LT3136B - Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination in the whole blood - Google Patents

Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination in the whole blood Download PDF

Info

Publication number
LT3136B
LT3136B LTIP275A LTIP275A LT3136B LT 3136 B LT3136 B LT 3136B LT IP275 A LTIP275 A LT IP275A LT IP275 A LTIP275 A LT IP275A LT 3136 B LT3136 B LT 3136B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
nicotinamide
glucose
dinucleotide
group
nad
Prior art date
Application number
LTIP275A
Other languages
English (en)
Inventor
Jan Evert Lilja
Sven-Erik Lennart Nilsson
Original Assignee
Migrata Uk Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Migrata Uk Ltd filed Critical Migrata Uk Ltd
Publication of LTIP275A publication Critical patent/LTIP275A/xx
Publication of LT3136B publication Critical patent/LT3136B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

Šis išradimas skirtas gliukozės nustatymui, o konkrečiau -, kiekybiniam gliukozės nustatymui gryname neatskiestame kraujyje. Šis išradimas taipogi numato analizės kompoziciją bei jos panaudojimą.
\ 'Z ' j _ . j :
. Gliukozės nustatymas kraujyje yra reikalingas klinikinės chemijos kasdieniniuose, tyrimuose. Šie tyrimai panaudojami diagnostikai ir terapijai sergantiems diabetu bei medžiagų apykaitos susirgimais..
Yra žinomi keli kiekybinio gliukozės nustatymo būda’i. gryname neatskiestame kraujyje..
Vienas iš. jau žinomų čia nurodytų būdų pagristas, fermentiniu gliukozės nustatymu, panaudojant gliukozės dehidrogenazę; kompozicija, atitinkanti ši būdą, aprašyta JAV-, patente 4120755, Nurodyta kompozicija sudaryta · iš buferio piridonįnio koenzimo ir gliukozės dehidroge.nazės. Čia buferio sąvoka- reiškia pH kitimą nuo 7,9 iki 3,.ę. JAV patente .3 964 974 žinoma kita .20 kompozicija, skirta gliukozės nustatymui. ·Nurodytos kompozicijos pagrindiniai elementai yra šie: gliukozės' dehidrogenazė, kuriai keliami tam tikri reikalavimai, švaros ir tipo atžvilgiu, piridoninis' koenzimas, pavyzdžiui, NAD- .(nikotinamid.inis . dinukleotidas) , buferinė reikšmei 8,5) ir sistema skirta .palaikyti tam tikrai pH junginio vandeniniame tirpale (tarp 6,5 ir mutarotazė. Nei viename iš nurodytų dviejų patentų nenumatytas nei būdas, nei kompozicija, tinkantys tiesioginiam kiekybiniam gliukozės nustatymui gryname neatskiestame kraujyje, tai yra nei atskiedus, nei nusodinus. Vienintelė informaciją, skirta gliukozės nustatymui gryname kraujyje, aprašyta JAV patento 3964974 7-ajame pavyzdyje, kur nurodyta drėgnos gliukozės cheminė analizė, naudojant gryno kraujo pavyzdį .\ Prieš atliekant šią analizę, iš gryno kraujo pavyzdžio pašalinami proteinai. Pašalinus proteinus, gali nebelikti raudonųjų kraujo kūnelių. Todėl
Reakcija pradedama, o po to nustatomas gliukozės nustatymas atliekamas ne gryname kraujyje. Būtina atkreipti dėmėsi i nurodyto JAV patento aprašymo 9 psl. 19-24 eilutes, kur nurodoma, kad negalima išsaugoti raudonųjų kraujo kūnelių, nustatant gliukozės 5 kiekį gryname kraujyje. Deproteinizavus neatskiestą kraują ir prieš praleidžiant, jis sumaišomas . su fermento iš buferio tirpalu.
įvedant koenzimo (NAD) tirpalą, gliukozės kiekis: Taip pat nurodoma, kad .gliukozė gali 10 būti nustatyta, panaudojant dažą arba spalvotą reakciją kaip indikatorių, parodantį NADN buvimą, pavyzdžiui, tetrazolio druską hidrogenezuoj a į atitinkamą formazoną, veikiant diaforazės fermentu. Bet nurodytame šaltinyje nenumatomas šios metodikos taikymas, 15 panaudojant NADN indikavimą, .skirtą gliukozės nustatymui tik kraujo plazmoje. JAV patente 3 964 074, pavyzdžiui, 6-jame pavyzdyje gliukozė kraujyje nustatoma tiriant' atskiestą kraują, priešingai, nei šiame išradime, kuriame gliukozė nustatoma tiesiogiai 20 neatskiestame kraujyje.
