KR930002509B1

KR930002509B1 - 결정성 칼슘 슈도모네이트 제법

Info

Publication number: KR930002509B1
Application number: KR1019850004305A
Authority: KR
Inventors: 해롤드 베이커 제프리; 비일 머얼
Original assignee: 비이참 그루우프 피이엘시이; 로놀드 스미자아
Priority date: 1984-06-19
Filing date: 1985-06-18
Publication date: 1993-04-03
Also published as: IE851506L; GB8415579D0; DK275585A; IL75536A0; FI88796C; PL254033A1; NZ212433A; DE3575428D1; DK164506B; ATE49600T1; US5792790A; JPH0723373B2; PH22951A; JO1420B1; IE58118B1; PT80657A; ES544329A0; HUT38654A; JPS6117583A; US5191093A

Abstract

내용 없음.

Description

결정성 칼슘 슈도모네이트 제법

제1도는 결정성 칼슘 슈도모네이트.2수화물의 분말 X-선 회절도이다.

제2도는 무정형 칼슘 슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않은 결정성 칼슘 슈도모네이트.2수화물의 적외선 스펙트럼이다.

제3도는 무정형 칼슘 슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않는 결정성 무수 칼슘 슈도모네이트의 분말 X-선 회절도이다.

제4도는 무정형 칼슘 슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않는 결정성 무수 칼슘 슈도모네이트의 적외선 스펙트럼이다.

본 발명은 의약 및 수의용 약제와 동물에서 성장촉진제로서 사용되는 결정성 칼슘 슈도모네이트의 제법에 관한 것이다.

슈도몬산(Pseudomonic acid)은 호기적으로 배양된 슈도모나스 플루오레센스 (Pseudomonas flucrescens)에 의해 제조된 항생제이다. 하기 구조식(I)의 화합물 및 그 염과 에스테르가 영국 특허번호 1,395,907에 공지 되어 있다:

슈도몬산의 칼슘염이 영국 특허번호 1,577,545 및 1,577,730에 공지되어 있다.

쉽게 분리될 수 있는 무정형 형태의 이들 염은 저 융점 및 열등한 열 안정성을 갖고 있는 수용성이 좋지 않은 물질인 것으로 밝혀졌다. 이들이 결정성 형태로 단리된 경우 칼슘 슈도모네이트는 높은 융점을 가지며 무정형 칼슘 슈도모네이트 및 슈도몬산 그 자체에 비해 탁월하게 양호한 열 안정성을 나타내는 것으로 밝혀졌다. 결정성 칼슘 슈도모네이트는 상기 특허나 기타 다른 간행물에 특별히 공지된 바 없으며 따라서 신규하다.

따라서 본 발명은 결정성 칼슘 슈도모네이트 또는 그 수화물을 제공한다. 또 다른 일면으로, 본 발명은 무정형 칼슘 슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않는 결정성 칼슘 슈도모네이트 또는 그 수화물을 제공한다.

바람직한 결정성 칼슘 슈도모네이트 수화물은 2수화물이다. 무정형 칼슘 슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않는 결정형태의 칼슘 슈도모네이트 2 수화물은 제1도에서와 같은 분말 X-선 회절도(구리 Kα선 사용)를 제공한다. 무정형 칼슘 슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않는 결정 형태의 칼슘슈도모네이트.2수화물은 제2도에서와 같은 적외선 스펙트럼(누졸)을 제공한다. 결정성 무수칼슘 슈도모네이트는 무정형 칼슘슈도모네이트를 실질적으로 함유치 않는 경우, 제3도에서와 같은 분말 X-선 회절도(구리 Kα선 이용) 및 제 4도에서와 같은 적외선 스펙트럼(누졸)을 나타낸다.

여기서 사용된 "무수결정성 칼슘슈도모네이트"란 용어는 실질적으로 결정수를 함유치 않는 예컨대 물을 0.5중량% 이하 함유하는 결정성 칼슘슈도모네이트를 칭한다. 실질적으로 무정형 칼슘슈도모네이트를 함유치 않은 무수 결정성 칼슘슈도모네이트는 105-l37℃, 바람직하게는 125-137℃, 좀더 바람직하게는 130-135℃의 융점을 갖는다.

