LT4758B

LT4758B - Pramoniniai gaminiai

Info

Publication number: LT4758B
Application number: LT2000035A
Authority: LT
Inventors: Jeffrey Thomas Emmick; William Ernest Pullman; Kenneth Michael Ferguson; John Steven Whitaker
Original assignee: Lilly Icos Llc
Priority date: 1999-04-30
Filing date: 2000-04-26
Publication date: 2001-02-26
Also published as: ES2187234A1; IL135817A0; KR100577057B1; AU4490800A; SI20361A; BR0010181A; NO20002097L; CN1196487C; CN1384746A; SE0001518L; JP2002543116A; SG98384A1; HRP20010778B1; SK285415B6; ZA200002058B; AU3012900A; PT1173181E; LV12560A; NO20015275L; DE60005940D1

Description

IŠRADIMO SRITIS

Šis išradimas yra susijęs su labai selektyviais fermento fosfodiesterazės (PDE) inhibitoriais ir jų panaudojimu farmacijos pramonės gaminiuose. Konkrečiau, šis išradimas yra susijęs su potencialiais cikliniam guanozin-3’,5’-monofosfatui specifinės 5 tipo fosfodiesterazės (PDE5) inhibitoriais, kurie, jeigu jie yra farmaciniame produkte, yra tinkami lytinės funkcijos sutrikimui gydyti. Čia aprašytiems pramoniniams gaminiams yra būdinga selektyvi PDE5 inhibicija, ir todėl jie duoda naudą tose terapijos srityse, kuriose pageidautina inhibuoti PDE5, sumažinant arba eliminuojant kenksmingus šalutinius efektus, atsirandančius dėl kitų fosfodiesterazių inhibavimo.

IŠRADIMO KILMĖ

Biocheminis, fiziologinis ir klinikinis cikliniam guanozin-3’,5’monofosfatui specifinės fosfodiesterazės (cGMP-specifinė PDE) inhibitorių efektas leidžia suprasti, kad juos galima panaudoti esant įvairioms ligų būklėms, kuriose pageidautina moduliuoti lygiuosius raumenis, inkstų, hemostazinę, uždegiminę ir/arba endokrininę funkciją. Penktojo tipo cGMPspecifinė fosfodiesterazė (PDE5) yra pagrindinis cGMP hidrolizuojantis fermentas gyslų lygiuosiuose raumenyse, ir buvo aprašyta jo ekspresija varpos akytkūnyje (Taher et ai., J. Urol., 149:2Q5A (1993)). Taigi, PDE5 yra patrauklus taikinys gydant lytinės funkcijos sutrikimą. (Murray, DN&P 6/3/:150-56 (1993)).

Farmacinis produktas, kuriame pateikiamas PDE5 inhibitorius, dabartiniu metu yra prieinamas ir parduodamas su prekės ženklu VIAGRA®. Veiklusis VIAGRA® ingredientas yra sildenafilas. Produktas parduodamas kaip pramoninis gaminys, į kurį įeina 25, 50 ir 100 mg sildenafilo tabletės ir įdėtinis lapelis prie įpakavimo. Šiame įdėtiniame lapelyje konstatuojama, kad sildenafilas yra veiksmingesnis PDE5, nei kitų žinomų fosfodiesterazių, inhibitorius (daugiau nei 80 kartų lyginant su PDE1 inhibavimu, daugiau nei 1000 kartų lyginant su PDE2, PDE3 ir PDE4 inhibavimu). Buvo aprašyta, kad sildenafilo IC₅₀ PDE5 atžvilgiu yra 3 nM (Drugs of the Future, 22(2), pp. 128143 (1997)) ir 3,9 nM (Boolell et ai., Int. J. of Impotence Res., 8, p.47-52 (1996)). Aprašyta, kad sildenafilas turi 4000 kartų didesnį selektyvumą PDE5 lyginant su PDE3 ir tik 10 kartų didesni selektyvumą PDE5 lyginant su PDE6. Samprotaujama, kad šis santykinis selektyvumo nebuvimas PDE6 atžvilgiu yra anomalijų, susijusių su spalvų matymu, pagrindas.

Nors sildenafilas turėjo nemažą komercinę sėkmę, jis nepasiekė tikslo dėl jo svarbių neigiamų šalutinių efektų, įskaitant veido paraudimą (10 % atvejų). Neigiami šalutiniai efektai riboja sildenafilo naudojimą pacientams, turintiems regėjimo anomalijas, hipertenziją, o ypač individams, kurie naudoja organinius nitratus (Welds et ai., Amer. J. of Cardiology, 83(5A), pp.

21C-28C (1999)).

Manoma, kad pacientams, kurie priiminėja organinius nitratus, pavartojus sildenafilą, sukeliamas kliniškai reikšmingas kraujo spaudimo sumažėjimas, kuris pacientui gali būti pavojingas. Dėl to sildenafilo pakuotės etiketėje pateikiamos griežtos kontraindikacijos dėl jo vartojimo derinyje su organiniais nitratais (pvz., nitrogliceroliu, izosorbido mononitratu, izosorbido dinitratu, etitritilo tetranitratu) ir kitais bet kurios formos azoto oksido donoriais tiek reguliariai, tiek ir su pertraukomis, nes sildenafilas sustiprina nitratų hipotenzinius efektus. Žr. C.R. Conti et ai., Amer. J. of Cardiology,

83(5A), pp.29C-34C (1999). Taigi, net ir esant prieinamam sildenafilui, išlieka poreikis surasti pagerintus farmacinius produktus, kurie būtų naudingi lytinės funkcijos sutrikimams gydyti.

Šiame išradime pateikiamas pramoninis gaminys žmonių farmaciniam naudojimui, kuris susideda iš įdėtinio lapelio prie įpakavimo, konteinerio ir peroralinės dozuotos formos vaisto, kuriame yra selektyvaus PDE5 inh!Hitnrip,,c vinnntin^ dozėa tam 1 ir mn/dozuotoie formoie. Šio išradimo naudingi efektai buvo pastebėti klinikiniuose tyrimuose ir atradus, kad selektyvus PDE5 inhibitorius, tenkinantis toliau duodamus kriterijus, leidžia efektyvų peroralinj vartojimą nuo 1 iki 20 mg/dozuotoje formoje be kontraindikacijų, paprastai nurodomų PDE5 inhibitorių produktams, tokių kaip įspėjimai dėl regėjimo anomalijų.

Šio išradimo selektyvus PDE5 inhibitorius turi:

1) mažiausiai 100 kartų IC₅o reikšmių skirtumą PDE5 inhibavimui, lyginant su PDE6, kiekvienam konkrečiam PDE5 inhibitoriui (t.y. IC₅o reikšmė PDE5 atžvilgiu yra mažiausiai 100 kartų mažesnė nei IC₅o reikšmė PDE6 atžvilgiu):

2) mažiausiai 1000 kartų IC₅o reikšmių skirtumą PDE5 inhibavimui, lyginant su PDE1c; ir

3) IC₅₀ reikšmę mažesnę už 10 nM.

Svarbu pažymėti, kad klinikiniai tyrimai taip pat parodė, kad gali būti pateiktas efektyvus produktas, turintis sumažintą tendenciją sukelti išraudimą jautriems pacientams. Kas labiausiai netikėta, šis produktas taip pat gali būti vartojamas, esant nežymiems šalutiniams efektams, susijusiems su PDE5 inhibitoriaus ir organinio nitrato derinio poveikiu. Taigi, kontraindikacijos, kurios buvo laikomos neišvengiamomis produktui, kuriame yra PDE5 inhibitoriaus, kaip čia parodyta, yra visai nebūtinos, jeigu yra naudojamas selektyvus PDE5 inhibitorius, kaip apibūdinta aukščiau. Taigi, šiame išradime pateikiama efektyvi lytinės funkcijos sutrikimo terapija individams, kurie anksčiau buvo negydytini arba kentėjo nuo nepriimtinų šalutinių poveikių, įskaitant individus, turinčius širdies ir kraujagyslių ligą, kaip antai individai, kuriems reikalingas gydymas nitratais, kurie turėjo miokardo infarktą daugiau nei prieš tris mėnesius nuo lytinės funkcijos sutrikimo gydymo pradžios, ir sergantiems 1 klasės kongestine širdies yda, ką nustatė Niujorko Širdies Asociacija (NYHA), arba individams, kenčiantiems nuo regėjimo anomalijų.

IŠRADIMO SANTRAUKA naudojimui, kuris susideda iš įdėtinio lapelio prie įpakavimo, konteinerio ir peroralinės dozuotos vaisto formos, kurioje yra nuo 1 iki 20 mg selektyvaus

PDE5 inhibitoriaus vienoje dozuotoje formoje.

Šiame išradime taip pat pateikiamas būklių, kuriose pageidautina inhibuoti PDE5, gydymo būdas, apimantis peroralinės dozuotos formos, turinčios nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus, skyrimą to reikalingam pacientui iki 20 mg/per dieną sumarinės dozės. Išradime taip pat pateikiamas peroralinės dozuotos vaisto formos, kurioje yra nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus dozė, panaudojimas lytinės funkcijos sutrikimo gydymui.

Specifinės būklės, kurias galima gydyti šio išradimo būdu ir gaminiu yra (bet jomis neapsiribojama) vyrų erekcinės funkcijos sutrikimas ir moterų lytinės funkcijos sutrikimas, ypatingai moterų sužadinimo sutrikimas, taip pat žinomas kaip moterų lytinio sužadinimo sutrikimas.

