MD4467C1 - Procedeu de sinteză enzimatică a acidului (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic sau a esterilor săi şi aplicarea lor în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale - Google Patents

Procedeu de sinteză enzimatică a acidului (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic sau a esterilor săi şi aplicarea lor în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale Download PDF

Info

Publication number
MD4467C1
MD4467C1 MDA20130008A MD20130008A MD4467C1 MD 4467 C1 MD4467 C1 MD 4467C1 MD A20130008 A MDA20130008 A MD A20130008A MD 20130008 A MD20130008 A MD 20130008A MD 4467 C1 MD4467 C1 MD 4467C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
formula
compound
acid
ester
synthesis
Prior art date
Application number
MDA20130008A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD20130008A2 (ro
MD4467B1 (ro
Inventor
МОРО Сандрин ПЕДРАГОСА
Франсуа Лефулон
Original Assignee
Les Laboratoires Servier
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Les Laboratoires Servier filed Critical Les Laboratoires Servier
Publication of MD20130008A2 publication Critical patent/MD20130008A2/ro
Publication of MD4467B1 publication Critical patent/MD4467B1/ro
Publication of MD4467C1 publication Critical patent/MD4467C1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C213/00—Preparation of compounds containing amino and hydroxy, amino and etherified hydroxy or amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C213/02—Preparation of compounds containing amino and hydroxy, amino and etherified hydroxy or amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton by reactions involving the formation of amino groups from compounds containing hydroxy groups or etherified or esterified hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/02—Preparation of carboxylic acid amides from carboxylic acids or from esters, anhydrides, or halides thereof by reaction with ammonia or amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
    • C07C51/08—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides from nitriles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C61/00—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C07C61/04—Saturated compounds having a carboxyl group bound to a three or four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/08—Preparation of carboxylic acid esters by reacting carboxylic acids or symmetrical anhydrides with the hydroxy or O-metal group of organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/001—Amines; Imines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/06—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being four-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
    • C12Y301/01—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/52—Improvements relating to the production of bulk chemicals using catalysts, e.g. selective catalysts

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Prezenta invenţie se referă la un procedeu de sinteză enzimatică a compusului cu formula (I):unde R1 reprezintă un atom de hidrogen sau o grupă alchil C1-C6, de preferinţă metil, precum şi la aplicarea acestuia în sinteza ivabradinei (3-{3-[{[(7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il]metil}(metil)amino]propil}-7,8-dimetoxi-1,3,4,5-tetrahidro-2H-3-benzazepin-2-ona) cu formula (II):a sărurilor sale de adiţie cu acizi farmaceutic acceptabili şi a hidraţilor acestora.Utilizarea lipazelor Pseudomonas fluorescens şi Candida antarctica permite obţinerea compuşilor chirali - principalii intermediari în sinteza ingredientelor farmaceutic active - în excese enantiomerice înalte şi randamente bune.

