MX2012007670A - Composición que incluye una combinación de al menos una enzima proteolítica y al menos una enzima lipolítica para usarse en la prevención de síntesis de triglicéridos. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición que comprende una combinación de por lo menos una enzima proteolítica, como subtilisina, y por lo menos una enzima lipolítica, para usarla en la prevención de la síntesis de triglicéridos, ventajosamente por medio de la degradación de 2-monoacilglicerol en el intestino; la invención también tiene como objetivo una composición para usarla como fármaco, agente cosmético, dispositivo médico, composición dietética, suplemento dietético, o nutracéutico, principalmente para usarla en la prevención o tratamiento de la obesidad, la aterosclerosis, diabetes tipo 2 o para el uso en la prevención o reducción del exceso de peso.

Description

COMPOSICIÓN QUE INCLUYE UNA COMBINACIÓN DE AL MENOS UNA ENZIMA PROTEOLÍTICA Y AL MENOS UNA ENZIMA LIPOLÍTICA PARA USARSE EN LA PREVENCIÓN DE SÍNTESIS DE TRIGLICÉRIDOS MEMORIA DESCRIPTIVA La presente invención se relaciona con una composición que incluye una combinación de al menos una enzima proteolítica, como la subtilisina, y al menos una enzima lipolítica, para usarse en la prevención de síntesis de triglicéridos, ventajosamente mediante la degradación de 2-monoacilglicerol en el intestino. Ventajosamente, la composición de la presente invención comprende varias lipasas. La invención también se refiere a tal composición para usarse como un fármaco, agente cosmético, dispositivo médico, composición dietética, suplemento dietético o nutracéutico, especialmente para el uso en el tratamiento o prevención de la obesidad, ateroesclerosis, diabetes tipo 2 o para el uso en la prevención o reducción del peso excesivo.

Hoy es generalmente reconocido que el aumento en la frecuencia de exceso de peso y obesidad, diabetes tipo 2, enfermedad cardiovascular y energía baja entre mucha gente en países desarrollados se debe al uso deficiente de las calorías contenidas en los productos que consumimos, las cuales en la mayoría de los casos son muy altas en grasa. Esta deficiencia metabólica o síndrome metabólico afecta a cerca de 50 millones de Estadounidenses (cerca de uno de cada cuatro adultos Estadounidenses) y aproximadamente a 30 millones de Europeos. Alrededor del 7% de adultos entre los 20 y los 30 años de edad y 40% de los adultos mayores de 40 años de edad cumplen con los criterios para desarrollar este síndrome.

El síndrome metabólico representa un grupo de factores que ocurren simultáneamente y aumentan el riesgo de enfermedad cardiovascular, accidente cerebrovascular y diabetes tipo 2. El tener sólo uno de estos factores - aumento en la presión sanguínea, alto nivel de insulina, exceso de grasa alrededor de la cintura o nivel anormal de colesterol - aumenta el riesgo de contraer una enfermedad seria; cuando muchos factores se combinan, el riesgo es aún mayor.

Las grasas, por sus propiedades físicas, químicas y fisiológicas, juegan un papel importante en la nutrición del hombre. Además de las grasas ingeridas en forma de alimento por el hombre, el mismo cuerpo fabrica lípidos.

Las grasas dietéticas, y las grasas de tejido adiposo, están compuestas principalmente de triglicéridos. Un triglicérido es una molécula de glicerol con tres ácidos grasos unidos a ella. Los triglicéridos están clasificados como lípidos (grasas), pero sólo los tres ácidos grasos son grasas, ya que el glicerol es un poliol que pertenece más bien a la clase de los carbohidratos. Por ejemplo, el glicerol es soluble en agua y no en aceite; por lo tanto el glicerol no es una grasa.

Las diferencias en la estructura de los ácidos grasos unidos al glicerol hacen que estas grasas sean distintas y que influyan en su estado de viscosidad. Por lo tanto, hay una gran diversidad de triglicéridos en alimentos tales como los aceites de oliva, girasol y soya, mantequilla, sebo, manteca, margarina, etc.

Estos ácidos grasos son asimilados en el intestino mediante un proceso común para todos los triglicéridos que por sí mismos no son asimilables.