Konkrečiau kalbant, šiame išradime pateikiamas pramoninis gaminys žmonių farmaciniam vartojimui, susidedantis iš;

(a) peroralinės dozuotos vaisto formos, turinčios nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus, kuris turi (i) mažiausiai 100 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE6 inhibavimo

IC₅o reikšmių (ii) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių (iii) ICso mažesnę už 10 nM ir (iv) pakankamą bioprieinamumą, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines peroralinės dozes;

(b) įdėtinio lapelio prie Įpakavimo, konstatuojančio, kad šis PDE5 inhibitorius tinka lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientui, kuriam reikalingas toks gydymas, ir kad jis neturi kontraindikacijų, susijusių su organinių nitratų vartojimu; ir (c) konteinerio.

Šiame išradime taip pat pateikiamas pramoninis gaminys žmonių i/n r+o ii f ir e> if~·/ Ά'-' o + i <- i F.

(a) peroralines dozuotos vaisto formos, turinčios nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus, kuris turi (i) mažiausiai 100 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE6 inhibavimo

IC50 reikšmių (ii) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių (iii) IC50 mažesnę už 10 nM ir (iv) pakankamą bioprieinamumą, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines peroralines dozes;

(b) įdėtinio lapelio prie įpakavimo, konstatuojančio, kad šis PDE5 inhibitorius tinka lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientui, kuriam reikalingas toks gydymas, ir kuris vartoja organinius nitratus; ir (c) konteinerio.

Šiame išradime taip pat pateikiamas pramoninis gaminys žmonių farmaciniam vartojimui, susidedantis iš:

IC50 reikšmių (ii) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių (iii) IC₅o mažesnę už 10 nM ir (iv) pakankamą bioprieinamumą, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines peroralines dozes;

(b) įdėtinio lapelio prie įpakavimo, teigiančio, kad šis PDE5 inhibitorius tinka lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientui, kuriam reikalingas toks gydymas, ir kuris kenčia nuo būklių, pasirinktų iš grupės, susidedančios iš tinklainės ligos, polinkio į išraudimą, polinkio j regėjimo anomalijas, 1 klasės kongestinės širdies ydos, miokardo infarkto, buvusio prieš 90 arba daugiau dienų prieš seksualinės funkcijos sutrikimo gydymo pradžią, ir jų derinių; ir (c) konteinerio.

SMULKUS APRAŠYMAS

Šio išradimo tikslams atskleisti ir aprašyti vartojami terminai ir sutrumpinimai yra apibrėžiami taip:

Terminas “konteineris reiškia bet kokj rezervuarą ir uždarą ertmę, tinkančią farmaciniam produktui laikyti, transportuoti, paruošti ir/arba pardavinėti.

Terminas “IC₅o” yra junginio gebos inhibuoti konkretų PDE fermentą (pvz. PDE1c, PDE5 arba PDE6) matas. IC₅o yra junginio koncentracija, kuri duoda 50 % fermento inhibavimą viename dozės-atsako eksperimente. Junginio IC₅o reikšmės nustatymas lengvai atliekamas pagal žinomą in vitro metodiką, aprašytą Y. Cheng et ai., Biochem. Pharmacol., 22, pp. 3099-3108 (1973).

Terminas “Įdėtinis lapelis prie Įpakavimo” reiškia produktą lydinčią informaciją, kur aprašoma kaip vartoti produktą kartu su saugumo ir efektyvumo duomenimis, reikalingais, kad terapeutas, vaistininkas ir pacientas galėtų padaryti sprendimą dėl produkto naudojimo. Šis Įdėtinis lapelis prie įpakavimo paprastai yra laikomas farmacinio produkto “etikete”,

Terminas “peroralinė dozuota forma” bendra prasme yra naudojamas peroraliniu būdu vartojamiems farmaciniams produktams pažymėti. Šios srities specialistai žino, kad peroralinės dozuotos formos apima tokias formas, kaip skystos vaisto formos, tabletės, kapsulės ir želatininės kapsulės.

Terminas “selektyvus PDE5 inhibitorius yra apibrėžiamas kaip PDE5 inhibitorius, kuris turi:

1) PDE5 inhibavimo IC₅o reikšmę mažiausiai 100 kartų mažesnę nei PDE6 inhibavimo reikšmė:

2) PDE5 inhibavimo IC₅₀ reikšmę mažiausiai 1000 kartų mažesnę nei PDE1c inhibavimo reikšmė: ir

3) PDE5 inhibavimo IC₅o reikšmę mažesnę už 10 nM.

Selektyvūs PDE5 inhibitoriai yra labai jvairios cheminės struktūros, ir jų panaudojimas šiame išradime priklauso ne tiek nūn rhpmir-ιός ctn.iktūro?, kiek nuo čia aprašomų selektyvumo ir veiksmingumo parametrų.

Terminas “regėjimo anomalijos reiškia nenormalų regėjimą, charakterzuojamą mėlynos-žalios spalvos matymu, kurį, kaip manoma, sukelia PDE6 inhibavimas.

Terminas “išraudimas reiškia trumpalaiki veido ir kalko paraudonavimą, priskiriamą vaisto priėmimo sukeltam kraujagyslių išsiplėtimui, kurį paprastai lydi karštis veido ir kaklo srityje, o kartais ir prakaitas.

Terminas “laisvas vaistas reiškia kietas vaisto daleles, kurios nėra tampriai surištos su polimero koprecipitatu.

Kaip jau minėta, šis išradimas yra skirtas pramoniniam gaminiui žmonių farmaciniam naudojimui, susidedančiam iš įdėtinio lapelio prie Įpakavimo, konteinerio ir dozuotos vaisto formos, kurioje yra nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus vienoje dozuotoje formoje. Selektyvus PDE5 inhibitorius, tinkantis Šiam išradimui, yra PDE5 inhibitorius, kuris turi:

1) mažiausiai 100 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE6 inhibavimo IC₅o reikšmių;

2) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių;

3) IC₅o reikšmę mažesnę už 10 nM;

ir yra pakankamai beprieinamas, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines dozes;

Skirtumas yra išreiškiamas kaip IC₅o reikšmių PDE6/PDE5 santykis, t.y.

PDE6 inhibavimo IC₅o santykis su PDE5 inhibavimo IC₅o reikšme (PDE6/PDE5); jis yra didesnis už 100, geriau kai yra didesnis už 300 ir geriausia kai yra didesnis už 500.

Panašiu būdu, IC₅o reikšmės santykis PDE1c su tC₅o reikšme PDE5 (PDE1c/PDE5) yra didesnis už 1000. Tinkamiausi PDE5 inhibitoriai turi didesnį nei 3000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo, ir dar geriau, jei skirtumas tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių yra didesnis nei 5000 kartų. Inhibitoriaus veiksmingumas, kurį atspindi IC₅₀ reikšmė PDE5 atžviioiu, vra mažesnis nei 10 nM geriau, kai yra rmžncnie _noi p nM. _n Har geriau, kai yra mažiau nei 1 nM.

įdėtiniame lapelyje prie įpakavimo pateikiamas aprašymas kaip vartoti farmacini produktą kartu su saugumo ir efektyvumo duomenimis, reikalingais, kad terapeutas, vaistininkas ir pacientas galėtų padaryti informuotą sprendimą dėl produkto naudojimo. įdėtinis lapelis prie įpakavimo paprastai yra laikomas farmacinio produkto etikete. Įdėtiniame lapelyje prie šio pramoninio gaminio įpakavimo nurodoma, kad selektyvus PDE5 inhibitorius yra tinkamas būklių, kuriose pageidautina inhibuoti PDE5, gydymui, įdėtiniame lapelyje taip pat pateikiami nurodymai vartoti vieną arba daugiau nuo 1 iki 20 mg vienetinių dozuotų formų, jeigu yra reikalas, iki maksimalios 20 mg per dieną sumarinės dozės. Pageidautina vartoti nuo 5 iki 20 mg/per dieną, dar geriau - nuo 5 iki 15 mg/per dieną, ir visų geriausia - 5 mg arba 10 mg dozuotą formą, imant ją kartą per dieną, jeigu yra reikalas.

Tinkamiausios būklės, kurias galima gydyti, yra lytinės funkcijos sutrikimas (įskaitant vyrų erekcijos funkcijos sutrikimą; ir moterų lytinės funkcijos sutrikimą, labiausiai moterų sužadinimo sutrikimą (FAD)). Labiausiai pageidautina gydytina būklė yra vyrų erekcijos funkcijos sutrikimas.

Svarbu pažymėti, kad įdėtiniame lapelyje prie įpakavimo siūlomas produkto naudojimas lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientams, kurie serga tinklainės liga, pavyzdžiui, diabetine retinopatija arba pigmentiniu retinitu, arba pacientams, kurie naudoja organinius nitratus. Taigi, svarbu, kad šiame įdėtiniame lapelyje nėra su šiomis būklėmis susijusių kontraindikacijų, ir ypatingai dėl šios dozuotos formos vartojimo su organiniu nitratu. Dar svarbiau, kad įdėtiniame lapelyje nėra jokių Įspėjimų tiek dėl tinklainės ligų, ypatingai pigmentinio retinito, ir susijusių su individais, kurie turi polinki į regėjimo anomalijas. Svarbu tai, kad įdėtiniame lapelyje prie Įpakavimo nurodoma, kad išraudimo atvejų skaičius yra mažiau 2 %, geriau mažiau 1 % ir visų geriausia, kai yra mažiau 0,5 % nuo pacientų, vartojusių šią dozuotą formą. Šis išraudimo atvejų skaičius rodo žymų pagerinimą, lyginant su ankstesniaisiais farmaciniais produktais, kuriuose yra PDE5 inhibitoriaus.

Šiame pramoniniame gaminyje naudojamas konteineris yra įprastas fprrnęmirinio ιλ pjjnroctoi paketas, stiklinis arba plastikinis buteliukas su dangteliu arba užsukimu arba kitoks panašus gaminys, patogus naudoti pacientui arba vaistininkui.

Pageidautina, kad konteinerio dydis būtų toks, kad jame tilptų 1-1000 kietų dozuotų formų, geriausia - 1-500 kietų dozuotų formų ir geriausia, kad tilptų

5-30 kietų dozuotų formų.

