MX2012008108A - Biomarcadores de efectos de inmunomodulacion en seres humanos tratados con anticuerpos anti-cd200. - Google Patents

Biomarcadores de efectos de inmunomodulacion en seres humanos tratados con anticuerpos anti-cd200.

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MX2012008108A
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MX
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Susan Faas Mcknight
Roxanne Cofiell
Yan Yan
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Abstract

La presente descripción se refiere a anticuerpos anti-CD200 (por ejemplo, anticuerpos variantes anti-CD200 que tienen una función efectora reducida o ninguna) y a biomarcadores para usarse en una variedad de métodos de diagnóstico y terapéuticos, por ejemplo, para determinar si a un ser humano se le ha administrado uno o más de los anticuerpos a una dosis suficiente para inducir un efecto de inmunomodulación deseado en el ser humano yio para seleccionar un programa de dosificación apropiado para un paciente.

Description

BIOMARCADORES DE EFECTOS INMUNOMODULADORES EN HUMANOS TRATADOS CON ANTICUERPOS ANTI-CD200 Referencia Cruzada con Solicitudes Relacionadas La presente solicitud reclama la prioridad y el beneficio de la Solicitud de Patente Provisional Norteamericana Serie No. 61/416,974, presentada el 24 de noviembre de 2010; 61/401,442, presentada el 12 de agosto de 2010; 61/337,997, presentada el 11 de Febrero de 2010; 61/294,066, presentada el 11 de enero de 2010, todas tituladas "Biomarcadores de Efectos Inmunomodulares en Humanos Tratados con Anticuerpos Anti-CD200", cuyos contenidos totales están incorporados a la presente invención como referencia.
Campo de la Invención El campo de la invención es en medicina, inmunología, biología molecular y química de proteína.
Antecedentes de la Invención La proteína CD200 humana es una glucoproteína de transmembrana tipo 1a, que normalmente se expresa en timocitos (por ejemplo, células T y células B), neuronas y células endoteliales. A través del encaje con su receptor cognato, CD200R, la proteína CD200 transduce una señal inmunorreguladora que puede suprimir las respuestas inmune transmitidas por célula T. Los estudios en animales de eliminación CD200, así como los experimentos que utilizan los anticuerpos anti-CD200 antagonistas y las proteínas de fusión CD200-Fc recombinantes, han demostrado que la proteína CD200 funciona como un agente inmunosupresor en trastorno autoinmune y durante trasplante. (Ver, por ejemplo, las Publicaciones de Hoek y asociados (2000) Science 290:1768-1771 y Gorczynski y asociados (1999) J Immunol 163:1654-1660.) La interacción entre CD200 y CD200R, da como resultado perfiles de citocina alterados, y promueve una respuesta de célula T TH2 (respuesta inmune humoral) con respecto a una respuesta TH1 (respuesta inmune celular). Ver, por ejemplo, la Publicación de Kretz-Rommel (2007) J Immunol 178:5595-5605.
El sistema inmune humano emplea una variedad de mecanismos de inmunosupervisión, que pueden identificar células malignas dentro de un organismo huésped, y exterminar las células antes de que se desarrolle cáncer. Ver, por ejemplo, las Publicaciones de Geertsen y asociados (1999) Int J Mol Med 3X11:49-57; Kerebijn y asociados (1999) Crit Rev Oncol Hematol 31 (1 ) :31 -53: y Pardoll (2003) Annu Rev Immunol 21_:807-39. Sin embargo, las células de cáncer son conocidas por evadir la detección del sistema inmune. Un mecanismo potencial a través del cual las células de cáncer escapan a la inmunovigilancia, es la expresión o sobreexpresión de la proteína CD200. De hecho, la proteína CD200 ha mostrado ser expresada o sobreexpresada en una variedad de células de cáncer humano, incluyendo, por ejemplo, células de leucemia linfocítica crónica de célula B, células de cáncer de próstata, células de cáncer de seno, cáncer de cáncer de colon y células de cáncer de cerebro. Ver, por ejemplo, las Publicaciones de Kawasaki y asociados (2007) Biochem Biophys Res Commun 364(4) :778-782; Kretz-Rommel y asociados (2007), supra; y Siva y asociados (2008) Cáncer Immunol Immunother 57(7) :987-96.
Los biomarcadores moleculares con frecuencia son utilizados en estudios desarrollo de fármacos tempranos, para determinar, por ejemplo, si un fármaco es biológicamente activo en un paciente - ya que el fármaco produjo un efecto biológico medible en el paciente al cual se administra. Por ejemplo, los biomarcadores pueden ser útiles durante estudios fase I, para establecer programas de dosificación para estudios fase II futuros, y en general, para ayudar a determinar programas de dosificación optimizados y clínicamente significativos para tratar pacientes que padecen de la enfermedad. Los biomarcadores también pueden ser útiles para identificar el surgimiento de efectos secundarios potenciales, u otros efectos no terapéuticos en un humano tratados con un fármaco, para determinar de esta manera un perfil de seguridad para el fármaco.
Breve Descripción de la Invención La presente descripción está basada, al menos en parte, en el descubrimiento por parte de los inventores, de diversos biomarcadores, un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en una o más de dichos biomarcadores, evidencia el surgimiento en un humano de un efecto inmunomodulador deseado como resultado de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, los inventores han observado que después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un humano, se reduce en el humano la concentración de leucocitos CD200+ en la circulación (por ejemplo, subconjuntos de células T CD200+ incluyendo, por ejemplo, células T CD2007CD4+ y/o células T CD200+/CD4 + activadas). Aunque la descripción no está proyectada para limitarse a teoría o mecanismo de acción alguno, los inventores consideran que la pérdida observada de leucocitos CD200+ se debe a uno o ambos de (a) pérdida de expresión CD200 por parte de los leucocitos y (b) movilización de las células fuera de la periferia, en lugar de una detección de los leucocitos CD20CT. También se observa por parte de los inventores que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200, el nivel de expresión de CD200R a través de una variedad de subconjuntos de leucocito (por ejemplo, células T CD4 + , células T CD8+, células T CD4+ activadas, células T NK, ?· células T CD21 +/CD25+/Fox3P+) fue incrementado. Además, los inventores observaron además que la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un humano que padece de cáncer dio como resultado:(i) una concentración incrementada de las células T activadas, en comparación con la concentración de las células en el humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (ii) una concentración disminuida de células T reguladoras, en comparación con la concentración de las células en el humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (iii) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, en comparación con la proporción correspondiente en el humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200. De hecho, tal como se elabora en los ejemplos de operación, la concentración de las células T reguladoras disminuyó en cuatro de siete (57%) pacientes, cuya enfermedad clínica estaba estabilizada o mejorada, mientras que únicamente el 29% de los pacientes cuya enfermedad clínica progresó clínicamente, experimentaron una disminución celular en la concentración de células T reguladoras.
Los anticuerpos anti-CD200 normalmente están bajo investigación como agentes terapéuticos potenciales para tratar una variedad de enfermedades incluyendo, pero sin limitarse a cáncer, trastornos inflamatorios (por ejemplo, rechazo de injerto) y trastornos de huesos. Por ejemplo, el anticuerpo anti-CD200 humanizado ALXN6000 (samalizumab; Alexion Pharmaceuticals, Inc., Cheshire, CT) está siendo evaluado actualmente en pruebas clínicas para el tratamiento de cáncer. Aunque la descripción no está limitada a teoría o mecanismo de acción alguno en particular, los inventores de la presente invención consideran que el monitoreo de un paciente tratado con un anticuerpo anti-CD200, tal como samalizumab para un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en uno o más de los biomarcadores aquí descritos, es útil para determinar si el anticuerpo anti-CD200 tiene la capacidad de producir un efecto inmunomodulador deseado en el humano al cual se administra el anticuerpo. Además, el monitoreo del grado del efecto inmunomodulador (por ejemplo, detectando un cambio en el uno o más de los biomarcadores aquí descritos) también es útil para identificar una dosis - una dosis de umbral o un programa de dosificación - de un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, samalizumab) el cual, en virtud del efecto inmunomodulador del anticuerpo en el humano, es suficiente para lograr un efecto clínicamente significativo en la enfermedad (es decir, suficiente para tratar una enfermedad, tal como cáncer). Como dato curioso, siete de veinticinco pacientes con B-CLL y mieloma múltiple a los que se les administró samalizumab en el estudio de seguridad fase I, exhibieron enfermedad estable tal como se determina a través de evaluaciones en serie de conteos de sangre periférico y exploraciones CT. Se observó un efecto inmunomodulador deseado del anticuerpo ant¡-CD200 en pacientes tratados, tal como se refleja en un cambio (por ejemplo, un incremento o reducción) en uno o más de los biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200, tal como aquí se describe.
Por consiguiente, en un aspecto, la descripción proporciona un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano (por ejemplo, un paciente con cáncer). El método incluye detectar un incremento o disminución de al menos un biomarcador inmunomodulador (algunas veces referido en la presente invención como un "biomarcador inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200") aquí descrito en una muestra de sangre obtenida de un humano al cual se le ha administrado un anticuerpo anti-CD200, para determinar de esta manera si el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador en el humano. El efecto inmunomodulador puede estar caracterizado por un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en al menos un biomarcador, por ejemplo, un biomarcador inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 aquí descrito, el cambio seleccionado del grupo que consiste en:(i) una concentración reducida de células T reguladoras, relativa a la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en humanos antes de la primera administración del anticuerpo; (ii) una concentración incrementada de células T CD8 + , relativa a la concentración de células T CD8+ del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (iii) una concentración incrementada de células T activadas, relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (iv) una concentración reducida de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ), relativa a la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ (por ejemplo, células T CD200FT), relativa a la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (vi) una proporción del porcentaje de células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras (T regs) de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1, al menos 6:1, o al menos 7:1), en forma relativa a la proporción de células T activadas a T regs en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (vii) un nivel disminuido de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida de un paciente antes de la administración al paciente de un anticuerpo anti-CD200, relativa al nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica del paciente antes de la administración del anticuerpo; y (viii) un nivel incrementado de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un paciente al que se le administra un anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, una reducción en la expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo anti-CD200, en comparación con un nivel de expresión de control (por ejemplo, el nivel de expresión CD200 en una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200), indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Quedará entendido que cualesquiera de los métodos aquí descritos pueden implicar determinar si ha habido un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en dos o más (por ejemplo, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, o 10 o más) de los biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200 aquí descritos. Cuando se lleva a cabo la interrogación de más de uno de los biomarcadores, se puede analizar cualquier combinación de dos o más (por ejemplo, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o más) de los biomarcadores.
Quedará entendido que en algunas modalidades, un cambio en expresión puede ser un cambio en la expresión de proteína o un cambio en la expresión de mARN. Esto es, por ejemplo, los métodos pueden interrogar a una población de leucocitos de un paciente, para determinar si ha ocurrido una reducción en el nivel de expresión de mARN CD200 y/o proteína CD200, en forma relativa a un nivel de control de la expresión de mARN y/o proteína. Los métodos para medir la expresión de proteína y mARN, son bien conocidos en la técnica y se describen en la presente invención.
En algunas modalidades, una reducción en la concentración de uno o más conjuntos de células de médula ósea CD200 en una muestra biológica obtenida del paciente, en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Los leucocitos CD200+ (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) o subconjuntos, pueden ser, pero no se limitan a, cualesquiera de los leucocitos CD200+ (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) o subconjuntos aquí descritos (infra).
Quedará entendido que la detección puede comprender, por ejemplo, medir la concentración del tipo de célula seleccionada adecuada (por ejemplo, leucocitos CD200+ o CD200R + ) o cuantificar el nivel de expresión de uno o más marcadores de expresión tales como CD200 o CD200R.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, la detección puede ocurrir después de la primera dosis del anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, la detección (es decir, la detección de un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en al menos uno de los biomarcadores) puede ocurrir en (o menos de) dos (2) meses (por ejemplo, menos de ocho semanas, siete semanas, seis semanas, cinco semanas, un mes, cuatro semanas, tres semanas, dos semanas o 13 días, 12 días, 11 días, 10 días, nueve días, ocho días, siete días, seis días, cinco días, o menos de 5 días) después de que se administra al humano la primera dosis terapéutica del anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, la detección no ocurre hasta al menos 10 días (por ejemplo, al menos 11 días, 12 días, 13 días, 14 días o una semana, dos semanas, tres semanas, cuatro semanas, un mes, cinco semanas, seis semanas, siete semanas, u ocho semanas o más) después de que se administra al humano la primera dosis terapéutica del anticuerpo anti-CD200. Quedará entendido que, por ejemplo, en los métodos que siguen aquí descritos, puede ocurrir la medida de la concentración de tipos de célula específicas o cuantif icación del nivel de expresión de un marcador de expresión (por ejemplo, CD200 o CD200R), por ejemplo, en cualesquiera de los períodos de tiempo antes mencionados.
En modalidades en las cuales se administran al humano al menos dos (por ejemplo, al menos tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 11, 12, 13 ó 14 o más) dosis del anticuerpo anti-CD200 antes de detectar un cambio (por ejemplo, un incremento o una disminución) en al menos un biomarcador, puede ocurrir la detección, por ejemplo, a los dos meses (o menos de dos) (por ejemplo, menos de ocho semanas, siete semanas, seis semanas, cinco semanas, un mes, cuatro semanas, tres semanas, dos semanas o 13 días, 12 días, 11 días, 10 días, nueve días, ocho días, siete días, seis días, cinco días, o menos de 5 días), y/o no hasta al menos 1 día (por ejemplo, al menos dos días, tres días, cuatro días, cinco días, seis días, siete días, ocho días, nueve días, 10 días, 11 días, 12 días, 13 días, 14 días, 15 días, 16 días, 17 días, 18 días, 19 días, 20 días, o tres semanas, cuatro semanas, un mes, cinco semanas, seis semanas, siete semanas, u ocho semanas o más) después de que se administró al humano la última dosis del régimen de anticuerpo anti-CD200 de dosis múltiple. En algunas modalidades, puede ocurrir la detección entre la dosificación (por ejemplo, entre la primera y segunda dosis, entre la segunda y tercera dosis, entre la tercera y cuarta dosis, entre la quinta y sexta dosis y/o entre la séptima y octava dosis). Dicha detección puede ser útil para determinar un programa de dosificación para el humano que es efectivo para mantener un efecto inmunomodulador (por ejemplo, el nivel pico o máximo del efecto inmunomodulador) en el humano en el curso de tratamiento. Quedará entendido que, por ejemplo, en los métodos siguientes en la presente invención, puede ocurrir la medida de la concentración de los tipos de célula específica o la cuantificación del nivel de expresión de un marcador de expresión (por ejemplo, CD200 o CD200R), por ejemplo, dentro de cualesquiera de los períodos de tiempo antes mencionados. En algunas modalidades, puede ocurrir la detección de un cambio en uno o más de los biomarcadores aquí descritos a lo largo del tratamiento del paciente (por ejemplo, antes y/o después de cada una de las dosis de anticuerpo anti-CD200 administradas el paciente). Dicha detección puede ser útil, entre otras cosas, para una evaluación longitudinal del efecto del anticuerpo anti-CD200 en la fisiología del paciente, y para permitir una correlación más precisa entre el surgimiento de los efectos inmunomoduladores y la eficacia del tratamiento con anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, una determinación positiva de que ha ocurrido en humanos un efecto inmunomodulador deseado, da como resultado una decisión por parte del practicante médico de continuar, o comenzar oficialmente, un régimen de tratamiento para el humano (por ejemplo, cuando el humano tiene, se sospecha que tiene, o está en riesgo de desarrollar una enfermedad (por ejemplo, un cáncer) en donde el practicante médico considera que se beneficiará de una terapia inmunomoduladora con anticuerpo anti-CD200) que incluye la administración de un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad, y con una frecuencia efectiva para mantener en el humano el surgimiento del efecto inmunomodulador deseado. En algunas modalidades, una determinación positiva de que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, da como resultado que el practicante médico continúe prescribiendo y/o seleccionando una terapia con anticuerpo anti-CD200 para el humano. En algunas modalidades, una determinación positiva de que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, como resultado de la administración de un anticuerpo anti-CD200, da como resultado un monitoreo continuo del humano para un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en el uno o más biomarcadores en el humano, por ejemplo, después de cada dosis del anticuerpo anti-CD200 administrada o después de cada dos dosis, etc. Esta práctica también puede ser útil para determinar un programa de dosificación para el humano, que es efectiva para mantener el efecto inmunomodulador (por ejemplo, el nivel pico o máximo del efecto inmunomodulador deseado) en el humano durante el curso de tratamiento.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método comprende medir la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde la reducción en la concentración de leucocitos CD200+ en la muestra de sangre, tal como se compara con la concentración de leucocitos CD200 + del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Los leucocitos CD200+, por ejemplo, pueden ser cualesquiera de los leucocitos CD200+ aquí descritos.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método comprende medir la concentración de células T CD200+ en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la concentración de células T CD200+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende medir la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ en la muestra de sangre, tal como se compara con la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método comprende cuantificar el nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano, al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la expresión CD200 a través de una pluralidad, en comparación con la expresión del nivel de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende cuantificar el nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica procedente de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la expresión CD200R a través de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de CD200R a través de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, cualesquiera de los métodos aquí descritos (por ejemplo, los métodos para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano), pueden incluir administrar el anticuerpo anti-CD200 al humano de acuerdo con los métodos. Por ejemplo, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: administrar un anticuerpo anti-CD200 a un humano y cuantificar el nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del humano después de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la expresión CD200R a través de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de CD200R a través de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, cualesquiera de los métodos aquí descritos (por ejemplo, los métodos para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano) puede incluir medir la concentración del tipo de célula específico, o cuantificar el nivel de expresión de un marcador de expresión específico en un tipo de célula específica, en una muestra biológica obtenida de un humano antes de la administración del anticuerpo. Por ejemplo, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: medir la concentración de células T CD200+ en una muestra de sangre de un humano, antes de administrar un anticuerpo anti-CD200 al humano; y medir la concentración de células T CD200+ en una muestra de sangre del humano después de que un anticuerpo anti-CD200 ha sido administrado al humano (por ejemplo, a través del mismo practicante o uno diferente), en donde una reducción en la concentración de células T CD200 + en la muestra de sangre post-tratamiento, en comparación con la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico en la muestra de sangre obtenida antes del tratamiento, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, cualesquiera de los métodos aquí descritos incluyen obtener la muestra biológica (por ejemplo, la muestra de sangre) del paciente antes y/o después de la administración del anticuerpo anti-CD200 al humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método comprende medir la concentración de una población de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200; y cuantificar el nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del humano al que se la administró un anticuerpo anti-CD200, en donde uno o ambos de:(i) una reducción en la concentración de una población de leucocitos CD200+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de una población correspondiente de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control y (ii) un incremento en la expresión CD200R a través de una pluralidad en comparación con un nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) medir la concentración de una población de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) en una muestra biológica obtenida de un humano, antes de la administración al humano, del anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de población de leucocito CD200+ pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo; y (iii) medir la concentración de una población de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de sangre obtenida del humano después de la administración del anticuerpo, para ob.tener de esta forma una concentración de población de leucocito CD200+ post-tratamiento, en donde una reducción en la concentración de leucocito post-tratamiento CD200+ en comparación con la concentración de leucocito CD200 + pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En un aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) medir la concentración de leucocitos CD200R + (por ejemplo, células T CD200R + ) en una muestra biológica obtenida de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de leucocito CD200FT pre-tratamiento; (ii) administración del anticuerpo al humano; y (¡ii) medir la concentración de leucocitos CD200FT (por ejemplo, células T CD200FT) del mismo tipo histológico en una muestra de sangre obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo para obtener de esta forma una concentración de leucocitos CD200R + post-tratamiento, en donde un incremento en la concentración de leucocito CD200R+ post-tratamiento, en comparación con la concentración del leucocito CD200R* pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Aún en otro aspecto, la presente descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) cuantificar el nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento; (ii) administrar a un humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) cuantificar el nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del humano obtenida después de la administración del anticuerpo, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en donde una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método incluye:(i) cuantificar el nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200R pre-tratamiento; (i¡) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) cuantificar el nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración del anticuerpo, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200R post-tratamiento, en donde un incremento en el nivel de expresión CD200R post-tratamiento en comparación con el nivel de expresión nivel de expresión CD200R pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Con respecto a la expresión CD200 por parte de los leucocitos, los leucocitos pueden ser por ejemplo, células T tales como células T CD200+/CD4 + , células T CD200+/CD4 + activadas o células T CD200+/CD8 + . En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, los leucocitos son células T tal como células T CD200+/CD4+ o células T CD2007CD4+ activadas.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % de reducción de la concentración de leucocitos CD200 + , indica que se ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % de reducción de la concentración de los leucocitos CD200+, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, o 100 o más) % de incremento en la concentración de leucocitos CD200R + , indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado. En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, o 100 o más) % de incremento en la concentración de leucocitos CD200FT, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, por ejemplo, con respecto a la expresión CD200R por parte de los leucocitos, los leucocitos, por ejemplo, pueden ser células T CD4 + , células T CD8\ células T CD4 + activadas, células T CD21 +/CD25 + /Fox3P+ y células T NK.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % de la reducción en la expresión CD200 por parte de los leucocitos (por ejemplo, células T) indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % de reducción en la expresión CD200 por parte de los leucocitos (por ejemplo, células T) indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 1.5 (por ejemplo, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, o 10 o más) veces de incremento en la expresión CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido un efecto inmunomodulador deseado a través del anticuerpo en el humano. En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 1.5 (por ejemplo, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, o 10 o más) veces de incremento en la expresión CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que el anticuerpo anti-CD200 es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción en la concentración de células T CD200+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, un incremento en la concentración de células T CD200R+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200R+ del mismo tipo histológico en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, un incremento en el nivel de expresión CD200R por parte de la pluralidad en comparación con el nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 es terapéuticamente efectivo en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende medir la concentración de células T reguladoras (T regs) en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Una reducción en la concentración de T regs en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de T regs del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. La muestra de control, por ejemplo, puede ser una muestra de sangre obtenida del paciente antes de la administración de la primera dosis terapéutica del anticuerpo anti-CD200.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método incluye:(i) medir la concentración de células T reguladoras (T regs) en una muestra de sangre obtenida de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración T regs pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) medir la concentración de T regs del mismo tipo histológico definido en una muestra de sangre obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la concentración de T regs en la muestra de sangre post-tratamiento, tal como se compara con la concentración T regs pre-tratamiento, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades de los métodos aquí descritos, las T regs pueden ser, por ejemplo, células T CD3 + CD4 + CD25 + FoxP3+ o células T CD3 + CD4+FoxP3 + .
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % de reducción de la concentración de T regs, indica que se ha producido en el humano un efecto ¡nmunomodulador deseado. En algunas modalidades, las T regs (por ejemplo, las T regs definidas a través de los marcadores de expresión anteriores), pueden expresar CD200 o CD200R.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % de reducción de la concentración de T regs, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto ¡nmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende medir la concentración de células T activadas en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la concentración de células T activadas en la muestra de sangre, tal como se compara con la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. La muestra de control por ejemplo, puede ser una muestra de sangre obtenida del paciente antes de la administración de la primera dosis terapéutica del anticuerpo anti-CD200.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) medir la concentración de células T activadas en la muestra de sangre obtenida de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de célula T activada pre-tratamiento; (ii) administrar al humano un anticuerpo anti-CD200; y (iii) medir la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico definido en una muestra de sangre obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la concentración de células T activadas en la muestra de sangre post-tratamiento, en comparación con la concentración de célula T activada pre-tratamiento, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, o 100 o más) % de incremento en la concentración de células T activadas indica que se ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, al menos un 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, o 100 o más) % de incremento en la concentración de células T activadas, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende determinar una proporción de porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en la muestra de sangre, en comparación con la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en la muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto ¡nmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende determinar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1, al menos 6:1, o al menos 7:1), indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) determinar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra de sangre obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, para determinar de esta forma una proporción pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) determinar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra de sangre obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en la muestra de sangre post-tratamiento, en comparación con la proporción pre-tratamiento, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, las células T activadas, pueden ser por ejemplo, células T CD3 + CD4 + CD25 + FoxP3neg o células T CD3 + CD4 + FoxP3neg. En algunas modalidades, las células T activadas (por ejemplo, las células T activadas definidas por los marcadores de expresión anteriores) pueden expresar CD200 o CD200R.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, la muestra de control puede ser, o contiene una muestra de sangre del humano, obtenida antes de la administración del anticuerpo anti-CD200.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método incluye medir: (a): (i) la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de leucocitos CD200FT en la muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200R a través de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano del anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 a través de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e): (ix) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f): (xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g): (xiü) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiü)) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (h): (xv) la concentración de linfocitos CD8+ en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv) en una muestra biológica del humano, antes de la administración del anticuerpo; (i): (xvii) la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xviii), la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico que en (xvii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (j): (xix) la concentración de células T CD200FT en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xx) la concentración de células T CD200R+ del mismo tipo histológico que en (xix) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (k): (xxi) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxii) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (xxi) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (1): (xxiii) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxiv) la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico que en (xxiii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y/o (m): (xxv) el nivel de expresión de CD200 a través de una pluralidad de las células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxvi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de las células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (xxv) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo, en donde: (a) una reducción en la concentración de leucocito CD200+ posttratamiento, en comparación con la concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (b) un incremento en la concentración de leucocito CD200FT posttratamiento, en comparación con la concentración de leucocito CD200FT pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (c) un incremento en nivel de expresión CD200R post-tratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200R pre-tratamiento indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (d) una reducción en el nivel de expresión CD200 + post-tratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (e) una reducción en la concentración post-tratamiento de células T reguladoras en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T reguladoras, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (f) un incremento en la concentración post-tratamiento de células T activadas, en comparación con la concentración de célula T activada pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (g) un incremento en la proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en comparación con la proporción pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano, o una proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (h) un incremento en la concentración post-tratamiento de linfocitos CD8+ en comparación con la concentración pre-tratamiento de linfocitos CD8 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (i) una disminución en la concentración post-tratamiento de células T CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T CD200+, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; j) un incremento en la concentración post-tratamiento de células T CD200R + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T CD200R + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (k) una disminución en la concentración post-tratamiento de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+, en comparación con la concentración pre-tratamiento de leucocitos CD200 + , indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (I) una disminución en la concentración posttratamiento de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+, en comparación con la concentración pre-tratamiento de células de médula ósea CD200+, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; o (m) una disminución en la expresión CD200 post-tratamiento por parte de la pluralidad de células de médula ósea en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de la pluralidad, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, se miden dos o más (por ejemplo, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, o nueve o más) de cualquier combinación de las condiciones. En algunas modalidades, se miden todas las condiciones.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un medio legible en computadora que comprende un perfil médico de un humano, comprendiendo el perfil la información en uno o más de los biomarcadores inmunomoduladores asociados con anticuerpo anti-CD200, siendo seleccionados los biomarcadores del grupo que consiste en: (a): (i) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200+) del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de leucocitos CD200R + (por ejemplo, células T CD200R + ) en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de leucocitos CD200FT (por ejemplo, células T CD200FT) del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e): (ix) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f):(xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración del anticuerpo anti-CD200 al humano y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g): (xiü) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano, después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiü)) en una muestra biológica de un humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (h):(xv) la concentración de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T) en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo. El perfil médico también puede incluir, por ejemplo, (xvii) el nivel de expresión de CD200 a través de una pluralidad de leucocitos (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) en una muestra biológica obtenida de un paciente después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y/o (xviii) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) del mismo tipo histológico que en (xvii) en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200. El perfil médico también puede incluir, por ejemplo, (xix) la concentración de uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un paciente, después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y/o (xx) la concentración de uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico que en (xix) en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, el perfil médico puede incluir información de dos o más (por ejemplo, tres, cuatro, cinco, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, o 100 o más) pacientes. En algunas modalidades, el perfil médico se almacena en un medio legible en computadora, tal como un disco duro, disco flash, DVD, o CD de computadora.
En otro aspecto, la descripción proporciona un método basado en computadora para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método incluye recibir datos que incluyen un perfil médico de un humano, en donde el perfil médico comprende información de al menos uno de los biomarcadores inmunomoduladores asociados con el anticuerpo anti-CD200 aquí descritos incluyendo: (a): (i) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) en una muestra biológica obtenida de un humano después de administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b):(¡¡¡) la concentración de leucocitos CD200FT (por ejemplo, células T CD200R + ) en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (¡v) la concentración de leucocitos CD200R+ (por ejemplo, células T CD200R + ) del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d):(vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano del anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e): (ix) la concentración de las células T reguladoras en una muestra biológica del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f ) : (x i ) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano; y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g):(xiii) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiii)) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (h):(xv) la concentración de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T) en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv), en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo; y procesar al menos una parte de los datos que contienen la información para determinar si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, en donde: una reducción en la concentración de leucocito CD200+ posttratamiento (por ejemplo, células T CD200+) en comparación con la concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento (por ejemplo, célula T CD200 + ), indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en la concentración de leucocito CD200R+ posttratamiento (por ejemplo, célula T CD200R + ) en comparación con la concentración de leucocito CD200R+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; una reducción en el nivel de expresión CD200+ post-tratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos en comparación con el nivel de expresión CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en el nivel de expresión CD200R posttratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos en comparación con el nivel de expresión CD200R pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; una reducción en la concentración post-tratamiento de células T reguladoras en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T reguladoras, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano; un incremento en la concentración post-tratamiento de células T activadas en comparación con la concentración de célula T activada pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en la concentración post-tratamiento de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T) en comparación con la concentración pre-tratamiento de linfocitos CD8 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; y un incremento en la proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, en comparación con la proporción pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; y/o una proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, o incluso 7:1 o más) indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método basado en computadora para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método incluye: proporcionar información con respecto a uno o ambos de (a): (i) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200+) del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de leucocitos CD200R + (por ejemplo, células T CD200R + ) en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de leucocitos CD200FT (por ejemplo, células T CD200R + ) del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200R a través de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e): (¡x) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti- CD200, y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f): (xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xii), la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g): (xiü) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200, y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiü)) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (h):(xv) la concentración de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T) en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv), en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo; ingresar la información en una computadora; y calcular un parámetro que indica si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, utilizando la computadora y la información de entrada, en donde: una reducción en la concentración de leucocito post-tratamiento CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) en comparación con concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento (por ejemplo, célula T CD200+), indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en la concentración de leucocito CD200FT post-tratamiento (por ejemplo, célula T CD200FT) en comparación con la concentración leucocito CD200FT pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; una reducción en el nivel de expresión CD200+ posttratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos en comparación con el nivel de expresión CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en nivel de expresión CD200R post-tratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos en comparación con el nivel de expresión CD200R pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; una reducción en la concentración post-tratamiento de células T reguladoras en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T reguladoras, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano; un incremento en la concentración post-tratamiento de células T activadas en comparación con la concentración pre-tratamiento de célula T activada, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en la proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, en comparación con la proporción pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; un incremento en la concentración post-tratamiento de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T) en comparación con la concentración pre-tratamiento de linfocitos CD8 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; y/o una proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, o incluso 7:1 o más), indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. El método también puede incluir producir el parámetro.
En algunas modalidades, la información puede incluir: (xvii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) en una muestra biológica obtenida de un paciente después de administración de un anticuerpo anti-CD200 y/o (xviii) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos (por ejemplo, células de médula ósea o esplenocitos) del mismo tipo histológico que en (xvii) en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde una disminución post-tratamiento en el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión pre-tratamiento por parte de la pluralidad correspondiente, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, la información puede incluir: (xix) la concentración de uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un paciente después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y/o (xx) la concentración de uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD2004 del mismo tipo histológico que en (xix) en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde una disminución post-tratamiento en la concentración del uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de los subconjuntos de médula ósea CD200+ correspondientes, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el humano tiene, se sospecha que tiene o es probable que desarrolle cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, CLL (por ejemplo, B-CLL). El cáncer puede ser, por ejemplo, un tumor sólido tal como, pero sin limitarse a, cáncer de colon, cáncer de seno, cáncer de pulmón, cáncer renal, cáncer pancreático, cáncer de tiroides, cáncer de piel, cáncer del sistema nervioso, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer testicular, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de hueso, un cáncer de los ojos, un cáncer del estómago, un cáncer del hígado. El cáncer del sistema nervioso puede ser un neuroblastoma.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el humano tiene, se sospecha que tiene o está en riesgo de desarrollar una condición inflamatoria y/o un trastorno óseo. Las trastornos inflamatorios y trastornos de hueso son bien conocidos en la técnica de la medicina. Los ejemplos de cada uno de estos trastornos se proporcionan en la presente invención.
En algunas modalidades, cualesquiera de los métodos aquí descritos pueden incluir administrar al humano una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-CD200, si se ha determinado que el anticuerpo produce un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, cualesquiera de los métodos puede incluir administrar al sujeto un anticuerpo anti-CD200, por ejemplo, en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener el efecto inmunomodulador en el humano.
Los inventores de la presente invención también han descubierto que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un paciente con cáncer, que comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200, se reduce la expresión CD200 por parte de las células de cáncer. Las células de cáncer han desarrollado una cantidad de formas de evadir la detección por parte del sistema inmune, el cual puede identificar células malignas y exterminar las células (un proceso conocido como inmunovigilancia-antes de que se desarrolle en el humano un cáncer que pone en riesgo potencialmente la vida. Ver por ejemplo las Publicaciones de Geertsen y asociados (1999) Int J Mol Med 3(1):49-57; Kerebijn y asociados (1999) Crit Rev Oncol Hematol 31(1):31-53: y Pardoll (2003) Annu Rev Immunol 21_:807-39. Un mecanismo potencial a través del cual las células de cáncer escapan a la inmunovigilancia, es a través de la expresión o sobreexpresión de la proteína CD200 inmunosupresora. De hecho, la proteína CD200 ha mostrado ser expresada o sobreexpresada en una variedad de células de cáncer humanas que incluyen, por ejemplo, células de leucemia linfocítica crónica de célula B, células de cáncer de próstata, células de cáncer de seno, células de cáncer de colon, y células de cáncer de cerebro. Ver por ejemplo las Publicaciones de Kawasaki y asociados (2007) Biochem Biophys Res Commun 364(4):778-782; Kretz-Rommel y asociados (2007), supra; y Siva y asociados (2008) Cáncer Immunol Immunother 57(7) :987-96. Por lo tanto, aunque la descripción no está limitada a alguna teoría o mecanismo de acción en particular, los inventores de la presente invención consideran que la desactivación dependiente del anticuerpo anti-CD200-dependent de CD200 en las células de cáncer, libera la inhibición de inmunovigilancia, y permite que el sistema inmune identifique y combata de manera más efectiva al cáncer. Por consiguiente, se considera que es benéfico administrar al humano un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para sostener la expresión reducida de CD200 por parte de las células de cáncer en el humano. En la presente invención se proporcionan programas de dosificación de anticuerpo anti-CD200 de ejemplo, de acuerdo con la descripción. Dos ejemplos no limitantes, no exhaustivos de dicho programa de dosificación, son la administración del anticuerpo anti-CD200 en una mayor cantidad (por ejemplo, mayor a 200 mg/m2) y/o en una menor cantidad (por ejemplo, menor o igual a 200 mg/m2), pero con una frecuencia incrementada (por ejemplo, al menos una vez cada 12 días). En la presente invención se proporcionan ejemplos adicionales.
Además, tal como se elabora en los ejemplos de operación aquí establecidos, los inventores reportaron en forma adicional un descubrimiento basado en las propiedades farmacodinámicas observadas del anticuerpo anti-CD200, samalizumab, administrado a un paciente en un programa de dosificación una vez al mes. Específicamente, bajo el programa de dosificación de una vez al mes en una dosis de (y que incluye) 50 mg/m2 a 200 mg/m2, el efecto inmunomodulador del anticuerpo en los pacientes fue temporal, con la recuperación de poblaciones de células afectadas (o casi la recuperación) a los niveles pre-tratamiento alrededor del día 14. La administración de la segunda dosis de samalizumab, sin embargo, una vez más produjo el efecto inmunomodulador en las poblaciones de célula específica (por ejemplo, células de cáncer CD200 + , células T CD200+, etc.)- La administración de una mayor dosis (por ejemplo, 300 mg/m2 a 500 mg/m2) dio como resultado un efecto inmunomodulador más sostenido en el humano. Por lo tanto, los inventores concluyeron que la administración del anticuerpo en una mayor cantidad y/o con una frecuencia incrementada para sostener de esta manera el efecto inmunomodulador en el paciente, será más efectiva para tratar una enfermedad (por ejemplo, un cáncer, un trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio) en un humano.
De acuerdo con aún otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano con cáncer, en donde el método incluye administrar al humano un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y/o con un frecuencia efectiva para tratar el cáncer, si se determina que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 en el humano. La determinación puede incluir, por ejemplo, cualesquiera de los métodos aquí descritos para determinar si el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un paciente que padece cáncer, en donde el método comprende: administrar al paciente que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 en el humano, para tratar de esta forma el cáncer del paciente. El inmunomodulador puede ser indicado, por ejemplo, a través de un cambio en uno o más de cualesquiera de los biomarcadores inmunomoduladores asociados con anticuerpo anti-CD200 aquí descritos, incluyendo la concentración de uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD200, y el nivel de expresión CD200 por parte de esplenocitos o células de médula ósea (ver más adelante). En algunas modalidades, los biomarcadores inmunomoduladores no incluyen la concentración de uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD200 y/o el nivel de expresión CD200 por parte de las células de médula ósea.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo se puede administrar al paciente en una cantidad, y con una frecuencia efectiva para mantener en el paciente una o más de las siguientes condiciones (por ejemplo, tal como se determina mediante análisis (por ejemplo, uga medida, detección o cuantif icación) de una muestra biológica del paciente): (i) una concentración reducida de células T reguladoras, relativas a la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (ii) una concentración incrementada de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico en el paciente, antes de la primera administración del anticuerpo; (iii) una concentración incrementada de las células T, relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (iv) una concentración reducida de linfocitos CD200+ (por ejemplo, células T), en forma relativa a la concentración de linfocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de linfocitos CD200FT (por ejemplo, células T), en forma relativa a la concentración de linfocitos CD200R+ del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (vi) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, en forma relativa a la proporción de una proporción en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (vii) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras (T regs) de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1, al menos 6:1, o al menos 7:1), en forma relativa a la proporción de células T activadas a T regs en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (viii) una reducción en el nivel de la expresión CD200 por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos, del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (ix) un incremento en el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en comparación con la expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en el paciente, antes de la primera administración del anticuerpo; y (x), en modalidades en donde el cáncer comprende una pluralidad de células que expresan (o sobreexpresan) CD200, una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de cáncer CD200 + , en forma relativa al nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad correspondiente de células de cáncer CD200+ antes de la primera administración de anticuerpo anti-CD200. En modalidades en donde un anticuerpo anti-CD200 ha sido administrado al paciente dos o más veces, quedará entendido que la evaluación de uno o más de los parámetros anteriores puede ser (aunque no es necesariamente) relativa (o en comparación con) al valor correspondiente del parámetro antes de la primera dosis del anticuerpo anti-CD200, la administración más reciente de anticuerpo anti-CD200, o entre dosis del anticuerpo anti-CD200 administradas al paciente. Por ejemplo, en modalidades en donde a un paciente se le han administrado con el tiempo cinco (5) dosis de un anticuerpo anti-CD200, una disminución en la concentración de linfocitos CD200+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de linfocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el paciente antes de la quinta administración del anticuerpo, puede indicar que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el paciente como resultado de la administración del anticuerpo.
En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente en una cantidad y con una frecuencia tal para mantener todas las condiciones anteriores en el paciente durante el curso del tratamiento contra cáncer. En algunas modalidades, el anticuerpo se administra al paciente durante al menos cuatro semanas (por ejemplo, al menos cinco semanas, seis semanas, siete semanas, ocho semanas, dos meses, tres meses, cuatro meses, cinco meses, seis meses, siete meses, ocho meses, nueve meses, 10 meses, 11 meses, un año, 13 meses, 14 meses, 15 meses, 16 meses, un año y medio, dos años, tres años, o cuatro años o más).
En algunas modalidades, los métodos de tratamiento contra cáncer aquí descritos pueden incluir administrar un anticuerpo anti-CD200, por ejemplo, un anticuerpo completo, a un paciente que necesita del mismo en una dosis individual mayor o igual a 100 (por ejemplo, mayor o igual a 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575, o 600) mg/m2 con una frecuencia de al menos aproximadamente una vez a la semana (por ejemplo, al menos una vez cada siete días, ocho días, nueve días, 10 días, 11 días, 12 días, 13 días, 14 días, 15 días, 16 días, 17 días, 18 días, 19 días o 20 días), dependiendo del paciente particular. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 puede administrarse al paciente al menos una vez por semana (por ejemplo, al menos una vez cada dos semanas o tres semanas). En algunas modalidades, una dosis individual del anticuerpo anti-CD200 puede ser entre (e incluyendo) 100 a 600 (por ejemplo, entre (e incluyendo) de 150 a 600, 200 a 600, 300 a 600, 100 a 500, 100 a 400, 100 a 300, 100 a 200, 200 a 500, 200 a 400, 200 a 300, 300 a 500, 400 a 500, o 300 a 500) mg/m2 y puede ser, en algunas modalidades, administrado a un paciente, por ejemplo, al menos una vez cada siete días. En algunas modalidades, un paciente puede recibir una dosis de un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito una vez al día (por ejemplo, cada dos días, o cada tres días). Tal como se describió anteriormente, quedará entendido que dependiendo de los parámetros individuales del paciente (por ejemplo, altura, peso, género, severidad de enfermedad, edad, co-morbididades y medicaciones adicionales), uno o ambos de la frecuencia y la cantidad de anticuerpo anti-CD200 se pueden modificar para mantener el efecto ¡nmunomodulador en el humano. Los métodos para determinar la estrategia de dosificación adecuada para mantener uno o más de las condiciones del efecto ¡nmunomodulador en el paciente son tal como aquí se describen.
En otro aspecto, la descripción proporciona un método para tratar cáncer, que incluye administrar a un paciente que padece de cáncer un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener una concentración incrementada de las células T activadas en el paciente, en comparación con la concentración de células T activadas en el paciente antes de la administración del anticuerpo, para tratar de esta forma el cáncer. El método también puede incluir después de administrar el anticuerpo anti-CD200 al humano, determinar si la concentración de células T activadas ha sido incrementada en el paciente.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método para tratar cáncer, en donde el método incluye administrar a un paciente que padece cáncer un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener en el paciente una concentración reducida de células T reguladoras, en comparación con la concentración de células T reguladoras en el paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, para tratar de esta forma el cáncer.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método para tratar cáncer, en donde el método comprende administrar a un paciente que padece cáncer, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener en el paciente (por ejemplo, tal como se determina mediante un análisis de la muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras (T regs) de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1 , al menos 6:1, o al menos 7:1).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, las células T reguladoras pueden ser, por ejemplo, células T CD3 + CD4 + CD25 + FoxP3+ o células T CD3 + CD4 + FoxP3 + . En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, las células T activadas puede ser, por ejemplo, células T CD3 + CD4 + CD25 + FoxP3neg o células T CD3 + CD4 + FoxP3neg.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti-CD200 para tratar a un paciente, en donde el practicante determina quién se beneficiará o es probable que se beneficie de una terapia de anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un paciente que padece de cáncer, una enfermedad ósea o un trastorno inflamatorio). El método comprende, por ejemplo, establecer un nivel pico o un nivel máximo de un efecto inmunomodulador producido en un paciente después de la administración de un anticuerpo anti-CD200, y monitorear al paciente (por ejemplo, por medio de un análisis de una muestra biológica del paciente) con respecto a un cambio fuera del nivel de efecto pico, en donde la sincronización de dicho cambio en el nivel de efecto pico (por ejemplo, la duración de tiempo en el que se mantiene el nivel de efecto pico en un paciente en una dosis determinada antes de que se requiera una dosis adicional para mantener el nivel de efecto pico) determina el programa de dosificación para el paciente, ya que un practicante médico determina la cantidad de anticuerpo anti-CD200 y/o frecuencia de administración del anticuerpo que es necesaria para mantener el nivel pico de efecto inmunomodulador en el paciente durante la duración del tratamiento. En algunas modalidades, se administra al paciente una dosis adicional (en una dosis mayor y/o en forma más rápida a la determinada originalmente) del anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente, si el nivel de efecto inmunomodulador cambia en al menos 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) % del efecto inmunomodulador pico observado para el paciente. Por ejemplo, un practicante médico puede observar que al momento de la administración de la primera dosis de un anticuerpo anti-CD200, disminuye la concentración de leucocitos CD200+ a una concentración post-tratamiento X, representando la concentración X el nivel pico de efecto inmunomodulador en el paciente. Cuando el practicante observa que la concentración post-tratamiento de los leucocitos CD200 + se incrementa en al menos 5% (supra) de X, el practicante puede decidir administrar una dosis adicional del anticuerpo anti-CD200 (en una dosis mayor o en la misma dosis a la dosis inicial, pero en forma más rápida de lo que el practicante había anticipado) al paciente, para restaurar y mantener de esta forma la concentración de leucocitos CD200+ en la concentración X o más baja.
Por lo tanto, en algunas modalidades, los métodos para determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti-CD200, puede incluir monitorear el nivel de un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 deseado en un paciente, al cual se le ha administrado un anticuerpo anti-CD200 para determinar de esta forma un programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener el efecto inmunomodulador en el paciente durante la duración del tratamiento con el anticuerpo. El surgimiento de un cambio en el nivel pico de efecto inmunomodulador en el paciente, puede ser el disparador para administrar al paciente una dosis mayor de anticuerpo anti-CD200 y/o administrar el anticuerpo anti-CD200 al paciente en forma más frecuente, para mantener de esta forma el nivel pico de efecto inmunomodulador en el paciente y determinar de esta forma un programa de dosificación para el anticuerpo de modo que se logre dicho mantenimiento.
En algunas modalidades, los métodos pueden incluir administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 para producir de esta forma en el paciente un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, como se indica a través de un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en uno o más de los biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200 en una muestra biológica del paciente). En algunas modalidades, se pueden monitorear uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, o 10 o más) de los siguientes cambios en los biomarcadores: (i) una concentración reducida de células T reguladoras, relativas a la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (ii) una concentración incrementada de leucocitos CD8+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de leucocitos CD8+ del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (iii) una concentración incrementada de las células T activadas, en forma relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (iv) una concentración reducida de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ), relativas a la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de leucocitos CD200FT (por ejemplo, células T CD200FV), relativa a la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico en el humano antes de la primera administración del anticuerpo; y (vi) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras (T regs) de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1, al menos 6:1, o al menos 7:1), relativa a la proporción de células T activadas a T regs en el humano antes de la primera administración del anticuerpo. Tal como se describe en la presente invención se pueden monitorear cambios adicionales. Por ejemplo, en algunas modalidades, una disminución post-tratamiento en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200, en comparación con la concentración pre-tratamiento de los subconjuntos de médula ósea CD200 + correspondientes, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inrnunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, una disminución post-tratamiento en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de esplenocitos y/o células de médula ósea (por ejemplo, subconjuntos de célula de médula ósea), en comparación con el nivel pre-tratamiento de expresión por parte de la pluralidad correspondiente, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Quedará entendido que el monitoreo puede comprender, por ejemplo, mediar la concentración del tipo de célula seleccionada adecuada (por ejemplo, leucocitos CD200+ o CD200R + ); cuantificar el nivel de expresión de uno o más marcadores de expresión tal como CD200; o determinar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras. En algunas modalidades, incluso un revertimiento parcial del estado de uno o más de estos biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200 indica que un practicante médico debe incrementar la cantidad del anticuerpo anti-CD200 administrada al paciente y/o incrementar la frecuencia de administración del anticuerpo anti-CD200 al paciente, para mantener de esta forma en el paciente el efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar un programa de dosificación para tratar a un paciente que padece de un cáncer utilizando un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: proporcionar a un paciente que padece de un cáncer que comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200; administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 para reducir de esta forma la expresión de CD200 por parte de las células de cáncer; y monitorear el nivel de expresión CD200 a través de las células de cáncer para determinar de esta forma para el paciente un programa de dosificación del anticuerpo, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener un nivel de expresión CD200 reducido (por ejemplo, en comparación con el nivel pretratamiento) por parte de las células de cáncer, por ejemplo, durante la duración del tratamiento con el anticuerpo. En algunas modalidades, el nivel de expresión CD200 a través de las células de cáncer puede ser reducido en al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) %.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar el programa de dosificación para tratar a un paciente que padece de un cáncer utilizando un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: administrar a un paciente que padece de un cáncer, un anticuerpo anti-CD200 para reducir de esta forma la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200+) tal como se mide en la muestra de sangre obtenida del paciente en comparación con la concentración de células T CD200+ en una muestra de control; y monitorear la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200) en el paciente, para determinar de esta forma el programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener una concentración reducida de células T CD200+ en el paciente durante la duración del tratamiento de cáncer con el anticuerpo. En algunas modalidades, la concentración de leucocitos CD200 + (por ejemplo, células T CD200 + ) puede reducirse en al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) %. En algunas modalidades, los leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) son seleccionados del grupo que consiste en células T CD200+/CD4\ células T CD200+/CD4+ activadas, o células T CD2007CD8 + .
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar el programa de dosificación para tratar a un paciente que padece de un cáncer utilizando un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: administrar a un paciente que padece de un cáncer un anticuerpo anti-CD200 para reducir de esta forma el nivel de expresión de CD200 por parte de los leucocitos en la muestra de sangre obtenida del paciente en comparación con un nivel de expresión de control de CD200 mediante leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control; y monitorear el nivel de expresión de CD200 por parte de leucocitos en el paciente para determinar de esta forma el programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener un nivel reducido de expresión de CD200 por parte de los leucocitos (reducido en comparación con la muestra de control) en el paciente durante la duración del tratamiento de cáncer con el anticuerpo. En algunas modalidades, el nivel de expresión CD200 por parte de los leucocitos puede ser reducido en al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, o 90 o más) %. En algunas modalidades, los leucocitos CD200 + son seleccionados del grupo que consiste en células T CD200+/CD4+, células T CD200+/CD4+ activadas, o células T CD200+/CD8+.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar el programa de dosificación para tratar a un paciente que padece de un cáncer utilizando un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: administrar a un paciente que padece de un cáncer, un anticuerpo anti-CD200 para incrementar de esta forma la concentración de leucocitos CD200R+ tal como se mide en una muestra de sangre obtenida del paciente en comparación con la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra de control; y monitorear la concentración de leucocitos CD200R+ en el paciente, para determinar de esta forma un programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener una concentración incrementada de leucocitos CD200R+ (incrementada en comparación con la muestra de control) en el paciente durante la duración del tratamiento del cáncer con el anticuerpo. En algunas modalidades, la concentración de leucocitos CD200R + puede ser incrementada en al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, o 100 o más) %. En algunas modalidades, las células T CD200FT son seleccionadas del grupo que consiste en células T CD200R + /CD4+ y células T CD200R+/CD4+ activadas.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar el programa de dosificación para tratar a un paciente que padece de un cáncer utilizando un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: administrar a un paciente que padece de un cáncer, un anticuerpo anti-CD200 para incrementar de esta forma el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos tal como se mide en una muestra de sangre obtenida del paciente en comparación con un nivel de expresión de control de CD200R por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control; y monitorear el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en el paciente, para determinar de esta forma un programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener un nivel incrementado de expresión de CD200R (por ejemplo, en comparación con el nivel de expresión pre-tratamiento) por parte de los leucocitos en el paciente durante la duración del tratamiento de cáncer con el anticuerpo. En algunas modalidades, el nivel de expresión CD200R por parte de los leucocitos puede ser incrementado en al menos 10 (por ejemplo, al menos 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75 , 80 , 85 , 90 , 95, o 00 o más) %. En algunas modalidades, los leucocitos son células T tal como células T CD4+ o células T activadas CD4 + .