본 발명은 인간 또는 동물 치료에 사용되는 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그의 수화물도 제공한다.

본 발명은 또한 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그 수화물을 제조하는 방법도 제공하며, 이 방법은 슈도모네이트 이온을 수성용매 용액중에서 칼슘이온과 반응시킨후, 용액으로부터 결정성 칼슘 슈도모네이트, 수화물을 회수하고, 소망에 따라 결정수를 제거하는 것으로 구성된다.

이 방법은 슈도몬산 또는 슈도모네이트염의 수용액에 칼슘이온원을 첨가해 줌으로써 적절히 수행된다. 슈도몬산 또는 슈도모네이트 이온 용액은 호기적으로 배양된 슈도모나스플루오레센스(NCIB10586)의 생성물이다. 이런 용액은 미생물이 성장된 배지일 수 있으며 또는 이것은 예컨대 EP 0 005 614에 언급된 바와 같은 극성, 유기, 수혼화성용매를 사용하여 배양 배지로 부터 슈도몬산을 추출한 다음 슈도몬산을 수용액, 바람직하게는 약 알칼리성 수용액내로 재추출함으로써 상기 배지를 정제함으로써 생성될 수 있다. 또다른 방법으로, 슈도몬산 또는 슈도모네이트 이온 용액은 슈도몬산 또는 그 염을 수성용매중에 용해시켜 제조할 수 있다.

이 공정에서 수성용매는 물이나 또는 물과 유기보조용매와의 혼합물 일수 있다. 유기 보조용매는 수혼화성 이거나 수불혼화성일 수 있다. 유기보조 용매는 수혼화성인 것이 바람직하다. 적당한 유기보조용매는 메탄올, 프로판올 및 아세톤이다. 바람직한 유기보조용매는 메탄올 및 아세톤이다. 결정성 칼슘슈도모네이트수화물은 2수화물 형태로 회수하는 것이 적당하다. 칼슘슈도모네이트.2수화물의 회수는 수성용매, 바람직하게는 물로 부터 결정화 또는 침전법에 의해 적절히 수행된다. 수성용매가 물과 유기보조용매의 혼합물인 경우, 회수는 수용액을 물로 희석하거나 또는 유기보조용매를 선택적으로 제거해쥼으로써 용이해진다. 바람직한 형태의 선택적 제거는 증발이다.

바람직한 형태의 공정은 슈도몬산의 수성용매중 용액을 칼슘이온 공급원과 반응시키는 것이다. 바람직한 칼슘이온 공급원은 산화칼슘이다.

적당한 수성용매는 물과 메탄올의 혼합물이며, 메탄올은 바람직하게 증발에 의해 회수에 앞서 선택적으로 제거된다. 칼슘슈도모네이트.2수화물은 바람직하게는 물로부터 침전 또는 결정화를 통해 회수되는 것이 바람직하다.

또 다른 바람직한 형태의 공정은 슈도몬산염의 수성용매중 용액을 칼슘이온 공급원, 바람직하게는 가용성 칼슘염과 반응시키는 것이다. 바람직한 슈도몬산염은 리튬, 나트륨 및 칼륨염이다. 특히 바람직한 염은 나트륨염이다. 적당한 수용성 칼슘염은 염화칼슘 또는 초산칼슘이며, 바람직하게는 염화칼슘이다. 칼슘슈도모네이트.2수화물은 바람직하게는 물로 부터 침전 또는 결정화에 의해 회수되는 것이 바람직하다. 칼슘슈도모네이트, 2수화물은 칼슘슈도모네이트를 수성용매중에 용해시킨 후, 바람직하게는 물로 부터 결정화 또는 침전에 의해 2수화물을 회수함으로써 제조될 수 있다. 이렇게 제조된 결정성 수화물로 부터 결정수를 제거하여 결정성 무수 칼슘슈도모네이트를 얻을 수 있다. 결정수는 결정성 칼슘슈도모네이트 수화물, 바람직하게는 2수화물을 수화물로 부터 물이 제거되기에 충분한 온도, 예컨대 70℃ 이상으로 가열해줌으로써 적절히 제거된다.