Aišku, kad paprasto ir greito testo sukūrimas kiekybiniam gliukozės nustatymui gryname neatskiestame kraujyje yra darbui klinikinėje laboratorijoje
-^.5 vertingas patobulinimas.
Vienas šio išradimo tikslų yra -kiekybinis gliukozės nustatymo gryname neatskiestame kraujyje patobulinimas, panaudojant spektrofotometriją pralaidumo režime.
Kitas šio išradimo tikslas yra tinkamiausias sausos kompozicijos parinkimas, naudojamas kiekybiniam Šis išradimas gali būti . taikomas gliukozės nustatymui mažuose gryno kraujo kiekiuose'. Išsireiškimas mažas tūris suprantamas kaip tūris, esantis °iarp 0,1 .ir 0,001 ml, o geriau, jei tarp 0,02 ir. 0,001’ml'.
nustatymui. kiekybiniam neatskiesto
Remiantis šiuo išradimu, kraujo geriau ne tik kad neskiesti, bet dar ir nemėginti kaip nors apdoroti.
Pirmiausia,, šiame, išradime numatytas kiekybinis gliukozės gryname neatskiestame kraujyje nustatymo būdas pasižymi tuo, kad gryno neatskiesto kraujo pavyzdys, kurio tūris, geriau jei būtų mažesnis nei 20 ml, kontaktuoja su sauso .pavidalo- reagentu, į kurio sudėtį įeina: .
J . 7 - . - - '
- gliukozės· dehidrogenazė (GDH); ,
- vienas arba keletas junginių, priklausančių grupei, sudarytai ' iš diaforazės, fenazinmetosulfato, fenazinetosulfato, fenazinfenosuifato ir Meldolo . mėlio;·
F
- vienas arba keletas junginių, priklausančių grupei, kurios sudėtis tokia: NAL (nikotinamidinis dinukleotidas), NADF, tio-NAD, tio-NADF, nikotinamidpurino dinukle tida's, nikotinamidmetilpurino dinukleotidas, nikotinamid-.R-chlormetilpurino di- 7 nukleotidas;
- viena arba keletas hemolizinių medžiagų,' priklausančių grupei, sudarytai iš - fosfolipazės, hemoližinių saponinų ir hidrofilinių mono-, di-: •arba trisacharidų ir alifatinių angliavandenilių, turinčių 10 -16 anglies atomų;
' . ‘ - oksidacinis-redukcinis indikatorius-dažas;
- galima papildyti mutarotaze; ir nurodyto reagento su gliukoze gryname neatskiestame kraujyje reak35 cijos metu besikeičiančios spalvos registracija spektrofotomeįrijos metodu pralaidumo režime.
Priemonės, skirtos tam, kad vyktų nurodytas būdas, yra aprašytos JAV patente 4 088 448.
. Antra šiame išradime numatyta kompozicija, skirta 5 gliukozės kiekio nustatymui gryname neatskiestame kraujyje, pasižymi tuo, kad ji sausame pavidale yra ir ją sudaro:
- gliukozės dehidrogenazė (GDH);
•vienas arba keletas grupei, sudarytai fenazinmetosulfato, fenazinfenosulfato ir Meldolo mėlio;
junginių, priklausančių iš diaforazės, fenazinetosulfato, vienas arba keletas junginiu, priklausančių grupei, kurios sudėtis tokia: KAD (nikotinamidinis dinukleotidas), HADE, tio-NAD, tio-NADF, nikotinam!dpurino dinukleotidas, nikotinamid-2chlormetilpurino dinukleotidas;
• - viena arba keletas hemolizinių medžiagų, priklausančių grupei, sudarytai iš fosfolipazės, hemolizinių saponinų ir hidrofilinių mono-, · di25 arba trisacharidų ir alifatinių angliavandenilių, turinčių 10 - 16 anglies atomų;
- oksidacinis-redukcinis indikatorius-dažas;
- galima papildyti mutarotaze.
Trečia, šiame išradime numatomas nurodytos kompozicijos panaudojimas, pasižymintis tuo, kad' į^jos sudėtį įeina:
- gliukozės dehidrogenazė (GDH);
- vienas arba keletas junginių, priklausančių grupei, sudarytai iš diaforazės, fenazinmetosulfato, fenazinetosulfato, fenazinfenosulfato ir Meidolo •'' mėlio; ' - - /
