MX2012015015A - Composiciones farmaceuticas que incluyen compuesto de carbamoiloxi-arilalcanoil-arilpiperazina. - Google Patents

Abstract

Se describe una composición farmacéutica que incluye un compuesto de carbamoiloxi-arilalcanoil5 arilpiperazina que previene o trata de manera efectiva nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, o inflamación.

Description

COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE INCLUYEN COMPUESTO DE CARBAMOILOXI -ARILALCANOIL-ARILPI ERAZINA Campo de la Invención La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que incluye un compuesto de carbamoiloxi-arilalcanoil-arilpiperazina y a un método para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación al usar la composición farmacéutica .

Antecedentes de la Invención Las lipoxigenasas son enzimas que no contienen hierro hemínico, que se encuentran en plantas y animales y catalizan la oxigenación de ácidos grados poli-insaturados particulares, tal como lípidos y lipoproteínas . Se conocen varias lipoxigenasas diferentes que tienen reacciones particulares de oxidación. Las lipoxigenasas de un mamífero se llaman de acuerdo a donde se localizan en el araquidonato que se va a oxigenar. Se conocen tres tipos de lipoxigenasas de un humano, y catalizan la adición de moléculas de oxígeno a los sitios 5, 12 y 15 de carbono del araquidonato. Por consiguiente, las enzimas se llaman como 5-, 12- o 15-lipoxigenasa de acuerdo a la ubicación del sitio de carbono Ref. 238044 al cual se adicionan las moléculas de oxígeno. Las 5-lipoxigenasa convierte araquidonato en 5-hidroperoxieicosatetraenato (5-HPETE) . Esta es una primera fase de una ruta metabólica para generar 5-hidroxieicosatetraenato (5-HETE) y leucotrieno (LT) . Igualmente, las 12- y 15-lipoxigenasas convierten respectivamente araquidonato en 12-HPETE y 15-HPETE. La reducción bioquímica de 12-HPETE induce 15-HETE, que es un precursor de compuestos conocidos como 15 -HETE- lipoxina . Se relacionan varios efectos biológicos a productos que tienen una actividad de lipoxigenasa, y mucho de estos productos se conocen como factores mediadores para varias enfermedades. Usualmente la 15 -lipoxigenasa se expresa en células endoteliales , células de músculo liso, monocitos/macrófagos , células mesangiales glomerurales , células epiteliales tubulares renales, y podocitos, y cataliza la formación de 15 -S-hidroxieicosatetraenato (15-S-HETE) de raquidonato (Natarajan y Nadler, Front . Biosci. (2003) 8:s783-795; Reilly et al., J. Biol . Chem. (2004) 279 (10) : 9440-9450) .

Las complicaciones diabéticas crónicas incluyen complicaciones macrovasculares , nefropatía diabética, neuropatía diabética, etc. Si la diabetes mellitus continúa durante varios años, los microvasos y macrovasos experimentan lentamente alteración patológica. Las complicaciones microvasculares se desarrollan directamente debido a hiperglicemia . Si se facilita la formación de sorbitol por hiperglicemia, se incrementa el espesor de las paredes de los vasos sanguíneos y se afecta el flujo sanguíneo, facilitando de este modo la coagulación sanguínea. Si en el riñon, neuronas, etc., se presentan lesiones de microvasos inducidas por hiperglicemia continua, pueden desarrollarse complicaciones diabéticas crónicas, tal como nefropatía diabética, neuropatía diabética. Entre tanto, la hiperglicemia es una cacusa indirecta de complicaciones macrovasculares , y un incremento en el colesterol debido al metabolismo anormal de lípidos en un estado de hiperglicemia es una causa directa de hiperglicemia.

La técnica anterior describe que la 15-lipoxigenasa está comprendida en el desarrollo de arteriosclerosis , glomerulonefritis , hiperlipidemia, o inflamación. También, KR 2008-67364 describe compuestos de triazol como inhibidores de 15-lipoxigenasa. Sin embargo, aún no está comercialmente disponible un agente para impedir o tratar estas enfermedades al inhibir la 15-lipoxigenasa. De esta manera, existe la necesidad de desarrollar una composición farmacéutica para prevenir o tratar estas enfermedades .

Breve Descripción de la Invención Problema Técnico La presente invención proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación.

La presente invención también proporciona un método para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación al usar la composición farmacéutica.

Solución al Problema De acuerdo a un aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación, en donde la composición farmacéutica incluye una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado del grupo que consiste de un compuesto representado por la Fórmula I posterior, una sal, isómero, solvato o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y una combinación de esto; y un portador farmacéuticamente aceptable: Fórmula I en donde, Xi comprende al menos uno seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, C1-C6 alquilo lineal o ramificado, halógeno que contiene F, Cl o Br, C1-C6 alcoxi lineal o ramificado, nitro, y trifluorometilo; X2 comprende al menos uno seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, C1-C6 alquilo lineal o ramificado, halógeno, C1-C6 alcoxi lineal o ramificado, nitro, trifluorometilo , y si X2 comprende dos o más de esto, son idénticos entre sí o diferentes entre sí y forman un ciclo conjuntamente con un átomo de carbono adyacente; y Y es hidrógeno o metilo, o forma un carbonilo conjuntamente con un átomo de carbono adyacente.

Una composición farmacéutica de acuerdo a una modalidad de la presente invención puede incluir una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado del grupo que consiste de un compuesto representado por la Fórmula I anterior, una sal, isómero, solvato o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y una combinación de esto .

En otra modalidad, se proporciona un método para tratar una enfermedad asociada con 15-lipoxigenasa, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado del grupo que consiste de un compuesto representado por la Fórmula I, o una sal, isómero, solvato o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y una combinación de esto y una combinación de esto, a un sujeto en necesidad de tratamiento. La enfermedad asociada con 15-lipoxigenasa se selecciona del grupo que consiste de complicaciones diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias e inflamación. Las complicaciones diabéticas incluyen nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia diabética e inflamación diabética.

El término "tratar" se interpreta como prevenir el desarrollo de una enfermedad o estado, suprimir una enfermedad o estado, es decir, suprimir el desarrollo de una enfermedad o estado, y aliviar una enfermedad o estado, es decir, provocar la regresión de una enfermedad o estado en un animal que tiene una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación o un estado o que no se ha diagnosticado como que tiene la enfermedad o estado pero está propenso a tener la enfermedad o estado. Por consiguiente, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad que es suficiente para obtener un efecto farmacéutico, es decir, un efecto terapéutico.

