MX2008010930A - Peptidos y derivados de peptido asi como composiciones farmaceuticas que los contienen. - Google Patents

Abstract

Péptidos y derivados de péptidos de la siguiente fórmula general (I): H2N-GHRPX1X2X3X4X5X6X7X8PX9X10X11PX12PPPX13X14X15X16GYR-X17 (I), en donde: X1-X16 denotan 1 de los 20 aminoácidos genéticamente codificados, X17 denota OR1, con R1=hidógeno, o alquilo de C1-C10 o NR2R3, R2 y R3 siendo idénticos o diferentes y denotando hidrógeno, alquilo de C1-C10 o un residuo -PEG5-60K, en donde el residuo PEG está enlazado al átomo N a través de un separador, o un residuo NH-Y-Z-PEG5-60K, en donde Y denota un enlace químico o un aminoácido genéticamente codificado de entre el grupo de S, C, K o R, y Z denota un separador por medio del cual un residuo de polietilenglicol (PEG) puede estar enlazado, así como las sales fisiológicamente aceptables, o en donde: X15 o X16 denota un aminoácido del grupo de C o K, que está enlazado a un residuo Z-PEG5-60K a través del heteroátomo en la cadena lateral, y en donde X17 denota OR1, con R1 = hidrógeno o alquilo de C1-C10, o NR2 R3, R2 y R3 siendo idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de C1-C10, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos.

Description

PÉPTIDOS Y DERIVADOS DE PÉPTIDO ASÍ COMO COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE LOS CONTIENEN La presente invención se refiere a péptidos y derivados de péptido, a la producción de los mismos, así como a su uso para preparar un fármaco activo terapéutica y/o preventivamente, y a dicho fármaco farmacéutico. La Patente EP1586586 describe el uso de péptidos a partir de la secuencia de fibrina que poseen efectos antiinflamatorios. Dicho efecto puede estar basado en el hecho de que la fibrina y los fragmentos de fibrina que se generan durante la descomposición de la misma se unen a las células endoteliales vía su neo-N-terminal de la cadena Bbeta y a las células en el torrente sanguíneo vía la secuencia de la cadena Aalfa, conduciendo así a la adhesión y trasmigración de estas células al interior del tejido. El socio de unión de la fibrina y los fragmentos de fibrina con las células endoteliales es la proteína cadherina vascular endotelial (VE), que se expresa exclusivamente en las juntas adherentes entre las células endoteliales vecinas. Los péptidos de conformidad con la invención bloquean esta interacción y con ello contraatacan la trasmigración de células sanguíneas. Sin embargo, no se afecta de manera adversa la defensa natural contra las infecciones mediante los leucocitos en la sangre. Por lo tanto, la composición de la misma, tal como granulocitos, linfocitos y monocitos, permanece sin afectar de manera que se mantiene el proceso natural de defensa. El fibrinógeno es producido en el hígado y, en esta forma, es biológicamente inactivo y normalmente se proporciona en la sangre en concentraciones de aproximadamente de 3 g/l. El desdoblamiento proteolítico de la proenzima protrombina da como resultado la formación de trombina, que desdobla los fibrinopéptidos A y B a partir del fibrinógeno. De esta manera, el fibrinógeno se transforma en su forma biológicamente activa. Se generan fibrina y productos de desdoblamiento de la fibrina. La trombina se forma siempre que se activa la coagulación de la sangre, es decir, con daño al tejido, ya sea de génesis inflamatoria, traumática o degenerativa. La formación de fibrina como es mediada por la trombina es básicamente un proceso de protección cuyo objetivo es el sellar rápidamente cualesquiera defectos causados al sistema vascular. Sin embargo, la formación de fibrina también es un proceso patógeno. La apariencia de un trombo de fibrina como la causa desencadenante de infarto cardiaco es uno de los problemas más prominentes en la medicina humana. El papel que juega la fibrina durante el extravasado de células inflamatorias del torrente sanguíneo dentro del tejido, que por una parte es un proceso deseado para la defensa contra microorganismos patógenos o células tumorales en el tejido, pero por otra parte es un procedimiento que por sí mismo induce o prolonga el daño hecho al tejido, no ha sido hasta ahora examinado para nada o no hasta un grado suficiente. La fibrina se une a las células endoteliales a través de su neo-N-term¡nal de Bbeta por medio de la secuencia para Bbeta y a las células en el torrente sanguíneo por medio de la secuencia Aalfa, conduciendo así a la adhesión y la trasmigración de las células al tejido. Mediante el mecanismo arriba descrito, los péptidos o proteínas de conformidad con la invención pueden evitar la adhesión de las células del torrente sanguíneo con las células endoteliales de la pared vascular y/o su subsecuente trasmigración de la sangre al tejido. La Patente W09216221 describe polipéptidos que están enlazados de manera covalente con polímeros de cadena larga, como por ejemplo metoxipolietileno glicol (PEG). La unión de los polipéptidos a estos polímeros con frecuencia resulta en una prolongación de la vida media biológica de estos polipéptidos y retrasa su excreción renal. Puede encontrarse un resumen de esta propiedades en Davis et al., Polymeric Materials Pharmaceuticals for Biomedical Use, pp. 441-451 (1980). La adición de los grupos PEG ejerce su efecto de una manera proporcional al peso molecular del péptido PEGilatado, ya que, hasta un cierto tamaño de la molécula, la velocidad de filtración glomular es inversamente proporcional al peso molecular. La Patente WO2004/101600 también describe nuevos compuestos modificados con poli(etileno glicol) y su uso, en particular con énfasis en los péptidos modificados que activan el receptor de eritropoyetina.

