KR20140051823A

KR20140051823A - 결정질 옥사진 유도체 및 bace 억제제로서의 그의 용도

Info

Publication number: KR20140051823A
Application number: KR1020137021074A
Authority: KR
Inventors: 리타 라모스
Original assignee: 노파르티스 아게
Priority date: 2011-01-12
Filing date: 2012-01-11
Publication date: 2014-05-02
Also published as: JP2014502625A; BR112013017757A2; CN103429588A; MX2013008112A; AU2012206633A1; UY33864A; AR084832A1; WO2012095451A1; EA201391026A1; CY1114757T1; US8524897B2; CA2824207A1; EP2663560A1; US20120178745A1; TW201309685A

Abstract

본 발명은 알츠하이머병의 치료에 사용하기 위한 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드, 그의 제조법, 그의 의학적 용도, 및 결정질 형태의 상기 화합물을 포함하는 의약에 관한 것이다.
<화학식 I>

Description

결정질 옥사진 유도체 및 BACE 억제제로서의 그의 용도 {CRYSTALLINE OXAZINE DERIVATIVE AND ITS USE AS BACE INHIBITOR}

본 개시내용은 일반적으로 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드에 관한 것이다. 본 개시내용은 또한 일반적으로 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 포함하는 제약 조성물, 뿐만 아니라 알츠하이머병의 치료에서 결정질 형태를 사용하는 방법, 및 이러한 결정질 물질을 수득하는 방법에 관한 것이다.

알츠하이머병은 파괴적인 신경변성 장애이다. 그의 산발성 형태는 고령 인구 (>75세 연령에서 발병률이 급격히 증가함)에 영향을 미치며, 추가로 40대 또는 50대에 질환이 발병하는 다양한 가족성 형태가 존재한다. 병리학적으로, 이는 환자 뇌 내에서 세포외 노인성 플라크 및 세포내 신경원섬유 엉킴의 존재를 특징으로 한다. 노인성 플라크의 코어 구성성분은 소형 4 kDa 아밀로이드 펩티드이다. 이는 큰 막횡단 단백질인 아밀로이드 전구체 단백질 (APP)의 단백질분해 처리에 의해 생성된다. 베타-세크레타제 (BACE-1)에 의한 APP의 절단은 가용성 APP-베타 단편을 방출하고, 반면에 99개-아미노산 길이의 C-말단은 막에 테더링된 채 남아있다. 상기 C-말단 단편은 후속적으로 감마-세크레타제 (막 다중-효소 복합체)에 의해 단백질분해 처리되어, 다양한 길이 (주로 40 및 42개 아미노산 길이)의 아밀로이드 펩티드를 생성한다 (문헌 [Hardy J, Selkoe DJ (2002) Science; 297 (5580):353-356]).

병리학적 상태 하에, 이들 펩티드의 생성이 증가된 속도로 일어나는 경우에, 또는 뇌로부터의 그의 제거가 방해받는 경우에, 증가된 뇌 아밀로이드 펩티드 농도는 올리고머, 피브릴 및 최종적으로 플라크의 형성을 유발한다 (문헌 [Farris W, et al. (2007) Am.J. Pathol.; 171 (1):241-251]). 뇌에서의 아밀로이드 펩티드 및 플라크의 침착은 알츠하이머병의 발병기전에서의 측정가능한 제1의 사건이고, 이는 시냅스, 시냅스 접촉 및 뉴런의 손실을 유발하는 것으로 나타났다 (문헌 [Grimmer T, et al. (2009) Neurobiology of Aging; 30 (12):1902-1909]). 대량 뉴런 손실에 의해 유발된 뇌 위축은 인지, 기억, 방향성 및 일상 생활의 과제 수행 능력에서의 손상, 즉 임상적으로 명백한 치매로 이어진다 (문헌 [Okello A, et al. (2009) Neurology; 73 (10):754-760]).

Asp2 또는 메맙신 2로도 또한 공지된 BACE-1은 뉴런에서 고도로 발현되는 막횡단 아스파르트산 프로테아제이다. 이는 골지 및 세포내이입 구획 내에서 그의 기질 APP와 공동-국재화된다 (문헌 [Willem M, Lammich S, Haass C (2009) Semin.Cell Dev.Biol; 20 (2):175-182]). 마우스에서의 녹-아웃 연구는 아밀로이드 펩티드 형성의 부재를 입증하였고, 반면에 동물은 건강하고 생식력이 있었다 (문헌 [Ohno M, et al. (2007) Neurobiol.Dis.; 26 (1):134-145]). APP-과다발현 마우스에서의 BACE-1의 유전적 제거는 플라크 형성의 부재 및 인지 결핍의 역전을 입증하였다 (문헌 [Ohno M, et al. (2004) Neuron; 41 (1):27-33]). BACE-1 수준은 산발성 알츠하이머병 환자의 뇌에서 상승된다 (문헌 [Hampel H, Shen Y (2009) Scand. J. Clin. Lab. Invest.; 69 (1):8-12]).

종합하면, 이들 발견은 BACE-1의 억제가 알츠하이머병의 치료에 대한 유망한 치료 전략일 수 있음을 시사한다.

본 발명은 BACE 억제 활성을 갖는 신규 결정질 옥사진 유도체, 즉 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드, 그의 제조법, 그의 의학적 용도, 및 상기 결정질 옥사진 유도체를 포함하는 의약에 관한 것이다.

결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드는 적어도 화학적 안정성 및 제제화의 용이성의 관점에서 상응하는 비-결정질 화합물에 비해 이점을 제공한다.

따라서, 본 발명의 제1 측면에서, 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드가 제공된다.

5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 화학 구조는

이다.

의문점을 피하기 위해, 본 발명은 유리 형태의 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 제공한다. 용어 "유리 형태"는 염 형성이 없는 화합물 그 자체를 지칭한다.

본 발명의 한 실시양태에서, 실질적으로 순수한 형태의 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드가 제공된다.

본원에 사용된 바와 같이, 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드와 관련하여 사용된 경우에 "실질적으로 순수한"은 화합물의 중량을 기준으로 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 90 중량% 초과의 순도, 예컨대 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 및 99 중량% 초과의 순도, 및 또한 예컨대 약 100 중량%와 같은 순도를 갖는 것을 의미한다.

반응 불순물 및/또는 처리 불순물의 존재는 당업계에 공지된 분석 기술, 예컨대 예를 들어 크로마토그래피, 핵 자기 공명 분광분석법, 질량 분광측정법 또는 적외선 분광법에 의해 결정될 수 있다.

보다 집중된 측면에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 8.3, 9.0, 10.9, 12.9, 13.9, 15.4, 16.2, 17.1, 18.2 및 24.5°로부터 선택된 굴절 2 세타 (θ) 각도 값을 갖는 적어도 1, 2 또는 3개의 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 8.3, 9.0, 10.9, 12.9, 13.9, 15.4, 16.2, 17.1, 18.2 및 24.5°로부터 선택된 굴절 2 세타 (θ) 각도 값을 갖는 적어도 1, 2, 3 또는 4개의 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 8.3°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 9.0°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 10.9°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 12.9°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 13.9°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 15.4°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 16.2°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 17.1°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 18.2°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 24.5°의 굴절 2 세타 (θ) 각도 값에서 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 보다 특히 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 도 1에 나타낸 X선 분말 회절 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 갖는 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다. 세부사항에 대해서는 실시예 7을 참조한다.

X선 회절 피크 위치와 관련하여 용어 "실질적으로 동일한"은 전형적 피크 위치 및 강도 변동성을 고려한다는 것을 의미한다. 예를 들어, 당업자는 피크 위치 (2θ)가 약간의 장치간 변동성, 전형적으로 0.2° 정도를 나타낼 것임을 인지할 것이다. 추가로, 당업자는 상대 피크 강도가 장치-간 변동성 뿐만 아니라 결정화도, 바람직한 배향, 제조된 샘플 표면 및 당업자에게 공지된 다른 인자로 인한 변동성을 나타낼 것이며, 이는 단지 정성적 측정치로서 받아들여야 함을 인지할 것이다.