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un cáncer que comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir el nivel de expresión CD200 (por ejemplo, en comparación con el nivel de expresión pre-tratamiento) por parte de las células de cáncer, para tratar de esta forma el cáncer del humano. El método también puede incluir monitorear al humano con respecto a una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método para tratar a un humano que padece de un cáncer, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en la sangre de un paciente con cáncer, para tratar de esta forma el cáncer del humano. El método también puede incluir monitorear al humano con respecto a una reducción en los leucocitos CD200+ en la sangre del paciente.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un cáncer, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad, y con una frecuencia suficiente para obtener como resultado un incremento en la concentración de leucocitos CD200FT en la sangre de un paciente con cáncer para tratar de esta forma el cáncer del humano. El método puede incluir monitorear al humano con respecto a una reducción en los leucocitos CD200 + en la sangre del paciente.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un cáncer, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir el nivel de expresión de CD200 por parte de las células T en la sangre de un paciente con cáncer, para tratar de esta forma el cáncer del humano. El método también puede incluir monitorear al humano con respecto a una reducción en el nivel de expresión de CD200 mediante células T en la sangre del paciente.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un cáncer, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para dar como resultado un incremento en el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en la sangre de un paciente con cáncer, para tratar de esta forma el cáncer del humano. El método también puede incluir monitorear el humano con respecto a una reducción en el nivel de expresión de CD200R mediante leucocitos en la sangre del paciente.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos anteriores, el cáncer puede ser uno que comprenda una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200. En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el cáncer es uno que comprende una pluralidad de células de cáncer que, en forma relativa a las células sin cáncer del mismo tipo histológico, sobreexpresan CD200.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el sujeto (por ejemplo, el humano o el paciente) es uno que no tiene leucemia linfocítica crónica (CLL) tal como CLL de célula B.
En algunas modalidades de los métodos aquí descritos, una dosis simple de un anticuerpo anti-CD200 es suficiente para producir un efecto inmunomodulador deseado en un humano. En algunas modalidades, una dosis simple de un anticuerpo anti-CD200 es suficiente para producir un efecto clínicamente significativo en el cáncer de un paciente. En algunas modalidades de los métodos de tratamiento aquí descritos, se administran a un paciente que necesita del mismo, dos o más (por ejemplo, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, o 10 o más) dosis del anticuerpo anti-CD200, por ejemplo, para tratar el cáncer de un paciente, un trastorno inflamatorio o un trastorno de huesos. En modalidades en las cuales se administran a un humano (por ejemplo, un paciente) dos o más dosis del anticuerpo, cada una de las dos o más dosis pueden administrarse al menos 7 (por ejemplo, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, o 30 o más) días de separación. En algunas modalidades, las dos o más dosis se administran al paciente durante el curso de al menos uno (por ejemplo, al menos dos, tres, cuatro, cinco, o seis) mes(s). Por ejemplo, un practicante médico puede decidir administrar al menos cuatro dosis de un anticuerpo anti-CD200 a un paciente con cáncer, en donde cada una de las dosis será administrada una vez cada dos semanas (14 días) durante dos meses. Quedará entendido que el practicante médico puede elegir continuar el tratamiento con el mismo o un diferente programa de dosificación.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un paciente que padece de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en: un trastorno de huesos y un trastorno inflamatorio, en donde el método comprende: administrar a un paciente que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 en el humano, para tratar de esta forma el trastorno del paciente. El efecto inmunomodulador puede estar indicado, por ejemplo, por parte de cualesquiera de los biomarcadores inmunomoduladores asociados con anticuerpo anti-CD200 aquí descritos. Esto es, en algunas modalidades, el anticuerpo puede ser administrado al paciente en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener en el paciente uno o más de las siguientes condiciones (por ejemplo, tal como se determina mediante un análisis (por ejemplo, una medida, detección o cuantif icación) de una muestra biológica del paciente): (i) una concentración reducida de células T reguladoras, relativa a la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (ii) una concentración incrementada de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T), en forma relativa a la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (iii) una concentración incrementada de células T activadas, relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (iv) una concentración reducida de linfocitos CD200+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de linfocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de linfocitos CD200R+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de linfocitos CD200FT del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (vi) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, relativa a la proporción correspondiente en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (vii) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras (T regs) de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1, al menos 6:1 , o al menos 7:1), en forma relativa a la proporción de células T activadas a T regs en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; (viii) una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad de leucocitos en comparación con el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo; y (ix) un incremento en el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en comparación con el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en el paciente antes de la primera administración del anticuerpo. En algunas modalidades, una disminución posttratamiento en la concentración de uno o más subconjuntos médula ósea CD200, en comparación con la concentración pre-tratamiento de los subconjuntos de médula ósea CD200 + correspondientes, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, una disminución post-tratamiento en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de esplenocitos y/o células de médula ósea (por ejemplo, subconjuntos de célula de médula ósea), en comparación con el nivel de expresión pre-tratamiento por parte de la pluralidad correspondiente, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En modalidades en las cuales un anticuerpo anti-CD200 ha sido administrado al paciente dos o más veces, quedará entendido que la evaluación del uno o más de los parámetros anteriores puede ser (aunque no necesariamente) relativa (o en comparación con) al valor correspondiente del parámetro antes de la primera dosis del anticuerpo, la administración más reciente del anticuerpo anti-CD200, o entre dos dosis administradas del anticuerpo. Por ejemplo, en modalidades en donde a un paciente se la han administrado con el tiempo cinco (5) dosis de un anticuerpo anti-CD200, una disminución en la concentración de linfocitos CD200+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de linfocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el paciente antes de la quinta administración del anticuerpo, puede indicar que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el paciente como el resultado de administración del anticuerpo. Por ejemplo, en modalidades en donde a un paciente se la han administrado con el tiempo cinco (5) dosis de un anticuerpo anti-CD200, una disminución en la concentración de linfocitos CD200+ (por ejemplo, células T), relativa a la concentración de linfocitos CD200+ del mismo tipo histológico en el paciente después de la tercera administración del anticuerpo, pero antes de la cuarta administración del anticuerpo, puede indicar que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el paciente como el resultado de la administración del anticuerpo.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método para tratar a un humano que padece de un trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir la concentración de células T CD200+ en la sangre del humano, para tratar de esta forma el trastorno de huesos del humano o un trastorno inflamatorio. El método también incluir monitorear una reducción en las células T CD200+ en la sangre del humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para obtener como resultado un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ en la sangre del humano, para tratar de esta forma el trastorno de huesos del humano o un trastorno inflamatorio. El método puede incluir monitorear una reducción en los leucocitos CD200+ en la sangre del humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir el nivel de expresión de CD200 mediante células T en la sangre del humano para tratar de esta forma el trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio en el humano. El método también puede incluir monitorear una reducción en el nivel de expresión de CD200 por parte de las células T en la sangre del humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente dar como resultado un incremento en la expresión del nivel de CD200R por parte de los leucocitos en la sangre del humano, para tratar de esta forma el trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio en el humano. El método también puede incluir monitorear una reducción en el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en la sangre del humano.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método para tratar a un humano que padece de un trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir la concentración de células T CD200+ en la sangre del humano, para tratar de esta forma el trastorno de huesos o un trastorno inflamatorio en el humano. El método también puede incluir monitorear una reducción en las células T CD200+ en la sangre del humano.
En otro aspecto, la descripción presenta también un método que da como resultado la reducción de la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T tal como células T CD4 + ) en la sangre de un paciente, en donde el método comprende administrar a un paciente que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad efectiva para reducir la concentración de leucocitos CD200 en la sangre del paciente. El paciente puede tener la sospecha de que tiene o estar en riesgo de desarrollar un cáncer, un trastorno inflamatorio, o trastorno de huesos.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método que da como resultado un incremento en la concentración de leucocitos CD200FV (por ejemplo, células T tal como células T CD4 + ) en la sangre de un paciente, en donde el método comprende administrar a un paciente que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad efectiva para obtener como resultado un incremento en la concentración de leucocitos CD200FT (por ejemplo, células T tal como células T CD4 + ) en la sangre del paciente. El paciente puede tener, tener la sospecha que tiene o estar en riesgo de desarrollar un cáncer, un trastorno inflamatorio, o trastorno de huesos.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método para reducir la expresión de CD200 por parte de los leucocitos (por ejemplo, células T tales como células T CD4+) en la sangre periférica de un paciente, en donde el método comprende administrar a un paciente que necesita del mismo un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad efectiva para reducir la expresión de CD200 por parte de los leucocitos en la sangre del paciente. El paciente puede tener, tener la sospecha de que tiene, o estar en riesgo de desarrollar un cáncer, un trastorno inflamatorio, o un trastorno de huesos.
En otro aspecto, la descripción también presenta un método que da como resultado un incremento en la expresión de CD200R por parte de los leucocitos (por ejemplo, células T tal como células T CD4+) en la sangre de un paciente, en donde el método comprende administrar a un paciente que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad suficiente para obtener como resultado un incremento en la expresión de CD200R por parte de los leucocitos en la sangre del paciente. El paciente puede tener, tener la sospecha de que tiene, o estar en riesgo de desarrollar un cáncer, un trastorno inflamatorio, o un trastorno de huesos.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para incrementar la concentración de células T activadas en un paciente que necesita del mismo (por ejemplo, un paciente con cáncer), en donde el método comprende administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para incrementar la concentración de células T activadas en el paciente.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para disminuir la concentración de células T reguladoras en un paciente que necesita del mismo (por ejemplo, un paciente con cáncer), en donde el método comprende administrar un anticuerpo anti-CD200 al paciente en una cantidad y con una frecuencia efectiva para reducir la concentración de células T reguladoras en el paciente.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para incrementar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en un paciente que necesita del mismo (por ejemplo, un paciente con cáncer), en donde el método comprende administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para incrementar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en el paciente. En algunas modalidades, la proporción del porcentaje de las células T activadas al porcentaje de las células T reguladoras, se incrementa en al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, 4:1, 5:1 , 6:1 , o incluso 7:1 o mayor).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos anteriores, el cáncer (o el paciente que padece cáncer) comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200. En algunas modalidades, el cáncer (o el paciente que padece de un cáncer), comprende una pluralidad de células, que en forma relativa a las células sin cáncer del mismo tipo histológico que las células de las cuales se deriva un cáncer, sobreexpresa CD200.
En algunas modalidades, cualesquiera de los métodos de tratamiento se puede llevar a cabo junto con cualesquiera de los métodos aquí descritos para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano.
Los inventores también han descubierto una correlación inversa entre la carga de tumor periférica (por ejemplo, carga de célula de tumor CLL B) y la concentración de células T presentes en pacientes con cáncer. Esto es, entre mayor es la concentración de células T sin cáncer presentes en un paciente con cáncer, menor es la carga de tumor en el paciente. Aunque el descubrimiento no está limitado a cualquier teoría o mecanismo de acción en particular, los inventores consideran que un paciente con cáncer puede recibir un beneficio aumentado de una terapia con anticuerpo anti-CD200, si el paciente con cáncer tiene niveles normales o elevados de células T normales en su cuerpo al momento de la terapia. En otras palabras, los inventores han determinado que una terapia de anticuerpo anti-CD200 probablemente tendrá mayor eficacia y/o un efecto inmunomodulador más fuerte en pacientes con un sistema inmune intacto (o no inmunocomprometido) , por ejemplo, un sistema inmune que tiene la capacidad de montar una respuesta inmune contra un cáncer presente en el paciente. Tal como se describe más adelante, los cuatro pacientes con cáncer quienes no recibieron previamente quimioterapia antes del tratamiento con samalizumab, tenían una enfermedad mejorada o clínicamente estable después del tratamiento con samalizumab. De hecho, el paciente 102-502, quien no ha recibido una terapia inmunosupresora o quimioterapéutica antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, exhibió una marcada reducción en la carga de tumor, que se correlacionó con los cambios en un número de biomarcadores aquí descritos, incluyendo, una reducción marcada en la concentración de células CLL B CD45 + , un incremento en células T CD8+ , una disminución en células T reguladoras, un incremento en células T activadas, y un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras.
Por consiguiente, en algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos (por ejemplo, los métodos de tratamiento, por ejemplo, métodos para tratar cáncer aquí descritos), el sujeto (por ejemplo, el paciente o el humano) es uno que no ha recibido una terapia inmunomoduladora y/o una terapia quimioterapéutica antes de la administración del anticuerpo anti-CD200. Los ejemplos de terapias quimioterapéuticas e inmunosupresoras tal como aquí se describe son conocidos en la técnica. En algunas modalidades, el sujeto o paciente o humano no ha recibido una terapia inmunosupresora o quimioterapéutica menos a dos meses (por ejemplo, menor a ocho semanas, siete semanas, seis semanas, cinco semanas, un mes, 30 días, 25 días, 20 días, 15 días, o 10 días) antes de la administración de la primera dosis del anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el sujeto es uno que tiene un sistema inmune que es competente para montar una respuesta inmune contra el cáncer del sujeto. Esto es, el sujeto (por ejemplo, el paciente) no está inmunocomprometido. En algunas modalidades, el sujeto no ha recibido un agente quimioterapéutico o cualquier otro agente con la capacidad de suprimir el sistema inmune del paciente menos de dos meses antes de que se administre al paciente una primera dosis de un anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, el paciente es uno que no está infectado con HIV tal como se determina, por ejemplo, a través de cualesquiera de las diversas pruebas comercialmente disponibles para infección HIV. En algunas modalidades, el paciente es uno que no tiene una infección HIV activa.
En algunas modalidades, un sistema inmune del paciente puede ser competente para montar una respuesta inmune para un cáncer, únicamente en la presencia del anticuerpo anti-CD200 (esto es, con la ayuda del efecto inmunomodulador producido por el anticuerpo después de la administración al sujeto). En algunas modalidades, el sistema inmune del sujeto es competente para montar una respuesta inmune para el cáncer, incluso en la ausencia del anticuerpo anti-CD200 - el anticuerpo que aumenta la capacidad que tiene el sistema inmune para montar una respuesta inmune contra el cáncer. Un método para determinar si el sistema inmune del sujeto es competente para montar una respuesta inmune, es determinar la concentración de células CD3+ en la sangre del sujeto. Se conocen métodos adicionales en la técnica y aquí se describen.
En otro aspecto, la presente descripción presenta un método para seleccionar un paciente con cáncer para tratamiento con un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende determinar si el paciente es immunocompetente, y si el paciente con cáncer es inmunocompetente, administrar un anticuerpo anti-CD200 al paciente con cáncer. El método puede incluir, por ejemplo, medir la concentración o número absoluto de uno o más subconjuntos de células inmune en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración de un anticuerpo anti-CD200. Los tipos celulares, subconjuntos y rangos de concentración y números de subconjuntos celulares de ejemplo indicativos de la inmunocompetencia se describen en la presente invención. Ver la sección titulada "Métodos para Tratamiento" (más adelante). Los métodos para medir la concentración o un número absoluto de uno o más subconjuntos en una muestra biológica de un paciente son conocidos en la técnica y se ejemplifican en la presente invención en los ejemplos de operación. En algunas modalidades, el método comprende: cuantificar la concentración de células CD3 + presentes en una muestra biológica de un paciente que padece de un cáncer, y administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad efectiva para tratar el cáncer en el paciente, si la concentración de células CD3+ en la muestra biológica es suficiente para ayudar a la terapia anti-CD200 en el sujeto (por ejemplo, si la concentración de células CD3+ es mayor a 300 por microlitro). En algunas modalidades, el anticuerpo se administra al paciente si la concentración de células CD3+/CD4+ en la muestra biológica es mayor o igual a 200 células por microlitro. En algunas modalidades, el anticuerpo se administra al paciente si la concentración de células CD3+/CD4* en la muestra biológica es mayor o igual a 400 células por microlitro. En algunas modalidades, se administra el anticuerpo al paciente si la concentración de células CD3+/CD8+ en la muestra biológica es mayor o igual a 150 células por microlitro. En algunas modalidades, se administra el anticuerpo al paciente si la concentración de células CD3+/CD8+ en la muestra biológica es mayor o igual a 500 células por microlitro.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 es un anticuerpo I g G 1 , lgG2, lgG3, lgG4, IgM, IgAl, lgA2, IgA, IgD o IgE. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 es un anticuerpo de múrido, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado, un anticuerpo de cadena simple, o un anticuerpo humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante variante que tiene una función efectora disminuida (reducida) o no tiene ninguna función efectora. En algunas modalidades, la región constante variante tiene menos del 90 (por ejemplo, menos del 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, o 10) % de la actividad de función efectora de la forma no variante correspondiente de la región constante. En algunas modalidades, una región constante variante tiene entre aproximadamente 0 a 30 (por ejemplo, entre aproximadamente 5 a 30, 10 a 30, 10 a 20, 0 a 20, 0 a 15, 0 a 10, 0 a 25, o 0 a 5) % de la actividad de la función efectora de la forma no variante correspondiente de la región constante. Por ejemplo, un anticuerpo aquí descrito puede contener una región constante variante I g G 1 que exhibe, por ejemplo, menos del 20% (o en otro ejemplo, entre 0 a 20%) de la actividad de la función efectora de la región constante I gG 1 no variante correspondiente. La región constante del anticuerpo anti-CD200 variante, en comparación con la región constante no variante correspondiente, puede tener uno o más de: actividad reducida o ninguna actividad citotóxica transmitida por célula dependiente de anticuerpo (ADCC); citotoxicidad reducida o ninguna citotoxicidad dependiente de complemento (CDC); y enlace disminuido a uno o más receptores Fe. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante variante que ha sido construida para comprender al menos una sustitución, inserción o eliminación de aminoácido dando como resultado la función efectora reducida o ninguna función efectora. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante variante que comprende una o más de las siguientes características: (i) glucosilación alterada y (ii) una mutación Ala-Ala. La glucosilación alterada comprende uno o más de los siguientes: (i) un cambio en uno o más componentes de azúcar; (ii) la presencia de uno o más componentes de azúcar adicionales; y (iii) la ausencia de uno o más componentes de azúcar. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 puede comprender, por ejemplo, una región constante lgG2/lgG4 híbrida que tiene función efectora reducida o ninguna función efectora.
En algunas modalidades, la región constante variante que tiene función efectora reducida o ninguna función efectora, comprende una sustitución en la posición 265 (relativa a la numeración de Kabat, infra), por ejemplo, una sustitución de aspartato 265 a alanina. Ver, por ejemplo la Publicación de Baudino y asociados (2008) J Immunol 181 :6664-6669. En algunas modalidades, la región variante constante que tiene una función efectora reducida o ninguna función efectora comprende una, dos, o tres de las siguientes sustituciones: L234F, L235E y P331S, que han mostrado reducir sustancialmente la actividad ADCC y CDC de las regiones constantes variantes en las cuales están presentes. Ver por ejemplo la Publicación de Organesyan y asociados (2008) Acta Cryst D64:700-704. Las modificaciones adicionales para una región constante, para que se obtenga como resultado de esta forma una región constante variante con función efectora reducida o ninguna función efectora, son conocidas en la técnica y aquí son mencionadas.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 inhibe la interacción entre CD200 y CD200R.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto emparejado de CDRs: una CDR1 de cadena pesada (HCDR1) que comprende la secuencia de aminoácido: GFTFSG FAMS (SEC ID NO:4); una CDR2 de cadena pesada (HCDR2) que comprende la secuencia de aminoácido: SISSGGTTYYLDSVKG (SEC ID NO:5); una CDR3 de cadena pesada (HCDR3) que comprende la secuencia de: GNYYSGTSYDY (SEC ID NO:6); una CDR1 de cadena ligera (LCDR1) que comprende la secuencia de aminoácido: RASESVDSYGNSFMH (SEC ID NO:7); una de cadena ligera CDR2 (LCDR2) que comprende la secuencia de aminoácido: RASNLES (SEC ID NO:8); y una CDR3 de cadena ligera (LCDR3) que comprende la secuencia de aminoácido: QQSNEDPRT (SEC ID NO:9).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto emparejado de CDRs: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GFNIKDYYMH (SEC ID NO:10); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: WIDPENGDTKYAPKFQG (SEC ID NO: 11); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: KNYYVSNYNFFDV (SEC ID NO:12); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: SASSSVRYMY (SEC ID NO:13); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: DTSKLAS (SEC ID NO:14); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: FQGSGYPLT (SEC ID NO:15).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto emparejado de CDRs: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GFNIKDYYIH (SEC ID NO:16); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: WIDPEIGATKYVPKFQG (SEC ID NO:17); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LYGNYDRYYAMDY (SEC ID NO:18); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KASQNVRTAVA (SEC ID NO:19); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: LASNRHT (SEC ID NO:20); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LQHWNYPLT (SEC ID NO:21).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto emparejado de CDRs: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GYSFTDYIIL (SEC ID NO:22); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: Hl DPYYGSSN YNLKFKG (SEC ID NO:23); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: SKRDYFDY (SEC ID NO:24); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KASQDINSYLS (SEC ID NO:25); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: RANRLVD (SEC ID NO:26); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LQYDEFPYT (SEC ID NO:27).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto emparejado de CDRs: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GYTFTEYTMH (SEC ID NO:28); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: GVNPNNGGALYNQKFKG (SEC ID NO:29); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: RSNYRYDDAMDY (SEC ID NO:30); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KSSQSLLDI DEKTYLN (SEC ID NO:31); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: LVSKLDS (SEC ID NO:32); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: WQGTHFPQT (SEC ID NO:33).
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto emparejado de CDRs: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: AFNIKDHYMH (SEC ID NO:34); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: WIDPESGDTEYAPKFQG (SEC ID NO:35); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: FNGYQALDQ (SEC ID NO:36); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: TASSSVSSSYLH (SEC ID NO:37); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: STSNLAS (SEC ID NO:38); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: RQYHRSPPIFT (SEC ID NO:39).
Los inventores también han descubierto diversos biomarcadores que evidencian el surgimiento de un humano de efecto inmunomodulador deseado a través de un anticuerpo anti-CD200 administrado a animales con un trastorno autoinmune. Por ejemplo, los inventores han observado que después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un animal, se reduce en los animales la concentración de diversos subconjuntos de leucocitos (por ejemplo, esplenocito) y células de médula ósea. Los inventores también han descubierto que la concentración, por ejemplo, de linfocitos F4/80+ en bazo, se incrementa después de la administración del anticuerpo anti-CD200 al animal. Aunque la presente descripción no está limitada a teoría o mecanismo de acción alguno en particular, los inventores consideran que es útil el monitoreo de un paciente tratado con un anticuerpo anti-CD200 para un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en uno o más de estos biomarcadores, entre otras cosas, para determinar si el anticuerpo anti-CD200 tiene la capacidad de producir un efecto inmunomodulador deseado en el humano al cual se administra el anticuerpo. Además, también son útiles uno o más de los biomarcadores para identificar una dosis - una dosis de umbral (o un programa de dosificación terapéutica) - de un anticuerpo anti-CD200, tal como samalizumab, ya que debido a su efecto inmunomodulador en el humano, es suficiente para lograr un efecto clínicamente significativo en la enfermedad (es decir, suficiente para tratar una enfermedad tal como cáncer o un trastorno autoinmune). Tal como se describe en los ejemplos de operación, un anticuerpo anti-CD200 tuvo la capacidad de reducir la concentración de anticuerpos autoinmunes en un modelo de ratón de enfermedad autoinmune.
Por consiguiente, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método incluye medir la concentración de uno o más subconjuntos de linfocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de linfocitos CD200+ en una muestra biológica en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de linfocitos CD200+ en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Los linfocitos pueden ser, por ejemplo, subconjuntos de esplenocitos o células de médula ósea.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, los subconjuntos de linfocitos CD200+ pueden ser, por ejemplo, linfocitos CD3+/CD200 + , linfocitos CD45R+/CD200 + , linfocitos CD5+/CD200 + , linfocitos CD197CD200 + , linfocitos CD138+/CD200+ o linfocitos CD200R+/CD200 + . En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción de al menos 5%, 10%, 20%, 30%, 40%), 50%), 60%, 70%), o 80% o más de la concentración del uno o más subconjuntos de linfocitos CD200 + , indica que se ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de linfocitos CD200 + en la muestra biológica en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de linfocitos CD200+ en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, la muestra biológica es una muestra de sangre. En algunas modalidades, la muestra biológica comprende o consiste en, tejido de bazo o tejido de médula ósea.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método incluye medir la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + en una muestra biológica, en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador en el humano. Los subconjuntos de células de médula ósea CD200+ pueden ser, por ejemplo, de células de médula ósea lgk+/CD200 + , células de médula ósea CD138+/CD200 + , células de médula ósea c-kit7CD200 + , o células de médula ósea c-kit+/CD200+/Lin /low.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción de al menos 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, o 80% o más de la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en la muestra biológica en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos anteriores, la muestra de control es una muestra biológica del mismo tipo obtenido del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método incluye cuantificar el nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con un nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Los leucocitos puede ser, por ejemplo, uno o más subconjuntos de célula de médula ósea o esplenocitos.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, los leucocitos CD200+ pueden ser, por ejemplo, leucocitos CD3+ /CD200 + , leucocitos CD45R+/CD200 + , leucocitos CD5+/CD200 + , leucocitos CD19+/CD200 + , leucocitos CD1387CD200+ o leucocitos CD200R+/CD200 + .
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción de al menos 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, o 80% o más del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano efecto inmunomodulador deseado.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano. El método incluye cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la expresión de CD200 por parte de la pluralidad en comparación con un nivel de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, las células de médula ósea CD200 + , por ejemplo, células de médula ósea lgk+/CD200+, células de médula ósea CD138+/CD200 + , células de médula ósea c-kit7CD200 + , o células de médula ósea c-kit+/CD200+/Lin" low.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción de al menos un 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, o 80% o más del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, la muestra de control es una muestra biológica del mismo tipo obtenida del humano antes de administrar el anticuerpo anti-CD200.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) medir la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de leucocito CD200+pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo; y (¡ii) medir la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo para obtener de esta forma una concentración de leucocito CD200+ post-tratamiento, en donde una reducción en la concentración de leucocito CD200+ posttratamiento en comparación con la concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) medir la concentración de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 para obtener de esta forma una concentración de célula médula ósea CD200+ pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo; y (¡ii) medir la concentración de células de médula ósea CD200 + en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo para obtener de esta forma una concentración de célula de médula ósea CD200 + post-tratamiento, en donde una reducción en la concentración de célula de médula ósea CD200+ post-tratamiento en comparación con la concentración de célula de médula ósea CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento; (¡i) administrar al humano el anticuerpo; y (iii) cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración del anticuerpo para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en donde una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (i) cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo; y (iii) cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de las células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en donde una reducción en el nivel de expresión CD200 posttratamiento en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Aún en otro aspecto, la presente descripción presenta un medio legible en computadora que comprende un perfil médico de un humano, en donde el perfil médico comprende información con respecto al menos uno de: (a):(i) la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (d):(v¡¡) el nivel de expresión de CD200 a través de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo.
En otro aspecto, la presente descripción presenta un método basado en computadora para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (A) recibir datos que incluyen un perfil médico de un humano, en donde el perfil comprende información de al menos una de: (a): (i) la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200; y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (B) procesar al menos la parte de los datos que contienen la información para determinar si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. (1) Una reducción en la concentración de leucocito CD200+ post-tratamiento en comparación con la concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (2) una reducción en la concentración de célula de médula ósea CD200 + post-tratamiento en comparación con la concentración de célula de médula ósea CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (3) una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento por parte de los leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de los leucocitos, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; o (4) una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento por parte de las células de médula ósea en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de las células de médula ósea, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método basado en computadora para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (I) proporcionar información de al menos una de: (a): (i) la concentración de leucocitos CD200 + en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (¡v) la concentración de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica, obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (II) ingresar la información en una computadora; y (III) calcular el parámetro que indica si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, utilizando la computadora y la información de entrada. (1) Una reducción en la concentración de leucocito CD200+ post-tratamiento en comparación con la concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (2) una reducción en la concentración de célula de médula ósea CD200+ posttratamiento en comparación con la concentración de célula de médula ósea CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (3) una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento por parte de los leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de los leucocitos, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; o (4) una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento por parte de las células de médula ósea, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de las células de médula ósea, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. El método puede incluir producir un parámetro.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el humano tiene, se sospecha que tiene, o es probable que desarrolle un cáncer. El cáncer puede ser, por ejemplo, leucemia linfocítica crónica (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica de célula B). El cáncer puede ser un tumor sólido, por ejemplo, un cáncer de colon, cáncer de seno, cáncer de pulmón, cáncer renal, cáncer pancreático, cáncer de tiroides, cáncer de piel, un cáncer del sistema nervioso, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer testicular, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de los ojos, cáncer de estómago o cáncer de hígado. El cáncer del sistema nervioso puede ser, por ejemplo, un neuroblastoma.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos de la presente invención, el humano tiene, se sospecha que tiene o está en riesgo de desarrollar, un trastorno inflamatorio o un trastorno de huesos. El trastorno inflamatorio puede ser, por ejemplo, un trastorno autoinmune tal como, por ejemplo, un trastorno hemolítico. El trastorno autoinmune puede ser anemia hemolítica autoinmune. El trastorno autoinmune puede ser, por ejemplo, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes melitus tipo 1, síndrome de Goodpasture, enfermedad de Grave, síndrome de Guillain-Barré, nefropatía IgA, escleroderma, síndrome de Sjógren, lupus eritematoso sistémico, nefritis por lupus, glomerulonef ritis, granulomatosis de Wegener, pemphigus vulgaris, artritis reumatoide, enfermedad de Chagas, enfermedad de aglutinina fría, síndrome anti-fosfolípido, anemia hemolítica autoinmune caliente, hemoglobinuria vía paroximal, enfermedad de Hashimoto, púrpura trombocitopénica idiopática, miastenia gravis, cirrosis biliar pulmonar o síndrome de Miller Fisher.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el uno o más subconjuntos de leucocitos CD200 + se seleccionan del grupo que consiste en linfocitos CD37CD200\ linfocitos CD45R+/CD200 + , linfocitos CD5+/CD200+, linfocitos CD 197CD200 + , linfocitos CD1387CD200+ y linfocitos CD200R7CD200 + .
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+, se seleccionan del grupo que consiste en células de médula ósea lgk+ /CD200 + , células de médula ósea CD1387CD2007 células de médula ósea c-kit+/CD200+ y células de médula ósea c-kit+/CD200+/Lin".
En algunas modalidades, los métodos incluyen administrar al humano una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-CD200, si el anticuerpo ha sido determinado que produce un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti-CD200 para un paciente, en donde el método comprende: administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 para reducir de esta forma la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra de control, en donde el paciente padece de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en un cáncer, un trastorno inflamatorio, o un trastorno de huesos; y monitorear la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en el paciente, para determinar de esta forma para el paciente, un programa de dosificación del anticuerpo, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener una concentración reducida del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en el paciente, durante la duración del tratamiento del trastorno con el anticuerpo. En algunas modalidades, la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se reduce en al menos el 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, o 90% o más.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el uno o más subconjuntos de leucocitos CD200 + se seleccionan del grupo que consiste en linfocitos CD3+/CD200 + , linfocitos CD45R + /CD200 + , linfocitos CD5+/CD200+, linfocitos CD19+/CD200+, linfocitos CD1387CD200\ linfocitos CD200R+/CD200+, células T CD2007CD4 + , células T CD200+/CD4+ activadas y células T CD200+/CD8+. En algunas modalidades, la muestra biológica contiene tejidos de bazo del paciente.
Aún en otro aspecto, la presente descripción presenta un método para determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti-CD200 para un paciente. El método incluye administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 para reducir de esta forma el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200 por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, en donde el paciente padece de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en un cáncer, un trastorno inflamatorio o un trastorno de huesos; y monitorear el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de leucocitos en el paciente, para determinar de esta forma un programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener un nivel reducido de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de leucocitos en el paciente durante la duración del tratamiento del cáncer con el anticuerpo.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de leucocitos se reduce en al menos 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, o 80% o más.
En otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti- CD200 para un paciente. El método incluye administrar a un paciente un anticuerpo anti-CD200 para reducir de esta forma la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, en comparación con la concentración del mismo subconjunto de células de médula ósea CD200 en una muestra de control, en donde el paciente padece de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en un cáncer, un trastorno inflamatorio, o un trastorno de huesos; y monitorear la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en el paciente, para determinar de esta forma un programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener una concentración reducida del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en el paciente, durante la duración del tratamiento del trastorno con el anticuerpo.
En algunas modalidades, la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , se reduce en al menos el 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, o 90% o más.
En algunas modalidades, el uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en células de médula ósea lgk+/CD200+, células de médula ósea CD 1387CD200 + , células de médula ósea c-kit+/CD200+ y células de médula ósea c-kit+/CD200+/Lin low.
Aún en otro aspecto, la descripción presenta un método para determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti-CD200 para un paciente, en donde el método comprende: administrar a un paciente un anticuerpo anti-CD200, para reducir de esta forma el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida de un paciente, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200 por parte de las células de médula ósea del mismo tipo histológico en una muestra de control, en donde el paciente padece de un trastorno seleccionado del grupo que consiste en un cáncer, un trastorno inflamatorio, o trastorno de huesos; y monitorear el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de células de médula ósea en el paciente, para determinar de esta forma un programa de dosificación del anticuerpo para el paciente, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener un nivel reducido de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de las células de médula ósea en el paciente durante la duración del tratamiento de cáncer con el anticuerpo.
Aún en otro aspecto, la presente descripción presenta un método para tratar a un humano que padece de un trastorno, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir la concentración de leucocitos CD200+ o células de médula ósea CD200+ en un paciente con cáncer, para tratar de esta forma al humano, en donde el humano padece de un trastorno seleccionado de un grupo que consiste en cáncer, un trastorno inflamatorio, y un trastorno de huesos. El método puede incluir monitorear al humano con respecto a una reducción en leucocitos CD200 o células de médula ósea CD200 en el paciente. En algunas modalidades, se reduce la concentración de leucocitos CD200 + en la sangre del paciente. En algunas modalidades, se reduce la concentración de leucocitos CD200+ en el bazo del paciente. El método puede incluir monitorear al humano con respecto a una reducción en el nivel de expresión de CD200 por parte de los leucocitos o células de médula ósea en el paciente.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el anticuerpo anti-CD200 es un anticuerpo I g G 1 , lgG2, lgG3, lgG4, IgM, lgA1 , lgA2, IgA, IgD, o IgE. El anticuerpo puede ser, por ejemplo, un anticuerpo de múrido, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado, un anticuerpo de cadena simple, o un anticuerpo humano. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 es un anticuerpo variante que ha disminuido que tiene función efectora disminuida o no tiene función efectora tal como aquí se describe.
En cualesquiera de los métodos, el anticuerpo anti-CD200 puede ser cualquiera de los anticuerpos anti-CD200 aquí descritos, tal como, pero sin limitarse a, samalizumab.
Los términos "polipéptido" "péptido" y "proteína" se utilizan de manera intercambiable y significan cualquiera cadena de aminoácidos enlazada por péptido, sin importar la longitud o modificación post-traducción. Las proteínas CD200 aquí descritas, pueden contener o ser proteínas tipo natural, o pueden ser variantes que no tienen más de 50 (por ejemplo, no más de una, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, diez, 12, 15, 20, 25, 30, 35, 40, o 50) sustituciones de aminoácido conservadoras. Las sustituciones conservadoras normalmente incluyen sustituciones dentro de los siguientes grupos: glicina y alanina; valina, isoleucina y leucina; ácido aspártico y ácido glutámico; asparagina, glutamina, serina y treonina; Usina, histidina y arginina; y fenilalanina y tirosina.
Las proteínas CD200 aquí descritas también incluyen "fragmentos de péptido antigénico" de las proteínas, las cuales son más cortas que las proteínas CD200 de longitud total, pero retienen al menos 10% (por ejemplo, al menos 10%, al menos 15%, al menos 20%, al menos 25%, al menos 30%, al menos 35%, al menos 40%, al menos 45%, al menos 50%, al menos 55%, al menos 60%, al menos 70%, al menos 80%, al menos 90%, al menos 95%, al menos 98%, al menos 99%, al menos 99.5% o 100% o más) de la capacidad de la proteína de longitud total para inducir una respuesta antigénica en un mamífero (ver más adelante la sección de "Métodos para Producir un Anticuerpo"). Los fragmentos de péptido antigénico de una proteína CD200, incluyen variantes de la proteína de eliminación terminal, así como de eliminación interna. Las variantes de eliminación pueden carecer de uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, diez, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, o 20 segmentos de aminoácido (de dos o más aminoácidos) o aminoácidos simples no contiguos. Los fragmentos de péptido antigénicos pueden tener al menos 6 (por ejemplo, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, o 200 o más) residuos de aminoácido de longitud (por ejemplo, al menos 6 residuos de aminoácido contiguos en cualesquiera de las SEC ID NOs:1 a 3). En algunas modalidades, un fragmento de péptido antigénico de una proteína CD200 humana tiene menos de 225 (por ejemplo, menos de 200, 190, 180, 170, 160, 150, 140, 130, 120, 110, 100, 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, o 7) residuos de aminoácido de longitud (por ejemplo, menos de 225 residuos de aminoácido contiguos en cualesquiera de las SEC ID NOs:1 a 3). En algunas modalidades, un fragmento de péptido antigénico de una proteína CD200 de longitud total tiene al menos 6, aunque menos de 225, residuos de aminoácido de longitud.
En algunas modalidades, la proteína CD200 humana puede tener una secuencia de aminoácido que es, o es mayor al 70 (por ejemplo, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, o 99) % idéntica a la proteína CD200 humana que tiene la secuencia de aminoácido ilustrada en SEC ID NO:1 o SEC ID NO:2 (ver más adelante). En algunas modalidades, la proteína CD200 humana tiene la secuencia de aminoácido ilustrada en la SEC ID NO: 1 o SEC ID NO: 2.
El porcentaje (%) de identidad de secuencia de aminoácido se define como el porcentaje de aminoácidos en una secuencia candidata, que son idénticos a los aminoácidos en una secuencia de referencia, después de alinear las secuencias e introducir aberturas, si es necesario, para lograr el porcentaje máximo de identidad de secuencia. La alineación para propósitos de determinar el porcentaje de identidad de secuencia, se puede lograr en diversas formas que están dentro de la experiencia en la técnica, por ejemplo, utilizando software de computadora públicamente disponibles, tales como el software BLAST, BLAST-2, ALIGN, ALIGN-2 o Megalign (DNASTAR). Los parámetros adecuados para medir la alineación, incluyendo algoritmos necesarios para lograr una alineación máxima en toda la longitud de las secuencias que están siendo comparadas, se pueden determinar a través de métodos conocidos.
Las secuencias de aminoácido, por ejemplo proteínas CD200 humanas, así como fragmentos de péptido antigénicos de las mismas, son conocidas en la técnica y se establecen más adelante.
Tal como se utiliza en la presente invención, el término "anticuerpo" se refiere a una molécula de anticuerpo completa o intacta (por ejemplo, IgM, IgG (incluyendo I g G 1 , lgG2, slgG3 y lgG4), IgA, IgD, o IgE) o cualquier fragmento de enlace de antígeno del mismo. El término anticuerpo, incluye por ejemplo un anticuerpo . quimerizado o quimérico, un anticuerpo humanizado, un anticuerpo desinmunizado, y un anticuerpo completamente humano. Los fragmentos de enlace de antígeno de un anticuerpo incluyen, por ejemplo, un anticuerpo de cadena simple, un fragmento Fv de cadena simple (scFv), un fragmento Fd, un fragmento Fab, un fragmento Fab', o un fragmento F(ab')2. Un fragmento scFv es una cadena de polipéptido simple que incluye las regiones variables tanto de cadena pesada como ligera del anticuerpo del cual se deriva scFv. Además, los intracuerpos, minicuerpos, triacuerpos y diacuerpos (ver por ejemplo las Publicaciones de Todorovska y asociados (2001) J Immunol Methods 248(1 ) :47-66:Hudson y Kortt (1999) J Immunol Methods 231 M):177-189: Poljak (1994) Structure 2(12): 1121-1123; Rondón y Marasco (1997) Annual Review of Microbiology 5J_:257-283, cuyas descripciones individuales están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia), también están incluidos en la definición de anticuerpo y son compatibles para utilizarse en los métodos aquí descritos. Los anticuerpos biespecíf icos (incluyendo anticuerpos DVD-lg; ver más adelante) también están abarcados por el término "anticuerpo". Los anticuerpos biespecíf icos son monoclonales, preferentemente anticuerpos humanos o humanizados que tienen especificidades de enlace para al menos dos diferentes antígenos.
A menos que se defina de otra forma, todos los términos técnicos y científicos aquí utilizados tienen el mismo significado al comúnmente comprendido por un experto en la técnica a la cual pertenece esta descripción. En caso de conflicto, el presente documento, incluyendo las definiciones, tomarán el control. Los métodos y materiales preferidos se describen más adelante, aunque también se pueden utilizar en la práctica o pruebas de los métodos y composiciones aquí descritos, métodos y materiales similares o equivalentes a los aquí descritos. Todas las publicaciones, solicitudes de patente, patentes y otras referencias aquí mencionadas están incorporadas en su totalidad como referencia.
Otras características y ventajas de la presente descripción, por ejemplo, métodos para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto modulador en un humano, serán apreciadas a partir de la siguiente descripción, los ejemplos y las reivindicaciones.
Breve Descripción de las Figuras La figura 1, es una gráfica de líneas que ilustra un incremento lineal dependiente de la dosis en la AUC de suero (área bajo la curva) para los primeros cuatro ciclos (dosis) de tratamiento con el anticuerpo anti-CD200 samalizumab. Únicamente los sujetos que recibieron cuatro dosis de samalizumab, fueron incluidos en el análisis AUC. El eje X ilustra la dosis (mg/m2) del anticuerpo administrado al paciente dentro de un cohorte particular (ver Ejemplos 1 y 2 que se encuentran más adelante). El eje Y representa la AUC (para la primera, segunda, tercera y cuarta dosis) en unidades de (mg x horas) x ml_"1. Los círculos abiertos representan la AUC individual para cada paciente dentro del cohorte. El cuadro/pestaña representa la AUC promedio para cada cohorte.
La figura 2, es una serie de trazos de punto de citometría de flujo que ilustran la reducción observada en las células T CD200+ en la sangre periférica de un paciente tratado con el anticuerpo anti-CD200 samalizumab en 100 mg/m2. En el panel (i), el eje X representa la intensidad de fluorescencia relativa de la señal producida a partir de un conjugado de anticuerpo anti-CD19/PerCP enlazado a la células evaluadas, y el eje Y representa la intensidad de fluorescencia relativa de la señal producida a partir de un anticuerpo anti-CD3/Alexa Fluor® 700 enlazado a las células evaluadas. Las células T células Identificadas en el panel (i), posteriormente fueron interrogadas tanto para la expresión de CD200 como para la evidencia de samalizumab enlazado (paneles ii a v). En los paneles (ii) a (v), el eje Y representa la intensidad de fluorescencia relativa de la señal producida a partir de un conjugado de anticuerpo anti-CD200/FITC enlazado a células CD3+ (células T) en la muestra de sangre del paciente, y el eje X representa la intensidad de fluorescencia relativa de un anticuerpo específico para samalizumab (por ejemplo, un conjugado de anticuerpo anti-idiotípico)/Alexa 647 enlazado a las células. El panel (i) ilustra el perfil de citometría de flujo de las células en una muestra de sangre obtenida del paciente antes de la administración de samalizumab, y específicamente las poblaciones CD3+ y CD19 + presentes en la muestra de sangre. El panel (ii) ilustra el perfil de citometría de flujo de la célula CD3+ controlada del panel (i), que muestra la concentración de células CD3+ en la población de (i) que también son CD200+ (ver el cuadrante superior izquierdo del panel) el día 0 (antes de la dosificación de samalizumab), y el panel (iii) muestra lo mismo en el día 1 después de la dosificación de samalizumab. El panel (iv) ilustra el perfil de citometría de flujo que muestra la concentración de células CD200+/CD3+ en una muestra biológica obtenida del paciente, siete días después de que al paciente se le administrará samalizumab (ver el cuadrante superior izquierdo del panel). El Panel (v) ¡lustra el perfil de citometría de flujo que muestra la concentración de células CD200+/CD3+ en una muestra biológica obtenida del paciente, catorce días después de que al paciente se le administrará samalizumab (ver el cuadrante superior izquierdo del panel). Las flechas rellenas, grandes, indican la población de células relevante.
La figura 3, es una serie de gráficas de línea que ilustran la naturaleza de la reducción en las células T CD200+/CD4+ en diferentes pacientes, respectivamente, después de la administración de samalizumab a los pacientes. Para cada fila de la gráfica de línea, el eje Y representa el porcentaje de cambio en la población de célula T CD200VCD4, a partir de la línea de base, tal como se mide en una muestra biológica del paciente. Las unidades numéricas identificadas en el eje Y son, en orden descendente desde la parte superior de cada gráfica: 75, 50, 25, 0, -25, -50, -75, y -100. El eje X para cada gráfica de línea individual, representa el tiempo en días después de la administración inicial de samalizumab. Las barras verticales representan los días en los cuales se administró samalizumab. Cada fila de las gráficas de línea corresponde a un cohorte particular numerado de 1 a 6. Tal como se elaboró más adelante en los Ejemplos de operación, los pacientes en el cohorte, 6 recibieron 500 mg/m2 de samalizumab en cada dosis. Los pacientes en el cohorte 5 recibieron 400 mg/m2 de samalizumab en cada dosis. Cada dosis de samalizumab administrada a los pacientes en el cohorte 4, fue de 300 mg/m2. Cada dosis de samalizumab administrada a los pacientes en el cohorte 3, fue de 200 mg/m2. Los pacientes en el cohorte 2 recibieron 100 mg/m2 de samalizumab y los pacientes en el cohorte 1 recibieron 50 mg/m2 de samalizumab para cada dosis. Cada gráfica de línea individual corresponde a un paciente dentro de cada cohorte. Los pacientes no evaluables son designados a través de un círculo con un cruce. En la figura se muestran únicamente cuatro dosis (ciclos). Los datos del paciente simple del cohorte 7 no están incluidos.
La figura 4, es una serie de histogramas de citometría de flujo que ilustran el cambio en la expresión de CD200 y CD200R en los subconjuntos de células T CD4+ y CD8+ en muestra de sangre obtenidas de un paciente tratado con samalizumab en una dosis de 100 mg/m2. El eje Y en todos los paneles representa el número de células. En los paneles (i), (¡i), (v), (vi), (ix), y (x), el eje X representa la intensidad de fluorescencia relativa de un conjugado de anticuerpo anti-CD200/FITC enlazado a las células. En los paneles (iii), (iv), (vii), y (viii), el eje X representa la intensidad de fluorescencia relativa de un conjugado de anticuerpo anti-CD200R/f icoeritrina enlazado a las células. El panel (i), ilustra el número de células T CD200+/CD3+ en una muestra de sangre del paciente antes de recibir samalizumab. El panel (ii) ilustra el número de células T CD2007CD3+ en una muestra de sangre del paciente obtenida siete días después de recibir samalizumab. El panel (iii) ilustra el número de células T CD200R+/CD3+ en una muestra de sangre del paciente antes de recibir samalizumab. El panel (iv) ilustra el número de células T CD200R+/CD3+ en una muestra de sangre del paciente, obtenida siete días después de recibir samalizumab. El panel (v) ilustra el número de células T CD200+/CD3+/CD4+ en una muestra de sangre del paciente antes de recibir samalizumab. El panel (vi) ilustra el número de células T CD2007CD3/CD4+ en una muestra de sangre del paciente obtenida siete días después de recibir samalizumab. El panel (vii) ilustra el número de células T CD200R+/CD3+/CD4 + en una muestra de sangre del paciente obtenida antes de recibir samalizumab. El panel (vüi) ilustra el número de células T CD200R+/CD3+/CD4+ en una muestra de sangre del paciente, obtenida siete días después de recibir samalizumab. El panel (ix) ilustra el número de células T CD200+/CD3+/CD8+ en una muestra de sangre del paciente antes de recibir samalizumab. El panel (x) ilustra el número de células T CD200+/CD3+/CD8 + en una muestra de sangre del paciente, obtenida siete días después de recibir samalizumab.
La figura 5 es una gráfica de barras que ilustra la reducción de las células T reguladoras (CD4+/CD25+/FoxP3 + ) en subconjuntos de pacientes tratados con samalizumab que tienen enfermedad estable o mejorada ("=SD"; la agrupación de barras del lado derecho) o enfermedad progresiva/eventos adversos ("PD/AE"; agrupación de barras de la izquierda). Cada barra dentro de la gráfica representa un paciente individual. El eje Y representa el porcentaje de cambio en la concentración de células T reguladoras en la última visita, en comparación con la línea de base (la concentración de células del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo), en una muestra biológica obtenida de cada paciente.
La figura 6, es una serie de gráficas de línea que ilustra la reducción en la expresión CD200+ a través de células B-CLL en diferentes pacientes, respectivamente, después de la administración de diferentes dosis de samalizumab a los pacientes. El eje Y representa el porcentaje (%) de cambio a partir de la línea de base en la intensidad de fluorescencia promedio (MFI) de un conjugado de anticuerpo anti-CD200/FITC enlazado a células B-CLL presentes en las muestras del paciente. Las unidades numéricas identificadas en el eje Y son, en orden descendente desde la parte superior de cada gráfica: 50, 0, -50, y -100. El eje X representa el tiempo en días después de la administración inicial de samalizumab. Las barras verticales representan los días en los cuales se administró samalizumab. Cada fila de gráficas de línea corresponde a un cohorte particular numerado del 1 al 6. Tal como se elaboró más adelante en los Ejemplos de operación, los pacientes en el cohorte 6 recibieron 500 mg/m2 de samalizumab en cada dosis.
Los pacientes en el cohorte 5, recibieron 400 mg/m2 de samalizumab en cada dosis. Cada dosis de samalizumab administrada a pacientes en el cohorte 4, fue de 300 mg/m2. Cada dosis de samalizumab administrada a pacientes en el cohorte 3, fue de 200 mg/m2. Los pacientes en el cohorte 2 recibieron 100 mg/m2 de samalizumab, y los pacientes en el cohorte 1 recibieron 50 mg/m2 de samalizumab para en cada dosis. Cada gráfica de líneas individual corresponde a un paciente dentro de cada cohorte. Los pacientes no evaluables están designados a través de un círculo cruzado.
