KR920701436A - 재조합 생성물 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 생체 및 실험실상에서 PAI-2 발현벡터의 제조에 사용되는 올리고뉴클레오티드 및 코드된 시그날 펩티드의 서열을 도시한다. 제2도는 실험실상에서의 발현벡터의 제조를 도시한다, A : 시그날이 없는 PAI-2 유전자를 포함하는 pBTA 821, B : 합성 시그날이 있는 PAI-2유전자를 포함하는 pBTA 822, C : α-1-안티트립신 시그날이 있는 PAI-2 유전자를 포함하는 pBTA 823, 제3도는 포유동물세포 발현벡터의 제조를 도시한다, A : 시그날이 없는 PAI-2유전자를 포함하는 pBTA 824, B : 합성 시그날이 있는 PAI-2유전자를 포함하는 pBTA 825 및 pBTA 827, C : α-1-안티트립신 시그날이 있는 PAI-2 유전자를 포함하는 pBTA 826 및 pBTA 828, D : 합성시그날이 있는 PAI-2 유전자를 포함하는 pBTA 839.
Claims (46)
- PAI-2 또는 N-말단 메티오닌이 없는 PAI-2를 코드화한 제1폴리뉴클레오티드 분자로 구성되는 구성체를 형성하는 단계, 일시적 시그날 서열을 코드화한 폴리뉴클레오티드분자를 제1폴리뉴클레오티드 분자의 5'말단에 부착함으로써 이 구성체로부터 발현되어 얻어진 하이브리드 단백질이 PAI-2 또는 N-말단 메티오닌이 없는 PAI-2의 NH2-말단에 부착된 일시적 시그날 서열로 구성되도록 하는 단계 및, 진핵생물숙주 세포에서 구성체를 발현시키는 단계로 이루어지는 글리코실화된 분비형태의 재조합 PAI-2 또는 글리코실화된 분비형태의 N-말단 메티오닌이 없는 재조합 PAI-2의 제조방법.
- PAI-2 또는 NH2-말단 메티오닌 또는 NH2-말단 글루탐산에 부착된 일시적 시그날 펩티드를 코드화한 폴리뉴클레오티드 구성체.
- 제2항에 있어서, 시그날 펩티드가 M K C L L L A L G L L A F V P L V R A인 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드 구성체.
- 제2항에 있어서, 시그날 펩티드가 사람의 단백질 α-1-안티트립신으로부터의 시그날 펩티드인 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드 구성체.
- 제2항 내지 제4항중의 어느 한항에 있어서, 구성체가 DNA 분자인 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드 구성체.
- NH2-말단이 변화함으로써 효과적인 시그날 펩티드를 제공하는 변화된 NH2-말단을 포함하는 PAI-2 변이체.
- 제6항에 있어서, PAI-2의 NH2-말단이 1 내지 22 아미노산중의 적어도 한 아미노산이 변화된 것을 특징으로 하는 PAI-2 변이체.
- 제6항 또는 제7항에 있어서, 8 및 14의 아스파라긴잔기, 17의 리신잔기 및 18의 히스티딘잔기의 일부 또는 모두가 대체되는 것을 특징으로 하는 PAI-2 변이체.
- 제8항에 있어서. 잔기 또는 잔기들이 실험실상의 변이법에 의하여 대체되는 것을 특징으로 하는 PAI-2 변이체.
- 제8항 또는 제9항에 있어서, 잔기들이 Leu, Phe, Ala, Met, Thr, Ser, Ile 및 Val로부터 선택되는 아미노산으로 대체되는 것을 특징으로 하는 PA1-2 변이체.
- 제6항에 내지 제10항중의 어느 한항의 PAI-2 변이체를 코드화한 폴리뉴클레오티드 분자.
- 제11항에 있어서, 분자가 DNA 분자인 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드 분자.
- 다음과 같은 서열을 가지는 합성펩티드 :M K C L L L A L G L L A F V P L V R A
- 제5항 또는 제12항의 DNA 분자와 벡터 DNA를 포함하는 재조합 DNA 분자.
- 제14항에 있어서, 벡터 DNA가 플라스미드 DNA인 것을 특징으로 하는 재조합 DNA 분자.
- 제15항에 있어서, 플라스미드 DNA가 pGEM4Z, pSVL, pBTA613, pBTA830및 바큘로 비루스 전달벡터로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 재조합 DNA 분자.
- pBTA822, pBTA823, pBTA825, pBTA826, pBTA827, pBTA828 및 pBTA839로부터 선택되는 재조합 DNA 분자.
- 제14항 내지 제17항중의 어느 한항의 재조합 DNA 분자에 의하여 형질전환된 형질전환숙주세포.
- 제18항에 있어서, 숙주세포가 원숭이 신장 COS 세포, 원숭시 신장세포계 Vero, 차이나즈 햄스터 난소 세포, 사람의 조직구임파종 U937 세포계, CH0-K1 세포의 유사세포, DG-44, 햄스터 신장세포계 BHK-21, 사람의 신장세포계 293, 사람의 상피유도세포계 HeLa S3 및 사람의 단핵세포계 HL 60 및 스포도프테라 프푸기페르다(Spodoptera frugiperda) 및 봄빅스 모리(Bombyx mori)의 곤충으로 부터 유래된 세포계등으로 선택되는 진핵생물로부터 얻어지는 세포계의 세포인 것을 특징으로 하는 형질전환 숙주세포.