:.5·· 7 , ’ - . ' ' ... . ' . · 7 . z. 7 '?//
- vienas arba* keletas junginių, priklausančių grupei, kurios sudėtis tokia: NAD '(nikotinamidinis dinukleotidas), NADF, tio-NAD, tio-NADF, nikotinamidpurino dinukleotidas, nikotįnamid-210 chlormetilpurino dinukleotidas;
-vienas arba· keletas hemolizinių ..medžiagų,;';: priklausančių grupei, sudarytai iš fosfolipazės,
- hemolizinių saponinų ir hidrofilinių mono-,, di15 arba' trisacharidų ir alifatinių angliavandenilių;
;:/ turinčių 10 - 16 anglies atomų; .
- oksidacinis-redukcinis indikatorius-dažas;
7 -galima papildyti mutarotaze; be to, imama nurodyta ' sauso pavidalo kompozi-ci ja, skirta· kiekybiniam . gliukozės nustatymui gryname neatskiestame kraujyje, panaudojant spektrofotometrijos metodo pralaidume. ' - . ;..//-7/7/2 ' .' . ' 7. /'. , ; . _/';. - 7 ,7 .Šiame išradime aprašytos ' kompozicijos komponentų : sudėtis/.nėra7kritinis -faktorius, bet geriau, kai ji yra nurodytose ribose, skirtose vienam gryno neatskiesto ; kraujo ml: '
3D ,·; . . - - ;/7
Medžiaga
GIrukozės dėkidrogenazė Diaforazė arba analogai 7
NAD ir analogai
Fosfolipazė arba analogai
Kiekis 5-500 aktyvumo vienetai 1-100 aktyvumo vienetų 10,1-30 mmol. '
1-100 mmol
1-1000 aktyvumo vienetų/0,5-70 mg
Mutarotazė 0,1-10 aktyvumo vienetų
Oksidacinis-redukcinis indikatorius-dažas 5-100 mmol
Į pagrindinę kompoziciją galima pridėti skirtingų komponentų, optimizuojančių funkcinę analizę, skirtą įvairiems pritaikymams. Norint alfa-gliukozę greitai paversti į beta-gliukozę, galima panaudoti mutarotazę, nes būtent pastaroji reaguoja su gliukozės dehidrogenaze. Tai ypač įdoftiu, kai •analizuojamas pavyzdys nėra paimtas tiesiog iš -paciento. Gliukozės dehidrogenazė specifiškai veikia į. beta-gliukozės skilimą. Alfa- ir beta-gliukozė vandeniniuose tirpaluose yra pusiausvyroje, ir priklausančioje nuo temperatūros, kuri nusistovi palyginti lėtai. Kadangi kūno temperatūra gana pastovi; .tai mutarotazė, kuri pagreitina pusiausvyros nusistovė j imą, gali' būti pašalinta iš reagento, imami pavyzdžiai turinčio kūno temperatūrą. Šio varianto pigumas, trumpas reakcijos laikas ir diapazono praplėtimas. Trūkumas toks, skirti kalibravimui ir kontrolei.
iš7 kraujo, privalumai: analitinio kad tiroalai, turi pasiekti nurodytą .temperatūrą, valandą.
o tai trunka mažiausiai vieną
Į reagentą galima pridėti medžiagų, stabilizuojančių pH nurodytame diapazone, tam, kad galėtų, vykti reakcija pH diapazone, atitinkančiame fermento· aktyvumą.
reaktyvą taipogi galima įterpti medžiagas, veikiančias junginio tirpumą bei stabilumą. Tai svarbu tam tikrais atvejais.
· '
Iš skirtingų medžiagų su skirtingomis molekulinėmis masėmis bei pH optimaliais variantais galima gauti gliukozės dehidrogenazę. Šiame aprašyme gliukozės dehidrogenazė suprantama tik kaip fermentai, sudaryti iš 'NAD (nikotinamidinio dinukleotido)' - arba NAD analogų - panašių tipų; į jų skaičių neįeina tokie tipai, kurie priklauso nuo deguonies ir funkcionuoja su kinininiais koenzimais, kurie taip pat vadinami gliukozės dehidrogenązėmis.’
Diafora’zė taip pat gali būti gauta iš skirtingų medžiagų, tačiau ją gali pakeisti kitos žinomos medžiagos, pavyzdžiui, fenazinmetosulfatas, -Meldolo mėlis ir t. t. Taipogi žinomi ir' kiti NAD (nikotinamidinis dinukleptidas) analogai, iš jų populiariausias yra NADF, · kuris gali būti atnaujintas gliukozės/gliukozės dehidrogenazės reakcija ir gali atnaujinti dažą arba spalvinę sistemą.
Tam, kad palengvinti paviršių sudrėkinimą ar patenkinti kitus poreikius, gali prireikti paviršinės-aktyvios medžiagos. Medžiagos, žeminančios paviršinę įtampą, gali. būti įterpiamos, kad palengvintų hidrofilinių plastįko paviršių padengimą...
Tam, kad palengvinti suspensijos adaptaciją prie įvairių rūšių paviršių, keičiamas jų klampumas, pridedant tinkamų stambiamolekulinių polimerų. Nurodytų stambiamolekulinių polimerų parinkimas nėra kriterijus, tačiau jis veikia sauso reaktyvo ištirpimo greitį. Tarp naudojamų polimerų paminėtini: polietilenglikolis, poiivinilpirolidonas, dekstranas ir įvairūs celiuliozės dariniai. Be to, polimerai gali būti parinkti ir tam, kad stabilizuotų suspensiją. Remiantis žinomais' junginio’ gavimo būdais, taikomais, pavyzdžiui, maisto arba kosmetinėje pramonėje, praktiškai galima išspręsti bet kurias problemas, iškylančias reagentui adaptuojantis prie įvairių paviršių.
Medžiagos, žeminančios paviršinę įtampą, gali pasižymėti hemoliziniu efektu. Taip yra su denoil-N-
metilgliukamidu. šis faktas leidžia panaudoti įvairias tokių medžiagų kombinacijas. Taip pat yra hemolizinės medžiagos, kurios · pasižymi ypatingu paviršiniu aktyvumu, pavyzdžiui, melitinas ir fosfolipazės.
Yra žinomi kai kurie medžiagų tipai, keičiantys spalvą, ir kurie gali keisti spalvą, veikiant NADF ir diaforazei. Tinkamiausiais. yra laikomi tetrazolo dariniai, nes dažas formazanas negrįžtamai . sus i f ormuoj-a, esant normalioms feakcijos sąlygoms. Geri rezultatai gaunami, kai kompozicijoje naudojami 3-(4,5dimetiltiarol-2) -2,5-difen.il-2H-tetrazolijbromidas (MMT), bet galima naudoti kitus tetrazolo darinius. Tenka pažymėti, kad hemolizinių junginių grupę sudaro tik tokios medžiagos, kurioms sąveikaujant su tetrazolo dariniais nesusidaro nepageidaująmos nuosėdos.
Išradimą iliustruoja pavyzdžiai ir juos atitinkantys brėžiniai
Fig.l schematiškai atvaizduota reakcija ir junginių formulės.
Fig.2 duota diagrama, kurios duomenys pateikti I~
- i' ojoje lentelėje ir kuri iliustruoja pasiskirstymą ir su lyginamuoju metodu bei statistiniu apdorojimu susietą koreliaciją, kurie reikalingi naudojantis galinio taško metodu.
Fig.3 duoti grafikai, skirti baigtinio taško nustatymui.
Fig.4 duoti hemoglobino, MTT-formazano palyginimo bei bangų ilgio spektrai.
. ; .
Fig.5 duota diagrama, iliustruojanti koreliaciją su lyginamuoju metodu kinetiniuose tyrimuose.
LT 3131 • Siekiant gauti skirtingus gliukozės lygius, matavimai atliekami su gryno kraujo pavyzdžiais, paruoštais su gliukoze. Lyginamąjį metodą sudaro firmos f Merk ' testinė sistema'. Svarbiausia yra' gliukozės·dehidrogenazė (Gliuk-0 metodas - DH(R),
886 tipas, 13 887). Nurodytam lyginamajam metodui_ spektroskopinis nustatymas atliekamas UF spektro srityje, esant 340 nm, pagal pridedamą , . testavimo instrukciją. Lyginamasis būdas yra cheminis analitinis drėgno” tipo būdas.
pavyzdys
Reagento kompozicijos kiekis 1 ml.
‘ '
100 /aktyvumo vienetų .gliukozės dehidrogenazė7
- ; (firmos Merk produktas) • 20 Aktyvumo vienetų diaforazė (firmos . Merk/ produktas), mol NAD (firmos Merk produktas) mol MTT (firmos Merk produktas)
25, ' . ; . λ / mg balto' sapon-ino (firmos BDN produktas) mg dekanoil-N-metilgliukamido
1 ml vandens (apdorotas jonų mainais). 7/ ; , . a
Gaunamas tirpalas, tinkantis džiovinimui užsaldant mikrokiuvetėse, gautose inžekciniu formavimu, kuris aprašytas JAV patente Nr. 4088448 ir yra (Hemoęuė - AB) firmos pramoninis produktas. Matavimai atliekami, naudojant galinio taško metodą, esant 660 nm, o palyginimui naudojamas .880 nm bangos ilgis.
