MD1179Z

MD1179Z - Metodă de tratament al ulcerelor trofice

Info

Publication number: MD1179Z
Application number: MDS20170043A
Authority: MD
Inventors: Серджиу ПИСАРЕНКО; Адриан КУШНИР; Георге АНГЕЛИЧ; Татьяна ЗУГРАВ
Original assignee: Государственный Медицинский И Фармацевтический Университет "Nicolae Testemitanu" Республики Молдова
Priority date: 2017-03-29
Filing date: 2017-03-29
Publication date: 2018-03-31
Also published as: MD1179Y

Abstract

Invenţia se referă la medicină, în special la chirurgia septică şi poate fi utilizată pentru tratamentul ulcerelor trofice.Metoda constă în aceea că cu 24...48 ore înainte de tratament se separă o suspensie de celule mononucleare din sângele pacientului, care conţine 3×107/ml de celule, de asemenea de la pacient cu 2...3 ore înainte de prima procedură se prelevă 30...40 ml de sânge, care se centrifughează timp de 8...12 min cu 3000...3500 rot./min cu obţinerea unui cheag fibrinic bogat în trombocite, suspensia se administrează subcutanat în jurul plăgii, la o distanţă de 1 cm de la marginile ei, în cantitate de 5...15 ml, după care pe plagă se aplică cheagul fibrinic, procedura se repetă peste fiecare 4 zile, iar seria de tratament este de 8...10 proceduri.

Description

Invenţia se referă la medicină, în special la chirurgia septică, şi poate fi utilizată pentru tratamentul proceselor septico-purulente ale ulcerelor trofice.

Este cunoscută metoda de tratament al ulcerelor trofice în piciorul diabetic, care constă în aceea că se efectuează necrectomia ţesuturilor necrotizate din regiunea ulcerului, apoi timp de 5...7 zile se efectuează lavajul plăgii cu soluţie antiseptică, după care se aplică un pansament îmbibat cu soluţie de 0,5% de iodopiron. După sanarea plăgii se aplică autotransplanturi dermale [1].

Este cunoscută, de asemenea, metoda de tratament al ulcerelor trofice în piciorul diabetic, care constă în aceea că se efectuează pansamente cu un amestec care conţine plasmă îmbogăţită cu trombocite, soluţie de 10% de CaCl2 în cantităţi egale şi un preparat antibacterian la care este sensibilă flora din plagă [2].

Mai este cunoscută metoda de tratament al complicaţiilor septico-purulente cu o rezistenţă majoră a microorganismelor faţă de antibiotice în piciorul diabetic, care constă în aceea că se efectuează pansamente cu soluţie de 1% de acid clorhidric pe plagă după aplicarea antibioticelor pe plaga menţionată. Pansamentele se efectuează până la apariţia granulaţiilor [3].

Este cunoscută metoda de tratament al ulcerelor trofice în piciorul diabetic, care constă în aceea că se administrează i/v soluţie de Tiroxin-alanil-glicil-phenilalanil-leucil-arginină diacetat (Dapargin), şi anume 4 mg, doza pentru 24 ore, în 10 ml de ser fiziologic, care se administrează timp de 10 zile, apoi se repetă peste 2 săptămâni [4].

Este cunoscută, de asemenea, metoda de tratament al ulcerelor trofice în piciorul diabetic, care constă în aceea că se administrează i/a în artera femurală a membrului afectat autolimfocite prelucrate cu glutoxim 20 mg timp de 45 min. Autolimfocitele sunt obţinute cu ajutorul unui plasmoseparator de celule sangvine AS-TEC 204 firma „Fresenius”. Procedura se efectuează de două ori cu un interval de 48...72 ore [5].

Este cunoscută metoda de regenerare a ulcerelor trofice inclusiv de geneză diabetică, care constă în aceea că preliminar, cu 24...48 ore înainte de tratament, se separă o suspensie de celule mononucleare din sângele recipientului, care conţine 3×107/ml de celule, apoi suspensia separată, peste o zi, în cantitate de 5...15 ml, se administrează subcutanat în jurul plăgii, la o distanţă de 1 cm de la marginile ei, şi în muşchiul gastrocnemian afectat, seria de tratament constituie 12...14 zile [6].

Dezavantajele metodelor cunoscute constau în aceea că are loc o regenerare lentă a ţesuturilor afectate, în unele cazuri sunt necesare intervenţii chirurgicale de plastie a defectelor dermale, precum şi utilizarea antibioticelor timp îndelungat şi aplicarea repetată a metodelor menţionate pentru obţinerea unei regenerări complete.

Problema pe care o rezolvă invenţia constă în sporirea eficienţei în combaterea complicaţiilor septico-purulente în ulcerele trofice, stimularea proceselor regenerative şi prevenirea dezvoltării proceselor degenerative şi necrotice ale ţesuturilor afectate.