당업자는 X선 회절 패턴이, 이용되는 측정 조건에 따라 달라지는 측정 오차와 함께 얻어질 수 있음을 인식할 것이다. 특히, 일반적으로 X선 회절 패턴에서의 강도는 사용된 측정 조건에 따라 변할 수 있는 것으로 공지되어 있다. 실험 조건에 따라 상대 강도가 또한 달라질 수 있고, 따라서 강도의 정확한 순서가 고려되지 않아야 하는 것을 추가로 이해하여야 한다. 추가로, 통상적인 X선 회절 패턴에 대한 회절각의 측정 오차는 전형적으로 약 5% 이하이고, 이같은 정도의 측정 오차가 상기 언급된 회절각에 부수되는 것으로 고려되어야 한다. 따라서, 본 발명의 결정 형태는 본원에 개시된 첨부된 도 1에 도시된 X선 회절 패턴과 완전히 동일한 X선 회절 패턴을 제공하는 결정 형태에 제한되지 않음을 이해하여야 한다. 첨부된 도 1에 개시된 바와 실질적으로 동일한 X선 회절 패턴을 제공하는 임의의 결정 형태가 본 발명의 범위 내에 포함된다. X선 회절 패턴의 실질적인 동일성을 확인하는 능력은 당업자의 능력 범위 내의 것이다.

본 발명의 추가 측면에서, 본 발명은 도 2에 나타낸 것과 실질적으로 동일한 시차 주사 열량측정법 (DSC) 온도기록도를 갖는 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 결정질 형태에 관한 것이다.

결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드는 이후 종종 "본 발명의 작용제" 또는 "본 발명의 화합물"이라 지칭되며, 시험관내 또는 생체내에서 시험시 유익한 약리 특성을 나타내고, 따라서 의약에서, 요법에서 또는 연구 화학물질, 예를 들어 도구 화합물로서 유용할 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 작용제는 아스파르트산 프로테아제의 억제제이고, 이러한 효소에 의한 처리와 관련된 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 특히, 본 발명의 작용제는 베타-세크레타제를 억제하며, 따라서 베타-아밀로이드의 생성, 및 올리고머 및 피브릴로의 후속 응집을 억제한다.

본 발명의 작용제의 프로테아제에 대한 억제 특성은 하기 기재된 시험에서 평가할 수 있다.

시험 1: 인간 BACE-1의 억제

0.1 내지 10 nM 농도의 재조합 BACE-1 (세포외 도메인, 바큘로바이러스에서 발현시키고 표준 방법을 이용하여 정제함)을 다양한 농도의 시험 화합물과 함께 0.1% CHAPS를 함유하는 10 내지 100 mM 아세테이트 완충제 (pH 4.5) 중에서 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. APP의 서열로부터 유도되고 적합한 형광단-켄처 쌍을 함유하는 합성 형광-켄칭된 펩티드 기질을 1 내지 5 μM의 최종 농도로 첨가하고, 형광의 증가를 마이크로플레이트 분광형광계에서 1분 간격으로 5 내지 30분 동안 적합한 여기/방출 파장에서 기록하였다. 시험 화합물 농도의 함수로서의 BACE-1 활성의 억제 백분율로부터 IC₅₀ 값을 계산하였다.

시험 2: 인간 BACE-2의 억제

0.1 내지 10 nM 농도의 재조합 BACE-2 (세포외 도메인, 바큘로바이러스에서 발현시키고 표준 방법을 이용하여 정제함)를 다양한 농도의 시험 화합물과 함께 0.1% CHAPS를 함유하는 10 내지 100 mM 아세테이트 완충제 (pH 4.5) 중에서 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. APP의 서열로부터 유도되고 적합한 형광단-켄처 쌍을 함유하는 합성 형광-켄칭된 펩티드 기질을 1 내지 5 μM의 최종 농도로 첨가하고, 형광의 증가를 마이크로플레이트 분광형광계에서 1분 간격으로 5 내지 30분 동안 적합한 여기/방출 파장에서 기록하였다. 시험 화합물 농도의 함수로서의 BACE-2 활성의 억제 백분율로부터 IC₅₀ 값을 계산하였다.

시험 3: 인간 카텝신 D의 억제

재조합 카텝신 D (바큘로바이러스에서 프로카텝신 D로서 발현시키고, 표준 방법을 이용하여 정제하고, 포름산나트륨 완충제 (pH 3.7) 중에서의 인큐베이션에 의해 활성화시킴)를 다양한 농도의 시험 화합물과 함께 pH 3.0 내지 5.0 범위 내의 적합한 pH의 포름산나트륨 또는 아세트산나트륨 완충제 중에서 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 합성 펩티드 기질 Mca-Gly-Lys-Pro-Ile-Leu-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(DNP)-D-Arg-NH₂를 1 내지 5 μM의 최종 농도로 첨가하고, 형광의 증가를 마이크로플레이트 분광형광계에서 1분 간격으로 5 내지 30분 동안 325 nm의 여기 및 400 nm의 방출에서 기록하였다. 시험 화합물의 농도에 대한 함수로서의 카텝신 D-활성 억제 백분율로부터 IC₅₀ 값을 계산하였다.

시험 4: 아밀로이드 펩티드 1-40의 세포 방출의 억제

차이니즈 햄스터 난소 세포를 아밀로이드 전구체 단백질에 대한 인간 유전자로 형질감염시켰다. 상기 세포를 96-웰 마이크로타이터 플레이트에 8000개 세포/웰의 밀도로 플레이팅하고, 10% FCS를 함유하는 DMEM 세포 배양 배지 중에서 24시간 동안 배양하였다. 시험 화합물을 다양한 농도로 세포에 첨가하고, 상기 세포를 시험 화합물의 존재 하에 24시간 동안 배양하였다. 상청액을 수집하고, 최신 면역검정 기술, 예를 들어 샌드위치 ELISA, 균일 시간-분해 형광 (HTRF) 면역검정 또는 전기-화학발광 면역검정을 이용하여 아밀로이드 펩티드 1-40의 농도를 결정하였다. 시험 화합물 농도의 함수로서의 아밀로이드 펩티드 방출의 억제 백분율로부터 화합물의 효능을 계산하였다.

무정형 및 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 상기 기재된 시험 1 및 시험 4로 시험하였다.

실시예의 화합물은 시험 1에서 하기 평균 IC₅₀ 값을 보여주었다:

<표 1>

실시예의 화합물은 시험 4에서 하기 평균 IC₅₀ 값을 보여주었다:

<표 2>

본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 담체"는 당업자에게 공지된 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등, 및 그의 조합을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 상용적이지 않은 경우를 제외하고는, 치료 또는 제약 조성물에서의 그의 용도가 고려된다.

용어 본 발명의 화합물의 "치료 유효량"은 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제, 또는 증상의 완화, 상태의 경감, 질환 진행의 둔화 또는 지연, 또는 질환의 예방 등을 도출할 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. 하나의 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은 대상체에게 투여되는 경우에 (1) (i) BACE-1에 의해 매개되거나, 또는 (ii) BACE-1 활성과 연관되거나, 또는 (iii) BACE-1의 활성 (정상 또는 비정상)을 특징으로 하는 상태 또는 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 경감시키고/거나, 억제하고/거나, 예방하고/거나, 완화시키는데 효과적이거나; 또는 (2) BACE-1의 활성을 감소시키거나 억제하는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. 또 다른 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은 세포 또는 조직 또는 비-세포 생물학적 물질 또는 배지에 투여되는 경우에 BACE-1의 활성을 적어도 부분적으로 감소시키거나 억제하는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. BACE-1에 대한 상기 실시양태에서 예시된 바와 같은 용어 "치료 유효량"의 의미는 또한 임의의 다른 관련 단백질/펩티드/효소, 예컨대 BACE-2 또는 카텝신 D에 동일한 의미로 적용된다.