pavyzdys
Reagento kompozicijos kiekis Imi.
Gliukozės dehidrogenazė 1000 aktyvumo vienetų (firmos Merk produktas)
200 aktyvumo vienetų' diaforazė (firmos Merk produktas)
220 mol NAD (firmos Merk produktas)
0,3 mol MTT (firmos Merk produktas)
250 mg balto saponino produktas) (R) ♦ ( f irmos BDN
50 mg Pliuronik P 85 (R) ( firmos Servą
produktas) , .
250 mmol vandens (apdorotas jonų mainais)
Junginio komponentai susmulkinami; taip, kad gauta suspensija būtų tinkama paviršių padengimui, tinkamų spausdinimo būdams, pavyzdžiui, spausdinimui ant šilko arba pasinaudojant spausdinimo cilindrais ir t. t. Ši suspensijos rūšis yra tinkama mikrokiuvetėms su skiriamaisiais paviršiais, aprašytais JAV patente Nr. 4088448.
pavyzdys
Mikrokiuvetes, atitinkančias JAV patentą Nr. 4 088448, pagamintas iš celiuliozės acetato-celiuliozės butirato maždaug 0,15 mm gylio padengia' reagento kompozicija, aprašyta 2 pavyzdyje, spausdinimo įrenginiu. (4 spausdinimo ciklai). Išdžiovinus ir surinkus, buvo tiriamas kiuvečių funkcionavimas, skirtas viso kraujo įvairių pavyzdžių analizei. Hemolizę nustatydavo, esant 660 nm bangos ilgiui; matavimo trukmė tęsėsi nuo 20 iki 40 sekundžių, priklausomai nuo eritrocitų kiekio.
Nusidažymas buvo tiriamas esant tam pačiam bangos ilgiui; viso kraujo pavyzdžiai, kurių gliukozės koncentracija sudaro 12 mmol/1,' pasiekia baigtinį tašką, atitinkantį matavimų metodikas., maždaug po 1,5 min. (žiūrėti fig. 3). Fig.4 duoti hemoglobino ir dažo spektrai gryno kraujo pavyzdžiui, kuriame gliukozės koncentracija yra . apie 12 mmol/1 kiuvetėje, pagal 3 pavyzdį. Akivaizdu, kad šiuo atveju turime geras galimybes įvertinti .susidariusį formazaninį nusidažymą, išvengiant nepageidaujamo'persidengimo su hemoglobinu;
taip pat susidaro galimybė pakeisti bendrą fono drumstumą nenurodytuose spektruose. Keičiant 'padengto sluoksnio storį, savaime suprantama, keičiasi reakcijos laikas bei maksimaliai nustatomos koncentracijos.
4 pavyzdys ,
Reagento kompozicijos kiekis,1 ml.
aktyvumo vienetų gliukozės dehidrogenazė su maksimaliu polietilenglikolaldehido metileteriu (750) t
aktyvumo vienetų diaforazė (firmos Merk produktas)
7 mol NAD (firmos Merk produktas) mol MTT (firmos Merk prodktas) mg balto saponino (R) (firmos BDN produktas) ml vandens (apdorotas jonų mainais)
Šiuo būdu gaunamas tirpalas, tinkantis džiovinimui užšaldant analogiškai pavyzdžiui. · Reagentas paruošiamas kinetiniams tyrimams, priešingai buvusiems pavyzdžiams, kur nustatoma, remiantis galiniu tašku. Santykinai
- didelis gliukozės dehidrogenazės kiekis surištas su redukcijos aktyvumu, vykstančios susiuvant polimero molekulę. Yra žinoma, kad polimero molekulių susiuvimas su fermentu padidina stabilumą, o tai yra pageidautina sąlyga, vykdant kinetinius tyrimus. Tinkamiausių polimerų parinkimas nebuvo atliekamas; šis pavyzdys tik parodo --panašių polimerų .panaudojimo galimybę. Polietilenglikolio monometilo eterį paverčia į aldehidą, veiKiant dimetilsulfosidu ir acto rūgšties anhidridu susirišus su gliukozės dehidrogenazė esant natro chloride karbonatiniam buferiui prie pH=10 ir esant polimero pertekliui, mišinys yra dializuojamas ir koncentruojamas. Kompleksas fermentas-polimeras. yra žymiai stabilesnis, nei grynas fermentas. Gauti rezultatai, atlikus kinetinius matavimus su duoto pavyzdžio reagentu, pateikiami fig. 5. Matuojama esant 660 nm, 3-3,75 min. laikotarpyje o po palyginimo bangos ilgis - 880 nm.