La figura 7A es una gráfica de líneas que ilustra las modalidades del efecto inmunomodulador de samalizumab, tal como se observa en el paciente CLL 102-502. El eje X representa el tiempo en días. El eje Y a la izquierda de la figura 7A, representa el porcentaje de células B-CLL CD45 tal como se mide en una muestra de sangre obtenida del paciente. El eje Y a la derecha de la figura 7A, representa el conteo de linfocitos absoluto en una muestra de sangre obtenida del paciente. Las líneas rayadas, verticales representan los puntos en los cuales se administró samalizumab al paciente. Cada dosis de samalizumab administrada al paciente 102-502, fue de 400 mg/m2.
La figura 7B, es una gráfica de líneas que ilustra una modalidad del efecto inmunomodulador de samalizumab, tal como se observa en el paciente CLL 102-502. El eje X representa el tiempo en días. Los triángulos rellenos representan el porcentaje de células BCLL CD45+ en la circulación. Los triángulos no rellenos representan el porcentaje de células T CD8 + . Las líneas que representan el porcentaje en células T CD4+ o células T reguladoras, están indicadas por las flechas. El eje Y de la figura 7B, representa el porcentaje de células de linfocitos en la población ensayada. Las línea rayadas, verticales, representan puntos en los cuales se administró samalizumab al paciente.
La figura 8A es una gráfica de líneas que ilustra la reducción en el porcentaje de células T CD200+/CD4+ en el paciente 102-502 con el tiempo, después de la primera dosis. El eje Y representa el porcentaje de células T CD200+/CD4+. El eje X representa el tiempo en días después de la administración de samalizumab.
La figura 8B, es una gráfica de líneas que ilustra la reducción en el nivel de expresión CD200+ por parte de las células B CLL en el paciente 102-502 durante el tiempo después la primera dosis. El eje Y representa la intensidad de fluorescencia promedio (MFI) de un conjugado de anticuerpo anti-CD200/FITC enlazado a células B-CLL presentes en las muestras del paciente. El eje X representa el tiempo en días después de la administración de samalizumab.
La figura 9, es una gráfica de líneas que ilustra el cambio en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en el paciente 102-502. El eje X representa el tiempo en días. El eje Y representa la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en la población ensayada. Las líneas rayadas, verticales representan puntos en los cuales se administró samalizumab al paciente.
La figura 10, es una gráfica de líneas que ilustra el retraso en la producción de autoanticuerpo RBC anti-ratón en ratones con enfermedad hemolítica auto-inmune, tratados con un anticuerpo anti-CD200. El eje Y representa la incidencia (%) de la producción de autoanticuerpo en los ratones en cada grupo. El eje X representa el tiempo en el cual se detectó la presencia de autoanticuerpos en cada ratón. Los siete grupos de ratones evaluados incluyeron: ratones que fueron inmunizados con RBCs de rata, pero no tratados con un anticuerpo (No Rx); ratones que fueron inmunizados con RBCs de rata y tratados con anticuerpo de control (Cntrl Ab); ratones que fueron inmunizados con RBCs de rata y tratados con un anticuerpo anti-CD200 (Anticuerpo 1); ratones que fueron inmunizados con RBCs de rata y tratados con ciclosporina (CsA); ratones que fueron inmunizados con RBCs de rata y tratados con anticuerpo de control y ciclosporina A (Cntrl Ab + CsA); ratones que fueron inmunizados con RBCs de rata y tratados con un anticuerpo anti-CD200 y ciclosporina A (Anticuerpo 1 + CsA); y ratones que no fueron ni inmunizados con RBCs de rata ni tratados con anticuerpo o ciclosporina (No-imm No Rx).
La figura 11 es una gráfica de líneas que ilustra el efecto de un anticuerpo anti-CD200 en el titulador de anticuerpo anti-RBC en un modelo de ratón dentro de enfermedad hemolítica. A los ratones C57BL/6 se les administró 2 x 108 de RBCs de rata en forma intraperitoneal (i.p.) una vez en el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. Los ratones inmunizados con RBC de rata, posteriormente fueron tratados con un anticuerpo anti-CD200 que poseía la función efectora (Anticuerpo 1; Ab 1) en 5 mg/kg o 1 mg/kg; un anticuerpo anti-CD200 que no poseía función efectora (Anticuerpo 2; Ab 2) en 5 mg/kg; o un anticuerpo de control (Cntl) en 5 mg/kg. Un grupo de ratones también fue tratado únicamente con vehículo. Un grupo final de ratones no recibió tratamiento con inmunización o anticuerpo (NC). El eje Y ilustra la intensidad de fluorescencia relativa reflejada como el factor de dilución en suero OD405 x y el eje X representa el número de días después del inicio del estudio.
La figura 12, es una gráfica de barras que ¡lustra la reducción en una proliferación inducida por antígeno de esplenocitos aislados de ratones tratados con un anticuerpo anti-CD200. El eje Y representa los conteos promedio por minutos de la radioactividad de 3H-timidina en ácido nucleico aislado de cada población de células. El eje X representa ratones individuales, tres (3) ilustrados en cada grupo. Para cada ratón, las cuatro medidas son para la proliferación de esplenocitos inducida a través del medio solo, glóbulos rojos de ratón, (mRBC), glóbulos rojos de rata (rRBC), o albúmina de suero de bovino (BSA). Los ratones de Grupo 1 fueron tratados con un anticuerpo anti-CD200 con función efectora (Anticuerpo 1) en una dosis de 5 mg/kg. Los ratones de Grupo 2 fueron tratados con Anticuerpo 1 en una dosis de 1 mg/kg. Los ratones de Grupo 3 fueron tratados con un anticuerpo de control que no enlaza a CD200 y los ratones de Grupo 4 no fueron tratados con un anticuerpo o inmunizados con glóbulos rojos de rata.
La figura 13 es una gráfica de barras que ilustra la reducción en esplenocitos CD200+ en ratones tratados con un anticuerpo anti-CD200. A los ratones C57BL/6 se les administró 2 x 108 de RBCs de rata en forma intraperitoneal (i.p.) una vez el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. Los ratones inmunizados con RBC de rata posteriormente fueron tratados con un anticuerpo anti-CD200 que poseía función efectora (Anticuerpo 1; Ab 1) en 5 mg/kg o 1 mg/kg; un anticuerpo anti-CD200 que no poseía función efectora (Anticuerpo 2; Ab 2) en 5 mg/kg; o un anticuerpo de control (Cntl) en 5 mg/kg. Un grupo de ratones también fue tratado únicamente con vehículo. Un grupo final de ratones no recibió tratamiento de inmunización o anticuerpo (Un-imm, No-Ab). El eje Y representa el porcentaje de células CD200+ en la población, total de esplenocitos viables. El eje X representa ratones individuales, tres (3) ilustrados en cada grupo.
Descripción Detallada de la Invención La presente descripción se refiere a anticuerpos anti-CD200 (por ejemplo, anticuerpos anti-CD200 variantes que tienen función efectora disminuida o no tienen función efectora) y a biomarcadores para utilizarse para determinar ya sea a un humano al que se le ha administrado una dosis de uno o más de los anticuerpos que producen un efecto inmunomodulador deseado en el humano. También se presentan métodos de diagnóstico y terapéuticos que utilizan los anticuerpos y biomarcadores. Aunque no se pretende ser limitantes en forma alguna, los anticuerpos anti-CD200 de ejemplo y los fragmentos de enlace CD200 de los mismos, conjugados, composiciones y formulaciones farmacéuticas, biomarcadores y métodos emplean cualesquiera de los anteriores, están elaborados más adelante y se ejemplifican en la sección de Ejemplos de operación.
Composiciones La descripción presenta anticuerpos que enlazan al polipéptido CD200 humano (algunas veces los anticuerpos son referidos en la presente invención como "anticuerpos anti-CD200"). También se presentan fragmentos de enlace de antígeno (enlace-CD200) de los anticuerpos. En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito enlaza a un epítope en la proteína CD200 humana. Por ejemplo, el anticuerpo anti-CD200 puede enlazar a un epítope en la proteína CD200 humana que comprende, o consiste en, la siguiente secuencia de aminoácido: ER LVI RM PFSH LSTYSLVWVM AAVVLCTAQVQ VVTQDER EQLYT PASLKCSLQNAQEALI VTWQKKKAVSPENMVTFSENHG VVIQPAYK DKI ITQLGLQNSTITFWNITLEDEGCYMCLFNTFGFGKISGTACLT VYVQPI VSLHYKFSEDHLNITCSATARPAPMVFWKVPRSGIENSTV TLSHPNGTTSVTSILHIKDPKQVGKEVICQVLHLGTVTDFKQTVNKG YWFSVPLLLSI VSLVILLVLISI LLYWKRH RNQDREP (SEC ID NO: 1; Acceso Genbank No. P_005935.2) . La SEC ID NO:1 ilustra la secuencia de aminoácido de una proteína de isoforma A CD200 humana precursora de longitud total. En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito enlaza a un epítope en la proteína CD200 humana que comprende, o consiste en la siguiente secuencia de aminoácido: MERLTLTRTIGGPLLTATLLGKTTINDYQVIRM PFSH LSTYSLVWVM AAVVLCTAQVQVVTQDER EQLYT P AS LKCSLQNAQEALIVTWQKK KAVSPENMVTFSENHGVVIQPAYKDKINITQLGLQNSTITFWNITLE DEGCYMCLFNTFGFGKISGTACLTVYVQPI VSLHYKFSEDH L ITCS ATARPAPM VFWKVPRSG I ENSTVTLSHPNGTTSVTSI LHI KDPKNQ VG KE VI CQVLHLGTVTDFKQTVNKG YWFSVPLLLSI VSLVILLVLISI LLYWKRH RNQDREP (SEC ID NO:2; Acceso Genbank No. NP_001004196.2). La SEC ID NO:2 ilustra la secuencia de aminoácido de una proteína de isoforma B CD200 de longitud total. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 enlaza a un epítope presente en proteína CD200 humana que tiene la siguiente secuencia de aminoácido: VI R PFSH LSTYSLVWVM AAVVLCTAQVQ VVTQDEREQLYTTASLK CSLQNAQEALIVTWQKKKAVSPEN VTFSENHGVVIQPAYKDKINI TQLGLQNSTITFWN ITLEDEGCYMCLFNTFGFGKISGTACLTVYVQ Pl VSLH YKFSEDHLNITCSATARPAPMVFWKVPRSGIENSTVTLSHP NGTTSVTSILHIKDPKNQVGKEVICQVLHLGTVTDFKQTVNKGYWF SVPLLLSI VSLVI LLVLISI LLYWKRHRNQDR GELSQGVQKMT (SEC ID NO:3; Acceso Genbank No. CAA28943.1; Figura 3 de la Publicación de McCaughan y asociados (1987) Immunogenetics 25:329-335). La SEC ID NO:3 es una secuencia de ejemplo de una proteína CD200 humana de longitud total.
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito enlaza a un epítope dentro de la porción extracelular de una proteína CD200. Por ejemplo, en algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 puede enlazar a una proteína CD200 en un epítope dentro o que traslapa con: (i) aminoácidos 1 a 233 de la secuencia de aminoácido ilustrada en SEC ID NO: 1; (ii) aminoácidos 1 a 258 de la secuencia de aminoácido ilustrada en SEC ID NO:2; o aminoácidos 1 a 229 de la secuencia de aminoácido ilustrada en SEC ID NO:3.
En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 enlaza a un epítope en la proteína CD200 humana que carece de la secuencia líder. Por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede enlazar una proteína CD200 en un epítope dentro o que traslapa con los aminoácidos 31 a 233 de la secuencia de aminoácido ilustrada en la SEC ID NO: 1, que corresponde a la porción extracelular de la forma madura de la isoforma A CD200 humana menor de la secuencia líder terminal amino. En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede enlazar a una proteína CD200 en un epítope dentro o que traslapa con los aminoácidos 56 a 258 de una secuencia de aminoácido ilustrada en la SEC ID NO:2, que corresponde a la porción extracelular de la forma madura de la isoforma B CD200 humana menor de la secuencia líder B terminal. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede enlazar a una proteína CD200 en un epítope dentro o que traslapa con los aminoácidos 27 a 229 de la secuencia de aminoácido ilustrada en la SEC ID NO:3, que corresponde a la porción extracelular de la forma madura de CD200 menor de la secuencia líder de amino terminal.
Un "epítope" se refiere al sitio en una proteína (por ejemplo, proteína CD200 humana) que está enlazado por un anticuerpo. Los "epítopes de traslape" incluyen al menos un (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, o seis) residuo(s) de aminoácido común.
En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 enlaza específicamente a una proteína CD200 humana (por ejemplo, la proteína CD200 humana que tiene la secuencia de aminoácido ilustrada en la SEC ID NO: 1, SEC ID NO:2, SEC ID NO:3, o los dominios extracelulares de las formas maduras de las proteínas CD200). Los términos "enlace específico" o "que enlaza en forma específica" se refiere a dos moléculas que forman un complejo (por ejemplo, un complejo entre un anticuerpo anti-CD200 y una proteína CD200) que es relativamente estable bajo condiciones fisiológicas. Normalmente, el enlace se considera específico cuando la constante de asociación (Ka) es mayor a 106 M" . Por lo tanto, un anticuerpo anti-CD200 puede enlazar específicamente a una proteína CD200 con una Ka de al menos (o mayor a) 106 (por ejemplo, al menos o mayor a 107, 108, 109, 1010, 1011 1012, 1013, 1014, o 1015 o mayor) "1. Los ejemplos de anticuerpos que enlazan específicamente a una proteína CD200 humana, se describen por ejemplo en las Patentes Norteamericanas Nos. 7,408,041; 7,427,665; 7,435,412; y 7,598,353, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia.
La secuencia de aminoácido para diversos anticuerpos anti-CD200 de ejemplo se describen por ejemplo en la Patente Norteamericana No. 7,408,041. Por ejemplo, el anticuerpo anti-CD200 puede comprender la secuencia de aminoácido de las regiones variables de cadena pesada y ligera de uno de los anticuerpos Fab - d1B10, d1A5, d1B5, c2aB7, c1A10, o c2aA10 - ilustrados en la figura 23 de la Patente Norteamericana No. 7,408,041, estando incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia las secuencias ilustradas en la figura 23. En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito contiene un conjunto emparejado de CDRs de cadena pesada y CDRs de cadena ligera de uno de los anticuerpos Fab ilustrados en la figura 23 de la Patente Norteamericana No. 7,408,041. Por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito contiene el conjunto emparejado de CDRs a partir del anticuerpo Fab d1B10: una CDR1 de cadena pesada (HCDR1) que comprende la siguiente secuencia: GFTFSGFAMS (SEC ID NO:4); una CDR2 de cadena pesada (HCDR2) que comprende la siguiente secuencia: SISSGGTTYYLDSVKG (SEC ID NO:5); una CDR3 de cadena pesada (HCDR3) que comprende la siguiente secuencia: GNYYSGTSYDY (SEC ID NO:6); una CDR1 de cadena ligera (LCDR1) que comprende la siguiente secuencia: RASESVDSYGNSFMH (SEC ID NO:7); una CDR2 de cadena ligera (LCDR2) que comprende la siguiente secuencia: RASNLES (SEC ID NO: 8); y una CDR3 de cadena ligera (LCDR3) que comprende la siguiente secuencia: QQSNEDPRT (SEC ID NO:9).
En otro ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede contener el conjunto emparejado de CDRs a partir del anticuerpo Fab d1A5: (i) una HCDR1 que comprende la siguiente secuencia: GFNIKDYYMH (SEC ID NO: 10); una HCDR2 que comprende la siguiente secuencia: WIDPENGDTKYAPKFQG (SEC ID NO: 11); una HCDR3 que comprende la siguiente secuencia: KNYYVSNYNFFDV (SEC ID NO: 12); una LCDR1 que comprende la siguiente secuencia: SASSSVRYMY (SEC ID NO: 13); una LCDR2 que comprende la siguiente secuencia: DTSKLAS (SEC ID NO: 14); y una LCDR3 que comprende la siguiente secuencia: FQGSGYPLT (SEC ID NO: 15).
En otro ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede comprender un conjunto emparejado del CDRs a partir del anticuerpo Fab d1B5: una HCDR1 que comprende la siguiente secuencia de aminoácido: GFNIKDYYIH (SEC ID NO: 16); una HCDR2 que comprende la siguiente secuencia de aminoácido: Wl DPEIGATKYVPKFQG (SEC ID NO: 17); una HCDR3 que comprende la siguiente secuencia de aminoácido: LYGNYDRYYAMDY (SEC ID NO: 18); una LCDR1 que comprende la siguiente secuencia de aminoácido: KASQN VRTAVA (SEC ID NO: 19); una LCDR2 que comprende la siguiente secuencia de aminoácido: LASNRHT (SEC ID NO:20); y una LCDR3 que comprende la siguiente secuencia de aminoácido: LQHWNYPLT (SEC ID NO:21).
En otro ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede contener el conjunto emparejado de CDRs a partir del anticuerpo Fab c2aB7: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GYSFTDYI I L (SEC ID NO:22); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: ' HIDPYYGS SNYNLKFKG (SEC ID NO:23); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: SKRDYFDY (SEC ID NO:24); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KASQD I NSYLS (SEC ID NO:25); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: RANRLVD (SEC ID NO:26); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LQYDEFPYT (SEC ID NO:27).
Aún en otro ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede contener a un conjunto emparejado de CDRs a partir del anticuerpo Fab c1A10: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GYTFTEYTMH (SEC ID NO:28); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: GVN PNNGGALYNQKFKG (SEC ID NO:29); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: RSNYRYDDAMDY (SEC ID NO:30); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KSSQSLLDIDEKTYLN (SEC ID NO:31); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: LVSKLDS (SEC ID NO:32); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: WQGTHFPQT (SEC ID NO:33).
Y aún en otro ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede contener un conjunto emparejado de CDRs a partir del anticuerpo Fab c2aA10: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: AFNI KDHYMH (SEC ID NO:34); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: WIDPESGDTEYAPKFQG (SEC ID NO:35); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: FNGYQALDQ (SEC ID NO:36); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: TASSSVSSSYLH (SEC ID NO:37); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: STSNLAS (SEC ID NO:38); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: RQYHRSPPIFT (SEC ID NO: 39).
Los conjuntos de CDRs de ejemplo adicionales de los anticuerpos anti-CD200 se describen por ejemplo en la Patente Norteamericana No. 7,427,665. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 es samalizumab.
Los métodos para determinar si un anticuerpo enlaza a un antígeno de proteína y/o la afinidad de un anticuerpo a un antígeno de proteína, son conocidos en la técnica. Por ejemplo, el enlace de un anticuerpo a un antígeno de proteína, puede ser detectada y/o cuantificada utilizando una variedad de técnicas, tales como, pero sin limitarse a, manchado Western, manchado de punto, método de resonancia de plasmón de superficie (SPR) (por ejemplo, sistema BIAcore; Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Suecia y Piscataway, N.J.), o ensayo inmunoabsorbente enlazado por enzimas (ELISA). Ver por ejemplo las Publicaciones de Harlow y Lañe (1988) "Anticuerpos: Manual de Laboratorio" Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.; Benny K. C. Lo (2004) "Ingeniería de Anticuerpo: Métodos y Protocolos," Humana Press (ISBN: 1588290921); Borrebaek (1992) "Ingeniería de Anticuerpo, Guía Práctica," W.H. Freeman y Co., Y; Borrebaek (1995) "Ingeniería de Anticuerpo," 2o Edición, Oxford University Press, NY, Oxford; Johne y asociados (1993) J Immunol Meth 160: 191-198; Jonsson y asociados (1993) Ann Biol Clin 5J_: 19-26; y Jonsson y asociados (1991) Biotechniques 11:620-627.
En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 puede bloquear en forma cruzada en enlace de otro anticuerpo que enlaza a un epítope dentro, o que traslapa con una proteína CD200 humana. En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 puede bloquear en forma cruzada el enlace de un anticuerpo que enlaza a un epítope dentro, o que traslapa con, un fragmento de péptido de una proteína CD200 humana. El fragmento de péptido puede ser un fragmento de una proteína CD200 humana que tiene la secuencia de aminoácido ilustrada, por ejemplo, en cualesquiera de las SEC ID NOs: 1 a 3. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "anticuerpo de bloqueo de cruce" se refiere a un anticuerpo que disminuye la cantidad de enlace del anticuerpo anti-CD200 a un epítope en una proteína CD200, relativo a la cantidad de enlace del anticuerpo anti-CD200 al epítope en la ausencia del anticuerpo. En la técnica se conocen métodos adecuados para determinar si un primer anticuerpo bloquea en forma cruzada el enlace de un segundo anticuerpo a un epítope.
En la técnica también se conocen métodos para identificar el epítope al cual enlaza el anticuerpo en particular (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200). Por ejemplo, el enlace del epítope de un anticuerpo anti-CD200 puede ser identificado, midiendo en enlace del anticuerpo a diversos (por ejemplo, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, o 30 o más) fragmentos de péptido de traslape de una proteína CD200 (por ejemplo, diversos fragmentos de traslape de una proteína que tienen la secuencia de aminoácido ilustrada, por ejemplo, en cualesquiera de las SEC ID NOs: 1 a 3). Cada uno de los diferentes péptidos de traslape, posteriormente es enlazado a una dirección única en un soporte sólido, por ejemplo, depósito separados de una placa de ensayo de depósitos múltiples. Posteriormente, el anticuerpo anti-CD200 es interrogado contactándolo con cada uno de los péptidos en la placa de ensayo durante una cantidad de tiempo y bajo condiciones que permiten que el anticuerpo enlace a su epítope. El anticuerpo anti-CD200 no enlazado es eliminado mediante lavado de cada uno de los depósitos. Posteriormente, un anticuerpo secundario etiquetado en forma detectable que enlaza al anticuerpo anti-CD200, si está presente en el depósito de la placa, se pone en contacto con cada uno de los depósitos, y el anticuerpo secundario no enlazado es eliminado mediante los pasos de lavado. La presencia o cantidad de la señal detectable producida por el anticuerpo secundario etiquetado en forma detectable en un depósito, es una indicación de que el anticuerpo anti-CD200 enlaza al fragmento de péptido en particular asociado con el depósito. Ver por ejemplo, la Publicación de Harlow y Lañe {supra), Benny K. C. Lo (supra), y la Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana No. 20060153836, cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia. Un epítope particular para el cual enlaza un anticuerpo, también puede ser identificado utilizando técnicas cromatográficas BIAcore (ver por ejemplo, la Publicación de Pharmacia Bl Atechnology Handbook, "Mapeo de Epítope", Sección 6.3.2, (Mayo 1994); y Johne y asociados (1993) J Immunol Methods 160: 191-8).
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200, o un fragmento de enlace CD200 del mismo, aquí descrito enlaza a un polipéptido CD200 humano expresado en la superficie de una célula. Los métodos para determinar si un anticuerpo enlaza a una proteína expresada en la superficie de una célula, son conocidos en la técnica y que se describen por ejemplo en las Publicaciones de Petermann y asociados (2007) J Clin ¡nvest 117(12):3922-9: Rijkers y asociados (2008) Mol Immunol 45(4): 1126-35; y Kretz-Rommel (2007) J Immunol 178X91:5595-605.
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 o un fragmento de enlace CD200 del mismo aquí descrito, inhibe la interacción entre la proteína CD200 y el receptor CD200. Los métodos para determinar si un agente (tal como un anticuerpo) inhibe la interacción entre CD200 y CD200R, son conocidos en la técnica y se describen por ejemplo en la Publicación de Hatherley y Barclay (2004) Eur J Immunol 34(6): 1688-94.
En algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 o fragmento de enlace CD200 del mismo, inhibe la formación de osteoctastos in vitro y/o in vivo. Los métodos adecuados para determinar si un anticuerpo inhibe la formación de osteoclastos, son conocidos en la técnica y se describen por ejemplo en la Publicación PCT No. WO 08/089022 y en la Publicación Cui y asociados (2007) Proc Nati Acad Sci USA 104(36): 14436-14441. Por ejemplo, se pueden cultivar células de médula ósea de múrido en la presencia, por ejemplo de RANKL y M-CSF en la presencia o ausencia de un anticuerpo anti-CD200. Una disminución en el porcentaje de osteoclastos formados a partir de células de médula ósea en la presencia del anticuerpo, en comparación con porcentaje de osteoclastos formados en la ausencia del anticuerpo, indica que el anticuerpo inhibe in vitro la formación de osteoclasto.
Ya que CD200 se expresa en células normales tal como células endoteliales, a pesar de que se expresa en niveles menores que en células de cáncer, en algunas modalidades puede ser conveniente administrar una variante del anticuerpo anti-CD200 (o fragmento de enlace CD200 del mismo), con una región constante modificada de modo que no transmita, o tenga capacidad disminuida de transmitir, ADCC o CDC. Dicha modificación puede ser útil para limitar el daño a las células normales. La expresión CD200 también se activa en algunas células normales activadas (por ejemplo, células T activadas), haciéndolas vulnerables a exterminación por parte de un anticuerpo anti-CD200 con una función efectora. Puede ser conveniente utilizar un anticuerpo anti-CD200 que carezca de función efectora para evitar el exterminio de estas células mediante ADCC o CDC. La función efectora de un anticuerpo anti-CD200 puede ser eliminada reemplazando una región constante de inmunoglobulina que tiene función efectora (por ejemplo, el dominio constante I g G 1 ) para una región constante que no tenga una función efectora (por ejemplo, una región constante de fusión lgG2/1gG4). A continuación se describen métodos adicionales para eliminar la función efectora.
Funciones Efectoras La interacción de los anticuerpos y complejos de anticuerpo-antígeno con células del sistema inmune, afecta una variedad de respuestas, referidas en la presente invención como funciones efectoras. La función efectora de ejemplo incluye enlace de receptor Fe, fagocitosis, desactivación de receptores de superficie celular (por ejemplo, receptor de célula B; BCR), etc. Otras funciones efectoras, incluyen ADCC, mediante las cuales los anticuerpos enlazan a receptores Fe en células exterminadoras naturales (NK) o macrófagos que conducen a muerte celular, y CDC, la cual es una muerte celular inducida mediante la activación de la cascada de complemento (revisada en Daeron (1997) Annu Rev Immunol 15:203-234; Ward y Ghetie (1995) Therapeutic Immunol 2:77-94; y Ravetch y Kinet (1991) Annu Rev Immunol 9:457-492). Dichas funciones efectoras generalmente requieren que la región Fe sea combinada con un dominio de enlace (por ejemplo, un dominio variable de anticuerpo) y se puedan evaluar utilizando los ensayos aquí descritos.
Varias de las funciones efectoras de anticuerpo, incluyendo ADCC, son transmitidas por receptores Fe (FcRs), que enlazan la región Fe del anticuerpo. En ADCC, las células NK o macrófagos enlazan a la región Fe del complejo de anticuerpo, y promueve la lisis de la célula objetivo. La reticulación de FcRs en células NK, activa la citotoxicidad transmitida por perforin/granzima, mientras que en macrófagos esta reticulación promueve la liberación de transmisores tales como óxido nítrico (NO), TNF-a, y especies de oxígeno reactivo. Para células objetivo positivas-CD200, un anticuerpo anti-CD200 enlaza a la célula objetivo y la región Fe dirige la función efectora a la célula objetivo. La afinidad de un anticuerpo para una FcR particular, y por lo tanto la actividad efectora transmitida por el anticuerpo, se puede modular alterando la secuencia de aminoácido y/o las modificaciones post-traducción de Fe y/o región constante del anticuerpo.
Las FcRs son definidas por su especificidad para isotipos de inmunoglobulina; los receptores Fe para anticuerpos IgG son referidos como FcyR, para IgE como FcsR, para IgA como FcaR y así sucesivamente. Se han identificado tres subclases de FCYR: FcyR1 (CD64), FCYRII (CD32) y FCYRIII (CD 16). Debido a que cada subclase FCYR está codificada por dos o tres genes, y la división de ARN alternativa conduce a transcripciones múltiples, existe una amplia diversidad en las isoformas FCYR. Los tres genes que codifican la subclase FCYR1 (FCYRIA, FCYRIB y FCYRIC) se agrupan en la región 1 q 21.1 del brazo largo del cromosoma 1; los genes que codifican las isoformas FCYRII (FCYRIIA, FCYRIIB y FCYRIIC) y los dos genes que codifican FCYRIII (FCYRIIIA y FCYRIIIB) todos se agrupan en la región 1q22. Estos diferentes subtipos FcR son expresados en diferentes tipos celulares (revisados en la Publicación de Ravetch y Kinet (1991) Annu Rev Immunol 9:457-492). Por ejemplo, en humanos, FCYRIIIB se encuentra únicamente en neutrófilos, en tanto que FCYRIIIA se encuentra en macrófagos, monocitos, células exterminadoras naturales (NK), y una subpoblación de células T. En forma notable, el FCYRIIIA es la única FcR presente en células NK, uno de los tipos celulares implicados en ADCC.
FCYRI, FcyRII y FCYRIII son receptores de la super familia de inmunoglobulina (IgSF); FCYRI tiene tres dominios IgSF en su dominio extracelular, en tanto que FCYRII y FCYRIII tiene únicamente dos dominios IgSF en sus dominios extracelulares. Otro tipo de receptor Fe es el receptor Fe neonatal (FcRn). FcRn es estructuralmente similar al complejo de histocompatibilidad mayor (MHC) y consiste en una a-cadena enlazada en forma no covalente a 32-microglobulina.
El sitio de enlace en los anticuerpos de humano y múrido para FcyR, ha sido mapeado previamente a la llamada "región de articulación de bajo nivel", que consiste en los residuos 233-239 (numeración de índice EU tal como la Publicación de Kabat y asociados (1991) Secuencias de Proteínas de Interés Inmunológico, 5o Edición, Public Health Service, National Institutes de Health, Bethesda, Maryland). Woof y asociados (1986) Molec Immunol 23:319-330; Duncan y asociados (1988) Nature 332:563: Canfield y Morrison (1991) J Exp Med 173:1483-1491 : Chappel y asociados (1991) Proc Nati Acad Sci USA 88.:9036-9040. De los residuos 233-239, P238 y S239 han sido mencionados como estando implicados posiblemente en el enlace.
Otras áreas mencionadas previamente implicadas posiblemente en el enlace a FcyR son: G316-K338 (IgG humano) para FcyRI humano (únicamente mediante comparación de secuencia; no se evaluaron mutantes de sustitución) (Woof y asociados (1986) Molec Immunol 23_:319-330) ; K274-R301 (IgGI humano) para FcyRIII humano (basado en péptidos) (Sarmay y asociados (1984) Molec Immunol 21_:43-51); Y407-R416 (IgG humano) para FcyRIII humano (basado en péptido) (Gergely y asociados (1984) Biochem Soc Trans 1_2:739-743 (1984)); así como N297 y E318 (lgG2b de múrido) para FcyRIl de múrido (Lund y asociados (1992) Molec Immunol 29:53-59).
Las células efectoras humanas son leucocitos que expresan una o más FcRs y llevan a cabo funciones efectoras. En ciertas modalidades, las células expresan al menos F c ? R I II y llevan a cabo la función efectora ADCC. Los ejemplos de leucocitos humanos que transmiten ADCC, incluyen células mononucleares de sangre periférica (PBMC), células exterminadoras naturales (NK), monocitos, células T citotóxicas y neutrófilos. Las células efectoras pueden ser aisladas de una fuente nativa de la misma, por ejemplo sangre o PBMCs.
En CDC, el complejo de anticuerpo-antígeno enlaza al complemento, dando como resultado la activación de la cascada de complemento y generación del complejo de ataque de membrana. La activación de la trayectoria de complemento clásica se inicia a través del enlace del primer componente del sistema de complemento (Clq) a los anticuerpos (de la subclase adecuada) que se enlazan ya sea a su antígeno cognato; por lo tanto la activación de la cascada de complemento se regula en parte de la afinidad del enlace de la inmunoglobulina a la proteína C1q. C1q y dos proteasas de serina, C1r y C1s, forman el complejo C1, el primer componente de la trayectoria CDC. C1q es una molécula hexavalente con un peso molecular de aproximadamente 460,000 y una estructura en la cual se conectan seis "tallos" colagenosos a seis regiones de cabeza globular. Burton y Woof (1992) Advances in Immunol 5J_:1-84. Para activar la cascada de complemento, es necesario que C1q enlace al menos a dos moléculas de lgG1, lgG2, o lgG3, pero únicamente una molécula de IgM, adherida al objetivo antigénico (Ward y Ghetie (1995) Therapeutic Immunology 2_:77-94). Para evaluar la activación de complemento, también se puede llevar a cabo un ensayo CDC, por ejemplo, tal como se describe en la Publicación de Gazzano-Santoro y asociados (1996) J Immunol Methods 202: 163.
Se ha propuesto que diversos residuos de la molécula IgG están implicados en el enlace a C1q, incluyendo los residuos Glu318, Lys320 y Lys322 en el dominio CH2, el residuo de aminoácido 331 localizados a su vez, en proximidad cercana a la misma hebra beta, los residuos Lys235 y Gly237 localizados en la región de articulación de menor nivel, y los residuos de 231 a 238 localizados en la región N-terminal del dominio CH2. Ver por ejemplo las Publicaciones de Xu y asociados (1993) J Immunol 150: 52A; Publicación PCT no. WO 94/29351; Tao y asociados (1993) J Exp Med 178:661 -667; Brekke y asociados (1994) Eur J Immunol 2_4:2542-47; Burton y asociados (1980) Nature 288:338-344; y las Patentes Norteamericanas Nos. 5,648,260 y 5,624,821. Se ha propuesto en forma adicional que la capacidad de IgG para enlazar a C1q y activar la cascada de complemento, también depende de la presencia, ausencia o modificación de la porción de carbohidrato colocada entre los dos dominios CH2 (lo cual normalmente se ancla en Asn297).
Ver por ejemplo, la Publicación de Ward y Ghetie (1995) Therapeutic Immunology 2:77-94. En ciertas modalidades, uno o más de estos residuos pueden ser modificados, sustituidos o eliminados o uno o más residuos de aminoácido pueden ser insertados para mejorar o disminuir la actividad CDC de los anticuerpos anti-CD200 aquí proporcionados.
Métodos para Disminuir o Eliminar la Función Efectora Las funciones efectoras que implican la región constante del anticuerpo específico del objetivo, pueden ser moduladas alterando las propiedades de la región constante o Fe. Las funciones efectoras alteradas, incluyen, por ejemplo, una modulación en una o más de las siguientes actividades: ADCC, CDC, apoptosis, enlace a uno o más receptores Fe, y respuestas pro-inflamatorias. La modulación se refiere a un incremento, disminución o eliminación de una actividad de función efectora exhibida por un anticuerpo en cuestión, en comparación con la actividad del segundo anticuerpo. En ciertas modalidades, el segundo anticuerpo es un anticuerpo que posee una función efectora que ocurre naturalmente, que no ha sido modificada. En modalidades particulares, la modulación incluye situaciones en las cuales se elimina o está completamente ausente una actividad. Además, en algunos casos, un anticuerpo no variante puede exhibir una actividad de función efectora similar o equivalente a la actividad de los anticuerpos chC2aB7-hG1 o hB7V3V2-hG1 aquí descritos.
Una región constante variante con afinidad de enlace FcR alterada y/o actividad ADCC y/o actividad CDC alterada, es un polipéptido que tiene actividad de enlace FcR y/o actividad ADCC y/o actividad CDC ya sea aumentada o disminuida en comparación con el polipéptido nativo o de origen o con un polipéptido que comprende una secuencia nativa o región constante. Una variante de polipéptido que muestra enlace incrementado a una FcR, enlaza al menos a una FcR con afinidad mayor al polipéptido de origen. Una variante de polipéptido que muestra enlace disminuido a una FcR enlaza al menos a una FcR con afinidad menor que un polipéptido de origen. Dichas variantes que muestran enlace disminuido a una FcR, pueden poseer poco o ningún enlace apreciable a una FcR, por ejemplo, 0 a 50% (por ejemplo, menos de 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, ó 1%) del enlace al FcR en comparación con el nivel enlace de una región Fe o constante de inmunoglobulina de secuencia nativa a la FcR. En forma similar, un anticuerpo anti-CD200 variante que muestra actividad ADCC y/o CDC alterada, puede exhibir actividad ADCC y/o CDC ya sea incrementada o reducida, en comparación con el polipéptido nativo o de origen. Por ejemplo, en algunas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 que comprende una región constante variante puede exhibir de aproximadamente 0 a 50% (por ejemplo, menos de 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, ó 1%) de la actividad ADCC y/o actividad CDC de forma nativa de la región constante. Un anticuerpo anti-CD200 que comprende una región constante variante que muestra ADCC y/o CDC reducida, puede exhibir actividad ADCC y/o CDC reducida o ninguna, tal como se muestra en la presente invención a través del ejemplo.
Una región constante o Fe secuencia nativa, comprende una secuencia de aminoácido idéntica a la secuencia de aminoácido de una región Fe o de cadena constante encontrada en la naturaleza. Una región constante o Fe, variante o alterada, comprende una secuencia de aminoácido que difiere de la región de cadena pesada de secuencia nativa, en virtud de al menos una modificación, inserción o eliminación de aminoácido, por ejemplo. En ciertas modalidades, la región constante variante o alterada tiene al menos una sustitución, inserción y/o eliminación de aminoácido, en comparación con una región constante de secuencia nativa o la región constante de un polipéptido de origen, por ejemplo, de aproximadamente una hasta aproximadamente cien sustituciones, inserciones, y/o eliminaciones de aminoácido en la región constante de secuencia nativa o la región constante del polipéptido de origen. En algunas modalidades, la región constante variante o alterada de la presente invención, tendrá al menos aproximadamente el 70% de homología (similitud) o identidad con una región constante de secuencia nativa y/o con la región constante de un polipéptido de origen, y en algunos casos, al menos aproximadamente el 75% y en otros casos al menos aproximadamente el 80% de homología o identidad entre sí, y en otras modalidades al menos aproximadamente 85%, 90% o 95% de homología o identidad entre sí. La región constante variante o alterada también puede contener una o más eliminaciones o inserciones de aminoácido. Además, la región constante variante puede contener una o más sustituciones, eliminaciones, o inserciones de aminoácido que dan como resultado modificaciones post-traducción alteradas, incluyendo, por ejemplo, un patrón de glucosilación alterado.
Los anticuerpos o fragmentos de enlace de antígeno del mismo, con funciones efectoras alteradas o sin funciones efectoras se pueden generar construyendo o produciendo anticuerpos con regiones constantes variantes, Fe, o de cadena pesada; tecnología de ADN recombinante y/o condiciones de expresión y cultivo celular pueden ser utilizadas para producir anticuerpos con función y/o actividad alterada. Por ejemplo, se puede utilizar tecnología de ADN recombinante para construir una o más sustituciones, eliminaciones, o inserciones de aminoácido en las regiones (tal como, por ejemplo, regiones Fe o constantes) que afectan la función del anticuerpo, incluyendo funciones efectoras. Como alternativa, los cambios en modificaciones post-traducción, tal como, por ejemplo, patrones de glucosilacion, se pueden lograr manipulando las condiciones de cultivo celular y expresión a través de las cuales se produce el anticuerpo.
Por consiguiente, ciertos aspectos y métodos de la presente descripción se refieren a anticuerpos anti-CD200 con funciones efectoras alteradas que comprenden una o más sustituciones, inserciones y/o eliminaciones de aminoácido. En algunas modalidades, dicho anticuerpo anti-CD200 variante, exhibe función efectora reducida o ninguna función efectora. En algunas modalidades, un anticuerpo variante comprende una región constante híbrida, o una parte de la misma, tal como una región constante híbrida G2/G4 (ver por ejemplo, las Publicaciones de Burton y asociados (1992) Adv Immun 51:1-18: Canfield y asociados (1991) J Exp Med 173: 1483-1491; y Mueller y asociados (1997) Mol Immunol 34(6):441 -452). Por ejemplo (y de acuerdo con la numeración de Kabat), las regiones constantes de I gG 1 y lgG4 contienen residuos G249G250, en tanto que la región constante de lgG2 no contiene el residuo 249, pero contiene G250. En una región constante híbrida G2/G4, en donde la región 249-250 viene de la secuencia G2, la región constante puede ser modificada en forma adicional para introducir un residuo de glicina en la posición 249 para producir una fusión G2/G4 que tiene G249/G250.
Además de utilizar una construcción G2/G4 tal como se describe anteriormente, o los anticuerpos anti-CD200 con función efectora reducida pueden ser producidos introduciendo otros tipos de cambios en la secuencia de aminoácido de ciertas regiones del anticuerpo. Dichos cambios de secuencia de aminoácido, incluyen pero no se limitan a la mutación Ala-Ala descrita por ejemplo, en las Publicaciones PCT Nos. WO 94/28027 y WO 98/47531 ; y Xu y asociados (2000) Cell Immunol 200: 16-26. Por lo tanto, en algunas modalidades, los anticuerpos anti-CD200 con mutaciones dentro la región constante que incluye una mutación Ala-Ala, pueden ser utilizados para reducir o eliminar la función efectora. De acuerdo con estas modalidades, la región constante de un anticuerpo anti-CD200 comprende una mutación para una alanina en la posición 234, o una mutación para una alanina en la posición 235. Además, la región constante puede contener una mutación doble: una mutación para una alanina en la posición 234 y una segunda mutación para una alanina en la posición 235. En una modalidad, el anticuerpo anti-CD200 comprende una estructura lgG4, en donde la mutación Ala-Ala puede describir una mutación(s) de fenilalanina a alanina en la posición 234 y/o la mutación de leucina a alanina en la posición 235. En otra modalidad, el anticuerpo anti-CD200 comprende una estructura I g G 1 , en donde la mutación Ala-Ala puede describir una mutación(s) de leucina a alanina en la posición 234 y/o una mutación de leucina a alanina en la posición 235. Un anticuerpo anti-CD200 puede llevar en forma alternativa o adicional otras mutaciones, incluyendo la mutación de punta K322A en el dominio CH2 (Hezareh y asociados (2001) J Virol 75.: 12161 -8) . Un anticuerpo con dicha mutación(s) en la región constante puede además ser un anticuerpo de bloqueo o no bloqueo.
Los cambios dentro de la región de articulación también afectan las funciones efectoras. Por ejemplo, la eliminación de la región de articulación puede reducir la afinidad para receptores Fe y puede reducir la activación de complemento (Klein y asociados (1981) Proc Nati Acad Sci USA 78: 524-528). La presente descripción por lo tanto se refiere a anticuerpos con alteraciones en la región de articulación.
En algunas modalidades, los anticuerpos anti-CD200 pueden ser modificados ya sea para aumentar o inhibir la citotoxicidad dependiente de complemento (CDC). Se puede lograr la actividad CDC modulada introduciendo una o más sustituciones, inserciones, o eliminaciones de aminoácido en una región Fe del anticuerpo. Ver, por ejemplo, la Patente Norteamericana No. 6,194,551. Como alternativa o en forma adicional, el residuo(s) de cisteína se puede introducir en la región Fe, permitiendo de esta forma una formación de enlace de disulfuro de intercadena en esta región. El anticuerpo homodimérico generado de esta forma puede tener capacidad de internalización mejorada o reducir y/o exterminación de célula transmitida por complemento incrementada o reducida. Ver por ejemplo, las Publicaciones de Carón y asociados (1992) J Exp Med 176: 1191 - 1195 y Shopes (1992) Immunol 148:2918-2922; Publicaciones PCT Nos. WO 99/51642 y WO 94/29351 ; Duncan y Winter (1988) Nature 322:738-40: y Patentes Norteamericanas Nos. 5,648,260 y 5,624,821. Los anticuerpos homodiméricos con la actividad anti-tumor aumentada, también se pueden preparar utilizando reticuladores heterobif uncionales tal como se describe en la Publicación de Wolff y asociados (1993) Cáncer Research 53:2560-2565. Como alternativa, un anticuerpo puede ser construido de modo que tenga dos regiones Fe duales, y de esta forma puede tener una lisis de complemento y capacidades ADCC mejoradas. Ver por ejemplo, la Publicación de Stevenson y asociados (1989) Anti-Cancer Drug Design 3:219-230.
Otro medio potencial para modular la función efectora de los anticuerpos, incluye cambios en la glucosilación, lo cual se resume por ejemplo en la Publicación de Raju (2003) BioProcess International 1 (14) :44-53. De acuerdo con Wright y Morrison, la microheterogeneidad de los oligosacáridos IgG humanos, puede afectar las funciones biológicas tales como CDC y ADCC, enlazando a diversos receptores Fe, y enlazando a proteína C1q. (1997) TIB TECH 1_5:26-32. La glucosilación de patrones de anticuerpos puede diferir dependiendo de la producción de células y de las condiciones de cultivo celular (Raju, supra). Dichas diferencias pueden conducir a cambios en la función efectora y farmacocinéticas. Ver, por ejemplo, las Publicaciones de Israel y asociados (1996) Immunology 89(4)573-578; Newkirk y asociados (1996) Clin Exp Immunol 106(2):259-64. Las diferencias en la función efectora pueden estar relacionadas con la capacidad de IgG para enlazar a receptores Fcy (FcyRs) en las células efectoras. Shields y asociados ha mostrado que IgG, con variantes en la secuencia de aminoácido que tiene el enlace mejorado a FcyR, puede exhibir hasta el 100% de ADCC aumentado utilizando células efectoras humanas. (2001) J Biol Chem 276(91:6591 -604. Aunque estas variantes incluyen cambios en los aminoácidos no encontrados en la inferíase de enlace, tanto la naturaleza del componente de azúcar, así como su patrón estructural también pueden contribuir a diferencias observadas. Además, la presencia o ausencia de fucosa en el componente de oligosacárido de una IgG puede mejorar el enlace y ADCC. Ver, por ejemplo, la Publicación de Shields y asociados (2002) J Biol Chem 277(30) :26733-40. Un IgG que carece de un carbohidrato fucosilado enlazado a Asn297, exhibió un enlace de receptor normal para el receptor FcyRI. En contraste, el enlace al receptor FcyRIIIA fue mejorado 50 veces y estuvo acompañado por una ADCC mejorada, especialmente en concentraciones de anticuerpo menores.
Shinkawa y asociados demostró que un anticuerpo para el receptor IL-5 humano producido en un hibridoma de rata mostró más del 50% más de ADCC cuando se comparó con el anticuerpo producido en células de ovario de Hámster Chino (CHO) (Shinkawa y asociados (2003) J Biol Chem 278(51:3466-73). La composición de monosacárido y el perfilado de oligosacárido mostraron que el IgG producido por hibridoma de rata tuvo menor contenido de fucosa que la proteína producida por CHO. Los autores concluyeron que la carencia de fucosilación de un lgG1, tiene un papel crítico en el aumento de actividad ADCC.
Umana y asociados tomó un diferente método, cambiando el patrón de glucosilación de chCE7, un anticuerpo anti-neuroblastoma I gG 1 quimérico. (1999) Nat Biotechnol 17(21: 176-80). Utilizando tetracicli na, regularon la actividad de una enzima de glucosiltransferasa (GnTIII), que bisecciona los oligosacáridos que han estado implicados en la actividad ADCC. La actividad ADCC del anticuerpo de origen estuvo moderadamente arriba del nivel de fondo. La medida de la actividad ADCC del chCE7 producida en diferentes niveles de tetraciclina, mostró un rango óptimo de expresión GnTIII para una actividad ADCC in vitro chCE7 máxima. Esta actividad se correlacionó con el nivel de oligosacárido complejo biseccionado, asociado con región constante. Las variantes recientemente optimizadas exhibieron una actividad ADCC sustancial. En forma similar, Wright y Morrison produjo anticuerpos en una línea de célula CHO con deficiencia de glucosilacion, y mostró que los anticuerpos producidos en esta línea celular no tuvieron la capacidad de citolisis transmitida por complemento. (1994) J Exp Med 180:1087-1096. Por lo tanto, como se sabe las alteraciones que afectan la función efectora incluyen modificaciones en el patrón de glucosilacion o un cambio en el número de residuos glucosilados, la presente descripción se refiere a un anticuerpo CD200, en donde la glucosilacion es alterada ya sea para aumentar o disminuir la función(s) efectora, incluyendo ADCC y CDC. La glucosilacion alterada incluye una disminución o incremento en el número de residuos glucosilados, así como un cambio en el patrón o localización de residuos glucosilados.
Existen aún otros métodos para alterar la función efectora de los anticuerpos. Por ejemplo, las células que producen anticuerpo pueden ser hipermutagénicas, para generar de esta forma anticuerpos con residuos de polipéptido alterados en forma aleatoria en toda una molécula de anticuerpo. Ver por ejemplo, la Publicación PCT No. WO 05/011735. Las células huésped hipermutagénicas incluyen células con deficiencia en la reparación de desacoplamiento de ADN. Los anticuerpos producidos de esta forma pueden ser menos antigénicos y/o tener propiedades farmacocinéticas benéficas. Además, dichos anticuerpos pueden ser seleccionados para propiedades tales como función(s) efectora aumentada o disminuida.
Quedará entendido además que la función efectora puede variar de acuerdo con la afinidad de enlace del anticuerpo. Por ejemplo, los anticuerpos con alta afinidad de enlace pueden ser más eficientes para activar el sistema de complemento, en comparación con anticuerpos con afinidad relativamente menor (Marzocchi-Machado y asociados (1999) Immunol Invest 28.89-101). Por consiguiente, un anticuerpo puede ser alterado de modo que la afinidad de enlace para su antígeno sea reducida (por ejemplo, cambiado las regiones variables del anticuerpo a través de métodos tales como sustitución, adición, o eliminación de uno o más residuos de aminoácido). Un anticuerpo anti-CD200 con afinidad de enlace reducida puede exhibir funciones efectoras reducidas, incluyendo, por ejemplo, ADCC y/o CDC reducida.
Composiciones v Formulaciones Farmacéuticas Las composiciones que contienen un anticuerpo anti-CD200 pueden ser formuladas como una composición farmacéutica, por ejemplo, para administración a un humano para tratar cáncer. Las composiciones farmacéuticas generalmente incluirán un transportador farmacéuticamente aceptable. Tal como se utiliza en la presente invención, un "transportador farmacéuticamente aceptable" se refiere a, e incluye cualesquiera y todos los solventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antif úngicos, agentes de retraso de absorción e isotónicos y similares que sean fisiológicamente compatibles. Las composiciones pueden incluir una sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, una sal de adición de ácido o una sal de adición base. Ver por ejemplo, la Publicación de Berge y asociados (1977) J Pharm Sci 66: 1-19.
Las composiciones pueden ser formuladas de acuerdo con métodos estándar. La formulación farmacéutica es una técnica bien establecida, y se describe en forma adicional, por ejemplo en las Publicaciones de Gennaro (2000) "Remington: Ciencia y Práctica de Farmacia", 20° Edición, Lippincott, Williams & Wilkins (ISBN: 0683306472); Ansel y asociados (1999) "Forma de Dosificación Farmacéutica y Sistemas de Suministro de Fármaco", 7o Edición, Lippincott Williams & Wilkins Publishers (ISBN: 0683305727); y Kibbe (2000) "Manual de Excipientes Farmacéuticos de la Asociación Farmacéutica Americana", 3° Edición (ISBN: 091733096X). En algunas modalidades, una composición puede ser formulada, por ejemplo, como una solución amortiguada en una concentración adecuada, y adecuada para almacenarse a una temperatura de 2-8°C. En algunas modalidades, una composición puede ser formulada para almacenarse a una temperatura menor a 0°C (por ejemplo, -20°C o -80°C).
