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METABOLITOS PARA ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR NEUROKININA 1 (NK-l)PARA EMESIS Descripción de la invención La presente invención se refiere a los compuestos de fórmula general
donde R es el grupo metilo; y R1 es 4-metil-4-oxi-piperazin-l-ilo; o bien R es el grupo CH2OH y R1 es 4-metil-piperazin-l-ilo o bien 4-metil-4-oxi-piperazin-1-ilo; y se refiere a las sales de adición acida derivadas de los mismos, tolerables desde el punto de vista farmacéutico. Los compuestos de fórmula I y sus sales se caracterizan por tener unas propiedades terapéuticas valiosas. Sorprendentemente, se ha descubierto que los compuestos de la presente invención son antagonistas del receptor Neurokinina 1(NK-1, sustancia P) . La sustancia P es un undecapéptido de origen natural que pertenece a la familia de péptidos de la taquikinina, llamados de este modo debido a su repentina acción contráctil en el tejido muscular liso extravascular.
Ref. : 186034
El receptor de la sustancia P es un miembro de la superfamilia de receptores acoplados a la proteína G. El receptor neuropeptídico de la sustancia P (NK-1) se encuentra ampliamente distribuido por todo el sistema nervioso de los mamíferos (especialmente el cerebro y los ganglios espinales), el sistema circulatorio y los tejidos periféricos (en particular el duodeno y el yeyuno) y está implicado en la regulación de una serie de procesos biológicos . Las acciones centrales y periféricas de la sustancia P de la taquikinina de los mamíferos se han asociado a numerosos estados inflamatorios que incluyen migrañas, artritis reumatoide, asma y la enfermedad intestinal inflamatoria así como la mediación del reflejo emético y la modulación de los trastornos del sistema nervioso central (SNC) como la enfermedad de Parkinson (Neurosci .Res ., 1996, 7, 187-214), ansiedad (Can. J. Phys ., 1997 , 75, 612-621) y la depresión (Science, 1998, 281, 1640-1645). La prueba de la utilidad de los antagonistas del receptor de taquikinina en el dolor, la cefalalgia, especialmente la migraña, la enfermedad de Alzheimer, la esclerosis múltiple, la atenuación de la retirada de la morfina, los cambios cardiovasculares, edemas, edema causado por una lesión térmica, enfermedades inflamatorias crónicas como la artritis reumatoide, asma /hiperreactividad bronquial
y otras enfermedades respiratorias que incluyen la rinitis alérgica, las enfermedades inflamatorias del aparato digestivo que incluyen la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn, lesiones oculares y enfermedades inflamatorias oculares revisadas en "Tachykinin Receptor y Tachykinin Receptor Antagonists" , J. Auton. Pharmacol., 13, 23-93, 1993. Además, los antagonistas del receptor Neurokinina 1 están siendo desarrollados para el tratamiento de una serie de trastornos fisiológicos asociados a un exceso o desequilibrio de taquikinina, en particular de sustancia P. Los ejemplos de los estados en los cuales la sustancia P se ha visto implicada incluyen trastornos del sistema nervioso central como ansiedad, depresión y psicosis (WO 95/16679, WO 95/18124 y WO 95/23798) . Los antagonistas del receptor Neurokinina-1 son además útiles para el tratamiento del mareo o cinetosis y para el tratamiento de vómitos inducidos. Además, en el New England Journal of Medicine, Vol. 340, n°3 190-195, 1999 se ha descrito la reducción de la emesis o vómitos inducidos por la cisplatina mediante un antagonista selectivo del receptor Neurokinina- 1. Adicionalmente, la US 5,972,938 describe un método para tratar un trastorno psicoinmunológico o psicosomático mediante la administración de un receptor de taquikinina, como el antagonista del receptor NK-1.