- 글리코실화된 PAI-2 또는 N-말단 메티오닌이 없는 글리코실화된 PAI-2 또는 PAI-2의 변이체로 구성되는, 제18항 또는 제19항의 형질전환 숙주세포의 발현 생성물.
- Clu-2로 시작하는 414 아미노산 길이의 PAI-2 분자.
- 글리코실화된 제21항의 PAI-2 분자.
- 60kD의 글리코실화된 분비형태의 재조합 PAI-2.
- 제20항의 발현 생성물 또는 제21항 내지 제23항중의 어느 한 항의 PAI-2 분자의 효과량과 함께 약학적허용 담체, 희석제, 부형제 및/또는 보조제를 포함하는 조성물.
- 제5항 또는 제12항의 DNA 분자를 벡터 DNA에 삽입하는 것으로 이루어지는, 제14항 내지 제17항중의 어느 한항의 재조합 DNA 분자의 제조방법.
- 형질전환을 위한 수용체 숙주세포를 제조하고, 이 수용체 숙주세포를 제14항 내지 제17항중의 어느 한항의 재조합 DNA 분자로 형질전환하는 것으로 이루어지는, 제18항 또는 제19항의 형질전환숙주세포를 제조하는 방법.
- 제18항 또는 제19항의 형질전환 숙주세포를 배양하고 숙주세포로부터 발현 생성물을 분리하는 것으로 이루어지는, 제20항의 발현생성물의 제조방법.
- 제20항의 발현 생성물 또는 제21항 내지 제23항의 어느 한항의 PAI-2 분자를 약학적 허용 담체, 희석제, 부형제 및/또는 보조제와 혼합하는 것으로 이루어지는, 제24항의 조성물을 제조하는 방법.
- 제20항의 발현생성물 또는 제24항의 조성물 또는 제21항 내지 제23항중의 어느 한항의 PAI-2 분자에 대한 항체.
- 제29항의 항체의 효과량과 함께 약학적 허용 담체, 희석제, 부형제 및/또는 보조제를 포함하는 이루어지는 항체 조성물.
- 제29항의 항체 또는 제30항의 항체 조성물의 효과량을 숙주에 투여하는 것으로 이루어지는, PAI-2에 대한 처리를 요하여 숙주를 수동 면역시키는 방법.
- 제20항의 발현생성물 또는 제24항의 조성물 또는 제21항 내지 제23항중의 어느 한항의 PAI-2 분자로 면역감응숙주를 면역시키는 것으로 이루어지는, 제29항의 항체를 생성하는 방법.
- 제27항의 방법에 의하여 생산된 제20항의 발현생성물.
- 제32항의 방법에 의하여 생산된 제29항의 항체.
- 양성 또는 음성 표준과 함께 제20항의 발현 생성물 및/또는 제24항의 조성물 및/또는 제21항 내지 제23항 중의 어느 한항의 PAI-2 분자 및/또는 제29항의 항체 및/또는 제30항의 항체 조성물을 포함하는 진단용 킷트.
- 제20항의 적당하게 표식된 발현 생성물 또는 제21항 내지 제23항중의 어느 한항의 PAI-2 분자를 표본에 투여하고 그후 표식의 축적부위를 결정하는 이미징 단계로 이루어지는, 조직 표본에서 종양의 부위를 특정하고 한정하는 방법.
- 제20항의 적당하게 표식된 발현 생성물 또는 제21항 내지 제23항중의 어느 한항의 PAI-2 분자를 치료를 요하는 환자에 투여하고 그후 표식의 측적부위를 측정하는 이미징 단계로 이루어지는, 생체에서 종양부위를 특정하고 한정하는 방법.
- 제20항의 적당하게 표식된 발현 생성물 또는 제21항 내지 제23항 중의 어느 한항의 PAI-2 분자를 포함하는, 생체 또는 조직표본에서 종양부위를 특정하고 한정하는 시약.
- 제20항의 발현생성물 또는 제21항 내지 제23항중에 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물의 치료유효량을 표식된 또는 표식되지 않은 형태로 치료를 요하는 환자에 투여하는 것으로 이루어지는, 종양치료 또는 종양 침투를 억제하는 방법.
- 제20항의 발현 생성물, 제21항 내지 제23항중의 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물의 치료 유효량을 표식된 또는 표식되지 않은 형태로 치료를 요하는 환자에 투여하는 것으로 이루어지는 만성적염증의 치료방법.
- 제29항의 항체 또는 제30항의 항체 조성물을 이용하여 체액 및 조직의 샘플에서 PAI-2를 검출하는 것으로 이루어지는 만성염증을 모니터하는 방법.
- 제20항의 발현생성물, 제21항 내지 제23항중의 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물을 이용하는 것으로 이루어지는 체액 또는 조직에서 만성염증을 모니터하는 방법.
- 제20항의 발현 생성물, 제21항 내지 제23항중 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물을 이용하는 것으로 이루어지는 암의 전이 및/또는 증식을 진단, 예방 또는 치료하는 방법.
- 제20항의 발현생성물, 제21항 내지 제23항 중 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물을 이용하는 것으로 이루어지는 면역억제상태의 진단, 예방 또는 치료방법.
- 제20항의 발현생성물, 제21항 내지 제23항 중 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물을 이용하는 것으로 이루어지는 상처 또는 골절상의 치료 방법.
- 제20항의 발현생성물, 제21항 내지 제23항중 어느 한항의 PAI-2 분자 또는 제24항의 조성물을 이용하는 것으로 이루어지는, 높은 백혈구 활성과 연관이 있는 질환의 진단, 예방 또는 치료방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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