Deben ser separados en dos diglicéridos, monoglicéridos y ácidos grasos libres mediante la acción de lipasas en el tracto digestivo; solamente esta serie de productos son asimilables y los triglicéridos no.

Las enzimas o lipasas lipolíticas son enzimas secretadas en la boca, estómago y páncreas para separar triglicéridos (TAG, por sus siglas en inglés) en moléculas lo suficientemente pequeñas como para ser asimiladas. Desafortunadamente, las lipasas atacan a los triglicéridos (TAG) sólo en las posiciones 1 y 3 del glicerol, conduciendo a la formación de ácidos grasos libres y 2-monoacilglicerol (molécula de glicerol que comprende un ácido graso unido en la posición 2).

Si la actividad de la lipasa es mayor, se pueden obtener incluso ácidos grasos libres y glicerol. Todas estas moléculas son asimilables por el cuerpo.

Pero es ahí en donde las cosas se ponen complicadas: tan pronto como estos productos son asimilados, el cuerpo resintetiza (reforma) en las células epiteliales del intestino (enterocitos) los triglicéridos que habían sido descompuestos particularmente en ácidos grasos libres y 2-monoacilglicerol por lipasas como las lipasas pancreáticas (véase la Figura 1 , la cual representa la descomposición de triglicéridos (triacilglicerol, TAG) por lipasas, y después la reformación del triglicéridos en células intestinales).

Esta reformación del triglicérido (TAG) se logra particularmente por la actividad de las cuatro enzimas (acil-CoA sintetasa, monoglicérido transacilasa, diglicérido transacilasa y diglicérido sintetasa), las cuales actúan como distintas etapas de la síntesis.

Después los ácidos grasos libres estarán unidos al 2-monoacilglicerol en las posiciones 1 y 3, lo cual reformará triglicéridos. Estos triglicéridos, los cuales no son solubles en la sangre, tendrán que integrar quilomicrones que evolucionarán a VLDL, LDL y HDL (por sus siglas en inglés) y transportarán triglicéridos (TAG), colesterol y fosfolípidos a través del cuerpo.

Estos nuevos triglicéridos estarán entonces unidos en lipoproteínas y almacenados en adipocitos (células de grasa). Los triglicéridos asimilados por el cuerpo, después de haber sido descompuestos en grasas más pequeñas, son almacenados otra vez como triglicéridos. Por tanto, el cuerpo no usa su energía inmediatamente, ya que están almacenados en adipocitos. El cuerpo no puede metabolizar ácidos grasos cuando están unidos al glicerol o a triglicéridos. Para ser metabolizados, los ácidos grasos deben estar libres.

Esta deficiencia metabólica, la cual algunos llaman el gen de la obesidad (James V. Neel - Diabetes Mellitus: a "thrifíy" genotype rendered detrimental by "progress" - American Journal of Human Genetics - vol. 14 -páginas 353-362), que constituye la recomposición y almacenamiento de triglicéridos, fue una ventaja para el hombre primitivo hace miles de años. De hecho, esta habilidad para almacenar grasas fue esencial para la supervivencia. Durante períodos prósperos, cuando la cacería hizo posible matar presas grandes, el hombre comía mucho y tenía grasas de reserva. Entonces el hombre, al almacenar grasa de este modo, pudo sobrevivir a largos períodos de hambruna mediante el consumo de sus reservas de grasa durante estos tiempos difíciles.

Todo esto ha sido bien explicado por Stephen Cunnane en su libro "The survival of the fattest," {The Key to Human Brain Evolution, World Scientific Publíshing Co, New Jersey, United States, 2005, www.worldscibooks.com) el cual explica que la gente con las reservas de grasa más abundantes sobrevivió mejor a largos períodos de escasez de alimento.

Esta es esa misma gente que enriqueció su cerebro con ácidos grasos de omega-3 y quienes se volvieron más inteligentes y más avanzados que el resto de las criaturas. Entonces durante este período, la deficiencia metabólica era una ventaja evolutiva, y fue también una ventaja en términos de selección natural. Este particularmente es el caso en el que el Homo sapiens surgió a partir de especies primitivas de Homo.

El ejemplo de los Melanesios es claro. Esta gente se fue de Taiwan en canoas y después colonizó todas las Islas del Pacífico. Aquellos que soportaron el viaje fueron los que tenían las mayores reservas de grasa.