Specialistai supras, kad peroralinės dozuotos formos apima, pavyzdžiui, tokias formas kaip skystos vaisto formos, tabletės, kapsulės ir želatininės kapsulės. Geriausia, kai dozuotos formos yra kietos dozuotos formos, ypatingai tabletės, kuriose yra nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus. Tokių dozuotų formų gamybai yra tinkamos bet kokios peroralinio vartojimo farmaciškai priimtinos pagalbinės medžiagos. Į tinkamas farmacines dozuotas formas įeina ir koprecipitato formos, aprašytos, pavyzdžiui, Butler U.S. patente Nr. 5.985.326, kuris čia duodamas kaip literatūros šaltinis. Tinkamiausiuose įgyvendinimo variantuose šio išradimo vienetinė dozuota forma yra kieta, neturinti koprecipitato PDE5 inhibitoriaus forma, kurioje yra kietas PDE5 inhibitorius laisvo vaisto pavidalu.

Pageidautina, kad tabletėse būtų visų pripažintos nekenksmingomis farmacinės pagalbinės medžiagos, tokios kaip laktozė, mikrokristalinė celiuliozė, krakmolas, kalcio karbonatas, magnio stearatas, stearino rūgštis, talkas ir koloidinis silicio dioksidas, o tabletes galima pagaminti Įprastais farmacinės pramonės metodais, kaip aprašyta Remington’s Pharmaceutical Sciences, 1&^h Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990). Tokiais metodais yra, pavyzdžiui, šlapiasis granuliavimas, po to išdžiovinimas, sumalimas ir supresavimas tabletėmis, kurios padengiamos apvalkalu arba nepadengiamos; sausasis granuliavimas, po to sumalimas ir supresavimas tabletėmis, kurios padengiamos apvalkalu arba nepadengiamos; sausasis sumaišymas, po to supresavimas tabletėmis, kurios padengiamos apvalkalu arba nepadengiamos; tablečių suformavimas pagal šabloną; šlapiasis granuliavimas, išdžiovinimas ir supilstymas i želatinos kapsules; sausasis sumaišymas ir supilstymas j želatinos kapsules; arba želatinos kapsulių užpildymas suspensija arba tirpalu. Paprastai kietos dozuotos formos turi identifikavimo ženklus, kurie yra iškilaus rašto arba 'įspausti ant paviršiai.js;

Šis išradimas yra paremtas išsamiais eksperimentais ir klinikiniais bandymais ir nelauktais pastebėjimais, kad šalutiniai poveikiai, kurie anksčiau buvo laikomi būdingais PDE5 inhibavimui, gali būti sumažinti iki kliniškai nežymaus lygio pasirenkant selektyvų PDE5 inhibitorių, turintį čia nurodytas specifines charakteristikas, būtent:

2) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC50 reikšmių;

3) PDE5 inhibavimo IC50 reikšmę mažesnę už 10 nM.

Šis netikėtas pastebėjimas Įgalino sukurti pramoninius gaminius, i kuriuos įeina selektyvaus PDE5 inhibitoriaus nuo 1 mg iki 20 mg dozuotos formos vienete, jeigu vartojama peroraliniu būdu, ir minimizuojami nepageidautini šalutiniai efektai, kurie anksčiau buvo laikomi neišvengiamais. Šie šalutiniai efektai yra veido išraudimas, regėjimo anomalijos ir didelis kraujo spaudimo sumažėjimas, kai PDE5 inhibitorius yra vartojamas vienas arba derinyje su organiniu nitratu. Minimalus šio PDE5 inhibitoriaus, vartojant ji nuo 1 iki 20 mg viename dozuotame vienete, poveikis j PDE6 taip pat leidžia skirti selektyvų PDE5 inhibitorių pacientams, sergantiems tinklainės liga, tokia kaip diabetinė retinopatija arba pigmentinis retinitas.

Vienas toks selektyvus PDE5 inhibitorius, t.y. (6R)-trans)-6-(1,3benzodioksol-5-il)-2,3,6,7,12,12a-heksahidro-2-metilpirazino[1’,2':1,6]pirido[3,4-b]indol-1,4-dionas, kitaip dar vadinamas (6R,12aR)-2,3,6,7,12,12aheksahidro-2-metil-6-(3,4-metilendioksofenil)pirazino[2’,1 ’:6,1]pirido[3,4b]indol-1,4-dionu, yra aprašytas Daugan U.S. patente Nr. 5.859.006 ir yra atvaizduojamas struktūrine formule (I):

Buvo parodyta, kad (I) formulės junginys klinikiniuose bandymuose su žmonėmis turi minimalų jnašą į sistolinj kraujo spaudimą, kai jis vartojamas kartu su organiniais nitratais. Priešingai, sildenafilas, kai jis vartojamas su nitratais, rodo net keturis kartus didesnį sistolinio kraujo spaudimo sumažėjimą, lyginant su placebu, ir tai verčia pateikti kontraindikacijas įdėtiniame lapelyje ir perspėjimus tam tikriems pacientams.

Selektyvūs PDE5 inhibitoriai yra labai įvairios cheminės struktūros, ir jų panaudojimas šiame išradime priklauso ne tiek nuo cheminės struktūros, kiek nuo čia aprašomų kritinių parametrų. Tačiau tinkamiausius junginius, turinčius reikalaujamą veiksmingumą ir selektyvumą, galima nesunkiai nustatyti panaudojant čia aprašytus testus, paimtus iš Daugan U.S. patento Nr. 5.859.006, Daugan et ai. U.S. patento Nr. 5.981.527 ir Daugan et al. U.S. patento Nr. 6.001,847, kurie duodami kaip literatūros šaltiniai.

Daugan U.S. patento Nr. 5.859.006 ir Daugan et al. U.S. patento Nr. 5.981.527 tinkamiausi junginiai yra atvaizduojami struktūrine formule (II):

kurioje R° yra pasirinktas iš grupės, susidedančios iš vandenilio, halonenn ir O-ralkilo^-

R¹ yra pasirinktas iš grupės, susidedančios iš vandenilio, C,.₆alkilo, C₂-6alkenilo, C₂.₆alkinilo, halogen-Ci.₆alkilo, C₃.₈cikloalkilo, . Cs-sCikloalkilCv ₃alkilo, arilCi.₃alkilo, kuriuose arilas yra fenilas arba fenilas, turintis 1*3 pakaitus, pasirinktus iš grupės, susidedančios iš halogeno, Ci-₆alkilo, Cv ₆alkoksigrupės, metiiendioksigrupės ir jų mišinių, ir heteroarilCi.₃arilo, kuriame heteroarilas yra tienilas, furilas arba piridilas, ir kiekviename iš jų gali būti 1-3 pakaitai, pasirinkti iš grupės, susidedančios iš halogeno, Ci.₆alkilo, Ci-ealkoksigrupės ir jų mišinių;

R² reiškia monociklini aromatinį žiedą, kuriame gali būti pakaitų, pasirinktą iš benzeno, tiofeno, furano ir piridino, arba biciklinį žiedą, kuriame gali būti pakaitų,

I A

I prijungtą prie likusios molekulės dalies per vieną iš benzeno žiedo anglies atomų, ir kuriame kondensuotas žiedas A yra sotus, dalinai nesotus arba pilnai nesotus 5- arba 6-naris žiedas, susidedantis iš anglies atomų ir galimai 1-3 heteroatomų, pasirinktų iš deguonies, sieros ir azoto;

R³ reiškia vandenilį arba Ci.₃alkilą, arba R¹ ir R³ kartu reiškia 3- arba 4narę alkilo arba alkenilo grandinę; ir jų druskos bei solvatai.

Kiti tinkamiausi (II) formulės junginiai yra tokie, kuriuose:

R° yra vandenilis, halogenas arba Ci-₆alkilas;

R’ yra vandenilis arba Ci.₆alkilas;

R² yra biciklinis žiedas

kuriame gali būti vienas arba daugiau pakaitų, pasirinktų iš halogeno ir Ci.₃alkilo; ir

H yra vandenins aroa G^: alkilas.

Toliau duodamoje lentelėje parodytos būdingų selektyvių PDE5 inhibitorių, aprašytų U,S, patente Nr. 5.859.006, PDE5 ir PDE6 ICso reikšmės, nustatytos pagal čia aprašytas metodikas.

lentelė

Junginys	PDE5 IC₅₀ (nM)	PDE6 IC₅₀ (nM)	PDE6/PDE5
1	5	663	133
2	2	937	469
3	2	420	210
4	5	729	146
5	2,5	3400	1360

lentelėje duotas 5 junginys turi struktūrinę formulę (I) ir, be to, jo IC₅o PDE1c atžvilgiu yra 10000, o PDE1c/PDE5 yra 4000.

lentelėje duotų 1-5 junginių struktūros atitinka (II) struktūrinę formulę, kurioje R°, R¹, R² ir R³ yra tokie:

lentelėje pateikti duomenys rodo, kad (I) struktūrinės formulės junginys, kuriame R¹ yra vandenilis arba Ci.₆alkilas, R² yra

I A

O o R³ yra vandenilis, yra ypatingai tinkamas. Geriausia, kai A yra

Tinkamiausi junginiai yra:

(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-heksahidro-2-metil-6-(3,4-metilendioksifenil)pirazino[2',1 ’:6,1 ]pirido[3,4-b]indol-1,4-dionas; ir (3S,6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-heksahidro-2,3-dimetil-6-(3,4-metilendioksifenil)pirazino[2',1’:6,1 ]pirido[3,4-b]indol-1,4-dionas; bei jų fiziologiškai priimtinos druskos ir solvatai (pvz. hidratai).

