KR960013462B1 - 식물 종묘의 증식 방법 - Google Patents

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미쯔이 세끼유 가가꾸 고오교오 가부시기가이샤
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Abstract

내용 없음.

Description

식물 종묘의 증식 방법
본 발명은 식물의 특정한 방법으로 조직 배양함으로써, 종묘를 대량으로 증식하는 방법에 관한 것이다.
양배추, 토마토, 오이 등의 야채류나 벼는 식용으로 이용되고 있고, 또 튜립, 수래국화, 루도베키어 등은 원예 식물로서 감상용으로 애호되고 있다. 이들 식물의 증식은 종래, 파종, 구근 분할, 괴경 분할에 의하여 실시하고 있다. 그러나 이와같은 증식법은 넓은 땅과 사람의 손을 필요로 하는 문제점외에, 최근에는 바이러스병의 만연으로 종묘의 생육속도가 저하되거나 꽃의 품질이 저하되는 문제가 대두되고 있다. 또 우량 형질을 가지는 품질을 육성 유지하기 위해서는, 영양 번식을 실행시키는 것이 효과적이다. 이들 문제점의 해소와 증식 효율의 향상을 목적으로 최근에는 식물 조직 배양 기술을 이용하는 방법도 보고되고 있다(예를들면, 일본 특개소 55-15734호 공보). 조직 배양 기술에 의한 증식은 배양 조직편, 배양 세포로부터의 부정아(不定牙), 부정배(不定胚), 구근 등의 분화에 의해 달성되고, 또 이들의 분화는 식물 호르몬인 사이토카이닌과 오옥신의 농도비에 의하여 제어되는 것으로 생각해 왔다(예를들면, Annals of Botany vol 45.321-327, 1980년). 그러나 식물 호르몬만으로는 분화가 일어나지 않는 식물 종류나 분화가 일어났어도 그 빈도가 대단히 낮은 식물 종류도 다수 존재하고 있어, 보다 직접적이고 또한 효과적인 분화 유도 방법의 확립이 요구되고 있다.
본 발명자 등은 종래의 식물 조직 배양 방법에 상기한 여러 가지의 문제점이 있음을 인식한 후에, 종래 방법과는 상이한 신규 방법에 의하여 식물을 조직 배양해서 해당 식물의 종묘를 종래와 비교해서 더 효율적으로 증식시키는 방법에 대한 검토를 했다.
그 결과, 본 발명자 등은 식물의 세포에 작용하여 해당 식물의 부정아, 부정배 및 구근의 분화를 촉진시키는 물질을 발견하고, 이를 기초로하여 식물의 종묘를 효율적으로 증식하는 방법을 발견하였다. 즉, 본 발명의 방법에 의하면 칼슘 이오노포어, 사이클릭 AMP 및 폴리아민으로 구성되는 군에서 선택된 1종 이상의 화합물을 함유하는 배지를 사용하여, 양귀비목, 덩굴오이속(屬)을 제외한 가지목, 미나리목, 장미목, 나리속을 제외한 나리목, 국화목, 퐁노초목, 오이목, 벼목에 속하는 식물의 조직편 또는 배양 세포를 조직 배양하는 것을 특징으로 하는 식물 종묘의 증식 방법이 제공된다.
본 발명에 속하는 조직 배양법을 적용할 수 있는 식물은 양귀비목, 덩굴오이속을 제외한 가지목, 미나리목, 장미목, 나리속을 제외한 나리목, 국화목, 풍노초목, 오이목, 벼목에 속하는 식물에서 선택된다. 상기 식물의 구체적인 일례로는 야미 기시편(山巖編) 「식물 계통 분류의 기초」 호꾸류깡 1974년에 기재되어 있는 식물을 들 수 있으며, 보다 구체적으로 살펴보면 가지목에 속하는 식물로서 가지, 토마토, 감자, 고구마, 자소 등을 양귀비목에 속하는 식물로서 양귀비, 유체화, 양배추, 무우, 배추 등을 미나리목에 속한 식물로서 당근, 미나리, 파슬리 등을, 장미목에 속하는 식물로서, 장미, 딸기, 메주콩, 벗 등을 나리속을 제외한 나리목에 속하는 식물로서 양파, 튜립 등을, 국화목에 속하는 식물로서 국화, 수래국화, 해바라기 등을 풍노초목에 속하는 퐁노초, 양아욱, 아마 등을 오이목에 속하는 식물로서, 오이, 호박 등을, 벼목에 속하는 식물로서 벼, 옥수수 등을 예로 들 수 있다. 이들 식물중에서도 본 발명과 관련하여 바람직한 식물의 구체적인 예로는 토마토, 가지, 감자, 당근, 양배추, 양파, 메주콩, 무우, 자소, 수래국화, 루도베키어, 튜립, 아마, 오이 및 벼 등을 들 수 있다.
본 발명에 있어 식물의 조직 배양은 해당 식물의 조직편 또는 또는 배양 세포를 사용해서 실시할 수 있다. 해당 조직 배양편의 구체적인 예로는 자엽(子葉), 배축(胚軸), 경정(莖頂), 줄기, 잎, 인편, 뿌리 또는 그밖의 조직을 잘게 절단한 식물의 조직편을 들 수 있다. 이들의 조직편은 통상, 차아염소산 소오다나 에틸 알콜에 의하여 살균한 후에 사용된다. 그러나, 무균적으로 재배한 식물을 사용할 경우, 상기의 살균 조작은 필요없다. 또 무병, 무바이러스의 식물 종묘를 증식할 경우에는, 배양 재료로서 생장점 근방 조직, 생장점 근방 조직에서 얻은 식물의 상기한 조직편 등을 사용할 수 있다. 본 발명의 식물의 조직 배양에 있어서 사용이 가능한 배양세포로는, 상기 조직편을 공지의 방법으로 조직배양하여 얻은 칼스 조직을 포함한 미분화의 부정형 세포가 있다.
본 발명에서는 식물의 조직편 또는 배양 세포를 조직 배양해서 식물의 종묘를 형성하는데에 있어서 이하에 상세히 설명되는 방법이 채택된다.
본 발명에서는 식물의 종묘를 증식시키는 방법으로서, 칼슘 이오노포어(Ca2+-ionophore), 사이클릭 AMP(Cyclic-adenosine-3'-5'-monophosphate), 및 폴리아민의 군에서 선택되는 1종 이상의 화합물을 첨가한 배지를 사용해서 조직 배양하는 방법이 사용된다. 이 방법에 의하면 식물의 조직 또는 배양 세포의 부정아, 부정배 및 구근으로의 분화가 현저히 촉진된다. 이와같은 특정의 화합물을 첨가한 배지를 사용해서 조직 배양을 실시하면 분화가 촉진된다는 사실은 본 발명자가 최초로 밝혀 낸 것이다.
본 발명에서 상기한 폴리아민 등의 특정의 화합물을 첨가하는데에 사용되는 배지는 무기 성분 및 탄소원을 필수 성분으로 하고, 이것에 식물 호르몬류, 비타민류를 첨가하고, 다시 필요에 따라서 아미노산류를 첨가한 배지이다. 이 배지의 무기 성분으로는 질소, 인, 칼륨, 나트륨, 칼슘, 마그네슘, 유황, 철, 망간, 아연, 붕소, 몰리브덴, 염소, 요오드, 코발트 등의 원소를 함유하는 무기염을 들 수 있으며, 구체적인 예로는 질산 칼륨, 질산 나트륨, 질산 암모늄, 염화 암모늄, 염화 칼륨, 염화 칼슘, 인산 일수소 칼륨, 인산 이수소 나트륨, 황산 마그네슘, 염화 마그네슘, 황산 나트륨, 황산 제1철, 황산 제2철, 황산 망간, 황산 동, 몰리브덴산 나트륨, 삼산화 몰리브덴, 요오드화 칼륨, 황산 아연, 붕산, 염화 코발트 등의 화합물이 있다.
이 배지의 탄소원으로는, 설탕등의 탄수화물과 그 유도체, 지방산 등의 유기산 및 에탄올 등의 1급 알콜 등을 들 수 있다.
이 배지의 식물 호르몬류의 예로는 나프탈렌 초산(NAA), 인돌 초산(IAA), p-클로로페녹시 초산, 2,4-디클로로페녹시 초산(2,4-D), 인돌 락트산(IBA) 및 이들의 유도체 등의 오옥신류, 및 벤질아데닌(BA), 카이네틴, 제아틴 등의 사이토카이닌류를 들 수 있다.
이 배지의 비타민류로는 비오틴, 티아민(비타민 B1), 피리독신(비타민 B6), 피리독살, 피리독사민, 판토텐산 칼슘, 아스코르빈산(비타민C), 이노시톨, 니코틴산, 니코틴산 아미드 및 리보플라빈(비타민 B2) 등을 예로 들 수 있다.
이 배지의 아미노산류의 예로는 글리신, 알라닌, 글루타민산, 시스테인, 페닐알라닌 및 리신 등을 들 수 있다.
본 발명의 상기 배지는 통상 상기 무기 성분을 약 0.1μM 내지 약 100mM, 상기 탄소원을 약 1g/l 내지 약 100g/l, 상기 식물 호르몬류를 약 0.01g/l 내지 약 10mg/l, 상기 비타민류를 약 0.1mg/l 내지 약 150mg/l 및 상기 아미노산류를 0 내지 약 1000mg/l함유시켜 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에의한 조직 배양에 사용되는 상기 배지로서 구체적으로는 종래부터 알려진 식물의 조직 배양에 사용되는 배지, 예를들면 무라시게·스크그('62)[Murashige Skoog]의 배지, 린스마이어·스크그(RM-1965)[Linsmaier Skoog]의 배지, 화이트('63)[White]의 배지, 감보그[Gamborg]의 B-5배지, 미쓰이(三井)의 M-9배지, 니치·니치[Nitch Nitch]의 배지 등에 상기한 탄소원 및 식물 호르몬을 첨가하고, 다시 필요에 따라 상기 비타민류, 아미노산류를 첨가하여 제조한 배지를 들 수 있으나, 본 발명에서는 이중에서도 특히 니치·니치, 린스마이어·스크그 또는 무라시게·스크그의 배지를 사용하여 제조한 배지가 바람직하다. 또, 상기한 종래 공지의 배지의 조성에 관해서는 예를들면 타께우찌, 나까지마, 후루야가 저술한 「신식물 조직 배양」P386~P391. 아사구라(朝倉) 출판(1979년)에 기재되어 있다.
본 발명에서 사용할 수 있는 상기 배지는 액체 배지 또는 한천을 통상 0.5~1% 함유시킨 고형 배지이다.
본 발명에서 상기한 배지에 첨가되는 칼슘 이오노포어의 배지에 있어서의 농도는 통상 10-8~10-4M/l, 바람직하게는 10-7~10-5M/l의 범위로, 이때 칼슘 이오노포이란 칼슘 이온의 막 투과성을 높이는 기능을 하는 물질을 의미하며, 본 발명에서는 그중 A23187을 사용하는 것이 좋다. 여기에서 A23187이란, 6S-[6α(2S*,3S*),8β,(R*)9β,11α]-5-(메틸아미노)-2-[[3,9,11-트리메틸-8-[1-메틸-2-옥소-2-(1H-피롤-2-일)에틸]-1,7-디옥사스피로[5.5]운테크-2-일]메틸]-4-벤족사졸카르복실산을 지칭한다. 마찬가지로, 사이클릭 AMP의 경우, 농도 범위는 통상 10-9~10-5M/l, 바람직하게는 10-8~10-6M/l이다. 폴리아민의 농도는 통상 10-6~10-3M/l, 바람직하게는 10-5~10-4M/l의 범위에 있다. 이때 본 발명의 배지에 첨가되는 폴리아민으로는 폴리메틸렌기[-(CH 2 )n-, n은 정수]의 양단에 이미노기 및/또는 아미노기를 가지는 구조 단위를 함유한 화합물로, 구체적인 예로는 스페르민[비스(아미노프로필)테트라메틸렌디아민 ; H2N(CH2)3NH(CH2)4NH(CH2)3NH2], 스페르미딘[H2N(CH2)3NH(CH2)4NH2] 및 푸트레신[H2N(CH2)4NH2] 등의 테트라메틸렌디아민류를 들 수 있다.
본 발명에서 상기한 식물의 조직편 또는 배양 세포는 본 출원인에 의한 일본 특원소 60-128348호에서와 같이 산소 함유 기체를 통기시킨 액체 배지를 사용하여 조직 배양할 수도 있다.
본 발명의 방법에 의하면, 식물의 조직편 또는 배양 세포에서 부정아, 부정배, 자구(수구근) 등을 효율적으로 양호하게 다량 얻는 것이 가능하다. 이를 구체적으로 설명하면, 본 발명의 방법에 의하여 얻어지는 부정아, 부정배는 이것을 발근시켜 식물체로 한후 미세하게 절단하여 조직편으로 하고, 또 자구도 동일하게 절단하여, 이들을 다시 본 발명에 의한 상기한 배양 방법에 의하여 조직 배양함으로써 종묘를 대량으로 증식할 수 있다. 또한, 본 발명으로 얻어진 식물은 통상의 방법으로 재배하면, 성질이 일정한 건강한 식물체로 성장시킬 수 있다.
본 발명의 식물의 조직 배양 방법을 사용하면, 식물의 조직 또는 배양 세포로부터 종래의 방법에 비해 효율적이고 양호하게 고품질의 식물체를 대량으로 배양하고, 종묘를 다량으로 증식시키는 것이 가능하다.
이하 실시예를 통해 본 발명의 구성 및 효과를 구체적으로 설명하고자 한다.
실시예 1-5
토마토의 배축(胚軸)을 70% 에탄올 및 차아염소산 소오다 수용액(유효 염소량 1%)으로 살균하여, 약 1cm 길이로 절단한 후에, 설탕 3%, 나프탈렌 초산 10-7M, 벤질아데닌10-6M 및 본 발명에 의한 특정의 화합물로서 A23187, 사이클릭 AMP, 스페르민, 스페르미딘 및 푸트레신중에서 선택한 화합물을 표 1에 나타낸 농도로 함유하는 pH 5.6의 무균의 무라시게 스크그(1962) 한천 배지(한천 농도 0.8%)를 제조하고, 이것에 상기한 토마토의 배축 절편을 첨가하여, 25℃로 밝은 곳에서 3주간 배양함으로써, 하기 표 1에 제시된 바와 같은 절편 1개당 부정아 형성수의 결과를 얻었다. 어느 것에서나 처리한 시료에서는 분화되어 수득한 부정아수가 비교예 1에 비하여 증가하였다.
비교예 1
본 비교예에서는, 배지에 본 발명에 의한 특정의 화합물을 함유시키지 않은 것이외에는 상기 실시예 1과 동일하게 토마토의 배축 절편을 조직 배양하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
Figure kpo00001
실시예 6-8
본 실시예들에서는, 재료로서 가지 배축 절편을 사용한 것이외에는 상기 실시예 1과 동일하게 조직 배양하여, 하기 표 2에 나타낸 결과를 얻었다. 어느 것에서나 처리한 시료에서는 분화한 부정아수가 비교예 2에 비하여 증가하였다.
실시예 9-11
본 실시예들에서는, 재료로서 양배추 배축 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 12-14
본 실시예들에서는, 재료로서 자소잎 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 15
본 실시예에서는, 재료로서 콩잎 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 16
본 실시예에서는 재료로서 무우 배축 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
비교예 2-6
본 비교예들에서는, 배지로서 본 발명에 의한 특정의 화합물을 함유시키지 않은 것이외에는 실시예 6-16과 동일하게 하여 배축 절편, 양배추 배축 절편, 자소잎 절편, 콩잎 절편, 무 배축 절편을 조직배양한 결과를 하기 표 2에 수록하였다.
Figure kpo00002
실시예 17-19
본 실시예들에서는, 재료로서 수래국화잎 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 조직 배양한 결과를 하기 표 3에 제시하였다. 어느 것에서나, 처리한 시료에서는 분화한 부정아수가 비교예 7에 비하여 증가하였다.
실시예 20-22
본 실시예들에서는, 재료로서 루도베키어잎 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 23
본 실시예에서는, 재료로서 토마토 칼스 세포를 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 24
본 실시예에서는, 재료로서 가지 칼스 세포를 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
비교예 7-10
본 비교예들에서는, 배지로서 본 발명에 의한 특정의 화합물을 함유하지 않은 것이외에는 실시예 17-24와 동일하게 하여 수래국화잎 절편, 루도베키어잎 절편, 토마토 칼스 세포, 가지 칼스 세포를 조직 배양한 결과를 하기 표 3에 제시하였다.
Figure kpo00003
Figure kpo00004
실시예 25-27
본 실시예들에서는, 재료로서 양파의 반경을 붙인 인엽(鱗葉) 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 28-30
본 실시예들에서는, 재료로서 감자잎 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 31-33
본 실시예들에서는, 재료로서 아마 배축 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 34
본 실시예들에서는, 재료로서 튜립 인편 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
실시예 35-37
본 실시예들에서는, 재료로서 아스파라가스 줄기 절편을 사용한 것이외에는 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
비교예 11-15
본 비교예들에서는, 배지에 본 발명에 의한 특정의 화합물을 함유시키지 않은 것이외에는 실시예 25-37과 동일하게 하여 양파 인엽 절편, 감자잎 절편, 아마 배축 절편, 튜립 인편 절편, 아스파라가스 줄기 절편을 조직 배양한 결과를 하기 표 4에 제시하였다.
Figure kpo00005
실시예 38-40
당근의 배축을 70% 에탄올 및 차아염소산 소오다 수용액(유효 염소량 1%)으로 살균하여, 약 1cm 길이로 절단한 후에, 설탕 4%, 2,4-디클로로페녹시 초산 10-6M 및 본 발명에 의한 특정의 화합물로서 A23187, 사이클릭 AMP, 스페르민중에서 선택한 화합물을 하기 표 5에 표시한 농도로 함유하는 pH 5.6의 무균의 무라시게 스크그(1962년)의 액체 배지를 제조하고, 이것에 상기한 당근의 배축 절편을 첨가하여, 25℃로 어두운 곳에서 3주간 배양하고, 그후 식물 호르몬을 포함하지 않는 배지에서 2주간 배양함으로써, 하기 표 5에 제시된 바와 같은 절편 1개당 부정배 형성수의 결과를 얻었다. 어느 것에서나 처리한 시료에서는 분화되어 수득한 부정배수가 비교예 16에 비하여 증가하였다.
실시예 41
본 실시예에서는, 재료로서 미숙배에서 유도한 벼의 칼스 세포를 사용하고, 본 발명에 의한 특정의 화합물로서 푸트레신을 함유하는 배지를 사용한 것이외에는 실시예 38과 동일하게 수행하였다.
실시예 42
본 실시예에서는, 재료로서 오이잎 절편에서 유도한 칼스 세포를 사용한 것이외에는 실시예 38과 동일하게 수행하였다.
실시예 43
본 실시예에서는, 재료로서 금어초잎 절편에서 유도한 칼스 세포를 사용한 것이외에는 실시예 38과 동일하게 수행하였다.
실시예 44
본 실시예에서는, 재료로서 아스파라가스의 줄기 절편에서 유도한 칼스 세포를 사용한 것이외에는 실시예 38과 동일하게 수행하였다.
비교예 16-20
본 비교예들에서는, 비지에 본 발명에 의한 특정의 화합물을 함유시키지 않은 것이외에는 실시예 38-44와 동일하게 하여 당근 배축 절편, 또는 벼, 오이, 금어초, 아스파라가스 줄기의 칼스 세포를 조직배양한 결과를 하기 표 5에 제시하였다.
Figure kpo00006
Figure kpo00007
전술한 바와같이 본 발명의 식물 종묘의 증식 방법은 양귀비목, 덩굴오이속을 제외한 가지목, 미나리목, 장미목, 나리속을 제외한 나리목, 국화목, 풍노초목, 오이목, 벼목에 속하는 식물의 조직편 또는 배양 세포를 조직 배양함에 있어서, 칼슘 이오노포어, 사이클릭 AMP 및 폴리아민으로 이루어진 군중에서 선택된 1종 이상의 화합물을 포함하는 배지를 사용하여 조직 배양하는 것이지만 후술하는 바와같이, 상기 각 식물의 조직편 또는 배양 세포를 혐기처리한 후에 조직 배양하는 것에 의해서도 본 발명과 동일한 목적을 달성하는 것이 가능하다. 즉,이하에 기술하는 식물 종묘의 증식 방법은 「양귀비목, 덩굴오이속을 제외한 가지목, 미나리목, 장미목, 나리속을 제외한 나리목, 국화목, 풍노초목, 오이목, 벼목에 속하는 식물의 조직편 또는 배양 세포를 혐기처리한 후에 조직배양하는 것을 특징으로 하는 식물 종묘의 증식방법」이다.
상기 방법에 의하면 식물의 조직편 또는 배양 세포로부터의 부정아, 부정배 및 구근의 분화가 현저하게 촉진된다. 이 방법은 본 발명자들에 의해 최초로 밝혀진 사실이다.
상기 방법을 적용할 수 있는 식물의 세부 사항과 상기 식물로부터의 조직편 또는 배양 세포의 채취 수단 등은 본 발명에 관해 이미 기재한 내용과 같다.
상기 방법에 의한 혐기처리는 다음과 같이 해서 수행할 수 있다. 조직 배양에 제공하고자 하는 식물의 조직편을 채취한 후, 질소, 아르곤, CO2등의 산소를 함유하고 있지 않거나, 또는 산소를 통상 5% 이하로 함유하고 있는 가스분위기에 이 시료를 위치시키고, 이 시료를 통상 15-30℃의 온도에서 30-90분간 이 가스와 접촉시킴으로써 혐의처리를 수행한다.
본 발명에서 혐기처리는 조직편의 채취직후에 수행하는 것이 특히 바람직하며, 이와 같은 조직편을 사용하여 조직 배양을 수행했을 경우가 재취후 조금있다가 혐기처리를 한 것을 사용한 경우에 비해 식물의 종묘를 효율적으로 양호하게 증식시킬 수 있어 바람직하다.
혐기처리후에 수행하는 조직 배양에 사용하는 배지로는 다음에 상술한 배지가 사용된다.
이 방법에서 사용할 수 있는 배지는 무기 성분 및 탄소원을 필수성분으로 하며, 이것에 식물 호르몬류, 비타민류를 첨가하고, 다시 필요에 따라서 아미노산류를 첨가할 배지이다.
이 배지의 무기 성분, 탄소원, 식물 호르몬, 비타민류 및 아미노산류의 예시 및 그들을 사용한 배지의 성분비, 기본 배지의 종류 및 그것을 사용한 배지의 조성 등은 모두 본 발명에 대해서 이미 기재한 바와 같다.
상기 방법에서 사용할 수 있는 배지는 액체 배지 또는 한천을 통상 0.5-1% 함유하는 고형 배지이다.
상기 방법에서는 필요에 따라서 상기 배지에 칼슘 이오노포어, 사이클릭 AMP 및 폴리아민으로 이루어진 군중에서 선택된 1종 이상의 화합물을 포함하는 배지를 사용하여 상기 방법에 의한 혐기처리를 하여 식물의 조직 배양을 수행할 수도 있다.
이 칼슘 이오노포어, 사이클릭 AMP 및 폴리아민의 예시 및 그 첨가량은 모두 본 발명에 대해 이미 기재한 바와 같다.
상기 방법에서 전술한 식물의 조직편 또는 배양 세포는 본 출원인에 의한 일본국 특원소 제60-128348호와 같이 산소 함유 기체를 통기시킨 액체 배지를 사용하여 조직 배양할 수도 있다.
상기 방법에 의하면, 본 발명과 같이 식물의 조직편 또는 배양 세포에서 부정아, 부정배, 자구(소구근) 등을 효율적으로 양호하게 다량으로 얻을 수 있다. 이를 구체적으로 설명하면, 상기 방법에 의해 얻어지는 부정아는 이것을 발근시켜 식물체로 한 후에, 미세하게 절단하여 조직편으로 만들고, 또 자구의 인편도 동일하게 절단하여, 이들을 다시 본 발명에 의한 상기 배양 방법에 의해 조직 배양함으로써, 종묘를 대량으로 증식할 수 있다. 그리고, 상기 방법으로 얻어진 식물을 통상의 방법으로 재배하면 성질이 일정하고 건강한 식물체로 성장시킬 수 있다.
이하, 참고예에 의거하여 본 발명의 구성 및 효과를 구체적으로 설명하고자 한다.
참고예 1-10
재료로 토마토 배축 절편, 가지 배축 절편, 당근 배축 절편, 양파 인엽 절편, 대두잎 절편, 무 배축 절편, 양배추 배축 절편, 자소잎 절편, 수래국화잎 절편, 루도베키어잎 절편을 사용한 재료를 70% 에탄올 및 차아염소산 소오다 수용액(유효염소량 1%)으로 살균하여, 약 1cm 길이 또는 약 1cm 직경으로 절단한 후에, 설탕 3%, 나프탈렌 초산 10-7M, 벤질아데닌 10-6M을 갖는 pH 5.6의 무균의 무라시게 스크그(1962년)의 한천 배지(한천 농도 0.8%)를 제조하고, 여기에 전술한 절편을 배양 개시한 직후에 배양물을 무균의 질소 가스 분위기하에 실온에서 30분간 방치(혐의처리)한 다음에 25℃의 밝은 곳에서 3주간 배양하여 얻어진 절편 1개당 부정아 및 식물의 형성수를 결과로서 하기 표 6에 제시하였다.
비교예 21-30
본 실시예들에서는 혐기처리를 수행하지 않은 것이외에는 상기 참고예 1-10가 동일하게 수행하여, 그 결과를 하기 표 6에 제시하였다.
Figure kpo00008
Figure kpo00009
참고예 11-15
본 실시예들에서는, 재료로서 각각 감자잎 절편, 아마 배축 절편, 튜립 인편 절편, 벼 미숙배 유래 칼스세포, 오이잎 절편 등을 사용한 것이외에는 참고예 1과 동일하게 수행하였다.
비교예 31-35
본 비교예에서는, 혐기처리를 하지않은 것이외에는 상기 참고예 11-15와 동일하게 수행하고, 그 결과를 하기 표 7에 제시하였다.
Figure kpo00010

Claims (3)

  1. 칼슘 이오노포어, 사이클릭 AMP 및 폴리메틸렌기[-(CH2)n-, n은 정수]의 양단에 이미노기 및/또는 아미노기를 가진 구조 단위를 함유하는 폴리아민 화합물로 구성되는 군중에서 선택된 1종 이상의 화합물을 함유하는 배지를 사용하여, 양귀비목, 덩굴오이속을 제외한 가지목, 미나리목, 장미목, 나리속을 제외한 나리목, 국화목, 풍노초목, 오이목, 벼목에 속하는 식물의 조직편 또는 배양 세포를 조직 배양하는 것을 특징으로 하는 식물 종묘의 증식 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 칼슘 이오노포어가 A23187인 것을 특징으로 하는 식물 종묘의 증식 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 폴리아민 화합물이 스페르민, 스페르미딘 또는 푸트레신인 것을 특징으로 하는 식물 종묘의 증식 방법.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180080487A (ko) * 2017-01-04 2018-07-12 대한민국(산림청 국립산림과학원장) 갈변 억제제 또는 폴리아민 처리에 의한 일본잎갈나무의 배발생 조직 생장 증진방법

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3889749T2 (de) * 1987-03-06 1994-09-08 Mitsui Petrochemical Ind Verfahren zum Vervielfältigen von Pflanzensämlingen.
JPH0740843B2 (ja) * 1987-10-23 1995-05-10 三井石油化学工業株式会社 植物の組織培養方法
WO1991004654A1 (en) * 1989-09-30 1991-04-18 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Method of producing seedling
JP2002233359A (ja) * 2001-02-06 2002-08-20 Univ Hiroshima シャリンバイの培養細胞及び該培養細胞を用いた組織培養法
JP6143679B2 (ja) 2011-02-07 2017-06-07 ライフ テクノロジーズ コーポレーション 感受性化合物を安定化するための組成物および方法
CN102144567B (zh) * 2011-04-21 2012-08-15 肇庆学院 黄花蝴蝶草的快速繁殖方法
CN102870674B (zh) * 2012-09-05 2013-12-25 广州白云华南生物科技有限公司 一种红葱组培快速繁殖方法
CN103609437B (zh) * 2013-10-23 2016-08-17 青岛文创科技有限公司 一种结球甘蓝胚状体再生植株诱导方法
CN103535283A (zh) * 2013-10-31 2014-01-29 定西市凯凯生态园植物快繁有限公司 一种马铃薯脱毒苗组培繁殖方法
CN109792952B (zh) * 2017-11-17 2021-12-10 广西壮族自治区农业科学院花卉研究所 一种蒲包花播种培育的方法
CN109042273A (zh) * 2018-10-29 2018-12-21 河南省农业科学院粮食作物研究所 观赏甘薯盆栽栽培方法
CN110268979B (zh) * 2019-06-03 2022-03-11 南京农业大学 一种建立无花粉百合高效再生体系的方法及应用
CN111602595A (zh) * 2020-06-28 2020-09-01 甘肃省农业科学院马铃薯研究所 一种马铃薯组培苗开放式快繁的方法
CN115885846A (zh) * 2022-08-11 2023-04-04 南京农业大学 一种白色胡萝卜快速组培再生体系

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4548901A (en) * 1983-06-21 1985-10-22 Zoecon Corporation Plantlet generation by cell culture
JPH0789804B2 (ja) * 1986-12-18 1995-10-04 三井石油化学工業株式会社 球根植物の増殖方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180080487A (ko) * 2017-01-04 2018-07-12 대한민국(산림청 국립산림과학원장) 갈변 억제제 또는 폴리아민 처리에 의한 일본잎갈나무의 배발생 조직 생장 증진방법

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