El compuesto representado por la Fórmula I de acuerdo a una modalidad de la presente invención se puede preparar por un experto en la técnica con respecto a la síntesis de compuestos en la técnica al usar compuestos conocidos, o compuestos que se preparan fácilmente de estos. En particular, se describen métodos de preparación para el compuesto en detalle en KR 2008-40393, que también se presenta por los presentes inventores de la presente invención, y la patente se incorpora en la presente como referencia. Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar químicamente al usar métodos descritos en la referencia citada anteriormente. Sin embargo, los métodos se usan sólo para propósitos ilustrativos. Por consiguiente, una secuencia de proceso usada en la presente se puede alterar de manera opcional si se necesita, y no puede limitar el alcance de la presente invención.

El compuesto puede incluir adicionalmente, además del compuesto representado por la Fórmula I, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es decir, una sal adicional de ácido base del mismo, y un isómero estereoquímico del compuesto representado por la Fórmula I en donde la sal farmacéuticamente aceptable puede ser cualquiera de varias sales que permitan que un compuesto de origen mantenga su actividad en un sujeto que se va a administrar con el compuesto y que no provoca efectos adversos . La sal farmacéuticamente aceptable puede ser una sal inorgánica o una sal orgánica. Los ejemplos de un ácido son un ácido acético, un ácido clorhídrico, un ácido nítrico, un ácido aspártico, un ácido sulfónico, un ácido sulfúrico, un ácido maleico, un ácido glutámico, un ácido fórmico, un ácido succínico, un ácido fosfórico, un ácido itálico, un ácido tánnico, un ácido tartárico, un ácido bromhídrico, un ácido propiónico, un ácido bencenosulfónico, un ácido benzoico, un ácido estárico, un ácido esílico, un ácido butírico, un ácido bicarbónico, un ácido bisulfúrico, un ácido bitartárico, un ácido oxálico, un ácido butílico, un ácido edético cálcico, un ácido camsílico, un ácido carbónico, un ácido clorobenzoico, un ácido cítrico, un ácido idético, un ácido toluenosulfónico, un ácido ecilínico, un ácido fumárico, un ácido gluceptico, un ácido pamoico, un ácido glucónico, un ácido glicolillarsanilico, un ácido metilonítrico, un ácido poligalatrónico, un ácido hexillisorcinónico, un ácido maloico, un ácido hidrobámico, un ácido hidroclorínico, un ácido hidroiodoico, un ácido hidroxilnaftólico, un ácido icetiónico, un ácido lactobiónico, un ácido mandélico, un ácido estolínico, un ácido múcico, un ácido nafcílico, un ácido mucónico, un ácido p-nitrometansulfónico, un ácido hexámico, un ácido pantoténico, un ácido monohidrogenofosfórico, un ácido dihidrogenofosfórico, un ácido salicílico, un ácido sulpámico, un ácido sulpanílico, un ácido metanosulfónico, y un ácido teoclico. Por ejemplo, el ácido para una sal adicional puede ser un ácido clorhídrico o un ácido metanosulfónico. También, los ejemplos de una sal básica son una sal de amonio, una sal de un metal alcalino o alcalinotérreo, tal como litio, sodio, potasio, magnesio o calcio. Los ejemplos detallados de la sal básica son una sal que contiene una base orgánica, tal como benzatina, N-metil-D-glucamina, o una sal de hidrabamina, y una sal que contiene un aminoácido, tal como arginina o lisina. También, las sales se pueden convertir en una forma de radical libre por tratamiento con una base o ácido apropiado. El término "sal adicional" incluye un compuesto solvente que se forma del compuesto representado por la Fórmula I y una sal del mismo. Los ejemplos del compuesto solvente son hidratos y alcolatos.

También, el isómero estereoquímico del compuesto representado por la Fórmula I de acuerdo a una modalidad de la presente invención se refiere a cualquier compuesto que se puede obtener del compuesto representado por la Fórmula I . Si no se define de otro modo, los apelativos químicos de los compuestos indican cualquier posible mezcla del tipo de isómero estereoquímico, y los ejemplos de la mezcla son diastereómeros y enantiómeros cada uno que tiene una estructura molecular básica. En particular, un estereocentro puede tener una coordinación a R o S y un sustituyente de radical saturado (parcialmente) cíclico 2-valente puede tener cis- o trans-coordinación. Un compuesto que tiene doble enlace puede tener estereoquímica E o Z en el doble enlace. El isómero estereoquímico del compuesto representado por la Fórmula I se induce que se incluye en el alcance de la presente invención.

Los ejemplos no limitantes del compuesto representado por la Fórmula I son éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido carbámico, éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1-(4-fluoro-fenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico, éster 3- (4-benzo [1,3] dioxol-5-il-piperazin-l-il) -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido carbámico, éster 3 - [4 - ( 3 , 4 -dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-trifluorometilo-fenil) -3-oxo-propílico del ácido carbámico, éster 3 - [4 - (3 , 4 -dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4 -nitrofenil) - 3 -oxo-propílico del ácido carbámico, éster 3 - [4 - (4 -cloro-fenil) -piperazin-l-il] -3 -oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) carbámico, éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-1-il] -3 -oxo-l-fenil- propílico del ácido (S) -carbámico, éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico, éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1-fenil-butílico del ácido carbámico, y éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-cloro-fenil) -3-oxo-propílico del ácido carbámico. De acuerdo a una modalidad de la presente invención, el compuesto representado por la Fórmula I puede ser éster 3- [4-(3 , 4 -dimetoxifenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico .

La composición farmacéutica de acuerdo a una modalidad de la presente invención puede incluir un portador farmacéuticamente aceptable.

El portador farmacéuticamente aceptable de la composición farmacéutica puede ser cualquiera de varios materiales que se usen de manera convencional en formulaciones, y los ejemplos no limitantes del portador farmacéuticamente aceptable son lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidón, caucho de acacia, fosfato de calcio, alginato, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, agua, jarabe, metil-celulosa, metilhidroxibenzoato, propílhidroxibenzoato, talco, estearato de magnesio, y aceite mineral. La composición farmacéutica puede incluir además un lubricante, o un agente humectante, un agente saborizante, un emulsionador, un agente de suspensión, un conservador, etc. Los portadores farmacéuticamente aceptables adecuados y las formulaciones se describen en detalle en Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed.,1995).