Otros ejemplos para la modificación covalente de residuos PEG de péptidos y proteínas son las interleucinas (Knauf et al., J. Biol Chem. 1988, 263, 15064; Tsutumi et al., J. Controlled Reléase 1995, 33, 447), Interferons (Kita et al., Drug Delivery Res. 1990, 6 157), Catalase (Abuchowski et al., J. Biol. Chem. 1997, 252, 3582). En Reddy, Ann. of Pharmacotherapy, 2000, 34, 915, puede encontrarse una revisión de la técnica anterior. Una vida media biológica prolongada es ventajosa para varios usos terapéuticos de los péptidos. Esto es particularmente cierto en los casos de enfermedades crónicas en las cuales está indicada la administración del agente activo durante un periodo de tiempo prolongado. Con tales indicaciones, esto puede mejorar la aceptación del paciente, ya que, por ejemplo, la aplicación del agente activo una vez al día será aceptada más fácilmente que la infusión continua. Aparte de aumentar la masa molecular mediante la modificación covalente, puede obtenerse una prolongación de la persistencia de los polipéptidos al modificarlos, de tal manera que se evite su degradación por las enzimas proteolíticas (p. ej., exo o endoproteasas o peptidasas). Usando diversos ejemplos, se ha mostrado que es necesario personalizar la modificación apropiada para cada péptido, de manera que se evite una influencia significativa en el efecto farmacodinámico en comparación con el péptido no modificado. En este contexto, puede referirse a: Calcitonin (Lee et al. Pharm. Res. 1999, 16, 813), Growth Hormone Releasing Hormone (Esposito et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 2003, 55, 1279), Glucagon like peptide 1 (Lee et al., Bioconjugate Res. 2005, 16, 377), así como a The growth hormone-receptor antagonist Pegvisomant (Ross et al., J. Clin. Endocrin. Metab. 2001 , 86, 1716). Las revisiones de Caliceti y Veronese (Adv. Drug Deliv. Rev. 2003, 55 1261 ) y de Harris y Chess (Nature Rev. Drug Discovery 2003, 2, 214) que discuten que en caso de diseñar conjugador PEG de péptido o proteína, es necesario tomar en consideración la estructura de la sustancia original, el peso molecular del péptido y el polímero, el número de cadenas de polímero conjugado, así como la química de unión, para obtener un conjugado PEG de péptido, efectivo. Sorprendentemente, ahora se ha encontrado que los péptidos derivados de la cadena del fragmento de fibrina Bbeta(15-42) en donde uno o varios aminoácidos de la secuencia natural de la fibrina han sido sustituidos por otros aminoácidos, así como los derivados modificados en el extremo terminal C de la secuencia péptida, también tienen fuertes efectos antiinflamatorios. Lo mismo aplica a péptidos y derivados de péptidos cuya modificación evita su destrucción por las proteasas o peptidasas, así como a conjugados PEG de péptido derivados de la secuencia básica del fragmento Bbet(15-42) de fibrina. Por lo tanto la invención se refiere a péptidos modificados que se derivan de la cadena del fragmento Bbeta(15-42) de fibnna y donde uno o varios de los aminoácidos de la secuencia han sido sustituidos por aminoácidos o peptidomiméticos codificados genéticamente o no codificados genéticamente, estos pueden existir como péptidos libres o como derivado de la terminal C y/o estando unidos a un polímero de polietileno glicol (PEG), y tienen efectos antiinflamatorios y/o estabilizantes del endotelio. Por ejemplo, los ésteres o las amidas pueden tomarse en consideración como derivados de la terminal C. Los compuestos de la invención pueden tener sustituciones conservadoras de aminoácidos en comparación con la secuencia natural de la fibrina en los animales de sangre caliente que van a ser tratados, en una o varias posiciones. Una sustitución conservadora se define como la cadena lateral del aminoácido respectivo que es reemplazada por una cadena lateral de estructura química y polaridad similares, siendo derivada la cadena lateral de un aminoácido codificado genéticamente o no codificado genéticamente. Las familias de aminoácidos de este tipo que tienen cadenas laterales similares, se conocen en la técnica. Estas comprende, por ejemplo, aminoácidos que tienen cadenas laterales básicas (lisinas, argininas, histidina), cadenas laterales ácidas (ácido aspártico, ácido glutámico) cadenas laterales polares no cargadas (glicina, ácido aspartámico, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadenas laterales no polares (alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptofano), cadenas laterales beta-ramificadas (treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (tirosina, fenilalanina, triptofano, histidina). Estas sustituciones conservadoras de las cadenas laterales pueden realizarse preferiblemente en posiciones no esenciales. En este contexto, una posición esencial en la secuencia es una en la cual la cadena lateral del aminoácido relevante es de significancia para su efecto biológico. La invención en particular concierne a péptidos y derivados de péptido de la siguiente fórmula general I: en donde: X Xi6 denotan uno de los 20 aminoácidos codificados genéticamente, Xi7 denota OR1 , con = hidrógeno o alquilo de (C1-C10), o NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno, alquilo de (Ci-C10), o un residuo de PEG5-6OK, donde el residuo de PEG está unido a un átomo de N vía un separador, o un residuo NH-Y-Z-PEG5.6OK, donde Y denota un enlace químico o un aminoácido codificado genéticamente de entre el grupo de S, C, K o R, y Z denota un separador mediante el cual un residuo de polietileno glicol (PEG) puede ser enlazado, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos, o en donde: Xi5 o X-I6 denotan un aminoácido del grupo de C o K, que está enlazado con un residuo Z-PEG5-6OK a través del heteroátomo en la cadena lateral, y en donde Xi7 denota OR1 , con R-i = hidrógeno o alquilo de (Ci-Ci0), o NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de (C1-C10), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. Una materia tema de la invención son los péptidos y derivados de péptidos de la Fórmula general I, en donde: ?? , X9, X10, X1 denotan L, I, S, M, o A, X2) ?ß, 7 denotan E o D, X3, X4, X5, X11 denotan R o K, ?ß, X12 denotan A, G, S o L, X13 denota I, L o V, y en donde X15, X16 y X17 tienen el mismo significado que se da arriba, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. Un tema materia particularmente preferido de la invención, son los péptidos y derivados de péptidos de la Fórmula II: H2N-GHRPLDKK E APSLRPAPPPÍSOGGY - en donde X 7 tiene el mismo significado que se da arriba para la Fórmula I, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos.

