KR940703920A - 시그날-펩타이드-유리 스태필로키나제의 발현 - Google Patents

시그날-펩타이드-유리 스태필로키나제의 발현

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Abstract

본 발명은 폴리스미노겐 활성화제 효과를 갖는 제조합 스태필로키나제 폴리펩타이드 및 이의 제조방법 및 용도에 관한 것이다. 상기 폴리펩타이드는 시그날-펩타이드-암호화 영역이 없는 DNA 서열의 발현에 의해 수득한다.

Description

시그날-펩타이드-유리 스태필로키나제의 발현
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (22)

  1. 서열이 시그날 펩타이드에 대해 암호화하는 영역을 갖지 않음을 특징으로 하는, 플라스미노겐 활성화제 효과를 갖는 스태필로키나제 폴리펩타이드의 재조합 제조에 사용하기 위한 DNA 서열.
  2. 제 1 항에 있어서, 이들이 제 1 도(서열 동정 번호 1)에 따르는 뉴클레오타이드 시리즈와 대립형질 변이체 및/또는 단편을 나타냄을 특징으로 하는 DNA 서열.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 이들이 제 2 도(서열 동정 번호 2)또는 제 3 도(서열 동정 번호 3)에 따르는 천연 대립형질 변이체의 뉴클레오타이드 시리즈를 나타냄을 특징으로 하는 DNA 서열.
  4. 제 1 항 또는 2 항에 있어서, 제 4 도(서열 동정 번호 4) 또는 제 5 도(서열 동정 번호 5)에 따르는 단편의 뉴클레오타이드 시리즈를 나타냄을 특징으로 하는 DNA 서열.
  5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 제 6 도(서열 동정 번호 6) 또는 제7도(서열 동정 번호 7)에 따르는 인위적인 대립형질 변이체의 뉴클레오타이드 시리즈를 나타냄을 특징으로 하는 DNA 서열.
  6. 발현 조절 서열과 기능적으로 연결된, 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 따르는 DNA 서열 중 하나를 함유함을 특징으로 하는 발현 플라스미드.
  7. 제 6 항에 있어서, 제 8 도(서열 동정 번호 8)에 따르는 해독-개시 영역과 5′-말단에서 기능적으로 연결된, 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 따르는 DNA 서열을 함유함을 특징으로 하는 별현 플라스미드.
  8. 제 6 항에 있어서 또는 제 7 항에 따르는 발현 플라스미드를 함유하며 플라스미노겐 활성화제 효과를 갖는 스태필로키나제 폴리펩타이드를 발현시킬 수 있음을 특징으로 하는 숙주 세포.
  9. 제 8 항에 있어서, 이들이 원핵 세포임을 특징으로 하는 숙주 세포.
  10. 제 9 항에 있어서, 이들이 이. 콜리 종에 속함을 특징으로 하는 숙주 세포.
  11. 제 9 항에 있어서, 이들이 바실러스 종 속에 속함을 특징으로 하는 숙주 세포.
  12. 제 8 항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따르는 숙주 세포를 적합한 배지 중에서 배양시켜 표적 폴리펩타이드를 숙주 세포로부터 분리시킴을 특징으로 하는, 표적 폴리펩타이드로서 플라스미노겐 활성화제 효과를 자는 스태필로키나제 폴리펩타이드의 재조합에 있어서 제조방법.
  13. 제12항에 있어서, 숙주 세포가 이. 콜리 종에 속함을 특징으로 하는 방법.
  14. 제12항 또는 제13항에 있어서, 표적 폴리펩타이드의 분리를 위하여 a) 숙주 세포를 분해하여 분해물의 가용성 분획을 불용성 분획과 분리시키고, b) 가용성 분획을 이온 교환기 상에 직접 통과시켜, c) 표적 폴리펩타이드를 이온 교환기로부터 NaCl 수용액으로 선택적으로 용출시키고, d) NaCl로 농축시킨 후 용출물을 직접 소수성 상호작용 크로마토그라피시켜, e) 표적 폴리펩타이드를 소수성 상호작용 크로마토그라피로부터 낙하 NaCl 구배로 선택적으로 용출시킨 다음 용출물로부터 수득함을 특징으로 하는 방법.
  15. 제14항에 있어서, 단계 중 NaCl 농도가 c) 30 SOWL 500mM, d) 2.0 내지 3.0M 및 e) 초기 농도 2.0 내지 3.0M에서 최종 농도 15 내지 100mM임을 특징으로 하는 방법.
  16. 제 4 도 내지 7 도(서열 동정 번호 4 내지 7)에 따르는 아미노산 서열을 나타냄을 특징으로 하는, 플라스미노겐 활성화제 효과를 갖는 스태필로키나제 폴리펩타이드.
  17. 제12항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따라서 제조된 스태필로키나제 폴리펩타이드 중 하나 이상을 임의로 약제학적으로적합한 희석제, 보조제 또는 담체 물질과 함께 함유함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
  18. 제16항에 따르는 스태필로키나제 폴리펩타이드를 임으로 약제학적으로 적합한 희석제, 보조제 또는 담체 물질과 함께 함유함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
  19. 제12항 내지 15항에 따르는 방법을 이용하여 제조된 스태필로키나제 폴리펩타이드 또는 제16항에 따르는 스태필로키나제 폴리펩타이드에 대응하는 면역 반응성을 나타내며 이들 폴리펩타이드의 플라스미노겐 활성화 효과를 억제시킬 수 있음을 특징으로 하는 모노클로날 항체.
  20. 제19항에 있어서, 하이브리도마 세포주 α-SAK Ⅰ G8/H10(ZIM 0511) 또는 α-SAK Ⅱ A4(A10(ZIM 0512)로부터 유래됨을 특징으로 하는 모노클로날 항체.
  21. 하이브리도마 세포주 ZIM 0511 및 ZIM 0512.
  22. 제19항 또는 제20항에 따르는 모노클로날 항-스태필로키나제 항체를 임의로 약제학적으로 허용되는 희석제, 보조제 및/또는 담체 제제와 함께 포함함을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
KR1019940702287A 1991-12-30 1992-12-28 시그날-펩타이드-유리 스태필로키나제의 발현 KR100221150B1 (ko)

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