본원에 사용된 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로, 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한, 예를 들어 영장류 (예를 들어, 인간, 남성 또는 여성), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이다.

본원에 사용된 용어 "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 주어진 상태, 증상 또는 장애 또는 질환의 감소 또는 저해, 또는 생물학적 활성 또는 과정의 기저 활성에서의 유의한 감소를 지칭한다.

본원에 사용된 임의의 질환 또는 장애에 대한 용어 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는, 한 실시양태에서, 질환 또는 장애의 완화 (즉, 질환 또는 그의 하나 이상의 임상적 증상의 발달의 둔화 또는 정지 또는 감소)를 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 하나 이상의 물리적 파라미터 (환자에 의해 인식가능하지 않을 수 있는 것들 포함)의 경감 또는 완화를 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애를 물리적으로 (예를 들어, 인식가능한 증상의 안정화), 생리학적으로 (예를 들어, 물리적 파라미터의 안정화) 또는 둘 다의 방식으로 조절하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 임의의 특정한 질환 또는 장애의 "예방"은 상기 질환 또는 장애의 임의의 증상이 나타나기 전에 대상체에게 본 발명의 화합물을 투여하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, 대상체가 치료로부터 생물학적으로, 의학적으로 또는 삶의 질에 있어 유익할 경우에, 이러한 대상체는 이러한 치료를 "필요로 한다".

본원에 사용된 용어 본 발명의 "작용제"는 용어 본 발명의 "화합물"과 상호교환적으로 사용되고, 의미상 어떠한 차이도 갖지 않는다.

본원에 사용된 바와 같이, 본 발명의 문맥에서 (특히, 특허청구범위의 문맥에서) 사용된 단수 용어 및 유사한 용어들은, 본원에서 달리 나타내거나 문맥상 명확하게 모순되지 않는 한, 단수형 및 복수형을 둘 다 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 본원에 제공된 임의의 모든 예 또는 예시용 어휘 (예를 들어, "예컨대")의 사용은 본 발명을 보다 잘 설명하기 위한 의도일 뿐이며 달리 청구된 본 발명의 범주를 제한하지는 않는다.

프로테아제에 대한 그의 억제 특성으로 인해, 본 발명의 작용제는 예를 들어 베타-아밀로이드 생성 또는 응집이 역할을 하는 다양한 장애성 정신의학적, 정신병적, 신경학적 또는 혈관성 상황, 예를 들어 혈관계 또는 신경계의 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 유용할 수 있거나, 또는 펩신형 아스파르틸 프로테아제 및 베타-세크레타제의 밀접한 상동체인 BACE-2 (베타-부위 APP-절단 효소 2) 또는 카텝신 D의 억제, 및 BACE-2 또는 카텝신 D 발현과 종양 세포의 보다 높은 종양형성 또는 전이 가능성과의 상관관계를 기반으로 하여, 예를 들어 종양 세포와 연관된 전이 과정의 저해에서 항암 의약으로서 유용할 수 있다. 혈관계 또는 신경계의 상기 상태, 질환 또는 장애는 비제한적으로 불안 장애, 예컨대 광장공포증을 동반하거나 동반하지 않는 공황 장애, 공황 장애의 병력이 없는 광장공포증, 동물 또는 다른 특정 공포증, 예컨대 사회 공포증, 사회 불안 장애, 불안, 강박 장애, 스트레스 장애, 예컨대 외상후 또는 급성 스트레스 장애, 또는 범불안 또는 물질-유도된 불안 장애; 신경증; 발작; 간질, 특히 부분 발작, 전신 발작으로 속발적으로 진행되는 단순, 복합 또는 부분 발작, 또는 전신 발작 [결신 (정형 또는 비정형), 근간대성, 간대성, 긴장성, 긴장성-간대성 또는 무긴장성 발작]; 경련; 편두통; 정동 장애, 예컨대 우울 장애 또는 양극성 장애, 예를 들어 단일-삽화 또는 재발성 주요 우울 장애, 주요 우울증, 기분변조성 장애, 기분저하증, 우울 장애 NOS, 양극성 I 또는 양극성 II 조증 장애 또는 순환기질성 장애; 정신병적 장애, 예컨대 정신분열증 또는 우울증; 신경변성, 예를 들어 뇌 허혈로 인한 신경변성; 신경계의 급성, 외상성 또는 만성 변성 과정, 예컨대 파킨슨병, 다운 증후군, 치매, 예를 들어 노인성 치매, 루이 소체 치매 또는 전두측두엽 치매, 인지 장애, 인지 손상, 예를 들어 경도 인지 장애, 기억 장애, 아밀로이드 신경병증, 말초 신경병증, 알츠하이머병, 게르스트만-스트래우슬러-샤잉커 증후군, 니만-피크병, 예를 들어 니만-피크 C형 질환, 뇌 염증, 뇌, 척수 또는 신경 손상, 예를 들어 외상성 뇌 손상 (TBI), 신경 외상 또는 뇌 외상, 혈관 아밀로이드증, 아밀로이드증을 동반하는 뇌 출혈, 헌팅톤 무도병, 근위축성 측삭 경화증, 다발성 경화증 또는 유약 X 증후군; 스크래피; 뇌 아밀로이드 혈관병증; 뇌병증, 예를 들어 전염성 해면상 뇌병증; 졸중; 주의력 장애, 예를 들어 주의력 결핍 과잉행동 장애; 투렛 증후군; 언어 장애, 예컨대 말더듬; 예를 들어 시차 또는 교대 근무의 영향으로 고통받는 대상체에서의 일주기 리듬 장애; 통증; 침해수용; 가려움증; 구토, 예컨대 급성, 지연 또는 예기 구토, 예컨대 화학요법 또는 방사선에 의해 유발된 구토, 멀미, 또는 수술후 오심 또는 구토; 섭식 장애, 예를 들어 신경성 식욕부진 또는 신경성 폭식증; 월경전 증후군; 예를 들어 하반신 마비 환자에서의 근육 연축 또는 경직; 청각 장애, 예를 들어 이명 또는 연령-관련 청각 손상; 요실금; 녹내장; 봉입체 근염; 또는 물질-관련 장애, 예컨대 물질 남용 또는 의존, 예컨대 알콜과 같은 물질 금단 장애에 의해 예시되며, 이를 포함한다. 본 발명의 작용제는 또한, 예를 들어 치매 상태, 예컨대 알츠하이머병을 앓는 대상체에서의 인지력 증진에서; 마취 또는 부수적 의학적 개입, 예컨대 내시경검사, 예컨대 위 내시경검사 이전의 전-의약으로서; 또는 리간드, 예를 들어 방사성리간드 또는 양전자 방출 단층촬영 (PET) 리간드로서 유용할 수 있다.

상기 언급된 적응증에 대해, 적절한 투여량은 예를 들어 활성 제약 성분으로서 사용되는 화합물, 숙주, 투여 방식, 상태, 질환 또는 장애의 성질 및 중증도, 또는 원하는 효과에 따라 달라질 것이다. 그러나, 일반적으로, 동물에서의 만족스러운 결과는 동물의 체중 1 kg당 약 0.1 내지 약 100 mg, 바람직하게는 약 1 내지 약 50 mg의 1일 투여량에서 달성된다고 제시된다. 보다 큰 포유동물, 예컨대 인간에서, 제시되는 1일 투여량은 본 발명의 작용제 약 0.5 내지 약 2000 mg 범위, 바람직하게는 약 2 내지 200 mg의 범위이며, 편리하게는 예를 들어 1일 4회 이하의 분할 용량으로 또는 지속 방출 형태로 투여된다.

본 발명의 작용제는 임의의 통상적인 경로에 의해, 특히 경장으로, 바람직하게는 경구로, 예를 들어 정제 또는 캡슐의 형태로, 또는 비경구로, 예를 들어 주사가능한 용액 또는 현탁액의 형태로 투여될 수 있다.