Claims (5)

  1. IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1, Bendro gliukozės kiekio gryname neatskiestame kraujyje nustatymo būdas, b e s i s -k i r i a n t i s
    5 tuo, kad neatskiesto kraujo pavyzdys, geriau mažesnio tūrio nei 20 1, kontaktuoja’ su sausu reagentu, susidedančiu iš: ' - gliukozės dehidrogenazės (DHG); 10 / '
    - vieno -junginio arba keleto junginių grupės, sudarytos iš diaforazės, ' fenazinmetosulfato, fenazinetosulfato,. fenazinfenosulfato ir Meldolo . mėlio; ' , ·
    15 - -vieno junginio arba keleto junginių j grupės,
    Z. sudarytos iš NAD(nikotinamidinio dinukleotido),
    NADF, tio-NAD, tio-NADF, nikotinamidpurino dinuk. leotido, ... - nikotinamidmetilpurino dinuKleotido, 20 nikotinamid-
  2. 2-chlormetilpurino dinukleotido;
    -vienos arba keleto hemolizinių medžiagų, priklausančių grupei, sudarytai iš fosfolipazės, hemolizinių saponinų ir hidrofilinių mono-, di-
    25 arba trįsačharidų. ir alifatinių angliavandenilių, turinčių 10-16 anglies atomų; - oksidacinio-redukcinio indikatoriaus-dažo;
    30 - galima papildyti mutarotaze; ir nurodyto reagento’ . su gliukoze gryname neatskiestame kraujyje reakcijos metu besikeičiančios spalvos registraciją spektrofotometrijos metodu pralaidumo režime.
    35 2. Būdas pagal 1 punktą, besiskiriantis tuo, kad gryno kraujo pavyzdžio kiekį ima mažesnį nei , 20 1.
  3. 3. ' Kompozicija, skirta gliukozės kiekio nustatymui gryname neatskiestame kraujyje, b e s i s k i r i a n t i tuo, kad ji yra sausame pavidale ir susideda iš:
    5 - gliukozės dehidrogenazės (DHG);
    - vieno junginio arba keleto junginių grupės, susidedančios iš diaforazės, fenazinmetosulfato, fenazinetošulfato, fenazinfenosulfato ir Meldolo
    10 mėlio; · ·
    - vieno junginio arba keleto junginių grupės, susidedančios iš NAD(nikotinamidinio dinukleotido) , NADF, tio-NAD, tio-NADF, nikotinamid-r
    15 purino dinukleotido, nikotinamidmetilpurino dinukleotido, nikotinamid-2-chlormetilpurino dinukleotido; ’
    - vienos arba keleto hemolizinių medžiagų,
    20 priklausančių grupei, sudarytai iš fosfolipazės, hemolizinių saponinų ir hidrofilinių mono-, diarba trisacharidų ir alifatinių angliavandenilių, turinčių 10-16 anglies atomų;
    25 - oksidacinio-redukcinio indikatoriaus-dažo;
    - galima papildyti mutarotaze.
  4. 4. Kompozicija pagal 3 punktą, b e. s i s k ir .i a n 30 t i tuo, kad nurodytas oksiaacinis-redukcinis indikatoriųs-dažas yra tetrazolino druska.
  5. 5. Kompozibija pagal 3 arba 4 puriktą, bes i s- k i r i a n t i tuo, kad į jos sudėtį įeina: / ,p:· · ·
    -'gliukozės dehidrogenazė;.
    - diaforazė, NAD(nikotinamidinis dinukleotidas);
    - vienas arba keletas.saponinų; ir
    5 - galima papildyti mutarota2e.
    / 6. Kompozicijos, į kurios sudėtį įeina:
    .· - gliukozės dehidrogenazė (DHG);
    - vienas junginys arbakeleto junginių grupė, sudaryta iš diaforazės, fenazinmetosulfato, fėnazinetosulfato, fenazinfenosulfato ir Meldolo mėlis; '
    - vienas junginys arba keleto junginių’ grupė, '-y/: /.):7 sudaryta iš NAD(nikotinamidinio d.inukleotido),
    NADF, tio-NAD, tio-NADF, · nikot.inamidpurino dinukleotidfc, hikotinamidraetilpurino dinukleotido,
    20 . nikotinamid--2-chlormetilpurino dinukleotido;
    - viena *arba keletas hemolizinių medžiagų, priklausančių grupei, sudarytai iš fosfolipazės, . hemolizinių/saponinų ir hidrofilinių mono-, · di25 . arba trisacharidų ir alifatinių angliavandenilių, • turinčių 10-16 anglies atomų;
    . - oksidacinis-redukcinis indikatorius-dažas;
    30- galimapapildytimutarotaze, - ...
    panaudojimas sausame pavidale bendro gliukozės kiekio nustatymui gryname neatskiestame kraujyje spėktrofotometrijos metodu pralaidumo režime.
LTIP275A 1989-04-25 1992-12-30 Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination in the whole blood LT3136B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE8901515A SE466158B (sv) 1989-04-25 1989-04-25 Analysmetod foer glukosbestaemning i helblod