De acuerdo a una modalidad de la presente invención, la composición farmacéutica se puede administrar de manera oral o parenteralmente . La administración parenteral puede ser infusión intravenosa, infusión subcutánea, infusión intramuscular, infusión intraperitoneal , administración por endotelio, administración tópica, administración intranasal, administración intra-vaginal , administración intrapulmonar, o administración intrarectal. En el caso de administración oral, se puede revestir o formular un material activo para que se proteja en la descomposición en el estómago. También, la composición farmacéutica se puede administrar mediante cualquier dispositivo que permita que un material activo alcance una célula objetivo o diana. Una ruta de administración puede diferir de acuerdo a una condición general y a la edad de un sujeto que se va a tratar, a una propiedad de una condición de tratamiento y a un material activo usado.

Una cantidad adecuada de administración de la composición farmacéutica puede diferir de acuerdo al método de formación, al método de administración, a la edad, peso, género y estado mórbido de un paciente, a la alimentación al tiempo de administración, a la ruta de administración, a la velocidad de excreción, y la sensibilidad de reacción. Típicamente, los expertos en la técnica pueden determinar y prescribir una cantidad de administración que sea efectiva para el tratamiento o prevención sin ninguna dificultad. La cantidad de administración de la composición farmacéutica se puede dar toda de una vez, o se puede dividir en varias porciones, y por ejemplo, la composición farmacéutica se puede administrar de una a cuatro veces por día.

La composición farmacéutica se puede formular en una forma de dosis unitaria al usar un método que es obvio para un experto en la técnica y un portador y/o excipiente farmacéuticamente aceptable, o se puede preparar al usar un recipiente de múltiples dosis, en este caso, la formulación puede ser una solución, suspensión, o emulsión en un medio acuoso o aceite, un extracto, polvo, gránulo, tableta o cápsula y un dispersante o un estabilizador se puede incluir adicionalmente en la composición farmacéutica. También, la composición farmacéutica se puede administrar en la formulación de un supositorio, aspersión, ungüento, crema, gel, inhalante o parche dérmico.

La composición farmacéutica se puede usar para prevenir o tratar nefropatía diabética, neuropatía diabética o complicaciones vasculares diabéticas.

El término "diabético" significa que una causa de una enfermedad correspondiente es diabetes. También, el término "diabetes" se refiere a un grupo de enfermedades que se caracteriza como hiperglicemia crónica inducida por operación deficiente de insulina y que tiene varios metabolismos anormales debido a la hiperglicemia crónica. Por consiguiente, la nefropatía diabética, neuropatía diabética, y complicaciones vasculares diabéticas se entienden respectivamente como nefropatía inducida por diabetes, neuropatía inducida por diabetes, y complicaciones vasculares inducidos por diabetes.

La nefropatía diabética se refiere a una enfermedad en la cual se deterioran los microvasos del riñon y de esta manera, las proteínas se descargan directamente sin filtración. La nefropatía diabética se desarrolla debido a hiperpenetración glomerulosa, nuevo engrosamiento de membrana base glomerulosa, proliferación de células mesangiales glomerulosas , engrosamiento glomeruloso, y síntesis e incremento de matriz extracelular, y provoca glomerulosis gradual y falla renal. La neuropatía diabética es una complicación del sistema nervioso de la diabetes en la cual se presenta una anormalidad en una función o estructura en neuronas debido a diabetes, y frecuentemente se desarrolla en el sistema nervioso periférico. También, las complicaciones diabéticas vasculares se refieren en una enfermedad en la cual se desarrolla angioesclerosis debido a hiperglicemia inducida por diabetes y trastorno metabólico, tal como, resistencia a insulina, que resulta de trastornos de flujo sanguíneo .

También, la composición farmacéutica se usa para prevenir o tratar hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, o inflamación.

La hiperlipidemia se refiere a un estado en el cual se realiza de forma normal el metabolismo de las grasas, tal como triglicéridos o colesterol y de esta manera, la sangre contiene una gran cantidad de grasa y cuando está presente la sangre un material graso, puede acumularse en las paredes de los vasos sanguíneos, provocando inflamación, y provocando de este modo enfermedad cardiovascular. También, la enfermedad de arterias coronarias se refiere a un estado en el cual se acumulan depósitos grasos y tejidos fibrosos en una arteria (arteria coronario o arteria cardíaca) a través de la cual se suministra sangre al corazón, y de este modo, se reduce el suministro sanguíneo al músculo cardíaco de modo que se desarrolla angina de pecho, necrosis miocárdica, infarto al miocardio y de esta manera, las funciones del corazón. De acuerdo a una modalidad de la presente invención, una causa de la hiperlipidemia o enfermedad de arterias coronarias puede ser o no diabetes .

La inflamación se entiende por un experto en la técnica como que incluye un síntoma que se caracteriza como una respuesta de defensa tópica o sistémica, y se puede provocar por reacciones químicas y/o fisiológicas contra heridas externas físicas, infección, las enfermedades crónicas como se describe anteriormente, y/o estímulos externos (por ejemplo, parte de una reacción alérgica) . Las reacciones provocan destrucción, dilución, o aislamiento de tejidos de herida. Por ejemplo, se desarrolla inflamación debido a pirexia, tumescencia, dolor, enrojecimiento, vasodilatación y/o flujo sanguíneo incrementado, invasión de células sanguíneas blancas en sitios infectados, o pérdida de función y/u otros síntomas relacionados al estado de inflamación. Por consiguiente, la inflamación se entiende como que incluye una enfermedad, trastorno o estado inflamatorio, y en particular, inflamación aguda, crónica, ulcerativa, específica, alérgica y necrótica y otros tipos de inflamación conocidos por un experto en la técnica. Por consiguiente, la composición farmacéutica se puede usar para tratar asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD, por sus siglas en inglés) , fibrosis pulmonar, enfermedad alérgica, rinitis, enfermedad inflamatoria de intestino, úlcera, dolor inflamatorio, pirexia, arteriosclerosis , enfermedad de arterias coronarias, vasculitis, pancreatitis, artritis, osteoartritis , artritis reumatoide, conjuntivitis, iritis, escleritis, uveítis, curación de heridas, dermatitis, eczema, psoriasis, ataque, diabetes, enfermedad autoinmunitaria, enfermedad de Alzheimer, esclerosis múltiple, sarcoidosis, enfermedad de Hodgkin, otras malignidades, y otros tipos de enfermedades que tienen un factor inflamatorio.