또한, 결정성 칼슘슈도모네이트 수화물은 오산화인 같은 건조제 존재하에 진공에서 건조시킬 수 있다. 18-80℃온도가 바람직하게는 약 21시간동안 적절히 사용된다.

반대로, 결정성 칼슘슈도모네이트를 대기중에 노출시켜 이 수화물이 형성되도록 평형상태로 놔둘수도 있다. 여기서 사용된 "칼슘슈도모네이트"란 용어는 무정형이며 수화되지 않는 칼슘염을 일컫는다. 공고된 영국 특허 출원번호 2097670에 슈도몬산 및 그염과 에스테르를 가축 성장촉진제로 사용하는데 대해 언급되어있다. 결정성 칼슘 슈도모네이트의 놀라운 열 안정성이 특히 고온과 관련된 약제 제조시 성장촉진제로서 사용하기에 좀 더 안정한 형태의 슈도몬산을 제공해 주는 것으로 생각된다. 따라서 본 발명은 가축의 체중증가 및 사료 이용 효율을 향상시키는 방법을 제공하는데 이 방법은 가축에 결정성 칼슘 슈도모네이트 또는 그 수화물을 성장촉진 무독성 양만큼 투여하는 것으로 구성된다.

본 발명에서는 결정성 칼슘슈도모네이트.2수화물을 사용하는 것이 바람직하다. 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그의 수화물은 돼지 같은 가축, 가금 및 소와 양 같은 반추동물에 투여할 수 있다. 이것은 돼지의 체중증가 및 사료 이용 효율을 향상시키는데 특히 적합하다. 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그 수화물, 바람직하게는 2수화물은 경구적으로, 바람직하게는 가축에 제공되는 사료나 식수내 넣어 투여할 수 있다. 이것은 사료에 2-300ppm, 적당히는 100ppm 이하, 예컨대 10-40ppm 양으로 투여되는 것이 편리하다. 사료에 넣어 투여하는 경우 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그의 수화물, 바람직하게는 2수화물은 적당한 담체와 프리믹스 상태로 제제화된다.

따라서 다른 일면으로, 본 발명은 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그의 수화물, 바람직하게는 2수화물과 수의용에 허용되는 담체로 구성된 수익용으로 허용되는 프리믹스제제를 제공해준다. 적당한 담체는 분말형태의 전분과 같은 불활성 담체이다. 그 밖의 통상적인 프리믹스 담체 또한 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물이 특히 유용한 인간 감염에는 성병 : 호흡기 감염 : 세균성뇌막염 및 피부와 연조직감염이 포함된다.

동물의 경우 이들은 소유선염, 돼지 이질, 칠면조, 닭, 돼지 및 소 같은 동물의 마이코플라스마 감염증 및 눈 감염증 치료에 사용될 수 있다. 마이코플라스마종에 의해 야기된 또는 그들이 중요한 역할을 하는 본 발명의 화합물이 효과를 나타내는 인간 및 가축질병은 하기와 같다.

[조류]

M. 겔리셉티쿰(M. gallisepticum)-닭 및 칠면조의 만성 호홉기 질환(airsacculitis)

[소]

M.보비스(Bovis)-유선염, 호흡기 질환 및 관절염.

M.디스파(dispar)-송아지 폐염.

[돼지]

M.히오뉴모니에(hyopneumoniae)-돼지의 지방병적 폐염.

M.히오리니스(hyorkinis)-돼지의 관절염

M.히오시노베(hyosynovial)

[인간]

M. 뉴모니애-원발성이형폐염.

본 발명의 화합물은, 질병을 자주 유발하는 박테리아 보르데텔라 브론키셉타카(Bordetella bronchise-ptica.), 파스퇴렐라 물로시다(Pasteurella multocida) 및 헤로필루스(Haemophilus spp.)에 대해 활성을 갖고 있기 때문에 돼지, 소 및 양같은 동물의 마이코프라즈마성 및/또는 박테리아성 폐염에 특히 유용하다.