La selección natural promovió la supervivencia del más grande, quien a su vez tuvo hijos con el gen de la obesidad. Por lo tanto, entre el 60% y el 70% de los Melanesios son diabéticos tipo 2.

Pero, hoy, en países desarrollados en donde el hambre es saciada tal vez en exceso, esta capacidad de almacenamiento se ha vuelto una catástrofe. De hecho, la resíntesis de triglicéridos en enterocitos o células intestinales tiene consecuencias desastrosas para la salud de los seres humanos. En particular, esta reformación de triglicéridos induce: un aumento en el tamaño y número de quilomicrones, los cuales transportan triglicéridos, colesterol y fosfolípidos en la sangre, un aumento en los riesgos de ateroesclerosis, facilitando la formación de placa arterial y frecuentemente trombosis arterial, debido a que todos los ácidos grasos están atrapados en triglicéridos y no son metabolizados por el cuerpo, un aumento en el nivel de colesterol malo en circulación, un aumento en el número y tamaño de células de grasa y por tanto el desarrollo de aumento de peso u obesidad.

Además, el exceso de triglicéridos en la sangre reduce la cantidad de ácidos grasos libres disponibles para ser metabolizados; y por tanto, una escasez de energía.

Por lo tanto, en algunos casos serios, en donde el gen de la obesidad está muy marcado, hay una sensación de no tener nutrientes disponibles en la sangre incluso después de una comida. Este desagradable sentimiento crea el deseo de comer, una sensación constante de hambre que invita al consumo de alimento y bebida para sentirse mejor.

Esta deficiencia metabólica, el hecho de no ser capaz de usar las calorías contenidas en los ácidos grasos que se asimilan, pero que no son usables en forma de triglicéridos porque los ácidos grasos están atrapados en él, conduce a una serie de complicaciones llamadas el síndrome X por Reaven o "el cuarteto mortal" por Kaplan - G.M. Reaven - Stanford University School of Medicine - División of Endocrinology, Gerontology and Metabolism, Department of Veterans Affairs Medical Center. Palo Alto, CA, USA - Syndrome X: 6 years later- Journal of Interna! Medicine 1994; 236 (Suplemento 736): 13-22; G.M. Reaven - Simón & Schuster - Rockefeller Center, 1230 Avenue of the Americas - New York, NY 10020 - Syndrome X -Overcoming the süent killer that can give you a heart attack - Copyright 2000 G.M. Raven, T. Strom and B. Fox; Norman M. Kaplan MD - The Deadly Quartet - Arch Inter. Med - vol 149, Julio 1989: 1514-1520.

Para encontrar la energía que necesita, nuestro cuerpo, privado de los ácidos grasos disponibles para ser metabolizados, usará glucosa, la cual es omnipresente en el cuerpo. Esto es lo que hace decir que los humanos son vehículos híbridos. Pero la glucosa, en contraste con los ácidos grasos, tiene muchas desventajas: Al quemarse, libera sólo cuatro calorías por gramo, mientras que los ácidos grasos liberan nueve calorías por gramo, Pero por encima de todo, la glucosa, para ser usada y para penetrar las células, necesita de la hormona insulina. También, para que la glucosa penetre todas sus células, el cuerpo debe secretar aún más insulina, más allá de sus capacidades y bajo condiciones extremas. De este modo, en algún punto, el cuerpo, y en particular el páncreas, ya no puede secretar mucha insulina, dando lugar al fenómeno de resistencia a la insulina; la glucosa se acumula en la sangre y ya no puede penetrar las células. Esto se llama intolerancia a la glucosa; el cuerpo se vuelve insulino-resistente.

Esta hiperinsulinemia tiene efectos perversos; demasiada insulina previene que los ácidos grasos salgan de las células de grasa, lo cual es llamado lipólisis. Por lo tanto hay una deficiencia aún mayor de ácidos grasos disponibles para ser utilizados; ya que los ácidos grasos ya no están saliendo de las células de grasa, no hay posibilidad de perder peso especialmente para aquellos que sufren de obesidad. Por tanto, la deficiencia de ácidos grasos disponibles es aún mayor, y la glucosa es empleada incluso más intensamente en el metabolismo, desde donde se derivan aún más complicaciones, como un aumento en la trigliceridemia y en la colesterolemia.