De acuerdo a una modalidad de la presente invención, el compuesto puede tener una actividad inhibitoria de 15 - lipoxigenasa .

Se conoce que la 15-lipoxigenasa se relaciona a una causa de varias enfermedades que incluyen arteriosclerosis , asma, glomerulonefritis , complicación crónica diabética, etc. (Harats et al., Arterioscler. Thromb. Va.sc. Biol., (2000) 20 (9) : 2100-2105 ; Natarajan et al., Front Biosci., (2003) 8 : S783-795; Hatley et al., J. Biol. Chem. , (2003) 278 (28) : 25369-25375 ; Shannon et al., Am. Rev. Respir. Dis., (1993)147 (4) :1024-1028; Montero y Badr, Ex . Neph. , (2000) 8 (1) : 14-19; Hatley et al., J. Biol. Chem., (2003) 278 (28) : 25369-25375 ; Natarajan et al., Arterioscler Thromb. Vasc. Biol., 24, (2004) 24 (9) : 1542-1548 ; Ma et al., Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids. , (2005) 72 (1) : 13-20 ; Xu et al., Kidney Int., (2006) 69 (3) : 512-9 ; Dwarakanath et al., J". Vasc. Res., (2008 ) 45 ( 2 ) : 132 -142 ) , y la expresión de 15-lipoxigenasa se mejora en un estado de diabetes o en un estado de hiperglicemia . La expresión mejorada de 15-lipoxigenasa afecta a varios metabolismos, red de señalización, control de transcripción y expresión génica, incrementando de este modo la formación de radicales libres, peroxidación de lípidos, proteína-cinasa activada por mitógeno (MAP, por sus siglas en inglés) , y reacciones inflamatorias. Estos resultados contribuyen al desarrollo de complicaciones diabéticas, y al inhibir artificialmente la expresión o actividad de 15-lipoxigenasa, se pueden prevenir y tratar complicaciones vasculares diabéticas, nefropatía diabética, y neuropatía diabética en un modelo de animal con diabetes (Natarajan y Nadler, Front . Biosci . (2003 ) 8 : s783 -795; Reilly et al., J. Biol. Chem. (200 ) 279 (10) : 9440-9450 ; Obrosova et al., Diabetes 55 (Suppl .1) (2006) A188 ,· Xu et al., Nephrol Dial Transplant . , (2009 ) 24 ( 6 ): 1744 -1752 ; Yuan et al., Am J Physiol Renal Physiol. (2008) 295 (2) : F605-617) . También, la inhibición de la expresión o actividad de 15-lipoxigenasa se sugiere como un método para prevenir o tratar enfermedad de arterias coronarias que se induce o no por diabetes (Siu, J Cardiovasc Med (Hagerstown) , (2010) 11(1) :l-6; Nagelin et al., J. Biol. Chem. (2009) 284 (45 ): 31303 -31314 ; Natarajan et al., Front Biosci. (2003) 8:s783-95; Hatley et al., J". Biol. Chem. (2003) 278 (28) : 25369-25375) , y también, puesto que la 15-lipoxigenasa juega un papel importante en la biosíntesis de asma, alergia, psoriasis, y puesto que los factores mediadores de inflamación y un inhibidor de la enzima en inhiben una ruta bioquímica relacionada a los estados de enfermedad, la inhibición de 15-lipoxigenasa es útil al tratar las enfermedades relacionadas a inflamación (Liu et al., Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. (2009) 297(1) :1196-1203; Jeon et al., Clin Exp Allergy. (2009) 39 (6) : 908-917 ; Claesson, Prostaglandins Other Lipid Mediat . (2009) 89(3-4): 120-125; Hajek, J Allergy Clin Immunol . , (2008) 122 (3) :633-639) .

Por consiguiente, un compuesto que exhibe la actividad inhibitoria contra 15-lipoxigenasa se puede usar como un agente para prevenir o tratar la nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, o inflamación como se describe anteriormente.

Otro aspecto de la presente invención proporciona un método para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consisten de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones diabéticas vasculares, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación, en donde el método incluye poner en contacto la composición farmacéutica y un sujeto.

La puesta en contacto se puede realizar vitro o in vivo. Si la puesta en contacto se realiza in vivo, el método puede incluir además administrar la composición farmacéutica al sujeto.

El sujeto puede ser una célula, un tejido, un órgano, o un individuo. También, la administración puede comprender la puesta en contacto directamente de una solución de la composición farmacéutica disuelta en una solución amortiguadora apropiada y una célula, un tejido, o un órgano, o puede ser administración parenteral . La composición farmacéutica y el método de administración usados en el tratamiento se han descrito ya anteriormente y de esta manera no se describirán en detalle en la presente.

Entre tanto, el sujeto al cual se puede administrar la composición farmacéutica puede ser cualquier clase de animal. Por ejemplo, el sujeto puede ser un humano, un animal no humano, tal como un perro, un gato, o un ratón.

Breve Descripción de las Figuras Las características y ventajas anteriores y otras de la presente invención llegarán a ser más evidentes al describir en detalle las modalidades de ejemplo de la misma con referencia a las figuras anexas en las cuales : La Figura 1 muestra resultados de medición de una cantidad de colesterol total en suero obtenido después de que un compuesto de acuerdo a una modalidad de la presente invención se administró a ratones con diabetes inducida; La Figura 2 muestra resultados de medición de una cantidad de triglicéridos en suero obtenidos después de que un compuesto de acuerdo a una modalidad de la presente invención se administró a ratones con diabetes inducida.

La Figura 3 muestra resultados de medición de un nivel de expresión de fibronectina en tejido de corteza renal después de que un compuesto de acuerdo con una modalidad de la presente invención se administró a ratones con diabetes inducida; La Figura 4 muestra los resultados de medición de una cantidad de ARNm transcrito de un gen PAI-l en tejidos de corteza renal después de que un compuesto de acuerdo a una modalidad de la presente invención se administró a ratones con diabetes inducida; La Figura 5 muestra resultados de medición de una cantidad de ARNm transcrito de un gen a MCP-1 en tejidos de corteza renal después de que un compuesto de acuerdo a una modalidad de la presente invención se administró a ratones con diabetes inducida; y La Figura 6 muestra resultados de medición de una cantidad de ARNm transcrito de un gen TGF-ß? en tejidos de corteza renal después de que un compuesto de acuerdo a una modalidad de la presente invención se administró a ratones con diabetes inducida, en donde en las Figuras 1 a 6, * indica que hay un significado estadístico entre un grupo de control y un grupo de prueba al cual no se administró el compuesto, y + indica que hay un significado estadístico entre un grupo de prueba al cual no se administró un compuesto y un grupo de prueba al cual se administró un compuesto.