Description

Prezenta invenţie se referă la un procedeu de sinteză enzimatică a compusului cu formula (I):
unde R1 reprezintă un atom de hidrogen sau o grupă alchil C1-C6, de preferinţă metil, precum şi la aplicarea acestuia în sinteza ivabradinei cu formula (II):
sau 3-{3-[{[(7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il]metil}(metil)amino]propil}-7,8-dimetoxi-1,3,4,5-tetrahidro-2H-3-benzazepină-2-onă,
a sărurilor sale de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, şi a hidraţilor acestora.
Ivabradina, precum şi sărurile sale de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, şi îndeosebi clorhidratul său, posedă proprietăţi farmacologice şi terapeutice foarte valoroase, în special proprietăţi bradicardice, ceea ce face ca aceşti compuşi să fie utili în tratamentul sau prevenirea diverselor situaţii clinice de ischemie miocardică cum este angina pectorală, infarctul miocardic şi tulburările asociate ale ritmului, precum şi în diverse patologii ce se referă la tulburări ale ritmului, în special supraventriculare, şi în cazuri de insuficienţă cardiacă.
Prepararea şi utilizarea terapeutică a ivabradinei şi a sărurilor sale de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, şi îndeosebi a clorhidratului său, au fost descrise în brevetul european EP 0 534 859.
Brevetul respectiv descrie sinteza clorhidratului de ivabradină pornind de la compusul cu formula (III), (7S)-1-(3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il) N-metil metanamină:
Compusul cu formula (III) este un intermediar esenţial în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale acceptabile farmaceutic.
Stadiul cunoscut al tehnicii prezintă mai multe procedee de obţinere a compusului cu formula (III).
Brevetul EP 0 534 859 descrie sinteza compusului cu formula (III) prin reducerea nitrilului racemic cu formula (IV):
prin BH3 în tetrahidrofuran,
urmată de adăugarea acidului clorhidric, pentru a obţine clorhidratul de amină racemică cu formula (V):
care este supus reacţiei cu cloroformiatul de etil pentru a obţine carbamatul cu formula (VI):
reducerea căruia, prin LiAlH4, conduce la obţinerea aminei metilate racemice cu formula (VII):
descompunerea căreia cu ajutorul acidului camforsulfonic conduce la obţinerea compusului cu formula (III).
Dezavantajul acestei metode constă în faptul că duce la obţinerea compusului cu formula (III) într-un randament foarte redus, de 2-3 %, pornind de la nitrilul racemic cu formula (IV).
Acest randament foarte redus este determinat de randamentul redus (4-5 %) al etapei de descompunere a aminei secundare cu formula (VII).
Brevetul EP 1 598 333 descrie obţinerea compusului cu formula (III) prin descompunerea aminei primare racemice cu formula (V) în amina optic activă cu formula (VIII):
cu ajutorul acidului N-acetil-L-glutamic,
urmată de metilare prin utilizarea aceleiaşi succesiuni de reacţii descrisă mai sus (transformarea în carbamat, urmată de reducere).
Randamentul etapei de descompunere este de 39%.
Brevetul EP 2 166 004 descrie obţinerea compusului cu formula (III) prin descompunerea optică a nitrilului racemic cu formula (IV) prin cromatografie chirală pentru a obţine nitrilul optic pur cu formula (IX):
care este redus prin NaBH4 pentru a obţine amina primară cu formula (VIII), care ulterior este metilată prin utilizarea aceleaşi succesiuni de reacţii descrisă mai sus (transformarea în carbamat, urmată de reducere).
Randamentul etapei de descompunere este de 45 %.
Problema prezentei invenţii a fost de a obţine compusul cu formula (III) utilizând un procedeu eficient, în special cu un randament bun, îndeosebi la etapa de descompunere.
Utilizarea biocatalizei pentru a permite obţinerea moleculelor chirale pare să fie tot mai valoroasă ca alternativă pentru sinteza organică tradiţională. De fapt, utilizarea enzimelor cu proprietăţi naturale intrinseci, cum ar fi chimio-, regio- şi stereo-selectivitatea, permite utilizarea enzimelor ca reactivi în chimia verde, care este prietenoasă cu mediul înconjurător.
În cazul descris în prezenta, utilizarea enzimelor hidrolitice (hidrolaze), care funcţionează fără co-factori, cum sunt lipazele (EC 3.1.1.3 în clasificatorul internaţional al enzimelor) sau esterazele (EC 3.1.1.1), permite obţinerea compuşilor chirali - principalii intermediari în sinteza ingredientelor farmaceutice active - în excese enantiomerice înalte şi randamente bune.
Mai exact, prezenta invenţie se referă la un procedeu de sinteză a compusului optic pur cu formula (Ia):
prin esterificarea enzimatică enantioselectivă a acidului racemic sau a unui alt acid non optic pur cu formula (X):
cu ajutorul unei lipaze de Candida antarctica şi Pseudomonas fluorescens,
într-un amestec de alcool ROH, unde R este o grupă alchil C1-C6 liniară sau ramificată, şi un co-solvent organic,
într-o concentraţie cuprinsă între 5 şi 500 g/L, preferabil între 100 g şi 200 g de compus cu formula (X) la un litru de amestec de solvenţi,
într-un raport E/S de la 10/1 la 1/100, preferabil de la 1/5 la 1/10,
la o temperatură cuprinsă între 25°C şi 40°C.
Printre lipazele de Candida antarctica pot fi menţionate, de exemplu, lipazele imobilizate pe o matrice polimerică, în special pe răşină acrilică, cum este Novozym® 435 de la compania Novozymes sau SPRIN adsorbed CALB® de la compania Sprin Technologies, sau pe o răşină din polistiren, cum sunt SPRIN actiplus CALB®, SPRIN acti CALB® or SPRIN lipo CALB® de la compania Sprin Technologies, sau pe o răşină epoxy acrilică, cum este SPRIN epobond CALB® de la compania Sprin Technologies.
Alcoolul ROH este, de preferinţă, metanol sau etanol. Co-solvenţii sunt, de preferinţă, acetonitril, toluen, MTBE sau n-heptan. Raportul preferat co-solvent/alcool este de la 8/2 la 9/1.
Schema de esterificare enzimatică conform invenţiei este următoarea:
În mod avantajos, esterul cu configuraţia (R), produsul secundar al reacţiei, poate fi hidrolizat prin acţiunea unei baze, preferabil KOH, DBU, trietilamină, DABCO, TBD, etoxid de sodiu, metoxid de sodiu sau K2CO3, pentru a forma acid racemic cu formula (X) pentru a fi reciclat în procesul de esterificare enzimatică.
Dacă etapa de hidroliză/racemizare este realizată in situ, procedeul conform invenţiei este un proces de descompunere cinetică dinamică (DKR), care face posibilă obţinerea acidului S cu formula (Ia) într-un ee ≥ 98% şi un randament ≥ 65%.
Acidul cu formula (Ia) este, de preferinţă, izolat de amestecul reacţiei după unul sau câteva cicluri de esterificare enzimatică.
Un alt aspect al invenţiei se referă la procedeul de sinteză a compusului optic pur cu formula (Ib):
unde R este o grupă alchil C1-C6 liniară sau ramificată, preferabil metil sau etil,
prin hidroliza enzimatică enantioselectivă a esterului racemic sau a unui alt ester non optic pur, cu formula (XI):
unde R reprezintă o grupă alchil C1-C6 liniară sau ramificată,
prin utilizarea unei lipaze de Candida antarctica şi de Pseudomonas fluorescens, în apă, într-o soluţie tampon cu pH=5 până la 8 sau într-un amestec de solvent organic şi apă sau soluţie tampon cu pH=5 până la 8, într-o concentraţie de la 1 la 200 g/L, preferabil în jur de 100 g de compus cu formula (XI) la un litru de solvent sau amestec de solvenţi,
într-un raport E/S de la 10/1 până la 1/100, preferabil de la 1/5 până la 1/10,
la o temperatură cuprinsă între 25°C şi 40°C,
urmată de izolarea esterului cu formula (Ib).
