MX2009002285A

MX2009002285A - Uso de aceites dpa(n-6) en formulas para infantes.

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Publication number: MX2009002285A
Application number: MX2009002285A
Authority: MX
Inventors: William Barclay; James Flatt; Mary Van Elswyk; Linda Arterburn; Samuel G Zeller
Original assignee: Market Biosciences Corp
Priority date: 2006-08-29
Filing date: 2007-08-29
Publication date: 2011-10-11
Also published as: EP2430926A2; PH12009500371A1; KR20090045929A; WO2008027991A3; VN24011A1; CA2662260A1; IL197039A0; CA2662260C; PH12014502412A1; EP2420146A1; SG10201501004UA; EP2061347A2; AU2007289233A1; WO2008027991A2; JP2010502189A; TW200824582A; SG174081A1; BRPI0714732A2; NZ574846A; CN101528067A

Abstract

Se proporcionan composiciones de fórmula para infantes que contienen ácido docosapentaenoico ("DPA(n-6)" y otros ácidos grasos poliinsaturados, y métodos para su preparación.

Description

USO DE ACEITES DPA(n-6) EN FÓRMULAS PARA INFANTES Campo de la Invención La presente invención se refiere a un método para preparar fórmulas para infantes con ácidos grasos poliinsaturados y las composiciones de fórmulas para infantes correspondientes.

Antecedentes de la Invención Se desea incrementar la ingesta en la dieta de ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (LC-PUFAs) benéficos, incluyendo por ejemplo, ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga omega-3, y ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga omega-6 (omega-3 LC-PUFAs), para infantes y niñas. Tal como se utiliza en la presente invención, se hace referencia a un ácido graso poliinsaturado de cadena larga o LC-PUFA, se refiere a un ácido graso poliinsaturado que tiene de 18 o más átomos de carbono. El reconocimiento de los beneficios clínicos atribuidos a los ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga omega-6 y omega-3 (LC-PUFA) ha estimulado esfuerzos para incrementar el uso de estos ácidos grasos en dietas para infantes (Carlson and Forsythe 2001 Curr. Op. Clin. Nutr. Metab. Care 4, 123-126; Birch et al. 2000 Develop. Med. Child Neuro. 42, 174-181 ). Además, los beneficios clínicos de LC-PUFA omega-3 para suplementos maternales, y otros tipos de suplementos y alimentos nutricionales también están bien reconocidos (Barclay and Van Elswyk 2000, FUNCTIONAL FOODS 2000, Angus, F. and Miller C, eds., pp. 60-67, Leatherhead Publishing, Surrey).

Los ácidos grasos se clasifican con base en la longitud y características de saturación de la cadena de carbono. Tal como se utiliza en la presente invención, los ácidos grasos incluyen ácidos grasos en varias formas, incluyendo pero sin limitarse a triacilgliceroles, diacilgliceroles, monoacilgliceroles, fosfolípidos ácidos grasos libres, ácidos grasos esterificados, y formas de derivados naturales o sintéticos de estos ácidos grasos (es decir, sales de calcio de ácidos grasos, ésteres etílicos, etc.). Los ácidos graso de cadena corta tienen de 2 hasta aproximadamente 7 carbonos y normalmente están saturados. Los ácidos grasos de cadena media tienen de aproximadamente 8 hasta aproximadamente 17 carbonos y pueden ser saturados o insaturados. Los ácidos grasos de cadena larga tienen de 18 a 24 o más carbonos y también pueden ser saturados o insaturados. En ácidos grasos más largos pueden haber uno o más puntos de insaturación, dando surgimiento a los términos "monoinsaturado" y "poliinsaturado", respectivamente. Los PUFAs (LC-PUFAs) son de particular interés en la presente invención.

Los LC-PUFAs son categorizados de acuerdo con el número de posición de enlaces dobles en los ácidos grasos de acuerdo con la nomenclatura bien comprendida. Existen dos series o familias comunes de LC-PUFAs, dependiendo de la posición del enlace doble más cercano al extremo de metilo del ácido graso: las series n-3 (ó ?-3 u omega-3) que contiene un enlace doble en el tercer carbono, en tanto que la serie (ó ?-6 u omega-6) no tiene un enlace doble hasta el sexto carbono. Por lo tanto, el ácido docosahexaenoico ("DHA") tiene una longitud de cadena de 22 carbonos con 6 enlaces dobles que comienzan con el tercer carbono del extremo de metilo y se designa "22:6 n-3". Otros LC-PUFAs omega-3 importantes incluyen ácido eicosapentaenoico ("EPA") el cual se designa "20:5 n-3" y ácido docosapentaenoico n-3 ("DPA(n-3)") el cual se designa como "22:5 n-3". Además, los LC-PUFAs omega-6 se utilizan en relación con la presente invención. Por ejemplo, el ácido araquidónico ("ARA") se designa como "20:4 n-6" y el ácido docosapentaenoico n-6 ("DPAn-6") el cual se designa como "22:5 n-6" son adecuados.

La síntesis de novo o "nueva" de los ácidos grasos omega-3 y ácidos grasos omega-6 no ocurre en el cuerpo humano. El ácido graso precursor de los ácidos grasos omega-3 y omega-6 son ácido alfa-linolénico (18:3n-3) y ácido linoleico (18:2n-6), respectivamente. Estos ácidos grasos son ácidos grasos esenciales y deben ser consumidos en la dieta debido a que los humanos no los sintetizan. Los humanos no pueden insertar enlaces dobles más cercanos al extremo omega que el séptimo átomo de carbono, contando desde dicho extremo de la molécula. Sin embargo, el cuerpo puede convertir el ácido alfa-linolénico y el ácido linoleico a LC PUFAs tal como DHA y ARA, respectivamente, aunque con una eficiencia muy baja. Todas las conversiones metabólicas ocurren sin alterar el extremo omega de la molécula que contiene los enlaces dobles omega-3 y omega-6. En consecuencia, los ácidos omega-3 y omega-6 son dos familias separadas de ácidos grasos ya que no se ¡nterconvierten en el cuerpo humano.

Tanto los infantes de termino como de pretermino pueden sintetizar LC-PUFAs a partir de los ácidos grasos esenciales respectivos, pero se ha centrado una controversia alrededor del hecho de que los infantes alimentados con leche materna tienen mayores concentraciones en plasma de estos LC-PUFAs que los infantes alimentados con fórmula. Esta información puede interpretarse para implicar que los infantes alimentados con fórmula no pueden sintetizar lo suficiente de estos ácidos grasos para cumplir con las necesidades en demanda, aunque el contenido en plasma de DHA y ARA es una fracción únicamente muy pequeña del conjunto de ácido graso total disponible en otros tejidos. Se ha demostrado que la adición de DHA a la fórmula para infantes mejora la función visual de los infantes, y que la adición tanto de DHA como de ARA mejora el desarrollo cognitivo y facilita el crecimiento normal del infante. Las fuentes de aceites que contienen tanto DHA y DPA(n-6), del aceite que contiene ARA, han sido desarrolladas para el uso nutricional y se han sugerido para utilizarse en fórmulas para infante para coincidir de mejor manera con el perfil LC-PUFA encontrado en la leche materna humana.

Las fórmula para infantes que utilizan aceite de atún o lípidos de huevo como una fuente de DHA y ARA pueden contener cantidades muy pequeñas de DPA(n-6). El uso de aceite de yema de huevo y aceites de pescado en fórmulas para infantes fue propuesto en la publicación de Clandinin Patente Norteamericana No. 4,670,285. Ahí se reportó (Tabla 2) que la leche materna humana proporciona aproximadamente 1.7 mg DPA(n-6) por 100 mis que representa aproximadamente 0.07% de los ácidos grasos totales en la leche humana.

El ácido araquidónico, junto con sus productos de elongación ácido docosatetraenoico y ácido docosapentaenoico, han sido sugeridos para la inclusión de dietas para infantes junto con el ácido docosahexaenoico en reconocimiento a su surgimiento natural en la leche materna humana (Specter 1994). DPA(n-6) se encontró leche materna humana en aproximadamente 0.1% de los ácidos grasos totales (Koletzko y asociados 1992, J. Pediatrics. 120, S62-S70). DPA(n-6) normalmente es un componente de tejido en el cuerpo humano, incluyendo el corazón (Rocquelin y asociados 1989 Lipids 24, 775-780), cerebro (Svennerholm y asociados 1978, J. Neurochem. 30, 1383-1390; OBrien y asociados 1965 J. Lipid Res. 6, 545-551 ), hígado (Salem 1989 Omega-3 Fatty Acids: Molecular and Biochemical Aspects, en PAPELES PROTECTORES RECIENTES DE NUTRIENTES SELECCIONADOS, (Spiller, G. A. and Scala, J., eds.), página 109-228, Alan R. Liss, Nueva York), células de glóbulos rojos (Sanders y asociados 1978 Am. J. Clin. Nutr. 31, 805-813; Sanders y asociados 1979 Br. J. Nutr. 41, 619-623) y tejido adiposo (Clandinin y asociados 1981, Early Human Development, 5, 355-366). DPA(n-6) representa el 9% de los ácidos grasos omega-6 de cadena larga en la corteza del cerebro humano, y el 5% de los ácidos grasos omega-6 de cadena larga en la retina de los ojos (Makrides y asociados 1994 Am. J. Clin. Nutr. 60, 189-194). En humanos, DHA y DPA(n-6) representan los productos de elongación final en las trayectorias de ácido graso n-3 y n-6, respectivamente. En muchas de estas fuentes en la dieta de DHA para humanos también contienen DPA (n-6). Las fuentes importantes de DPA(n-6) en la dieta para adultos y niños son aves (carne y huevos) y alimentos del mar (Taber y asociados 1998 Lipids 33(12), 1151-1157; Nichols y asociados 1998 "ALIMENTOS MARINOS": LA BUENA ALIMENTACIÓN: EL CONTENIDO DE ACEITE (GRASA) Y COMPOSICIÓN DE PESCADOS, OSTRAS, CRUSTACEOS COMERCIALES AUSTRALIANOS. CSIRO Marine Research, Hobart, Australia).

Un número de organizaciones proporcionan recomendaciones para los niveles de LC-PUFA-s en fórmulas para infante. Por ejemplo, la Sociedad Internacional para el Estudio de Ácidos Grasos y Lipidos (ISSFAL) se recomendó en 1994 que las fórmulas para infantes proporcionan 60-100 mg/kg/día en la forma de ácido araquidónico y sus formas omega-6 de cadena larga asociadas (22:4(n-6) 22:5(n-6)). ISSFAL Board of Directors, ISSFAL Newsletter :4-5 (1994), ISSFAL hizo las siguientes recomendaciones para LC-PUFAs en la fórmula para infantes en 1999, con el objeto de asegurar la ingesta adecuada de LC-PUFAs: ácido linoleico, 18 : 2 n - 6 , 10%, ácido a-linoleico, 18:3, 1.50%, ácido araquidónico, 20:4n-6, 0.50%; ácido docosahexaenoico, 22:6n-3, ácido eicosapentaenoico, 20:5n-3, 10%. No hubo una recomendación para DPA(n-6) en estas recomendaciones (Ver la Publicación de Simopoulos y asociados, J Am Coll Nutr 18 (5): 487 (1999)).

Las Ingestas Diarias Recomendadas Establecidas (RDIs) para los ácidos grasos omega-3 de cadena larga (DHA y EPA) flutúa de 200 mg/día (COMA (Committee on Medical Aspects of Food Policy) (1994). Annual Report. Londres: Department of Health) a 1.2 g/día (Nordic Councíl of Ministers (1989). Nordic Nutrition Recommendations, Segunda Edición). Estos RDIs representan un rango de ingestas DHA/EPA de 3 a 20 mg DHA + EPA/kg/día para adultos. Aunque un RDI para un DPA(n-6) no ha sido establecido, se puede considerar una ingesta de referencia con propósitos de comparación a partir de los datos en el contenido de DPA(n-6) en la leche materna humana. Con base en un nivel promedio reportado de aproximadamente 0.1% (de ácidos grasos totales) de DPA(n-6) en leche materna (Carlson y asociados 1986 Am. J. Clin. Nutr. 44, 798-804), un infante que se alimenta con leche materna de 3 kilos que consume 0.8-1.0 litros de leche/día que contiene 32 g/litros de grasa puede consumir aproximadamente 26-32 mg/día de DPA(n-6), o aproximadamente 10 mg DPA (n-6)/kg/día. Con relación a la ingesta de DHA y DPA(n-6) combinado en los alimentos, es bien sabido que el contenido PUFA de la leche materna humana es un indicador de la composición de ácido graso en la dieta maternal (Chen y asociados 1994 Lipids 30, 15-21; Jensen 1996 Prog. Lipid Res. 35, 53-91 ). Chen y asociados Lipids 32, 1061-1067 (1997) revisó recientemente las diferencias en la composición de ácido graso de la leche materna entre una población de mujeres Chinas en una dieta "occidentalizada" versus una población con una dieta China "tradicional". Las mujeres en la dieta "tradicional" consumieron un promedio diario de 7 huevos, 220 g de pollo y 54 g de cerdo y 11 g de pescado. Esto puede representar una ingesta diaria DPA(n-6) de aproximadamente 158 mg/día con base en los datos de Taber (1998) y Nichols y asociados (1998). Las mujeres con una dieta "occidentalizada" consumieron diariamente 1 huevo, 44 g de pollo, 29 g de cerdo, y 26 g de pescado que representa una ingesta de DPA(n-6) de aproximadamente 32 mg/día (Taber 1998; Nichols y asociados 1998). Aunque DPA(n-6) en la dieta tradicional se estimó para ser cinco veces mayor que en la dieta occidentalizada, el contenido DPA(n-6) (0.10 % en peso de ácidos grasos totales) de leche materna en las mujeres en la dieta "tradicional" no fue significativamente diferente que de las mujeres con la dieta "occidentalizada" (0.09% en peso de ácidos grasos totales). Los niveles ARA fueron mayores en la leche materna de mujeres con la dieta tradicional (0.76 vs 0.61% en peso de ácidos grasos totales) pero no fueron estadísticamente diferentes. Esto indica que existe una mínima acumulación de DPA(n-6) cuando se consume en combinación con DHA y que DPA(n-6) puede ayudar a mantener los niveles ARA. Lo más importante para infantes, es que este alto nivel de ingesta de DPA(n-6) (en términos de mg/kg de peso corporal) ocurre durante el período cuando los tejidos de cerebro y neuronales están en un rápido desarrollo. Este también es el momento cuando la acumulación DHA aumenta en el infante con el contenido de DHA de la leche materna varias veces más que el de DPA(n-6).

DPA(n-6) se conoce por tener la capacidad de retroconvertir a ácido araquidónico mediante ß-oxidación (Stoffel y asociados 1970 Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem. 351, 1545-1554). La retroconversión de DPA(n-6) a ARA no es una elongación de cadena inversa, sino más bien una degradación parcial que incluye una hidrogenación y acotamiento de cadena, tal como se determina a través de experimentos con ácidos grasos etiquetados con isótopos en preparaciones de hígado de rata. Se ha sugerido que una alimentación DPA(n-6) concomitante con DHA evita la rápida disminución de ARA en la sangre que se aprecia cuando se administra DHA solo. Sin embargo, no se ha sugerido que la administración de ARA pueda disminuir.

ARA es generalmente el LC-PUFA agregado en la concentración más alta a la fórmula para infante. Las recomendaciones normales de organizaciones de salud y reguladoras, sugieren que ARA y DHA se deben agregar a la fórmula para infante en una proporción aproximada de 2:1-1:1 (ARA:DHA). Se sabe que una ingesta en la dieta de alto nivel de LC-PUFAs omega-3, tal como DHA da como resultado un incremento en el contenido de DHA, aunque también reduce los niveles en plasma de ARA. Por lo tanto, ARA se agrega a fórmula para infantes en estos niveles para compensar la disminución en niveles en plasma ARA que resultan de la administración de DHA. Las fórmulas para infantes que contienen LC-PUFAs pueden ser más costosas que las fórmulas para infantes estándares, debido al costo agregado de los ingredientes de LC-PUFA.