Descripción Detallada de la Invención La presente invención se describirá en detalle adicional con referencia a los siguientes ejemplos. Estos ejemplos son solo para propósitos ilustrativos y no se proponen para limitar el alcance de la presente invención. Ejemplo 1: Síntesis del éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido carbámico Se disolvieron 554 mg (2.887 mmoles) de benzoilacetato de etilo y 641 mg (2.887 mmoles) de 3,4-dimetoxifenilpiperazina en tolueno y se sometieron a reflujo durante 24 horas. Se disolvieron 736 mg (1.99 mmoles) de un compuesto obtenido después de la concentración bajo presión reducida en metanol y se enfrió a una temperatura de 0°C, y se adicionó a esto lentamente 109 mg (2.887 mmoles) de borohidruro de sodio. La solución resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, y luego se concentró un solvente bajo presión reducida y se eluyó con agua y se extrajo varias veces con acetato de etilo. Entonces, se secó una capa orgánica obtenida usando sulfato de magnesio y se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se refino por cromatografía en columna (hexano: acetato de etilo=l:l), obteniendo de este modo 1.592 mmoles (589 mg) de un compuesto. El compuesto obtenido se disolvió en tetrahidrofurano (10 mL) , y luego se adicionaron 820 mg (5 mmoles) de 1 , 11 -carbomidiazol a esto y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, y se adicionó amoníaco-agua en exceso a esto y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con agua, y se extrajo varias veces con acetato de etilo y la capa orgánica obtenida se secó con sulfato de magnesio y se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se refino por cromatografía en columna (acetato de etilo) para producir un compuesto objetivo (Cantidad: 329 mg, Rendimiento: 28 %) .

RMN-Hl (200MHz, CDC13) d: 2.82 (dd, 1H) , 3.04 (m, 5H) , 3.61(m, 2H) , 3.77(m, 2H) , 3.88(d, 6H) , 4.77(br, 2H) , 6.15(t, 1H) , 6.42(d, 1H) , 6.57(s, 1H) , 6.82(d, 1H) , 7.41(m, 5H) .

Ejemplo 2: Síntesis de éster 3 - [4 - ( 3 , 4 -dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-fluoro-fenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico Se obtuvo un compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 1, excepto que se usaron 4- fluorobenzoilacetato y 3 , -dimetoxifenilpiperazina como materiales de inicio (Cantidad: 542 mg, Rendimiento: 37 %) .

RMN-XH (200MHz, CDC13) d: 2.82 (dd, 1H) , 3.01 (m, 5H) , 3.60(m, 2H) , 3.75 (m, 2H) , 3.86 (d, 6H) , 4.92(br, 2H) , 6.15(t, 1H) , 6.42(d, 1H) , 6.56 (d, 1H) , 6.80(d( 1H) , 7.04(t, 2H) , 7.38(t, 2H) Ejemplo 3: Síntesis de éster 3- (4-benzo [1, 3] dioxol-5-il- piperazin-l-il) -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido carbámico Se obtuvo el compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 1, excepto que se usaron benzoilacetato de etilo y 3 , 4 -metilendioxifenilpiperazina como materiales de inicio (Cantidad: 190 mg, Rendimiento: 48 %) RMN-^'H (200MHz, CDC13) d: 2.98 (m, 6H) , 3.59(m, 2H) , 3.76(m, 2H) , 4.71(br, 2H) , 5.94(s, 2H) , 6.15(t, 1H) , 6.36(dd, 1H) , 6.55(s, 1H) , 6.74(d, 1H) , 3.40(m, 5H) Ejemplo 4: Síntesis de clorhidrato del éster 3- [4- (3,4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-trifluorometilo-fenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico Se obtuvo el compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 1, excepto que se usaron etil-4-trifluorometil-benzoilacetato y 3 , 4-dimetoxi-fenilpiperazina como materiales de inicio (Cantidad: 250 mg, Rendimiento: 52 %) . Se disolvió el producto generado en diclorometano y se adicionó a esto una solución saturada de HCl/éter para producir clorhidrato.

RMN-1H (200MHz, DMSO) d: 2.90(dd, 1H) , 3.12 (dd, 1H) , 3.34(m, 4H) , 3.75(s, 3H) , 3.78(s, 3H) , 3.85(m, 4H) , 6.00(m, 1H) , 6.60(br, 2H) , 7.01(m, 2H) , 7.20(m, 1H) , 7.60(d, 2H) , 7.75(d, 2H) Ejemplo 5: Síntesis de éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-nitro-fenil) -3-oxo-propílico del ácido carbámico Se obtuvo el compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 1, excepto que se usaron etil-4 -nitro-benzoilacetato y 3 , 4-dimetoxi-fenilpiperazina como materiales de inicio (Cantidad: 261 mg, Rendimiento: 57 %) .

RMN1H (200MHz, DMSO) d: 2.96 (dd, 1H) , 3.16 (dd, 1H) , 3.42(m, 4H) , 3.76(s, 3H) , 3.78(s, 3H) , 3.92(m, 4H) , 6.05(m, 1H) , 6.64(br, 2H) , 7.02(m, 1H) , 7.24 (m, 2H), 7.65(d, 2H) , 8.24(d, 2H) Ejemplo 6: Síntesis de 3- [4- (4-cloro-fenil) -piperazin-l-il] -3 -oxo- 1- fenil-propílico del ácido (R) -carbámico Se disolvieron 1.0 g (6.0 mmoles) de ácido (R) -3-hidroxi-3-fenilpropionico y 1.18 g (6.0 mmoles) de 4-cloro- fenilpiperazina en 50 mL de tetrahidrofurano como un solvente a temperatura ambiente, y se adicionaron a esto gota a gota 1.24 g (6.0 mmoles) de EDC y 0.81 g (6 mmoles) de HOBt y se agitó a una temperatura de 25°C durante 5 horas. Se removió el solvente de exceso de esto por destilación bajo presión reducida, y el producto resultante se neutralizó con 20 mL de solución acuosa de cloruro de sodio 1 N, y a esto se adicionaron 25 mL de acetato de etilo y la capa orgánica obtenida se aisló y se extrajo dos veces con 15 mL de acetato de etilo. La capa orgánica se secó con 2 g de sulfato de magnesio anhidro y se filtró, y se concentró el filtrado bajo presión reducida y se purificó por aislamiento por cromatografía en columna (hexano : acetato de etilo=l:l a 1:10). Se disolvieron 0.345 g (1 mmol) del producto obtenido en 15 mL de tetrahidrofurano y luego a esto se adicionaron 0.325 g (2 mmoles) de 1 , 1 ' -carbodimidazol y se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente, y luego, a esto se adicionó una solución de amoníaco en exceso y se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo varias veces con acetato de etilo, y la capa orgánica obtenida se secó con sulfato de magnesio y se concentró bajo presión reducida. Se verificó el residuo obtenido por cromatografía en columna (hexano : acetato de etilo = 1:1), produciendo de este modo el compuesto (Cantidad: 1.2 g, Rendimiento: 52.5 %) .