발명은 또한 결정성 칼슘슈도모네이트 또는 그 수화물(이후 약제로 칭함)과 함께 제약학상 또는 수의용으로 허용되는 담체 또는 부형제로 구성된 제약학적 또는 수의과용 조성물도 제공한다. 조성물은 어떤 방식으로나 투여될 수 있게 제제화될 수 있으며 치료되는 질병에 따라 그 조성물이 달라진다. 조성물은 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 로젠지, 또는 경구, 국소 또는 멸균 비경구 현탁액과 같은 액제나 겔 제제일 수 있다.

경구 투여용 정제와 캅셀제는 단위제형 형태로 있을 수 있으며, 예컨대 시럽, 아카시아, 젤라틴, 솔비톨, 트라가 칸트 또는 폴리비닐피롤리돈 같은 결합제 ; 예컨대 유당, 서당, 옥수수 전분, 인산칼슘, 솔비톨 또는 글리신과 같은 증량제; 예컨대 스테아린산 마그네슘, 탈크, 폴리에틸렌글리콜 또는 실리카 같은 정제윤활제 ; 예컨대 감자 전분 같은 붕해제 ; 또는 라우릴황산나트륨 같은 허용되는 습윤제등과 같은 통상적인 부형제를 함유할 수 있다. 정제는 제약분야에 공지된 방법에 따라 고팅할 수 있다. 경구용 액체제제는 예컨대 수성 또는 유성 현탁제, 액제, 유제, 시럽 또는 엘릭실제 같은 형태로 있을 수 있으며 또는 사용전 물이나 기타 적당한 기초제(vahicle)에 의해 재구성되는 건조제품 상태로 존재할 수 있다. 이런 액체제제는 예컨대 솔비톨, 시럽, 메틸셀룰로오스, 포도당 시럽, 젤라틴, 수소첨가식용지방 같은 현탁화제 ; 레시틴, 솔비탄 모노올레이트 또는 아카시아 같은 유화제 ; 알몬드유, 분별된 코코낱유, 글리세린, 프로필렌글리콜, 에틸알콜 같은 유성 에스테르와 같은 비수성 기초제(식용유 포함할 수 있음) ; 예컨대 메틸 또는 프로필P-하이드록시 벤조에이트 또는 소루빈산 같은 보존제 및 소망에 따라 통상적인 향료 또는 착색제 같은 통상적인 첨가제를 함유할 수 있다,

피부에 국소적용하기 위해 약제를 크림, 로숀 또는 연고형태로 만들어줄 수 있다. 약제로 사용될 수 있는 크림 또는 연고제는 하기 문헌에 언급된 바와 같이 이 분야에 잘 알려진 통상적인 제제이다 : Harry's Cosmeticology(Leonard Hill Books에 의해 출판)) 및 the British Pharmacopoeia과 같은 제약학 및 화장학 분야의 표준 교과서. 소망에 따라 이들 제제를 망편(tulle)내 넣어줄 수 있다.

이들 제제는 항균, 항진균, 항바이러스 및 항염제 같은 또 다른 치료제, 예컨대 클로르테트라사이클린, 미코나졸, 아이독스우리딘 및 페나존 같은 것을 함유할 수 있다. 좌제는 통상적인 좌제기제, 예컨대 코코아-버터 또는 글리시타이드 같은 것을 함유한다. 비경구 투여의 경우, 약제 및 멸균 기초제를 이용하여 유체단위용량형을 제조한다. 사용되는 기초제 및 농도에 따라 약제는 기초제내에 현탁될 수 있다. 국소마취제, 보존제 및 완충제 같은 보조제를 기초제내 용해시킬 수 있다. 안정성을 높히기 위해 조성물을 바이알내에 충전시킨 뒤 동결시켜 진공하에 물을 제거할 수 있다. 이어 동결건조된 분말을 바이알내에 밀폐시킨다. 약제를 별균 기초제에 현탁시키기 전에 산화에틸렌에 노출시켜 멸균해줄 수 있다. 약제의 균일한 분포를 용이하게 해주기 위해 조성물에 계면활성제나 습윤세를 포함시키는 것이 유리하다.

귀에 국소적용하기 위해 약제를 물, 글리세롤, 묽은 에탄올, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜 또는 비휘발성 기름 같은 적당한 액체 담체에 현탁시켜 현탁액으로 만들어 줄 수 있다. 눈에 국소적용하기 위해 약제를 적당한 멸균 수성 또는 비수성 기초제중 현탁액으로 제제화해줄 수 있다. 메타중아황산 나트륨 또는 디나트륨 에데레이트 같은 완충제 ; 페닐머큐릭 아세레이트 또는 나이트레이트, 벤즈알코늄 클로라이드 또는 클로르헥시딘 같은 살균 및 항균제를 비롯한 보존제 및 하이프로멜토스 같은 농조화제등의 첨가제를 또한 포함시킬 수 있다. 약제는 또한 에어터졸로 피부에 적용될 수도 있다. 국소용 조성물의 사용용량은 치료되는 면적 크기에 따라 달라진다. 귀 및 눈에서 각 용량은 보통약제 10-100mg이다. 동물의 유방 이상, 특히 소의 유선염을 치료하는데 사용되는 수의용 조성물에는 일반적으로 약제의 오일기초제중 현탁액을 함유한다. 조성물은 투여방법에 따라 0.1-99중량%, 바람직하게는 10-60중량%의 약제를 함유할 수 있다. 조성물이 단위용량형태로 존재하는 경우 각 용량 단위는 50-500mg의 약제를 함유하는 것이 바람직하다. 성인 치료에 사용되는 용량은 투여경로 및 빈도에 따라 1일 약제 100mg-3g, 예컨대 250mg-2g 범위인 것이 바람직하다.

또한 약제는 섭취되는 음식물의 일부로 투여될 수도 있다. 이런 경우, 사용되는 약제의 양은 음식물의 1중량% 이하일 수 있으며,0.5중량% 이하인 것이 바람직하다. 동물의 음식물은 일반적인 사료에 약제가 첨가된 것일 수 있으며, 또는 약제를 사료와 혼합되어 있는 프리믹스내에 포함시킬 수 있다. 동물에 대한 적당한 약제 투여법은 약제는 동물식수에 첨가하는 것이다. 이 경우 식수중 약제의 농도는 약 5-500μg/ml이며, 예컨대 5-200/'g/ml이 적당하다.

본 발명은 또한 인간 또는 인강이외의 동물에 박테리아성 또는 마이코플라즈마성 감염을 치료하는 방법을 제공하는데, 이 방법은 대상이 되는 인간 또는 인간이외의 동물에 결정성 칼슘 슈도모네이트 또는 그의 수화물을 무독성 유효량 만큼 투여하는 것으로 구성된다. 이런방법으로 치료될 수 있는 안간 또는 인간이외 동물의 특정 박테리아성 및/또는 마이코플라즈마성 감염에는 인간의 경우 성병, 세균성 기관지염과 같은 호흡기감염, 세균성 뇌막염, 비특발성 요도염, 폐염 및 동물의 경우, 호흡기감염, 유선염, 돼지 이질 및 폐염이 포함된다.

하기 실시예는 본 발명을 예시 설명해 준다.

[실시예 1]