Puede ser recomendable enriquecer la fórmula para infantes en una fórmula que proporcione los beneficios del suplemento de DHA y ARA con una eficiencia de producción incrementada. Estas y otras necesidades son atendidas en la presente invención.

Breve Descripción de la Invención La presente invención proporciona fórmulas para infantes que tienen niveles ARA que son menores que los niveles recomendados normales o los objetivos, pero los cuales, sin embargo, reducen o evitan en forma significativa la disminución asociada en niveles en plasma ARA que ocurrirá cuando la fórmula de infante contenga ácido graso omega-3, tal como DHA. Además, la presente invención proporciona fórmulas para infantes que tienen niveles ARA que están en los niveles u objetivos aproximadamente recomendados normales, pero que proporcionan niveles ARA en plasma aumentados en comparación con productos corrientes. ARA es importante para el crecimiento, peso, desarrollo inmune, y desarrollo de sistema nervioso, por lo tanto, reduce o previene la disminución de niveles en plasma de ARA que mantiene el crecimiento de infantes, peso, desarrollo de sistema inmune, y desarrollo de sistema nervioso central en niveles normales. Las fórmulas para infantes que contienen ácido graso omega-3 tal como DHA originan disminuciones en los niveles en plasma de ARA en los infantes, y en consecuencia, se agrega ARA a la fórmula para infante para evitar dicha disminución. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método para enriquecer las fórmulas para infantes suplementadas con DHA con DPA(n- 6) un ácido graso que generalmente está presente en leche materna, para compensar la disminución en el nivel de plasma de ARA debido a DHA. Esto se describe con detalle a continuación.

En una modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infante, en donde, cuando está lista para ser consumida por el infante, la composición comprende ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga, y en donde los ácidos grasos de n-3 de cadena larga comprende ácido docosahexaenoico (DHA); los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ácido docosapentaenoico (DPA(n-6)) y opcionalmente ácido araquidónico (ARA). En esta modalidad, la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 3:1, y la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de fórmula para infante, que comprende combinar componentes nutricionales, ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga, en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden DHA; en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ARA y DPA(n-6); en donde la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 3:1, y en donde la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1. Las composiciones de fórmulas para infantes preparadas a través de este método también están incluidas en la presente invención.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 2.95:1, menor a aproximadamente a 2.85:1, menor a aproximadamente 2.9:1, menor a aproximadamente 2.8:1, menor a aproximadamente 2.75:1, menor a aproximadamente 2.5:1, menor a aproximadamente 2.25:1 , menor a aproximadamente 2:1. menor a aproximadamente 1.95:1, menor a aproximadamente 1.9:1, menor a aproximadamente 1.85:1 , menor a aproximadamente 1.8:1, o menor a aproximadamente 1.75:1. En otra modalidades, la proporción de ARA:DHA es mayor a aproximadamente 0.4:1. Aún en otras modalidades, la composición no comprende ARA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1, hasta aproximadamente 2:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1, de aproximadamente 4:1, hasta aproximadamente 3:1 , aproximadamente 2:1, aproximadamente 1:1, o aproximadamente 0.5:1.

En ciertos aspectos de estas modalidades, los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de la fórmula para infante se suministra en el aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprende al menos 2% en peso DPA(n-6). En otras modalidades, el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 5% en peso DPA(n-6), al menos aproximadamente 10% en peso DPA(n-6), al menos aproximadamente 15% en peso DPA(n-6), al menos aproximadamente 20% en peso DPA(n-6), al menos aproximadamente 25% en peso DPA(n-6), al menos aproximadamente 30% en peso DPA(n-6), al menos aproximadamente 40% en peso DPA(n-6) o al menos aproximadamente 50% en peso DPA(n -6).

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n -6), al menos aproximadamente 13 mg/L de DPA(n-6) , al menos aproximadamente 26 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 53 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 80 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 100 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 120 mg/L de DPA(n-6). En otras modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 240 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 220 mg/L de DPA(n-6), o menos de aproximadamente 200 mg/L de DPA(n-6). En otras modalidades, la composición comprende varios rangos de DPA(n-6) formados a través de cualquier combinación de cualesquiera de los valores mínimos y máximos anteriores.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infante comprende al menos 20 mg/L de DHA o al menos 40 mg/L DHA. En otras modalidades, la composición de fórmula para infante comprende de aproximadamente 40 a aproximadamente 140 mg/L de DHA, de aproximadamente 20 hasta aproximadamente 200 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 140 mg/L de DHA o menos de aproximadamente 200 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición comprende varios rangos de DHA formado a través de cualquier combinación de cualesquiera de los valores mínimos y máximos anteriores.

En ciertos aspectos, de estas modalidades, la composición de fórmula para infante comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol de aproximadamente 500 mg/L de colesterol. En otras modalidades, la composición de fórmula para infante comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 300 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol de aproximadamente 100 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol de aproximadamente 50 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol de aproximadamente 10 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infante comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol de aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de la fórmula para infante comprende más de aproximadamente 0.5 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de la fórmula para infante comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol, aproximadamente 0.75 mg/L de colesterol, aproximadamente 1.5 mg/L de colesterol, aproximadamente 2.3 mg/L de colesterol, aproximadamente 3 mg/L de colesterol, o aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos el colesterol se proporciona en la forma de un aceite microbiano, conteniendo el aceite un ácido graso omega-3 de cadena larga u omega-6 de cadena larga.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infante comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor a aproximadamente 3 mg/L. En ciertos aspectos, la composición de la fórmula para infante comprende EPA en una cantidad menor de aproximadamente 60 mg/L. En otros aspectos, la composición de la fórmula para infante comprende de aproximadamente 15 mg/L hasta aproximadamente 30 mg/L EPA. En algunas modalidades, la proporción EPA:DHA se proporciona en una proporción de hasta 1:1.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infante es formulada para proporcionar al menos aproximadamente 2 mg/kg/día DPA(n-6) cuando se administra a un infante. En algunas modalidades, la composición de la fórmula para infante es formulada para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

En una modalidad adicional, la presente invención proporciona una composición para la fórmula de un infante que comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y DHA, en los cuales los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones para la fórmula de infantes se suministran en un aceite fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6), la proporción DHA:DPA(n-6) en las composiciones de la fórmula para infantes es de aproximadamente 10:1 hasta aproximadamente 0.5:1, en donde las composiciones de la fórmula para infante son formuladas para proporcionar al menos de aproximadamente 2 mg/kg/día DPA(n-6) cuando se administran a un infante.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de la fórmula para infante, que comprende combinar componentes nutricionales, DHA, y los ácidos grasos n-6 de cadena larga, en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de la fórmula para infante se suministran en un aceite de fuente, cuando el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprende al menos aproximadamente 2% en peso DPA(n-6), en donde la proporción DHA:DPA(n-6) en las composiciones de la fórmula para infante son de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1. El método se diseña para proporcionar una formulación que proporciona al menos aproximadamente 2 mg/kg/día DPA(n-6) cuando se administran a un infante. Las composiciones de la fórmula para infante preparadas a través de este método también están incluidas en la presente invención .

En ciertos aspectos de estas modalidades, los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de la fórmula para infante se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden de aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6).

En otras modalidades, el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 5% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 10% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 15% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 20% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 25% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 30% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40% en peso de DPA(n-6), o al menos de aproximadamente 50% en peso de DPA(n -6).

En otros aspectos de estas modalidades, los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ARA, y la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 3:1. En algunas modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor de aproximadamente 2.95:1, menor a aproximadamente 2.85:1, menor a aproximadamente 2.9:1 , menor a aproximadamente 2.8:1, menor a aproximadamente 2.75:1, menor a aproximadamente 2.5:1, menor a aproximadamente 2.25:1, menor a aproximadamente 2:1, menor a aproximadamente 1.95:1 , menor a aproximadamente 1.9:1, menor a aproximadamente 1.85:1, menor a aproximadamente 1.8:1, o menor a aproximadamente 1.75:1. En otras modalidades, la proporción de ARA:DHA es mayor a aproximadamente 0.4:1. Aún en otras modalidades, las composiciones no comprenden ARA. ciertos aspectos de estas modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n -6), de al menos aproximadamente 13 mg/L de DPA(n -6), de al menos aproximadamente 26 mg/L de DPA(n-6), de al menos aproximadamente 40 mg/L de DPA(n-6), de al menos aproximadamente 53 mg/L de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6), de al menos aproximadamente 80 mg/L de DPA(n-6), de al menos aproximadamente 100 mg/L de DPA(n-6), de al menos aproximadamente 120 mg/L de DPA(n-6). En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 240 mg/L de DPA(n-6), menos de aproximadamente 220 mg/L de DPA(n-6), o menos de aproximadamente 200 mg/L de DPA(n-6).

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infantes comprende al menos 20 mg/L de DHA o al menos 40 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición de la fórmula para infantes comprende de aproximadamente 40 a aproximadamente 140 mg/L de DHA, de aproximadamente 20 hasta aproximadamente 200 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 140 mg/L de DHA o menos de aproximadamente 200 mg/L de DHA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la proporción DHA:DPA(n-6) en la composición de la fórmula para infante es de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 3:1 , de aproximadamente 5:1 , a aproximadamente 2:1, de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 1:1 , aproximadamente 4:1, aproximadamente 3:1, aproximadamente 2:1, aproximadamente 1:1, o aproximadamente 0.5:1.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infantes, comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol. En otras modalidades, la composición para la fórmula de infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 300 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 100 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 50 mg/L de colesterol, o de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 10 mg/L de colesterol. En otros aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de la fórmula para infantes comprende más de aproximadamente 0.5 mg/L. En algunas modalidades, la composición de la fórmula para infante comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol, aproximadamente 0.75 mg/L de colesterol, aproximadamente 1.5 mg/L de colesterol, aproximadamente 2.3 mg/L de colesterol, aproximadamente mg/L de colesterol, aproximadamente 3 mg/L de colesterol, o aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos el colesterol se proporciona en la forma de un aceite microbiano, conteniendo el aceite un ácido graso de cadena larga omega-6 u omega-3 de cadena larga.

En ciertas aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infantes comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor a aproximadamente 3 mg/L. En otros aspectos, la composición de la fórmula para infantes comprende EPA en una cantidad menor de aproximadamente 60 mg/L. En otros aspectos, la composición de la fórmula para infantes comprende de aproximadamente 15 mg/L hasta aproximadamente 30 mg/L EPA. En algunas modalidades, la proporción EPA:DHA se proporciona en una proporción de hasta aproximadamente 1:1.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infantes se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

En una modalidad adicional, la presente invención proporciona una composición para la fórmula de infantes formulada para comprender al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6) cuando están listas para consumo, en donde la composición comprende además ácidos grasos n-3 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden DHA; en donde la composición comprende opcionalmente además ácido araquidónico ARA; y en donde la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 3:1.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición para la fórmula de infantes, que comprende combinar componentes nutricionales DPA(n-6), DHA, y opcionalmente, ARA; en donde la composición se formula para comprender al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6) cuando está lista para consumo, y en donde la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 3:1. Las composiciones de fórmula para infante preparada a través de este método también están incluidas en la presente invención.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor a aproximadamente 3:1. En algunas modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor de aproximadamente 2.95:1, menor de aproximadamente 2.85:1, menor de aproximadamente 2.9:1, menor de aproximadamente 2.8:1, menor de aproximadamente 2.75:1, menor de aproximadamente 2.5:1, menor de aproximadamente 2.25:1, menor de aproximadamente 2:1, menor de aproximadamente 1.95:1 , menor de aproximadamente 1.9:1, menor de aproximadamente 1.85:1, menor de aproximadamente 1.8:1, o menor de aproximadamente 1.75:1. En otras modalidades, la proporción de ARA:DHA es mayor a aproximadamente 0.4:1. Aún en otras modalidades, la composición no comprende ARA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de la fórmula para infantes comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 13 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 26 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 53 mg/L de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 80 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 100 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 120 mg/L de DPA(n -6). En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende menos de aproximadamente 240 mg/L de DPA(n-6), menos aproximadamente 220 mg/L de DPA(n-6), o menos de aproximadamente 200 mg/L de DPA(n-6).

En ciertos aspectos de estas modalidades, los ácidos grados n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos graso n-6 de cadena larga que comprenden al menos 2% en peso de DPA(n-6). En otras modalidades, los ácidos grados n- 6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se sumin istra n en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 5% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 10% en peso de DPA(n-6) al menos aproximadamente 15% en peso de DPA(n-6) al menos aproximadamente 20% en peso de DPA(n-6) al menos aproximadamente 25% en peso de DPA(n-6) al menos aproximadamente 30% en peso de DPA(n-6) al menos aproximadamente 40% en peso de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 50% en peso de DPA(n-6).

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende al menos aproximadamente 20 mg/L de DHA o al menos aproximadamente 40 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 40 hasta aproximadamente 140 mg/L de DHA, de aproximadamente 20 hasta aproximadamente 200 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 140 mg/L de DHA o menos de aproximadamente 200 mg/L de DHA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la proporción DHA:DPA(n-6) en la composición de fórmula para infantes es de aproximadamente 10:1 hasta aproximadamente 3:1 , de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1, aproximadamente 4:1 , aproximadamente 3:1 , aproximadamente 2:1, aproximadamente 1 :1, o aproximadamente 0.5:1.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol. En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 300 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 100 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 50 mg/L de colesterol, o de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 10 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende más de aproximadamente 0.5 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol, aproximadamente 0.75 mg/L de colesterol, aproximadamente 1.5 mg/L de colesterol, aproximadamente 2.3 mg/L de colesterol, aproximadamente 3 mg/L de colesterol, o aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos, el colesterol se proporciona en la forma de un aceite microbiano, conteniendo el aceite un ácido graso de cadena larga omega-3 o de cadena larga omega-6 .

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor a aproximadamente 3 mg/L. En otros aspectos, la composición de fórmula para infantes comprende EPA en una cantidad menor a aproximadamente 60 mg/L. En otros aspectos, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 15 mg/L hasta aproximadamente 30 mg/L de EPA. En algunas modalidades, la proporción EPA:DHA se proporciona en una proporción de hasta 1:1.

En otros aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes se formula para proporciona al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administran a un infante. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

Aún en otra modalidad la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes y un método para preparar una composición de fórmula para infantes en la cual la cantidad de DPA(n-6) en la composición se determina con base en los niveles en plasma de ARA que se desean. En esta modalidad, la composición de fórmula para infantes se formula para cumplir con los requerimientos objetivo de DHA y ARA, y la composición comprende DHA en la cantidad de requerimiento de DHA objetivo, ARA en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento de ARA objetivo; y DPA(n-6) en una cantidad suficiente para retro-convertir ARA in vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub-objetivo de ARA.