Todos estos trastornos metabólicos conducen a dislipidemia, hipertensión, hiperuricemia y a un nivel de glucosa por arriba de lo normal debido a que la glucosa penetra de forma deficiente a las células y se acumula en la sangre causando hiperglucemia.

Todas estas complicaciones metabólicas pueden entonces conducir a diabetes tipo 2, la cual se agrava a largo plazo. Una acumulación de grasa en células de grasa, en particular en el abdomen y alrededor de la cintura en los hombres y en el trasero en las mujeres, también se agravará a largo plazo.

Todos estos problemas metabólicos tendrán repercusiones en el ánimo del individuo, quien entonces está frecuentemente en un nadir que puede conducir a un desequilibrio emocional o a un colapso nervioso en el individuo que sufre de estos trastornos metabólicos, especialmente con un gran sentimiento de insatisfacción y hambre constante.

Además, el cerebro es por lo tanto abastecido de forma deficiente. El exceso de insulina altera varios parámetros sanguíneos: las adipocitocinas, ???ß, IL-6, PAI 1 , la adiposina, el angiotensinógeno, la leptina, la adiponectina, la resistina, MCSF, TGFL, etc., aumentan en la sangre. Todos estos productos inflamatorios acentúan el desequilibrio biológico y desestabilizan el metabolismo de lípidos y carbohidratos del individuo.

Trabajos anteriores buscaron nuevas maneras de provocar un corto circuito en la síntesis de triglicéridos y de superar esta deficiencia metabólica.

De este modo, se encontró que varios métodos reducen la cantidad de células de grasa y hacen que los ácidos grasos almacenados en las células de grasa estén biodisponibles.

Las sustancias que particularmente se han usado para ese fin incluyen el extracto de té rico en flavonoides para bloquear la enzima O'-metiltransferasa, la cual destruye adrenalina, o extracto de semilla de uva rico en flavan-3-ol y corteza de pino rica en bioflavonoides, siendo esta última capaz de incrementar la termogénesis, es decir, liberando ácidos grasos de las células de grasa; de forma similar, los polifenoles extraídos de cacao tienen el mismo efecto.

Se hizo un intenso uso de anfetaminas y otros isoméridos o Mediator para ayudar a la liberación de grasas aprisionadas por las células de grasa. Pero estos productos fueron muy peligrosos y todos están ahora prohibidos.

También se hizo un intento por hacer corto circuito en las células de grasa con ácido linoleico conjugado (CLA, por sus siglas en inglés), el cual no entra en el ciclo de síntesis del triacilglicerol (TAG), y con aceites de cadena media que se queman sin pasar a través de las células de grasa.

El solicitante buscó encontrar mejores formas de confrontar el síndrome metabólico, combatir el gen de la obesidad y usar la energía de las grasas, más sin promover la formación de depósitos de grasa.

El solicitante notó que muchos laboratorios propusieron el uso de agentes bloqueadores de lipasa para prevenir la descomposición y reformación de TAG.

Pero el solicitante descubrió de manera sorprendente que los productos anti-lipasa eran absolutamente inefectivos para la pérdida de peso, y en realidad tenían un efecto dañino en el cuerpo al aumentar la cantidad de TAG que permanece en el intestino.

La solución propuesta por la presente invención es inhibir, reducir y/o prevenir la reformación de triglicéridos en los enterocitos o células del intestino del cuerpo mediante el uso de una combinación de enzimas proteolíticas o proteasas con al menos una enzima lipolítica o lipasa.

Al administrar dichas enzimas proteolíticas, especialmente las lipasas, se evita la resíntesis de triglicéridos de una manera elegante y sin peligro para el cuerpo.

De este modo, el solicitante descubrió que: • las enzimas proteolíticas alteran la actividad de las cuatro enzimas (acil-CoA sintetasa, monoglicérido transacilasa, diglicérido transacilasa y diglicérido sintetasa) en el enterocito, lo cual ayuda a la resíntesis de triglicéridos, • pero especialmente si se usan lipasas específicas que actúan ventajosamente en la posición 2 en los triglicéridos del intestino, se reduce la producción de 2-monoacilglicerol, lo cual es el eje de la resíntesis de triglicéridos. Esta vía metabólica es conocida por todos los bioquímicos debido a que es la vía de síntesis del 80% de los triglicéridos; la otra vía, menos eficiente, es la resíntesis a partir de glicerol-3-fosfato y sólo produce 20% de los triglicéridos.

Por tanto, la presente invención tiene como objetivo una composición que comprende una combinación de al menos una enzima proteolítica o proteasa y al menos una enzima lipolítica o lipasa para su uso en la prevención de la síntesis o reformación de triglicéridos, especialmente en los enterocitos o células del intestino, ventajosamente mediante la degradación del 2-monoacilglicerol.

Ventajosamente, de acuerdo con la presente invención, la enzima proteolítica es seleccionada de un grupo que comprende subtilisina, nagarse, natocinasa, quimotripsina, tripsina, elastasa, termolisina, serrapeptasa, y mezclas de las mismas.

De una forma particularmente ventajosa de acuerdo con la presente invención, la enzima proteolítica es subtilisina o natocinasa, o una mezcla de subtilisina o natocinasa con una o más enzimas proteolíticas distintas.

De acuerdo con una característica particular de la presente invención, la enzima proteolítica está presente en una proporción de 5-30% en peso, típicamente de 10-20% en peso, en relación con el peso total de la composición.

De acuerdo con otra característica particular de la presente invención, la enzima proteolítica está presente en una proporción de 70-95% en peso, típicamente de 80-90% en peso, en relación con el peso total de la composición.

Ventajosamente de acuerdo con la presente invención, la composición permite la administración de una dosis diaria de enzima proteolítica que va de entre los 10 mg. y los 200 mg., más particularmente entre 10 mg. y 100 mg., típicamente entre 20 mg. y 100 mg., por ejemplo entre los 50 mg. y los 100 mg.

Ventajosamente de acuerdo con la presente invención, la composición permite la administración de una dosis diaria de enzima lipolítica que va de entre los 100 mg. y los 400 mg., más particularmente entre 100 mg. y 300 mg., típicamente entre 100 mg. y 200 mg. o entre 200 mg. y 300 mg.

En una modalidad particular de la presente invención, la composición es formulada para ser administrada oralmente.

Ventajosamente de acuerdo con la presente invención, la composición se presenta en la forma de una cápsula dura o suave, una tableta, un granulo, un polvo o una solución oral.

De acuerdo con una característica particular de la presente invención, la composición se presenta en la forma de una cápsula dura o suave o de una tableta gastro-resistente.

Ventajosamente, la composición es gastro-resistente, de modo que la composición libera la enzima proteolítica y la enzima lipolítica en el intestino.

De manera ventajosa de acuerdo con la presente invención, la composición es una composición farmacéutica, cosmética, nutracéutica o dietética, un suplemento dietético, o un dispositivo médico, y puede comprender cualquier portador o excipiente adecuado, aceptable desde un punto de vista farmacéutico, cosmético, dietético o nutracéutico, asi como aditivos convencionales conocidos por los expertos en la técnica.

De manera ventajosa de acuerdo con la presente invención, la composición comprende al menos una lipasa, como la lipasa extraída de Thermomyces lanuginosus, Rhizopus niveus, Penicillium roqueforti, Penicillium camemberti, Geotrichum candidum, Candida rugosa, Candida lipolytica, Candida parapsilosis, Aspergillus niger, Rhizopus oryzae, Mucor javanicus, o una lipasa de Candida anthartica, Geotrichum candidum o una lipasa extraída de avena, así como una combinación de las mismas.

De manera particularmente ventajosa, la composición comprende varias lipasas.

Ventajosamente, las lipasas usadas en el contexto de la presente invención son activas en la posición 2 en los triglicéridos y reducirán el 2-monoacilglicerol, previniendo que los triglicéridos se formen de nuevo, una vía que produce el 80% de los triglicéridos.

De acuerdo con una característica particular de la invención, la composición comprende al menos una lipasa seleccionada del grupo que comprende la lipasa Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotrichum candidum, Candida rugosa, y mezclas binarias o ternarias de estas lipasas Típicamente, la composición comprende una mezcla de Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotrichum candidum y Candida rugosa.

En una modalidad particular, la composición de la presente invención está hecha para usarse en la prevención o reducción del exceso de peso, la adipogénesis o el exceso de colesterol, o como un agente anti- celulitis, típicamente en una composición cosmética o un dispositivo médico.