칼슘 슈도모네이트2수화물

슈도몬산(100g, 0.2몰)의 50% 수성메탄올(1.51)중 용액에 산화칼슘(7.1g, 0.127몰)을 적가하여 중성용액(pH 7.0)을 얻었다. 감압하에 메탄올을 증발시키기전에 용액을 실온에서 1시간 교반하여 포말을 얻었다. 포말을 실온에서 교반하면서 물(2ℓ)에 적가했다. 1시간 교반한 후 용액을 여과하여 여액을 실온에서 48시간 정치시켰다. 결정성 생성물을 여과하여 표제화합물(31.0g, 29%)을 얻었다. 융점 : 135-137℃ ; Y_max(KBr) 3600-3100, 1710, 1650 and 1600-1530cm^-1; λ_max(EtOH) 220nm(ε_max30840) ; δ_H(CD₃OD) 5.75(1H, s, 2-H), 4.08(2H, t, 9'-H₂), 3.9-3.7(4H,m,5-H,7-H,13-H,16_a-H), 3.58(1H,m,16_b-H), 3.37(1H,dd,6-H), 2.8(1H,m,10-H), 2.7(1H,dd,11-H), 2.6(1H,m,4a-H), 2.22(3H,m,4-H,2'-H2), 2.2(3H,s,15-H₃), 1.95(1H,m,8-H), 1.75-1.5(6H,m,9-₂,3'-H₂,8'-H₂), 1.4-1.3(9H,m,12-H,4'-H₂,5'-H₂,6'-H₂,7'-H₂), 1.22(3H,d,14-H3) and 0.95(3H,d,17-H₃) ; δ_C(CD₃OD) 184.5(C-1'), 168.1(C-1,159(C-3), 118.2(C-2), 76(C-5), 71.6(C-13), 70.6(C-7), 69.9(C-6), 66.2(C-16'), 64.7(C-9'), 61.2(C-11), 56.8(C-10), 43.8(C-4), 43.6(C-12), 41.4(C-8), 38.5(C-2'), 32.9(C-9), 30.7, 30.5, 30.3, (C-4',5' and 6'), 29.8(C-8'), 27.2, 27.1(C-3' and 7'), 20.4(C-14), 19.4(C-15) and 12.3 ppm(C-17)

원소분석 : C₅₂H₈₆O₁₈Ca.2H₂O

실측치(%) : C ; 57.97, H ; 8.35, Ca ; 3.68

이론치(%) : C ; 58.08, H ; 8.44, Ca ; 3.73

수분함량(%) ; 2H₂O

실측치 : 3.70%

이론치 : 3.35%

결정화로 부터 얻은 모액을 감압하에 1/2용량으로 증발시킨 다음 24시간 정치시켜 칼슘 슈도모네이트.2수화물 2차 생성물을 얻었다. (39g,36%) 융점 132-134℃(수분함량, 3.44%).

[실시예 2]

칼슘 슈도모네이트.2수화물

슈도몬산(93%)(1400g, 2.6몰)을 메탄올(7l)에 용해시킨 다음 여과하고 이어 물(5ℓ)로 주의해가면서 희석했다. 슈도몬산 용액 교반된 것에 산화칼슘(92g, 1.64a몰)을 적가했다. 용액의 pH가 7이 되었을 때, 혼합물을 여과하여 맑은 황색용액을 얻었으며 이때 pH가 7.9로 상승되었다. 감압하에 메탄올을 증발시켜 최종 용량 5.6ℓ를 얻은 다음, 용액을 물(400ml)로 희석하고 결정화되게 했다. 24시간 정치시킨 후, 혼합물을다시 물(2.5ℓ)로 희석하고 18시간 동안 결정화를 계속했다. 결정성 생성물을 교반하여 슬러리를 얻은 다음 이를 여과하고 생성물을 모아 물(2.5ℓ)을 사용하여 슬러리화해주면서 세척했다. 백색 과립상 생성물을 여과한 후 펜이 달려있는 오븐내에서 실온에서 건조시켰다. 생성물을 약간 분쇄한 후 실온의 유동상 공기건조기내에서 2시간 건조하여 칼슘 슈도모네이트.2수화물(1125g, 80%)를 얻었다. 융점 135℃ ; 칼 휘셔법에 의해 측정된 수분함량 3.6% ; 2H₂O, 이론치 ; 3.35%

상기 제법을 반복하여 수율(1300g, 93%)와 (1275g, 91%)을 얻었다.