Kitų šiam išradimui tinkančių junginių pavyzdžiais yra junginiai, aprašyti Daugan et ai. U.S. patente Nr. 6.001.847 ir WO 97/43287, kurie čia duodami kaip literatūros šaltiniai.

Dar kitų junginių, kuriuos galima naudoti šiame išradime, pavyzdžiais yra junginiai, aprašyti PCT paraiškoje PCT/EP98/06050, pažymėtoje U.S., pavadintoje “Cheminiai junginiai”, išradėjai A. Bombrun ir F. Gellibert, kurios aprašymas specialiai pridedamas kaip literatūros šaltinis. Šios klasės junginiai turi struktūrinę formulę (III):

kurioje C reiškia 5- arba 6-narę heterociklinę grupę, turinčią bent vieną sieros;

R¹² reiškia vandenilį arba halogeną;

R¹³ yra pasirinktas iš grupės, susidedančios iš vandenilio, nitrogrupės (NO₂), trifluormetilo, trifluormetoksigrupės, halogeno, cianogrupės (CN),

5- arba 6-narės heterociklinės grupės, turinčios bent vieną heteroatomą, pasirinktą iš grupės, susidedančios iš deguonies, azoto ir sieros, kurioje kaip pakaitai gali būti C(=O)OR^a arba Ci-₄alkilas,

Ci.₆alkilo, kuriame kaip pakaitas gali būti OR^h,

Ci.₃alkoksigrupės,

C(=O)R^h,

OC(=O)OR^h,

C(=O)OR^h,

C,.₄alkilenHet,

C,.₄alkilenC(=O)OR^a,

OC, .₄alkilenC(=O)OR^a,

Ci.₄alkilenOC₁.₄alkilenC(=O)OR^a,

C(=O)NR^ISO₂R',

C(=O)Ci.₄alkilenHet,

C,.₄alkilenNR^hRⁱ,

C₂.₄alkenilenNR^hR',

C(=O)NR^hR¹,

C(=O)NR^hR',

C(=O)NR^hC,.₄alkilenOR',

C(=O)NR^hC,.₄alkilenHet,

OR',

OC₂.₄alkilenNR^hR',

OC,.₄alkilenCH(OR^h)CH₂NR^hRⁱ,

OC,.₄alkilenHet,

OCi.₄alkilenOR^h,

OC₂.₄alkilenNR^hC(=O)OR^h,

NR^hR',

NR^hCi.₄alkilenNR^hR',

NR^hC(=O)R',

NR^hC(=O)NR^hR',

N(SO₂Ci.₄alkilas)₂,

NR^h(SO₂Ci.₄alkilas),

SO₂NR^hR' ir OSO₂trifluormetilas;

R¹⁴ yra pasirinktas iš grupės, susidedančios iš vandenilio, halogeno, OR^h, Ci.₆alkilo, NO₂ ir NR^hR';

arba R¹³ ir R¹⁴ kartu paimti sudaro 5- arba 6-nario žiedo, kuriame gali būti mažiausiai vienas heteroatomas, 3- arba 4-narę alikleno arba alkenileno grandinės dali;

R¹⁵ yra pasirinktas iš grupės, susidedančios iš vandenilio, halogeno, NO₂, trifluormetoksigrupės, Ci.₆alkilo, OCi-6alkilo ir C(=O)OR^h;

R¹⁶ yra vandenilis, arba R¹⁵ ir R¹⁶ kartu paimti sudaro 5- arba 6-nario žiedo, kuriame gali būti mažiausiai vienas heteroatomas, 3- arba 4-narę aiikleno arba alkenileno grandinės dalį;

Het reiškia 5- arba 6-narę heterociklinę grupę, turinčią bent vieną heteroatomą, pasirinktą iš grupės, susidedančios iš deguonies, azoto ir sieros, kurioje kaip pakaitas gali būti Ci.₄alkilas;

R^h ir R' gali būti vienodi arba skirtingi ir yra nepriklausomai pasirinkti iš vandenilio ir Ci.₆alkilo;

R' reiškia fenilą arba C₄.₆cikloalkilą, ir fenile arba C₄-6Cikloalkile kaip pakaitai gali būti vienas arba daugiau halogeno atomų, viena arba daugiau C(=O)OR^h arba viena arba daugiau OR^h;

n yra sveikasis skaičius 1,2 arba 3; ir m vra sveikasis skaičius 1 arba 9 bei šių junginių druskos ir solvatai (pvz. hidratai).

PREPARATAI Žmogaus PDE5 gavimas

Žmogaus PDE5 rekombinantinis produkavimas buvo vykdomas iš esmės pagal U.S. patento Nr. 5.702.936, čia pridedamo kaip literatūros šaltinis, 7 pavyzdyje duotą aprašymą, išskyrus tai, kad buvo naudojamas mielių transformacijos vektorius, kuris buvo gautas iš pagrindinės ADH2 plazmidės, aprašytos V. Price et ai., Methods in Enzymology, 1985, pages 308-318 (1990), įterpiant mielių ADH2 promotoriaus ir baigmės sekas, o ne ADH1 promotoriaus ir baigmės sekas, o Saccharomyces cerevisiase šeimininkas buvo turintis proteazės deficitą BJ2-54 kamienas, deponuotas 1998 m. rugpjūčio mėn. 31 d. American Type Culture Collection, Manassas, Virginia, su depozito numeriu ATCC 74465. Transformuotos šeimininko ląstelės buvo auginamos 2X SC-Ieu terpėje, pH 6,2, su mikroelementais ir vitaminais. Po 24 vai. pridedama YEP terpės, turinčios glicerolio, iki 2X YEP/3 % glicerolio galutinės koncentracijos. Maždaug po 24 valandų ląstelės buvo surenkamos, plaunamos ir laikomos -70 °C temperatūroje.

Ląstelių suspaustos nuosėdos (29 g) buvo atitirpdomos ant ledo, pridėjus lygų tūrį ūžavimo buferio (25 mM Tris-HCI, pH 8, 5 mM MgCI₂, 0,25 mM ditiotreitolio, 1 mM benzamidino ir 10 μΜ ZnSO₄). Ląstelės buvo Iizuojamos mikroskystintuve, N₂ atmosferoje, esant 138000 kPa slėgiui. Lizatas buvo centrifuguojamas ir nufiltruojamas per 0,45 μπη uždedamus filtrus. Filtratas buvo supiltas į 150 ml Q Sepharose Fast Flow (Pharmacia) kolonėlę. Kolonėlė plaunama 1,5 tūrio A buferio (20 mM Bis-Tris propano, pH 6,8, 1 mM MgCI₂, 0,25 mM ditiotreitolio, 10 μΜ ZnSO₄) ir eliuuojama 125 mM NaCI A buferyje laipsnišku gradientu, o po to 125-1000 mM NaCI A buferyje linijiniu gradientu.

Aktyviosios frakcijos iš linijinio gradiento buvo supilamos i 180 ml hidroksiapatito kolonėlę B buferyje (20 mM Bis-Tris propano, pH 6,8, 1 mM MgCI₂, 0,25 mM ditiotreitolio, 10 μΜ ZnSO₄ ir 250 ml KCI). Supylus medžiagą, kolonėlė nlauriamA 2 tūriais R hoforio ir oiiuuoiama 0-195 mM kalio fosfato R buferyje linijiniu gradientu. Aktyviosios frakcijos sumaišomos, nusodinamos % amonio sulfatu ir resuspenduojamos C buferyje (20 mM Bis-Tris propano, pH 6,8, 125 mM NaCI, 0,5 mM ditiotreitolio ir 10 μΜ ZnSO₄). Suspensija supilama j 140 ml Sephacryl S-300 HR kolonėlę ir eiiuuojama C buferiu. Aktyviosios frakcijos praskiedžiamos iki 50 % glicerolio ir laikomos 20 °C temperatūroje. Gautieji preparatai buvo maždaug 85 % grynumo (pagal SDS-PAGE).

PDE aktyvumo nustatymas

PDE5 aktyvumas gali būti išmatuojamas panaudojant žinomus standartinius testus. Pavyzdžiui, bet kurios PDE aktyvmas gali būti nustatomas taip. PDE testas, naudojant atskyrimo per medžio anglį metodiką, buvo atliktas iš esmės pagal Loughney et ai., (1996) The Journal of Biological Chemistry, 277:796-806 aprašytą metodiką. Šiame teste aktyvioji PDE5 paverčia [³²P]cGMP į [³²P]5’GMP proporcingai esančiam aktyviosios PDE5 kiekiui. Tada [³²P]5'GMP kiekybiškai paverčiama j laisvą [³²Pj fosfatą ir nežymėtą adenoziną veikiant gyvatės nuodų 5'-nukleotidaze. Taigi, išlaisvinto [³²Pj fosfato kiekis yra proporcingas fermento aktyvumui. Bandymas atliktas 30 °C temperatūroje 100 μΙ reakcijos mišinio, turinčio (galutinės koncentracijos) 40 mM Tris-CI (pH 8,0), 1 μΜ ZnSO4, 5 mM MgCI2 ir 0,1 mg/ml jaučio serumo albumino. PDE5 kiekis yra toks, kad būtų gaunama <30 % viso substrato hidrolizės (tiesinės testo sąlygos). Bandymas pradedamas pridedant substrato (1 mM [³²PjcGMP), ir mišinys inkubuojamas 12 min. Po to pridedama 75 μρ Crotalus atrox nuodų ir inkubuojama dar 3 minutes (iš viso 15 minučių). Reakcija stabdoma pridedant 200 ml aktyvuotos medžio anglies (25 mg/ml suspensija 0,1 M NaH2PO₄, pH 4). Nucentrifugavus (750 x g 3 minutes), kad nusėstų medžio anglis, paimamas nuopilo mėginys radioaktyvumui matuoti scintiliaciniu skaitikliu ir išskaičiuojamas PDE5 aktyvumas. Preparatų aktyvumas buvo maždaug 3 μίτιοΙίρ cGMP hidrolizė per minutę miligramui baltymo.