En otra modalidad particular, la composición o el producto de la presente invención está hecho para usarse en la prevención o tratamiento de la obesidad o la ateroesclerosis, o trastornos cardiovasculares, o diabetes tipo 2, y en general de lo que se refiere al síndrome metabólico, para combatir el gen de la obesidad.

La presente invención también tiene como objetivo una composición o un producto que contiene: - al menos una enzima proteolítica, como la subtilisina, y - al menos una lipasa, como las lipasas Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotrichum candidum, una lipasa de Candida rugosa, o una mezcla binaria o ternaria de estas lipasas, como un producto de combinación para el uso simultáneo, separado o estratificado para prevenir la síntesis de triglicéridos, ventajosamente mediante la degradación del 2-monoacilglicerol en el intestino.

Ventajosamente de acuerdo con la presente invención, la enzima proteolítica es seleccionada de un grupo que comprende subtilisina, nagarse, natocinasa, quimotripsina, tripsina, elastasa, termolisina, serrapeptasa, y mezclas de las mismas.

De manera ventajosa de acuerdo con la presente invención, la lipasa es extraída de Thermomyces lanuginosus, Rhizopus niveus, Penicillium roqueforti, Penicillium camemberti, Geotrichum candidum, Candida rugosa, Candida lipolytica, Candida parapsilosis, Aspergillus niger, Rhizopus oryzae, Mucorjavanicus, o es extraída de Candida anthartica, Geotrichum candidum o de avena.

Típicamente, las proteasas son administradas en la forma de una cápsula de gelatina. Las proteasas son ventajosamente administradas dos o tres veces al día, una cápsula de gelatina con cada comida.

Típicamente, el producto comprende al menos una lipasa de Candida anthartica como las lipasas Cal A o Cal B de Candida anthartica, una lipasa de Geotrichum candidum, una lipasa de Candida rugosa y/o una lipasa extraída de avena. Esto es particularmente ventajoso porque estas lipasas actúan en la posición 2 en los triglicéridos y por lo tanto rompen el 2-monoacilglicerol y ayudan a las proteasas a prevenir que los triglicéridos se reformen en el cuerpo. Sin el 2-monoacilglicerol, la resíntesis de TAG es mucho más difícil (recordar que esta vía produce el 80% de TAG en el cuerpo).

Típicamente, las lipasas son administradas en la forma de una cápsula de gelatina. Las lipasas son ventajosamente administradas tres veces al día, una cápsula de gelatina con cada comida.

En una modalidad particular, la composición o el producto de la presente invención está hecho para usarse como un fármaco, un agente cosmético, un dispositivo médico, una composición dietética o un suplemento nutracéutico o dietético.

En una modalidad particular, la composición o el producto de la presente invención está hecho para usarse en la prevención o reducción del exceso de peso, la adipogénesis o el exceso de colesterol, o como un agente anti-celulitis.

En otra modalidad particular, la composición o el producto de la presente invención está hecho para usarse en la prevención o tratamiento de la obesidad, la ateroesclerosis, los trastornos cardiovasculares, o la diabetes tipo 2, y en general de lo que se refiere al síndrome metabólico, para combatir el gen de la obesidad.

Los siguientes ejemplos tienen la intención de ilustrar, pero no limitar, el alcance de la invención.

EJEMPLO 1 Estudio de la actividad inducida por la administración de una combinación de enzimas proteolíticas, como la subtilisina, y enzimas lipoliticas, como la Cal A de Candida anthartica. la lipasa de Geotríchum candidum, y la lipasa de Candida rugosa, para prevenir la síntesis de triqlicéridos Se llevó a cabo un estudio de actividad y dosis de ensayo usando ratas. Estas ratas fueron divididas en tres grupos (condiciones de ensayo) de 10.

La primera condición, el grupo control, no recibió ningún producto activo.

Las otras dos condiciones, cada una comprendiendo grupos de 10 ratas, recibieron por 8 días (una vez al día), respectivamente, una mezcla de 50 mg de subtilisina y 100 mg. de la lipasa Cal A de Candida anthartica para el grupo 1 , y una mezcla de 50 mg. de subtilisina y 50 mg. de la lipasa de Geotrichum candidum, así como 50 mg de la lipasa de Candida rugosa para el grupo 2.