[실시예 3]

칼슘 슈도모네이트.2수화물

메탄올(11) 및 물(750ml)중의 슈도몬산(200g, 0.4몰) 여과용액에 산화칼슘(13.5g, 0.24몰)을 서서히 첨가하여 중성용액(pH 7.2)을 얻었다. 용액을 여과하고 메탄올을 강압하에 여액으로 부터 증발시켰다. 수성농축액을 약 1ℓ용량으로 희석한 후 실온에서 24시간 결정화되게 두었다. 백색 결정성 생성물을 여과한 후 물(500ml)로 세척하고 55℃ 감압하에 건조했다. 생성물을 대기압하에 12시간 동안 평형화시켜 결정성 칼슘슈도모네이트.2수화물(165g, 77%)을 얻었다.

융점 125-132℃(수분함량 (칼 휘셔) 3.4%).

[실시예 4]

칼슘 슈도모네이트.2수화물

슈도몬산(1.0g, 2.0m몰)을 물(20ml)중에서 교반해준 후 수산화나트륨용액(1.8ml, 1M)(pH 7.1)으로 서서히 중화시켰다. 염화칼슘(0.25g, 2.25m몰)을 혼합물에 첨가한 후 교반을 계속하여 맑은 용액을 얻었다. 18시간 정치시킨 후 결정성 생성물을 여과하고 물(5ml)로 세척하고 칼슘 슈도모네이트.2수화물(0.5g,48%)융점 133-136℃을 얻었다.

[실시예 5]

칼슘 슈도모네이트.2수화물

슈도몬산(100g)을 아세톤/물 혼합물(각기 100ml 및 50ml)에 용해시켰다. 수산화나트륨 용액(10% w/v)과 물을 더 첨가하여 pH 8에서 약 10-12%w/v의 나트륨염을 얻었다. 염화칼슘(23g) 수용액을 첨가하고 필요한 만큼 사이드화한 후 칼슘 슈도모네이트를 20-30℃에서 결정화되게 두었다. 생성물을 단리한 후, 세척하고, 건조시켜 결정성.2수화물 100g을 얻었다.

[실시예 6]

칼슘 슈도모네이트.2수화물

슈도몬산 전액을 메틸이소부틸케톤으로 추출했다. 유기추출액을 농축시킨 후 수성수산화나트륨내로 재추출하여 pH8 로 되게 했다.

결과 생성된 재추출액을 필요한 경우 농축하여 약 10% w/v 나트륨 슈드모네이트 용액을 얻었다. 이어 실시예 5에서와 같은 적당한 침전제를 첨가하여 칼슘 슈드모네이트.2수화물을 산출했다.

[실시예 7]

결정성 무수 칼슘 슈도모네이트

결정성 칼슘 슈도모네이트.2수화물(15g)을 80℃의 오사화인상에서 21시간 동안 진공건조하여 결정수를 실질적으로 함유치 않은 결정성 칼슘 슈도모네이트, 융점 131-133℃(수분함량, 칼 휘셔 0.3%)을 얻었다.

[설명 1]

무정형 무수 칼슘 슈도모네이트 A

슈도몬산 A(35g, 0.07몰)의 50% 수성메탄올(0.5ℓ)중 용액에 산화칼슘(2.75g, 0.049몰)을 적가하여 중성용액(pH 7.1)을 얻었다. 용액을 실온에서 1시간 교반한 후 여과하고 여액을 감압하에 증발시켜 고체 포말을 얻었다. 포말을 무수에테르(0.5ℓ)로 1시간 배산시킨 후 여과하여 표제화합물을 백색 분말(33g, 90%)로서 얻었다.

융점 70-76℃ ; Y_max(KBr)3600-3100, 2915, 2710, 1650 및 1600-1530cm^-1; 〈_max(EtOH) 220nm(ε_m29840) ; δ_H(CD₃OD) 5.75(1H,s,2-H), 4.08(2H,t,9'-H₂), 3.9-3.7(4H,m,5-H,7-H,13-H,16_a-H), 3.58(1H,m,16_b-H), 3.37(1H,dd,6-H), 2.8(1H,m,10-H), 2.7(1H,dd,11-H), 2.6(1H,m,4_a-H), 2.22(3H,m,4_b-H,2'-H₂), 2.2(3H,s,15-H₃), 1.95(1H,m,8-H), 1.75-1.5(6H,m,9-H₂,3-H₂,8'-H₂), 1.4-1.3(9H,m,12-H,4'-H₂,5'-H₂,6'-H₂,7'-H₂),1.22(3H,d,14-H₃) 및 0.95(3H,d,17-H₃) ; δ_C(CD₃OD) 168.1(C-1), 158.9(C-3), 118.2(C-2), 76.1(C-13), 70.7(C-7), 69.9(C-6), 66.3 (C-16), 64.7 (C-9), 61.3 (C-11), 56.8 (C-10), 43.8 (C-4), 43.6 (C-12), 41.4(C-8 ), 38 .1(C-2'), 32.9(C-9), 30.6, 30.5, 30.3(C-4',5', 및 6'), 29.8(C-8'), 27.0(C-3' 및 7'), 20.4(C-14), 19.4(C-15) 및 12.3ppm(C-17) ;