Metoda constă în aceea că cu 24...48 ore înainte de tratament se separă o suspensie de celule mononucleare din sângele pacientului, care conţine 3×107/ml de celule, de asemenea de la pacient cu 2...3 ore înainte de prima procedură se prelevă 30...40 ml de sânge, care se centrifughează timp de 8...12 min cu 3000...3500 rot./min cu obţinerea unui cheag fibrinic bogat în trombocite, suspensia se administrează subcutanat în jurul plăgii, la o distanţă de 1 cm de la marginile ei, în cantitate de 5...15 ml, după care pe plagă se aplică cheagul fibrinic, procedura se repetă peste fiecare 4 zile, iar seria de tratament prevede 8...10 proceduri.

Rezultatul invenţiei constă în intensificarea proceselor regenerative, antiinflamatoare şi de resorbţie, ce contribuie la o cicatrizare per primum a plăgii cu preîntâmpinarea trecerii proceselor necrotice în ţesuturile profunde şi cu remisii îndelungate.

Platelet Rich Fibrin (PRF) prezintă o matrice fibrinică bogată în trombocite, care include în sine citokine, factori de creştere şi leucocite, având posibilitatea de a elimina substanţele menţionate un timp îndelungat. El poate fi utilizat sub formă de cheag sau membrană. Trombocitele pot secreta factori de creştere numai după formarea cheagului fibrinic, care îi conferă un potenţial terapeutic.

Produsul menţionat se pregăteşte în eprubete vacuumate cu un activator al plasmei, acestea pot fi eprubete din plastic cu un strat aplicat de SiO pe pereţii interni sau eprubete din sticlă fără adaos, deoarece sticla este un activator al plasmei sangvine. După care se centrifughează 30...40 ml de sânge, timp de 8...12 min cu 3000...3500 rot./min. Apoi cheagul se amplasează într-o boxă (PRF-BOX) pentru scurgerea cheagurilor de fibrină. Scopul centrifugării este sedimentarea eritrocitelor. Principala condiţie este factorul g (RCF, acceleraţia centrifugă), care depinde de viteza de rotaţie şi de distanţa de la eprubetă până la axa centrală a centrifugii.

Pentru obţinerea PRF se începe centrifugarea la cel mult 1 min după prelevarea sângelui. Până la începerea centrifugării se amestecă bine sângele în eprubetă. Activatorul plasmei activează factorul 12, cu cât mai mare este concentraţia activatorului cu atât mai bine se amestecă sângele şi cu atât mai multă şi mai repede se formează trombina, care transformă fibrinogenul în fibrină.

În perioada de până la 7 zile după aplicarea cheagului fibrinic pe suprafaţa ulcerului din el se elimină următoarele:

- leucocite şi monocite ce se transformă în macrofagi, celule care stimulează regenerarea ţesutului;

- VEGF - factorul de creştere a endoteliului (Vascular endothelial growth factor), care este o proteină de semnalizare, se elimină de celule pentru stimularea vasculogenezei şi angiogenezei;

- PDGF - factorul de creştere a trombocitelor (Platelet-derived growth factor) - proteină ca factor de creştere şi are importanţă pentru angiogeneză;

- TGF - beta - factor de creştere şi transformare (Transforming growth factor beta) - proteină care controlează proliferarea, diferenţierea celulară şi alte funcţii;

- proteine, care au importanţă în procesul de angiogeneză, stimulează creşterea ţesuturilor;

- TSP - trombospondina este un inhibitor al angiogenezei, acţionând asupra adgeziei şi creşterii celulelor endoteliale;

- IGF-1 - factor de creştere de tip insulinic 1 - proteină din familia factorilor de creştere de tip insulinic.

Cultura de celule mononucleare conţine substanţe biologic active ce contribuie la activizarea reacţiilor imune, la intensificarea sintezei proteinelor şi a proceselor fermentative, precum şi la inhibarea reacţiei inflamatoare, în locul administrării suspensiei are loc ameliorarea microcirculaţiei, proliferarea ţesutului conjunctiv, intensificarea proceselor de resorbţie. Ca rezultat are loc un proces antiinflamator, reparativ şi regenerativ intens, cicatrizarea plăgii se produce mai rapid, provocând diminuarea edemului şi prevenind dezvoltarea lui datorită ameliorării microcirculaţiei în ţesuturile plăgii.