En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infante y un método para preparar una composición de fórmula para infante formulada para cumplir con los requerimientos objetivo de DHA y ARA, en donde la composición comprende DHA en la cantidad de requerimiento objetivo de DHA; ARA en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) en al menos una cantidad de valor de umbral, en donde la curva de respuesta ARA es curvilínea, y en donde la cantidad de valor de umbral da como resultado una respuesta ARA en la cual la pendiente de la curva de respuesta ARA cambia de negativo a positivo.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de fórmula para infantes, que comprende combinar componentes n utricionales, DHA, ARA y DPA(n-6), en donde DHA está presente en una cantidad de requerimiento objetivo de DHA; ARA está presente en una cantidad sub-objetivo menor a una cantidad de requerimiento objetivo ARA; y DPA(n-6) está presente en una cantidad suficiente para retro-convertir a ARA ¡n vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub-objetivo de ARA. Las composiciones de fórmula para infantes preparadas a través de este método también se incluyen en la presente invención.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de fórmula para infantes, que comprende combinar componentes nutricionales, y una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación se selecciona del grupo que consiste en una combinación que comprende un primer aceite que comprende DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que comprende DHA; una combinación que comprende un aceite que tiene una primera proporción de DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que tiene una segunda proporción DHA de DPA(n-6), en donde las proporciones son diferentes y en donde el primer aceite tiene más DPA(n-6) que el segundo aceite; y una combinación que comprende un primer aceite de un microorganismo traustoquitrido y un segundo aceite de un microorganismo dinoflagelato. Las composiciones de fórmula para infantes preparadas a través de este método también están incluidas en la presente invención.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la cantidad sub-objetivo de ARA es una cantidad seleccionada del grupo que consiste en una cantidad de aproximadamente 5% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de aproximadamente 10% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de aproximadamente 15% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, y una cantidad de aproximadamente 20% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1, menor aproximadamente a 2.95:1, menor aproximadamente a 2.85:1, menor aproximadamente a 2.9:1, menor aproximadamente a 2.8:1, menor aproximadamente a 2.75:1, menor aproximadamente a 2.5:1 , menor aproximadamente a 2.25:1, menor aproximadamente a 2:1, menor aproximadamente a 1.95:1 , menor aproximadamente a 1.9:1 , menor aproximadamente a 1.85:1 , menor aproximadamente a 1.8:1 , o menor aproximadamente a 1.75:1. En otras modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1, aunque mayor aproximadamente a 0.4:1. Aún en otras modalidades, la composición no comprende ARA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, los ácidos grados n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos graso n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6). En otras modalidades, los ácidos grados n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 5% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 10% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 15% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 20% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 25% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 30% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40% en peso de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 50% en peso de DPA(n-6).

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende al menos aproximadamente 20 mg/L de DHA o al menos aproximadamente 40 mg/L de DHA.

En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 40 hasta aproximadamente 140 mg/L de DHA, de aproximadamente 20 hasta aproximadamente 200 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 140 mg/L de DHA o menos de aproximadamente 200 mg/L de DHA.

En otros aspectos de estas modalidades, la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1, aproximadamente 4:1 , aproximadamente 3:1, aproximadamente 2:1 , aproximadamente 1 :1 , o aproximadamente 0.5:1.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 13 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 26 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 53 mg/L de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 80 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamentel 00 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 120 mg/L de DPA(n-6). En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende menos de aproximadamente 240 mg/L de DPA(n-6), menos de aproximadamente 220 mg/L de DPA(n-6), o menos de aproximadamente 200 mg/L de DPA(n-6).

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol. En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 300 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 100 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 50 mg/L de colesterol, o de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 10 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende más de aproximadamente 0.5 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol, aproximadamente 0.75 mg/L de colesterol, aproximadamente 1.5 mg/L de colesterol, aproximadamente 2.3 mg/L de colesterol, aproximadamente 3 mg/L de colesterol, o aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos el colesterol se proporciona en la forma de un aceite microbiano, conteniendo el aceite un ácido graso de cadena larga omega-3 o de cadena larga omega-6.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L. En otros aspectos, la composición de fórmula para infantes comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L. En otros aspectos, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 15 mg/L hasta aproximadamente 30 mg/L de EPA. En algunas modalidades, la proporción EPA:DHA se proporciona en una proporción de hasta 1:1.

En otros aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes se formula para proporciona al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

En algunos aspectos de todas las modalidades anteriores, DHA, ARA o DPA(n-6) es de una fuente seleccionada del grupo que consiste en una planta, una semilla de aceite, un microorganismo, un animal, y mezclas de los anteriores. En algunos aspectos, el microorganismo se selecciona del grupo que consiste en algas, bacterias, hongos y protozoarios. En algunos aspectos, el microorganismo se selecciona del grupo que consiste en Traustoquitriales, dinoflagelatos y Mucorales. En otros aspectos, el microorganismo se selecciona del grupo que consiste en Schizoquitrium , Traustoquitrium, Crypthecodinium y Mortierella.

En otros aspectos, la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada o una semilla de aceite genéticamente modificada seleccionada del grupo que consiste en frijol soya, maíz, cártamo, girasol, cañóla, lino, cacahuate, mostaza, semilla de colza, garbanzo, algodón, lenteja, clavo blanco, olivo, palma, borraja, primavera nocturna, semilla de linaza y tabaco y mezclas de los mismos.

En aún otros aspectos, la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada, o una semilla de aceite genéticamente modificada, y un microorganismo genéticamente modificado, en donde la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido o una parte del mismo. Tal como lo aprecian los expertos en la técnica, una semilla de aceite genéticamente modificada es parte de una planta genéticamente modificada.

En aspectos adicionales, la composición comprende una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación comprende un primer aceite que comprende DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que comprende DHA.

En aspectos adicionales, la composición comprende una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación comprende un primer aceite que tiene una primera proporción de DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que tiene una segunda proporción de DHA y DPA(n-6), en donde las proporciones son diferentes y en donde el primer aceite tiene más de DPA(n-6) del segundo aceite.

En aspectos adicionales, la composición de fórmula para infantes comprende una combinación de aceites microbianos, y en donde la combinación comprende aceite de un microorganismo traustoquitrido y un aceite de un microorganismo dinoflagelato.

En aspectos adicionales, la composición comprende una combinación de aceites microbianos y de planta, en donde la combinación comprende aceite de una planta genéticamente modificada que produce DHA y DPA(n-6), y en donde el aceite de planta comprende DHA y DPA(n-6), y en donde el aceite microbiano comprende ARA. En algunos aspectos, la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

En algunos aspectos, la composición comprende un aceite de planta de una planta genéticamente modificada que produce DHA y DPA(n-6), y en donde el aceite comprende DHA y DPA(n-6) en una proporción de aproximadamente 0.5:1 hasta aproximadamente 10:1. En aspectos adicionales, la composición comprende un aceite de planta de una planta genéticamente modificada que produce uno de DPA(n-6), DHA ó ARA. En modalidades preferidas de este aspecto, el microorganismo no produce uno o ambos de los otros dos PUFAs. En algunos aspectos, la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

En aspectos adicionales, la composición comprende un aceite microbiano de un microorganismo genéticamente modificado y en donde el aceite comprende DHA y DPA(n-6) en una proporción de aproximadamente 0.5:1 hasta aproximadamente 10:1. En aspectos adicionales, la composición comprende un aceite microbiano de un microorganismo genéticamente modificado que produce uno de DPA(n-6), DHA ó ARA. En modalidades preferidas de este aspecto, el microorganismo no produce uno o ambos de los dos PUFAs. En algunos aspectos, la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

La presente invención proporciona además métodos para alimentar a un infante, en donde los métodos comprenden administrar una composición nutricional infantil de la presente invención a un infante.

La presente invención proporciona además un método para alimentar a un infante, en donde el método comprende administrar una composición de fórmula para infantes que contiene componentes nutricionales, DHA y DPA(n-6) a un infante, en donde el infante es alimentado al menos aproximadamente 2 mg de DPA(n-6)/kg/día.

Tal como se utiliza en la presente invención, una cantidad/kg/día significa la cantidad multiplicada por el peso del infante en kilogramos, por día. Tal como se utiliza en la presente invención, una cantidad/L significa la cantidad en un litro de composición de fórmula para infantes tal como se proyecta para el consumo de un infante, es decir, si la composición de fórmula para infantes, se fabrica como un polvo seco o un líquido concentrado, la cantidad/L se mide con el polvo seco o líquido concentrado habiendo sido mezclado con líquido suficiente para lograr la composición de fórmula para infantes proyectada para ser consumida por un infante. Cuando fuentes y cantidades o rangos de los ácidos grasos y otros ingredientes se utilizan en la presente invención, todas las combinaciones y sub-combinaciones y modalidades específicas están proyectadas para estar incluidas.

Breve Descripción de las Figuras La figura 1, muestra el cambio en 4 semanas a partir de la línea de base en niveles DHA de fosfolípido en plasma (PL) como un porcentaje en peso de ácidos grasos totales mediante una dosis DHA y una fuente DHA para el Estudio de Biodisponibilidad DHA en Adultos del Ejemplo 1 utilizando Aceite Schizoquitrium Martek DHA™-S con alto contenido de DHA comparado con un aceite DHA puro (DHASCO®) (LSMean ± S.E., n = 12 individuos por punto de datos).

La figura 2, muestra el cambio en 4 semanas a partir de la línea de base en niveles DPA(n-6) de fosfolípido en plasma (PL) como un porcentaje en peso de los ácidos grasos totales mediante dosis DHA y una fuente DHA para el Estudio de Biodisponibilidad DHA en Adultos del Ejemplo 1 utilizando Aceite Schizoquitrium Martek DHA™-S con alto contenido de DHA comparado con un aceite DHA puro (DHASCO®) (LSMean ± S.E., n = 12 individuos por punto de datos).

La figura 3, muestra el cambio en 4 semanas a partir de los niveles de la línea de base en niveles de ácido araquidonico de fosfolípido en plasma (PL) medido como un porcentaje en peso de los ácidos grasos totales mediante una dosis y fuente DHA para el Estudio de Biodisponibilidad DHA del Ejemplo 1 utilizando Aceite Schizoquitrium Martek DHA™-S con alto contenido de DHA comparado con un aceite DHA puro (DHASCO®) (LSMean ± S.E., n = 12 individuos por punto de datos).

La figura 4, muestra niveles de ácido graso de fosfolípido en plasma como un porcentaje en peso de ácidos grasos totales para el Estudio de Biodisponibilidad DHA en Niños del Ejemplo 2 antes y después del suplemento con 200 y 400 mg de DHA/día con Aceite Schizoquitrium Martek DHA™-S con alto contenido de DHA durante 4 semanas (n = 10 a12 individuos por grupo).

Las figuras 5A a 5C, muestran niveles DHA (A), DPA(n-6) (B) y ARA (C) en plasma después de 28 días de alimentar a ratas con una dieta que contiene aceite Martek DHA™-S o aceite DHASCO®.

Descripción Detallada de la Invención La presente invención se dirige a métodos para preparar productos de fórmula para infantes y composiciones de fórmula para infantes que se suplementan con LC-PUFAs. La fórmula para infantes se define a través de la ley de los Estados Unidos como un alimento que pretende ser o está representado para uso de dieta especial únicamente como alimento para infantes por razones de su simulación con la leche humana o su capacidad de adaptación como un substituto completo o parcial de leche humana.

Las fórmulas para infantes de la presente invención en algunas modalidades pueden tener niveles ARA que son inferiores a los niveles recomendados normales u objetivos, pero que sin embargo, reducen en forma significativa o previenen la disminución asociada en niveles en plasma de ARA que ocurrirán cuando la fórmula para infantes contiene un ácido graso omega-3 tal como DHA. La reducción o prevención de la disminución de niveles en plasma de ARA mantiene el crecimiento de infantes, peso, desarrollo del sistema inmune y desarrollo del sistema nervioso normales.

Tal como se observó anteriormente, se ha sugerido que LC-PUFAs se incluya en una fórmula para infantes en cantidades que coincidan o mimeticen cercanamente el perfil LC-PUFA encontrado en leche materna. Las fórmulas de la presente invención están basadas en el reconocimiento de que la fórmula para infantes no necesita coincidir o mimetizar en forma cercana el perfil LC-PUFA encontrado en leche materna, con el objeto de proporcionar beneficios nutricionales significativos. En forma específica, los inventores de la presente invención han descubierto que la adición de DPA(n-6) a la fórmula para infantes suplementada con DHA, ayudará a mantener los niveles ARA en plasma en los infantes. Por lo tanto, la cantidad de ARA agregada a la fórmula para infantes puede reducirse a una cantidad sub-objetivo para compensar el ARA metabolizado a partir de DPA(n-6). Tal como se utiliza en la presente invención, la referencia a ARA en una cantidad sub-objetivo se refiere a una cantidad de ARA que es menor a una cantidad de requerimiento ARA objetivo en una fórmula para infantes. Un ejemplo de una cantidad de requerimiento ARA objetivo es la cantidad de ARA en leche materna. Esta cantidad ha sido reportada como 0.37-0.49% de los ácidos grasos totales en elche materna. (Yuhas, y asociados, Lipids, 2006 41 (9): 851-58). Por consiguiente, tal como se utiliza en la presente invención, un ejemplo de un requerimiento ARA objetivo para una composición de fórmula para infantes será de 0.37-0.49% de ácidos grasos totales en la composición de fórmula para infantes. Otro ejemplo de una cantidad de requerimiento objetivo de ARA es la cantidad de ARA agregada a una composición de fórmula para infantes, de modo que se proporcione una proporción aproximada de aproximadamente 2:1 hasta aproximadamente 1:1 (ARA: DH A).

El reconocimiento de los inventores es el resultado del descubrimiento de que la suplementación con el DPA(n-6), da como resultado una respuesta ARA curvilínea, con reducciones en ARA en bajas dosis aunque un mantenimiento cercano de niveles ARA en dosis más altas. Por lo tanto, la presente invención proporciona métodos y composiciones para fórmulas de infantes, en donde al menos uno de ARA en la fórmula para infantes se reemplaza o suplementa con DPA(n-6). Sin pretender limitarse a la teoría, se considera que tanto DPA(n-6) como ARA son importantes como fuentes independientes de eicosanoides que impactan el crecimiento y por su capacidad para competir con ácidos grasos LC ?-3 tales como DHA para incorporarse en membranas celulares. ARA puede ser alargada a DPA(n-6), y DPA(n-6) puede ser retro-convertida a ARA. Sin pretender limitarse a la teoría, los inventores de la presente invención han descubierto que en una dosis de valor de umbral, DPA(n-6) se retro-convierte en forma activa a ARA in vivo, un fenómeno que parece ser transmitido por substrato. Por ejemplo, la figura 3 muestra una respuesta curvilínea de niveles ARA en plasma en donde la pendiente de la respuesta ARA cambia de negativo a positivo, conforme incrementan las cantidades de DPAfn-6), un componente del aceite Martek DHA-S. Por lo tanto, la figura 3 ilustra una dosis de valor de umbral de DPA(n-6). Además, la presente invención incluye fórmulas de infantes suplementadas con DHA que tienen cantidades convencionales de suplemento ARA, que incluyen además DPA(n-6) que dan como resultado fórmulas para infantes que pueden lograr niveles en plasma ARA mayores (aumentados) debido a la combinación de ARA en la fórmula y la retro-conversión de DPA(n-6) a ARA.

Ya que las fórmulas para infantes de la presente invención comprenden múltiples componentes incluyendo, LC-PUFAs, se podrá apreciar que las diferentes modalidades de las fórmulas para infantes pueden describirse de acuerdo con la referencia a uno o más de los componentes, o proporciones de dichos componentes. Por ejemplo, la cantidad de ARA en la composición puede expresarse como una proporción de ARA:DHA. La cantidad de DPA(n-6) en la composición puede expresarse como una proporción con DHA o como una concentración de DPA(n-6) contenida en la fórmula, por ejemplo, en un litro de la fórmula tal como se pretende para consumo por parte de un infante. Las fórmulas para infantes pueden describirse utilizando la cantidad de DPA(n-6) en la composición con base en los niveles en plasma de ARA que se desean; esto es, DPA(n-6) en una cantidad suficiente para retro-con ertir a ARA in vivo, y suficiente para compensar (compensar) la cantidad de ARA en la fórmula que se presenta en una cantidad su b-objetivo.

Por consiguiente, en una modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes, en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1. En otras modalidades, la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 2.95:1, menor aproximadamente a 2.85:1, menor aproximadamente a 2.9:1 , menor aproximadamente a 2.8:1, menor aproximadamente a 2.75:1, menor aproximadamente a 2.5:1 , menor aproximadamente a 2.25:1, menor aproximadamente a 2:1, menor aproximadamente a 1.95:1, menor aproximadamente a 1.9:1 , menor aproximadamente a 1.85:1, menor aproximadamente a 1.8:1, o menor aproximadamente a 1.75:1. En otras modalidades, la proporción de ARA:DHA es mayor aproximadamente a 0.4:1. Aún en otras modalidades, la composición no comprende ARA.

En algunas modalidades, la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 10:1 hasta aproximadamente 0.5:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1, aproximadamente 4:1, aproximadamente 3:1 , aproximadamente 2:1, aproximadamente 1:1 , o aproximadamente 0.5:1.