Jaučio PDE6 gavimas

Jaučio PDE6 pateikė Dr. N. Virmaux, INSERM U338, Strasbourg. Jaučio tinklainės buvo paruošiamos pagal Virmaux et ai., FEBS Letters, 12(6), pp. 325-328 (1971) aprašymą ir žr. taip pat A. Sitaramayya et ai., Exp. Eye Res., 25, pp. 163-169 (1977). Trumpai tariant, jeigu nenurodyta kitaip, visos operacijos buvo atliekamos šaltyje ir neryškioje raudonoje šviesoje. Po paskerdimo akys buvo laikomos Šaltyje ir tamsoje iki keturių valandų.

Jaučio tinklainės išorinių segmentų (ROS) paruošimas pagrindinai buvo atliekamas pagal Schichi et ai., J. Biol. Chem., 224:529 (1969) aprašytas metodikas. Tipiškame eksperimente 35 jaučio tinklainės buvo sugrūstos grūstuve su 35 ml 0,066 M fosfatinio buferio, pH 7,0, pridedama sacharozės iki 40 %, po to homogenizuojama Potter homogenizatoriuje (20 smūgių aukštyn ir žemyn). Suspensija centrifuguojama esant 25000 x g 20 minučių. Suspaustos nuosėdos buvo homogenizuojamos 7,5 ml 0,006 M fosfatinio buferio (40 % sacharozėje) ir atsargiai padedamos po 7,5 ml fosfatinio buferio (be sacharozės). Centrifuguojama pakabinamu rotoriumi esant 45000 x g 20 min. ir gaunamos suspaustos nuosėdos, kurių apačia yra juoda, ir taip pat yra raudona juosta 0,066 M fosfato - 40 % sacharozės/0,066 M fosfato fazių riboje (negryni ROS). Fazių riboje esanti raudonoji medžiaga išimama, praskiedžiama fosfatiniu buferiu, sukama iki susidarant suspaustoms nuosėdoms ir vėl paskirstoma buferinėje 40 % sacharozėje kaip aprašyta aukščiau. Ši procedūra kartojama 2 arba 3 kartus, kol nebesusidaro suspaustų nuosėdų. Šie išgryninti ROS plaunami fosfatiniu buferiu ir pagaliau nusodinami sukant 25000 x g 20 min. Tada visos medžiagos laikomos užšaldytos iki naudojimo.

Hipotoniniai ekstraktai buvo pagaminami suspenduojant išskirtus ROS 10 mM Tris-CI, pH 7,5, 1 mM EDTA ir 1 mM ditioeritritolo, po to centrifuguojama esant 100000 x g 30 minučių.

Nustatyta, kad preparato specifinis aktyvumas yra apie 35 nmolių cGMP hidrolizė per minutę miligramui baltymo.

PDE1c gavimas iš Spodoptera fugiperda ląstelių (Sf9)

Ląstelių nuosėdos (5 g) buvo atitirpdomos ant ledo su ūžavimo buferiu (50 mM MOPS, pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 0,1 mM CaCI₂, 1 mM DH, 2 mM benzamidino HCI, po 5 μg/ml pepstatino, leupeptino ir aprotenino). Ląstelės buvo lizuojamos praleidžiant per French ląstelių presą (SLM-Aminco) palaikant žemesnes už 10 °C temperatūras. Gautas ląstelių homogenatas buvo centrifuguojamas esant 36000 aps./min. 4 °C temperatūroje 45 minutes Beckmano ultracentrifugoje, naudojant T145 tipo rotorių. Nuopilas buvo atskirtas ir likusios suspaustos nuosėdos vėl suspenduojamos 40 ml soliubilizavimo buferio (ūžavimo buferis, turintis 1 M NaCi, 0,1 M MgCI₂, 1 mM CaCI₂, 20 ųg/ml kalmodulino ir 1 % sulfobetaino SB12 (Z3-12)) ultragarso pagalba, panaudojant VibraCell tiunerj su mikrogaliuku 3 x 30 sekundžių. Ši operacija buvo atliekama šaldant susmulkinto ledo/druskos mišiniu. Po poveikio ultragarsu mišinys buvo lėtai maišomas 30 minučių 4 °C temperatūroje kad būtų užbaigtas surištų su membrana baltymų soliubilizavimas. Šis mišinys buvo centrifuguojamas Beckmano ultracentrifuga, naudojant T145 tipo rotorių, esant 36000 aps./min., 45 minutes. Nuopilas praskiedžiamas ūžavimo buferiu, turinčiu 10 ųg/ml kalpaino inhibitoriiaus I ir II, Nusodintas baltymas buvo centrifuguojamas 20 min., esant 9000 aps./min., Beckmano JA-10 rotoriuje. Po to gautas nuopilas buvo leidžiamas j Mimetic Blue AP agarozės chromatografiją.

Norint paleisti Mimetic Blue AP agarozės kolonėlę, derva iš pradžių buvo blokuojama, panaudojant 10 Įkrovos tūrių 1 % polivinilpirolidino (kurio molekulinė masė 40000), kad būtų užblokuotos nespecifinio surišimo vietos. Netvirtai surištas PVP-40 buvo pašalinamas, plaunant 10 Įkrovos tūrių 2M NaCi ir 10 mM natrio citrato, pH 3,4. Prieš pat supilant soliubilizuotą PDE1c mėgini, kolonėlė buvo pusiausvyrinama 5 įkrovos tūriais kolonėlės buferio A (50 mM MOPS, pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 5 mM MgCI₂, 0,1 mM CaCI₂, 1 mM DTT, 2 mM benzamidino HCI).

AhHį |hilt7i intpc? rpęnin\/o r-ι i Ιχ,οΙοΓ-ιΑΙη C'SS.P/ 2 srovės greičiui, su ciklo pakartojimu taip, kad visas mėginys buvo perleidžiamas 4-5 kartus per 12 valandų. Pabaigus įkrovimą, kolonėlė buvo plaunama 10 kolonėlės tūrių kolonėlės buferio A, po to 5 kolonėlės tūriais kolonėlės buferio B (kolonėlės buferis A, turintis 20 mM 5'-AMP), ir po to 5 kolonėlės tūriais kolonėlės buferio C (50 mM MOPS, pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄,

0,1 mM CaCI₂, 1 mM ditiotreitolio ir 2 mM benzamidino HCI). Fermentas buvo eliuuotas į tris viena po kitos einančias frakcijas. Pirmąją frakciją sudarė fermentas iš plovimo 5 įkrovos tūriais kolonėlės buferio C, turinčio 1 mM cAMP. Antrąją frakciją sudarė fermentas iš plovimo 10 įkrovos tūrių kolonėlės buferio C, turinčio 1 M NaCI. Galutinę frakciją sudarė fermentas iš plovimo 5 įkrovos tūriais kolonėlės buferio C, turinčio 1 M NaCI ir 20 mM cAMP.

Buvo surinktos aktyvaus fermento frakcijos, ir ciklinis nukleotidas pašalintas įprastine gelfiltracine chromatografija arba chromatografija per hidroksiapatito dervas. Po ciklinių nukleotidų pašalinimo fermento frakcijos buvo dializuojamos į dializės buferį, turintį 25 mM MOPS, pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 500 mM NaCI, 1 mM CaCI₂, 1 mM ditiotreitolio, 1 mM benzamidino HCI, o po to dializuojamos į dializės buferį, turintį 50 % glicerolio. Fermentas buvo greitai užšaldomas sausu ledu ir laikomas -70 °C temperatūroje.

Gautų preparatų grynumas pagal SDS-PAGE buvo >90 %. Šių preparatų specifinis aktyvumas buvo apie 0,1-1,0 ųmol cAMP hidrolizės per minutę vienam miligramui baltymo.

ICso reikšmės nustatymas

Parametras, tinkantis PDE5 ir/arba PDE1c ir PDE6 konkurencinio fermento inhibitoriaus gebai įvertinti, yra inhibicijos konstanta, t.y. K,. Šis parametras gali būti apytikriai įvertintas, nustatant IC₅o, kuri yra inhibitoriaus koncentracija, duodanti 50 % fermento inhibavimą viename dozės-atsako eksperimente toliau nurodytomis sąlygomis.

Inhibitoriaus koncentracija visada yra daug didesnė nei fermento koncentracija, ir todėl laisvo inhibitoriaus koncentracija (kuri yra nežinoma) gali būti prilyginama bendrai inhibitoriaus koncentracijai (kuri yra žinoma).

Pasirenkamas tinkamas inhibitoriaus koncentracijų intervalas (t.y.

eksperimente yra bent keletą kartų mažesnės ir keletą kartų didesnės koncentracijos nei K,). Paprastai inhibitoriaus koncentracijos yra nuo 10 nM iki 10 μΜ.

Fermento ir substrato koncentracijos yra pasirenkamos taip, kad mažiau nei 20 % substrato yra sunaudojama nesant inhibitoriaus (su sąlyga, jei, pvz., maksimali substrato hidrolizė yra nuo 10 iki 15 %), kad fermento aktyvumas būtų apytikriai pastovus viso bandymo metu.

Substrato koncentracija yra mažesnė nei viena dešimtoji Michaelio konstantos (Km). Šiomis sąlygomis IC₅o bus labai artima K_b Taip yra dėl Cheng-Prusoff’o lygties, rišančios šiuos du parametrus: IC₅o = K(1 +S/K_m), esant (1 + S/Km) apytikriai lygiam vienetui, kai S/Km reikšmė yra maža.

