 (m, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,21 (dd, 1H), 4,49 (d, 1H), 4,16 (d, 1H), 1,76 (s, 3H), 1,64 (s, 3H), 1,62 (s, 9H). b) [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico A una solución de éster tere- butílico del ácido ((2R,5R)- 5- {5-[(5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carbonil)- amino]- 2- fluoro- fenil}-2,5- dimetil- 2- trifluorometil- 5,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)-carbámico (2,27 g, 4,13 mmol) en CH2CI2 (25 mi) se agregó TFA (41,3 mmol, 3,18 mi) y la mezcla de reacción se agitó a 25 0 C durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se agregó a una solución de NaHC03 acuosa al 10% (pH> 8) y la base libre se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y se concentraron. El producto crudo se recristalizó dos veces disolviendo el material en EtOH (15 mi) a 50 - 600 C y después de la saturación con H20 (6- 8 mi), la solución clara se dejó enfriar a temperatura ambiente durante la noche para proporcionar después de la filtración y el secado del compuesto del título en > 99% pureza como cristales blancos: UPLC RtH5 = 0.905 min; ESIMS: 450 [(M + H) +]; 1H NMR (600 Hz, DMSO- d6): 10,72 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,78 (d, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,15 (t, 1H), 6,08 (br s, 2H), 3,91 (d, 1H), 3,78 (d, 1H), 2,52 (s, 3H), 1,46 (s, 3H), 1,41 (s, 3H).
Ejemplo 3: Segundo procedimiento alternativo para la preparación de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluoro-metil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina 5.954 mg de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluoro-metil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfo se dispersó en 400 ul de agua a temperatura ambiente y se enfrió a 160 C a 50 C a 2,40 C / h, se mantuvo a 50 C por 10 horas y luego se calentó a 400 C a 5 0 C / min y se enfrío de nuevo a 5 0 C a 2,4 ° C / h. Los sólidos se aislaron por centrifugación y se secaron a 370 C/50 mbar durante la noche.
Ejemplo 4: Tercer procedimiento alternativo para la preparación de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina 4,9 mg de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfa se suspendió en 400 uL de 20/80 etanol/agua a temperatura ambiente durante 24 horas. Los sólidos se separaron y se secaron a 37 0 C/50 mbar durante la noche.
Ejemplo 5: Cuarto procedimiento alternativo para la preparación de [3- ((3R,6R)- S- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico en forma cristalina 4,9 mg de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil-3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfa se suspendió en 400 uL de 20/80 de acetona/agua a temperatura ambiente durante 24 horas. Los sólidos se separaron y se secaron a 37 0 C/50 mbar durante la noche.
Ejemplo 6: Quinto procedimiento alternativo para la preparación de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridin- 2- carboxílico en forma cristalina La [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridin- 2- carboxílico amorfa se disolvió en i-PrOH (3 litros) y se calentó a 60°C; en este punto, se agregó agua (3 litros) a 60°C. La solución se enfrió gradualmente hasta 0°C para formar una pasta acuosa. El sólido se recolectó mediante filtración a 0-4°C, y la torta del filtro se lavó con i-PrOH/agua (1:1) (1 litro), se secó en un horno al vacío a 65°C durante 40 horas, para obtener un material cristalino como un sólido blanco: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): d 10.69 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.72-7.15 (q, 1H), 6.05 (br s, 2H), 3.78-3.93 (q, 2H), 2.54 (s, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.42 (s, 3H). suspendió en 400 uL de 20/80 de acetona/agua a temperatura ambiente durante 24 horas. Los sólidos se separaron y se secaron a 370 C/50 mbar durante la noche.
Ejemplo 7: Análisis XRPD de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil-6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro-fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfa y cristalina [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalino se analizó mediante XRPD y los diez picos más característicos se muestran en la Tabla 3 (véase también la figura 1).