Las composiciones farmacéuticas pueden estar en una variedad de formas. Estas formas incluyen, por ejemplo, formas de dosificación líquida, semi-sólida y sólida, tal como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables e infusibles), dispersiones o suspensiones, tabletas, pildoras, polvos, liposomas y supositorios. La forma preferida depende en parte, del modo de administración proyectado y la aplicación terapéutica. Por ejemplo, las composiciones que contienen un anticuerpo anti-CD200 proyectadas para suministro sistémico local, pueden estar en la forma de soluciones, inyectables o infusibles. Por consiguiente, las composiciones pueden ser formuladas para administración a través de un modo parenteral (por ejemplo, inyección intravenosa, subcutánea, intraperitoneal, o intramuscular). La "administración parenteral", "administrar en forma parenteral" y otras frases gramaticalmente equivalentes, tal como aquí se utilizan, se refieren a modos de administración además de la administración enteral o tópica, normalmente mediante inyección e incluyen sin limitación, inyección e infusión, intravenosa, intranasal, infraocular, pulmonar, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardiaca, intradérmica, intrapulmonar, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoide, intraespinal, epidural, intracerebral, intracraneal, intracarótida e intraesternal (ver más adelante).
Las composiciones se pueden formular como una solución, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada, adecuada para almacenamiento estable en una alta concentración. Las soluciones inyectables estériles pueden prepararse incorporando un anticuerpo aquí descrito en la cantidad requerida en un solvente adecuado, con una o una combinación de ingredientes de los enumerados anteriormente, según se requiera, seguido de esterilización filtrada. Generalmente las dispersiones se preparan incorporando un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito en un vehículo estéril que contenga un medio de dispersión básico, y los otros ingredientes requeridos de los descritos anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación incluyen secado al vacío y secado por congelación, que produce un polvo del anticuerpo aquí descrito más cualquier ingrediente deseado adicional, de una solución filtrada estéril previamente. La fluidez adecuada de una solución, puede mantenerse, por ejemplo, a través del uso de un recubrimiento tal como lecitina, a través del mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersión, y a través del uso de tensoactivos. La absorción prolongada de composiciones inyectables puede llevarse a cabo, incluyendo en la composición un reactivo que retrase la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.
En ciertas modalidades, el anticuerpo anti-CD200 puede ser preparado con un transportador que protegerá al compuesto contra liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada, incluyendo implantes y sistemas de suministro microencapsulado. Se pueden utilizar polímeros biodegradables, biocompatibles, tal como acetato de vinilo de etileno, polianhídridos, ácido poliglucólico, colágeno, poliortoésteres, y ácido poliláctico. Muchos métodos para la preparación de dichas formulaciones son conocidos en la técnica (Ver, por ejemplo la Publicación de J.R. Robinson (1978) "Sistema de Suministro de Fármacos de Liberación Sostenida y Controlada" Marcel Dekker, Inc., Nueva York).
En algunas modalidades, un anticuerpo aquí descrito puede ser formulado en una composición adecuada para administración intrapulmonar (por ejemplo, para administración a través de nebulizador) a un mamífero, tal como un humano. Los métodos para preparar dichas composiciones son bien conocidos en la técnica, y se describen por ejemplo en la Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana No. 20080202513; Patentes Norteamericanas Nos. 7,112,341 y 6,019,968; y Publicación PCT Nos. WO 00/061178 y WO 06/122257, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia. Las formulaciones de inhalador de polvo seco y los sistemas adecuados para administración en las formulaciones se describen por ejemplo en la Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana No. 20070235029, Publicación PCT No. WO 00/69887; y Patente Norteamericana No. 5,997,848.
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede ser modificado, por ejemplo, con una porción que mejore su estabilización y/o retención en la circulación, por ejemplo, en sangre, suero u otros tejidos. La porción de estabilización puede mejorar la estabilidad, o retención del anticuerpo en al menos 1.5 (por ejemplo, al menos 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, o 50 o más) veces.
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede formularse con uno o más agentes activos adicionales útiles para tratar cáncer o disminuir un síntoma del mismo. Por ejemplo, un anticuerpo antí-CD200 puede formularse con un agente genotóxico, o un agente quimioterapéutico, o uno o más inhibidores de cinasa. El agente genotóxico o quimioterapéutico, puede ser, pero no se limita a: carboplatin, procarbazina, mecloretamina, ciclofosfamida, camptotecina, ifosfamida, melfalan, clorambucil, busulfan, nitrosurea, dactinomicina, daunorubicina, doxorubicina, bleomicina, plicomicina, mitomicina, etopósida, podof ilotoxina, taxol, satraplatino, 5-f luorouracilo, vincristina, vinblastina, metotrexato, ara-C, taxotero, gemcitabina, cisplatin (CDDP), adriamicin (ADR), o un análogo de cualesquiera de los mencionados anteriormente. Los inhibidores de cinasa incluyen, por ejemplo, uno o más de: trastuzumab, gefitinib, erlotinib, mesilato de imatinib, o malato de sunitinib. Los agentes adicionales son conocidos en la técnica y se describen en la presente invención.
Cuando el anticuerpo anti-CD200 será utilizado en combinación con un segundo agente activo, o cuando se utilizarán dos o más diferentes anticuerpos anti-CD200, los agentes pueden ser formulados por separado o juntos. Por ejemplo, las composiciones farmacéuticas respectivas, pueden ser mezcladas, por ejemplo, justo antes de la administración, y administrarse juntas o se pueden administrar por separado, por ejemplo, al mismo tiempo o en tiempos diferentes (ver más adelante) .
Tal como se describe anteriormente, se puede formular una composición de modo que incluya una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-CD200, o la composición pueda ser formulada para incluir una cantidad sub-terapéutica del anticuerpo y una cantidad sub-terapéutica de uno o más agentes activos adicionales, de modo que los componentes en total, sean terapéuticamente efectivos para tratar un cáncer. En algunas modalidades, una composición puede ser formulada para incluir dos o más anticuerpos anti-CD200, cada uno en dosis subterapéuticas, de modo que los anticuerpos en combinación estén en una concentración que sea terapéuticamente efectiva para tratar un cáncer en un humano. Los métodos para determinar una dosis terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-CD200, son conocidos en la técnica y se describen en la presente invención.
Métodos para Producir un Anticuerpo Anti-CD200 Los métodos adecuados para producir un anticuerpo anti- CD200, o fragmentos de enlace CD200 del mismo, de acuerdo con la descripción, son conocidos en la técnica (ver por ejemplo, las Patentes Norteamericanas Nos. 7,427,665; 7,435,412; y 7,408,041, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia) y aquí se describen. Por ejemplo, los anticuerpos anti-CD200 monoclonales pueden ser generados utilizando células que expresan CD200 humano, un polipéptido CD200 humano, o un fragmento antigénico de un polipéptido CD200 humano como un inmunogen, para elevar de esta forma una respuesta inmune en animales de los cuales se puede aislar las células que producen anticuerpos, y a su vez, anticuerpos monoclonales. La secuencia de dichos anticuerpos puede ser determinada, y los anticuerpos o variantes de los mismos producidos mediante técnicas recombinantes. Las técnicas recombinantes pueden ser utilizadas para producir anticuerpos quiméricos, injertados con CDR, humanizados o completamente humanos, basados en la secuencia de los anticuerpos monoclonales, así como polipéptidos con la capacidad de enlazar a CD200 o un fragmento de los mismos.
Además, los anticuerpos derivados de bibliotecas recombinantes ("anticuerpos de fago") pueden seleccionarse utilizando células que expresan CD200, o polipéptidos derivados de los mismos, como cebo para aislar los anticuerpos o polipéptidos sobre las bases de la especificidad objetivo. La producción y aislamiento de anticuerpos anti-CD200 no humanos y quiméricos están dentro de los conocimientos de los expertos en la técnica.
Se puede utilizar tecnología de ADN recombinante, para modificar una o más características de los anticuerpos producidos en las células no humanas. Por lo tanto, se pueden construir anticuerpos quiméricos con el objeto de disminuir la inmunogenicidad de los mismos en aplicaciones de diagnóstico o terapéuticas. Además, se puede minimizar la inmunogenicidad, humanizando los anticuerpos mediante injerto CDR y, opcionalmente, modificación de estructura. Ver las Patentes Norteamericanas Nos. 5,225,539 y 7,393,648, cuyos contenidos totales están incorporados a la presente invención como referencia.
Los anticuerpos se pueden obtener suero animal o, en el caso de anticuerpos monoclonales o fragmentos de los mismos, producirse en cultivo celular. Se puede utilizar tecnología de ADN recombinante para producir los anticuerpos de acuerdo con el procedimiento establecido, incluyendo procedimientos en cultivo de células bacterianas, o preferentemente de mamífero.
El sistema de cultivo de célula seleccionada, secreta preferentemente el producto de anticuerpo.
En otra modalidad, un proceso para la producción de un anticuerpo aquí descrito incluye cultivar un huésped, por ejemplo, E. coli o una célula de mamífero, que ha sido transformada con un vector híbrido. El vector incluye uno o más cartuchos de expresión que contienen un promotor enlazado en forma operable a una primera secuencia de ADN que codifica un péptido de señal enlazado en el cuadro de lectura adecuado a una segunda secuencia de ADN que codifica la proteína de anticuerpo. La proteína de anticuerpo posteriormente se recolecta y aisla. Opcionalmente, el cartucho de expresión puede incluir un promotor enlazado en forma operable a una secuencia de ADN policistrónica (por ejemplo, bicistronica) que codifica las proteínas de anticuerpo, cada una enlazadas individualmente de manera operable a un péptido de señal en el cuadro de lectura adecuado.
La multiplicación de célula de hibridoma o células huésped de mamífero in vitro se lleva a cabo en un medio de cultivo adecuado, que incluye el medio de cultivo estándar acostumbrado (tal como, por ejemplo Medio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) o medio RPMI 1640), rellenado opcionalmente con suero de mamífero (por ejemplo, suero de becerro fetal), o elementos residuales y suplementos que sostienen el crecimiento (por ejemplo, células alimentadoras tales como células de exudado peritoneal de ratón normal, células de bazo, macrófagos de médula ósea, 2-aminoetanol, insulina, transferina, lipoproteína de baja densidad, ácido oleico y similares). La multiplicación de las células huésped que son células bacterianas o células de levadura, se lleva a cabo de igual manera en un medio de cultivo adecuado conocido en la técnica. Por ejemplo, para bacterias, el medio de cultivo adecuado incluye medio LE, NZCYM, NZYM, NZM, Terrific Brot, SOB, SOC, 2 xYT, o Medio Mínimo M9. Para levadura, el medio de cultivo adecuado incluye medio YPD, YEPD, Medio Mínimo, o un Medio de Goteo Mínimo Completo.
La producción in vitro proporciona preparaciones de anticuerpo relativamente puras y permite una producción de escala hacia arriba para proporcionar mayores cantidades de anticuerpos deseados. Las técnicas para cultivo de célula bacteriana, levadura, planta o células de mamífero son conocidas en la técnica, e incluyen cultivo de suspensión homogénea (por ejemplo, en un reactor de elevación de aire o en un reactor de agitador continuo), y cultivo de célula inmovilizada o atrapada (por ejemplo, en fibras huecas, microcápsulas o microcuentas de agarosa o cartuchos de cerámica).
También se pueden obtener grandes cantidades de anticuerpos deseados, multiplicando células de mamífero in vivo. Para este propósito, se inyectan células de hibridoma que producen los anticuerpos deseados en mamíferos histocompatibles para originar el crecimiento de tumores que producen anticuerpos. Opcionalmente, los animales son imprimados con un hidrocarburo, especialmente aceites minerales tales como pristano (tetrametil-pentadecano) , antes de la inyección. Después de una a tres semanas, los anticuerpos son aislados de los fluidos corporales de dichos mamíferos. Por ejemplo, las células de hibridoma obtenidas mediante fusión de células de mieloma adecuadas con células de bazo que producen anticuerpos de ratones Balb/c, o células transf ectadas derivadas de la línea de célula de hibridoma Sp2/0 que producen los anticuerpos deseados son inyectadas en forma intraperitoneal en ratones Balb/c tratados previamente en forma opcional con pristano. Después de una a dos semanas, se toma el fluido ascítico de los animales.
La anterior, y otras técnicas, se describen por ejemplo en la Publicación de Kohler y Milstein, (1975) Nature 256:495-497; Patente Norteamericana No. 4,376,110; Harlow y Lañe, Anticuerpos: Manual de Laboratorio, (1988) Cold Spring Harbor, cuyas descripciones están incorporadas a la presente invención como referencia. Las técnicas para la preparación de moléculas de anticuerpo recombinantes se describen en las referencias anteriores y también, por ejemplo en: WO97/08320; Patente Norteamericana No. 5,427,908; Patente Norteamericana No. 5,508,717; Smit (1985) Science 225: 1315-1317; Parmley y Smit (1988) Gene 73_:305-318; De La Cruz y asociados (1988) J Biol Chem 263:4318-4322; Patente Norteamericana No. 5,403,484; Patente Norteamericana No. 5,223,409; WO88/06630; W092/15679; Patente Norteamericana No. 5,780,279; Patente Norteamericana No. 5,571,698; Patente Norteamericana No. 6,040,136; Davis y asociados (1999) Cáncer Metástasis Rev 1_8_(4l:421-5; y Taylor y asociados (1992) Nucleic Acids Res 20: 6287-6295; Tomizuka y asociados (2000) Proc Nati Acad Sci USA 97(2) : 722-727, cuyos contenidos están incorporados en su totalidad a la presente invención como referencia.
Los sobrenadantes de célula de cultivo se clasifican para los anticuerpos deseados, preferentemente mediante manchado inmunofluorescente de células que expresan CD200, mediante inmunomanchado, mediante inmunoensayo de enzimas, por ejemplo, un ensayo de emparedado o un ensayo de punto o radioinmunoensayo.
Para aislamiento, los anticuerpos, las inmunoglobulinas en los sobrenadantes de cultivo, o en el fluido ascítico pueden estar concentradas, por ejemplo, mediante precipitación con sulfato de amonio, diálisis contra material higroscópico, tal como polietilenglicol, filtración a través de membranas selectivas o similares. Si es necesario y/o deseado, los anticuerpos son purificados a través de métodos de cromatografía acostumbrados, por ejemplo, filtración de gel, cromatografía de intercambio de iones, cromatografía sobre celulosa-DEAE y/o cromatografía por (inmuno-) afinidad, por ejemplo, cromatografía por afinidad con uno o más polipéptidos de superficie derivados de una línea de célula que expresa CD200 o péptidos de fragmento CD200 sintéticos o con proteína A o -G.
Otra modalidad proporciona un proceso para la preparación de una línea de célula bacteriana que secreta anticuerpos dirigidos contra una proteína CD200 humana en un mamífero adecuado. Por ejemplo, se inmuniza un conejo con muestras reunidas de tejido o células que expresan CD200 o polipéptido CD200 o fragmentos de los mismos. Una biblioteca de despliegue de fago es producida de ratón inmunizado se construye y se lava con batea para los anticuerpos deseados de acuerdo con métodos conocidos en la técnica (tal como, por ejemplo, los métodos descritos en la diversas referencias aquí incorporadas como referencia).
Las células de hibridoma que secretan los anticuerpos monoclonales también son descritas. Las células de hibridoma preferidas son genéticamente estables, secretan anticuerpos monoclonales, aquí descritos de la especificidad deseada, y pueden ser expandidas de los cultivos congelados-profundos, mediante descongelación y propagación in vitro o como ascitos ¡n vivo.
En otra modalidad, se proporciona un proceso para la preparación de una línea de célula de hibridoma que secreta anticuerpos monoclonales contra proteína CD200 humana. En este proceso, un mamífero adecuado, por ejemplo un ratón Balb/c, es inmunizado con uno o más polipóptidos o fragmentos antigénicos de CD200 o con uno o más polipéptidos o fragmentos antigénicos derivados de una célula que expresa CD200, la propia célula que expresa CD200 o un transportador antigénico que contiene un polipéptido purificado tal como se describe. Las células que producen anticuerpos del mamífero inmunizado se crecen en forma breve en un cultivo, o se fusionan con células de una línea de célula de mieloma adecuada. Las células híbridas obtenidas en la fusión son clonadas, y los clones celulares que secretan los anticuerpos deseados, son seleccionados. Por ejemplo, las células de bazo de ratones Balb/c inmunizados con un fragmento de proteína de CD200 humana, se fusionan con células de la línea de célula de mieloma PAI o la línea de célula de mieloma Sp2/0-Ag 14. Posteriormente las células híbridas obtenidas son clasificadas para secreción de los anticuerpos deseados y se clonan las células de hibridoma positivas.
Los métodos para preparar una línea de célula de hibridoma incluyen inmunizar ratones Balb/c inyectando en forma subcutánea y/o intraperitoneal un fragmento de péptido de CD200 humano varias veces, por ejemplo, cuatro a seis veces, durante varios meses, por ejemplo, entre dos y cuatro meses. Las células de bazo de los ratones inmunizados se toman de dos a cuatro días después de la última inyección y se fusionan con células de la línea de célula de mieloma PAI en la presencia de un promotor de fusión, preferentemente polietilenglicol. Preferentemente, las células de mieloma se fusionan con un exceso de treinta a veinte veces de las células de bazo de los ratones inmunizados en una solución que contiene aproximadamente 30% hasta aproximadamente 50% de polietilenglicol de un peso molecular de alrededor de 4000. Después de la fusión, las células se expanden en un medio de cultivo adecuado tal como se describe supra suplementado con un medio de selección, por ejemplo un medio HAT, en intervalos regulares con el objeto de prevenir que las células de mieloma normales sobre crezcan las células de hibridoma deseadas.
Los anticuerpos y fragmentos de los mismos pueden ser "quiméricos". Los anticuerpos quiméricos y los fragmentos de enlace de antígeno del mismo comprenden partes de dos o más diferentes especies (por ejemplo, ratón y humano). Los anticuerpos quiméricos pueden producirse con regiones variables de ratón de especificidad deseada divididos en segmentos de gen de dominio constante humano (por ejemplo, Patente Norteamericana No. 4,816,567). En esta forma, se pueden modificar anticuerpos no humanos para hacerlos más adecuados para aplicación clínica humana (por ejemplo, métodos para tratar o prevenir un cáncer en un sujeto humano).
Los anticuerpos monoclonales de la presente descripción incluyen formas "humanizadas" de los anticuerpos no humanos (por ejemplo, ratones). Los mAbs humanizados o con injerto CDR son particularmente útiles como agentes terapéuticos para humanos, debido a que no se despejan de la circulación en forma tan rápida como los anticuerpos de ratón, y normalmente no provocan una reacción inmune adversa. Generalmente, un anticuerpo humanizado tiene uno o más residuos de aminoácido introducidos en el mismo procedentes de una fuente no humana. Estos residuos de aminoácido no humanos con frecuencia son referidos como residuos "de importación", los cuales normalmente se toman de un dominio variable de "importación". Los métodos para preparar anticuerpos humanizados generalmente son conocidos en la técnica. Por ejemplo, la humanización se puede llevar a cabo esencialmente después del método de Winter y colaboradores (ver, por ejemplo, las Publicaciones de Jones y asociados (1986) Nature 321 :522-525; Riechmann y asociados (1988) Nature 332:323-327: y Verhoeyen y asociados (1988) Science 239:1534-1536). sustituyendo CDRs o secuencias CDR de roedor por las secuencias correspondientes de un anticuerpo humano. Ver también por ejemplo la Publicación de Staelens y asociados (2006) Mol Immunol 43: 1243-1257. En algunas modalidades, las formas humanizadas de anticuerpos no humano (por ejemplo, ratón) son anticuerpos humanos (anticuerpo receptor) en donde los residuos de región hipervariable (CDR) del anticuerpo receptor son reemplazados por residuos de región hipervariable de una especie no humana (anticuerpo donante) tal como ratón, rata, conejo, o primate no humano que tiene la especificidad, afinidad y capacidad de enlace deseada. En algunos casos, los residuos de región de estructura de la inmunoglobulina humana también son reemplazados por residuos no humanos correspondientes (llamados "retromutaciones"). Además, se pueden utilizar bibliotecas de despliegue de fago para variar los aminoácidos en las posiciones elegidas dentro de la secuencia de anticuerpo. Las propiedades de un anticuerpo humanizado también se ven afectadas por la elección de la estructura humana.
Además, los anticuerpos humanizados y quimerizados pueden ser modificados para comprender residuos que no se encuentran en el anticuerpo receptor, o en el anticuerpo donante, con el objeto de mejorar las propiedades del anticuerpo, tales como, por ejemplo, afinidad o función efectora.
Los anticuerpos completamente humanos también se proporcionan en la presente invención. El término "anticuerpo humano" incluye anticuerpos que tienen regiones variables y constantes (si están presentes), derivadas de secuencias de inmunoglobulina de línea germinal humana. Los anticuerpos humanos pueden incluir residuos de aminoácido no codificados por secuencias de inmunoglobulina de línea germinal humana (por ejemplo, mutaciones introducidas mediante mutagénesis aleatoria o específica del sitio in vitro o mediante mutación somática in vivo). Sin embargo, el término "anticuerpo humano" no incluye anticuerpos en los cuales se han injertado secuencias CDR derivadas de la línea germinal de otras especies de mamífero, tal como ratón, en las secuencias de estructura humana (por ejemplo anticuerpos humanizados). Los anticuerpos humanos o completamente humanos se pueden derivar de ratones transgénicos que llevan los genes de anticuerpo (que llevan los exones variables (V), de diversidad (D), de unión (J), y constante (C)) o de células humanas. Por ejemplo, ahora es posible producir animales transgénicos (por ejemplo, ratones) que tengan la capacidad, al momento de la inmunización, de producir un repertorio completo de anticuerpos humanos en la ausencia de una producción de inmunoglobulina endógena. Ver por ejemplo, las Publicaciones de Jakobovits y asociados (1993) Proc Nati Acad Sci USA 90.:2551; Jakobovits y asociados (1993) Nature 362:255-258; Bruggemann y asociados (1993) Year in Immunol 7:33; y Duchosal y asociados (1992) Nature 355:258. Las cepas de ratón transgénico se pueden construir para contener secuencias de gen de genes de inmunoglobulina humana no reajustados. Las secuencias humanas pueden codificar tanto para cadenas pesadas como ligeras de anticuerpos humanos, y pueden funcionar correctamente en los ratones, que pasan por reajuste para proporcionar un amplio repertorio de anticuerpos similar al de humanos. Los ratones transgénicos pueden ser inmunizados con la proteína objetivo (por ejemplo, una proteína CD200 humana, fragmentos de la misma, o células que expresan la proteína CD200) para crear una formación diversa de anticuerpos específicos y su ARN de codificación. Los ácidos nucleicos que codifican los componentes de cadena de anticuerpo de dichos anticuerpos, posteriormente se pueden clonar del animal en un vector de despliegue. Normalmente, las poblaciones separadas de ácidos nucleicos que codifican secuencias de cadena pesada y ligera son clonadas, y posteriormente las poblaciones separadas son recombinadas en inserción en el vector, de modo que cualquier copia determinada del vector reciba una combinación aleatoria de una cadena pesada y una cadena ligera. El vector está diseñado para expresar cadenas de anticuerpo de modo que puedan ser ensambladas y mostradas en la superficie externa de un paquete de despliegue que contiene el vector. Por ejemplo, las cadenas de anticuerpo pueden ser expresadas como proteínas de fusión con una proteína de recubrimiento de fago de la superficie externa del fago. Posteriormente, se pueden clasificar paquetes de despliegue para el despliegue de anticuerpos que enlazan a un objetivo.
Además, los anticuerpos humanos se pueden derivar de bibliotecas de despliegue de fago (Hoogenboom y asociados (1991) J Mol Biol 227:381; Marks y asociados (1991) J Mol Biol 222.:581 -597; y Vaughan y asociados (1996) Nature Biotech 1_4:309 (1996)). Se pueden crear bibliotecas de fago sintéticas que utilizan combinaciones aleatorizadas de regiones V de anticuerpo humano sintético. Mediante selección en el antígeno, se pueden elaborar anticuerpos completamente humanos en donde las regiones V tienen una naturaleza muy parecida al humano. Ver por ejemplo, las Patentes Norteamericanas Nos. 6,794,132, 6,680,209, 4,634,666, y la Publicación de Ostberg y asociados (1983) Hybridoma 2:361-367, cuyos contenidos están incorporados en su totalidad a la presente invención como referencia.
Para la generación de anticuerpos humanos, ver también la Publicación de Méndez y asociados (1998) Nature Genetics 15:146-156, y Green y Jakobovits (1998) J Exp Med 188:483-495, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia. Los anticuerpos humanos se describen y se indican en forma adicional en las Patentes Norteamericanas Nos.: 5,939,598; 6,673,986; 6,114,598; 6,075,181; 6,162,963; 6,150,584; 6,713,610; y 6,657,103 así como las Publicaciones de Solicitud de Patente Norteamericana Nos. 20030229905 A1, 20040010810 A1, 20040093622 A1 , 20060040363 A1 , 20050054055 A1 , 20050076395 A1, y 20050287630 A1. Ver también las Solicitudes de Patente Internacional Nos. WO 94/02602, WO 96/34096, y WO 98/24893, y la Patente Europea No. EP 0 463 151 B1. Las descripciones de cada una de las patentes, solicitudes y referencias antes mencionadas están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia.
En un método alternativo, otros, incluyendo GenPharm International, Inc., han utilizado un método de "minilocus". En el método de minilocus, un locus Ig exógeno es mimetizado a través de la inclusión de piezas (genes individuales) del locus Ig. Por lo tanto, se forman uno o más genes VH, uno o más genes DH, uno o más genes JH, una región constante mu, y una segunda región constante (preferentemente una región constante gamma) en una construcción para una inserción en un animal. Este método se describe por ejemplo en las Patentes Norteamericanas Nos.: 5,545,807; 5,545,806; 5,625,825; 5,625,126; 5,633,425; 5,661,016; 5,770,429; 5,789,650; 5,814,318; 5,591,669; 5,612,205; 5,721,367; 5,789,215; 5,643,763; 5,569,825; 5,877,397; 6,300,129; 5,874,299; 6,255,458; y 7,041,871, cuyas descripciones están incorporadas a la presente invención como referencia. Ver también la Patente Europea No. 0 546 073 B1, las Publicaciones de Solicitud de Patente International Nos. WO 92/03918, WO 92/22645, WO 92/22647, WO 92/22670, WO 93/12227, WO 94/00569, WO 94/25585, WO 96/14436, WO 97/13852, y WO 98/24884, cuya descripción está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia. Ver además las Publicaciones de Taylor y asociados (1992) Nucleic Acids Res 20: 6287; Chen y asociados (1993) Int Immunol 5: 647; Tuaillon y asociados (1993) Proc Nati Acad Sci USA 90.: 3720-4; Choi y asociados (1993) Nature Genetics 4: 117; Lonberg y asociados (1994) Nature 368:856-859; Taylor y asociados (1994) International Immunology 6: 579-591; Tuaillon y asociados (1995) J. Immunol. 154: 6453-65; Fishwild y asociados (1996) Nature Biotechnology 1_4:845; y Tuaillon y asociados (2000) Eur J Immunol 1_0: 2998-3005, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia.
En ciertas modalidades, se proporcionan anticuerpos anti-CD200 des-ínmunizados o fragmentos de enlace de antígenos de los mismos. Los anticuerpos des-inmunizados o los fragmentos de enlace de antígenos de los mismos son los modificados para convertir al anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo en no inmunogénico, o menos inmunogénico para una especie determinada. Se puede lograr la des-inmunización, modificando el anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo utilizando cualesquiera variedad de una variedad de técnicas conocidas para los expertos en la técnica (ver, por ejemplo, las Publicaciones PCT Nos. WO 04/108158 y WO 00/34317). Por ejemplo, un anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo puede ser des- inmunizado, identificando epítopes de célula T y/o epítopes de célula B potenciales dentro de la secuencia de aminoácido del anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo y eliminando uno o más de los epítopes de célula T y/o epítopes de célula B potenciales del anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo, por ejemplo, utilizando técnicas recombinantes. El anticuerpo modificado o fragmento de enlace de antígeno del mismo, posteriormente puede ser producido de manera opcional y probado para identificar anticuerpos o fragmentos de enlace de antígeno del mismo, que han retenido una o más actividades biológicas deseadas, tales como, por ejemplo, afinidad de enlace, pero que tienen ¡nmunogenicidad reducida. Los métodos para identificar epítopes de célula T y/o epítopes de célula B potenciales, se pueden utilizar llevando técnicas conocidas en el arte, tal como, por ejemplo, métodos de cómputo (por ejemplo, Publicación PCT No. WO 02/069232), técnicas in vitro o in silico, y ensayos biológicos o métodos físicos (tal como, por ejemplo, determinación del enlace de péptidos a moléculas MHC, determinación del enlace de complejos de péptido:MHC a receptores de célula T de las especies para recibir el anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo, pruebas de la proteína o partes de péptido de los mismos utilizando animales transgénicos o moléculas MHC de las especies para recibir el anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo, o pruebas con animales transgénicos reconstituidos con células del sistema inmune de la especie para recibir el anticuerpo o fragmento de enlace de antígeno del mismo, etc.). En varias modalidades, los anticuerpos anti-CD200 des-inmunizados aquí descritos, incluyen fragmentos de enlace de antígeno des-inmunizados, Fab, Fv, scFv, Fab' y F(ab')2, anticuerpos monoclonales, anticuerpos de múrido, anticuerpos construidos (tal como, por ejemplo, anticuerpos quiméricos, de cadena simple, injertados con CDR, humanizados o completamente humanos, anticuerpos seleccionados en forma artificial), anticuerpos sintéticos y anticuerpos semi-sintéticos.
En algunas modalidades, se produce un ADN recombinante que comprende un inserto que codifica para un dominio variable de cadena pesada y/o para un dominio variable de cadena ligera de un anticuerpo anti-CD200 o una línea de célula que expresa una proteína CD200. El término ADN incluye ADNs de codificación de hebra simple, ADNs de hebra doble que consiste en los ADNs de codificación y de ADNs complementarios de los mismos, o estos ADNs complementarios (hebra simple) por sí mismos.
Además, un ADN que codifica un dominio variable de cadena pesada y/o un dominio variable de cadena ligera de anticuerpos anti-CD200, o la línea de célula que expresa CD200, se pueden sintetizar en forma enzimática o química para contener la secuencia de ADN auténtica que codifica para un dominio variable de cadena pesada y/o para el dominio variable de cadena ligera, o un muíante del mismo. Un mutante del ADN auténtico es un ADN que codifica un dominio variable de cadena pesada y/o dominio variable de cadena ligera de los anticuerpos antes mencionados, en los cuales se eliminan, insertan o intercambian uno o más aminoácidos con uno o más de otros aminoácidos. Preferentemente, dicha modificación(s) está fuera de las CDRs del dominio variable de cadena pesada y/o el dominio variable de cadena ligera del anticuerpo en aplicaciones de optimización de humanización y expresión. El término ADN mutante, también abarca mutantes silentes, en donde uno o más nucleótidos son reemplazados por otros nucleótidos con los nuevos codones que codifican para el mismo aminoácido(s) . El término secuencia mutante, también incluye una secuencia de degeneración. Las secuencias de degeneración son degeneradas dentro del significado del código genético, en cuanto a que se reemplaza un número no limitado de nucleótidos por otros nucleótidos sin dar como resultado un cambio de la secuencia de aminoácido originalmente codificada. Dichas secuencias de degeneración pueden ser útiles debido a sus diferentes sitios de restricción y/o frecuencia de codones particulares que son preferidos por el huésped específico, particularmente E. coli, para obtener una expresión óptima del dominio variable del múrido de cadena pesada y/o dominio variable de múrido de cadena ligera.
El término muíante pretende incluir un ADN muíante obtenido medianíe muíagénesis in vitro del ADN aulénlico de acuerdo con méíodos conocidos en la íécnica.
Para el ensamble de moléculas de inmunoglobulina tetraméricas compleías y la expresión de aníicuerpos quiméricos, los inserios de ADN recombinaníe que codifican para dominios variable de cadena pesada y cadena ligera se fusionan con los ADNs correspondieníes que purifican para dominios conslantes de cadena pesada y ligera, posleriormeníe se íransfieren a células huésped adecuadas, por ejemplo, después de incorporación en vecíores híbridos.
Se pueden uíilizar ADNs recom bi nantes que incluyen un inserto que codifica para un dominio variable de múrido de cadena pesada de un anticuerpo anti-CD200 o una línea de célula que expresa CD200 fusionada a un dominio IgG constaníe humano, por ejemplo ? 1 , ?2, ?3 o y4, en modalidades parliculares, ?1 o ?4. También se proporcionan ADNs recombinantes que incluyen un inserto que codifican para un dominio variable de múrido de cadena ligera de un anticuerpo fusionado a un dominio constante humano ? o A, preferentemente ?.
Otra modalidad pertenece a ADNs recombinantes que codifican para un polipéptido recombinaníe, en donde el dominio variable de cadena pesada y el dominio variable de cadena ligera se enlazan por medio de un grupo espaciador, que comprende opcionalmente una secuencia de señal que facilita el procesamiento del anticuerpo en la célula huésped y/o una secuencia de ADN que codifica un péptido que facilita la purificación del anticuerpo y/o el sitio de disociación y/o el espaciador de péptido y/o agente. El ADN que codifica para un agente, está proyectado para ser un ADN que codifica para el agente útil en aplicaciones de diagnóstico o terapéuticas. Por lo tanto, las moléculas agentes que son toxinas o enzimas, especialmente enzimas con la capacidad de catalizar la activación de profármacos, están particularmente indicadas. El ADN que codifica dicho agente, tiene la secuencia de una enzima o toxina que ocurre naturalmente que codifica el ADN, o muíante del mismo, y puede prepararse a través de métodos conocidos en la técnica.
Por consiguiente, los anticuerpos monoclonales o fragmentos de enlace de antígeno de la presente descripción, pueden ser anticuerpos desprotegidos o fragmentos de enlace de antígeno que no están conjugados para otros agentes, por ejemplo, un agente terapéutico o etiqueta detectable. Como alternativa, el anticuerpo monoclonal o fragmento de enlace de antígeno puede conjugarse para un agente tal como, por ejemplo, un agente citotóxico, una molécula pequeña, una hormona, una enzima, un factor de crecimiento, una citocina, una ribozima, un peptidomimético, un químico, un profármaco, una molécula de ácido nucleico, que incluye secuencias de codificación (tal como construcciones antisentido ARNi, de dirección de gen, etc.). o etiqueta detectable (por ejemplo, un agente de contraste RMN o de rayos X, molécula fluorescente, etc). En ciertas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 o fragmento de enlace de antígeno (por ejemplo, Fab, Fv, scFv de cadena simple, Fab', y F(ab')2) se enlaza a una molécula que incrementa la vida media del anticuerpo o fragmento de enlace de antígenos (ver anteriormente).
Están disponibles diversos sistemas de vector posibles para la expresión de los genes de cadena pesada y cadena ligera clonados en células de mamífero. Una clase de vectores depende de la integración de las secuencias de gen deseadas en el genoma de célula huésped. Las células que tienen un ADN integrado en forma estable, se pueden seleccionar mediante introducción simultánea de genes de resistencia a fármacos tales como E. coli gpt (Mulligan y Berg (1981) Proc Nati Acad Sci USA, 78:2072-2076) o Tn5 neo (Soutern y Berg (1982) J Mol Appl Genet 1_:327-341). El gen marcador seleccionable puede ser ya sea enlazado a las secuencias de gen de ADN que serán expresadas, o introducido en la misma célula mediante co-transfección (Wigler y asociados (1979) Cell 1_6:777-785). Una segunda clase de vectores utiliza elementos de ADN que confiere capacidad de réplica autónoma a un plásmido extracromosomal. Estos vectores pueden ser derivados de viruses animales, tal como papilomavirus de bovino (Sarver y asociados (1982) Proc Nati Acad Sci USA, 79_:7147-7151 ) , virus de polioma (Deans y asociados (1984J Proc Nati Acad Sci USA 81_: 1292-1296), o virus SV40 (Lusky y Botchan (1981) Nature 293:79-81).
Ya que un cADN de inmunoglobulina está comprendido únicamente de secuencias que representan el mARN maduro que codifica una proteína de anticuerpo, se requieren elementos de expresión de gen adicionales que regulan la transcripción del gen y el procesamiento del ARN para la síntesis del mARN de inmunoglobulina. Estos elementos pueden incluir señales de división, promotores de transcripción incluyendo promotores inducibles, aumentadores y señales de terminación. Los vectores de expresión de cADN que incorporan dichos elementos incluyen los descritos por Okayama y Berg (1983) Mol Cell Biol 3:280-289; Cepko y asociados (1984) Cell 37: 1053-1062; y Kaufman (1985) Proc Nati Acad Sci USA 82:689-693.
Tal como es evidente a partir de la descripción, los anticuerpos anti-CD200 pueden ser utilizados en terapias (por ejemplo, terapias para tratar un cáncer), incluyendo terapias de combinación, así como en el monitoreo del progreso de la enfermedad.
En las modalidades terapéuticas de la presente descripción, se contemplan anticuerpos biespecíficos. Los anticuerpos biespecíficos son monoclonales, preferentemente anticuerpos humanos o humanizados que tienen especificidades de enlace para al menos dos diferentes antígenos. En este caso, una de las especificidades de enlace es para el antígeno CD200 en una célula (tal como, por ejemplo, una célula inmune), el otro es para cualquier otro antígeno, y preferentemente para una proteína o receptor, o sub-unidad de receptor de superficie celular.
Los métodos para elaborar anticuerpos biespecíf icos están dentro de las habilidades de los expertos en la técnica. Tradicionalmente, la producción recombinante de anticuerpos biespecíf icos está basada en la co-expresión de dos pares de cadena pesada puede ser inmunoglobulina, en donde dos cadenas tienen diferentes especificidades (Milstein y Cuello (1983) Nature 305:537-539). Los dominios variables de anticuerpo con las especificidades de enlace deseadas (sitios de combinación de anticuerpo-antígeno) pueden fusionarse a secuencias de dominio constante de inmunoglobulina. La fusión está preferentemente con un dominio constante de cadena pesada inmunoglobulina, incluyendo al menos parte de la articulación, regiones CH2, y CH3. Los ADNs que codifican las fusiones de cadena pesada de inmunoglobulina, y si se desea, la cadena ligera de inmunoglobulina, se insertan en vectores de expresión separados, y se transfectan en conjunto en un organismo huésped adecuado. Para detalles adicionales de métodos actualmente conocidos ilustrativos para generar anticuerpos biespecíf icos consultar por ejemplo las Publicaciones de Suresh y asociados (1986) Metods Enzymol 121 :210-228: Publicación PCT No. WO 96/27011; Brennan y asociados (1985) Science 229:81 -83: Shalaby y asociados J Exp Med (1992) 175:217-225: Kostelny y asociados (1992) J Immunol 148(5): 1547- 1553; Hollinger y asociados (1993) Proc Nati Acad Sci USA 90.:6444-6448; Gruber y asociados (1994) J Immunol 52:5368-5474: y Tutt y asociados (1991) J Immunol 147:60-69. Los anticuerpos biespecíf icos también incluyen anticuerpos reticulados por heteroconjugado. Los anticuerpos de heteroconjugado pueden elaborarse utilizando cualesquiera métodos de reticulación convenientes. Los agentes de reticulación adecuados son conocidos en la técnica, y se describen en la Patente Norteamericana No. 4,676,980, junto con un número de técnicas de reticulación.
También se han descrito varias técnicas para elaborar y aislar fragmentos de anticuerpo biespecíf icos, directamente de un cultivo de célula recombinante. Por ejemplo, se han producido anticuerpos biespecíficos utilizando cierres de leucina. Ver por ejemplo la Publicación de Kostelny y asociados (1992) J Immunol 148(5): 1547-1553. Los péptidos de cierre de leucina de las proteínas Fos y Jun pueden enlazarse a las porciones Fab' de los diferentes anticuerpos mediante fusión de gen. Los homodímeros de anticuerpo pueden ser reducidos en la región de articulación para formar monómeros y posteriormente volverse a oxidar para formar los heterodímeros del anticuerpo. Este método puede ser utilizado para la producción de homodímeros de anticuerpo. La tecnología de "diacuerpo" descrita por Hollinger y asociados (1993) Proc Nati Acad Sci USA 9_0.:6444-6448 ha proporcionado un mecanismo alternativo para elaborar fragmentos de anticuerpo biespecíf icos. Los fragmentos comprenden un dominio variable de cadena pesada (VH) conectado a un dominio variable de cadena ligera (VL) a través de un enlazador el cual es demasiado corto para permitir el emparejamiento entre los dos dominios en la misma cadena. Por consiguiente, los dominios VH y VL de un fragmento son forzados a emparejarse con los dominios VL y VH complementarios del otro fragmento, para formar de esta manera dos sitios de enlace de antígeno. Otra estrategia para elaborar fragmentos de anticuerpo biespecíficos a través del uso de dímeros de Fv cadena simple (scFv) también ha sido reportada. Ver por ejemplo la Publicación de Gruber y asociados (1994) J Immunol 152:5368-5374. Como alternativa, los anticuerpos pueden ser "anticuerpos lineales" tal como se describe por ejemplo, en la Publicación de Zapata y asociados (1995) Protein Eng 8(10): 1057- 1062. En síntesis, estos anticuerpos comprenden un par de segmentos Fd tándem (VH-CH1 -VH-CH1 ) que forman un par de regiones de enlace de antígeno. Los anticuerpos lineales pueden ser biespecíficos o monoespecíficos.
La descripción también abarca varias formas de anticuerpos biespecíficos, tal como las moléculas de inmunoglobulina de dominio variable, duales, tetravalentes (DVD-lg) descritas en la Publicación de Wu y asociados (2007) Nat Biotechnol 25.(11): 1290-1297. Las moléculas DVD-lg están diseñadas de modo que se enlacen en tándem directamente o a través de un enlazador corto mediante técnicas de ADN recombinante, seguido por el dominio constante de cadena ligera, dos diferentes dominios variables de cadena ligera (VL) de dos diferentes anticuerpos de origen. Los métodos para generar moléculas DVD-lg de dos anticuerpos de origen se describen en forma adicional por ejemplo en las Publicaciones PCT Nos. WO 08/024188 y WO 07/024715, cuyas descripciones están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia.
En algunas modalidades, los anticuerpos anti-CD200 pueden ser modificados, por ejemplo, con una porción que mejora la estabilización y/o retención de los propios anticuerpos en la circulación, por ejemplo, en sangre, suero u otros tejidos. Por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito puede ser PEGilado tal como se describe por ejemplo, en las Publicaciones de Lee y asociados (1999) Bioconjug Chem 10(6): 973-8; Kinstler y asociados (2002) Advanced Drug Deliveries Reviews 5_4:477-485; y Roberts y asociados (2002) Advanced Drug Delivery Reviews 5_4:459-476. La porción de estabilización puede mejorar la estabilidad o retención, del anticuerpo en el cuerpo de un sujeto (por ejemplo, sangre o tejido) en al menos 1.5 (por ejemplo, al menos 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, o 50 o más) veces.
Muestras Biológicas v Recolección de Muestras Las muestras biológicas adecuadas para utilizarse en los métodos aquí descritos incluyen cualquier fluido biológico, población de células, o tejido o fracción del mismo, que incluye a uno o más glóbulos blancos y/o uno o más glóbulos rojos. Una muestra biológica, puede ser por ejemplo, un espécimen obtenido de un sujeto (por ejemplo, un mamífero tal como un humano) o puede derivarse de dicho sujeto. Por ejemplo, una muestra puede ser una sección de tejido obtenida mediante biopsia, o células que se colocan en o se adaptan al cultivo de tejido. Una muestra biológica también puede ser un fluido biológico tal como orina, sangre completa, o una fracción de la misma (por ejemplo, plasma), saliva, semen, esputo, fluido cerebro espinal, lágrimas o moco. Una muestra biológica puede ser fraccionada en forma adicional, si se desea, para una fracción que contiene tipos de células particulares. Por ejemplo, una muestra de sangre completa puede ser fraccionada en suero o en fracciones que contienen tipos particulares de célula de sangre tal como glóbulos rojos o glóbulos blancos (leucocitos). Si se desea, una muestra biológica puede ser una combinación de diferentes muestras biológicas de un sujeto, tal como una combinación de una muestra de tejido y fluido.
Las muestras biológicas pueden ser obtenidas de un sujeto, por ejemplo, un sujeto que tiene, se sospecha que tiene o está en riesgo de desarrollar un cáncer (por ejemplo, B-CLL), una condición inflamatoria, o un trastorno de huesos (por ejemplo, un trastorno de huesos asociado con CD200). Cualesquiera métodos adecuados para obtener las muestras biológicas pueden ser empleados, no obstante, los métodos de ejemplo incluyen por ejemplo flebotomía, restregado con algodón (por ejemplo, restregado bucal), lavado, o procedimiento de biopsia de aspiración de aguja delgada. Los ejemplos no limitantes de tejidos susceptibles a aspiración con aguja fina incluyen, nodo linfático, pulmón, tiroides, seno e hígado. Las muestras biológicas también se pueden obtener de médula ósea. Las muestras también pueden ser recolectadas, por ejemplo, mediante microdisecado (por ejemplo, microdisección de captura láser (LCM) o microdisección láser (LMD)), lavado de vejiga, embarrado (embarrado PAP), o lavado ductal .
Los métodos para obtener y/o almacenar muestras que conservan la actividad o integridad de las células en la muestra biológica, son bien conocidos para los expertos en la técnica. Por ejemplo, una muestra biológica puede ponerse en contacto en forma adicional con uno o más agentes adicionales tales como amortiguadores y/o inhibidores adecuados, incluyendo inhibidores de proteasa, los agentes que sirven para conservar o minimizar los cambios en las células (por ejemplo, cambios en osmolaridad o pH) o desnaturalización de proteína de superficie celular (por ejemplo, proteínas enlazadas GPI) o porciones GPI en la superficie de las células. Dichos inhibidores incluyen, por ejemplo, queladores tales como ácido tetraacético de etilenodiamina (EDTA), ácido tetraacético de etilenglicol (EGTA), inhibidores de proteasa tales como fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF), aprotinina, y leupeptina. Los amortiguadores y condiciones adecuadas para almacenar o manipular de otra forma células completas, se describen por ejemplo en las Publicaciones de Pollard y Walker (1997), "Protocolos de Cultivo Celular Básico", volumen 75 de la Publicación de Métodos de Biología Molecular, Humana Press; asters (2000) "Cultivo de célula animal: método práctico", volumen 232 de la Publicación de Serie de métodos prácticos, Oxford University Press; y Jones (1996) "Protocolos de cultivo de célula humana", volumen 2 de la Publicación de Métodos de medicina molecular, Humana Press.
Una muestra también puede ser procesada para eliminar o minimizar la presencia de sustancia de interferencia. Por ejemplo, una muestra biológica puede ser fraccionada o purificada para eliminar uno o más materiales (por ejemplo, células) que no son de interés. Los métodos para fraccionar o purificar una muestra biológica incluyen pero no se limitan a: citometría de flujo, clasificación de célula activada por fluorescencia y sedimentación.
Biomarcadores v Aplicaciones Los inventores de la presente invención han identificado y proporcionado en el presente documento diversos biomarcadores consistentes con la producción en un humano de un efecto inmunomodulador deseado a través de un anticuerpo anti-CD200 administrado al humano. Un "efecto inmunomodulador deseado" o "efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200" y términos gramáticamente similares, tal como aquí se utilizan, se refieren a un efecto inmunológico medible, deseable en un humano, que se puede atribuir a la actividad biológica de un anticuerpo anti-CD200 administrado al humano. Por ejemplo, los inventores han observado que después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un humano, la concentración de linfocitos CD200 + en la circulación (por ejemplo, subconjuntos de células T CD200+ incluyendo, por ejemplo, células T CD200+/CD4+ y/o células T CD200+/CD4+ activadas) se reduce en el humano, tal como se mide mediante una reducción en la concentración de dichas células en la sangre. También se observa que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200, el nivel de expresión de CD200R en al menos un subconjunto de leucocitos (por ejemplo, células T CD4+) se incrementa. Aunque no se pretende limitarse a teoría o mecanismo de acción alguno en particular, los inventores consideran que el monitoreo de un paciente tratado con un anticuerpo anti-CD200 para un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en uno o más de estos biomarcadores es útil, entre otras cosas, para determinar si el anticuerpo anti-CD200 tiene la capacidad de producir un efecto biológico al humano al cual se administra el anticuerpo. Además, los cambios del monitoreo en uno o más de los biomarcadores también son útiles para identificar una dosis -una dosis de umbral (o un programa de dosificación)- de un anticuerpo anti-CD200, tal como samalizumab, ya que en virtud de su efecto inmunomodulador en el humano, es suficiente para lograr un efecto clínicamente significativo en la enfermedad (por ejemplo, suficiente para tratar una enfermedad tal como cáncer). Diversos pacientes B-CLL a los que se les administró samalizumab exhibieron una enfermedad clínicamente estable o mejorada, tal como se determina mediante evaluaciones en serie de conteos en sangre periférica y exploraciones CT. Se observó un efecto inmunomodulador deseado del anticuerpo en todos estos pacientes, tal como se refleja en un cambio (por ejemplo, un incremento o disminución) en uno o más de los biomarcadores aquí descritos.
Por lo tanto, de acuerdo con la presente descripción, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto ¡nmunomodulador deseado (por ejemplo, un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200) en el humano (y de esta forma al humano se le ha administrado una dosis al administración suficiente para afectar el tratamiento del paciente, entre otras cosas, mediante su actividad inmunomoduladora) , un practicante puede medir la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en una muestra de sangre de humano que se administra un anticuerpo anti-CD200. Una reducción en la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en la muestra de sangre en comparación con la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en una muestra de sangre de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, el practicante no necesita medir primero la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en la muestra de sangre. Por ejemplo, un practicante (por ejemplo, un profesional médico o un científico o técnico de diagnóstico) abastecido con la información con respecto: (i) la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en una muestra de sangre del humano al que se administró el anticuerpo y (ii) una concentración de leucocitos CD200+ de control puede determinar, si el anticuerpo ha producido el efecto inmunomodulador deseado en el humano, utilizando la información, por ejemplo, comparando la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en la muestra de sangre con la concentración de dichas células en la muestra de control, en donde la reducción en la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) en la muestra de sangre en comparación con una concentración de control de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T) indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Los métodos para medir la concentración de células CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + ) son bien conocidos en la técnica e incluyen, entre otros métodos, citometría de flujo. Ver, por ejemplo, la Publicación de Chen y asociados (2009) Mol Immunol 46.(10): 1951-1963. Un método adecuado para detectar y/o medir la concentración de células T CD200 + también se establece en los ejemplos de operación. En algunas modalidades, un practicante puede interrogar una muestra biológica obtenida de un paciente post-tratamiento (un paciente al cual ya se le ha administrado el anticuerpo anti-CD200) con respecto a la concentración de células de un subconjunto particular de leucocitos CD200+ (por ejemplo, células T). Por ejemplo, un practicante puede determinar la concentración de células T CD200+/CD4+ y/o la concentración de células T CD2007CD4+ activadas presentes en una muestra biológica de un paciente post-tratamiento. En algunas modalidades, un practicante puede determinar la concentración de células CD2007CD8 + . En cada caso, una reducción en la concentración de células T CD200 de un subconjunto determinado, en comparación con la concentración de control de células T CD200+ del mismo tipo histológico, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado.