RMN-XH (200MHz, CDC13) d: 2.82(dd, 1H) , 3.07(m, 5H) , 3.58(m, 2H) , 3.74(m, 2H) , 4.81(br, 2H) , 6.13(t, 1H) , 6.84 (d, 2H) , 7.38 (m, 7H) Ejemplo 7: Síntesis de éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (S) -carbámico Se obtuvo el compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 6, excepto que se usaron ácido (S) -3-hidroxi - 3 - fenilpropionico (6 mmoles) y 3,4-dimetoxi fenilpiperazina (6 mmoles) como materiales de inicio (Cantidad: 1.38 g, Rendimiento: 56 %) RMN- XH (200MHz, CDC13) d: 2.82 (dd, 1H) , 3.04 (m, 5H) , 3.61(m, 2H) , 3.77(m, 2H) , 3.88(d, 6H) , 4.77(br, 2H) , 6.15(t, 1H) , 6.42(d, 1H) , 6.57(s, 1H) , 6.82(d, 1H) , 7.41(m, 5H) Ejemplo 8: Síntesis de áster 3- [4- (3 , -dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3 -oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico Se obtuvo el compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 6, excepto que se usaron ácido (R)-3-hidroxi-3-fenilpropionico y 3 , 4-dimetoxi-fenilpiperazina como los materiales de inicio (Cantidad: 1.040 g, Rendimiento: 42 %) RM -^ (200MHz, CDC13) d: 2.82 (dd, 1H) , 3.04 (m, 5H) , 3.61(m, 2H) , 3.77(m, 2H) , 3.88(d, 6H) , 4.77(br, 2H) , 6.15 (t, 1H) , Ejemplo 9: Síntesis de éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1-fenil-butílico del ácido carbámico Se disolvieron fenil-l-profenil-cetona (4.1 mmoles) y 3 , 4 -dimetoxi fenilpiperazina (4.9 mmoles) en 30 mL de etanol como un solvente se agitó a una temperatura de 72 °C durante 48 horas. El solvente se destiló bajo presión reducida, y la mezcla resultante se eluyó con agua, se extrajo dos veces con agua, y se extrajo dos veces con acetato de etilo. Bajo presión reducida se destiló la capa orgánica y luego, se secó con sulfato de magnesio y se filtró, y se concentró el filtrado bajo presión reducida y se purificó por cromatografía en columna (hexano: acetato de etilo=4:l), produciendo de este modo un compuesto. El compuesto (2.9 mmoles) se disolvió en 20 mL de metanol y a esto se adicionó lentamente NaBH4 (3.8 mmoles) . El producto resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, se concentró el solvente bajo presión reducida y el residuo amarillo se purificó por cromatografía en columna (hexano : acetato de etilo=l:l). El compuesto purificado (2 mmoles) se disolvió en 15 mi de tetrahidrofurano y luego a esto se adicionó 1 , 11 -carbodiimidazol (4 mmoles) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, y a esto se adicionó agua y amoníaco en exceso, y se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo varias veces con acetato de etilo, y la capa orgánica obtenida se secó con sulfato de magnesio y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna (hexano : acetato de etilo = 1:1), produciendo de este modo un producto final (Cantidad: 90.9 mg, Rendimiento : 22 %) .

RMN^H (200MHz, CDC13) d 1.81(m, 1H) , 2.32 (m, 1H) , 2.5(m, 3H) , 2.8(m, 2H) , 3.14(m, 4H) , 3.80(s, 6H) , 4.80(br, 2H),6.02(t, 1H) , 6.92{ m, 4H) , 7.36(m, 5H) Ejemplo 10: Síntesis de éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-cloro-fenil) -3-oxo-propílico del ácido carbámico Se obtuvo el compuesto objetivo de la misma manera como en el Ejemplo 1, excepto que se usaron etil-4 -cloro-benzoilacetato y 3 , 4-dimetoxifenilpiperazina como materiales de inicio (Cantidad: 543 mg, Rendimiento: 42 %) .

RMN-XH NMR(200MHz, CDC13) d: 2.82 (dd, 1H) , 3.01 (m, 5H) , 3.61(m, 2H) , 3.77 (m, 2H) , 3.86(d, 6H) , 4.84(br, 2H) , 6.15(t, 1H) , 6.42(d, 1H) , 6.57(s, 1H) , 6.82(d, 1H) , 7.35(s, 4H) Ejemplo 11: Prueba in-vitro de Efecto Inhibitorio en 15- Lipoxigenasa A fin de confirmar que los compuestos elaborados de acuerdo a los Ejemplos 1 a 10 inhiben específicamente solo 15-lipoxigenasa, se usaron 12-lipoxigenasa inducida por plaquetas humanas como un control negativo y 15-lipoxigenasa inducida por células de reticulocitos de conejo como un grupo de prueba, para identificar el efecto inhibitorio de los compuestos en 12-lipoxigenasa.

La 12-lipoxigenasa reacciona con araquidonato como un substrato para producir 12 -hidroxieicosatetranoato (12 -HETE) como un producto. Por consiguiente, la actividad de 12-lipoxigenasa se evalúa al medir la cantidad de 12-HETE generado por espectrometría. También, la 15-lipoxigenasa reacciona con un ácido linolénico como un substrato para producir ácido 13 -hidroperoxi - 9 , 11-octadecadienoico (13-HPODE) como un producto. Por consiguiente, se evalúa la actividad de 15-lipoxigenasa al medir la cantidad de 13-HPODE generado por espectrometría.