El tema materia más altamente preferido de la presente invención son los compuestos de la Fórmula (II), en donde Xi7 denota NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno, alquilo de (C1-C10), o un residuo C(NR2R3)-(S-succinimido)-(PEG5.40K), estando el residuo de succinimida enlazado vía el átomo 3 de carbono con el átomo de azufre del residuo de cisteína, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. Otro tema materia que es el más altamente preferido de la invención son los derivados de péptido de la Fórmula (III): en donde dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo C(S-succinimido)-(PEG5-4oK), estando el residuo succinimido enlazado con el átomo de azufre de la cisteína vía el átomo 3 de C, y en donde X17 denota NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de (C Cio), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. Otro tema materia que es el más altamente preferido de la invención, son los derivados de péptido de la Fórmula (III): H2 -GHRPLD KREEAPSLRPAPPp-ÍS-Xi9- 2fl- X2.rYR-Xi7 <M en donde dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo K-(PEG5-4OK), estando el residuo de PEG enlazado vía el átomo de nitrógeno en la cadena lateral del residuo de lisina, y donde: X-i7 denota NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de (C1 -C10), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. En las anteriores Fórmulas I y II, las siguientes letras representan residuos de aminoácido de conformidad con la notación general para proteínas y péptidos: pFenilalanina es F, leucina es L, isoleucina es I, metionina es M, valina es V, serina es S, prolina es P, treonina es T, alanina es A, tirosina es Y, histidina es H, glutamina es Q, asparagina es N, lisina es K, ácido aspártico es D, ácido glutámico es E, cisteína es C, triptofano es W, arginina es R, glicina es G. Los residuos de aminoácidos en los compuestos de la Fórmula I pueden estar presentes en cualquiera de sus configuraciones D o L. El término péptido se refiere a un polímero de estos aminoácidos, que está enlazado vía un enlace de amida. "Fisiológicamente aceptable" significa que esas sales son formadas con ácidos o bases cuya adición no tiene efectos indeseables cuando son usadas por humanos. Son preferibles las sales con ácidos o bases cuyo uso se enlista para el uso con animales de sangre caliente, en particular humanos, en la Farmacopea de los EUA o en cualquier otra farmacopea generalmente reconocida. PEG significa un residuo de polietilenoglicol que tiene un peso molecular de entre 5,000 y 60,000 Daltons, siendo este peso molecular el máximo de una distribución del peso molecular, de manera que los componentes individuales de la mezcla pueden tener pesos moleculares mayores o menores. La invención también se refiere a procedimientos para la producción de péptidos y derivados de péptido de la Fórmula (I), caracterizados en cualquiera de: (A) el primer aminoácido en el extremo terminal C de la secuencia respectiva es enlazado con una resina polimérica vía un separador adecuado que puede desdoblarse, los aminoácidos subsecuentes, que contienen grupos protectores adecuados para los grupos funcionales, son enlazados paso por paso de conformidad con métodos conocidos en la técnica, el péptido terminado se separa de la resina polimérica de conformidad con los métodos adecuados conocidos en la técnica, los grupos protectores, si están presentes, son separados mediante métodos adecuados y el péptido o derivado de péptido se purifica de conformidad con los métodos adecuados, o (B) un grupo PEG que tiene un peso molecular deseado se enlaza con una resina polimérica vía un separador adecuado, el primer aminoácido en el extremo terminal N del péptido se enlaza usando métodos adecuados, siendo los pasos restantes los mismos que se describen en (A), o (C) un residuo de lisina, que contiene un grupo protector adecuado en el grupo e-amino, se enlaza con una resina polimérica adecuada vía un separador adecuado usando métodos adecuados, la cadena de péptido se sintetiza como se describe en (A), siguiendo el desdoblamiento a partir de la resina polimérica y purificación, si es necesaria, el grupo protector en el grupo e-amino se separa usando métodos adecuados, un grupo PEG que tenga un peso molecular deseado se enlaza con el grupo e-amino usando un reactivo activado adecuado, los grupos protectores opcionalmente restantes se separan y el producto final se purifica usando los métodos adecuados, o (D) un péptido que contiene un residuo de cisteína se hace reaccionar con una maleimida de PEG para formar los compuestos de la Fórmula (III). Los pasos adecuados del procedimiento siguientes a (A), (B) o (C), así como los reactivos adecuados, se describen, por ejemplo, en el documento WO 2004/101600. Las modalidades de los pasos de procedimiento respectivos no son nuevos per se y serán claros para un especialista con experiencia en el campo de la síntesis orgánica. Los procedimientos para unir un residuo de PEG con una cadena de péptido serán conocidos para la persona experimentada en la técnica. Por ejemplo, un residuo de cisteína (C) puede hacerse reaccionar con una maleimida de PEG, dando como resultado un residuo de succinimida como separador para el residuo Z. Otra posibilidad es hacer reaccionar un residuo de carboxi con terminal C activado con un residuo de PEG sustituido con aminoalquilo. Otra posibilidad es la introducción de un residuo de PEG haciendo reaccionar un residuo de PEG sustituido con aldehido con la función e-amino de un residuo de lisina. Los reactivos de PEG activados que tienen separadores y grupos reactivos adecuados pueden obtenerse, por ejemplo, en NOF Corporation (Tokio, Japón). Las sustancias de conformidad con la invención y el uso de las sustancias de conformidad con la invención para la producción de un fármaco farmacéutico son de significancia particular para la producción de un fármaco farmacéutico para la terapia de enfermedades resultantes del efecto dañino de los leucocitos en el tejido, o donde se daña la integridad fisiológica completa de la capa de células endoteliales que limitan los vasos sanguíneos. Las enfermedades que pertenecen a este grupo son aquellas en contexto con la autoinmunidad, como por ejemplo colaginosis, enfermedades reumáticas, enfermedades inflamatorias del intestino como Crohn mórbido o colitis ulcerosa, psoriasis y artritis soriática reumatoide, y/o enfermedades post/para-infecciosas así como enfermedades causadas por la reacción de tejido contra huésped. Un efecto curativo tiene lugar cuando este fármaco médico bloquea la migración de los leucocitos al tejido. Por lo tanto, los leucocitos permanecen en el torrente sanguíneo y no pueden causar un efecto auto-reactivo dañino al tejido. Este efecto de las sustancias de la invención es importante también para el tratamiento de condiciones de choque, en particular en el caso de choque séptico activado por infección con patógenos bacteriales gram-positivos o gram-negativos, así como choque por infecciones virales y hemorrágico causados por pérdida de sangre abundante debida a heridas severas o a infecciones bacteriales o virales. Las sustancias de la invención pueden usarse generalmente en situaciones que pueden ser descritas en términos de "Síndrome de Respuesta Sistémica Inflamatoria (SIRS)", "Síndrome de Depresión respiratoria Aguda (ARDS)" y falla orgánica o multiorgánica, respectivamente. Con un fármaco farmacéutico para la terapia y/o la prevención de las reacciones de rechazo de trasplantes de órganos hay un efecto curativo, ya que este fármaco farmacéutico evita la migración de leucocitos del torrente sanguíneo al órgano del sonador, y el órgano donado puede por lo tanto no ser destruido, por ejemplo, por linfocitos autorreactivos. Con un fármaco farmacéutico para la terapia y/o la prevención de la arteriosclerosis hay un efecto curativo y/o preventivo ya que este fármaco farmacéutico bloquea la migración de linfocitos y monocitos a la pared del tejido y por lo tanto la activación de las células de la pared del tejido. Por lo tanto se minimiza o se detiene el progreso de la arteriosclerosis, la progresión de la placa arteriosclerótica resultante de la misma es inhibida, causando que la arteriosclerosis retroceda. Con un fármaco farmacéutico para la terapia y/o la prevención del trauma por reperfusión después de inducir quirúrgica o farmacéuticamente el resuministro de sangre, p. ej., después de intervención coronaria percutánea, apoplejía, cirugía de los vasos, cirugía cardiaca de derivación y trasplantes de órganos, hay un efecto curativo y/o preventivo, ya que este fármaco farmacéutico inhibe la migración de linfocitos, neutrófilos y monocitos en la pared del vaso. El trauma por reperfusión es causado por una falta de oxígeno/acidosis de las células del vaso durante su resuministro con sangre conduciendo a su activación y/o daño. Debido a esto, los linfocitos, los neutrófilos y los monocitos se adhieren a la pared del vaso y migran a su interior. El bloqueo de la adherencia y de la migración de los linfocitos, neutrófilos y monocitos en la pared del vaso, causa que se abata el daño inducido por falta de oxígeno/acidosis, sin la subsecuente reacción inflamatoria que causa un daño permanente al vaso. El efecto estabilizante del endotelio de los compuestos de la invención evita además la formación de edemas así como cualquier daño posterior a los órganos irrigados a través de los vasos sanguíneos respectivos. Con un fármaco farmacéutico para la terapia y/o la prevención de la arteriesclerosis como una consecuencia de enfermedades metabólicas o del proceso de envejecimiento, hay un efecto curativo y/o preventivo, ya que este fármaco farmacéutico inhibe la migración de los linfocitos, neutrófilos y monocitos a la pared del vaso, inhibiendo por lo tanto la progresión de la placa arteriosclerótica que de ello resulta. El fármaco farmacéutico de conformidad con la invención también puede usarse para la transportación de otro fármaco. El fármaco de la invención se une específicamente a una molécula de la superficie en las células endoteliales. Por lo tanto los fármacos a él unidos pueden ser entregados a las células endoteliales en concentraciones altas sin ningún peligro de que tengan efectos colaterales en otros sitios. Un ejemplo que aquí puede citarse es el uso de sustancias que inhiben la división celular que, llevadas específicamente a las células endoteliales, pueden tener un efecto angiogenético. Esto proporciona un efecto curativo en pacientes de tumor, ya que el crecimiento del tumor es bloqueado mediante la prevención de la proliferación de las células endoteliales y evitando por lo tanto la neoangiogénesis. Los propios compuestos de la invención también pueden desarrollar un efecto angiogenético, ya que ellos, debido a su efecto estabilizante del endotelio, evitan que las células endoteliales cambien a un fenotipo proliferativo y por lo tanto evitan la formación de nuevos vasos sanguíneos capilares. Por lo tanto, ellos son por sí mismos adecuados para el tratamiento de todo tipo de enfermedades tumorales así como de la prevención y/o el tratamiento de metástasis tumoral. Los compuestos de la invención de la Fórmula (I) junto con adyuvantes y aditivos farmacéuticos, pueden ser formulados en preparaciones farmacéuticas que también son tema materia de la presente invención. Para preparar dichas formulaciones, una dosis terapéuticamente efectiva del péptido o del derivado de péptido se mezcla con diluyentes, estabilizantes, solubilizantes, auxiliares emulsificantes, adyuvantes o portadores farmacéuticamente aceptables, y se lleva a una forma terapéutica adecuada. Dichas preparaciones contienen por ejemplo una dilución de varios reguladores (Tris-HCI, acetato, fosfato) de diferentes pH y resistencia iónica, detergentes y solubilizantes (p. ej., Tween 80, Polisorbato 80), antioxidantes (p. ej., ácido ascórbico), y rellenos (p. ej., lactosa, manitol). Estas formulaciones pueden influenciar la disponibilidad biológica y el comportamiento metabólico de los agentes activos. Las preparaciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden ser administradas oralmente, parenteralmente (intramuscular, intraperitoneal, intravenosa o subcutáneamente), transdérmicamente o en un implante erosionable de un polímero adecuado biológicamente degradable (p. ej., polilactato o poliglicolato). El efecto biológico y la aplicabilidad del uso que se reivindica de los compuestos de la invención pueden ser determinados por ejemplo en un ensayo en el cual se examine microscópicamente un cultivo de células endoteliales de cordón umbilical humano después de la estimulación con la "proteína haz de disulfuro N-terminal" (NDSK-II) o con trombina. La estimulación de las células endoteliales causa la formación de espacios entre las células en una capa celular densamente empacada. El tratamiento con los compuestos de la invención puede evitar la formación de estos espacios, y es útil en el cierre de los espacios que ya se hayan formado. Este efecto habla del efecto protector que los compuestos de la invención tienen en el endotelio a través del organismo. Los compuestos de la invención tienen un efecto en la escala de concentraciones de desde 0.01 nM hasta 1 mM, preferiblemente en la escala de desde 1 nM hasta 0.1 mM en las células del baño de solución.