Tabla 3 El análisis de difracción de polvo de rayos X (XRPD) se realizó con un difractómetro de rayos X Brucker D8 Advance. Las mediciones se realizaron a 30 kV y 40 mA aproximadamente bajo las siguientes condiciones: Tasa de barrido (barrido continuo) : 0.3 s/paso (igual a 1 07, 1 s tiempo de paso) Tamaño de paso: 0.01 7 ° Apertura Soller: 2.5° Aperturas (de izq uierda a derecha) V1 2 (variable) , 6 mm apertura anti- dispersión El patrón de difracción de rayos X se registró entre 20 y 400 (2 teta) con radiación CuKQ para la identificación de todo el patrón.
Ejemplo 8: Análisis DSC de [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6-trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]-amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalina y amorfa [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalina fue analizada por calorimetría diferencial de barrido (DSC) utilizando un Q1000 DSC a partir de los instrumentos TA y se encontró que tiene un inicio de la fusión a 93.60 C, ver Figura 2. [3- ((3R.6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfa También se analizó por DSC, véase la Figura 3.
Ejemplo 9: Estabilidad química de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6-dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4-fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico amorfa versus cristalina cuando se expone a altas temperaturas/humedad durante una semana La estabilidad de [3- ((3R,6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6-trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]-amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico amorfa versus cristalina se probó mediante la exposición del material amorfo o cristalino a alta temperatura y/o humedad durante una semana. Después de un almacenamiento a alta temperatura y/o humedad, se tomaron muestras del material amorfo o cristalino en bruto y se disolvió en acetonitrilo y la pureza se analizó en un Aquity UPLC de Waters con las siguientes condiciones: Columna de Acquity UPLC BEH C18 (2,1 * 50 mm) separación Fase móvil A: 0,1% TFA + agua B: ACN +0,1 % TFA Gradiente 10> 60 a 10 minutos, 60 por 1 min, 60> 10 a 1 min Flujo 0,4 ml/min Columna T ° 300 C Detección 220nm Los resultados de esta prueba se muestran en la tabla 4 a continuación.
Tabla 4 † = picos más bajos cuando se mide por XRPD Descripción de las figuras La Figura 1 muestra el patrón de difracción de polvo de rayos X para [3- ((3R .6R)- 5- amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6-dih idro- 2 H- [1 ,4]oxazin- 3- il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5-ciano- 3- metil- piridina- 2- carboxílico cristalina cuando se mide utilizando radiación Cu Ka.
La Figura 2 muestra el termograma DSC para [3- ((3R.6R)- 5-amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihid ro- 2H- [1 ,4]oxazin- 3-il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina- 2-carboxílico cristalina.
La Figura 3 muestra el termograma DSC para [3- ((3R.6R) amino- 3,6- dimetil- 6- trifluorometil- 3,6- dihidro- 2H- [1,4]oxazin il)- 4- fluoro- fenil]- amida del ácido 5- ciano- 3- metil- piridina carboxílico amorfa.

Claims (11)

REIVINDICACIONES
1. Una forma cristalina del compuesto:
2. Una forma cristalina del compuesto según la reivindicación 1, en forma sustancialmente pura.
3. Una forma cristalina del compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 la cual tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X con al menos uno, dos o tres picos que tienen valores de ángulo de refracción 2 teta (T) seleccionados a partir de 8.3, 9.0, 10.9, 12.9, 13.9, 15.4, 16.2, 17.1, 18.2 y 24.5 °, cuando se mide utilizando la radiación CuKa, en donde dichos valores oscilan más o menos 0.202T.
4. Una forma cristalina del compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 la cual tiene un patrón de difracción de polvo de rayos X sustancialmente igual que el patrón de difracción de polvo de rayos X mostrado en la Figura 1 cuando se mide utilizando radiación CuKQ.
5. Una composición farmacéutica que comprende una forma cristalina del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 como un ingrediente farmacéutico activo en asociación con al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
6. Una composición farmacéutica según la reivindicación 5, que comprende además otro agente o agentes terapéuticos.
7. Una forma cristalina del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso como un medicamento.
8. Una forma cristalina del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve.
9. El uso de una forma cristalina del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve.
10. Un método para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Alzheimer o deterioro cognitivo leve, en un sujeto en necesidad de tal tratamiento o prevención, dicho método comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de una forma cristalina del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.
11. Una combinación farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de una forma cristalina del compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y una segunda sustancia farmacológica, para administración simultánea o secuencial.
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