Printre lipazele de Candida antarctica pot fi menţionate, în calitate de exemplu, lipazele imobilizate pe o matrice polimerică, în special pe răşină acrilică, cum sunt Novozym® 435 de la compania Novozymes sau SPRIN adsorbed CALB® de la compania Sprin Technologies, sau pe o răşină de polistiren, cum sunt SPRIN actiplus CALB®, SPRIN acti CALB® sau SPRIN lipo CALB® de la compania Sprin Technologies, sau o răşină epoxy acrilică, cum este SPRIN epobond CALB® de la compania Sprin Technologies.
Dacă reacţia este realizată în prezenţa unui solvent organic, acesta din urmă va fi, de preferinţă, acetonitril, toluen, MTBE sau n-heptane.
Raportul preferat - solvent organic/ apă sau soluţie tampon variază de la 8/2 la 9/1.
Schema de hidroliză enzimatică conform invenţiei este următoarea:
În mod avantajos, acidul cu configuraţie (R), produsul secundar al reacţiei, poate fi racemizat prin acţiunea unei baze, preferabil prin acţiunea KOH la cald, după care acidul racemic obţinut astfel poate fi alchilat în ester racemic cu formula (XI), pentru a fi reciclat în procesul de hidroliză enzimatică.
Alternativ, acidul cu configuraţia (R), produsul secundar al reacţiei, poate fi mai întâi alchilat şi ulterior esterul cu configuraţia (R) obţinut astfel poate fi racemizat prin acţiunea unei baze, preferabil prin acţiunea DBU, KOH, trietilamin, DABCO, TBD, etoxid de sodiu, metoxid de sodiu sau K2CO3, pentru a fi reciclat în procesul de hidroliză enzimatică.
Dacă racemizarea este realizată la cald, temperatura este cuprinsă, de preferinţă, între 50 şi 80°C.
Definiţii
Compus optic pur înseamnă un compus al cărui exces enantiomeric este mai mare sau egal cu 90%.
Acid sau ester care nu este pur din punct de vedere optic înseamnă un acid sau ester al cărui exces enantiomeric este mai mic de 90%.
Acid sau ester racemic înseamnă un acid sau ester în formă de amestec din doi enantiomeri în raport de la 55:45 până la 45:55.
Esterificarea enantioselectivă a unui acid racemic sau a unui alt acid non optic pur înseamnă esterificarea preferenţială a unuia dintre enantiomerii amestecului.
Hidroliza enantioselectivă a unui ester racemic sau a unui alt ester non optic pur înseamnă hidroliza preferenţială a unuia dintre enantiomerii amestecului.
Un alt aspect al invenţiei se referă la un procedeu de sinteză a compusului cu formula (III) pornind de la nitrilul cu formula (IV), care este hidrolizat pentru a forma acidul racemic cu formula (X), esterificarea enzimatică a căruia, conform invenţiei, duce la obţinerea acidului optic pur cu formula (Ia), care ulterior este transformat în amida optic pură cu formula (XII):
a cărei reducere, preferabil prin BH3, NaBH4 sau LiAlH4, duce la obţinerea compusului cu formula (III).
Un alt aspect al invenţiei se referă la un procedeu de sinteză a compusului cu formula (III) pornind de la nitrilul cu formula (IV), care este hidrolizat pentru a forma acid racemic cu formula (X), iar apoi este alchilat pentru a forma ester racemic cu formula (XI), a cărui hidroliză enzimatică, conform invenţiei, duce la obţinerea esterului optic pur cu formula (Ib), care este transformat în amida optic pură cu formula (XII):
a cărei reducere, preferabil prin BH3, NaBH4 sau LiAlH4, duce la obţinerea compusului cu formula (III).
Compusul cu formula (III) este ulterior fie cuplat cu un compus cu formula (XIII):
unde X reprezintă un atom de halogen, preferabil un atom de iod,
fie supus unei reacţii de aminare reductivă cu un compus cu formula (XIV) în prezenţa unui agent reductor:
unde R2 reprezintă o grupă selectată dintre CHO şi CHR3R4,
unde R3 şi R4 reprezintă fiecare o grupă alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată, sau formează împreună cu atomul de carbon care le poartă, un cilcu 1,3-dioxan, 1,3-dioxolan sau 1,3-dioxepan,
pentru a obţine ivabradină, care este ulterior transformată într-o sare de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, sarea respectivă fiind în formă anhidră sau de hidrat.
Compusul cu formula (III) poate fi utilizat, de asemenea, în reacţia de aminare reductivă, sub forma sării sale de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, de preferinţă clorhidratul său. În acest caz, ivabradina este obţinută direct în formă de clorhidrat.
Printre acizii acceptabili farmaceutic pot fi menţionaţi, fără a se limita la aceştia, acizii clorhidric, bromhidric, sulfuric, fosforic, acetic, trifluoroacetic, lactic, piruvic, malonic, succinic, glutaric, fumaric, tartaric, maleic, citric, ascorbic, oxalic, metan-sulfonic, benzensulfonic şi camforic.
Printre agenţii reductori care pot fi utilizaţi pentru reacţia de aminare reductivă între compusul cu formula (III) şi compusul cu formula (XIV) pot fi menţionaţi, fără a se limita la aceştia, compuşii donori de hidrură, cum sunt triacetoxiborohidrura de sodiu sau cianoborohidrura de sodiu şi hidrogenul în prezenţa unui catalizator cum este paladiul, platina, nichelul, ruteniul, rodiul sau a unui compus al acestora, în special pe un suport sau sub formă de oxizi.
Agentul reductor preferat pentru reacţia de aminare reductivă între compusul cu formula (III) şi compusul cu formula (XIV) este dihidrogenul catalizat cu paladiu pe carbon.
Exemplele de mai jos ilustrează invenţia.
Abrevieri
ATFA Acid TriFluoroAcetic CSS Cromatografie în Strat Subţire DABCO 1,4-DiAzaBiCiclo[2.2.2]Octan DBU DiazaBicicloUndecenă DKR Dynamic Kinetic Resolution (Descompunere cinetică dinamică) E Coeficientul de enantioselectivitate ee exces enantiomeric eq echivalent molar HPLC High Performance Liquid Chromatography (Cromatografie în fază lichidă de înaltă performanţă) MeOH Metanol MTBE Metil Tert-Butil Eter po puritate optică sau enantiomerică raportul E/S raportul Enzime/Substrat (g/g) RMN Rezonanţă magnetică nucleară (spectroscopie) SM Spectrometrie de masă TBD 1,5,7-TriazaBiciclo-[4.4.0]Dec-5-enă THF TetraHidroFuran TMS TetraMetilSilan
EXEMPLUL 1: Acid 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic
Se suspendă 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carbonitril (11 g, 58,1 mmol) într-o soluţie de hidroxid de sodiu 1N (70 mL) şi se încălzeşte amestecul reacţiei la reflux (110°C) timp de 2 ore.
Se lasă să revină la temperatura mediului ambiant şi apoi se acidifică amestecul cu acid clorhidric concentrat. Se observă precipitarea.
Se dizolvă produsul în 200 mL de diclorometan şi apoi se extrage faza apoasă. Se usucă pe MgSO4 şi se evaporă pentru a obţine produsul din titlu (11,6 g) la un randament de 95,9%.
EXEMPLUL 2: (7S)- Acid 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic
0,5 g (c = 200 g/L) de acid racemic obţinut în Exemplul 1 este dizolvat în 2,5 mL de amestec de acetonitril/metanol în proporţie de 8/2.
Ulterior 0,1 g (c = 40 g/L) de lipază de Candida antarctica NOVOZYM 435® (Novozymes Denmark) se adaugă la amestec (raport E/S - 1/5). Amestecul reacţiei este menţinut la temperatura de 30°C, agitându-se rotativ la 220 rpm, timp de 48 ore.
Reacţia este controlată prin faza chirală HPLC, în condiţii care permit determinarea exceselor enantiomerice ale esterului şi ale acidului:
coloana Chiralpak® IC 250* 4,6
30 % etanol absolut + 0,1 % ATFA + 70 % heptan + 0,1 % ATFA
1ml/min, 25°C, 288 nm
% acid % ester Ee (%) Acid (S) Ee (%) Ester (R) E 18 ore 59 41 66 > 99 77 24 ore 55 45 78 > 99 100 48 ore 51 49 97 > 98 890
Cromatogramele HPLC în faza chirală ale compuşilor racemici şi ale produsului după 48 de ore sunt prezentate în Figurile 1 şi 2.