Tal como se describió anteriormente, determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante con función efectora disminuida o sin función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano se puede llevar a cabo comparando la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un paciente después de la administración del anticuerpo anti-CD200 (la concentración de célula T CD200+ post-tratamiento) a la concentración de células CD200+ en una muestra de control. En algunas modalidades, la muestra de control se obtiene del paciente antes de administrar al paciente el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, la muestra de control puede ser (o puede estar basada en), o por ejemplo, como una recolección de muestras obtenidas de uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, 25, 30, 35, ó 40 o más) individuos saludables a los que no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, una concentración de control de células CD200+ del mismo tipo histológico puede ser un promedio de la concentración de células en una o más muestras de control obtenidas de pacientes a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, la muestra de control puede ser, o puede basarse en, por ejemplo, en una recolección de muestras obtenidas de uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, 25, 30, 35, ó 40 o más) individuos que padecen del mismo cáncer o diferentes tipos de cánceres, pero a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano al que se le administró el anticuerpo, un practicante puede comparar la concentración de célula T CD200+ post-tratamiento con la concentración típica, o concentración promedio, de células T CD200+ del mismo tipo histológico presentes en humanos a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200 o al menos no tienen un nivel detectable de un anticuerpo anti-CD200 en una muestra biológica obtenida de los humanos.
En algunas modalidades, una concentración de célula T CD200+ post-tratamiento que es al menos 5% menor que la concentración de control indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano que se le administró el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, una concentración de célula T CD200+ post-tratamiento que es el 10 (por ejemplo, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, O más del 80) % menor a la concentración de control, indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, se puede llevar a cabo consultando si la concentración de célula T CD200+ post-tratamiento cae dentro de un rango predeterminado, que indica el surgimiento de un efecto inmunomodulador deseado mediante un anticuerpo anti-CD200 en un humano. En algunas modalidades, determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano puede incluir, consultar si la concentración de célula T CD200+ post-tratamiento de un tipo histológico determinado de células T CD200+ cae arriba o debajo de un valor de cohorte predeterminado. El valor de corte normalmente es la concentración de células T CD200+ de un tipo histológico determinado arriba o debajo, lo cual se considera indicativo de un cierto fenotipo - es decir, el surgimiento de un efecto inmunomodulador deseado en un humano, producido por un anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano (y de esta forma al humano se le ha administrado una dosis del anticuerpo suficiente para afectar el tratamiento del paciente a través de, entre otras cosas, su actividad inmunomoduladora) , un practicante puede cuantificar la expresión de CD200 mediante células T (por ejemplo, células T CD4 + , células T CD8 + , o células T CD4+ activadas) en una muestra de sangre de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Una reducción en el nivel de expresión de CD200 mediante células T en la muestra de sangre en comparación con el nivel de expresión de CD200 mediante células T del mismo tipo histológico en una muestra de sangre de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Tal como se describió anteriormente, el practicante no necesita medir primero el nivel de expresión de células T CD200 mediante en la muestra de sangre. Por ejemplo, un practicante abastecido con información con respecto: (i) el nivel de expresión de CD200 mediante células T en una muestra de sangre del humano al que se le administró un anticuerpo y (ii) el nivel de expresión de CD200 mediante células T en una muestra de sangre de control, puede determinar si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano utilizando la información, por ejemplo, comparando el nivel de expresión de CD200 mediante células T en la muestra de sangre con el nivel de expresión de CD200 mediante dichas células en la muestra de control, en donde la reducción en el nivel de expresión CD200 mediante las células T en la muestra de sangre, en comparación con el nivel de expresión de CD200 mediante células T del mismo tipo histológico en la muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Los métodos adecuados para cuantificar el nivel de expresión de CD200 mediante células (por ejemplo, leucocitos tales como células T) son conocidos en la técnica y se describen en la presente invención.
Los inventores también observaron que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200, el nivel de expresión de CD200R a través de una variedad de subconjuntos de leucocitos se incrementa. Sin pretender limitarse a teoría o mecanismo de acción en particular, los inventores incrementan que un incremento en la expresión CD200R mediante leucocitos, es potencialmente una respuesta compensadora por parte de estas células, a la reducción de la expresión CD200 celular inducida por el anticuerpo anti-CD200. Por lo tanto, la expresión CD200R por parte de los leucocitos, sirve como un biomarcador indirecto para monitorear (o detectar) el efecto inmunomodulador de un anticuerpo anti-CD200 en la expresión CD200 por parte de los leucocitos en el humano al cual se administra el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano (y de esta forma al humano se la ha administrado una dosis del anticuerpo suficiente para afectar el tratamiento del paciente mediante, otras cosas, su actividad inmunomoduladora), un practicante puede medir el nivel de expresión de CD200R a través de una pluralidad de leucocitos (por ejemplo, una pluralidad de leucocitos de un tipo histológico determinado) en una muestra biológica (por ejemplo, una muestra de sangre) obtenida de un humano después de la administración del anticuerpo anti-CD200 (el nivel de expresión CD200R post-tratamiento) , en donde un incremento en el nivel de expresión CD200R post-tratamiento, en comparación con el nivel de expresión CD200R por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado. En algunas modalidades, el practicante no necesita medir primero el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en la muestra biológica. Por ejemplo, un practicante (por ejemplo, un médico profesional o un científico o técnico de diagnóstico) abastecido con la información con respecto: (i) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra de sangre del humano al que se le administró el anticuerpo y (ii) un nivel de expresión de control (por ejemplo, el nivel de expresión de CD200R por parte de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control) puede determinar si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano utilizando la información, por ejemplo, comparando el nivel de expresión CD200R por parte de leucocitos en la muestra biológica, con el nivel de expresión del control, en donde un incremento en el nivel de expresión CD200R por parte de los leucocitos, en comparación con el nivel de expresión del control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Los métodos para cuantificar el nivel de expresión de CD200 y/o CD200R por parte de una célula o población de células, son conocidos en la técnica e incluyen, entre otros métodos, manchado Western, manchado de punto, y citometría de flujo, los cuales son útiles para cuantificar la expresión de proteína, o reacción de cadena de polimerasa de transcriptasa inversa (RT-PCR) y análisis de manchado Northern para cuantificar la expresión de mARN. Ver, por ejemplo, las Publicaciones de Walker y asociados (2009) Exp Neurol 215(11:5-19; Rijkers y asociados (2008) Mol Immunol 45. 141:1126-1135; y Voehringer y asociados (2004) J Biol Chem 279 (52): 54 17-54 23. Ver de manera general la Publicación de Sambrook y asociados (1989) "Clonación Molecular: Manual de Laboratorio, 2° Edición", Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. y Ausubel y asociados (1992) "Protocolos Actuales en Biología Molecular" Greene Publishing Associates. Un método adecuado para detectar y/o cuantificar la expresión de CD200 o CD200R por parte de los leucocitos, también se establecen en los ejemplos de operación. En algunas modalidades, un practicante puede interrogar una muestra biológica (por ejemplo, una muestra de sangre) obtenida de un paciente post-tratamiento (un paciente al cual se le ha administrado un anticuerpo anti-CD200 para el nivel de expresión) CD200 y/o CD200R en el nivel de expresión (por ejemplo, el nivel de expresión promedio) por parte de una pluralidad de leucocitos de un tipo histológico determinado. Por ejemplo, un practicante puede determinar el nivel de expresión o el nivel de expresión promedio de CD200R por parte de una pluralidad de células T CD4 + , células T CD8 + , células T CD4 + activadas, células T NK, o células T CD217CD25+/Fox3P + . En un caso, un incremento en la expresión CD200R por parte de un subconjunto de leucocitos determinado, en comparación con el nivel de expresión de control (por ejemplo, el nivel de expresión promedio de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo), indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido en el humano un efecto inmunomodulador deseado.
En algunas modalidades, un nivel de expresión CD200R post-tratamiento que es al menos 1.5 veces mayor que el nivel de expresión de control (esto es, el nivel de expresión de CD200R por parte de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control) indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, un nivel de expresión CD200R post-tratamiento que es al menos 2 (por ejemplo, al menos 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, ó 10 o más) veces mayor que el nivel de expresión de control, indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, un nivel de expresión CD200R post-tratamiento que es al menos 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 150, 200, o 250 0 más) % mayor que el nivel de expresión de control indica que un ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, el nivel de expresión CD200 post-tratamiento que es al menos 5 (por ejemplo, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, ó 90 o más) % inferior que el nivel de expresión de control indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, la muestra de control es una muestra biológica obtenida de un sujeto humano antes de la administración al sujeto humano del anticuerpo anti-CD200. (Esto es, por ejemplo, el nivel de expresión CD200R de control puede ser el nivel de expresión de CD200R por parte de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del sujeto humano antes de administrar el sujeto humano al anticuerpo anti-CD200). En algunas modalidades, el nivel de expresión CD200 o CD200R de control puede estar basado, por ejemplo, en el nivel de expresión promedio de CD200 o CD200R por parte de leucocitos del mismo tipo histológico obtenidos de uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, 25, 30, 35, ó 40 o más) individuos saludables, a los que no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200. El nivel de expresión CD200 o CD200R de control puede estar basado en, por ejemplo, el nivel de expresión promedio de expresión CD200 o CD200R por parte de leucocitos del mismo tipo histológico obtenidos de uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, 25, 30, 35, ó 40 o más) individuos que padecen del mismo cáncer o de diferentes tipos de cánceres, pero a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano al que se le administró un anticuerpo, un practicante puede comparar el nivel de expresión CD200R post-tratamiento con el nivel de expresión típico, o nivel de expresión promedio, de CD200R por parte de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida de humanos, a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200 o al menos no tienen un nivel detectable de un anticuerpo anti-CD200 en la muestra biológica.
En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora disminuida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano se puede llevar a cabo consultando si el nivel de expresión CD200 o CD200R post-tratamiento, cae dentro de un rango predeterminado que indica el surgimiento de un efecto inmunomodulador a través de un anticuerpo anti-CD200 en un humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, puede incluir consultar si el nivel de expresión CD200 o CD200R posttratamiento a través de un tipo histológico de leucocitos cae arriba o debajo de un valor de corte predeterminado. En este caso, el valor de corte normalmente es el nivel de expresión (por ejemplo, expresión mARN o de proteína) por parte de leucocitos de un tipo histológico determinado arriba o debajo del cual se considera indicativo de un cierto fenotipo - a saber el surgimiento de un efecto inmunomodulador deseado en un humano, producido por un anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano (y de esta forma al humano se le administró una dosis de anticuerpo suficiente para afectar el tratamiento del paciente, entre otras cosas, a través de su actividad inmunomoduladora) , un practicante puede medir la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra de sangre de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ en la muestra de sangre en comparación con la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico en una muestra de sangre de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. Un practicante (por ejemplo, un médico profesional o un científico o técnico de diagnóstico) abastecido con la información con respecto: (i) la concentración de leucocitos CD200FV en una muestra de sangre del humano al que se le administró un anticuerpo y (ii) una concentración de leucocitos CD200FT de control, puede determinar si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano utilizando la información, por ejemplo, comparando la concentración de leucocitos CD200FV en la muestra de sangre, con la concentración dichas células en la muestra de control, en un incremento en la concentración de leucocitos CD200FT en la muestra de sangre, en comparación con una concentración de control de leucocitos CD200R+ indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades de cualesquiera de los métodos aquí descritos, el mismo practicante puede administrar el anticuerpo al humano antes de determinar si ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, mientras que en algunas modalidades, el practicante quien administra el anticuerpo al paciente, es diferente al practicante quien determina si ha ocurrido en el humano un efecto inmunomodulador deseado. En algunas modalidades, el practicante puede obtener una muestra biológica (por ejemplo, una muestra de sangre) del humano antes de la administración del anticuerpo. En algunas modalidades, el practicante puede obtener una muestra biológica (por ejemplo, una muestra de sangre) del humano después de la administración del anticuerpo al humano. En algunas modalidades, se puede obtener la muestra post-tratamiento del humano en menos de 48 (por ejemplo, menos de 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, nueve, ocho, siete, seis, cinco, cuatro, tres, dos, o incluso menos de una) horas después de la administración del anticuerpo anti-CD200 al humano. En algunas modalidades, se puede obtener una muestra post-tratamiento del humano en menos de 20 (por ejemplo, menos de 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, nueve, ocho, siete, seis, cinco, cuatro, tres, dos, o uno) día(s) después de la administración al humano del anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, la muestra biológica se obtiene del humano, no más de 20 (por ejemplo, no más de 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, nueve, ocho, siete, seis, cinco, cuatro, tres, dos, o uno) día(s) después de que el anticuerpo se administra al humano.
En algunas modalidades, la determinación desde un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, puede incluir (i) medir la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma, una concentración de célula T CD200+ pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo; y (iii) medir la concentración de células T CD200 + en una muestra de sangre obtenida del humano para obtener de esta forma una concentración de célula T CD200+ posttratamiento, en donde una reducción en la concentración de célula T CD200* post-tratamiento en comparación con la concentración de célula T CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano puede incluir (i) medir la concentración leucocitos de CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 para obtener de esta forma una concentración de leucocito CD200FT pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo; y (iii) medir la concentración de leucocitos CD200R + en una muestra de sangre obtenida del humano para obtener de esta forma una concentración de leucocitos CD200R+ posttratamiento, en donde un incremento en la concentración de leucocito CD200R+ post-tratamiento en comparación concentración de leucocitos CD200R+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 es biológicamente activo de un humano incluye: (i) cuantificar el nivel de expresión CD200R a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200R pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) cuantificar el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del humano obtenida después la administración del anticuerpo, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200R post-tratamiento, en donde un incremento en el nivel de expresión CD200R post-tratamiento en comparación con el nivel de expresión CD200R pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 es biológicamente activo en un humano incluye: (i) cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) cuantificar el nivel de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano, obtenida después la administración del anticuerpo para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 posttratamiento, en donde una disminución en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 es biológicamente activo en el humano incluye: (i) medir la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para determinar de esta forma una concentración de célula T activada pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) medir la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (i) para determinar de esta forma una concentración de célula T activada por post-tratamiento, en donde un incremento en la concentración de célula T activada post-tratamiento, en comparación con la concentración de célula T activada pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 es biológicamente activo en humanos incluye: (i) medir la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 para determinar de esta forma una concentración de célula T reguladora pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) medir la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en un (i) para determinar de esta forma una concentración de célula T reguladora post-tratamiento, en donde una disminución en la concentración de célula T reguladora post-tratamiento, en comparación concentración de célula T reguladora pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 es biológicamente activo en un humano incluye: (i) determinar la proporción del porcentaje células T activadas, al porcentaje de T reguladoras en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para determinar de esta forma una proporción pre-tratamiento; (ii) administrar al humano el anticuerpo anti-CD200; y (iii) medir la proporción del porcentaje de células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (i) para determinar de esta forma una proporción post-tratamiento, en donde un incremento en la proporción post-tratamiento, en comparación con la proporción pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. La proporción puede ser incrementada, por ejemplo, para al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3: 1, 4: 1, 5: 1, 6: 1, o incluso 7:1 o más).
En algunas modalidades, los pasos del método anterior se puede llevar a cabo por más de un practicante. Por ejemplo, un practicante puede analizar (por ejemplo, medir la concentración de células T CD200+ o cuantificar el nivel de expresión de CD200R mediante leucocitos) en las muestras pre- y posttratamiento obtenidas del humano. Otro practicante puede recibir información con respecto al análisis de las muestras a través del primer practicante, para determinar de esta forma si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En algunas modalidades, aún otro practicante puede obtener una muestra biológica pre-tratamiento de un paciente y un cuarto practicante puede obtener una muestra biológica post-tratamiento del paciente. En algunas modalidades, todos los pasos se llevan a cabo a través de un mismo practicante.
Se observó además, que la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un humano, da como resultado uno o más de: (a) un incremento en la concentración de células T activadas; (b) una disminución en la concentración de células T reguladoras; y (c) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, o una proporción de porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3: 1, 4: 1, 5: 1, 6: 1 , o incluso 7:1 o más). Por lo tanto, de acuerdo con la presente descripción, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado (por ejemplo, un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200) en el humano (y de esta forma al humano se le ha administrado una dosis del anticuerpo suficiente para afectar el tratamiento del paciente, entre otras cosas, a través de su actividad imunomoduladora) , un practicante puede medir la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Un incremento en la concentración de células T activadas en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T activadas en la muestra de sangre de control indica, que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. De acuerdo con la descripción, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, un practicante puede medir la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del humano, en donde una disminución en la concentración de células T reguladoras en la muestra biológica, en comparación con la concentración de células T reguladoras en una muestra de control de un efecto inmunomodulador deseado. Tal como se describió anteriormente, el practicante no necesita medir primero la concentración de células T activadas en la muestra de sangre.
Los métodos para medir la concentración de células T activadas (por ejemplo, células T activadas) o células T reguladoras son bien conocidos en la técnica e incluyen, entre otros métodos, citometría de flujo. Tal como se describió anteriormente, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo un anticuerpo anti-CD200 variante con función efectora disminuida o sin función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, se puede llevar a cabo comparando la concentración de células T activadas y/o células T reguladoras en una muestra biológica obtenida de un paciente, después de la administración del anticuerpo ant¡-CD200 (la concentración de célula T activada post-tratamiento) a la concentración de células T activadas en una muestra de control. La muestra de control, puede ser, por ejemplo, una muestra biológica obtenida del sujeto humano antes de la administración al sujeto humano del anticuerpo anti-CD200. La muestra de control puede ser (o puede estar basada en) por ejemplo, una recolección de muestras obtenidas de uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, 25, 30, 35, ó 40 o más) individuos saludables a los que no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, una concentración de control de células activadas CD200+ del mismo tipo histológico, puede ser un promedio de la concentración de las células en una o más muestras de control obtenidas de pacientes a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano al que se le administró el anticuerpo, un practicante puede comparar la concentración de célula T activada post-tratamiento con la concentración típica, o concentración promedio, de células T activadas del mismo tipo histológico presentes en humanos a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200 o al menos no tienen un nivel detectable de un anticuerpo anti-CD200 en una muestra biológica obtenida de los humanos.
En algunas modalidades, una concentración de célula T activada post-tratamiento que es al menos el 5% mayor que la concentración de control, indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, una concentración de célula T activada post-tratamiento que es al menos 10 (por ejemplo, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, o más del 80) % mayor a la concentración de control, indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, se puede llevar a cabo consultando si la concentración de célula T activada post-tratamiento cae dentro de un rango predeterminado, que indica el surgimiento de un efecto inmunomodulador deseado a través de un anticuerpo anti-CD200 en un humano, o si la concentración de célula T activada post-tratamiento para un tipo histológico predeterminado de célula T activada, cae arriba o debajo de un valor de corte predeterminado.
Tal como se describió anteriormente, una comparación del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, también se puede utilizar para determinar si ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, un practicante puede determinar la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una proporción de al menos 2:1 (por ejemplo, al menos 3:1, al menos 4:1, al menos 5:1, al menos 6:1, o al menos 7:1 o más) indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado. En algunas modalidades, un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida de un paciente después de la administración de un anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la proporción correspondiente determinada de una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
En algunas modalidades, los métodos se llevan a cabo utilizando una computadora, por ejemplo, el método puede incluir recibir datos que incluyen un perfil médico de un humano, por ejemplo, a través de una comunicación de Internet o ingresando directamente la información en la computadora. El perfil contiene información de al menos uno de (a):(1) la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de células T CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de células T CD200FT del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo. Posteriormente, la computadora procesa al menos la parte de los datos que contienen información para determinar que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Los métodos a base de computadora también pueden incluir proporcionar información con respecto al menos una de: (a): (i) la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b): (iii) la concentración de células T CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de células T CD200R+ del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c): (v) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión de CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d): (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del anticuerpo; (e): (ix) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f): (xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano, después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que e (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g): (xiü) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje células T activadas al porcentaje células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiii)) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (h): (xv) la concentración de linfocitos CD8+ (por ejemplo, células T) en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv) en una muestra biológica del humano, antes de la administración del anticuerpo. La información se ingresa en una computadora y se calcula un parámetro, indicando el parámetro si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano utilizando la computadora y la información de entrada. El método también puede incluir producir el parámetro y/o registrar el parámetro o resultado en un medio legible en computadora o un archivo físico, tal como un registro o gráfica del paciente.
Tal como se describe con detalle en los ejemplos de operación, los inventores también han descubierto que después de la administración de un anticuerpo anti-CD2O0 a un animal que padece de enfermedad autoinmune, se reduce la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, subconjuntos de CD200 leucocitos) y se reducen en el animal células de médula ósea CD200 (por ejemplo, subconjuntos de células de médula ósea CD200), tal como se mide a través de una reducción en la concentración de dichas células en tejido de bazo. Se observó una marcada reducción en la concentración de autoanticuerpos asociados con un trastorno autoinmune, en animales tratados con el anticuerpo anti-CD200 y en los cuales ocurrió el efecto inmunomodulador. Por lo tanto, sin pretender limitarse a teoría o mecanismo de acción alguno en particular, los inventores consideran que el monitoreo de un paciente tratado con un anticuerpo anti-CD200 con respecto al surgimiento de uno o más de estos biomarcadores es útil, entre otras cosas, para determinar si el anticuerpo anti-CD200 tiene la capacidad de producir un efecto biológico en el humano al cual se administra el anticuerpo. Además, el monitoreo con respecto a los cambios en uno o más de los biomarcadores también es útil para identificar una dosis - una dosis de umbral - de un anticuerpo anti-CD200, tal como samalizumab, ya que en virtud de su efecto inmunomodulador en los humanos, es suficiente para lograr un efecto clínicamente significativo en la enfermedad (es decir, suficiente para tratar una enfermedad tal como una enfermedad autoinmune). Ya que se observó un efecto inmunomodulador similar en poblaciones de célula CD200+ en pacientes con cáncer tratados con un anticuerpo anti-CD200, los inventores consideran que los efectos inmunomoduladores inducidos por el anticuerpo anti-CD200 en leucocitos CD200+ y células de médula ósea CD200 + , es muy probable que ocurran también en humanos.
Por lo tanto, de acuerdo con la presente descripción, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora reducida) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano (y por lo tanto al humano se le ha administrado una dosis del anticuerpo suficiente para afectar el tratamiento del paciente, entre otras cosas, a través de su actividad inmunomoduladora) un practicante puede medir la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, uno o más subconjunto de células de médula ósea CD200+ y/o esplenocitos CD200 + ) en una muestra biológica (por ejemplo, una muestra de sangre o una muestra de bazo) de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Una reducción en la concentración de leucocitos CD200+ en la muestra, en comparación con la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano. En forma similar, para determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora reducida o no tiene función efectora reducida) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, un practicante también puede medir la concentración de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200. Una reducción en la concentración de células de médula ósea CD200+ en la muestra en comparación con la concentración de células de médula ósea CD200+ (del mismo tipo histológico) en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
Tal como se describió anteriormente, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante con función efectora disminuida o sin función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, se puede llevar a cabo comparando la concentración de leucocitos CD200+ (por ejemplo, esplenocitos CD200+ o células de médula ósea CD200 + ) en una muestra biológica obtenida de un paciente después de la administración del anticuerpo anti-CD200 (la concentración de leucocito CD200+ o célula de médula ósea CD200+ post-tratamiento) con la concentración de células CD200+ en una muestra de control. En algunas modalidades, se obtiene una muestra de control del sujeto humano antes de administrar al sujeto humano el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, la muestra de control puede ser (o puede estar basada en), por ejemplo, una recolección de muestras obtenidas de uno o más (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 15, 20, 25, 30, 35, ó 40 o más) individuos saludables a los cuales no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, una concentración de control de células CD200+ del mismo tipo histológico puede ser un promedio de la concentración de las células en una o más muestras de control, obtenidas de pacientes a quienes no se les ha administrado un anticuerpo anti-CD200).
En algunas modalidades, una concentración posttratamiento de leucocito CD200+ o célula de médula ósea CD200+ que es al menos el 5% menor que la concentración de control, indica que ha ocurrido un efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200. En algunas modalidades, una concentración posttratamiento de leucocito CD200+ o célula de médula ósea CD200+ que es de al menos 10 (por ejemplo, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, o más del 80) % menor a la concentración de control, indica que ha ocurrido el efecto inmunomodulador deseado en el humano al que se le administró el anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, determinar si un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 variante que tiene función efectora o reducida o no tiene función efectora) ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, se puede llevar a cabo consultando si la concentración posttratamiento de leucocito CD200+ o célula de médula ósea CD200+ cae dentro de un rango predeterminado que indica el surgimiento de un efecto inmunomodulador deseado por parte de un anticuerpo anti-CD200 en un humano. En algunas modalidades, la determinación de si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, puede incluir consultar si la concentración posttratamiento de leucocito CD200+ o célula de médula óseaCD200+ de un tipo histológico predeterminado de leucocitos CD200+ leucocitos o células de médula ósea CD200 + cae arriba o debajo de un valor de corte predeterminado. Un valor de corte es normalmente la concentración de leucocitos CD200+ o células de médula ósea CD200+ de un tipo histológico predeterminado arriba o debajo de lo cual se considera indicativo de un cierto fenotipo - es decir el surgimiento de un efecto inmunomodulador deseado en un humano producido por un anticuerpo anti-CD200.
Métodos de Tratamiento La descripción también presenta métodos para tratar una variedad de trastornos, incluyendo por ejemplo, cánceres, condiciones inflamatorias, y trastornos asociados con pérdida de huesos (también referido en la presente invención como "trastorno de huesos"). Por ejemplo, después de que se determina que un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano que padece de un cáncer (por ejemplo, utilizando cualesquiera de los métodos de diagnóstico aquí descritos), un practicante médico puede seleccionar administrar al humano el anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para mantener el surgimiento del efecto inmunomodulador para tratar de esta forma el cáncer del paciente. En forma similar, después de que se ha determinado que un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano que padece de una condición inflamatoria, un practicante médico puede elegir administrar al humano el anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para mantener el efecto inmunomodulador en el paciente para tratar de esta forma la condición inflamatoria del paciente. Los métodos para administrar en forma terapéutica un anticuerpo anti-CD200 a un humano que son conocidos en la técnica y se describen por ejemplo en la Patente Norteamericana No. 7,408,041.
El cáncer es una clase de enfermedad o trastorno caracterizada por la división incontrolada de las células, y la capacidad que tienen éstas de dispersarse, ya sea mediante crecimiento directo en tejido adyacente a través de invasión, o mediante implante en sitios distantes mediante metástasis (cuando las células de cáncer son transportadoras a través del torrente sanguíneo o torrente linfático). El cáncer puede afectar a personas de todas las edades, pero el riesgo tiende a incrementar con la edad. Los tipos de cánceres pueden incluir por ejemplo cáncer de pulmón, cáncer de seno, cáncer de colon, cáncer pancreático, cáncer renal, cáncer de estómago, cáncer de hígado, cáncer de huesos, cáncer hematológico, cáncer de tejido neural (por ejemplo, neuroblastoma) , melanoma, cáncer de tiroides, cáncer de ovario, cáncer de testicular, cáncer de próstata, cáncer cervical, cáncer vaginal, o cáncer de vejiga. Los cánceres hematológicos (tumores líquidos) incluyen, por ejemplo, leucemias (por ejemplo, leucemia linfocítica crónica tal como leucemia linfocítica crónica tipo célula B o célula T) y mieloma múltiple. Los cánceres de hueso incluyen sin limitación, osteosarcoma y osteocarcinomas.
Tal como se utiliza en la presente invención, un humano "en riesgo de desarrollar un cáncer" es un humano que tiene una predisposición a desarrollar un cáncer, por ejemplo, una predisposición genética a desarrollar cáncer tal como una mutación en un gen supresor en tumor (por ejemplo, mutación en BRCA1, p53, RB, o APC) o ha sido expuesto a condiciones que pueden dar como resultado cáncer. Por lo tanto, un humano también puede ser uno que "está en riesgo de desarrollar un cáncer" cuando el humano ha sido expuesto a niveles mutagénicos o carcinogénicos de ciertos compuestos (por ejemplo, compuestos carcinogénicos en humo de cigarro tal como acroleina, arsénico, benceno, benz{a}antraceno, benzo{a}pireno, polonio-210 (radon), uretano, o cloruro de vinilo). Además, el humano puede estar "en riesgo de desarrollar un cáncer), cuando el humano ha sido expuesto a, por ejemplo, grandes dosis de luz ultravioleta o radiación-X, o ser infectado por un virus asociado/que causa un tumor tal como papilomavirus, virus de Epstein-Barr, virus de hepatitis B, o virus de linfoma de leucemia de célula T humano. A partir de lo anterior, quedará claro que los humanos "en riesgo de desarrollar un cáncer" no son todos los humanos dentro de una especie de interés.
Un humano "del que se sospecha que tiene un cáncer" es uno que tiene uno o más síntomas de un cáncer. Los síntomas de cáncer son bien conocidos para los expertos en la técnica e incluyen sin limitación, bolitas de seno, dolor, pérdida de peso, debilidad, fatiga excesiva, dificultad para comer, pérdida de apetito, tos crónica, empeoramiento en la respiración, tos con sangre, sangre en la orina, sangre en el excremento, náusea, vomito, metástasis en hígado, metástasis en pulmón, metástasis en huesos, llenado abdominal, inflamación, fluido en la cavidad peritoneal, sangrado vaginal, constipación, distensión abdominal, perforación del colon, peritonitis aguda (infección, fiebre, dolor), dolor, vómito con sangre, sudoración pesada, fiebre, alta presión sanguínea, anemia, diarrea, ictericia, mareos, escalofríos, espasmos musculares y dificultad para tratar. Los síntomas de un cáncer primario (por ejemplo, un cáncer primario grande) pueden incluir, por ejemplo a cualesquiera de metástasis de colon, metástasis de pulmón, metástasis de vejiga, metástasis de hígado, metástasis de huesos, metástasis de riñon y metástasis de páncreas.
Un anticuerpo anti-CD200 o un fragmento de enlace de antígeno del mismo aquí descrito, se puede administrar a un humano con cáncer, junto con uno o más agentes anti-cáncer terapéuticos adicionales. Los agentes anti-cáncer incluyen por ejemplo, agentes quimioterapéuticos, radiación por ionización, agentes de inmunoterapia o agentes de hipertermoterapia. Los agentes quimioterapéuticos, incluyen pero no se limitan a aminoglutetimida, amsacrina, anastrozol, asparaginasa, bcg, bicalutamida, bleomicin, buserelin, busulfan, camptotecina, capecitabina, carboplatin, carmustina, clorambucil, cisplatin, cladribina, clodronato, colquicina, ciclofosfamida, ciproterona, citarabina, dacarbazina, dactinomicin, daunorubicin, dienestrol, dietilstilbestrol, docetaxel, doxorubicin, epirubicin, estradiol, estramustina, etopósida, exemestano, filgrastim, fludarabina, f ludrocortisona, fluorouracilo, fluoximesterona, flutamida, gemcitabina, genistein, goserelin, hidroxiurea, idarubicin, ifosfamida, imatinib, interferón, irinotecan, letrozol, leucovorin, leuprolida, levamisole, lomustina, mecloretamina, medroxiprogesterona, megestrol, melfalan, mercaptopurina, mesna, metotrexato, mitomicin, mitotano, mitoxantrona, nilutamida, nocodazol, octreotida, oxaliplatin, paclitaxel, pamidronato, pentostatin, plicamicin, porfimer, procarbazina, raltitrexed, rituximab, estreptozocin, suramin, tamoxifen, taxol, temozolomida, teniposida, testosterona, tioguanina, tiotepa, dicloruro de titanoceno, topotecan, trastuzumab, tretinoin, vinblastina, vincristina, vindesina, y vinorelbina. En algunas modalidades, una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-CD200 o fragmento de enlace CD200 del mismo, se puede formular con uno o más de cualesquiera de los agentes anteriores, o cualquier otro agente anti-cáncer aquí descrito.
Estos compuestos anti-tumor quimioterapéuticos se pueden categorizar en grupos por su mecanismo de acción, incluyendo, por ejemplo, los siguientes: agentes anti-metabolitos/anti-cáncer, tales como análogos de pirrimidina (5-fluorouracil, floxuridina, capecitabina, gemcitabina y citarabina) y análogos de purina, antagonistas de folato e inhibidores relacionados (mercaptopurina, tioguanina, pentostatina y 2-clorodesoxiadenosina (cladribina)); agentes antiproliferativos/antimitóticos incluyendo productos naturales tales como alcaloides vinca (vinblastina, vincristina, y vinorelbina) , interruptores de microtúbulo tales como taxano (paclitaxel, docetaxel), vincristina, vinblastina, nocodazol, epotilones y navelbina, epidipodofillotoxinas (etopósida, teniposida), agentes que dañan el ADN (actinomicin, amsacrina, antraciclinas, bleomicin, busulfan, camptotecin, carboplatin, clorambucil, cisplatin, ciclofosfamida, citoxan, dactinomicin , daunorubicin, doxorubicin, epirubicin, hexametilmelaminaoxaliplatin, ifosfamida, melfalan, mecloretamina, mitomicin, mitoxantrona, nitrosourea, plicamicin, procarbazina, taxol, taxotere, teniposida, trietilenetiofosforamide y etopósido (VP16)); antibióticos tal como dactinomicin (actinomicin D), daunorubicin, doxorubicin (adriamicin) , idarubicin, antraciclinas, mitoxantrona, bleomicinas, plicamicin (mitramicin) y mitomicin; enzimas (L-asparaginasa que metaboliza sistémicamente L-asparagina y priva a las células que no tienen la capacidad de sintetizar su propia asparagina); agentes antiplaqueta; agentes de alquilacion antiproliferativos/antimitóticos tales como mostazas de nitrógeno (mecloretamina, ciclofosfamida y análogos, melfalan, clorambucil) , etileniminas y metilmelaminas (hexametilmelamina y tiotepa), alquilo sulfonatos-busulfan, nitrosoureas (carmustina (BCNU) y análogos, estreptozoci na) , trazenos - dacarbazinina (DTIC); antimetabolitos antiprolif erativos/antimitóticos tal como análogos de ácido fólico (metotrexato) ; complejos de coordinación de patino (cisplatin, carboplatin) , procarbazina, hidroxiurea, mitotano, aminoglutetimida; hormonas, análogos de hormona (estrógeno, tamoxifen, goserelin, bicalutamida, nilutamida) e inhibidores de aromatasa (letrozol, anastrozol); anticoagulantes (heparina, sales de heparina sintética y otros inhibidores de trombina); agentes fibrinolítico (tal como activador de plasminogen de tejido, estreptocinasa y urocinasa), aspirina, dipirridamol, ticlopidina, clopidogrel, abciximab; agentes antimigratorios; agentes anti-secreción (breveldin); inmunosupresores (ciclosporina, tacrolimus (FK-506), sirolimus (rapamicin), azatioprina, mofetil de micofenolato) ; agentes inmunomoduladores (talidomida y análogos de los mismos, tales como lenalidomida (Revlimid, CC-5013) y CC-4047 (Actimid)), ciclofosfamida; compuestos anti-angiogénicos (TNP-470, genistein) e inhibidores de factor de crecimiento (inhibidores de factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), inhibidores del factor de crecimiento de fibroblasto (FGF)); bloqueador de receptor de angiotensina; donadores de óxido nítrico; oligonucleótidos antisentido; anticuerpos (trastuzumab) ; inhibidores de ciclo celular e inductores de diferenciación (tretinoin); inhibidores mTOR, inhibidores de topoisomerasa (doxorubicin (adriamicin), amsacrina, camptotecin, daunorubicin, dactinomiein, eniposida, epirubicin, etoposida, idarubicin y mitoxantrona, topotecan, irinotecan), corticoesteroides (cortisona, dexametasona, hidrocortisona, metilprednisolona, prednisona, y prednisolona); inhibidores de cinasa de transducción de señal de factor de crecimiento; inductores de disfunción mitocondrial y activadores de caspasa; e interruptores de cromatin.
Tal como se describió anteriormente, en algunas modalidades de los métodos aquí descritos (por ejemplo, en algunas modalidades de los métodos para tratar cáncer), el anticuerpo anti-CD200 no se administra al humano en combinación con un compuesto quimioterapéutico o cualquier otro compuesto que tiene o puede tener un efecto inmunosupresor en el humano. Esto es, en algunas modalidades, un paciente se selecciona para tratamiento con un anticuerpo anti-CD200 terapéutico, si al paciente no se le ha administrado (dentro de un período de tiempo especificado antes del inicio de la terapia de anticuerpo anti-CD200) un agente quimioterapéutico (tal como cualesquiera de los aquí descritos) o cualquier otro agente que pueda (o pudo) da como resultado una inmunosupresión en el paciente. En algunas modalidades, el humano es uno quien no ha recibido tratamiento quimioterapéutico previo a la administración de la primera dosis del anticuerpo anti-CD200 y/o continúa sin recibir un tratamiento quimioterapéutico, siempre que al paciente se le esté administrando el anticuerpo anti-CD200. "Previo a la administración de la primera dosis del anticuerpo anti-CD200" puede incluir, por ejemplo, dentro de un período de tiempo que es menor a cuatro meses (por ejemplo, menor que 16 semanas, 15 semanas, 14 semanas, 13 semanas, tres meses, 12 semanas, 11 semanas, 10 semanas, 9 semanas, dos meses, ocho semanas, siete semanas, seis semanas, cinco semanas, un mes, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21 , 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11 , o menos de 10 días) previo a la administración de la primera dosis del anticuerpo anti-CD200.
En algunas modalidades, los métodos aquí descritos pueden incluir determinar si el humano tiene cáncer. En algunas modalidades, los métodos aquí descritos pueden incluir el paso de determinar si una o más células de cáncer del cáncer humano, expresan CD200. En algunas modalidades, los métodos pueden incluir determinar si una o más células de cáncer del cáncer del humano sobreexpresan CD200, en forma relativa a una muestra de control. En algunas modalidades, la muestra de control se obtiene del mismo humano, y comprende células normales del mismo tipo de tejido que el cáncer del humano. Por ejemplo, un experto en la técnica puede medir el nivel de proteína CD200 presente en células de cáncer de colon de un paciente, en comparación con células de cáncer normales del paciente. En algunas modalidades, la muestra de control puede ser el nivel de expresión (o nivel de expresión promedio) de células obtenidas de uno o más humanos quienes no tienen cáncer. En algunas modalidades, el cáncer comprende células (por ejemplo, una pluralidad o incluso la mayoría de las células) que expresan o sobreexpresan CD200 (por ejemplo, proteína CD200 y/o mARN CD200). En algunas modalidades, al menos (o más de) 10 (por ejemplo, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, ó 95) % de células de cáncer del humano sobreexpresan CD200. En algunas modalidades, todas las células de cáncer ensayadas sobreexpresan CD200 en forma relativa a las células normales. En algunas modalidades, una célula de cáncer (por ejemplo, una pluralidad de células de cáncer, al menos el 10% de las células de cáncer, o todas las células de cáncer ensayadas) pueden expresar proteína CD200 en niveles de al menos aproximadamente 1.4 (por ejemplo, al menos aproximadamente 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.2., 2.5, 3.0, 3.5,4.0, 4.5, ó 5 o más) - veces más que los niveles de expresión encontrados en células normales del mismo tipo histológico o mayores a la expresión promedio de células normales de uno o más pacientes quienes no tienen cáncer.
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 se administra únicamente a un humano, si el cáncer del humano comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan o sobreexpresan CD200. Los métodos para detectar la expresión de CD200 son bien conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, manchado Western, inmunohistoquímica, y técnicas de citometría de flujo. Los métodos adecuados para detectar la expresión de CD200 se describen con detalle, por ejemplo en las Publicaciones de Kretz-Rommel y asociados, (2007) J Immunol 178:5595-5605 y Kretz-Rommel y asociados, (2008) Jlmmunol 180:699-705.
En algunas modalidades, un anticuerpo anti-CD200 bloque la supresión inmune en cáncer, mediante dirección de células de cáncer que expresan CD200. La erradicación o inhibición de estas células de cáncer, puede estimular el sistema inmune y permitir la erradicación adicional de las células de cáncer.
En algunas modalidades, la combinación de la célula de cáncer directa que extermina y conduce la respuesta inmune hacia un perfil Th1, proporciona eficacia mejorada en el tratamiento de cáncer. Por lo tanto, en una modalidad, se proporciona un tratamiento de cáncer en donde un anticuerpo o fragmento de anticuerpo, que enlaza a CD200 y tanto a) bloquea la interacción entre CD200 y su receptor, como b) extermina directamente las células de cáncer que expresan CD200, se administra a un paciente con cáncer. El mecanismo a través del cual las células de cáncer son exterminadas puede incluir, pero no se limita a, ADCC o CDC; fusión con una toxina; fusión con un agente radioactivo tóxico, fusión con un polipéptido tóxico tal como granzima B o perforina; fusión con un virus citotóxico (por ejemplo, reo virus citotóxico tal como Reolysin®); o fusión con una citocina tal como TNF-a o IFN-a. En una modalidad alternativa, un tratamiento de cáncer implica administrar un anticuerpo el cual, tanto a) bloquea la interacción entre CD200 y su receptor como b) la actividad de célula T o célula NK citotóxica contra el tumor. Dicho aumento de la actividad de célula T o célula NK citotóxica, por ejemplo, puede combinarse fusionando el anticuerpo con citocinas tales como, por ejemplo, IL-2, IL-12, IL-18, IL-13, y IL-5. Además, dicho aumento puede lograrse mediante la administración de un anticuerpo anti-CD200 en combinación con inhibidores tales como análogos de IMiDs, talidomida, o talidomida.
Aún en otra modalidad, el tratamiento de cáncer implica administrar un anticuerpo el cual a) bloquea la interacción entre CD200 y su receptor y b) atrae células T hacia las células de tumor. La atracción de célula T se puede lograr fusionando el Ab con quimiocinas tales como MIG, IP-10.1-TAC, CCL21, CCL5 o LIGHT. Asimismo, el tratamiento con quimioterapéuticos puede dar como resultado la activación deseada de LIGHT. La acción combinada de bloquear la supresión inmune y exterminar directamente a través de la dirección de anticuerpo de las células de tumor, es un método único que proporciona eficacia incrementada.
Una "condición inflamatoria", tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a un proceso en el cual una o más sustancias (por ejemplo, sustancias que no ocurren naturalmente en el humano), a través de la acción de los glóbulos blancos (por ejemplo, células B, células T, macrófagos, monocitos, o células dendríticas) disparan en forma no adecuada una respuesta patológica, por ejemplo, una respuesta inmune patológica. Por consiguiente, dichas células inmune implicadas en la respuesta inflamatoria, son referidas como "células inflamatorias". La respuesta inflamatoria disparada en forma inadecuada, puede ser una en la cual no esté presente una sustancia extraña (por ejemplo, un antígeno, un virus, una bacteria, un hongo) en el humano. La respuesta disparada en forma no adecuada puede ser una en donde se dirija (por ejemplo, un trastorno inmune tal como esclerosis múltiple) un auto-componente (por ejemplo, un auto-antígeno) a través de las células inflamatorias. La respuesta disparada en forma no adecuada también puede ser una respuesta que no sea adecuada en magnitud o duración, por ejemplo, anafilaxis. Por lo tanto la respuesta dirigida en forma no adecuada puede ser debido a la presencia de una infección microbiana (por ejemplo, viral, bacteriana o fúngica). Los tipos de condición inflamatoria (por ejemplo, enfermedad autoinmune, pueden incluir, pero no se limitan a, osteoartritis; artritis reumatoide; espondiloartropatías; síndrome de dificultad respiratoria (incluyendo síndrome de dificultad respiratoria en adultos; ARDS), síndrome de POEMS; enfermedad inflamatoria de intestino; enfermedad de Crohn, enfermedad de injerto versus huésped (por ejemplo, rechazos de injertos de piel, injertos de riñon, injertos de corazón, injertos de pulmón, injertos de hígado, o injertos de médula ósea); enfermedad de Castleman multicéntrica; lupus eritomatoso sistémico (SLE); esclerosis múltiple; distrofia muscular; diabetes melitus dependiente de insulina; dermatomiositis; polimiositis; neuropatías inflamatorias tales como síndrome de Guillain Barré; vasculitis tal como granulomatosis Wegener; nefritis de lupus (LN); glomerulonefritis; poliarteritis nodosa; polimialgia reumática; arteritis temporal; síndrome de Sjógren; enfermedad de Behcet; síndrome de Churg-Strauss; o arteritis de Takayasu. También se incluyen en trastornos inflamatorios, ciertos tipos de alergia tales como rinitis, sinusitis, urticaria, erupción, angioedema, dermatitis atópica, alergias por alimentos (por ejemplo, alergia a nueces), alergias de fármacos (por ejemplo, penicilina), alergia de insectos (por ejemplo, alergia a la picadura de abeja), o mastocitosis. Las condiciones inflamatorias también pueden incluir colitis ulcerativa y asma.
Un humano "en riesgo de desarrollar una condición inflamatoria" se refiere a un humano con un historial familiar de una o más condiciones inflamatorias (por ejemplo, una predisposición genética a uno o más trastornos inflamatorios) o uno expuesto a una o más condiciones de inducción de inflamación. Por ejemplo, un humano puede haber sido expuesto a un superantígeno viral o bacteriano, tal como pero sin limitarse a, enterotoxi ñas Stafilococcal (SEs), una exotoxina Streptococcus pirogenes (SPE), una toxina de síndrome de choque tóxico Stafilococcus aureus (TSST-I), una exotoxina mitogénica Streptococcal (SME) y un superantígeno Streptococcal (SSA). De los anteriores, quedará claro que los humanos "en riesgo de desarrollar una condición inflamatoria", no son todos los humanos dentro de una especie de interés.
Un humano "del que se sospecha tiene una condición inflamatoria" es uno quien se presenta con uno o más síntomas de condición inflamatoria. Los síntomas de trastornos inflamatorios son bien conocidos en la técnica e incluyen, pero no se limitan a, enrojecimiento, hinchazón (por ejemplo, articulaciones hinchadas), articulaciones que están calientes al tacto, dolor de articulaciones, rigidez, dolor en la función articular, fiebre, escalofríos, fatiga, pérdida de energía, dolores de cabeza, pérdida de apetito, rigidez muscular, insomnio, comezón, nariz tapada, nariz floja, tos, uno o más síntomas neurológicos tales como mareos, convulsiones o dolor. De los anteriores, quedará claro que los humanos "de los que se sospecha tienen una condición inflamatoria" no son todos los humanos dentro de una especie de interés.
Un "trastorno inmune" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a un estado de enfermedad en el cual, a través de la acción de glóbulos blancos (por ejemplo, células B, células T, macrófagos, monocitos, o células dendríticas) , se ha generado una respuesta inmune patológica (por ejemplo, patológica en duración y/o magnitud) en un organismo huésped contra una sustancia o tejido que normalmente está presente dentro del organismo huésped. Los tipos de enfermedades autoinmune incluyen, pero no se limitan a enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes melitus tipo 1, síndrome de Goodpasture, SLE, LN, enfermedad de Grave, síndrome de Guillain-Barré, nefropatía de IgA, escleroderma, síndrome de Sjógren, granulomatosis de Wegener, pénfigo vulgaris, enfermedad de Chagas, artritis reumatoide, enfermedad de Crohn, enfermedad de Hashimoto, púrpura trombocitopénica idiopática, miastenia grave, cirrosis biliar pulmonar, y síndrome de Miller Fisher. Los trastornos autoinmune también incluyen ciertos trastornos hemolíticos autoinmune tal como enfermedad de aglutinina fría (CAD), síndrome de antifosf ol ípido (APS), enfermedad hemolítica autoinmune (por ejemplo, anemia hemolítica autoinmune; AIHA), síndrome de anti-fosfolípido catastrófico (APS), anemia hemolítica autoinmune caliente, y hemoglobinuria fría paroxismal (PCH).
Un humano "en riesgo de desarrollar un trastorno" se refiere a un humano con un historial familiar de trastornos inmune (por ejemplo, una predisposición genética a uno o más trastornos autoinmune) o uno expuesto a una o más condiciones de trastorno autoinmune/inducción de autoanticuerpo. Los humanos con ciertos cánceres (por ejemplo, tumores líquidos tal como mieloma múltiple o leucemia linfocítica crónica) pueden pre-disponer a los pacientes a desarrollar ciertas enfermedades hemolíticas. Por ejemplo, PCH puede seguir una variedad de infecciones (por ejemplo, sífilis) o neoplasmas tales como linfoma de no Hodgkin. En otro ejemplo, CAD puede estar asociada con infección HIV, infección Mycoplasmapneumonia, linfoma de no Hodgkin o macroglobulinemia de Waldenstrom. Aún en otro ejemplo, la anemia hemolítica autoinmune es una complicación bien conocida de la leucemia linfocítica crónica humana, aproximadamente el 11% de los pacientes CLL con enfermedad avanzada, desarrollarán AIHA. Tanto como el 30% de los pacientes CLL, pueden estar en riesgo de desarrollar AIHA. Ver, por ejemplo, Diehl y asociados, (1998) Semin Oncol 250):80-97 y Gupta y asociados, (2002) Leukemia 16(T0) .2092-2095. De lo anterior quedará claro que los humanos "en riesgo de desarrollar un trastorno autoinmune" no son todos los humanos dentro de una especie de interés.
Un humano "del que se sospecha tiene un trastorno autoinmune" es uno que se presenta con uno o más síntomas de un trastorno autoinmune. Los síntomas de trastornos autoinmune pueden variar en severidad y tipo con el trastorno autoinmune en particular e incluyen, pero no se limitan a enrojecimiento, hinchazón (por ejemplo, articulaciones hinchadas), articulaciones que están calientes al tacto, dolor articular, rigidez, pérdida de función articular, fiebres, escalofríos, fatiga, pérdida de energía, dolor, fiebre, palidez, ictericia, erupción dérmica de urticaria, hemoglobinuria, hemoglobinemia, y anemia (por ejemplo, anemia severa), dolores de cabeza, pérdida de apetito, rigidez muscular, insomnio, comezón, nariz tapada, nariz suelta, tos, uno o más síntomas neurológicos tales como mareos, convulsiones o dolor. De los anteriores quedará claro que los humanos "de los que se sospecha tienen un trastorno autoinmune" no son todos los humanos dentro de un especie de interés.