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Las indicaciones más preferidas de acuerdo con la presente invención son aquellas que incluyen trastornos del sistema nervioso central, por ejemplo, el tratamiento o la prevención de ciertos trastornos depresivos o bien vómitos por la administración de antagonistas del receptor NK-1. Un episodio depresivo importante se ha definido como un periodo de al menos dos semanas durante las cuales, la mayor parte del día y casi todos los días, existe un humor depresivo o una pérdida de interés o de placer por todo o en casi todas las actividades. Los objetivos de la presente invención son los compuestos de fórmula I, que incluyen
2- (3, 5-bis-trifluorometil-fenil) -N-metil-N- [6- (4-metil-4-oxi-piperazin-l-ilo) -4-o-tolil-piridin-3-ilo] -isobutiramida (compuesto 1-1) 2- (3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N- [4- (2-hidroximetil-fenil) -6- (4-metil-piperazin-l-ilo) -piridin-3-ilo] -N-metil-
- isobutiramida (compuesto 1-2) y 2- (3, 5-dimetil-fenil) -N- [4- (2-hidroximetil-fenil) -6- (4-metil-4-oxi-piperazin-l-ilo) -piridin-3-ilo] -N-metil-isobutiramida (1-3), y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, la preparación de los compuestos anteriormente mencionados, los medicamentos que los contienen y su fabricación así como el uso de los compuestos anteriormente mencionados en el control o la prevención de enfermedades, en particular de enfermedades y trastornos de la clase mencionada antes o en la fabricación de los correspondientes medicamentos. Los más preferidos son los compuestos de fórmulas 1-1 y 1-2. Se ha demostrado que estos compuestos tienen una solubilidad mejorada con respecto a compuestos similares, descritos en EP 1 035 115 Al o bien EP 1 103 545 Al. Estos compuestos de fórmula I y sus sales farmacéuticamente aceptables pueden ser preparados según métodos ya conocidos, por ejemplo, según los procesos descritos a continuación, en los que el proceso comprende a) reacción de un compuesto de fórmula
- - con OXONE® [ (peroximonosulfato potásico) 2KHS05'KHSO4'K2S04] para tener un compuesto de fórmula
b) reacción de un compuesto de fórmula
con NaBH4 para tener un compuesto de fórmula
y si se desea, la conversión del compuesto obtenido en una sal de adición acida farmacéuticamente aceptable. El término "sales de adición acida farmacéuticamente aceptaqbles" incluye sales con ácidos inorgánicos y
- orgánicos, como el ácido clorhídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido acético, ácido succínico, ácido tartárico, ácido metanosulfónico, ácido p-toluensulfónico y similares. La formación de sales se efectúa a temperatura ambiente de acuerdo con los métodos que se conocen de por sí y que son familiares a cualquier persona experimentada en la materia. No solamente se tienen en cuenta sales con ácidos inorgánicos, sino también sales con ácidos orgánicos. Clorhidratos, bromhidratos , sulfatos, nitratos, citratos, acetatos, maleatos, succinatos, metano-sulfonatos, p-toluensul f onatos y similares son ejemplos de las sales . Los esquemas de reacción siguientes 1 y 2 describen el proceso para la preparación de compuestos de fórmula I con más detalle. Los materiales de partida de las fórmulas IV y II son compuestos conocidos y se pueden preparar según los métodos conocidos en la actualidad. En los esquemas de reacción se han utilizado las siguientes abreviaciones: DIPEA N-etildiisopropilamina KHMDS Hexametildisilazida potásico
Esquema de reacción 1
Una mezcla de N- [4-iodo-6- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -2, 2-dimetil-propionamida (síntesis descrita en DE10008042) en ácido clorhídrico se agita durante unas 18 h a 100°C. Después de enfriar a 0°C la mezcla de reacción se purifica y se seca de forma convencional. Luego a una suspensión de 4-yodo-6- ( 4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-ilamina y N, N-diisopropiletilamina en diclorometano se añade cloruro de 2- ( 3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -2-metil-propionilo a 0°C. La mezcla de reacción se agita durante unas 2 h a temperatura ambiente y se mantiene 2h a reflujo. Después de
- - enfriar a temperatura ambiente la mezcla de reacción se lava y se seca y se añade una solución de 2- (3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N- [4-yodo-6- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -isobutiramida en N, N-dimetilformamida a 0°C a una solución de bis (trimetilsilil) amida potásico en tetrahidrofurano. Después de agitar a 0°C se añade yodometano. La mezcla se agita durante 2 días en un frasco cerrado. La mezcla de reacción se concentra y purifica. Esquema de reacción 2
A una solución de 2- ( 3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N-metil-N- [6- ( -metil-piperazin-l-il) -4-o-tolil-piridin-3-il] -isobutiramida (síntesis descrita en DE10008042) y bicarbonato sódico en metanol y agua se añade una sal triple de monopersulfato sódico a temperatura ambiente. Después de agitar durante unas 6 h la mezcla de reacción se concentra y purifica . Tal como se ha mencionado previamente, los compuestos de fórmula I y sus sales de adición utilizables desde el punto de vista farmacéutico poseen unas propiedades farmacológicas valiosas. Se ha averiguado que los compuestos de la presente