추가 측면에서, 본 발명은 활성 제약 성분으로서의 본 발명의 작용제를, 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께, 및 임의로 다른 보조 물질, 예컨대 시토크롬 P450 효소의 억제제, 시토크롬 P450에 의한 활성 제약 성분의 분해를 방지하는 작용제, 활성 제약 성분의 약동학을 개선시키거나 증진시키는 작용제, 활성 제약 성분의 생체이용률을 개선시키거나 증진시키는 작용제 등, 예를 들어 그레이프프루트 주스, 케토코나졸 또는 바람직하게는 리토나비르와 함께 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 이러한 조성물은 통상의 방식으로, 예를 들어 그의 성분들을 혼합함으로써 제조될 수 있다. 단위 투여 형태는, 예를 들어 본 발명의 작용제를 약 0.1 내지 약 1000 mg, 바람직하게는 약 1 내지 약 500 mg 함유한다.

또한, 본 발명의 제약 조성물은 고체 형태 (비제한적으로 캡슐, 정제, 환제, 과립, 분말 또는 좌제 포함), 또는 액체 형태 (비제한적으로 용액, 현탁액 또는 에멀젼 포함)로 제조될 수 있다. 제약 조성물은 멸균과 같은 통상의 제약적 작업에 적용될 수 있고/거나, 통상의 불활성 희석제, 윤활제, 완충제, 뿐만 아니라 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.

전형적으로, 제약 조성물은 활성 성분을

a) 희석제, 예를 들어 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신;

b) 윤활제, 예를 들어 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제의 경우에 또한

c) 결합제, 예를 들어 규산알루미늄마그네슘, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 원하는 경우에

d) 붕해제, 예를 들어 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염, 또는 발포성 혼합물; 및/또는

e) 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제

와 함께 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐이다.

정제는 당업계에 공지된 방법에 따라 필름 코팅되거나 장용 코팅될 수 있다.

경구 투여에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물을 정제, 로젠지, 수성 또는 유성 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 또는 시럽 또는 엘릭시르의 형태로 포함한다. 경구 사용을 위해 의도된 조성물은 제약 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조되고, 이러한 조성물은 제약상 우아하고 맛우수한 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 정제는 활성 성분을, 정제의 제조에 적합한 비독성의 제약상 허용되는 부형제와 혼합하여 함유할 수 있다. 이러한 부형제는, 예를 들어 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예를 들어 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예를 들어 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석이다. 정제는 코팅되지 않거나, 또는 공지된 기술에 의해 코팅되어 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시킴으로써 보다 장기간에 걸쳐 지속되는 작용을 제공한다. 예를 들어, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트와 같은 시간 지연 물질이 사용될 수 있다. 경구 사용을 위한 제제는, 활성 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합된 경질 젤라틴 캡슐, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩 오일, 액상 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합된 연질 젤라틴 캡슐로서 제공될 수 있다.

특정의 주사가능한 조성물은 수성 등장성 용액 또는 현탁액이고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액으로부터 유리하게 제조된다. 상기 조성물은 멸균될 수 있고/거나 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 게다가, 이들은 또한 다른 치료상 유익한 물질을 함유할 수 있다. 상기 조성물들은 각각 통상의 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제조되며, 약 0.1-75%의 활성 성분을 함유하거나, 또는 약 1-50%의 활성 성분을 함유한다.

경피 적용에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물을 적합한 담체와 함께 포함한다. 경피 전달에 적합한 담체는 흡수가능한 약리학상 허용되는 용매를 포함하여 숙주의 피부를 통한 통과를 보조한다. 예를 들어, 경피 장치는 백킹 부재, 화합물을 임의로 담체와 함께 함유하는 저장소, 임의로 장기간에 걸쳐 제어된 예정 속도로 숙주의 피부에 화합물을 전달하기 위한 속도 제어 장벽, 및 장치가 피부에 부착되도록 하는 수단을 포함하는 붕대 형태이다.

예를 들어 피부 및 안구로의 국소 적용에 적합한 조성물은 수용액, 현탁액, 연고, 크림, 겔 또는, 예를 들어 에어로졸 등에 의한 전달을 위한 분무가능한 제제를 포함한다. 이러한 국소 전달 시스템은 선 크림, 로션, 스프레이 등으로 특히 피부 도포, 예를 들어 피부암의 치료, 예를 들어 예방적 용도에 적절할 것이다. 따라서, 이들은 당업계에 널리 공지된 국소 제제 (미용 제제 포함)로 사용하기에 특히 적합하다. 이들은 가용화제, 안정화제, 장성 증진제, 완충제 및 보존제를 함유할 수 있다.

본원에 사용된 바와 같은 국소 적용은 또한 흡입 또는 비강내 적용에 관한 것일 수 있다. 이는 편리하게는 적합한 추진제를 사용하거나 사용하지 않고, 가압 용기, 펌프, 스프레이, 분사기 또는 네뷸라이저로부터의 건조 분말 흡입기 또는 에어로졸 스프레이 제제로부터 건조 분말의 형태로 (단독으로, 혼합물로서, 예를 들어 락토스와의 건조 블렌드로서, 또는 예를 들어 인지질과의 혼합 구성성분 입자로서) 전달될 수 있다.

본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 포함하는 무수 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공하는데, 이는 물이 특정 화합물의 분해를 용이하게 할 수 있기 때문이다.

본 발명의 무수 제약 조성물 및 투여 형태는 무수 성분 또는 저수분 함유 성분, 및 저수분 또는 저습 조건을 이용하여 제조할 수 있다. 무수 제약 조성물은 그의 무수 특성이 유지되도록 제조 및 저장될 수 있다. 따라서, 물에 대한 노출을 방지하기 위해 공지된 물질을 사용하여 무수 조성물을 포장함으로써, 이들이 적합한 규정 키트 내에 포함될 수 있도록 한다. 적합한 포장의 예는 기밀 호일, 플라스틱, 단위 투여 용기 (예를 들어, 바이알), 블리스터 팩 및 스트립 팩을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명은 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물이 분해될 속도를 감소시키는 하나 이상의 작용제를 포함하는 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공한다. 본원에서 "안정화제"로 지칭되는 이러한 작용제는 항산화제, 예컨대 아스코르브산, pH 완충제 또는 염 완충제 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

상기에 따라, 추가 측면에서, 본 발명은 예를 들어 베타-아밀로이드 생성 또는 응집이 역할을 하는 신경계 또는 혈관계 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용, 또는 종양 세포와 연관된 전이 과정의 저해용 의약으로서 사용하기 위한 본 발명의 작용제에 관한 것이다. 추가 실시양태에서, 본 발명은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 본 발명의 작용제에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 본 발명의 작용제에 관한 것이다.

추가 측면에서, 본 발명은 예를 들어 베타-아밀로이드 생성 또는 응집이 역할을 하는 신경계 또는 혈관계 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용, 또는 종양 세포와 연관된 전이 과정의 저해용 의약에 있어서 활성 제약 성분으로서의 본 발명의 작용제의 용도에 관한 것이다. 추가 실시양태에서, 본 발명은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 위한 의약에 있어서 활성 제약 성분으로서의 본 발명의 작용제의 용도에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방용 의약에 있어서 활성 제약 성분으로서의 본 발명의 작용제의 용도에 관한 것이다.

추가 측면에서, 본 발명은 베타-아밀로이드의 생성 또는 응집이 역할을 하는 신경계 또는 혈관계 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용, 또는 종양 세포와 연관된 전이 과정의 저해용 의약의 제조를 위한 본 발명의 작용제의 용도에 관한 것이다. 추가 실시양태에서, 본 발명은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방용 의약의 제조를 위한 본 발명의 작용제의 용도에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방용 의약의 제조를 위한 본 발명의 작용제의 용도에 관한 것이다.