Un anticuerpo anti-CD200 aquí descrito, también se puede administrar junto con uno o más agentes terapéuticos adicionales útiles para tratar o prevenir una condición inflamatoria. El uno o más agentes incluyen, por ejemplo, un fármaco antünflamatorio no esteroidal (NSAID), un fármaco anti-reumático que modifica la enfermedad (DMARD), un modificador de respuesta biológica, o un corticoesteroide. Los modificadores de respuesta biológica que incluyen, por ejemplo, un agente anti-TNF (por ejemplo, un receptor TNF soluble o un anticuerpo específico para TNF tal como adulimumab, infliximab, o etanercept). En algunas modalidades, el uno o más agentes terapéuticos adicionales pueden ser por ejemplo, esteroides, anti-malarias, aspirina, fármacos anti-inflamatorios no esteroidales, ¡nmunosupresores, fármacos citotóxicos, corticosteroides (por ejemplo, prednisona, dexametasona, y prednisolona) , metotrexato, metilprednisolona, ¡nmunosupresores de macrólido (por ejemplo, sirolimus y tacrolimus), inhibidores mitóticos (por ejemplo, azatioprina, ciclofosfamida, y metotrexato), metabolitos fúngicos que inhiben la actividad de linfocitos T (por ejemplo, ciclosporina), mofetil de micofenolato, acetato de glatiramer, y agentes citotóxicos y que dañan el ADN (por ejemplo, clorambucil o cualquier agente que daña el ADN aquí descrito o conocido en la técnica).
Los anticuerpos anti-CD200 aquí descritos también se pueden utilizar para tratar una variedad de trastornos asociados con pérdida de huesos incluyendo por ejemplo, osteoporosis y enfermedad periodontal. La pérdida de huesos puede resultar de un número de trastornos tales como, pero sin limitarse a, hipercalciuria, trastornos de nutrición (por ejemplo, trastornos de alimentación tal como bulimia o anorexia), menopausia, falla ovariana prematura, condiciones hipogonadales tales como síndrome de Turner, síndrome de Klinefelter, síndrome de Kallmann, andropausia, amenorrea hipotalámica, o hiperprolactinemia. La pérdida de huesos osteoporótica, también puede resultar de un número de cánceres y enfermedades inflamatorias. Por ejemplo, la pérdida de huesos puede resultar de mieloma múltiple ( M), artritis reumatoide (RA), y lupus eritematoso sistémico (SLE). Un humano "en riesgo de desarrollar un trastorno asociado con pérdida de huesos" es uno con un historial familiar de osteoporosis o un humano que tiene un trastorno que está asociado con osteoporosis. Por ejemplo, un humano en riesgo de desarrollar osteoporosis, puede ser uno quien tiene mieloma múltiple, un trastorno nutricional o un trastorno inflamatorio asociado con osteoporosis, tal como RA o SLE. Un humano en riego de desarrollar osteoporosis puede ser, por ejemplo, una mujer menopáusica. De los anteriores, quedará claro que los humanos "en riesgo de desarrollar un trastorno asociado con pérdida de huesos" no son todos los humanos dentro de una especie de interés.
Un humano "del que se sospecha tiene un trastorno asociado con pérdida de huesos" es uno quien presenta uno o más síntomas del trastorno. Los síntomas de osteoporosis incluyen, por ejemplo, fracturas por fragilidad, dolor (por ejemplo, dolor de cuello o de espalda baja), y postura encorvada que resulta de fracturas de compresión espinal.
Además de la administración de uno o más anticuerpos anti-CD200 o fragmentos de enlace CD200 de los mismos aquí descritos, se puede tratar un trastorno asociado con pérdida de huesos con un bisfosfonato, hormona paratiroides recombinante, terapia de reemplazo hormonal (por ejemplo, terapia de estrogenos en mujeres), y un modulador de receptor de estrogenos selectivo.
CD200 ha mostrado en animales desempeñar un papel importante en el embarazo. Por ejemplo, la expresión CD200 incrementada, por medio de una proteína de fusión CD200-Fc soluble, ha mostrado disminuir el rango de absorción espontánea en ratones. (Ver por ejemplo, las Publicaciones de Clark y asociados, (2001) Mol Human Reprod 7:185-194 y Gorczynski y asociados, (2001) Graft 4:338-345). Por lo tanto, para administrar un anticuerpo anti-CD200 o un fragmento de enlace CD200 del mismo a una mujer, un practicante médico puede optar por no administrar el anticuerpo anti-CD200 a la mujer. El prácticamente médico puede seleccionar opcionalmente una terapia alternativa para la mujer.
En algunas modalidades, la eficacia terapéutica de las terapias mieloablativas seguido de trasplante de médula ósea, o transferencia adoptiva de células T que reaccionan con células CLL, se puede aumentar mediante la terapia anti-CD200.
Además, un tratamiento anti-CD200 puede aumentar sustancialmente la eficacia de las vacunas de cáncer tal como células dendríticas cargadas con proteínas de célula CLL, péptidos o ARN derivado de dichas células, proteínas de choque térmico derivado de los pacientes (HSPs), péptidos o proteínas de tumor. En otras modalidades, un anticuerpo anti-CD200 o fragmento de enlace CD200 del mismo se puede utilizar en combinación con un compuesto inmuno-estimulador, tal como CpG, agonistas receptores tipo toll o cualquier otro adyuvante, anticuerpos anti-CTLA-4, y similares. En algunas modalidades, la eficacia del tratamiento con anticuerpo anti-CD200 (o fragmento de enlace CD200) puede mejorarse bloqueando los mecanismos inmunosupresores utilizando anticuerpos anti-PDLI y/o anti-PDL2, anticuerpos anti-IL-10, anticuerpos anti-IL-6, y similares. En algunas modalidades, la eficacia de un tratamiento con anticuerpo anti-CD200 se mejora mediante la administración de agentes que incrementan el número de células NK o la actividad de células T, tal como el inhibidor de molécula pequeña I iDs, talidomida, o análogos talidomida.
En algunas modalidades, puede ser conveniente eliminar las células dendríticas plasmacitoides, mostradas como inmunosupresoras en un ambiente de cáncer. En estas modalidades, en donde el suministro de un anticuerpo anti-CD200 o fragmento de enlace CD200 del mismo está proyectado para aumentar una respuesta inmune, es conveniente un anticuerpo anti-CD200 que carezca de función efectora.
En algunas modalidades, los métodos aquí descritos pueden incluir, después de administrar un anticuerpo anti-CD200, monitorear al humano con respecto a una mejoría en el trastorno y/o uno o más síntomas del mismo. El monitoreo de un humano con respecto a la mejoría en un trastorno (por ejemplo, un cáncer, una condición inflamatoria, o un trastorno asociado con pérdida de huesos), tal como aquí se define, significa evaluar al sujeto con respecto a un cambio en el parámetro de la enfermedad, por ejemplo, una mejoría en uno o más síntomas de la enfermedad. En algunas modalidades, se lleva a cabo una evaluación de al menos 1 hora, por ejemplo, al menos 2, 4, 6, 8, 12, 24, ó 48 horas, o al menos 1 día, 2 días, 4 días, 10 días, 13 días, 20 días o más, o al menos 1 semana, 2 semanas, 4 semanas, 10 semanas, 13 semanas, 20 semanas o más, después de la administración. El humano puede ser evaluado en uno o más de los siguientes períodos: antes de comenzar el tratamiento; durante el tratamiento; o después de que se han administrado uno o más elementos del tratamiento. La evaluación puede incluir evaluar la necesidad de tratamiento adicional, por ejemplo, evaluar si se debe alterar una dosificación, frecuencia de administración o duración del tratamiento. También puede incluir evaluar la necesidad de agregar o eliminar una modalidad terapéutica seleccionada, por ejemplo, agregar o eliminar cualesquiera de los tratamientos de un trastorno aquí descrito.
En algunas modalidades, el monitoreo del progreso y/o efectividad de un tratamiento terapéutico, incluye monitorear el nivel de expresión CD200 antes y después del tratamiento. Por ejemplo, los niveles de pre-tratamiento de CD200 puede ser confirmados, y después de al menos una administración de la terapia, los niveles de CD200 pueden volver a ser determinados. Una disminución en los niveles de CD200 puede ser indicativa de un tratamiento efectivo (ver más adelante). La medida de los niveles CD200 puede ser utilizada por un practicante como una guía para incrementar la cantidad de dosificación o frecuencia de la terapia. Deberá quedar entendido que los niveles CD200 pueden ser monitoreados directamente o, como alternativa, que puede monitorear cualquier marcador que se correlacione con CD200.
Los inventores también han descubierto, que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un paciente con cáncer que comprende las células que expresan CD200, se reduce la expresión CD200 en las células de cáncer. Tal como se observó anteriormente, las células de cáncer han evolucionado en una cantidad de formas para evadir la detección por parte del sistema inmune, el cual puede identificar células malignas dentro un organismo huésped, y exterminar las células antes de que se desarrolle un cáncer.
Ver por ejemplo las Publicaciones de Geertsen y asociados, (1999) Int J Mol Med 3(11:49-57; Kerebijn y asociados, (1999) Crit Rev Oncol Hematol 31 (11:31-53: y Pardoll (2003) Annu Rev Immunol 2J_:807-39. Un mecanismo potencial a través del cual las células de cáncer escapan la inmunovigilancia, es la expresión o sobre-expresión de la proteína CD200 inmunosupresora. De hecho, la proteína CD200 ha mostrado ser expresada o sobreexpresada en una variedad de células de cáncer humano, incluyendo, por ejemplo, células de leucemia linfocítica crónica de célula B, células de cáncer de próstata, células de cáncer de seno, células de cáncer de colon, y células de cáncer de cerebro. Ver por ejemplo la Publicación de Kawasaki y asociados, (2007) Biochem Biophys Res Commun 364(41:778-782: Kretz-Rommel y asociados, (2007), supra; y Siva y asociados, (2008) Cáncer Immunol Immunoter 57(7):987-96. Por lo tanto, aunque la descripción no pretende limitarse a teoría o mecanismo de acción alguno en particular, los inventores consideran que la desactivación dependiente de anticuerpo anti-CD200 de CD200 en células de cáncer, libera la inhibición de la inmunovigilancia y permite que el sistema inmune identifique y combata en forma más efectiva el cáncer.
Por consiguiente, se considera como benéfico administrar al humano un anticuerpo anti-CD200 en cualquier cantidad y con una frecuencia suficiente para sostener la expresión reducida de CD200 por parte de las células de cáncer en el humano. Los métodos para detectar la expresión o un cambio en la expresión de CD200 por parte de las células de cáncer son bien conocidos en la técnica (por ejemplo, técnicas de manchado Western, inmunohistoquímica, y citometría de flujo) y aquí se describen. Por ejemplo, después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un humano, se puede determinar el nivel de expresión de CD200 por parte de las células de cáncer mediante análisis de citometría de flujo de las células de cáncer presentes en una muestra biológica obtenida de un paciente. Se puede comparar el nivel de expresión CD200 de células de cáncer post-tratamiento, con un nivel de expresión de control y/o el nivel de expresión de las células de cáncer del paciente antes del tratamiento con el anticuerpo, en donde una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer, indica que el anticuerpo anti-CD200 se ha administrado al humano en una cantidad y con una frecuencia suficiente para reducir la expresión de CD200 por parte de las células de cáncer.
A través de un proceso interactivo, un practicante médico puede determinar la cantidad de dosis adecuada, y la frecuencia de administración de cada dosis, requerida para mantener un nivel reducido de expresión CD200 por parte de las células de cáncer en el paciente. Por ejemplo, un practicante médico puede administrar a un paciente con cáncer al menos dos (por ejemplo, al menos tres, cuatro, cinco, seis, siete, u ocho o más) veces un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad que reduce (o se espera al menos que reduzca) el nivel de expresión de CD200 por parte de las células de cáncer. Las al menos dos dosis deben estar separadas en tiempo por al menos un (por ejemplo, al menos dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve, 10, 11, 12, 13, o incluso 14) día(s). Las muestras biológicas (por ejemplo, muestras de sangre) que contienen células de cáncer, se obtienen del paciente en varios momentos, por ejemplo, antes de la primera administración del anticuerpo anti-CD200, entre la primera dosis y al menos una dosis adicional, y al menos una recolección de muestra biológica después de la segunda dosis. En algunas modalidades, se pueden recolectar muestras biológicas, al menos dos veces entre dosis y/o al menos una vez después de que se administra la dosis al final al paciente. Las células de cáncer en cada muestra biológica obtenida, posteriormente son interrogadas con respecto a la expresión CD200 para determinar si la cantidad y/o la frecuencia de administración del anticuerpo anti-CD200, son suficientes para mantener un nivel reducido de expresión CD200 por parte de las células de cáncer. Equipadas con la información con respecto a la expresión CD200 por parte de las células de cáncer del paciente con el tiempo y el efecto en la expresión CD200 por parte de las células con el tiempo mediante la administración del anticuerpo anti-CD200 al paciente, un practicante médico (y/o una computadora) puede determinar un programa de dosificación de anticuerpo anti-CD200 para el paciente, que sea suficiente para mantener un nivel reducido de expresión CD200 por parte de las células de cáncer del paciente durante el curso del tratamiento.
Tal como se describió anteriormente, los inventores también han observado que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un paciente con un cáncer que comprende células que expresan CD200: (i) se reduce el nivel de expresión de CD200 por parte de los leucocitos, en comparación con el nivel de expresión de CD200 por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control; (¡i) se incrementa el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos, en comparación con el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control; (iii) se reduce la concentración de células T CD200 + , en comparación con la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control; y (¡v) se incrementa la concentración de leucocitos CD200R + , en comparación con la concentración de leucocitos CD200R+ del mismo tipo histológico en una muestra de control. En forma similar, los inventores también han observado que al momento de la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un animal con una enfermedad autoinmune, se reduce la concentración de leucocitos CD200+ y células de médula ósea CD200 + , en comparación con la concentración de dichas células en un animal no tratado con el anticuerpo. Por consiguiente, la descripción también presenta métodos para determinar la cantidad de dosis adecuada, y frecuencia de administración de cada dosis, requerida para mantener, por ejemplo, un nivel reducido de expresión CD200 por parte de los leucocitos en el paciente; un nivel incrementado de expresión CD200R por parte de los leucocitos; una concentración reducida de leucocitos CD200+ y/o células de médula ósea CD200 en el paciente; y/o una concentración incrementada de leucocitos CD200FV en el paciente, durante la duración del tratamiento del paciente con un anticuerpo anti-CD200.
Utilizando la información aquí proporcionada con respecto al efecto(s) inmunomodulador de un anticuerpo anti-CD200 (por ejemplo, la reducción en el nivel de expresión de CD200 por parte de las células de cáncer o el incremento en expresión CD200R por parte de los leucocitos en un paciente tratado con un anticuerpo anti-CD200), puede ser cuestión de experimentación de rutina para un experto en la técnica de la medicina, determinar un programa de dosificación adecuado de un anticuerpo anti-CD200 para un paciente, el cual mantenga en el paciente la presencia de al menos uno de los efectos inmunomoduladores aquí descritos.
Por ejemplo, un anticuerpo aquí descrito puede administrarse como una dosis fija, o en una dosis de miligramo por kilogramo (mg/kg). En algunas modalidades, la dosis también puede ser elegida para reducir o evitar la producción de anticuerpos u otras respuestas inmune del huésped contra uno o más de los anticuerpos activos en la composición. Aunque no se pretende limitar en forma alguna, las dosificaciones de ejemplo de un anticuerpo, incluyen por ejemplo 1-100 Mg/kg, 0.5-50 pg/kg, 0.1-100 pg/kg, 0.5-25 pg/kg, 1-20 Mg/kg, y 1-10 pg/kg, 1-100 mg/kg, 0.5-50 mg/kg, 0.1-100 mg/kg, 0.5-25 mg/kg, 1-20 mg/kg, y 1-10 mg/kg. Las dosis de ejemplo de un anticuerpo aquí descrito incluyen, sin limitación 0.1 pg/kg, 0.5 pg/kg, 1.0 pg/kg, 2.0 pg/kg, 4 pg/kg, y 8 pg/kg, 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg, 1.0 mg/kg, 2.0 mg/kg, 4 mg/kg, y 8 mg/kg. Las dosis de ejemplo (por ejemplo, un anticuerpo anti-CD200 completo tal como samalizumab) también incluyen, por ejemplo, más o igual a 50 mg/m2, 75 mg/m2, 100 mg/m2, 150 mg/m2, 200 mg/m2, 250 mg/m2, 300 mg/m2, 350 mg/m2, 400 mg/m2, 450 mg/m2, 500 mg/m2, 550 mg/m2, 600 mg/m2, y/o 700 mg/m2.
Una composición farmacéutica puede incluir una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo aquí descrito, dichas cantidades efectivas pueden ser fácilmente determinadas por un experto en la técnica basadas, en parte, en el efecto del anticuerpo administrado, o el efecto de combinación del anticuerpo y uno o más agentes activos adicionales, si se utiliza más de un agente. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo aquí descrito, también puede variar de acuerdo con factores tales como el estado de la enfermedad, edad, sexo y peso del individuo, y la capacidad que tiene el anticuerpo (y uno o más agentes activos adicionales) de generar una respuesta deseada en el individuo, por ejemplo, disminución de al menos un parámetro de la condición, por ejemplo, disminución de al menos un síntoma del cáncer y/o la presencia de al menos uno de los biomarcadores del efecto inmunomodulador aquí descrito. Una cantidad terapéuticamente efectiva también es una en la cual cualquier efecto tóxico o perjudicial de la composición, son excedidos por los efectos terapéuticamente benéficos.
La toxicidad y eficacia terapéutica de dichas composiciones se puede determinar a través de procedimientos farmacéuticos conocidos en cultivos celulares o animales experimentales (por ejemplo, modelos animales de cualesquiera de los trastornos aquí descritos). Estos procedimientos pueden ser utilizados, por ejemplo, para determinar la LD50 (la dosis letal para el 50% de la población) y la ED50 (la dosis terapéuticamente efectiva para el 50% de la población). La proporción de dosis entre los efectos tóxicos y terapéuticos, es el índice terapéutico y se puede expresar como la proporción LD5o/ED50. Se prefiere un anticuerpo anti-CD200 que exhibe un alto índice terapéutico. Aunque se pueden utilizar composiciones que exhiben efectos secundarios tóxicos, deberá tenerse cuidado de diseñar un sistema de suministro que dirija los compuestos al sitio del tejido afectado y minimice el daño potencial a las células normales, y de esta forma, se reduzcan los efectos secundarios.
Los inventores también han descubierto una correlación inversa entre la carga de tumor periférico (por ejemplo, carga de célula de tumor B CLL) y la concentración (o número) de células T presentes en pacientes con cáncer. Esto es, entre mayor es la concentración de células T sin cáncer presentes en un paciente con cáncer, menor es la carga de tumor en el paciente. Aunque el descubrimiento no pretende limitarse a teoría o mecanismo de acción alguno en particular, los inventores consideran que un paciente con cáncer pueden recibir un beneficio mejorado de una terapia de anticuerpo anti-CD200 si el paciente con cáncer exhibe niveles normales o elevados de células T al momento de la terapia. En forma similar, los inventores también han determinado que una terapia de anticuerpo anti-CD200 es probable que tenga incluso más eficacia y/o un efecto inmunomodulador más fuerte en pacientes con un sistema inmune intacto, por ejemplo, un sistema inmune que tiene la capacidad de montar una respuesta inmune contra un cáncer presente en el paciente. Tal como se describió anteriormente, los cuatro pacientes con cáncer en el estudio, quienes no habían recibido quimioterapia previa antes del tratamiento con samalizumab, tuvieron una enfermedad clínicamente estable o mejorada después del tratamiento con samalizumab. De hecho, el paciente 102-502, quien no había recibido una terapia inmunosupresora o quimioterapéutica previa a la administración del anticuerpo anti-CD200, exhibió una reducción sustancial en la carga de tumor, que se correlacionó con los cambios en el número de los biomarcadores inmunomoduladores aquí descritos, incluyendo, una marcada reducción en la concentración de células CD45+ B CLL, un incremento en células T CD8 + , una disminución en células T reguladoras, un incremento en células T activadas y un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras.
Por consiguiente, un paciente con cáncer quien tiene un sistema inmune intacto con la capacidad de montar una respuesta inmune para el cáncer del paciente, puede ser seleccionado para tratamiento con un anticuerpo anti-CD200. La selección puede incluir, por ejemplo, cuantificar la concentración de células CD3+ presentes en una muestra biológica de un paciente que padece de un cáncer; y administrar al paciente el anticuerpo anti-CD200 en una cantidad efectiva para tratar el cáncer en el paciente, si el paciente tiene una concentración de células T suficiente para aumentar la eficacia de la terapia de anticuerpo anti-CD200 en el paciente. La concentración promedio de células CD3+ en la sangre de un sujeto saludable y un humano que tiene un cáncer, tal como B-CLL, es bien conocida en la técnica. En algunas modalidades, una concentración suficiente de células CD3+ en la muestra biológica es una concentración de células CD3+ que es mayor a 300 (por ejemplo, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575, 600, 625, 650, 675, 700, 725, 750, 775, 800, 825, 850, 875, 900, 925, 950, 975, 1000, 1100, 1200, o 1300 o más) células por microlitro. En algunas modalidades, una concentración suficiente de células CD3+ en la muestra biológica es una concentración de células CD3+/CD4+ que es mayor o igual a 200 (por ejemplo, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, o 500 o más) células por microlitro. En algunas modalidades, una concentración suficiente de células CD3+ en la muestra biológica es una concentración de células CD3+/CD8+ que es mayor o igual a 150 (por ejemplo, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500, 525, 550, 575, 600, 625, 650, 675, 700, 725, 750, 775, 800, 825, 850, 875, 900, 925, 950, 975, 1000, 1100, 1200, o 1300 o más) células por microlitro. Los métodos para determinar la concentración de células CD3+ son conocidos en la técnica e incluyen, por ejemplo, citometría de flujo. Los métodos para administrar un anticuerpo anti-CD200 en forma terapéutica a un paciente con cáncer son conocidos en la técnica, aquí describen y se elaboran por ejemplo en la Patente Norteamericana No. 7,408,041.
En algunas modalidades, se puede determinar la competencia inmune cuantif ¡cando el número absoluto de ciertas poblaciones de linfocitos en una muestra biológica (por ejemplo, una muestra de sangre) obtenida de un paciente tal como se mide, por ejemplo, mediante citometría de flujo. Ver, por ejemplo las Publicaciones de Shearer y asociados (2003) J Allergy Clin Immunol 112(51:973-980 y Paglieroni y Holland (1994) Transfusión 34:512-516. Por ejemplo, en algunas modalidades, la competencia inmune esté indicada por un conteo de limfocito CD45 + , mediante citometría de flujo de: 0.66-4.60 x 103 células/µ?- (para pacientes 0 to 17 años of age); 0.99-3.15 x 103 células/µ?- (para pacientes aged 18 to 55 años); or 1.00-3.33 x 103 células/µ.- (para pacientes mayores a 55 años) .
En algunas modalidades, se puede determinar la competencia inmune mediante la cuantif icación del número absoluto de células T CD3+ mediante citometría de flujo, en una muestra biológica obtenida de un paciente. Por ejemplo, en algunas modalidades, la competencia inmune está indicada por un conteo de linfocito CD3+ por ejemplo, mediante citometría de flujo de: 2,500-5,500 células/ L (para pacientes 0 a 2 meses de edad); 2,500-5,600 células/µ.- (para pacientes de 3 a 5 meses de edad); 1,900-5,900 células/pL (para pacientes de 6 a 11 meses de edad); 2,100-6,200 células/µ?- (para pacientes de 12 a 23 meses de edad); 1 ,400-3,700 células/µ?- (para pacientes de 2 a 5 años de edad); 1,200-2,600 células/µ?- (para pacientes de 6 a 11 años de edad); 1,000-2,200 células/µ-. (para pacientes de 12 a 17 años de edad); 677-2,383 células/µ?- (para pacientes de 18 a 55 años de edad); o 617-2,254 células/µ?. (para pacientes mayores a 55 años de años).
En algunas modalidades, se puede determinar la competencia inmune, cuantif ¡cando el número absoluto de células B CD19+, por ejemplo, mediante citometría de flujo, en una muestra biológica obtenida de un paciente. Por ejemplo, en algunas modalidades, la competencia inmune está indicada por un conteo de célula B CD19+ mediante citometría de flujo de:: 300-2,000 células/µ?- (para pacientes de 0 a 2 meses de edad); 430-3,000 células/µ?- (para pacientes de 3 a 5 meses de edad); 610-2,600 células/µ?- (para pacientes de 6 a 11 meses de edad); 720-2,600 células/µ.- (para pacientes de 12 a 23 meses de edad); 390-1 ,400 células/µ?- (para pacientes de 2 a 5 años de edad); 270-860 células/µ?- (para pacientes de 6 a 11 años de edad); 110-570 células/µ?- (para pacientes de 12 a 17 años de edad); 99-527 células/µ?- (para pacientes de 18 a 55 años de edad); o 31-409 células/pL (para pacientes mayores a 55 años de edad).
En algunas modalidades, se puede determinar la competencia inmune cuantificando el número absoluto de células Exterminadoras Naturales (NK) CD16 + CD56\ por ejemplo, mediante citometría de flujo, en una muestra biológica obtenida de un paciente. Por ejemplo, en algunas modalidades, la competencia inmune está indicada por el conteo de células NK CD16 + CD56 + , mediante citometría de flujo de: 170 a 1,100 (para pacientes de 0 a 2 meses de edad); 170-830 células/pL (para pacientes 3 a 5 meses de edad); 160 a 950 células/pL (para pacientes de 6 a 11 meses de edad); 180-920 células/µ?-(para pacientes de 12 a 23 meses de edad); 130 a 720 células/µ-- (para pacientes de 2 a 5 años de edad); 100 a 480 células/µ?- (para pacientes de 6 a 11 años de edad); 110 a 570 células/µ?- (para pacientes de 12 a 17 años de edad); 101 a 678 células/µ?. (para pacientes de 18 a 55 años); o 110 a 657 células/µ?. (para pacientes mayores a 55 años de edad).
En algunas modalidades, la competencia inmune se puede determinar cuantif icando el número absoluto de células T auxiliares CD4+, por ejemplo, mediante citometría de flujo, en una muestra biológica obtenida de un paciente. Por ejemplo, en algunas modalidades, la competencia inmune está indicada por un conteo de célula T auxiliar CD4 + , mediante citometría de flujo de: 1,600 a 4,000 (para pacientes de 0 a 2 meses de edad); 1,800 a 4,000 células/µ?. (para pacientes de 3 a 5 meses de edad); 1,400 a 4,300 células/pL (para pacientes de 6 a 11 meses de edad); 1,300 a 3,400 células/µ?- (para pacientes de 12 a 23 meses de edad); 700 a 2,200 células/µ?- (para pacientes de 2 a 5 años de edad); 650 a 1,500 células/µ.. (para pacientes de 6 a 11 años de edad); 530 a 1,300 células/µ?. (para pacientes de 12 a 17 años de edad); 424 a 1,509 células/pL (para pacientes de 18 a 55 años de edad); o 430 a 1,513 células/µ?-(para pacientes mayores a 55 años de edad).
En algunas modalidades, la competencia inmune se puede determinar cuantif ¡cando el número absoluto de células T CD8 + T por ejemplo, mediante citometría de flujo en una muestra biológica obtenida de un paciente. Por ejemplo, en algunas modalidades, la competencia inmune está indicada por un conteo de célula T CD8 + , mediante citometría de flujo de: 560 a 1,700 (para pacientes de 0 a 2 meses de edad); 590 a 1,600 células/pL (para pacientes de 3 a 5 meses de edad); 500 a 1,700 células/pL (para pacientes de 6 a 11 meses de edad); 620 a 2,000 células/pL (para pacientes de 12 a 23 meses de edad); 490 a 1,300 células/pL (para pacientes de 2 a 5 años de edad); 370 a 1,100 células/pL (para pacientes de 6 a 11 años de edad); 330-920 células/pL (para pacientes de 12 a 17 años de edad); 169 a 955 células/µ?- (para pacientes de 18 a 55 años de edad); o 101 a 839 células/^L (para pacientes mayores a 55 años de edad).
Quedará entendido que los conteos de célula inmune que caen debajo de estos niveles, tal como se mide en una muestra biológica obtenida de un paciente, pueden indicar que el paciente está inmunocomprometido. Los conteos de célula inmune que caen dentro de uno o más de los rangos establecidos anteriormente, pueden indicar que el paciente está inmunocompetente y probablemente reciba un beneficio mejorado de una terapia de anticuerpo anti-CD200 aquí descrita. Cualesquiera de los métodos aquí descritos pueden incluir ensayar una muestra biológica para determinar: (a) el número por microlitro de uno o más subconjuntos de célula inmune aquí descritos y/o (b) si los números ensayados caen dentro de un rango predeterminado tal como los rangos predeterminados descritos anteriormente.
En algunas modalidades, los métodos aquí descritos pueden incluir identificar o seleccionar un sujeto que tiene un sistema inmune intacto, por ejemplo, uno competente para montar una respuesta inmune contra el cáncer presente en el sujeto. Los métodos para determinar si un sistema inmune es competente para montar una respuesta inmune contra un cáncer, son bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, un practicante médico puede ensayar para respuestas de anticuerpo (por ejemplo, IgG, IgM o IgA) específicas para cáncer, probando la presencia de anticuerpos que enlazan en forma sistémica a tejido de cáncer (por ejemplo, en suero) o, por ejemplo, en diversos sitios de mucosa (por ejemplo, en saliva o lavados gástricos o bronqueoalveolares) utilizando ensayos in vitro familiares para los expertos en la técnica, por ejemplo una ELISA. Los practicantes también pueden evaluar la inmunocompetencia general del paciente, evaluando uno o más de: (a) la capacidad para montar una respuesta proliferativa normal a mitógenos (por ejemplo PHA o LPS) o estimulación de anticuerpo anti-CD3; (b) proporciones de célula CD4 + : célula CD8+ en un rango normal predeterminado (por ejemplo, >1.0); y (c) respuestas inmune específicas de tumor tal como cuantificación de células T específicas para antígenos de tumor utilizando por ejemplo, ELISPOT o análisis de tetrámero o citocina.
Como alternativa, o en forma adicional, ya que las respuestas de célula T CD4+ generalmente son requeridas para respuestas de anticuerpo, las respuestas de célula T CD4+ in vitro al cáncer pueden medirse utilizando métodos conocidos en la técnica. Dichos métodos incluyen proliferación de célula T CD4+ o ensayos de producción de linfocina (por ejemplo, interleucina-2, interleucina-4, o interferón-?). Parte de la determinación puede incluir una evaluación/valoración cuantitativa o cualitativa para ver si al paciente se le ha administrado previamente una terapia quimioterapéutica o inmunosupresora, ya que dichas terapias son conocidas por inhibir el sistema inmune del paciente al cual se administran.
Los siguientes ejemplos pretenden ilustrar, no limitar, la presente invención.
Ejemplos Ejemplo 1. Resultados preliminares de una prueba de escalado de dosis que evalúa un anticuerpo anti-CD200 en humanos Samalizumab (Alexion Pharmaceuticals, Inc.) es un anticuerpo monoclonal humanizado, recombinante de primera clase que actualmente está siendo evaluado en forma clínica para el tratamiento de B-CLL. El anticuerpo inhibe la interacción entre CD200 y CD200R, y por lo tanto, en pacientes con cánceres que expresan CD200, inhibe la supresión inmune dependiente de CD200. Por consiguiente, la administración al paciente de samalizumab, permite que el sistema inmune del paciente identifique en forma adecuada y erradique el cáncer.
Se llevó a cabo una prueba de escalado de dosis en curso, para evaluar la seguridad y dosis máxima tolerada (MTD) de samalizumab en pacientes con mieloma múltiple (MM) o B-CLL de relapso o refractarios utilizando un diseño Fibonacci modificado de tres pacientes por cohorte. Los cohortes fueron expandidos a seis pacientes si ocurrían toxicidades que limitaran la dosis (DLT). Los pacientes del estudio recibieron una dosis intravenosa simple por un ciclo de 28 días, y dosis intravenosas adicionales opcionales de samalizumab en intervalos de 28 días. Se han evaluado un total de siete cohortes, que fluctúan de 50 mg/m2 a 600 mg/m2 por ciclo de tratamiento. El estudio ha evaluado en pacientes, entre otras cosas, los conteos de sangre completa, exploraciones de tomografía computarizada (CT), evaluaciones de seguridad estándar, medidas farmacocinéticas (PK) y farmacodinámicas (PD) del anticuerpo; y si se ha generado en los pacientes una respuesta de anticuerpo anti-samalizumab.
El estudio tiene inscritos a 26 pacientes B-CLL, incluyendo tres pacientes con mieloma múltiple (MM) y un paciente con linfoma linf ocítico pequeño (SLL), en cohortes de siete (7) dosis, con dosis que fluctúan de 50 mg/m2 a 600 mg/m2. Dos de los pacientes MM fueron inscritos en el cohorte de 500 mg/m2, y uno en el cohorte de 600 mg/m2. El paciente SLL fue inscrito en el cohorte de 500 mg/m2. Cuatro pacientes no habían recibido quimioterapia previa para el cáncer, mientras que los otros 22 pacientes habían recibido un promedio de dos regímenes (que fluctúan de 1 a 9 ciclos por paciente) de quimioterapia antes de la administración de la primera dosis de samalizumab. Hubieron 18 pacientes hombres y 8 pacientes mujeres, teniendo los pacientes un rango de edad de 41 a 87 años (siendo la edad promedio 67). Veinte pacientes recibieron dosificación opcional: tres de éstos (uno dosificado en 50 mg/m2; dos dosificados en 200 mg/m2), desarrollaron una respuesta de anticuerpo antihumano de humano contra samalizumab. Nueve de 13 pacientes quienes completaron cuatro (4) ciclos de dosificación, exhibieron enfermedad estable (SD) con base en evaluaciones en serie de conteos de sangre periférica y exploraciones CT. El protocolo fue enmendado para permitir más de cuatro (4) ciclos de tratamiento para pacientes que exhiben SD en cuatro ciclos. No se observaron reacciones de citocina clínicamente adversas. Ocurrió una muerte no relacionada con la malignidad, no relacionada con fármaco. Los eventos adversos en su mayoría fueron de leves a moderados en severidad, y no se observó dosis máxima tolerada (MTD) al final de seis períodos de evaluación del cohorte. Samalizumab exhibe un incremento lineal dependiente de la dosis en el área bajo la curva (AUC) del suero. La AUC promedio de los niveles de fármaco en suero (100 a 400 mg/m2) para los primeros cuatro (4) ciclos de tratamiento, es consistente con una relación lineal entre la dosis y AUC (figura 1).
Los resultados iniciales sugieren que samalizumab es generalmente seguro y bien tolerado y exhibe una actividad inmunoduladora deseada en esta población de pacientes, tal como se describe a continuación.
Ejemplo 2. Observación de biomarcadores del surgimiento de un efecto inmunomodulador en humanos tratados con samalizumab Entre los pacientes con poblaciones de células evaluables, el tratamiento con anticuerpos dio como resultado efectos inmunomoduladores observables tanto en células inmune como en células de cáncer B-CLL en la sangre periférica. En la tabla 1 se muestra un resumen de los efectos. Por ejemplo, se observó una reducción en células T CD200+ en 19 de 20 pacientes (95%), después de la administración de samalizumab (Tabla 1).
Tabla 1. Dosificación y Parámetros Farmacodinámicos (PD) por cohorte "Anticuerpo" se refiere a samalizumab "N" es el número de pacientes.
"HAHA" se refiere al surgimiento de una respuesta en anticuerpo anti-humano de humano contra samalizumab en el paciente. aTh1 detectadas en cualquier punto de tiempo durante el tratamiento del paciente.
Más de tres pacientes inscritos para evaluar la seguridad de dosis múltiple. 0 Se refiere al mismo paciente. d Sin respuesta HAHA detectada. e Dos de siete pacientes eran pacientes con mieloma múltiple (MM). f La información de citocina Th1 no estuvo disponible para un paciente en este cohorte. 9 Paciente que padece de mieloma múltiple.
"NA" se refiere a no aplicable.
La figura 2 proporciona un análisis representativo de pacientes tratados que muestran una reducción en células T CD20CT. Tal como se muestra en la figura 3, la reducción de células T CD200+ en los pacientes fue temporal, comenzando a recuperarse las células T CD200+ a los niveles pre-tratamiento alrededor del día 14. Sin embargo, la administración de una segunda dosis de samalizumab a estos pacientes nuevamente, dio como resultado una reducción temporal en la concentración de células T CD200+ (figura 3). La naturaleza temporal del efecto fue observada en forma más frecuente en dosis más bajas de samalizumab (por ejemplo, 50 a 200 mg/m2), en comparación con un efecto sostenido en mayores dosis. (300 a 500 mg/m2) del anticuerpo. Esto indicó que el efecto inmunomodulador del anticuerpo anti-CD200 en pacientes fue dependiente de la dosis, y que la modificación de un programa de dosificación para mantener el efecto inmunomodulador en pacientes, puede lograrse a través de uno o ambos de un incremento en la dosis de samalizumab y/o una administración más frecuente de samalizumab.
La reducción o recuperación en células T CD200+, no estuvo asociada con un cambio general en la concentración total de células T CD3+ en los pacientes, lo que sugiere que las células T CD200+ están ya sea desactivando la expresión CD200 y/o están siendo movilizadas fuera de la periferia, en lugar de ser eliminadas. (Samalizumab no bloquea en forma cruzada el enlace del anticuerpo utilizado para detectar expresión CD200 mediante leucocitos en las muestras de sangre del paciente, y por lo tanto no afecta sustancialmente la capacidad para detectar la expresión CD200 utilizando estos ensayos) .
Además, un nivel elevado de expresión CD200R en subconjuntos de leucocito (por ejemplo, subconjuntos de leucocito CD200R+/CD4 + ) el día siete (7) después de la administración de samalizumab, también se observó en ocho de 19 pacientes (ver por ejemplo, la figura 4). Las reducciones en células CD200+ e incrementos en expresión CD200R mediante leucocitos, fueron observadas predominantemente en las poblaciones de célula T CD4+ (figura 4). Tal como se describió anteriormente, los Incrementos en la expresión CD200R por parte de los subconjuntos de leucocitos, pueden ser el resultado de la compensación por parte de las células, a la reducción en la expresión CD200.
Diez de 25 pacientes (40%) exhibieron respuestas de citocina Th1 de primera dosis moderada, en tanto que veintidós de veinticinco (88%) pacientes tuvieron citocinas Thl detectables en uno o más puntos de tiempo durante el estudio. Esto también es consistente con la actividad inmunomoduladora de samalizumab en los pacientes.
También se observó una pérdida de células T reguladoras (Tregs) en pacientes a los que se les administró samalizumab. Particularmente cuatro de nueve (44.4%) pacientes con enfermedad clínicamente estable o mejorada exhibe una reducción en Tregs, en tanto que únicamente cinco de dieciséis (31.2%) pacientes, cuya enfermedad progresó clínicamente, exhibieron una pérdida similar de Tregs (figura 5).
Una reducción de expresión de proteína CD200 mediante células de tumor B-CLL en las sangre periférica, también fue observada en 14 de 21 pacientes (67%) después de la administración de samalizumab. La reducción fue temporal en dosis menores de samalizumab (por ejemplo, 50 a 200 mg/m2), con expresión CD200 por parte de células B-CLL comenzando a recuperarse a (o casi a) los niveles pre-tratamiento alrededor del día 14. Sin embargo, la administración de una segunda dosis de samalizumab a estos pacientes nuevamente dio como resultado una reducción temporal en la expresión de proteína CD200 por parte de las células (figura 6). Se observó una pérdida sostenida de CD200 en células de tumor B-CLL en dosis mayores (300 a 500 mg/m2) del anticuerpo. Tal como se observó anteriormente, este resultado indicó en forma adicional que el efecto inmunomodulador del anticuerpo anti-CD200 en pacientes fue dependiente de la dosis, y que la modificación de una estrategia de dosificación para mantener el efecto inmunomodulador en los pacientes, puede lograrse a través de uno o ambos de un incremento en la dosis de samalizumab y/o una administración más frecuente de samalizumab. Dicha estrategia de dosificación de anticuerpo anti-CD200, probablemente proporcionará un beneficio clínico mejorado a los pacientes tratados.
Los cambios en la expresión de CD200R y/o CD200 en otros subconjuntos de leucocito, o un cambio en la concentración de otros leucocitos CD200+ o CD200R+ no se observó debido a una carencia de cantidad suficiente de células, para realizar dicha observación.
De los nueve pacientes que exhibieron enfermedad estable, uno fue del cohorte 1, tres fueron del cohorte 2, uno en cada uno de los cohortes 3, 4 y 5, y dos en el cohorte de dosis mayor (500 mg/m2). Los efectos inmunomoduladores asociados con anticuerpo anti-CD200 de ejemplo observados en los pacientes, son como se indican a continuación: 1. Células T CD4VCD200 : Todos los pacientes con enfermedad estable en los cohortes 1, 2 y 3 mostraron una reducción temporal en las células T CD200/CD4+ después de la primera y subsecuentes dosis de samalizumab. El paciente en los cohortes 4, 5 y 6 con enfermedad estable, exhibe una reducción sostenida en células T CD200+/CD4 + . 2. Células T CD200RVCD4†. Uno de tres pacientes en el cohorte 2 con enfermedad estable, el paciente en el cohorte 3, y el paciente en el cohorte 4 (todos con enfermedad estable) exhibieron un incremento en las células T CD200R+/CD4 + después de la primera dosis.
Estos pacientes con enfermedad estable tuvieron números variantes de células T en la línea de base (2%, 2%, 14%, 23% y 39% de los leucocitos CD45 + ) y el porcentaje de las células T CD47CD200+ varió de 10 a 35% de células T CD3+ totales en la línea de base en estos pacientes. Además, en todos los pacientes con enfermedad estable, se redujo la expresión de CD200 en las células B CLL.
Estos resultados indican que el anticuerpo anti-CD200 tiene la capacidad de producir un efecto inmunomodulador en pacientes a quienes se administró el anticuerpo. Ya que los nueve pacientes tratados con samalizumab exhibieron enfermedad estable en cuatro ciclos de tratamiento, los biomarcadores también pueden indicar que la dosis de samalizumab, en virtud de su efecto inmunomodulador observado en el humano, es suficiente para lograr un efecto clínicamente significativo en la enfermedad.
Ejemplo 3. Biomarcadores. efecto inmunomodulador y eficacia de tratamiento samalizumab en pacientes quienes no han recibido previamente quimioterapia Tal como se describió anteriormente, cuatro de los pacientes inscritos en el estudio no había recibido quimioterapia antes de la terapia con samalizumab. Los cuatro de estos pacientes, recibieron terapia de samalizumab y exhibieron enfermedad mejorada o clínicamente estable -cuatro de los nueve que respondieron. Uno de los cuatro pacientes, el paciente 102-502, es un hombre de 66 años de edad, quien se presentó con CLL avanzado (RAI etapa 4 a la entrada del estudio sin tratamiento previo), incluyendo una masa abdominal grande y fatiga al momento de la inscripción. Antes de comenzar con el régimen de tratamiento de anticuerpo anti-CD200, el paciente 102-502 no había recibido tratamientos de quimioterapia algunos u otras terapias inmunosupresoras para CLL. A las pocas semanas después de recibir la primera dosis de 400 mg/m2 de samalizumab, la masa abdominal del paciente había reducido en un 57.6%, tal como se determina mediante exploración CT. El tratamiento del paciente con samalizumab, continuó durante cuatro ciclos adicionales (4 dosis) en 400 mg/m2. Después del cuarto ciclo, la masa abdominal del paciente había reducido en forma adicional - un total de un 71% de reducción desde el momento de la inscripción. La fatiga del paciente también se había eliminado. El paciente había recibido 13 dosis de samalizumab administrada una vez al mes y había logrado una respuesta parcial (PR).
En forma concomitante con la reducción en la carga de tumor (figura 7A), se observó en este paciente un cambio en el número de biomarcadores inmunomoduladores asociados con anticuerpo anti-CD200. Por ejemplo, al igual que otros pacientes evaluados, la concentración de linfocitos CD200+ (por ejemplo, células T CD200 + CD4 + ) también disminuyó en este paciente durante el curso de tratamiento (figura 8A). Además, la concentración de células B CLL y el nivel de expresión de CD200 a través de las células B CLL restantes, también fueron reducidos dramáticamente en este paciente (figura 8B).
También se observó en el paciente un incremento en células T CD8 + , así como células T CD4+ (figura 7B). En contraste, hubo una pérdida de Tregs en el paciente 102-502 durante el curso de tratamiento. La proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras incrementó con el curso del tratamiento de aproximadamente 2:1, a 3:1, a 4:1, a 5:1, y eventualmente alrededor de 6:1. Ver la figura 9.
Estos resultados indican en forma adicional que el anticuerpo anti-CD200 tiene incluso más capacidad de producir un efecto inmunomodulador en pacientes, y que los cambios en los biomarcadores aquí descritos se correlacionan con un efecto clínicamente significativo en la enfermedad. Dichos cuatro de los nueve pacientes que respondieron, antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, no habían recibido tratamiento quimioterapéutico alguno para CLL, de modo que la inmunosupresión de los pacientes, indica que la administración del anticuerpo anti-CD200 a un paciente con un sistema inmune intacto (o uno que no ha estado comprometido por agentes inmunosupresores) puede recibir probablemente un mayor beneficio terapéutico de una terapia de anticuerpo anti-CD200 aquí descrita.
Ejemplo 4. Eficacia de un anticuerpo anti-CD200 en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune Estudio 0 (Modelo de Prevención). Los anticuerpos anti-CD200 terapéuticos fueron probados con respecto a su capacidad de prevenir, retardar o disminuir la severidad de la producción de los anticuerpos asociados con enfermedad hemolítica autoinmune utilizando un modelo de ratón de la enfermedad. Ver por ejemplo las Publicaciones de Playfair and Marshall-Clarke (1973) Nat New Biol 243:213-214; Naysmith y asociados (1981) Immunol Rev 55:55-87.
Para provocar en los ratones la producción de anticuerpos que enlazan a glóbulos rojos de ratón (RBCs), se administraron 2 x 108 RBCs de rata en forma intraperitoneal (i.p.) a ratones hembra C57BL/6 una vez en el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. La producción de aloanticuerpos RBC anti-rata a través de los ratones inmunizados, fue observada en la segunda semana del estudio, y también se observó alrededor de la semana tres la producción por parte de los ratones, de anticuerpos RBC anti-ratón.
Los ratones inmunizados-RBC de rata fueron divididos en seis grupos experimentales diseñados: Grupo 1 (seis ratones), Grupo 2 (6 ratones), Grupo 3 (8 ratones), Grupo 4 (7 ratones), Grupo 5 (9 ratones) y Grupo 6 (9 ratones). Un grupo adicional -Grupo 7 (6 ratones) - también fue evaluado como un control. Los ratones del Grupo 7 ni fueron inmunizados con RBCs de rata, ni recibieron ninguno de los tratamientos adicionales que se describen más adelante.
Comenzando en el día O (éste es el día de la primera administración de RBCs de rata), los ratones de cada uno de los grupos 2 a 6 se les administró un agente terapéutico o vehículo bajo el siguiente programa: durante cada semana del estudio, cinco dosis de agente o vehículo administradas una dosis al día durante cinco días consecutivos. Los ratones del Grupo 1 fueron tratados únicamente con vehículo - solución salina amortiguada por fosfato (PBS). Los ratones del Grupo 2 fueron tratados bajo el programa de tratamiento anterior utilizando 5 mg/kg de un anticuerpo de Control que no enlaza a CD200, pero posee función efectora (lgG2a). Los ratones del Grupo 3 se trataron bajo el programa de tratamiento antes mencionado con el Anticuerpo 1 - un anticuerpo anti-CD200 (lgG2a) que tiene función efectora - siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 4 fueron tratados con ciclosporina en una dosis de 15 mg/kg. Los ratones del Grupo 5 fueron tratados con un Anticuerpo de Control en 5 mg/kg y ciclosporina en 15 mg/kg. Los ratones del Grupo 6 fueron tratados con el Anticuerpo 1 en una dosis de 5 mg/kg y ciclosporina en una dosis de 15 mg/kg. Los tratamientos de anticuerpo fueron administrados i.p. La ciclosporina fue administrada a los ratones en forma subcutánea (s.c). Los programas de tratamiento y el diseño del Grupo para cada grupo se resumen en la Tabla 2.
Tabla 2. Diseño de Grupo y Programa de Tratamiento para Estudio 0.
N se refiere al número de ratones en cada grupo.
N/A = no aplicable.
Sobre una base semanal, se extrajo sangre de los ratones de los Grupos 1 a 7 antes, durante y después de los tratamientos anteriores, para evaluar mediante citometría de flujo, si el tratamiento afectó el titulador de los anticuerpos RBC anti-ratón y/o anticuerpos RBS anti-rata en los ratones. Para determinar la concentración relativa de los autoanticuerpos anti-ratón producidos en un ratón (por ejemplo, un ratón tratado del Grupo 3), se incubó la sangre completa obtenida del ratón con una preparación de anticuerpo anti-ratón etiquetando en forma fluorescente, para detectar de esta forma la presencia de anticuerpos RBS anti-ratón presentes en la superficie de RBC de ratón en la sangre de los animales. Las células se lavaron con PBS y posteriormente se sometieron a citometría de flujo para evaluar la cantidad relativa de RBCs anti-ratón de ratón enlazadas a las RBSc de ratón como una función de la intensidad de fluorescencia promedio. Entre el día 13 y 27, incrementó la concentración de los autoanticuerpos RBS anti-ratón en los ratones de los Grupos 1, 2, 4, 5, y 6. En contraste, la concentración de loa autoanticuerpos RBC antiratón en los ratones de Grupo 3, fue marcadamente reducida en comparación con la concentración del autoanticuerpo en los otros grupos. Además, la producción del autoanticuerpo por parte de los ratones en el Grupo 3, estuvo marcadamente retrasada, en comparación con los ratones en los otros grupos (figura 10). Por ejemplo, el 50% de los ratones en los Grupos 1, 2, 4, 5 y 6 desarrolló autoanticuerpos entre el día 20 y 27 del estudio. En contraste, no ocurrió la producción de autoanticuerpo en al menos el 50% de los ratones en el Grupo 3, hasta entre el día 27 y el día 34. Estos resultados indican que el Anticuerpo 1, un anticuerpo anti-CD200, en 5 mg/kg, tuvieron la capacidad no únicamente de reducir la concentración de los autoanticuerpos RBC anti-ratón en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune, sino que también tuvo la capacidad de retardar en forma significativa la producción de los autoanticuerpos en los ratones.
Para determinar la concentración relativa de los aloanticuerpos producidos en un ratón (por ejemplo, un ratón tratados del Grupo 3), se incubó el suero obtenido del ratón con una muestra de las RBCs de rata aisladas durante un tiempo y bajo condiciones suficientes para que cualesquiera aloanticuerpos específicos de RBC de rata presentes en el suero, enlazarán a las RBCs de rata. Las células se lavaron con PBS y posteriormente se incubaron con un anticuerpo etiquetado en forma fluorescente que enlaza a los anticuerpos de ratón. Después de un paso de lavado adicional, las células se sometieron a citometría de flujo para evaluar la cantidad relativa de RBCs anti-rata de ratón enlazadas a las RBCs de rata como la intensidad de fluorescencia promedio. Los sueros obtenidos de los ratones de los Grupos 1, 2, 4, 5 y 6, contenían una concentración en incremento de aloanticuerpos RBC antirata durante el curso del experimento. En contraste, los sueros obtenidos de los ratones del Grupo 3, contenían muchos menos autoanticuerpos RBC anti-rata detectables en comparación con los otros grupos. Estos resultados indicaron además que el Anticuerpo 1 , un anticuerpo anti-CD200, en 5 mg/kg, tuvo la capacidad de reducir el titulador de los aloanticuerpos específicos de RBC, así como los autoanticuerpos anti-RBC, producidos en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune.