En algunas modalidades, los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6). En otras modalidades, los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 5% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 10% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 15% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 20% en peso de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 25% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 30% en peso de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40% en peso de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 50% en peso de DPA(n En algunas modalidades, la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-B), al menos aproximadamente 13 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 26 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 40 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 53 mg/L de DPA(n-6), o al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 80 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamentel 00 mg/L de DPA(n-6), al menos aproximadamente 120 mg/L de DPA(n-6). En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 240 mg/L de DPA(n-6), menos de aproximadamente 220 mg/L de DPA(n-6), o menos de aproximadamente 200 mg/L de DPA(n-6).

En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende al menos 20 mg/L de DHA o al menos 40 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 40 hasta aproximadamente 140 mg/L de DHA, de aproximadamente 20 hasta aproximadamente 200 mg/L de DHA. En otras modalidades, la composición comprende menos de aproximadamente 140 mg/L de DHA o menos de aproximadamente 200 mg/L de DHA.

En ciertos aspectos de estas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol. En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 300 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 100 mg/L de colesterol, de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 50 mg/L de colesterol, o de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 10 mg/L de colesterol. En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende más de aproximadamente 0.5 mg/L de colesterol. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol, aproximadamente 0.75 mg/L de colesterol, aproximadamente 1.5 mg/L de colesterol, aproximadamente 2.3 mg/L de colesterol, aproximadamente 3 mg/L de colesterol, o aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol. En ciertos aspectos el colesterol se proporciona en la forma de un aceite microbiano, conteniendo el aceite un ácido graso de cadena larga omega-3 o de cadena larga omega-6.

En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L. En otros aspectos, la composición de fórmula para infantes comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L. En otros aspectos, la composición de fórmula para infantes comprende de aproximadamente 15 mg/L hasta aproximadamente 30 mg/L de EPA. En algunas modalidades, la proporción EPA:DHA se proporciona en una proporción de hasta 1:1.

En otras modalidades, la composición de fórmula para infantes se formula para proporciona al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante. En algunas modalidades, la composición de fórmula para infantes se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

En algunas modalidades, la cantidad sub-objetivo de ARA es una cantidad seleccionada del grupo que consiste en una cantidad de aproximadamente 5% debajo de una cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de aproximadamente 10% debajo de una cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de aproximadamente 15% debajo de una cantidad de requerimiento objetivo de ARA, y una cantidad de aproximadamente.20% debajo de una cantidad de requerimiento objetivo de ARA.

En una modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes, en donde la composición comprende ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga, y en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden ácido docosahexaenoico (DHA); los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ácido docosapentaenoico (DPA(n-6)) y opcionalmente ácido araquidonico (ARA). En esta modalidad, la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1, y la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de fórmula para infantes, caracterizada porque comprende combinar componentes nutricionales, ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden DHA; en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ARA y DPA(n-6); en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1, y en donde la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1. Las composiciones de fórmulas para infantes preparadas a través de este método también se incluyen en la presente invención.

En otra modalidad, la fórmula para infantes comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y DHA, en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6), la proporción DHA: DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1 , y en donde la composición se formula para proporcionar al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de fórmula para infantes, en donde el método comprende combinar los componentes nutricionales, DHA y los ácidos grasos n-6 de cadena larga, en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6), en donde la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1. El método se diseña para proporcionar una formulación que proporciona al menos aproximadamente 2 mg/kg/d¡a de DPA(n-6) cuando se administra a un infante. Las composiciones de fórmula para infantes preparadas a través de este método también están incluidas en la presente invención.

En otra modalidad, la composición de fórmula para infantes se formula para comprender al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6) cuando están listas para consumo, en donde la composición comprende además ácidos grasos n-3 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden DHA; en donde la composición comprende en forma opcional además ácido araquidonico ARA; y en donde la proporción de ARA.DHA es menor aproximadamente a 3:1.

La presente invención también proporciona un método para preparar una composición de fórmula para infantes, caracterizado porque comprende combinar componente nutricionales, DPA(n-6), DHA y opcionalmente ARA; en donde la composición se formula para comprender al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6) cuando está lista para consumo, y en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1. Las composiciones de fórmula para infantes preparadas a través de este método también están incluidas en la presente invención.

Aún en otra modalidad la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes formulada para cumplir con los requerimientos objetivos de DHA y ARA, y la composición comprende DHA en la cantidad de requerimiento objetivo de DHA, ARA en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) en una cantidad suficiente para retro-convertir a ARA ¡n vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub-objetivo de ARA. Se deberá observar que los infantes no se considera que tienen una deficiencia fisiológica en la presente invención (por ejemplo, los infantes no tienen una deficiencia de ARA). Más bien, el término "sub-objetivo" se utiliza en la presente invención para referirse a una cantidad que es menor a una cantidad recomendada u objetivo. Por ejemplo, una cantidad ampliamente recomendada u objetivo de ARA, es una cantidad suficiente para proporcionar una proporción ARA:DHA de 2:1, de modo que se logren niveles en plasma adecuados de ARA y DHA.

Un método para preparar una composición de fórmula para infantes, en donde el método comprende combinar componentes nutricionales, DHA, ARA y DPA(n-6), en donde DHA está presente en la cantidad de requerimiento objetivo de DHA; ARA está presente en una cantidad sub-objetivo menor a una cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) está presente en una cantidad suficiente para retro-convertir ARA in vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub-objetivo de ARA. Las composiciones de fórmula para infantes preparadas a través de este método también están incluidas en la presente invención.

ARA, DHA y DPA(n-6), y otros PUFAs aquí referidos, tal como EPA, pueden estar en cualesquiera de las formas comunes encontradas en los lípidos naturales incluyendo pero sin limitarse a triacilgliceroles, diacilgliceroles, monoacilgliceroles, fosfolípidos, ácidos grasos libres, ácidos grasos esterificados o formas derivadas naturales o sintéticas de estos ácidos grasos (por ejemplo, sales de calcio de ácidos grasos, esteres etílicos, etc.). La referencia a un aceite que comprende un PUFA, tal como se utiliza en la presente invención, se puede referir ya sea a un aceite que comprende únicamente a un PUFA simple tal como DHA o un aceite que comprende una mezcla de dos o más PUFAs tal como DHA y EPA, o DHA y ARA DPA(n-6).

Una fuente preferida de un aceite que comprende al menos un PUFA, en las composiciones y métodos de la presente invención, incluye una fuente microbiana. Las fuentes microbianas y métodos para crecer microorganismos que comprenden nutrientes y/o PUFAs, se conocen en la técnica (Industrial Microbiology and Biotechnology, 2° edición, 1999, American Society for Microbiology). Preferentemente, los microorganismos se cultivan en un medio de fermentación en un termentador. Los métodos y composiciones de la presente invención aplican a cualquier microorganismo industrial que produzca cualquier tipo de nutrientes o un componente deseado tal como, por ejemplo, algas, protozoarios, bacterias y hongos (incluyendo levadura).

Las fuentes microbianas pueden incluir un microorganismo tal como algas, bacterias, hongos y/o protozoarios. Los organismos preferidos incluyen los seleccionados del grupo que consiste en algas doradas (tal como microorganismos de reino Stramenopiles), algas verdes, diátomos, dinoflagelatos (tal como microorganismos del orden Dinophyceae incluyendo miembros del género Crypthecodinium tal como, por ejemplo, Crypthecodinium cohnii), levadura y hongos de los géneros Mucor y Mortierella , incluyendo pero sin limitarse a Mortierella alpina y Mortierella sect. schmuckeri . Los miembros del grupo microbiano Stramenopiles, incluyen micro-algas y microorganismos tipo alga, incluyendo los siguientes grupos de microorganismos: Hamatores, Proteromonad Opalines, Develpayella, Diplophrys, Labrinthulids, Traustoquitrids, Biosecids, Oomycetes, Hipoquitridiomycetes, Commation, Reticu losphaera , Pelagomonas, Pelagococcus, Ollicola, Aureococcus, Parmales, Diatoms, Xanthophytes, Phaeophytes (alga café), Eustigmatophytes, Raphidophytes, Synurids, Axodines (incluyendo Rhizochromulinaales, Pedinellales, Dictyochales), Chrysomeridales, Sarcinochysidales, Hydrurales, Hibberdiales y Chromulinales. Los Traustoquitrids incluyen los géneros Schizoquitrium (las especies incluyen aggregatum , limnaceum , mangrovei, minutum, octosporum), Traustoquitrium (las especies incluyen arudimentale , aureum, benthicola, globosum , kinnei, motivum, multirudimentale , pachydermum , proliferum , roseum, striatum) , Ulkenia* (las especies incluyen amoeboidea , kerguelensis, minuta, profunda, radíate, sailens, sarkariana , schizoquitrops, visurgensis, yorkensis) , Aplanoquitrium (las especies incluyen haliotidis , kerguelensis, profunda , stocchinoi), Japonoquitrium (las especies incluyen marinum) , Althornia (las especies incluyen crouchii), y Elina (las especies incluyen marisalba, sinorifica) . Ya que existe un cierto desacuerdo entre los expertos en cuanto a que si Ulkenia es un género separado del género Traustoquitrium , para los propósitos de la presente solicitud, el género Traustoquitrium incluirá Ulkenia. Los Labrinthulids incluyen los géneros Labyrinthula (las especies incluyen algeriensis, coenocystis, chattonii, macrocystis, macrocystis atlántica , macrocystis macrocystis , marina, minuta, roscoffensis, valkanovii , vitellina, vitellina pacifica, vitellina vitellina, zopfi), Labyrinthomyxa (las especies incluyen marina), Labyrinthuloides (las especies incluyen haliotidis, yorkensis), Diplophrys (las especies incluyen archeri), Pyrrhosorus* (las especies incluyen marinus), Sorodiplophrys* (las especies incluyen stercorea), Chlamydomyxa* (las especies incluyen labyrinthuloides, montana) . (* = no existe consenso general corriente en la colocación taxonómica exacta de estos géneros).

Aunque el proceso de la presente invención se puede utilizar para producir forma de PUFAs que se pueden producir en una amplia variedad de microorganismos, con objeto de brevedad, conveniencia e ilustración, la descripción detallada de la presente invención describirá procesos para crecer microorganismos que tienen la capacidad de producir lípidos que comprenden ácidos grasos poli-insaturados omega-3 y/u omega-6, en particular microorganismos que tienen la capacidad de producir DHA (o compuestos cercanamente relacionados tales como DPA, EPA o ARA). Los microorganismos preferidos adicionales son algas, tales como Traustoquitrids del orden de Traustoquitriales, incluyendo Traustoquitrium (incluyendo Ulkenia), y Schizoquitrium , e incluyendo Traustoquitriales que se describen en las Patentes Norteamericanas comúnmente asignadas Nos. 5,340,594 y 5,340,742, ambas emitidas para Barclay, las cuales todas están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia. Más preferentemente, los microorganismos se seleccionan del grupo que consiste en microorganismos que tienen las características de identificación del número ATCC 20888, número ATCC 20889, número ATCC 20890, número ATCC 20891 y número ATCC 20892. También se prefieren cepas de Mortierella schmuckeri (por ejemplo, incluyendo microorganismos que tienen las características de identificación de ATCC 74371 ) y Mortierella alpina (por ejemplo, incluyendo microorganismos que tienen las características de identificación de ATCC 42430). También se prefieren cepas de Crypthecodinium cohnii, incluyendo microorganismos que tienen las características de identificación de ATCC Nos. 30321, 30334-30348, 30541-30543, 30555-30557, 30571, 30572, 30772-30775, 30812, 40750, 50050-50060 y 50297-50300. También se prefieren cepas mutantes derivadas de cualesquiera de las anteriores y mezclas de las mismas. También se prefieren microorganismos oleaginosos. Tal como se utiliza en la presente invención, los "microorganismos oleaginosos" son definidos como microorganismos que tienen la capacidad de acumular más del 20% del peso de sus células en la forma de lípidos. Los microorganismos genéticamente modificados que producen PUFAs también son adecuados para la presente invención. Estos pueden incluir microorganismos que producen naturalmente PUFA que han sido genéticamente modificados así como microorganismos que no producen naturalmente PUFAs pero que han sido modificados genéticamente para hacerlo.

Los organismos adecuados se pueden obtener del número de fuentes disponibles, incluyendo mediante la recolección del ambiente natural. Por ejemplo, la Recolección de Cultivo Tipo Americana actualmente describe muchas cepas públicamente disponibles de microorganismos identificados anteriormente. Tal como se utiliza en la presente invención, cualquier organismo o cualquier tipo específico de organismo, incluye cepas naturales, mutantes o tipos recombinantes. Las condiciones de crecimiento en las cuales se cultivan o crecen estos organismos son conocidas en la técnica, y las condiciones de crecimiento adecuadas para al menos alguno de estos organismos se describen, por ejemplo, en la Patente Norteamericana No. 5,130,242, Patente Norteamericana No. 5,407,957, Patente Norteamericana No. 5,397,591 , Patente Norteamericana No. 5,492,938 y Patente Norteamericana No. 5,711,983, las cuales todas están incorporadas en su totalidad a la presente invención como referencia.

Otra fuente preferida de un aceite que comprende al menos un PUFA, en las composiciones y métodos de la presente invención incluye una fuente de planta, tal como plantas de semilla de aceite. Ya que las plantas no producen naturalmente PUFAs que tienen cadenas de carbono de 20 o más, las plantas que producen dichos PUFAs son las construidas genéticamente para expresar genes que producen dichos PUFAs. Tal como se describe en la Solicitud de Patente Norteamericana también pendiente Serie N o.11 /452 , 096 , titulada Sistemas de Sintasa de Poliquetido PUFA y usos de los mismos, y presentada el 12 de Junio del 2006, la cual está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia, los sistemas PUFA PKS representan una oportunidad para producir plantas con capacidades únicas de producción de ácido graso, tal como plantas construidas genéticamente para producir uno o más PUFAs en la misma planta, incluyendo, DHA y DPA(n-6). La creación de cualquiera de un número de "aceites de diseñador" en varias proporciones y formas también será descrita.

En algunas modalidades, el aceite que comprende al menos un PUFA es un aceite de semilla de planta derivado de una planta de semilla de aceite que ha sido genéticamente modificada para producir ácidos grasos poli-insaturados de cadena larga. Dichos genes pueden incluir genes que codifican proteínas implicadas en las trayectorias de sintasa de ácido graso clásicas, o genes que codifican proteínas implicadas en la trayectoria de sintasa de poliquetido (PKS). Los genes y proteínas implicados en las trayectorias de sintasa de ácido graso clásicas y organismos genéticamente modificados, tales como plantas, transformados con dichos genes, se describen por ejemplo, en la publicación de Napier y Sayanova, Proceedings of the Nutrition Society (2005), 64:387-393; Robert y asociados, Functional Plant Biology (2005) 32:473-479; o en la publicación de Solicitud de Patente Norteamericana 2004/0172682. La trayectoria PUFA PKS, los genes y proteínas incluidos en esta trayectoria, y los microorganismos genéticamente modificados y plantas transformadas con dichos genes para la expresión y producción de PUFAs se describen con detalle en la Patente Norteamericana No. 6,566,583; Patente Norteamericana No. 7,247,461; Patente Norteamericana No. 7,211,418 y Patente Norteamericana No. 7,217,856, cada una de las cuales está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia.

Las cosechas de semilla de aceite preferidas incluyen frijol soya, maíz, cártamo, girasol, cañóla, lino, cacahuate, mostaza, semilla de colza, garbanzo, algodón, lenteja, clavo blanco, olivo, aceite de palma, borraja, primavera nocturna, semilla de linaza y tabaco que han sido modificadas genéticamente para producir PUFA tal como se describió anteriormente.

Las técnicas de transformación genéticas para microorganismos y las plantas son conocidas en el arte. Las técnicas de transformación para microorganismos son conocidas en el arte y se describen por ejemplo, en la publicación de Sambrook y asociados, 1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Labs Press. Una técnica general para transformación de dinoflagelatos, que se puede adaptar para utilizarse con Crypthecodinium cohnii, se describe con detalle en la publicación de Louis y Miller, The Plant Journal (1998) 13(3): 427-435. Una técnica general para transformación genética de Traustoquitrids se describe con detalle en la Publicación de Solicitud de Patente Norteamericana No. 20030166207, presentada el 4 de Septiembre del 2003. Los métodos para la construcción genética de plantas también son conocidos en la técnica. Por ejemplo, se han desarrollado numerosos métodos para transformación de plantas, incluyendo protocolos de transformación biológica y física. Ver por ejemplo, las publicaciones de Miki y asociados, "Procedures for Introducing Foreign DNA into Plants" in Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology, Glick, B.R. y Thompson, J.E. Eds (CRC Press, Inc., Boca Ratón, 1993) pp. 67-88. Además, los vectores en métodos de cultivo in vitro para células de plantas o transformación de tejido y regeneración de plantas también están disponibles. Ver por ejemplo, la publicación de Gruber y asociados, "Vectores para Transformación de Plantas" en Methods in Plant Molecular Biology and Biotechnology, Glick, B.R. y Thompson, J.E. Eds. (CRC Press, Inc., Boca Ratón, 1993) pp 89-119. Ver también las publicaciones de Horsch y asociados, Science 227:1229 (1985); Kado, C.I., Crit. Rev. Plant. Sci. 10:1 (1991); Moloney y asociados, Plant Cell Reports 8:238 (1989); Patente Norteamericana No. 4,940,838; Patente Norteamericana No. 5,464,763; Sanford y asociados, Part. Sci. Technol. 5:27 (1987); Sanford, J.C., Trends Biotech. 6:299 (1988); Sanford, J.C., Physiol. Plant 79:206 (1990); Klein y asociados, Biotechnology 10:268 (1992); Zhang y asociados, Bio/Technology 9:996 (1991 ); Deshayes y asociados, EMBO J., 4:2731 (1985); Christou y asociados, Proc Nati. Acad. Sci. USA 84:3962 (1987); Hain y asociados, Mol. Gen. Genet. 199:161 (1985); Draper y asociados, Plant Cell Physiol. 23:451 (1982); Donn y asociados. In Abstracts of Vllth International Congress on Plant Cell and Tissue Culture IAPTC, A2-38, p. 53 (1990); D'Halluin y asociados, Plant Cell 4:1495-1505 (1992) y Spencer y asociados, Plant Mol. Biol. 24:51-61 (1994).

Cuando las plantas de semilla de aceite son la fuente de PUFAs, las semillas pueden recolectarse y procesarse para eliminar cualesquiera impurezas, residuos o partes indigeribles de las semillas recolectadas. Los pasos de procesamiento varían del tipo de semilla de aceite y son conocidos en la técnica. Los pasos de procesamiento pueden incluir trillado (tal como, por ejemplo, cuando las semillas de frijol soya se separan de las vainas), descascarado (se elimina la cubierta exterior seca, o cascara, de una fruta, semilla o grano), secado, limpieza, molido, triturado y elaboración de hojuelas. Una vez que las semillas han sido procesadas para eliminar cualesquiera impurezas, residuos o materiales indigeribles, se pueden agregar a una solución acuosa, generalmente, agua y posteriormente se mezclan para producir una pasta. Generalmente, se lleva a cabo un molido, triturado o elaboración de hojuelas cuando está lista para mezclarse con agua. Una pasta producida en esta forma puede ser tratada y procesada en la misma forma que se describe para el caldo de fermentación microbiana. La reducción de tamaño, tratamiento de calor, ajuste de pH, pasteurización y otros tratamientos conocidos se pueden utilizar con el objeto de mejorar la hidrólisis, preparación de emulsión y calidad (nutricional y sensorial).

Otra fuente preferida de un aceite que comprende al menos un PUFA, en las composiciones y métodos de la presente invención incluye una fuente animal. Por lo tanto, en algunas modalidades, el aceite comprende al menos un PUFA que es un aceite de animal acuático. Los ejemplos de fuentes animales incluyen animales acuáticos (por ejemplo, peces, mamíferos marinos y crustáceos tales como conjuntos de varias especies de crustáceos marinos de alto valor nutritivo y otros eufausidos) y lipidos extraídos de tejidos animales (por ejemplo, cerebro, hígado, ojos, etc.) y productos animales tales como huevos o leche.

La presente invención proporciona además una fórmula para infantes que comprende una combinación de aceites microbianos, combinaciones de aceites microbianos y de plantas, aceites de plantas de plantas modificadas genéticamente para producir DHA y DPA(n-6), o aceites microbianos de microorganismos que se modifican genéticamente.

En una modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes que comprende una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación comprende aceite de un microorganismo traustoquitrid y un aceite de un microorganismo dinoflagelato.

En una modalidad, el microorganismo traustoquitrid es del género Schizoq uitrium y el microorganismo dinoflagelato es del género Crypthecodinium .

En otra modalidad, la combinación comprende entre aproximadamente 20% en peso y aproximadamente 90% en peso, entre aproximadamente 50% en peso y aproximadamente 82% en peso, o aproximadamente 75% en peso de aceite de un microorganismo traustoquitrid y entre aproximadamente 10% en peso y aproximadamente 80% en peso, entre aproximadamente 18% en peso y aproximadamente 50% en peso, o aproximadamente 25% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato. En otra modalidad, la combinación comprende entre aproximadamente 57.5% en peso y aproximadamente 67.5% en peso de un microorganismo traustoquitrid y entre aproximadamente 32.5% en peso y aproximadamente 42.5% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato. En otra modalidad, la combinación comprende entre aproximadamente 65% en peso y aproximadamente 80% en peso de aceite de un microorganismo de traustoquitrid y entre aproximadamente 35% en peso y aproximadamente 20% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato. En otra modalidad, la combinación comprende entre aproximadamente 80% en peso y aproximadamente 99% en peso de aceite de un microorganismo de traustoquitrid y entre aproximadamente 20% en peso y aproximadamente 1% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato.

En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes que comprende una combinación de aceites microbianos y de plantas. En esta modalidad, la combinación comprende aceite de una planta modificada genéticamente para producir DHA y DPA(n-6). El aceite de planta contiene DHA y DPA(n-6), y el aceite microbiano contiene ARA.

En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes que comprende aceite de planta de una planta genéticamente modificada par producir DHA y DPA(n-6). El aceite comprende DHA y DPA(n-6) en una proporción de aproximadamente 0.5:1 hasta aproximadamente 5:1. En algunas modalidades, la planta es genéticamente modificada para producir ARA.

La producción de PUFAs (tal como DHA, DPA(n-6) y ARA) en una planta que ha sido genéticamente modificada para expresar los genes que codifican un sistema PUFA PKS de Schizoquitrium , ha sido descrita en la solicitud de Patente Norteamericana también pendiente Serie No. 11/452,096, sistema de sintasa de poliquetido PUFA y uso de los mismos, y presentada el 12 de Junio del 2006, la cual está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia. En síntesis, los aceites producidos a través de estas plantas contienen cantidades significativas tanto de DHA (ácido docosahexaenoico (C22:6n-3)) y DPA (ácido docosapentaenoico (C22:5n-6)), los cuales son los PUFAs predominantes (los PUFAs primarios) producidos a través de Schizoquitrium de los cuales se derivaron los genes PUFA PKS. En forma significativa, los aceites de plantas que producen PUFAs utilizando la trayectoria PUFA PKS tienen un perfil de ácido graso diferente al de las plantas que son genéticamente construidas para producir los mismos PUFAs a través de la trayectoria "clásica". (En la trayectoria clásica, los ácidos grasos saturados de longitud de cadena media (productos de un sistema de sintasa de ácido graso (FAS) se modifica a través de una serie de reacciones de elongación y desaturación. Los substratos para la reacción de elongación son acil-CoA graso (la cadena de ácido graso que será alargada) y malonil-CoA (la fuente de 2 carbonos agregada durante cada reacción de elongación). El producto de la reacción de elongasa es un acil- CoA graso que tiene dos carbonos adicionales en la cadena lineal. Las desaturasas crean enlaces c/'s dobles en la cadena de ácido graso preexistente mediante la extracción de 2 hidrógenos en una reacción dependiente de oxígeno. Dichas trayectorias y los genes implicados en estas trayectorias son conocidos en la literatura). El uso de construcciones PUFA PKS para producir PUFAs en levadura, además de la producción de las plantas transgénicas, también se describe en la Solicitud de Patente Norteamericana Serie No. 11/452,096. Se demostró que la transformación tanto de levadura como de plantas con el sistema PUFA PKS que produce DHA y DPA(n-6) como los PUFAs objetivo, producen ambos de estos PUFAs como los ácidos grasos adicionales primarios en los ácidos grasos totales de la planta (por ejemplo, substrayendo ácidos grasos que se producen en la planta tipo natural), y en la levadura y además, ya que cualesquiera otros ácidos grasos que no están presentes en los ácidos grasos de la planta tipo natural, son virtualmente ¡ndetectables. También se describe una planta genéticamente modificada que produce DHA y DPA(n-6), y la proporción de DHA a DPA(n-6) es de aproximadamente 1:10 hasta aproximadamente 10:1 , incluyendo cualquier proporción entre ellas.

En otra modalidad, la presente invención proporciona una composición de fórmula para infantes que comprende un aceite microbiano de un microorganismo genéticamente modificado. El aceite comprende DHA y DPA(n-6) en una proporción de aproximadamente 0.5:1 hasta aproximadamente 5:1. En algunas modalidades, el microorganismo produce ARA.

En otra modalidad, la composición comprende un aceite de planta o un aceite microbiano de una planta o microorganismo genéticamente modificado para producir DPA(n-6). En modalidades preferidas de este aspecto, la planta o microorganismo no produce DHA o ARA. En aspectos adicionales, la composición comprende un aceite de planta o aceite microbiano de una planta o microorganismo genéticamente modificado para producir DHA. En modalidades preferidas de este aspecto, la planta o microorganismo no produce DPA(n-6) o ARA. En aspectos adicionales, la composición comprende un aceite de planta o microbiano de un microorganismo genéticamente modificado para producir ARA. En modalidades preferidas de este aspecto, la planta o microorganismo no produce DHA o DPA(n6). En una modalidad, los aceites de estas plantas o microorganismos se utilizan en cantidades adecuadas y proporciones para producir las composiciones de fórmula para infantes de la presente invención .

En modalidades en las cuales se utiliza una planta genéticamente modificada, la modificación genética puede incluir la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

En algunas modalidades, en las cuales se utiliza un microorganismo genéticamente modificado, la modificación genética puede incluir la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o parte del mismo.

Los componentes nutricionales para fórmulas para infantes son conocidos en la técnica y uno reconocible en la técnica puede tener la capacidad de ajustar las composiciones de la fórmula para incluir niveles y proporciones de PUFA de la presente invención. Por ejemplo, una fórmula para infantes normalmente contiene un componente de proteína que contiene de aproximadamente 6 hasta aproximadamente 25% del contenido calórico total de la fórmula de infantes; un componente de carbohidrato que comprende de aproximadamente 35 hasta aproximadamente 50% del contenido calórico total de la fórmula de infantes; y un componente de lípidos que comprende de aproximadamente 30 hasta aproximadamente 50% del contenido calórico total de la fórmula de infantes. Estos rangos se proporcionan únicamente como ejemplos, y no pretenden ser limitantes.

Los ejemplos de fuentes de grasa adecuados normalmente incluyen aceite de cártamo oleico de alto nivel, aceite de soya, aceite de coco fraccionado (triglicéridos de cadena media, aceite MCT), aceite de girasol oleico de alto nivel, aceite de maíz, aceite de cañóla, aceites de coco, palma y de grano de palma, aceite marino, aceite de semilla de algodón, aceite de nuez, aceite de germen de trigo, aceite de ajonjolí, aceite de hígado de bacalao, y aceite de cacahuate. Cualquier grasa simple descrita anteriormente, o combinación de cualquiera de las mismas, se pueden utilizar. Otras grasas adecuadas serán fácilmente apreciadas por los expertos en la técnica.

Los componentes adicionales de fórmulas para infantes incluyen normalmente, por ejemplo, proteínas, carbohidratos, vitaminas y minerales. Los ejemplos de fuentes de proteína adecuados para infantes normalmente incluyen caseína, suero, leche condensada, leche sin grasa, soya, chícharo, arroz, maíz, proteína hidrolizada, aminoácidos libres, fuentes de proteína que contienen calcio en un suspensión coloidal con la proteína. Cualquier proteína simple descrita anteriormente, o cualquier combinación de las mismas, según sea adecuado se puede utilizar. Otras proteínas adecuadas serán fácilmente apreciadas por los expertos en la técnica.

Un tercer componente de fórmula para infantes es una fuente de carbohidratos. Los carbohidratos son una fuente mayor de energía fácilmente disponible que el infante necesita para crecer y que protege al infante de catabolismo de tejido. En la leche humana y en la mayor parte de las fórmulas para infantes a base de leche estándar, es carbohidrato es lactosa. Los carbohidratos que se pueden utilizar en la fórmula para infantes pueden variar ampliamente. Los ejemplos de carbohidratos adecuados para infantes normalmente incluyen almidón de maíz hidrolizado, maltodextrina, polímeros de glucosa, sacarosa, lactosa, jarabe de maíz, sólidos de jarabe de maíz, jarabe de arroz, glucosa, fructosa, jarabe de maíz con alto contenido de fructosa y oligosacáridos indigeribles tales como fructooligosacáridos (FOS). Cualquier carbohidrato simple descrito anteriormente o cualquier combinación de los mismos, según sea adecuado puede ser utilizado. Otros carbohidratos adecuados serán apreciados fácilmente por los expertos en la técnica.

La fórmula para infantes de la presente invención normalmente incluye vitaminas y minerales suplementados. Los ejemplos de vitaminas y minerales que se pueden agregar a la fórmula para infantes de la presente invención normalmente incluyen vitamina A, vitamina B( l vitamina B2, vitamina B6, vitamina B12, vitamina C, vitamina D, vitamina K, vitamina E, biotina, ácido fólico, ácido pantoténico, ácido, níacina, m-inositol, calcio, fósforo, magnesio, zinc, manganeso, cobre, sodio, potasio, cloruro, hierro y selenio. También se pueden incluir nutrientes adicionales como cromo, molibdeno, yodo, taurina, carnitina y colina.

Las fórmulas para infantes de la presente invención se pueden preparar como cualquier forma de producto adecuado para utilizarse en infantes, incluyendo polvos reconstituibles, líquidos listos para alimentación y concentrados líquidos diluibles, cuyas formas de productos son conocidas en las técnicas de fórmulas nutricionales. Tal como se utiliza en la presente solicitud, las cantidades de componentes presentes en las composiciones de fórmula para infantes se refieren a las cantidades cuando la fórmula está lista para ser consumida por el infante. Quedará entendido que en el caso de un polvo reconstituible o concentrado líquido diluible, las cantidades de componente serán ajustadas de modo que cuando la composición de fórmula para infantes sea reconstituida o diluida, las cantidades son como se describe en la presente invención. Por lo tanto, por ejemplo, la referencia a una composición de fórmula para infantes que será diluida, por ejemplo, mediante la adición de una parte de agua para una parte de la fórmula para infantes, en donde la composición de fórmula para infantes tiene una concentración de componentes determinada, cuando esté lista para el consumo, se pretende cubrir una composición de fórmula para infantes que tenga una concentración de componentes de dos veces la cantidad determinada, antes de que esté lista para el consumo mediante la adición de agua. Los métodos para preparar fórmulas para infantes son conocidos para los expertos en la técnica. Por ejemplo, los aceites que contienen PUFA se pueden agregar directamente a la composición de fórmula líquida en un punto adecuado en el proceso de fabricación.

La fórmula para infantes de acuerdo con la presente invención puede ser esterilizada opcionalmente y subsecuentemente utilizada sobre unas bases de lista para alimentación, se pueden almacenar como un concentrado. El concentrado puede ser preparado mediante secado con rocío de la fórmula líquida preparada como se indicó anteriormente, y la fórmula puede ser reconstituida re-hidratando el concentrado. El concentrado de fórmula para infantes es un líquido estable y tiene una vida en anaquel adecuada.

En otra modalidad, los aceites son micro-encapsulados antes de la adición en la composición de fórmula. La elección de recubrimiento para la microencapsulacion de los PUFAs, se determina a través de su carencia de toxicidad, tamaño de partícula deseado y estabilidad bajo las condiciones de procesamiento de fórmulas para infantes, particularmente esterilización. Se puede utilizar cualquier recubrimiento substancialmente impermeable al oxígeno, convencionalmente aceptable en la presente invención. Dichos métodos de microencapsulacion convencionales y materiales de recubrimiento están dentro de las consideraciones de los expertos en la técnica, y el método de microencapsulacion específico y recubrimiento, son peculiares para la presente invención. Algunos de estos métodos incluyen secado con rocío tal como cuando los PUFAs son emulsificados en una solución de un polímero, y secados con rocío para elaborar partículas finas. Las partículas de aproximadamente 250 µ?? son adecuadas para inclusión en las fórmulas para infantes de acuerdo con la presente invención. Cuando los PUFAs se incorporan en una grasa o cera derretible, el proceso es denominado enfriamiento con rocío, ya que la emulsión necesita ser únicamente enfriada debajo de su punto de fundición para formar partículas. Otro proceso de e n ca ps u lacio n que puede ser utilizado para encapsular los PUFAs es coacervación. Otras técnicas adecuadas incluyen polimerización interfacial, encapsulación con derretimiento por calor, encapsulación de separación de fase (eliminación de solvente y evaporación de solvente), emulsión espontánea, microencapsulación de evaporación de solvente, microencapsulación de eliminación de solvente, coacervación, y formación de microesferas a baja temperatura y nanoencapsulación de impresión de fase (PIN). En general, los PUFAs microencapsulados forman un polvo de flujo libre que es adecuado para adición en modalidades pulverizadas de las composiciones. Estas y otras técnicas de encapsulación y aceites encapsulados se describen en la Solicitud de Patente Provisional Norteamericana Serie No. 60/805,590, la cual está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia.

Para modalidades en polvo de la presente invención, los métodos de uso antes descritos comprenden además reconstitución de polvo con un líquido acuoso adecuado, preferentemente agua. Dicha dilución puede estar en una cantidad suficiente para proporcionar una fórmula para infantes fortificada con LC-PUFA que tiene las características descritas con detalle en la presente invención. Para modalidades en polvo de la presente invención, dichos polvos normalmente están en la forma de composiciones de partícula fluibles o substancialmente fluibles, o al menos composiciones de partícula que pueden ser fácilmente cuchareadas y medidas con una cuchara u otro aparato similar, en donde las composiciones pueden se reconstituidas fácilmente a través del usuario proyectado con un fluido acuoso adecuado, normalmente agua, para formar una fórmula líquida para infantes. Dentro de este contexto, el uso "inmediato" generalmente significa en las próximas 48 horas, más normalmente en las próximas 24 horas, preferentemente después de la reconstitución. Estas modalidades de polvo incluyen formas secadas con rocío, aglomeradas, mezcladas en seco u otras formas de particulado conocidas y efectivas. La cantidad de un polvo nutricional requerido para producir un volumen adecuado para una porción, pueden variar.

La presente invención proporciona además métodos para alimentar a un infante, en donde los métodos comprenden administrar una composición nutricional para infantes de la presente invención, a un infante. Por ejemplo, la presente invención proporciona un método para alimentar a un infante, en donde el método comprende administrar una composición de fórmula para infantes a un infante, en donde la composición comprende ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga, y en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden ácido docosahexaenoico (DHA); los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ácido docosapentaenoico (DPA(n-6)) y opcionalmente ácido araquidonico (ARA). En esta modalidad, la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1, y la proporción de DHA: DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1. En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para alimentar a un infante que comprende administrar una composición de fórmula para infantes a un infante, en donde la composición comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y DHA, en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga en la composición de fórmula para infantes se suministra en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y comprende al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6), la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1, y en donde la composición se formula para proporcionar al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante. En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para alimentar a un infante, en donde el método comprende administrar una composición de fórmula para infantes, a un infante, en donde la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6), cuando está lista para consumo, en donde la composición comprende además ácidos grasos n-3 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden DHA; en donde la composición comprende opcionalmente además ácido araquidonico ARA; y en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1. En otra modalidad, la presente invención proporciona un método para alimentar a un infante en donde el método comprende administrar una composición de fórmula para infantes a un infante, en donde la composición de fórmula para infantes se formula para cumplir con los requerimientos objetivo de DHA y ARA, y la composición comprende DHA en una cantidad de requerimiento objetivo de DHA, ARA en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) en una cantidad suficiente para retro-convertir a ARA in vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub-objetivo de ARA.

La presente invención proporciona además un método para alimentar a un infante en donde el método comprende administrar una composición de fórmula para infantes que contiene componentes nutricionales DHA y DPA(n-6) a un infante, en donde el infante se alimenta al menos aproximadamente 2 mg de DPA(n-6)/kg/día. En algunas modalidades, la presente invención proporciona un método para alimentar a un infante, en donde el método comprende administrar cualquier composición de fórmula para infantes tal como aquí se describe a un infante. En algunas modalidades, el método comprende además disolver un polvo de fórmula para infantes que contiene componentes nutricionales y DHA y DPA(n-6) en agua para obtener una solución que incluye los componentes nutricionales y los LC-PUFAs.

Las fórmulas nutricionales de la presente invención se pueden empacar y sellar en contenedores para usos múltiples o simples, y posteriormente almacenarse bajo condiciones ambientales durante hasta aproximadamente 36 meses o más, más normalmente de aproximadamente 12 hasta aproximadamente 24 meses. Para contenedores de uso múltiple, estos empaques pueden abrirse y posteriormente cubrirse para uso repetido por parte del último usuario, siempre que el empaque cubierto posteriormente sea almacenado bajo condiciones ambientales (por ejemplo, evitar temperaturas externas) y los contenidos utilizados dentro de un mes aproximadamente.

Los infantes prematuros requieren nutrientes adicionales para soportar su crecimiento y están en riesgo de enfermedades relacionadas con la pre-madurez. Los infantes de pre-término se alimentan comúnmente ya sea con una fórmula para infantes comercial diseñada específicamente para estos infantes, o con la leche materna de su propia madre. Otros medios para alimentar a un infante de pre-término son suplementar la leche de pre-término, leche de término depositada, otra leche adecuada, o fórmula para infantes con un fortificador para la leche o fórmula. La leche o fórmula suplementada puede proporcionar en forma más adecuada niveles de diversos nutrientes para cumplir con las necesidades de estos infantes. Otra invención de la presente solicitud, proporciona una composición fortificadora para la nutrición de infantes prematuros que comprende LC-PUFAs. En particular, la composición fortificadora de nutrición para infantes prematuros comprende DPA(n-6) y en otras modalidades, puede comprender DHA y/o ARA. La composición fortificadora generalmente es un polvo o aceite que puede suplementar opcionalmente el nivel de proteína, grasa, vitaminas y minerales. Las composiciones fortif icadoras se formulan para proporcionar las cantidades y proporciones de LC-PUFAs tal como se describe para composiciones de fórmula para infantes anteriores, cuando se agregan a leche o fórmulas. Por ejemplo, la composición de leche o fórmula fortificada puede comprender una cantidad de valor de umbral de DPA(n-6), puede tener una proporción de DHA:DPA(n-6) que es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1; o tener otras limitaciones a partir de las diversas invenciones aquí descritas. Las composiciones fortificadoras pueden ser la única fuente de uno o más de los LC-PUFAs DPA(n-6), DHA y/o ARA en la leche o fórmula fortificada resultante o pueden suplementar cantidades de LC- PUFAs en la leche o fórmula no fortificada. Otra invención de la presente solicitud es un método para preparar una leche o fórmula para infantes prematuros fortificada que incluya combinar una leche o fórmula para infantes en la composición tal como se describió.

Otra invención de la presente solicitud es un método para proporcionar nutrientes suplementales a un infante de pre-término, en donde el método comprende administrar una leche o fórmula fortificada a un infante prematuro, en donde la leche o fórmula se preparan agregando una composición fortificante para la nutrición del infante prematuro tal como se describe anteriormente, a una leche o fórmula para infantes.

Otra invención de la presente solicitud, es un método para formar el crecimiento de un infante prematuro, en donde el método comprende administrar una leche o fórmula fortificada a un infante prematuro, en donde la leche o fórmula se prepara agregando una composición fortificadora de nutrición para infantes prematuros tal como se describió anteriormente, a una leche o fórmula para infantes.

La presente invención también proporciona una composición de suplemento para dieta de infantes suplementado con LC-PUFAs. En particular, la composición de suplemento para dieta de infantes comprende DPA(n-6) y en otras modalidades, puede comprender DHA y/o ARA. El suplemento para dieta de infantes también puede suplementar opcionalmente niveles de proteína, grasa, vitaminas y minerales. Las composiciones de suplemento de dieta para infantes se formulan para proporcionar las cantidades y proporciones de LC-PUFAs tal como se describe para las composiciones de fórmulas para infantes anteriores, incluyen particularmente los parámetros de ingestión diaria cuando dichos suplementos se toman aparte de la fórmula para infantes. Los suplementos de la dieta de infantes, en algunas modalidades, pueden ser agregados, sin embargo, a fórmulas para infantes. El suplemento de dieta para infantes del asunto materia de la presente invención pueden formularse para ser administrados o administrarse en una dosis parcial, por ejemplo, una dosis fraccionada, una o más veces durante un período de 24 horas, una sola dosis durante un período de tiempo de 24 horas, una dosis doble durante un período de tiempo de 24 horas, o más de una dosis doble durante un período de tiempo de 24 horas. Las dosis fraccionadas, dobles u otras dosis múltiples pueden tomarse en forma simultánea o en diferentes momentos durante un período de tiempo de 24 horas.

Las composiciones para formulaciones orales útiles para la composición de suplemento de dieta de infantes de la presente invención que son agradables en sabor para infantes, son conocidas en la técnica. La composición de suplemento de dieta de infantes puede ser administrada en forma oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un transportador comestible asimilable, o pueden guardarse en cápsulas de gelatina de cubierta dura o blanda, o pueden comprimirse en tabletas, o pueden incorporarse directamente con el alimento de la dieta. Para administración oral, la composición de suplemento de dieta de infantes puede incorporarse con un excipiente y utilizarse en la forma de tabletas ingeribles, tabletas bucales, grageas, cápsulas, elíxires, suspensiones, jarabes, obleas y similares. Las tabletas, grageas, pildoras, cápsulas y similares, también contienen lo siguiente: un enlazador tal como goma de tragacanto, acacia, almidón de maíz o gelatina; excipientes tales como fosfato de dicalcio; un agente de desintegración tal como almidón de maíz, almidón de papa, ácido algínico y similares; un lubricante tal como estearato de magnesio; y un agente edulcorante tal como sacarosa, lactosa o sacarina puede agregarse o un agente de saborización tal como hierbabuena, aceite de "wintergreen" (especie de planta), o saborizante de cereza. Cuando la forma de unidad de dosis es una cápsula, puede contener, además de los materiales del tipo anterior, un transportador líquido. Otros diversos materiales pueden estar presentes como recubrimientos o modificar de otra manera la forma física de la unidad de dosificación. Por ejemplo, las tabletas, pildoras o cápsulas pueden ser cubiertas con laca, azúcar o ambas. Un jarabe o elíxir puede contener el compuesto activo, sacarosa como un agente edulcorante, metilo o propilparabenos como conservadores, una tinta y saborizante tal como sabor de cereza o naranja. Las emulsiones de aceite en agua pueden ser mejor adaptadas para uso oral en infantes debido a que estas son mezclables en agua, y por lo tanto su aceitocidad se cubre. Dichas emulsiones son conocidas en las ciencias farmacéuticas.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Estudio de Bio-equivalencia DHA en Adultos Este Ejemplo muestra la retro-conversión dependiente de la dosis de DPA(n-6) a ARA en la presencia de DHA en adultos.

Para estudiar los efectos de la suplementación de aceite Schizoquitrium con alto contenido de DHA (Martek DHA™-S) y aceite Crypthecodinium con alto contenido de DHA (DHASCO®) en contenido de ácido graso en plasma, se aleatorizaron adultos saludables que tienen una edad promedio de aproximadamente 38 años, en grupos de tratamiento suplementados con cápsulas de gelatina que proporcionan ya sea 0, 200, 600 ó 1 ,000 mg de DHA por día durante un total de 4 semanas. Este estudio fue un estudio de bio-equivalencia, de grupo paralelo, aleatorizado, de prospecto y de ocho brazos que utiliza res dosis de DHA (200, 600 ó 1000 mg de DHA por día) de cápsulas ya sea de DHASCO® o Martek DHA™-S, cápsulas de placebo o una sola dosis de DHA (465 mg por día) de las barras nutricionales Martek DHA™-S durante un período de tratamiento de cuatro semanas. Entre los grupos que consumen cápsulas, el estudio fue doble ciego y controlado con placebo.

Las muestras en sangre fueron recolectadas en la línea de base y después de cuatro semanas de suplemento con DHA. El plasma se aisló, se purgó con N2 y se almacenó a una temperatura de -80°C hasta el análisis de ácido graso. Los lípidos en plasma fueron extraídos utilizando el método de Folch y los fosfolípidos se aislaron a través de cromatografía de capa delgada (TLC) sobre placas de gel de sílice desarrolladas en una solución con una proporción de 60:40:3 (v/v/v) de hexanos:éter:ácido acético. Se agregó un estándar interno (23:0 de ácido graso) y los fosfolípidos fueron saponificados con 0.5 N NaOH en metanol. Los ácidos grasos resultantes fueron metilados utilizando 14% BF3 en metanol y posteriormente extractados con hexanos. Los ésteres metílicos de ácido graso fueron separados mediante cromatografía de gas de columna capilar en un Sistema Agilent Series 6980 equipado con una columna 30 m FAMEWAX™ (Restek, State Collage, PA) utilizando una proporción de flujo de división 48:1 con helio como un gas transportador y un gradiente de temperatura programada (130 a 250°C). Los ésteres metílicos de ácido graso fueron identificados mediante detección por ionización de flama y comparación de tiempos de retención para un estándar de éster metílico de ácido graso mezclado de NuChek Prep. (Elysian, MN). Los ácidos grasos se cuantif icaron mediante comparación con el estándar interno 23:0. Los niveles de ácido graso individuales se reportan como gramos por 100 g de ácidos grasos totales.

El aceite de Crypthecodinium con alto contenido de DHA (aceite DHASCO®) contiene aproximadamente 400 mg/g de DHA, 0 mg/g de DPA(n-6), 0 mg/g de EPA y 2.5 mg/g de colesterol, siendo el resto grasas saturadas e ¡nsaturadas comunes, y componentes menores de esterol y carotenoides. El aceite Schizoquitrium con alto contenido de DHA (Aceite Martek DHA™-S) contiene aproximadamente 400 mg/g de DHA, 150 mg/g de DPA(n-6), 11 mg/g de EPA y 2.5 mg/g de colesterol, siendo el resto grasas saturadas e ¡nsaturadas comunes, y componente menores de esterol y carotenoides. Los pesos de los sujetos fluctuaron de rigurosamente 40 a 116.4 kg, con un promedio de 76.7 kg. Se calcularon niveles de ingesta de DHA promedio normalizados con peso para ser de 2.6 mg de DHA/kg/día en un nivel de 200 mg de DHA/día, 7.8 mg de DHA/kg/día en un nivel de 600 mg de DHA/día y 13.0 mg de DHA/kg/día en el nivel de 1,000 mg de DHA/día.

La suplementacion tanto con cápsulas de DHASCO® como de Martek DHA™-S dio como resultado un incremento dependiente de la dosis, estadísticamente significativo (p<0.05), en niveles en plasma de PL DHA tal como se muestra en la figura 1. DPA(n-6) incrementó con el tratamiento Martek DHA™-S, pero disminuyó con el tratamiento DHASCO® tal como se muestra en la figura 2.

La respuesta de los fosfoüpidos en plasma ARA para la suplementación DHA difirió para los dos tratamientos DHA tal como se muestra en la Tabla 1 y en la figura 3.

Tabla 1. Resumen de Diferencias en Fosfolípidos de Plasma Medido para Estudio de Biodisponibilidad DHA del Ejemplo 1 utilizando Aceite de Schizoquitrium con Alto Contenido de DHA (Aceite Martek DHA™-S) y Aceite Crypthecodinium con Alto Contenido de DHA (DHASCO®) (n = 12 individuos por célula) (representado como promedio de (muestra de 4 semanas promedio - muestra de 0 semanas promed¡o)/muestra de 0 semanas promedio) Para el tratamiento DHASCO®, los niveles ARA de fosfolípido en plasma se midieron en una forma inversamente proporcional a la dosis DHA. Sin embargo, para el tratamiento Martek DHA™-S, los niveles ARA de fosfolípido en plasma mostraron una disminución similar de 11% en la dosis 600 mg/día, sin embargo, los niveles ARA disminuyeron únicamente en un 4% en la dosis más alta de 1000 mg DH A/día. Se espera una disminución en el contenido ARA con el suplemento de DHA y se observa comúnmente debido a la inhibición de síntesis ARA mediante DHA. El mantenimiento cercano de los niveles ARA observado con una dosis superior de 1000 mg de DHA/día con el Aceite Martek DHA™-S no se esperó y puede ser mejor explicado mediante retro-conversión in vivo de DPA(n-6) a ARA en esta dosis.

Ejemplo 2. Estudio de Bio-disponibilidad DHA-S en Niños Este ejemplo muestra la retro-conversión dependiente de la dosis de DPA(n-6) a ARA en la presencia de DHA. Para estudiar los efectos del suplemento de aceite Schizoquitrium con alto contenido de DHA (Aceite Martek DHA™-S) en el contenido de ácido graso en plasma, se aleatorizaron niños saludables de 4 a 6 años en dos grupos de tratamiento suplementados con cápsulas de gelatina masticable que proporcionan ya sea 200 mg ó 400 mg de DHA por día durante un total de 4 semanas. Hubieron aproximadamente 20 sujetos por grupo de tratamiento. La fuente de DHA fue el aceite de triglicérido con alto contenido de DHA derivado de la especie Schizoquitrium sp. (Aceite Martek DHA™-S), el cual contiene aproximadamente 400 mg/g de DHA, 150 mg/g de DPA(n-6), 11 mg/g de EPA y 2.5 mg/g de colesterol, siendo el resto grasas saturadas e insaturadas comunes, y componentes menores de esterol y carotenoides. Los pesos de los sujetos fueron aleatorizados de 15.3 a 25.4 kg, con un promedio de 18.8 kg. Los niveles de ingesta de DHA promedio normalizados con peso fueron calculados para ser de 10.6 mg de DHA/kg/día en el nivel 200 mg de DHA/día y de 21.3 mg de DHA/kg/día en el nivel 400 mg de DHA/día. Se tomaron muestras de sangre antes de que comenzara el tratamiento y después que finalizó el período de tratamiento de 4 semanas. Los ácidos grasos de fosfolípido en plasma fueron medidos como se describe en el Ejemplo 1 para cada muestra y se tabularon tal como se muestra en la figura 4. El cambio en ácidos grasos clave durante el período de tiempo de 4 semanas fueron calculados substrayendo el contenido de ácido graso de fosfolípido de plasma en 4 semanas del valor correspondiente a las 0 semanas, y promediando las diferencias. Estos resultados se resumen en la Tabla 2.

Tabla 2. Resumen de Diferencias en Fosfolípidos en Plasma Medidos para el Estudio de Bio-disponibilidad DHA en Niños utilizando Aceite Schizoquitrium con Alto Contenido de DHA (n = 10 a 12 por grupo) (representado como promedio de (muestra de 4 semanas - muestra de 0 semanas)/muestra 0 semanas).

Cambio en % de Cambio en %de Ácido Ácido Graso Ácido Graso 400 Graso 200 mg DHA/día mg DHA/día Ácido araquidonico (C20:4 n-6) -13%* -7%* Ácido docosapentaenoico (C22:5 n-6) +45%* -71%* Ácido docosa exaenoico (C22:6 n-3) + 130%" -242%* * indica que los resultados fueron significativamente diferentes (p-valor < 0.05) Los resultados mostraron un comportamiento similar al observado en el Ejemplo 1. Los contenidos de fosfolípido tanto DHA como DPA(n-6) se incrementaron en una forma dependiente a la dosis, confirmando el cumplimiento del sujeto con el protocolo de tratamiento. ARA de fosfolípidos en plasma disminuyeron en un promedio de 13% en 200 mg de DHA/día, sin embargo disminuyeron únicamente en 7% en la dosis mayor de 400 mg de DHA/día. Una disminución en el contenido ARA con suplemento DHA se espera y se observa comúnmente debido a la inhibición de la síntesis ARA mediante DHA. Se observaron niveles menores de disminución ARA con la dosis superior de 400 mg de DHA/día que no fue esperado y se puede explicar de mejor manera mediante la retro-conversión in vivo de DPA(n-6) a ARA. Este resultado es consistente con los resultados observados en el Ejemplo 1, especialmente cuando se compara sobre una base de dosis normalizada-peso (mg DHA/kg/día).

Los resultados de los Ejemplos 1 y 2 demuestran como el uso del aceite Schizoquitrium con alto contenido de DHA (Aceite artek DHA™-S), que contiene DPA(n-6), puede reducir la necesidad de suplementacion conjunta de ARA con DHA hacia una meta para incrementar DHA en suero sin disminuir ARA. Estos resultados muestran que una supresión significativa de disminución ARA, viene con una dosis normalizada en peso de aproximadamente 10 a 25 mg de DHA/kg/día que corresponde a una dosis DPA(n-6) de 2 a 3 hasta aproximadamente 6 a 8 mg de DPA(n-6)/kg/día.

Ejemplo 3. Mantenimiento de Niveles ARA mediante DPA(n-6) en ratas in vivo Se alimentaron ratas Sprague Dawley con una dieta purificada con AIN-76A que contiene varias cantidades de entre 0 a 3% de aceite Martek DHA™-S o aceite DHASCO® durante 28 días después de lo cual se recolectó la sangre. El plasma se recolectó y almacenó a una temperatura de -80°C hasta el análisis de ácido graso. Se determinaron los niveles de ácido graso en el plasma completo. En síntesis, se agregó un estándar interno (23:0) a las muestras de plasma y los lípidos se extractaron utilizando el método de Folch. Los lípidos extraídos fueron saponificados con 0.5N NaOH en metanol, y los ácidos grasos resultantes fueron metilados utilizando 14% BF3 en metanol y posteriormente extractados con hexano. Los ésteres metílicos de ácido graso fueron separados mediante cromatografía de gas de columna capilar en un Sistema Agilent Series 6890 equipado con una columna 30m FAMEWAX™ (Restek, State Collage, PA) utilizando una proporción de flujo de división 48:1 con helio como un gas transportador y un gradiente de temperatura programada (130 a 250°C). Los ásteres metílicos de ácido graso fueron identificados mediante detección de ionización con flama y comparación de los tiempos de retención con un estándar de éster metílico de ácido graso mezclado de NuChek Prep (Elysian, MN). Los ácidos grasos fueron cuantif icados mediante comparación con el estándar interno 23:0. Los niveles de ácido graso individuales se reportaron como gramos por 100 g de ácidos grasos totales.

Las figuras 5A a 5C, ilustran niveles de DHA (A), DPA(n-6) (B) y ARA (C) en plasma después de 28 días de alimentar ratas con una dieta que contiene aceite Martek DHA™-S o aceite DHASCO®. Las gráficas se normalizan para una dosis de DHA en una base de mg por kg de peso corporal por día. Se debe observar que los niveles DHA incrementaron en una forma dependiente a la dosis similar tanto con el aceite Martek DHA™-S como con el aceite DHASCO®, pero el aceite Martek DHA™-S dio como resultado un incremento en niveles DPA(n-6) (debido a la presencia de este ácido graso en el aceite) en tanto que en el aceite DHASCO® condujo a una disminución en los niveles DPA(n-6). Los niveles ARA disminuyeron en una forma dependiente a la dosis DHA leve con aceite DHASCO®. Sin embargo, el suplemento con aceite Martek DHA™-S, que contiene DPA(n-6), dio como resultado una respuesta ARA curvilínea, con reducciones en ARA en dosis bajas pero casi el mantenimiento de niveles ARA en dosis más altas, debido en forma presumible a la retro-conversión de DPA(n-6) a ARA después de alcanzar los niveles DPA(n-6) de valor de umbral in vivo. La respuesta a ARA de ratas a DPA(n-6), es paralela con la respuesta observada con el suplemento DPA(n-6) en humanos.

Ejemplo 4. Combinación de aceites de traustoquitrid y dinoflaqelato para proporcionar proporciones variadas de DHA:DPA(n-6) para utilizarse en fórmulas para infantes. Este experimento describe el suministro de aceites combinados en donde varía la proporción DHA: DPA(n-6).

La composición de combinación necesaria para lograr una proporción de DHA/DPA(n-6) de 4:1 se determinó resolviendo tres ecuaciones en forma simultánea: Martek DHA™-S DHASCO® Combinación resto DHA: 0.40% X + 0.40% (1 - X) = D resto DPA(n-6) 0.15% X + 0% (1 - X) = P DHADPA(n-6) D/P = 4 en donde: X= fracción de peso de Martek DHA™-S en la combinación final Y= fracción de peso de DHASCO® en la combinación final = 1 - X D= fracción de peso de DHA en la combinación final P= fracción de peso de DPA en la combinación final Resolviendo (1 ): D = 0.4 (3): P = 0.1 (2): X = 0.0.659 (Martek DHA™-S % en la combinación final) ? 65.9% Martek DHA™-S (aceite Schizoquitrium) Y = 0.0341 (DHASCO® en la combinación final) ? 34.1% DHASCO® (aceite Crypthecodinium) En forma similar, se pueden calcular otras proporciones DHA/DPA(n-6) objetivo a través del mismo método, tomando en cuenta la cantidad de DHA y DPA(n-6) en los aceites de partida. Por ejemplo, para una combinación de Aceite DHASCO® o Aceite Martek DHA™-S, se pueden calcular las siguientes proporciones DHA/DPA(n-6) objetivo: La descripción anterior de la presente invención ha sido presentada para propósitos de ilustración y descripción. Además, la descripción no pretende limitar la presente invención a la forma aquí descrita. En consecuencia, las variaciones y modificaciones son proporcionales a las enseñanzas anteriores, y a las habilidades o conocimiento de la técnica relevante, están dentro del alcance de la presente invención. La modalidad descrita anteriormente está proyectada en forma adicional para explicar el mejor modo conocido para practicar la presente invención y para permitir que otros expertos en la técnica utilicen la presente invención, en dicha modalidad u otras modalidades y con diversas modificaciones requeridas para las aplicaciones o usos particulares de la presente invención. Además, los elementos de una modalidad pueden ser recombinados fácilmente con elementos de una o más de otras modalidades. Dichas combinaciones pueden formar un número de modalidades dentro del alcance de la presente invención. Se pretende que las reivindicaciones adjuntas se construyan para incluir modalidades alternativas hasta el punto permitido por la técnica anterior. Además, otros diversos aspectos de la presente invención aquí descritos se establecen en las siguientes reivindicaciones numeradas:

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición de fórmula para infantes, en donde, cuando está lista para consumo por parte del infante, la composición comprende ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden ácido docosahexaenoico (DHA); y en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ácido docosapentaenoico (DPA(n-6)) y opcionalmente ácido araquidonico (ARA); en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1, y en donde la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

2. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 1.95:1.

3. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 1.85:1.

4. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 1.75:1.

5. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 0.4:1.

6. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6).

7. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 7% mg/L de DPA(n-6).

8. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque DHA, ARA ó DPA(n-6) son de una fuente seleccionada del grupo que consiste en una planta, semilla de aceite, un microorganismo, un animal y mezclas de los anteriores.

9. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en algas, bacterias, hongos y protozoarios.

10. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada y una semilla de aceite genéticamente modificada seleccionada del grupo que consiste en frijol soya, maíz, cártamo, girasol, cañóla, lino, cacahuate, mostaza, semilla de colza, garbanzo, algodón, lenteja, clavo blanco, olivo, palma, borraja, primavera nocturna, linaza y tabaco y mezclas de los mismas.

11. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada, una semilla de aceite genéticamente modificada y un microorganismo genéticamente modificado, en donde la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido o una parte del mismo.

12. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 8, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en Traustoquitriales, dinoflagelatos y Mortierella.

13. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizada porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste en Schizoquitrium , Traustoquitrium y Crypthecodinium .

14. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición comprende una combinación de aceites microbianos, y en donde la combinación comprende aceite de un microorganismo traustoquitrid y un aceite de un microorganismo dinoflagelato.

15. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) se selecciona del grupo que consiste en de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1 y de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1.

16. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol.

17. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol.

18. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L.

19. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L.

20. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar al menos 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

21. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 20, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

22. Un método para alimentar a un infante, caracterizado porque comprende administrar una composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 21 , a un infante.

23. Un método preparar una composición de fórmula para infantes, en donde el método comprende combinar componentes nutricionales, ácidos grasos n-3 de cadena larga y ácidos grasos n-6 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden (DHA); en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ARA y DPA(n-6); en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1 , y en donde la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

24. Una composición de fórmula para infantes, en donde la composición comprende ácidos grasos n-3 de cadena larga y DHA, en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga son suministrados en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6), en donde la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1 , y en donde la composición se formula para proporcionar al menos 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

25. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga en el aceite de fuente comprenden al menos aproximadamente 5% en peso de DPA(n-6)·

26. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga en el aceite de fuente comprenden al menos aproximadamente 10% en peso de DPA(n-6)·

27. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga en el aceite de fuente comprenden al menos aproximadamente 15% en peso de D P A ( n -6).

28. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga en el aceite de fuente comprenden al menos aproximadamente 20% en peso de DPA(n-6).

29. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga en el aceite de fuente comprenden al menos aproximadamente 25% en peso de DPA(n-6).

30. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque los ácidos grasos n-6 de cadena larga comprenden ARA; y en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1.

31. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 30, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es mayor aproximadamente a 0.4:1.

32. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición no comprende ARA.

33. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6).

34. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque DHA o DPA(n-6) proceden de una fuente seleccionada del grupo que consiste en una planta, una semilla de algodón, un microorganismo, un animal y mezclas de los mismos.

35. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 34, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en algas, bacterias, hongos y protozoarios.

36. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 34, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada y una semilla de aceite genéticamente modificada seleccionada del grupo que consiste en frijol soya, maíz, cártamo, girasol, cañóla, lino, cacahuate, mostaza, semilla de colza, garbanzo, algodón, lenteja, clavo blanco, olivo, palma, borraja, primavera nocturna, linaza y tabaco y mezclas de los mismas.

37. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 34, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada, una semilla de aceite genéticamente modificada y un microorganismo genéticamente modificado, en donde la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido o una parte del mismo.

38. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 34, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en Traustoquitriales, dinoflagelatos y Mortierella .

39. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 38, caracterizada porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste en Schizoquitrium, Traustoquitrium y Crypthecodinium .

40. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición comprende una combinación de aceites microbianos, y en donde la combinación comprende aceite de un microorganismo traustoquitrid y un aceite de un microorganismo dinoflagelato.

41. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) se selecciona del grupo que consiste en de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1 y de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1.

42. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol.

43. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol.

44. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L.

45. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L.

46. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 24, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

47. Un método para alimentar a un infante, caracterizado porque comprende administrar una composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 22 a la 46, a un infante.

48. Un método para preparar una composición de fórmula para infantes, que comprende combinar componentes nutricionales, DHA, y los ácidos grasos n-6 de cadena larga, en donde los ácidos grasos n-6 de cadena en las composiciones de fórmula para infantes se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6), y en donde la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1, mediante lo cual se prepara una composición de fórmula para infantes que proporciona al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

49. Una composición de fórmula para infantes, en donde la composición se formula para comprender al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6) cuando está lista para el consumo, en donde la composición comprende además ácidos grasos n-3 de cadena larga; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden DHA; en donde la composición comprende opcionalmente además ácido araquidonico ARA; y en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1.

50. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es mayor a roximadamente a 0.4:1.

51. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición no comprende ARA.

52. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 13 mg/L de DPA(n-6).

53. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 26 mg/L de DPA(n-6).

54. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 40 mg/L de DPA(n-6).

55. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 53 mg/L de DPA(n-6).

56. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6).

57. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque el DPA(n-6) en la composición se suministra a través de un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga.

58. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque el DPA(n-6) es de una fuente seleccionada del grupo que consiste en una planta, una semilla de algodón, un microorganismo, un animal, y mezclas de los anteriores.

59. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 58, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en algas, bacterias, hongos y protozoarios.

60. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 58, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada y una semilla de aceite genéticamente modificada seleccionada del grupo que consiste en frijol soya, maíz, cártamo, girasol, cañóla, lino, cacahuate, mostaza, semilla de colza, garbanzo, algodón, lenteja, clavo blanco, olivo, palma, borraja, primavera nocturna, linaza y tabaco y mezclas de los mismas.

61. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 58, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada, una semilla de aceite genéticamente modificada y un microorganismo genéticamente modificado, en donde la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido o una parte del mismo.

62. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en Traustoquitriales, dinoflagelatos y Mortierella .

63. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 62, caracterizada porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste en Schizoquitrium , Traustoquitrium y Crypthecodinium .

64. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende una combinación de aceites microbianos, y en donde la combinación comprende aceite de un microorganismo tra u stoq u itri d y un aceite de un microorganismo dinoflagelato.

65. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) se selecciona del grupo que consiste en de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1 y de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1.

66. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol.

67. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol.

68. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende ácido eicosapentaenoico (EPA) en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L.

69. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L.

70. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar al menos 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

71. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 70, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

72. Un método para alimentar a un infante, caracterizado porque comprende administrar una composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 49 a la 71, a un infante.

73. Un método para preparar una composición de fórmula para infantes, caracterizado porque comprende combinar componentes nutricionales, DPA(n-6) y opcionalmente ARA; en donde la composición se formula para comprender al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6) cuando está lista para consumo, y en donde la proporción de ARA:DHA en menor aproximadamente a 3:1.

74. Un composición de fórmula para infantes que comprende una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación comprende un primer aceite que comprende DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que comprende DHA.

75. Un composición de fórmula para infantes que comprende una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación comprende un aceite que tiene una primera proporción de DHA y DPA(n-6), y un segundo aceite que tiene una segunda proporción DHA de DPA(n-6), en donde las proporciones son diferentes y en donde el primer aceite tiene más DPA(n-6) que el segundo aceite.

76. Una composición que comprende una combinación de aceites microbianos, y en donde la combinación comprende un primer aceite de un microorganismo traustoquitrid y un segundo aceite de un microorganismo dinoflagelato.

77. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 76, caracterizada porque el microorganismo traustoquitrid es del género Schizoquitrium y el microorganismo dinoflagelato es del género Crypthecodinium .

78. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 76, caracterizada porque la combinación comprende entre aproximadamente 10% en peso y aproximadamente 90% en peso de aceite de un microorganismo traustoquitrid y entre aproximadamente 90% en peso y aproximadamente 10% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato.

79. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 76, caracterizada porque la combinación comprende entre aproximadamente 50% en peso y aproximadamente 82% en peso de aceite de un microorganismo traustoquitrid y entre aproximadamente 18% en peso y aproximadamente 50% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato.

80. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 76, caracterizada porque la combinación comprende entre aproximadamente 57.5% en peso y aproximadamente 67.5% en peso de aceite de un microorganismo traustoquitrid y entre aproximadamente 32.5% en peso y aproximadamente 42.5% en peso de aceite de un microorganismo dinoflagelato.

81. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la combinación tiene una proporción DHA:DPA(n-6) de entre aproximadamente 3:1 y aproximadamente 10:1.

82. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la combinación tiene una proporción DHA:DPA(n-6) de entre aproximadamente 0.5:1 y aproximadamente 10:1.

83. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la combinación tiene una proporción DHA:DPA(n-6) de entre aproximadamente 3.5:1 y aproximadamente 4.5:1.

84. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la combinación comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga y en donde los ácidos grasos n-6 de cadena larga se suministran en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de DPA(n-6).

85. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la combinación comprende ácidos grasos n-3 de cadena larga que comprenden DHA; en donde los ácidos grasos n-3 de cadena larga comprenden ácido araquidonico ARA; y en donde la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1.

86. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 85, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es mayor aproximadamente a 0.4:1.

87. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 85, caracterizada porque la composición no comprende ARA.

88. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6).

89. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) es seleccionada del grupo que consiste de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1. de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1; y de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1:1.

90. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol.

91. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol.

92. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L.

93. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L.

94. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 80, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar al menos aproximadamente 2 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

95. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 93, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

96. Un método para alimentar a un infante, en donde el método comprende administrar a un infante una composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 75 a la 95.

97. Un método para preparar una composición de fórmula para infantes, caracterizada porque comprende combinar componentes nutricionales, y una combinación de aceites microbianos, en donde la combinación es seleccionada del grupo que consiste en una combinación que comprende un primer aceite que comprende DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que comprende DHA; una combinación que comprende un aceite que tiene una primera proporción de DHA y DPA(n-6) y un segundo aceite que tiene una segunda proporción DHA de DPA(n-6), en donde las proporciones son diferentes y en donde el primer aceite tiene más de DPA(n-6) que el segundo aceite; y una combinación que comprende un primer aceite de un microorganismo traustoquitrid y un segundo aceite de un microorganismo dinoflagelato.

98. Una composición de fórmula para infantes que comprende una combinación de aceites microbianos y de planta, en donde la combinación comprende aceite de una planta genéticamente modificada para producir DHA y DPA(n-6), y en donde el aceite de planta comprende DHA y DPA(n-6), y en donde el aceite microbiano comprende ARA.

99. La fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 98, caracterizada porque la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

100. Una composición de fórmula para infantes que comprende un aceite de planta de una planta genéticamente modificada para producir DHA y DPA(n-6), y en donde el aceite comprende DHA y DPA(n-6) en una proporción de aproximadamente 0.5:1 hasta aproximadamente 5:1.

101. La fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 100, caracterizada porque la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

102. Una composición de fórmula para infantes que comprende un aceite microbiano de un microorganismo genéticamente modificado y en donde el aceite comprende DHA y DPA(n-6) en una proporción de aproximadamente 0.5:1 hasta aproximadamente 5:1.

103. La fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 102, caracterizada porque la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido PUFA o partes del mismo.

104. Una composición de fórmula para infantes formulada para cumplir con los requerimientos objetivo de DHA y ARA y mantener el crecimiento, peso, desarrollo del sistema nervioso o desarrollo del sistema inmune normales, en donde la composición comprende; DHA en la cantidad de requerimiento objetivo de DHA; ARA en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) en una cantidad suficiente para retro-convertir a ARA in vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub-objetivo de ARA.

105. Una composición de fórmula para infantes formulada para cumplir con los requerimientos objetivo de DHA y ARA y para mantener el crecimiento, peso, desarrollo del sistema nervioso o desarrollo del sistema inmune normales, en donde la composición comprende; DHA en la cantidad de requerimiento objetivo de DHA; ARA en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) en al menos una cantidad de valor de umbral, en donde la curva de respuesta ARA es curvilínea, y en donde la cantidad de valor de umbral da como resultado una respuesta ARA en la cual la pendiente de la curva de respuesta ARA cambia de positivo a negativo.

106. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la cantidad sub-objetivo de ARA es una cantidad seleccionada del grupo que consiste en al menos de aproximadamente 5% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de al menos de aproximadamente 10% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad al menos de aproximadamente 15% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA y una cantidad de aproximadamente 20% de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA.

107. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque el DPA(n-6) se suministra en un aceite de fuente, en donde el aceite de fuente comprende ácidos grasos n-6 de cadena larga que comprenden al menos aproximadamente 2% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga totales.

108. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque el DPA(n-6) comprende al menos aproximadamente 5% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga totales en la composición.

109. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque el DPA(n-6) comprende al menos aproximadamente 10% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga totales en la composición.

110. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque el DPA(n-6) comprende al menos aproximadamente 15% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga totales en la composición.

111. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque el DPA(n-6) comprende al menos aproximadamente 20% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga totales en la composición.

112. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque el DPA(n-6) comprende al menos aproximadamente 25% en peso de los ácidos grasos n-6 de cadena larga totales en la composición .

113. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 3:1.

114. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 1.95:1.

115. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 1.85:1.

116. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 1.75:1.

117. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción de ARA:DHA es menor aproximadamente a 0.4:1.

118. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición no comprende ARA.

119. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 7 mg/L de DPA(n-6).

120. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende al menos aproximadamente 66 mg/L de DPA(n-6).

121. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende de aproximadamente 40 hasta aproximadamente 140 mg/L de DHA.

122. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque DHA ó DPA(n-6) son de una fuente seleccionada del grupo que consiste en una planta, un aceite de semilla, un microorganismo, un animal y mezclas de los anteriores.

123. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 122, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en algas, bacterias, hongos y protozoarios.

124. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 122, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada y una semilla de aceite genéticamente modificada seleccionada del grupo que consiste en frijol soya, maíz, cártamo, girasol, cañóla, lino, cacahuate, mostaza, semilla de colza, garbanzo, algodón, lenteja, clavo blanco, olivo, palma, borraja, primavera nocturna, linaza y tabaco y mezclas de los mismas.

125. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 122, caracterizada porque la fuente se selecciona del grupo que consiste en una planta genéticamente modificada, una semilla de aceite genéticamente modificada y un microorganismo genéticamente modificado, en donde la modificación genética comprende la introducción de un gen de sintasa de poliquetido o una parte del mismo.

126. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 122, caracterizada porque la fuente es un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en Traustoquitriales, dinoflagelatos y Mortierella .

127. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 126, caracterizada porque el microorganismo es seleccionado del grupo que consiste en Schizoquitrium , Traustoquitrium y Crypthecodinium .

128. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende una combinación de aceites microbianos, y en donde la combinación comprende aceite de un microorganismo traustoquitrid y un aceite de un microorganismo dinoflagelato.

129. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 10:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

130. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

131. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la proporción DHA:DPA(n-6) se selecciona del grupo que consiste de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 3:1, de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 2:1 y de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 1 :1.

132. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 500 mg/L de colesterol.

133. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende además de aproximadamente 0.37 mg/L de colesterol hasta aproximadamente 3.75 mg/L de colesterol.

134. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 3 mg/L.

135. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición comprende EPA en una cantidad menor aproximadamente a 60 mg/L.

136. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar al menos aproximadamente 2 mg/kg/dia de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

137. La composición de fórmula para infantes tal como se describe en la reivindicación 104 ó 105, caracterizada porque la composición se formula para proporcionar de aproximadamente 3 mg/kg/día de DPA(n-6) hasta aproximadamente 8 mg/kg/día de DPA(n-6) cuando se administra a un infante.

138. Un método para alimentar a un infante caracterizado porque comprende administrar una composición de fórmula para infantes tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 104 a la 137 a un infante, mediante lo cual se mantiene el crecimiento, peso, desarrollo del sistema nervioso y desarrollo del sistema inmune normales.

139. Un método para preparar una composición de fórmula para infantes, caracterizado porque comprende combinar los componentes n utricionales DHA, ARA y DPA(n-6), en donde DHA está presente en una cantidad de requerimiento objetivo de DHA; ARA está presente en una cantidad sub-objetivo menor a la cantidad de requerimiento objetivo de ARA; y DPA(n-6) está presente en una cantidad del gruó que consiste en una cantidad suficiente para retro-convertir a ARA in vivo, en una cantidad suficiente para compensar la cantidad sub- objetivo de ARA; y al menos una cantidad de valor de umbral, en donde la curva de respuesta Ara es curvilínea, y en donde la cantidad de valor de umbral da como resultado una respuesta ARA en la cual la pendiente de la curva de respuesta de ARA cambia de negativo a positivo.

140. El método tal como se describe en la reivindicación 139, caracterizado porque la cantidad sub-objetivo de Ara es una cantidad seleccionada del grupo que consiste en una cantidad de aproximadamente 5% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de aproximadamente 10% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, una cantidad de aproximadamente 15% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA, y una cantidad de aproximadamente 20% debajo de la cantidad de requerimiento objetivo de ARA.

141. Un método para alimentar a un infante, en donde el método comprende administrar una composición de fórmula para infantes que contiene componentes nutricionales, DHA y DPA(n-6) a un infante, en donde el infante es alimentado al menos aproximadamente 2 mg de DPA(n-6)/kg/día.

142. El método tal como se describe en la reivindicación 141, caracterizado porque la composición de fórmula para infantes es la composición de fórmula para infantes de cualesquiera de las reivindicaciones de la 1 a la 21, de la 24 a la 45, de la 49 a la 71 o de la 104 a la 137.

143. Una composición fortificadora de nutrición para infante prematuros formulada para combinación con leche o fórmula para infantes, en donde la composición fortificadora de nutrición para infantes prematuros comprende DPA(n-6) y en donde cuando se combina con la leche o fórmula, la combinación comprende DPA(n-6) en una cantidad de valor de umbral.

144. La composición fortificadora para nutrición de infantes prematuros tal como se describe en la reivindicación 143, caracterizada porque comprende además DHA.

145. La composición fortificadora para nutrición de infantes prematuros tal como se describe en la reivindicación 144, caracterizada porque comprende además ARA.

146. La composición fortificadora para nutrición de infantes prematuros tal como se describe en la reivindicación 144, caracterizada porque la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

147. La composición fortificadora para nutrición de infantes prematuros tal como se describe en la reivindicación 143, caracterizada porque comprende además un componente seleccionado del grupo que consiste en proteína, grasa, vitaminas y minerales.

148. Un método para proporcionar nutrientes suplementarios a un infante de pre-término, caracterizado porque comprende administrar a un infante leche o fórmula fortificada con una composición fortificadora de nutrición para infantes prematuros de la composición tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 144 a la 147 a un infante de pre-término.

149. Un método para promover el crecimiento de un infante prematuro, en donde el método comprende administrar a un infante leche o fórmula fortificada con la composición fortificadora de nutrición para infantes prematuros de la composición tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 144 a la 147 a un infante de pre-término.

150. Un método para preparar leche o fórmula para infante prematuros fortificada, en donde el método comprende combinar una leche o fórmula para infantes con la composición tal como se describe en cualesquiera de las reivindicaciones de la 144 a la 147.

151. Una composición de suplemento en la dieta de infantes, caracterizada porque la composición de suplemento de dieta para infantes comprende DPA(N-6) y un excipiente, en donde la combinación comprende DPA(n-6) en una cantidad de valor de umbral.

152. Una composición de suplemento de dieta para infantes tal como se describe en la reivindicación 151, caracterizada porque comprende además DHA.

153. Una composición de suplemento de dieta para infantes tal como se describe en la reivindicación 152, caracterizada porque comprende además ARA.

154. Una composición de suplemento de dieta para infantes tal como se describe en la reivindicación 152, caracterizada porque la proporción de DHA:DPA(n-6) es de aproximadamente 5:1 hasta aproximadamente 0.5:1.

155. Una composición de suplemento de dieta para infantes tal como se describe en la reivindicación 151, caracterizada porque comprende además un componente seleccionado del grupo que consiste en proteína, grasa, vitaminas y minerales.

156. Un método para proporcionar nutrientes suplementarios a un infante, en donde el método comprende administrar a un infante, una composición de suplemento de dieta tal como se describe en las reivindicaciones de la 151 a la 155 a un infante.