După 48 de ore se observă prezenţa esterului şi a acidului optic puri într-un raport optim acid/ester de aproximativ 50/50. Amestecul reacţiei este filtrat, enzima este spălată cu 5 mL de metanol, după care filtratul este evaporat în vid. Acidul S şi esterul R optic puri sunt separaţi prin cromatografie pe o coloană de silice (eluant: diclorometan/metanol 98/1).
Acid (S): 0,22 g (44 %); puritate optică > 96 %; [α]20 D la 589 nm: +57,1° (5 mg/ml în MeOH)
Ester (R): 0,24 g; puritate optică > 96%; [α]20 D la 589 nm: - 62,7° (5 mg/ml în MeOH)
Randament global (S + R): 92%.
EXEMPLUL 3: 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil
Se suspendă (7R)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilatul de metil (445 mg) (ee > 96%) în izopropanol (2,5 mL) şi se adaugă diazabicicloundecenă (58 µl - 1,5 eq).
Amestecul reacţiei se încălzeşte la temperatura de 65°C timp de 2 ore. Racemizarea completă se observă după două ore de reacţie a esterului.
Condiţiile analizei:
coloana Chiralpak® IC 250* 4,6
30% etanol absolut + 0,1% ATFA + 70% heptan + 0, 1% ATFA
1ml/min, 25°C, 288 nm
EXEMPLUL 4: Acid 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic
Se suspendă (7R)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil (50 mg) (ee > 96%) în metanol (1 mL) şi se adaugă hidroxid de potasiu (56,1) (25 mg - 2 eq).
Se încălzeşte amestecul reacţiei la temperatura de 65°C timp de 6 ore. Se observă hidroliza esterului în acid racemic.
Condiţiile analizei:
coloana Chiralpak® IC 250* 4,6
30% etanol absolut + 0,1% ATFA + 70% heptan + 0,1% ATFA
1ml/min, 25°C, 288 nm
EXEMPLUL 5: (7S)-Acid 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic
2 g (c = 200 g/L) de acid racemic 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic se dizolvă în 20 ml de amestec de acetonitril/metanol (9/1).
Apoi la amestec se adaugă 0,4 g (c = 20 g/L) de lipază de Candida antarctica SPRIN actiplus CALB® (Sprin Technologies). Amestecul reacţiei se păstrează la temperatura de 30°C, agitându-se rotativ la 220 rpm timp de 24 ore. Enzima este filtrată şi apoi spălată cu metanol. Ulterior la amestec (filtrat) se adaugă 0,5 g de KOH (2 eq) şi se continuă agitarea timp de 6 ore la temperatura de 30°C. Ulterior amestecul este evaporat în vid. Aceasta permite racemizarea completă şi hidroliza esterului R fără racemizarea acidului S. Reziduul este extras cu acetat de etil şi apoi spălat cu soluţie de acid citric de 10%. Extracţia cu acetat de etil nefiind suficientă, acidul hidrosolubil este re-extras cu soluţie de butan-1-ol. Extractele sunt uscate pe MgSO4 pentru a obţine, după evaporare, 1,9 g de acid în raport de 75:25 (S:R). Acest acid îmbogăţit enantiomeric este utilizat într-o a doua reacţie enzimatică în prezenţa a 0,2 g de lipază. După 24 de ore la temperatura de 30°C, enizma este filtrată şi apoi spălată cu metanol.
După evaporare, reziduul este cromatografiat pe o coloană de silice (eluant CH2Cl2/MeOH de la 99/1 la 99/2) pentru a obţine următoarele produse:
Acid (S): 1,33 g; po > 96%; randamentul acidului (teoretic 75%): 67%
Ester (R): 0,42 g; po > 96%; randamentul esterului (teoretic 25%): 21%
Randamentul global al reacţiei este ~88 %.
Descrierea RMN şi SM a acidului
1H RMN (DMSO-d6, ppm / TMS): 3,17 (dd; 1H; 13,6Hz; 2,4Hz); 3,27 (dd; 1H; 13,6Hz; 5,3Hz); 4,13 (dd; 1H); 3,71 (s;3H); 6,78 (s; 1H); 6,80 (s; 1H); 12,40 (s; 1H).
SM (EI+) Ion molecular M+ la m/z 208.
Descrierea RMN şi SM a esterului
1H RMN (DMSO-d6, ppm / TMS) = 3,19 (dd; 1H; 13,6Hz; 2,4 Hz); 3,33 (dd; 1H; 13,6Hz; 5,5Hz); 3,65 (s; 3H); 3,71 (s; 6H); 4,23 (dd; 1H); 6,79 (s; 1H); 6,82 (s;1H).
SM (EI+) Ion molecular M+ la m/z 222.
Succesiunea reacţiilor este controlată prin HPLC în faza chirală, în condiţii ce permit determinarea excesului enantiomeric atât al esterului cât şi al acidului:
coloana Chiralpak® IC 250* 4,6
30% etanol absolut + 0,1% TFA + 70% heptan + 0,1% TFA
1ml/min, 25°C, 288 nm
EXEMPLUL 6: 3,4-Dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil
Se dizolvă acidul 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic (3 g - 14,4 mmol) în metanol şi se adaugă clorură de acetil (1,65 g - 21,1 mmol).
Se încălzeşte la reflux amestecul reacţiei timp de 2 ore. Analiza prin CSS (eluant: diclormetan) indică absenţa materialului iniţial al acidului racemic.
Se evaporă amestecul reacţiei, se extrage reziduul în acetat de etil şi se spală faza organică cu NaHCO3. Se evaporă până la uscare, şi se usucă pentru la obţinerea produsului din titlu într-un randament de 97 %.
EXEMPLUL 7: (7S)-3,4-Dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil
2 g (c = 100 g/L) de metil racemic 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat se dizolvă în 20 mL de amestec de 80/20 de acetonitril/tampon pH=7.
Apoi la amestec se adaugă 0,4 g (c = 20 g/L) de lipază de Candida antarctica NOVOZYM 435® (Novozymes Denmark) (raportul E/S - 1/5). Amestecul reacţiei se menţine la temperatura de 30°C, agitându-se rotativ la 230 rpm.
După 4 ore de reacţie (pH=5,8), pH-ul este ajustat la 7,2. După 24 ore, enzima este filtrată şi spălată prin agitare în metanol. Toţi filtraţii se colectează, se evaporează şi se liofilizează.
Liofilizatul este extras în acetat de etil, se agită timp de o noapte, după care amestecul reacţiei este filtrat iar filtratul este evaporat.
Reziduul este purificat pe o coloană de silice (eluant diclormetan/metanol) pentru a obţine 0,81 g de ester din titlu (7S), adică într-un randament de 41 %.
[α]20 D la 589nm: +64,7° (5 mg/ml în MeOH)
Fracţiunea care conţine acidul este extras în acetat de etil pentru a obţine 0,72 g de acid (7R), adică într-un randament de 36 % .
[α]20 D la 589 nm: -58.8° (5 mg/ml în MeOH)
EXEMPLUL 8: (7S) -3,4-Dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil
3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil racemic (1 mg; c = 1 g/L) se dizolvă în 1 mL de amestec de tampon fosfat pH=7/toluen în raport de 90/10.
Apoi la amestec se adaugă 5 mg (c = 5 g/L) de lipază din Pseudomonas fluorescens (raportul E/S - 5/1). Amestecul reacţiei se menţine la o temperatură de 28°C, cu agitare rotativă la 220 rpm timp de 48 ore.
Amestecul reacţiei este analizat prin HPLC în fază inversă, iar enantioselectivitatea (ee) esterului rezidual este controlat prin HPLC în fază chirală, în conformitate cu metodele descrise mai jos:
Condiţiile de analiză a amestecului de reacţie prin HPLC în fază inversă:
Kinetex® 2,6µm C18 50*2,1 , 40°C, 0,6ml/min 100 % A la 100 % B timp de 5minute.
A (1000 apă+25 ACN+1 ATFA)
B (1000 ACN+25 apă+1 ATFA)
Condiţiile de analiză a enantioselectivităţii prin HPLC în fază chirală:
coloana Chiralpak® IC 250* 4.6, 100% etanol absolut, 1ml/min, 25°C, 288 nm
Enantiomer Timp de retenţie (min) (7R) 7,19 (7S) 9,03
Analiza amestecului reacţiei arată o activitate hidrolitică bună (procentajul de ester rezidual: 25%).
Analiza enantioselectivităţii indică un ee de 90% pentru esterul (7S).
EXEMPLUL 9: Acid 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic
Se suspendă acidul (7R)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic (50 mg - ee > 95%) în metanol (1 mL) şi se adaugă hidroxid de potasiu (20 mg).
Amestecul reacţiei se încălzeşte la o temperatură de 65°C timp de 24 de ore. Se observă racemizarea completă a acidului.
Condiţii de analiză:
Coloana Chiralpak® IC 250* 4,6
30% etanol absolut + 0,1 % ATFA + 70% heptan + 0,1% ATFA
1ml/min, 25°C, 288nm
EXEMPLUL 10: (7S)-3,4-Dimetoxi-N-metilbiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxamidă
Se suspendă acidul (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic obţinut în Exemplul 5 (300 mg) în THF (3 mL) la temperatura mediului ambiant, apoi se adaugă trietilamină (200 µl). La acest amestec se adaugă lent cloroformat de etil (150 µL). Amestecul reacţiei se precipită (amestecul I).
Într-un alt flacon, metilamina, ca soluţie 2M în THF (2,25 mL) se amestecă cu apă (1 ml) şi trietilamină (300 µL). Se agită în continuu timp de 20 de minute, iar apoi amestecul rezultat se adaugă la amestecul I şi se agită la temperatura mediului ambiant, timp de o noapte.
Amestecul reacţiei este apoi evaporat şi purificat prin HPLC preparativă.
(7S)-3,4-Dimethoxi-N-metilbiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxamida este obţinută într-un randament de 60%.
1H RMN (DMSO-d6, ppm / TMS) = 2,61 (m; 3H); 3,16 (m; 2H); 3,71 (s; 6H); 4,05 (m; 1H); 6,78 (s; 1H); 6,81 (s; 1H); 7,78 (s; 1H).
EXEMPLUL 11: (7S)-3,4-Dimetoxi-N-metilbiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxamidă
Se suspendă (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil (500 mg) în apă şi apoi se adaugă lent, la temperatura mediului ambiant, 20 mL de soluţie de metilamină de 33% în etanol absolut.
După ce se agită timp de 3 ore, amestecul reacţiei este evaporat. Reziduul obţinut este purificat prin HPLC preparativă (eluant: apă/acetonitril/acid trifluoroacetic de la 98/2/0,2 la 20/80/0,2) timp de 30 de minute pentru a obţine produsul din titlu într-un randament de 70%.
EXEMPLUL 12: (7S)-3,4-Dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il]-N-metil-metanamină
Se suspendă (7S)-3,4-dimetoxi-N-metilbiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxamidă (450 mg) în tetrahidrofuran (20 mL) şi apoi la amestecul reacţiei se adaugă lent 1,6 mL de soluţie de LiAlH4 2M în tetrahidrofuran la temperatura mediului ambiant. Se observă o degajare puternică de gaze şi amestecul reacţiei devine limpede. Amestecul reacţiei se încălzeşte la reflux timp de 30 de minute.
După ce se readuce la temperatura mediului ambiant, se hidrolizează şi apoi se extrage prin acetatul de etil. Se usucă pe MgSO4 şi apoi se evaporă. Reziduul obţinut este purificat prin HPLC preparativă (eluant: apă/acetonitril/acid trifluoroacetic de la 98/2/0,2 la 20/80/0,2) timp de 30 de minute pentru a obţine produsul din titlu într-un randament de 46%.
1H RMN (DMSO-d6, ppm / TMS) = 2,60 (m; 3H); 2,85 (m; 1H); 3,15 (m; 1H); 3,25 (dd; 1H); 3,30 (m; 1H); 3,62 (m; 1H); 3,70 (s; 6H); 6,82 (s; 1H); 6,89 (s; 1H); 8,48 (s; 1H).
EXEMPLUL 13: (7S)-3,4-Dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il]-N-metil-metanamină clorhidrat
20 mL de soluţie molară de BH3 în tetrahidrofuran se adaugă la temperatura mediului ambiant la amestecul de 2,2 g (10 mmol) de (7S)-3,4-dimethoxi-N-metilbiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxamidă în 45 mL de tetrahidrofuran. După 1 oră de agitare, se adaugă 10 mL de soluţie de BH3 în tetrahidrofuran. După ce s-a agitat pe parcursul nopţii la temperatura mediului ambiant, se adaugă 20 mL de etanol în picături şi amestecul se agită până când nu se mai degajă gaz (aproximativ 1 oră). Apoi se adaugă 20 mL de soluţie de acid clorhidric în etanol în formă de picături. După ce se agită timp de 4 ore, precipitatul obţinut (1,2 g de produs din titlu) este filtrat. Filtratul este concentrat şi se obţin încă 0,65 g de produs din titlu, solidificându-l într-un amestec de acetat de etil/etanol în raport de 80/20.
Cele două precipitate sunt combinate pentru a se obţine 1,85 g de produs din titlu (randament: 77 %).
EXEMPLUL 14: Clorhidrat de ivabradină
Se introduc 5,5 kg de 3-[2-(1,3-dioxolan-2-il)etil]-7,8-dimethoxi-1,3-dihidro-2H-3-benzazepină-2-onă, 27,5 litri de etanol şi 550 g de paladiu pe carbon într-o autoclavă.
Se purjează cu azot şi apoi cu hidrogen, se încălzeşte până la 55°C apoi se hidrogenează la această temperatură sub o presiune de 5 bari, până la absorbţia cantităţii teoretice de hidrogen.
Apoi se readuce la temperatura mediului ambiant şi se reduce presiunea în autoclavă.
Ulterior se adaugă 4 kg de clorhidrat de (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-il]-N-metilmetanamină, 11 litri de etanol, 5,5 litri de apă şi 1 kg de paladiu pe carbon.
Se purjează cu azot şi apoi cu hidrogen, se încălzeşte până la temperatura de 85°C şi apoi se hidrogenează la această temperatură sub o presiune de 30 de bari, până la absorbţia cantităţii teoretice de hidrogen.
Apoi se readuce la temperatura mediului ambiant, se purjează autoclava şi apoi se filtrează amestecul reacţiei; se distilează solvenţii şi apoi se izolează clorhidratul de ivabradină prin cristalizare dintr-un amestec de toluen/1-metil-2-pirolidinonă.
Astfel clorhidratul de ivabradină este obţinut într-un randament de 85% şi cu o puritate chimică mai mare de 99%.
EXEMPLU comparativ: Screeningul lipazelor şi a esterazelor pentru hidroliza enzimatică a 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilatului de metil
Se dizolvă 3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilat de metil racemic (1 mg; c = 1 g/L) în 1 mL de amestec de tampon fosfat pH=7/toluen de 90/10.
5 mg (c = 5 g/L) de lipază sau esterază studiată se adaugă apoi la amestec (raport E/S - 5/1). Amestecul reacţiei se menţine la o temperatură de 28°C, cu agitare rotativă la 220 rpm timp de 48 de ore.
Amestecul reacţiei este analizat prin HPLC în fază inversă şi enantioselectivitatea (ee) esterului rezidual este controlată prin HPLC în fază chirală, conform metodelor descrise mai jos:
Condiţii de analiză a amestecului de reacţie prin HPLC în fază inversă:
Kinetex® 2.6µm C18 50*2.1, 40°C, 0.6 ml/min 100 % A la 100% B în 5minute
A (1000 apă+25 ACN+1 ATFA)
B (1000 ACN+25 apă+1 ATFA)
Condiţii de analiză a enantioselectivităţii prin HPLC în fază chirală:
Coloana Chiralpak® IC 250*4,6 100 % etanol absolut, 1 ml/min, 25°C, 288 nm
Enantiomer Timp de retenţie (min) (7R) 7,19 (7S) 9,03
Rezultatele sunt prezentate sumar în următorul tabel:
Lipază % ester % acid Ester Eea (%) Eb Lipază pancreatică de porc Tip II - 100 0 - Lipază PS (Pseudomonas cepacia) 55 45 34 (enantio S) 3 Lipază AY 30 (Candida rugosa) - 100 0 - Lipază FAP-15 (Rhizpous oryzae) 45 55 52 (enantio S) 4 Lipază A6 (Aspergillus niger) 76 24 68 (enantio R) 6 Lipază AH (Pseudomonas cepacia) 90 10 14 (enantio S) 8 Lipază M "Amano"10 (Mucor javanicus) 60 40 36 (enantio S) 5 Lipază din Aspergillus oryzae 78 22 64 (enantio S) 5 Lipază G "Amano" (Penicillium camemberti) 40 60 26 (enantio R) 2 Lipază AYS "Amano" (Candida rugosa) 60 40 4 (enantio R) 1 Lipază R "Amano" (Penicillium roqueforti) - 100 0 Esterază din ficat de porc - 100 0 Esterază din Rhizpous oryzae 40 60 50 (enantio S) 3 Esterază din Mucor miehei 79 21 45 (enantio S) 6 Esterază din ficat de cal - 100 0 Newlază F (Rhizpous niveus) - 100 0 - Lipază de Pseudomonas fluorescens 25 75 90 (enantio S) 6 Lipază B de Candida antarctica (Novozym® 435) 30 70 94 (enantio S) 9
a Exces enantiomeric ee (en %) = % enantioE2 - % enantioE1 / % enantio E2 + % enantio E1 (enantio E2 fiind enantiomerul predominant)
b Coeficient de enantioselectivitate E = ln[(1-c)(1-ee(S)] / ln[(1-c)(1+ee(S)]; c = nivelul de conversie = ee(ester) /ee(ester) + ee(acid)
Descrierea se publică în redacţia solicitantului şi în baza revendicărilor coordonate.
1. EP 534859 A1 1993-03-31
description example 2,3, STADE B, C, E;
2. EP1598333 A1 2005.11.23
3. EP2166004 A1 2010.03.24