invención son antagonistas del receptor Neurokinina 1 (NK-1, sustancia P) . Los compuestos se han investigado de acuerdo con las pruebas que se indican a continuación. La afinidad de los compuestos analizados por el receptor NKi se evaluaba en receptores humanos de NKX en células CHO infectadas con el receptor humano NKx (usando el sistema de expresión vírico Semliki) y se marcaba radiactivamente con la sustancia P [3H] (concentración final 0.6 nM) . Las pruebas de fijación se realizaban en el tampón HEPES (50 mM, pH 7.4) que contiene BSA(0.04%) de leupeptina (8 µg/ml), MnCl2(3mM) y fosforamidona (2µM) . Las pruebas de fijación consistían en 250 µl de suspensión de membrana (1.25xl05 células /tubo de ensayo), 0.125 µl de tampón de agente desplazante y 125 µl de suspensión de membrana (1.25 x 105 células /tubo de ensayo), 0.125 µl de tampón de agente desplazante y 125 µl de sustancia P(3H) . Las curvas de desplazamiento se determinaban con un mínimo de siete concentraciones del compuesto. Los tubos de ensayo se incubaban durante 60 minutos a temperatura ambiente, después de lo cual el contenido del tubo se filtraba rápidamente al vacío a través de filtros GF/C previamente impregnados durante 60 minutos con PEÍ (0.3%) con 2 lavados de 2 ml cada uno de tampón HEPES (50 mM, pH 7.4) . La radiactividad retenida en los filtros se medía mediante el recuento por escintilación. Todas las pruebas se realizaban
- por triplicado en como mínimo dos experimentos distintos. La afinidad al receptor NK-1, indicada como pKi se describe en la tabla siguiente: 2- (3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N-metil-N- [6- (4-metil- 9.0 4-oxi-piperazin-l-il) -4-o-tolil-piridin-3-il] - isobutiramida (compuesto 1-1) 2- (3, 5-bis-trifluorometil-fenil) -N- [4- (2-hidroximetil- 9.1 fenil) -ß- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -N- metil-isobutiramida (compuesto 1-2)
Además de su buena afinidad hacia el receptor NK-1, se ha demostrado que los compuestos de fórmulas I-1 e 1-2 presentan ventajas en sus propiedades farmacéuticas. Por ejemplo, el compuesto de fórmula 1-2 muestra una muy buena solubilidad y permeabilidad si se compara con los compuestos relacionados con la estructura que se muestran en la versión anterior (EP 1 035 115) . Se obtienen los resultados siguientes: Solubilidad Descripción del método de la solubilidad en equi 1 ibr io Los valores de solubilidad en equilibrio se determinaban a un pH de 4.2 (tampón citrato 0.15M) . Una cantidad conocida de fármaco, generalmente de 1-2 mg, se añadía a 250 µl de tampón (tubos de vidrio) y
la suspensión resultante se agitaba durante 2h (21°C), después de 5 minutos de sonificación. El pH de la solución se revisaba y corregía si era necesario (en caso de corrección del pH, la solución se agitaba una vez más y se equilibraba) y después de 24 h se filtraba a través de un filtro de 0.65 µm. La solución filtrada se analizaba luego mediante HPLC para determinar la concentración de fármaco. En los casos en los que el fármaco se había disuelto por completo en el tampón, el valor de la solubilidad en equilibrio resultaba ser mayor que el valor determinado por HPLC y se informaba de ello. Las soluciones madre (~1 mg/ml) en DMSO se usaban en la preparación de una curva de calibración en el tampón indicado usando reactivos de HPLC. Resultados
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superior a a e compuesto compara o, que aparece eñ EP 035 115. Permeabilidad Descripción del método: La permeabilidad se ha investigado mediante la prueba PAMPA PSR4p, que se basa en microplacas de 96 pocilios. La permeabilidad se mide utilizando una construcción tipo sandwich. Una placa de filtración se reviste de fosfolípidos (membrana) y se coloca en una placa donante que contiene una solución tampón de fármaco. Finalmente, la placa de filtración se llena de una solución tampón (aceptante) . La concentración donante se mide en un inicio t (referencia) y
- se compara con la concentración donante y aceptante después de un cierto tiempo final t. El esquema de reacción siguiente se usa para la prueba
PAMPA PSR4p: Donante: Tampón MOPSO 0.05M a un pH 6.5 + 0.05% de ácido glicólico Membrana: 10% (p/v) lecitina de huevo +0.5% de colesterol
(p/v) en dodecano Aceptante: Tampón MOPSO 0.05M a pH 6.5 La manipulación líquida se lleva a cabo con un robot de pipeteado TECAN RSP150. El análisis de fármacos se basa en la espectroscopia UV. Todas las muestras son transferidas a placas UV de 96 pocilios. Un lector de placas UV SpectralMax se utiliza para recoger los espectros UV. Las etapas de pipeteado se pueden dividir en cuatro partes: 1. Dilución de las soluciones madre y filtración, 2.