IC50 reikšmė yra įvertinama iš duomenų taškų, pritaikant duomenis tinkamam fermento ir inhibitoriaus sąveikos modeliui. Kai žinoma, kad tokia sąveika yra paprasta inhibitoriaus ir substrato konkurencija, gali būti naudojamas dviparametrinis modelis:

y = A/(1+x/B), kur y yra fermento aktyvumas, išmatuotas esant inhibitoriaus koncentracijai x,

A yra aktyvumas nesant inhibitoriaus, o B yra IC₅o. Žr. Y. Cheng et al., Biochem. Pharmacol., 22:3099-3108 (1973).

Šio išradimo inhibitorių poveikis j PDE5 ir PDE6 preparatų fermentinį aktyvumą, kaip aprašyta aukščiau, buvo įvertintas kiekviename iš dviejų bandymų, kurie skyrėsi vienas nuo kito pagrindinai kiekiais ir davė iš esmės tokius pačius IC₅o reikšmių rezultatus. Abiejuose bandymuose buvo modifikuota VVells et ai., Biochim. Biophys. Actą, 384:430 (1975) metodika.

Pirmasis bandymas buvo atliekamas bendrame 200 μΙ tūryje, turinčiame 50 mM Tris, pH 7,5, 3 mM Mg acetato, 1 mM EDTA, 50 pg/ml gyvatės nuodų nukleotidazės ir 50 nM [³H]-cGMP (Amersham). Šio išradimo junginiai buvo ištirpinti DMSO, kurio kiekis galutiniame bandymo tirpale sudarė 2 %.

Mėginiai buvo inkubuojami 30 minučių 30 °C temperatūroje ir reakcija stabdoma pridedant 800 μΙ 10 mM Tris, pH 7,5, 10 mM EDTA. 10 mM teofilino, 0,1 mM adenozino ir 0,1 mM guanozino. Mišiniai buvo supiistomi į

0,5 ml QAE Sephadex kolonėles ir eliuuojama 2 ml 0,1 M formiato (pH 7,4).

Išbėgusio tirpalo radioaktyvumas buvo matuojamas scintiliaciniu skaitikliu

Optiphase Hisafe 3.

Antrasis, mikroplokštelinis PDE bandymas buvo atliekamas naudojant Multiscreen plokšteles ir vakuminj įtaisą. Mėginyje (100 μΙ) buvo 50 mM Tris pH 7,5, 5 mM Mg acetato, 1 mM EDTA ir 250 ąg/ml gyvatės nuodų nukleotidazės. Kiti reakcijos mišinio komponentai buvo tokie kaip aprašyta aukščiau. Inkubavimo pabaigoje visas mėginio tūris buvo supilamas Į QAE Sephadex mikrokolonėlių plokštelę filtruojant. Laisvasis radioaktyvumas buvo eliuuojamas 200 μ! vandens; jo 50 μΙ alikvotos buvo analizuojamos scintiliacijų skaitikliu, kaip aprašyta aukščiau.

Toliau duodami pavyzdžiai yra skirti geresniam išradimo preparatų apibūdinimui. Šio išradimo apimtis neturi būti laikoma tik kaip susidedanti iš toliau duodamų pavyzdžių.

pavyzdys (I) struktūrinės formulės junginys buvo pagamintas pagal U.S. patento 5.859.006 aprašymą, o jo turinčios tabletės pagamintos naudojant šlapią granuliavimą. Povidonas buvo ištirpintas vandenyje pagaminant 10 % tirpalą. Veiklusis junginys, mikrokristalinė celiuliozė, natrio kroskarmeliozė ir natrio lauriisulfatas buvo sudėti j didelio poslinkio maišyklę ir maišyta 2 minutes. Milteliai buvo šlapiai granuliuojami su povidono tirpalu ir papildomu vandens kiekiu, reikalingu visiškam sugranuliavimui, Gautas mišinys džiovinamas džiovykloje su verdančiu sluoksniu, turinčioje oro įleidimą, 70 °C ± 5 °C temperatūroje, kol svorio sumažėjimas džiovinimo metu buvo mažesnis už

2,5 %. Granulės buvo perleidžiamos per Comil su tinkama uždanga (arba sietu) ir sudedamos i tinkamą maišyklę. Papildoma natrio kroskarmeliozė, natrio lauriisulfatas ir koloidinis bevandenis silicio dioksidas perleidžiami per tinkamą sietą (pvz., 500 mikronų), sudedami Į maišyklę ir maišoma 5 minutes, įdedamas rnann'n «ųosi-at»·? ^|r o M'-'C'e nmoo.-.Ho'.oo tikslinius 250 mg kompresijos/svorio vienetus, naudojant 9 mm apvalų statmeną įgaubtą įtaisą.

Šios šerdinės tabletės buvo dengiamos vandenine Opadry OY-S-7322 suspensija, naudojant Accelacota (arba panašią dengimo vonią) su oro įleidimu nuo 50 °C iki 70 °C temperatūroje, kol tabletės svoris padidėjo apytikriai 8 mg. Opadry OY-S-7322 turi metilhidroksipropilceliuliozės Ph.Eur., titano dioksido Ph.Eur., triacetino USP. Opadry padidina kiekvienos tabletės svorį iki maždaug 258 mg. Ant kiekvienos tabletės uždėtos plėveiinės dangos kiekis gali būti mažesnis negu nurodyta priklausomai nuo proceso efektyvumo.

Tabletė buvo supakuotos į ruplėtus paketus ir i juos įdėtas įdėtinis lapelis, aprašantis junginio efektyvumą ir rizikos faktorius.

Komponentas	Receptūra (mg vienai tabletei)
Selektyvus PDE5 inhibitorius¹	1	5
Hidroksipropilmetilceliuliozės ftaiatas	1	5
Mikrokristalinė celiuliozė	221,87	213,87
Natrio kroskarmeliozė	5,00	5,00
Natrio laurilsulfatas	2,50	2,50
Povidono sulfatas K30	9,38	9,38
Grynintas vanduo, USP (vanduo irigacijai)	q.s.	q.s.
Natrio kroskarmeliozė	5,00	5,00
Natrio laurilsulfatas	2,50	2,50
Koloidinis bevandenis silicio dioksidas	0,50	0,50
Magnio stearatas	1,25	1,25
Visa tabletės šerdis	250,00	250,00
(Plėvelinė danga Opadry OY-S-7322)	maždaug 8 mg	maždaug 8 mg

¹ (I) struktūrinės formulės junginys pavyzdys

Gaminant padengtą dozuotą formą, turinčią 10 mg (I) formulės junginio, naudojama tokia kompozicija;

Ingredientas	Kiekis (mg)
Granuliatas Selektvvus POF5 inhibitorius’	10.00
Laktozes monohiaratas	ΐοό,όυ
Laktozės monohidratas (išdžiovintas išpurškimo būdu)	25,00

Hidroksipropilceliulioze	4,00
Natrio kroskarmelioze	9,00
Hidroksipropilceliulioze (EF)	1,75
Natrio laurilsulfatas Išoriniai milteliai	0,70 35,00
Mikrokristalinė celiuliozė (granular-102)	37,50
Natrio kroskarmelioze	7,00
Magnio stearatas (augalinis)	1,25 Viso 250 mg
Plėvelinė danga	(apytikriai) 11,25

Tablečių gamyboje yra naudojamas grynintas vanduo, USP. Šis vanduo yra pašalinamas gamybos metu ir galutiniame produkte lieka minimalūs jo kiekiai.

Tabletės yra gaminamos naudojant šlapio granuliavimo procesą. Toliau duodamas laipsniškas šio proceso aprašymas. Vaistas ir pagalbinės medžiagos, kurios bus granuliuojamos, yra kruopščiai išsijojamos. Sausas selektyvus PDE5 inhibitorius yra sumaišomas su sausu laktozės monohidratu (išdžiovintas išpurškimo būdu), hidroksipropilceliulioze, natrio kroskarmelioze ir laktozės monohidratu. Gautas miltelių mišinys granuliuojamas su vandeniniu hidroksipropilceliuliozės ir natrio laurilsulfato tirpalu, naudojant Powrex arba kitokį tinkamą didelio poslinkio granuliatorių. Norint gauti pageidaujamą galutini rezultatą, galima pridėti vandens. Šlapio granuliato gabaliukų susmulkinimui ir išdžiovinimo palengvinimui gali būti naudojamas malimas. Šlapias granuliatas yra džiovinamas naudojant arba džiovyklą su verdančiu sluoksniu, arba džiovinimo krosnį. Išdžiovinus medžiagą, ji gali būti sijojama, norint atskirti didelius aglomeratus. Mikrokristalinė celiuliozė, natrio kroskarmelioze ir magnio stearatas yra kruopščiai išsijojami ir supilami j šias sausas išsijotas granules. Šios pagalbinės medžiagos ir sausas granuliatas maišomi iki visiško išsimaišymo naudojant vartyklę, juostinę-sraigtinę maišyklę arba kitą tinkamą maišymo įrangą. Maišymo procesą galima išskirti i dvi fazes. Mikrokristalinė celiuliozė, natrio kroskarmelioze ir išdžiovintas granuliatas sudedami j maišyklę ir maišomi pirmą kartą, po to i ši granuliatą r, t’i Π z-. ) t nf r, c •'•'''z*' i ►' t,-' i r— ·— I z z-,

U k CA Ulo H » t tL-U kj H I O. l kl Cį i k ką.

Po to sumaišytas granuliatas presuojamas tabletėmis, naudojant rotorinę presavimo mašiną. Šerdinės tabletės padengiamos plėvele, naudojant atitinkamo apdailos mišinio vandeninę suspensiją dengimo vonioje (pvz., Acceta Cota). Padengtos tabletės gali būti šiek tiek apdulkinamos talku norint pagerinti tolesnio darbo su jomis charakteristikas.

Tabletės supilstomos j plastikinius konteinerius (30 tablečių konteineryje) ir pridedamas įdėtinis lapelis, aprašantis junginio efektyvumą ir rizikos faktorius.

pavyzdys

Gaminant padengtą dozuotą formą, turinčią 5 mg (I) formulės junginio, naudojama tokia kompozicija.