Metoda se realizează în modul următor: de la pacient, preliminar cu 24...48 ore, se prelevă 20...40 ml de sânge, la care se adaugă 20...100 UI de heparină la 1 ml de sânge. Din sânge se separă celulele mononucleare pe un gradient de densitate, se spală cu ser fiziologic steril, se includ în mediul de cultură (mediu Eagle, TC 199, RPMI 1640, etc.) şi se amplasează în termostat la temperatura de 37°C pentru 24...48 ore. După perioada de incubare cultura celulară se separă de mediul de cultură şi se amestecă, obţinându-se o suspensie în 5...15 ml de ser fiziologic steril. De asemenea se pregăteşte cheagul de fibrină, şi anume se prelevă 30...40 ml de sânge şi se centrifughează timp de 8...12 min la 3200 rot./min, apoi se scurge cheagul de fibrină bogat în trombocite. Plaga se curăţă de mase necrotice, de fibrină până la apariţia sângerării din marginile ei, se prelucrează cu soluţii antiseptice, apoi suspensia de celule, care conţine 3×107/ml de celule în cantitate de 5...15 ml, în dependenţă de suprafaţa plăgii, se administrează în jurul plăgii, la 1 cm de la marginea ei, în stratul subcutanat al membrului afectat, procedura se repetă peste fiecare 4 zile, iar seria de tratament constituie 8...10 proceduri.

Metoda revendicată a fost utilizată pentru tratamentul a 10 pacienţi. Rezultatele au fost satisfăcătoare.

Exemplul 1

Pacientul K., 66 ani, internat în secţia chirurgie septică cu o plagă supurată de 6x9 cm în regiunea 1/3 inferioare a gambei drepte, care s-a dezvoltat timp de 2 săptămâni de la o rană în regiunea menţionată. Pacientul suferă de diabet zaharat de 18 ani. După investigarea clinică şi paraclinică a pacientului s-a utilizat metoda revendicată, şi anume la a doua zi de spitalizare s-au preluat 30 ml de sânge, la care s-au adăugat 600 UI de heparină. S-a separat cultura de celule mononucleare. S-a utilizat mediul de cultură RPMI 1640, care a fost amplasat în termostat la temperatura de 37°C pentru 48 ore. Apoi s-a separat cultura de mediul de cultură şi s-a amestecat cu 10 ml de ser fiziologic steril. De asemenea, cu 2 ore până la efectuarea metodei, s-a pregătit cheagul de fibrină pentru a fi aplicat pe suprafaţa plăgii. S-a efectuat prelucrarea plăgii. S-au administrat în jurul plăgii în stratul subcutanat 10 ml de suspensie de celule. Pe suprafaţa plăgii s-a aplicat cheagul de fibrină bogat în trombocite. Procedura a fost repetată peste fiecare 4 zile, seria de tratament a constituit 9 proceduri. Plaga s-a cicatrizat per primum, fără semne de inflamaţie. Pacientul a fost externat în stare satisfăcătoare.

Exemplul 2

Pacienta N., 53 ani, internată în secţia chirurgie septică cu o plagă supurată de 4x6 cm în regiunea plantei drepte, care s-a dezvoltat timp de 5 luni de la o rană tăiată în regiunea menţionată. După investigarea clinică şi paraclinică a pacientei s-a utilizat metoda revendicată, şi anume la a doua zi de spitalizare s-au preluat 30 ml de sânge, la care s-au adăugat 600 UI de heparină. S-a separat cultura de celule mononucleare. S-a utilizat mediul de cultură RPMI 1640, care a fost amplasat în termostat la temperatura de 37°C pentru 48 ore. Apoi s-a separat cultura de mediul de cultură şi s-a amestecat cu 15 ml de ser fiziologic steril. De asemenea, cu 2 ore până la efectuarea metodei, s-a pregătit cheagul de fibrină pentru a fi aplicat de suprafaţa plăgii. S-a efectuat prelucrarea plăgii. S-au administrat în jurul plăgii în stratul subcutanat 10 ml de suspensie de celule. Pe suprafaţa plăgii s-a aplicat cheagul de fibrină bogat în trombocite. Procedura a fost repetată peste fiecare 4 zile, seria de tratament a constituit 9 proceduri. Plaga s-a cicatrizat per primum, fără semne de inflamaţie. Pacientul a fost externat în stare satisfăcătoare.

1. RU 2359624 C1 2009.06.27

2. RU 2322247 C1 2008.04.20

3. RU 2184551 C2 2002.07.10

4. RU 2144831 C1 2000.01.27

5. RU 2228204 C2 2004.05.10

6. MD 696 Y 2013.11.30

Claims

Metodă de tratament al ulcerelor trofice, care constă în aceea că cu 24...48 ore înainte de tratament se separă o suspensie de celule mononucleare din sângele pacientului, care conţine 3×107/ml de celule, de asemenea de la pacient cu 2...3 ore înainte de prima procedură se prelevă 30...40 ml de sânge, care se centrifughează timp de 8...12 min cu 3000...3500 rot./min cu obţinerea unui cheag fibrinic bogat în trombocite, suspensia se administrează subcutanat în jurul plăgii, la o distanţă de 1 cm de la marginile ei, în cantitate de 5...15 ml, după care pe plagă se aplică cheagul fibrinic, procedura se repetă peste fiecare 4 zile, iar seria de tratament este de 8...10 proceduri.