/e(rel.int.)(+ve이온 FAB) 539[(슈도모네이트) Ca]⁺, 78%].

원소분석 : C₅₂H₈₆O₁₈Ca

실측치(%) : C ; 60.16, H ; 8.77, Ca ; 3.86

이론치(%) : C ; 60.09, H ; 8.34, Ca ; 3.86

열 안정성 데이타 : 결정성 칼슘 슈도모네이트.2수화물, 무정형 칼슘 슈도모네이트 및 슈도몬산에 대한 데이타

*순수 유리 슈도믄산에 대한 백분율 표시

*최초 순도에 대한 백분율로 표시

[생물학적 데이타]

a) 마이코플라스마

각종 마이코플라스마 미생물에 대한 실시예 화합물들의 활성을 0.9% 아가로스로 고체화한 10³-10⁵C.F.U.로 접종된 프리이스(Friis) 배양액내에서 시험관내 시험으로 평가했다. 최소저지 농도(MIC)는 37℃에서 6일간 배양 후 측정했으며 그 결과가 하기 표 1에 나타냈다.

b) 수의학적 박테리아

수의학적으로 중요한 각종 박테리아에 대한 실시예 화합물들의 활성을 10⁴미생물로 접종된 진단용 감응성 시험한천내에서 2배 연속희석법을 사용하여 시험관내 시험으로 평가했다. MIC는 37℃에서 18시간 배양 후 측정했으며 하기 표 2에 나타앴다.

c) 인간 박테리아

인간의 질병으로 중요한 각종 박테리아에 대한 실시예 화합물들의 활성은 5% 쵸콜렛화한 말혈액을 함유한 영양한천 내에서 연속희석법을 사용하여 시험관내 시험으로 평가했다. 37℃에서 18시간 배양 후 MIC를 측정하여 하기 표 3에 나타냈다.

NT-시험 하지 않았음.

NG-성장하지 않았음.

C-오염되었음.

[표 1]

칼슘 슈도모네이트.2수화물의 마이코플라스마에 대한 MIC(㎍/ml)

[표 2]

칼슘 슈도모네이트, 2수화물의 수의학적 박테리아에 대한 MIC(㎍/ml)

[표 3]

칼슘 슈도모네이트.2수화물의 인간 박테리아에 대한 MIC(㎍/ml)

Claims

수성용매에서 용액내 칼슘 이온과 슈도모네이트 이온을 반응시켜 결정성 칼슘 슈도모네이트 수화물을 얻고, 용액으로 부터 결정성 칼슘 슈도모네이트 수화물을 회수하는 것으로 구성된 결정성 칼슘 슈도모네이트 수화물을 제조하는 방법.
제1항에 있어서, 수성용매에서 슈도몬산 또는 그염의 용액에 칼슘이온 공급원을 첨가해 주는 것으로 구성된 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, 결정성 칼슘 슈도모네이트 2수화물을 제조하는 방법.
수성용매에서 용액내 칼슘 이온과 슈도모네이트 이온을 반응시켜 결정성 칼슘 슈도모네이트 수화물을 얻고, 용액으로 부터 결정성 칼슘 슈도모네이트 수화물을 회수한 후 결정수를 제거하는 것으로 구성되는 무수 결정성 칼슘 슈도모네이트를 제조하는 방법.