Se midió la actividad de 12-lipoxigenasa cuando la concentración de cada uno de los compuestos fue 10 µ?. Cada muestras se pretrató al usar una solución amortiguadora (Tris-HCl 50 mM, Tritón X-100 al 0.1 %, pH 7.4) a una temperatura de 25°C durante 15 minutos y luego, se adicionó a esto araquidonato 30 µ? (una concentración del mismo se controló para que sea 30 µ? durante la reacción) y se hizo reaccionar una temperatura de 25°C durante 15 minutos, y la cantidad de 12 -HETE como un producto generado se midió por absorbancia en una longitud de onda de 570 nm.

Se midió la actividad de 15- lipoxigenasa cuando la concentración de cada uno de los compuestos fue 10 µ?. Cada muestra se pretrató al usar una solución amortiguadora (solución salina amortiguada con fosfato, pH 7.4) a una temperatura de 4°C durante 15 minutos, y luego se adicionó ácido linolénico 260 µ? (una concentración del mismo se controló para que sea 260 µ? durante la reacción) y se hizo reaccionar la temperatura de 4°C durante 10 minutos, y la cantidad de 13-HPODE como un producto generado se midió por absorbancia a una longitud de onda de 660 nm.

Los resultados obtenidos al medir el efecto inhibitorio de los compuestos en la actividad de 12-lipoxigenasa y 15 - lipoxigenasa se muestran en la Tabla 1. Tabla 1 Ejemplo 12: Prueba de Efecto Farmacéutico en Hiperlipidemia Diabética en Modelo de Animal con Diabetes Se usaron ratas Sprague-Dawley (n=21, 4 semanas, macho) como modelos de laboratorio (Central Lab. Animal Inc.) . Se usaron como un grupo de prueba ratas (n=14) que tienen diabetes inducida por administración intraperitoneal de 50 mg/kg de estreptozotocina, y como un control se usaron ratas (n=7) administradas intraperitonealmente con sólo solvente (solución amortiguadora de ácido cítrico 100 mM, pH 4.5). Típicamente, la estreptozotocina destruye las células beta del páncreas para inducir diabetes, y de este modo, se incrementa el azúcar sanguíneo y se incrementan las cantidades de colesterol y triglicéridos en suero. 2 días después de la administración de estreptozotocina, se induce diabetes en grupos de prueba. El grupo de prueba se dividió en dos grupos, y las ratas de un grupo se administraron oralmente una vez al día con 200 mg/kg de éster 3- [4- (3,4-dimetoxi-fenil) -piperazin- 1- il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico durante cuatro semanas. El otro grupo se administró oralmente con 30 % de polietilenglicol (PEG) en lugar del compuesto.

Después de la administración de 4 semanas del compuesto y PEG, se midieron las cantidades de colesterol total y triglicéridos en suero de cada uno de los grupos y los resultados de esto se muestran en las Figuras 1 y 2. A fin de medir las cantidades de colesterol total y triglicéridos, se aisló suero de las ratas y se usó un autoanalizador Hitachi 7600. Como resultado, se confirmó que debido a la administración de éster ácido 3- [4- (3,4-dimetoxi-fenil) -piperazin- 1- il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico, se disminuyó la concentración (120+13 mg/dl) de colesterol total incrementado por estreptozotocina a 66+9 mg/dl similar a 62+5 mg/dl del control, y también, se disminuyó sustancialmente la concentración (760+162 mg/dl) de triglicéridos incrementada por estreptozotocina a 126±44 mg/dl. Es decir, el colesterol y triglicéridos incrementados en suero se disminuyeron significativamente debido a la administración con el compuesto. Este resulta, se confirmó que el compuesto es útil para prevenir o tratar hiperlipidemia .

Ejemplo 13: Prueba de Efecto Farmacéutico en Nefropatia Diabética Se usaron ratas Sprague-Dawley (n=21, 4 semanas, macho) como modelos de laboratorio (Central Lab. Animal Inc.) . Como un grupo de prueba se usaron ratas (n=14) que tienen diabetes inducida por administración intraperitoneal de 50 mg/kg de estreptozotocina, y como un control se usaron ratas (n=7) administradas intraperitonealmente con sólo un solvente (solución amortiguadora de ácido cítrico 100 mM, pH 4.5) . Típicamente, en ratas que tienen diabetes inducidas por estreptozotocina, la nefropatia diabética se induce por hiperglicemia, y uno de los síntomas es fibrosis renal, y se incrementó la expresión génica de una proteína de matriz extracelular tal como fibronectina . 2 días después de la administración de estreptozotocina, indujo diabetes en el grupo de prueba. El grupo de prueba se dividió en dos grupos, y las ratas de un grupo se administraron oralmente una vez al día con 200 mg/kg de éster 3 - [4 - ( 3 , 4 -dimetoxi- fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico durante 4 semanas . El otro grupo se administró oralmente con 30 % de polietilenglicol (PEG) en lugar del compuesto .

Después de la administración durante 4 semanas del compuesto y PEG, se extrajeron los tejidos de corteza renal de cada uno de los grupos y luego, se midió el nivel de expresión de fibronectina por una reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa en tiempo real (es decir, una cantidad de ARNm transcrita de fibronectina) (ver Figura 3) . Se midió el nivel de expresión de fibronectina al usar un cebador directo (51 -GCCACACCTACAACCAGTAT-31 ; SEQ ID NO: 1) y un cebador inverso (51 -ATGACCACTCAGAAATGGAG-3 ' ; SEQ ID NO: 2) . En la RT-PCR, se realizó la fijación durante un minuto a una temperatura de 60°C, se usó verde SYBR (Applied Biosystem) como un material fluorescente, y se usó PCR en tiempo real 7300 fabricada por Applied Biosystem Company. Las reacciones diferentes de la fijación se realizaron al usar un método conocido en la técnica de acuerdo a un protocolo proporcionado por el fabricante. Para el control, se usó ARNm transcrito de un gen de beta-actina, y los resultados de medición se indicaron al dividir una cantidad de ARNm de fibronectina cuantificada de los resultados de RT-PCT por una cantidad de ARNm de beta-actina. Como resultado, debido a la administración de estreptozotocina, se incrementó el nivel de expresión de fibronectina de la corteza renal por 1.4+0.1 veces mayor que aquel del control, y debido a la administración de éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-1-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico, se disminuyó el nivel de expresión de fibronectina de la corteza cerebral por 1.2+0.1 veces más pequeño que aquel del control. De los resultados, se confirmó que el compuesto fue efectivo para inhibir la fibrosis renal inducida por diabetes.