Estudio 1 (Modelo de Tratamiento). Se probaron anticuerpo anti-CD200 terapéuticos con respecto a su capacidad para reducir la producción de autoanticuerpos asociados con enfermedad hemolítica autoinmune, utilizando un modelo de ratón de la enfermedad. Para provocar en los ratones la producción de autoanticuerpos que enlazan a glóbulos rojos de ratón (RBCs), 2 x 1 O8 de RBCs de rata fueron administrados en forma intraperitoneal (i.p.) a ratones hembra C57BL/6 una vez el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. La producción de aloanticuerpos RBC anti-rata por parte de ratones inmunizados, fue observada en la segunda semana del estudio, y se observó en la tercera semana la producción por parte de los ratones, de autoanticuerpos RBC anti-ratón.
Los ratones inmunizados con RBC de rata, fueron divididos en cinco grupos designados Grupo 1 (8 ratones), Grupo 3 (8 ratones), Grupo 4 (7 ratones) y Grupo 5 (8 ratones). Un sexto grupo de ratones (designados Grupo 6; 6 ratones) también fue evaluado como un control. Los ratones del Grupo 6, ni fueron inmunizados con RBCs de rata, ni recibieron cualesquiera de los tratamientos adicionales que se describen más adelante.
Comenzando en el día 112, los ratones de cada uno de los Grupos 1 a 5, recibieron un tratamiento adicional de 14 dosis de agente terapéutico o control de vehículo, administradas bajo el siguiente programa: (i) cinco dosis de agente o vehículo administradas una dosis por día durante cinco días consecutivos; (ii) una interrupción en el tratamiento durante dos días; (iii) cinco dosis adicionales del agente o vehículo, administradas una dosis por día durante cinco días consecutivos; otra interrupción del tratamiento de dos días; y (iv) cuatro dosis más de agente o vehículo administrado una dosis al día durante cuatro días consecutivos. Los ratones de Grupo 1 fueron tratados únicamente con vehículo - solución salina amortiguada por fosfato (PBS). Los ratones del Grupo 2 fueron tratados bajo el programa de tratamiento antes mencionado con el Anticuerpo 1 - un anticuerpo anti-CD200 (lgG2a) que tiene función efectora - siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 3 fueron tratados con Anticuerpo 1 en una dosis de 1 mg/kg. Los ratones del Grupo 4 fueron tratados bajo el programa de tratamiento anterior con el Anticuerpo 2 - un anticuerpo anti-CD200 que careció de función efectora - cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 5 fueron tratados bajo el programa de tratamiento anterior, utilizando una dosis de 5 mg/kg de un anticuerpo de Control que no enlaza a CD200, pero posee función efectora (lgG2a). El diseño del Grupo y los programas de tratamiento de cada grupo, se resumen en la Tabla 3.
Tabla 3. Diseño de Grupo v Programa de Tratamiento para Estudio 1 N se refiere al número de ratones en cada grupo.
N/A = no aplicable Sobre bases semanales, se extrajo sangre de los ratones de los Grupos 1 a 6, antes, durante y después de los tratamientos anteriores, para evaluar mediante citometría de flujo, si el tratamiento afectó el titulador de los autoanticuerpos RBC anti-ratón y/o aloanticuerpos RBC anti-rata en los ratones. Entre los días 133 y 137 del estudio, los ratones fueron sacrificados y se recolectaron sus bazos. Para determinar la concentración relativa de los aloanticuerpos producidos en un ratón (por ejemplo, un ratón tratados del Grupo 2), se contactó el suero obtenido del ratón (por ejemplo, el día 133) con una muestra de las RBCs de rata aisladas durante un tiempo y bajo condiciones suficientes para que cualesquiera aloanticuerpos específicos de RBC de rata presentes en el suero, enlazaran a RBCs de rata. Las células fueron lavadas con PBS y posteriormente incubadas con un anticuerpo etiquetado en forma fluorescente que enlaza a anticuerpos de ratón. Después de un paso de lavado adicional, las células se sometieron a citometría de flujo para evaluar la cantidad relativa de las RBCs anti-rata de ratón, enlazadas a las RBCs de rata como la intensidad de fluorescencia promedio. Los inventores observaron que los sueros post-tratamiento obtenidos de los ratones de los 1, 3, 4 y 5 contenían una concentración incrementada de aloanticuerpos RBC anti-rata en comparación con los sueros correspondientes obtenidos de los ratones antes del tratamiento. En contraste, los sueros obtenidos de los ratones del Grupo 2 de post-tratamiento, contenían menos aloanticuerpos RBC anti-rata detectables en comparación con los sueros correspondientes, obtenidos de los ratones antes del tratamiento. Estos resultados indicaron que el anticuerpo 1, un anticuerpo anti-CD200, en 5 mg/kg, tuvo la capacidad de reducir la producción de anticuerpos específicos de RBC en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune.
Los inventores observaron en forma subsecuente que el Anticuerpo 2, tuvo una vida media significativamente más corta en ratones tratados en comparación con la vida media del Anticuerpo 1. Por lo tanto, los resultados observados con el Anticuerpo 2 en el Estudio 1, en otros estudios aquí descritos, puede no reflejar completamente la eficacia real del Anticuerpo 2 en el modelo de enfermedad hemolítica autoinmune, ni el efecto inmunomodulador del anticuerpo en animales.
Estudio 2 (Modelo de prevención). Se probaron anticuerpos anti-CD200 terapéuticos con respecto a su capacidad para prevenir, retardar o disminuir la severidad de, la producción de autoanticuerpos asociados con enfermedad hemolítica autoinmune utilizando el modelo de ratón de la enfermedad antes mencionado.
Para provocar en los ratones la producción de autoanticuerpos que enlazan a glóbulos rojos de ratón (RBCs), las RBCs de rata se administraron en forma intraperitoneal (i.p.) a ratones BALB/c hembra una vez el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. Tal como se describió anteriormente, la producción de los aloanticuerpos RBC anti-rata por parte de los ratones inmunizados, fue observada en la segunda semana del estudio, y en la tercera semana se observó la producción por parte de los ratones, de los autoanticuerpos RBC de anti-ratón.
Los ratones inmunizados con RBC de rata fueron divididos en cinco grupos designados Grupo 1 (8 ratones), Grupo 2 (8 ratones), Grupo 3 (8 ratones), Grupo 4 (8 ratones) y Grupo 5 (8 ratones). Un sexto grupo de ratones (designado Grupo 6; 6 ratones) también se evaluó como un control. Los ratones del Grupo 6 ni fueron inmunizados con RBCs de rata, ni recibieron cualesquiera tratamientos adicionales de los que se describen más adelante.
Comenzando en el día 0 (esto es el día de la primera administración de las RBCs de rata), a los ratones de cada uno de los Grupos 1 a 5, se les administró un agente terapéutico o vehículo bajo el siguiente programa: durante cada semana del estudio, se administraron cinco dosis de agente o vehículo en una dosis al día durante cinco días consecutivos. Los ratones del Grupo 1 fueron tratados únicamente con vehículo - solución salina amortiguada por fosfato (PBS). Los ratones del Grupo 2 se trataron bajo el programa de tratamiento antes mencionado con Anticuerpo 1 - un anticuerpo anti-CD200 (lgG2a) que tiene función efectora - siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 3 fueron tratados con Anticuerpo 1 en una dosis de 1 mg/kg. Los ratones del Grupo 4 fueron tratados bajo el programa de tratamiento anterior con el Anticuerpo 2 - un anticuerpo anti-CD200 que carecía de función efectora - cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 5 fueron tratados bajo el programa de tratamiento anterior utilizando 5 mg/kg de un anticuerpo de Control que no enlaza a CD200, pero posee función efectora (lgG2a). El diseño del Grupo y los programas de tratamiento de cada grupo se resumen en la Tabla 4.
Tabla 4. Diseño de Grupo v Programa de Tratamiento para Estudio 2 N se refiere al número de ratones en cada grupo.
N/A = no aplicable Sobre bases semanales, se extrajo sangre de los ratones de los Grupos 1 a 6 antes, durante y después de los tratamientos anteriores, para evaluar mediante citometría de flujo, si el tratamiento afectó el titulador de los autoanticuerpos RBC anti-ratón y/o aloanticuerpos RBC anti-rata en los ratones. El día 64 ó 65 del estudio, los ratones fueron sacrificados y sus bazos fueron recolectados. (Se sacrificaron cuatro ratones de cada grupo el día 64 y otros cuatro ratones en cada grupo el día 65). Para determinar la concentración relativa de los aloanticuerpos producidos en un ratón (por ejemplo, un ratón tratado del Grupo 3), se contactó el suero obtenido del ratón con una muestra de RBCs de rata aisladas durante un tiempo y bajo condiciones suficientes para que cualesquiera aloanticuerpos específicos de RBC de rata presentes en el suero, enlazaran a RBCs de rata. Las células se lavaron con PBS y posteriormente se incubaron con un anticuerpo etiquetado en forma fluorescente que enlaza a anticuerpos de ratón. Después de un paso de lavado adicional, las células fueron sometidas a citometría de flujo para evaluar la cantidad relativa de RBCs anti-rata de ratón enlazadas a las RBCs de rata como intensidad de fluorescencia promedio. Tal como se muestra en la figura 1, los sueros obtenidos de los ratones de los Grupos 1, 3, 4 y 5, contenían una concentración en incremento de los aloanticuerpos RBC anti-rata durante el curso del experimento. En contraste, los sueros obtenidos de los ratones del Grupo 2 post-tratamiento contenían muchos menos aloanticuerpos RBC anti-rata detectables, en comparación con los otros Grupos. Estos resultados indicaron en forma adicional que el Anticuerpo 1, un anticuerpo anti-CD200, en 5 mg/kg, tuvo la capacidad de reducir el titulador de los aloanticuerpos específicos de RBC producidos en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune.
Estudio 3 (Modelo de Tratamiento). Los anticuerpos anti-CD200 terapéuticos fueron probados con respecto a su capacidad para tratar enfermedad hemolítica autoinmune utilizando un modelo de ratón de la enfermedad. Para provocar en los ratones la producción de autoanticuerpos que enlazan a glóbulos rojos de ratón (RBCs), RBCs de rata fueron administradas en forma intraperitoneal (i.p.) a ratones hembra C57BL/6 una vez el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. Tal como se describió anteriormente, la producción de aloanticuerpos RBC anti-rata por parte de ratones inmunizados, fue observada en la segunda semana del estudio, y en la tercera semana se observó la producción por parte de los ratones de autoanticuerpos RBC anti-ratón. Los ratones inmunizados con RBC de rata fueron divididos en tres grupos designados Grupo 1 (6 ratones), Grupo 2 (3 ratones) y Grupo 3 (5 ratones).
Comenzando el día 86, los ratones de cada uno de los Grupos 1 a 3, recibieron un tratamiento adicional de 10 dosis de un agente terapéutico o control de vehículo administrado bajo el siguiente programa: (i) cinco dosis de agente o vehículo administradas como una dosis al día durante cinco días consecutivos; (ii) una interrupción en el tratamiento durante dos días; y (iii) cinco dosis adicionales del agente o vehículo, administradas una dosis al día durante cinco días consecutivos. Los ratones del Grupo 1 se trataron bajo el programa del tratamiento antes mencionado con el Anticuerpo 1 - un anticuerpo anti-CD200 (lgG2a) que tiene función efectora -siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 2 fueron tratados con Anticuerpo 1 en una dosis de 1 mg/kg. Los ratones del Grupo 3 fueron tratados bajo el programa de tratamiento anterior con el Anticuerpo 2 - un anticuerpo anti-CD200 que carecía de función efectora - cada dosis de 5 mg/kg. El diseño del Grupo y los programas de tratamiento de cada grupo se resumen en la Tabla 5.
Tabla 5. Diseño de Grupo v Programa de Tratamiento para Estudio 3 N se refiere al número de ratones en cada grupo.
N/A = no aplicable Al concluir el estudio, los ratones fueron sacrificados y sus bazos fueron recolectados. Para determinar si la administración del Anticuerpo 1 a los ratones afectó la activación de esplenocitos mediante RBC, además de afectar la producción de anticuerpos anti-RBC en los ratones, se evaluó la activación de esplenocito en la presencia de RBCs utilizando un ensayo de proliferación in vitro. En síntesis, se cultivaron esplenocitos aislados con uno de tres diferentes antígenos -RBCs de ratón, RBCs de rata o albúmina de suero de bovino (control) - o con medio solo. Después de contactar los esplenocitos con los antígenos, se agregó 3H-timidina al medio de cultivo de esplenocito durante aproximadamente 16 horas. El medio fue eliminado y las células recolectadas. La activación relativa de los esplenocitos por parte de los antígenos, posteriormente se midió como una función de la cantidad de 3H-timidina incorporada en el ADN de los esplenocitos.
Tal como se muestra en la figura 12, los esplenocitos de los ratones del Grupo 2 y 3, exhibieron una respuesta proliferativa robusta después de contactarse con RBCs de rata. En contraste, los esplenocitos de los ratones de Grupo 1 proliferaron muy poco en la presencia de RBCs de rata, lo que indica que la administración de un anticuerpo anti-CD200 en 5 mg/kg tuvo la capacidad de inhibir la activación de los esplenocitos mediante RBCs de rata en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune.
Estudio 4 (Modelo de Tratamiento). Tal como se describe anteriormente, para provocar en los ratones la producción de autoanticuerpos que enlazan a glóbulos rojos de ratón (RBCs), se administraron RBCs de rata en forma intraperitoneal (i.p.) a ratones C57BL/6 hembra una vez el día 0 del estudio, y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio.
Los ratones inmunizados con RBC de rata se dividieron en siete (7) grupos designados Grupo 1, Grupo 2, Grupo 3, Grupo 4, Grupo 5, Grupo 6 y Grupo 7. También se evaluó como un control, un octavo grupo de ratones (designado Grupo 8). Los ratones del Grupo 8 ni fueron inmunizados con RBCs de rata, ni recibieron cualesquiera de los tratamientos adicionales que se describen más adelante. Hubieron diez ratones en cada grupo.
Comenzando el día 21, los ratones de cada uno de los grupos 1 a 7, recibieron un tratamiento adicional de uno o más agentes terapéuticos o control de vehículo administrados bajo el siguiente programa: durante cada semana del estudio, se administraron cinco dosis de uno o más agentes o vehículo, en la forma de una dosis al día durante cinco días consecutivos. Los ratones del Grupo 1 se trataron únicamente con vehículo -solución salina amortiguada con fosfato (PBS). Los ratones del Grupo 2 se trataron bajo el programa de tratamiento anterior utilizando una dosis de 5 mg/kg de un anticuerpo de Control que no enlaza a CD200, pero que posee función efectora (lgG2a). Los ratones del Grupo 3 se trataron bajo el programa de tratamiento antes mencionado con Anticuerpo 1 - un anticuerpo anti-CD200 (lgG2a) que tiene función efectora - siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones del Grupo 4 se trataron bajo el programa anterior con 15 mg/kg de ciclosporina. Los ratones del Grupo 5 se trataron bajo el programa de dosificación anterior tanto con el anticuerpo de Control (en 5 mg/kg) como ciclosporina (en 15 mg/kg). Los ratones del Grupo 6 se trataron bajo el programa de dosificación anterior tanto con Anticuerpo 1 (en 5 mg/kg) como con ciclosporina (en 15 mg/kg). Los ratones del Grupo 7 se trataron bajo el programa de dosificación anterior tanto con Anticuerpo 1 (en 1 mg/kg) como ciclosporina (en 15 mg/kg). El diseño del Grupo y los programas de tratamiento de cada grupo se resumen en la Tabla 6.
Tabla 6. Diseño de Grupo y Programa de Tratamiento para Estudio 4 N se refiere al número de ratones en cada grupo.
N/A = no aplicable Sobre bases semanales, se extrajo sangre de los ratones los Grupos 1 a 8 antes, durante y después de los tratamientos anteriores para evaluar mediante citometría de flujo, si el tratamiento afectó el titulador de los autoanticuerpos RBC anti-ratón y/ aloanticuerpos RBC anti-rata en los ratones. El día 37 del estudio, los ratones fueron sacrificados y sus bazos fueron recolectados. También se obtuvieron células de médula ósea de los dos huesos fémur y tibia de los ratones. Las células de bazo y médula ósea se sometieron a citometría de flujo tal como se muestra más adelante (Ejemplo 5).
Estuvo presente una concentración reducida de aloanticuerpos RBC anti-rata en sueros post-tratamientos, obtenidos de ratones de los Grupos 3 y 4 en comparación con los sueros pre-tratamiento correspondientes. La reducción posttratamiento en aloanticuerpos RBC anti-rata fue incluso mayor en los ratones de los Grupos 6 y 7, indicando que la ciclosporina y el Anticuerpo 1 tienen un efecto sinérgico en la reducción de la producción de aloanticuerpo en los ratones. Estos resultados indicaron incluso en forma adicional que un anticuerpo anti-CD200 tuvo la capacidad de reducir el titulador de los anticuerpos específicos de RBC producidos en un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoínmune y que un anticuerpo anti-CD200 es útil para tratar la enfermedad.
Ejemplo 5. Administración de un anticuerpo anti-CD200 a ratones, afecta la concentración de poblaciones de célula de esplenocito y médula ósea en los ratones Los esplenocitos obtenidos de los ratones de Estudio 1, se evaluaron para determinar el porcentaje de células que expresan CD200. Las células se recolectaron de los bazos de los ratones y se incubaron con una composición de anticuerpos anti-CD200 etiquetados con biotina (pollclonal) durante una cantidad de tiempo y bajo condiciones suficientes para permitir el enlace de los anticuerpos a CD200, si está presente en las células. Se utilizó la preparación del anticuerpo policlonal para evitar o disminuir cualquier efecto de enmascaramiento debido a la presencia de anticuerpo anti-CD200 terapéutico residual (por ejemplo, Anticuerpo 1 o Anticuerpo 2) en las células. Las células se lavaron y se incubaron con una porción de estreptavidina etiquetada en forma fluorescente. Después de un paso de lavado adicional, las células se sometieron a citometría de flujo. Tal como se muestra en la figura 13, hubo una reducción marcada en la concentración de esplenocitos CD200 + en los ratones tratados con catorce dosis de 5 mg/kg doses Anticuerpo 1, en comparación con la concentración de esplenocitos CD200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, o Anticuerpo 2.
Los esplenocitos recolectados de los bazos de los ratones del Estudio 2, también se sometieron a manchado y análisis de citometría de flujo, tal como se describió anteriormente. Hubo una marcada reducción en la concentración de esplenocitos CD200+ en ratones tratados en forma crónica con 5 mg/kg de Anticuerpo 1, en comparación con la concentración de esplenocitos CD200+ en ratones tratados con vehículo o anticuerpo de Control. No hubo cambio tampoco en la concentración de esplenocitos CD200+ en los ratones del Grupo 3, tratados con una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1, y los ratones del Grupo 4 tratado con 5 mg/kg de Anticuerpo 2.
Los esplenocitos recolectados de los bazos de los ratones del Estudio 4, también se sometieron a manchado y a análisis de citometría de flujo tal como se describió anteriormente. Hubo una marcada reducción en la concentración de esplenocitos CD200+ en los ratones tratados con 5 mg/kg de Anticuerpo 1 con o sin cicíosporina, en comparación con la concentración de esplenocitos CD200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, cicíosporina sola o una combinación del anticuerpo de Control y cicíosporina. No hubo cambio en la concentración de esplenocitos CD200+ en los ratones del Grupo 7, tratados con un programa de combinación de cicíosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1. También se llevó a cabo un análisis de la intensidad de fluorescencia promedio (MFI) de esplenocitos CD200+ de cada ratón (lo cual es una medida del nivel de expresión relativo de CD200 a través de cada esplenocito CD200 + ). La MFI de los esplenocitos CD200+ de los Grupos 3 y 6, fue reducida en forma marcada en comparación con el MFI de los esplenocitos CD200+ en los Grupos restantes (Grupo 8). Esto indicó que no únicamente la administración del Anticuerpo 1 a los ratones, reduce el número total de esplenocitos CD200 + , sino que las células restantes que no expresan CD200+ en los ratones tratados con Anticuerpo 1, expresan CD200 en niveles mucho menores.
Tomados juntos, estos resultados confirman que la administración de un anticuerpo anti-CD200 a un animal, reduce la concentración de esplenocitos CD200+ en el animal. Los resultados también indican que la reducción transmitida por el anticuerpo anti-CD200 en esplenocitos CD200+ no se ve afectada ni en forma positiva ni en forma negativa por la ciclosporina.
Los inventores también revisaron en forma adicional el efecto de los anticuerpos anti-CD200 en: (i) la concentración de los subconjuntos de linfocito CD200+ de esplenocitos particulares de los ratones del Estudio 4, y (ii) la concentración de los subconjuntos CD2004 particulares de células derivadas de médula ósea de los ratones del Estudio 4.
Concentración de Subconjuntos de Linfocito Esplénico en los Ratones del Estudio 4 Subconjunto de Linfocito CD3*/CD200+ . Se incubó una muestra de esplenocitos de cada uno de los ratones del estudio 4, con una preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD3, para identificar de esta forma la proporción de células CD3+/CD200+ en los bazos de ratones de los Grupos 1 a 8. La población de células CD3+ incluye células T, tales como células T CD4+ y CD8 + . Las células etiquetadas fueron sometidas a citometría de flujo. Hubo una marcada reducción en la concentración de esplenocitos CD3+/CD200+ en ratones tratados en forma crónica con 5 mg/kg del Anticuerpo 1 con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de esplenocitos CD3+/CD200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola, o una combinación de anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo un cambio significativo en la concentración de esplenocitos CD3+/CD200 + en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Subconjunto de Linfocito CD5*/CD200 + Se incubó una muestra de esplenocitos de cada uno de los ratones del Estudio 4 con una preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD5, para identificar de esta forma la proporción de células CD5+/CD200+ en los bazos de los ratones de los Grupos 1 a 8. La población de células CD5+ incluye células T, así como células B (población de célula B1). Las células etiquetadas fueron sometidas a citometría de flujo. Hubo una marcada reducción en la concentración de esplenocitos CD5+/CD200+ en ratones tratados en forma crónica con 5 mg/kg del Anticuerpo 1 con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de esplenocitos CD57CD200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola, o una combinación de anticuerpo de Control y ciclosporina. No hubo cambio significativo en la concentración de esplenocitos CD5+/CD200 + en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg de Anticuerpo 1.
Subconjunto de Linfocito CD19+/CD200+ . Se incubó una muestra de esplenocitos de cada uno de los ratones del Estudio 4, con una preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD19, para identificar de esta forma la proporción de células CD19 + /CD200+ en los bazos de los ratones de los Grupos 1 a 8. La población de células CD19+ incluye células B. Las células etiquetadas fueron sometidas a citometría de flujo. Igual que las células CD5+/CD200+ y las células CD37CD200 + , también hubo una marcada reducción en la concentración de esplenocitos CD19 + /CD200+ en ratones tratados en forma crónica con 5 mg/kg del Anticuerpo 1 con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de esplenocitos CD19+/CD200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo Control, ciclosporina sola, o una combinación de anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo un cambio significativo en la concentración de esplenocitos CD19+/CD200+ en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Subconjunto de Linfocito CD138+/CD200 + . Se incubó una muestra de esplenocitos de cada uno de los ratones del Estudio 4 con una preparación de anti-CD200 policlonal y anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD138, para identificar de esta forma la proporción de células CD138 + /CD200+ en los bazos de ratones de los Grupos 1 a 8. La población de células CD138+ incluye células de plasma. Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo. Una marcada reducción en la concentración de esplenocitos CD 138+/CD200+ en ratones tratados en forma crónica con 5 mg/kg de Anticuerpo 1 con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de esplenocitos C D 138+/C D200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola, o una combinación del anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo cambio significativo en la concentración de esplenocitos CD 1387CD200+ en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Subconjunto de Linfocito F4/F80*. F4/80 es una proteína de transmembrana de 125 kDa presente en la superficie celular de los macrófagos de ratón maduros. Para determinar si la administración de un anticuerpo anti-CD200 afecta la concentración de macrófagos residentes en el bazo, se incubó una muestra de esplenocitos de cada ratón del Estudio 4 con un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a F4/80.
Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo para identificar de esta manera la proporción de células F4/80+ en los bazos de ratones de los Grupos 1 a 8. La concentración de esplenocitos F4/80+ se incrementó en los ratones tratados con 5 mg/kg del Anticuerpo 1 (10 dosis) con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de esplenocitos F4/80+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola o una combinación del anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo cambio significativo en la concentración de esplenocitos F4/80+ en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Tomados juntos, estos resultados indican que la administración de un anticuerpo anti-CD200 reduce una variedad de subconjuntos de esplenocito CD200+, pero incrementa ciertos subconjuntos de macrófago, en animales tratados.
Concentración de Subconjuntos de Célula de Médula Ósea en los Ratones del Estudio 4 Subconjunto de Célula de Médula Ósea CD34+/CD200 Se incubó una muestra de células de médula ósea de cada uno de los ratones, con una preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD34 para identificar de esta forma la proporción de las células CD34+/CD200+ en la médula ósea de ratones de los Grupos 1 a 8. Las células CD34+ incluyen una población de células madre hematopoyéticas (HSCs). Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo, seleccionando también las células que tienen un linaje bajo (Lin"/Low). Hubo una marcada reducción en la concentración de células de médula ósea CD34+/CD200+ en ratones tratados con 5 mg/kg de Anticuerpo 1 (10 dosis) con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de células de médula ósea CD34 + /CD200+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola, o una combinación del anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo un cambio significativo en la concentración de células de médula ósea CD34+/CD200+ en los ratones del Grupo 7, tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Subconjuntos de Célula de Médula Ósea Sca-1+/CD200+ .
Se incubó una muestra de células de médula ósea de cada uno de los ratones, con una preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a Sca-1 para identificar de esta forma la proporción de células Sca-1 +/CD200+ en la médula ósea de ratones de los grupos 1 a 8. Las células Sca-1+ incluye una población de HSCs y células madre mesenquimales (MSCs). Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo seleccionando también las células que tienen linaje de bajo nivel (Lin' Lo ). Hubo una marcada reducción en la concentración de células de médula ósea Sca-1 +/CD200+ en ratones tratados con 5 mg/kg de Anticuerpo 1 (10 dosis) con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de células de médula ósea Sca-17CD200 + en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola o una combinación de anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo cambio significativo en la concentración de células de médula ósea Sca-1/CD200+ en los ratones del Grupo 7, tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg de Anticuerpo 1.
Subconjuntos de Células de Médula Ósea Sca-1+/CD34* .
Se incubó una muestra de células de médula ósea de cada uno de los ratones con un primer anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD34, y un segundo anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a Sca-1, para identificar de esta forma la proporción de células Sca-1+/CD34 + en la médula ósea de ratones de los Grupos 1 a 8. Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo, seleccionando también las células que tienen linaje de bajo nivel (Lin"/Low). Las células Sca-1* /CD34+ /Lin~ incluyen una población de MSCs. Hubo una marcada reducción en la concentración de células de médula ósea Sca-1+/CD34+ en ratones tratados con 5 mg/kg del Anticuerpo 1 (10 dosis) con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de células de médula ósea Sca-1+/CD34 + en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola o una combinación del anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo un cambio significativo en la concentración de células de médula ósea Sca-1+/CD34+ en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Subconjuntos de Célula de Médula Ósea c-kit+/CD200+ . Se incubó una muestra de células de médula ósea de cada uno de los ratones, con la preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a c-kit, para identificar de esta forma la proporción de las células c-kit+/CD200+ en la médula ósea de los ratones de los Grupos 1 a 8. Las células c-kit+ incluyen una población de HSCs y MSCs. Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo, seleccionando también aquellos que tienen linaje de bajo nivel (Lin"/Low). Hubo una marcada reducción en la concentración de células de médula ósea c-kit+/CD200+ en ratones tratados crónicamente con 5 mg/kg de Anticuerpo 1 con 0 sin ciclosporina, en comparación con la concentración de células de médula ósea c-kit+/CD200+ en los ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola o una combinación del anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo cambio significativo en la concentración de células de médula ósea c-kit+/CD200+ en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Subconjunto de Célula de Médula Ósea CD200 CD200R Se incubó una muestra de células de médula ósea de cada uno de los ratones, con la preparación del anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma detectable que enlaza a CD200R para identificar de esta forma la proporción de células CD2007CD200FT en la médula ósea de ratones de los Grupos 1 a 8. Las células etiquetadas se sometieron a citometría de flujo. Hubo una marcada reducción en la concentración de células de médula ósea CD200+/CD200R+ en ratones tratados en forma crónica con 5 mg/kg del Anticuerpo 1 , con o sin ciclosporina, en comparación con la concentración de células de médula ósea CD200+/CD200R+ en ratones tratados con vehículo, el anticuerpo de Control, ciclosporina sola o una combinación del anticuerpo de Control y ciclosporina. Tampoco hubo cambio significativo en la concentración de células de médula ósea CD2007CD200R+ en los ratones del Grupo 7 tratados con un programa de combinación de ciclosporina y una dosis de 1 mg/kg del Anticuerpo 1.
Ejemplo 6. Recuperación de célula de médula ósea y subconiuntos de esplenocito CD200+ después de extracción de terapia de anti-CD200 Estudio 5 (Modelo de Tratamiento). Los anticuerpos anti-CD200 terapéuticos se probaron nuevamente con respecto a su capacidad para modular la concentración de poblaciones de subconjuntos específicos de esplenocitos y células de médula ósea. Se administraron anticuerpos a los ratones dentro del contexto de un modelo de ratón de enfermedad hemolítica autoinmune. Tal como se describió anteriormente, para provocar en los ratones la producción de auto-anticuerpos que enlazan a glóbulos rojos de ratón (RBCs), se administraron 2 x 108 de RBCs de rata en forma intraperitoneal (i.p.) a ratones hembra en BALB/c una vez el día 0 del estudio y posteriormente una vez a la semana durante el resto del estudio. La producción de los aloanticuerpos RBC anti-rata a través de los ratones inmunizados, se observó en la segunda semana del estudio y en la tercera semana se observó la producción, por parte de los ratones, de auto-anticuerpo RBC anti-ratón.
Los ratones inmunizados RBC de rata se dividieron en cinco grupos designados Grupo 2 (20 ratones), Grupo 3 (20 ratones), Grupo 4 (20 ratones), Grupo 5 (15 ratones), y Grupo 6 (15 ratones). También se evaluó como un control un sexto grupo de ratones (designado Grupo 1; 20 ratones). Los ratones del Grupo 1 ni se inmunizaron con RBCs de rata ni recibieron cualesquiera tratamientos adicionales que se describen más adelante.
Comenzando el día 21, los ratones de cada uno de los Grupos 2 a 6, recibieron un tratamiento adicional de 10 dosis de un agente terapéutico o control de vehículo administrado bajo el siguiente programa: (i) cinco dosis de agente o vehículo administrado como una dosis por día durante cinco días consecutivos; (ii) una interrupción en el tratamiento durante dos días; y (Mi) cinco dosis adicionales del agente o vehículo administrado a una dosis por día durante cinco días consecutivos. Se trataron ratones del Grupo 6 únicamente con vehículo - solución salina amortiguada por fosfato (PBS). Los ratones del Grupo 2 se trataron bajo el programa de tratamiento antes mencionado con Anticuerpo 1 - un anticuerpo anti-CD200 (lgG2a) que tiene función efectora - siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones de Grupo 3 se trataron bajo el programa de tratamiento anterior con Anticuerpo 2 - un anticuerpo anti-CD200 que careció de función efectora - siendo cada dosis de 5 mg/kg. Los ratones de Grupo 4 se trataron bajo el programa de tratamiento anterior utilizando una dosis de 5 mg/kg de un anticuerpo de Control que no enlaza a CD200, pero posee función efectora (lgG2a). Los ratones de Grupo 5 se trataron bajo el programa de tratamiento anterior utilizando una dosis de 5 mg/kg de un anticuerpo de Control que no enlaza a CD200 y no posee función efectora. El diseño del Grupo y los programas de tratamiento de cada grupo se resumen en la Tabla 7.
Tabla 7. Diseño de Grupo y Programa de Tratamiento para Estudio 5.
N se refiere al número de ratones en cada grupo.
N/A = no aplicable Sobre bases semanales, se extrajo sangre de los ratones de los Grupos 1 a 6 antes, durante y después de los tratamiento anteriores, para evaluar mediante citometría de flujo, si el tratamiento afectó el titulador de los autoanticuerpos RBC anti-ratón y/o aloanticuerpos RBC anti-rata en los ratones. El día 35 del estudio, tres ratones de cada grupo fueron sacrificados y sus bazos fueron recolectados. También se aisló la médula ósea de los fémures y tibias de cada ratón. Tal como se describió anteriormente, las células fueron etiquetadas con anticuerpos etiquetados en forma detectable (por ejemplo, la preparación de anticuerpo anti-CD200 policlonal y un anticuerpo etiquetado en forma fluorescente adicional) y se sometieron a citometría de flujo. En la Tabla 8 que se encuentra a continuación se muestra un resumen de los resultados.
Tabla 8. Efecto de Anticuerpos Anti-CD200 en Subconiuntos de Esplenocito y Médula Ósea en el Día 35 "*" indica que la reducción en la concentración de un subconjunto de células particulares en ratones tratados con Anticuerpo 2, no es tan profunda como la reducción observada en el mismo sub-conjunto de células en ratones tratados con Anticuerpo 1. "**" indica que la reducción o incremento en la concentración de un subconjunto de células particulares, es relativo a la concentración del subconjunto particular en ratones tratados con vehículo (Grupo 6) y el control de isotipo correspondiente. Por lo tanto, la reducción de esplenocitos CD200+ observado en ratones del Grupo 2, es relativa a la concentración de los esplenocitos CD200+ en ratones de Grupo 6 y ratones de Grupo 4. "-" indica que no se observaron diferencias entre los niveles de Anticuerpo 2 y su Anticuerpo de Control correspondiente .
Del día 35 al día 91, los ratones restantes en cada grupo recibieron inmunizaciones RBC adicionales, pero no tratamientos con los anticuerpos, siendo el propósito determinar si las poblaciones de esplenocitos de células de médula ósea podrían recuperarse con el tiempo. Se sacrificaron tres ratones en cada grupo el día 91, y se recolectaron, tal como se describió anteriormente, sus pasos y médula ósea. Se llevó a cabo un análisis de citometría de flujo en las células aisladas, para determinar si los subconjuntos de población particulares de esplenocitos y células de médula ósea, los cuales se redujeron el día 35, se recuperaron el día 91. Cada una de las poblaciones de células se recuperaron completamente en el día 91, indicando que los efectos inmunomoduladores del anticuerpo anti-CD200 en la concentración de subconjunto de célula de ósea y esplenocitos, son reversibles al momento de la extracción del anticuerpo.
Aunque la presente descripción ha sido descrita con referencia a las modalidades específicas de la misma, deberá quedar entendido para los expertos en la técnica que se pueden realizar varios cambios y que se pueden sustituir equivalentes sin apartarse del espíritu y alcance real de la presente descripción. Además, se pueden realizar muchas modificaciones para adaptar una situación, material, composición de materia, proceso, paso o pasos del proceso particulares al objetivo, espíritu y alcance de la presente descripción. Todas de dichas modificaciones están proyectadas para estar dentro del alcance de la presente descripción.

Claims (266)

REIVINDICACIONES
1. Un método para tratar un trastorno en un paciente, en donde el método comprende administrar a un paciente que padece de un trastorno, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para producir y mantener el surgimiento de un efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 deseado en el paciente, para tratar de esta forma el trastorno en el paciente, en donde el trastorno es seleccionado del grupo que consiste en cáncer, un trastorno asociado con pérdida de huesos, y un trastorno inflamatorio.
2. El método tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque el efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 deseado, está caracterizado por uno o más cambios fisiológicos en el paciente, seleccionados del grupo que consiste en: (i) una reducción en la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de las células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente, antes de la administración del anticuerpo ; (ii) un incremento en la concentración de células T CD8 + en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de células T CD8+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (iii) un incremento en la concentración de células T activadas en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (iv) una reducción en la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de leucocitos CD200FT en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de leucocitos CD200R del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (vi) una la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200; (vii) un incremento en la proporción del porcentaje células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (viii) un nivel disminuido de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de la expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica del paciente antes de la administración del anticuerpo; (ix) un nivel incrementado de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (x) una disminución en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración del uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + correspondientes en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (xi) una disminución en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de linfocitos en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de linfocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente, antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde los linfocitos son células de médula ósea o células esplénicas.
3. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque el trastorno es un trastorno asociado con pérdida de huesos.
4. El método tal como se describe en la reivindicación 3, caracterizado porque el trastorno asociado con pérdida de huesos es un resultado de un mieloma múltiple.
5. El método tal como se describe en la reivindicación 3, caracterizado porque el trastorno asociado con pérdida de huesos es osteoporosis.
6. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 ó 2, caracterizado porque el trastorno es un trastorno inflamatorio.
7. El método tal como se describe en la reivindicación 6, caracterizado porque el trastorno inflamatorio es un trastorno autoinmune.
8. El método tal como se describe en la reivindicación 6, caracterizado porque el trastorno inflamatorio se selecciona del grupo que consiste en osteoartritis, artritis reumatoide, espondiloartropatía, síndrome de dificultad respiratoria, síndrome de POEMS, enfermedad inflamatoria de intestino, enfermedad de Crohn, enfermedad de injerto versus huésped, enfermedad de Castleman multicéntrica, lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, distrofia muscular, diabetes melitus dependiente de insulina, dermatomiositis; polimiositis, lupus eritematoso sistémico, nefritis por lupus, glomerulonefritis, síndrome de Guillain Barre, granulomatosis de Wegener, poliarteritis nodosa, polimialgia reumática, arteritis temporal, síndrome de Sjógren, enfermedad de Behcet, síndrome de Churg-Strauss, arteritis de Takayasu, rinitis, sinusitis, urticaria, erupción, angioedema, dermatitis atópica, alergia por alimentos, alergias por fármacos, alergia por insectos, mastocitosis, colitis ulcerativa y asma.
9. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque el trastorno es un cáncer.
10. El método tal como se describe en la reivindicación 9, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente en una cantidad y con una frecuencia efectiva para mantener una reducción en uno o ambos de: (i) la concentración de células de cáncer, CD200+ en forma relativa a la concentración de células de cáncer CD200+ antes la administración del anticuerpo anti-CD200 y (ii) el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer, en forma relativa al nivel de expresión por parte de las células de cáncer antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, para tratar de esta forma el cáncer.
11. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 10, caracterizado porque comprende además ensayar una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200 para determinar un parámetro seleccionado del grupo que consiste en: (a) la concentración de células T reguladoras; (b) la concentración de células T CD8 + ; (c) la concentración de células T activadas; (d) la concentración de leucocitos CD200 + ; (e) la concentración de leucocitos CD200FT; (f) la proporción del porcentaje de células T activadas por al porcentaje de células T reguladoras; (g) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (h) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (i) la concentración del uno o más subconjuntos de médula ósea CD200; y (j) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea o células esplénicas.
12. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a 11, caracterizado porque comprende además ensayar una muestra biológica obtenida del paciente, antes de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, para determinar uno o más de los parámetros seleccionados del grupo que consiste en: (a) la concentración de células T reguladoras; (b) la concentración de células T CD8 + ; (c) la concentración de células T activadas; (d) la concentración de leucocitos CD200*; (e) la concentración de leucocitos CD200FT; (f) la proporción del porcentaje células T activadas por el porcentaje de células T reguladoras; (g) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (h) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (i) la concentración del uno o más subconjuntos de médula ósea CD200; y (j) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea o células esplénicas.
13. Un método para tratar a un paciente con cáncer, en donde el método comprende administrar al paciente que padece de un cáncer, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para producir y mantener una reducción en uno o ambos de: (i) la concentración de células de cáncer CD200 + , relativas a la concentración de células de cáncer CD200+ antes de la administración del anticuerpo anti-CD200 y (ii) el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer, en forma relativa al nivel de expresión, por parte de las células de cáncer antes de la administración del anticuerpo anti-CD200.
14. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 9 a 13, caracterizado porque el cáncer comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200.
15. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 9 a 13, caracterizado porque el cáncer comprende una pluralidad de células de cáncer que, en forma relativa a las células de no cáncer del mismo tipo histológico del cual se derivan las células de cáncer, sobre-expresan CD200.
16. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 9 a 13, caracterizado porque el paciente es inmunocompetente.
17. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a 13, caracterizado porque el método comprende administrar al menos cuatro dosis de anticuerpo anti-CD200 al paciente.
18. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 2 a 16, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos de dos (2) meses después de la administración del anticuerpo.
19. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 2 a 16, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos de un (1) mes después de la administración del anticuerpo.
20. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 2 a 16, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos de dos semanas después de la administración del anticuerpo.
21. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 2 a 16, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos o igual a una semana después de la administración del anticuerpo.
22. Un método para tratar a un paciente que padece de un cáncer, en donde el método comprende: determinar si un paciente que padece cáncer es un inmunocompetente; y si el paciente es inmunocompetente, administrar al paciente un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia efectiva para tratar el cáncer.
23. El método tal como se describe en la reivindicación 22, caracterizado porque la determinación comprende medir el número absoluto de células T CD8+ por microlitro de sangre obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200.
24. El método tal como se describe en la reivindicación 22, caracterizado porque la determinación comprende medir el número absoluto por microlitros de sangre de al menos una población de células inmune en el paciente antes de administrar el anticuerpo anti-CD200, en donde la al menos una población de célula inmune se selecciona del grupo que consiste en células T auxiliares CD4 + , linfocitos CD45+ no cancerígenos, células B CD19 + , células Exterminadoras Naturales (NK) CD16 + CD56+ y células CD3 + .
25. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 10 a 24, caracterizado porque la administración del anticuerpo anti-CD200 reduce la expresión CD200 por parte de las células de cáncer en al menos el 25%.
26. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 10 a 24, caracterizado porque la administración del anticuerpo anti-CD200 reduce la expresión CD200 por parte de las células de cáncer en la menos el 50%.
27. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 10 a 24, caracterizado porque la administración del anticuerpo anti-CD200, reduce la concentración de células de cáncer CD200+ en al menos el 25%.
28. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 10 a 24, caracterizado porque la administración del anticuerpo anti-CD200, reduce la concentración de células de cáncer CD200+ en al menos el 50%.
29. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a 28, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente en una cantidad y con una frecuencia efectiva para producir y mantener el surgimiento del efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 deseado en el paciente.
30. El método tal como se describe en la reivindicación 29, caracterizado porque el efecto inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 deseado, está caracterizado por uno o más cambios fisiológicos en el paciente seleccionado del grupo que consiste en: (i) una reducción en la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente, del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (ii) un incremento en la concentración de células T CD8 + en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de células T CD8+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (iii) un incremento en la concentración de células T activadas en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (iv) una reducción en la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración de leucocitos CD200R+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (vi) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1, en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200; (vii) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo; (viii) un nivel disminuido de expresión CD200 a través de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica del paciente antes de la administración del anticuerpo; (ix) un nivel incrementado de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (x) una disminución en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200, en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa a la concentración del uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 correspondientes en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (x¡) una disminución en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de linfocitos en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, en forma relativa al nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de linfocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde los linfocitos son células de médula ósea o células esplénícas.
31. El método tal como se describe en la reivindicación 30, caracterizado porque comprende además ensayar una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, para determinar uno o más parámetros seleccionado del grupo que consiste en: (a) la concentración de células T reguladoras; (b) la concentración de células T CD8+; (c) la concentración de células T activadas; (d) la concentración de leucocitos CD200 + ; (e) la concentración de leucocitos CD200R + ; (f) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras; (g) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (h) el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos; (i) la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + ; y (j) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea o células esplénícas.
32. El método tal como se describe en la reivindicación 30, caracterizado porque comprende además ensayar una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200 para determinar uno o más parámetros seleccionados del grupo que consiste en: (a) la concentración de células T reguladoras; (b) la concentración de células T CD8 + ; (c) la concentración de células T activadas; (d) la concentración de leucocitos CD200 + ; (e) la concentración de leucocitos CD200FT; (f) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras; (g) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (h) el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos; (i) la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + ; y (j) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea o células esplénicas.
33. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 30 a la 32, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos de dos (2) meses después de la administración del anticuerpo.
34. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 30 a la 32, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos de un (1) mes después de la administración del anticuerpo.
35. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 30 a la 32, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos de dos semanas después de la administración del anticuerpo.
36. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 30 a la 32, caracterizado porque el uno o más cambios fisiológicos ocurren en menos o igual a una semana después de la administración del anticuerpo.
37. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque las células T reguladoras son células T CD3 + CD4 + CD25 + FoxP3+ o células T CD3 + CD4 + FoxP3 + .
38. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque las células T activadas son células T CD3 + CD4 + CD25+ FoxP3neg o células T CD3 + CD4 + FoxP3ne9.
39. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 2 ó 30, caracterizado porque los leucocitos CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en células CD4 + , células CD8 + , células CD4+ activadas, células CD21 +/CD25+/Fox3P+ y células T NK.
40. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque los leucocitos CD200FT son células T CD200R+/CD4+ o células T CD200R7CD4+ activadas.
41. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque la proporción determinada del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en la muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200 es de al menos 5:1.
42. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque los esplenocitos CD200+ o células de médula ósea CD200+ son linfocitos CD3+/CD200 + , linfocitos CD45R+/CD200 + , linfocitos CD5+/CD200 + , linfocitos CD19+/CD200 + , linfocitos CD1387CD200+ o linfocitos CD200R+/CD200 + .
43. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque el uno o más subconjuntos de célula de médula ósea CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en células de médula ósea lgk+/CD200 + , células de médula ósea CD 138+/CD200 + , células de médula ósea c-kit+/CD200 + , y células de médula ósea c-kit+/CD2007Lin" /low
44. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos el 25% en la concentración de células T reguladoras, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
45. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos el 50% en la concentración de células T reguladoras indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
46. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos el 75% en la concentración de células T reguladoras indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
47. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos el 25% en la concentración de células T reguladoras indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
48. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 50% en la concentración de células T CD8 + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
49. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 100% en la concentración de células T CD8+ indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
50. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 200% en la concentración de células T CD8+ indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
51. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 25% en la concentración de células T activadas, Índica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
52. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 50% en la concentración de células T activadas, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
53. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 100% en la concentración de células T activadas, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
54. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 200% en la concentración de células T activadas, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
55. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción en al menos 25% en la concentración de leucocitos CD200 + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
56. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción en al menos 50% en la concentración de leucocitos CD200 + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
57. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción en al menos 75% en la concentración de leucocitos CD200+, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
58. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 25% en la concentración de leucocitos CD200R + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
59. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 50% en la concentración de leucocitos CD200R + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
60. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 100% en la concentración de leucocitos CD200R + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
61. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 200% en la concentración de leucocitos CD200R + indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
62. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 3:1, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
63. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 4:1, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
64. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 5:1, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
65. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 25% en el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
66. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 50% en el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
67. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 100% en el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
68. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque un incremento de al menos 200% en el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
69. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 25% en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
70. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 50% en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
71. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 100% en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
72. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 25% en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
73. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 50% en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + , indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
74. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 75% en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200+ indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
75. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 25% en la concentración de uno o más subconjuntos de esplenocitos CD200+, indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
76. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 50% en la concentración de uno o más subconjuntos de esplenocitos CD200+ indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
77. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 2 ó 30, caracterizado porque una reducción de al menos 75% en la concentración de uno o más subconjuntos de esplenocitos CD200+ indica que ha ocurrido en el paciente un efecto inmunomodulador deseado.
78. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 9 a la 77, caracterizado porque el paciente es inmunocompetente.
79. El método tal como se describe en la reivindicación 78, caracterizado porque durante menos de dos meses antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, al paciente no se le ha administrado un agente quimioterapéutico o un agente inmunosupresor.
80. El método tal como se describe en la reivindicación 78, caracterizado porque el paciente no está infectado con HIV.
81. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 9 a la 80, caracterizado porque el cáncer es leucemia linfocítica crónica (CLL).
82. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 9 a la 80, caracterizado porque el cáncer es un tumor sólido.
83. El método tal como se describe en la reivindicación 82, caracterizado porque el tumor sólido es un cáncer de colon, cáncer de seno, cáncer de pulmón, cáncer renal, cáncer pancreático, cáncer de tiroides, cáncer de piel, un cáncer del sistema nervioso, un cáncer cervical, un cáncer ovariano, un cáncer testicular, un cáncer de cabeza y cuello, un cáncer de los ojos, un cáncer de estómago, o un cáncer de hígado.
84. El método tal como se describe en la reivindicación 83, caracterizado porque el cáncer del sistema nervioso es un neu roblastoma.
85. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 84, caracterizado porque la cantidad por dosis del anticuerpo anti-CD200 administrada al paciente es de al menos 100 mg/m2 del paciente.
86. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 84, caracterizado porque la cantidad por dosis del anticuerpo anti-CD200 administrada al paciente es al menos 200 mg/m2 del paciente.
87. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 84, caracterizado porque la cantidad por dosis del anticuerpo anti-CD200 administrada al paciente es al menos 400 mg/m2 del paciente.
88. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 87, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente al menos una vez cada siete días.
89. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 87, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente al menos una vez cada dos semanas.
90. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 87, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra dos o más veces al paciente durante el curso de un mes.
91. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 87, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra dos o más veces al paciente durante el curso de dos meses.
92. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 87, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 se administra cuatro o más veces al paciente durante el curso de dos meses.
93. Un método para la determinación si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado asociado con anticuerpo anti-CD200 en un humano, en donde el método comprende detectar un cambio en al menos un bíomarcador inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, en donde el cambio en al menos un biomarcador inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 se selecciona del grupo que consiste en: (i) una reducción en la concentración de células T reguladoras en la muestra biológica, relativa a la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (ii) un incremento en la concentración de células T CD8 + en una muestra biológica, relativa a la concentración de células T CD8+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (iii) un incremento en la concentración de células T activadas en la muestra biológica, relativa a la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (iv) una reducción en la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica, relativa a la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (v) un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ en la muestra biológica, relativa a la concentración de leucocitos CD200R+ del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (vi) una proporción del porcentaje células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 en la muestra biológica; (vii) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras en la muestra biológica, relativa a la proporción correspondiente del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (viii) un nivel disminuido de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en la muestra biológica, relativa al nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo; (ix) un nivel incrementado de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en la muestra biológica, relativa al nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (x) una disminución en la concentración de uno o más CD200+ subconjuntos de médula ósea CD200+ en la muestra biológica, relativa a la concentración del uno o más subconjuntos de médula ósea CD200+ correspondientes en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; y (xi) una disminución en el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de linfocitos en la muestra biológica, relativa al nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de linfocitos del mismo tipo histológico en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde los linfocitos son células de médula ósea o células esplénicas.
94. El método tal como se describe en la reivindicación 93, caracterizado porque comprende ensayar una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200, para determinar uno o más parámetros seleccionados del grupo que consiste en: (a) la concentración de células T reguladoras; (b) la concentración de células T CD8 + ; (c) la concentración de células T activadas; (d) la concentración de leucocitos CD200 + ; (e) la concentración de leucocitos CD200R + ; (f) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras; (g) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (h) el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos; (i) la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + ; y (j) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea o células esplénicas.