Preparación del sandwich de referencia y de PAMPA PSR4p, 3.
Traspaso de las soluciones de aceptante a la placa UV, 4.
Transferencia de las soluciones donantes a la placa UV. La prueba PAMPA PSR4p contiene información acerca de la precipitación de muestras en los espectros UV de la solución tampón donante de la muestra; la lectura al principio de la prueba (t-inicio: referencia) y al final (t-final : donante, aceptante) permite la determinación de una distribución de muestras en donante, membrana y aceptante. Debido al conocido
- tiempo de permeación (t-final, t-inicio) se puede deducir una constante de permeación. La unidad de esta constante es 10" 6cm/s, lo que indica que es un valor cinético o en otras palabras la velocidad de permeación. Resultados
Puede decirse que la velocidad de permeación es tres veces superior a la del compuesto 1-2, si se compara con el compuesto correspondiente, lo que se indica en EP 1035 115. Además, la 2- ( 3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N-metil-N- [ 6- (4-metil-4-piperazin-l-il) -4-o-tolil-piridin-3-il] -isobutiramida (EP 1 035 115) tiene el potencial de producir fosfolipidosas (efecto tóxico) . Eso se debe al hecho de que este compuesto contiene un átomo de nitrógeno básico, que puede protonar en unas condiciones fisiológicas. La ventaja del actual compuesto de fórmula 1-1 es que el óxido de N es neutro y no tiene por tanto potencial para producir
fosfolipidosas (Halliwell WH, Cationic amphiphilic drug-induced phospholipidosis , Toxicologic pathology, 1997, 25(1), 53-60 y Lullmann H y cois., Lipidosis induced by amphiphilicationic drugs, Biochem. Pharmacol., 1978, 27, 1103-1108) . Adicionalmente, se ha demostrado que el óxido N (compuesto de fórmula 1-1) tiene una estabilidad metabólica superior in vitro en los microsomas, en comparación con la 2- (3 , 5-bis-trifluormetil-fenil) -N-metil-N- [6- (4 -metil-4-piperazin-1-il) -4 -o-tolil-piridin-3-il] -isobutiramida. Los compuestos de fórmula I así como sus sales de adición acida que se utilizan desde el punto de vista farmacéutico se pueden utilizar como medicamentos, por ejemplo, en forma de preparados farmacéuticos. Los preparados farmacéuticos se pueden administrar por vía oral, por ejemplo, en forma de comprimidos, comprimidos revestidos, grageas, cápsulas de gelatina duras y blandas, soluciones, emulsiones o suspensiones. Sin embargo, la administración puede ser realizada por vía rectal, por ejemplo, en forma de supositorios, o por vía parenteral, por ejemplo, en forma de soluciones inyectables. Los compuestos de fórmula I y sus sales de adición acida pueden ser tratados con excipientes farmacéuticamente inertes, orgánicos e inorgánicos para la producción de comprimidos, comprimidos revestidos, grageas y cápsulas de gelatina duras. La lactosa, el almidón o derivados de los
mismos, talco, ácido esteárico o sus sales etc pueden ser usados como tal excipientes, por ejemplo, para comprimidos, grageas y cápsulas de gelatina dura. Los excipientes adecuados para cápsulas de gelatina blandas son, por ejemplo, los aceites vegetales, las ceras, grasas, los polioles semisólidos y líquidos, etc. Los excipientes adecuados para la fabricación de soluciones y jarabes son, por ejemplo, el agua, los polioles, la sacarosa, el azúcar invertido, la glucosa, etc. Los excipientes adecuados para las soluciones inyectables son, por ejemplo, agua, alcoholes, polioles, glicerol, aceites vegetales, etc. Los excipientes adecuados para los supositorios son, por ejemplo, aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas, polioles semi-líquidos o líquidos, etc. Además, los preparados f rmacéuticos contienen conservantes, solubilizantes, estabilizadores, agentes humectantes, emulgentes, endulzantes, colorantes, aromatizantes, sales para modificar la presión osmótica, tampones, agentes de enmascarado o antioxidantes. Pueden contener también otras sustancias valiosas desde el punto de vista terapéutico. La dosis puede variar dentro de unos amplios límites y naturalmente se ajustará a los requisitos individuales en cada caso en particular. En general, en el caso de una