Después de 8 días, todas las ratas, incluyendo al grupo control, recibieron una dosis de aceite de oliva equivalente a una cucharada para el hombre (15 mi.).

Después de la administración de aceite de oliva a todas las ratas, se tomaron muestras de sangre de todos los animales 1 hora, 2.5 horas y 5 horas después de la administración del aceite de oliva. Entonces se calcularon los niveles de triglicéridos a partir de la sangre muestreada.

En las ratas control se encontró una alta cantidad de TAG en la sangre para las tres muestras (1 hr., 2.5 hr., y 5 hr.).

Los grupos 1 y 2 no tuvieron TAG en la sangre.

Entonces el aceite de oliva fue administrado nuevamente dos veces a un intervalo de una semana - mientras que las condiciones 1 y 2 continuaron recibiendo subtilisina en combinación con las lipasas mencionadas anteriormente.

Los resultados fueron los mismos en estas otras dos ocasiones. El TAG no se reformó en los grupos 1 y 2, mientras que el grupo control tuvo una alta concentración de TAG en la sangre para las tres muestras.

Por tanto se puede concluir que la combinación de subtilisina y lipasas previno la formación de triglicéridos (TAG).

EJEMPLO 2 Estudio de 10 cerdos miniatura Se llevó a cabo un estudio con 10 cerdos miniatura.

Estos cerdos fueron separados en cuatro grupos: un cerdo control tres cerdos en el grupo 1 tres cerdos en el grupo 2 tres cerdos en el grupo 3 El cerdo control no recibió enzima.

Las otras tres condiciones recibieron tres fórmulas de enzimas.

La fórmula 1 estuvo compuesta de 10 mg de subtilisina y 300 mg de la lipasa Cal A, así como pancreatina. Fue administrada a los cerdos del grupo 1 , con una dosis de 20 mg/kg.

La fórmula 2 estuvo compuesta de 10 mg de subtilisina y 300 mg de la lipasa de Candida rugosa, así como pancreatina. Fue administrada a los cerdos del grupo 2, con una dosis de 40 mg/kg.

La fórmula 3 estuvo compuesta de 10 mg de subtilisina y 300 mg de la lipasa de Geotrichum candidum, así como pancreatina. Fue administrada a los cerdos del grupo 3, con una dosis de 40 mg/kg.

Las fórmulas se dieron por 8 días, una vez al día.

Los resultados (niveles de triglicéridos) se midieron en las muestras de sangre tomadas cada 2 horas por 2 días.

Los resultados del estudio mostraron que el cerdo control produjo una gran cantidad de triglicéridos, mientras que los cerdos en las otras tres condiciones produjeron relativamente pocos triglicéridos (véase la figura 2).

Se llevó a cabo un segundo estudio 8 días después, usando esta vez un cerdo de cada condición mencionada anteriormente como animal control (un cerdo del grupo 1 , un cerdo del grupo 2 y un cerdo del grupo 3).

Los dos cerdos restantes por lote recibieron las mismas fórmulas de enzima que se mencionaron anteriormente.

Fue entonces cuando se notó que ninguno de los cerdos produjo muchos triglicéridos, incluyendo a los cerdos control. Por tanto, se puede concluir que las enzimas que se dieron 8 días antes todavía tenían actividad en la sangre con un efecto retardado, y que las lipoproteínas fueron reducidas en los animales control, los cuales habían recibido las enzimas 8 días antes.

Claims (26)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Una composición que comprende una combinación de al menos una enzima proteolítica y al menos una enzima lipolítica para usarse en la prevención de síntesis de triglicéridos, ventajosamente mediante la degradación de 2-monoacilglicerol en el intestino.

2. - La composición de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la enzima proteolítica es seleccionada del grupo que comprende subtilisina, nagarse, natocinasa, quimotripsina, tripsina, elastasa, termolisina, serrapeptasa, y mezclas de las mismas, preferentemente subtilisina o natocinasa.

3. - La composición de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizada además porque es para usarse como un fármaco, un agente cosmético, un dispositivo médico, una composición dietética, o un suplemento nutracéutico o dietético.

4. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada además porque es para usarse en la prevención o reducción del exceso de peso, la adipogénesis o el exceso de colesterol, o como un agente anti-celulitis.

5. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada además porque es para usarse en la prevención o tratamiento de la obesidad, la ateroesclerosis o la diabetes tipo 2.

6. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada además porque está formulada para ser administrada oralmente.

7. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada además porque es provista en la forma de una cápsula dura o suave, una tableta, un gránulo, un polvo o una solución oral.

8.- La composición de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada además porque es provista en la forma de una cápsula de gelatina o de una tableta gastro-resistente.

9 - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada además porque permite la administración de una dosis diaria de enzima proteolítica de 50-100 mg.

10. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada además porque permite la administración de una dosis diaria de enzima lipolítica de 200-300 mg.

1 1. - La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada además porque la lipasa es seleccionada del grupo que comprende una lipasa extraída de Thermomyces lanuginosus, Rhizopus niveus, Penicillium roqueforti, Penicillium camemberti, Geotríchum candidum, Candida rugosa, Candida lipolytica, Candida parapsilosis, Aspergillus niger, Rhizopus oryzae, Mucor javanicus, o una lipasa de Candida anthartica, Geotrichum candidum o una lipasa extraída de avena, y mezclas de las mismas.

12.- La composición de conformidad con la reivindicación 1 1 , caracterizada además porque la lipasa es una lipasa Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotrichum candidum, Candida rugosa, o una mezcla de las mismas.

13 - Un producto que comprende: - al menos una enzima proteolítica, como la subtilisina, y - al menos una lipasa, como la lipasa Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotrichum candidum, una lipasa de Candida rugosa, o una mezcla de estas lipasas, - como un producto de combinación para uso simultáneo, separado o estratificado para prevenir la síntesis de triglicéridos, ventajosamente mediante la degradación de 2-monoacilglicerol en el intestino.

14.- El uso de una composición que comprende una combinación de al menos una enzima proteolítica y al menos una enzima lipolítica para preparar una composición para prevenir la síntesis de triglicéridos, ventajosamente mediante la degradación de 2-monoacilglicerol en el intestino.

15.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 14, en donde la enzima proteolítica es seleccionada del grupo que comprende subtilisina, nagarse, natocinasa, quimiotripsina, tripsina, elastasa, termolisina, serrapeptasa, y mezclas de los mismos, preferiblemente subtilisina o natocinasa.

16.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 14 o la reivindicación 15, en donde la composición es adaptada para ser administrable como un fármaco, agente cosmético, dispositivo médico, composición dietética, suplemento nutracéutico o dietético.

17.- El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 14 a 16, para prevenir o reducir el exceso de peso, adipogénesis o exceso de colesterol, o como un agente anti-celulitis.

18. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 14 a 16, para prevenir o tratar la obesidad, ateroesclerosis o diabetes tipo 2.

19. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición es formulada para ser administrada oralmente.

20. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición se proporciona en la forma de una cápsula dura o suave, tableta, gránulo, polvo o solución oral.

21. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 20, en donde la composición se proporciona en la forma de una cápsula de gelatina o una tableta gastro-resistente.

22.- El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición es adaptada para permitir una dosis diaria de enzima proteolítica de 50-100 mg.

23.- El uso como el que reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición es adaptada para permitir una dosis diaria de enzima lipolítica de 200-300 mg.

24. - El uso como el que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la lipasa es seleccionada del grupo que comprende- una lipasa extraída de Thermomyces lanuginosus, Rhizopus niveus, Penicillium roqueforti, Penicillium camemberti, Geotrichum candidum, Candida rugosa, Candida lipolytica, Candida parapsilosis, Aspergillus niger, Rhizopus oryzae, Mucor javanicus, o una lipasa de Candida anthartica, Geotrichum candidum o una lipasa extraída de avena, y combinaciones de las mismas.

25. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 24, en donde la lipasa es una lipasa Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotrichum candidum, Candida rugosa, o una mezcla de estas lipasas.

26. - El uso de un producto que contiene: al menos una enzima proteolítica, como la subtilisina, y al menos una lipasa, como una lipasa Cal A o Cal B de Candida anthartica, Geotnchum candidum, una lipasa de Candida rugosa, o una mezcla de estas lipasas, para preparar una composición para prevenir la síntesis de triglícéridos, ventajosamente mediante la degradación de 2-monoacilglicerol en el intestino; en donde la composición es adaptada como un producto de combinación para uso simultáneo, separado o estratificado.