KR920701448A - 산업적 사용조건에서 안정성이 저하된 변이체 효소 - Google Patents
산업적 사용조건에서 안정성이 저하된 변이체 효소Info
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도 : 플라스미드 pUCAm4의 구조, 제2도 : α-아밀라아제 유전자의 DNA서열, 제3도 : pMaTBac의 EcoRI-BamHI의 서열.
Claims (25)
- 미생물 발효공정의 제조물이고, 산업상의 사용조건에서 대응 야생형 효소에 비해 감소된 안정성을 나타내는 것을 특징으로 하는 변이체 효소.
- 야생형 효소를 1개 또는 그이상의 선택된 돌연변이시켜 얻을 수 있고, 변이된 효소가 산업상의 사용조건에서 원하는 감소된 안정성을 나타내는 것을 특징으로 하는 변이체 효소.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 빵을 굽는 조건에서 빵의 개선된 특성을 나타내는 것을 특징으로 하는 변이체 효소.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 베이킹 효소, 바람직하게는 박테리아의 α-아밀라아제인 것을 특징으로 하는 변이체 효소.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 베이킹 조건에서 대응 야생형 효소에 비해 감소된 열안정성을 나타내는 박테리아 α-아밀라아제인 것을 특징으로 하는 변이체 효소.
- 제1항 내지 제5항중의 어느 한 항에 있어서, 야생형 효소와는 1내지 10개의 아미노산이 다른 아미노산 서열을 가지는 변성된 효소를 코드화하는 유전자의 발현에 의해 얻어지는 것을 특징으로 하는 변성된 효소.
- 제5항에 있어서, 야생형 효소의 Arg 123이 Cys 123으로 교체된 아미노산 사열을 가지는 것을 특징으로 하는 변성된 박테리아 α-아밀라아제.
- 제5항에 있어서, 아미노산 서열이 바실루스 아밀로리퀴팩신스의 야생형 효소와는 아미노산 번호 113, 114, 116, 123, 163, l64, 166, 238, 316, 322, 345, 349, 356, 386, 394또는 398이 다르거나, 동일구조 α-아밀라아제의 동일한 위치가 다른 것을 특징으로 하는 변성된 박테리아 α-아밀라아제.
- 제7항 또는 8항에 있어서, 상기 박테리아 α-아밀라아제가 바실루스 α-아밀라아제, 더욱 바람직하게는 바실루스 아밀로리퀴팩신스 α-아밀라아제인 것을 특징으로 하는 변성된 박테리아 α-아밀라아제.
- 제3항 내지 제9항중의 어느 한 항에 따른 빵 개선 특성을 가진 변이체 효소를 사용하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 빵반죽 또는 이와 유사한 제조물의 제조방법.
- 제3항 내지 제9항중의 어느 한 항에 따른 빵 개선 특성을 가진 변이체 효소로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 빵반죽 또는 이와 유사한 제조물.
- 제3항 내지 제9항중의 어느 한 항에 따른 빵 개선 특성을 가진 변이체 효소를 포함하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 빵 또는 관련 제조물의 제조방법.
- 제12항의 방법에 의해 제조된 것을 특징으로 하는 빵 또는 관련 제조물.
- 제1항 내지 제9항에 따른 변이체 효소를 제조할 수 있는 것을 특징으로 하는 미생물.
- 내인성 α-아밀라아제의 발현을 배제시키거나 비활성화시킴으로써 변이체 박테리아 α-아밀라아제의 제조에 적합하게 된 것을 특징으로 하는 미생물.
- 바람직하게 박테리아, 효모 또는 균류 더욱 바람직하게는 E. coli, 바실루스 또는 아스페르길루스이고, 바람직하게는 바실루스 섭틸리스, 바실루스 아밀로리퀴팩신스 또는 바실루스 리케니포미스이며, 제1항 내지 제9항중의 어느 한 항에 따른 변이체 효소를 코드화하는 유전자로 이루어지는 것을 특징으로 하는 미생물.
- 야생형 유전자와는 1-10개 잔기가 다른 DNA서열을 가지는 제1항 내지 9항의 변이체 효소를 코드화하는 것을 특징으로 하는 유전자.
- 제2도의 DNA서열을 가지는 야생형 유전자와는 1-10개의 잔기가 다른 박테리아 α-아밀라아제를 코드화하는 것을 특징으로 하는, 제14항에 따른 유전자.
- 제17항이나 18항에 따른 유전자로 이루어지는 것을 특징으로 하는 리터 또는 플라스미드.
- 제19항에 따른 벡터나 플라스미드로 형질전환된 것을 특징으로 하는 미생물.
- 제14-16항 또는 20항에 따른 미생물을 발효시키고 형성된 변이체 효소를 임의로 분리 및 정제하는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 제1항 내지 9항중의 한 항에 따른 변이체 효소의 제조방법.
- 산업상의 사용조건에서 원하는 안정성을 나타내며, (a)야생형 효소를 코드하는 유전자를 변이원화하는 단계; (b)안정성이 변화된 변이체를 선별하는 단계; (c)야생형 효소에 비해 대응 아미노산 치환을 측정하는 단계; 및 (d)각각의 선택된 아미노산 치환을 결합하여 변이체 효소를 코드화하는 변이된 유전자를 형성하는 단계; 로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 변이체 효소의 제조방법.
- 산업상의 사용조건에서 원하는 안정성을 나타내는 변이체 효소를 코드화하는 유전자를 사용하여 클로닝된 미생물의 제조방법에 있어서, (a)야생형 효소를 코드화하는 유전자를 클로닝하는 단계; (b)야생형 유전자를 코드하는 유전자를 변이원화하는 단계; (c)안정성이 변화된 변이체를 선별하는 단계; (d)야생형 효소에 비해 대응 아미노산 치환을 측정하는 단계; (e)선택된 개별적 아미노산 치환을 결합하여 변이체 효소를 코드화하는 돌연변이 유전자를 형성하는 단계; 및 (f)적당한 숙주내에서 돌연변이 유전자를 다시 클로닝하는 단계;로 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
- 산업상의 사용조건에서 원하는 안정성을 나타내는 변이체 효소의 제조방법에 있어서, 제23항에 따라 제조된 미생물을 발효시키는 것으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법.
- 활성 성분으로서 제3항 내지 제9항중의 어느 한 항에 따른 빵 개선 특성을 가지는 변이체로 이루어지는 것을 특징으로 하는 빵 개선제 조성물.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
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