Ingredientas	Kiekis (mg)
Granuliatas
Selektyvus PDE5 inhibitorius'	2,50
Laktozės monohidratas	79,395
Laktozės monohidratas (išdžiovintas išpurškimo būdu)	12,50
Hidroksipropilceliuliozė	2,00
Natrio kroskarmeliozė	4,50
Hidroksipropilceliuliozė (EF)	0,875
Natrio laurilsulfatas	0,35
Išoriniai milteliai
Mikrokristaline celiuliozė (granular-102)	18,75
Natrio kroskarmeliozė	3,50
Magnio stearatas (augalinis)	0,63 Viso 125 mg
Plėvelinė danga	(apytikriai) 6,875

pavyzdžio dozuota forma buvo pagaminta taip pat kaip ir 2 pavyzdžio dozuota forma.

pavyzdys f----i ingreaientas

Kapsulė su tirpalu | mg/kapsulei i procentai (%) i

Selektyvus PDE5 inhibitorius¹	10	2
PEG400 NF	490	98
Užpildo masė	500	100

Žefatininės kapsulės tiksliai užpildomos, jleidžiant tikslų prieš tai ištirpintos vaistinės kompozicijos tūrį į dalinai užlydytos kapsulės ertmę. Tuoj pat po vaistinės kompozicijos tirpalo suleidimo kapsulė užlydoma šildant.

Kapsulės sudedamos į plastikinius konteinerius ir pridedami įdėtiniai lapeliai.

pavyzdys

Šis tyrimas buvo atsitiktinio parinkimo, dvigubo aklumo, kontroliuotas pagal placebą, dvigubo sukeitimo klinikinės farmakologijos vaistų sąveikos tyrimas, kuriame įvertinami selektyvaus PDE5 inhibitoriaus - tiriamojo vaisto (t.y. (I) struktūrinės formulės junginio) - ir trumpalaikio veikimo nitratų vienalaikio vartojimo hemodinaminiai efektai bandyme su sveikais vyriškos lyties savanoriais, Šiame bandyme subjektai kasdien gavo arba 10 mg tiriamojo vaisto, arba placebo dozę septynias dienas. Šeštą arba septintą dieną subjektai gavo poliežuvinio nitroglicerino (0,4 mg), būdami aukštielninki ant nuožulnaus stalo. Nitroglicerinas buvo duodamas praėjus 3 valandoms po tiriamojo vaisto gavimo, ir visi subjektai laikė nitroglicerino tabletę po liežuviu tol, kol ji visiškai ištirpo. Subjektai buvo pakeliami iki 70° aukštyn galva kas 5 minutės iš viso 30 minučių, matuojant kraujo spaudimą ir širdies plakimų skaičių. Tarp 22 sveikų vyriškos lyties subjektų (nuo 19 iki 60 metų amžiaus) prašymų nutraukti bandymą nebuvo.

Pagal preliminarinę šio bandymo analizę, tiriamasis vaistas buvo gerai pernešamas ir rimtų nepalankių šalutinių Įvykių nebuvo. Laboratoriniuose rizikos laipsnio arba 12 takelių EKG įvertinimuose su šiuo vaistu susijusių pokyčių nebuvo. Labiausiai paplitę pašaliniai poveikiai buvo galvos skausmas, disoensiia ir nuoaros skausmas Tyrimas pararia minimalu nnvoivi į vidurkini maksimalų nitroglicerino sukelto sistolinio kraujo spaudimo sumažėjimą ir maksimalų nitroglicerino sukelto sistolinio kraujo spaudimo sumažėjimą visiems pacientams.

pavyzdys

Dviejuose atsitiktinio parinkimo, dvigubo aklumo, kontroliuotuose pagal placebą tyrimuose (I) struktūrinės formulės junginys buvo skiriamas jo reikalingiems pacientams tiek kasdieninio dozavimo dozių intervale, tiek ir pagal lytinės sueities ir lytinio santykiavimo poreikio terapiją namų aplinkoje. (I) struktūrinės formulės junginio 5-20 mg dozės buvo veiksmingos ir nedavė išraudimo ir jokių nusiskundimų dėl regėjimo anomalijų. Buvo rasta, kad (I) struktūrinės formulės junginio 10 mg dozė buvo pilnai veisminga ir turėjo minimalius pašalinius efektus (nebuvo išraudimo ir pranešimų apie mėlynos spalvos regėjimą).

Erekcijos funkcija buvo įvertinama pagal tarptautini erekcijos funkcijos indeksą (IIEF) (Rosen et ai., Urology, 49, pp. 822-830 (1997)), lytinių mėginimų dienoraščius ir apklausą dėl visiško pasitenkinimo. (I) struktūrinės formulės junginys žymiai pagerino erekcijos funkciją pagal visus vertinimo kriterijus, ir “pagal poreiki”, ir pagal kasdieninio dozavimo režimą (I) struktūrinės formulės junginys žymiai pagerino erekcijos funkciją 1-20 mg dozių intervale.

pavyzdys

Trečiasis klinikinis tyrimas buvo atsitiktinio parinkimo, dvigubo aklumo, kontroliuotas pagal placebą tyrimas, naudojant (I) struktūrinės formulės junginį (tiriamąjį vaistą), skiriamą “pagal poreikį pacientams, turintiems vyro erekcijos funkcijos sutrikimą. Tiriamasis vaistas buvo skiriamas astuonias savaites vyro erekcijos funkcijos sutrikimui (ED) gydyti. Erekcijos funkcijos sutrikimas (ED) yra apibūdinamas kaip pastovus negalėjimas pasiekti ir/arba išlaikyti erekciją, kurios pakaktų lytiniam aktui atlikti. Dozavimas “pačiai poreikį yra apibrėžiamas kaip tiriamojo vaisto vartojimas laikas nuo laiko prieš numatomą lytinį aktyvumą.

Tiriamaisiais subjektais buvo 212 vyrų mažiausiai nuo 18 metų amžiaus, turinčių erekcijos funkcijos sutrikimą nuo silpnai išreikštos iki rimtos formos. Tiriamasis vaistas buvo duodamas peroraiiniu būdu kaip koprecipitato tabletės, pagamintos pagal Butler U.S. patentą Nr. 5.985.326. Tiriamasis vaistas buvo vartojamas 2 mg, 5 mg, 10 mg ir 25 mg dozėmis “pagal poreikį” ir ne dažniau kaip vieną kartą per 24 valandas. Gydymas bet kokiais nitratais, azotiniais priešgrybeliniais vaistais (pvz. ketokonazolu arba itrakonazolu), varfarinu, eritromicinu arba priešandrogenais tyrimo metu nebuvo leidžiamas. Joks kitas gydymas patvirtintais arba eksperimentiniais vaistais, kitais būdais arba priemonėmis, naudojamomis ED gydymui, nebuvo leidžiamas. Keturiasdešimt vienas subjektas gavo placebą.

Du pirminiai veiksmingumo kintamieji buvo subjekto sugebėjimas Įsiskverbti j jo partnerę ir jo sugebėjimas išlaikyti erekciją santykiavimo metu, kaip matuojama pagal tarptautini erekcijos funkcijos indeksą (IIEF). IIEF klausimyne yra 15 klausimų, ir jis yra trumpas ir patikimas erekcijos funkcijos matas. Žr, R.C. Rosen et ai., Urology, 49, pp. 822-830 (1997).

Antriniai veiksmingumo kintamieji buvo IIEF srities erekcijos funkcijos Įvertinimo balai, orgazmo funkcija, lytinis potraukis, pasitenkinimas lytiniu aktu ir bendras pasitenkinimas; paciento sugebėjimas pasiekti erekciją, sugebėjimas įkišti varpą j partnerės makštį, lytinio akto užbaigimas ejakuliacija, pasitenkinimas erekcijos kietumu ir bendras pasitenkinimas; visus šiuos rodiklius atspindi seksualinės sueities charakteristikos (SEP) dienoraštis ir bendro Įvertinimo klausimas, klausiamas gydymo periodo pabaigoje. SEP yra paciento kasdieninis dokumentas, kuriame aprašomas kiekvienas lytinis aktas šio tyrimo eigoje.

į šio tyrimo rizikos faktorių analizę buvo įtraukti visi tyrime dalyvaujantys subjektai ir buvo vertinami visi pranešami šalutiniai poveikiai ir klinikinių laboratorinių rodiklių pokyčiai, esminiai požymiai, fizinio tyrimo rezultatai ir elektrokardiogramos rezultatai

Vienas rezultatas - pacientai įvertino savo sugebėjimą įsiskverbti (IIEF 3 klausimas) kaip “beveik visada arba visada - buvo toks: 17,5 % placebo grupėje, 38,1 % - 2 mg grupėje, 48,8 % - 5 mg grupėje, 51,2 % - 10 mg grupėje ir 83,7 % - 25 mg grupėje. Palyginimas atskleidžia statistiškai reikšmingus sugebėjimo Įsiskverbti skirtumus tarp placebo ir visų tiriamojo vaisto dozių.

Kitas rezultatas - pacientai įvertino savo sugebėjimą išlaikyti erekciją (IIEF 4 klausimas) lytinių santykių metu kaip “beveik visada arba visada” buvo toks: 10,0 % placebo grupėje, 19,5 % - 2 mg grupėje, 32,6 % - 5 mg grupėje, 39,0 % - 10 mg grupėje ir 69,0 % - 25 mg grupėje. Palyginimas atskleidžia statistiškai reikšmingus sugebėjimo Įsiskverbti skirtumus tarp placebo ir trijų aukštesnių tiriamojo vaisto dozių.