추가 측면에서, 본 발명은 베타-아밀로이드의 생성 또는 응집이 역할을 하는 신경계 또는 혈관계 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방, 또는 종양 세포와 연관된 전이 과정의 저해를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 본 발명의 작용제를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 상기 상태, 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하거나 상기 전이 과정을 억제하거나 상기 손실을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 대상체에게 치료 유효량의 본 발명의 작용제를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성을 조절하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에게 유효량의 본 발명의 작용제를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 본 발명은 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에게 유효량의 본 발명의 작용제를 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 작용제는 단독 활성 제약 성분으로서 투여될 수 있거나, 또는 예를 들어 베타-아밀로이드의 생성 또는 응집이 역할을 하는 신경계 또는 혈관계 상태, 질환 또는 장애의 치료 또는 예방에 효과적이거나, 또는 종양 세포와 연관된 전이 과정의 저해에 효과적인 1종 이상의 다른 활성 제약 성분과의 조합물로서 투여될 수 있다. 이러한 제약 조합물은 단위 투여 형태일 수 있으며, 상기 단위 투여 형태는 소정량의 2종 이상의 활성 성분 각각을 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 포함한다. 대안적으로, 제약 조합물은 2종 이상의 활성 성분을 개별적으로 포함하는 패키지 형태, 예를 들어 개별적으로 배열된 2종 이상의 활성 성분의 공동 또는 개별 투여에 적합한 팩 또는 분배 장치일 수 있다. 추가 측면에서, 본 발명은 이러한 제약 조합물에 관한 것이다.

따라서, 추가 측면에서, 본 발명은 동시 또는 순차적 투여를 위한, 치료 유효량의 본 발명의 작용제 및 제2 약물 물질을 포함하는 제약 조합물에 관한 것이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 요법에서의 동시, 개별 또는 순차적 사용을 위한, 조합 제제로서 본 발명의 작용제 및 1종 이상의 다른 치료제를 포함하는 생성물을 제공한다. 한 실시양태에서, 요법은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태의 치료이다.

한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 작용제 및 또 다른 치료제(들)를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 임의로는, 제약 조성물은 상기 기재된 바와 같은 제약상 허용되는 부형제를 포함할 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 2종 이상의 개별 제약 조성물을 포함하며, 이들 중 적어도 하나가 본 발명의 작용제를 함유하는 것인 키트를 제공한다. 한 실시양태에서, 키트는 상기 조성물을 개별적으로 보유하기 위한 수단, 예컨대 용기, 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함한다. 이러한 키트의 예는 전형적으로 정제, 캡슐 등의 포장에 사용되는 블리스터 팩이다. 본 발명의 키트는 상이한 투여 형태, 예를 들어 경구 및 비경구로 투여하기 위해, 개별 조성물을 상이한 투여 간격으로 투여하기 위해, 또는 개별 조성물을 서로에 대해 적정하기 위해 사용될 수 있다. 편의를 도모하기 위해, 본 발명의 키트는 전형적으로 투여 지침서를 포함한다.

본 발명의 조합 요법에서, 본 발명의 작용제 및 다른 치료제는 동일하거나 상이한 제조업체에 의해 제조되고/거나 제제화될 수 있다. 추가로, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제는 함께, (i) 의사에게 조합 생성물로 배포되기 전에 (예를 들어, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제를 포함하는 키트의 경우); (ii) 투여 직전에 의사에 의해 (또는 의사 지시 하에); (iii) 예를 들어 본 발명의 화합물 및 다른 치료제의 순차 투여 동안에 환자 자신에서, 조합 요법으로 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는데 사용하기 위한 본 발명의 작용제의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 또 다른 치료제와 함께 투여하기 위해 제조된다. 또한, 본 발명은 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 치료제의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 본 발명의 작용제와 함께 투여된다.

본 발명은 또한 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 본 발명의 작용제를 제공하며, 여기서 본 발명의 작용제는 또 다른 치료제와 함께 투여하기 위해 제조된다. 본 발명은 또한 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 치료제를 제공하며, 여기서 다른 치료제는 본 발명의 작용제와 함께 투여하기 위해 제조된다. 본 발명은 또한 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 본 발명의 작용제를 제공하며, 여기서 본 발명의 작용제는 또 다른 치료제와 함께 투여된다. 본 발명은 또한 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 치료제를 제공하며, 여기서 다른 치료제는 본 발명의 작용제와 함께 투여된다.

본 발명은 또한 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 본 발명의 작용제의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 이전에 (예를 들어, 24시간 내에) 또 다른 치료제로 치료되었다. 본 발명은 또한 BACE-1, BACE-2 또는 카텝신 D 활성에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 치료제의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 이전에 (예를 들어, 24시간 내에) 본 발명의 작용제로 치료되었다.

한 실시양태에서, 본 발명은 또 다른 치료제와 조합된 본 발명의 화합물에 관한 것이며, 여기서 다른 치료제는 다음으로부터 선택된다:

(a) 아세틸콜린에스테라제 억제제, 예컨대 도네페질 (아리셉트(Aricept)^TM), 리바스티그민 (엑셀론(Exelon)^TM) 및 갈란타민 (라자다인(Razadyne)^TM);

(b) 글루타메이트 길항제, 예컨대 메만틴 (나멘다(Namenda)^TM);

(c) 기분 저하 및 과민성을 위한 항우울증 의약, 예컨대 시탈로프람 (셀렉사(Celexa)^TM), 플루옥세틴 (프로작(Prozac)^TM), 파록세인 (팍실(Paxil)^TM), 세르트랄린 (졸로프트(Zoloft)^TM) 및 트라조돈 (데시렐(Desyrel)^TM);

(d) 불안, 안절부절, 언어적 파탄 행동 및 저항성을 위한 불안완화제, 예컨대 로라제팜 (아티반(Ativan)^TM) 및 옥사제팜 (세락스(Serax)^TM);

(e) 환각, 망상, 공격, 초조, 적개심 및 비협조를 위한 항정신병 의약, 예컨대 아리피프라졸 (아빌리파이(Abilify)^TM), 클로자핀 (클로자릴(Clozaril)^TM), 할로페리돌 (할돌(Haldol)^TM), 올란자핀 (지프렉사(Zyprexa)^TM), 퀘티아핀 (세로쿠엘(Seroquel)^TM), 리스페리돈 (리스페르달(Risperdal)^TM) 및 지프라시돈 (게오돈(Geodon)^TM);

(f) 기분 안정제, 예컨대 카르바마제핀 (테그레톨(Tegretol)^TM) 및 디발프로엑스 (데파코트(Depakote)^TM);

(g) 니코틴산 알파 - 7 효능제;

(h) mGluR5 길항제;

(i) H3 효능제; 및

(j) 아밀로이드 요법 백신.

또 다른 실시양태에서, 본 발명은 다음을 포함하는 제약 조성물을 제공한다:

i) 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염;

ii) a) 아세틸콜린에스테라제 억제제,

b) 글루타메이트 길항제,

c) 항우울증 의약,

d) 불안완화제,

e) 항정신병 의약,

f) 기분 안정제,

g) 니코틴산 알파 - 7 효능제,

h) mGluR5 길항제,

i) H3 효능제, 및

j) 아밀로이드 요법 백신

으로부터 선택된 하나 이상의 치료제; 및

iii) 하나 이상의 제약상 허용되는 담체.

하기 실시예는 본 발명을 예시한다.

실시예

약어 목록

DMAP 4-디메틸아미노피리딘

DMF 디메틸포름아미드

DMSO 디메틸술폭시드

EDC 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드

EtOAc 에틸 아세테이트

h 시간

i-PrOH 이소프로판올

nBuLi n-부틸리튬

NEt₃ 트리에틸아민

Pd₂(dba)₃ 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)

TBME tert-부틸-메틸-에테르

tBu₃P 트리-tert-부틸 포스핀

TFA 트리플루오로아세트산

THF 테트라히드로푸란

TLC 박층 크로마토그래피

일반적 크로마토그래피 정보

HPLC 방법 H1 (Rt_H1):

HPLC-칼럼 치수: 3.0 x 30 mm

HPLC-칼럼 유형: 조르박스(Zorbax) SB-C18, 1.8 μm

HPLC-용리액: A) 물 + 0.05 부피% TFA; B) ACN + 0.05 부피% TFA

HPLC-구배: 30-100% B (3.25분), 유량 = 0.7 ml / 분

LCMS 방법 H3 (Rt_H3):

HPLC-칼럼 치수: 3.0 x 30 mm

HPLC-칼럼 유형: 조르박스 SB-C18, 1.8 μm

HPLC-용리액: A) 물 + 0.05 부피% TFA, B) ACN + 0.05 부피% TFA

HPLC-구배: 10-100% B (3.25분), 유량 = 0.7 ml / 분

UPLC 방법 H5 (Rt_H5):

HPLC-칼럼 치수: 2.1 x 50 mm

HPLC-칼럼 유형: 액퀴티(Acquity) UPLC HSS T3 C18, 1.7 μm

HPLC-용리액: A) 물 + 0.1 부피% TFA, B) ACN + 0.1 부피% TFA

HPLC-구배: 5 - 100% B (1.5분), 유량 = 1.0 ml / 분

실시예 1: 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 제조

a) 2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-2-올

THF (500 ml) 중 디이소프로필 아민 (57.3 ml, 402 mmol)의 용액에 아르곤 하에 헥산 중 nBuLi의 1.6 M 용액 (260 ml, 416 mmol)을 -50℃ 미만에서 첨가하였다. -75℃에서 30분 동안 교반한 후, 4-브로모-1-플루오로 벤젠 (31.1 ml, 277 mmol)을 -70℃ 미만의 온도를 유지하면서 첨가하였다. -75℃에서 2시간 동안 교반한 후, 아세톤 (41.2 ml, 554 mmol)을 -65℃ 미만에서 첨가하고, 반응 혼합물을 -75℃에서 1시간 동안 교반하고, -50℃로 가온하고, 10% 수성 NH₄Cl 용액에 부었다. 혼합물을 TBME로 추출하고, 유기 상을 수성 KHSO₄ 용액, 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 헥산으로부터 결정화시켜 표제 화합물을 백색 결정으로서 수득하였다:

b) 4-브로모-1-플루오로-2-이소프로페닐-벤젠

CH₂Cl₂ (50 ml) 중 2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-2-올 (119.7g, 498 mmol)의 용액에 히드로키논 (2.74 g, 24.9 mmol) 및 250 ml 85% H₃PO₄를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 50℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 빙수에 붓고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기 상을 2N 수성 NaOH 및 물로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 헥산 중에 용해시키고, 실리카 겔의 플라우를 통해 여과하고, 600 mbar에서 농축시킨 후에 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다:

c) (S)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-1,2-디올

t-BuOH-H₂O 1:1 (1600 ml) 중 K₃Fe(CN)₆ (186 g, 561 mmol), K₂CO₃ (78 g, 561 mmol), (DHQ)₂-PHAL (1.311 g, 1.674 mmol) 및 K₂OsO₂(OH)₄ (0.378 g, 1 mmol)의 현탁액에 0℃에서 4-브로모-1-플루오로-2-이소프로페닐-벤젠 (36 g, 167 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 14시간 동안 교반하였다. 0-5℃에서 Na₂S₂O₅ (100 g)를 조심스럽게 첨가한 후, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 후, EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 5% NaS₃O₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다:

d) (S)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-메틸-옥시란

CH₂Cl₂ (400 ml) 중 (S)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-1,2-디올 (37.35 g, 150 mmol)의 용액에 아르곤 하에 NEt₃ (41.8 ml, 300 mmol)을 첨가하고, 메실 클로라이드 (12.8 ml, 165 mmol)를 0-5℃에서 적가하였다. 0-5℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 차가운 1N HCl에 첨가하고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 추출물을 1N HCl, H₂O 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 메실레이트를 TBME (500 ml) 및 200 ml 2N 수성 NaOH 중에 용해시키고, 2시간 동안 25℃에서 교반한 후, 혼합물을 TBME로 추출하였다. 합한 추출물을 NaH₂PO₄ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (S)-거울상이성질체를 무색 오일로서 수득하였다: 78% ee (키랄팩(Chiralpak) AS-H 1218, 헥산-EtOH 97:3, 0.4 mL/분);

e) (S)-1-아지도-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-2-올

EtOH (800 ml) 중 (S)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-메틸-옥시란 (51.85 g, 224 mmol)의 용액에 NaN₃ (36.8 g, 531 mmol), NH₄Cl (60.6 g, 1122 mmol) 및 18-크라운-6 (59.8 g, 224 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 환류 하에 6시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 그의 부피의 절반으로 농축시켰다. 잔류 오일을 EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 표제 화합물을 담황색 오일로서 수득하였다:

f) (S)-1-아미노-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-2-올

THF (250 ml) 중 LiAlH₄ (4.65 g, 122 mmol)의 현탁액에 아르곤 하에 0-5℃에서 THF (150 ml) 중에 용해시킨 (S)-1-아지도-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-2-올 (33.4 g, 122 mmol)의 용액을 30분의 기간에 걸쳐 첨가하였다. 0-5℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 물 (4.7 ml), 4 N NaOH (4.7 ml) 및 물 (14.1 ml)을 조심스럽게 첨가하여 켄칭하고, 3시간 동안 25℃에서 다시 교반하였다. 백색 현탁액을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 응고된 생성물을 TBME-헥산으로부터 재결정화시켜 표제 화합물을 베이지색 결정으로서 수득하였다: 98% ee (키랄팩 AD-H 헥산-EtOH 75-25 + 0.05% NEt₃);

g) N-[(S)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-히드록시-프로필]-2-니트로-벤젠술폰아미드

THF (400 ml) 중 (S)-1-아미노-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-프로판-2-올 (34.7 g, 140 mmol)의 용액에 2-니트로-벤젠술포닐 클로라이드 (34.9 g, 154 mmol)를 0-5℃에서 첨가하고, 그 후 1N 수성 NaOH를 0.5시간의 기간에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 TBME로 희석하고, 물 및 NaH₂PO₄ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, TBME-헥산으로부터 결정화시킨 후에 표제 화합물을 베이지색 결정으로서 수득하였다:

h) (R)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-메틸-1-(2-니트로-벤젠술포닐)-아지리딘

CH₂Cl₂ (400 ml) 중 N-[(S)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-히드록시-프로필]-2-니트로-벤젠술폰아미드 (20.8 g, 48 mmol)의 용액에 PPh₃ (19.2 g 72.4 mmol)을 0-5℃에서 첨가하고, 디에틸 아조디카르복실레이트 (11.6 ml, 72.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 24시간 동안 교반하고, 농축시켰다. 표제 화합물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 정제 (헥산-EtOAc 20:1 → 2:1)한 후에 황색 결정으로서 수득하였다:

i) (R)-2-[(R)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-(2-니트로-벤젠술포닐아미노)-프로폭시]-3,3,3-트리플루오로-2-메틸-프로피온산 에틸 에스테르

DMF (160 ml) 중 NaH (2.53 g, 광유 중 60%, 63 mmol)의 현탁액에 아르곤 하에 (R)-3,3,3-트리플루오로-2-히드록시-2-메틸-프로피온산 에틸 에스테르 (11.99 g, 63 mmol)를 적가하고, 20℃에서 0.5시간 동안 교반한 후에 (R)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-메틸-1-(2-니트로-벤젠술포닐)-아지리딘 (21.85 g, 52.6 mmol)을 적가하였다. 반응물을 25℃에서 16시간 동안 유지하였다. 혼합물을 차가운 수성 2N HCl에 첨가하고, 생성물을 TBME로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류 고체를 TBME-헥산으로부터 재결정화시켜 표제 화합물을 황색 결정으로서 수득하였다:

j) (R)-2-[(R)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-(2-니트로-벤젠술포닐아미노)-프로폭시]-3,3,3-트리플루오로-2-메틸-프로피온아미드

MeOH 중 7N NH₃ (75 ml) 중 (R)-2-[(R)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-(2-니트로-벤젠술포닐아미노)-프로폭시]-3,3,3-트리플루오로-2-메틸-프로피온산 에틸 에스테르 (26.6 g, 44.2 mmol)의 용액을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류 고체를 Et₂O로부터 재결정화시켜 표제 화합물을 황색 결정으로서 수득하였다:

k) N-[(R)-1-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-((R)-1-시아노-2,2,2-트리플루오로-1-메틸-에톡시)-1-메틸-에틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드

CH₂Cl₂ (300 ml) 중 (R)-2-[(R)-2-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-(2-니트로-벤젠술포닐아미노)-프로폭시]-3,3,3-트리플루오로-2-메틸-프로피온아미드 (20.83 g, 35.6 mmol)의 용액에 아르곤 하에 NEt₃ (12.5 ml, 89 mmol)을 첨가하고, 0-5℃에서 트리플루오로아세트산 무수물 (6.15 ml, 42.7 mmol)을 첨가하였다. 25℃에서 4시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 차가운 NaHCO₃ 용액에 첨가하고, 생성물을 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 추출물을 차가운 0.1 N 수성 HCl, 물 및 포화 NaHCO₃ 용액으로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 그대로 사용하였다:

l) (2R,5R)-5-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일아민

MeOH (80 ml) 중 N-[(R)-1-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2-((R)-1-시아노-2,2,2-트리플루오로-1-메틸-에톡시)-1-메틸-에틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드 (6.54 g,11.8 mmol) 및 N-아세틸-시스테인 (2.4 g, 26.0 mmol)의 용액에 K₂CO₃ (3.62 g, 26.0 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 용매를 제거한 후, 잔류물을 물 중에 용해시키고, EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 표제 화합물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 정제 (헥산-EtOAc 10:1 → 1:2 (0.03% NEt₃ 함유))한 후에 황색 오일로서 수득하였다:

m) (2R,5R)-5-(2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일아민

MeOH (50 ml) 중 (2R,5R)-5-(5-브로모-2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일아민 (1.66 g, 4.5 mmol) 및 아세트산나트륨 (0.369 g, 4.5 mmol)의 용액을 10% Pd-C 상에서 6시간 동안 50℃에서 수소화하였다. 촉매를 셀라이트 상에서 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 포화 NaHCO₃ 용액 중에 용해시키고, EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 표제 화합물을 무색 오일로서 수득하였다:

n) (2R,5R)-5-(2-플루오로-5-니트로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일아민

H₂SO₄ (6 ml) 중 (2R,5R)-5-(2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일아민 (1.035 g, 3.57 mmol)의 용액에 KNO₃ (0.379 g, 3.74 mmol)을 빙수 냉각 하에 조금씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하고, 물로 희석하고, 냉각 하에 K₂CO₃으로 염기성화시켰다. 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 추출물을 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (헥산-EtOAc 4:1 → 1:1 (0.05% NEt₃ 함유))를 통해 정제하여 표제 화합물을 담황색 오일로서 수득하였다:

o) [(2R,5R)-5-(2-플루오로-5-니트로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일]-카르밤산 tert-부틸 에스테르

ACN (20 ml) 중 (2R,5R)-5-(2-플루오로-5-니트로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일아민 (1.14 g, 3.4 mmol)의 용액에 Boc₂O (0.891 g, 4.08 mmol) 및 NEt₃ (0.72 ml, 5.1 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시키고, 잔류 오일을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (헥산-EtOAc 20:1 → 7:3)에 의해 정제하고, Et₂O-헥산으로부터 결정화시킨 후에 표제 화합물을 베이지색 결정으로서 수득하였다:

p) [(2R,5R)-5-(5-아미노-2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일]-카르밤산 tert-부틸 에스테르

이소프로판올-THF 2:1 (24 ml) 중 [(2R,5R)-5-(2-플루오로-5-니트로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일]-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (0.98 g, 2.25 mmol)의 용액을 5% Pd-C 상에서 4시간 동안 50℃에서 수소화하였다. 촉매를 셀라이트 상에서 여과하고, 여과물을 농축시키고, TBME-헥산으로부터 결정화시킨 후에 표제 화합물을 베이지색 결정으로서 수득하였다:

q) ((2R,5R)-5-{5-[(5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르보닐)-아미노]-2-플루오로-페닐}-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-카르밤산 tert-부틸 에스테르

DMF (2 ml) 중 [(2R,5R)-5-(5-아미노-2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일]-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (82 mg, 0.20 mmol)의 용액에 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 (42 mg, 0.26 mmol), EDC.HCl (51 mg, 0.26 mmol), HOAt (31 mg, 0.22 mmol) 및 DIPEA (0.09 ml, 0.52 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 유지하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (헥산-EtOAc 20:1 → 1:1)에 의해 정제하여 표제 화합물을 담황색 발포체로서 수득하였다:

r) 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드

CH₂Cl₂ (0.3 ml) 중 ((2R,5R)-5-{5-[(5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르보닐)-아미노]-2-플루오로-페닐}-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-카르밤산 tert-부틸 에스테르의 용액에 TFA (0.6 ml)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 유지하였다. 반응물을 차가운 10% 수성 K₂CO₃ 용액에 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시킨 다음, 콤비플래쉬(CombiFlash) (120 g 실리카 겔, 헥산 - (CH₂Cl₂/MeOH 10:1) 구배 10:1 → 0:10)에 의해 정제하여 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 무색 발포체로서 수득하였다. 무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드 (2.6 g, 5.6 mmol)를 EtOH (15 mL) 중에 용해시키고, 40℃로 가온한 후에 용액을 H₂O (약 6-7 mL)로 포화시켰다. 결정화를 25℃에서 16시간 동안 유지한 후, 결정을 수집하고, 차가운 EtOH-H₂O로 세척하고, 고진공 하에 25℃에서 16시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 백색 침상물로서 수득하였다: mp 101-102℃

5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산의 제조

상기 단계 q)에 사용된 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산을 하기와 같이 제조할 수 있었다:

a) 5-브로모-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 tert-부틸 에스테르

100 ml THF 중 10.20 g (47.2 mmol) 5-브로모-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 및 20.61 g (94 mmol) 디-tert-부틸디카르보네이트의 용액에 0.577 g DMAP를 첨가하였다. CO₂의 발생이 즉시 시작되었고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. TBME 및 포화 수성 NaHCO₃을 첨가하였다. 층을 분리하고, 유기 층을 포화 수성 NaHCO₃ 및 염수로 세척하고, MgSO₄.H₂O로 건조시켰다. 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (헥산/ EtOAc 1-7%)하여 표제 화합물을 황색 액체로서 수득하였다.

b) 5-브로모-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 tert-부틸 에스테르

6.0 g (22.05 mmol) 5-브로모-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 tert-부틸 에스테르, 1.813 g (15.43 mmol) Zn(CN)₂, 0.144 g Zn 분말 (2.205 mmol) 및 0.571 g (0.551 mmol) Pd₂(dba)₃.CHCl₃의 혼합물을 10 ml DMF 중에 질소 분위기 하에 현탁시켰다. tBu₃P (0.321 ml, 1.323 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 5시간 동안 교반하였다. 냉각된 후, 혼합물을 TBME로 희석하고, 셀라이트 상에서 여과하고, 염수로 3회 세척하였다. 조 생성물을 실리카 겔 상에서 칼럼 크로마토그래피 (헥산/ EtOAc 5-15%)에 의해 정제하여 표제 화합물을 회백색 고체로서 수득하였다.

c) 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산

51 ml (389 mmol) 1,3-디메톡시벤젠 중 8.50 g (38.9 mmol) 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 tert-부틸 에스테르의 용액에 85 ml TFA를 첨가하고, 6.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔으로 희석하고, 증발시켰다. 잔류물을 톨루엔에 녹이고 증발시켰다 (2회). 생성물을 TBME/헥산으로부터 결정화시켜 표제 화합물을 백색 분말로서 수득하였다.