Claims (22)

1. Procedeu de obţinere a compusului optic pur cu formula (Ia):
care cuprinde esterificarea enzimatică enantioselectivă a acidului racemic sau a unui alt acid non optic pur, cu formula (X):
cu ajutorul unei lipaze de Candida antarctica sau Pseudomonas fluorescens, într-un amestec de alcool ROH, unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, şi un cosolvent organic, într-o concentraţie cuprinsă între 5 şi 500 g de compus cu formula (X) pe litru de amestec de solvenţi, într-un raport E/S cuprins între 10/1 şi 1/100, la o temperatură cuprinsă între 25°C şi 40°C.
2. Procedeu conform revendicării 1, unde raportul E/S este cuprins între 1/5 şi 1/10.
3. Procedeu conform uneia dintre revendicările 1-2, unde alcoolul ROH este metanol, iar co-solventul este acetonitril.
4. Procedeu conform revendicării 3, unde raportul de acetonitril/metanol este cuprins între 8/2 şi 9/1.
5. Procedeu conform uneia dintre revendicările 1-4, unde esterul cu configuraţia (R), produsul secundar al reacţiei:
este hidrolizat prin acţiunea unei baze pentru a forma acidul racemic cu formula (X) cu scopul de a fi reciclat în procesul de esterificare enzimatică.
6. Procedeu conform revendicării 5, unde baza este KOH.
7. Procedeu conform uneia dintre revendicările 5 sau 6, unde etapa de hidroliză/racemizare este efectuată in situ.
8. Procedeu conform uneia dintre revendicările 1-7, unde acidul cu formula (Ia) este izolat după unul sau mai multe cicluri de esterificare enzimatică.
9. Procedeu de sinteză a compusului optic pur cu formula (Ib):
unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, care cuprinde hidroliza enzimatică enantioselectivă a esterului racemic sau a unui alt ester non optic pur, cu formula (XI):
unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, cu ajutorul unei lipaze de Candida antarctica sau Pseudomonas fluorescens, în apă, într-o soluţie tampon cu pH=5 până la 8 sau într-un amestec de solvent organic şi apă sau soluţie tampon cu pH=5 până la 8, într-o concentraţie cuprinsă între 1 şi 200 g de compus cu formula (XI) pe litru de solvent sau amestec de solvenţi, într-un raport E/S cuprins între 10/1 şi 1/100, la o temperatură cuprinsă între 25°C şi 40°C, urmată de izolarea esterului cu formula (Ib).
10.Procedeu de sinteză conform revendicării 9, unde raportul E/S este cuprins între 1/5 şi 1/10.
11.Procedeu de sinteză conform uneia dintre revendicările 9 - 10, unde R este o grupare metil.
12.Procedeu de sinteză conform uneia dintre revendicările 9 - 11, unde reacţia este realizată într-un amestec de acetonitril şi o soluţie tampon cu pH=7.
13. Procedeu de sinteză conform revendicării 12, unde raportul de acetonitril/tampon pH=7 este cuprins între 8/2 şi 9/1.
14. Procedeu de sinteză conform uneia dintre revendicările 9-13, unde acidul cu configuraţia (R):
produsul secundar al reacţiei, este racemizat prin acţiunea unei baze, după care acidul racemic astfel obţinut este alchilat pentru a forma ester racemic cu formula (XI), pentru a fi reciclat în procesul de hidroliză enzimatică.
15.Procedeu de sinteză conform revendicării 14, unde acidul cu configuraţia (R) este racemizat prin acţiunea KOH la cald.
16.Procedeu de sinteză conform uneia dintre revendicările 9 - 13, unde acidul cu configuraţia (R), produsul secundar al reacţiei:
este mai întâi alchilat, ulterior esterul cu configuraţia (R) astfel obţinut este racemizat prin acţiunea unei baze, pentru a fi reciclat în procesul de hidroliză enzimatică.
17.Procedeu de sinteză conform revendicării 16, unde esterul cu configuraţia (R) este racemizat prin acţiunea DBU la cald sau a KOH la temperatura mediului ambiant.
18.Procedeu de sinteză a compusului cu formula (III):
pornind de la nitrilul cu formula (IV):
care este hidrolizat pentru a forma acidul racemic cu formula (X):
esterificarea enzimatică a căruia, conform uneia dintre revendicările 1 - 10, duce la obţinerea acidului optic pur cu formula (Ia):
care ulterior este transformat în amida optic pură cu formula (XII):
reducerea căreia duce la obţinerea compusului cu formula (III).
19. Procedeu de sinteză a compusului cu formula (III):
pornind de la nitrilul cu formula (IV):
care este hidrolizat pentru a forma acidul racemic cu formula (X):
şi ulterior alchilat pentru a forma esterul racemic cu formula (XI):
unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, hidroliza enzimatică a căruia, conform uneia dintre revendicările 9-17, duce la obţinerea esterului optic pur cu formula (Ib):
unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, care este transformat în amidă optic pură cu formula (XII):
reducerea căreia duce la obţinerea compusului cu formula (III).
20.Procedeu de sinteză conform uneia dintre revendicările 18 sau 19, unde reducerea compusului cu formula (XII) pentru a forma compusul cu formula (III) este efectuată de BH3, NaBH4 sau LiAlH4.
21.Procedeu de sinteză a ivabradinei pornind de la nitrilul cu formula (IV):
care este hidrolizat pentru a forma acidul racemic cu formula (X):
esterificarea enzimatică a căruia, conform uneia dintre revendicările 1 - 10, duce la obţinerea acidului optic pur cu formula (Ia):
care este ulterior transformat în amida optic pură cu formula (XII):
reducerea căreia duce la obţinerea compusului cu formula (III).
unde compusul cu formula (III) este ulterior cuplat cu un compus cu formula (XIII):
unde X reprezintă un atom de halogen, ori supus unei reacţii de aminare reductivă cu un compus cu formula (XIV) în prezenţa unui agent reducător:
unde R2 reprezintă o grupare selectată dintre CHO şi CHR3R4, unde R3 şi R4 reprezintă fiecare o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată sau formează, împreună cu atomul de carbon care le poartă, un ciclu 1,3-dioxan, 1,3-dioxolan sau 1,3-dioxepan, pentru a obţine ivabradina, care este ulterior transformată într-o sare de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, sarea respectivă fiind în formă anhidră sau hidrată.
22.Procedeu de sinteză a ivabradinei pornind de la nitrilul cu formula (IV):
care este hidrolizat pentru a forma acidul racemic cu formula (X):
iar ulterior este alchilat pentru a forma esterul racemic cu formula (XI):
unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, hidroliza enzimatică a căruia, conform uneia dintre revendicările 11 - 21, duce la obţinerea esterului optic pur cu formula (Ib):
unde R reprezintă o grupare alchil C1-C6 liniară sau ramificată, care este transformat în amidă optic pură cu formula (XII):
reducerea căreia duce la obţinerea compusului cu formula (III)
unde compusul cu formula (III) este ulterior cuplat cu un compus cu formula (XIII):
unde X reprezintă un atom de halogen, ori supus unei reacţii de aminare reductivă cu un compus cu formula (XIV) în prezenţa unui agent reducător:
unde R2 reprezintă o grupare selectată dintre CHO şi CHR3R4, unde R3 şi R4 reprezintă fiecare o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată sau formează, împreună cu atomul de carbon care le poartă, un ciclu 1,3-dioxan, 1,3-dioxolan sau 1,3-dioxepan, pentru a obţine ivabradină, care este ulterior transformată într-o sare de adiţie cu un acid acceptabil farmaceutic, sarea respectivă fiind în formă anhidră sau hidrată.
MDA20130008A 2012-02-09 2013-02-07 Procedeu de sinteză enzimatică a acidului (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic sau a esterilor săi şi aplicarea lor în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale MD4467C1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1251195A FR2986804A1 (fr) 2012-02-09 2012-02-09 Procede de synthese enzymatique de l'acide (7s) 3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene 7-carboxylique ou de ses esters, et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels

Publications (3)

Publication Number Publication Date
MD20130008A2 MD20130008A2 (ro) 2013-07-31
MD4467B1 MD4467B1 (ro) 2017-02-28
MD4467C1 true MD4467C1 (ro) 2017-09-30

Family

ID=47631378

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20130008A MD4467C1 (ro) 2012-02-09 2013-02-07 Procedeu de sinteză enzimatică a acidului (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic sau a esterilor săi şi aplicarea lor în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale

Country Status (31)

Country Link
US (1) US9506095B2 (ro)
EP (1) EP2626428B1 (ro)
JP (1) JP5764151B2 (ro)
KR (1) KR101463787B1 (ro)
CN (1) CN103243146A (ro)
AR (1) AR089927A1 (ro)
AU (2) AU2013200482A1 (ro)
BR (1) BR102013003214A2 (ro)
CA (1) CA2805831C (ro)
CY (1) CY1116477T1 (ro)
DK (1) DK2626428T3 (ro)
EA (1) EA024316B1 (ro)
ES (1) ES2546102T3 (ro)
FR (1) FR2986804A1 (ro)
GE (1) GEP20156235B (ro)
HR (1) HRP20150872T1 (ro)
HU (1) HUE026805T2 (ro)
JO (1) JO3054B1 (ro)
MA (1) MA34503B1 (ro)
MD (1) MD4467C1 (ro)
MX (1) MX341712B (ro)
PL (1) PL2626428T3 (ro)
PT (1) PT2626428E (ro)
RS (1) RS54076B1 (ro)
SA (1) SA113340275B1 (ro)
SG (1) SG193081A1 (ro)
SI (1) SI2626428T1 (ro)
TW (1) TWI467019B (ro)
UA (1) UA115765C2 (ro)
UY (1) UY34611A (ro)
WO (1) WO2013117869A2 (ro)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2986804A1 (fr) * 2012-02-09 2013-08-16 Servier Lab Procede de synthese enzymatique de l'acide (7s) 3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene 7-carboxylique ou de ses esters, et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels
EP3101010A1 (en) 2015-06-03 2016-12-07 Urquima S.A. New method for the preparation of highly pure ivabradine base and salts thereof
CN113387791B (zh) * 2021-03-05 2022-08-02 株洲壹诺生物技术有限公司 一种盐酸伊伐布雷定关键中间体的合成方法

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0319024A2 (en) * 1987-12-03 1989-06-07 Sumitomo Chemical Company, Limited Process for producing optically active alpha-isopropyl-p-chlorophenylacetic acid
EP0534859A1 (fr) * 1991-09-27 1993-03-31 Adir Et Compagnie 3-Benzazépin-zones substituées par un groupe benzocyclobutyl- ou indanyl-alkyl-amino-alkyle, utiles dans le traitement des affections cardiovasculaires
US5561057A (en) * 1994-09-19 1996-10-01 National Research Council Of Canada Resolution of (RS)-ibuprofen by Candida antarctica catalyzed esterification with long chain alcohols while removing water
EP1589005A1 (fr) * 2004-04-13 2005-10-26 Les Laboratoires Servier Procédé de synthèse de l'ivabradine et de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable
EP1598333A1 (fr) * 2004-05-19 2005-11-23 Les Laboratoires Servier Procédé de synthèse du (1S)-4,5-diméthoxy-1-(méthylaminométhyl)-benzocyclobutane et de ses sels d'addition, et application à la synthèse de l'ivabradine et de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable
WO2007129018A1 (en) * 2006-04-21 2007-11-15 Ineos Fluor Holdings Limited Process for dynamic kinetic resolution (dkr) of racemic compounds in (hydro) fluorocarbon solvents
WO2010023383A1 (fr) * 2008-08-29 2010-03-04 Les Laboratoires Servier Nouveau procede de resolution des enantiomeres du (3,4- dimethoxy-bicyclo[4.2.0]octa-13,5-trien-7-yl)nitrile et application a la synthese de l'ivabradine
WO2011138625A1 (en) * 2010-05-07 2011-11-10 Richter Gedeon Nyrt. Industrial process for the synthesis of ivabradine salts
FR2986804A1 (fr) * 2012-02-09 2013-08-16 Servier Lab Procede de synthese enzymatique de l'acide (7s) 3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene 7-carboxylique ou de ses esters, et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5089637A (en) * 1990-03-21 1992-02-18 Pfizer Inc. Process and intermediates for 2r-benzyl-chroman-6-carbaldehyde
KR20000069705A (ko) * 1996-12-27 2000-11-25 피터 기딩스 리파제를 이용한 벤조디아제핀-아세트산 에스테르의 효소적 분할
EP1054996B1 (en) * 1998-02-17 2004-01-28 G.D. SEARLE & CO. Process for the enzymatic resolution of lactams
JPWO2004108944A1 (ja) * 2003-06-04 2006-07-20 三菱瓦斯化学株式会社 光学活性クロマンカルボン酸エステルの製造方法
GB0314260D0 (en) * 2003-06-19 2003-07-23 Astrazeneca Ab Therapeutic agents
CN101682878A (zh) * 2006-08-23 2010-03-24 日本电气株式会社 移动通信系统、无线电网络控制设备、移动电话及小区显示方法
CN101434552B (zh) * 2007-11-16 2012-05-23 江苏恒瑞医药股份有限公司 4,5-二甲氧基-1-(甲基氨基甲基)-苯并环丁烷的拆分
FR2933975B1 (fr) * 2008-07-17 2011-02-18 Servier Lab Nouveau procede de preparation de benzocyclobutenes fonctionnalises,et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels d'addition a un acide pharmaceutiquement acceptable.
EP2351729B1 (en) * 2008-10-29 2014-01-22 Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. Process for production of optically active organic carboxylic acid