La efectividad in vivo puede establecerse por ejemplo usando un modelo de neumonitis aguda en un roedor. Para esto, el tratamiento del animal y la administración de la sustancia se realizan como se describe en el Ejemplo 7 de abajo. Los compuestos de la invención muestran un efecto a una dosis en la escala de desde 0.001 mg/kg de peso corporal hasta 500 mg/kg de peso corporal, preferiblemente a una dosis en la escala de desde 0.1 mg/kg a 50 mg/kg. Otra posibilidad para establecer el efecto biológico in vivo es la reducción o la completa supresión de la mortalidad debida a una infección con virus o bacterias hemolíticos. Para este propósito, como se describe en el Ejemplo 8, los ratones son infectados por ejemplo con una dosis de virus del dengue, con la cual el 50% de los animales fallece dentro de un periodo de 5-20 días después de la infección. Los compuestos de la invención proporcionan una reducción de esta mortalidad a una dosis en la escala de desde 0.001 hasta 500 mg/kg de peso corporal, preferiblemente a una dosis en la escala de desde 0.1 a 50 mg/kg de peso corporal. Los siguientes ejemplos sirven para ilustrar la invención, sin limitarla a los ejemplos.

Preparación general y purificación de los péptidos de conformidad con la invención La preparación y purificación de los derivados de péptidos anteriores generalmente se realiza mediante la estrategia FMOC sobre soportes de resina inestable al ácido usando un sintetizador de lote de péptido comercialmente disponible como también se describe en la literatura (p. ej., "Solid phase peptide synthesis - A practical approach" por E. Atherton, R.C.

Sheppard, Oxford University press 1989). Los derivados N-alfa protegidos con FMOC, cuyas cadenas funcionales están protegidas por grupos protectores sensibles al ácido, se usan como componentes de aminoácido. A menos que se establezca de otra forma, la purificación se realiza por medio de cromatografía de RP usando un gradiente de agua/acetonitrilo y TFA al 0.1 % como reactivo de par iónico.

EJEMPLO 1 Gl y - His-Ar g - Pro-Leu - Asp-Lys-Ly s- . Aig-Glu-GJo- AJ a-Pro-Ser-Leii- Arg-P ro-Ak-P« D-Pro-Pro- Jle-SeT-G ly- Gly ~G1 y-Tyr-Arg-NHj' 100 mg de Tentagel-S-RAM (Rapp Polymere) a una carga de 0.24 mmoles/g, se transfieren a un dispositivo de síntesis péptida comercialmente disponible (PSMM(Shimadzu)), donde la secuencia péptida es construida paso a paso de conformidad con el método de carbodiimida/HOBt. Los derivados de aminoácido FMOC son preactivados añadiendo un exceso equimolar de cinco veces de diisopropil-carbodiimida (DIC), diisopropil-etilamina (DIPEA) e hidroxibenzotriazola (HOBt) y, enseguida de su transferencia al recipiente de reacción, se mezcla con el soporte de resina durante 30 minutos. Los pasos de desdoblamiento se realizan mediante la adición de 3 x 900 µ? de piperidina al 30% en DMF y agitando vigorosamente durante 4 minutos. La remoción de la reacción individual y las soluciones de lavado se efectúan forzando las soluciones a través de la frita del fondo del recipiente de reacción. Se emplean los derivados de aminoácidos FMOC-Ala, FMOC-Arg(Pbf), FMOC-Asp, FMOC-Gly, FMOC-His(Trt), FMOC-lle, FMOC-Leu, FMOC-Lys(BOC), FMOC-Pro, FMOC-Ser(tBu) y FMOC-Tyr(tBu) (Orpegen). Cuando se completa la síntesis se seca la resina péptida. Subsecuentemente se separa la amida péptida mediante tratamiento con ácido trifluoroacético/TIS/EDT/agua (95:2:2:1 vol.) durante 2 horas a temperatura ambiente. Por medio de filtración, concentración de la solución y precipitación mediante la adición de dietiléter enfriado en hielo, se obtiene el producto crudo (75 mg) como un sólido. El péptido se purifica mediante RP-HPLC en 10 µ?? de Kromasil RP-18 250-20 en TFA al 0.1% con un gradiente de 5 en 60% de acetonitrilo en 40 minutos a una velocidad de flujo de 12 ml/min y evaluación del eluado mediante un detector de UV a 215 nm. La pureza de las fracciones individuales se determina por RP-HPLC analítico y espectrometría de masa. Después de la combinación de las fracciones purificadas y de la liofilización, de obtienen 48 mg de producto puro Maldi-TOF, 3036.6 m/z (m.i.) EJEMPLO 2 Gly ¾is-Arg-Pro-] ^Asp-Ly^ ?t?-1^.·$^-01?-???-01?-?>?·-?¾-0 ¾.(8-5?????½?(.3-???2??)-?? El péptido monomérico se sintetiza como en el Ejemplo 1 , usándose Tentagel (Rapp Polymere) como soporte de resina con FMOC-Cys(Trt) como el primer aminoácido. Después del desdoblamiento y la purificación del péptido la reacción se realiza con un exceso molar de 2 a 8 veces de maleinimido-PEG2OK- Enseguida de la recuperación se realiza la purificación sobre Kromasil RP-18, y la identidad del producto de confirma por medio de RP-HPLC analítica y MALDI-MS. EJEMPLO 3 Pro- Íls-Scr- üJy- G)y'Gl «T> -Ai¾-Cys-(S-succinimido -PE¾rK amida 100 mg de Tentagel-S-RAM (Rapp Polymere) a una carga de 0.24 mmoles/g fueron transferidos a un dispositivo de síntesis de péptido comercialmente disponible (PSMM(Shimadzu)) donde la secuencia péptida es construida paso a paso de conformidad con el método de carbodiimida/HOBt. Los derivados del FMOC-aminoácido son preactivados añadiendo un exceso equimolar de 5 veces de diisopropil carbodiimida (DIC), diisopropil-etilamina (DIPEA) e hidroxibenzotriazola (HOBt) y, enseguida de su transferencia a un recipiente de reacción, se mezclan con el soporte de resina durante 30 minutos. Se realizan los pasos de lavado mediante 5 adiciones de 900 µ? de DMF y mezclando vigorosamente durante 1 minuto. Los pasos de desdoblamiento se realizan mediante la adición de 3 x 900 µ? de piperidina al 30% en DMF y agitando vigorosamente durante 4 minutos. La remoción de la reacción individual y las soluciones de lavado se efectúan forzando las soluciones a través de la frita del fondo del recipiente de reacción. Se emplearon los derivados de aminoácidos FMOC -Ala, FMOC-Asp, FMOC-Gly, FMOC-His(Trt), FMOC-lle, FMOC-Leu, FMOC-Lys(BOC), FMOC-Pro, FMOC-Ser(tBu), FMOC-Cys(Trt) y FMOC-Tyr(tBu) (Orpegen). Después del desdoblamiento y la purificación del péptido se realiza la reacción con un exceso molar de 2 a 8 veces de maleinimido-PEG2OK- Enseguida de la recuperación se realiza la purificación en Kromasil RP-18, y la identidad del producto se confirma por medio de RP-HPLC analítica y MALDI-MS.

EJEMPLO 4 Gly-His-Axg-Pro-Leu-Asp-Lys-L^ 100 mg de Tentagel-S-RAM (Rapp Polymere) a una carga de 0.24 mmoles/g fueron transferidos a un dispositivo de síntesis de péptido comercialmente disponible (PSMM(Shimadzu)) donde la secuencia péptida es construida paso a paso de conformidad con el método de carbodiimida/HOBt. Los derivados del FMOC-aminoácido son preactivados añadiendo un exceso equimolar de 5 veces de diisopropil carbodiimida (DIC), diisopropil-etilamina (DIPEA) e hidroxibenzotriazola (HOBt) y, enseguida de su transferencia al recipiente de reacción, se mezclan con el soporte de resina durante 30 minutos. Se realizan los pasos de lavado mediante 5 adiciones de 900 µ? de DMF y mezclando vigorosamente durante 1 minuto. Los pasos de desdoblamiento se realizan mediante la adición de 3 x 900 µ? de piperidina al 30% en DMF y agitando vigorosamente durante 4 minutos. La remoción de la reacción individual y las soluciones de lavado se efectúan forzando las soluciones a través de la frita del fondo del recipiente de reacción. Se emplearon los derivados de aminoácidos FMOC -Ala, FMOC- Arg(Pbf), FMOC-Asp, FMOC-Gly, FMOC-His(Trt), FMOC-lle, FMOC-Leu, FMOC-Lys(BOC), FMOC-Pro, FMOC-Ser(tBu), FMOC-Cys(Trt) y FMOC-Tyr(tBu) (Orpegen). Cuando se completa la síntesis se seca la resina péptida. La amida péptida es subsecuentemente retirada mediante tratamiento con ácido trifluoroacético/TIS/EDT/agua (95:2:2:1 , vol.) durante 2 horas a temperatura ambiente. Por medio de filtración, concentración de la solución y precipitación mediante la adición de dietiléter enfriado en hielo, se obtiene el producto crudo (75 mg) como un sólido. El péptido se purifica mediante RP-HPLC sobre Kromasil RP-18 250-20. El péptido así obtenido se hace reaccionar con maleinimido-PEG20K-Después de la recuperación, la purificación por medio de cromatografía de gel y liofilizacion, se obtiene un producto puro, cuya identidad es confirmada por medio de RP-HPLC y MALDI-MS.

EJEMPLO 5 Se obtiene como en el Ejemplo 4, alterando de manera apropiada la secuencia de aminoácidos protegidos.

EJEMPLO 6 Giy-His-Arg- l¾-LeM A^- ys-Lys-A¾^ Se obtiene como en el Ejemplo 4, alterando de manera apropiada la secuencia de aminoácidos protegidos. Lo siguiente, se preparó como en el Ejemplo 1 : Gly<-His-A7g- rv>1te«A$p-Lys-L s-Arg^ c-Scr-O!y-GJy-Gly-Tyr-Arg-NH? G)y-^is-Arg-Pm-Ala-Asp*Ly Lys-Arg^ f Je-Ser -Gly-Gly-Oly-Tyr- Ajg-NH2 Gly-His-Arg-Pro-Leu-Asp-Arg-Lys^ Pro-nc-Ser-Gly-Gly-Gly-T>T-ATg-NH2 Gíy-Hi5 ? rg^ o-Leu-Ásp-Lys-Lys-Ajg-Ghi-Asp-Ala-Pro co-ijc-X-'s- GSv Gly-GIy- yr-Arg-NHj I!^Ser-Cly-01y-Gly-Tyr-Arg-NH2 G!y-His-A r£-ftx>-L&u-Asp-Lys-Lys-A^ Pro-Ilc-Scr-GJy^Gly-Gty yr-Aíg-NH?.

Pro-Ile-Ser-Gly-Gly-Gly-Tyr-ATg-NHj íle-.Ser-Gl -Gly-G]y-Tyr-Arg-NH2 Gly- His- Ar g-Pro-Len- Asp-Lys-Ly S- Arg-G!u-Gtu- A 1 a-P ro- Ser-Lcu-A rg-Pro- AJa-Pro-Pro-Pro - ) le- AJ a - Gly-Gly-Giy-'í Arg-N¾ Pro-lte-Ala-Ala-Q]y-Gly-Tyr-Arg- ¾ 01 y-H is- A Í g- Pro -lie- Asp -Lys- Arg- Arg-G lu-Gl u -AJa-Pro-Scr-Ut-Arg-Pro-Ala-Pro-Fro-PrO" !le-A)a~ 1 y- Gly- Gl y-Tyr- Arg-N¾ Lo siguiente, se preparó como en el Ejemplo 2: Gly-H'is-Arg-Pro-Iíe-A^p-^ Ile-Ser-Gly-GIy-Gly-Tyr-Arg-C^$^$-Sücciránjido-PECi2e )QH GJ y-I-i i s -Ar g-P ro-Leu- Asp-A rg- Lys- Arg- Gl u- G hi- Aln-Prc-S er-lcu-Arg-Pro - A la- Pro -Pro-IVo-Iit-Str-Gty-G]y~6ly-Tyr-Ai^^ !y-Hi^An^To-Le^^ Pro-He-Ser-Gly-GlY-Gly-Tyr-Aj-g-Cys^ Gly-H s-Arg-F o-Lou-As]^ ho )c-Ser-Gbf-Gly-GJyTyr-Arg^ Giy-H -Arg--Prc>I^ Pro-Ik-Ab-G{y.<31y-Gly.Tyr-Arg-Cy5-(S"Sücdn iiido«PE<¾(>K)OH rg-Pr(>Leu-Asp-Lys-Lyí-Arg-Glu-G!u-A]a-Pro-Sa--Lcu-Arg-P o- AIÍI-???-?? - Pn Jíe-S r.Gly-Giy^Gly-Tyr-Arg-CyS'(S-syccinirnidc PEGt«K)OH Gl -His rR-Pro-Leu-Asj^L s^ys^^ Pro-]fe-Scr"Gly.Gly-Gly-Tyr'Arg- y5-(S-s«cc imiÍO-.PBC¾o5)OH Gly-His-Arg-Pro-Leu-Asp-Lys-C-ys-A^ Lo siguiente se preparó como en el Ejemplo 3: Ile.-Sri.r- ni - l 'Gl -T r'Arg-C s-(S-sü( JwiiiDklo-P G2eK) amida Gly-His-Arg-Pro-Leu-Asp-Arg-Lys-A^^ Pro-He-Ser-Gl -Gly-GJy-Tyr-Arg-Cys-(S-succinjrai«io-PEQioK)arnida l -His-Arg^' o-Leu-Asp-Lya^^^ Pco-lle.- Ser -Gly-Gly- Q ly T-Arg-Cy5-(S-suc*Íniiiii<lü-PEG¾)K) amida Qy-Kis-Arg-Pro-Leu-A$p^ys^ PrCí-lle-Scr-Gij'-GIy-Gly-Tyr-Áxg-Cys- {S-5uocinirnído-PEGm'.)amida l -Kis-Ar -Pro-Lcu-Aí^ L $ L s*Ar^^ Prü-lle-Ak.Gi -G!y-Gly.Tyr-Arg-Cys S-succüiimito-PEG20K)amida Gl -Kií^Arg-- r0Íeu-A$ -L s ,ys-Arg-Gl^ Pro--Jle-Ser-Gly-Gly-Gly-Tyr-Arg-CyS'(S-succÍBÍmklo-PEGn) ) amida GSy ^í: Aig lr ^Lei^Asp-l. s-L s-Ar "Glü- Iu-Á]a- r Pro-}le-Ser-Gíy-Giy-Gly-Tyr-A g'Cys-(S-succi«iinido-PB¾oK) amida líc-Scr-G!y-Gly-GÍy yr-Arg-Cys-(S-succíramido-PEG29K)arnida EJEMPLO 7 El efecto biológico del compuesto del Ejemplo 1 se estableció en un modelo de neumonitis inducida por LPS. Ratones negros C57 se dividieron aleatoriamente en dos grupos de 6 animales cada uno, y se trataron como sigue: El grupo 1 recibió 100 ng/kg de LPS intranasalmente, inmediatamente después de la administración del LPS los ratones recibieron 4.8 mg/kg del agente del Ejemplo 1 (disuelto en 100 µ? de NaCI) i.p., una segunda dosis siguió 60 minutos después de la administración del LPS. El grupo 2 recibió 100 ng/kg de LPS intranasalmente, inmediatamente después de la administración del LPS los ratones recibieron 100 µ? de NaCI i.p., 60 minutos después de la administración del LPS los ratones de nuevo recibieron 100 µ? de NaCI i.p. 6 horas después de la aplicación del LPS todos los grupos se sometieron a un lavado broncoalveolar y se removieron los pulmones. A partir de los líquidos del lavado se determinó el número de neutrófilos (PMN). Los resultados arrojados, se muestran en la Figura 1.

EJEMPLO 8 El efecto biológico del compuesto del Ejemplo 3 se estableció en un modelo de infección con virus del dengue en ratones. Ratones machos BALB/c de 5 meses de edad se dividieron en 2 grupos. Todos los animales fueron infectados subcutáneamente con un virus del dengue adaptado para ratones (DEN-1 , cepa P23085, a una dosis de I-2 LD50. 15 ratones recibieron 0.1 mi de salina al 0.8% como inyección intramuscular (control). Los animales tratados recibieron 4.8 mg/kg/día del agente del Ejemplo 3 como una inyección intramuscular (diluida en 0.1 mi de salina al 0.8%) una vez al día durante 5 días, iniciando en el día 3 después de la infección con el virus. Al final del periodo de tratamiento (día 10) se compararon las tasas de supervivencia. Se obtuvieron los siguientes resultados: EJEMPLO 9 Gly-His~Arg-J''ro-Lcu-Asp-Ly$^ Pr» ie-Ser }|y-G]y~Gly^ La síntesis del péptido monomérico se realiza de manera análoga al Ejemplo 1 , usando Tentagel (Rapp Polymere) como resina de soporte, aquí con FMOC-Cys(Trt) como el primer aminoácido. Enseguida del desdoblamiento y la purificación del péptido se realiza la reacción con un exceso adecuado de Br-CH2-CO-NH-PEG2oK- En seguida de la recuperación de realiza la purificación sobre Kromasil RP-18, y se confirma la identidad del producto mediante MALDI-MS.

EJEMPLO 10 Gly-Kis Ar£-Pra~Lett%A.sp-Ly$-L^^ Pro líe-¾r--Gly.í}1y-^ 100 mg de Tentagel-S-RAM (Rapp Polymere) a una carga de 0.24 mmoles/g fueron transferidos a un dispositivo de síntesis de péptido comercialmente disponible (PSMM(Shimadzu)) donde la secuencia péptida es construida paso a paso de conformidad con el método de carbodiimida/HOBt. Los derivados del FMOC-aminoácido son preactivados añadiendo un exceso equimolar de 5 veces de diisopropil carbodiimida (DIC), diisopropil-etilamina (DIPEA) e hidroxibenzotriazola (HOBt) y, enseguida de su transferencia al recipiente de reacción, se mezclan con el soporte de resina durante 30 minutos. Se realizan los pasos de lavado mediante 5 adiciones de 900 µ? de DMF y mezclando vigorosamente durante 1 minuto. Los pasos de desdoblamiento se realizan mediante la adición de 3 x 900 µ? de piperidina al 30% en DMF y agitando vigorosamente durante 4 minutos. La remoción de la reacción individual y las soluciones de lavado se efectúan forzando las soluciones a través de la frita del fondo del recipiente de reacción. Se emplearon los derivados de aminoácidos FMOC -Ala, FMOC-Arg(Pbf), FMOC-Asp, FMOC-Gly, FMOC-His(Trt), FMOC-lle, FMOC-Leu, FMOC-Lys(BOC), FMOC-Pro, FMOC-Ser(tBu), FMOC-Cys(Trt) y FMOC-Tyr(tBu) (Orpegen). Enseguida del desdoblamiento y la purificación del péptido se realiza la reacción con un exceso adecuado de Br-CH2-CO-NH-PEG20K- En seguida de la recuperación de realiza la purificación sobre Kromasil RP-18, y se confirma la identidad del producto mediante MALDI-MS.

EJEMPLO 11 Gl -Hi& .Pro»teü-As -Lys-^ 100 mg de Tentagel-S-RAM (Rapp Polymere) a una carga de 0.24 mmoles/g fueron transferidos a un dispositivo de síntesis de péptido comercialmente disponible (PSMM(Shimadzu)) donde la secuencia péptida es construida paso a paso de conformidad con el método de carbodiimida/HOBt. Los derivados del FMOC-aminoácido son preactivados añadiendo un exceso equimolar de 5 veces de diisopropil carbodiimida (DIC), diisopropil-etilamina (DI PEA) e hidroxibenzotriazola (HOBt) y, enseguida de su transferencia al recipiente de reacción, se mezclan con el soporte de resina durante 30 minutos. Se realizan los pasos de lavado mediante 5 adiciones de 900 µ? de DMF y mezclando vigorosamente durante 1 minuto. Los pasos de desdoblamiento se realizan mediante la adición de 3 x 900 µ? de piperidina al 30% en DMF y agitando vigorosamente durante 4 minutos.

La remoción de la reacción individual y las soluciones de lavado se efectúan forzando las soluciones a través de la frita del fondo del recipiente de reacción. Se emplearon los derivados de aminoácidos FMOC -Ala, FMOC-Arg(Pbf), FMOC-Asp, FMOC-Gly, FMOC-His(Trt), FMOC-lle, FMOC-Leu, FMOC-Lys(BOC), FMOC-Pro, FMOC-Ser(tBu), FMOC-Cys(Trt) y FMOC-Tyr(tBu) (Orpegen). Cuando la síntesis es completada, se seca la resina péptida. Subsecuentemente se separa la amida péptida mediante tratamiento con ácido trifluoroacético/TIS/EDT/agua (95:2:2:1 vol.) durante 2 horas a temperatura ambiente. Por medio de filtración, concentración de la solución y precipitación mediante la adición de dietiléter enfriado en hielo, se obtiene el producto crudo (75 mg) como un sólido. El péptido se purifica por RP-HPLC en Komasil RP-18 250-20. El péptido así obtenido se hace reaccionar con 0-(yodoacet¡l)-N-hidroxisuccinimida, seguida por amino-etil-oxi-PEG20K- Después de la recuperación, la purificación mediante cromatografía de gel y liofilización, se obtiene el producto puro, cuya identidad se confirma mediante MALDI-MS.

EJEMPL0 12 Se obtiene como en el Ejemplo 11, alterando apropiadamente la secuencia de aminoácidos protegidos.

Lo siguiente, se produjo como en el Ejemplo 9: Gly-His-Arg-Pra-ílc-Asp-Lys^^ Ite-S^G!y-G!y-GSy-^ Gly-His-Arg-Pro-Leu-Asp-Arg-Lys^ Pr^I]C'Sc:"Gl 'G] -Gly-Tw-Arg-C KS-CH2-CO^PEGi^)OH ·...

Gly-His-Arg-Pra-LeivAsp-Lys^s^ Pro4!e-S r-Giy-Gl.y-Gly.Tyr-ATg-Cys--{S-CH CO->IH.PEG2e )OH Gly-Ki ^rg-Pro^xu-Asp-Lys-J^ Pro-ne-Sef-Giy-Gly-Gly Árg-Cys-'(S-C¾-CO-NH-PEG2os)OH Gly-Htf-Arg-Pro- u-Asp½s ,ys-Arg-G ^ Pro-Ile-Ala-Giy-Gly-Gty-Tyr-ATg-CyM^ : Gly-Hj^Ar^Pro-Leu-Asp-Lys-Lys-Arg-Glu-Glu-Ata^ Pro-Ila-$e-Gly-Gly-Gly-Tyr-Arg-C s--(S-C¾-CO- H-PEGieK)OH G I y-His- Arg-Pro - Leo-Asp-tys'-Lys- Arg-Gl 'Gíu-Aia-Pi^er-ll^-Áirg-Proi^¾^j^Proi- Pro^]e^cr"(}lv ily-GJY-T -Aig-CYS^(S.CHrCO-NH-PEG20K)OH I!c-Scr-GJ> Gíy-Gly yr-Aig-Cys-^S-CHi-CO- H-P Oaoj OH Lo siguiente, se produjo como en el Ejemplo 10: G) y-His-? r a-Pi o -lie- Asp-Ly s- Ly s-Arg- Glu-Oiu- Ala-Pio-S er-Leii- Arg-Pro- AI a-Pru-ProPro Ik-Ser-Gh-Gly-G]y-Tyí-Arg-Cys-(S^C¾^00-NH-PEG^K) amida Gly- His- Arg- Pro-Leu-Ásp-Arg-Lys-Aig-GIa-^^ Pro lfc^cr Oly-Gly-Giy^ G I y- His- A g · P ra- Leu- A sp-Lys-Lys-Arg-Ghi- Asp-Aia-Pro-Ser-Lcü-Arg-Pro-A) a -ProPro- r0*J)e'& 5iy«Gly-G1 ^ G I y-H is-A g-P ro-Leu - A sp-Lys-Lys-Aig-Glu-Gto-Ála -Pro- J a-Leu- Arg-Pro- A ) a-Pto-Pro- GW-His-A -g-Pro- u-Asp-Lys-Lys^ rie-ScT-Giy-G]y-Gly-Ty^Arg-CyHS-CH2-CO-NH-PEG¾ )amida

Claims (7)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1. Los péptidos y derivados de péptidos de la siguiente Fórmula general (I): H2 -OHRP | X2 3X X5 ¿X7 ÍP 9 «)X I iPX .jPPPXnXidXisXieGYR-Xp (I), en donde: X1 -X16 denotan uno de los 20 aminoácidos codificados genéticamente, Xu denota OR-i, con R1 = hidrógeno o alquilo de (C1 -C10), o NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno, alquilo de (CrCio), o un residuo de PEG5-6OK, donde el residuo de PEG está unido al átomo de N vía un separador, o un residuo NH-Y-Z-PEG5-6OK, donde Y denota un enlace químico o un aminoácido codificado genéticamente de entre el grupo de S, C, K o R, y Z denota un separador mediante el cual un residuo de polietileno glicol (PEG) puede ser enlazado, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos, o en donde: X15 o Xi6 denotan un aminoácido del grupo de C o K, que está enlazado con un residuo Z-PEG5-6OK a través del heteroátomo en la cadena lateral, y en donde Xi7 denota OR1 , con R1 = hidrógeno o alquilo de (C1 -C10), o NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de (C1 -C10), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos, con la condición de que el fragmento de fibrina Bbeta(15-42) con R<¡ = hidrógeno, sea excluido.

2. Los péptidos y derivados de péptido de la Fórmula general I, en donde: Xi , X9, Xi0l Xi4 denotan L, I, S, M, o A, X2, X6, X7 denotan E o D, X3, X4, X5, X11 denotan R o K, X8, X12 denotan A, G, S o L, X13 denota I, L o V, y en donde X15, X16 y X17 tienen el mismo significado que en la reivindicación 1 , así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos, con la condición de que el fragmento de fibrina Bbeta(15-42) con R-\ = hidrógeno, sea excluido.

3. Los péptidos y derivados de péptido de la Fórmula II, HzN-GHW ^DKKREEAPSLRPAPPPlSGGGYR- Xn (?), en donde X17 tiene el significado que se da para la Fórmula I en la reivindicación 1 , así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos, con la condición de que el fragmento de fibrina Bbeta( 15-42) con R = hidrógeno, sea excluido.

4. Los péptidos y derivados de péptido de la Fórmula II, en donde: X 7 denota NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de (C Cio), o un residuo C(NR2R3)-(S-succinimido)-(PEG5-4OK), estando el residuo de succinimida enlazado con el átomo de azufre del residuo de cisteína vía el átomo 3 de C, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos.

5. Los derivados de péptido de la Fórmula (III), H2N-G!-n PLDKKREEAPSLRPAFPP]S-Xi9-X2r ¾rYR-X i 7 (W) en donde dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo C(S-succinimido)-(PEG5.40K), estando el residuo succinimido enlazado con el átomo de azufre de la cisteína vía el átomo 3 de C, y en donde ??7 denota NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno o alquilo de (C1 -C10), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos.

6. El derivado péptido de la Fórmula (I I I), H2N-GHRPLD K.REEAPSLRPAPPPlS-X , X2 X21-YR-X.7 (III) en donde dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo K-(PEG5-4OK), estando el residuo de PEG enlazado vía el átomo de nitrógeno en la cadena lateral del residuo de lisina, y donde X 7 denota NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y denotando hidrógeno o alquilo de (CrC 0), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos.

7. Una composición de fármaco farmacéutico, que contiene un péptido o derivado de péptido de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.