실시예 2: 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 제조에 대한 제1 대안적 절차

a) ((2R,5R)-5-{5-[(5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르보닐)-아미노]-2-플루오로-페닐}-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-카르밤산 tert-부틸 에스테르

DMF (20 ml) 중 [(2R,5R)-5-(5-아미노-2-플루오로-페닐)-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일]-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (실시예 1 단계 p) (2.2 g, 5.43 mmol)의 용액에 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 (0.968 g, 5.97 mmol), EDC (1.095 g, 7.05 mmol), HOAt (1.182 g, 8.68 mmol)를 0-5℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 차가운 포화 NaHCO₃ 용액에 첨가하고, 생성물을 TBME로 추출하였다. 합한 TBME 층을 H₂O 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 디이소프로필에테르로부터 결정화시킨 후에 표제 화합물을 무색 결정으로서 수득하였다:

b) 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드

CH₂Cl₂ (25 ml) 중 ((2R,5R)-5-{5-[(5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르보닐)-아미노]-2-플루오로-페닐}-2,5-디메틸-2-트리플루오로메틸-5,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (2.27 g, 4.13 mmol)의 용액에 TFA (41.3 mmol, 3.18 ml)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 10% 수성 NaHCO₃ 용액 (pH >8)에 첨가하고, 유리 염기를 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을, 물질을 EtOH (15 ml) 중에 50 내지 60℃에서 용해시키고, H₂O (6-8 ml)로 포화시킨 후에 투명한 용액을 주위 온도로 밤새 냉각되도록 하여 2회 재결정화시키고, 여과하고 건조시킨 후에 표제 화합물을 백색 결정으로서 >99% 순도로 수득하였다:

실시예 3: 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 제조에 대한 제2 대안적 절차

무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드 5.954 mg을 물 400 uL 중에 실온에서 분산시키고, 16℃에서 5℃로 2.4℃/시간으로 냉각시키고, 5℃에서 10시간 동안 유지한 다음, 40℃로 5℃/분으로 가열하고, 5℃로 2.4℃/시간으로 다시 냉각시켰다. 고체를 원심분리에 의해 단리시키고, 밤새 37℃/50 mbar에서 건조시켰다.

실시예 4: 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 제조에 대한 제3 대안적 절차

무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드 4.9 mg을 에탄올/물 20/80 400 uL 중에서 실온에서 24시간 동안 슬러리화시켰다. 이어서, 고체를 분리하고, 밤새 37℃/50 mbar에서 건조시켰다.

실시예 5: 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 제조에 대한 제4 대안적 절차

무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드 4.9 mg을 아세톤/물 20/80 400 uL 중에서 실온에서 24시간 동안 슬러리화시켰다. 이어서, 고체를 분리하고, 밤새 37℃/50 mbar에서 건조시켰다.

실시예 6: 결정질 형태의 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 제조에 대한 제5 대안적 절차

무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드 (395 g)를 i-PrOH (3 L) 중에 용해시키고, 60℃로 가열하고, 이 시점에, 물 (3 L)을 60℃에서 첨가하였다. 용액을 0℃로 서서히 냉각시켜 슬러리를 형성하였다. 고체를 0-4℃에서 여과에 의해 수집하고, 필터 케이크를 i-PrOH/물 (1:1) (1 L)로 세척하고, 진공 오븐에서 65℃에서 40시간 동안 건조시켜 결정질 물질을 백색 고체로서 수득하였다:

실시예 7: 무정형 및 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 XRPD 분석

결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 XRPD에 의해 분석하고, 10개의 가장 특징적인 피크를 하기 표 3에 나타내었다 (또한 도 1 참조).

<표 3>

X선 분말 회절 (XRPD) 분석은 브루커(Brucker) D8 어드밴스(Advance) X선 회절계를 이용하여 수행하였다. 측정은 하기 조건 하에 약 30 kV 및 40 mA에서 수행하였다:

스캔 속도 (연속 스캔): 0.3초/스텝 (107.1초 스텝 시간과 같음)

스텝 크기: 0.017° (2세타)

솔러(Soller) 슬릿: 2.5°

슬릿 (좌측에서 우측으로): V12 (가변), 6 mm 항산란 슬릿

전체 패턴의 확인을 위해 CuK_α 방사선을 사용하여 2° 내지 40° (2 세타) 사이에서 X선 회절 패턴을 기록하였다.

실시예 8: 결정질 및 무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 DSC 분석

결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 TA 인스트루먼츠(TA instruments)로부터의 Q1000 DSC를 이용하여 시차 주사 열량측정법 (DSC)에 의해 분석하였으며, 약 93.6℃에서의 용융 개시점을 갖는 것으로 밝혀졌다 (도 2 참조).

무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드를 또한 DSC에 의해 분석하였다 (도 3 참조).

실시예 9: 높은 온도/습도에 1주 동안 노출시 무정형 대 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 화학적 안정성

무정형 대 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드의 안정성을, 무정형 또는 결정질 물질을 높은 온도 및/또는 습도에 1주 동안 노출시킴으로써 시험하였다. 높은 온도 및/또는 습도에서 저장한 후, 벌크 무정형 또는 결정질 물질을 샘플링하고, 아세토니트릴 중에 용해시키고, 순도를 하기 조건을 이용하여 워터스(Waters)로부터의 액퀴티 UPLC에서 분석하였다:

분리 칼럼 액퀴티 UPLC BEH C18 (2.1*50mm)

이동상 A: 물+0.1%TFA B: ACN+0.1%TFA

구배 10 > 60 (10분 이내); 60 (1분 동안); 60 > 10 (1분 이내)

유량 0.4 ml/분

칼럼 T° 30℃

검출 220nm

상기 시험의 결과를 표 4에 나타내었다.

<표 4>

도면의 설명

도 1은 CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드에 대한 X선 분말 회절 패턴을 보여준다.

도 2는 결정질 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드에 대한 DSC 온도기록도를 보여준다.

도 3은 무정형 5-시아노-3-메틸-피리딘-2-카르복실산 [3-((3R,6R)-5-아미노-3,6-디메틸-6-트리플루오로메틸-3,6-디히드로-2H-[1,4]옥사진-3-일)-4-플루오로-페닐]-아미드에 대한 DSC 온도기록도를 보여준다.

Claims

하기 화합물의 결정질 형태.
제1항에 있어서, 실질적으로 순수한 형태인, 화합물의 결정질 형태.
제1항 또는 제2항에 있어서, CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 8.3, 9.0, 10.9, 12.9, 13.9, 15.4, 16.2, 17.1, 18.2 및 24.5°로부터 선택된 굴절 2 세타 (θ) 각도 값을 갖는 적어도 1, 2 또는 3개의 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 가지며, 여기서 상기 값은 ± 0.2° 2θ인, 화합물의 결정질 형태.
제1항 또는 제2항에 있어서, CuK_α 방사선을 사용하여 측정시 도 1에 나타낸 X선 분말 회절 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 갖는, 화합물의 결정질 형태.
활성 제약 성분으로서의 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 결정질 형태를 하나 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 포함하는 제약 조성물.
제5항에 있어서, 또 다른 치료제 또는 치료제들을 추가로 포함하는 제약 조성물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 의약으로서 사용하기 위한 화합물의 결정질 형태.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 화합물의 결정질 형태.
알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방용 의약의 제조를 위한, 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 결정질 형태의 용도.
알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 결정질 형태의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, 이러한 대상체에서의 알츠하이머병 또는 경도 인지 장애의 치료 또는 예방 방법.
동시 또는 순차적 투여를 위한, 치료 유효량의 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 결정질 형태 및 제2 약물 물질을 포함하는 제약 조합물.