95. El método tal como se describe en la reivindicación 93, caracterizado porque comprende ensayar una muestra biológica obtenida del paciente, antes de la administración al paciente del anticuerpo anti-CD200 para determinar uno o más parámetros seleccionado del grupo que consiste en: (a) la concentración de células T reguladoras; (b) la concentración de células T CD8 + ; (c) la concentración de células T activadas; (d) la concentración de leucocitos CD200 + ; (e) la concentración de leucocitos CD200FT; (f) la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras; (g) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos; (h) el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos; (i) la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200 + ; y (j) el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea o células esplénicas.
96. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 93 a la 95, caracterizado porque la detección ocurre en menos de dos (2) meses después de la administración del anticuerpo.
97. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 93 a la 95, caracterizado porque la detección ocurre en menos de un (1) mes después de la administración del anticuerpo.
98. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 93 a la 95, caracterizado porque la detección ocurre en menos de dos semanas después de la administración del anticuerpo.
99. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 93 a la 98, caracterizado porque el humano padece de cáncer.
100. El método tal como se describe en la reivindicación 99, caracterizado porque el cáncer comprende una pluralidad de células de cáncer que expresa CD200.
101. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 99 ó 100, caracterizado porque el cáncer comprende una pluralidad de células de cáncer, que en forma relativa a las células de no cáncer del mismo tipo histológico del cual se derivan las células de cáncer, sobre-expresan CD200.
102. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 100 ó 101, caracterizado porque después de la administración del anticuerpo anti-CD200 al paciente, el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer, se reduce en al menos el 50%.
103. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 100 ó 101, caracterizado porque después de la administración del anticuerpo anti-CD200 al paciente, la concentración células de cáncer de CD200+ se reduce en al menos el 50%.
104. Un medio legible en computadora que comprende un perfil médico de al menos un humano, en donde el perfil comprende información de al menos: (a) : (i) la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b) : (iii) la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de leucocitos CD200R+ del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c) : (v) el nivel de expresión en CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión en CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d) : (vi¡) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e) : (ix) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f) : (xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g): (xiii) la proporción de porcentaje células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiü)), en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (h) : (xv) la concentración de linfocitos CD8+ en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv), en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (i) : (xvii) la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xviii) la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico que en (xvii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (j): (xix) la concentración de células T CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xx) la concentración de células T CD200FT del mismo tipo histológico que en (xix) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (k): (xxi) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xxii) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (xxi) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (I): (xxiii) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxiv) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + del mismo tipo histológico que en (xxiii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (m): (xxv) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxvi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (xxv), en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo.
105. Un método basado en computadora para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método comprende: (I) recibir datos que incluyen un perfil médico de un humano, en donde el perfil comprende información al menos de: (a): (i) la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (ii) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b) : (iii) la concentración de leucocitos CD200FT en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c) : (v) el nivel de expresión en CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión en CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d) : (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e) : (ix) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f) : (xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g) : (xiii) la proporción de porcentaje células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiii)), en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (h) : (xv) la concentración de linfocitos CD8+ en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv), en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (i): (xvii) la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xviii) la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico que en (xvii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (j): (xix) la concentración de células T CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xx) la concentración de células T CD200FT del mismo tipo histológico que en (xix) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (k): (xxi) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xxii) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (xxi) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (I): ( x x i i i ) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxiv) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico que en (xxiii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (m): (xxv) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxvi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (xxv), en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo. (II) procesar al menos la parte de los datos que contienen información, para determinar si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano, en donde: (a) una reducción en la concentración de leucocitos CD200+ post-tratamiento, en comparación con la concentración de leucocitos CD200+ pre-tratamiento, una indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (b) un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ post-tratamiento en comparación con la concentración de leucocitos CD200FT pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (c) un incremento en el nivel de expresión post- tratamiento CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200R pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (d) una reducción en el nivel de expresión CD200+ posttratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (e) una reducción en la concentración post-tratamiento de células T reguladoras, en comparación con la concentración post-tratamiento de células T reguladoras, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (f) un incremento en la concentración post-tratamiento de células T activadas en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T activadas indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (g) un incremento en la proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, en comparación con la proporción pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano, o una proporción posttratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (h) un incremento en la concentración post-tratamiento de linfocitos CD8 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de linfocitos CD8 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (i) una disminución en la concentración post-tratamiento de células T CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T CD200 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (j) un incremento en la concentración post-tratamiento de células T CD200R + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T CD200R + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (k) una disminución en la concentración post-tratamiento de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de los leucocitos CD200 + , indica que el anticuerpo anti-CD200, ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (I) una disminución en la concentración post-tratamiento de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de las células de médula ósea CD200 + , indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; o (m) una disminución en la expresión post-tratamiento CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de la pluralidad, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
106. Un método basado en computadora para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método que comprende: (I) proporcionar información al menos de: (a) : (i) la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (¡i) la concentración de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico que en (i) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (b) : (iii) la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (iv) la concentración de leucocitos CD200FT del mismo tipo histológico que en (iii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (c) : (v) el nivel de expresión en CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (vi) el nivel de expresión en CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (v) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (d) : (vii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (viii) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos del mismo tipo histológico que en (vii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (e) : (ix) la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (x) la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico que en (ix) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (f) : (xi) la concentración de células T activadas en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, y (xii) la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico que en (xi) en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (g): (xiü) la proporción de porcentaje células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 y (xiv) la proporción correspondiente del porcentaje células T activadas, al porcentaje de células T reguladoras (cada una del mismo tipo histológico que en (xiii)), en una muestra biológica del humano antes de la administración del anticuerpo anti-CD200; (h) : (xv) la concentración de linfocitos CD8+ en una muestra biológica de un humano después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, y (xvi) la concentración de linfocitos CD8+ del mismo tipo histológico que en (xv), en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (i) : (xvii) la concentración de células T CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xviii) la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico que en (xvii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (j): (xix) la concentración de células T CD200R+ en una muestra biológica obtenida de un humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xx) la concentración de células T CD200FV del mismo tipo histológico que en (xix) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (k): (xxi) la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, y (xxii) la concentración de uno o más subconjuntos de CD200+ leucocitos del mismo tipo histológico que en (xxi) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; (I) : (xxiii) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxiv) la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + del mismo tipo histológico que en (xxiii) en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo; y (m): (xxv) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano después de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200 y (xxvi) el nivel de expresión de CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea del mismo tipo histológico que en (xxv), en una muestra biológica obtenida del humano antes de la administración del anticuerpo. (II) ingresar la información en una computadora; y (III) calcular un parámetro que indica si el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano, utilizando la computadora y la información de entrada, en donde: (a) una reducción en la concentración de leucocito CD200 + post-tratamiento, en comparación con la concentración de leucocitos CD200+ pre-tratamiento, una indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (b) un incremento en la concentración de leucocitos CD200R+ post-tratamiento en comparación con la concentración de leucocitos CD200R+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (c) un , incremento en el nivel de expresión posttratamiento CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión CD200R pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (d) una reducción en el nivel de expresión CD200+ posttratamiento por parte de la pluralidad de leucocitos, en comparación con el nivel de expresión pre-tratamiento CD200 + indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (e) una reducción en la concentración post-tratamiento de células T reguladoras, en comparación con la concentración post-tratamiento de células T reguladoras, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (f) un incremento en la concentración post-tratamiento de células T activadas en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T activadas indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (g) un incremento en la proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras, en comparación con la proporción pre-tratamiento, que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano, o una proporción post-tratamiento del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2: 1, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (h) un incremento en la concentración post-tratamiento de linfocitos CD8+, en comparación con la concentración pre-tratamiento de linfocitos CD8 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (i) una disminución en la concentración post-tratamiento de células T CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T CD200 + , indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (j) un incremento en la concentración post-tratamiento de células T CD200FT en comparación con la concentración pre-tratamiento de células T CD200FT, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (k) una disminución en la concentración post-tratamiento de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de los leucocitos CD200 + , indica que el anticuerpo anti-CD200, ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; (I) una disminución en la concentración post-tratamiento de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , en comparación con la concentración pre-tratamiento de las células de médula ósea CD200+, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano; o (m) una disminución en la expresión post-tratamiento CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento por parte de la pluralidad, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
107. El método tal como se describe en la reivindicación 106, caracterizado porque comprende además producir el parámetro.
108. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 105 a la 107, caracterizado porque la detección ocurre en menos de dos (2) meses después de la administración del anticuerpo.
109. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 105 a la 107, caracterizado porque la detección ocurre en menos de un (1) mes después de la administración del anticuerpo.
110. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 105 a la 107, caracterizado porque la detección ocurre en menos de dos semanas después de la administración del anticuerpo.
111. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 105 a la 110, caracterizado porque el humano tiene, se sospecha que tiene o es probable que desarrolle un cáncer.
112. El método tal como se describe en la reivindicación 111, caracterizado porque el humano tiene un cáncer.
113. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 111 ó 112, caracterizado porque el cáncer es leucemia linfocítica crónica.
114. El método tal como se describe en la reivindicación 113, caracterizado porque la leucemia linfocítica crónica es una leucemia linfocítica crónica de célula B.
115. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 111 ó 112, caracterizado porque el cáncer es un tumor sólido.
116. El método tal como se describe en la reivindicación 115, caracterizado porque el tumor sólido es un cáncer de colon, cáncer de seno, cáncer de pulmón, cáncer renal, cáncer de huesos, cáncer pancreático, cáncer de tiroides, cáncer de piel, cáncer del sistema nervioso, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer testicular, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de los ojos, cáncer del estómago, o cáncer de hígado.
117. El método tal como se describe en la reivindicación 116, caracterizado porque el cáncer del sistema nervioso es un neuroblastoma.
118. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 105 a la 110, caracterizado porque el humano tiene, se sospecha que tiene o está en riesgo de desarrollar un trastorno inflamatorio o un trastorno de huesos.
119. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno inflamatorio es un trastorno autoinmune.
120. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno inmune es un trastorno hemolítico.
121. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno inmune es una anemia hemolítica autoinmune.
122. El método tal como se describe en la reivindicación 119, caracterizado porque el trastorno inmune se selecciona del grupo que consiste en enfermedad pulmonar obstructiva crónica, diabetes melitus tipo I, síndrome de Goodpasture, enfermedad de Grave, síndrome de Guillain-Barre, nefropatía IgA, escleroderma, síndrome de Sjógren, granulomatosis de Wegener, pénfigo vulgaris, artritis reumatoide, enfermedad de Chagas, enfermedad de aglutinina fría, síndrome anti-fosfolípido, anemia hemolítica autoinmune caliente, hemoglobinuria fría paroxismal, enfermedad de Hashimoto, púrpura trombocitopénica idiopática, miastenia grave, cirrosis biliar pulmonar, y síndrome de Miller Fisher.
123. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno de huesos es osteoporosis.
124. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno de huesos está asociado con un cáncer.
125. El método tal como se describe en la reivindicación 124, caracterizado porque el cáncer es un mieloma múltiple.
126. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno de huesos está asociado con un trastorno inflamatorio.
127. El método tal como se describe en la reivindicación 118, caracterizado porque el trastorno de huesos es una enfermedad periodontal.
128. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 105 a la 127, caracterizado porque comprende además administrar al humano una cantidad terapéuticamente efectiva del anticuerpo anti-CD200, si se ha determinado que el anticuerpo produce un efecto inmunomodulador en el humano.
129. Un método para determinar si un anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador deseado en un humano, en donde el método que comprende detectar un cambio en al menos un biomarcador inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200 en una muestra biológica obtenida de un humano, después de la administración de un anticuerpo anti-CD200 al humano, en donde el cambio en al menos un biomarcador inmunomodulador asociado con anticuerpo anti-CD200, indica que el anticuerpo anti-CD200 produjo un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
130. El método tal como se describe en la reivindicación 129, caracterizado porque la detección comprende medir la concentración de células T CD200+ en una muestra de sangre obtenida del humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la concentración de células T CD200+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
131. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 ó 130, caracterizado porque la detección comprende medir la concentración de células T CD200R+ en una muestra de sangre obtenida del humano, al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la concentración de células T CD200R+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200R+ del mismo tipo histológico en una muestra de control indica, que el anticuerpo anti-CD200 ha producido el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
132. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 131, caracterizado porque la detección comprende cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica del humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con un nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
133. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 132, caracterizado porque la detección comprende cuantificar el nivel de expresión CD200R por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde un incremento en la expresión CD200R por parte de la pluralidad, en comparación con un nivel de expresión de control indica, que el anticuerpo anti-CD200 ha producido el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
134. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 130 ó 131, caracterizado porque la muestra de control es una muestra de sangre del humano obtenida antes de la administración del anticuerpo.
135. El método tal como se describe en la reivindicación 130, caracterizado porque las células T son células T CD2007CD4 + .
136. El método tal como se describe en la reivindicación 130, caracterizado porque las células T son células T CD200+/CD4+ activadas.
137. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 130, 135 ó 136, caracterizado porque una reducción de al menos el 5% de la concentración de células T CD200 + , indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
138. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 130, 135, ó 136, caracterizado porque una reducción de al menos el 20% de la concentración de células T CD200 + , indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
139. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 130, 135, ó 136, caracterizado porque una reducción de al menos el 50% de la concentración de células T CD200 + , indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado en el humano.
140. El método tal como se describe en la reivindicación 131, caracterizado porque un incremento de al menos 5% en la concentración de células T CD200R + , indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado.
141. El método tal como se describe en la reivindicación 131, caracterizado porque un incremento de al menos 10% en la concentración de células T CD200FT, indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado.
142. El método tal como se describe en la reivindicación 131, caracterizado porque un incremento de al menos 20% en la concentración de células T CD200R + , indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado.
143. El método tal como se describe en la reivindicación 131, caracterizado porque un incremento de al menos 50% en la concentración de células T CD200R + , indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado.
144. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 132 ó 133, caracterizado porque los leucocitos se seleccionan del grupo que consiste en células CD4+, células CD8\ células CD4+ activadas, células CD21 +/CD25+/Fox3P+ y células T K.
145. El método tal como se describe en la reivindicación 132, caracterizado porque una reducción de al menos el 5% en la expresión CD200 por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado a través del anticuerpo.
146. El método tal como se describe en la reivindicación 132, caracterizado porque una reducción de al menos el 20% en la expresión CD200 por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado a través del anticuerpo.
147. El método tal como se describe en la reivindicación 132, caracterizado porque una reducción de al menos el 50% en la expresión CD200 por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado a través del anticuerpo.
148. El método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque un incremento de al menos el 50% en la expresión CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado a través del anticuerpo.
149. El método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque un incremento de al menos el 100% en la expresión CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido en el humano el efecto inmunomodulador deseado a través del anticuerpo.
150. El método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque un incremento de al menos el 200% en la expresión CD200R por parte de la pluralidad de leucocitos, indica que se ha producido en el humano el efecto ¡nmunomodulador deseado a través del anticuerpo.
151. El método tal como se describe en la reivindicación 130, caracterizado porque una reducción en la concentración de células T CD200+ en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200+ del mismo tipo histológico en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
152. El método tal como se describe en la reivindicación 131, caracterizado porque un incremento en la concentración de células T CD200FV en la muestra de sangre, en comparación con la concentración de células T CD200FT del mismo tipo histológico en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
153. El método tal como se describe en la reivindicación 132, caracterizado porque una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 es terapéuticamente efectivo en el humano.
154. El método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque un incremento en el nivel de expresión CD200R por parte de la pluralidad, en comparación con el nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 es terapéuticamente efectivo en el humano.
155. El método tal como se describe en la reivindicación 130, caracterizado porque la muestra de control es una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de célula T CD200+ pre-tratamiento.
156. El método tal como se describe en la reivindicación 131, caracterizado porque la muestra de control es una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración del humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de célula T CD200FT pre-tratamiento.
157. El método tal como se describe en la reivindicación 132, caracterizado porque el nivel de expresión de control se mide en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano, de un anticuerpo anti-CD200 para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento.
158. El método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque el nivel de expresión de control se mide en una muestra biológica de un humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200R pre-tratamiento.
159. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 158, caracterizado porque el método comprende medir la concentración del uno o más subconjuntos de linfocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo ant¡-CD200, en donde una reducción en la concentración del uno o más subconjuntos de linfocitos CD200+ en una muestra biológica, en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de linfocitos CD200+ en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
160. El método tal como se describe en la reivindicación 159, caracterizado porque los subconjuntos de linfocitos CD200+ son linfocitos CD3+/CD200 + , linfocitos CD45R+/CD200 + , linfocitos CD5+/CD200 + , linfocitos CD19+/CD200 + , linfocitos CD138 + /CD200+ o linfocitos CD200R+/CD200 + .
161. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 159 ó 160, caracterizado porque una reducción de al menos 10% de la concentración del uno o más subconjuntos de linfocitos CD200 + , indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
162. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 159 ó 160, caracterizado porque una reducción de al menos 50% de la concentración del uno o más subconjuntos de linfocitos CD200*, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
163. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 159 ó 160, caracterizado porque una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de linfocitos CD200+ en la muestra biológica, en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de linfocitos CD200+ en la muestra de control, indica que el anticuerpo es terapéuticamente efectivo en el humano.
164. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 159 a la 163, caracterizado porque la muestra biológica comprende tejido de bazo del humano.
165. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 159 a la 163, caracterizado porque la muestra biológica comprende tejido de médula ósea del humano.
166. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 165, caracterizado porque el método comprende medir la concentración de uno ó más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida del humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra biológica, en comparación con la concentración de los mismos subconjuntos de células de médula ósea CD200+ en una muestra de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
167. El método tal como se describe en la reivindicación 166, caracterizado porque los subconjuntos de células de médula ósea CD200+ son células de médula ósea lgk+/CD200 + , células de médula ósea CD1387CD200+, células de médula ósea c-kit7CD200\ o células de médula ósea c-kit+/CD200+/l_in.
168. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 166 ó 167, caracterizado porque una reducción de al menos 5% de la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , indica que se ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
169. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 166 ó 167, caracterizado porque una reducción de al menos 20% de la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , indica que se ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
170. El método tal como se describe en la reivindicación 166 ó 167, caracterizado porque una reducción de al menos 50% de la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200 + , indica que se ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
171. El método tal como se describen cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 170, caracterizado porque el método comprende: medir la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de leucocito CD200 + pre-tratamiento ; y medir la concentración de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo, para obtener de esta forma una concentración de leucocito CD200+ post-tratamiento, en donde una reducción en la concentración de leucocito CD200+ post-tratamiento, en comparación con la concentración de leucocito CD200+ pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto ¡nmunomodulador en el humano.
172. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 170, caracterizado porque el método comprende: medir la concentración de células de médula ósea CD200 + en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma una concentración de células de médula ósea CD200+ pre-tratamiento; y medir la concentración de células de médula ósea CD200 + en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo para obtener de esta forma una concentración de célula de médula ósea CD200+ posttratamiento, en donde una reducción en la concentración de célula de médula ósea CD200+ post-tratamiento, en comparación con la concentración de célula de médula ósea CD200+ pre- tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
173. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 170, caracterizado porque el método comprende: cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento; y cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en donde una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
174. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 170, caracterizado porque el método comprende: cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano, antes de la administración al humano de un anticuerpo anti-CD200, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 pre-tratamiento; y cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del humano, después de la administración del anticuerpo, para obtener de esta forma un nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en donde una reducción en el nivel de expresión CD200 post-tratamiento, en comparación con el nivel de expresión CD200 pre-tratamiento, indica que el anticuerpo ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
175. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 174, caracterizado porque el método comprende cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de leucocitos en una muestra biológica obtenida del humano al que se la administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con un nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
176. El método tal como se describe en la reivindicación 175, caracterizado porque los leucocitos CD200+ son leucocitos CD37CD200\ leucocitos CD45R+/CD200+, leucocitos CD57CD200+, leucocitos CD19VCD200 + , leucocitos CD1387CD200+ o leucocitos CD200R7CD2007
177. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 175 ó 176, caracterizado porque una reducción de al menos 5% del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
178. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 175 ó 176, caracterizado porque una reducción de al menos 20% del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
179. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 175 ó 176, caracterizado porque una reducción de al menos 50% del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
180. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 179, caracterizado porque el método comprende cuantificar el nivel de expresión CD200 por parte de una pluralidad de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida de un humano al que se le administró un anticuerpo anti-CD200, en donde una reducción en la expresión CD200 por parte de la pluralidad, en comparación con un nivel de expresión de control, indica que el anticuerpo anti-CD200 ha producido un efecto inmunomodulador en el humano.
181. El método tal como se describe en la reivindicación 180, caracterizado porque las células de médula ósea CD200 + son células de médula ósea lgk+/CD200+, células de médula ósea CD1387CD200 + , células de médula ósea c-kit7CD200+ o células de médula ósea c-kit+/CD200 /Lin".
182. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 180 ó 181, caracterizado porque una reducción de al menos un 5% del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
183. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 180 ó 181, caracterizado porque una reducción de al menos un 20% del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
184. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 180 ó 181, caracterizado porque una reducción de al menos un 50% del nivel de expresión CD200 por parte de la pluralidad, indica que se ha producido en el humano un efecto inmunomodulador.
185. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 184, caracterizado porque el método comprende, administrar al humano al menos una dosis adicional del anticuerpo anti-CD200, si el anticuerpo anti-CD200 produces un efecto inmunomodulador en el humano.
186. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 185, caracterizado porque la detección ocurre en menos de dos (2) meses después de la administración del anticuerpo.
187. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 ala 185, caracterizado porque la detección ocurre en menos de un (1) mes después de la administración del anticuerpo.
188. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 185, caracterizado porque la detección ocurre en menos de dos semanas después de la administración del anticuerpo.
189. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 188, caracterizado porque el humano tiene, se sospecha que tiene, o es probable que desarrolle un cáncer.
190. El método tal como se describe en la reivindicación 189, caracterizado porque el humano tiene un cáncer.
191. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 188 ó 189, caracterizado porque el cáncer es CLL.
192. El método tal como se describe en la reivindicación 191, caracterizado porque la CLL es B-CLL.
193. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 188 ó 189, caracterizado porque el cáncer es un tumor sólido.
194. El método tal como se describe en la reivindicación 193, caracterizado porque el tumor sólido es cáncer de colon, cáncer de seno, cáncer de pulmón, cáncer renal, cáncer pancreático, cáncer de tiroides, cáncer de piel, cáncer del sistema nervioso, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer testicular, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de los ojos, cáncer del estómago o cáncer del hígado.
195. El método tal como se describe en la reivindicación 194, caracterizado porque el cáncer del sistema nervioso es un neuroblastoma.
196. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 129 a la 195, caracterizado porque comprende además administrar dosis adicionales del anticuerpo anti-CD200, si se ha determinado que el anticuerpo produce un efecto inmunomodulador deseado en el humano.
197. Un método para determinar el programa de dosificación para tratar a un paciente que padece de un cáncer, utilizando un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: (I) proporcionar a un paciente que padece de un cáncer que comprende una pluralidad de células de cáncer que expresan CD200; (II) administrar el paciente un anticuerpo anti-CD200 para producir de esta forma un cambio en uno o más biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200, en donde el cambio en uno o más biomarcadores se selecciona del grupo que consiste en : (a) una reducción en la expresión de CD200 por parte de las células de cáncer en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la expresión de CD200 en una muestra de control, (b) una reducción en la concentración de células T CD200 + en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T CD200+ en una muestra de control, (c) una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de células T en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200 por parte de las células T del mismo tipo histológico en una muestra de control, (d) un incremento en la concentración de leucocitos CD200 + en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de leucocitos CD200FT en una muestra de control, (e) un incremento en el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200R por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, (f) una reducción en la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra de control, (g) un incremento en la concentración de células T activadas en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra de control, (h) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, (i) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la proporción correspondiente en una muestra de control, j) una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, (k) una reducción en la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, y (I) una reducción en el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del paciente después administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de C2000 por parte de las células de médula ósea del mismo tipo histológico en una muestra de control; y (III) monitorear el cambio en el uno o más biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200, en donde el programa de dosificación es suficiente para mantener el cambio en el uno o más biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200 durante la duración del tratamiento con el anticuerpo.
198. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer se reduce en al menos el 10%.
199. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer se reduce en al menos el 20%.
200. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión CD200 por parte de las células de cáncer se reduce en al menos el 50%.
201. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración de células T CD200 + se reduce en al menos 10%.
202. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración de células T CD200 + se reduce en al menos 20%.
203. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración de células T CD200 + se reduce en al menos 50%.
204. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 197 a la 203, caracterizado porque las células T CD200+ son células T CD200+/CD4 + , células T CD2007CD4+ activadas o células T CD2007CD8 + .
205. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte de las células T, se reduce en al menos 10%.
206. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte de las células T, se reduce en al menos 20%.
207. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte de las células T, se reduce en al menos 50%.
208. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 205 a 207, caracterizado porque las células T son células T CD4+, células T CD4+ activadas o células T CD8 + .
209. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración de células T CD200FT se incrementa en al menos el 10%.
210. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración de células T CD200FT se incrementa en al menos el 20%.
211. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración de células T CD200R+ se incrementa en al menos el 50%.
212. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 211 a 211, caracterizado porque las células T CD200R+ son células T CD200R7CD4* o células T CD200R + /CD4+ activadas.
213. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos se incrementa en al menos 10%.
214. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos se incrementa en al menos 20%.
215. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos se incrementa en al menos 50%.
216. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 213 a 215, caracterizado porque los leucocitos son células T CD4+ o células T CD4+ activadas.
217. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se reduce en al menos el 10%.
218. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se reduce en al menos el 20%.
219. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se reduce en al menos el 50%.
220. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 217 a 219, caracterizado porque el uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en linfocitos CD3+/CD200 + , linfocitos CD45R+/CD200 + , linfocitos CD5+/CD200\ linfocitos CD197CD200 + , linfocitos CD138+/CD200 + , linfocitos CD200R7CD200\ células T CD2007CD4 + , células T CD200VCD4+ activadas y células T CD200+/CD8\
221. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se reduce en al menos 10%.
222. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se reduce en al menos 20%.
223. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200* se reduce en al menos 50%.
224. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 221 a 223, caracterizado porque el uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en linfocitos CD3+/CD200 + , linfocitos CD45R+/CD200 + , linfocitos CD5+/CD200+, linfocitos CD19+/CD200 + , linfocitos CD138+/CD200 + , linfocitos CD200R+/CD200 + , células T CD4 + , células T CD4+ activadas y células T CD8 + .
225. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ se reduce en al menos 10% .
226. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ se reduce en al menos 20%.
227. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque la concentración del uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ se reduce en al menos 50%.
228. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 225 a 227, caracterizado porque el uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en células de médula ósea lgk+/CD200 + , células de médula ósea CD138+/CD200 + , células de médula ósea c-kit+/CD200+ y células de médula ósea c-kit+/CD200+/Lin /low.
229. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de células de médula ósea se reduce en al menos 10%.
230. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de células de médula ósea se reduce en al menos 20%.
231. El método tal como se describe en la reivindicación 197, caracterizado porque el nivel de expresión de CD200 por parte del uno o más subconjuntos de células de médula ósea se reduce en al menos 50%.
232. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 197 ó 229 a 231, caracterizado porque el uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ se seleccionan del grupo que consiste en células de médula ósea lgk + /CD200\ células de médula ósea CD138+/CD200 + , células de médula ósea c-kit+/CD200+ y células de médula ósea c-kit+/CD200+/l_in- low.
233. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 197 a la 232, caracterizado porque la muestra biológica es una muestra de sangre.
234. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 197 a la 233, caracterizado porque la muestra de control es una muestra biológica obtenida del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200 al paciente.
235. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 197 a la 234, caracterizado porque las células T reguladoras son células T CD3 + CD4 + CD25 + FoxP3 + o células T CD3 + CD4 + FoxP3 + .
236. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 197 a la 235, caracterizado porque las células T activadas son células T CD3+CD4+CD25+ FoxP3neg o células T CD3 + CD4 + FoxP3neg.
237. Un método para tratar a un humano que padece de un cáncer, en donde el método comprende administrar a un humano que necesita del mismo, un anticuerpo anti-CD200 en una cantidad y con una frecuencia suficiente para producir un cambio en uno o más biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200 en el humano, para tratar de esta forma el cáncer del humano.
238. El método tal como se describe en la reivindicación 237, caracterizado porque el cambio en uno o más biomarcadores se selecciona del grupo que consiste en: (a) una reducción en la expresión de CD200 por parte de las células de cáncer en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la expresión de CD200 en una muestra de control, (b) una reducción en la concentración de células T CD200 + en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T CD200+ en una muestra de control, (c) una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de células T en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200 por parte de las células T del mismo tipo histológico en una muestra de control, (d) un incremento en la concentración de leucocitos CD200FT en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra de control, (e) un incremento en el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200R por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, (f) una reducción en la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra de control, (g) un incremento en la concentración de células T activadas en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra de control, (h) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, (i) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la proporción correspondiente en una muestra de control, j) una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, (k) una reducción en la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, y (I) una reducción en el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del paciente después administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de C2000 por parte de las células de médula ósea del mismo tipo histológico en una muestra de control.
239. El método tal como se describe cualesquiera reivindicaciones 237 ó 238, caracterizado porque comprende además monitorear al humano con respecto a uno o ambos de la producción y mantenimiento del cambio en el uno o más biomarcadores.
240. El método tal como se describe en la reivindicación 238, caracterizado porque el anticuerpo se administra al paciente en una cantidad y con una frecuencia para mantener una proporción de células T activadas a regs T de al menos 4:1.
241. El método tal como se describe en la reivindicación 238, caracterizado porque el anticuerpo se administra al paciente en una cantidad y con una frecuencia para mantener una proporción de células T activadas a regs T de al menos 6:1.
242. Un método para seleccionar a un paciente con cáncer para el tratamiento con un anticuerpo anti-CD200, en donde el método comprende: determinar si el sistema inmune del paciente con cáncer, es competente para montar una respuesta inmune contra el cáncer; y si se determina que el sistema inmune del paciente es competente, seleccionar al paciente para la terapia de anticuerpo anti-CD200.
243. El método tal como se describe en la reivindicación 242, caracterizado porque se determinar que el sistema inmune del paciente es competente para montar una respuesta inmune contra el cáncer en la presencia del anticuerpo anti-CD200.
244. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 242 ó 243, caracterizado porque se determina que el sistema inmune del paciente es competente para montar una respuesta inmune contra el cáncer en la ausencia del anticuerpo anti-CD200.
245. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 242 a la 244, caracterizado porque la determinación comprende medir el número absoluto por microlitro de sangre de al menos una población de células inmune, obtenidas del paciente antes de la administración del anticuerpo anti-CD200, en donde la al menos una población de célula inmune se selecciona del grupo que consiste en células T auxiliares CD4 + , linfocitos CD45+ de no cáncer, células B CD19 + , células Exterminadoras Naturales CD16 + CD56+ (NK) células y células CD3 + .
246. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 242 a la 245, caracterizado porque comprende además administrar a un paciente seleccionado un anticuerpo anti-CD200, en donde el anticuerpo anti-CD200 se administra al paciente en una cantidad y con una frecuencia efectiva para producir y mantener en el paciente un cambio en uno o más biomarcadores asociados con anticuerpo anti-CD200, en donde el cambio en uno o más biomarcadores se seleccionan del grupo que consiste en: (a) una reducción en la expresión de CD200 por parte de las células de cáncer en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la expresión de CD200 en una muestra de control, (b) una reducción en la concentración de células T CD200 + en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T CD200+ en una muestra de control, (c) una reducción en el nivel de expresión CD200 por parte de células T en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200 por parte de las células T del mismo tipo histológico en una muestra de control, (d) un incremento en la concentración de leucocitos CD200FV en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de leucocitos CD200R+ en una muestra de control, (e) un incremento en el nivel de expresión de CD200R por parte de los leucocitos en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de CD200R por parte de los leucocitos del mismo tipo histológico en una muestra de control, (f) una reducción en la concentración de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T reguladoras del mismo tipo histológico en una muestra de control, (g) un incremento en la concentración de células T activadas en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de células T activadas del mismo tipo histológico en una muestra de control, (h) una proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras de al menos 2:1 en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, (i) un incremento en la proporción del porcentaje de células T activadas al porcentaje de células T reguladoras en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la proporción correspondiente en una muestra de control, j) una reducción en la concentración de uno o más subconjuntos de médula ósea CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente, después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de uno o más subconjuntos de células de médula ósea CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, (k) una reducción en la concentración del uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ en una muestra biológica obtenida del paciente después de la administración del anticuerpo, en comparación con la concentración de uno o más subconjuntos de leucocitos CD200+ del mismo tipo histológico en una muestra de control, y (I) una reducción en el nivel de expresión de CD200 por parte de uno o más subconjuntos de células de médula ósea en una muestra biológica obtenida del paciente después administración del anticuerpo, en comparación con un nivel de expresión de control de C2000 por parte de las células de médula ósea del mismo tipo histológico en una muestra de control.
247. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 246, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 es un anticuerpo lgG1, lgG2, lgG3, lgG4, IgM, lgA1, lgA2, IgA, IgD o IgE.
248. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 246, caracterizado porque el anticuerpo ant¡-CD200 es un anticuerpo de múrido, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado o un anticuerpo humano.
249. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 246, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 es un fragmento de enlace de antígeno de un anticuerpo anti-CD200 completo.
250. El método tal como se describe en la reivindicación 249, caracterizado porque el fragmento de enlace de antígeno se selecciona del grupo que consiste en un fragmento Fab, un fragmento F(ab')2, un fragmento Fv y un anticuerpo de cadena simple.
251. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 246, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 es un anticuerpo monoclonal.
252. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103, 105 a 248, o 251, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante variante que tiene función efectora disminuida o no tiene función efectora, en forma relativa a una forma no variante de la región constante.
253. El método tal como se describe en la reivindicación 252, caracterizado porque la región constante variante, en comparación con la forma no variante de la región constante, tiene una o más características seleccionadas del grupo que consiste en: (a) actividad de citotoxicidad transmitida por célula dependiente de anticuerpo (ADCC) reducida, o ninguna; (b) citotoxicidad dependiente de complemento (CDC) reducida o ninguna; y (c) enlace disminuido a uno o más receptores Fe.
254. El método tal como se describe en la reivindicación 252, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante variante que ha sido construida para comprender al menos una sustitución, inserción o eliminación de aminoácido, dando como resultado una función efectora reducida o ninguna, en comparación con una región constante no variante correspondiente, que no contiene la al menos una sustitución, inserción o eliminación de aminoácido.
255. El método tal como se describe en la reivindicación 253, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante variante que ha sido construida para comprender al menos una sustitución, inserción o eliminación de aminoácido, dando como resultado una función efectora reducida o ninguna, en comparación con una región constante no variante correspondiente, que no contiene la al menos una sustitución, inserción o eliminación de aminoácido.
256. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 252 a la 255, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante que comprende una o más características seleccionadas del grupo que consiste en: (i) glucosilación alterada y (ii) una mutación Ala-Ala.
257. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 248 ó 251 a 256, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 comprende una región constante lgG2/lgG4 híbrida.
258. El método tal como se describe en la reivindicación 256, caracterizado porque la glucosilación alterada comprende una o más características seleccionadas del grupo que consiste en: (i) un cambio en uno o más componentes de azúcar; (ii) la presencia de uno o más componentes de azúcar adicionales; y (iii) la ausencia de uno o más componentes de azúcar.
259. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 258, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 inhibe la interacción entre CD200 y CD200R.
260. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de 1 a 103 ó 105 a 259, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto de CDRs emparejadas: una CDR1 de cadena pesada (HCDR1) que comprende la secuencia de aminoácido: GFTFSGFAMS (SEC ID NO: 4); una CDR2 de cadena pesada (HCDR2) que comprende la secuencia de aminoácido: SISSGGTTYYLDSVKG (SEC ID NO: 5); una CDR3 de cadena pesada (HCDR3) que comprende la secuencia de aminoácido: GNYYSGTSYDY (SEC ID NO: 6); una CDR1 de cadena ligera (LCDR1) que comprende la secuencia de aminoácido: RASESVDSYGNSFMH (SEC ID NO: 7); una CDR2 de cadena ligera (LCDR2) que comprende la secuencia de aminoácido: RASNLES (SEC ID NO: 8); y una CDR3 de cadena ligera (LCDR3) que comprende la secuencia de aminoácido: QQSNEDPRT (SEC ID NO: 9).
261. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 259, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto de CDRs emparejadas: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GFNIKDYYMH (SEC ID NO: 10); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: WIDPENGDTKYAPKFQG (SEC ID NO: 11); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: KNYYVSNYNFFDV (SEC ID NO: 12); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: SASSSVRYMY (SEC ID NO: 13); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: DTSKLAS (SEC ID NO: 14); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: FQGSGYPLT (SEC ID NO: 15).
262. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 259, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto de CDRs emparejadas: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GFNIKDYYIH (SEC ID NO: 16); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: Wl DPEIGATKYVPKFQG (SEC ID NO: 17); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LYGNYDRYYAMDY (SEC ID NO: 18); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KASQNVRTAVA (SEC ID NO: 19); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: LASNRHT (SEC ID NO: 20); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LQHWNYPLT (SEC ID NO: 21).
263. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 259, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto de CDRs emparejadas: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GYSFTDYI I L (SEC ID NO: 22); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: Hl DPYYGSSNYNLKFKG (SEC ID NO: 23); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: SKRDYFDY (SEC ID NO: 24); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KASQDINSYLS (SEC ID NO: 25); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: RANRLVD (SEC ID NO: 26); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: LQYDEFPYT (SEC ID NO: 27).
264. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de 1 a 103 ó 105 a 259, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto de CDRs emparejadas: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: GYTFTEYTMH (SEC ID NO: 28); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: GVNPNNGGALYNQKFKG (SEC ID NO: 29); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: RSNYRYDDAMDY (SEC ID NO: 30); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: KSSQSLLDI DEKTYLN (SEC ID NO: 31); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: LVSKLDS (SEC ID NO: 32); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: WQGTHFPQT (SEC ID NO: 33).
265. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de 1 a 103 ó 105 a 259, caracterizado porque el anticuerpo anti-CD200 contiene el siguiente conjunto de CDRs emparejadas: una HCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: AFNIKDHYMH (SEC ID NO: 34); una HCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: WIDPESGDTEYAPKFQG (SEC ID NO: 35); una HCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: FNGYQALDQ (SEC ID NO: 36); una LCDR1 que comprende la secuencia de aminoácido: TASSSVSSSYLH (SEC ID NO: 37); una LCDR2 que comprende la secuencia de aminoácido: STSNLAS (SEC ID NO: 38); y una LCDR3 que comprende la secuencia de aminoácido: RQYHRSPPIFT (SEC ID NO: 39).
266. El método tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 103 ó 105 a 265, caracterizado porque un cambio en el uno o más biomarcadores asociados con el anticuerpo anti-CD200, indica que el anticuerpo CD200 es terapéuticamente efectivo.
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Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8846098B2 (en) 2009-07-10 2014-09-30 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Artificial cell constructs for cellular manipulation
US11090363B2 (en) 2009-07-10 2021-08-17 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Vasoactive intestinal peptide release from microparticles
MX2012009321A (es) 2010-02-11 2012-11-21 Alexion Pharma Inc Metodos terapeuticos que utilizan anticuerpos anti-cd200.
TW201244737A (en) 2011-02-03 2012-11-16 Alexion Pharma Inc Use of an anti-CD200 antibody for prolonging the survival of allografts
CN102698266A (zh) * 2012-05-15 2012-10-03 中国医学科学院北京协和医院 Cd200在制备系统性红斑狼疮治疗药物中的应用
SG11201408646VA (en) 2012-07-06 2015-01-29 Genmab Bv Dimeric protein with triple mutations
US10247730B2 (en) * 2013-02-14 2019-04-02 Faron Pharmaceuticals Oy Method for determining acute respiratory distress syndrome (ARDS) related biomarkers, a method to monitor the development and treatment of ARDS in a patient
US11505599B2 (en) 2016-01-14 2022-11-22 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center T cell receptor-like antibodies specific for Foxp3-derived peptides
GB201608197D0 (en) * 2016-05-10 2016-06-22 Ducentis Biotherapeutics Ltd Novel proteins
WO2018075408A1 (en) 2016-10-17 2018-04-26 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating acute myeloid leukemia (aml) with combinations of anti-cd200 antibodies, cytarabine, and daunorubicin
WO2018102594A1 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating solid tumors with anti-cd200 antibodies
EP3621641A4 (en) * 2017-05-08 2021-03-03 Adimab, LLC ANTI-CD3 BINDING DOMAINS AND ANTIBODIES CONTAINING THEM AND THE METHOD OF MANUFACTURING AND USING THEM
WO2019067499A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Alexion Pharmaceuticals, Inc. BIOMARKER SIGNATURE FOR PREDICTING A TUMOR RESPONSE TO ANTI-CD200 THERAPY
WO2019126536A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Alexion Pharmaceuticals Inc. Humanized anti-cd200 antibodies and uses thereof
TWI749367B (zh) * 2018-09-14 2021-12-11 美商美國禮來大藥廠 Cd200r促效劑抗體及其用途

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US599784A (en) 1898-03-01 Spout attachment for bottles
US4376110A (en) 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4634666A (en) 1984-01-06 1987-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Human-murine hybridoma fusion partner
EP0335476A3 (en) 1984-02-08 1989-12-13 Cetus Corporation Recombinant methods for the production of ricin a, ricin b, ricin or diphtheria toxin (dt)a or ab' fragment, suitable hosts and vectors therefor, and conjugates comprising ricin toxin a chain or diphtheria toxin
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
DE3852304T3 (de) 1987-03-02 1999-07-01 Enzon Lab Inc Organismus als Träger für "Single Chain Antibody Domain (SCAD)".
JP3101690B2 (ja) 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
JPH0246297A (ja) 1988-08-08 1990-02-15 Takeda Chem Ind Ltd モノクローナル抗体、抗体産生ハイブリドーマおよび抗体の製造法
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US5175384A (en) 1988-12-05 1992-12-29 Genpharm International Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice
ATE139258T1 (de) 1990-01-12 1996-06-15 Cell Genesys Inc Erzeugung xenogener antikörper
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6713610B1 (en) 1990-01-12 2004-03-30 Raju Kucherlapati Human antibodies derived from immunized xenomice
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6657103B1 (en) 1990-01-12 2003-12-02 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US20040010810A1 (en) 1990-01-12 2004-01-15 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US7041871B1 (en) 1995-10-10 2006-05-09 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
WO1994025585A1 (en) 1993-04-26 1994-11-10 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
EP0546073B1 (en) 1990-08-29 1997-09-10 GenPharm International, Inc. production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5612205A (en) 1990-08-29 1997-03-18 Genpharm International, Incorporated Homologous recombination in mammalian cells
DK0564531T3 (da) 1990-12-03 1998-09-28 Genentech Inc Berigelsesfremgangsmåde for variantproteiner med ændrede bindingsegenskaber
US5780279A (en) 1990-12-03 1998-07-14 Genentech, Inc. Method of selection of proteolytic cleavage sites by directed evolution and phagemid display
ES2287206T3 (es) 1991-03-01 2007-12-16 Dyax Corporation Proceso para el desarrollo de mini-proteinas de union.
WO1992022670A1 (en) 1991-06-12 1992-12-23 Genpharm International, Inc. Early detection of transgenic embryos
WO1992022645A1 (en) 1991-06-14 1992-12-23 Genpharm International, Inc. Transgenic immunodeficient non-human animals
WO1993004169A1 (en) 1991-08-20 1993-03-04 Genpharm International, Inc. Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs
AU3328493A (en) 1991-12-17 1993-07-19 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
JPH07508410A (ja) 1992-06-18 1995-09-21 ジェンファーム　インターナショナル　インコーポレイテッド 酵母人工染色体を有するトランスジェニック非ヒト動物の製造方法
EP0652950B1 (en) 1992-07-24 2007-12-19 Amgen Fremont Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US5508717A (en) 1992-07-28 1996-04-16 Sony Corporation Computer pointing device with dynamic sensitivity
JP3095175B2 (ja) 1992-11-13 2000-10-03 アイデック ファーマシューティカルズ コーポレイション Ｂ細胞リンパ腫の治療のためのヒトｂリンパ球限定分化抗原に対するキメラ抗体と放射能標識抗体の療法利用
US5885573A (en) 1993-06-01 1999-03-23 Arch Development Corporation Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies
WO1994029351A2 (en) 1993-06-16 1994-12-22 Celltech Limited Antibodies
US5595721A (en) 1993-09-16 1997-01-21 Coulter Pharmaceutical, Inc. Radioimmunotherapy of lymphoma using anti-CD20
US5625825A (en) 1993-10-21 1997-04-29 Lsi Logic Corporation Random number generating apparatus for an interface unit of a carrier sense with multiple access and collision detect (CSMA/CD) ethernet data network
US5643763A (en) 1994-11-04 1997-07-01 Genpharm International, Inc. Method for making recombinant yeast artificial chromosomes by minimizing diploid doubling during mating
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
US20050287630A1 (en) 1995-04-27 2005-12-29 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
AU2466895A (en) 1995-04-28 1996-11-18 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
ES2176484T3 (es) 1995-08-18 2002-12-01 Morphosys Ag Bancos de proteinas/(poli)peptidos.
WO1997021450A1 (en) 1995-12-08 1997-06-19 Brigham And Women's Hospital, Inc. Ox-2 costimulatory molecule
KR100643058B1 (ko) 1996-12-03 2006-11-13 아브게닉스, 인크. 복수의 Ｖн 및 Ｖк 영역을 함유하는 인간 면역글로불린 유전자좌를 갖는 트랜스제닉 포유동물 및 이로부터 생성된 항체
WO1998047531A2 (en) 1997-04-21 1998-10-29 Arch Development Corporation Fc receptor non-binding anti-cd3 monoclonal antibodies deliver a partial tcr signal and induce clonal anergy
US6955811B2 (en) 1997-11-07 2005-10-18 Trillium Therapeutics Inc. Methods of inhibiting immune response suppression by administering antibodies to OX-2
PT1032662E (pt) 1997-11-07 2006-07-31 Trillium Therapeutics Inc Metodos e composicoes para imunomodulacao.
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
CA2323757C (en) 1998-04-02 2011-08-02 Genentech, Inc. Antibody variants and fragments thereof
CN1202128C (zh) 1998-12-08 2005-05-18 拜奥威神有限公司 修饰蛋白的免疫原性
US20020192215A1 (en) 1999-04-13 2002-12-19 Schering Corporation, A New Jersey Corporation Novel uses of mammalian OX2 protein and related reagents
WO2000061178A1 (en) 1999-04-13 2000-10-19 Inhale Therapeutics Systems, Inc. Pulmonary administration of dry powder formulations for treating infertility
TWI277425B (en) 1999-04-13 2007-04-01 Lilly Co Eli Pulmonary administration of dry powder formulations for treating infertility
GB9910975D0 (en) 1999-05-13 1999-07-14 Univ Strathclyde Rapid dehydration of proteins
US6794132B2 (en) 1999-10-02 2004-09-21 Biosite, Inc. Human antibodies
US6680209B1 (en) 1999-12-06 2004-01-20 Biosite, Incorporated Human antibodies as diagnostic reagents
US7291330B2 (en) 2000-03-17 2007-11-06 Trillium Therapeutics Inc. MD-1 inhibitors as immune suppressants
US7306801B2 (en) 2000-05-15 2007-12-11 Health Research, Inc. Methods of therapy for cancers characterized by overexpression of the HER2 receptor protein
CA2417874C (en) 2000-08-03 2012-10-02 Transplantation Technologies Inc. Use of ox-2 inhibitors for the treatment of cancer
CA2429579A1 (en) 2000-11-22 2002-05-30 Trillium Therapeutics Inc. Truncated cd200
US7408041B2 (en) 2000-12-08 2008-08-05 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
US20040198661A1 (en) 2000-12-08 2004-10-07 Bowdish Katherine S. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
US9249229B2 (en) 2000-12-08 2016-02-02 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
WO2002059280A2 (en) 2000-12-08 2002-08-01 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Chronic lymphocytic leukemia cell line and its use for producing an antibody
US20060057651A1 (en) * 2000-12-08 2006-03-16 Bowdish Katherine S Polypeptides and antibodies derived from chronic lymphocytic leukemia cells and uses thereof
CN100404673C (zh) 2001-02-19 2008-07-23 默克专利有限公司 鉴定t细胞表位的方法及制备具有降低的免疫原性的分子的用途
WO2002095030A2 (en) 2001-05-24 2002-11-28 Trillium Therapeutics Inc. Modulation of cd200 receptors
JP4527394B2 (ja) 2001-06-01 2010-08-18 バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド Ｋｉｍ−１の分断を阻害するための分子および方法
US7393648B2 (en) 2001-12-03 2008-07-01 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Hybrid antibodies
KR101033196B1 (ko) 2002-02-14 2011-05-09 이뮤노메딕스, 인코오포레이티드 항-ｃｄ20 항체 및 그 융합 단백질 및 이들의 이용방법
US20050271660A1 (en) 2002-09-06 2005-12-08 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Nebulization of monoclonal antibodies for treating pulmonary diseases
JP2006512396A (ja) 2002-12-27 2006-04-13 シェーリング　コーポレイション 免疫寛容を誘導および維持する方法
CN1822857A (zh) 2003-06-02 2006-08-23 阿莱克申药物公司 去免疫原性抗cd3抗体
JP2007518827A (ja) 2004-02-02 2007-07-12 シェーリング　コーポレイション Ｃｄ２００およびｃｄ２００ｒを調節する方法
JP2007532680A (ja) * 2004-04-16 2007-11-15 ジェネンテック・インコーポレーテッド 疾患の治療方法
GB0416328D0 (en) 2004-07-21 2004-08-25 Univ Cardiff Use of dry powder compositions for pulmonary delivery
WO2006031370A2 (en) * 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
ES2755976T3 (es) * 2005-02-07 2020-04-24 Roche Glycart Ag Moléculas de unión a antígeno que se unen a EGFR, vectores que las codifican y usos de las mismas
BRPI0612814A2 (pt) 2005-07-11 2017-06-20 Macrogenics Inc anticorpo, métodos para redução e para tratamento de uma resposta imune prejudicial em um mamífero, proteína de ligação ao cd16a, e, método para redução dos efeitos colaterais de primeira dose em um paciente
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
KR20140053410A (ko) 2005-08-19 2014-05-07 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
NZ599035A (en) * 2006-01-12 2013-12-20 Alexion Pharma Inc Antibodies to ox-2/cd200 and uses thereof
US8037880B2 (en) 2006-04-07 2011-10-18 The University Of Western Ontario Dry powder inhaler
US20100104582A1 (en) 2007-01-11 2010-04-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh CD200 and its receptor, CD200R, modulate bone mass via the differentiation of osteoclasts
EP2077281A1 (en) * 2008-01-02 2009-07-08 Bergen Teknologioverforing AS Anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
MX2012009321A (es) * 2010-02-11 2012-11-21 Alexion Pharma Inc Metodos terapeuticos que utilizan anticuerpos anti-cd200.

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