administración oral, una dosis diaria de unos 10 a 1000 mg por persona de un compuesto de fórmula general I sería apropiada, aunque el límite superior indicado puede ser también excedido siempre que sea necesario. Los siguientes ejemplos ilustran la presente invención sin limitarla. Todas las temperaturas se dan en grados Celsius . Ejemplo A Comprimidos de la composición siguiente se fabrican del modo habitual: mg/comprimido Sustancia activa 5 Lactosa 45 Almidón de maíz 15 Celulosa microcristalina 34 Estearato de magnesio 1 Peso del comprimido 100 Ejemplo B Se fabrican cápsulas de la composición siguiente : mg/cápsula Sustancia activa 10 Lactosa 155 Almidón de maíz 30 Talco 5 Peso del relleno de la cápsula 200
La sustancia activa, la lactosa y el almidón de maíz se mezclan en primer lugar en un mezclador y luego en una máquina trituradora. La mezcla se devuelve al mezclador, se añade talco y se mezcla todo de nuevo. La mezcla se introduce por medio de una máquina en cápsulas de gelatina dura. Ejemplo C Se fabrican supositorios de la siguiente composición: mg/sup. Sustancia activa 15 Masa de supositorio 1285 Total 1300 La masa de supositorio se mezcla en un recipiente de vidrio o de acero, se mezcla intensamente y se enfría a 45°C. Luego la sustancia activa en forma de polvo fino se añade a la mezcla y se agita hasta que se ha dispersado completamente. La mezcla se vierte en moldes de supositorio del tamaño apropiado, se deja enfriar, luego se retiran los supositorios de los moldes y en empaquetan individualmente en papel parafinado o lámina metálica.
Ejemplo 1 2- (3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N-metil-N- [6- (4-metil-4-oxi-piperazin-1-il) -4-o-tolil-piridin-3-il] -isobutiramida (compuesto 1-1)
A una solución de 2.00 g (3.46 mol) de 2-(3,5-bis-trifluor et il-fenil) -N-metil-N- [6- ( 4 -metil -piperazin-l-il) -4-o-tolil-piridin-3-il] -isobutiramida (síntesis descrita en DE10008042) y 610 mg (7.26 mmol) de cabonato hidrógeno sódico en 40 ml de metanol y 8 ml de agua se añadían 1.10 g (1.80 mmol) de sal triple de monopersulfato potásico a temperatura ambiente durante 15 minutos. Después de agitar durante 6 h a temperatura ambiente la mezcla de reacción se concentraba al vacío y se purificaba mediante cromatografía instantánea para dar 1.65 g
(80%) del compuesto del título en forma de cristales blancos . MS m/e (%) : 595 (M+H+, 100)
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Ejemplo 2 2- (3 , 5-Bis-trifluormetil-fenil) -N- [4- (2-hidroximetil-fenil) 6- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -N-metil-isobutiramida (compuesto 1-2)
4-yodo-6- ( 4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-ilamina (compuesto V) Una mezcla de 2.20 g (5.47 mmol) de N- [ 4-yodo-6- ( 4-metil -piperazin- 1-il ) -piridin-3-il] -2, 2 -dimetil-propionamida (síntesis descrita en DE10008042) en 50 ml de ácido clorhídrico 3N se agitaba durante 18 h a 100°C. Después de enfriarse a 0°C, la mezcla de reacción se lavaba dos veces con éter (50 ml ) . La fase acuosa se trataba con 50 ml de diclorometano y se alcalinizaba con una solución ÍM de carbonato sódico. Se separaba la fase orgánica y la fase acuosa se extraía cuatro veces con 50 ml de diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaban sobre sulfato sódico y se concentraban al vacío para dar 1.60 g (92%) del compuesto del título en forma de un sólido blanquecino. MS m/e (%) : 319 (M+H+, 100)