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0319024A2 (en) * 1987-12-03 1989-06-07 Sumitomo Chemical Company, Limited Process for producing optically active alpha-isopropyl-p-chlorophenylacetic acid
EP0534859A1 (fr) * 1991-09-27 1993-03-31 Adir Et Compagnie 3-Benzazépin-zones substituées par un groupe benzocyclobutyl- ou indanyl-alkyl-amino-alkyle, utiles dans le traitement des affections cardiovasculaires
US5561057A (en) * 1994-09-19 1996-10-01 National Research Council Of Canada Resolution of (RS)-ibuprofen by Candida antarctica catalyzed esterification with long chain alcohols while removing water
EP1589005A1 (fr) * 2004-04-13 2005-10-26 Les Laboratoires Servier Procédé de synthèse de l'ivabradine et de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable
EP1598333A1 (fr) * 2004-05-19 2005-11-23 Les Laboratoires Servier Procédé de synthèse du (1S)-4,5-diméthoxy-1-(méthylaminométhyl)-benzocyclobutane et de ses sels d'addition, et application à la synthèse de l'ivabradine et de ses sels d'addition à un acide pharmaceutiquement acceptable
WO2007129018A1 (en) * 2006-04-21 2007-11-15 Ineos Fluor Holdings Limited Process for dynamic kinetic resolution (dkr) of racemic compounds in (hydro) fluorocarbon solvents
WO2010023383A1 (fr) * 2008-08-29 2010-03-04 Les Laboratoires Servier Nouveau procede de resolution des enantiomeres du (3,4- dimethoxy-bicyclo[4.2.0]octa-13,5-trien-7-yl)nitrile et application a la synthese de l'ivabradine
EP2166004A1 (fr) * 2008-08-29 2010-03-24 Les Laboratoires Servier Nouveau procédé de résolution des énantiomères du (3,4-diméthoxy-bicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trién-7-yl)nitrile et application à la synthèse de l'ivabradine
WO2011138625A1 (en) * 2010-05-07 2011-11-10 Richter Gedeon Nyrt. Industrial process for the synthesis of ivabradine salts
FR2986804A1 (fr) * 2012-02-09 2013-08-16 Servier Lab Procede de synthese enzymatique de l'acide (7s) 3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene 7-carboxylique ou de ses esters, et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Davis B.G., Boyer V. Biocatalysis and enzymes in organic synthesis. Nat. Prod. Rep., 2001, 618-640. DOI: 10.1039/b003667f, Regăsit în Internet la 2016.07.30, url: http://users.ox.ac.uk/~dplb0149/publication/NPRBiocatalysisRev.pdf chapters 1, 2 *
Dynamic Kinetic resolution in Asymmetric synthesis. WikipediA, The Free Enciclopedia. Regăsit în Internet la 2016.07.26, url: https://en.wikipedia.org/wiki/Dynamic_kinetic_resolution_in_asymmetric_synthesis *
Kirrchner G., Scollar M.P. and Klibanov A.M."Resolution of Racemic Mixtures via Lipase Catalysis in Organic Solvents" J. Am. Chem. Soc. 1985, 107, 7072-7076 documentul integral; referinţele incluse *

Also Published As

Publication number Publication date
SG193081A1 (en) 2013-09-30
GEP20156235B (en) 2015-01-26
EA201300100A2 (ru) 2013-08-30
ES2546102T3 (es) 2015-09-18
EP2626428A3 (fr) 2013-10-30
MD20130008A2 (ro) 2013-07-31
KR101463787B1 (ko) 2014-11-20
UA115765C2 (uk) 2017-12-26
MD4467B1 (ro) 2017-02-28
RS54076B1 (sr) 2015-10-30
TW201333206A (zh) 2013-08-16
JO3054B1 (ar) 2017-03-15
AU2013200482A1 (en) 2013-08-29
WO2013117869A2 (fr) 2013-08-15
US20130210091A1 (en) 2013-08-15
FR2986804A1 (fr) 2013-08-16
EP2626428B1 (fr) 2015-05-27
AR089927A1 (es) 2014-10-01
MX341712B (es) 2016-08-31
WO2013117869A3 (fr) 2013-11-14
JP5764151B2 (ja) 2015-08-12
KR20130092483A (ko) 2013-08-20
PT2626428E (pt) 2015-08-21
EP2626428A2 (fr) 2013-08-14
EA201300100A3 (ru) 2013-10-30
CY1116477T1 (el) 2017-03-15
CA2805831C (fr) 2015-11-24
JP2013162788A (ja) 2013-08-22
MX2013001458A (es) 2013-08-28
DK2626428T3 (en) 2015-08-31
US9506095B2 (en) 2016-11-29
AU2013200646B2 (en) 2014-12-18
MA34503B1 (fr) 2013-09-02
TWI467019B (zh) 2015-01-01
AU2013200646A1 (en) 2013-08-29
SA113340275B1 (ar) 2015-08-18
PL2626428T3 (pl) 2015-10-30
CA2805831A1 (fr) 2013-08-09
UY34611A (es) 2013-09-30
BR102013003214A2 (pt) 2016-04-19
HRP20150872T1 (hr) 2015-09-25
SI2626428T1 (sl) 2015-10-30
CN103243146A (zh) 2013-08-14
HUE026805T2 (en) 2016-07-28
EA024316B1 (ru) 2016-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9068214B2 (en) Method for preparing (R)-praziquantel
KR20220084102A (ko) (4s)-(4-시아노-2-메톡시페닐)-5-에톡시-2,8-디메틸-1,4-디히드로-1,6-나프티리딘-3-카르복실산의 아실옥시메틸 에스테르의 제조 방법
MD4467C1 (ro) Procedeu de sinteză enzimatică a acidului (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic sau a esterilor săi şi aplicarea lor în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale
DK2687506T3 (en) A process for the enzymatic synthesis of (7 S) -1- (3,4-dimethoxybicyclo [4.2.0] octa-1,3,5-trien-7-yl) -N-methylmethanamine and use for the synthesis of ivabradine and its salts
WO2011141923A2 (en) Improved synthesis of optically pure (s) - 3-cyano-5-methyl-hexanoic acid alkyl ester, an intermediate of (s)- pregabalin
EP1687270A1 (en) Method for preparing (s)-indoline-2-carboxylic acid and (s)-indoline-2-carboxylic acid methyl ester using hydrolytic enzyme
HK1188255A (en) Process for the enzymatic synthesis of (7s)-3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene-7-carboxylic acid or esters thereof, and application in the synthesis of ivabradine and salts thereof
MD4440C1 (ro) Procedeu de sinteză enzimatică a acidului (7S)-3,4-dimetoxibiciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-7-carboxilic şi aplicarea acestuia în sinteza ivabradinei şi a sărurilor sale
HK1191057A (en) Process for the enzymatic synthesis of an intermediate of ivabradine, and application in the synthesis of ivabradine and salts thereof
HK1191057B (en) Process for the enzymatic synthesis of an intermediate of ivabradine, and application in the synthesis of ivabradine and salts thereof

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued
KA4A Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)
MM4A Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees