KR950704686A - 화학발광성 표지물과 비오틴 결합된 리간드를 이용한 항체의 이부위 면역에세이 방법(two-site immunoassay for an antibody with chemiluminescent label and biotin bound ligand) - Google Patents

화학발광성 표지물과 비오틴 결합된 리간드를 이용한 항체의 이부위 면역에세이 방법(two-site immunoassay for an antibody with chemiluminescent label and biotin bound ligand) Download PDF

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Abstract

본 발명은, 리간드 항원, 항체 또는 비오틴에 결합된 불완전 항원; 상자성 입자에 결합된 검출된 항체에 대항 항체; 및 아비딘, 스트렙타비딘에 결합된 화학발광성 아크리디늄 화합물을 샘플과 혼합하여 고체상이 결합된 복합체를 생성하고; 액체상에서 고체상을 분리하고; 화학발광성 복합체 존재에 대하여 분리된 고체상을 분석하는 단계로 이루어진, 화학발광성 표지 화합물을 이용한 샘플에서 항체를 검출하는 방법에 관한 것이다.

Description

화학발광성 표지물과 비오틴 결합된 리간드를 이용한 항체의 이부위 면역에세이 방법(TWO-SITE IMMUNOASSAY FOR AN ANTIBODY WITH CHEMILUMINESCENT LABEL AND BIOTIN BOUND LIGAND)
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (15)

  1. a)리간드 항원, 항체 또는 비오틴이나 이들의 작용성 유도체에 결합된 불완전 항원; 상자성 입자에 결합된 검출될 항체에 대한 항체; 및 아비딘, 스트랩타비딘 또는 이들의 작용성 유도체에 결합된 샘플을 포함하는 화학발광성 아크리디늄 화합물을 혼합하여 고체상이 결합된 복합체를 생성하고, b)액체상에서 고체상을 자기적으로 분리하고, c)화학발광성 반응을 개시하고 화학발광성 복합체 존재에 대하여 분리된 고체항을 분석하는 것으로 이루어지되, 여기에서 화학발광물의 존재는 상기 샘플 내의 상기한 항체의 존재를 나타내는 것인, 화학 발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  2. I)샘플을 포함하는, 리간드항원, 항체 또는 비오틴 또는 그의 작용성 유동체와 상자성 입자에 결합된 검출될 항체에 대한 항체를 혼합하여 제1고체상 복합체를 생성하고, ii)아비딘, 스트렙비딘 또는 이들의 작용성 유동체에 공유결합된 화학발광성 아크리디늄 화합물을 첨가하여 제2고체상 복합체를 생성하고, iii)액체상에서 고체상을 자기적으로 분리하고, iv)화학발광성 반응을 개시하여 화학발광성 복합체의 존재에 대하여 분리된 고체상을 분석하는 것으로 이루어진, 제1항에 따른 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 샘플 내의 항체가 특이성 IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 및 이들의 아이소타입으로 이루어진 군에서 선택된 특이성 면역글로부린이고, 리간드 항원, 항체 또는 불완전 항원은 특이성 알레르겐인 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  4. 제3항에 있어서, 특이성 면역글로부린은 특이성 IgE 인 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 샘플 내의 항체는 총 IgA, 총 IgE, 총 IgE, 총 IgG, 총 IgM 및 이들의 아이소타입으로 이루어진 군에서 선택된 특이성 면역글 종류로부린이고, 리간드 항원, 항체 또는 불완전 항원은 면역 글로부린의 상기한 종류에 대한 항체인 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  6. 제5항에 있어서, 면역글로부린의 종류가 총 IgE인 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  7. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 있어서, 상자성 입자에 결합된 측정될 항체에 대한 항체는 플리클로날 항체와, 재조합 항체, 절편화된 항체 등의 모노클로날 항체로 이루어진 군에서 선택되며, 바람직하기로는 모노클로날 마우스 항면역글로부린인 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 화학발광성 아크리디늄 화합물인 아비딘, 스트렙타비딘 또는 그의 작용성 유도체에 공유결합된 N-히드록시숙신이미드 디메틸아크리디늄 에스테르인 화학발광성 표지 화합물을 이용하여 샘플에서 항체를 검출하는 방법.
  9. 화학발광 표지물에 커플된 포착된 특이성 항체로 이루어진 분리된 고체상의 측정된 광(光) 방출량을 상기한 특이성 항체가 속하는 샘플내의 항체들의 총량을 측정하는 실제로 평행인 대조 면역 에세에세이에서 얻어진 측정된 광 방출량과 비교되는 샘플에서 특이성 항체의 농도 및/또는 상대적인 함량을 측정하는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 화학발광성 표지물에 커플된 포착이 특이성 항체를 함유하는 분리된 고체상의 광 방출량이, a)측정될 특이성 항체가 비오틴 또는 이들의 작용성 유도체에 직접 결합된 리간드 항원 또는 불완전 항원; 상자성 입자에 결합된 측정될 항체의 일정 부위에 대한 항체; 및, 아비딘, 스트랩타비딘 또는 이들의 작용성 유도체에 결합된 샘플을 함유하는 화학발광 아크리디늄 화합물을 혼합하여 고체상 복합체를 생성하고; b)액체상에서 고체상을 자기적으로 분리하고, c)화학발광성 반응을 개시하고 광 방출량을 측정하여 얻어지고, 상기한 특이성 항체가 속하는 항체의 종류에 대한 참조 면역에세이가; a)비오틴 또는 이들의 작용성 유도체에 결합된 측정될 상기한 종류의 항체에 대한 리간드 항체; 상자성 입자에 결합된 측정될 항체의 일정 부위에 대한 항체; 및, 아비딘 스트렙타비딘 또는 이들의 작용성 유도체에 결합된 샘플을 함유하는 화학발광 아크리디늄 혼합물을 혼합하여 고체상 복합체를 생성하고, b)액체상에서 고체상을 자기적으로 분리하고, c)화학발광성 반응을 개시하고 광 방출량을 측정하는 과정으로 이로어진 샘플에서 특이성 항체의 농도 및/또는 상대적인 함량을 측정하는 방법.
  11. 제9항에 있어서, 화학발광성 표지물에 결합된 포착된 특이성 항체로 이루어진 분리된 고체상의 광 방출량이, i)리간드 항원 또는 측정될 특이성 항체가 샘플을 함유하는 비오틴 또는 이들의 작용성 유도체에 직접 결합된 불완전 항원 및 상자성 입자에 결합된 측정될 항체의 일정부 위에 대한 항체를 혼합하여 제1고체상 복합체를 형성하고, ii)아비딘, 스트렙타바딘 또는 이들의 작용성 유도체에 공유결합된 화학발광성 아크리디늄 화합물을 첨가하여 제2고체상 복합체를 생성하고, iii)액체상에서 고체상을 자기적으로 분리하고, iv)화학발광성 반응을 개시하고 광 방출량르 측정하는 과정에 의해 얻어지고, 상기한 특이성 항체가 속하는 종류의 항체에 대한 참조 면역에세이는, i)샘플을 포함하는 비오틴 또는 이들의 작용성 유도체에 결합된 측정될 상기한 종류의 항체에 대한 리간드 항체와 상자성 입자에 결합된 측정될 항체의 일정 부위에 대한 항체를 혼합하여 제1고체상 복합체를 형성하고, ii)아비딘, 스트렙타바딘 또는 이들의 작용성 유도체에 공유결합된 화학발광성 아크리디늄 화합물을 첨가하여 제2고체상 복합체를 생성하고, iii)액체상에서 고체상을 자기적으로 분리하고, iv)화학발광성 반응을 개시하고 광 방출량을 측정하는 과정으로 이루어진, 샘플에서 특이성 항체의 농도 및/또는 상대적인 함량을 측정하는 방법.
  12. 제9항, 제10항 또는 제11항에 있어서, 샘플 내에서 측정될 특이성 항체는 IgA, IgD, IgE, IgG, IgM 및 이들의 아이소타입으로 이루어진 군에서 선택된 특이성 면역글로부린이고, 리간드 항원, 항체 또는 상기한 항체의 가변부에 대한 불완전 항원은 알레르겐이고, 항체의 종류는 총 IgA, 총IgD, 총IgE, 총IgG, 총IgM 및 이들의 아이소타입으로 이루어진 군에서 선택된 면역글로부린 종류이고, 리간드 항원, 항체 또는 불완전 항원은 면역글로부린의 상기한 종류에 대한 항체인 샘플에서 특이성 항체의 농도 및/또는 상대적인 함량을 측정하는 방법.
  13. 제12항에 있어서, 특이성 면역글로부린은 특이성 IgE이고, 항체의 종류는 총 IgE 인, 샘플에서 특이성 항체의 농도 및/또는 상대적인 함량을 측정하는 방법.
  14. 제10항 또는 제11항에 있어서, 상자성 입자에 결합된 측정될 항체에 대한 항체는 폴리클로날 항체와, 재조합 항체, 절편화된 항체 등의 모노클로날 항체로 이루어진 군에서 선택되며, 바람직하기로는 모노클로날마우스 항면역글로부린인 샘플에서 특이성 항체의 농도 및/또는 상대적인 함량을 측정하는 방법.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 화학발광성 이크리디늄 화합물이 아비딘, 스트렙타비딘 또는 그것의 작용성 유도체에 공유결합된 N-히드록시 숙신이미드 디메틸아크리디늄 에스테르인 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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