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LTIP275A LTIP275A (en) 1994-07-15
LT3136B true LT3136B (en) 1995-01-31

Family

ID=20375802

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LTIP275A LT3136B (en) 1989-04-25 1992-12-30 Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination in the whole blood

Country Status (18)

Country Link
US (1) US5278047A (lt)
EP (1) EP0470201B1 (lt)
JP (1) JPH0734757B2 (lt)
KR (1) KR960001139B1 (lt)
AT (1) ATE122102T1 (lt)
AU (1) AU637612B2 (lt)
BR (1) BR9007339A (lt)
CA (1) CA2053315C (lt)
DE (1) DE69019149T2 (lt)
DK (1) DK0470201T3 (lt)
ES (1) ES2071821T3 (lt)
FI (1) FI97551C (lt)
LT (1) LT3136B (lt)
LV (1) LV10122B (lt)
NO (1) NO300853B1 (lt)
RU (1) RU2050546C1 (lt)
SE (1) SE466158B (lt)
WO (1) WO1990012889A1 (lt)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69524773T2 (de) * 1994-09-08 2002-06-13 Lindab Ab, Baastad Vorrichtung zum verbinden von rohrteilstücken
DK9500486U3 (da) * 1995-12-18 1997-04-11 Lindab As Indretning til sammenkobling af rørstykker
ATE316757T1 (de) 1998-05-26 2006-02-15 Lifecell Corp Cryokonservierung menschlicher roter blutzellen
US6077660A (en) * 1998-06-10 2000-06-20 Abbott Laboratories Diagnostic assay requiring a small sample of biological fluid
US6312888B1 (en) 1998-06-10 2001-11-06 Abbott Laboratories Diagnostic assay for a sample of biological fluid
US5902731A (en) * 1998-09-28 1999-05-11 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds
US6656697B1 (en) * 1998-09-28 2003-12-02 Lifescan, Inc. Diagnostics based on tetrazolium compounds
LT4605B (lt) 1999-04-07 2000-01-25 Biochemijos Institutas Fermentinis gliukozės sensorius ir jo gavimo būdas
RU2163722C2 (ru) * 1999-05-12 2001-02-27 Рязанский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова Способ определения моносахаридов в сыворотке крови
US6485923B1 (en) 2000-02-02 2002-11-26 Lifescan, Inc. Reagent test strip for analyte determination having hemolyzing agent
CA2404421A1 (en) * 2000-03-28 2001-10-04 Tianmei Ouyang Reagent systems for detecting the presence of a reduced cofactor in a sample and methods for using the same
US6368818B1 (en) * 2000-10-12 2002-04-09 Qingzhong Kong Methods and compositions for the visualization of cellular organelles using tetrazolium salts
US6420128B1 (en) * 2000-09-12 2002-07-16 Lifescan, Inc. Test strips for detecting the presence of a reduced cofactor in a sample and method for using the same
US20040096927A1 (en) * 2000-09-13 2004-05-20 Chittock Roger Steward Method for the detection and measurement of biomass
US7524872B2 (en) * 2000-09-15 2009-04-28 Qingzhong Kong Method and composition for treating cancer using cellular organelle crystallizing agents
RU2198402C2 (ru) * 2001-03-11 2003-02-10 ГУ Тверская государственная медицинская академия Способ диагностики сахарного диабета
ATE423219T1 (de) * 2004-12-17 2009-03-15 Megazyme Ip Ltd Test zur bestimmung freier d-galactose und/oder l-arabinose
WO2006064488A1 (en) * 2004-12-17 2006-06-22 Megazyme Ip Limited A kit for colorimetric assays of food and beverage analytes
US20080268485A1 (en) * 2005-02-22 2008-10-30 Guarino Julianne M Iconic Display of Markers for a Meter
KR100793852B1 (ko) * 2005-03-21 2008-01-11 김영기 착즙주스기
KR100776914B1 (ko) 2005-06-14 2007-11-15 주식회사 엘지화학 온도 측정 장치
RU2394648C2 (ru) * 2005-08-31 2010-07-20 Эгомедикаль Технологиз Аг Тест-система коагуляции
RU2398235C2 (ru) * 2005-08-31 2010-08-27 Эгомедикаль Технологиз Аг Тест-система с использованием элементов неэнзиматического распознавания анализируемого вещества
WO2008030154A1 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Hemocue Ab Haemolysing agent
US8008037B2 (en) 2008-03-27 2011-08-30 Roche Diagnostics Operations, Inc. Matrix composition with alkylphenazine quaternary salt and a nitrosoaniline
KR101239381B1 (ko) * 2012-05-02 2013-03-05 주식회사 아이센스 산화환원반응용 시약의 안정제 조성물
CN103088108A (zh) * 2012-11-16 2013-05-08 李立和 葡萄糖脱氢酶法检测葡萄糖的试剂盒及制备方法
US9347958B2 (en) 2014-06-27 2016-05-24 Hemocue Ab Device and method for determination of an analyte in blood
CN106018297A (zh) * 2016-05-20 2016-10-12 大连大学 蓝莓中总黄酚含量的测定
CN106018296A (zh) * 2016-05-20 2016-10-12 大连大学 蓝莓中总黄酮含量的测定
CN110715923A (zh) * 2019-11-24 2020-01-21 天津市宝坻区人民医院 α-D-葡萄糖检测试剂盒