Ejemplo 14: Prueba de Efecto Farmacéutico en Reacción Inflamatoria en Modelo Animal que Tiene Nefropatía Diabética Inducida .

Cuando se inducen nefropatía diabética por estreptozotocina, se incrementan las reacciones inflamatorias en el riñon y de este modo, se incrementa la expresión de varios genes relacionados a la inflamación (por ejemplo, PAI-1, MCP-1, y TGF-ß?) . Por consiguiente, a fin de confirmar un efecto farmacéutico del compuesto en las reacciones de inflamación, se midió la cantidad de ARNm transcrito de PAI-1, MCP-1, y TGF-ß? de los tejidos de corteza renal de los respectivos grupos usados en el Ejemplo 13 por la RT-PCR usada en el Ejemplo 13 (ver Figuras 4, 5, y 6) . Los genes se amplificaron usando las siguientes secuencias de cebador: un cebador directo (51-TCCGCCATCACCATTTT-3 ' ; SEQ ID NO: 3) y un cebador inverso (5'-GTCAGTCATGCCCAGCTTCTC-31 ; SEQ ID NO : 4) que se usaron para amplificar PAI-1; un cebador directo (5'- CCTCCACCACTATGCAGGTCTCC-31 ; SEQ ID NO: 5) y un cebador inverso (51 -GCACGTGGATGCTACAGGC-31 ; SEQ ID NO: 6) que se usaron para amplificar MCP-1; y un cebador directo (5'-CCAACTACTGCTTCAGCTCCA-3 ' ; SEQ ID NO : 7) y un cebador inverso (51 -GTCTCCAGGCTCCAAATGT-31 ; SEQ ID NO: 8) se usaron para amplificar TGF-ß?.

Como resultado, las expresiones de PAI-1, MCP-1 y TGF-ß?, que son genes relacionados con inflamación en la corteza renal se incrementaron respectivamente por 1.8+0.1, 3.4+1.0, y 1.6+0.2 veces mayor que aquel del control, debido a la administración de éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico, los niveles de expresión de los genes PAI-1, MCP-1 y TGF-ß? en la corteza renal se disminuyeron respectivamente por 1.1+0.2, 1.6+0.3 y 1.3+0.2 veces menor que aquel del control. De este resultado, se confirmó que el compuesto fue efectivo para inhibir la expresión de genes relacionados a inflamación inducidos por diabetes.

De los resultados de los Ejemplos 13 y 14, se confirmó que puesto que el compuesto inhibe la expresión de fibrosis y genes relacionados a inflamación que provocan nefropatía diabética, el compuesto es útil en la prevención o tratamiento de nefropatía diabética.

Ejemplo 15: Administración de éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico y Preparación de Tableta que Incluye el Mismo (Expectación) .

El compuesto de acuerdo a la presente invención se usa en la prevención o tratamiento de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, o inflamación. Una cantidad de administración clínicamente apropiada (administración oral) fue 300 mg por adulto.

En base a la cantidad de administración, se preparó una tableta que contiene los componentes mostrados en la Tabla 2 posterior al usar un método convencional. Se usó Avicel 102 (celulosa microcristalina) como un excipiente.

Tabla 2 Una cantidad apropiada de administración del compuesto fue 60 kg por adulto, que es equivalente a una o dos tabletas que contienen el compuesto.

Cuando las composiciones farmacéuticas de acuerdo a la presente invención se usan, se pueden prevenir o tratar de manera efectiva nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, o inflamación.

En tanto que la presente invención se ha mostrado y descrito de manera particular con referencia a modalidades de ejemplo de la misma, se entenderá por los expertos en la técnica que se pueden hacer varios cambios en la forma y detalles sin apartarse del espíritu y alcance de la presente invención como se define por las siguientes reivindicaciones.

Las secuencias del nucleótido o polinucleótido de SEQ ID NO: 1 hasta SEQ ID NO : 8 se presentan en listado de secuencias, y los contextos en el listado de secuencias se incorporan en esta solicitud en sus totalidades.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la presente invención, es el que resulta claro a partir de la presente descripción de la invención.

Claims (4)

REIVI DICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación, caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto seleccionado del grupo que consiste de un compuesto representado por la Fórmula I posterior, una sal, isómero, solvato o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y una combinación de esto; y un portador farmacéuticamente aceptable del mismo, y una combinación de esto, y un portador farmacéuticamente aceptable en donde, Xi comprende al menos uno seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, C1-C6 alquilo lineal o ramificado, halógeno que contiene F, Cl o Br, C1-C6 alcoxi lineal o ramificado, nitro, y trifluorometilo; X2 comprende al menos uno seleccionado del grupo que consiste de hidrógeno, C1-C6 alquilo lineal o ramificado, halógeno, C1-C6 alcoxi lineal o ramificado, nitro, trifluorometilo, y si X2 comprende dos o más de esto, son idénticos entre sí o diferentes entre sí y forman un ciclo conjuntamente con un átomo de carbono adyacente; e Y es hidrógeno o metilo, o forma un carbonilo conjuntamente con un átomo de carbono adyacente.

2. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el compuesto se selecciona del grupo que consiste de éster 3- [4- (3,4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido carbámico, éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-fluorofenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico, éster 3- (4-benzo [1, 3] dioxol-5-il-piperazin-l-il) -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido carbámico, clorhidrato del éster 3 - [4 - (3 , 4 -dimetoxi- fenil) -piperazin-l-il] - 1- (4 -trifluorometilo- fenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico, éster 3- [4- (3 , 4 -dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-nitro-fenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico, éster 3- [4- (4-cloro-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico, éster 3- [4- (3 , 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (S) - carbámico, éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -3-oxo-l-fenil-propílico del ácido (R) -carbámico, éster 3- [4-(3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1-fenil-butílico del ácido carbámico, y éster 3- [4- (3, 4-dimetoxi-fenil) -piperazin-l-il] -1- (4-cloro-fenil) -3 -oxo-propílico del ácido carbámico.

3. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el compuesto tiene actividad inhibitoria de 15-lipoxigenasa.

4. Un método para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de nefropatía diabética, neuropatía diabética, complicaciones vasculares diabéticas, hiperlipidemia, enfermedad de arterias coronarias, e inflamación, caracterizado porque comprende poner en contacto la composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, con un sujeto que se va a tratar.