Bendrai imant, šis tyrimas parodė, kad visos keturios tiriamojo vaisto dozės, būtent 2 mg, 5 mg, 10 mg ir 25 mg, pavartotos “pagal poreiki”, davė vyrų, sergančių erekcijos funkcijos sutrikimu, lytinio akto atlikimo pagerėjimą, lyginant su placebu, vertinant pagal IIEF, pagal pacientų dienoraščius, vertinančius sėkmingų lytinių santykių dažnį ir pasitenkinimą lytiniais santykiais, bei pagal bendrą įvertinimą. Šis pagerėjimas buvo parodytas dideliam skaičiui subjektų, tarp jų ir pacientai su rimtais erekcijos funkcijos sutrikimais. Dauguma kenksmingų šalutinių poveikių buvo nedideli arba vidutinio stiprumo. Svarbu pažymėti, kad nei vienam pacientui nebuvo pastebėti šalutiniai poveikiai, susiję su spalvų matymo sutrikimais.

Apibendrinti klinikinių tyrimų rezultatai parodė, kad (I) struktūrinės formulės junginio vartojimas efektyviai gydo vyrų erekcijos funkcijos sutrikimą, ką galima matyti iš šios lentelės:

IIEF EREKCIJOS FUNKCIJOS SRITIS (skirtumas nuo bazinės linijos)
Vienetinė dozė	n	vidurkis±SN	P
placebas	131	0,8+5,3
2 mg	75	3,9 + 6,1	<0,001
5 mg	79	6,6 + 7,1	<0,001

t n .t r' -z , , V _ o , /

I .<> <·>/-, j j υ,υυ l

25 mg	132	9,4+7,0	<0,001
50 mg	52	9,8±5,5	<0,001
100 mg	49	8,4+6,1	<0,001

n yra subjektų skaičius; SN yra standartinis nukrypimas.

Tačiau taip pat buvo pastebėta iš jungtinių klinikinių tyrimų, kad gydymo nenumatytų nepalankių įvykių procentas didėja, didėjant (I) struktūrinės formulės junginio vienetinei dozei, ką iliustruoja ši lentelė;

Gydymo nenumatyti nepalankus	įvykiai	(%)
		Vi	enetinė	dozė (	mg)
Įvykis	Placebas	2	5	10	25	50	100
Galvos skausmas	10	12	10	23	29	34	46
Virškinimo sutrikimas	6	3	14	13	19	20	25
Nugaros skausmas	5	3	3	15	18	24	22
Mialgija	3	0	3	9	16	20	29
Sloga	3	7	3	4	4	0	2
Konjunktyvitas	1	0	1	1	0	2	5
Akies voko patinimas	0	0	0	1	1	2	3
Išraudimas	0	0	0	0	0	3	7
Regėjimo anomalijos	0	0	0	0	0	0	0

Ši lentelė rodo nepalankių Įvykių padidėjimą vartojant 25-100 mg vienetines dozes. Taigi, nors ir buvo stebėtas ED gydymo 25-100 mg dozėmis efektyvumas, esant šioms dozėms turi būti atsižvelgiama i pastebėtus nepalankius Įvykius.

Pagal ši išradimą, 1-20 mg, geriau 2-20 mg, dar geriau 5-20 mg ir visų geriausia 5-15 mg dozė, vartojama iki daugiausia 20 mg per 24 valandas, ir efektyviai gydo ED, ir sumažia arba eliminuoja nepalankių šalutinių efektų atsiradimą. Svarbu pažymėti, kad nebuvo pastebėta jokių regėjimo anomalijų, o išraudimas buvo iš esmės pašalintas. Kas yra labiausiai nelaukta, apart individų ED gydymo (I) struktūrinės formules junginio 1-20 mg doze, esant minimaliems pašaliniams poveikiams, pagal šio išradimo būdą ir šio išradimo kompozicija nuo ED gali būti gydomi ir individai, kurie yra gydomi nitratais.

Šiame aprašyme pateikti šio išradimo principai, tinkamiausi įgyvendinimo variantai ir atlikimo būdai. Tikimasi, kad išradimas tuo bus apsaugotas, tačiau neturi būti laikoma, kad jis yra apribotas konkrečiomis atskleistomis formomis, nes jos turi būti laikomos daugiau iliustracinėmis nei apribojančiomis. Patyrę šios srities specialistai gali padaryti pakeitimus, nenukrypdami nuo išradimo sferos.

Claims

IŠRADIMO APIBRĖŽTIS

1. Pramoninis gaminys žmonių farmaciniam vartojimui, susidedantis iš:

(a) peroralinės dozuotos vaisto formos, turinčios nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus, besiskirantis tuo, kad turi (i) mažiausiai 100 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE6 inhibavimo

IC₅o reikšmių (ii) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių (iii) PDE5 inhibavimo IC₅o mažesnę už 10 nM ir (iv) pakankamą bioprieinamumą, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines peroralines dozes;

(b) Įdėtinio lapelio prie įpakavimo, nurodančio, kad šis PDE5 inhibitorius tinka lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientui, kuriam reikalingas toks gydymas, ir kad jis neturi kontraindikacijų, susijusių su organinių nitratų vartojimu; ir (c) konteinerio.
2. Pramoninis gaminys žmonių farmaciniam vartojimui, susidedantis iš:

(a) peroralinės dozuotos vaisto formos, turinčios nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus, besiskiriantis tuo, kad turi (i) mažiausiai 100 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE6 inhibavimo

IC₅o reikšmių, (ii) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC₅o reikšmių (iii) IC₅o mažesnę už 10 nM ir (iv) pakankamą bioprieinamumą, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines peroralines dozes;

(b) įdėtinio lapelio prie įpakavimo, nurodančio, kad šis PDE5 inhibitorius tinka lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientui, kuriam reikalingas toks gydymas, ir kuris vartoja organinius nitratus; ir fc'i knntoinorįn
3. Pramoninis gaminys žmonių farmaciniam vartojimui, susidedantis iš:

(a) peroralinės dozuotos vaisto formos, turinčios nuo 1 iki 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus, besiskiriantis tuo, kad turi (i) mažiausiai 100 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE6 inhibavimo

IC50 reikšmių (ii) mažiausiai 1000 kartų skirtumą tarp PDE5 ir PDE1c inhibavimo IC50 reikšmių (iii) IC₅o mažesnę už 10 nM ir (iv) pakankamą bioprieinamumą, kad būtų veiksmingas vartojant nuo 1 iki 20 mg vienetines peroralines dozes;

(b) Įdėtinio lapelio prie įpakavimo, nurodančio, kad šis PDE5 inhibitorius tinka lytinės funkcijos sutrikimams gydyti pacientui, kuriam reikalingas toks gydymas, ir kuris kenčia nuo būklių, pasirinktų iš grupės, susidedančios iš tinklainės ligos, polinkio j išraudimą, polinkio i regėjimo anomalijas, 1 klasės kongestinės širdies ydos, miokardo infarkto, buvusio prieš 90 dienų arba daugiau prieš lytinės funkcijos sutrikimo gydymo pradžią, ir jų derinių; ir (c) konteinerio.
4. Gaminys pagal 3 punktą, besiskiriantis tuo, kad tinklainės liga yra diabetinė retinopatija arba pigmentinis retinitas.
5. Gaminys pagal 3 punktą, besiskiriantis tuo, kad Įdėtiniame lapelyje prie įpakavimo nurodoma, kad išraudimo atvejų skaičius yra mažiau 2 % nuo gydytų pacientų.
6. Gaminys pagal 1-5 punktą, besiskiriantis tuo, kad peroralinėje dozuotoje formoje yra 5 mg, 10 mg arba 20 mg selektyvaus PDE5 inhibitoriaus.
7. Gaminys pagal 1-6 punktą, besiskiriantis tuo, kad Įdėtiniame lapelyje prie įpakavimo nurodoma, kad maksimali selektyvaus PDE5 inhibitoriaus dozė yra 20 mg per 24 valandas.
8. Gaminys pagal 1-7 punktą, besiskiriantis tuo, kad selektyvaus PDE5 inhibitoriaus struktūrinė formulė yra:
9. Selektyvaus PDE5 inhibitoriaus panaudojimas vaisto, skirto paciento, gydomo organiniais nitratais, lytinės funkcijos sutrikimams gydyti, gamyboje.
10. Selektyvaus PDE5 inhibitoriaus panaudojimas vaisto, skirto paciento, turinčio polinki į regėjimo anomalijas, polinki Į išraudimą, kenčiančio nuo tinklainės ligos, nuo 1 klasės kongestinės širdies ydos arba patyrusio miokardo infarktą prieš 90 arba daugiau dienų prieš lytinės funkcijos sutrikimo gydymo pradžią, lytinės funkcijos sutrikimams gydyti, gamyboje.
11. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad ji yra pritaikyta gydyti paciento, gydomo organiniais nitratais, lytinės funkcijos sutrikimams, kurioje kaip veiklusis ingredientas yra aukščiau aprašytas selektyvus PDE5 inhibitorius.
12. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad ji yra pritaikyta gydyti paciento, linkusio i išraudimą, lytinės funkcijos sutrikimams, kurioje kaip veiklusis ingredientas yra aukščiau aprašytas selektyvus PDE5 inhibitorius.
13. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad ji yra pritaikyta gydyti paciento, kenčiančio nuo tinklainės ligos, lytinės funkcijos sutrikimams, kurioje kaip veiklusis ingredientas yra aukščiau aprašytas selektyvus PDE5 inhibitorius.
14. Farmacinė kompozicija, besiskirianti tuo, kad ji yra pritaikyta gydyti paciento, kenčiančio nuo 1 klasės kongestinės širdies ydos

Π. 37!pi ίθό Gu cii Del UciūįjlciU pi iūb lytlilbS funkcijos sutrikimo gydymo pradžią, lytinės funkcijos sutrikimams gydyti, kurioje kaip veiklusis ingredientas yra aukščiau aprašytas selektyvus PDE5 inhibitorius.