2- (3 , 5 -Bis-trifluormetil-fenil) -N- [4 -yodo- 6- (4 -metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -isobutiramida (compuesto VI) A una suspensión de 1.60 g (5.03 mmol) de 4-yodo-6-(4-metil-piperazin-1-il) -piridin-3-ilamina y 975 mg (7.54 mmol) de N,N-diisopropiletilamina en 16 ml de diclorometano se añadía gota a gota 1.76 g (5.53 mmol) de cloruro de 2- (3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -2-metil-propionilo a 0°C. La mezcla de reacción se agitaba durante 2 h a temperatura ambiente y 2 h a reflujo. Después de enfriar a temperatura ambiente se lavaba la mezcla de reacción con 20 ml de una solución de carbonato sódico acuoso 1 M y 20 ml de agua. Las capas orgánicas combinadas se secaban sobre sulfato sódico y se concentraban al vacío para dar 3.39 g (100%) del compuesto crudo del título en forma de aceite color pardo. MS m/e (%) : 601 (M+H+, 100) 2- (3 , 5-Bis-trifluormetil-fenil) -N- [4-yodo-6- (4-metil-piperazin-1-il) -piridin-3-il] -N-metil-isobutiramida (Compuesto VII) A una solución de 3.9g (5.15 mmol) de 2-(3,5-bis-trifluormetil-fenil) -N- [4-yodo-6- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -isobutiramida en 30 ml de N, N-dimetilformamida se añadían a 0°C 6.8 ml (6.2 mmol) de una solución 0.91M de bis (trimetilsilil) amida de potasio en tetrahidrofurano. Después de agitar a 0°C durante 40 min. se añadían 0.352 ml (5.66 mmol) de yodometano. La mezcla se agitaba durante 2
días en un frasco cerrado. La mezcla de reacción se concentraba al vacío y se purificaba mediante cromatografía instantánea para dar 980 mg(31%) del compuesto del título en forma de un aceite color pardo. MS m/e (%) : 615 (M+H+, 100) 2- (3, 5-Bis-trifluormetil-fenil) -N- [4- (2-formil-fenil) -6- (4-metil-piperazin-1-il) -piridin-3-il] -N-metil-isobutiramida (compuesto III) En una mezcla de 900 mg (1.47 mmol) de 2-(3,5-bis-trifluormetil-fenil) -N- [4-yodo-6- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -N-metilisobutiramida, 2.8 ml de una solución de carbonato sódico ÍM, 33 mg (0.15 mmol) de ácido 2-formilfenilborónico en 5 ml de dimetoxihexano se hacía el vacío y se llenaba con árgon y se agitaba durante 2h a 80 °C. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluía con 20 ml de acetato de etilo y se lavaba con 20 ml de salmuera. Las capas orgánicas combinadas se secaban sobre sulfato sódico, se concentraban y purificaban mediante cromatografía instantánea para dar 584 mg(67%) del compuesto del título en forma de un sólido de color marrón pálido. MS m/e(%) :593 (M+H+,100) 2- (3, 5 -Bis-trifluormetil-fenil) -N- [4- (2-hidroximetil-fenil) -6- (4-metil-piperazin-l-il) -piridin-3-il] -N-metil-isobutiramida (compuesto 1-2) A una mezcla de 15 mg (0.41 mmol) de borohidruro sódico
en 2ml de metanol se añadían a 0°C 200 mg (0.338 mmol) de 2- (3, 5-bis-trifluormetil-fenil) -N- [4- (2-formil-fenil) -6 (4-metil-piperazin-1-il) -piridin-3-il] -N-metil-isobutiramida. Después de agitar a 0°C durante lh se añadía 1 ml de salmuera a 0°C. La mezcla se agitaba durante 30 min. Se destilaba el metanol y el residuo se diluía con 20 ml de acetato de etilo y se lavaba con 20 ml de salmuera. La capa orgánica se secaba sobre sulfato sódico, se concentraba y purificaba mediante cromatografía instantánea para dar 137 mg (68%) del compuesto del título en forma de un sólido color marrón pálido. MS m/e(%) :595 (M+H+, 100) Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.