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3964974A (en) 1972-09-28 1976-06-22 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Enzymatic determination of glucose
US4120755A (en) 1977-04-28 1978-10-17 Beckman Instruments, Inc. Kinetic method for determination of glucose concentrations with glucose dehydrogenase

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2349819A1 (de) * 1973-10-04 1975-04-17 Eppendorf Geraetebau Netheler Verfahren zur enzymkinetischen konzentrationsbestimmung eines substrats
US4898813A (en) * 1986-04-04 1990-02-06 Albarella James P Catalytic test composition intended to produce a range of colors
US4975367A (en) * 1986-04-04 1990-12-04 Miles Inc. Catalytic test composition intended to produce a range of colors
US5059394A (en) * 1986-08-13 1991-10-22 Lifescan, Inc. Analytical device for the automated determination of analytes in fluids

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3964974A (en) 1972-09-28 1976-06-22 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Enzymatic determination of glucose
US4120755A (en) 1977-04-28 1978-10-17 Beckman Instruments, Inc. Kinetic method for determination of glucose concentrations with glucose dehydrogenase

Also Published As

Publication number Publication date
LTIP275A (en) 1994-07-15
BR9007339A (pt) 1992-04-28
WO1990012889A1 (en) 1990-11-01
CA2053315C (en) 2000-07-04
AU5557590A (en) 1990-11-16
SE466158B (sv) 1992-01-07
LV10122A (lv) 1994-05-10
ES2071821T3 (es) 1995-07-01
DK0470201T3 (da) 1995-07-17
AU637612B2 (en) 1993-06-03
DE69019149T2 (de) 1995-09-07
EP0470201A1 (en) 1992-02-12
FI915020A0 (fi) 1991-10-24
KR920701476A (ko) 1992-08-11
SE8901515L (sv) 1990-10-26
FI97551C (fi) 1997-01-10
DE69019149D1 (de) 1995-06-08
NO914181D0 (no) 1991-10-24
SE8901515D0 (sv) 1989-04-25
CA2053315A1 (en) 1990-10-26
NO300853B1 (no) 1997-08-04
ATE122102T1 (de) 1995-05-15
LV10122B (en) 1995-02-20
JPH04504661A (ja) 1992-08-20
EP0470201B1 (en) 1995-05-03
FI97551B (fi) 1996-09-30
US5278047A (en) 1994-01-11
RU2050546C1 (ru) 1995-12-20
KR960001139B1 (ko) 1996-01-19
JPH0734757B2 (ja) 1995-04-19
NO914181L (no) 1991-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
LT3136B (en) Method of analysis, reagent composition and use thereof for glucose determination in the whole blood
Walters et al. An ultramicromethod for the determination of conjugated and total bilirubin in serum or plasma
Vanderlinde Measurement of total lactate dehydrogenase activity
EP1312922B1 (en) Stabilized tetrazolium reagent compositions with nitrite and methods for using the same
ES2288906T3 (es) Pareja de colorantes para la determinacion espectrofotometrica de analitos.
US5156947A (en) Process for reduction of the matrix effect in a fructosamine determination assay
CN1432653A (zh) 稳定的四唑鎓试剂组合物及其使用方法
JP2539225B2 (ja) グルコ−ス定量用安定化液体酵素組成物、それを用いる試薬キット及び定量方法
JPH04120464A (ja) カルシウムおよび（または）マグネシウムの測定方法および測定用試薬組成物
JP2003528623A (ja) サンプル中の還元された補助因子の存在を検出するための試薬システムおよびその使用方法
US4803158A (en) Composition used for the determination of beta-hydroxybutyric acid and a method for preparing the said composition
US4119401A (en) Total bilirubin assay
JPH0365760B2 (lt)
JP2619222B2 (ja) 血液試料または血液由来の試料中のフルクトサミン含量を測定するための試薬と方法
Lim et al. Determination of ethanol in serum by an enzymatic PMS-INT colorimetric method
JPH0155880B2 (lt)
JP3869601B2 (ja) ホモシステインの測定方法
JPH1099098A (ja) トレハロース分析用試薬
Tomisek et al. Fluorometric assay of ultramicro quantities of glucose with Somogyi filtrate and hexokinase
SU328604A1 (ru) ПАТЕНТНО-- ^ Т>&л1}1ЧЕП;Д^ 5 F::5A^OYcKA
JP4392472B2 (ja) ソルビトール測定用組成物
Freier Determination of Glucose in Serum and Urine
JPH1084994A (ja) トレハロースの酵素的測定方法およびトレハロース分析用試薬
JP2004037431A (ja) 臨床検体の測定における共存物質の影響阻止方法
JP2005214956A (ja) 高感度な試料中のシュクロースの定量方法及び定量試薬。

Legal Events

Date Code Title Description
MM9A Lapsed patents

Effective date: 20091230